体外诱导鲍精子受精方法
阅读：115发布：2020-05-15
专利汇可以提供体外诱导鲍精子受精方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 公开一种操作简单、可提高受精率的体外诱导鲍精子受精方法，依次按如下步骤进行：煮沸过滤 海 水 并冷却至21℃，加入体积浓度为25%~28%的 氨 水 至氨 水体 积浓度为0.005‰~0.04‰，制成激活液，将激活液置于密闭容器再置于21℃水浴中，备用；取备用的激活液置于烧杯中，再取成熟雄性种鲍的精巢组织放入激活液中2min，所述激活液与精巢组织的比例为100ml：1g；迅速将从精巢中游离出来的精子悬液吸出，并用 海水 稀释至1500个/ml，加入盛放卵子的容器中，保持水温21℃。，下面是体外诱导鲍精子受精方法专利的具体信息内容。
体外诱导鲍精子受精方法
技术领域
[0001] 本发明涉及鲍精子受精方法，尤其是一种操作简单、可提高受精率的体外诱导鲍精子受精方法。
背景技术
[0002] 皱纹盘鲍Haliotis discus hannai是我国重要的海水养殖贝类，自然分布于山东、辽宁等地。目前人工养殖的区域从山东、辽宁扩大到福建、海南。在皱纹盘鲍人工苗种生产中涉及到人工授精，既需要分别获得皱纹盘鲍的精子和卵子，然后将精子与卵子按比例混合，进而得到受精卵。解剖种鲍直接获得精子的操作比较方便，可是所获得的精子虽可运动却不能受精，为此现有获得精子的方法是通过阴干种鲍或者采用经紫外线照射的海水流水刺激种鲍等方法诱导种鲍自然排放精子，但是有时会出现经久不排精的现象，错过卵子的受精时间，降低受精率，直接影响苗种的产量。用紫外线照射的海水流水刺激种鲍的方法还存在着操作复杂、成本高等问题。
发明内容
[0003] 本发明是为了解决上述技术问题，提供一种操作简单、可提高受精率的体外诱导鲍精子受精方法。
[0004] 本发明的技术解决方案是：一种体外诱导鲍精子受精方法，其特征在于依次按如下步骤进行：a．煮沸过滤海水并冷却至21℃，加入体积浓度为25% 28%的氨水至氨水体积浓度为~
0.005‰ 0.04‰，制成激活液，将激活液置于密闭容器再置于21℃水浴中，备用；
~
b. 取备用的激活液置于烧杯中，再取成熟雄性种鲍的精巢组织放入激活液中2min，所述激活液与精巢组织的比例为100ml：1g；
c. 迅速将从精巢中游离出来的精子悬液吸出，并用海水稀释至1500个/ml，加入盛放卵子的容器中，保持水温21℃。
0.005‰ 0.04‰，制成激活液，将激活液置于密闭容器再置于21℃水浴中，备用；
~
b. 取备用的激活液置于烧杯中，再取成熟雄性种鲍的精巢组织放入激活液中2min，所述激活液与精巢组织的比例为100ml：1g；
c. 迅速将从精巢中游离出来的精子悬液吸出，并用海水稀释至1500个/ml，加入盛放卵子的容器中，保持水温21℃。
[0006] 本发明的最佳方案是a步骤加入氨水至终浓度为0.02‰制成激活液。
[0007] 本发明是将成熟雄性种鲍的精巢组织取出后诱导，即在种鲍体外实现对精子受精能力的诱导，之后再将经过诱导的精子与卵子混合，实现人工授精。解决了现有人工取得的精子不受精及久经诱导种鲍不能自然排精的问题，操作简单，有效提高了受精率，与紫外线照射的海水流水刺激种鲍的方法相比，还大大降低了设备成本。
具体实施方式
[0008] 实施例1：依次按如下步骤进行：
a．煮沸过滤海水并冷却至21℃，加入体积浓度为25% 28%的氨水（市售氨水）至氨水体~
积浓度为0.005‰ 0.04‰制成激活液，为防止氨水挥发，需将激活液置于密闭容器再置于~
21℃水浴中保温，备用；
b. 取备用的激活液置于烧杯中，再选取个体较大、体质健壮、性腺丰满、成熟度好的雄性鲍鱼，按照现有技术的方法用无菌手术刀轻划开其性腺被膜，用吸管吸取乳白色精巢组织，称重后将精巢组织放入激活液中2min，激活液与精巢组织的比例为100ml：1g，应轻轻晃动烧杯，使精子充分散开；
c. 因精巢组织放入激活液中2min时精子达到最活跃状态，应迅速将从精巢中游离出来的精子悬液吸出，并用海水稀释至1500个/ml，再将精子稀释液加入盛放卵子的容器中（精子与卵子比例同现有技术），保持水温21℃，45min开始第一次卵裂。
a．煮沸过滤海水并冷却至21℃，加入体积浓度为25% 28%的氨水（市售氨水）至氨水体~
积浓度为0.005‰ 0.04‰制成激活液，为防止氨水挥发，需将激活液置于密闭容器再置于~
21℃水浴中保温，备用；
b. 取备用的激活液置于烧杯中，再选取个体较大、体质健壮、性腺丰满、成熟度好的雄性鲍鱼，按照现有技术的方法用无菌手术刀轻划开其性腺被膜，用吸管吸取乳白色精巢组织，称重后将精巢组织放入激活液中2min，激活液与精巢组织的比例为100ml：1g，应轻轻晃动烧杯，使精子充分散开；
c. 因精巢组织放入激活液中2min时精子达到最活跃状态，应迅速将从精巢中游离出来的精子悬液吸出，并用海水稀释至1500个/ml，再将精子稀释液加入盛放卵子的容器中（精子与卵子比例同现有技术），保持水温21℃，45min开始第一次卵裂。
[0009] 实施例2：与实施例1基本相同，区别是激活液中氨水的体积浓度为0.01‰。
[0010] 实施例3：与实施例1基本相同，区别是激活液中氨水的体积浓度为0.02‰。
[0011] 实施例4：与实施例1基本相同，区别是激活液中氨水的体积浓度为0.04‰。
[0012] 用本发明实施例1 4上述方法，与对照组（激活液采用不同的氨水体积浓度）进行~了对比实验，其结果见下表。
[0013] 结果表明：本发明与对照组相比，可以有效提高受精率至56.80±2.95%以上。
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