具有α淀粉酶活性的酶及其使用方法
阅读：491发布：2022-06-17
专利汇可以提供具有α淀粉酶活性的酶及其使用方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 涉及α 淀粉 酶和编码α淀粉酶的多核苷酸。并且，也提供了设计新的α淀粉酶的方法和这些α淀粉酶的使用方法。这些α淀粉酶在酸性和 碱 性pH值和升高 温度 下具有增加的活性和 稳定性 。，下面是具有α淀粉酶活性的酶及其使用方法专利的具体信息内容。
1.一种分离的核酸，其包括编码具有α淀粉酶活性的多肽的序列， 其中所述系列选自：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17，19，21，23，25， 27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51，53，55，57，59，61，63，65， 67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95，97，99，101，103， 105，107，109，111，113，115，117，119，121，123，125，127，129，131，133， 135，137，139，141，143，145，147，149，151，153，155，157，159，161，163， 165，167，169，171，173，175，177，179，181，183，185，187，189，191，193， 195，197，199，201，203，205，207，209，211，213，215，217，219，221，223， 225，227，229，231，233，235，237，239，241，243，245，247，249，251，253， 255，257，259，261，263，265，267，269，271，273，275，277，279，281，283， 285，287，289，291，293，295，297，299；
与如下序列在至少大约100残基的区域内具有至少50％序列同源 性的变体：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17，19，21，23，25，27，29，31， 33，35，37，39，41，43，45，47，49，51，53，55，57，59，61，63，65，67，69，71， 73，75，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95，97，99，101，103，105，107， 109，111，113，115，117，119，121，123，125，127，129，131，133，135，137， 139，141，143，145，147，149，151，153，155，157，159，161，163，165，167， 169，171，173，175，177，179，181，183，185，187，189，191，193，195，197， 199，201，203，205，207，209，211，213，215，217，219，221，223，225，227， 229，231，233，235，237，239，241，243，245，247，249，251，253，255，257， 259，261，263，265，267，269，271，273，275，277，279，281，283，285，287， 289，291，293，295，297，299，正如用序列比较算法或通过目测所确定 的；
与如下序列互补的序列：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17，19， 21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51，53，55，57，59， 61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95，97，99， 101，103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123，125，127，129， 131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153，155，157，159， 161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183，185，187，189， 191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213，215，217，219， 221，223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243，245，247，249， 251，253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273，275，277，279， 281，283，285，287，289，291，293，295，297，299；和
与如下序列在至少大约100残基的区域内具有至少大约50％序列 同源性的变体互补的序列：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17，19，21， 23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51，53，55，57，59，61， 63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95，97，99，101， 103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123，125，127，129，131， 133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153，155，157，159，161， 163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183，185，187，189，191， 193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213，215，217，219，221， 223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243，245，247，249，251， 253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273，275，277，279，281， 283，285，287，289，291，293，295，297，299，正如用序列比较算法或通过 目测所确定的。
2.如权利要求1所述的分离的核酸，其中分离的核酸包括一个互 补的序列，所述互补序列在高度严格条件下与选自如下序列的序列杂 交：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17，19，21，23，25，27，29，31，33，35， 37，39，41，43，45，47，49，51，53，55，57，59，61，63，65，67，69，71，73，75， 77，79，81，83，85，87，89，91，93，95，97，99，101，103，105，107，109，111， 113，115，117，119，121，123，125，127，129，131，133，135，137，139，141， 143，145，147，149，151，153，155，157，159，161，163，165，167，169，171， 173，175，177，179，181，183，185，187，189，191，193，195，197，199，201， 203，205，207，209，211，213，215，217，219，221，223，225，227，229，231， 233，235，237，239，241，243，245，247，249，251，253，255，257，259，261， 263，265，267，269，271，273，275，277，279，281，283，285，287，289，291， 293，295，297，299，和与如下序列的至少一个序列在至少大约100残基 的区域内具有至少50％同源性的变体：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15， 17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51，53，55， 57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95， 97，99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123，125，127， 129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153，155，157， 159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183，185，187， 189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213，215，217， 219，221，223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243，245，247， 249，251，253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273，275，277， 279，281，283，285，287，289，291，293，295，297，299，正如用序列比较算 法或通过目测所确定的。
3.如权利要求1所述的分离的核酸，其中分离的核酸包括一个互 补的序列，所述互补序列在中度严格条件下与选自如下序列的序列杂 交：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17，19，21，23，25，27，29，31，33，35， 37，39，41，43，45，47，49，51，53，55，57，59，61，63，65，67，69，71，73，75， 77，79，81，83，85，87，89，91，93，95，97，99，101，103，105，107，109，11 1， 113，115，117，119，121，123，125，127，129，131，133，135，137，139，141， 143，145，147，149，151，153，155，157，159，161，163，165，167，169，171， 173，175，177，179，181，183，185，187，189，191，193，195，197，199，201， 203，205，207，209，211，213，215，217，219，221，223，225，227，229，231， 233，235，237，239，241，243，245，247，249，251，253，255，257，259，261， 263，265，267，269，271，273，275，277，279，281，283，285，287，289，291， 293，295，297，299，和与如下序列的至少一个序列在至少大约100残基 的区域内具有至少50％同源性的变体：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15， 17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51，53，55， 57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95， 97，99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123，125，127， 129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153，155，157， 159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183，185，187， 189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213，215，217， 219，221，223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243，245，247， 249，251，253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273，275，277， 279，281，283，285，287，289，291，293，295，297，299，正如用序列比较算 法或通过目测所确定的。
4.如权利要求1所述的分离的核酸，其中分离的核酸包括一个互 补的序列，所述互补序列在低度严格条件下与选自如下序列的序列杂 交：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17，19，21，23，25，27，29，31，33，35， 37，39，41，43，45，47，49，51，53，55，57，59，61，63，65，67，69，71，73，75， 77，79，81，83，85，87，89，91，93，95，97，99，101，103，105，107，109，111， 113，115，117，119，121，123，125，127，129，131，133，135，137，139，141， 143，145，147，149，151，153，155，157，159，161，163，165，167，169，171， 173，175，177，179，181，183，185，187，189，191，193，195，197，199，201， 203，205，207，209，211，213，215，217，219，221，223，225，227，229，231， 233，235，237，239，241，243，245，247，249，251，253，255，257，259，261， 263，265，267，269，271，273，275，277，279，281，283，285，287，289，291， 293，295，297，299，和与如下序列的至少一个序列在至少大约100残基 的区域内具有至少50％同源性的变体：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15， 17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51，53，55， 57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95， 97，99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123，125，127， 129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153，155，157， 159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183，185，187， 189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213，215，217， 219，221，223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243，245，247， 249，251，253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273，275，277， 279，281，283，285，287，289，291，293，295，297，299，正如用序列比较算 法或通过目测所确定的。
5.如权利要求1所述的分离的核酸，其中所述变体与如下序列的 至少一个序列在至少大约200残基的区域内具有至少50％同源性：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39， 41，43，45，47，49，51，53，55，57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79， 81，83，85，87，89，91，93，95，97，99，101，103，105，107，109，111，113，115， 117，119，121，123，125，127，129，131，133，135，137，139，141，143，145， 147，149，151，153，155，157，159，161，163，165，167，169，171，173，175， 177，179，181，183，185，187，189，191，193，195，197，199，201，203，205， 207，209，211，213，215，217，219，221，223，225，227，229，231，233，235， 237，239，241，243，245，247，249，251，253，255，257，259，261，263，265， 267，269，271，273，275，277，279，281，283，285，287，289，291，293，295， 297，299，正如用序列比较算法或通过目测所确定的。
6.如权利要求1所述的分离的核酸，其中所述变体与如下序列的 至少一个序列在整个序列内具有至少50％同源性：SEQ ID NO.：1，3，5， 9，11，13，15，17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47， 49，51，53，55，57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87， 89，91，93，95，97，99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，119，121， 123，125，127，129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151， 153，155，157，159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181， 183，185，187，189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，211， 213，215，217，219，221，223，225，227，229，231，233，235，237，239，241， 243，245，247，249，251，253，255，257，259，261，263，265，267，269，271， 273，275，277，279，281，283，285，287，289，291，293，295，297，299。
7.如权利要求1，2，3，4，5或6所述的分离的核酸，其中所述 变体与如下序列的至少一个序列具有至少55％同源性：SEQ ID NO.：1， 3，5，9，11，13，15，17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45， 47，49，51，53，55，57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85， 87，89，91，93，95，97，99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，119， 121，123，125，127，129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149， 151，153，155，157，159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179， 181，183，185，187，189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209， 211，213，215，217，219，221，223，225，227，229，231，233，235，237，239， 241，243，245，247，249，251，253，255，257，259，261，263，265，267，269， 271，273，275，277，279，281，283，285，287，289，291，293，295，297，299。
8.如权利要求1，2，3，4，5或6所述的分离的核酸，其中所述 变体与如下序列的至少一个序列具有至少60％同源性：SEQ ID NO.：1， 3，5，9，11，13，15，17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45， 47，49，51，53，55，57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85， 87，89，91，93，95，97，99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，119， 121，123，125，127，129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149， 151，153，155，157，159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179， 181，183，185，187，189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209， 211，213，215，217，219，221，223，225，227，229，231，233，235，237，239， 241，243，245，247，249，251，253，255，257，259，261，263，265，267，269， 271，273，275，277，279，281，283，285，287，289，291，293，295，297，299。
9.如权利要求1，2，3，4，5或6所述的分离的核酸，其中所述 变体与如下序列的至少一个序列具有至少65％同源性：SEQ ID NO.：1， 3，5，9，11，13，15，17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45， 47，49，51，53，55，57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85， 87，89，91，93，95，97，99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，119， 121，123，125，127，129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149， 151，153，155，157，159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179， 181，183，185，187，189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209， 211，213，215，217，219，221，223，225，227，229，231，233，235，237，239， 241，243，245，247，249，251，253，255，257，259，261，263，265，267，269， 271，273，275，277，279，281，283，285，287，289，291，293，295，297，299。
10.如权利要求1，2，3，4，5或6所述的分离的核酸，其中所述 变体与如下序列的至少一个序列具有至少70％同源性：SEQ ID NO.：1， 3，5，9，11，13，15，17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45， 47，49，51，53，55，57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85， 87，89，91，93，95，97，99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，119， 121，123，125，127，129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149， 151，153，155，157，159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179， 181，183，185，187，189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209， 211，213，215，217，219，221，223，225，227，229，231，233，235，237，239， 241，243，245，247，249，251，253，255，257，259，261，263，265，267，269， 271，273，275，277，279，281，283，285，287，289，291，293，295，297，299。
11.如权利要求1，2，3，4，5或6所述的分离的核酸，其中所述 变体与如下序列的至少一个序列具有至少75％同源性：SEQ ID NO.：1， 3，5，9，11，13，15，17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45， 47，49，51，53，55，57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85， 87，89，91，93，95，97，99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，119， 121，123，125，127，129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149， 151，153，155，157，159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179， 181，183，185，187，189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209， 211，213，215，217，219，221，223，225，227，229，231，233，235，237，239， 241，243，245，247，249，251，253，255，257，259，261，263，265，267，269， 271，273，275，277，279，281，283，285，287，289，291，293，295，297，299。
12.如权利要求1，2，3，4，5或6所述的分离的核酸，其中所述 变体与如下序列的至少一个序列具有至少80％同源性：SEQ ID NO.：1， 3，5，9，11，13，15，17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45， 47，49，51，53，55，57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85， 87，89，91，93，95，97，99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，119， 121，123，125，127，129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149， 151，153，155，157，159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179， 181，183，185，187，189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209， 211，213，215，217，219，221，223，225，227，229，231，233，235，237，239， 241，243，245，247，249，251，253，255，257，259，261，263，265，267，269， 271，273，275，277，279，281，283，285，287，289，291，293，295，297，299。
13.如权利要求1，2，3，4，5或6所述的分离的核酸，其中所述 变体与如下序列的至少一个序列具有至少85％同源性：SEQ ID NO.：1， 3，5，9，11，13，15，17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45， 47，49，51，53，55，57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85， 87，89，91，93，95，97，99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，119， 121，123，125，127，129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149， 151，153，155，157，159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179， 181，183，185，187，189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209， 211，213，215，217，219，221，223，225，227，229，231，233，235，237，239， 241，243，245，247，249，251，253，255，257，259，261，263，265，267，269， 271，273，275，277，279，281，283，285，287，289，291，293，295，297，299。
14.如权利要求1，2，3，4，5或6所述的分离的核酸，其中所述 变体与如下序列的至少一个序列具有至少90％同源性：SEQ ID NO.：1， 3，5，9，11，13，15，17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45， 47，49，51，53，55，57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85， 87，89，91，93，95，97，99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，119， 121，123，125，127，129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149， 151，153，155，157，159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179， 181，183，185，187，189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209， 211，213，215，217，219，221，223，225，227，229，231，233，235，237，239， 241，243，245，247，249，251，253，255，257，259，261，263，265，267，269， 271，273，275，277，279，281，283，285，287，289，291，293，295，297，299。
15.如权利要求1，2，3，4，5或6所述的分离的核酸，其中所述 变体与如下序列的至少一个序列具有至少95％同源性：SEQ ID NO.：1， 3，5，9，11，13，15，17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45， 47，49，51，53，55，57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85， 87，89，91，93，95，97，99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，119， 121，123，125，127，129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149， 151，153，155，157，159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179， 181，183，185，187，189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209， 211，213，215，217，219，221，223，225，227，229，231，233，235，237，239， 241，243，245，247，249，251，253，255，257，259，261，263，265，267，269， 271，273，275，277，279，281，283，285，287，289，291，293，295，297，299。
16.权利要求1的分离的核酸，其中序列比较算法是具有缺省参数 的FASTA版本3.0t78。
17.一种分离的核酸，所述分离的核酸包括至少10个连续碱基， 所述至少10个连续碱基是选自
如下序列的序列的碱基：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17，19， 21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51，53，55，57，59， 61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95，97，99， 101，103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123，125，127，129， 131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153，155，157，159， 161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183，185，187，189， 191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213，215，217，219， 221，223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243，245，247，249， 251，253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273，275，277，279， 281，283，285，287，289，291，293，295，297，299；
与如下序列的至少一个序列在至少大约100残基的区域内具有至 少50％同源性的变体：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17，19，21，23， 25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51，53，55，57，59，61，63， 65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95，97，99，101， 103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123，125，127，129，131， 133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153，155，157，159，161， 163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183，185，187，189，191， 193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213，215，217，219，221， 223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243，245，247，249，251， 253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273，275，277，279，281， 283，285，287，289，291，293，295，297，299，正如用序列比较算法或通过 目测所确定的；
与如下序列互补的序列：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17，19， 21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51，53，55，57，59， 61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95，97，99， 101，103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123，125，127，129， 131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153，155，157，159， 161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183，185，187，189， 191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213，215，217，219， 221，223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243，245，247，249， 251，253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273，275，277，279， 281，283，285，287，289，291，293，295，297，299；和
与如下序列在至少大约100残基的区域内具有至少50％同源性的 变体互补的序列：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17，19，21，23，25，27， 29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51，53，55，57，59，61，63，65，67， 69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95，97，99，101，103，105， 107，109，111，113，115，117，119，121，123，125，127，129，131，133，135， 137，139，141，143，145，147，149，151，153，155，157，159，161，163，165， 167，169，171，173，175，177，179，181，183，185，187，189，191，193，195， 197，199，201，203，205，207，209，211，213，215，217，219，221，223，225， 227，229，231，233，235，237，239，241，243，245，247，249，251，253，255， 257，259，261，263，265，267，269，271，273，275，277，279，281，283，285， 287，289，291，293，295，297，299，正如用序列比较算法或通过目测所确 定的。
18.如权利要求17所述的分离的核酸，其中所述序列与选自如下 序列的序列在至少大约200残基的区域内具有至少50％同源性：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39， 41，43，45，47，49，51，53，55，57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79， 81，83，85，87，89，91，93，95，97，99，101，103，105，107，109，111，113，115， 117，119，121，123，125，127，129，131，133，135，137，139，141，143，145， 147，149，151，153，155，157，159，161，163，165，167，169，171，173，175， 177，179，181，183，185，187，189，191，193，195，197，199，201，203，205， 207，209，211，213，215，217，219，221，223，225，227，229，231，233，235， 237，239，241，243，245，247，249，251，253，255，257，259，261，263，265， 267，269，271，273，275，277，279，281，283，285，287，289，291，293，295， 297，299。
19.如权利要求17所述的分离的核酸，其中所述序列与选自如下 序列的序列在整个序列内具有至少50％同源性：SEQ ID NO.：1，3，5，9， 11，13，15，17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49， 51，53，55，57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89， 91，93，95，97，99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，119，121， 123，125，127，129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151， 153，155，157，159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181， 183，185，187，189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，211， 213，215，217，219，221，223，225，227，229，231，233，235，237，239，241， 243，245，247，249，251，253，255，257，259，261，263，265，267，269，271， 273，275，277，279，281，283，285，287，289，291，293，295，297，299。
20.如权利要求17，18或19所述的分离的核酸，其中所述序列与 选自如下序列的序列具有至少55％同源性：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11， 13，15，17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51， 53，55，57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91， 93，95，97，99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123， 125，127，129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153， 155，157，159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183， 185，187，189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213， 215，217，219，221，223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243， 245，247，249，251，253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273， 275，277，279，281，283，285，287，289，291，293，295，297，299。
21.如权利要求17，18或19所述的分离的核酸，其中所述序列与 选自如下序列的序列具有至少60％同源性：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11， 13，15，17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51， 53，55，57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91， 93，95，97，99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123， 125，127，129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153， 155，157，159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183， 185，187，189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213， 215，217，219，221，223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243， 245，247，249，251，253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273， 275，277，279，281，283，285，287，289，291，293，295，297，299。
22.如权利要求17，18或19所述的分离的核酸，其中所述序列与 选自如下序列的序列具有至少65％同源性：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11， 13，15，17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51， 53，55，57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91， 93，95，97，99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123， 125，127，129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153， 155，157，159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183， 185，187，189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213， 215，217，219，221，223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243， 245，247，249，251，253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273， 275，277，279，281，283，285，287，289，291，293，295，297，299。
23.如权利要求17，18或19所述的分离的核酸，其中所述序列与 选自如下序列的序列具有至少70％同源性：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11， 13，15，17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51， 53，55，57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91， 93，95，97，99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123， 125，127，129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153， 155，157，159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183， 185，187，189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213， 215，217，219，221，223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243， 245，247，249，251，253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273， 275，277，279，281，283，285，287，289，291，293，295，297，299。
24.如权利要求17，18或19所述的分离的核酸，其中所述序列与 选自如下序列的序列具有至少75％同源性：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11， 13，15，17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51， 53，55，57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91， 93，95，97，99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123， 125，127，129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153， 155，157，159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183， 185，187，189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213， 215，217，219，221，223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243， 245，247，249，251，253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273， 275，277，279，281，283，285，287，289，291，293，295，297，299。
25.如权利要求17，18或19所述的分离的核酸，其中所述序列与 选自如下序列的序列具有至少80％同源性：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11， 13，15，17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51， 53，55，57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91， 93，95，97，99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123， 125，127，129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153， 155，157，159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183， 185，187，189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213， 215，217，219，221，223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243， 245，247，249，251，253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273， 275，277，279，281，283，285，287，289，291，293，295，297，299。
26.如权利要求17，18或19所述的分离的核酸，其中所述序列与 选自如下序列的序列具有至少85％同源性：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11， 13，15，17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51， 53，55，57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91， 93，95，97，99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123， 125，127，129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153， 155，157，159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183， 185，187，189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213， 215，217，219，221，223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243， 245，247，249，251，253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273， 275，277，279，281，283，285，287，289，291，293，295，297，299。
27.如权利要求17，18或19所述的分离的核酸，其中所述序列与 选自如下序列的序列具有至少90％同源性：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11， 13，15，17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51， 53，55，57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91， 93，95，97，99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123， 125，127，129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153， 155，157，159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183， 185，187，189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213， 215，217，219，221，223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243， 245，247，249，251，253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273， 275，277，279，281，283，285，287，289，291，293，295，297，299。
28.如权利要求17，18或19所述的分离的核酸，其中所述序列与 选自如下序列的序列具有至少95％同源性：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11， 13，15，17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51， 53，55，57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91， 93，95，97，99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123， 125，127，129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153， 155，157，159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183， 185，187，189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213， 215，217，219，221，223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243， 245，247，249，251，253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273， 275，277，279，281，283，285，287，289，291，293，295，297，299。
29.一种分离的核酸，其编码选自如下的多肽：
具有选自如下序列的氨基酸序列的多肽：SEQ ID NO.：2，4，6，10， 12，14，16，18，20，22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50， 52，54，56，58，60，62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90， 92，94，96，98，100，102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122， 124，126，128，130，132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152， 154，156，158，160，162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182， 184，186，188，190，192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214， 216，218，220，222，224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244， 246，248，250，252，254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274， 276，278，280，282，284，286，288，290，292，294，296，298；
与如下序列的至少一个序列在至少大约100残基的区域内具有至 少50％同源性的变体：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16，18，20，22，24， 26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56，58，60，62，64， 66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96，98，100，102， 104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126，128，130，132， 134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156，158，160，162， 164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186，188，190，192， 194，196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218，220，222，224， 226，228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248，250，252，254， 256，258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278，280，282，284， 286，288，290，292，294，296，298，正如用序列比较算法或通过目测所确 定的；
与如下序列互补的序列：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16，18，20， 22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56，58，60， 62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96，98，100， 102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126，128，130， 132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156，158，160， 162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186，188，190， 192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218，220，222， 224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248，250，252， 254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278，280，282， 284，286，288，290，292，294，296，298；和
与如下序列在至少大约100残基的区域内具有至少50％同源性的 变体互补的序列：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16，18，20，22，24，26， 28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56，58，60，62，64，66， 68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96，98，100，102，104， 106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126，128，130，132，134， 136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156，158，160，162，164， 166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186，188，190，192，194， 196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218，220，222，224，226， 228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248，250，252，254，256， 258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278，280，282，284，286， 288，290，292，294，296，298，正如用序列比较算法或通过目测所确定 的；和
具有至少10个连续氨基酸的多肽，所述至少10个连续氨基酸是 具有选自如下序列的序列的多肽的氨基酸：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12， 14，16，18，20，22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52， 54，56，58，60，62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92， 94，96，98，100，102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124， 126，128，130，132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154， 156，158，160，162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184， 186，188，190，192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214，216， 218，220，222，224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244，246， 248，250，252，254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274，276， 278，280，282，284，286，288，290，292，294，296，298。
30.一种纯化的多肽，选自：
具有选自如下序列的氨基酸序列的多肽：SEQ ID NO.：2，4，6，10， 12，14，16，18，20，22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50， 52，54，56，58，60，62，64，66，68，70，72，74， 76，78，80，82，84，86，88，90， 92，94，96，98，100，102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122， 124，126，128，130，132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152， 154，156，158，160，162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182， 184，186，188，190，192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214， 216，218，220，222，224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244， 246，248，250，252，254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274， 276，278，280，282，284，286，288，290，292，294，296，298；
与如下序列的至少一个序列在至少大约100残基的区域内具有至 少50％同源性的变体：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16，18，20，22，24， 26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56，58，60，62，64， 66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96，98，100，102， 104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126，128，130，132， 134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156，158，160，162， 164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186，188，190，192， 194，196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218，220，222，224， 226，228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248，250，252，254， 256，25 8，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278，280，282，284， 286，288，290，292，294，296，298，正如用序列比较算法或通过目测所确 定的；
与如下序列互补的序列：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16，18，20， 22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56，58，60， 62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96，98，100， 102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126，128，130， 132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156，158，160， 162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186，188，190， 192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218，220，222， 224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248，250，252， 254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278，280，282， 284，286，288，290，292，294，296，298；和
与如下序列在至少大约100残基的区域内具有至少50％同源性的 变体互补的序列：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16，18，20，22，24，26， 28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56，58，60，62，64，66， 68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96，98，100，102，104， 106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126，128，130，132，134， 136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156，158，160，162，164， 166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186，188，190，192，194， 196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218，220，222，224，226， 228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248，250，252，254，256， 258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278，280，282，284，286， 288，290，292，294，296，298，正如用序列比较算法或通过目测所确定 的；和
具有一种多肽的至少10个连续氨基酸的多肽，所述该种多肽是具 有选自如下序列的多肽：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16，18，20，22， 24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56，58，60，62， 64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96，98，100， 102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126，128，130， 132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156，158，160， 162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186，188，190， 192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218，220，222， 224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248，250，252， 254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278，280，282， 284，286，288，290，292，294，296，298。
31.如权利要求30的纯化的多肽，其中所述氨基酸序列与选自如 下序列的序列在至少大约200残基的区域内具有至少50％同源性：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16，18，20，22，24，26，28，30，32，34，36，38，40， 42，44，46，48，50，52，54，56，58，60，62，64，66，68，70，72，74，76，78，80， 82，84，86，88，90，92，94，96，98，100，102，104，106，108，110，112，114， 116，118，120，122，124，126，128，130，132，134，136，138，140，142，144， 146，148，150，152，154，156，158，160，162，164，166，168，170，172，174， 176，178，180，182，184，186，188，190，192，194，196，198，202，204，206， 208，210，212，214，216，218，220，222，224，226，228，230，232，234，236， 238，240，242，244，246，248，250，252，254，256，258，260，262，264，266， 268，270，272，274，276，278，280，282，284，286，288，290，292，294，296， 298。
32.如权利要求30的纯化的多肽，其中所述氨基酸序列与选自如 下序列的序列在整个序列内具有至少50％同源性：SEQ ID NO.：2，4，6， 10，12，14，16，18，20，22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48， 50，52，54，56，58，60，62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88， 90，92，94，96，98，100，102，104，106，108，110，112，114，116，118，120， 122，124，126，128，130，132，134，136，138，140，142，144，146，148，150， 152，154，156，158，160，162，164，166，168，170，172，174，176，178，180， 182，184，186，188，190，192，194，196，198，202，204，206，208，210，212， 214，216，218，220，222，224，226，228，230，232，234，236，238，240，242， 244，246，248，250，252，254，256，258，260，262，264，266，268，270，272， 274，276，278，280，282，284，286，288，290，292，294，296，298。
33.如权利要求30，31或32的纯化的多肽，其中所述氨基酸序列 与选自如下序列的序列具有至少55％同源性：SEQ ID NO.：2，4，6，10， 12，14，16，18，20，22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50， 52，54，56，58，60，62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90， 92，94，96，98，100，102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122， 124，126，128，130，132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152， 154，156，158，160，162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182， 184，186，188，190，192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214， 216，218，220，222，224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244， 246，248，250，252，254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274， 276，278，280，282，284，286，288，290，292，294，296，298。
34.如权利要求30，31或32的纯化的多肽，其中所述氨基酸序列 与选自如下序列的序列具有至少60％同源性：SEQ ID NO.：2，4，6，10， 12，14，16，18，20，22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50， 52，54，56，58，60，62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90， 92，94，96，98，100，102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122， 124，126，128，130，132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152， 154，156，158，160，162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182， 184，186，188，190，192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214， 216，218，220，222，224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244， 246，248，250，252，254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274， 276，278，280，282，284，286，288，290，292，294，296，298。
35.如权利要求30，31或32的纯化的多肽，其中所述氨基酸序列 与选自如下序列的序列具有至少65％同源性：SEQ ID NO.：2，4，6，10， 12，14，16，18，20，22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50， 52，54，56，58，60，62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90， 92，94，96，98，100，102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122， 124，126，128，130，132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152， 154，156，158，160，162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182， 184，186，188，190，192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214， 216，218，220，222，224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244， 246，248，250，252，254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274， 276，278，280，282，284，286，288，290，292，294，296，298。
36.如权利要求30，31或32的纯化的多肽，其中所述氨基酸序列 与选自如下序列的序列具有至少70％同源性：SEQ ID NO.：2，4，6，10， 12，14，16，18，20，22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50， 52，54，56，58，60，62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90， 92，94，96，98，100，102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122， 124，126，128，130，132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152， 154，156，158，160，162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182， 184，186，188，190，192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214， 216，218，220，222，224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244， 246，248，250，252，254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274， 276，278，280，282，284，286，288，290，292，294，296，298。
37.如权利要求30，31或32的纯化的多肽，其中所述氨基酸序列 与选自如下序列的序列具有至少75％同源性：SEQ ID NO.：2，4，6，10， 12，14，16，18，20，22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50， 52，54，56，58，60，62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90， 92，94，96，98，100，102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122， 124，126，128，130，132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152， 154，156，158，160，162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182， 184，186，188，190，192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214， 216，218，220，222，224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244， 246，248，250，252，254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274， 276，278，280，282，284，286，288，290，292，294，296，298。
38.如权利要求30，31或32的纯化的多肽，其中所述氨基酸序列 与选自如下序列的序列具有至少80％同源性：SEQ ID NO.：2，4，6，10， 12，14，16，18，20，22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50， 52，54，56，58，60，62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90， 92，94，96，98，100，102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122， 124，126，128，130，132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152， 154，156，158，160，162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182， 184，186，188，190，192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214， 216，218，220，222，224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244， 246，248，250，252，254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274， 276，278，280，282，284，286，288，290，292，294，296，298。
39.如权利要求30，31或32的纯化的多肽，其中所述氨基酸序列 与选自如下序列的序列具有至少85％同源性：SEQ ID NO.：2，4，6，10， 12，14，16，18，20，22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50， 52，54，56，58，60，62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90， 92，94，96，98，100，102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122， 124，126，128，130，132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152， 154，156，158，160，162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182， 184，186，188，190，192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214， 216，218，220，222，224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244， 246，248，250，252，254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274， 276，278，280，282，284，286，288，290，292，294，296，298。
40.如权利要求30，31或32的纯化的多肽，其中所述氨基酸序列 与选自如下序列的序列具有至少90％同源性：SEQ ID NO.：2，4，6，10， 12，14，16，18，20，22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50， 52，54，56，58，60，62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90， 92，94，96，98，100，102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122， 124，126，128，130，132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152， 154，156，158，160，162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182， 184，186，188，190，192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214， 216，218，220，222，224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244， 246，248，250，252，254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274， 276，278，280，282，284，286，288，290，292，294，296，298。
41.如权利要求30，31或32的纯化的多肽，其中所述氨基酸序列 与选自如下序列的序列具有至少95％同源性：SEQ ID NO.：2，4，6，10， 12，14，16，18，20，22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50， 52，54，56，58，60，62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90， 92，94，96，98，100，102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122， 124，126，128，130，132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152， 154，156，158，160，162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182， 184，186，188，190，192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214， 216，218，220，222，224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244， 246，248，250，252，254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274， 276，278，280，282，284，286，288，290，292，294，296，298。
42.如权利要求30的纯化的多肽，其具有选自如下序列的氨基酸 序列：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16，18，20，22，24，26，28，30，32，34， 36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56，58，60，62，64，66，68，70，72，74， 76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96，98，100，102，104，106，108，110， 112，114，116，118，120，122，124，126，128，130，132，134，136，138，140， 142，144，146，148，150，152，154，156，158，160，162，164，166，168，170， 172，174，176，178，180，182，184，186，188，190，192，194，196，198，202， 204，206，208，210，212，214，216，218，220，222，224，226，228，230，232， 234，236，238，240，242，244，246，248，250，252，254，256，258，260，262， 264，266，268，270，272，274，276，278，280，282，284，286，288，290，292， 294，296，298；和与如下序列的至少一个序列在整个序列内具有至少 50％同源性的序列：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16，18，20，22，24，26， 28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56，58，60，62，64，66， 68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96，98，100，102，104， 106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126，128，130，132，134， 136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156，158，160，162，164， 166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186，188，190，192，194， 196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218，220，222，224，226， 228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248，250，252，254，256， 258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278，280，282，284，286， 288，290，292，294，296，298。
43.一种纯化的抗体，其与选自如下的多肽特定地结合：
包括选自如下序列的氨基酸序列的多肽：
SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16，18，20，22，24，26，28，30，32，34， 36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56，58，60，62，64，66，68，70，72，74， 76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96，98，100，102，104，106，108，110， 112，114，116，118，120，122，124，126，128，130，132，134，136，138，140， 142，144，146，148，150，152，154，156，158，160，162，164，166，168，170， 172，174，176，178，180，182，184，186，188，190，192，194，196，198，202， 204，206，208，210，212，214，216，218，220，222，224，226，228，230，232， 234，236，238，240，242，244，246，248，250，252，254，256，258，260，262， 264，266，268，270，272，274，276，278，280，282，284，286，288，290，292， 294，296，298；
与如下序列的至少一个序列在至少大约100个残基的区域内具有 至少50％同源性的变体：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16，18，20，22， 24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56，58，60，62， 64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96，98，100， 102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126，128，130， 132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156，158，160， 162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186，188，190， 192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218，220，222， 224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248，250，252， 254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278，280，282， 284，286，288，290，292，294，296，298，正如用序列比较算法或通过目测 所确定的；
与如下序列互补的序列：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16，18，20， 22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56，58，60， 62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96，98，100， 102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126，128，130， 132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156，158，160， 162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186，188，190， 192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218，220，222， 224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248，250，252， 254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278，280，282， 284，286，288，290，292，294，296，298；和
与如下序列在至少大约100个残基的区域内具有至少50％同源性 的变体互补的序列：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16，18，20，22，24，26， 28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56，58，60，62，64，66， 68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96，98，100，102，104， 106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126，128，130，132，134， 136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156，158，160，162，164， 166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186，188，190，192，194， 196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218，220，222，224，226， 228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248，250，252，254，256， 258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278，280，282，284，286， 288，290，292，294，296，298，正如通过用序列比较算法或通过目测所确 定的；和
具有至少10个连续氨基酸的多肽，所述至少10个连续氨基酸是 具有选自如下序列的多肽的氨基酸：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16， 18，20，22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56， 58，60，62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96， 98，100，102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126， 128，130，132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156， 158，160，162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186， 188，190，192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218， 220，222，224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248， 250，252，254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278， 280，282，284，286，288，290，292，294，296，298。
44.如权利要求43所述的纯化的抗体，其与具有至少10个连续氨 基酸序列的多肽特定地结合，所述至少10个连续氨基酸是选自如下序 列的多肽的氨基酸：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16，18，20，22，24，26， 28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56，58，60，62，64，66， 68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96，98，100，102，104， 106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126，128，130，132，134， 136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156，158，160，162，164， 166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186，188，190，192，194， 196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218，220，222，224，226， 228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248，250，252，254，256， 258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278，280，282，284，286， 288，290，292，294，296，298。
45.如权利要求43的抗体，其中所述抗体是多克隆抗体。
46.如权利要求43的抗体，其中所述抗体是单克隆抗体。
47.一种产生多肽的方法，所述多肽选自：
具有选自如下序列的氨基酸序列的多肽：SEQ ID NO.：2，4，6，10， 12，14，16，18，20，22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50， 52，54，56，58，60，62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90， 92，94，96，98，100，102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122， 124，126，128，130，132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152， 154，156，158，160，162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182， 184，186，188，190，192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214， 216，218，220，222，224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244， 246，248，250，252，254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274， 276，278，280，282，284，286，288，290，292，294，296，298；
与如下序列的至少一个序列在至少大约100残基的区域内具有至 少50％同源性的变体：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16，18，20，22，24， 26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56，58，60，62，64， 66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96，98，100，102， 104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126，128，130，132， 134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156，158，160，162， 164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186，188，190，192， 194，196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218，220，222，224， 226，228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248，250，252，254， 256，258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278，280，282，284， 286，288，290，292，294，296，298，正如用序列比较算法或通过目测所确 定的；
与如下序列互补的序列：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16，18，20， 22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56，58，60， 62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96，98，100， 102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126，128，130， 132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156，158，160， 162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186，188，190， 192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218，220，222， 224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248，250，252， 254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278，280，282， 284，286，288，290，292，294，296，298；和
与如下序列在至少大约100残基的区域内具有至少50％同源性的 变体互补的序列：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16，18，20，22，24，26， 28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56，58，60，62，64，66， 68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96，98，100，102，104， 106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126，128，130，132，134， 136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156，158，160，162，164， 166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186，188，190，192，194， 196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218，220，222，224，226， 228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248，250，252，254，256， 258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278，280，282，284，286， 288，290，292，294，296，298，正如用序列比较算法或通过目测所确定 的；和
具有至少10连续氨基酸的多肽，所述10个连续氨基酸是具有选 自如下序列的多肽的氨基酸：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16，18，20， 22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56，58，60， 62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96，98，100， 102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126，128，130， 132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156，158，160， 162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186，188，190， 192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218，220，222， 224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248，250，252， 254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278，280，282， 284，286，288，290，292，294，296，298；包括将编码多肽的核酸在允许多 肽表达的条件下导入宿主细胞中，且回收多肽的步骤。
48.一种产生多肽的方法，所述多肽包括选自如下的序列的至少 10个氨基酸：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16，18，20，22，24，26，28，30， 32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56，58，60，62，64，66，68，70， 72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96，98，100，102，104，106， 108，110，112，114，116，118，120，122，124，126，128，130，132，134，136， 138，140，142，144，146，148，150，152，154，156，158，160，162，164，166， 168，170，172，174，176，178，180，182，184，186，188，190，192，194，196， 198，202，204，206，208，210，212，214，216，218，220，222，224，226，228， 230，232，234，236，238，240，242，244，246，248，250，252，254，256，258， 260，262，264，266，268，270，272，274，276，278，280，282，284，286，288， 290，292，294，296，298，包括步骤：将编码与启动子可操作连接的多肽 的核酸在允许该肽表达的条件下导入宿主细胞中，且回收多肽。
49.一种产生变体的方法，所述方法包括：
得到包括选自如下序列的多核苷酸的核酸：SEQ ID NO.：1，3，5，9， 11，13，15，17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49， 51，53，55，57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89， 91，93，95，97，99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，119，121， 123，125，127，129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151， 153，155，157，159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181， 183，185，187，189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，211， 213，215，217，219，221，223，225，227，229，231，233，235，237，239，241， 243，245，247，249，251，253，255，257，259，261，263，265，267，269，271， 273，275，277，279，281，283，285，287，289，291，293，295，297，299；
与如下序列的至少一个序列在至少大约100个残基的区域内具有 至少大约50％同源性的变体：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17，19， 21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51，53，55，57，59， 61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95，97，99， 101，103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123，125，127，129， 131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153，155，157，159， 161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183，185，187，189， 191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213，215，217，219， 221，223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243，245，247，249， 251，253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273，275，277，279， 281，283，285，287，289，291，293，295，297，299，正如用序列比较算法或 通过目测所确定的；
与如下序列互补的序列：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17，19， 21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51，53，55，57，59， 61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95，97，99， 101，103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123，125，127，129， 131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153，155，157，159， 161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183，185，187，189， 191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213，215，217，219， 221，223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243，245，247，249， 251，253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273，275，277，279， 281，283，285，287，289，291，293，295，297，299；和
与如下序列在至少大约100个残基的区域内具有至少大约50％同 源性的变体互补的序列：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17，19，21，23， 25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51，53，55，57，59，61，63， 65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95，97，99，101， 103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123，125，127，129，131， 133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153，155，157，159，161， 163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183，185，187，189，191， 193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213，215，217，219，221， 223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243，245，247，249，251， 253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273，275，277，279，281， 283，285，287，289，291，293，295，297，299，正如用序列比较算法或通过 目测所确定的；和
包括前述序列任一种的至少30个连续核苷酸的片段；和
在所述多核苷酸中将一个或多个核苷酸修饰为另一个核苷酸，在 所述多核苷酸中删除一个或多个核苷酸，或将一个或多个核苷酸添加 到所述多核苷酸中。
50.如权利要求49所述的方法，其中修饰是通过选自如下的方法 来引入的：易错PCR、改组、寡核苷酸介导的诱变、装配PCR、有性 PCR诱变、体内诱变、盒式诱变、递归集团诱变、指数集团诱变、位 点特异性诱变、基因再装配、GSSM及其任意组合。
51.如权利要求50所述的方法，其中所述修饰是通过易错PCR引 入的。
52.如权利要求50所述的方法，其中所述修饰是通过改组引入的。
53.如权利要求50所述的方法，其中所述修饰是通过寡核苷酸介 导的诱变引入的。
54.如权利要求50所述的方法，其中所述修饰是通过装配PCR引 入的。
55.如权利要求50所述的方法，其中修饰是通过有性PCR诱变引 入的。
56.如权利要求50所述的方法，其中所述修饰是通过体内诱变引 入的。
57.如权利要求50所述的方法，其中所述修饰是通过盒式诱变引 入的。
58.如权利要求50所述的方法，其中所述修饰是通过递归集团诱 变引入的。
59.如权利要求50所述的方法，其中所述修饰是通过指数集团诱 变引入的。
60.如权利要求50所述的方法，其中所述修饰是通过位点特异性 诱变引入的。
61.如权利要求50所述的方法，其中所述修饰是通过基因再装配 引入的。
62.如权利要求50所述的方法，其中所述修饰是通过基因位点饱 和诱变引入的。
63.一种其上已经存储了选自如下序列的序列的计算机可读介质：
如下序列的核酸序列：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17，19，21， 23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51，53，55，57，59，61， 63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95，97，99，101， 103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123，125，127，129，131， 133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153，155，157，159，161， 163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183，185，187，189，191， 193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213，215，217，219，221， 223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243，245，247，249，251， 253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273，275，277，279，281， 283，285，287，289，291，293，295，297，299；
与如下序列的至少一个序列在至少大约100个残基的区域内具有 至少50％同源性的核酸序列的变体：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15， 17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51，53，55， 57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95， 97，99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123，125，127， 129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153，155，157， 159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183，185，187， 189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213，215，217， 219，221，223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243，245，247， 249，251，253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273，275，277， 279，281，283，285，287，289，291，293，295，297，299，正如用序列比较算 法或通过目测所确定的；
与如下序列互补的核酸序列：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17， 19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51，53，55，57， 59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95，97， 99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123，125，127， 129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153，155，157， 159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183，185，187， 189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213，215，217， 219，221，223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243，245，247， 249，251，253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273，275，277， 279，281，283，285，287，289，291，293，295，297，299；
与如下序列在至少大约100个残基的区域内具有至少50％同源性 的核酸序列的变体互补的核酸序列：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15， 17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51，53，55， 57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95， 97，99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123，125，127， 129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153，155，157， 159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183，185，187， 189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213，215，217， 219，221，223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243，245，247， 249，251，253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273，275，277， 279，281，283，285，287，289，291，293，295，297，299，正如用序列比较算 法或通过目测所确定的；
如下序列的多肽序列：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16，18，20，22， 24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56，58，60，62， 64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96，98，100， 102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126，128，130， 132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156，158，160， 162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186，188，190， 192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218，220，222， 224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248，250，252， 254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278，280，282， 284，286，288，290，292，294，296，298；
与如下序列的至少一个序列在至少大约100个残基的区域内具有 至少50％同源性的多肽序列的变体：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16， 18，20，22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56， 58，60，62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96， 98，100，102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126， 128，130，132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156， 158，160，162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186， 188，190，192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218， 220，222，224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248， 250，252，254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278， 280，282，284，286，288，290，292，294，296，298，正如用序列比较算法或 通过目测所确定的；
与如下序列互补的多肽序列：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16，18， 20，22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56，58， 60，62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96，98， 100，102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126，128， 130，132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156，158， 160，162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186，188， 190，192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218，220， 222，224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248，250， 252，254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278，280， 282，284，286，288，290，292，294，296，298；和
与如下序列在至少大约100个残基的区域内具有至少50％同源性 的多肽序列的变体互补的多肽序列：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16， 18，20，22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56， 58，60，62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96， 98，100，102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126， 128，130，132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156， 158，160，162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186， 188，190，192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218， 220，222，224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248， 250，252，254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278， 280，282，284，286，288，290，292，294，296，298，正如用序列比较算法或 通过目测所确定的。
64.一种包括处理器和数据存储设备的计算机系统，其中所述数据 存储设备上存储了选自如下序列的序列：
如下序列的核酸序列：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17，19，21， 23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51，53，55，57，59，61， 63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95，97，99，101， 103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123，125，127，129，131， 133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153，155，157，159，161， 163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183，185，187，189，191， 193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213，215，217，219，221， 223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243，245，247，249，251， 253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273，275，277，279，281， 283，285，287，289，291，293，295，297，299；
与如下序列的至少一个序列在至少大约100个残基的区域内具有 至少50％同源性的核酸序列的变体：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15， 17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51，53，55， 57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95， 97，99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123，125，127， 129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153，155，157， 159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183，185，187， 189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213，215，217， 219，221，223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243，245，247， 249，251，253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273，275，277， 279，281，283，285，287，289，291，293，295，297，299，正如用序列比较算 法或通过目测所确定的；
与如下序列互补的核酸序列：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17， 19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51，53，55，57， 59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95，97， 99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123，125，127， 129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153，155，157， 159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183，185，187， 189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213，215，217， 219，221，223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243，245，247， 249，251，253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273，275，277， 279，281，283，285，287，289，291，293，295，297，299；
与如下序列在至少大约100个残基的区域内具有至少50％同源性 的核酸序列的变体互补的核酸序列：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15， 17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51，53，55， 57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95， 97，99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123，125，127， 129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153，155，157， 159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183，185，187， 189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213，215，217， 219，221，223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243，245，247， 249，251，253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273，275，277， 279，281，283，285，287，289，291，293，295，297，299，正如用序列比较算 法或通过目测所确定的；
如下序列的多肽序列：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16，18，20，22， 24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56，58，60，62， 64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96，98，100， 102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126，128，130， 132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156，158，160， 162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186，188，190， 192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218，220，222， 224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248，250，252， 254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278，280，282， 284，286，288，290，292，294，296，298；
与如下序列的至少一个序列在至少大约100个残基的区域内具有 至少50％同源性的多肽序列的变体：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16， 18，20，22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56， 58，60，62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96， 98，100，102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126， 128，130，132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156， 158，160，162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186， 188，190，192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218， 220，222，224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248， 250，252，254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278， 280，282，284，286，288，290，292，294，296，298，正如用序列比较算法或 通过目测所确定的；
与如下序列互补的多肽序列：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16，18， 20，22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56，58， 60，62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96，98， 100，102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126，128， 130，132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156，158， 160，162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186，188， 190，192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218，220， 222，224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248，250， 252，254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278，280， 282，284，286，288，290，292，294，296，298；和
与如下序列在至少大约100个残基的区域内具有至少50％同源性 的多肽序列的变体互补的多肽序列：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16， 18，20，22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56， 58，60，62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96， 98，100，102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126， 128，130，132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156， 158，160，162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186， 188，190，192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218， 220，222，224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248， 250，252，254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278， 280，282，284，286，288，290，292，294，296，298，正如用序列比较算法或 通过目测所确定的。
65.如权利要求64的计算机系统，所述计算机系统进一步包括一 种序列比较算法和其上已经存储了至少一个参考序列的数据存储设 备。
66.如权利要求65的计算机系统，其中所述序列比较算法包括一 个计算机程序，所述计算机程序显示出多态现象。
67.如权利要求64的计算机系统，所述计算机系统进一步包括一 个在所述序列中鉴别一种或多种特性的鉴别器。
68.一种用于比较第一序列和第二序列的方法，所述方法包括步 骤：
通过使用进行序列比较的计算机程序读取第一序列和第二序列； 和
用该计算机程序确定第一序列和第二序列之间的差异，其中所述 第一序列是选自如下的序列的一个序列：
如下序列的核酸序列：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17，19，21， 23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51，53，55，57，59，61， 63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95，97，99，101， 103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123，125，127，129，131， 133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153，155，157，159，161， 163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183，185，187，189，191， 193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213，215，217，219，221， 223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243，245，247，249，251， 253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273，275，277，279，281， 283，285，287，289，291，293，295，297，299；
与如下序列的至少一个序列在至少大约100个残基的区域内具有 至少50％同源性的核酸序列的变体：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15， 17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51，53，55， 57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95， 97，99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123，125，127， 129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153，155，157 ， 159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183，185，187， 189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213，215，217， 219，221，223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243，245，247， 249，251，253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273，275，277， 279，281，283，285，287，289，291，293，295，297，299，正如用序列比较算 法或通过目测所确定的；
与如下序列互补的核酸序列：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17， 19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51，53，55，57， 59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95，97， 99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123，125，127， 129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153，155，157， 159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183，185，187， 189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213，215，217， 219，221，223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243，245，247， 249，251，253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273，275，277， 279，281，283，285，287，289，291，293，295，297，299；
与如下序列在至少大约100个残基的区域内具有至少50％同源性 的核酸序列的变体互补的核酸序列：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15， 17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51，53，55， 57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95， 97，99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，1 19，121，123，125，127， 129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153，155，157， 159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183，185，187， 189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213，215，217， 219，221，223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243，245，247， 249，251，253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273，275，277， 279，281，283，285，287，289，291，293，295，297，299，正如用序列比较算 法或通过目测所确定的；
如下序列的多肽序列：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16，18，20，22， 24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56，58，60，62， 64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96，98，100， 102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126，128，130， 132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156，158，160， 162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186，188，190， 192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218，220，222， 224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248，250，252， 254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278，280，282， 284，286，288，290，292，294，296，298；
与如下序列的至少一个序列在至少大约100个残基的区域内具有 至少50％同源性的多肽序列的变体：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16， 18，20，22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56， 58，60，62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96， 98，100，102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126， 128，130，132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156， 158，160，162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186， 188，190，192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218， 220，222，224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248， 250，252，254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278， 280，282，284，286，288，290，292，294，296，298，正如用序列比较算法或 通过目测所确定的；
与如下序列互补的多肽序列：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16，18， 20，22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56，58， 60，62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96，98， 100，102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126，128， 130，132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156，158， 160，162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186，188， 190，192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218，220， 222，224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248，250， 252，254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278，280， 282，284，286，288，290，292，294，296，298；和
与如下序列在至少大约100个残基的区域内具有至少50％同源性 的多肽序列的变体互补的多肽序列：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16， 18，20，22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56， 58，60，62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96， 98，100，102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126， 128，130，132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156， 158，160，162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186， 188，190，192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218， 220，222，224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248， 250，252，254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278， 280，282，284，286，288，290，292，294，296，298，正如用序列比较算法或 通过目测所确定的。
69.如权利要求68的方法，其中确定第一序列和第二序列之间差 异的步骤进一步包括鉴别多态现象的步骤。
70.一种用于在序列中鉴别特征的方法，所述方法包括步骤：
用在序列中鉴别一个或多个特征的计算机程序读取序列；和
用该计算机程序在序列中鉴别一个或多个特征，其中所述序列选 自：
如下序列的核酸序列：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17，19，21， 23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51，53，55，57，59，61， 63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95，97，99，101， 103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123，125，127，129，131， 133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153，155，157，159，161， 163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183，185，187，189，191， 193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213，215，217，219，221， 223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243，245，247，249，251， 253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273，275，277，279，281， 283，285，287，289，291，293，295，297，299；
与如下序列的至少一个序列在至少大约100个残基的区域内具有 至少50％同源性的核酸序列的变体：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15， 17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51，53，55， 57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95， 97，99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123，125，127， 129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153，155，157， 159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183，185，187， 189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213，215，217， 219，221，223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243，245，247， 249，251，253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273，275，277， 279，281，283，285，287，289，291，293，295，297，299，正如用序列比较算 法或通过目测所确定的；
与如下序列互补的核酸序列：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17， 19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51，53，55，57， 59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95，97， 99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123，125，127， 129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153，155，157， 159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183，185，187， 189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213，215，217， 219，221，223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243，245，247， 249，251，253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273，275，277， 279，281，283，285，287，289，291，293，295，297，299；
与如下序列的至少一个序列在至少大约100个残基的区域内具有 至少50％同源性的核酸序列的变体互补的核酸序列：SEQ ID NO.：1，3， 5，9，11，13，15，17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47， 49，51，53，55，57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87， 89，91，93，95，97，99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，119，121， 123，125，127，129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151， 153，155，157，159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181， 183，185，187，189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，211， 213，215，217，219，221，223，225，227，229，231，233，235，237，239，241， 243，245，247，249，251，253，255，257，259，261，263，265，267，269，271， 273，275，277，279，281，283，285，287，289，291，293，295，297，299，正如 用序列比较算法或通过目测所确定的；
如下序列的多肽序列：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16，18，20，22， 24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56，58，60，62， 64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96，98，100， 102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126，128，130， 132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156，158，160， 162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186，188，190， 192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218，220，222， 224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248，250，252， 254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278，280，282， 284，286，288，290，292，294，296，298；
与如下序列的至少一个序列在至少大约100个残基的区域内具有 至少50％同源性的多肽序列的变体：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16， 18，20，22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56， 58，60，62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96， 98，100，102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126， 128，130，132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156， 158，160，162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186， 188，190，192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218， 220，222，224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248， 250，252，254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278， 280，282，284，286，288，290，292，294，296，298，正如用序列比较算法或 通过目测所确定的；
与如下序列互补的多肽序列：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16，18， 20，22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56，58， 60，62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96，98， 100，102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126，128， 130，132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156，158， 160，162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186，188， 190，192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218，220， 222，224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248，250， 252，254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278，280， 282，284，286，288，290，292，294，296，298；和
与如下序列在至少大约100个残基的区域内具有至少50％同源性 的多肽序列的变体互补的多肽序列：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16， 18，20，22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56， 58，60，62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96， 98，100，102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126， 128，130，132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156， 158，160，162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186， 188，190，192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218， 220，222，224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248， 250，252，254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278， 280，282，284，286，288，290，292，294，296，298，正如用序列比较算法或 通过目测所确定的。
71.一种用于水解淀粉键的方法，所述方法包括将含有淀粉的物质 与选自如下的多肽接触：
SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16，18，20，22，24，26，28，30，32，34， 36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56，58，60，62，64，66，68，70，72，74， 76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96，98，100，102，104，106，108，110， 112，114，116，118，120，122，124，126，128，130，132，134，136，138，140， 142，144，146，148，150，152，154，156，158，160，162，164，166，168，170， 172，174，176，178，180，182，184，186，188，190，192，194，196，198，202， 204，206，208，210，212，214，216，218，220，222，224，226，228，230，232， 234，236，238，240，242，244，246，248，250，252，254，256，258，260，262， 264，266，268，270，272，274，276，278，280，282，284，286，288，290，292， 294，296，298，和与其基本上同一的序列，条件是能促进碳-卤素键的水 解。
72.一种用于催化淀粉分解的方法，所述方法包括将含有淀粉的样 品与具有选自如下的序列的多肽接触：
多肽序列SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16，18，20，22，24，26，28， 30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56，58，60，62，64，66，68， 70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96，98，100，102，104，106， 108，110，112，114，116，118，120，122，124，126，128，130，132，134，136， 138，140，142，144，146，148，150，152，154，156，158，160，162，164，166， 168，170，172，174，176，178，180，182，184，186，188，190，192，194，196， 198，202，204，206，208，210，212，214，216，218，220，222，224，226，228， 230，232，234，236，238，240，242，244，246，248，250，252，254，256，258， 260，262，264，266，268，270，272，274，276，278，280，282，284，286，288， 290，292，294，296，298；
与如下序列的至少一个序列在至少大约100个残基的区域内具有 至少50％同源性的多肽序列的变体：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16， 18，20，22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56， 58，60，62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96， 98，100，102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126， 128，130，132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156， 158，160，162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186， 188，190，192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218， 220，222，224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248， 250，252，254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278， 280，282，284，286，288，290，292，294，296，298，正如用序列比较算法或 通过目测所确定的；
与如下序列互补的多肽序列：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16，18， 20，22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56，58， 60，62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96，98， 100，102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126，128， 130，132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156，158， 160，162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186，188， 190，192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218，220， 222，224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248，250， 252，254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278，280， 282，284，286，288，290，292，294，296，298；和
与如下序列在至少大约100个残基的区域内具有至少50％同源性 的多肽序列的变体互补的多肽序列：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16， 18，20，22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56， 58，60，62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96， 98，100，102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126， 128，130，132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156， 158，160，162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186， 188，190，192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218， 220，222，224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248， 250，252，254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278， 280，282，284，286，288，290，292，294，296，298，正如用序列比较算法或 通过目测所确定的；
条件是可以促进卤代烷或者卤代羧酸的水解。
73.一种分析方法，用于鉴别由如下序列的片段编码的功能多肽片 段或变体：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17，19，21，23，25，27，29，31， 33，35，37，39，41，43，45，47，49，51，53，55，57，59，61，63，65，67，69，71， 73，75，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95，97，99，101，103，105，107， 109，111，113，115，117，119，121，123，125，127，129，131，133，135，137， 139，141，143，145，147，149，151，153，155，157，159，161，163，165，167， 169，171，173，175，177，179，181，183，185，187，189，191，193，195，197， 199，201，203，205，207，209，211，213，215，217，219，221，223，225，227， 229，231，233，235，237，239，241，243，245，247，249，251，253，255，257， 259，261，263，265，267，269，271，273，275，277，279，281，283，285，287， 289，291，293，295，297，299，和与如下序列在至少大约100个残基的区 域内具有至少50％同源性的序列：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17， 19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51，53，55，57， 59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95，97， 99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123，125，127， 129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153，155，157， 159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183，185，187， 189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213，215，217， 219，221，223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243，245，247， 249，251，253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273，275，277， 279，281，283，285，287，289，291，293，295，297，299，正如用序列比较算 法或通过目测所确定的，所述功能多肽片段或变体保留了如下序列的 多肽的至少一个特征：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16，18，20，22，24， 26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56，58，60，62，64， 66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96，98，100，102， 104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126，128，130，132， 134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156，158，160，162， 164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186，188，190，192， 194，196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218，220，222，224， 226，228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248，250，252，254， 256，258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278，280，282，284， 286，288，290，292，294，296，298，和与如下序列在至少大约100个残基 的区域内具有至少50％同源性的序列：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14， 16，18，20，22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54， 56，58，60，62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94， 96，98，100，102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126， 128，130，132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156， 158，160，162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186， 188，190，192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218， 220，222，224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248， 250，252，254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278， 280，282，284，286，288，290，292，294，296，298，正如用序列比较算法或 通过目测所确定的，所述分析方法包括步骤：
将如下序列的多肽与底物分析在允许特定多肽发挥作用的条件 下接触：如下序列表示的多肽SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16，18，20， 22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56，58，60， 62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96，98，100， 102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126，128，130， 132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156，158，160， 162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186，188，190， 192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218，220，222， 224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248，250，252， 254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278，280，282， 284，286，288，290，292，294，296，298，和与如下序列在至少大约100个 残基的区域内具有至少50％同源性的序列：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12， 14，16，18，20，22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52， 54，56，58，60，62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92， 94，96，98，100，102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124， 126，128，130，132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154， 156，158，160，162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184， 186，188，190，192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214，216， 218，220，222，224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244，246， 248，250，252，254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274，276， 278，280，282，284，286，288，290，292，294，296，298，正如用序列比较算 法或通过目测所确定的，
由如下序列所编码的多肽片段或变体：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11， 13，15，17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51， 53，55，57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91， 93，95，97，99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123， 125，127，129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153， 155，157，159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183， 185，187，189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213， 215，217，219，221，223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243， 245，247，249，251，253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273， 275，277，279，281，283，285，287，289，291，293，295，297，299，与如下序 列在至少大约100个残基的区域内具有至少50％同源性的序列：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39， 41，43，45，47，49，51，53，55，57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79， 81，83，85，87，89，91，93，95，97，99，101，103，105，107，109，111，113，115， 117，119，121，123，125，127，129，131，133，135，137，139，141，143，145， 147，149，151，153，155，157，159，161，163，165，167，169，171，173，175， 177，179，181，183，185，187，189，191，193，195，197，199，201，203，205， 207，209，211，213，215，217，219，221，223，225，227，229，231，233，235， 237，239，241，243，245，247，249，251，253，255，257，259，261，263，265， 267，269，271，273，275，277，279，281，283，285，287，289，291，293，295， 297，299，正如用序列比较算法或通过目测所确定的，和与前述序列的 任一序列互补的序列；和
检测是底物量有所降低还是所述多肽与所述底物之间反应的反应 产物的量有所增加；其中底物量的降低或反应产物量的增加表示存在 功能多肽。
74.一种核酸探针，所述核酸探针包括长度为10-50个核苷酸的寡 核苷酸，且具有至少10个邻接核苷酸的片段，所述片段与选自如下序 列的核酸序列的核酸靶区域至少50％互补：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11， 13，15，17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51， 53，55，57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91， 93，95，97，99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123， 125，127，129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153， 155，157，159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183， 185，187，189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213， 215，217，219，221，223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243， 245，247，249，251，253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273， 275，277，279，281，283，285，287，289，291，293，295，297，299；并且其在 中度到高度严格条件下杂交到核酸靶区域上，从而形成可检测的靶： 探针双链体。
75.如权利要求74的探针，其中所述寡核苷酸是DNA。
76.如权利要求74的探针，其中所述寡核苷酸具有至少10个邻接 核苷酸的片段，所述片段与核酸靶区至少55％互补。
77.如权利要求74的探针，其中所述寡核苷酸具有至少10个邻接 核苷酸的片段，所述片段与核酸靶区至少60％互补。
78.如权利要求74的探针，其中所述寡核苷酸具有至少10个邻接 核苷酸的片段，所述片段与核酸靶区至少65％互补。
79.如权利要求74的探针，其中所述寡核苷酸具有至少10个邻接 核苷酸的片段，所述片段与核酸靶区至少70％互补。
80.如权利要求74的探针，其中所述寡核苷酸具有至少10个邻接 核苷酸的片段，所述片段与核酸靶区至少75％互补。
81.如权利要求74的探针，其中所述寡核苷酸具有至少10个邻接 核苷酸的片段，所述片段与核酸靶区至少80％互补。
82.如权利要求74的探针，其中所述寡核苷酸具有至少10个邻接 核苷酸的片段，所述片段与核酸靶区至少85％互补。
83.如权利要求74的探针，其中所述寡核苷酸具有至少10个邻接 核苷酸的片段，所述片段与核酸靶区至少90％互补。
84.如权利要求74的探针，其中所述寡核苷酸具有至少10个邻接 核苷酸的片段，所述片段与核酸靶区至少95％互补。
85.如权利要求74的探针，其中所述寡核苷酸具有至少10个邻接 核苷酸的片段，所述片段与核酸靶区完全互补。
86.如权利要求74的探针，其中所述寡核苷酸长度为15-50个碱 基。
87.如权利要求74的探针，其中所述探针进一步包括一个可检测 的同位素标记物。
88.如权利要求74的探针，其中所述探针进一步包括一个选自荧 光分子、化学发光分子、酶、辅因子、酶底物和半抗原的可检测的非 同位素标记物。
89.如权利要求86的探针，其中所述寡核苷酸具有至少15个邻接 核苷酸的片段，所述片段与核酸靶区至少90％互补，并且在中度到高 度严格条件下杂交到核酸靶区上，从而形成可检测的靶：探针双链体。
90.如权利要求86的探针，其中所述寡核苷酸具有至少15个邻接 核苷酸的片段，所述片段与核酸靶区至少95％互补，并且在中度到高 度严格条件下杂交到核酸靶区上，从而形成可检测的靶：探针双链体。
91.如权利要求86的探针，其中所述寡核苷酸具有至少15个邻接 核苷酸的片段，所述片段与核酸靶区至少97％互补，并且在中度到高 度严格条件下杂交到核酸靶区上，从而形成可检测的靶：探针双链体。
92.一种多核苷酸探针，用于分离或鉴别具有一个与如下序列之一 的至少一个片段相同或完全互补的α淀粉酶基因：SEQ ID NO.：1，3，5， 9，11，13，15，17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47， 49，51，53，55，57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87， 89，91，93，95，97，99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，119，121， 123，125，127，129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151， 153，155，157，159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181， 183，185，187，189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，211， 213，215，217，219，221，223，225，227，229，231，233，235，237，239，241， 243，245，247，249，251，253，255，257，259，261，263，265，267，269，271， 273，275，277，279，281，283，285，287，289，291，293，295，297，299。
93.一种蛋白质制剂，其包括选自如下的多肽：
具有选自如下序列的氨基酸序列的多肽：
SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16，18，20，22，24，26，28，30，32，34， 36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56，58，60，62，64，66，68，70，72，74， 76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96，98，100，102，104，106，108，110， 112，114，116，118，120，122，124，126，128，130，132，134，136，138，140， 142，144，146，148，150，152，154，156，158，160，162，164，166，168，170， 172，174，176，178，180，182，184，186，188，190，192，194，196，198，202， 204，206，208，210，212，214，216，218，220，222，224，226，228，230，232， 234，236，238，240，242，244，246，248，250，252，254，256，258，260，262， 264，266，268，270，272，274，276，278，280，282，284，286，288，290，292， 294，296，298；
与如下序列的至少一个序列在至少大约100个残基的区域内具有 至少50％同源性的变体：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16，18，20，22， 24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56，58，60，62， 64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96，98，100， 102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126，128，130， 132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156，158，160， 162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186，188，190， 192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218，220，222， 224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248，250，252， 254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278，280，282， 284，286，288，290，292，294，296，298，正如用序列比较算法或通过目测 所确定的；
与如下序列互补的序列：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16，18，20， 22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56，58，60， 62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96，98，100， 102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126，128，130， 132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156，158，160， 162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186，188，190， 192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218，220，222， 224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248，250，252， 254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278，280，282， 284，286，288，290，292，294，296，298；和
与如下序列在至少大约100个残基的区域内具有至少50％同源性 的变体互补的序列：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16，18，20，22，24，26， 28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56，58，60，62，64，66， 68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96，98，100，102，104， 106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126，128，130，132，134， 136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156，158，160，162，164， 166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186，188，190，192，194， 196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218，220，222，224，226， 228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248，250，252，254，256， 258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278，280，282，284，286， 288，290，292，294，296，298，正如用序列比较算法或通过目测所确定 的；和
具有至少10个连续氨基酸的多肽，所述至少10个连续氨基酸是 具有选自如下序列的多肽的氨基酸：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16， 18，20，22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56， 58，60，62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96， 98，100，102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126， 128，130，132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156， 158，160，162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186， 188，190，192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218， 220，222，224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248， 250，252，254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278， 280，282，284，286，288，290，292，294，296，298；和
其中所述蛋白质制剂是液体的。
94.一种蛋白质制剂，其包括选自如下的多肽：
具有选自如下序列的氨基酸序列的多肽：
SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16，18，20，22，24，26，28，30，32，34， 36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56，58，60，62，64，66，68，70，72，74， 76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96，98，100，102，104，106，108，110， 112，114，116，118，120，122，124，126，128，130，132，134，136，138，140， 142，144，146，148，150，152，154，156，158，160，162，164，166，168，170， 172，174，176，178，180，182，184，186，188，190，192，194，196，198，202， 204，206，208，210，212，214，216，218，220，222，224，226，228，230，232， 234，236，238，240，242，244，246，248，250，252，254，256，258，260，262， 264，266，268，270，272，274，276，278，280，282，284，286，288，290，292， 294，296，298；
与如下序列的至少一个序列在至少大约100个残基的区域内具有 至少50％同源性的变体：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16，18，20，22， 24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56，58，60，62， 64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96，98，100， 102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126，128，130， 132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156，158，160， 162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186，188，190， 192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218，220，222， 224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248，250，252， 254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278，280，282， 284，286，288，290，292，294，296，298，正如用序列比较算法或通过目测 所确定的；
与如下序列互补的序列：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16，18，20， 22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56，58，60， 62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96，98，100， 102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126，128，130， 132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156，158，160， 162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186，188，190， 192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218，220，222， 224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248，250，252， 254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278，280，282， 284，286，288，290，292，294，296，298；和
与如下序列在至少大约100个残基的区域内具有至少50％同源性 的变体互补的序列：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16，18，20，22，24，26， 28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56，58，60，62，64，66， 68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96，98，100，102，104， 106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126，128，130，132，134， 136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156，158，160，162，164， 166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186，188，190，192，194， 196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218，220，222，224，226， 228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248，250，252，254，256， 258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278，280，282，284，286， 288，290，292，294，296，298，正如用序列比较算法或通过目测所确定 的；和
具有至少10个连续氨基酸的多肽，所述至少10个连续氨基酸是 具有选自如下序列的序列的多肽的氨基酸：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12， 14，16，18，20，22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52， 54，56，58，60，62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92， 94，96，98，100，102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124， 126，128，130，132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154， 156，158，160，162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184， 186，188，190，192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214，216， 218，220，222，224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244，246， 248，250，252，254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274，276， 278，280，282，284，286，288，290，292，294，296，298；和
其中所述蛋白质制剂是固体的。
95.一种用于修饰小分子的方法，所述方法包括将由选自如下序列 的多核苷酸编码的至少一个多肽与至少一个小分子混合，从而通过至 少一个生物催化反应产生至少一个修饰的小分子，其中至少所述一个 多肽具有α淀粉酶活性：
SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17，19，21，23，25，27，29，31，33， 35，37，39，41，43，45，47，49，51，53，55，57，59，61，63，65，67，69，71，73， 75，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95，97，99，101，103，105，107，109， 111，113，115，117，119，121，123，125，127，129，131，133，135，137，139， 141，143，145，147，149，151，153，155，157，159，161，163，165，167，169， 171，173，175，177，179，181，183，185，187，189，191，193，195，197，199， 201，203，205，207，209，211，213，215，217，219，221，223，225，227，229， 231，233，235，237，239，241，243，245，247，249，251，253，255，257，259， 261，263，265，267，269，271，273，275，277，279，281，283，285，287，289， 291，293，295，297，299；
与如下序列的至少一个序列在至少大约100个残基的区域内具有 至少50％同源性的变体：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17，19，21，23， 25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51，53，55，57，59，61，63， 65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95，97，99，101， 103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123，125，127，129，131， 133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153，155，157，159，161， 163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183，185，187，189，191， 193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213，215，217，219，221， 223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243，245，247，249，251， 253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273，275，277，279，281， 283，285，287，289，291，293，295，297，299，正如用序列比较算法或通过 目测所确定的；
与如下序列互补的序列：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17，19， 21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51，53，55，57，59， 61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95，97，99， 101，103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123，125，127，129， 131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153，155，157，159， 161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183，185，187，189， 191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213，215，217，219， 221，223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243，245，247，249， 251，253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273，275，277，279， 281，283，285，287，289，291，293，295，297，299；和
与如下序列在至少大约100个残基的区域内具有至少50％同源性 的变体互补的序列：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17，19，21，23，25， 27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51，53，55，57，59，61，63，65， 67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95，97，99，101，103， 105，107，109，111，113，115，117，119，121，123，125，127，129，131，133， 135，137，139，141，143，145，147，149，151，153，155，157，159，161，163， 165，167，169，171，173，175，177，179，181，183，185，187，189，191，193， 195，197，199，201，203，205，207，209，211，213，215，217，219，221，223， 225，227，229，231，233，235，237，239，241，243，245，247，249，251，253， 255，257，259，261，263，265，267，269，271，273，275，277，279，281，283， 285，287，289，291，293，295，297，299，正如用序列比较算法或通过目测 所确定的；和前述多肽的任一种的片段。
96.如权利要求95的方法，其中所述至少一个多肽包括大量多肽， 至少一个小分子包括大量小分子，从而通过大量生物催化反应产生大 量修饰的小分子，从而形成修饰的小分子文库。
97.如权利要求96的方法，所述方法进一步包括测试该文库以确 定该文库中是否存在表现出期望活性的特定的修饰小分子。
98.如权利要求97的方法，其中测试文库的步骤进一步包括步骤：
系统地消除用于在文库中产生大量修饰小分子的一部分的生物催 化反应的全部但是仅仅保留一个生物催化反应，通过测试修饰小分子 部分中存在或不存在具有期望活性的特定修饰的小分子，鉴别产生期 望活性的特定修饰小分子的特定生物催化反应。
99.如权利要求98的方法，其中所述产生具有期望活性的修饰小 分子的特定生物催化反应被重复。
100.如权利要求93的方法，其中所述生物催化剂反应是用一组生 物催化剂完成的，所述生物催化剂与在至少一个小分子内存在的不同 结构部分反应；
每一生物催化剂对于特定结构部分或一组相关的结构部分是特异 的；和
每一生物催化剂与大量小分子反应，所述大量小分子含有对特定 生物催化剂特异的特定结构部分。
101.一种克隆载体，所述克隆载体包括编码具有α淀粉酶活性的 多肽的序列，所述序列选自：
SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17，19，21，23，25，27，29，31，33， 35，37，39，41，43，45，47，49，51，53，55，57，59，61，63，65，67，69，71，73， 75，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95，97，99，101，103，105，107，109， 111，113，115，117，119，121，123，125，127，129，131，133，135，137，139， 141，143，145，147，149，151，153，155，157，159，161，163，165，167，169， 171，173，175，177，179，181，183，185，187，189，191，193，195，197，199， 201，203，205，207，209，211，213，215，217，219，221，223，225，227，229， 231，233，235，237，239，241，243，245，247，249，251，253，255，257，259， 261，263，265，267，269，271，273，275，277，279，281，283，285，287，289， 291，293，295，297，299；
与如下序列的至少一个序列在至少大约100个残基的区域内具有 至少50％同源性的变体：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17，19，21，23， 25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51，53，55，57，59，61，63， 65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95，97，99，101， 103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123，125，127，129，131， 133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153，155，157，159，161， 163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183，185，187，189，191， 193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213，215，217，219，221， 223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243，245，247，249，251， 253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273，275，277，279，281， 283，285，287，289，291，293，295，297，299，正如用序列比较算法或通过 目测所确定的；
与如下序列互补的序列：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17，19， 21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51，53，55，57，59， 61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95，97，99， 101，103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123，125，127，129， 131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153，155，157，159， 161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183，185，187，189， 191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213，215，217，219， 221，223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243，245，247，249， 251，253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273，275，277，279， 281，283，285，287，289，291，293，295，297，299；和
与如下序列在至少大约100个残基的区域内具有至少50％同源性 的变体互补的序列：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17，19，21，23，25， 27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51，53，55，57，59，61，63，65， 67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95，97，99，101，103， 105，107，109，111，113，115，117，119，121，123，125，127，129，131，133， 135，137，139，141，143，145，147，149，151，153，155，157，159，161，163， 165，167，169，171，173，175，177，179，181，183，185，187，189，191，193， 195，197，199，201，203，205，207，209，211，213，215，217，219，221，223， 225，227，229，231，233，235，237，239，241，243，245，247，249，251，253， 255，257，259，261，263，265，267，269，271，273，275，277，279，281，283， 285，287，289，291，293，295，297，299，正如用序列比较算法或通过目测 所确定的。
102.一种包括编码具有α淀粉酶活性的多肽的序列的宿主细胞， 所述序列选自：
SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17，19，21，23，25，27，29，31，33， 35，37，39，41，43，45，47，49，51，53，55，57，59，61，63，65，67，69，71，73， 75，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95，97，99，101，103，105，107，109， 111，113，115，117，119，121，123，125，127，129，131，133，135，137，139， 141，143，145，147，149，151，153，155，157，159，161，163，165，167，169， 171，173，175，177，179，181，183，185，187，189，191，193，195，197，199， 201，203，205，207，209，211，213，215，217，219，221，223，225，227，229， 231，233，235，237，239，241，243，245，247，249，251，253，255，257，259， 261，263，265，267，269，271，273，275，277，279，281，283，285，287，289， 291，293，295，297，299；
与如下序列的至少一个序列在至少大约100个残基的区域内具有 至少50％同源性的变体：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17，19，21，23， 25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51，53，55，57，59，61，63， 65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95，97，99，101， 103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123，125，127，129，131， 133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153，155，157，159，161， 163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183，185，187，189，191， 193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213，215，217，219，221， 223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243，245，247，249，251， 253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273，275，277，279，281， 283，285，287，289，291，293，295，297，299，正如用序列比较算法或通过 目测所确定的；
与如下序列互补的序列：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17，19， 21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51，53，55，57，59， 61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95，97，99， 101，103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123，125，127，129， 131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153，155，157，159， 161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183，185，187，189， 191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213，215，217，219， 221，223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243，245，247，249， 251，253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273，275，277，279， 281，283，285，287，289，291，293，295，297，299；和
与如下序列在至少大约100个残基的区域内具有至少50％同源性 的变体互补的序列：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17，19，21，23，25， 27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51，53，55，57，59，61，63，65， 67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95，97，99，101，103， 105，107，109，111，113，115，117，119，121，123，125，127，129，131，133， 135，137，139，141，143，145，147，149，151，153，155，157，159，161，163， 165，167，169，171，173，175，177，179，181，183，185，187，189，191，193， 195，197，199，201，203，205，207，209，211，213，215，217，219，221，223， 225，227，229，231，233，235，237，239，241，243，245，247，249，251，253， 255，257，259，261，263，265，267，269，271，273，275，277，279，281，283， 285，287，289，291，293，295，297，299，正如用序列比较算法或通过目测 所确定的。
103.一种表达载体，能在宿主细胞中复制，所述表达载体包括具 有选自如下的序列的多核苷酸：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17，19， 21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51，53，55，57，59， 61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95，97，99， 101，103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123，125，127，129， 131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153，155，157，159， 161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183，185，187，189， 191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213，215，217，219， 221，223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243，245，247，249， 251，253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273，275，277，279， 281，283，285，287，289，291，293，295，297，299，与如下序列在至少大约 100个残基的区域内具有至少50％同源性的变体：SEQ ID NO.：1，3，5，9， 11，13，15，17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49， 51，53，55，57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89， 91，93，95，97，99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，119，121， 123，125，127，129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151， 153，155，157，159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181， 183，185，187，189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，211， 213，215，217，219，221，223，225，227，229，231，233，235，237，239，241， 243，245，247，249，251，253，255，257，259，261，263，265，267，269，271， 273，275，277，279，281，283，285，287，289，291，293，295，297，299，正如 用序列比较算法或通过目测所确定的，与如下序列互补的序列：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41， 43，45，47，49，51，53，55，57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81， 83，85，87，89，91，93，95，97，99，101，103，105，107，109，111，113，115， 117，119，121，123，125，127，129，131，133，135，137，139，141，143，145， 147，149，151，153，155，157，159，161，163，165，167，169，171，173，175， 177，179，181，183，185，187，189，191，193，195，197，199，201，203，205， 207，209，211，213，215，217，219，221，223，225，227，229，231，233，235， 237，239，241，243，245，247，249，251，253，255，257，259，261，263，265， 267，269，271，273，275，277，279，281，283，285，287，289，291，293，295， 297，299，和，与如下序列在至少大约100个残基的区域内具有至少50％ 同源性的变体互补的序列：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17，19，21， 23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51，53，55，57，59，61， 63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95，97，99，101， 103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123，125，127，129，131， 133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153，155，157，159，161， 163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183，185，187，189，191， 193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213，215，217，219，221， 223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243，245，247，249，251， 253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273，275，277，279，281， 283，285，287，289，291，293，295，297，299，正如用序列比较算法或通过 目测所确定的，和分离的核酸，其可以在低度、中度和高度严格条件 下与具有前述序列的任何一种序列的核酸杂交。
104.如权利要求101或103所述的载体，其中所述载体选自病毒 载体、质粒载体、噬菌体载体、噬菌粒载体、粘粒、fosmid、噬菌体、 人工染色体、腺病毒载体、逆转录病毒载体和腺相关病毒载体。
105.一种宿主细胞，所述宿主细胞包括如权利要求103所述的表 达载体。
106.一种如权利要求47、102、103或105所述的宿主细胞，其中 所述宿主选自原核、真核、真菌、酵母、植物和新陈代谢旺盛的宿主。
107.一种方法，用于液化含有淀粉的组合物，所述方法包括将淀 粉与权利要求30所述的多肽接触。
108.一种通过权利要求107所述的方法产生的液化糖浆。
109.一种液化糖浆，其具有权利要求108所述的糖浆的寡糖组成 特点。
110.一种液化糖浆，其NN/MW比率在18DE低于2.0，在12DE 低于大约4.0。
111.一种用于清洗物体的方法，所述方法包括将所述物体与权利 要求30所述的多肽在足以完成所述清洗的条件下接触。
112.一种用于织物脱浆的方法，所述方法包括将所述织物与权利 要求30所述的多肽在足以完成所述脱浆的条件下接触。
113.一种用于处理木质纤维的方法，其中用权利要求30所述的多 肽处理所述纤维，所用多肽的量要足以提高纤维特性。
114.一种根据权利要求113用于给再循环纸浆脱墨的方法，其中 权利要求30所述的多肽以足以有效给纤维编码脱墨的量施用。
115.一种用于液化淀粉的方法，所述方法包括将淀粉与权利要求 30所述的多肽再足以完成所述液化的条件下接触。
116.一种去污剂添加剂，其包括权利要求30所述的多肽。
117.一种用于产生高麦芽糖或高葡萄糖糖浆或混合糖浆的方法， 所述方法包括：
用足量的权利要求30的多肽液化淀粉，得到一种可溶的淀粉水解 产物；和
使可溶的淀粉水解产物糖化，从而产生糖浆。
118.如权利要求107、115或117中任一项所述的方法，其中淀粉 来自稻米、稻芽、玉米、大麦、小麦、豆类和甘薯。
119.如权利要求107、115或117中任一项所述的方法，所述方法 进一步包括加入第二种α淀粉酶或β淀粉酶或其组合。
120.一种用于增加地下形成物的生产流体的流动的方法，通过去 除生产操作过程中形成的且在地下形成物内存在的粘性、含淀粉的、 具有破坏性的流体，所述地下形成物包围整个井孔，所述方法包括：
允许生产流体从井孔流出；
降低低于期望流速的形成物的生产流体的流动；
通过将含水流体与权利要求30所述的多肽混合在一起配制酶处理 物；
将酶处理物泵到井孔内的期望位置；
允许酶处理物降解粘性、含淀粉的、具有破坏性的流体，从而可 以将流体从地下形成物中移动到井表面；和
其中酶处理物足以攻击含淀粉流体中的α糖苷键。
相关申请资料
本申请要求如下申请的优先权：2001年2月21日提交的美国临时 申请60/270,495，目前在审理中；2001年2月21日提交的美国临时申 请60/270,496，目前在审理中；和2001年5月14日提交的美国临时申 请60/291,122，目前在审理中，所有这些申请被完整引用于此作为参考。
发明领域
本发明总的来说涉及酶，编码这些酶的多核苷酸，这些多核苷酸 和多肽的用途，更明确地说涉及具有α淀粉酶活性的酶。
背景技术
淀粉是存在于人类饮食中的复合糖。淀粉的结构是用α-1，4和α-1，6 糖苷键连接的葡萄糖聚合物。淀粉酶是一种能催化淀粉水解为糖的酶。 淀粉酶在淀粉中水解内α-1，4-糖苷键，在很大程度上是随机水解，从而 得到较小分子量的麦芽糖糊精。在消化系统和商业上，淀粉的分解是 很重要的。所以淀粉酶被认为很有商业价值，在很多场合得到使用： 淀粉加工的初始阶段(液化)；湿玉米碾磨；酒精生产；在去污剂基料 中作为清洗剂；在纺织行业用于淀粉脱浆；烘培应用；饮料行业；在 油田的钻探工艺中；给循环纸上墨；和动物饲料中。
淀粉酶是用多种微生物制备的，这些微生物包括芽孢杆菌属 (Bacillus)和曲霉属(Aspergillus)，其中许多商业淀粉酶是从细菌来 源制备的，如地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)，解淀粉芽孢杆菌 (Bacillus amyloliquefaciens)，枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)，或嗜 热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus)。在最近几年，那些来自 地衣芽孢杆菌的酶已经用于商业应用中，原因在于它们的热稳定性和 性能，至少中性和弱碱性的pH值。
通常，淀粉到果糖的加工包括四个步骤：颗粒淀粉的液化，液化 淀粉糖化为葡萄糖，纯化，和异构化为果糖。淀粉液化步骤的目的是 将淀粉聚合物颗粒的浓缩悬浮液转化为低粘度的可溶性短链糊精溶 液。该步骤对于用标准设备便利地处理和有效转化为葡萄糖或103其它 糖是必要的。为了液化颗粒淀粉，必须通过将颗粒淀粉的温度升高到 高于大约72℃以使颗粒胶凝化。加热过程可以瞬间破坏不溶性淀粉颗 粒从而产生水溶性淀粉溶液。然后通过淀粉酶将溶解的淀粉溶液液化。 淀粉颗粒包括：69-74％支链淀粉，26-31％淀粉酶，11-14％水，0.2-0.4％ 蛋白质，0.5-0.9％脂质，0.05-0.1％灰分，0.02-0.03％磷，0.1％戊聚糖。 大约70％的颗粒是非晶态的，30％是晶态的。
普通的酶液化步骤涉及通过加入氢氧化钙，氢氧化钠或碳酸钠将 颗粒淀粉浆料的pH值调节到6.0-6.5之间，是衍生于地衣芽孢杆菌的α- 淀粉酶的最适pH值。加入氢氧化钙还有一个优点，就是可以提供钙离 子，已知钙离子能够稳定α-淀粉酶以免其发生失活。一旦加入α-淀粉 酶，就通过蒸汽喷嘴抽出悬浮液，这样可以将温度瞬间升高到 80℃-115℃之间。淀粉被立刻胶凝化，随后由于存在α-淀粉酶，通过α- 淀粉酶随机水解(1-4)糖苷键将其被解聚为流体物质，这样易于抽出。
在液化步骤的第二种变化形式中，α-淀粉酶被加入到淀粉悬浮液 中，悬浮液被保持在80-100℃的温度以部分地水解淀粉颗粒，然后部 分水解的淀粉颗粒通过喷嘴在超过大约105℃的温度被抽出，以彻底地 胶凝化任何剩余的颗粒结构。在冷却胶凝淀粉后，第二次加入α-淀粉 酶，以进一步水解淀粉。
该步骤的第三种变化形式被称作干磨方法。在干磨法中，将全粒 研磨，并且与水混合。通过漂浮分离或等效技术任选地去除胚芽。用α- 淀粉酶液化所得到的混合物，该混合物含有淀粉、纤维、蛋白质和谷 物的其它成分。当使用干磨法时，本技术领域通常的实践是采取在较 低温度下进行酶液化。通常，在将淀粉转化为可溶性糊精时，认为低 温液化比高温液化的效率低一些。
典型地，淀粉溶液在胶凝化后，在存在α-淀粉酶的情况下，保持 于高温下，直到DE达到10-20，通常保持1-3小时。葡萄糖当量值(DE) 是用于测量总的还原糖浓度的行业标准，是以干重量计算的D-葡萄糖 来表示。未水解的颗粒淀粉的DE实质上为零，尽管D-葡萄糖的DE 被定义为100。
玉米湿磨是一种产生玉米油、谷蛋白粉、谷蛋白饲料和淀粉的方 法。碱性淀粉酶被用于淀粉液化中，葡糖淀粉酶被用于糖化中，从而 产生葡萄糖。玉米是一种包括外种皮(纤维)、淀粉、淀粉和葡萄糖的 结合物和内胚芽的谷粒，进行一种四步骤方法，该四步骤方法导致产 生淀粉。玉米被浸泡，去胚芽，去纤维，最后分离谷蛋白。在浸泡过 程中，取出可溶性物质。去掉可溶性物质后剩余的产物被去胚芽，这 样导致产生了玉米油且产生了油饼，油饼可以被加入到来自浸泡步骤 的可溶性物质中。剩余产物被去纤维，然后纤维固体被加入到油饼/可 溶性混合物中。纤维固体、油饼和可溶性物质的混合物形成了谷蛋白 饲料。在去纤维后，剩余产物进行谷蛋白分离。该分离导致谷蛋白粉 和淀粉。然后将淀粉进行液化和糖化，产生葡萄糖。
烘烤产品(如面包)的老化(staling)已经被认为是随着面包产品 制备时刻和消费时刻之间的时间变长而变得越来越严重的一个问题。 术语老化被用于描述面包产品在离开烤箱后的不受消费者欢迎的性质 变化，如面包屑的坚硬性增加，面包屑弹性降低，面包皮发生变化， 变得坚韧嚼不动。面包屑坚硬性在储存过程中进一步增加到一个被认 为是被拒绝的水平。面包屑坚硬性的增加被认为是老化的最重要方面， 是由消费者辨认的，是在面包产品在其它方面变得不适合消费之前的 很长一段时间就发生的。
在该行业存在对于淀粉酶的鉴别和最优化的需求，淀粉酶可用于 多种用途，包括商业玉米淀粉液化工艺中。例如，相对于来自地衣芽 孢杆菌的行业标准酶而言，这些第二代酸性淀粉酶将提供改进的生产 和/或工作特性。
也存在对于鉴别和最优化在自动洗碗机(ADW)产品和洗衣行业 的去污剂中有用的淀粉酶的需求。在ADW产品中，淀粉酶将在存在 钙螯合剂和氧化条件下，在pH 10-11和45-60℃发挥作用。对于洗衣行 业，需要在适当的去污剂基料中，于pH 9-10和40℃下的活性。淀粉 酶在织物脱浆、酿造工艺、造纸和纸浆行业中的淀粉改性以及本技术 领域的其它工艺中有用。
此处讨论的公开文献只提供了它们在本发明提交日之前的公开内 容。此处没有任何内容可以被解释为承认本发明没有依赖现有发明而 以较前的时日记入这些公开内容。
发明概述
本发明提供了一种分离的核酸，其具有如下序列中所阐明的序列： SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37， 39，41，43，45，47，49，51，53，55，57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77， 79，81，83，85，87，89，91，93，95，97，99，101，103，105，107，109，111，113， 115，117，119，121，123，125，127，129，131，133，135，137，139，141，143， 145，147，149，151，153，155，157，159，161，163，165，167，169，171，173， 175，177，179，181，183，185，187，189，191，193，195，197，199，201，203， 205，207，209，211，213，215，217，219，221，223，225，227，229，231，233， 235，237，239，241，243，245，247，249，251，253，255，257，259，261，263， 265，267，269，271，273，275，277，279，281，283，285，287，289，291，293， 295，297，299及其与如下序列具有至少50％序列同一性的变体：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41， 43，45，47，49，51，53，55，57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81， 83，85，87，89，91，93，95，97，99，101，103，105，107，109，111，113，115， 117，119，121，123，125，127，129，131，133，135，137，139，141，143，145， 147，149，151，153，155，157，159，161，163，165，167，169，171，173，175， 177，179，181，183，185，187，189，191，193，195，197，199，201，203，205， 207，209，211，213，215，217，219，221，223，225，227，229，231，233，235， 237，239，241，243，245，247，249，251，253，255，257，259，261，263，265， 267，269，271，273，275，277，279，281，283，285，287，289，291，293，295， 297，299，和编码具有α-淀粉酶活性的多肽。
本发明的一个方面是一种分离的核酸，其具有如下序列中所阐明 的序列：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17，19，21，23，25，27，29，31， 33，35，37，39，41，43，45，47，49，51，53，55，57，59，61，63，65，67，69，71， 73，75，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95，97，99，101，103，105，107， 109，111，113，115，117，119，121，123，125，127，129，131，133，135，137， 139，141，143，145，147，149，151，153，155，157，159，161，163，165，167， 169，171，173，175，177，179，181，183，185，187，189，191，193，195，197， 199，201，203，205，207，209，211，213，215，217，219，221，223，225，227， 229，231，233，235，237，239，241，243，245，247，249，251，253，255，257， 259，261，263，265，267，269，271，273，275，277，279，281，283，285，287， 289，291，293，295，297，299(下文被称作“A组核酸序列”)，与其基本 上同一的序列，和与其互补的序列。
本发明的另一个方面是一种分离的核酸，其包括至少10个连续碱 基，所述至少10个连续碱基是A组核酸序列，与其基本上同一的序列， 和与其互补的序列中所阐明的序列的碱基。
仍然在另一个方面，本发明提供了一种分离的核酸，其编码具有 如下述序列中所阐明的序列的多肽：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16， 18，20，22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56， 58，60，62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96， 98，100，102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126， 128，130，132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156， 158，160，162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186， 188，190，192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218， 220，222，224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248， 250，252，254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278， 280，282，284，286，288，290，292，294，296，298及其编码具有α-淀粉酶 活性和与这些序列具有至少50％序列同一性的多肽的变体。
本发明的另一个方面是一种分离的核酸，其编码具有如下述序列 中所阐明的序列的多肽或其功能片段：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14， 16，18，20，22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54， 56，58，60，62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94， 96，98，100，102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126， 128，130，132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156， 158，160，162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186， 188，190，192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218， 220，222，224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248， 250，252，254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278， 280，282，284，286，288，290，292，294，296，298(下文被称作“B组氨基 酸序列”)，和与其基本上同一的序列。
本发明的另一个方面是一种分离的核酸，其编码一种多肽，该多 肽具有至少10个连续氨基酸，所述10个连续氨基酸是B组氨基酸序 列和与其基本上同一的序列中所阐明的序列的氨基酸。
仍然在另一个方面，本发明提供了一种纯化的多肽，该多肽具有 如B组氨基酸序列和与其基本上同一的序列中所阐明的序列。
本发明的另一个方面是一种分离的或纯化的抗体，该抗体与具有 如B组氨基酸序列和与其基本上同一的序列中所阐明的序列的多肽特 定地结合。
本发明的另一个方面是一种分离的或纯化的抗体或其结合片段， 该抗体或其结合片段与具有至少10个连续氨基酸的多肽特定地结合， 所述10个连续氨基酸是B组氨基酸序列和与其基本上同一的序列的多 肽之一的10个连续氨基酸。
本发明的另一个方面是一种制备多肽的方法，该多肽具有B组氨 基酸序列和与其基本上同一的序列中所阐明的序列。该方法包括将编 码多肽的核酸导入宿主细胞，其中所述核酸与启动子可操作地连接. 并且在允许核酸表达的条件下培养宿主细胞。
本发明的另一个方面是一种制备多肽的方法，该多肽具有至少10 个氨基酸，是B组氨基酸序列和与其基本上同一的序列中所阐明的序 列的10个氨基酸。该方法包括将编码多肽的核酸导入宿主细胞，其中 所述核酸与启动子可操作地连接，并且在允许核酸表达的条件下培养 宿主细胞，从而产生该多肽。
本发明的另一个方面是一种产生变体的方法，该方法包括获得具 有如下序列中所阐明的一个序列的核酸：A组核酸序列，与其基本上 同一的序列，与A组核酸序列基本上互补的序列中，包括前述序列的 至少30个连续核苷酸的片段；将该序列中的一个或多个核苷酸改变为 另一个核苷酸；删除该序列中的一个或多个核苷酸；或将一个或多个 核苷酸添加到该序列中。
本发明的另一个方面是一种可用计算机读取的存储介质，其上已 经存储了A组核酸序列和与其基本上同一的序列中所阐明的序列，或 B组氨基酸序列和基本上与其同一的序列中所阐明的多肽序列。
本发明的另一个方面是一种计算机系统，该系统包括一个处理器 和一个数据存储设备，其中数据存储设备上已经存储了A组核酸序列 和与其基本上同一的序列中所阐明的序列，或具有B组氨基酸序列和 基本上与其同一的序列中所阐明的序列的多肽。
本发明的另一个方面是一种将第一个序列与参考序列进行比较的 方法，其中第一个序列是具有如A组核酸序列和与其基本上同一的序 列中所阐明的序列的核酸，或B组氨基酸序列和基本上与其同一的序 列的多肽编码。该方法包括通过使用进行序列比较的计算机程序读取 第一个序列和参考序列；用该计算机程序确定第一个序列和参考序列 之间的差异。
本发明的另一个方面是一种方法，用于鉴别A组核酸序列和与其 基本上同一的序列中所阐明的序列的特征，或鉴别具有B组氨基酸序 列和基本上与其同一的序列中所阐明的序列的多肽的特征，该方法包 括通过使用能在序列中进行特征鉴别的计算机程序读取序列；用该计 算机程序鉴别序列的特征。
本发明的另一个方面是一种分析方法，用于鉴别B组氨基酸序列 和基本上与其同一的序列的片段或变体，其保留了B组氨基酸序列和 与其基本上同一的序列的多肽的酶功能。该分析方法包括将B组氨基 酸序列和基本上与其同一的序列的多肽，或多肽片段或变体，与底物 分子在允许多肽片段或变体发挥作用的条件下接触；检测是底物水平 有所降低，还是多肽与底物之间反应的特定反应产物水平有所增加， 从而鉴别这些序列的片段或变体。
本发明也提供了一种方法，用于制备生面团或烘烤产品，该方法 包括将本发明的淀粉酶以可以显著延迟面包老化的量加入到生面团 中。本发明也提供了一种包括所述淀粉酶的生面团，和一种包括所述 淀粉酶和面粉的预混合料。最后，本发明提供了一种酶烘烤添加剂， 该添加剂含有所述淀粉酶。
根据本发明，使用淀粉酶提供了一种改进的抗老化效果，正如通 过如下特性所测定的，例如较少的面包屑变硬，持久的面包屑弹性， 改进的可切片性能(例如面包屑更少，无胶质面包屑)，改进的可口性 或味道。
附图简述
下述附图是本发明的实施方案的例证性说明，不意味着限定本发 明的范围，本发明的范围如权利要求所描述。
图1是计算机系统的流程图。
图2是例证性说明一个实施方案的流程图，所述比较方法用于将 新核苷酸或蛋白序列与序列数据库进行比较，以确定新序列和数据库 中的序列之间的同源性水平。
图3是例证性地说明计算机中一种方法的一个实施方案的流程图. 所述方法用于确定两个序列是否是同源的。
图4是例证性地说明一种识别符方法300的一个实施方案的流程 图，所述方法用于检测序列特征的存在。
图5显示了实施例1中各种淀粉酶在加热到90℃维持10分钟后的 残余活性。
图6显示了使用漂白剂和螯合剂的ADW洗涤测试中所去除的淀 粉的净百分比与酶浓度的关系曲线。
图7显示了pH8，40℃的亲代淀粉酶于55℃在ADW配方中的活 性。
图8是关于实施例4中新颖酶的H2O2耐受性的数据图。
图9是选择所表征的淀粉酶的pH和温度数据图。图9a显示了pH 8，40℃的数据，图9b显示了pH10，50℃的数据。
图10阐明了在用酶进行的重装配试验中所使用的序列。
图11例证性说明了实施例5的样本标准曲线分析。
图12例证性说明了SEQ ID NO.：127的pH等级曲线图，其具有 中性最适pH，和SEQ ID NO.：211的pH等级曲线图，其具有大约10 的最适pH值。
图13显示了Diversa淀粉酶与商业酶相比的稳定性，如实施例2 中所讨论的。
图14显示了嗜低温α-淀粉酶的序列对比，如实施例8中所阐明的。 图14a显示了淀粉酶序列的对齐。SEQ ID NO.:81＝环境克隆；pyro＝ 热球菌属(Pyrococcus sp.(菌株：KOD1))，Tachibana，Y.，Mendez，L.， Takagi，M.和Imanaka，T.，J Ferment.Bioeng.82：224-232，1996；pyro2＝激 烈热球菌(Pyrococcus furiosus)，Appl.Environ.Microbiol.63(9)： 3569-3576，1997；Thermo＝热球菌(Thermococcus sp.)；Thermo2＝热水 管热球菌(Thermococcus hydrothermalis)，Leveque，E等人专利：法国 98.05655，1998年5月5日，未公开。图14b显示了鉴别的序列的氨基 酸序列对比：SEQ ID NO.：81；pyro；SEQ ID NO.：75；SEQ ID NO.：77； SEQ ID NO.：83；SEQ ID NO.：85；thermo2；SEQ ID NO.：79；thermo； pyro2；克隆A；thermo3。图14c显示了与图5和6的多肽序列相应的 核酸序列对比。SEQ ID NO.：81；SEQ ID NO.：75；SEQ ID NO.：77；SEQ ID NO.：83；SEQ ID NO.：85；SEQ ID NO.：79；克隆A；和SEQ ID NO.： 73。
图15是用邻位相连法(Neighor-jointing)所得的热球菌目 (Thermococcales)进化树。
图16是本发明的序列。
发明详述
本发明涉及淀粉酶和编码这些酶的多核苷酸。正如此处所用，术 语“淀粉酶”包括具有α-淀粉酶活性的酶，例如能在多糖中水解内α-1，4- 葡聚糖键的淀粉酶，包括能在碱性pH或酸性pH将淀粉水解为糖的淀 粉酶。本发明的淀粉酶特别地可用于玉米湿磨法，去污剂，烘烤工艺， 饮料和油田(燃料乙醇)中。淀粉酶也可以用于织物脱浆，酿造工艺， 纸和纸浆工业中淀粉改性和本技术领域描述的其它方法中。
已经鉴定出本发明的多核苷酸编码具有α淀粉酶或碱性淀粉酶活 性的多肽。本发明的碱性淀粉酶可以包括，但不限于：SEQ ID NO.：115； SEQ ID NO.：207；SEQ ID NO.：139；SEQ ID NO.：127；SEQ ID NO.：137； SEQ ID NO.：113；SEQ ID NO.：205；SEQ ID NO.：179；SEQ ID NO.：151； SEQ ID NO.：187；SEQ ID NO.：97；SEQ ID NO.：153；SEQ ID NO.：69； SEQ ID NO.：135；SEQ ID NO.：189；SEQ ID NO.：119；SEQ ID NO.：209 和SEQ ID NO.：211。
可以在本发明的变体中实现的特性改变是如下的特性改变，例如 底物特异性、底物结合性、底物分裂型、热稳定性、pH/活性曲线、pH/ 稳定性曲线[如在低pH值(例如pH＜6，尤其是pH＜5)或高pH值(例如 pH＞9)下增加的稳定性]、抗氧化稳定性、Ca2+依赖性、比活性和其它相 关特性。例如，与亲本淀粉酶相比，可以产生改变导致具有降低的Ca2+依赖性和/或改变的pH/活性曲线的变体。
本发明涉及α淀粉酶和编码这些酶的多核苷酸。正如此处所用， 术语“α淀粉酶”包括具有α-淀粉酶活性的酶，例如能将淀粉水解为 糖的酶。与许多已知的淀粉酶不同，本发明的淀粉酶可以是不依赖于 钙的酶。
高度期望能降低α-淀粉酶的Ca2+依赖性。因此，本发明的一方面 提供了一种淀粉酶，该淀粉酶与商品酶或亲本淀粉酶相比具有降低的 Ca2+依赖性。降低的Ca2+依赖性通常将具有功能后果，即变体在存在比 商品酶或亲本酶所需要的浓度低的钙离子浓度的情况下，在外部介质 中表现出令人满意的淀粉分解活性。降低的Ca2+依赖性通常进一步具 有如下结果，即变体对于钙离子贫乏的条件不太敏感，如那些在含有 钙配位剂的介质中所获得的条件(例如某些去污剂助剂)。
“液化作用”或“液化”是指一种过程，通过该过程淀粉被转化 为短链和低粘性糊精。通过，该过程包括在加入α淀粉酶的同时或加 入α淀粉酶之后胶凝化淀粉。在商业过程中，优选地颗粒淀粉来自玉 米、小麦、蜀黍、高粱、黑麦或bulgher(一种俄罗斯作物)。然而，本 发明适用于可用于液化的任何谷物淀粉来源，例如已知可以产生适合 于液化的淀粉的任何其它谷物或植物来源。
“颗粒淀粉”或“淀粉颗粒”指可食用谷物的水不溶性成分，该 成分在去除外壳、纤维、蛋白质、脂肪、胚芽后保留下来的部分，并 且在经过谷物湿磨方法所特有的浸泡、机械破裂、分离、筛选、逆流 冲洗和离心步骤处理后可溶。颗粒淀粉包括含有，几乎是独占地含有 压紧的淀粉分子(即支链淀粉和直链淀粉)的完整淀粉颗粒。在玉米 中，颗粒淀粉成分含有大约99％淀粉；剩余1％包括蛋白质、脂肪、灰 分、纤维素和与颗粒密切相关的微量成分。颗粒淀粉的填充物结构严 重地阻碍了α-淀粉酶水解淀粉的能力。利用淀粉的胶凝化来破坏颗粒， 以得到可溶性淀粉溶液且有助于酶水解。
“淀粉溶液”指水溶性胶凝淀粉，通过加热颗粒淀粉得到。一旦 将颗粒加热到超过大约72℃，颗粒淀粉就溶解形成疏松淀粉分子的含 水混合物。该混合物形成一种粘性水溶液，所述混合物，例如在黄色 马齿种玉米中，包括大约75％支链淀粉和25％直链淀粉。“α淀粉酶” 指裂解或水解α(1-4)糖苷键的酶活性，例如淀粉，支链淀粉或直链淀粉 聚合物中的α(1-4)糖苷键。合适的α淀粉酶是天然存在的α淀粉酶，以 及可用于淀粉液化中的重组或突变淀粉酶。例如，本发明也包括了在 不同于野生型淀粉酶的pH或温度下，产生具有活性的变异淀粉酶的技 术。
液化的温度范围通常是任何已知在液化淀粉中有效的液化温度。 优选地，淀粉的温度介于大约80℃-大约115℃之间，更优选地介于大 约100℃-大约110℃之间，最优选地介于大约105℃-大约108℃之间。
在一个实施方案中，本发明的信号序列是在鉴别新颖淀粉酶多肽 后被鉴别的。蛋白质被分选，且转运到其适当细胞位置的途径是通过 被称作蛋白质导向途径实现的。在所有这些导向系统中最重要的元件 之一是称作信号序列的位于新合成的多肽的氨基末端上的短氨基酸序 列。信号序列将蛋白质指向其在细胞中的适当位置，在转运过程中或 者当蛋白质到达其最终目的地时被去除。大部分溶酶体、膜或分泌蛋 白具有一个氨基末端信号序列，该信号标记它们转移到内质网的内腔 中。该组中超过100种蛋白质的信号序列已经被确定。序列的长度在 13-36个氨基酸残基之间。识别信号序列的各种方法对于本技术领域的 普通技术人员而言是已知的。在一个实施方案中，通过一种被称作 SignalP的方法来鉴别肽。SignalP使用综合神经网络来识别信号肽以及 它们的裂解位点。(Nielsen，H.，Engelbrecht，J.，Brunalk，S.，von Heijne， G.，“Identification of prokaryotic and eukaryotic signal peptides and prediction of their cleavage sites.”Protein Engineering，第10卷，第1期， 1-6页(1997)，此处引用作为参考)。应该理解到，本发明的一些淀粉酶 可以没有信号序列。可以期望包括编码信号序列的核酸序列，所述信 号序列来自与一种不同淀粉酶的核酸序列可操作连接的淀粉酶，或任 选地来自非淀粉酶蛋白的信号序列是期望的。表3显示了本发明的信 号序列。
正如此处所用，短语“核酸”或“核酸序列”指寡核苷酸、核苷 酸、多核苷酸，或指寡核苷酸、核苷酸、多核苷酸中任一种的片段， 指基因组或合成来源的DNA或RNA，指肽核酸(PNA)，或者指任何天 然或合成来源的类似DNA或类似RNA的物质。
特定多肽或蛋白质的“编码序列”或“编码特定多肽或蛋白质的 核苷酸序列”是当在置于适当调节序列控制下时被转录或翻译到多肽 或蛋白质中的核酸序列。
术语“基因”指涉及产生多肽链的DNA片段；包括编码区之前和 之后的区(前导区和非转录尾区)，以及适当的时候，包括个体编码片 段(外显子)之间的间插序列(内含子)。
正如此处所用，“氨基酸”或“氨基酸序列”指寡肽、肽、多肽或 蛋白序列，或指寡肽、肽、多肽或蛋白序列中任意一种的片段、部分 或亚单位，指天然分子或合成分子。
正如此处所用，术语“多肽”指通过肽键或修饰的肽键即肽等排 物(peptide isostere)彼此连接在一起的氨基酸，并且可以含有除了20 个由基因编码的氨基酸以外的修饰氨基酸。多肽可以通过任一种天然 方法修饰，如翻译后加工，或通过本技术领域已知的化学修饰技术修 饰。修饰可以发生在多肽中的任何地方，包括肽骨架、氨基酸侧链和 氨基末端或羧基末端。应该意识到，在给定的多肽中，相同类型的修 饰可以在数个位点以相同或变化的程度存在。而且，给定的多肽可以 具有许多类型的修饰。这些修饰包括乙酰化作用、酰化作用、ADP-核 糖基化作用、酰胺化作用、黄素的共价附着、亚铁血红素部分的共价 附着、核苷酸或核苷酸衍生物的共价附着、脂质或脂质衍生物的共价 附着、phosphytidylinositol的共价附着、交联环化、二硫键形成、脱甲 基作用、共价交联的形成、半胱氨酸的形成、焦谷氨酸的形成、甲酰 化作用、γ-羧化作用、糖基化作用、GPI锚形成、羟基化作用、碘化作 用、甲基化作用、豆蔻酰化、氧化、pergylation、蛋白水解加工、磷酸 化作用、异戊二烯化、外消旋作用、硒化作用(selenoylation)、硫酸化 作用、t-RNA介导的将氨基酸加入到蛋白质的过程如精氨酰化。(参考 Creighton，T.E.，Proteins-structure and Molecular Properties第二版，W.H. Freeman and Company，New York(1993)；Posttranslational Covalent Modification of Proteins，B.C.Johnson编著，Academic Press，New York， 1-12页(1983))。
正如此处所用，术语“分离的”指物质离开其原始环境(例如， 如果是天然存在的，则离开其天然环境)。例如，存在于活的动物体内 的天然存在的多核苷酸或多肽不是分离的，但从天然系统中的一些或 全部共存物质中分离出的相同多核苷酸或多肽是分离的。这样的多核 苷酸可以是载体的一部分，和/或这样的多核苷酸或多肽可以是组合物 的一部分，它们仍然是分离的，原因在于这些载体或组合物不是天然 环境的一部分。
正如此处所用，术语“纯化的”不要求完全纯化；更确切地说， 该术语是一个相对定义。来自文库的个体核苷酸已经被常规地纯化达 到电泳同质性。来自这些克隆的序列不能直接从文库或者直接从总人 DNA获得。本发明的纯化的核酸已经从微生物的基因组DNA的剩余 物中纯化了至少104-106倍。然而，术语“纯化的”也包括已经从基因 组DNA的剩余物或从文库或其它环境中的其它序列纯化了至少一个 数量级的核酸，典型地是纯化了两个或三个数量级，更典型地是四个 或五个数量级。
正如此处所用，术语“重组的”指核酸与“骨架”核酸相邻，而 在其天然环境中与“骨架”核酸不是相邻的。另外，被“富集”的核 酸表示核酸骨架分子群体中的核酸插入物达到5％或更多数量。根据本 发明的骨架分子包括核酸，如表达载体、自我复制核酸、病毒、整合 核酸和其它用于维持或操纵相关核酸插入物的载体或核酸。典型地， 富集的核酸表示重组骨架分子群体中的核酸插入物达到15％或更多数 量。更典型地，富集核酸表示重组骨架分子群体中的核酸插入物为50％ 或更多数量。在一个实施方案中，富集核酸表示重组骨架分子群体中 的核酸插入物达到90％或更多数量。
“重组的”多肽或蛋白质指通过重组DNA技术产生的多肽或蛋白 质；即，通过编码期望多肽或蛋白质的外源DNA构建物转化的细胞产 生的多肽或蛋白质。“合成的”多肽或蛋白质是那些通过化学合成制备 的多肽或蛋白质。也可以固相化学肽合成方法来合成本发明的多肽或 片段。这些方法自从20世纪60年代早期在本技术领域就已经已知 (Merrifield，R.B.，J.Am.Chem.Soc.，85：2149-2154，1963)(也可以参 见Stewart，J.M.和Young，J.D.，Solid Phase Peptide Synthesis，第二版， Pierce Chemical Co.，Rockford，I11，11-12页))，并且最近已经被用于可 通过商业途径获得的实验室肽设计和合成试剂盒(Cambridge Research Biochemicals)。这些可通过商业途径获得的实验室试剂盒通常使用了 H.M.Geysen等人，Proc.Natl.Acad.Sci.，USA，81：3998(1984)的教导， 在大量“棒”或“针”的尖端上提供合成肽，所有棒或针与单个板子 相连接。当使用这样的系统时，一个具有棒或针的板子被翻转，且插 入到具有相应孔或容器的第二个板子中，所述孔或容器含有将适当氨 基酸附着或固定到针或棒尖端的溶液。通过重复这一处理步骤，即将 棒或针的尖端翻转且插入到适当溶液中，氨基酸就被构建到期望肽中。 此外，可以得到数量众多的FMOC肽合成系统。例如，多肽或片段的 装配可以使用Applied Biosystems，Inc.提供的Model 431A自动肽合成 仪在固体载体上进行。该肽合成仪提供了现成获取本发明所述肽，或 者通过直接合成或者通过合成一系列片段，这些片段可以使用其它已 知技术偶联。
当起动启动子转录的RNA聚合酶将编码序列转录到mRNA中时， 启动子序列与编码序列是“可操纵连接”的。
“质粒”由前面的小写字母“p”，和/或其后的大写字母和/或数字 标明。此处的起始质粒或者通过商业途径获得，是不受限制地公开获 得，或者可以用与公开方法一致的方法从可获得的质粒构建而来。另 外，与此处所描述的质粒等效的质粒在本领域是已知的，对于普通技 术人员而言是明了的。
DNA的“消化”指用仅在DNA中某些序列上发挥作用的限制酶 催化裂解DNA。此处使用的各种限制酶是通过商业途径获得，其反应 条件、辅因子和其它要求按照普通技术人员已知的那样使用。对于分 析目的，通常在大约20μl缓冲液中，对于1μg质粒或DNA片段，大 约使用2单位酶。对于分离DNA片段进行质粒构建的目的，通常在较 大容器中用20-250单位酶消化5-50μg DNA。对于特定限制酶，由制造 商详细说明所使用的适当缓冲液和底物的用量。一般使用37℃大约1 小时的温育时间，但可以根据供应商提供的说明书有所变化。消化后， 进行凝胶电泳来分离期望片段。
“寡核苷酸”或者指一个单链多脱氧核苷酸，或者指两个互补的 多脱氧核苷酸链，它们可以化学合成。这样化学合成的寡核苷酸没有5’ 磷酸，因此在没有用ATP添加磷酸和存在激酶的情况下，不会与另一 个寡核苷酸连接。合成寡核苷酸将与没有发生去磷酸化作用的片段连 接。
在有关核酸或多肽的上下文中，词语“基本上同一的”指两个或 更多序列，当进行最大对应的对比且对齐时，正如用已知的序列比较 算法或通过视觉观察所测定的，所述序列具有至少50％，60％，70％， 80％，在某些方面具有90-95％核苷酸或氨基酸残基同一性。典型地， 基本上的同一性存在于至少大约100个残基的区域内，最普通地是序 列在至少大约150-200个残基范围内是基本上同一的。在一些实施方案 中，序列在整个编码区是基本上同一的。
另外，“基本上同一的”氨基酸序列是这样一个序列，即该序列通 过一个或多个保守或非保守氨基酸取代、缺失或插入而与参考序列不 同，尤其当这样的取代发生的位点不是分子的活性位点时，只要多肽 实质上保留了其功能特性时。保守氨基酸取代，例如用一个氨基酸取 代另一个同类氨基酸(例如用一个疏水氨基酸取代另一个疏水氨基酸， 例如这些疏水氨基酸为异亮氨酸、缬氨酸、亮氨酸或甲硫氨酸，或者 用一个极性氨基酸取代另一个极性氨基酸，如用精氨酸取代赖氨酸， 谷氨酸取代天冬氨酸，谷氨酰胺取代天冬酰胺)。一个或多个氨基酸可 以被删除，例如从α淀粉酶多肽进行删除，导致多肽结构的修饰，而 不会显著地改变其生物活性。例如，α淀粉酶生物活性不要求的氨基或 羧基末端氨基酸可以被删除。本发明的修饰的多肽序列可以通过许多 方法分析α淀粉酶生物活性，包括用α淀粉酶底物接触修饰的多肽序 列，确定修饰的多肽是否在分析中降低了特定底物的量，或者是否增 加了功能性α淀粉酶多肽与底物的酶反应的生物产物。
正如此处所用，“片段”是天然存在的蛋白质的一部分，其可以以 至少两种不同的构象存在。片段可以具有与天然蛋白质相同或基本上 相同的氨基酸序列。“基本上相同”指氨基酸序列大部分是相同的，但 不是完全相同，但保持与其相关的序列的至少一种功能活性。通常如 果两个氨基酸序列至少大约85％是同一的，那么这两个氨基酸序列是 “基本上相同的”或“基本上同源的”。与天然蛋白质具有不同的三维 结构的片段也包括在内。这样的一个例子是“前形式(pro-from)”分 子，如可以通过裂解产生具有显著较高活性的成熟酶的具有较低活性 的前蛋白。
“杂交”指一种过程，通过该过程核酸链通过碱基配对与互补链 结合。杂交反应可以是敏感的，且是选择性的，这样相关的特定序列 即使在其存在浓度非常低的样品中也能被识别出。合适的严格条件可 以通过如下条件来确定，例如预杂交和杂交溶液中的盐或甲酰胺的浓 度，或者通过杂交温度来确定，并且这些条件在本技术领域是已知的。 尤其是，严格性的增加可以通过降低盐浓度、增加甲酰胺浓度或升高 杂交温度实现。
例如，高度严格条件下的杂交可以于大约37℃-42℃和在大约50％ 甲酰胺中发生。杂交可以在降低的严格条件下发生，于大约30℃-35℃ 在大约35％-25％甲酰胺中发生。尤其是，杂交可以在高度严格条件下 于发生，于大约42℃在50％甲酰胺、5XSSPE、0.3％SDS和200n/ml 剪切且变性的鲑精DNA中发生。杂交可以在降低的严格条件下发生， 正如上面所描述的，于降低的温度35℃在35％甲酰胺中发生。与特定 严格性水平相应的温度范围可以通过计算相关核酸的嘌呤与嘧啶的比 率并且相应地调节温度来进一步变窄。上述范围和条件的变化在本技 术领域是已知的。
术语“变体(variant)”指在一个或多个碱基对、密码子、内含子、 外显子或氨基酸残基(分别地)被修饰的本发明的多核苷酸或多肽， 但仍然保留了本发明的α淀粉酶的生物活性。变体可以通过很多方法 产生，这些方法包括，例如易错PCR、改组、寡核苷酸介导的诱变、 装配PCR、有性PCR诱变、体内诱变、盒式诱变、递归集团诱变(recursive ensemble mutagenesis)、指数集团诱变(exponential ensemble mutagenesis)、位点特异性诱变、基因再装配、GSSM及其任意组合。 本发明也包括了产生，例如与野生型淀粉酶不同的pH或温度下具有活 性的变体淀粉酶的技术。
酶是高度选择的催化剂。它们的特点是以微妙的立体、区域和化 学选择性催化反应，这是传统合成化学难以匹敌的。而且，酶具有显 著的多种用途。它们可以在有机溶剂中发挥作用，在极端pH(例如高 pH和低pH)、极端温度(例如高温和低温)、极端盐度水平(例如高 盐度和低盐度)下工作，且可以催化在结构上与其自然的生理学底物 不相关的化合物的反应。
酶对于多种天然和非天然底物都有活性，从而能实质上修饰任何 有机前导化合物。而且，与传统的化学催化剂不同，酶是高度对映选 择和区域选择的。这些酶所表现出的高度官能基团特异性能使得人们 追踪导致新活性化合物的合成序列中的每一反应。酶也能催化与它们 的生理学功能本质上不相关的许多性质不同的反应。例如，过氧化物 酶通过过氧化氢催化苯酚的氧化。过氧化物酶也能催化与该酶的天然 功能不相关的羟基化反应。其它例子是催化多肽分解的蛋白酶。在有 机溶液中，一些蛋白酶也可以催化糖的酰化，这是与这些酶的天然功 能不相关的已知功能。
一方面，本发明包括液化含有组合物的淀粉的方法，所述方法包 括将淀粉与本发明的多肽(例如，选自具有选自如下序列的氨基酸序 列的纯化多肽：B组氨基酸序列；与至少一个B组氨基酸序列具有至 少大约50％同源性的变体，在至少大约100个残基的区域内，正如通 过用序列比较算法或通过视觉观察进行的分析所确定的那样：与任一 个B组氨基酸序列互补的序列；和在至少大约100个残基的区域内与 任一个B组氨基酸序列具有至少大约50％同源性的变体互补的序列， 正如通过用序列比较算法或通过视觉观察进行的分析所确定的那样； 和具有多肽的至少10个连续氨基酸的多肽，所述多肽具有选自B组氨 基酸序列的序列)接触。在一个优选的实施方案中，多肽是B组氨基 酸序列中所阐明的。淀粉可以来自选自如下的物质：稻米、发芽稻米、 玉米、大麦、小麦、豆类和甘薯。此处也包括通过本发明的方法产生 的葡萄糖糖浆。该糖浆可以是麦芽糖糖浆、葡萄糖糖浆或其组合。尤 其是，与通过商业酶产生的糖浆相比，用本发明的淀粉酶产生的糖浆 具有较高水平的DP2部分，较高水平的DP3(麦芽三糖和/或潘糖)和 较少的大于DP7片段的片段。这与液化曲线相符合，这是由于在本发 明的液化糖浆中有较少的大片段。
本发明也提供一种方法，用于从物质中去除含有淀粉的染料，该 方法包括将该材料与本发明的多肽接触。一方面，本发明提供了一种 洗涤目标物的方法，该方法包括将目标物与本发明的多肽在足以洗涤 的条件下接触。例如，本发明的多肽可以作为去污剂添加剂被包括进 相应产品中。本发明也包括一种用于织物脱浆的方法，该方法包括将 织物与本发明的多肽在足以脱浆的条件下接触。
本发明也提供一种降低面包产品老化的方法，该方法包括将本发 明的多肽在烘烤之前加入到面包产品中。
本发明也提供了一种处理木质纤维素的方法，其中用本发明的多 肽以足以改进纤维特性的量处理纤维。本发明包括一种用于循环纸浆 的酶法脱墨的方法，其中多肽以足以有效地使纤维表面脱墨的量使用。
此处描述的任何方法之一均包括添加第二种α-淀粉酶或者β-淀粉 酶或者它们的组合物。适合与本发明的酶组合使用的商业淀粉酶或其 它酶对于本技术领域的普通技术人员而言是已知的。
本发明也包括一种通过如下步骤从地下形成物增加生产液体流动 的方法，是通过去除生产操作过程中形成的和在地下形成物中被发现 的粘性、含淀粉的有破坏性的液体而实现，这些液体包围着整个井孔， 包括允许生产液体从井孔流出；降低从地层流出的生产液体流动达到 低于期望流速；通过将含水液体与本发明的多肽共混配制酶处理物； 将酶处理物泵到井孔中的期望位置；允许酶处理物降解粘性、含淀粉 的有破坏性的液体，从而液体可以从地下形成物移动到井表面；其中 酶处理物可以有效地破坏含有淀粉的液体中的α糖苷键。
本发明利用了酶的一种独特的催化特性。尽管在化学转化中使用 生物催化剂(即，纯化酶或者粗酶，非活细胞或者活细胞)通常需要 鉴别与特定起始化合物反应的特定生物催化剂，本发明使用了选择的 生物催化剂和反应条件，它们对于在许多起始化合物中存在的官能基 团是特异的。
每种生物催化剂对于一种官能基团或者几种相关的官能基团是特 异的，并且可以与含有该官能基团的许多起始化合物反应。
生物催化剂反应产生来自单一起始化合物的衍生物群体。这些衍 生物可以被进行另一轮生物催化剂反应，以产生第二群衍生化合物。 可以用生物催化剂衍生作用的每一次迭代产生成千上万种原始化合物 的变化。
酶在起始化合物的特定位点反应，不影响该分子的其余部分，该 过程用传统化学方法非常难以实现。这种高度的生物催化特异性提供 了在文库中鉴别单一活性化合物的方法。文库的特征在于用于产生某 种化合物的生物催化反应系列，所谓的“生物合成历史”。筛选文库的 生物活性并且跟踪生物合成历史，就能够鉴别产生活性化合物的特定 反应序列。重复反应序列，确定合成的化合物的结构。与其它合成和 筛选方法不同，鉴别模式不需要固定化技术，可以使用实质上任何类 型的筛选分析方法在溶液中以游离态合成且测试化合物。重要的是要 注意到，酶在官能基团上的反应的高度特异性允许跟踪特定酶反应， 这些反应形成生物催化产生的文库。
为基于表达而发现淀粉酶的目的，对λ噬菌体文库进行筛选有很 多优点。这些优点包括改进对于毒性克隆的检测；改进对于底物的接 近；降低对于对宿主进行遗传工程的需求；绕开对于任何由于文库的 大规模删除所导致的偏见的潜能；以及在低克隆密度下的较快速生长。 另外，在液相中筛选λ噬菌体文库相对于在固相中筛选而言有优势。 这些优势包括：分析条件下更好的灵活性；额外的底物灵活性；对于 弱克隆更高的灵敏度；以及易于自动化。
许多程序步骤是用机械自动化进行的，这样能完成大量生物催化 反应，并且每天筛选被试验物，以及确保高水平的准确性和可再现性。 这样的结果是，可以在几周内产生衍生化合物的文库，而该文库用当 前的化学方法将需要数年才能产生。(关于分子修饰的进一步教导，包 括小分子，参见PCT/US94/09174，将其完整引用于此作为参考)。
一方面，本发明提供了一种非随机方法，称作合成基因再装配 (synthetic gene reassembly)，这与随机改组有一些相关，只是核酸构 件没有任意地被改组或被连接或被嵌合，而是被非随机性地装配。
合成基因再装配方法不依赖于将被改组的多核苷酸之间存在高度 同源性。本发明可以被用于非随机地产生后代分子的文库(或集合)， 所述后代分子包括超过10100不同的后代嵌合体。令人信服地，合成基 因再装配甚至能被用于产生包括超过101000不同的后代嵌合体的文库。 因此，一方面，本发明提供了一种非随机方法，用于产生一组最终确 定的嵌合核酸分子，这些分子具有由设计所选择的全装配顺序，该方 法包括如下步骤：通过设计产生大量特定核酸构件，这些核酸构建具 有可使用的相互兼容的可连接末端；装配这些核酸构件，从而可实现 设计的总装配顺序。
如果将被装配的核酸构建的相互兼容的可连接末端能使构件以预 定顺序被偶联，那么它们被认为对于这种类型的顺序装配是“可使用 的”。因此，一方面，核酸构建可以被偶联的总装配顺序由可连接末端 的设计确定，如果将使用多于一个装配步骤，那么核酸构建能被偶联 的总装配顺序也将由装配步骤的顺序确定。在本发明的一个实施方案 中，用酶处理退火的构件部分，例如连接酶(如，T4 DNA连接酶)可 以实现构件部分的共价键合。
在另一个实施方案中，核酸构件的设计是依据一组祖先核酸模板 的序列分析获得的，模板用作产生最终确定的嵌合核酸分子的后代集 合的基础。这些祖先核酸模板从而作为序列信息的来源，该序列信息 核酸构件的设计，其将被诱变，例如被嵌合或改组。
在一个例证中，本发明提供了一个相关基因家族和它们的相关产 物的编码家族的嵌合。在一个特定的例证中，被编码的产物是酶。本 发明的淀粉酶，例如α-淀粉酶或碱性淀粉酶，可以根据此处描述的方 法被诱变。
因此根据本发明的一个方面，大量祖先核酸模板的序列(例如A 组核酸序列的多核苷酸)被对齐，以便选择一个或多个分界点，这些 分界点可以被放置在一个同源区中。分界点可以被用来描述将要产生 的核酸构件的边界。因此，在祖先分子中识别和选择的分界点在后代 分子的装配中用作潜在的嵌合点。
典型地，可使用的分界点是由至少两个祖先模板共享的同源区(包 括至少一个同源核苷酸碱基)，但分界点可以是由至少一半的祖先模 板，至少三分之二的祖先模板，至少四分之三的祖先模板，优选地最 多所有祖先模板共享的同源区。甚至更优选地，可使用的分界点仍然 是由所有祖先模板共享的同源区。
在一个实施方案中，基因再装配过程是彻底地进行的，以便产生 详尽的文库。换句话说，核酸构件的所有可能的有序重组均存在于最 终确定的核酸分子的集合中。同时，每一重组中的装配顺序(即每一 最终确定的嵌合核酸的5’-3序列中的每一构件的装配顺序)是设计的 (或者不是随机的)。由于该方法的非随机特性，大大降低了不必要的 副产品的可能性。
在另一个实施方案中，该方法提供了，系统地进行基因再装配过 程，例如以产生系统区室化的文库，该文库具有可以被系统性选择的 区室，例如一个接一个顺序。换句话说，本发明提供了，通过有选择 且明智地使用特定核酸构件，与有选择且明智使用的顺序阶段装配反 应偶联，在几个反应容器中的每一个中获得后代产物的特定集合的场 合，可以实现试验设计。这样可以允许进行系统地检验且筛选程序。 因此，这允许潜在的大量后代分子以较小的组被系统地检验。
由于以高度灵活且详尽和系统的方式进行嵌合的能力，尤其是当 祖先分子之间有低水平同源性时，本发明提供了产生一个包括大量后 代分子的文库(或集合)。由于本发明的基因再装配发明的非随机特性， 所产生的后代分子优选地包括一个最终确定的嵌合核酸分子的文库， 这些核酸分子具有由设计所选择的总装配顺序。在一个特别的实施方 案中，这样产生的文库包括超过103-超过101000个不同的后代分子种类。
一方面，正如所述所产生的最终确定的嵌合核酸分子的集合包括 编码多肽的多核苷酸。根据一个实施方案，该多核苷酸是基因，可以 是人工基因。根据另一个实施方案，该多核苷酸是基因途径，可以是 人工基因途径。本发明提供了，由本发明所产生的一种或多种人工基 因可以被整合到人工基因途径中，如在真核生物体(包括植物)中可 操作的途径。
在另一个例证中，产生构件的步骤的合成特性允许设计且导入核 苷酸(例如一个或多个核苷酸，它们可以是，例如密码子或内含子或 调节序列)，这些核苷酸随后可以以体外方法被任选地去除(例如通过 诱变)，或者以体内方法(例如通过利用宿主微生物的基因剪接能力)。 应该意识到，在许多情况下，除了产生可使用的分界点的潜在益处之 外，由于许多其它原因导入这些核苷酸也是期望的。
因此，根据另一个实施方案，本发明提供了，核酸构件可以被用 来导入内含子。因此，本发明提供了，功能内含子可以被导入到本发 明的人工基因中。本发明也提供了，功能内含子可以被导入到本发明 的人工基因途径中。此外，本发明提供了嵌合多核苷酸的产生，该嵌 合多核苷酸是含有一个(或多个)人工导入的内含子的人工基因。
另外，本发明也提供了嵌合多核苷酸的产生，该嵌合多核苷酸是 含有一个(或多个)人工导入的内含子的人工基因途径。优选地，人 工导入的内含子在一种或多种用于基因剪接的宿主细胞中起作用，主 要以天然内含子在基因剪接中功能地发挥作用的方式进行。本发明提 供了一种产生含内含子的人工多核苷酸的方法，这些多核苷酸将被导 入到用于重组和/或剪接的宿主微生物中。
用本发明产生的人工基因也用作与另一种核酸重组的模板。同样 地，用本发明产生的人工基因途径也用作与另一种核酸重组的模板。 在一种优选的情况中，重组由含内含子的人工基因和用作重组配偶体 的核酸之间的同源区促进，或者在该区发生。在一种特别优选的情况 中，重组配偶体也是本发明产生的核酸，包括人工基团或人工基因途 径。重组可以由存在于人工基因中的一个(或多个)人工导入的内含 子的同源区促进，或者在该区发生。
本发明的核酸基因再装配方法使用了大量核酸构件，每一构件优 选地具有两个可连接末端。每一核酸构件上的两个可连接末端可以是 两个钝末端(即每一个没有核苷酸突出物)，或者优选地一个钝末端和 一个突出端，或者更优选地仍然是两个突出端。
对于该目的有用的突出端可以是3’突出端或5’突出端。因此，核 酸构件可以具有3’突出端或可选择地5’突出端，或者可选择地具有两 个3’突出端，或者可选择地具有两个5’突出端。核酸构件被装配以形 成最终确定的嵌合核酸分子的总顺序由有目的的试验设计确定，不是 随机的。
根据一个优选的实施方案，核酸构件是如下产生的：两个单链核 酸(也称作单链寡核苷酸)的化学合成，并且将它们接触以允许它们 退火形成一个双链核酸构件。
双链核酸构件的尺寸是可变化的。这些构件的尺寸可小可大。构 件的优选尺寸的范围在1个碱基(不包括任何突出端)到100,000个碱 基对(不包括任何突出端)之间。也提供了其它优选的尺寸范围，下 限为1bp-10,000bp(包括1-10,000之间的每一个整数值)，上限为 2bp-100,000bp(包括2-100,000之间的每一个整数值)。
存在许多方法，通过这些方法可以产生对于本发明有用的双链核 酸构件；并且这些方法在本技术领域是已知的，可以容易地由普通技 术人员进行。
根据一个实施方案，双链核酸构件是如下产生的：首先产生两个 单链核酸，然后允许它们退火形成双链核酸构件。双链核酸构件的两 个链在除了任何形成突出端的核苷酸以外的每一核苷酸上可以是互补 的；从而除了任何突出端以外不含有失配。根据另一个实施方案，双 链核酸构件的两个链在除了任何形成突出端的核苷酸以外，即少于每 一个核苷酸的部分是互补的。因此，根据该实施方案，双链核酸构件 可以被用来导入密码子简并。优选地用此处描述的位点饱和诱变 (Site-saturation mutagenesis)导入密码子简并，用一个或多个N，N，G/T 盒子或也可以使用一个或多个N，N，N盒子进行。
本发明的体内重组方法可以根据特定多核苷酸或序列的未知杂交 或等位基因库不受抑制地进行。然而，没必要知道特定多核苷酸的实 际DNA或RNA序列。
在基因的混合群体内使用重组的方法可以用于产生任何有用的蛋 白，例如白细胞介素I，抗体，组织型纤溶酶原激活物(tPA)和生长 激素。该方法可用于产生具有改变的特异性或活性的蛋白质。该方法 也可以用于产生杂交核酸序列，例如启动子区域、内含子、外显子、 增强子序列、基因的3’未翻译区或5’未翻译区。因此该方法可以用于 产生具有增强的表达率的基因。该方法也可以用于重复DNA序列的研 究。最后，该方法可用于突变核酶或适体(aptamer)。
如此处所述，本发明的一个方面涉及使用还原重配、重组和选择 的重复循环，这些循环允许通过重组完成高度复杂的线性序列的定向 分子进化，如DNA、RNA或蛋白质。
分子的体内改组可用于提供变体，可以用细胞的天然特性进行， 以重组多聚体。而体内重组已经提供了分子多样性的主要自然路线， 基因重组保留了相对复杂的过程，该过程涉及1)同源性的识别；2)链 裂解、链侵入和导致产生重组交叉的新陈代谢步骤；以及最后3)交叉 分解为分离的重组分子。交叉的形成需要识别同源序列。
在另一个实施方案中，本发明包括一种方法，用于从至少第一个 多核苷酸和第二个多核苷酸产生杂交多核苷酸。本发明也用于产生杂 交多核苷酸，通过将共享至少一个部分序列同源区的第一个多核苷酸 和第二个多核苷酸引导进入合适的宿主细胞来实现。部分序列同源区 促进了导致产生杂交多核苷酸的序列再组织的过程。正如此处所用， 术语“杂交多核苷酸”是用本发明的方法产生的任何核苷酸序列，其 含有来自至少两个原始多核苷酸序列的序列。这样的杂交多核苷酸可 以来自分子间重组事件，这些事件可以促进DNA分子之间的序列整 合。另外，这样的杂交多核苷酸可以来自分子内还原重配过程，这些 过程使用重复序列来改变DNA分子内的核苷酸序列。
本发明提供了一种产生杂交多核苷酸的方式，所述杂交多核苷酸 可以编码生物活性的杂交多肽(例如杂交α淀粉酶)。一方面，原始多 核苷酸编码生物活性多肽。本发明的方法通过使用细胞过程产生新的 杂交多肽，这些过程整合原始多核苷酸的序列，以便产生杂交多核苷 酸编码多肽，该多肽表现出来自原始生物活性多肽的活性。例如，原 始多核苷酸可以编码来自不同微生物的特定酶。例如，来自生物体或 变体的第一个多核苷酸编码的酶可以在特定环境条件如高盐度下有效 地发挥作用。由来自不同生物体或变体的第二个多核苷酸编码的酶可 以在不同的环境条件如极度高温下有效地发挥作用。含有来自第一个 和第二个原始多核苷酸的序列的杂交多核苷酸可以编码酶，该酶表现 出由原始多核苷酸编码的两种酶的特性。因此，由杂交多核苷酸编码 的酶可以在由第一个和第二个多核苷酸编码的每一酶共有的环境条件 下有效地发挥作用，例如高盐度和极端温度。
由本发明的多核苷酸编码的酶，包括但不限于，水解酶，如α淀 粉酶和碱性淀粉酶。由本发明的方法产生的杂交多肽可以表现出原始 酶没有显示的特定酶活性。例如，在编码水解酶活性的多核苷酸的重 组和/或还原重配后，可以对所得到的由杂交多核苷酸编码的杂交多肽 筛选来自每一原始酶的特定水解酶活性，即水解酶发挥作用的键类型 和水解酶发挥作用的温度。因此，例如，可以对水解酶进行筛选以明 确那些区分杂交水解酶与原始水解酶的化学功能性，例如(a)酰胺肽 键)，即蛋白酶；(b)酯键，即淀粉酶和脂酶；(c)缩醛，即糖苷酶， 以及例如，杂交多肽发挥作用的温度、pH或盐浓度。
原始多核苷酸来源可以分离自单个生物体(“分离物”)，已经在合 成培养基(“富集培养物”)中培养的生物体采集，或未培养的生物体 (“环境样品”)。使用不依赖培养物的方法来获得来自环境样品的编码 新颖生物活性的多核苷酸是最优选的，这是因为该方法允许得到未使 用的生物多样性来源。
“环境文库”是从环境样品产生的，表示存储于克隆载体中的自 然存在的生物体的集合基因组，所述克隆载体可以在合适的原核宿主 中增殖。由于克隆DNA最初直接提取自环境样品，所以这些文库不限 于可以在纯培养中生长的小的原核生物部分。此外，这些样品中存在 的环境DNA的规格化可以允许从原始样品中存在的所有种类中更均 等地呈现DNA。这可以显著地增加从样品的较少组成部分中找到相关 基因的效率，与优势种相比，这些基因可以以数个数量级之低的数量 存在。
例如，对从一种或多种未培养的微生物产生的基因文库进行筛选， 以筛选相关活性。编码相关生物活性分子的潜在途径首先以基因表达 文库的形式在原核细胞中被捕获。编码相关活性的多核苷酸分离自这 样的文库，并且被导入到宿主细胞中。宿主细胞在这样的条件下生长， 即可以促进产生具有新颖或增强活性的潜在活性生物分子的重组和/或 还原重配。
可以制备多核苷酸的微生物包括原核微生物，如真细菌 (Eubacteria)和古细菌(Archaebacteria)，和低级真核微生物如真菌， 一些藻类和原生动物。多核苷酸可以分离自环境样品，在这种情况下 不需要培养生物体就可以回收核酸，或者从一种或多种培养的生物体 回收。一方面，这样的微生物可以是极端菌(extremophile)，如高温菌 (hyperthermophile)、嗜冷菌、嗜冷生物、嗜盐菌、嗜压微生物和嗜酸 细菌。编码分离自极端菌的酶的多核苷酸是特别优选的。这样的酶可 以如下条件下发挥作用：陆地温泉和深海热出口超过100℃的温度，北 极水中低于0℃的温度，死海的饱和盐环境，煤沉积物和富含硫的地热 温泉中pH大约为0，或者污水污泥中pH超过11。例如，用极端菌生 物体克隆且表达的几种淀粉酶和脂酶在大范围的温度和pH下显示出 高活性。
在本发明的许多新颖酶已经在40℃和50℃且pH为8的条件下， 以及在40℃和50℃且pH为10的条件下被纯化且表征。而且发现于 pH 8和40℃的条件下被纯化且表征得到的酶的比活性为地衣芽孢杆菌 酶(B.lichenoformis)(228U/mg)的三倍(682U/mg)。此外发现另一 种酶具有与地衣芽孢杆菌酶相当的比活性(250U/mg)。在pH 10和50℃ 的条件下，这些酶之一的比活性为31U/mg，另一种的比活性为 27.5U/mg，而地衣芽孢杆菌酶的比活性为27U/mg。
正如上面所述选择且分离的多核苷酸被导入合适的宿主细胞中。 合适的宿主细胞是能促进重组和/或还原重配的任何细胞。所选择的多 核苷酸优选地已经在包括适当控制序列的载体中。宿主细胞可以是高 级真核细胞，如哺乳动物细胞，或者是低级真核细胞，如酵母细胞， 或者优选地，宿主细胞是原核细胞，如细菌细胞。将构建物导入宿主 细胞可以由磷酸钙转染法、DEAE-葡聚糖介导转染法或者由电穿孔实 现(Davis等人，1986)。
适当宿主的代表性实例可以有：细菌细胞，如大肠杆菌(E.coli)、 链霉菌(Streptomyces)、鼠伤寒沙门氏杆菌(Salmonella typhimurium)； 真菌细胞，如酵母；昆虫细胞，如果蝇S2和草地夜蛾Sf9；动物细胞， 如中国仓鼠卵巢细胞(CHO)、COS或Bowes黑素瘤；腺病毒；和植 物细胞。根据此处的教导，适当宿主的选择被认为在本技术领域普通 技术人员的范围内。
尤其参考各种可以被用来表达重组蛋白的哺乳动物细胞培养系 统，哺乳动物表达系统的实例包括猴肾成纤维细胞的COS-7系，描述 在“SV40-转染的猿细胞支持早期SV40突变体的复制”(Gluzman， 1981)，和能表达匹配载体的其它细胞系，例如C127，3T3，CHO，HeLa 和BHK细胞系。哺乳动物表达载体将包括一个复制起点和合适的启动 子和增强子，也包括任何必须的核糖体结合位点，聚腺苷酸化位点， 剪接供体和受体位点，转录终止序列，和5’侧非转录序列。衍生自SV40 剪接的DNA序列和聚腺苷酸化位点可以被用来提供所要求的非转录 遗传元件。
含有相关多核苷酸的宿主细胞可以在传统的营养培养基中培养， 该传统营养培养基被修饰以适合激活启动子、选择转化体或扩增基因。 培养条件，如温度和pH等等，是先前选择用于表达的宿主细胞所用的 那些条件，这些条件对于普通技术人员而言是显然的。然后可以对克 隆进行测序，以识别编码具有增强活性的酶的多核苷酸序列，所述克 隆被鉴别出具有特定的酶活性。
另一方面，应该预期到，本发明的方法可以被用来从一种或多种 操纵子或基因簇或其部分产生编码生化途径的新颖多核苷酸。例如， 细菌和许多真核生物具有一种可调节基因的谐调机制，所述基因的产 物涉及相关过程。这些基因在单一染色体上是成簇的，这在结构上被 称作”基因簇”，并且在单一调节序列的控制下被转录在一起，包括起 动整个簇转录的单一启动子。因此，基因簇是一组邻接基因，它们通 常由于其功能或者相同或者相关。由基因簇编码的生物化学途径的一 个实例是聚酮化合物。聚酮化合物分子是生物活性的非常丰富的来源， 包括抗生素(如四环素和红霉素)，抗癌试剂(道诺霉素)，免疫抑制 剂(FK506和雷帕霉素)，以及兽医产品(莫能菌素)。许多聚酮化合 物(由聚酮化合物合酶制备)是有价值的治疗剂。聚酮化合物合酶是 多功能的酶，其催化大量在官能度和环化作用的长度和方式上不同的 碳链的生物合成。聚酮化合物合酶基因落入基因簇，至少一种类型(被 指定为类型I)的聚酮化合物合酶具有大尺寸基因和酶，这使得遗传操 纵和这些基因/蛋白的体外研究变得复杂化。
基因簇DNA可以从不同的生物体分离，且被连接到载体中，尤其 是含有表达调节序列的载体，这些表达调节序列可以控制和调节从连 接的基因簇制备可检测的蛋白质或蛋白质相关排列活性。使用对于外 源DNA导入具有异常大容量的载体对于使用这样的基因簇是尤其适 当的，此次通过实施例的方式对它们进行了描述，包括大肠杆菌的f 因子(或者致育因子)。大肠杆菌的f因子是影响其在接合过程中高频 转移的质粒，可以理想地获得且稳定地增殖大DNA片段，如来自混合 微生物样品的基因簇。尤其优选的实施方案是使用克隆载体，被称作 “fosmid”或细菌人工染色体(BAC)载体。它们来源于大肠杆菌f 因子，能稳定地整合基因组DNA大片段。当用来自混合未培养的环境 样品的DNA整合时，可以以稳定的“环境DNA文库”的形式获得大 基因组片段。用于本发明中的另一种类型的载体是粘粒载体。粘粒载 体最初被设计用来克隆且增殖基因组DNA的大片段。在Sambrook等 人的Molecular Cloning：A Laboratory Manual，第二版，Cold Spring Harbor Laboratory Press(1989)中详细描述了克隆进粘粒载体的方法。一 旦连接到适当载体中，两种或多种含有不同聚酮化合物合酶基因簇的 载体可以被导入到合适的宿主细胞中。由基因簇共享的部分序列同源 区将促进导致序列组构(reorganization)的过程，而序列组构导致杂交 基因簇。然后对新颖杂交基因簇进行筛选，以筛选在原始基因簇中不 存在的增强的活性。
因此，在一个实施方案中，本发明涉及一种方法，用于制备生物 活性杂交多肽，对这样的多肽筛选增强的活性，是通过如下步骤：
1)引导可操作连接中的至少第一多核苷酸和可操作连接中的第二 多核苷酸进入合适的宿主细胞，所述至少第一多核苷酸和第二多核苷 酸共享至少一个部分序列同源区；
2)培养宿主细胞，培养条件是促进导致可操作连接中的杂交多核 苷酸的序列组构；
3)表达由杂交多核苷酸编码的杂交多肽；
4)在促进鉴别增强生物活性的条件下筛选杂交多肽；和
5)分离编码杂交多肽的多核苷酸。
筛选各种酶活性的方法对于本技术领域的普通技术人员而言是已 知的，并且在整个说明书中对这些方法进行了讨论。当分离本发明的 多肽和多核苷酸时可以使用这些方法。
作为可以使用的表达载体的代表性实例有：病毒颗粒、杆状病毒、 噬菌体、质粒、噬菌粒、粘粒、fosmid、细菌人工染色体、病毒DNA (例如牛痘、腺病毒、禽痘病毒、假狂犬病和SV40衍生物)、P1人工 染色体、酵母质粒、酵母人工染色体以及任何其它对于相关特异宿主 特异的载体(如芽孢杆菌属、曲霉属和酵母)。因此，例如DNA可以 被包括在用于表达多肽的多种表达载体中的任一种中。这样的载体包 括染色体、非染色体和合成DNA序列。大量合适的载体对于本技术领 域普通技术人员是已知的，而且可以通过商业途径获得。通过实例的 方式提供了下述载体；细菌的：pQE载体(Qiagen)，pBluescript质粒， pNH载体，(λ-ZAP载体(Stratagene)；ptrc99a，pKK223-3，pDR540， pRIT2T(Pharmacia)；真核的：pXT1，pSG5(Stratagene)，pSVK3， pBPV，pMSG，pSVLSV40(Pharmacia)。然而，可以使用任何其它质 粒或其它载体，只要它们在宿主中是可复制的且能生存的。本发明可 以使用低拷贝数量或高拷贝数量载体。
表达载体中的DNA序列与适当的表达控制序列(启动子)可操作 地连接，以指导RNA合成。特定命名的细菌启动子包括lacI，lacZ， T3，T7，gpt，λPR，PL和trp。真核启动子包括CMV立即早期启动子、 HSV胸苷激酶启动子、早期和晚期SV40启动子、来自反转录病毒的 LTR启动子和小鼠金属硫蛋白-I启动子。适当载体和启动子的选择在 本技术领域普通技术人员的水平范围内。表达载体也含有翻译起始和 转录终止子的核糖体结合位点。载体也可以包括扩增表达的适当序列。 可以用可选择的标记物从使用了氯霉素转移酶(CAT)载体或其它载 体的任何期望的基因选择启动子区。另外，表达载体优选地含有一种 或多种可选择的标记物基因，以便为转化的宿主细胞的选择提供表型 特征，如真核细胞培养的二氢叶酸还原酶或新霉素抗性，或者如大肠 杆菌中的四环素或氨苄青霉素抗性。
体内重配集中于“分子间”过程，这些过程被集体称作“重组”， 在细菌中通常称作“RecA依赖”现象。本发明依赖于宿主细胞的重组 过程来重组和重配序列，或者细胞的能力来介导还原过程以通过缺失 在细胞中降低准重复序列的复杂性。“还原重配”的过程通过“分子内”， 是不依赖RecA的过程。
因此，在本发明的另一方面，新颖多核苷酸可以通过还原重配方 法产生。该方法涉及产生含有连续序列(原始编码序列)的构建物， 将这些构建物插入到适当的宿主中，随后导入适当的宿主细胞中。单 个分子同一性的重配通过具有同源区的构建物中的连续序列之间或者 准重复单元之间的组合过程发生。重配过程重组和/或降低重复序列的 复杂性和程度，导致产生新颖的分子种类。可以使用多种处理以提高 重配率。这些处理包括用紫外灯、DNA损伤化合物和/或使用显示出增 强水平的“遗传不稳定性”的宿主细胞系处理。因此，重配过程可以 涉及同源重组或准重复序列的自然特性，以指导它们自身的进化。
重复或“准重复”序列在遗传不稳定性中发挥着作用。在本发明 中，“准重复”是不限于其原始单元结构的重复。准重复单元可以表现 为构建物中的序列排列；小序列的连续单元。一旦连接，连续序列之 间的连接处就变得基本上看不见，所得到的构建物的准重复性质现在 在分子水平是连续的。细胞进行缺失过程以降低所产生的构建物复杂 性的缺失过程会在准重复序列之间进行操作。准重复单元提供实际上 无限的模板清单，滑动事件可以在模板上发生。因此含有准重复的构 建物可以有效地提供足够的分子弹性(molecular elasticity)，缺失(和 潜在的插入)事件实质上可以在准重复单元内的任何地方发生。
当准重复序列以相同方向被全部连接时，例如头尾相接或反之， 细胞就不能区分单个单元。因此，还原过程可以在整个序列中发生。 相反，当例如单元以头对头呈现而不是以头对尾呈现时，倒置描绘了 相邻单元的末端，这样缺失形成将有助于不连续单元的损失。因此， 用本发明方法优选的是序列以相同方向。准重复序列的随机方向将导 致重配效率的损失，而序列的一致方向将提供最高效率。然而，尽管 在相同方向具有较少的邻接序列降低了效率，但它仍然可以为有效回 收新颖分子提供充分的弹性。可以在相同方向上用准重复序列获得构 建物，以提供更高的效率。
序列可以用多种方法中的任一种以头对尾的方向装配，包括如下：
a)可以使用包括聚腺苷酸头(poly-A)和聚胸苷酸尾(poly-T)的 引物，当获得单链时它们可以提供方向。这是通过具有从RNA获得的 最初几个碱基实现的，因此易于RNAseH去除。
b)可以使用包括独特限制裂解位点的引物。将需要多个位点、一 组独特序列和重复的合成和连接步骤。
c)引物的内部少许碱基可以被硫醇化，核酸外切酶用于产生适当 的有尾分子。
重配序列的回收依赖于用还原重复指数(RI)鉴别克隆载体。然 后通过扩增回收重配编码序列。产物被再克隆且被表达。具有还原RI 的克隆载体的回收受如下因素影响：
1)使用只有当构建物的复杂性降低时才稳定地维持的载体。
2)用物理方法物理回收缩短的载体。在这种情况下，将用标准质 粒分离方法回收克隆载体，在琼脂糖凝胶上，或者用标准方法在具有 低分子量临界的柱上进行大小分级。
3)回收含有断裂基因的载体，当插入物大小降低时可以选择断裂 基因。
4)用表达载体和适当的选择使用直接选择技术。
从相关生物体编码序列(例如基因)可以表明高度同源水平，并 且编码变化相当多的蛋白产物。这些类型的序列尤其可以在本发明中 用作准重复序列。然而，尽管下面举例说明的实施例表明几乎相同的 原始编码序列(准重复序列)的重配，但该方法不限于这些几乎相同 的重复序列。
下面的实例说明了本发明的方法。描述了衍生于三(3)个独特种 类的编码核酸序列(准重复序列)。每一序列编码具有不同特性组的蛋 白质。每一序列在序列中的独特位置上通过一个或几个碱基对而不同。 准重复序列被单独或整体扩增，并且连接到随机装配中，这样可以在 连接分子群体中获得所有可能的排列和组合。准重复单元的数量可以 通过装配条件来控制。构建物中准重复单元的平均数量被定义为重复 指数(RI)。
构建物一旦形成，就可以根据出版的协议在琼脂糖凝胶上进行大 小分级，或者不进行大小分级，被插入克隆载体，转染到适当宿主细 胞中。然后细胞被增殖，进行“还原重配”。如果需要，还原重配率可 以通过导入DNA损伤来刺激。RI的降低是通过“分子内”机制由重 复序列间的缺失形成来介导，还是通过“分子间”机制由类似于重组 的事件来介导是不重要的。最终结果是分子被重配到所有可能的组合 中。
任选地，该方法包括一个额外步骤，即筛选改组池的文库成员以 鉴别单个改组文库成员，所要鉴别的单个改组成员具有结合或相互作 用或催化具有预定大分子的特定反应(如酶的催化域)，例如蛋白质受 体、寡糖、病毒或其它预定化合物或结构。
从这些文库中鉴别出的多肽可以用于治疗、诊断、研究和相关用 途(例如催化剂、增加水溶液的摩尔渗透压浓度的溶质，等等)，和/ 或可以经受一次或多次额外的改组和/或选择循环。
另一方面，应该想象到，在重组或重配之前或期间，用本发明的 方法产生的多核苷酸可以经受促进将突变导入原始多核苷酸的试剂或 方法的处理。这些突变的导入将增加所得到的杂交多核苷酸和由此所 编码的多肽的多样性。促进诱变的试剂或方法包括但不限于： (+)-CC-1065，或者一种合成类似物如(+)-CC-1065-(N3-腺嘌呤(参见Sun 和Hurley，(1992)；能抑制DNA合成的N-乙酰化或脱乙酰化4’-氟-4- 氨基联苯加成物(例如参见van de Poll等人(1992))；或能抑制DNA合 成的N-乙酰化或脱乙酰化4’-氨基联苯加成物(例如参见van de Poll等 人(1992)，751-758页)；三价铬、三价铬盐、能抑制DNA复制的多环芳 族烃(PAH)DNA加成物，如7-溴甲基-苯[a]蒽(“BMA”)，三(2，3-二溴丙 基)磷酸盐(“Tris-BP”)，1，2-二溴-3-氯丙烷(“DBCP”)，2-溴丙烯醛(2BA)， 苯并[a]芘-7，8-二氢二醇-9-10-环氧化物(“BPDE”)，铂(II)卤盐，N-羟基 -2-氨基-3-甲基咪唑[4，5-f]-喹啉(“N-羟基-IQ”)，和N-羟基-2-氨基-1-甲 基-6-苯基咪唑[4，5-f]-吡啶(“N-羟基-PhIP”)。减慢或暂停PCR扩增的尤 其优选的方法包括UV光(+)-CC-1065和(+)-CC-1065-(N3-腺嘌呤)。尤 其包括的方法是DNA加成物或来自多核苷酸或多核苷酸池的含有 DNA加成物的多核苷酸，可以用一种方法来释放或去除，该方法包括 在进一步处理之前加热含有多核苷酸溶液。
另一方面，本发明涉及一种制备具有生物活性的重组蛋白质的方 法，通过处理含有编码野生型蛋白质的双链模板多核苷酸样品，条件 是根据本发明能提供杂交或重配多核苷酸产生的条件。
本发明也提供使用专用密码子引物(含有简并N，N，N序列)引导 点突变进入多核苷酸，以便产生一组后代多肽，其中全长的单一氨基 酸取代体现在每一氨基酸位置上(基因位点饱和诱变(GSSM))。所用 的寡核苷酸连续地包括第一同源序列、简并N，N，N序列和优选地但不 是必须的第二同源序列。使用这样的寡核苷酸得到的下游后代翻译产 物在每一氨基酸位点沿着多肽包括所有可能的氨基酸变化，这是因为 N，N，N序列的简并包括所有20个氨基酸的密码子。
一方面，一个这样的简并寡核苷酸(包括一个简并N，N，N盒子) 被用于使亲本寡核苷酸模板上的每一原始密码子经受全长密码子取 代。另一方面，使用至少两个简并N，N，N盒子-或者在相同寡核苷酸上 或者不是，用于使亲本寡核苷酸模板上的至少两个原始密码子经受全 长密码子取代。因此，在一个寡核苷酸中可以含有多于一个N，N，N序 列，以便在多于一个位点上引入氨基酸突变。大多数N，N，N序列可以 直接邻接，或者被一个或多个额外的核苷酸序列分离。另一方面，可 以单独使用可用于引入添加和缺失的寡核苷酸，或者与含有N，N，N序 列的密码子组合使用，以便引导氨基酸添加、缺失和/取代的任何组合 或排列。
在一个特别的例证中，用寡核苷酸同时诱变两个或多个连续氨基 酸位置是可能的，所述寡核苷酸含有连续的N，N，N三联体，即简并 (N，N，N)n序列。
另一方面，本发明提供使用比N，N，N序列具有较低简并性的简并 盒子。例如，在某些情况下期望使用(例如在一个寡核苷酸中)仅包 括一个N的简并三联体序列，其中所述N可以是三联体的，第一，第 二或第三位置。包括其任何组合和排列的任何其它碱基可以被用在三 联体的其余两个位置上。另外，在某些情况下期望使用(例如在一个 寡核苷酸中)简并N，N，N三联体序列，N，N，G/T，或N，N，G/C三联体序 列。
然而，应该理解到，由于好几个原因，使用本发明中所公开的简 并三联体(如N，N，G/T，或N，N，G/C三联体序列)是有利的。一方面， 本发明提供一种方法，该方法可以系统地且非常简单地产生可能氨基 酸(对于总共20个氨基酸而言)到多肽中每一氨基酸位置的全长取代。 因此，对于100个氨基酸多肽，本发明提供一种途径，来系统且非常 简单地产生2000个不同种类(即每个位置20个可能的氨基酸乘以100 个氨基酸位置)。应该理解到，通过使用含有简并N，N，G/T或N，N，G/C 三联体序列的寡核苷酸，提供了32个编码20个可能氨基酸的单一序 列。因此，在反应容器中，其中用这样的寡核苷酸使亲本多核苷酸序 列经受饱和诱变，产生了32个编码20个不同多肽的不同后代多核苷 酸。相反，在定点诱变中使用非简并寡核苷酸导致每一反应容器仅有 一个后代多肽产物。
本发明也提供了使用非简并寡核苷酸，它们可以被任选地与所公 开的简并引物组合使用。应该预期到，在某些情况下，在工作寡核苷 酸中使用非简并寡核苷酸来产生特异性点突变是有利的。这提供了一 种方式，用于产生特异性沉默点突变，导致相应氨基酸变化的点突变， 引起终止密码子和多肽片段的相应表达的点突变。
因此，在本发明的一个优选实施方案中，每一饱和诱变反应容器 包括编码至少20个后代多肽分子的多核苷酸，这样所有20个氨基酸 被表示在与在亲本多核苷酸中诱变的密码子位置相应的特异性氨基酸 位置上。从每一饱和诱变反应容器产生的32倍简并后代多肽可以经受 克隆扩增(例如用表达载体克隆进合适的大肠杆菌中)，并且经受表达 筛选。当通过筛选鉴别出单个后代多肽在特性上显示出有利变化时(当 与亲本多核苷酸相比较)，可以对其进行测序以鉴别被包含在其中的相 应的有利氨基酸取代。
应该理解到，一旦用此处所公开的饱和诱变在亲本多肽上诱变每 一氨基酸位置，可以在多于一个氨基酸位置上鉴别出有利的氨基酸变 化。可以产生一个或多个新颖后代分子，它们含有这些有利的氨基酸 取代的全部或部分的组合。例如，如果在多肽中3个氨基酸位置中的 每一位置上鉴别出2个特定的有利氨基酸变化，那么排列包括每一位 置(与原始氨基酸没有变化，和两个有利变化中的每一个)和3个位 置上的3种可能性。因此，有3×3×3或27种总可能性，包括先前检 验的7种-6个单一点突变(即三个位置的每一位置上2个)并且任何 位置上都没有变化。
仍然在另一方面，位点饱和诱变可以与改组、嵌合、重组和其它 诱变过程连同筛选一起使用。本发明提供了以迭代方式使用任何诱变 过程，包括饱和诱变。在一个例证中，任何诱变过程的迭代用途被用 于与筛选组合使用。
因此，在一个非限定性例证中，本发明提供了饱和诱变与其它诱 变过程的组合使用，如两个或多个相关多核苷酸被导入合适的宿主细 胞的过程，以便通过重组和还原重配产生杂交多核苷酸。
除了沿着基因的整个序列进行诱变，本发明提供了，可以用诱变 在多核苷酸序列中取代大量碱基中的每一个，其中将被诱变的碱基数 量优选地是15-100,000之间的每一整数。因此，代替沿着分子诱变每 一位置，可以使每一或离散数量的碱基(优选地总数在15-100,000之 间的子集)经受诱变。优选地，分离的核苷酸被用于沿着多核苷酸序 列诱变每一位置或一组位置。将被诱变的一组3个位置可以是密码子。 优选地用含有异种盒子的诱变引物导入突变，也被称作诱变盒子。优 选的盒子具有1-500个碱基。这样的异种盒子中的每一核苷酸位置是 N，A，C，G，T，A/C，A/G，A/T，C/G， C/ G/T，C/G/T，A/G/T，A/C/T，A/C/G， 或E，其中E是不是A，C，G或T的任何碱基(E可以被称作设计者寡 核苷酸)。
通常意义而言，饱和诱变包括在将被诱变的确定多核苷酸序列(其 中将被诱变的序列的长度优选地在大约15-100,000个碱基之间)中诱 变一组完整的诱变盒子(其中每一盒子的长度优选地为大约1-500个碱 基)。因此，一组突变(1-100个突变)被导入将被诱变的每一盒子中。 在应用一轮饱和诱变的过程中，将被导入盒子的突变的分组可以与将 被导入第二个盒子的突变的分组不同或相同。这样的分组的例证为缺 失、添加、特定密码子的分组和特定核苷酸盒子的分组。
将被诱变的已知序列包括全基因、途径、cDNA、整个开放阅读框 (ORF)和整个启动子、增强子、阻遏物/反式激活蛋白、复制起点、 内含子、操纵子、或任何多核苷酸官能基团。通常，用于该用途的”确 定序列”可以是任何多核苷酸，15个碱基多核苷酸序列和长度在15个 碱基到15,000个碱基之间的多核苷酸序列(本发明特别是指15-15,000 之间的每一整数)。选择密码子分组要考虑的因素包括由简并诱变盒子 编码的氨基酸类型。
在一个尤其优选的例证中，可以被导入诱变盒子的突变的分组， 本发明特别地提供了在每一位置上编码2，3，4，5，6，7，8，9，10，11，12， 13，14，15，16，17，18，19和20个氨基酸的简并密码子取代(使用简并寡 核苷酸)，和由它们编码的多肽文库。
本发明的另一个方面是已知分离的核酸，其包括A组核酸序列中、 与其基本上同一的序列、与其互补的序列的一个序列，或者包括一个 片段，其包括A组核酸序列(或与其互补的序列)的序列之一的至少 10，15，20，25，30，35，40，50，75，100，150，200，300，400 或500个连续碱基。分离的核酸可以包括DNA，这包括cDNA、基因 组DNA和合成DNA。DNA可以是双链或单链的，如果单链可以是编 码链或非编码(反义)链。另外，分离的核酸可以包括RNA。
正如下面所详细讨论的，A组核酸序列和与其基本上同一的序列 的序列之一的分离的核酸可以被用于制备B组氨基酸序列和与其基本 上同一的序列的多肽之一，或者含有B组氨基酸序列和与其基本上同 一的序列的多肽之一的至少5，10，15，20，25，30，35，40，50，75， 100或150个连续氨基酸的片段。
另外，本发明的另一方面是一种分离的核酸，其编码B组氨基酸 序列和与其基本上同一的序列的多肽之一，或者含有B组氨基酸序列 的多肽之一的至少5，10，15，20，25，30，35，40，50，75，100或 150个连续氨基酸的片段。作为遗传密码子的冗余或简并的结果，这些 核酸的编码序列可以与A组核酸序列的核酸之一的编码序列之一、或 其片段相同，或者可以是不同的编码序列，其编码B组氨基酸序列和 与其基本上同一的序列的多肽之一，或者含有B组氨基酸序列多肽之 一的至少5，10，15，20，25，30，35，40，50，75，100或150个连 续氨基酸的片段。遗传密码子对于本技术领域的普通技术人员而言是 已知的，而且可以获得，例如在B.Lewin，Genes VI，Oxford University Press，1997的第214页，将其公开内容引用于此作为参考。
编码B组氨基酸序列和与其基本上同一的序列的分离的核酸包括 但不限于：仅包括A组核酸序列和与其基本上同一的序列的序列之一 的编码序列，和其它编码序列，如前导序列或前蛋白序列和非编码序 列，如内含子或编码序列的5’和/或3’非编码序列。因此，正如此处所 用，术语“编码多肽的多核苷酸”包括，仅包括多肽的编码序列的多 核苷酸，和包括其它编码和/或非编码序列的多核苷酸。
另外，A组核酸序列和与其基本上同一的序列的核酸序列可以用 传统技术来诱变，如定点诱变，或者对于本技术领域普通技术人员熟 悉的其它技术，以便引导沉默变化进入A组核酸序列和与其基本上同 一的序列的多核苷酸中。正如此处所用，“沉默变化”包括，例如不改 变由多核苷酸编码的氨基酸序列的变化。这样的变化可能是期望的， 以便通过引导密码子或密码子对增加由含有编码多肽的载体的宿主细 胞产生的多肽的水平，这在宿主生物体中频繁发生。
本发明也涉及具有核苷酸变化的多核苷酸，这些变化在B组氨基 酸序列和与其基本上同一的序列的多肽中导致氨基酸取代、添加、缺 失、融合和平截。这样的核苷酸变化可以使用诸如定点诱变、随机化 学诱变、核酸外切酶III缺失和其它重组DNA技术来引入。另外，这样 的核苷酸变化可以是自然发生的等位基因变体，它们通过鉴别核酸被 分离，所述核酸与包括A组核酸序列和与其基本上同一的序列(或与 其互补的序列)的序列之一的至少10，15，20，25，30，35，40，50， 75，100，150，200，300，400或500个连续碱基的探针在此处提供的 高度严格、中度严格或低度严格条件下特定地杂交。
A组核酸序列、和与其基本上同一的序列、与其互补的序列的分 离的核酸，或含有A组核酸序列、和与其基本上同一的序列、与其互 补的序列的序列之一的至少10，15，20，25，30，35，40，50，75， 100，150，200，300，400或500个连续碱基的片段，也可以被用作探 针来确定生物样品如土壤样品是否含有具有本发明的核酸序列的生物 体或可以从其得到核酸的生物体。在这样的方法中，可以得到潜在的 含有从其可以得到核酸的生物体的生物样品，并且可以从该样品得到 核酸。将核酸与探针接触，条件是允许探针与样品中存在的任何互补 序列特定地杂交。
在必要时，允许探针与任何互补序列特定地杂交的条件可以通过 将探针与来自样品的互补序列接触来确定，所述样品已知含有互补序 列和对照序列，对照序列不含有互补序列。杂交条件，如杂交缓冲液 的盐浓度，杂交缓冲液的甲酰胺浓度，或者杂交温度可以发生变化， 以鉴别允许探针与互补核酸特定地杂交的条件。
如果样品含有生物体，从这些生物体可以得到核酸，然后检测探 针的特定杂交。可以通过用可检测试剂标记探针来检测杂交，这些可 检测试剂如放射性同位素、荧光染料、或能催化可检测产物形成的酶。
许多使用已标记的探针来检测样品中互补核酸的存在的方法对于 本技术领域的普通技术人员是熟悉的。这些方法包括Southern印迹、 Northern印迹、克隆杂交方法和斑点印迹。每一种这些方法的程序由 Ausubel等人，Current Protocols in Molecular Biology，John Wiley 503 Sons，Inc.(1997)以及Sambrook等人，Molecular Cloning：A Laboratory Manual第二版，Cold Spring Harbor Laboratory Press(1989)提供，这些参 考文献被完整引用于此作为参考。
另外，多于一个探针(至少能与核酸样品中存在的任何互补序列 特定地杂交的探针)可以被用于扩增反应中以确定样品是否含有包括 本发明的核酸序列的生物体(例如从中可以得到核酸的生物体)。典型 地，探针包括寡核苷酸。在一个实施方案中，扩增反应可以包括PCR 反应。PCR程序描述在Ausubel和Sambrook的文献中，见上文。另外， 扩增可以包括连接酶链式反应、3SR、或链置换反应。(参见Barany，F.， “The Ligase Chain Reaction in a PCR World”，PCR方法和应用1：5-16， 1991；E.Fahy等人，“Self-sustained Sequence Replication(3SR)：An Isothermal Transcription-Based Amplification System Alternative to PCR”， PCR方法和应用1：25-33，1991；和Walker G.T.等人，“Strand Displacement Amplification-an Isothermal in vitro DNA Amplification Technique”，Nucleic Acid Research 20：1691-1696，1992，将这些参考文 献引用于此作为参考)。在这样的方法中，将样品中的核酸与探针接触， 进行扩增反应，并且检测任何所得到的扩增产物。扩增产物可以通过 在反应产物上进行凝胶电泳并且用嵌入剂(interculator)如溴化乙锭染 色凝胶来检测。另外，可以用放射性同位素来标记一个或多个探针， 在凝胶电泳后通过射线自显影术检测是否存在放射性扩增产物。
来自接近A组核酸序列和与其基本上同一的序列的序列末端的序 列的探针也可以用在染色体步移方法中，以鉴别含有基因组序列的克 隆，所述基因组克隆位于与A组核酸序列和与其基本上同一的序列临 近的位置。这样的方法允许来自宿主生物体的编码其它蛋白质的基因 的分离。
A组核酸序列、和与其基本上同一的序列、与其互补的序列的分 离的核酸，或者含有A组核酸序列、和与其基本上同一的序列、或与 其互补的序列的序列之一的至少10，15，20，25，30，35，40，50， 75，100，150，200，300，400或500个连续碱基的片段，可以被用作 探针，以鉴别和分离相关核酸。在一些实施方案中，相关核酸可以是 来自生物体的cDNA或基因组DNA，而不是可以从中分离核酸的生物 体。在这样的方法中，将核酸样品与探针接触，条件是允许探针与相 关序列特定地杂交。然后用上面所描述的任一种方法检测探针与来自 相关生物体的核酸的杂交。
在核酸杂交反应中，用于获得特定严格水平的条件可以有所变化， 这依赖于将被杂交的核酸的性质。例如，在选择杂交条件时可以考虑 核酸杂交区的长度、互补程度、核苷酸序列组成(例如GC和AT含量) 和核酸类型(例如RNA和DNA)。其它的考虑因素是核酸之一是否被 固定化，例如固定化在滤器上。
杂交可以在低度严格、中度严格或高度严格条件下进行。作为核 酸杂交的一个实例，含有被固定化的变性核酸的高分子膜被首先于 45℃在溶液中预杂交30分钟，所述溶液含有0.9M NaCl、50mM NaH2PO4、pH7.0、5.0mM Na2EDTA、0.5％SDS、10X Denhardt’s溶液 和0.5mg/ml多核糖腺苷酸。然后将大约2×107cpm(比活性4-9×10 cpm/μg)的P末端标记的寡核苷酸探针加入到上述溶液中。温育12-16 小时后，用含有0.5％SDS的1XSET(150mM NaCl、20mM三氢氯 化物、pH7.8、1mM Na2EDTA)中于室温下将膜冲洗30分钟，随后用 对于寡核苷酸探针而言为Tm-10℃的新鲜1XSET冲洗30分钟。然后 将膜暴露于放射自显影薄膜以检测杂交信号。
通过改变用于鉴别核酸杂交条件的严格性，所述核酸如cDNA或 基因组DNA，其与可检测到的探针杂交，可以鉴别且分离与探针具有 不同同源性水平的核酸。通过在低于探针的解链温度的变化温度下完 成杂交来改变严格性。解链温度Tm是指，在该温度下(在已知的离 子强度和pH下)50％的靶序列与优选的互补探针杂交。对于特定探针. 选择非常严格的条件为等于5℃或比Tm低大约5℃。探针的解链温度 可以用如下公式计算：
对于长度在14-70个核苷酸之间的探针，解链温度(Tm)的计算 公式为：Tm＝81.5+16.6(log[Na+])+0.41(分数G+C)-(600/N)，其中N 是探针的长度。
如果杂交是在含有甲酰胺的溶液中完成的，解链温度的计算公式 为：Tm＝81.5+16.6(log[Na+])+0.41(分数G+C)-(0.63％甲酰胺)-(600/N). 其中N是探针的长度。
预杂交可以在6 X SSC、5 X Denhardt’s试剂、0.5％SDS、100μg 变性断裂鲑精DNA或6 X SSC、5 X Denhardt’s试剂、0.5％SDS、100μg 变性断裂鲑精DNA、50％甲酰胺中进行。对于SSC和Denhardt’s溶液 的阐述罗列在Sambrook等人的文献中，见上文。
通过将可检测探针加入到上面所罗列的预杂交溶液中完成杂交。 其中探针包括双链DNA，它在加入到杂交溶液之前被变性。将滤器与 杂交溶液接触足够长的时间，以允许探针与含有与其互补的序列或与 其同源的序列的cDNA或基因组DNA杂交。多于长度超过200个核苷 酸的探针，杂交可以在低于Tm的15-25℃进行。低于较短的探针，如 寡核苷酸探针，杂交可以在低于Tm的5-10℃进行。典型地，对于在6 XSSC中进行的杂交，杂交在大约68℃进行。通常，对于在含有50％ 甲酰胺的溶液中进行的杂交，杂交在大约42℃进行。
前述所有杂交将在高度严格条件下考虑。
杂交后，冲洗滤器以去除任何没有特定结合的可检测探针。用于 冲洗滤器的严格性也可以变化，依赖于将被杂交的核酸的性质、将被 杂交的核酸的长度、互补程度、核苷酸组成(例如GC和AT含量)和 核酸类型(例如RNA和DNA)。逐渐增加的严格性条件的实例如下： 2 X SSC、0.1％SDS于室温下15分钟(低严格性)；0.1 X SSC、0.5％SDS 于室温下30分钟到1小时(中度严格性)；0.1 X SSC、0.5％SDS在杂 交温度和68℃之间15-30分钟(非常高的严格性)。最终的低严格性冲 洗可以在0.1 X SSC中于室温下进行。上述实例仅仅是对可用于冲洗滤 器的一组条件的例证性说明。本技术领域的普通技术人员将知道对于 不同的严格性冲洗有许多方法。下面给出了一些其它的实例。
通过放射自显影术或其它传统技术来鉴别已经与探针杂交的核 酸。
可以对上述方法进行修正以鉴别与探针序列具有降低水平的同源 性的核酸。例如，为了获得与可检测探针具有降低的同源性的核酸. 可以使用较低的严格条件。例如，杂交温度可以在具有大约1M Na-浓 度的杂交缓冲液中以5℃的增量从68℃降低到42℃。杂交后，在杂交 温度下用2 X SSC，0.5％SDS冲洗滤器。高于50℃的条件被认为是” 中度”条件，低于50℃被认为是”低度”条件。”中度”杂交条件的一个特 定实例是当上述杂交在55℃完成时。”低度严格性”杂交条件的一个特 定实例是当上述杂交在45℃完成时。
另外，杂交可以于42℃在缓冲液中进行，如含有甲酰胺的6 X SSC。 在这种情况下，杂交缓冲液中的甲酰胺浓度可以以5％的增量从50％降 低到0％，以鉴别与探针具有降低水平的同源性的克隆。杂交后，于50℃ 用6 X SSC，0.5％SDS冲洗滤器。高于25％的甲酰胺被认为是”中度” 条件，低于25％的甲酰胺被认为是“低度”条件。“中度”杂交条件的 一个特定实例是当上述杂交在30％的甲酰胺中完成时。“低度严格性” 杂交条件的一个特定实例是当上述杂交在10％的甲酰胺中完成时。
例如，可以用前述方法来分离核酸，所述核酸具有与选自如下序 列的核酸序列具有至少大约97％，至少95％，至少90％，至少85％， 至少80％，至少70％，至少65％，至少60％，至少55％或至少50％同 源性的序列：A组核酸序列和与其基本上同一的序列，或包括其至少 大约10，15，20，25，30，35，40，50，75，100，150，200，300， 400或500个连续碱基的片段，和与其互补的序列。用对齐算法来测定 同源性。例如，同源的多核苷酸可能具有一个编码序列，该编码序列 是此处描述的编码序列之一的天然存在的等位基因变体。与A组核酸 序列或与其互补的序列的核酸相比，这样的等位基因变体可能具有一 个或多个核苷酸的取代、缺失或添加。
另外，上述方法可以用于分离编码多肽的核酸，所述多肽与具有 如下序列之一的序列的多肽具有至少大约99％，95％，至少90％，至 少85％，至少80％，至少75％，至少70％，至少65％，至少60％，至 少55％或至少50％同源性的序列：B组氨基酸序列和与其基本上同一 的序列，或包括其至少大约5，10，15，20，25，30，35，40，50，75， 100或150个连续碱基的片段，正如用序列对齐算法所测定的(例如， 如具有缺省参数的FASTA版本3.0t78算法)。
本发明的另一个发明是一种分离或纯化的多肽，其包括如下序列 之一的序列：A组核酸序列和与其基本上同一的序列，或包括其至少 大约5，10，15，20，25，30，35，40，50，75，100或150个连续碱 基的片段。正如上面所讨论的，这样的多肽可以通过将编码多肽的核 酸插入到载体中获得，这样编码序列与能够驱动被编码的多肽在合适 的宿主细胞中表达的序列可操作地连接在一起。例如，表达载体可以 包括启动子、翻译起始的核糖体结合位点和转录终止子。载体也可以 包括用于扩增表达的适当的序列。
适合在细菌中表达多肽或其片段的启动子包括大肠杆菌lac或trp 启动子、lacI启动子、lacZ启动子、T3启动子、T7启动子、gpt启动 子、λPR启动子、来自编码如3-磷酸甘油酸激酶(PGK)的操纵子的启动 子、和酸性磷酸酶启动子。真菌启动子包括V因子启动子。真核启动 子包括CMV立即早期启动子、HSV胸腺嘧啶核苷激酶启动子、热休 克启动子、早期和晚期SV40启动子、来自反转录病毒的长末端重复序 列(LTR)和小鼠金属硫蛋白-I启动子。也可以使用已知在原核或真核 细胞或其病毒中控制基因表达的其它启动子。
哺乳动物表达载体也可以包括复制起点、任何必须的核糖体结合 位点、聚腺苷酸化位点、剪接供体和受体位点、转录终止序列和5’侧 非转录序列。在一些实施方案中，衍生于SV40剪接和聚腺苷酸化位点 的DNA序列可以用于提供所需要的非转录遗传元件。
用于在真核细胞中表达多肽或其片段的载体也可以含有增强子以 增加表达水平。增强子是DNA的顺式作用元件，长度通常在大约10- 大约300bp之间，其作用于启动子以增强其转录。实例包括复制起点 bp 100-270后侧上的SV40增强子、巨细胞病毒早期启动子增强子、复 制起点后侧上的多瘤病毒增强子、和反转录病毒增强子。
另外，表达载体通常含有一个或多个选择性标记物基因，以允许 选择含有载体的宿主细胞。这样的选择性标记物包括编码二氢叶酸还 原酶的基因、或为真核细胞培养物提供新霉素抗性的基因、在大肠杆 菌中提供四环素或氨苄青霉素抗性的基因、和酿酒酵母(S.cerevisiae) TRP1基因。
在一些实施方案中，编码如下序列的多肽之一的核酸以适当相与 能指导翻译多肽或其片段分泌的前导序列装配：B组氨基酸序列和与 其基本上同一的序列，或者含有其至少5，10，15，20，25，30，35， 40，50，75，100或150个连续氨基酸的片段。任选地，核酸可以编码 融合多肽，其中B组氨基酸序列和与其基本上同一的序列，或者含有 其至少5，10，15，20，25，30，35，40，50，75，100或150个连续 氨基酸的片段的多肽之一被融合到异种肽或多肽上，如赋予期望特性， 诸如增强的稳定性或简易纯化特性的N-末端鉴别肽。
适当的DNA序列可以通过多种方法被插入到载体中。通常，在用 适当的限制性核酸内切酶消化插入物和载体后，DNA序列被连接到载 体中的期望位置。另外，插入物和载体的钝末端可以被连接。在如下 文献中公开了多种克隆技术：Ausubel等人，Current Protocols in Molecular Biology，John Wiley 503 Sons，Inc.1997和Sambrook等人， Molecular Cloning：A Laboratory Manual第二版，Cold Spring Harbor Laboratory Press (1989)，将这些文献的全部公开内容引用于此作为参 考。这些方法和其它方法被认为在本技术领域的普通技术人员的范围 内。
载体的形式可以是，例如质粒、病毒颗粒或噬菌体。其它载体包 括染色体、非染色体和合成DNA序列、SV40衍生物；细菌质粒、噬 菌体DNA、杆状病毒、酵母质粒、衍生于质粒和噬菌体DNA的组合 的载体、病毒DNA如牛痘、腺病毒、禽痘病毒以及假狂犬病。原核和 真核宿主中使用的多种克隆和表达载体由Sambrook等人描述在 Molecular Cloning：A Laboratory Manual第二版，Cold Spring Harbor Laboratory Press(1989)中，将该文献的公开内容引用于此作为参考。
可以被使用的特定细菌载体包括可以通过商业途径获得的质粒， 其含有如下已知的克隆载体的遗传成分：pBR322(ATCC 37017)、 pKK223 3(Pharmacia Fine Chemicals，Uppsala，Sweden)，GEM1 (Promega Biotec，Madison，WI，USA)pQE70，pQE60，pQE-9(Qiagen)， pD10，psiX174 pBluescript II KS，pNH8A，pNH16a，pNH18A，pNH46A (Stratagene)，ptrc99a，pKK223-3，pKK233-3，pDR540，pRIT5(Pharmacia)， pKK232-8和pCM7。特定的真核载体包括pSV2CAT，pOG44，pXT1，pSG (Stratagene)pSVK3，pBPV，pMSG和pSVL(Pharmacia)。然而，可以使 用任何其它载体，只要它在宿主细胞中可复制且可存活。
宿主细胞可以是本技术领域普通技术人员所熟悉的任何宿主细 胞，包括原核细胞、真核细胞、哺乳动物细胞、昆虫细胞或植物细胞。 作为适当宿主的代表性实例有：细菌细胞，如大肠杆菌、链霉菌属、 枯草杆菌、鼠伤寒沙门氏杆菌和假单胞菌属、链霉菌属和葡萄球菌属 中的多种种类；真菌细胞，如酵母；昆虫细胞，如果蝇S2和草地夜蛾 Sf9；动物细胞，如CHO、COS或Bowes黑素瘤；以及腺病毒。适当 宿主的选择在本技术领域普通技术人员的能力范围内。
可以用多种技术中的任一种将载体导入宿主细胞中，包括转化、 转染、转导、病毒感染、基因枪或Ti-介导的基因转移。特定的方法包 括磷酸钙转染法、DEAE-葡聚糖介导的转染法、脂质转染法或者电穿 孔(Davis，L.，Dibner，M.，Battey，I.，Basic Methods in Molecular Biology， (1986))。
适当的时候，进行了遗传工程的宿主细胞可以在传统营养培养基 中培养，所述培养基被修饰以适合激活启动子、选择转化体或扩增本 发明的基因。在转化了合适的宿主株并且使宿主株生长到适当的细胞 密度后，可以通过适当的方法诱导所选择的启动子(例如温度变化或 化学诱导)，并且可以将细胞再培养一段时间，以使得它们制备出期望 的多肽或其片段。
细胞通常通过离心来收获，通过物理或化学方法来破坏，保留所 得到的粗提取物，以进一步纯化。用于表达蛋白的微生物细胞可以通 过任何便利的方法来破坏，包括冻-融循环、超声处理、机械破坏、或 使用细胞裂解剂。这样的方法对于本技术领域的普通技术人员是已知 的。被表达的多肽或其片段可以通过如下方法被回收或从重组细胞培 养物中纯化：硫酸铵或乙醇沉淀、酸萃取、阴离子或阳离子交换层析、 磷酸纤维素层析、疏水相互作用层析、亲和层析、羟基磷灰石层析和 凝集素层析。需要时，在完成多肽的构型中，可以使用蛋白质再折叠 步骤。如果期望，可以将高效液相色谱(HPLC)用于最终的纯化步骤。
也可以用多种哺乳动物细胞培养系统来表达重组蛋白质。哺乳动 物表达系统的实例包括猴肾成纤维细胞的COS-7系(由Gluzman描述， Cell，23：175，1981)，和能表达来自相容载体的蛋白质的其它细胞系， 如C127，3T3，CHO，HeLa和BHK细胞系。
宿主细胞中的构建物可以以传统方式来使用，以产生由重组序列 所编码的基因产物。依赖于重组产生方法中所用的宿主，由含有载体 的宿主细胞产生的多肽可以被糖基化，或者不被糖基化。本发明的多 肽也可以或者不可以包括起始甲硫氨酸氨基酸残基。
另外，B组氨基酸序列和与其基本上同一的序列的多肽，或者其 含有至少5，10，15，20，25，30，35，40，50，75，100或150个连 续氨基酸的片段，可以通过传统肽合成仪通过合成方法制备。在其它 实施方案中，多肽的片段或部分可以通过肽合成仪被用于制备相应的 全长多肽；于此，这些片段可以被用作制备全长多肽的中间物。
也可以通过使用从DNA构建物转录的mRNA将不含细胞的翻译 系统用于制备B组氨基酸序列和与其基本上同一的序列的多肽，或者 其含有至少5，10，15，20，25，30，35，40，50，75，100或150个 连续氨基酸的片段的多肽之一，所述DNA构建物含有与编码多肽或其 片段的核酸可操作连接的启动子。在一些实施方案中，DNA构建物可 以在进行体外转录反应之前被线性化。然后用适当的不含细胞的翻译 提取物温育转录的mRNA，如兔网织红细胞提取物，以制备期望的多 肽或其片段。
本发明也涉及如下序列的多肽的变体：B组氨基酸序列，和与其 基本上同一的序列，或者其含有至少5，10，15，20，25，30，35，40. 50，75，100或150个连续氨基酸的片段。术语”变体”包括这些多肽的 衍生物或类似物。尤其是，通过一个或多个取代、添加、缺失、融合 和平截，它们可以以任意的组合出现，变体可以在氨基酸序列上与B 组氨基酸序列和与其基本上同一的序列的多肽不同。
变体可以是自然存在或在体外产生。尤其是，这样的变体可以用 遗传工程技术产生，如定向诱变、随机化学诱变、核酸外切酶III缺失 方法和标准克隆技术。另外，这样的变体、片段、类似物或衍生物可 以用化学合成或修饰方法产生。
产生变体的其它方法对于本技术领域的普通技术人员也是熟悉 的。这些方法包括，其中从天然分离物得到的核酸序列被修饰以产生 编码多肽的核酸，所述多肽具有增强它们在工业或实验室应用中的价 值。在这样的方法中，由于从天然分离物得到的序列，得到了具有一 个或多个核苷酸差异的大量变体序列，并且它们被表征。典型地，相 对对于来自天然分离物的核酸编码的多肽，这些核苷酸差异导致氨基 酸变化。
例如，可以用易错PCR产生变体。在易错PCR中，PCR是在DNA 聚合酶的拷贝保真度较低的条件下进行的，这样沿着PCR产物的全长 可以获得高比率点突变。易错PCR描述在Leung，D.W.，等人，Technique， 1：11-15，1989)和Caldwell，R.C.& Joyce G.F.，PCR Methods Applic.，2： 28-33，1992，将其公开内容完整引用于此作为参考。简单地说，在这些 方法中，将要被诱变的核酸与PCR引物、反应缓冲液、MgCl2、MnCl2、 Taq聚合酶和适当浓度的dNTPs混合，以沿着PCR产物的全长获得高 比率点突变。例如，可以使用如下物质进行反应：20fmol将被诱变的 核酸，30pmol每一PCR引物，含有50mM KCl、10mM Tris HCl(pH 8.3)和0.01％凝胶的反应缓冲液，7mM MgCl2，0.5mM MnCl2，5单位 Taq聚合酶，0.2mM dGTP，0.2mM dATP，1mM dCTP和1mM dTTP。 PCR可以进行30个循环：94℃ 1分钟，45℃1分钟，72℃1分钟。然 而，应该意识到这些参数在需要时可以有所变化。将被诱变的核酸克 隆到适当的载体中，并且评价由诱变的核酸编码的多肽的活性。
也可以用寡核苷酸定向诱变产生变体，以便在任何相关的克隆 DNA中产生位点特异性突变。寡核苷酸诱变描述在Reidhaar-Olson，J.F. & Sauer，R.T.，等人，Scicence，241：53-57，1988，将其公开内容完整引用 于此作为参考。简单地说，在这些方法中合成了大量具有一次或多次 将要被导入克隆DNA的突变的双链寡核苷酸，并且被插入到将被诱变 的克隆DNA中。回收含有诱变DNA的克隆，评价由它们编码的多肽 的活性。
产生变体的另一种方法是装配PCR(assembly PCR)。装配PCR 涉及从小DNA片段的混合物装配PCR产物。大量不同的PCR反应在 同一小管中平行发生，一次反应的产物作为另一次反应的产物的引物。 装配PCR描述在：1996年7月9日提交的美国专利5,965,408，题 为”Method of DNA Reassembly by Interrupting Synthesis”，将其公开内 容完整引用于此作为参考。
仍然产生变体的另一种方法是有性PCR诱变。在有性PCR诱变中， 强制同源重组在体外发生于具有不同但高度相关DNA序列的DNA分 子之间，结果基于序列同源性的DNA分子之间发生随机断裂，随后在 PCR反应中通过引物延伸固定交换。有性PCR诱变描述在：Stemmer，W. P.，PNAS，USA，91：10747-10751，1994，将其公开内容完整引用于此作 为参考。简单地说，在这些方法中，用DNAse消化大量将被用于重组 的核酸，以产生具有平均大小为50-200核苷酸的片段。纯化具有期望 的平均大小的片段，且再次悬浮于PCR混合物中。PCR在有助于核酸 片段之间重组的条件下进行。例如，PCR可以通过如下进行：将纯化 的片段以10-30ng/：1的浓度再次悬浮于下述溶液中，其中每一种dNTP 为0.2mM、2.2mM MgCl2、50mM KCL、10mM Tris HCl、pH9.0和0.1％ Triton X-100的溶液中。每100∶1反应混合物加入2.5单位Taq聚合物， 用如下方式进行PCR：94℃ 60秒，50-55℃30秒，72℃30秒(30-45 次)和72℃5分钟。然而，应该意识到，这些参数当需要时可以有所 变化。在一些实施方案中，寡核苷酸可以被包括在PCR反应中。在其 它实施方案中，DNA聚合酶I的克列诺片段(Klenow fragment)可以 被用于第一组PCR反应中，Taq聚合物可以被用于随后的PCR反应组 中。分离重组序列，并且评价它们编码的多肽的活性。
也可以用体内诱变(in vivo mutagenesis)产生变体。在一些实施 方案中，通过在细菌株如大肠杆菌株中增殖相关序列产生相关序列中 的随机突变，所述细菌株在一种或多种DNA修复途径中发生了突变。 这些”增变”株比野生型亲本具有更高的随机突变率。在这些菌株中增 殖DNA将最终在该DNA中产生随机突变。适合用于体内诱变的增变 株描述在：PCR Publication No.WO 91/16427，于1991年10月31日出 版，题为“Methods for Phenotype Creation from Multiple Gene Populations”，将其公开内容完整引用于此作为参考。
也可以用盒式诱变(cassette mutagenesis)产生变体。在盒式诱变 中，用与天然序列不同的合成寡核苷酸”盒子”取代双链DNA分子的小 区域。寡核苷酸通常含有完全和/或部分随机化的天然序列。
递归集团诱变(recursive ensemble mutagenesis)也可以用来产生 变体。递归集团诱变是一种蛋白质工程(蛋白质诱变)算法，该算法 被用来开发产生不同群体的表型相关突变体，所述表型相关突变体的 成员在氨基酸序列上不同。该方法使用反馈机制来控制连续轮回的组 合盒式诱变。递归集团诱变描述在：Arkin，A.P.和Youvan，D.C.，PNAS， USA，89：7811-7815，1992，将其公开内容完整引用于此作为参考。
在一些实施方案中，用指数集团诱变(exponential ensemble mutagenesis)产生变体。指数集团诱变是一种用于产生高百分比的独 特和功能性突变体的组合文库的方法，其中残基小组中被随机化，以 便平行地在每一被改变的位置鉴别导致功能蛋白质的氨基酸。指数集 团诱变描述在：Delegrave，S.和Youvan，D.C.，Biotechnology Research，11： 1548-1552，1993，将其公开内容完整引用于此作为参考。随机和定点诱 变描述在：Arnold，F.H.，Current Opinion in Biotechnology，4：450-455， 1993，将其公开内容完整引用于此作为参考。
在一些实施方案中，用改组方法(shuffling procedure)产生变体， 其中编码不同多肽的多个核酸部分被融合到一起，产生编码嵌合多肽 的嵌合核酸序列，描述在：1996年7月9日提出申请的美国专利 5,965,408中，题为“Method of DNA Reassembly by Interupting Synthesis”，和美国专利5,939,250中，1996年5月2日提出申请，题 为“Production of Enzymes Having Desired Activities by Mutagenesis”， 将它们都引用于此作为参考。
B氨基酸序列的多肽的变体可以是这样的变体，即其中B组氨基 酸序列的多肽的一个或多个氨基酸残基被保守或非保守氨基酸残基 (优选地一个保守氨基酸残基)取代，这样取代的氨基酸残基可以是 或者不是由遗传密码子编码的残基。
保守置换是那些用具有类似特性的另一个氨基酸取代多肽中的给 定氨基酸。通常认为的保守置换是下述取代：用另一个脂族氨基酸取 代脂族氨基酸如丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸；用苏氨酸取代 丝氨酸，或反之亦然；用另一个酸性残基取代酸性残基，如天冬氨酸 和谷氨酸；用另一个具有酰胺基团的残基取代具有酰胺基团的残基， 如天冬酰胺和谷氨酰胺；用另一个碱性残基交换碱性残基，如赖氨酸 和精氨酸；用另一个芳族残基取代芳族残基，如苯丙氨酸、酪氨酸。
其它变体是那些其中B组氨基酸序列的多肽的一个或多个氨基酸 残基包括取代基的变体。
仍然地，其它的变体是那些其中多肽与另一种化合物结合的变体， 例如增加多肽的半衰期的化合物(例如聚乙二醇)。
其它变体是那些其中其它的氨基酸被融合到多肽上的变体，例如 前导序列、分泌序列、前蛋白序列或有助于多肽的纯化、富集或稳定 的序列。
在一些实施方案中，片段、衍生物和类似物保持与B组氨基酸序 列和与其基本上同一的序列的多肽系统的生物功能或活性。在其它实 施方案中，片段、衍生物或类似物包括前蛋白，这样片段、衍生物或 类似物可以通过前蛋白部分的裂解激活，以产生活性多肽。
本发明的另一个方面是多肽或其片段，其与如下序列的多肽之一 具有至少大约50％，至少大约55％，至少大约60％，至少大约65％， 至少大约70％，至少大约75％，至少大约80％，至少大约85％、至少 大约90％、至少大约95％或高于大约95％同源性的序列：B组氨基酸 序列和与其基本上同一的序列，或其包括至少大约5，10，15，20，25， 30，35，40，50，75，100或150个连续氨基酸的片段。同源性可以用 上面描述的任一种程序来确定，上面描述的程序对齐将比较的多肽或 片段，并且确定它们之间的氨基酸同一性或类似性程度。应该意识到， 氨基酸”同源性”包括保守氨基酸置换，如上面所描述的那些。
与如下序列的多肽之一具有同源性的多肽或片段可以使用上面描 述的技术通过分离编码它们的核酸获得：B组氨基酸序列，和与其基 本上同一的序列，或其包括至少大约5，10，15，20，25，30，35，40， 50，75，100或150个连续氨基酸的片段。
另外，同源的多肽或片段可以通过生物化学富集或纯化方法获得。 潜在的同源多肽或片段的序列可以通过蛋白水解消化、凝胶电泳和/或 微量测序确定。预期同源的多肽或片段的序列可以使用上面所描述的 任一种程序与如下序列的多肽之一比较：B组氨基酸序列，和与其基 本上同一的序列，或其包括至少大约5，10，15，20，25，30，35，40， 50，75，100或150个连续氨基酸的片段。
本发明的另一方面是一种分析方法，用于鉴定B组氨基酸序列和 与其基本上同一的序列的片段或变体，它们保留了B组氨基酸序列和 与其基本上同一的序列的多肽的酶功能。例如，所述多肽的片段或变 体可以被用来催化生化反应，这表明片段或变体保留了B组氨基酸序 列中的多肽的酶活性。
确定变体的片段是否保留了B组氨基酸序列和与其基本上同一的 序列的多肽的酶活性的分析方法包括如下步骤：将多肽片段或变体与 底物分子在允许多肽片段或变体发挥作用的条件下接触，检测底物水 平是否有所降低，或者多肽和底物之间反应的特定反应产物的水平是 否有所增加。
B组氨基酸序列，和与其基本上同一的序列，或其包括至少大约5， 10，15，20，25，30，35，40，50，75，100或150个连续氨基酸的片 段的多肽可以用于多种应用中。例如，其多肽或片段可用于催化生化 反应。根据本发明的一方面，提供了一种方法，所述方法使用B组氨 基酸序列和与其基本上同一的序列的多肽，或编码这样的多肽的多核 苷酸来水解糖苷键。在这样的方法中，将含有糖苷键的底物(例如淀 粉)与B组氨基酸序列和与其基本上同一的序列的多肽之一接触，条 件是有助于糖苷键的水解。
B组氨基酸序列，和与其基本上同一的序列，或其包括至少大约5， 10，15，20，25，30，35，40，50，75，100或150个连续氨基酸的片 段的多肽，也可以被用于淀粉的液化和糖化中。使用本发明的多肽或 其片段，液化可以在比先前的酶所用的pH更低的pH下进行。在一个 实施方案中，液化在pH 4.5进行。另外，与这些方法中先前所用的酶 相比，本发明的多肽或其片段对钙的依赖性更低。在液化中用淀粉酶 来水解淀粉。在优选的实施方案中，本发明的多肽或其片段在90-95℃ 是热稳定的。
B组氨基酸序列，和与其基本上同一的序列，或其包括至少大约5， 10，15，20，25，30，35，40，50，75，100或150个连续氨基酸的片 段的多肽，也可以用来产生与多肽或片段特定结合的抗体。所得到的 抗体可以用在免疫亲和层析方法中，以分离或纯化多肽，或者确定生 物样品中是否存在多肽。在这样的方法中，将蛋白质制剂如提取物， 或者生物样品与能与如下序列的多肽之一特定结合的抗体接触：B组 氨基酸序列，和与其基本上同一的序列，或其包括至少大约5，10，15， 20，25，30，35，40，50，75，100或150个连续氨基酸的片段。
在免疫亲和方法中，抗体被附着在固体载体上，如珠子或其它柱 基质上。蛋白质制剂被置于与抗体接触，条件是抗体与B组氨基酸序 列，和与其基本上同一的序列，或其片段的多肽之一特定地结合。在 洗涤以去除非特定地结合的蛋白质之后，洗脱出特定结合的多肽。
可以用本技术领域普通技术人员熟悉的多种技术中的任一种来确 定蛋白质在生物样品中结合抗体的能力。例如，可以通过用可检测的 标记物如荧光试剂、酶标记物或放射性同位素标记抗体来确定结合。 另外，抗体与蛋白质的结合可以使用其上具有可检测标记物的第二抗 体来检测。特定的方法方法包括酶联免疫吸附测定(ELISA分析)、夹 心分析、放射免疫分析和Western印迹。
针对如下序列的多肽产生的多克隆抗体可以通过将多肽直接注射 到动物体内和通过将多肽施用于动物例如非人动物获得：B组氨基酸 序列，和与其基本上同一的序列，或其包括至少大约5，10，15，20， 25，30，35，40，50，75，100或150个连续氨基酸的片段。然后，这 样获得的抗体将与多肽自身结合。用这样方式，甚至仅编码多肽的一 个片段的序列可以用于产生抗体，所述抗体可能与完整的天然多肽结 合。这样的抗体然后被用于从表达该多肽的细胞分离多肽。
为了制备单克隆抗体，可以使用能提供连续细胞系培养产生抗体 的任何技术。实例包括杂交瘤技术(Kohler和Milstein，Nature，256： 495-497，1975，将其公开内容引用于此作为参考)，三系杂交瘤技术 (trioma技术)，人B-细胞杂交瘤技术(Kozbor等人，Immunology Today 4：72，1983，将其公开内容引用于此作为参考)，以及EBV-杂交瘤技术 (Cole等人，1985，Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy，Alan R. Liss，Inc.，77-96页，将其公开内容引用于此作为参考)。
描述单链抗体产生的技术(美国专利4,946,778，将其公开内容引 用于此作为参考)可以适用于产生B组氨基酸序列，和与其基本上同 一的序列，或其包括至少大约5，10，15，20，25，30，35，40，50， 75，100或150个连续氨基酸的片段的单链抗体。另外，转基因小鼠可 以被用于表达这些多肽或其片段的人源化抗体。
针对B组氨基酸序列，和与其基本上同一的序列，或其包括至少 大约5，10，15，20，25，30，35，40，50，75，100或150个连续氨 基酸的片段的多肽而产生的抗体可以被用于从其它生物体和样品中筛 选类似多肽。在这样的技术中，将来自生物体的多肽与抗体接触，并 且检测那些与抗体特定地结合的多肽。上面所描述的任何技术可以被 用来检测抗体结合。一种这样的筛选分析方法描述在“Methods for Measuring Cellulase Activities”，Methods in Enzymology，160卷，87-116 页，将其完整引用于此作为参考。
正如此处所用，术语“如下序列中所阐明的核酸序列：SEQ ID NO.： 1，3，5，9，11，13，15，17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43， 45，47，49，51，53，55，57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83， 85，87，89，91，93，95，97，99，101，103，105，107，109，111，113，115，117， 119，121，123，125，127，129，131，133，135，137，139，141，143，145，147， 149，151，153，155，157，159，161，163，165，167，169，171，173，175，177， 179，181，183，185，187，189，191，193，195，197，199，201，203，205，207， 209，211，213，215，217，219，221，223，225，227，229，231，233，235，237， 239，241，243，245，247，249，251，253，255，257，259，261，263，265，267， 269，271，273，275，277，279，281，283，285，287，289，291，293，295，297， 299”包括如下序列的核苷酸序列：A组核酸序列，和与其基本上同一 的序列，以及与A组核酸序列及其片段同源的序列，和与所有前述序 列互补的序列。片段包括如下序列的部分：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13， 15，17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51，53， 55，57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91，93， 95，97，99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123，125， 127，129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153，155， 157，159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183，185， 187，189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213，215， 217，219，221，223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243，245， 247，249，251，253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273，275， 277，279，281，283，285，287，289，291，293，295，297和299，包括A组核 酸序列，和与其基本上同一的序列的至少10，15，20，25，30，35， 40，50，75，100，150，200，300，400或500个连续核苷酸。A组核 酸序列，和与其基本上同一的序列的同源序列和片段，是指与这些序 列具有至少99％，98％，96％，95％，90％，85％，80％，75％，70％， 65％，60％，55％或50％同源性的序列。同源性可以使用此处描述的任 一种计算机程序和参数来确定，包括具有缺省参数的FASTA版本 3.0t78。同源序列也包括RNA序列，其中尿嘧啶取代A组核酸序列中 所阐明的核酸序列中的胸腺嘧啶。可以使用此处描述的任何方法获得 同源序列，或者可以从校正测序误差获得同源序列。应该意识到，A 组核酸序列和与其基本上同一的序列中所阐明的核酸序列，可以以传 统的单字母格式表示(参见Stryer，Lubert.Biochemistry，第三版，W.H Freeman & Co.，New York的封三)或者以在序列中记录核苷酸同一性 的任何其它格式表示。
正如此处所用，术语“如下序列中所阐明的多肽序列：SEQ ID NO.： 2，4，6，10，12，14，16，18，20，22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44， 46，48，50，52，54，56，58，60，62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84， 86，88，90，92，94，96，98，100，102，104，106，108，110，112，114，116，118， 120，122，124，126，128，130，132，134，136，138，140，142，144，146，148， 150，152，154，156，158，160，162，164，166，168，170，172，174，176，178， 180，182，184，186，188，190，192，194，196，198，202，204，206，208，210， 212，214，216，218，220，222，224，226，228，230，232，234，236，238，240， 242，244，246，248，250，252，254，256，258，260，262，264，266，268，270， 272，274，276，278，280，282，284，286，288，290，292，294，296，298”包括 如下序列的多肽序列：B组氨基酸序列，和与其基本上同一的序列， 它们由如下序列中的序列编码：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16，18， 20，22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56，58， 60，62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96，98， 100，102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126，128 ， 130，132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156，158， 160，162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186，188， 190，192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218，220， 222，224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248，250， 252，254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278，280， 282，284，286，288，290，292，294，296，298中所阐明的序列，与B组氨 基酸序列同源的多肽序列，和与其基本上同一的序列，或任何前述序 列的片段。同源的多肽序列指与B组氨基酸的多肽序列之一具有至少 99％，98％，97％，96％，95％，90％，85％，80％，75％，70％，65％， 60％，55％或50％同源性的序列。同源性可以使用此处描述的任一种计 算机程序和参数来确定，包括具有缺省参数或任何被修改参数的 FASTA版本3.0t78。可以使用此处描述的任何方法获得同源序列，或 者可以从校正测序误差获得同源序列。多肽片段包括B组氨基酸序列， 和与其基本上同一的序列的多肽的至少5，10，15，20，25，30，35， 40，50，75，100或150个连续氨基酸。应该意识到，B组氨基酸序列 和与其基本上同一的序列中所阐明的多肽序列，可以以传统的单字母 格式或三字母格式表示(参见Stryer，Lubert.Biochemistry，第三版，W.H Freeman & Co.，New York的封三)或者以在序列中叙述多肽同一性的 任何其它格式表示。
本技术领域普通技术人员应该可以意识到，SEQ ID NO.：1，3，5，9， 11，13，15，17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49， 51，53，55，57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89， 91，93，95，97，99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，119，121， 123，125，127，129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151， 153，155，157，159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181， 183，185，187，189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，211， 213，215，217，219，221，223，225，227，229，231，233，235，237，239，241， 243，245，247，249，251，253，255，257，259，261，263，265，267，269，271， 273，275，277，279，281，283，285，287，289，291，293，295，297，299中所 阐明的核酸序列，和SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16，18，20，22，24，26， 28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56，58，60，62，64，66， 68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96，98，100，102，104， 106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126，128，130，132，134， 136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156，158，160，162，164， 166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186，188，190，192，194， 196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218，220，222，224，226， 228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248，250，252，254，256， 25 8，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278，280，282，284，286， 288，290，292，294，296，298中所阐明的多肽序列可以在任何计算机可 以阅读且访问的介质上被储存、记录和操作。正如此处所用，词语“被 记录”和“被储存”指将信息储存在计算机介质上的过程。熟练技术 人员将可以容易地采用任何当前已知的方法，将信息记录在计算机可 读的介质上，以便产生包括如下序列的制品：A组核酸序列和与其基 本上同一的序列中所阐明的一个或多个核酸序列，B组氨基酸序列和 与其基本上同一的序列中所阐明的一个或多个多肽序列。本发明的另 一个方面是其上储存了A组核酸序列和与其基本上同一的序列中所阐 明的至少2，5，10，15或20个核酸序列的计算机可读介质。
本发明的另一方面是其上已经储存了A组核酸序列和与其基本上 同一的序列中所阐明的一个或多个核酸序列的计算机可读介质。本发 明的另一方面是其上储存了B组氨基酸序列和与其基本上同一的序列 中所阐明的至少一个或多个多肽序列的计算机可读介质。本发明的另 一个方面是其上储存了如上所阐明的至少2，5，10，15或20个序列 的计算机可读介质。
计算机可读介质包括磁性可读介质、光学可读介质、电子可读介 质和磁性/光学介质。例如，计算机可读介质可以是硬盘、软盘、磁带、 CD-ROM、数字通用盘(DVD)、随机存取存储器(RAM)或只读存 储器(ROM)以及本技术领域已知的其它类型的其它介质。
本发明的实施方案包括系统(例如基于因特网的系统)，尤其是存 储且操纵此处描述的序列信息的计算机系统。在图1中以方块图形式 说明了计算机系统100的一个实例。正如此处所用，”计算机系统”指 硬件部分、软件部分和数据存储部分，所述计算机系统用于分析如下 序列：A组核酸序列和与其基本上同一的序列中所阐明的核酸序列的 核苷酸序列，或B组氨基酸序列中所阐明的多肽序列。计算机系统100 通常包括一个用于处理、访问和操纵序列数据的处理器。处理器105 可以是任何已知类型的中央处理器单元，如Intel公司的奔腾III，或 Sun、Motorola、Compag、AMD或国际商业机器公司(IBM公司)的 类似处理器。
通常计算机系统100是一种具有通用目的的系统，其包括处理器 105，和用于储存数据的一个或多个内部数据存储部分110，和一个或 多个用于恢复数据存储部分上存储的数据的数据恢复设备。熟练技术 人员可以容易地意识到，当前可获得的任一种计算机系统是适合的。
在一个特定实施方案中，计算机系统100包括与总线相连的处理 器105，所述总线与主存储器115相连(优选地为RAM)，和一个或多 个内部数据存储设备110，如硬盘驱动器和/或其上已经存储了数据的 其它计算机可读介质。在一些实施方案中，计算机系统100进一步包 括一个或多个数据恢复设备118，用于读取存储在内部数据存储设备 110上的数据。
数据恢复设备118表示，例如软盘驱动器、光盘驱动器、磁带驱 动器或能连接远程数据存储系统(如通过因特网)等的调制解调器。 在一些实施方案中，内部数据存储设备110是可移动的计算机可读介 质，如包括控制逻辑和/或其上记录了数据的软盘、光盘、磁带等等。 计算机系统100可以有利地包括或通过适当的软件被编程，以便数据 存储部分一旦插入到数据恢复设备就从其上阅读控制逻辑和/或数据。
计算机系统100包括显示器120，其用于将输出显示给计算机用 户。也应该注意到，计算机系统100可以被连接到因特网或广域网中 的其它计算机系统125a-c上，以便集中访问计算机系统100。
访问和处理如下序列的核苷酸的软件(如搜索工具、比较工具和 建模工具等)在执行过程中可以驻留在主存储器115中：A组核酸序 列和与其基本上同一的序列中所阐明的核酸序列，或B组氨基酸序列 和与其基本上同一的序列中所阐明的多肽序列。
在一些实施方案中，计算机系统100可以进一步包括序列比较算 法，用于将存储在计算机可读介质上的A组核酸序列和与其基本上同 一的序列中所阐明的核酸序列，或B组氨基酸序列和与其基本上同一 的序列中所阐明的多肽序列，与存储在计算机可读介质上的参考核苷 酸或多肽序列进行比较。“序列比较算法”指一个或单个程序，它们在 计算机系统100上(本地或远程)运行，以便将核苷酸序列与数据存 储设备中所存储的其它核苷酸序列和/或化合物进行比较。例如，序列 比较算法可以将存储在计算机可读介质上的A组核酸序列和与其基本 上同一的序列中所阐明的核酸序列，或B组氨基酸序列和与其基本上 同一的序列中所阐明的多肽序列，与存储在计算机可读介质上的参考 序列进行比较，以鉴别同源性或结构基序。在本发明说明书中任何地 方标明的多种序列比较程序尤其期望用于本发明的这一方面。蛋白质 和/或核酸序列同源性可以用本技术领域已知的多种序列比较算法和程 序来评价。这样的算法和程序包括但决不限于：TBLASTN、BLASTP、 FASTA、TFASTA和CLUSTALW(Pearson和Lipman，Proc.Natl.Acad. Sci.USA 85(8)：2444-2448，1988；Altschul等人，J.Mol.Biol.215(3)： 403-410，1990；Thompson等人，Nucleic Acids Res.22(2)：4673-4680， 1994；Higgins等人，Methods Enzymol.266：383-402，1996；Altschul等人， J.Mol.Biol.215(3)：403-410，1990；Altschul等人，Nature Genetics 3： 266-272，1993)。
同源性或同一性通常用序列分析软件来测定(例如Genetics Computer Group，University of Wisconsin Biotechnology Center，1710 University Avenue，Madison，WI 53705的序列分析软件包)。该软件通过 给各种缺失、取代和其它修饰分配同源性程度来匹配类似序列。在上 下文中对于两种或多种核酸或多肽序列，术语”同源性”和”同一性”指相 同或具有特定百分比的氨基酸残基或核苷酸的两个或多个序列或子序 列，当在同一比较窗口或指定区域内尽可能一致地比较或对齐时，所 述氨基酸残基或核苷酸是相同的，这正如用大量序列比较算法或通过 人工对齐和视觉观察所测定那样。
对于序列比较，通常一个序列作为参考序列，测试序列与其进行 比较。当使用序列比较算法时，将测试序列和参考序列输入计算机， 如果需要，指定子序列坐标系，指定序列算法程序参数。然后用序列 比较算法基于程序参数计算测试序列相对于参考序列的序列同一性百 分比。
正如此处所用，“比较窗口(comparison window)”是指包括选自 20～600，通常为大约50～大约200，更通常大约100～大约150的邻 接位置的任一个数目的片断，在这些片断中，在两个序列被最优地对 比后，一个序列可以与具有相同数目的邻接位置的参考序列进行比较。 用于比较的序列对比方法在本领域是熟知的。可以进行最优的序列对 比比较，如通过local homology algorithm，由Smith & Waterman，Adv. Appl.Math.2：482，1981提供；通过homology alignment algorithm，由 Needleman & Wunsch，J.Mol.Biol 48：443，1970提供；通过search for similarity method，由person & Lipman，Proc.Nat’l.Acad.Sci.USA 85：2444，1988提供，通过这些算法的计算机化实施(Wisconsin Genetics Software Package，Genetics Computer Group，575 Science Dr.，Madison， WI中的GAP、BESTFIT、FASTA和TFASTA)，或通过人工对比和视 觉观察。例如，用于确定同源性或同一性的其它算法包括，除了BLAST 程序(Basic Local Alignment Search Tool at the National Center for Biological Information)、ALIGN、AMAS(Analysis of Multiply Aligned Sequences)、AMPS(Protein Multiple Sequence Alignment)、ASSET (Aligned Segment Statistical Evaluation Tool)、BANDS、BESTSCOR、 BIOSCAN(Biological Sequence Comparative Analysis Node)、BLIMPS (Blocks IMProved Searcher)、FASTA、Intervals & Points、BMB、 CLUSTAL V、CLUSTAL W、CONSENSUS、LCONSENSUS、 WCONSENSUS、Smith-Waterman algorithm、DARWIN、Las Vegas algorithm、FNAT(Forced Nucleotide Alignment Tool)、Framealign、 Framesearch、DYNAMIC、FILTER、FSAP(Fristensky Sequence Analysis Package)、GAP(Global Alignment Program)、GENAL、GIBB S、 GenQuest、ISSC(Sensitive Sequence Comparison)、LALIGN(Local Sequence Alignment)、LCP(Local Content Program)、MACAW(Multiple Alignment Construction & Analysis Workbench)、MAP(Multiple Alignment Program)、MBLKP、MBLKN、PIMA(Pattern-Induced Multi-sequence Alignment)、SAGA(Sequence Alignment by Genetic Algorithm)和WHAT-IF。这些对比程序也可以用来筛选基因组数据库， 以区分序列基本上一样的多核苷酸序列。许多基因组数据库是可利用 的，例如，人类基因组的实质部分可以作为人类基因组测序项目的一 部分来利用(J.Roach， http：//weber.u.Washington.edu/～roach/human genome progess 2.html) (Gibbs，1995)。至少21个其它基因组已经被测序.例如包括 M.genitalium(Fraser等人，1995)、M.jannaschii(Bult等人.1996)、 H.influenzae(Fleischmann等人，1995)、大肠杆菌(Blattner等人，1997)和 酵母(S.cerevisiae)(Mewes等人，1997)和果蝇(D.melanogaster)(Adams 等人，2000)。在模型生物的基因组的测序上已经取得了显著的进步，如 鼠、C.elegans和Arabadopsis sp。几个含有注解有某些功能信息的基因 组信息由不同的组织所保存，可以通过因特网访问，例如 http：//www.tigr.org/tdb； http：//www.genetics.wisc.edu； http：//genome-www.stanford.edu/～ball； http：//hiv-web.lanl.gov； http：//www.ncbi.nlm.nih.gov； http：//www.ebi.ac.uk； http：//Pasteur.fr/other/biology；和 http：//www.genome.wi.mit.edu。
一个有用算法的实例是BLAST和BLAST 2.0算法，对它们的描述 分别在Altschul等人，Nuc.Acids Res.25：3389-3402，1977和Altschul等 人，J.Mol.Biol.215：403-410，1990中。完成BLAST分析的软件可以通过 National Center for Biotechnology Information ( http：//www.ncbi.nlm.nih.gov/)公开获得。该算法首先涉及通过识别查 询序列中的长度W的短单词来识别高计分序列对(HSP)，当在数据库 序列中用相同长度的单词对比时，该高记录序列对或者匹配或者满足 一些正阈值T。T是指相邻单词分数阈值(Altschul等人，见上文)。这 些起始的相邻单词击中作为寻找包括它们的更长HSP的初始搜索的种 子。这些单词击中在两个方向沿着每一个序列一直延伸，直到累积对 比值增加。对于核苷酸序列，用参数M(一对匹配残基的得分；通常 ＞0)对累积值进行计算。对于氨基酸序列，用计分矩阵来计算累积值。 当发生下列情况时暂停在每一方向的单词击中的延伸：累积对比值随 着数量X从其最大获得值而下降；由于一个或多个负得分残基对比值 的累积，累积值达到零或零以下；或者达到了任一序列的末端。BLAST 算法参数w、T和X确定对比的选择性和速度。BLASTN程序(用于 核苷酸序列)使用的缺省值为：单词长度(W)为11，期望值(E)为 10，M＝5，N＝-4，以及比较两个链。对于氨基酸序列，BLASTP程 序使用的缺省值为：单词长度为3，期望值(E)为10，BLOSUM62 计分矩阵(参考Henikoff & Henikoff，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 89：10915，1989)对比值(B)为50，期望值(E)为10，M＝5，N＝-4， 以及比较两个链。
BLAST算法也进行两个序列之间相似性的统计分析(如参考 Karlin & Altchul，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 90：5873，1993)。由BLAST 算法提供的相似性的一个测量值是最小总计几率(P(N))，该值提供了几 率指标，通过它两个核苷酸或氨基酸序列之间的匹配将偶然地发生。 例如，如果测试核酸与参考核酸的比较中最小总计几率小于大约0.2， 更优选小于大约0.01，最优选小于大约0.001，那么核酸被认为与参考 序列是相似的。
在一个实施方案中，用Basic Local Alignment Search Tool (”BLAST”)来评价蛋白质和核酸序列同源性。尤其是，使用五个特 定BLAST程序来完成下述任务：
(1)BLASTP和BLAST3将氨基酸查询序列与蛋白质序列数据库 进行比较；
(2)BLASTN将核苷酸查询序列与核苷酸序列数据库进行比较；
(3)BLASTX将查询核苷酸序列(两个链)的六读框概念翻译产 物与蛋白质序列数据库进行比较；
(4)TBLASTN将查询蛋白质序列与以总共六个阅读框(两个链) 翻译的核苷酸序列数据库进行比较；和
(5)TBLASTX将核苷酸查询序列的六读框翻译与核苷酸序列数 据库的六读框翻译进行比较。
BLAST程序通过识别查询氨基酸或核酸序列与测试序列之间相似 片断，在此处被称作”高计分片断对”，来识别同源序列，其中测试序 列优选从蛋白质或核酸序列数据库获得。高计分片断对优选通过计分 矩阵方法来识别(即对比)，其中大部分方法在本领域是已知的。优选 地，所用的计分矩阵是BLOSUM62矩阵(Gonnet等人，Science 256：1443-1445，1992；Henikoff和Henikoff，Proteins 17：49-61，1993)。不 太优选地，也可以使用PAM或PAM250矩阵(如参考Schwartz和 Dayhoff编著，1978，Matrices for Detecting Distance Relationships：Atlas of Protein Sequence and Structure，Washington：National Biomedical Research Foundation)。BLAST程序可以通过美国National Library of Medicine获得，例如www.ncbi.nlm.nih.gov。
可以根据序列长度和所研究的同源性程度对上述算法所用的参数 进行修改。在一些实施方案中，在没有用户说明书的情况下，这些参 数可以是这些算法所用的缺省参数。
图2是说明方法200的一个实施方案的流程图，该方法200用于 将新核苷酸或蛋白质序列与序列数据库进行比较，以便确定新序列和 数据库中序列之间的同源性水平。序列数据库可以是存储在计算机系 统100中的专用数据库，或者可以是公开数据库，如通过因特网获得 的GENBANK数据库。
方法200在起点状态201开始，然后进展至状态202，其中将被比 较的新数据库被存储在计算机系统100的存储器中。正如上面所讨论 的，存储器可以是任何类型的存储器，包括RAM或内部存储设备。
方法200然后进展至状态204，其中打开序列数据库以便用于分析 和比较。方法200然后进展至状态206，其中存储在数据库中的第一序 列被读入计算机上的存储器中。然后在状态210进行比较，以确定第 一序列是否与第二序列相同。重要的是要注意到，这一步不限于在新 序列和数据库中的第一序列之间进行精确的比较。用于比较两个核苷 酸或蛋白质序列的著名方法对于本技术领域普通技术人员是已知的， 即使它们不相同。例如，可以将间隙引入序列中，以便提高两个测试 序列之间的同源性水平。比较过程中控制间隙或其它特征是否被引入 序列中的参数通常通过计算机系统的用户输入。
一旦两个序列的比较已经在状态210进行，就要在状态210做出 一个判断，即两个序列是否相同。当然，术语”相同”不限于完全相同 的序列。在方法200中，处于由用户输入的同源参数内的序列将被记 录为”相同”。
如果做出的判断是两个序列是相同的，方法200进展至状态214， 其中来自数据库的序列的名称被显示给用户。该状态通知用户，具有 所显示名称的序列满足输入的同源性约束。一旦所存储的序列的名称 被显示给用户，方法200就进展至判断状态218，其中要做出判断，即 数据库中是否存在更多的序列。如果数据库中不存在更多的序列，那 么方法200就在终止状态220结束。然而，如果数据库中存在更多的 序列，那么方法200就进展至状态224，其中指针被指向数据库中的下 一个序列，这样该序列可以与新序列进行比较。用这种方式，新序列 被对齐，并且与数据库中的每一序列进行比较。
应该注意到，如果在判断状态212已经做出这两个序列不同源的 判断，那么方法200将立即进展至判断状态218，以便确定数据库中是 否有任何其它序列可进行比较。
因此，本发明的一个方面是一个计算机系统，该系统包括一个处 理器；一个其上已经存储了如下述序列中所阐明的序列的数据存储设 备：A组核酸序列和与其基本上同一的序列中所阐明的核酸序列，或B 组氨基酸序列和与其基本上同一的序列中所阐明的多肽序列；一个其 上已经可检索地存储了将要与如下序列中所阐明的序列进行比较的参 考核苷酸序列或多肽序列：A组核酸序列和与其基本上同一的序列中 所阐明的核酸序列，或B组氨基酸序列和与其基本上同一的序列中所 阐明的多肽序列；和一个进行比较的序列比较器。序列比较器可以表 明所要比较的序列之间的同源性，或者可以鉴别上面所描述的A组核 酸序列和与其基本上同一的序列的核酸密码子，或B组氨基酸序列和 与其基本上同一的序列中所阐明的多肽序列中的结构基序，或者它可 以鉴别相对于这些核酸密码子和多肽密码子的序列中的结构基序。在 一些实施方案中，数据存储设备上可以存储如下序列中所阐明的至少 2，5，10，15，20，25，30或40或更多个序列：A组核酸序列和与其 基本上同一的序列中所阐明的核酸序列，或B组氨基酸序列和与其基 本上同一的序列中所阐明的多肽序列。
本发明的另一个方面是一种方法，用于确定如下序列中所阐明的 序列和参考核苷酸序列之间的同源性水平：A组核酸序列和与其基本 上同一的序列中所阐明的核酸序列，或B组氨基酸序列和与其基本上 同一的序列中所阐明的多肽序列。该方法包括通过使用一个确定同源 性水平的计算机程序读取核酸密码子或多肽密码子，和参考核苷酸或 多肽序列，用该计算机程序确定核酸密码子或多肽密码子和参考核苷 酸或多肽序列之间的同源性。该计算机程序可以是用于确定同源性水 平的大量计算机程序中的任一个，包括此处特别列举的那些(例如具 有缺省参数或任何修改参数的BLAST2N)。该方法可以用上面所描述 的计算机系统来执行。该方法也可以通过使用计算机程序读取至少2， 5，10，15，20，25，30或40或更多个上面所描述的A组核酸序列中 所阐明的核酸序列，或B组氨基酸序列中所阐明的多肽序列并且确定 核酸密码子或多肽密码子与参考核苷酸序列或多肽序列之间的同源性 来进行。
图3是说明计算机中方法250的一个实施方案的流程图，该方法 用于确定两个序列是否同源。方法250在开始状态252开始，然后进 展至状态254，其中将要被比较的第一序列被存储在存储器上。将要被 比较的第二序列然后在状态256被存储在存储器上。方法250然后进 展至状态260，其中读取第一序列中的第一个字母，然后进展至状态 262，其中读取第二序列的第一个字母。应该理解到，如果该序列是核 苷酸序列，那么该字母将通常是A，T，C，G或U。如果该序列是蛋白质 序列，那么优选地它是单字母氨基酸密码子，这样可以容易地比较第 一和第二序列。
然后在判断状态264做出这两个字母是否相同的判断。如果它们 相同，那么方法250进展至状态268，其中读取第一和第二序列中的下 一个字母。然后做出下一个字母是否相同的判断。如果它们相同，那 么方法250继续这一循环，直到两个字母不相同。如果做出的判断是 下两个字母不相同，那么方法250进展至判断状态274，以确定是否有 更多的字母或者序列可以读取。
如果没有更多的字母可以读取，那么方法250进展至状态276，其 中第一和第二序列之间的同源性水平被显示给用户。同源性水平通过 计算第一序列中相同序列之间的字母在总序列中的百分比来确定。因 此，如果第一个含有100个核苷酸的序列中的每一字母与第二序列中 的每一字母进行对齐，同源性将是100％。
另外，计算机程序可以是这样的计算机程序，即将本发明中所阐 明的核酸序列的核苷酸序列与一个或多个参考核苷酸序列进行比较， 以便确定A组核酸序列和与其基本上同一的序列的核酸密码子是否与 参考核酸序列在一个或多个位置上不同。任选地这样的程序记录了被 插入、删除或取代的核苷酸的长度和相对于参考多核苷酸序列或A组 核酸序列和与其基本上同一的序列中所阐明的核酸序列的序列的同一 性。在一个实施方案中，计算机程序可以是这样的程序，即确定A组 核酸序列和与其基本上同一的序列中所阐明的核酸序列相对于参考核 苷酸序列是否含有单核苷酸多态现象(SNP)。
因此，本发明的另一个方面是一种方法，用于确定A组核酸序列 和与其基本上同一的序列中所阐明的核酸序列是否与参考核苷酸序列 在一个或多个核苷酸上不同，所述方法包括如下步骤：通过鉴别核酸 序列间差异的计算机程序读取核酸密码子和参考核苷酸序列，用该计 算机程序鉴别核酸密码子和参考核苷酸序列之间的差异。在一些实施 方案中，计算机程序是鉴别单核苷酸多态现象的程序。该方法可以通 过上面说明的计算机程序和图3中所说明的方法来完成。该方法也可 以通过用计算机程序读取A组核酸序列和与其基本上同一的序列中所 阐明的至少2，5，10，15，25，30或40或更多个核酸序列，以及参 考核苷酸序列，并且用该计算机程序鉴别核酸密码子和参考核苷酸序 列之间的差异来进行。
在其它实施方案中，基于计算机的系统可以进一步包括一个鉴别 器，用于鉴别A组核酸序列和与其基本上同一的序列中所阐明的核酸 序列，或B组氨基酸序列和与其基本上同一的序列中所阐明的多肽序 列中的特征。
“鉴别器”指一个或多个程序，所述程序鉴别A组核酸序列和与 其基本上同一的序列中所阐明的核酸序列，或B组氨基酸序列和与其 基本上同一的序列中所阐明的多肽序列中的某些特征。在一个实施方 案中，鉴别器可以包括一个程序，该程序鉴别用于在A组核酸序列和 与其基本上同一的序列中所阐明的核酸序列中鉴别开放阅读框。
图4是说明鉴别器方法300的一个实施方案的流程图，该方法用 于检测序列中某个特征的存在。方法300在起始状态302开始，然后 进展至状态304，其中将被检查特征的第一序列被存储到计算机系统 100中的存储器115中。方法300然后进展至状态306，其中开放序列 特征的数据库。这样的数据库将包括每一特征属性连同特征名称的列 表。例如，特征名称可以是“起始密码子”，属性将是“ATG”。另一 个实例将是特征名称“TAATAA盒”，特征属性将是“TAATAA”。这 样的一个数据库的实例是由University of Wisconsin Genetics Computer Group( www.gcg.com)产生的。另外，这些特征是结构多肽基序，如α- 螺旋、β-片层或功能多肽基序，如酶活性位点、螺旋-转角-螺旋基序或 本技术领域普通技术人员已知的其它基序。
一旦特征数据库在状态306开放，方法300进展至状态308，其中 从数据库读取第一特征。然后在状态310进行第一特征的属性与第一 序列的比较。在状态316进行判断，即在第一序列中是否存在该特征 的属性。如果存在该属性，那么方法300进展至状态318，其中所存在 的特征的名称被显示给用户。
方法300然后进展至判断状态320，其中做出数据库中是否存在更 多特征的判断。如果不存在更多的特征，方法300在结束状态324结 束。然而，通过数据库中存在更多的特征，那么方法300在状态326 读取下一个序列特征，并且循环回到状态310，其中将下一特征的属性 再次与第一序列进行比较。
应该注意到，如果在判断状态316中发现第一序列中不存在特征 属性，那么方法300直接进展至判断状态320，以便确定数据库中是否 存在更多的特征。
因此，本发明的另一方面是一种方法，用于鉴别A组核酸序列和 与其基本上同一的序列中所阐明的核酸序列，或B组氨基酸序列和与 其基本上同一的序列中所阐明的多肽序列中的特征，该方法包括通过 在其中鉴别特征的计算机程序读取核酸密码子或多肽密码子，并且用 该程序在核酸密码子内鉴别特征。在一个实施方案中，计算机程序包 括一个鉴别开放阅读框的计算机程序。该方法可以通过用计算机程序 读取A组核酸序列和与其基本上同一的序列中所阐明的一个单一序列 或者至少2，5，10，15，25，30或40或更多个核酸序列，或B组氨 基酸序列和与其基本上同一的序列中所阐明的多肽序列，并且用该计 算机程序鉴别核酸密码子或多肽密码子内的特征来进行。
A组核酸序列和与其基本上同一的序列中所阐明的核酸序列，或B 组氨基酸序列和与其基本上同一的序列中所阐明的多肽序列可以以多 种格式存储在多种数据存储程序且用多种数据存储程序来操纵。例如， A组核酸序列和与其基本上同一的序列中所阐明的核酸序列，或B组 氨基酸序列和与其基本上同一的序列中所阐明的多肽序列可以以文本 存储在字处理文件中，如MicrosofiWORD或WORDPERFECT或以 ASCII文件存储在本技术领域普通技术人员熟悉的多种数据库程序中， 如DB2、SYBASE或ORACLE。而且，许多计算机程序和数据库可以 被用作序列比较算法、鉴别器或参考核苷酸序列或多肽序列源。这些 序列将要与A组核酸序列和与其基本上同一的序列中所阐明的核酸序 列，或B组氨基酸序列和与其基本上同一的序列中所阐明的多肽序列 进行比较。下述列表目的不在于限定本发明，而是对有用的程序和数 据库提供指导，这是对于A组核酸序列和与其基本上同一的序列中所 阐明的核酸序列，或B组氨基酸序列和与其基本上同一的序列中所阐 明的多肽序列有用的程序和数据库。
可以使用的程序和数据库包括但不限于：MacPattern(EMBL)， DiscoveryBase(Molecular Application Group)，GeneMine(Molecular Applications Group)，Look(Molecular Applications Group)，MacLook (Molecular Applications Group)，BLAST和BLAST2(NCBI)，BLASTN和 BLASTX(Altschul等人，J.Mol.Biol.215：403，1990)，FASTA(Pearson 和Lipman，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，85：2444，1988)，FASTDB(Brutlag 等人，Comp.App.Biosci.6：237-245，1990)，Catalyst(Molecular Simulations Inc.)，Catalyst/SHAPE(Molecular Simulations Inc.)， Cerius2.DBAccess(Molecular Simulations Inc.)，HypoGen(Molecular Simulations Inc.)，Insight II，(Molecular Simulations Inc.)，Discover (Molecular Simulations Inc.)，CHARMm(Molecular Simulations Inc.)， Felix(Molecular Simulations Inc.)，DelPhi，(Molecular Simulations Inc.)， QuanteMM，(Molecular Simulations Inc.)，Homology(Molecular Simulations Inc.)，Modeler(Molecular Simulations Inc.)，ISIS(Molecular Simulations Inc.)，Quanta/Protein Design(Molecular Simulations Inc.)， WebLab(Molecular Simulations Inc.)，WebLeb Diversity Explorer (Molecular Simulations Inc.)，Gene Explorer(Molecular Simulations Inc.)， SeqFold(Molecular Simulations Inc.)，the MDL Available Chemicals Direnctory数据库，Derwent’s World Drug Index数据库， BioByteMasterFile数据库，Genbank数据库和Genseqn数据库。通过所 给出的本发明的公开内容，许多其它程序和数据库对于本技术领域普 通技术人员是显而易见的。
可以用上述程序检测的基序包括编码亮氨酸拉链的序列、螺旋-转 角-螺旋基序、糖基化位点、遍在蛋白化位点、α-螺旋、β-片层、编码 信号肽的信号序列，所述信号肽指导所编码的蛋白的分泌，在转录调 节中相关的序列，如同源框、酸性序列、酶活性位点、底物结合位点 和酶裂解位点。
本发明利用了酶的独特的催化特性。尽管在化学转化中使用生物 催化剂(即纯化酶或粗酶，非活性或活性细胞)通常需要鉴别与特定 起始化合物反应的特定生物催化剂，本发明使用对于许多起始化合物 如小分子中存在的官能基团特异的选择的生物催化剂和反应条件。每 一种生物催化剂对于一个官能基团或几个相关的官能基团特异，并且 可以与许多含有该官能基团的起始化合物反应。
生物催化反应产生了来自单一起始化合物的衍生物群体。这些衍 生物可以进行另一轮生物催化反应，以产生衍生化合物的第二群体。 每一次生物催化衍生的重复就会产生成千上万的原始小分子或化合物 的变异物。
酶在起始化合物的特定位点反应，不会影响分子的其余部分，该 过程用传统化学方法很难实现。高度生物催化特异性提供了在文库中 鉴别单一活性化合物的方法。该文库的特征在于用于产生该文库的生 物催化反应系列，被称作“生物合成历史”。筛选该文库的生物活性并 且跟踪生物合成历史可以鉴别产生活性化合物的特定反应序列。重复 反应序列，并且确定所合成的化合物的结构。这种鉴别模式不同于其 它合成和筛选方法，不需要固定化技术，并且可以使用实质上任何类 型的筛选分析方法在溶液中合成且测试化合物。重要的是要注意到， 官能基团上的酶反应的高度特异性允许“跟踪”特定酶反应，所述特 定酶反应形成生物催化法产生的文库。
许多程序步骤是用机械人自动化进行的，这样能完成大量生物催 化反应，并且每天筛选被试验物，以及确保高水平的准确性和可再现 性。这样的结果是，可以在几周内产生衍生化合物的文库，该文库用 当前的化学方法将需要数年才能产生。
在一个特定的实施方案中，本发明提供了一种用于修饰小分子的 方法，该方法包括用小分子接触由此处描述的多核苷酸编码的多肽或 其酶活性判断，以产生修饰的小分子。测试修饰的小分子文库，以确 定文库中是否存在表现出期望活性的小分子。通过系统地去除用于产 生文库部分的每一生物催化反应，然后测试文库部分中产生的小分子 是否存在或不存在具有期望活性的修饰的小分子，从而鉴别产生具有 期望活性的修饰小分子的特定生物催化反应。任选地重复产生期望活 性的修饰小分子的特定生物催化反应。用一组生物催化剂来完成生物 催化反应，所述生物催化剂与小分子结构中发现的不同结构部分反应， 每一生物催化剂对于一个结构部分或一组相关结构部分特异；并且每 一生物催化剂与含有不同结构部分的许多不同小分子反应。
在一个实施方案中，本发明的新颖碱性淀粉酶通过如下来鉴别： 在高pH下筛选活性，并且鉴别在自动洗碗(ADW)配方中具有稳定 性的淀粉酶。对于衍生自地衣芽孢杆菌的淀粉酶进行比较。水解对于 pH的依赖性研究表明，本发明的大部分碱性淀粉酶的最适pH为7， 或更低，除了克隆B的最适pH为大约8。本发明的碱性淀粉酶保留了 在ADW配方中的活性，尽管克隆B对于高温敏感。优选地，当在ADW 产品中使用时，本发明的碱性淀粉酶将在pH10-11和45-60℃下发挥作 用。
本发明参考下述实施例进行了进一步的描述；然而，应该理解到 本发明不限于这些实施例。
实施例
实施例1
耐热α-淀粉酶的鉴别和表征
本实施例显示了新颖酸性淀粉酶的鉴别。筛选程序是在中性和低 pH条件下进行的。目标是发现用低pH样品产生的DNA文库。这一努 力发现了数百种有能力降解淀粉的克隆。DNA序列和生物信息分析将 这些基因中的大多数分类为以前未曾鉴别的淀粉酶。
生化研究
淀粉酶基因组克隆的生化分析表明许多克隆的最适pH低于6。通 过在70℃，80℃，90℃或100℃温育10分钟并且测量在pH为4.5时 的残余活性来测试这些基因组克隆的裂解物的耐热性。选择在80℃热 处理后保留＞50％活性的克隆进行进一步分析。将这些克隆在90℃和 pH6.0和pH4.5温育10分钟，并且在pH4.5测试残余活性(图1)。 在处理后大部分克隆保留的活性＞40％。为了便于比较，所进化的淀粉 酶，克隆c的残余活性等于第二代酶中最好的酶；克隆c的比活性比 较高。
在pH为4.5室温、70℃和90℃测量在90℃和pH4.5进行热处理 后具有残余活性的克隆的热活性。表1表明SEQ ID NO.：87(嗜热脂 肪芽孢杆菌淀粉酶)和SEQ ID NO.：113(地衣芽孢杆菌淀粉酶)的水 解率在较高温度下有所降低，尽管SEQ ID NO.：125的水解率随着温度 升高到70℃继续增加，并且在90℃仅仅降低了大约50％。
候选者评价
基于在90℃进行热处理后在pH为4.5时的残余活性，比活性和在 90℃时的淀粉水解率，当与地衣芽孢杆菌淀粉酶比较时，在淀粉液化 分析方法中将SEQ ID NO.：125与进化的淀粉酶克隆c进行比较。 室温 70℃ 90℃ SEQ ID NO.：871 1.25 1.43 0.33 SEQ ID NO.：1132 3.3 1.9 0.39 SEQ ID NO.：125 1.9 47 19
表1：三个基因组克隆在pH为4.5和3个不同温度时的染料标记 淀粉水解率(相对荧光单位/秒)。1B.stearothermophilus淀粉酶，2B. licheniformis淀粉酶。
实施例2
碱性pH下耐热淀粉酶活性
该实施例的起始焦点是评价商业自动洗碗(ADW)配方中的现有 淀粉酶系列。这一努力鉴别出了两个候选者：一个在高pH具有活性 (SEQ ID NO.：115)，另一个在ADW配方中具有稳定性(SEQ ID NO.： 207)。研究也包括高pH淀粉酶的鉴别。这一努力发现了数百种具有降 解淀粉能力的克隆。DNA序列和生物信息分析将这些基因中的大多数 分类为先前没有鉴别的淀粉酶。剩余的开放阅读框是新支链淀粉酶 (neopullulanase)、淀粉支链淀粉酶(amylopullulanase)和淀粉麦芽糖 酶。广泛的生化和应用研究表明了3个候选者：克隆B，SEQ ID NO.： 147，和SEQ ID NO.：139)，在pH10具有高比活性，但不幸的是在ADW 配方中缺乏稳定性。总之，已经鉴别了新颖淀粉酶系列，其中每一淀 粉酶对于ADW应用具有期望表型。
生化研究
淀粉酶基因组克隆地生化分析表明，这些克隆中大多数在pH10 和50℃水解淀粉。为了产生足够数量的酶以便进一步进行生化和应用 测试，40个最具活性的基因组克隆的淀粉酶开放阅读框被亚克隆到表 达载体中。这一努力包括：对于那些含有推定信号序列的克隆构建两 个构建物，为每一亚克隆建立生长和诱导条件(加上或减去淀粉酶信 号肽)。
可溶的活性蛋白质从34个亚克隆中被成功地纯化到同质性，用缓 冲液中的2％淀粉于pH8和pH10(40℃和50℃)测量比活性(单位/mg， 其中1单位＝μmol还原糖/分钟)。选择来自地衣芽孢杆菌的淀粉酶 (SEQ ID NO.：113)作为这些研究的基准。比活性通过在30分钟反应 过程中在不同时间点去除样品并且分析还原糖来确定比活性。起始比 率通过将进展曲线适合线性方程来确定。最好的候选者的比较如表2 所示。
确定水解率对pH的依赖性的研究表明，只有克隆B是“碱性淀 粉酶”，其最适pH为大约8；所有其它的最适pH为大约7或更低。不 过，应该清楚击中系列包括在pH10和50℃具有明显活性的几种榜样 淀粉酶。
表2淀粉酶的比活性(U/mg纯酶) 酶 比活性pH8，40℃ 比活性pH10，50℃ 克隆B 682 20 SEQ ID NO.：139 430 33 SEQ ID NO.：127 250 47 SEQ ID NO.：137 230 3 SEQ ID NO.：113 (地衣芽孢杆菌) 228 27 SEQ ID NO.：205 163 4 其余 ＜40
稳定性
测量通过生化分析鉴别的3个最佳候选者中每一个在存在ADW 配方的情况下的稳定性。这些研究的基准是配方基质中的商业酶。图 13说明了在存在ADW配方的多种组分的情况下在50℃温育30分钟 后的残余活性(于pH8和50℃测量)；pH8，pH10.8，ADW溶液(有 漂白剂)和ADW溶液(无漂白剂)。温育后，所测量的活性以原始活 性的百分比表示。该数据表明，克隆B对于高温非常敏感，尽管其它 淀粉酶受影响很小。当在高pH和高温温育这些酶时，商业酶SEQ ID NO.：139稳定性变差；然而，SEQ ID NO.：127保留了全部活性。在重 复试验中在pH 10温育对pH 8温育后，观察到SEQ ID NO.：127的显 而易见的反常行为。
当在ADW基质中于50℃测量了染料标记的淀粉的淀粉酶活性时， 商业淀粉酶表现出活性在pH为8时的大约5％。在相同分析中，克隆 B、SEQ ID NO.：139和SEQ ID NO.：127表现出其在pH为8时测量的 原始活性的不到2％。
洗涤测试
用淀粉涂敷玻片进行洗涤测试，以测量每一纯化酶与商业淀粉酶 相比的性能。根据试验程序，准备用空心面条淀粉涂敷的玻片。将两 个预先称重的淀粉涂敷玻片背对背置于50mL圆锥管中，每个管加入 25mLADW溶液，+/-酶。将试管在垂直的圆盘传送带上轻轻旋转的 同时于50℃温育20分钟。在温育期后，将玻片立即在水中洗涤，烘干 过夜。所有试验进行两次，商业酶作为阳性对照组。这些试验的结果 (图6)以所去除的淀粉的净百分比表示，例如，在有酶的ADW中去 除的淀粉百分比，减去在单独ADW中去除的淀粉百分比。
实施例3
基因最优化
酶的特性可以通过多种进化策略来提高，包括基因位点饱和诱变 (GSSMTM)和基因再装配TM(Diversa Corporation，San Diego，CA)。 这样的技术将被用于所发现的淀粉酶基因，以便产生可以筛选改进的 特性的变体库。
进化的亲本分子将是下述分子中的一种或多种：SEQ ID NO.：113， SEQ ID NO.：139，SEQ ID NO.：115和SEQ ID NO.：127(SEQ ID NO.： 127的平截形式)。
已经开发出了高产量筛选(high throughput screen)来评价存在 ADW特性情况下的酶特性。高产量筛选(HTS)的开发在任何进化程 序中是最重要的。HTS已经实现自动化，且对于亲本淀粉酶，已经显 示出一致结果(图7)。亲本淀粉酶在ADW配方中具有可测量的活性， 然而相对于pH8活性降低了很多。
通过GSSM或随机突变产生的SEQ ID NO.：81的突变体
GSSM
宿主： 大肠杆菌，XL1-Blue MRF’
载体： pSE420
亲本： SEQ ID NO.：81
突变的残基包括#2-93，#118-159，#389和#433。
已经被测序的提高活性的淀粉酶克隆列表 名称 变化 大肠杆菌中的数据 SEQ ID NO.：81/4V Y4V，TAT到GTG 活性增加2倍 SEQ ID NO.：81/4V Y4V，TAT到GCG 活性增加2倍 SEQ ID NO.：81/30V T30，ACC到GTT 活性增加2.5倍 SEQ ID NO.：81/31V I31Q，ATC到TAG 活性增加1.5倍 SEQ ID NO.：81-4V-30V 4V+30V 活性增加3倍 SEQ ID NO.：81-2C C154A&C155A 活性增加1.2倍 SEQ ID NO.：81-4C C154，C155A& C389A，C433A 活性增加2倍
备注：
●对于SEQ ID NO.：81/31Q，TAG密码子应该编码终止密码子， 但由于宿主的supE突变它编码XL1-Blue MRF’中的Gln。
随机突变
通过易错PCR按照如下方法将随机突变导入SEQ ID NO.：81中
◆ 在反应中使用不平衡的dATP，dCTP，dGTP或dTTP来导入突 变
◆ 在反应中使用不同浓度的MnCl2来导入诱变
◆ 使用上述两种方法的组合
新活性克隆的确认：
◆ 在15ml Falcon管中从初级筛选中培养上调突变体，并且用 1mM IPTG诱导
◆ 用RBB-淀粉作为底物再次进行分析
◆ 对克隆进行测量以确认突变
已经被测序的提高活性的淀粉酶克隆列表
名称 摇瓶中的数据 发酵罐中的数据
SEQ ID NO.：81-4C-UM1 活性增加1.3-2倍 与SEQ ID NO.：81-4C相同
SEQ ID NO.：81-4C-UM1 活性增加2倍 与SEQ ID NO.：81-4C相同
实施例4
在碱性pH下对具有活性的α-淀粉酶的表征
进一步对本发明的在碱性pH下具有活性的淀粉酶进行表征。已经 在pH8和10(40℃和50℃)进行了对2％淀粉的动力学分析。
表4
克隆，比活性 pH8，40℃ pH10，50℃
SEQ ID NO.：113 228单位/mg 27单位/mg
(地衣芽孢杆菌)
克隆B 682单位/mg 31单位/mg
SEQ ID NO.：139 430单位/mg 33单位/mg
SEQ ID NO.：127 540单位/mg 50单位/mg
对照组0GL5(大肠杆菌) 1.8单位/mg 0单位/mg
1单位活性倍定义为每分钟释放1μmol还原糖
实施例5
淀粉酶活性分析：BCA还原端分析
相关克隆地淀粉酶的活性使用下面的方法学进行确定。
1.如下准备2种底物溶液：
a)2％可溶淀粉(马铃薯)溶液，pH为8，通过将2mg马铃 薯淀粉溶解在pH为8的100ml 100mM磷酸钠中制备。
b)2％可溶淀粉(马铃薯)溶液，pH为10，通过将2mg马铃 薯淀粉溶解在100ml 100mM碳酸钠中制备。
在沸腾的水浴中加热这两种溶液，同时混合，持续30-40分钟直到 淀粉溶解。
2.制备溶液A，使用64mg/ml一水合碳酸钠，24mg/ml碳酸氢钠， 和1.95mg/ml BCA(4，4’-二羧基-2，2’-二喹啉二钠盐(Sigma Chemical cat #D-8284)来制备。将上述加入到dH2O中。
3.制备溶液B，通过将1.24mg/ml五水合硫酸铜和1.26mg/ml L- 丝氨酸混合而制备。将该混合物加入到dH2O中。
4.用溶液A和B制备一种工作试剂，其中溶液A和B的比率为 1∶1。
5.制备dH2O中的10mM麦芽糖的麦芽糖标准溶液，其中10mM 麦芽糖在期望pH下混合到2％可溶淀粉中，使最终浓度为0，100，200， 300，400，600μM。标准曲线将通过每组时间-点产生。由于该曲线是 通过将10μl标准物加入到工作溶剂中来确定，所以它能确定出0，1， 2，3，4，6nmol麦芽糖。
6.将1ml底物溶液等分到微型离心管中，在加热块或被加热的水 浴中使其平衡到期望温度(5分钟)。将50μl酶溶液加入到管盖子的内 部。
7.该溶液用溶液A&B的混合溶液5ml进行平衡，将100μl等分 到96孔PCR板中。将板放在冰上。
8.在5分钟温度平衡后，盖上管子的盖子，倒置且涡流3次。将 10μl立刻等分到板子上，t＝0(零时间点)。将酶混合物留在加热块中， 在每一期望时间点等分10μl(例如0，5，10，15，20，30分钟)。
9.确保12个孔是空的(只有工作试剂被等分)，以便加入10μl标 准物作标准曲线。
10.当所有时间点被收集以及加入了标准物之后，盖住板，加热到 80℃维持35分钟。在冰上将板冷却10分钟。所有孔中加入100μl H2O。 混合均匀并将100μl样品加入到平底96孔板上，在560nm下读取吸光 值。
11.对每一样品的时间点根据其自己的t＝0调零(从其它A560值 的平均值中减去平均的t＝0 A560值)。通过标准曲线的斜率将A560值 (实验值)转化为微摩尔(将A560值(实验值)作被除数，除以标准 曲线的斜率(A560/umole))。生成时间点和微摩尔(以微摩尔/分表示) 的斜率，乘以100(作为微摩尔值，只是因为在检试中使用了10μl，而 不是1ml rxn中所含的量)。斜率(以微摩尔/分表示)除以用以毫克为 单位表示的蛋白质数值可以得到比活性。在三个测试样品中，所有的 点应该至少是以双份方式重复。一个例示性的标准曲线图示在图11中。
表5：样品数据 A560 实验 值/标 准斜 率 克隆 稀释 度 分钟 A-560-1 A-560-2 平均A 560 调零A 560 微 摩 尔 ENZ 50 0 0.1711 0.1736 0.17235 0 0.000 5 0.2104 0.2165 0.21345 0.0411 0.0005 10 0.2492 0.2481 0.24865 0.0763 0.0009 15 0.2984 0.2882 0.2933 0.12095 0.0014 20 0.3355 0.3409 0.3382 0.16585 0.0020 30 0.3942 0.3805 0.38735 0.215 0.0026 40 0.4501 0.4412 0.44565 0.2733 0.0033
活性＝0.008646微摩尔/分
蛋白质浓度(mg/ml)除以任意稀释度，就可以得到测试中所用毫 克数值。
上述斜率除以测试中所用毫克数值，得到比活性
比活性＝24.93微摩尔/分/毫克
(例如，参见，Dominic W.S.Wong，Sarah B.Batt，和George H. Robertson(2000).Microassay for rapid screening of alpha-amylase activity. J.Agric.Food Chem.48，4540-4543，以及Jeffrey D.Fox和John F. Robyt，(1991).Minituratization of three carbohydrate analyses using a micro sample plate reader.Anal.Biochem.195，93-96，在此引用加以参 考)。
实施例6
筛选α-淀粉酶活性
克隆的淀粉酶活性可以通过本技术领域的多种方法进行评价。下 面是有关本发明所用的一般方法学的叙述。每个板上用于筛选的噬菌 斑的数目大约是10,000噬菌斑形成单位(pfu)。对于每个DNA文库： 对于一个分离文库而言，至少筛选50,000个噬菌斑；对于一个非分离 文库而言，至少筛选200,000个噬菌斑。这取决于相对λZap Express 扩增裂解物而言的噬菌斑形成单位的滴度。
λ文库的滴度确定
1)将微升量的λZap Express扩增文库原种加到600μl大肠杆菌 MRF细胞中(OD600＝1.0)。为稀释MRF原种，使用了10mM MgSO4。
2)在37℃温育15分钟。
3)将细胞悬液转移到50℃的5-6ml NZY培养基的顶层琼脂中，轻 轻混合。
4)立即将琼脂溶液倾倒到大的(150mm)NZY培养基平板上。
5)然后让顶层琼脂完全凝固(大约30分钟)，然后倒置平板。
6)在39℃将平板温育8-12小时。
7)估计噬菌斑的数目。确定出噬菌体滴度为10,000pfu/板。如果 需要，用SM缓冲液稀释文库噬菌体等分试样。
底物筛选
1)将来自扩增文库的λZap Express(50,000pfu)加到600μl大肠 杆菌MRF细胞中(OD600＝1.0)。对于非环境文库，制备4管(50.000pfu/ 管)。
2)在37℃温育15分钟。
3)当噬菌体/细胞悬液正在温育时，将1.0mL红色淀粉底物(1.2％ w/v)加入到50℃的6.0mL NZY培养基的顶层琼脂中，彻底混合。将 溶液于50℃保存，直到使用。
4)将1/5(10,000pfu)细胞悬液转移到底物/培养基的顶层琼脂中， 轻轻混合。
5)立即将琼脂溶液倾倒到大的(150mm)NZY培养基平板上。
6)然后让顶层琼脂完全凝固(大约30分钟)，然后倒置平板。
7)将剩余细胞悬液重复步骤4-6四次(每次1/5悬液)。
8)在39℃将平板温育8-12小时。
9)观察平板上噬菌斑周围的清澈区(孔环区)。
10)将具有孔环的噬菌斑从琼脂中取出，并且转移到无菌微量管 中。大孔200μL移液管管尖正好用于移出含有期望噬菌斑的(核心) 琼脂塞。
11)将噬菌体再次悬浮于500μL SM缓冲液中。加入20μL氯仿， 以抑制任何进一步的细胞生长。
12)在开始下一步之前，将纯噬菌体悬液在室温温育4小时，或 者过夜。
分离纯克隆
1)将10mL再悬浮的噬菌体悬液加到500μl大肠杆菌MRF细胞 中(OD600＝1.0)。
2)在37℃温育15分钟。
3)当噬菌体/细胞悬液正在温育时，将1.0mL红色淀粉底物(1.2％ w/v)加入到50℃的6.0mL NZY培养基的顶层琼脂中，彻底混合。将 溶液于50℃保存，直到使用。
4)将细胞悬液转移到底物/培养基的顶层琼脂中，轻轻混合。
5)立即将琼脂溶液倾倒到大的(150mm)NZY培养基平板上。
6)然后让顶层琼脂完全凝固(大约30分钟)，然后倒置平板。
7)在39℃将平板温育8-12小时。
8)观察平板上单个噬菌斑(纯克隆)周围的清澈区(孔环区)。 如果单个噬菌斑不能分离，调节滴度和并且再次对噬菌体悬液铺板。
9)将具有孔环的单个噬菌斑从琼脂中取出，并且转移到无菌微量 管中。大孔200μL移液管管尖正好用于移出含有期望噬菌斑的(核心) 琼脂塞。为了扩增滴度，将5个单个活性噬菌斑装入到微量管中。
10)将噬菌斑再次悬浮于500μL SM缓冲液中。加入20μL氯仿， 以抑制任何进一步的细胞生长。
11)在开始下一步之前，将纯噬菌斑悬液在室温温育4小时，或 者过夜。通过将DMSO加入到噬菌体悬液(7％v/v)中，将纯噬菌体 悬液储存于-80℃。
排除纯克隆
1)将100μL纯噬菌体悬液加到200μl大肠杆菌MRF细胞中 (OD600＝1.0)。向其中加入1.0μL ExAssist噬菌体(＞1X106pfu/mL； Stratagene)。使用2059 Falcon管来排除。
2)将悬液在37℃温育15分钟。
3)将3.0mL 2xYT介质加入到细胞悬液中。
4)在摇动的同时将悬液在30℃温育至少6小时或过夜。
5)将管子变为70℃20分钟。噬菌粒悬液可以在4℃储存1-2月。
6)将100μL噬菌粒悬液转移到含有200μL大肠杆菌Exp 505细 胞(OD600＝1.0)的微量管中。
7)将悬液在37℃温育15分钟。
8)将300μL SOB加入到悬液中。
9)将悬液在37℃温育30-45分钟。
10)将100μL悬液转移到小的(90mm)LB培养基平板中，所述 平板含有用于Zap Express DNA文库的卡那霉素(含有卡那霉素 50μg/mL的LB培养基)或用于Zap II DNA文库的氨苄青霉素(含有 卡那霉素100μg/mL的LB培养基)。
11)剩余悬液被转移到另一个小的LB培养基平板上。
12)使用无菌玻璃珠将悬液均匀地分配到平板上。
13)将平板在30℃温育12-24小时。
14)观察平板的集落。
15)将单个集落接种到含有适当的抗生素的LB液体培养基中，并 且在30℃温育12-24小时。
16)甘油原种可以通过将80％甘油加入到液体培养物(15％v/v) 中来制备，并且于-80℃储存。
活性检验
1)将50μL液体培养物转移到微量管中。将500μL 8％pH 7 Amylopectin Azure加入到同一管子中。每一克隆准备2个管子。
2)在50℃测试活性3小时或过夜。使用pH7缓冲液作为对照组。
3)在冰水浴中将试验样品冷却5分钟。
4)加入750μL Ethaqnol并且彻底混合。
5)在13000rpm(16000g)离心5分钟。
6)在595nm测量上清液的OD。
RFIP分析
1)将1.0mL液体培养物转移到无菌微量管中。
2)在13200rpm(16000g)离心1分钟。
3)丢弃上清液。将另一种1.0mL液体培养物加入到同一无菌微量 管中。
4)在13200rpm(16000g)离心1分钟。
5)丢弃上清液。
6)按照QIAprep旋转微型试剂盒规程以进行质粒分离。
7)使用BioPhotometer检查DNA浓度。
8)使用Sac I和Kpn I进行第一次双重消化。在37℃温育1小时。
9)使用Pst I和Xho I进行第二次双重消化。在37℃温育1小时。
10)将加样染料加入到消化后的样品中。
11)以120伏特在1.0％琼脂糖凝胶上对消化后的样品电泳1-1.5 小时。
12)用凝胶成象仪观察凝胶。所有具有不同消化模式的克隆将进 行序列分析。
实施例7
淀粉酶分析
宿主培养物的制备
1.开始过夜培养XL 1-Blue MRF宿主细胞。使用来自划线平板的 单菌落接种用20μg/mL四环素补充的10mL LB。过夜培养培养物，在 37℃摇动至少16小时。
2.使用无菌技术，用具有来自过夜LBTet培养物的XL 1-Blue MRF 宿主接种新鲜的100mL LBTet每日培养物。
3.在37℃振荡器中培养，直到OD值到达0.75-1.0。
4.使宿主细胞在1000xg离心10分钟得以沉淀，然后轻轻地再悬 浮于10mM OD值为5的MgSO4中。
5.将少量宿主细胞稀释到OD1，用于滴度测定和pintooling。
6.当宿主制备物被储存于冰中或4℃时，可以使用长达1周时间。
注释
-为了缩短日培养的时间，在LB中使用_X通常的Tet浓度(_X ＝10μg/mL)，或者完全略去抗生素。
-当用四环素选择时不使用NZY。NZY培养基中的高Mg++浓度使 得Tet不起作用。
测定λ文库的滴度
7.将三个无菌微量离心管放置到支架上。
8.将995μL制备的宿主细胞等分到一个管子中，并且将45μL制 备的OD1宿主细胞等分到两个剩余的管子的每一个中。
9.将5μLλ文库加入到含有995μL宿主细胞的管子中，涡流搅拌 混合。这导致稀释因子为200。
10.通过将5μL先前的稀释液连续地加入到含有45μL制备的宿主 细胞的其余两个管子中，制备1/2,000和1/20,000稀释液。
11.通过在37℃温育15分钟，使噬菌体吸附到宿主上。
12.同时，将100μL制备的OD1宿主细胞移入三个Falcon 2059 管子的每一个中。
13.将5μL每一稀释液加入到含有宿主细胞的独立的2059管子 中。
14.通过将3mL顶层琼脂加入到每一个管子中，并且快速地倾倒 在90mm NZY板上，对每一稀释液铺平板。在顶层琼脂变硬之前确保 平滑且均匀地分配。
15.倒置平板，在37℃过夜培养。
16.数出噬菌斑的数量，并且计算文库原种的滴度(单位为：噬菌 斑形成单位(pfu)/μL)。
淀粉酶的λ微量滴度筛选
制备
1.如上所述制备足量的XL1-Blue MRF宿主培养物，用于计划的 筛选量。100mL培养物通常足以筛选2-3个文库。
2.高压灭菌与QFill2分配器相容的几个瓶子。这些瓶子是广口科 尔希(Corning)瓶，250mL，在瓶口有密封环。
3.确保具有足量的适于筛选的平板，顶层琼脂，BODIPY淀粉， 红色淀粉溶液等等。
4.规定用自动化代表形式设定运转Day 2自动仪器循环。
第一天
1.用文库筛选和平板数目标记1536-孔平板(黑色)。Tough-TagsTM 管粘着剂，在宽度方向切割成两半，是标记1536-孔平板的理想标记物。
2.计算筛选所必须的文库、宿主细胞和NZY介质的体积。这用 Excel电子表格很容易实现。
3.将所计算的λ文库和OD5宿主细胞的体积混合到一个无菌 250mL广口科尔希瓶中(具有密封环)。
4.允许在37℃发生吸附作用15分钟。
5.加如所计算的体积的NZY介质并且很好地混合。这被称作细胞 -噬菌体-介质悬浮液。
6.通过将50μL细胞-噬菌体-介质悬浮液与250μL OD1细胞在 Falcon 2059管中混合进行伴随滴度测定，然后与9mL顶层琼脂一起铺 平板于150mm NZY平板上。在37℃将伴随滴度平板培养过夜。
7.用剩余的悬浮液装载分配器，并且将每一标记的1536-孔平板以 4μL/孔进行排列。如果分配器在一些孔中留下了气泡，可以通过在200 xg离心1分钟去除这些气泡。
8.将0.5μL阳性对照组噬菌体加入到至少两个分析平板的AD46 孔位置处。为了完成这一目的，使用具有强大的淀粉酶阳性的λ克隆。 SEQ ID NO.：113或SEQ ID NO.：199的λ版本是阳性对照组的很好的 选择。
9.在一个加湿温育器中(≥95％)将排列平板于37℃培养过夜。
第二天
1.计算伴随滴度测定平板上的pfu数量，确定每孔的平均接种密 度(单位为pfu/孔)。
2.如下pintool每一文库筛选的至少两个平板(优选地2个含阳性 对照组)：
a)准备两个宿主菌苔平板作为其上进行pintool的表面：将250μL OD1宿主细胞与2mL 2％红色淀粉混合，并且用9mL顶层琼脂铺平板 于150mm NZY平板上。尽可能地将每一平板与顶层琼脂凝固保持水 平，以便在平板上产生均匀的红色色彩。
b)使用两次火焰消毒的1536位置pintool，在宿主菌苔平板上重 复至少两个筛选平板。
c)将pintool的受体平板放置在层流罩超静台中，将其盖子打开大 约15-30分钟(以排出过量的湿气)。
d)将盖子放回原处，在37℃倒置培养过夜。
3.如下制备2X BODIPY淀粉底物缓冲液：
a)计算以4μL/孔的所有筛选平板所需要的2X底物缓冲溶液的总 体积(包括分配器所需要的任何额外的死区体积)，并且将100mM CAPS pH10.4的量计量为适合于所用分配器的容器。
b)收回足量0.5mg的BODIPY淀粉管子，以产生终浓度为 20-30μg/mL的所需体积的2X底物缓冲液(在上面步骤a)中所计算的)。
c)于室温将50μL DMSO溶解在每一0.5mg管子中，避光，同时 频繁涡流。这需要超过15分钟时间；一些生产批量的BODIPY淀粉比 其它淀粉溶解的好一些。
d)在每一管子中加入50μL 100mM CAPS缓冲液，pH10.4，并且 涡流混合。
e)合并所有管子的内容物，并且通过在微型离心机中以最大速度 离心速度离心1分钟去除任何未溶解的聚集物。
f)将上清液加入到上述步骤a)中测量的剩余的100mM CAPS缓 冲液中。
g)通过用金属箔包裹使2X底物缓冲液避光。
4.将平板和底物缓冲液放入自动化室中，用下述参数设计自动仪 器的程序：
a)每孔分配4μL底物缓冲液
b)第一次读数在加入底物后1小时，第二次读数在9小时，第三 次读数在17小时；读数之间于37℃温育
c)激发过滤器：485nm；发射过滤器：535nm
d)将荧光增益设置为70，或者设置所准备的2X底物缓冲液批次 的最适增益。
e)确保所用的培育箱可以使分析平板避光
第三天
1.检查pintool平板在与相关分析平板上的孔对应的所有位置上在 细菌菌苔中已透明。而且检查在任何针刺(pin)位置上在红色淀粉中 已透明。如果含有阳性对照组的平板被用于pintool，应该能在红色背 景上看到一个大的透明区。注意要提防也会在红色淀粉中形成透明区 的污染(参见实施例7最后的评论”在红色淀粉中形成透明区地污染 物”)。
2.从自动仪器计算机产生的数据表中鉴别出推定的击中。通过遗 传工程产生的KANAL程序简化了数据分析。作为单凭经验的方法， 推定击中的特征在于具有在整个背景上信号密度清洗至少1.5倍的孔。
3.对于每一推定，从孔中取出2μL，加入到含有500μL SM缓冲 液和50μL CHCl3的管子中。涡流混合，并且于4℃储存。该溶液在下 文被称作4e-3原种。原始筛选平板应当于4℃避光储存，至少储存到 对数据进行分类总结结束时。
这是推荐的用于突破推定击中的方法。这是一种依赖于确认 BODIPY淀粉上活性的液相分析方法。另外，推定击中可以被直接铺 平板于含有红色淀粉的固相平板上，这样对于2,000-3,000pfu/击中就可 以检查透明区。然而，不能观察到红色淀粉上的透明区的一个指示不 必是，推定击中是假阳性。然后必需用最初鉴别的格式进行分析(即 用BODIPY淀粉作为底物的液相分析)。另外，非常弱的阳性用下面详 细描述的方法将更加易于鉴别。
第一天
1.在无菌50mL圆锥管中，将0.5mL OD5宿主细胞与45.5mL NZY 混合。这将被称作宿主-介质悬浮液。
2.对于将要分析的每一推定击中，将1mL宿主介质悬浮液等分到 3个无菌微量离心管的每一管中。
3.将12道自动移液管设置为多次分配模式，等分试样为20μL， 等分量为2x。将具有无菌尖端的清洁装置安放到自动移液管上。
4.将大约1mL宿主介质悬浮液倾倒到一个新无菌溶液盆中，并且 加到多道自动移液管上。
5.将20μL/孔分配到黑色384-孔平板(12道×2＝24孔)的最后 一行(行P)。这一行在下文将被用作对照组。
6.通过用尖端接触盆表面并且按下自动移液管上的RESET按钮 将剩余液体排出尖端。将自动移液管稍微朝下放置以阻止尖端受到污 染。此时没有必要替换尖端。
7.将盆中的剩余液体倾倒到一个废物容器中(像烧杯)，注意避免 防溅挡板的污染。
8.对于将要分析的第一推定，取出111μL 4e-3原种(参见淀粉酶 的λ微量滴度筛选的第二天)，并且将其加入到一组含有1mL宿主介 质悬浮液的三个管子中的第一个中(步骤2)。涡流混合。这是稀释物 A。
9.取出111μL溶液A，并且将其加入到该组管子的下一个管子中。 涡流混合。这是稀释物B。
10.取出111μL溶液B，并且将其加入到该组管子的最后一个管子 中。涡流混合。这是稀释物C。现在应该有三种噬菌体稀释物，每一 稀释物的浓度以因子10而不同。
11.将稀释物C的内容物(三个样品中最稀的)倾倒到溶液盆中， 加到多道自动移液管上。
12.按照20μL/孔分配到384-孔平板(12道×2＝24孔)的第一行。
13.通过用尖端接触盆表面并且按下自动移液管上的RESET按钮 将剩余液体排出尖端。将自动移液管稍微朝下放置以阻止尖端受到污 染。此时没有必要替换尖端。
14.如上所述倒空盆子。
15.将稀释物B的内容物倾倒到相同的盆子中，并且加到多道自 动移液管上。
16.按照20μL/孔分配到384-孔平板的第二行。
17.类似地进行步骤13-16以便将稀释物A分配到平板的第三行 中。
18.在所有三种稀释物已经被排列到平板的最初3行中后，将所有 尖端和溶液盆抛到生物危险废物容器中。
19.用一组干净的无菌尖端放置到自动移液管上，并且打开一个新 的无菌溶液盆。
20.对每一剩余的推定击中重复步骤8-19，使用平板上剩余的行， 直到行O。在一个384-孔平板上可以分析五个推定击中，保留最后一 行(行P)作为对照组。
21.将0.5μL每一对照组加入到一个独立的孔中。使用至少2-3个 独立对照组，优选地能覆盖活性范围。
22.在加湿(≥95％)培养箱中于37℃过夜培养分析平板。
第二天
1.将所有幸免平板pintool到具有红色淀粉的宿主菌苔上，使用与 淀粉酶的λ微量滴度筛选中的第二天所描述的相同方法，除了使用384- 位置pintool之外。
2.如下制备2X BODIPY淀粉底物缓冲液：
a)计算以20μL/孔的所有幸免平板所需要的2X底物缓冲溶液的总 体积(包括分配器所需要的任何额外的死区体积)，并且将100mM CAPS pH10.4的量计量为适合于所用分配器的容器。
b)收回足量0.5mg的BODIPY淀粉管子，以产生终浓度为 20-30μg/mL的所需体积的2X底物缓冲液(在上面步骤a)中所计算的)。
c)于室温将每一0.5mg管子中的物质溶解在50μL DMSO中，避 光，同时频繁涡流。这需要超过15分钟时间；一些生产批量的BODIPY 淀粉比其它淀粉溶解的好一些。
d)在每一管子中加入50μL 100mM CAPS缓冲液，pH10.4，并且 涡流混合。
e)合并所有管子的内容物，并且通过在微型离心机中以最大速度 离心1分钟去除任何未溶解的聚集物。
f)将上清液加入到上述步骤a)中测量的剩余的100mM CAPS缓 冲液中。
g)通过用金属箔包裹使2X底物缓冲液避光。
3.按照20μL/孔分配到所有幸免平板中。
4.在铝箔包裹所有平板，并且于室温温育2-6小时。
5.用下述设置在Spectrafluor中读取每一平板：
a)荧光读数(激发过滤器：485nm；发射过滤器：535nm
b)平板定义：384孔黑色
c)从顶部读数
d)最适增益
e)闪光次数：3
6.在所得到的Excel电子表格中，以独立的图表绘制推定的3行 中的每一行的图表，并且检查其活性。确保阳性对照组在整个背景上 产生信号。
7.对于在孔中具有每一真实信号的每一推定，按照如下方法从阳 性孔中收获样品：
a)从代表最高的原始稀释度的行中选择阳性孔。
b)将2μL从上述孔中转移到含有500μL SM和50μL CHCl3的管 子中。这被称作机会原种。
c)于4℃储存。
8.使用先前所描述的方法，用红色淀粉将大约10μL每一机会原 种铺平板于150mm NZY平板上。目的是获得几个(至少20个)孔独 立的噬菌斑，从这些噬菌斑中来取出分离物。
第三天
1.检查pintool平板在与相关分析平板上的孔对应的所有位置上在 细菌菌苔中的透明区可接受发生率。而且检查在任何阳性对照组和任 何测试推定中红色淀粉中的透明区。注意要提防也会在红色淀粉中形 成透明区的污染物(参见如下)。
2.从含有机会原种的稀释物的固相平板上，取出几个分离的噬菌 斑，将每一噬菌斑移入含有50μL CHCl3的500μL SM中。这被称作分 离原种。
3.然后可以用上述描述的方法在BODIPY淀粉上个别地测试分离 原种。如果在步骤2中被取出的噬菌斑在红色淀粉背景中产生了透明 区的话，这一步可以忽略。然后用上述描述的方法在BODIPY淀粉上 个别地测试分离原种。然而，如果在步骤2中被取出的噬菌斑在红色 淀粉背景中产生了透明区的话，这一步可以忽略。
排除
第一天
1.在Falcon 2059管子中混合200μL OD1 XL1-Blue MRF宿主， 100μLλ分离原种和1μL ExAssist噬菌体原种。
2.在37℃振荡器中温育15分钟。
3.加入3mL NZY培养基。
4.在37℃振荡器中培养过夜。
第二天
1.在20分钟内将排除管加热到70℃。
2.在1000xg离心10分钟。
3.在Falcon 2059管子中，混合50μL上清液和200μL EXP505 OD1 宿主。
4.在37℃振荡器中温育15分钟。
5.加入300μL SOB培养基。
6.在37℃振荡器中温育30-45分钟。
7.使用无菌玻璃珠将50μL铺平板于大的LBKan50平板上。如果这 些平板是“干的”，可以加入另外的SOB培养基，以帮助分配细胞。
8.将平板在30℃至少培养24小时。
9.培养分离物以用于测序和/或RFLP。
在30℃培养降低了噬菌粒的拷贝数量，并且被用于减轻一些淀粉 酶克隆的显而易见的毒性。
在红色淀粉中形成透明区的污染物
当在固体培养基上使用红色淀粉来分析噬菌体的淀粉酶活性时， 通常可以看见在红色淀粉中形成透明区的污染集落生成单位(cfu)。对 于pintool平板，重要的是，不管何时这些污染物与特定孔位置对齐时。 需要区分淀粉酶阳性噬菌体克隆与这些污染物。污染微生物的来源大 概是2％红色淀粉原种，该原种不能通过高压灭菌或通过在制备后过滤 来灭菌。应该可以认为，它们是通过使红色淀粉产生代谢变化而存洉 的机会微生物。为了降低这些污染物，当准备2％红色淀粉溶液时需要 使用无菌技术，并且将原种于4℃或冰中储存。
实施例8
生物信息分析
用已知的嗜高温α-淀粉酶序列进行最初的生物信息分析。图14a 显示了序列的对齐状况，一些序列已经储存在NCBI数据库中。该分 析显示了用于PCR的简并引物的设计潜力，PCR完整基因减去其信号 序列(参见图14a)的部分，从文库中潜在地得到了新颖的全长α淀粉 酶。
通过PCR从基因组DNA筛选下述文库：
表6 文库 名称 PCR阳性 亚克隆 5 A.lithotropicus 否 13 隐蔽热网菌(Pyrodictium occultum) 否 17 热网菌TAG11(Pyrodictium TAG11) 否 是 113 深海富集物(Deep sea enrichment) 是 是 170 深海富集物(Deep sea enrichment) 是 是 198 古生菌属(Archaeglobus) 否 206 酸菌属(Acidianus sp) 否 453 混合的冰岛富集物(Mixed iceland enrich) 否 455 混合的冰岛富集物(Mixed iceland enrich) 是 是
图14b显示了所鉴别的序列的对齐，下面的表罗列了它们相对的 同一性百分比。
表7：核苷酸序列同一性％ SEQ ID NO.：81 pyro Pyro 2 thermo therm2 SEQ ID NO.：75 SEQ ID NO.：77 SEQ ID NO.：83 SEQ ID NO.：85 SEQ ID NO.：79 SEQ ID NO.：81 100 91.7 75.1 82.1 80.1 82.5 82.6 82.1 82.6 83 pyro 100 74.8 82.5 80.5 82 82.2 82.9 82.8 84 Pyro2 100 71.5 71.1 74 74.2 77 77.1 73 therm 100 81.7 83.5 83.8 82.8 83.2 83.8 Therm2 100 88.9 88.8 84.1 84.7 84 SEQ ID NO.：75 100 98.3 84.6 85.2 85.5 SEQ ID NO.：77 100 84.8 84.9 85.4 SEQ ID NO.：83 100 96 83.3 SEQ ID NO.：85 100 83 SEQ ID NO.：79 100 克隆A
氨基酸同一性的范围在大约85-98％之间。因此，正如此处所述，这些序列可用于基因的改组。
图14c显示了上面的相应多肽序列的核酸对齐。这些淀粉酶在表达载体pSE420和宿主细胞系XL-Blue中的表达 显示了1703和1706具有淀粉酶活性。
实施例9
文库63 GP-1α淀粉酶最适pH的表征和比活性的确定
在最初的试验中，来自Thermococcus的SEQ ID NO.：81显示了， 它不仅对于用于谷物湿研磨的淀粉液化有效，而且对于用于织物脱浆 有效。该酶的最适pH为4.5-5.0。在这样低的pH下，可能使用很少的 钙或不使用钙，这会降低整个运作成本和减少副产物形成。另外，在 这样低的pH下，减少了化学品的使用和离子交换载体的使用。工业标 准的地衣芽孢杆菌淀粉酶的热稳定性和最适pH属于次最佳的。与地衣 芽孢杆菌淀粉酶相比，63GP-1淀粉酶具有较高的应用比活性，因此水 解一吨淀粉需要的酶会更少(使用的酶可以少至20倍)。
水解淀粉的最适pH通过将50μL GP-1，0.35U/ml与100ml 1％可 溶淀粉溶液(淀粉0.0175U/g)在95℃反应30分钟来确定。正如此处 所述，在液化淀粉溶液中产生的还原端通过neocupronine分析测量。 玉米淀粉的水解百分比通过用neocupronine分析测量所产生的糖还原 端来确定。称取70g缓冲溶液(pH4-7)，加入100ppm钙。将30g玉 米淀粉混合到缓冲溶液中，形成淀粉浆料。加入酶，密封容器，用每 分钟6℃的起始加热速率在95℃温育30分钟。从反应烧杯中提取1ml 样品，并且用neocupronine分析法进行分析。GP-1的最适pH为4.5 到5之间，而商业上的地衣芽孢杆菌淀粉酶在大约pH 6.0发挥最佳作 用。
实施例10
淀粉酶连接再装配
从亲本克隆SEQ ID NO.：81，SEQ ID NO.：77，SEQ ID NO.：79中 的每一个扩增9个片段(每一个片段大约150bp)，覆盖了整个开放阅 读框。引物提供在表8中。
表8
SEQ ID NO：
GAACACTAGTAGGAGGTAACTTATGGCAAAGTATTCCGAGCTCGAAG 258 SpeI
GAACGGTCTCATTCCGCCAGCCAGCAAGGGGATGAGCGG 259 BsaI
GAACCGTCTCAAAACACGGCCCATGCCTACGGC 260 BsmBI
GAACGTCTCACCTCGACTTCCACCCCAACGAGGTCAAG 261 BsmAI
GAACGTCTCAGGCGCTTTGACTACGTGAAGGGC 262 BsmAI
GAACGGTCTCAACAAGATGGATGAGGCCTTTG 263 BsaI
GAACCGTCTCACGATATAATCTGGAACAAGTACCTTGC 264 BsmBI
GAACCGTCTCAGAAGCACGAGCATAGTTTACTACG 265 BsmBI
GAACCGTCTCAAAGGTGGGTTTATGTGCCG 266 BsmBI
GAACGTCTCAGGAATCCAAATGGCGGATATTCCCGC 267 BsmAI
GAACGGTCTCAGTTTATCATATTGATGAGCTCC 268 BsaI
GAACCGTCTCAGAGGTAGTTGGCAGTATATTTG 269 BsmBI
GAACGTCTCACGCCAGGCATCAACGCCGATG 270 BsmAI
GAACGTCTCATTGTAGTAGAGCGGGAAGTC 271 BsmAI
GAACGGTCTCAATCGGTGTCGTGGTTTGCTAC 272 BsaI
GAACCGTCTCACTTCCACCTGCGAGGTGGTC 273 BsmBI
GAACCGTCTCACCTTCCAACCTTGCTCGAGC 274 BsmBI
TCGAGACTGACTCTCACCCAACACCGCAATAGC 275
GAACACTAGTAGGAGGTAACTTATGGCCAAGTACCTGGAGCTCGAAG 276 SpeI
AGG
GAACGGTCTCATTCCCCCGGCGAGCAAGGGC 277 BsaI
GAACCGTCTCAAAACACCGCCCACGCCTACGG 278 BsmBI
GAACGTCTCACCTCGACTTCCACCCCAAC 279 BsmAI
GAACGTCTCAGGCGCTTCGACTACGTCAAGG 280 BsmAI
GAACGGTCTCAACAAGATGGACGCGGCCTTTGAC 281 BsaI
GAACCGTCTCACGATATAATTTGGAACAAGTACCC 282 BsmBI
GAACCGTCTCAGAAGCACCGACATAGTCTAC 283 BsmBI
GAACCGTCTCAAAGGTGGGTCTACGTTCCG 284 BsmBI
GAACGTCTCAGGAATCCATATTGCGGAGATTCCGGC 285 BsmAI
GAACGGTCTCAGTTTATCATGTTCACGAGCTC 286 BsaI
GAACCGTCTCAGAGGTAGTTGGCCGTGTACTTG 287 BsmBI
GAACGTCTCAGCCATGCGTCAACGCCGATG 288 BsmAI
GAACGTCTCATTGTAGTAGAGCGGGAAGTCG 289 BsmAI
GAACGGTCTCAATCGGTGTCGTGGTTTGCAACG 290 BsaI
GAACCGTCTCACTTCCACCGGCGAGGTGGTCGTG 291 BsmBI
GAACCGTCTCACCTTCCGGCCTTGCTCGAGCC 292 BsmBI
TCGAGACTGACTCTCAGCCCACCCCGCAGTAGCTC 293
GAACACTAGTAGGAGGTAACTTATGGCCAAGTACTCCGAGCTGGAAG 294 SpeI
AGG
GAACGGTCTCATTCCTCCCGCGAGCAAGGG 295 BsaI
GAACCGTCTCAAAACACCGCCCACGCCTATG 296 BsmBI
GAACGTCTCACCTCGACTTCCACCCGAACGAGC 297 BsmAI
GAACGTCTCAGGCGCTTCGACTACGTCAAGG 298 BsmAI
GAACGGTCTCAACAAGATGGACGAGGCCTTCG 299 BsaI
GAACCGTCTCACGATATAATCTGGAACAAG 300 BsmBI
GAACCGTCTCAGAAGCACTGACATCGTTTACTACG 301 BsmBI
GAACCGTCTCAAAGGTGGGTTTACGTTCCG 302 BsmBI
GAACGTCTCAGGAATCCATATCGCCGAAAT 303 BsmAI
GAACGGTCTCAGTTTATCATGTTTATGAGC 304 BsaI
GAACCGTCTCAGAGGTAGTTGGCCGTGTATTTAC 305 BsmBI
GAACGTCTCACGCCAGGCATCGATGCCGAT 306 BsmAI
GAACGTCTCATTGTAGTAGAGGGCGAAGTCAAAG 307 BsmAI
GAACGGTCTCAATCGGTATCGTGGTTGGCTACAAAC 308 BsaI
GAACCGTCTCACTTCCTCCGGCGAGGTTGTCATG 309 BsmBI
GAACCGTCTCACCTTCCGGCTTTGCTTGAGGC 310 BsmBI
TCGAGACTGACTCTCACCCAACACCGCAGTAGCTCC 311
CACACAGCAGCAACCAACCTCGAGACTGACTCTCASCC 312 BbvI
PCR所用的条件是：3分钟94℃，(30秒94℃；30秒55℃，30 秒68℃)×30个循环，随后10分钟68℃。将与来自三个亲本的同源 区相对应的PCR产物集中(1∶1∶1)，用适当的限制酶切割(参见表 8)，并且凝胶纯化。混合等量的片段库，并且将其连接(16℃；过夜)。 将所得到的450bp连接产物凝胶纯化并且连接，得到全长淀粉酶基因。 将所得到的全长产物凝胶纯化，并且用F1引物SEQ ID NO.：81，SEQ ID NO.：77，SEQ ID NO.：79和引物(SEQ ID NO.：312)的混合物进行PCR 扩增。PCR所用的条件如下：3分钟94℃，(30秒94℃；30秒50℃， 30秒68℃)×30个循环，随后10分钟68℃。纯化所得到的PCR产物 (～1.4kbp)，用SpeI和BbvI切割，凝胶纯化，连接到pMYC来自 Mycogen的载体，用SpeI/XhoI切割)中，并且转化到大肠杆菌Top10 中。分离来自～21000集落库中的质粒DNA，并且将其转化到假单孢 菌属(Pseudomonas)中。
重配α-淀粉酶的筛选
将所转化的荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens(MB214))通 过FACS挑选到96孔或384孔平板中，并且用6M尿素进行处理，所 述转化的荧光假单胞菌(MB214)含有衍生自亲本克隆SEQ ID NO.：81， SEQ ID NO.：77，SEQ ID NO.：79的pMYC。如下面所更详细描述的， 用RBB-淀粉和/或异硫氰酸荧光素淀粉(FITC-淀粉)作为底物完成最 初筛选。使用诱导的培养物并且通过液化分析，用RBB-淀粉作为底物 筛选提高活性的克隆。基于液化数据，储存新的提高活性的克隆，并 且对其进行测序。
收集所转化的重配淀粉酶文库(MB214(Pf))，并且在50μL LB+Tet 中以1细胞/孔将其挑选到96孔平板(或384孔平板)中。复制与每孔 相应的平板，用于储存。将45μL 12M尿素加入到每一孔中，将平板振 荡10分钟。将平板于室温保持至少1小时，将溶菌产物于4℃储存。
用RBB-淀粉进行分析
75μL RBB-淀粉底物(在50mM NaAc缓冲液中的1％RBB-不可溶 玉米淀粉，pH＝4.5)加入到新96孔平板(V-底)中的每一孔中。用 Biomek或Zymark将5μL酶溶菌产物转移到每一含有底物的孔中。用 铝封条密封平板，在摇床上短暂地振荡。于90℃将平板温育30分钟， 随后于室温冷却5-10分钟。将100μL 100％乙醇加入到每一孔中，密封 平板，在摇床上短暂地振荡。然后用台式离心机以4000rpm将平板离 心20分钟。用Biomek将100μL上清液转移到一个新的96孔平板(平 底)中，并且读取OD595。对照组：SEQ ID NO.：81，SEQ ID NO.：77， SEQ ID NO.：79。
用FITC-淀粉进行分析
将50μL底物(在100mM NaAc缓冲液中的0.01％FITC淀粉，pH ＝4.5)加入到一个新的384孔平板的每一孔中。将5μL酶溶菌产物转 移到含有底物的每一孔中，于室温将平板温育过夜。读取每一孔底物 的极化变换，激发485nm，发射535nm。对照组：SEQ ID NO.：81，SEQ ID NO.：77，SEQ ID NO.：79。优选地，所有分析使用96孔平板。
新活性克隆的确认
培养筛选所得的每一阳性克隆，用标准方法进行诱导。检查每一 克隆的生长(即，一段时间内的细胞密度)，每细胞水平的活性(RBB- 淀粉分析和液化分析)，蛋白质的表达(蛋白凝胶)和可溶性(通过显 微镜分析)。转移所确认的新的升高克隆，用于发酵。
尽管本发明已经参考其某些优选实施方案进行了详细描述，应该 可以理解到修饰和变化也在所描述的和所请求保护的范围和精神内。
序列表
<110>戴弗萨公司
<120>具有α淀粉酶活性的酶及其使用方法
<130>09010-108WO1
<140>PCT/US02/05068
<141>2002-02-21
<150>US 60/270,495
<151>2001-02-21
<150>US 60/270,496
<151>2001-02-21
<150>US 60/291,122
<151>2001-05-14
<160>321
<170>FastSEQ for Windows Version 4.0
<210>1
<211>1311
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>合成产生的寡核苷酸
<400>1
atggcaaagt attccgagct cgaagagggc gggctcataa tgcaggcctt ctactgggac 60
gtccccatgg gaggaatctg gtgggacacg atagcccaga agatacccga ctgggcaagc 120
gccgggattt cggcgatatg gattcccccg gcgagcaagg gcatgggcgg cgcctattcg 180
atgggctacg acccctacga cttctttgac ctcggtgagt acgaccagaa gggaacggta 240
gagacgcgct ttggctccaa gcaggagctc gtgaacatga taaacaccgc ccacgcctat 300
ggcatgaagg taatagccga tatagtcatc aaccaccgcg ccggcggtga cctggagtgg 360
aaccccttcg tgaacgacta tacctggacc gacttctcaa aggtcgcgtc gggtaaatac 420
acggccaact acctcgactt ccacccgaac gagctccatg cgggcgattc cggaacattt 480
ggaggctatc ccgacatatg ccacgacaag agctgggacc agtactggct ctgggccagc 540
caggagagct acgcggcata tctcaggagc atcggcatcg atgcctggcg cttcgactac 600
gtcaagggct acggagcgtg ggtcgtcaag gactggctgg actggtgggg aggctgggcc 660
gtcggggagt actgggacac aaacgttgat gcactgctca actgggccta ctcgagcgat 720
gcaaaagtct tcgacttccc gctctactac aagatggacg cggcctttga eaacaagaac 780
attcccgcac tcgtcgaggc cctcaagaac gggggcacag tcgtcagccg cgacccgttt 840
aaggccgtaa ccttcgttgc aaaccacgac accgatataa tctggaacaa gtatccagcc 900
tacgcgttca tcctcaccta cgagggccag ccgacaatat tctaccgcga ctacgaggag 960
tggctcaaca aggataagct caagaacctc atctggatac atgacaacct cgccggagga 1020
agcactgaca tcgtttacta cgacaacgac gagctgatat tcgtgagaaa cggctacgga 1080
agcaagccgg gactgataac atacatcaac ctcgcctcaa gcaaagccgg aaggtgggtt 1140
tacgttccga agttcgcagg ctcgtgcata cacgagtaca ccggcaatct cggcggctgg 1200
gtggacaagt gggtggactc aagcggctgg gtctacctcg aggctcctgc ccacgacccg 1260
gccaacggcc agtacggcta ctccgtctgg agctactgcg gtgttgggtg a 1311
<210>2
<211>436
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>合成产生的多肽
<400>2
Met Ala Lys Tyr Ser Glu Leu Glu Glu Gly Gly Leu Ile Met Gln Ala
1 5 10 15
Phe Tyr Trp Asp Val Pro Met Gly Gly Ile Trp Trp Asp Thr Ile Ala
20 25 30
Gln Lys Ile Pro Asp Trp Ala Ser Ala Gly Ile Ser Ala Ile Trp Ile
35 40 45
Pro Pro Ala Ser Lys Gly Met Gly Gly Ala Tyr Ser Met Gly Tyr Asp
50 55 60
Pro Tyr Asp Phe Phe Asp Leu Gly Glu Tyr Asp Gln Lys Gly Thr Val
65 70 75 80
Glu Thr Arg Phe Gly Ser Lys Gln Glu Leu Val Asn Met Ile Asn Thr
85 90 95
Ala His Ala Tyr Gly Met Lys Val Ile Ala Asp Ile Val Ile Asn His
100 105 110
Arg Ala Gly Gly Asp Leu Glu Trp Asn Pro Phe Val Asn Asp Tyr Thr
115 120 125
Trp Thr Asp Phe Ser Lys Val Ala Ser Gly Lys Tyr Thr Ala Asn Tyr
130 135 140
Leu Asp Phe His Pro Asn Glu Leu His Ala Gly Asp Ser Gly Thr Phe
145 150 155 160
Gly Gly Tyr Pro Asp Ile Cys His Asp Lys Ser Trp Asp Gln Tyr Trp
165 170 175
Leu Trp Ala Ser Gln Glu Ser Tyr Ala Ala Tyr Leu Arg Ser Ile Gly
180 185 190
Ile Asp Ala Trp Arg Phe Asp Tyr Val Lys Gly Tyr Gly Ala Trp Val
195 200 205
Val Lys Asp Trp Leu Asp Trp Trp Gly Gly Trp Ala Val Gly Glu Tyr
210 215 220
Trp Asp Thr Asn Val Asp Ala Leu Leu Asn Trp Ala Tyr Ser Ser Asp
225 230 235 240
Ala Lys Val Phe Asp Phe Pro Leu Tyr Tyr Lys Met Asp Ala Ala Phe
245 250 255
Asp Asn Lys Asn Ile Pro Ala Leu Val Glu Ala Leu Lys Asn Gly Gly
260 265 270
Thr Val Val Ser Arg Asp Pro Phe Lys Ala Val Thr Phe Val Ala Asn
275 280 285
His Asp Thr Asp Ile Ile Trp Asn Lys Tyr Pro Ala Tyr Ala Phe Ile
290 295 300
Leu Thr Tyr Glu Gly Gln Pro Thr Ile Phe Tyr Arg Asp Tyr Glu Glu
305 310 315 320
Trp Leu Asn Lys Asp Lys Leu Lys Asn Leu Ile Trp Ile His Asp Asn
325 330 335
Leu Ala Gly Gly Ser Thr Asp Ile Val Tyr Tyr Asp Asn Asp Glu Leu
340 345 350
Ile Phe Val Arg Asn Gly Tyr Gly Ser Lys Pro Gly Leu Ile Thr Tyr
355 360 365
Ile Asn Leu Ala Ser Ser Lys Ala Gly Arg Trp Val Tyr Val Pro Lys
370 375 380
Phe Ala Gly Ser Cys Ile His Glu Tyr Thr Gly Asn Leu Gly Gly Trp
385 390 395 400
Val Asp Lys Trp Val Asp Ser Ser Gly Trp Val Tyr Leu Glu Ala Pro
405 410 415
Ala His Asp Pro Ala Asn Gly Gln Tyr Gly Tyr Ser Val Trp Ser Tyr
420 425 430
Cys Gly Val Gly
435
<210>3
<211>1311
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>合成产生的寡核苷酸
<400>3
atggccaagt acctggagct cgaagagggc gggctcataa tgcaggcctt ctactgggac 60
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ggcatcaagg tcatcgcaga catagtaatc aaccaccgcg ccggaggaga ccttgagtgg 360
aaccccttcg tcaatgacta cacctggacg gacttctcga aggtcgcttc cggcaagtac 420
acggccaatt acctcgactt ccacccgaac gagctccatg cgggcgattc cggaacattt 480
ggaggctatc ccgacatatg ccacgacaag agctgggacc agtactggct ctgggccagc 540
caggagagct acgcggcata tctcaggagc atcggcatcg atgcctggcg cttcgactac 600
gtcaagggct atgctccctg ggtcgtcaag gactggctga actggtgggg aggctgggcg 660
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gccaacggct attacggcta ctccgtctgg agctattgcg gtgttgggtg a 1311
<210>4
<211>436
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>合成产生的多肽
<400> 4
Met Ala Lys Tyr Leu Glu Leu Glu Glu Gly Gly Leu Ile Met Gln Ala
1 5 10 15
Phe Tyr Trp Asp Val Pro Met Gly Gly Ile Trp Trp Asp Thr Ile Ala
20 25 30
Gln Lys Ile Pro Asp Trp Ala Ser Ala Gly Ile Ser Ala Ile Trp Ile
35 40 45
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50 55 60
Pro Tyr Asp Phe Phe Asp Leu Gly Glu Tyr Asp Gln Lys Gly Thr Val
65 70 75 80
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115 120 125
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130 135 140
Leu Asp Phe His Pro Asn Glu Leu His Ala Gly Asp Ser Gly Thr Phe
145 150 155 160
Gly Gly Tyr Pro Asp Ile Cys His Asp Lys Ser Trp Asp Gln Tyr Trp
165 170 175
Leu Trp Ala Ser Gln Glu Ser Tyr Ala Ala Tyr Leu Arg Ser Ile Gly
180 185 190
Ile Asp Ala Trp Arg Phe Asp Tyr Val Lys Gly Tyr Ala Pro Trp Val
195 200 205
Val Lys Asp Trp Leu Asn Trp Trp Gly Gly Trp Ala Val Gly Glu Tyr
210 215 220
Trp Asp Thr Asn Val Asp Ala Val Leu Asn Trp Ala Tyr Ser Ser Gly
225 230 235 240
Ala Lys Val Phe Asp Phe Ala Leu Tyr Tyr Lys Met Asp Glu Ala Phe
245 250 255
Asp Asn Lys Asn Ile Pro Ala Leu Val Ser Ala Leu Gln Asn Gly Gln
260 265 270
Thr Val Val Ser Arg Asp Pro Phe Lys Ala Val Thr Phe Val Ala Asn
275 280 285
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290 295 300
Leu Thr Tyr Glu Gly Gln Pro Thr Ile Phe Tyr Arg Asp Tyr Glu Glu
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Trp Leu Asn Lys Asp Lys Leu Lys Asn Leu Ile Trp Ile His Asp Asn
325 330 335
Leu Ala Gly Gly Ser Thr Asp Ile Val Tyr Tyr Asp Asn Asp Glu Leu
340 345 350
Ile Phe Val Arg Asn Gly Tyr Gly Ser Lys Pro Gly Leu Ile Thr Tyr
355 360 365
Ile Asn Leu Ala Ser Ser Glu Ala Gly Arg Trp Val Tyr Val Pro Lys
370 375 380
Phe Ala Gly Ala Cys Ile His Glu Tyr Thr Gly Asn Leu Gly Gly Trp
385 390 395 400
Val Asp Lys Trp Val Asp Ser Ser Gly Trp Val Tyr Leu Glu Ala Pro
405 410 415
Ala His Asp Pro Ala Asn Gly Tyr Tyr Gly Tyr Ser Val Trp Ser Tyr
420 425 430
Cys Gly Val Gly
435
<210>5
<211>1311
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>合成产生的寡核苷酸
<400>5
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<210>6
<211>436
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>合成产生的多肽
<400> 6
Met Ala Lys Tyr Ser Glu Leu Glu Glu Gly Gly Val Ile Met Gln Ala
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Phe Tyr Trp Asp Val Pro Gly Gly Gly Ile Trp Trp Asp Thr Ile Arg
20 25 30
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35 40 45
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Pro Tyr Asp Phe Phe Asp Leu Gly Glu Tyr Asp Gln Lys Gly Thr Val
65 70 75 80
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115 120 125
Trp Thr Asp Phe Ser Lys Val Ala Ser Gly Lys Tyr Thr Ala Asn Tyr
130 135 140
Leu Asp Phe His Pro Asn Glu Leu His Ala Gly Asp Ser Gly Thr Phe
145 150 155 160
Gly Gly Tyr Pro Asp Ile Cys His Asp Lys Ser Trp Asp Gln Tyr Trp
165 170 175
Leu Trp Ala Ser Gln Glu Ser Tyr Ala Ala Tyr Leu Arg Ser Ile Gly
180 185 190
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195 200 205
Val Lys Asp Trp Leu Asn Trp Trp Gly Gly Trp Ala Val Gly Glu Tyr
210 215 220
Trp Asp Thr Asn Val Asp Ala Val Leu Asn Trp Ala Tyr Ser Ser Gly
225 230 235 240
Ala Lys Val Phe Asp Phe Ala Leu Tyr Tyr Lys Met Asp Glu Ala Phe
245 250 255
Asp Asn Lys Asn Ile Pro Ala Leu Val Ser Ala Leu Gln Asn Gly Gln
260 265 270
Thr Val Val Ser Arg Asp Pro Phe Lys Ala Val Thr Phe Val Ala Asn
275 280 285
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Leu Thr Tyr Glu Gly Gln Pro Val Ile Phe Tyr Arg Asp His Glu Glu
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Trp Leu Asn Lys Asp Arg Leu Asn Asn Leu Ile Trp Ile His Asp His
325 330 335
Leu Ala Gly Gly Ser Thr Asp Ile Val Tyr Tyr Asp Asn Asp Glu Leu
340 345 350
Ile Phe Val Arg Asn Gly Tyr Gly Asp Lys Pro Gly Leu Ile Thr Tyr
355 360 365
Ile Asn Leu Gly Ser Ser Lys Ala Gly Arg Trp Val Tyr Val Pro Lys
370 375 380
Phe Ala Gly Ala Cys Ile His Glu Tyr Thr Gly Asn Leu Gly Gly Trp
385 390 395 400
Val Asp Lys Tyr Val Tyr Ser Ser Gly Trp Val Tyr Leu Glu Ala Pro
405 410 415
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Cys Gly Val Gly
435
<210>7
<211>16
<212>PRT
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<400>7
Met Ala Leu Glu Glu Gly Gly Leu Ile Met Gln Ala Phe Tyr Trp Asp
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<210>8
<211>26
<212>PRT
<213>细菌的
<400> 8
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1 5 10 15
Ala Gly Leu Tyr Ala Gln Pro Ala Gly Ala
20 25
<210>9
<211>1311
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>合成产生的寡核苷酸
<400>9
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<210>10
<211>436
<212>PRT
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<220>
<223>合成产生的多肽
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Gly Gly Tyr Pro Asp Ile Cys His Asp Lys Ser Trp Asp Gln Tyr Trp
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Leu Trp Ala Ser Gln Glu Ser Tyr Ala Ala Tyr Leu Arg Ser Ile Gly
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Ile Asp Ala Trp Arg Phe Asp Tyr Val Lys Gly Tyr Ala Pro Trp Val
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Val Lys Asp Trp Leu Asn Trp Trp Gly Gly Trp Ala Val Gly Glu Tyr
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Trp Asp Thr Asn Val Asp Ala Val Leu Asn Trp Ala Tyr Ser Ser Gly
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435
<210>11
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<220>
<223>合成产生的寡核苷酸
<400>11
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100 105 110
Arg Ala Gly Gly Asp Leu Glu Trp Asn Pro Phe Val Asn Asp Tyr Thr
115 120 125
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atgggctacg acccctacga cttctttgac ctcggtgagt atgaccagaa gggaacggta 240
gagacgcgct ttggctccaa gcaggagctc gtgaacatga taaacacggc acatgcctac 300
ggcataaagg tcatagcgga catcgtcata aaccaccgcg caggcggaga cctcgagtgg 360
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275 280 285
His Asp Thr Asp Ile Ile Trp Asn Lys Tyr Pro Ala Tyr Ala Phe Ile
290 295 300
Leu Thr Tyr Glu Gly Gln Pro Thr Ile Phe Tyr Arg Asp Tyr Glu Glu
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Trp Leu Asn Lys Asp Arg Leu Lys Asn Leu Ile Trp Ile His Asp Tyr
325 330 335
Leu Ala Gly Gly Ser Thr Asp Ile Val Tyr Tyr Asp Asn Asp Glu Leu
340 345 350
Ile Phe Val Arg Asn Gly Tyr Gly Ser Lys Pro Gly Leu Ile Thr Tyr
355 360 365
Ile Asn Leu Ala Ser Ser Lys Ala Gly Arg Trp Val Tyr Val Pro Lys
370 375 380
Phe Ala Gly Ala Cys Ile His Glu Tyr Thr Gly Asn Leu Gly Gly Trp
385 390 395 400
Val Asp Lys Tyr Val Tyr Ser Ser Gly Trp Val Tyr Leu Glu Ala Pro
405 410 415
Ala Tyr Asp Pro Ala Asn Gly Gln Tyr Gly Tyr Ser Val Trp Ser Tyr
420 425 430
Cys Gly Val Gly
435
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<212>DNA
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<220>
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<400>23
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<211>436
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>合成产生的多肽
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435
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<211>1311
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>合成产生的寡核苷酸
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Cys Gly Val Gly
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435
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<212>DNA
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<220>
<223>合成产生的寡核苷酸
<400>65
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<223>合成产生的多肽
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<212>DNA
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Gly Gly Phe Pro Asp Ile Ala His Glu Lys Ser Trp Asp Gln His Trp
165 170 175
Leu Trp Ala Ser Asp Glu Ser Tyr Ala Ala Tyr Leu Arg Ser Ile Gly
180 185 190
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225 230 235 240
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245 250 255
Asp Asn Asn Asn Ile Pro Ala Leu Val Asp Ala Leu Arg Tyr Gly Gln
260 265 270
Thr Val Val Ser Arg Asp Pro Phe Lys Ala Val Thr Phe Val Ala Asn
275 280 285
His Asp Thr Asp Ile Ile Trp Asn Lys Tyr Pro Ala Tyr Ala Phe Ile
290 295 300
Leu Thr Tyr Glu Gly Gln Pro Thr Ile Phe Tyr Arg Asp Tyr Glu Glu
305 310 315 320
Trp Leu Asn Lys Asp Lys Leu Lys Asn Leu Ile Trp Ile His Asp Asn
325 330 335
Leu Ala Gly Gly Ser Thr Ser Ile Val Tyr Tyr Asp Ser Asp Glu Met
340 345 350
Ile Phe Val Arg Asn Gly Tyr Gly Ser Lys Pro Gly Leu Ile Thr Tyr
355 360 365
Ile Asn Leu Gly Ser Ser Lys Val Gly Arg Trp Val Tyr Val Pro Lys
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Phe Ala Gly Ala Cys Ile His Glu Tyr Thr Gly Asn Leu Gly Gly Trp
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405 410 415
Ala His Asp Pro Ala Asn Gly Tyr Tyr Gly Tyr Ser Val Trp Ser Tyr
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<213>环境的
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100 105 110
Ser Ala Ile Asp Ala Leu His Lys Gln Asn Ile Asp Val Tyr Gly Asp
115 120 125
Val Val Met Asn His Lys Gly Gly Ala Asp Tyr Thr Glu Thr Val Thr
130 135 140
Ala Val Glu Val Asp Arg Asn Asn Arg Asn Ile Glu Val Ser Gly Asp
145 150 155 160
Tyr Gln Ile Ser Ala Trp Thr Gly Phe Asn Phe Pro Gly Arg Gly Asp
165 170 175
Ala Tyr Ser Asn Phe Lys Trp Lys Trp Tyr His Phe Asp Gly Thr Asp
180 185 190
Trp Asp Glu Gly Arg Lys Leu Asn Arg Ile Tyr Lys Phe Arg Gly Val
195 200 205
Asp Lys Ala Trp Asp Trp Glu Val Ser Ser Glu Asn Gly Asn Tyr Asp
210 215 220
Tyr Leu Met Tyr Ala Asp Leu Asp Phe Asp His Pro Asp Val Ala Asn
225 230 235 240
Glu Met Lys Asn Trp Gly Thr Trp Tyr Ala Asn Glu Leu Asn Leu Asp
245 250 255
Gly Phe Arg Leu Asp Ala Val Lys His Ile Asp His Glu Tyr Leu Arg
260 265 270
Asp Trp Val Asn His Ala Arg Gln Gln Thr Gly Lys Glu Met Phe Thr
275 280 285
Val Ala Glu Tyr Trp Gln Asn Asp Val Gln Ala Leu Asn Asn Tyr Leu
290 295 300
Ala Lys Val Asn Tyr Asn Gln Ser Val Phe Asp Ala Pro Leu His Tyr
305 310 315 320
Asn Phe His Tyr Ala Ser Thr Gly Asn Gly Asn Tyr Asp Met Arg Asn
325 330 335
Ile Leu Asn Gly Thr Val Met Lys Asn His Pro Ala Leu Ala Val Thr
340 345 350
Leu Val Glu Asn His Asp Ser Gln Pro Gly Gln Ser Leu Glu Ser Val
355 360 365
Val Ser Pro Trp Phe Lys Pro Leu Ala Tyr Ala Phe Ile Leu Thr Arg
370 375 380
Ala Glu Gly Tyr Pro Ser Val Phe Tyr Gly Asp Tyr Tyr Gly Thr Ser
385 390 395 400
Gly Asn Ser Ser Tyr Glu Ile Pro Ala Leu Lys Asp Lys Ile Asp Pro
405 410 415
Ile Leu Thr Ala Arg Lys Asn Phe Ala Tyr Gly Thr Gln Arg Asp Tyr
420 425 430
Leu Asp His Pro Asp Val Ile Gly Trp Thr Arg Glu Gly Asp Gly Val
435 440 445
His Ala Asn Ser Gly Leu Ala Thr Leu Leu Ser Asp Gly Pro Gly Gly
450 455 460
Ser Lys Trp Met Asp Val Gly Lys Asn Asn Ala Gly Glu Val Trp Tyr
465 470 475 480
Asp Ile Thr Gly Asn Gln Thr Asn Thr Val Thr Ile Asn Lys Asp Gly
485 490 495
Trp Gly Gln Phe Tyr Val Ser Gly Gly Ser Val Ser Ile Tyr Val Gln
500 505 510
Arg
<210>71
<211>1311
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>合成产生的寡核苷酸
<400>71
atggccaagt acctggagct cgaagagggc ggggtcataa tgcaggcgtt ctactgggac 60
gtgccttcag gaggaatatg gtgggacaca atacggcaga agataccgga gtggtacgat 120
gccggaatct ccgcaatatg gattcccccg gcgagcaagg gcatgggcgg cgcctattcg 180
atgggctacg acccctacga cttctttgac ctcggtgagt acgaccagaa gggaacggta 240
gagacgcgct ttggctccaa gcaggagctc gtgaacatga taaacacggc ccatgcctac 300
ggcataaagg tcatagcgga catcgtcata aaccaccgcg caggcggaga cctcgagtgg 360
aacccgttcg ttggggacta cacctggacg gacttctcaa aggtagcctc gggcaaatat 420
actgccaact acctcgactt ccacccgaac gagctccatg cgggcgattc cggaacattt 480
ggaggctatc ccgacatatg ccacgacaag agctgggacc agtactggct ctgggccagc 540
caggagagct acgcggcata tctcaggagc atcggcatcg atgcctggcg cttcgactac 600
gtcaagggct atgctccctg ggtcgtcaag gactggctga actggtgggg aggctgggcg 660
gttggagagt actgggacac caacgtcgac gctgttctca actgggcata ctcgagcggt 720
gccaaggtct ttgacttcgc cctctactac aagatggatg aggcctttga caacaaaaac 780
attccagcgc tcgtctctgc ccttcagaac ggccagactg ttgtctcccg cgacccgttc 840
aaggccgtaa cctttgtagc aaaccacgac accgatataa tctggaacaa gtatccagcc 900
tacgcgttca tcctcaccta cgagggccag ccgacaatat tctaccgcga ctacgaggag 960
tggctcaaca aggataagct caagaacctc atctggatac atgacaacct cgccggagga 1020
agcactgaca tcgtttacta cgacaacgac gagctgatat tcgtgagaaa cggctacgga 1080
agcaagccgg gactgataac atacatcaac ctcgcctcaa gcaaagccgg aaggtgggtt 1140
tatgtgccga agttcgcggg cgcgtgcatc cacgagtata ctggtaacct cggaggctgg 1200
gtagacaagt acgtctactc aagcggctgg gtctatctcg aagctccagc ttacgaccct 1260
gccaacgggc agtatggcta ctccgtgtgg agctactgcg gggtgggctg a 1311
<210>72
<211>436
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>合成产生的多肽
<400>72
Met Ala Lys Tyr Leu Glu Leu Glu Glu Gly Gly Val Ile Met Gln Ala
1 5 10 15
Phe Tyr Trp Asp Val Pro Ser Gly Gly Ile Trp Trp Asp Thr Ile Arg
20 25 30
Gln Lys Ile Pro Glu Trp Tyr Asp Ala Gly Ile Ser Ala Ile Trp Ile
35 40 45
Pro Pro Ala Ser Lys Gly Met Gly Gly Ala Tyr Ser Met Gly Tyr Asp
50 55 60
Pro Tyr Asp Phe Phe Asp Leu Gly Glu Tyr Asp Gln Lys Gly Thr Val
65 70 75 80
Glu Thr Arg Phe Gly Ser Lys Gln Glu Leu Val Asn Met Ile Asn Thr
85 90 95
Ala His Ala Tyr Gly Ile Lys Val Ile Ala Asp Ile Val Ile Asn His
100 105 110
Arg Ala Gly Gly Asp Leu Glu Trp Asn Pro Phe Val Gly Asp Tyr Thr
115 120 125
Trp Thr Asp Phe Ser Lys Val Ala Ser Gly Lys Tyr Thr Ala Asn Tyr
130 135 140
Leu Asp Phe His Pro Asn Glu Leu His Ala Gly Asp Ser Gly Thr Phe
145 150 155 160
Gly Gly Tyr Pro Asp Ile Cys His Asp Lys Ser Trp Asp Gln Tyr Trp
165 170 175
Leu Trp Ala Ser Gln Glu Ser Tyr Ala Ala Tyr Leu Arg Ser Ile Gly
180 185 190
Ile Asp Ala Trp Arg Phe Asp Tyr Val Lys Gly Tyr Ala Pro Trp Val
195 200 205
Val Lys Asp Trp Leu Asn Trp Trp Gly Gly Trp Ala Val Gly Glu Tyr
210 215 220
Trp Asp Thr Asn Val Asp Ala Val Leu Asn Trp Ala Tyr Ser Ser Gly
225 230 235 240
Ala Lys Val Phe Asp Phe Ala Leu Tyr Tyr Lys Met Asp Glu Ala Phe
245 250 255
Asp Asn Lys Asn Ile Pro Ala Leu Val Ser Ala Leu Gln Asn Gly Gln
260 265 270
Thr Val Val Ser Arg Asp Pro Phe Lys Ala Val Thr Phe Val Ala Asn
275 280 285
His Asp Thr Asp Ile Ile Trp Asn Lys Tyr Pro Ala Tyr Ala Phe Ile
290 295 300
Leu Thr Tyr Glu Gly Gln Pro Thr Ile Phe Tyr Arg Asp Tyr Glu Glu
305 310 315 320
Trp Leu Asn Lys Asp Lys Leu Lys Asn Leu Ile Trp Ile His Asp Asn
325 330 335
Leu Ala Gly Gly Ser Thr Asp Ile Val Tyr Tyr Asp Asn Asp Glu Leu
340 345 350
Ile Phe Val Arg Asn Gly Tyr Gly Ser Lys Pro Gly Leu Ile Thr Tyr
355 360 365
Ile Asn Leu Ala Ser Ser Lys Ala Gly Arg Trp Val Tyr Val Pro Lys
370 375 380
Phe Ala Gly Ala Cys Ile His Glu Tyr Thr Gly Asn Leu Gly Gly Trp
385 390 395 400
Val Asp Lys Tyr Val Tyr Ser Ser Gly Trp Val Tyr Leu Glu Ala Pro
405 410 415
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420 425 430
Cys Gly Val Gly
435
<210>73
<211>1299
<212>DNA
<213>环境的
<400>73
atggctctgg aagagggcgg gcttataatg caggccttct actgggacgt cccaggtgga 60
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atagcggaca tagtcatcaa ccaccgcgcc ggcggcgacc tggagtggaa tcctttcacc 360
aacagctaca cctggaccga tttctcgaag gtcgcgtcgg gcaagtacac ggccaactac 420
ctcgacttcc acccgaacga gcttcacgcg ggcgattccg gaacatttgg aggctatccc 480
gacatatgcc acgacaagag ctgggaccag cactggctct gggccagcaa cgaaagctac 540
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gctccctggg tcgttaagaa ctggctgaac cggtggggcg gctgggcggt tggagagtac 660
tgggacacca acgtcgatgc actcctgagc tgggcctacg acagcggtgc taaagtcttc 720
gacttcccgc tctactacaa gatggacgag gccttcgata acaacaacat ccccgccctc 780
gtggacgccc tcaagaacgg aggcacggtc gtcagccgcg acccgttcaa agccgtgacc 840
ttcgttgcca accacgatac caacataatc tggaacaagt atccggccta cgccttcatc 900
ctcacctatg agggacagcc ggcaatattc taccgcgact acgaggagtg gctcaacaag 960
gacaggctca ggaacctcat ctggatacac gaccacctcg cgggaggaag cacagacatc 1020
atctactacg acagcgacga gcttatcttc gtgagaaacg gctacgggga caagccggga 1080
ctgataacct acatcaacct cggctcaagc aaggccggaa ggtgggtcta cgttccgaag 1140
ttcgcaggct cgtgcataca cgagtacacc ggcaacctcg gcggctggat tgacaagtgg 1200
gttgactcaa gcggtcgggt ctaccttgag gcccccgccc acgacccggc caacggccag 1260
tacggctact ccgtatggag ctactgcggt gttgggtga 1299
<210>74
<2ll>432
<212>PRT
<213>环境的
<400>74
Met Ala Leu Glu Glu Gly Gly Leu Ile Met Gln Ala Phe Tyr Trp Asp
1 5 10 15
Val Pro Gly Gly Gly Ile Trp Trp Asp Thr Ile Ala Gln Lys Ile Pro
20 25 30
Asp Trp Ala Ser Ala Gly Ile Ser Ala Ile Trp Ile Pro Pro Ala Ser
35 40 45
Lys Gly Met Ser Gly Gly Tyr Ser Met Gly Tyr Asp Pro Tyr Asp Phe
50 55 60
Phe Asp Leu Gly Glu Tyr Tyr Gln Lys Gly Ser Val Glu Thr Arg Phe
65 70 75 80
Gly Ser Lys Glu Glu Leu Val Asn Met Ile Asn Thr Ala His Ala His
85 90 95
Asn Met Lys Val Ile Ala Asp Ile Val I1e Asn His Arg Ala Gly Gly
100 105 110
Asp Leu Glu Trp Asn Pro Phe Thr Asn Ser Tyr Thr Trp Thr Asp Phe
115 120 125
Ser Lys Val Ala Ser Gly Lys Tyr Thr Ala Asn Tyr Leu Asp Phe His
130 135 140
Pro Asn Glu Leu His Ala Gly Asp Ser Gly Thr Phe Gly Gly Tyr Pro
145 150 155 160
Asp Ile Cys His Asp Lys Ser Trp Asp Gln His Trp Leu Trp Ala Ser
165 170 175
Asn Glu Ser Tyr Ala Ala Tyr Leu Arg Ser Ile Gly Ile Asp Ala Trp
180 185 190
Arg Phe Asp Tyr Val Lys Gly Tyr Ala Pro Trp Val Val Lys Asn Trp
195 200 205
Leu Asn Arg Trp Gly Gly Trp Ala Val Gly Glu Tyr Trp Asp Thr Asn
210 215 220
Val Asp Ala Leu Leu Ser Trp Ala Tyr Asp Ser Gly Ala Lys Val Phe
225 230 235 240
Asp Phe Pro Leu Tyr Tyr Lys Met Asp Glu Ala Phe Asp Asn Asn Asn
245 250 255
Ile Pro Ala Leu Val Asp Ala Leu Lys Asn Gly Gly Thr Val Val Ser
260 265 270
Arg Asp Pro Phe Lys Ala Val Thr Phe Val Ala Asn His Asp Thr Asn
275 280 285
Ile Ile Trp Asn Lys Tyr Pro Ala Tyr Ala Phe Ile Leu Thr Tyr Glu
290 295 300
Gly Gln Pro Ala Ile Phe Tyr Arg Asp Tyr Glu Glu Trp Leu Asn Lys
305 310 315 320
Asp Arg Leu Arg Asn Leu Ile Trp Ile His Asp His Leu Ala Gly Gly
325 330 335
Ser Thr Asp Ile Ile Tyr Tyr Asp Ser Asp Glu Leu Ile Phe Val Arg
340 345 350
Asn Gly Tyr Gly Asp Lys Pro Gly Leu Ile Thr Tyr Ile Asn Leu Gly
355 360 365
Ser Ser Lys Ala Gly Arg Trp Val Tyr Val Pro Lys Phe Ala Gly Ser
370 375 380
Cys Ile His Glu Tyr Thr Gly Asn Leu Gly Gly Trp Ile Asp Lys Trp
385 390 395 400
Val Asp Ser Ser Gly Arg Val Tyr Leu Glu Ala Pro Ala His Asp Pro
405 410 415
Ala Asn Gly Gln Tyr Gly Tyr Ser Val Trp Ser Tyr Cys Gly Val Gly
420 425 430
<210>75
<211>1299
<212>DNA
<213>环境的
<400>75
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ggaatctggt gggacacgat agcccagaag atacccgact gggcaagcgc cgggatttcg 120
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ccctacgatt attttgacct cggtgagtac taccagaagg gaacggtgga aacaagattc 240
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atagccgata tagtcatcaa ccaccgcgcc ggcggcgatc tggagtggaa ccccttcgtg 360
aacgactata cctggaccga cttctcgaag gtcgcgtcgg gtaaatacac ggccaactac 420
ctcgacttcc acccgaacga gctccacgcg ggcgattccg gaacatttgg aggctatccc 480
gacatatgcc acgacaagag ctgggaccag tactggctct gggccagcca ggagagctac 540
gcggcctatc tcaggagcat cggcatcgac gcctggcgct tcgactacgt caagggctat 600
gctccctggg tcgtcaggga ctggctgaac tggtggggag gctgggcagt tggagagtac 660
tgggacacca acgtcgacgc tgttctcaac tgggcatact cgagcggtgc caaggtcttt 720
gacttcgccc tctactacaa gatggacgag gccttcgata acaacaacat tcccgccctg 780
gtggacgccc tcagatacgg ccagacagtg gtcagccgcg acccgttcaa ggctgtgacg 840
tttgtagcca accacgatac cgacataatc tggaacaagt atccagccta cgcgttcatc 900
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tacggctact ccgtttggag ctattgcggt gttgggtga 1299
<210>76
<211>432
<212>PRT
<213>环境的
<400>76
Met Ala Leu Glu Glu Gly Gly Leu Ile Met Gln Ala Phe Tyr Trp Asp
1 5 10 15
Val Pro Met Gly Gly Ile Trp Trp Asp Thr Ile Ala Gln Lys Ile Pro
20 25 30
Asp Trp Ala Ser Ala Gly Ile Ser Ala Ile Trp Ile Pro Pro Ala Ser
35 40 45
Lys Gly Met Ser Gly Gly Tyr Ser Met Gly Tyr Asp Pro Tyr Asp Tyr
50 55 60
Phe Asp Leu Gly Glu Tyr Tyr Gln Lys Gly Thr Val Glu Thr Arg Phe
65 70 75 80
Gly Ser Lys Gln Glu Leu Ile Asn Met Ile Asn Thr Ala His Ala Tyr
85 90 95
Gly Met Lys Val Ile Ala Asp Ile Val Ile Asn His Arg Ala Gly Gly
100 105 110
Asp Leu Glu Trp Asn Pro Phe Val Asn Asp Tyr Thr Trp Thr Asp Phe
115 120 125
Ser Lys Val Ala Ser Gly Lys Tyr Thr Ala Asn Tyr Leu Asp Phe His
130 135 140
Pro Asn Glu Leu His Ala Gly Asp Ser Gly Thr Phe Gly Gly Tyr Pro
145 150 155 160
Asp Ile Cys His Asp Lys Ser Trp Asp Gln Tyr Trp Leu Trp Ala Ser
165 170 175
Gln Glu Ser Tyr Ala Ala Tyr Leu Arg Ser Ile Gly Ile Asp Ala Trp
180 185 190
Arg Phe Asp Tyr Val Lys Gly Tyr Ala Pro Trp Val Val Arg Asp Trp
195 200 205
Leu Asn Trp Trp Gly Gly Trp Ala Val Gly Glu Tyr Trp Asp Thr Asn
210 215 220
Val Asp Ala Val Leu Asn Trp Ala Tyr Ser Ser Gly Ala Lys Val Phe
225 230 235 240
Asp Phe Ala Leu Tyr Tyr Lys Met Asp Glu Ala Phe Asp Asn Asn Asn
245 250 255
Ile Pro Ala Leu Val Asp Ala Leu Arg Tyr Gly Gln Thr Val Val Ser
260 265 270
Arg Asp Pro Phe Lys Ala Val Thr Phe Val Ala Asn His Asp Thr Asp
275 280 285
Ile Ile Trp Asn Lys Tyr Pro Ala Tyr Ala Phe Ile Leu Thr Tyr Glu
290 295 300
Gly Gln Pro Thr Ile Phe Tyr Arg Asp Tyr Glu Glu Trp Leu Asn Lys
305 310 315 320
Asp Lys Leu Lys Asn Leu Ile Trp Ile His Asp Asn Leu Ala Gly Gly
325 330 335
Ser Thr Asp Ile Val Tyr Tyr Asp Asn Asp Glu Leu Ile Phe Val Arg
340 345 350
Asn Gly Tyr Gly Ser Lys Pro Gly Leu Ile Thr Tyr Ile Asn Leu Gly
355 360 365
Ser Ser Lys Ala Gly Arg Trp Val Tyr Val Pro Lys Phe Ala Gly Ser
370 375 380
Cys Ile His Glu Tyr Thr Gly Asn Leu Gly Gly Trp Val Asp Lys Trp
385 390 395 400
Val Asp Ser Ser Gly Trp Val Tyr Leu Glu Ala Pro Ala His Asp Pro
405 410 415
Ala Asn Gly Gln Tyr Gly Tyr Ser Val Trp Ser Tyr Cys Gly Val Gly
420 425 430
<210>77
<211>1299
<212>DNA
<213>环境的
<400>77
atggctctgg aagagggcgg gctcataatg caggccttct actgggacgt ccccatggga 60
ggaatctggt gggacacgat agcccagaag atacccgact gggcaagcgc cgggatttcg 120
gcgatatgga tccctcccgc gagcaagggt atgagcggcg gctattcgat gggctacgac 180
ccctacgatt attttgacct cggtgagtac taccagaagg gaacggtgga aacgaggttc 240
ggctcaaagc aggagctcat aaacatgata aacaccgccc acgcctatgg catgaaggta 300
atagccgata tagtcatcaa ccaccgcgcc ggcggtgacc tggagtggaa ccccttcgtg 360
aacgactata cctggaccga cttctcaaag gtcgcgtcgg gtaaatacac ggccaactac 420
ctcgacttcc acccgaacga gctccatgcg ggcgattccg gaacatttgg aggctatccc 480
gacatatgcc acgacaagag ctgggaccag tactggctct gggccagcca ggagagctac 540
gcggcatatc tcaggagcat cggcatcgat gcctggcgct tcgactacgt caagggctat 600
gctccctggg tcgtcaagga ctggctgaac tggtggggag gctgggcggt tggagagtac 660
tgggacacca acgtcgacgc tgttctcaac tgggcatact cgagcggtgc caaggtcttt 720
gacttcgccc tctactacaa gatggacgag gccttcgata acaacaacat tcccgccctg 780
gtggacgccc tcagatacgg tcagacagtg gtcagccgcg acccgttcaa ggctgtgacg 840
tttgtagcca accacgatac cgacataatc tggaacaagt atccagccta cgcgttcatc 900
ctcacctacg agggccagcc gacaatattc taccgcgact acgaggagtg gctcaacaag 960
gataagctca agaacctcat ctggatacat gacaacctcg ccggagggag cactgacatc 1020
gtttactacg acaacgacga gctgatattc gtgagaaacg gctacggaag caagccggga 1080
ctgataacat acatcaacct cgcctcaagc aaagccggaa ggtgggttta cgttccgaag 1140
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gtggactcaa gcggctgggt ctacctcgag gctcctgccc acgacccggc caacggccag 1260
tacggctact ccgtctggag ctactgcggt gttgggtga 1299
<210>78
<211>432
<212>PRT
<213>环境的
<400>78
Met Ala Leu Glu Glu Gly Gly Leu Ile Met Gln Ala Phe Tyr Trp Asp
1 5 10 15
Val Pro Met Gly Gly Ile Trp Trp Asp Thr Ile Ala Gln Lys Ile Pro
20 25 30
Asp Trp Ala Ser Ala Gly Ile Ser Ala Ile Trp Ile Pro Pro Ala Ser
35 40 45
Lys Gly Met Ser Gly Gly Tyr Ser Met Gly Tyr Asp Pro Tyr Asp Tyr
50 55 60
Phe Asp Leu Gly Glu Tyr Tyr Gln Lys Gly Thr Val Glu Thr Arg Phe
65 70 75 80
Gly Ser Lys Gln Glu Leu Ile Asn Met Ile Asn Thr Ala His Ala Tyr
85 90 95
Gly Met Lys Val Ile Ala Asp Ile Val Ile Asn His Arg Ala Gly Gly
100 105 110
Asp Leu Glu Trp Asn Pro Phe Val Asn Asp Tyr Thr Trp Thr Asp Phe
115 120 125
Ser Lys Val Ala Ser Gly Lys Tyr Thr Ala Asn Tyr Leu Asp Phe His
130 135 140
Pro Asn Glu Leu His Ala Gly Asp Ser Gly Thr Phe Gly Gly Tyr Pro
145 150 155 160
Asp Ile Cys His Asp Lys Ser Trp Asp Gln Tyr Trp Leu Trp Ala Ser
165 170 175
Gln Glu Ser Tyr Ala Ala Tyr Leu Arg Ser Ile Gly Ile Asp Ala Trp
180 185 190
Arg Phe Asp Tyr Val Lys Gly Tyr Ala Pro Trp Val Val Lys Asp Trp
195 200 205
Leu Asn Trp Trp Gly Gly Trp Ala Val Gly Glu Tyr Trp Asp Thr Asn
210 215 220
Val Asp Ala Val Leu Asn Trp Ala Tyr Ser Ser Gly Ala Lys Val Phe
225 230 235 240
Asp Phe Ala Leu Tyr Tyr Lys Met Asp Glu Ala Phe Asp Asn Asn Asn
245 250 255
Ile Pro Ala Leu Val Asp Ala Leu Arg Tyr Gly Gln Thr Val Val Ser
260 265 270
Arg Asp Pro Phe Lys Ala Val Thr Phe Val Ala Asn His Asp Thr Asp
275 280 285
Ile Ile Trp Asn Lys Tyr Pro Ala Tyr Ala Phe Ile Leu Thr Tyr Glu
290 295 300
Gly Gln Pro Thr Ile Phe Tyr Arg Asp Tyr Glu Glu Trp Leu Asn Lys
305 310 315 320
Asp Lys Leu Lys Asn Leu Ile Trp Ile His Asp Asn Leu Ala Gly Gly
325 330 335
Ser Thr Asp Ile Val Tyr Tyr Asp Asn Asp Glu Leu Ile Phe Val Arg
340 345 350
Asn Gly Tyr Gly Ser Lys Pro Gly Leu Ile Thr Tyr Ile Asn Leu Ala
355 360 365
Ser Ser Lys Ala Gly Arg Trp Val Tyr Val Pro Lys Phe Ala Gly Ser
370 375 380
Cys Ile His Glu Tyr Thr Gly Asn Leu Gly Gly Trp Val Asp Lys Trp
385 390 395 400
Val Asp Ser Ser Gly Trp Val Tyr Leu Glu Ala Pro Ala His Asp Pro
405 410 415
Ala Asn Gly Gln Tyr Gly Tyr Ser Val Trp Ser Tyr Cys Gly Val Gly
420 425 430
<210>79
<211>1386
<212>DNA
<213>细菌的
<400>79
atgaagcctg cgaaactcct cgtctttgtg ctcgtagtct ctatcctcgc ggggctctac 60
gcccagcccg cgggggcggc caagtacctg gagctcgaag agggcggcgt cataatgcag 120
gcgttctact gggacgtgcc ttcaggagga atatggtggg acacaatacg gcagaagata 180
ccggagtggt acgatgccgg aatctccgca atatggattc ccccggcgag caagggcatg 240
ggcggcgcct attcgatggg ctacgacccc tacgacttct ttgacctcgg tgagtacgac 300
cagaagggaa cggtagagac gcgctttggc tccaagcagg agctcgtgaa catgataaac 360
accgcccacg cctacggcat caaggtcatc gcagacatag taatcaacca ccgcgccgga 420
ggagaccttg agtggaaccc cttcgtcaat gactacacct ggacggactt ctcgaaggtc 480
gcttccggca agtacacggc caactacctc gacttccacc ccaacgaggt caagtgctgc 540
gacgagggca cctttggagg gttcccggac atagcccacg agaagagctg ggaccagtac 600
tggctctggg cgagcaacga gagctacgcc gcctacctca ggagcatcgg cgttgacgca 660
tggcgcttcg actacgtcaa gggctacgga gcgtgggtcg tcaaggactg gctggactgg 720
tggggaggct gggccgtcgg ggagtactgg gacacaaacg ttgatgcact gctcaactgg 780
gcctactcga gcgatgcaaa agtcttcgac ttcccgctct actacaagat ggacgcggcc 840
tttgacaaca agaacattcc cgcactcgtc gaggccctca agaacggggg cacagtcgtc 900
agccgcgacc cgtttaaggc cgtaaccttc gttgcaaacc acgacacgga cataatttgg 960
aacaagtacc cggcctacgc cttcatcctc acctacgagg gccagccgac gatattctac 1020
cgcgactacg aggagtggct caacaaggac aggctcaaga acctcatctg gatacacgac 1080
cacctcgccg gtggaagcac cgacatagtc tactacgata acgatgaact catcttcgtc 1140
aggaacggct acggggacaa gccggggctt ataacctaca tcaacctagg ctcgagcaag 1200
gccgggaggt gggtctacgt tccgaagttc gcgggagcgt gcatccacga gtacaccggc 1260
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ggctga 1386
<210>80
<211>461
<212>PRT
<213>细菌的
<400>80
Met Lys Pro Ala Lys Leu Leu Val Phe Val Leu Val Val Ser Ile Leu
1 5 10 15
Ala Gly Leu Tyr Ala Gln Pro Ala Gly Ala Ala Lys Tyr Leu Glu Leu
20 25 30
Glu Glu Gly Gly Val Ile Met Gln Ala Phe Tyr Trp Asp Val Pro Ser
35 40 45
Gly Gly Ile Trp Trp Asp Thr Ile Arg Gln Lys Ile Pro Glu Trp Tyr
50 55 60
Asp Ala Gly Ile Ser Ala Ile Trp Ile Pro Pro Ala Ser Lys Gly Met
65 70 75 80
Gly Gly Ala Tyr Ser Met Gly Tyr Asp Pro Tyr Asp Phe Phe Asp Leu
85 90 95
Gly Glu Tyr Asp Gln Lys Gly Thr Val Glu Thr Arg Phe Gly Ser Lys
100 105 110
Gln Glu Leu Val Asn Met Ile Asn Thr Ala His Ala Tyr Gly Ile Lys
115 120 125
Val Ile Ala Asp Ile Val Ile Asn His Arg Ala Gly Gly Asp Leu Glu
130 135 140
Trp Asn Pro Phe Val Asn Asp Tyr Thr Trp Thr Asp Phe Ser Lys Val
145 150 155 160
Ala Ser Gly Lys Tyr Thr Ala Asn Tyr Leu Asp Phe His Pro Asn Glu
165 170 175
Val Lys Cys Cys Asp Glu Gly Thr Phe Gly Gly Phe Pro Asp Ile Ala
180 185 190
His Glu Lys Ser Trp Asp Gln Tyr Trp Leu Trp Ala Ser Asn Glu Ser
195 200 205
Tyr Ala Ala Tyr Leu Arg Ser Ile Gly Val Asp Ala Trp Arg Phe Asp
210 215 220
Tyr Val Lys Gly Tyr Gly Ala Trp Val Val Lys Asp Trp Leu Asp Trp
225 230 235 240
Trp Gly Gly Trp Ala Val Gly Glu Tyr Trp Asp Thr Asn Val Asp Ala
245 250 255
Leu Leu Asn Trp Ala Tyr Ser Ser Asp Ala Lys Val Phe Asp Phe Pro
260 265 270
Leu Tyr Tyr Lys Met Asp Ala Ala Phe Asp Asn Lys Asn Ile Pro Ala
275 280 285
Leu Val Glu Ala Leu Lys Asn Gly Gly Thr Val Val Ser Arg Asp Pro
290 295 300
Phe Lys Ala Val Thr Phe Val Ala Asn His Asp Thr Asp Ile Ile Trp
305 310 315 320
Asn Lys Tyr Pro Ala Tyr Ala Phe Ile Leu Thr Tyr Glu Gly Gln Pro
325 330 335
Thr Ile Phe Tyr Arg Asp Tyr Glu Glu Trp Leu Asn Lys Asp Arg Leu
340 345 350
Lys Asn Leu Ile Trp Ile His Asp His Leu Ala Gly Gly Ser Thr Asp
355 360 365
Ile Val Tyr Tyr Asp Asn Asp Glu Leu Ile Phe Val Arg Asn Gly Tyr
370 375 380
Gly Asp Lys Pro Gly Leu Ile Thr Tyr Ile Asn Leu Gly Ser Ser Lys
385 390 395 400
Ala Gly Arg Trp Val Tyr Val Pro Lys Phe Ala Gly Ala Cys Ile His
405 410 415
Glu Tyr Thr Gly Asn Leu Gly Gly Trp Val Asp Lys Trp Val Asp Ser
420 425 430
Ser Gly Trp Val Tyr Leu Glu Ala Pro Ala His Asp Pro Ala Asn Gly
435 440 445
Tyr Tyr Gly Tyr Ser Val Trp Ser Tyr Cys Gly Val Gly
450 455 460
<210>81
<211>1386
<212>DNA
<213>细菌的
<400>81
atgaagaagt ttgtcgccct gttcataacc atgtttttcg tagtgagcat ggcagtcgtt 60
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tggcgctttg actacgtgaa gggctacgga gcgtgggtcg tcaaggactg gctcaactgg 720
tggggcggct gggccgttgg cgagtactgg gacaccaacg ttgatgcact cctcaactgg 780
gcctactcga gcggcgccaa ggtcttcgac ttcccgctct actacaagat ggatgaggcc 840
tttgacaaca aaaacattcc agcgctcgtc tctgcccttc agaacggcca gactgttgtc 900
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gggtga 1386
<210>82
<211>461
<212>PRT
<213>细菌的
<400>82
Met Lys Lys Phe Val Ala Leu Phe Ile Thr Met Phe Phe Val Val Ser
1 5 10 15
Met Ala Val Val Ala Gln Pro Ala Ser Ala Ala Lys Tyr Ser Glu Leu
20 25 30
Glu Glu Gly Gly Val Ile Met Gln Ala Phe Tyr Trp Asp Val Pro Gly
35 40 45
Gly Gly Ile Trp Trp Asp Thr Ile Arg Ser Lys Ile Pro Glu Trp Tyr
50 55 60
Glu Ala Gly Ile Ser Ala Ile Trp Ile Pro Pro Ala Ser Lys Gly Met
65 70 75 80
Ser Gly Gly Tyr Ser Met Gly Tyr Asp Pro Tyr Asp Phe Phe Asp Leu
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Gly Glu Tyr Asn Gln Lys Gly Thr Ile Glu Thr Arg Phe Gly Ser Lys
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Gln Glu Leu Ile Asn Met Ile Asn Thr Ala His Ala Tyr Gly Ile Lys
115 120 125
Val Ile Ala Asp Ile Val Ile Asn His Arg Ala Gly Gly Asp Leu Glu
130 135 140
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145 150 155 160
Ala Ser Gly Lys Tyr Thr Ala Asn Tyr Leu Asp Phe His Pro Asn Glu
165 170 175
Val Lys Cys Cys Asp Glu Gly Thr Phe Gly Gly Phe Pro Asp Ile Ala
180 185 190
His Glu Lys Ser Trp Asp Gln His Trp Leu Trp Ala Ser Asp Glu Ser
195 200 205
Tyr Ala Ala Tyr Leu Arg Ser Ile Gly Val Asp Ala Trp Arg Phe Asp
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Tyr Val Lys Gly Tyr Gly Ala Trp Val Val Lys Asp Trp Leu Asn Trp
225 230 235 240
Trp Gly Gly Trp Ala Val Gly Glu Tyr Trp Asp Thr Asn Val Asp Ala
245 250 255
Leu Leu Asn Trp Ala Tyr Ser Ser Gly Ala Lys Val Phe Asp Phe Pro
260 265 270
Leu Tyr Tyr Lys Met Asp Glu Ala Phe Asp Asn Lys Asn Ile Pro Ala
275 280 285
Leu Val Ser Ala Leu Gln Asn Gly Gln Thr Val Val Ser Arg Asp Pro
290 295 300
Phe Lys Ala Val Thr Phe Val Ala Asn His Asp Thr Asp Ile Ile Trp
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Asn Lys Tyr Leu Ala Tyr Ala Phe Ile Leu Thr Tyr Glu Gly Gln Pro
325 330 335
Val Ile Phe Tyr Arg Asp Tyr Glu Glu Trp Leu Asn Lys Asp Arg Leu
340 345 350
Asn Asn Leu Ile Trp Ile His Asp His Leu Ala Gly Gly Ser Thr Ser
355 360 365
Ile Val Tyr Tyr Asp Ser Asp Glu Met Ile Phe Val Arg Asn Gly Tyr
370 375 380
Gly Ser Lys Pro Gly Leu Ile Thr Tyr Ile Asn Leu Gly Ser Ser Lys
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435 440 445
Gln Tyr Gly Tyr Ser Val Trp Ser Tyr Cys Gly Val Gly
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<210>83
<211>1299
<212>DNA
<213>环境的
<400>83
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<212>PRT
<213>环境的
<400>84
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1 5 10 15
Val Pro Gly Gly Gly Ile Trp Trp Asp Thr Ile Ala Gln Lys Ile Pro
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Glu Trp Ala Ser Ala Gly Ile Ser Ala Ile Trp Ile Pro Pro Ala Ser
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Asp Leu Glu Trp Asn Pro Phe Val Asn Asp Tyr Thr Trp Thr Asp Phe
115 120 125
Ser Lys Val Ala Ser Gly Lys Tyr Thr Ala Asn Tyr Leu Asp Phe His
130 135 140
Pro Asn Glu Leu His Cys Cys Asp Glu Gly Thr Phe Gly Gly Tyr Pro
145 150 155 160
Asp Ile Cys His Asp Lys Ser Trp Asp Gln Tyr Trp Leu Trp Ala Ser
165 170 175
Ser Glu Ser Tyr Ala Ala Tyr Leu Arg Ser Ile Gly Val Asp Ala Trp
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195 200 205
Leu Ser Trp Trp Gly Gly Trp Ala Val Gly Glu Tyr Trp Asp Thr Asn
210 215 220
Val Asp Ala Leu Leu Asn Trp Ala Tyr Ser Ser Gly Ala Lys Val Phe
225 230 235 240
Asp Phe Pro Leu Tyr Tyr Lys Met Asp Glu Ala Phe Asp Asn Thr Asn
245 250 255
Ile Pro Ala Leu Val Asp Ala Leu Arg Tyr Gly Gln Thr Val Val Ser
260 265 270
Arg Asp Pro Phe Lys Ala Val Thr Phe Val Ala Asn His Asp Thr Asp
275 280 285
Ile Ile Trp Asn Lys Tyr Pro Ala Tyr Ala Phe Ile Leu Thr Tyr Glu
290 295 300
Gly Gln Pro Val Ile Phe Tyr Arg Asp Tyr Glu Glu Trp Leu Asn Lys
305 310 315 320
Asp Lys Leu Asn Asn Leu Ile Trp Ile His Asp His Leu Ala Gly Gly
325 330 335
Ser Thr Asp Ile Val Tyr Tyr Asp Ser Asp Glu Leu Ile Phe Val Arg
340 345 350
Asn Gly Tyr Gly Thr Lys Pro Gly Leu Ile Thr Tyr Ile Asn Leu Gly
355 360 365
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370 375 380
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420 425 430
<210>85
<211>1299
<212>DNA
<213>环境的
<400>85
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<210>86
<211>432
<212>PRT
<213>环境的
<400> 86
Met Ala Leu Glu Glu Gly Gly Leu Ile Met Gln Ala Phe Tyr Trp Asp
1 5 10 15
Val Pro Gly Gly Gly Ile Trp Trp Asp Thr Ile Ala Gln Lys Ile Pro
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Glu Trp Ala Ser Ala Gly Ile Ser Ala Ile Trp Ile Pro Pro Ala Ser
35 40 45
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Gly Ser Lys Glu Glu Leu Val Asn Met Ile Asn Thr Ala His Ser Tyr
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Gly Ile Lys Val Ile Ala Asp Ile Val Ile Asn His Arg Ala Gly Gly
100 105 110
Gly Leu Glu Trp Asn Pro Phe Val Asn Asp Tyr Thr Trp Thr Asp Phe
115 120 125
Ser Lys Val Ala Ser Gly Lys Tyr Thr Ala Asn Tyr Leu Asp Phe His
130 135 140
Pro Asn Glu Leu His Cys Cys Asp Glu Gly Thr Phe Gly Gly Tyr Pro
145 150 155 160
Asp Ile Cys His Asp Lys Ser Trp Asp Gln Tyr Trp Leu Trp Ala Ser
165 170 175
Ser Glu Ser Tyr Ala Ala Tyr Leu Arg Ser Ile Gly Val Asp Ala Trp
180 185 190
Cys Phe Asp Tyr Val Lys Gly Tyr Gly Ala Trp Val Val Asn Asp Trp
195 200 205
Leu Ser Trp Trp Gly Gly Trp Ala Val Gly Glu Tyr Trp Asp Thr Asn
210 215 220
Val Asp Ala Leu Leu Asn Trp Ala Tyr Asn Ser Gly Ala Lys Val Phe
225 230 235 240
Asp Phe Pro Leu Tyr Tyr Lys Met Asp Glu Ala Phe Asp Asn Thr Asn
245 250 255
Ile Pro Ala Leu Val Tyr Ala Leu Lys Asn Gly Gly Thr Val Val Ser
260 265 270
Arg Asp Pro Phe Lys Ala Val Thr Phe Val Ala Asn His Asp Thr Asp
275 280 285
Ile Ile Trp Asn Lys Tyr Pro Ala Tyr Ala Phe Ile Leu Thr Tyr Glu
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Gly Gln Pro Val Ile Phe Tyr Arg Asp Tyr Glu Glu Trp Leu Asn Lys
305 310 315 320
Asp Lys Leu Asn Asn Leu Ile Trp Ile His Asp His Leu Ala Gly Gly
325 330 335
Ser Thr Asp Ile Val Tyr Tyr Asp Ser Asp Glu Leu Ile Phe Val Arg
340 345 350
Asn Gly Tyr Gly Thr Lys Pro Gly Leu Ile Thr Tyr Ile Asn Leu Gly
355 360 365
Ser Ser Lys Ala Gly Arg Trp Val Tyr Val Pro Lys Phe Ala Gly Ser
370 375 380
Cys Ile His Glu Tyr Thr Gly Ser Leu Gly Gly Trp Ile Asp Lys Tyr
385 390 395 400
Val Ser Ser Ser Gly Trp Val Tyr Leu Glu Ala Pro Ala His Asp Pro
405 410 415
Ala Asn Gly Gln Tyr Gly Tyr Ser Val Trp Ser Tyr Cys Gly Val Gly
420 425 430
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<212>DNA
<213>环境的
<400>87
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tccaaatcag ggggcgcatt tgatatgcgc acgttaatga ccaatactct catgaaagat 1020
caaccgacat tggccgtcac cttcgttgat aatcatgaca ccgaacccgg ccaagcgctg 1080
cagtcatggg tcgacccatg gttcaaaccg ttggcttacg cctttattct aactcggcag 1140
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65 70 75 80
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100 105 110
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115 120 125
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130 135 140
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195 200 205
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210 215 220
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225 230 235 240
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245 250 255
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275 280 285
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290 295 300
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305 310 315 320
Ser Lys Ser Gly Gly Ala Phe Asp Met Arg Thr Leu Met Thr Asn Thr
325 330 335
Leu Met Lys Asp Gln Pro Thr Leu Ala Val Thr Phe Val Asp Asn His
340 345 350
Asp Thr Glu Pro Gly Gln Ala Leu Gln Ser Trp Val Asp Pro Trp Phe
355 360 365
Lys Pro Leu Ala Tyr Ala Phe Ile Leu Thr Arg Gln Glu Gly Tyr Pro
370 375 380
Cys Val Phe Tyr Gly Asp Tyr Tyr Gly Ile Pro Gln Tyr Asn Ile Pro
385 390 395 400
Ser Leu Lys Ser Lys Ile Asp Pro Leu Leu Ile Ala Arg Arg Asp Tyr
405 410 415
Ala Tyr Gly Thr Gln His Asp Tyr Leu Asp His Ser Asp Ile Ile Gly
420 425 430
Trp Thr Arg Glu Gly Val Thr Glu Lys Pro Gly Ser Gly Leu Ala Ala
435 440 445
Leu Ile Thr Asp Gly Pro Gly Gly Ser Lys Trp Met Tyr Cys Trp Gln
450 455 460
Thr Thr Arg Trp Lys Ser Val Leu
465 470
<210>89
<211>3301
<212>DNA
<213>细菌的
<400>89
atgaaagaag cggttgtgta tcaaattttc ccggatcggt tctttaatgg caacccttca 60
aatgataaca gcaagcagca ggcacgcggg gcgcagccga ttgagcatcg cgattggtcg 120
gatttgcccg ataatccgcg cctgaaaggg acgagcggct acgatggcga cggtgaatgg 180
tcgaatgact ttttcggcgg agacatcgcc ggaattgaac aaaagttgga ttatttgcag 240
tcgcttggag tgaacacgat ttacttaaat ccgatcgcca atgcgccatc gaaccataaa 300
tatgatgcga gcaattacaa agaattggat ccgatgttcg gttccccgga agaattccaa 360
tcgtttgtgc aggcgcttgc gaaccggggg atgcatctca tcttagacgg ggtgttcaac 420
cacgtatccg acgattcgat ttactttgac cgctaccacc gctatccgac cgtcggtgcg 480
tatgaatatt gggaagcggt ttacgatttg atgaatgaaa aaggattgag cgaggaagaa 540
gcgcggaaac aagtggaaga gaagttcaaa caagagggac agacgttcag cccgtatggg 600
tttcatcttt ggttcaatat tgaaaacaaa aaagtcaatg gccattatca ataccaatca 660
tggtggggct atgacagtct gccggagttt aagtcggtga cgggggaaaa agtgccgcat 720
ccgagtgaat tgaacaacga tgcgctcgcg aattacattt tccgtgaatc ggattcggtg 780
gcgaaaagct ggattgccct cggcgcctcc ggctggcggt tggatgtggc caatgaggtg 840
gatccggcgt tttggcgcga gtttcgccaa gaattgcttc aagggtcgta cggccgcggt 900
ccgacgttaa aagaggggga gcagccgctc attttagggg aaatttggga tgacgcatcg 960
aaatattttc taggcgacca gtacgattcc gtgatgaact accggttccg cggggcggtg 1020
cttgactttt tgaaaaacgg aaatgcagaa gaggcggaca agcggctgac ggccataagg 1080
gaagactacc caagtgaagc gttttatgcg ctgatgaact taatcggttc gcatgacacg 1140
gcgcgggcgg tctttctgct tgggaacgga acggattcat ccgagcgggc ggagcttgat 1200
ccgaattata atgaggaact tgggaaaaag cggctcaagc tggcggtgat tttgcagatg 1260
ggatacccgg gagcgccgac gatttattac ggcgatgaag cgggagtaac aggctcaaaa 1320
gacccagaca accgccgcac gtatccgtgg ggcaaagaag atcaaaatct gttgtcccat 1380
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gctggcggaa cgttgacggt cacgattccg gccctggatg gacggatgat gtttgggacg 1680
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gtgacgttaa cgtgggaagg aaatgcatcg agataccgaa tttacgagtc cacgttaaaa 1800
ggtgccggtt atacgatggt gcaagagacg gaaacaactt cggccacgat cggttcgttg 1860
acgaacggaa cagcctatta ctttgccgtt gcggcggtcg atgaaaacgg gaatgaatca 1920
ccgaaggtcg aaacgaatcg cgtcgttcct cattacccgc tgacgagcga caatgtccag 1980
ttcgtgacaa cgttaagcga tgccacactg gatttgtcaa agccgcagca agtggatgtc 2040
catgtcaaca tcgacaatgt gacaagcaaa ggagcagctg atgggttgca agcggtgttg 2100
caagtgaaag gcccgcatga cgaaacatgg aaagaataca gagcggctta ccaaggacaa 2160
gacggcgacg ccaacgtgtt ccgagctgcc ttcactccgc tcgccgcagg gacgtatacg 2220
tatcgttatg cgctgacgac caaccttggc gaggagtgga tgtatacaga agagaagcaa 2280
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cagcctgcgg ttgaatcggg acaagtgaat ttatcatgga cgtttgttgg gaaaaaagat 2400
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atcggcgatt catttacaga ctacgatgtc gaaaacggca ccgagtacac gtatgttgtc 2520
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attgtgatgg tgaaagtgat ttttaaagtg agagcgccgg attacacacc gttggatgcc 2640
cgaattacga ttccgaacag cttgaacggc tggaacacag gggcctggga gatgtcgcgc 2700
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tggatcgata tgccggtcgt catcgaagag gtgcaaaaac aaggaagtca agtgacgatc 3000
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catatcgaac catcggccga aagcaaaaca gccattttca acaacgacgg cggagcgatt 3180
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a 3301
<210>90
<211>1100
<212>PRT
<213>细菌的
<400>90
Met Lys Glu Ala Val Val Tyr Gln Ile Phe Pro Asp Arg Phe Phe Asn
1 5 10 15
Gly Asn Pro Ser Asn Asp Asn Ser Lys Gln Gln Ala Arg Gly Ala Gln
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Pro Ile Glu His Arg Asp Trp Ser Asp Leu Pro Asp Asn Pro Arg Leu
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50 55 60
Phe Gly Gly Asp Ile Ala Gly Ile Glu Gln Lys Leu Asp Tyr Leu Gln
65 70 75 80
Ser Leu Gly Val Asn Thr Ile Tyr Leu Asn Pro Ile Ala Asn Ala Pro
85 90 95
Ser Asn His Lys Tyr Asp Ala Ser Asn Tyr Lys Glu Leu Asp Pro Met
100 105 110
Phe Gly Ser Pro Glu Glu Phe Gln Ser Phe Val Gln Ala Leu Ala Asn
115 120 125
Arg Gly Met His Leu Ile Leu Asp Gly Val Phe Asn His Val Ser Asp
130 135 140
Asp Ser Ile Tyr Phe Asp Arg Tyr His Arg Tyr Pro Thr Val Gly Ala
145 150 155 160
Tyr Glu Tyr Trp Glu Ala Val Tyr Asp Leu Met Asn Glu Lys Gly Leu
165 170 175
Ser Glu Glu Glu Ala Arg Lys Gln Val Glu Glu Lys Phe Lys Gln Glu
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Gly Gln Thr Phe Ser Pro Tyr Gly Phe His Leu Trp Phe Asn Ile Glu
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Asn Lys Lys Val Asn Gly His Tyr Gln Tyr Gln Ser Trp Trp Gly Tyr
210 215 220
Asp Ser Leu Pro Glu Phe Lys Ser Val Thr Gly Glu Lys Val Pro His
225 230 235 240
Pro Ser Glu Leu Asn Asn Asp Ala Leu Ala Asn Tyr Ile Phe Arg Glu
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Ser Asp Ser Val Ala Lys Ser Trp Ile Ala Leu Gly Ala Ser Gly Trp
260 265 270
Arg Leu Asp Val Ala Asn Glu Val Asp Pro Ala Phe Trp Arg Glu Phe
275 280 285
Arg Gln Glu Leu Leu Gln Gly Ser Tyr Gly Arg Gly Pro Thr Leu Lys
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Glu Gly Glu Gln Pro Leu Ile Leu Gly Glu Ile Trp Asp Asp Ala Ser
305 310 315 320
Lys Tyr Phe Leu Gly Asp Gln Tyr Asp Ser Val Met Asn Tyr Arg Phe
325 330 335
Arg Gly Ala Val Leu Asp Phe Leu Lys Asn Gly Asn Ala Glu Glu Ala
340 345 350
Asp Lys Arg Leu Thr Ala Ile Arg Glu Asp Tyr Pro Ser Glu Ala Phe
355 360 365
Tyr Ala Leu Met Asn Leu Ile Gly Ser His Asp Thr Ala Arg Ala Val
370 375 380
Phe Leu Leu Gly Asn Gly Thr Asp Ser Ser Glu Arg Ala Glu Leu Asp
385 390 395 400
Pro Asn Tyr Asn Glu Glu Leu Gly Lys Lys Arg Leu Lys Leu Ala Val
405 410 415
Ile Leu Gln Met Gly Tyr Pro Gly Ala Pro Thr Ile Tyr Tyr Gly Asp
420 425 430
Glu Ala Gly Val Thr Gly Ser Lys Asp Pro Asp Asn Arg Arg Thr Tyr
435 440 445
Pro Trp Gly Lys Glu Asp Gln Asn Leu Leu Ser His Tyr Gln Lys Val
450 455 460
Gly His Ile Arg Gln His His Gln Ser Leu Leu Ala His Gly Asp Ile
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Lys Thr Val Tyr Ala Gln Gly Asp Val Tyr Val Phe Ala Arg Gln Tyr
485 490 495
Gly Arg Glu Ala Ala Leu Ile Ala Ile Asn Arg Gly Asn Glu Asp Lys
500 505 510
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565 570 575
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850 855 860
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900 905 910
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Ser Trp Asp Gln Glu Gly Leu Ala Asp His Thr Arg Glu Asp Asp Asn
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Asp Asp Asp Val Ser Tyr Tyr Gly Tyr Gly Thr Ile Gly Thr Asp Leu
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Lys Val Thr Val His Asn Glu Gly Asn Asn Thr Met Ile Val Gln Asp
965 970 975
Arg Ile Leu Arg Trp Ile Asp Met Pro Val Val Ile Glu Glu Val Gln
980 985 990
Lys Gln Gly Ser Gln Val Thr Ile Lys Gly Asn Ala Ile Lys Asn Gly
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Val Leu Thr Ile Asn Gly Glu Arg Val Pro Ile Asp Gly Arg Met Ala
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Phe Ser Tyr Thr Phe Ala Pro Ala Ser His Gln Lys Glu Val Leu Ile
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His Ile Glu Pro Ser Ala Glu Ser Lys Thr Ala Ile Phe Asn Asn Asp
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Gly Gly Ala Ile Ala Lys Asn Thr Lys Asp Tyr Val Leu Asn Leu Glu
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Gly Pro Ser Ile Phe His Pro Gly Gly Val Pro Gly
1090 1095 1100
<210>91
<211>1650
<212>DNA
<213>细菌的
<400>91
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tggttgtcgt atgtgcgttc tcagactggc aagccgctat ttaccgtcgg ggaatattgg 900
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atgcgcacgt taatgaccaa tactctcatg aaagatcaac cgacattggc cgtcaccttc 1080
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<210>92
<211>549
<212>PRT
<213>细菌的
<400>92
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Ala Phe Leu Leu Thr Ala Ser Leu Phe Cys Pro Thr Gly Gln Pro Ala
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Lys Ala Ala Ala Pro Phe Asn Gly Thr Met Met Gln Tyr Phe Glu Trp
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Tyr Leu Pro Asp Asp Gly Thr Leu Trp Thr Lys Val Ala Asn Glu Ala
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65 70 75 80
Tyr Lys Gly Thr Ser Arg Ser Asp Val Gly Tyr Gly Val Tyr Asp Leu
85 90 95
Tyr Asp Leu Gly Glu Phe Asn Gln Lys Gly Thr Val Arg Thr Lys Tyr
100 105 110
Gly Thr Lys Ala Gln Tyr Leu Gln Ala Ile Gln Ala Ala His Ala Ala
115 120 125
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Asn Gln Glu Ile Ser Gly Thr Tyr Gln Ile Gln Ala Trp Thr Lys Phe
165 170 175
Asp Phe Pro Gly Arg Gly Asn Thr Tyr Ser Ser Phe Lys Trp Arg Trp
180 185 190
Tyr His Phe Asp Gly Val Asp Trp Asp Glu Ser Arg Lys Leu Ser Arg
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Asp His Pro Glu Val Val Thr Glu Leu Lys Asn Trp Gly Lys Trp Tyr
245 250 255
Val Asn Thr Thr Asn Ile Asp Gly Phe Arg Leu Asp Ala Val Lys His
260 265 270
Ile Lys Phe Ser Phe Phe Pro Asp Trp Leu Ser Tyr Val Arg Ser Gln
275 280 285
Thr Gly Lys Pro Leu Phe Thr Val Gly Glu Tyr Trp Ser Tyr Asp Ile
290 295 300
Asn Lys Leu His Asn Tyr Ile Thr Lys Thr Asn Gly Thr Met Ser Leu
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Phe Asp Ala Pro Leu His Asn Lys Phe Tyr Thr Ala Ser Lys Ser Gly
325 330 335
Gly Ala Phe Asp Met Arg Thr Leu Met Thr Asn Thr Leu Met Lys Asp
340 345 350
Gln Pro Thr Leu Ala Val Thr Phe Val Asp Asn His Asp Thr Glu Pro
355 360 365
Gly Gln Ala Leu Gln Ser Trp Val Asp Pro Trp Phe Lys Pro Leu Ala
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Gln His Asp Tyr Leu Asp His Ser Asp Ile Ile Gly Trp Thr Arg Glu
435 440 445
Gly Val Thr Glu Lys Pro Gly Ser Gly Leu Ala Ala Leu Ile Thr Asp
450 455 460
Gly Pro Gly Gly Ser Lys Trp Met Tyr Val Gly Lys Gln His Ala Gly
465 470 475 480
Lys Val Phe Tyr Asp Leu Thr Gly Asn Arg Ser Asp Thr Val Thr Ile
485 490 495
Asn Ser Asp Gly Trp Gly Glu Phe Lys Val Asn Gly Gly Ser Val Ser
500 505 510
Val Trp Val Pro Arg Lys Thr Thr Val Ser Thr Ile Ala Trp Pro Ile
515 520 525
Thr Thr Arg Pro Trp Thr Gly Glu Phe Val Arg Trp Thr Glu Pro Arg
530 535 540
Leu Val Ala Trp Pro
545
<210>93
<211>1545
<212>DNA
<213>细菌的
<400>93
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cttgaagaaa cgacaattac ctttttcttt aacgcgaaaa cgaaagtagt gtataccgat 1080
tacaatccaa gcggttcgga tggtatcgtc caaaaagacc gtttgaagca taatacgtgg 1140
gattcgttgt atcgccaacc gtttggtgcg gtgaaagctg ggacagaagt gacccttcgt 1200
ttatcagcga aaaaaggtga tttgacaaaa gcggatgtat atgtaaaaaa tacgacaacc 1260
ggcacagcga aactatattc gatgaaaaaa gccggtgttc ttggcgaaga agaatattgg 1320
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<210>94
<211>515
<212>PRT
<213>细菌的
<400>94
Met Lys Ser Phe Ala Phe Met Pro Ile Leu Phe Tyr Ala Asn Asp Phe
1 5 10 15
Ile Ser Glu Arg Glu Gly Gly Gly Lys Met Gly Lys Asn Met Arg Arg
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Arg Phe Thr Tyr Phe Ser Ile Phe Leu Leu Phe Val Gln Leu Phe Ser
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Phe Ser Ala Thr Ala Ser Ala Asn Gly Thr Val Asn Ser Ser Pro Val
50 55 60
Val Asn Gly Asn Glu Val Thr Phe Leu Tyr Gly Gly Thr Gly Asn Glu
65 70 75 80
Gln Ser Val Leu Leu Ala Gly Ser Phe Asn Asp Trp Gln Lys Asp Gly
85 90 95
Asp Lys Lys Ile Ala Leu Thr Lys Gly Asp Asn Asn Val Trp Ser Val
100 105 110
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115 120 125
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130 135 140
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145 150 155 160
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165 170 175
Thr Ser Glu Trp Asp Pro Lys Ala Thr Ala Thr Val Met Lys Lys Glu
180 185 190
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195 200 205
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210 215 220
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225 230 235 240
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245 250 255
Thr Trp Tyr Ala Pro Ile Leu Lys Glu Lys Gln Pro Arg Leu Val Gly
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Thr Ile Leu Pro Ala Ile Gly Tyr Glu Thr Asp Val Asn Gly Trp Thr
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Tyr Thr Phe Lys Ala Arg Val Pro Lys Gly Thr Tyr Glu Tyr Lys Val
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Val Leu Gly Asn Asp Trp Thr Tyr Glu Asn Tyr Pro Gln Asp Asn Ala
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Lys Leu Asn Val Leu Glu Glu Thr Thr Ile Thr Phe Phe Phe Asn Ala
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Ile Val Gln Lys Asp Arg Leu Lys His Asn Thr Trp Asp Ser Leu Tyr
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Asp Lys Asn Ala Glu Leu Phe Gln Leu Thr Val Tyr Asp Pro Ser Tyr
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<212>DNA
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<212>PRT
<213>细菌的
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Trp His Tyr Lys Val Asn Ser Lys Gly Gln Thr Val Trp Tyr Phe Gly
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Tyr Asp Gly Asp Ser Asn Val Leu Leu Lys Phe Ala Pro Met Pro Val
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Arg Phe Ile Ser Glu Leu Val Asp Ser Lys Tyr Gln Gly Asp Val Ile
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Ser Ala Thr Lys Gln Tyr Leu Leu Val Asn Ala Leu Leu Leu Ser Leu
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<210>101
<211>2136
<212>DNA
<213>环境的
<400>101
ttgcgattct ttccaaagtt aatatcccct tttccgcaaa acaccagaga gtggcagcga 60
agcgcagtat caagagacac tgaacaatta caaaggaaag taataatgat caatttgaaa 120
aaaaacacca ttagcgccct ggtcgcaggt atggtattag gctttgcatc caacgcaatg 180
gcggttccta gaaccgcttt tgtacacctc tttgaatgga aatgggaaga tgttgcacag 240
gagtgtgaaa catttctcgg acctaaaggc tttgccgcag tgcaagtctc tccgccaact 300
aaatctcaca acacggatgc atggtggggc cgttatcaac ccgttagtta tgcttttgaa 360
ggacgcagcg gtaatcgcag ccaatttaaa aatatggtgc aacgttgtaa agctgtaggc 420
gtcgatatat acgtagatgc agtgattaac cacatggcag cctacgacag aaatttccct 480
gatgtaccct atagcagtaa tgactttaac tcctgtacag gagatattga ctataataac 540
cgttggcaaa cacagcattg tgatttagtc ggtcttaatg atctaaaaac aggatctgac 600
tacgtccgcc aaaaaatagc ggattatatg aacgacgcaa tcagtatggg tgtagctggt 660
ttccgtattg atgcagccaa acatatacca gcaggtgata tagctgccat taaaggtaaa 720
ttaaatggta atccatacat cttccaagag gtaattggtg catccggcga acctgttcga 780
ccgactgaat acacctttat cggtggtgtc acggaatttc aatttgctcg aaaattgggt 840
ccagccttcc gcaatagtaa tattgcttgg ttaaaagaca ttggcagtca aatggaatta 900
tccagtgctg atgccgtaac atttgtaacg aatcatgatg aagagcgtca taacccgaat 960
ggtcctattt ggcacggcgt tcaaggtaat ggttatgcat tagcaaatat tttcacctta 1020
gcttaccctt acggctatcc aaaaatcatg tcaggatact tcttccacgg tgactttaac 1080
gcagctccac caagcagtgg tatacacaca ggaaatgcgt gtggttttga tggcggagac 1140
tgggtatgcg aacacaaatg gcgcggtatt gctaacatgg ttgccttccg caactataca 1200
gcaagcgaat ggcgtatcag taattggtgg caaaacagta acgaccaaat tgcttttggt 1260
cgcggtggtt taggttttgt tgttattaat aaacgtgcta atggtagcat taatcaaagt 1320
tttgatacgg gaatgcctga tggccaatac tgtaacataa tagaagctaa ctttgatgaa 1380
agcaccggcc aatgtagtgc agctacagat tccaacggtc aagccgttat taccgtcagt 1440
ggtgggcaag ctaactttaa tgtagcaggc gatcatgctg ctgcaattca tgttggcgca 1500
aaaattggtg atcaatgtag tggtgatgat tgcccatgta caggatccga ttgtaataat 1560
gatcctaaac ctgattttgc agtaccagca acatcaattt gtacatcaga aaatttacct 1620
acgctatatt actggggagc acagcctaca gatagcttag cgaatgcagc ttggccaggt 1680
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gcaggttgtt ataaagacgg gacttggagc accttacaaa attgtggctt tgaaattacc 1860
ggtgcacaaa ccaatccagt cggtggcgac gaagtctggt acttccgagg tactgctaat 1920
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gcttatccaa cagctgatta ccaagttaca gataacaatt cataccgcat taactttaat 2100
agcgatagca aagcgattac agtaaacgca caataa 2136
<210>102
<211>711
<212>PRT
<213>环境的
<400>102
Met Arg Phe Phe Pro Lys Leu Ile Ser Pro Phe Pro Gln Asn Thr Arg
1 5 10 15
Glu Trp Gln Arg Ser Ala Val Ser Arg Asp Thr Glu Gln Leu Gln Arg
20 25 30
Lys Val Ile Met Ile Asn Leu Lys Lys Asn Thr Ile Ser Ala Leu Val
35 40 45
Ala Gly Met Val Leu Gly Phe Ala Ser Asn Ala Met Ala Val Pro Arg
50 55 60
Thr Ala Phe Val His Leu Phe Glu Trp Lys Trp Glu Asp Val Ala Gln
65 70 75 80
Glu Cys Glu Thr Phe Leu Gly Pro Lys Gly Phe Ala Ala Val Gln Val
85 90 95
Ser Pro Pro Thr Lys Ser His Asn Thr Asp Ala Trp Trp Gly Arg Tyr
100 105 110
Gln Pro Val Ser Tyr Ala Phe Glu Gly Arg Ser Gly Asn Arg Ser Gln
115 120 125
Phe Lys Asn Met Val Gln Arg Cys Lys Ala Val Gly Val Asp Ile Tyr
130 135 140
Val Asp Ala Val Ile Asn His Met Ala Ala Tyr Asp Arg Asn Phe Pro
145 150 155 160
Asp Val Pro Tyr Ser Ser Asn Asp Phe Asn Ser Cys Thr Gly Asp Ile
165 170 175
Asp Tyr Asn Asn Arg Trp Gln Thr Gln His Cys Asp Leu Val Gly Leu
180 185 190
Asn Asp Leu Lys Thr Gly Ser Asp Tyr Val Arg Gln Lys Ile Ala Asp
195 200 205
Tyr Met Asn Asp Ala Ile Ser Met Gly Val Ala Gly Phe Arg Ile Asp
210 215 220
Ala Ala Lys His Ile Pro Ala Gly Asp Ile Ala Ala Ile Lys Gly Lys
225 230 235 240
Leu Asn Gly Asn Pro Tyr Ile Phe Gln Glu Val Ile Gly Ala Ser Gly
245 250 255
Glu Pro Val Arg Pro Thr Glu Tyr Thr Phe Ile Gly Gly Val Thr Glu
260 265 270
Phe Gln Phe Ala Arg Lys Leu Gly Pro Ala Phe Arg Asn Ser Asn Ile
275 280 285
Ala Trp Leu Lys Asp Ile Gly Ser Gln Met Glu Leu Ser Ser Ala Asp
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Ala Val Thr Phe Val Thr Asn His Asp Glu Glu Arg His Asn Pro Asn
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Gly Pro Ile Trp His Gly Val Gln Gly Asn Gly Tyr Ala Leu Ala Asn
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Ile Phe Thr Leu Ala Tyr Pro Tyr Gly Tyr Pro Lys Ile Met Ser Gly
340 345 350
Tyr Phe Phe His Gly Asp Phe Asn Ala Ala Pro Pro Ser Ser Gly Ile
355 360 365
His Thr Gly Asn Ala Cys Gly Phe Asp Gly Gly Asp Trp Val Cys Glu
370 375 380
His Lys Trp Arg Gly Ile Ala Asn Met Val Ala Phe Arg Asn Tyr Thr
385 390 395 400
Ala Ser Glu Trp Arg Ile Ser Asn Trp Trp Gln Asn Ser Asn Asp Gln
405 410 415
Ile Ala Phe Gly Arg Gly Gly Leu Gly Phe Val Val Ile Asn Lys Arg
420 425 430
Ala Asn Gly Ser Ile Asn Gln Ser Phe Asp Thr Gly Met Pro Asp Gly
435 440 445
Gln Tyr Cys Asn Ile Ile Glu Ala Asn Phe Asp Glu Ser Thr Gly Gln
450 455 460
Cys Ser Ala Ala Thr Asp Ser Asn Gly Gln Ala Val Ile Thr Val Ser
465 470 475 480
Gly Gly Gln Ala Asn Phe Asn Val Ala Gly Asp His Ala Ala Ala Ile
485 490 495
His Val Gly Ala Lys Ile Gly Asp Gln Cys Ser Gly Asp Asp Cys Pro
500 505 510
Cys Thr Gly Ser Asp Cys Asn Asn Asp Pro Lys Pro Asp Phe Ala Val
515 520 525
Pro Ala Thr Ser Ile Cys Thr Ser Glu Asn Leu Pro Thr Leu Tyr Tyr
530 535 540
Trp Gly Ala Gln Pro Thr Asp Ser Leu Ala Asn Ala Ala Trp Pro Gly
545 550 555 560
Val Ala Met Gln Thr Asn Gly Asp Phe Lys Cys His Asp Leu Gly Val
565 570 575
Glu Leu Thr Lys Ile Asn Ala Ile Phe Ser Asp Asn Gly Ala Asn Lys
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Thr Ala Asp Leu Thr Val Thr Gly Ala Gly Cys Tyr Lys Asp Gly Thr
595 600 605
Trp Ser Thr Leu Gln Asn Cys Gly Phe Glu Ile Thr Gly Ala Gln Thr
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Asn Pro Val Gly Gly Asp Glu Val Trp Tyr Phe Arg Gly Thr Ala Asn
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Asp Trp Gly Lys Ala Gln Leu Asp Tyr Asp Ala Thr Ser Gly Leu Tyr
645 650 655
Tyr Thr Ile Gln Ser Phe Asn Gly Glu Glu Ala Pro Ala Arg Phe Lys
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Ile Asp Asn Gly Ser Trp Thr Glu Ala Tyr Pro Thr Ala Asp Tyr Gln
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Val Thr Asp Asn Asn Ser Tyr Arg Ile Asn Phe Asn Ser Asp Ser Lys
690 695 700
Ala Ile Thr Val Asn Ala Gln
705 710
<210>103
<211>1650
<212>DNA
<213>环境的
<400>103
gtgctaacgt ttcaccgcat cattcgaaaa ggatggatgt tcctgctcgc gtttttgctc 60
actgcctcgc tgttctgccc aacaggacag cccgccaagg ctgccgcacc gtttaacggc 120
accatgatgc agtattttga atggtacttg ccggatgatg gcacgttatg gaccaaagtg 180
gccaatgaag ccaacaactt atccagcctt ggcatcaccg ctctttggct gccgcccgct 240
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gatcatcccg aagtcgtgac cgagctgaaa aactgggggg aatggtatgt caacacaacg 780
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tggttgtcgt atgtgcgttc tcagactggc aagccgctat ttaccgtcgg ggaatattgg 900
agctatgaca tcaacaagtt gcacaattac attacgaaaa caaacggaac gatgtctttg 960
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<210>104
<211>549
<212>PRT
<213>环境的
<400>104
Val Leu Thr Phe His Arg Ile Ile Arg Lys Gly Trp Met Phe Leu Leu
1 5 10 15
Ala Phe Leu Leu Thr Ala Ser Leu Phe Cys Pro Thr Gly Gln Pro Ala
20 25 30
Lys Ala Ala Ala Pro Phe Asn Gly Thr Met Met Gln Tyr Phe Glu Trp
35 40 45
Tyr Leu Pro Asp Asp Gly Thr Leu Trp Thr Lys Val Ala Asn Glu Ala
50 55 60
Asn Asn Leu Ser Ser Leu Gly Ile Thr Ala Leu Trp Leu Pro Pro Ala
65 70 75 80
Tyr Lys Gly Thr Ser Arg Ser Asp Val Gly Tyr Gly Val Tyr Asp Leu
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Tyr Asp Leu Gly Glu Phe Asn Gln Lys Gly Thr Val Arg Thr Lys Tyr
100 105 110
Gly Thr Lys Ala Gln Tyr Leu Gln Ala Ile Gln Ala Ala His Ala Ala
115 120 125
Gly Met Gln Val Tyr Ala Asp Val Val Phe Asp His Lys Gly Gly Ala
130 135 140
Asp Gly Thr Glu Trp Val Asp Ala Val Glu Val Asn Pro Ser Asp Arg
145 150 155 160
Asn Gln Glu Ile Ser Gly Thr Tyr Gln Ile Gln Ala Trp Thr Lys Phe
165 170 175
Asp Phe Pro Gly Arg Gly Asn Thr Tyr Ser Ser Phe Lys Trp Arg Trp
180 185 190
Tyr His Phe Asp Gly Val Asp Trp Asp Glu Ser Arg Lys Leu Ser Arg
195 200 205
Ile Tyr Lys Phe Arg Gly Ile Gly Lys Ala Trp Asp Trp Glu Val Asp
210 215 220
Thr Glu Asn Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Met Tyr Ala Asp Leu Asp Met
225 230 235 240
Asp His Pro Glu Val Val Thr Glu Leu Lys Asn Trp Gly Glu Trp Tyr
245 250 255
Val Asn Thr Thr Asn Ile Asp Gly Phe Arg Leu Asp Ala Val Lys His
260 265 270
Ile Lys Phe Ser Phe Phe Pro Asp Trp Leu Ser Tyr Val Arg Ser Gln
275 280 285
Thr Gly Lys Pro Leu Phe Thr Val Gly Glu Tyr Trp Ser Tyr Asp Ile
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Asn Lys Leu His Asn Tyr Ile Thr Lys Thr Asn Gly Thr Met Ser Leu
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Phe Asp Ala Pro Leu His Asn Lys Phe Tyr Thr Ala Ser Lys Ser Gly
325 330 335
Gly Ala Phe Asp Met Arg Thr Leu Met Thr Asn Thr Leu Met Lys Asp
340 345 350
Gln Pro Thr Leu Ala Val Thr Phe Val Asp Asn His Asp Thr Glu Pro
355 360 365
Gly Gln Ala Leu Gln Ser Trp Val Asp Pro Trp Phe Lys Pro Leu Ala
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Tyr Ala Phe Ile Leu Thr Arg Gln Glu Gly Tyr Pro Cys Val Phe Tyr
385 390 395 400
Gly Asp Tyr Tyr Gly Ile Pro Gln Tyr Asn Ile Pro Ser Leu Lys Ser
405 410 415
Lys Ile Asp Pro Leu Leu Ile Ala Arg Arg Asp Tyr Ala Tyr Gly Thr
420 425 430
Gln His Asp Tyr Leu Asp His Ser Asp Ile Ile Gly Trp Thr Arg Glu
435 440 445
Gly Val Thr Glu Lys Pro Gly Ser Gly Leu Ala Ala Leu Ile Thr Asp
450 455 460
Gly Pro Gly Gly Ser Lys Trp Met Tyr Val Gly Lys Gln His Ala Gly
465 470 475 480
Lys Val Phe Tyr Asp Leu Thr Gly Asn Arg Ser Asp Thr Val Thr Ile
485 490 495
Asn Ser Asp Gly Trp Gly Glu Phe Lys Val Asn Gly Gly Ser Val Ser
500 505 510
Val Trp Val Pro Arg Lys Thr Thr Val Ser Thr Ile Ala Arg Pro Ile
515 520 525
Thr Thr Arg Pro Trp Thr Gly Glu Phe Val Arg Trp Thr Glu Pro Arg
530 535 540
Leu Val Ala Trp Pro
545
<210>105
<211>1650
<212>DNA
<213>环境的
<400>105
atgtccctat tcaaaaaaat ctttccgtgg attgtatctc tacttctttt gttttcgttt 60
attgctcctt tttccattca aacagaaaaa gtccgcgctg gaagtgttcc agtgaatgga 120
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gagtttaatc aaaaaggaac tgtccgaaca aaatacggaa caaaaacaca atatatccaa 360
gcaatccaag cggcgcatac agcaggaatg caagtatatg cagatgtcgt ctttaaccat 420
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aatcaagaaa tatcaggaac atatcaaatc caagcgtgga caaaatttga ttttcctggt 540
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gatcatccag aggttgtatc tgaactaaaa aattggggaa agtggtatgt aaccacaacc 780
aatatcgacg gattccgtct ggatgcagtg aagcatatta aatatagctt tttcccagac 840
tggctatcgt atgtacgaac ccaaacacaa aagcctcttt ttgccgttgg cgaattttgg 900
agctatgaca ttaacaagct acacaactat attacaaaga cgaacggctc tatgtcccta 960
ttcgatgccc cgctgcataa caatttttat atagcatcga aatcaggtgg ctattttgat 1020
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gtagacaatc acgatactga gccagggcaa tctttgcagt cgtgggtcga gccgtggttt 1140
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ctcattaccg acggacctgg cggaagcaaa tggatgtatg ttggcaaaca acacgctggc 1440
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acttcccaaa tcacatttac tgtaaataat gccacaaccg tttggggaca aaatgtatac 1620
gttgtcggga atatttcgca gctgggcaac 1650
<210>106
<211>550
<212>PRT
<213>环境的
<400>106
Met Ser Leu Phe Lys Lys Ile Phe Pro Trp Ile Val Ser Leu Leu Leu
1 5 10 15
Leu Phe Ser Phe Ile Ala Pro Phe Ser Ile Gln Thr Glu Lys Val Arg
20 25 30
Ala Gly Ser Val Pro Val Asn Gly Thr Met Met Gln Tyr Phe Glu Trp
35 40 45
Tyr Leu Pro Asp Asp Gly Thr Leu Trp Thr Lys Val Ala Asn Asn Ala
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Gln Ser Leu Ala Asn Leu Gly Ile Thr Ala Leu Trp Leu Pro Pro Ala
65 70 75 80
Tyr Lys Gly Thr Ser Ser Ser Asp Val Gly Tyr Gly Val Tyr Asp Leu
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Tyr Asp Leu Gly Glu Phe Asn Gln Lys Gly Thr Val Arg Thr Lys Tyr
100 105 110
Gly Thr Lys Thr Gln Tyr Ile Gln Ala Ile Gln Ala Ala His Thr Ala
115 120 125
Gly Met Gln Val Tyr Ala Asp Val Val Phe Asn His Lys Ala Gly Ala
130 135 140
Asp Gly Thr Glu Leu Val Asp Ala Val Glu Val Asn Pro Ser Asp Arg
145 150 155 160
Asn Gln Glu Ile Ser Gly Thr Tyr Gln Ile Gln Ala Trp Thr Lys Phe
165 170 175
Asp Phe Pro Gly Arg Gly Asn Thr Tyr Ser Ser Phe Lys Trp Arg Trp
180 185 190
Tyr His Phe Asp Gly Thr Asp Trp Asp Glu Ser Arg Lys Leu Asn Arg
195 200 205
Ile Tyr Lys Phe Arg Gly Thr Gly Lys Ala Trp Asp Trp Glu Val Asp
210 215 220
Thr Glu Asn Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Met Tyr Ala Asp Leu Asp Met
225 230 235 240
Asp His Pro Glu Val Val Ser Glu Leu Lys Asn Trp Gly Lys Trp Tyr
245 250 255
Val Thr Thr Thr Asn Ile Asp Gly Phe Arg Leu Asp Ala Val Lys His
260 265 270
Ile Lys Tyr Ser Phe Phe Pro Asp Trp Leu Ser Tyr Val Arg Thr Gln
275 280 285
Thr Gln Lys Pro Leu Phe Ala Val Gly Glu Phe Trp Ser Tyr Asp Ile
290 295 300
Asn Lys Leu His Asn Tyr Ile Thr Lys Thr Asn Gly Ser Met Ser Leu
305 310 315 320
Phe Asp Ala Pro Leu His Asn Asn Phe Tyr Ile Ala Ser Lys Ser Gly
325 330 335
Gly Tyr Phe Asp Met Arg Thr Leu Leu Asn Asn Thr Leu Met Lys Asp
340 345 350
Gln Pro Thr Leu Ser Val Thr Leu Val Asp Asn His Asp Thr Glu Pro
355 360 365
Gly Gln Ser Leu Gln Ser Trp Val Glu Pro Trp Phe Lys Pro Leu Ala
370 375 380
Tyr Ala Phe Ile Leu Thr Arg Gln Glu Gly Tyr Pro Cys Ile Phe Tyr
385 390 395 400
Gly Asp Tyr Tyr Gly Ile Pro Lys Tyr Asn Ile Pro Ala Leu Lys Ser
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Lys Leu Asp Pro Leu Leu Ile Ala Arg Arg Asp Tyr Ala Tyr Gly Thr
420 425 430
Gln His Asp Tyr Ile Asp Asn Ala Asp Ile Ile Gly Trp Thr Arg Glu
435 440 445
Gly Val Ala Glu Lys Ala Asn Ser Gly Leu Ala Ala Leu Ile Thr Asp
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Gly Pro Gly Gly Ser Lys Trp Met Tyr Val Gly Lys Gln His Ala Gly
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Lys Thr Phe Tyr Asp Leu Thr Gly Asn Arg Ser Asp Thr Val Thr Ile
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Asn Ala Asp Gly Trp Gly Glu Phe Lys Val Asn Gly Gly Ser Val Ser
500 505 510
Ile Trp Val Pro Lys Thr Ser Thr Thr Ser Gln Ile Thr Phe Thr Val
515 520 525
Asn Asn Ala Thr Thr Val Trp Gly Gln Asn Val Tyr Val Val Gly Asn
530 535 540
Ile Ser Gln Leu Gly Asn
545 550
<210>107
<211>1509
<212>DNA
<213>环境的
<400>107
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accgaccgtt tccaggatgg cgacaagacc aacaacatgg acgtggtccc gacggacatg 240
aaaaaatatc atggcggcga catccagggg ctcatcgaca agctcgacta tatcaaggag 300
accggttcga cggccatctg gctcacgccc cctatgaagg ggcagaccca cttcttcgag 360
accgacaatt accatggtta ctggcccatt gacttctatg acacggaccc ccatgtgggc 420
accatgcaga aatttgagga gcttatcgag aaagcccatg agaaagggct gaagatcgtg 480
ctcgatattc ccctgaacca cacggcctgg gagcatccct tctacaagga cgacagcaag 540
aaggactggt tccaccatat aggagatgtg aaggactggg aagatcccta ctgggctgaa 600
aacggctcca tattcggtct tcctgacctg gcgcaggaaa accctgccgt ggaaaagtac 660
ctcatcgacg tggccaagtt ctgggtagac aagggtattg acggcttcag gcttgacgcc 720
gtgaagaacg tgcccctcaa cttctgggcg aagtttgacc gggcgattca cgattatgcg 780
ggcaaggact tcctcctcgt cggggaatac tttgacggaa acccggcgaa agtcgcgaac 840
taccagagag aggacatgag ctcactcttc gattacccgc tctactggac cctgaaggac 900
accttcgcca aggacgggag catgcgcaac ctggcggcga agcttgatga gtgcgacagg 960
aattatcccg acccgggcct catgtcggtt ttccttgata accacgacac gccgaggttc 1020
ctcaccgagg ccaacggcaa caaggataag ctcaaactgg ccctcgcctt cgcgatgacc 1080
atcaaccgca tgcctaccat ttattatggc accgaggttg ccatggaagg caactgcgat 1140
atcatgggcg ccgtagataa ccggagggac atgcagtggg acaaggatcc tgacatgttc 1200
aaatacttca agactctcac cactgcccgc aatgagcatg aatccctcag ggaaggaaag 1260
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gagtctatcg tggtgcttaa caacggctat gatacgcagg aacgggacat accgctccgc 1380
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cccgcgtag 1509
<210>108
<211>502
<212>PRT
<213>环境的
<400>108
Met Asp Ser Leu Asp Ala Pro Glu Gln Lys Pro Trp Val Lys Asp Gly
1 5 10 15
Arg Leu Ser Ala Tyr Leu Asp Thr Gly Thr Gly Thr Val Val Ala Pro
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35 40 45
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65 70 75 80
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85 90 95
Tyr Ile Lys Glu Thr Gly Ser Thr Ala Ile Trp Leu Thr Pro Pro Met
100 105 110
Lys Gly Gln Thr His Phe Phe Glu Thr Asp Asn Tyr His Gly Tyr Trp
115 120 125
Pro Ile Asp Phe Tyr Asp Thr Asp Pro His Val Gly Thr Met Gln Lys
130 135 140
Phe Glu Glu Leu Ile Glu Lys Ala His Glu Lys Gly Leu Lys Ile Val
145 150 155 160
Leu Asp Ile Pro Leu Asn His Thr Ala Trp Glu His Pro Phe Tyr Lys
165 170 175
Asp Asp Ser Lys Lys Asp Trp Phe His His Ile Gly Asp Val Lys Asp
180 185 190
Trp Glu Asp Pro Tyr Trp Ala Glu Asn Gly Ser Ile Phe Gly Leu Pro
195 200 205
Asp Leu Ala Gln Glu Asn Pro Ala Val Glu Lys Tyr Leu Ile Asp Val
210 215 220
Ala Lys Phe Trp Val Asp Lys Gly Ile Asp Gly Phe Arg Leu Asp Ala
225 230 235 240
Val Lys Asn Val Pro Leu Asn Phe Trp Ala Lys Phe Asp Arg Ala Ile
245 250 255
His Asp Tyr Ala Gly Lys Asp Phe Leu Leu Val Gly Glu Tyr Phe Asp
260 265 270
Gly Asn Pro Ala Lys Val Ala Asn Tyr Gln Arg Glu Asp Met Ser Ser
275 280 285
Leu Phe Asp Tyr Pro Leu Tyr Trp Thr Leu Lys Asp Thr Phe Ala Lys
290 295 300
Asp Gly Ser Met Arg Asn Leu Ala Ala Lys Leu Asp Glu Cys Asp Arg
305 310 315 320
Asn Tyr Pro Asp Pro Gly Leu Met Ser Val Phe Leu Asp Asn His Asp
325 330 335
Thr Pro Arg Phe Leu Thr Glu Ala Asn Gly Asn Lys Asp Lys Leu Lys
340 345 350
Leu Ala Leu Ala Phe Ala Met Thr Ile Asn Arg Met Pro Thr Ile Tyr
355 360 365
Tyr Gly Thr Glu Val Ala Met Glu Gly Asn Cys Asp Ile Met Gly Ala
370 375 380
Val Asp Asn Arg Arg Asp Met Gln Trp Asp Lys Asp Pro Asp Met Phe
385 390 395 400
Lys Tyr Phe Lys Thr Leu Thr Thr Ala Arg Asn Glu His Glu Ser Leu
405 410 415
Arg Glu Gly Lys Lys Leu Glu Met Trp Gln Asp Asp Lys Val Tyr Ala
420 425 430
Tyr Gly Arg Gln Thr Pro Lys Asp Glu Ser Ile Val Val Leu Asn Asn
435 440 445
Gly Tyr Asp Thr Gln Glu Arg Asp Ile Pro Leu Arg Pro Glu Ser Gly
450 455 460
Ile Lys Asn Gly Thr Val Leu Lys Asp Val Ile Thr Gly Glu Thr Val
465 470 475 480
Thr Val Gln Asn Gly Lys Ile His Ala Lys Cys Gly Gly Lys Gln Ala
485 490 495
Arg Ile Tyr Val Pro Ala
500
<210>109
<211>1374
<212>DNA
<213>环境的
<400>109
atggcaagaa aaacgctggc catatttttc gtacttctag tgcttcttag tctctcggca 60
gttccggcaa aggcagaaac tctagagaat ggtggagtta taatgcaggc tttctattgg 120
gatgttcctg gaggaggaat ctggtgggac acaatagctc aaaagatacc cgaatgggca 180
agtgcaggaa tctcagcgat atggattcca ccagcgagta agggcatgag cggtggttat 240
tccatgggct acgatcccta cgatttcttt gacctcggcg agtactatca gaaggggaca 300
gttgagacgc gcttcggctc aaaggaagaa ctggtgaaca tgataaacac cgcacactcc 360
tacggcataa aggtgatagc ggacatagtc ataaaccacc gcgccggtgg agaccttgag 420
tggaacccct tcgtgaacga ctatacctgg acagacttct caaaagtcgc ctccggtaaa 480
tatacggcca actaccttga cttccaccca aacgagcttc actgttgtga tgaaggtacc 540
tttggaggat accctgatat atgtcacgac aaaagctggg accagtactg gctctgggcg 600
agcagcgaaa gctacgctgc ctacctcagg agcatagggg ttgacgcctg gcgtttcgac 660
tacgtcaagg gctacggagc atgggttgtt aacgactggc tcagctggtg gggaggctgg 720
gccgttggag agtactggga cacgaacgtt gatgcactcc tcaactgggc atacagcagc 780
ggcgccaagg tctttgactt cccgctctac tacaagatgg acgaagcctt cgacaacacc 840
aacatcccgg cattagtgga tgcactcaga tacggccaga cagtggtcag ccgcgatccc 900
ttcaaggcgg taactttcgt tgccaaccac gatacagata taatctggaa caagtatccg 960
gcttatgcat tcatccttac ctatgaggga cagcctgtta tattctaccg cgactacgag 1020
gagtggctca acaaggataa gcttaacaac ctcatctgga tacacgatca ccttgctgga 1080
gggagtactg acattgttta ctacgacagc gacgagctta tctttgtgag aaacggctat 1140
ggcaccaaac caggactgat aacctatatc aacctcggct caagcaaagt tggaaggtgg 1200
gtctacgttc caaagttcgc cggttcatgc atccacgagt acaccggcaa cctcggcggt 1260
tggatagaca agtacgtctc ctccagcggc tgggtctatc ttgaggcccc agcccacgac 1320
ccggcgaacg gctactacgg ctactctgtc tggagctact gcggtgtggg ttga 1374
<210>110
<211>457
<212>PRT
<213>环境的
<400>110
Met Ala Arg Lys Thr Leu Ala Ile Phe Phe Val Leu Leu Val Leu Leu
1 5 10 15
Ser Leu Ser Ala Val Pro Ala Lys Ala Glu Thr Leu Glu Asn Gly Gly
20 25 30
Val Ile Met Gln Ala Phe Tyr Trp Asp Val Pro Gly Gly Gly Ile Trp
35 40 45
Trp Asp Thr Ile Ala Gln Lys Ile Pro Glu Trp Ala Ser Ala Gly Ile
50 55 60
Ser Ala Ile Trp Ile Pro Pro Ala Ser Lys Gly Met Ser Gly Gly Tyr
65 70 75 80
Ser Met Gly Tyr Asp Pro Tyr Asp Phe Phe Asp Leu Gly Glu Tyr Tyr
85 90 95
Gln Lys Gly Thr Val Glu Thr Arg Phe Gly Ser Lys Glu Glu Leu Val
100 105 110
Asn Met Ile Asn Thr Ala His Ser Tyr Gly Ile Lys Val Ile Ala Asp
115 120 125
Ile Val Ile Asn His Arg Ala Gly Gly Asp Leu Glu Trp Asn Pro Phe
130 135 140
Val Asn Asp Tyr Thr Trp Thr Asp Phe Ser Lys Val Ala Ser Gly Lys
145 150 155 160
Tyr Thr Ala Asn Tyr Leu Asp Phe His Pro Asn Glu Leu His Cys Cys
165 170 175
Asp Glu Gly Thr Phe Gly Gly Tyr Pro Asp Ile Cys His Asp Lys Ser
180 185 190
Trp Asp Gln Tyr Trp Leu Trp Ala Ser Ser Glu Ser Tyr Ala Ala Tyr
195 200 205
Leu Arg Ser Ile Gly Val Asp Ala Trp Arg Phe Asp Tyr Val Lys Gly
210 215 220
Tyr Gly Ala Trp Val Val Asn Asp Trp Leu Ser Trp Trp Gly Gly Trp
225 230 235 240
Ala Val Gly Glu Tyr Trp Asp Thr Asn Val Asp Ala Leu Leu Asn Trp
245 250 255
Ala Tyr Ser Ser Gly Ala Lys Val Phe Asp Phe Pro Leu Tyr Tyr Lys
260 265 270
Met Asp Glu Ala Phe Asp Asn Thr Asn Ile Pro Ala Leu Val Asp Ala
275 280 285
Leu Arg Tyr Gly Gln Thr Val Val Ser Arg Asp Pro Phe Lys Ala Val
290 295 300
Thr Phe Val Ala Asn His Asp Thr Asp Ile Ile Trp Asn Lys Tyr Pro
305 310 315 320
Ala Tyr Ala Phe Ile Leu Thr Tyr Glu Gly Gln Pro Val Ile Phe Tyr
325 330 335
Arg Asp Tyr Glu Glu Trp Leu Asn Lys Asp Lys Leu Asn Asn Leu Ile
340 345 350
Trp Ile His Asp His Leu Ala Gly Gly Ser Thr Asp Ile Val Tyr Tyr
355 360 365
Asp Ser Asp Glu Leu Ile Phe Val Arg Asn Gly Tyr Gly Thr Lys Pro
370 375 380
Gly Leu Ile Thr Tyr Ile Asn Leu Gly Ser Ser Lys Val Gly Arg Trp
385 390 395 400
Val Tyr Val Pro Lys Phe Ala Gly Ser Cys Ile His Glu Tyr Thr Gly
405 410 415
Asn Leu Gly Gly Trp Ile Asp Lys Tyr Val Ser Ser Ser Gly Trp Val
420 425 430
Tyr Leu Glu Ala Pro Ala His Asp Pro Ala Asn Gly Tyr Tyr Gly Tyr
435 440 445
Ser Val Trp Ser Tyr Cys Gly Val Gly
450 455
<210>111
<211>1416
<212>DNA
<213>环境的
<400>111
atgcccgcgt tcaaatctaa ggtgatgcac atgaagttga agtaccttgc tttagttttg 60
ttggctgtgg cttcgatagg cctcctctcg actccagtgg gtgctgccaa gtactccgaa 120
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tggtgggaca ccataagaca gaaaatcccg gagtggtacg acgctggaat ctcggcgata 240
tggattcctc cagctagcaa aggtatgggt ggtgcatact ccatgggtta tgacccctac 300
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tatacttgga cagacttctc caaggtcgcc tccggtaaat acacggccaa ctaccttgac 540
ttccacccaa acgaggtcaa gtgctgcgat gagggtacat ttggtgactt tccggacatc 600
gcccacgaga agagctggga tcagtactgg ctctgggcaa gcaatgagag ctacgccgcc 660
tatctccgga gcatagggat cgatgcatgg cgtttcgact acgtcaaagg ttacggagcg 720
tgggttgtta acgactggct cagctggtgg ggaggttggg ccgttggaga gtactgggac 780
accaacgttg atgcactcct taactgggca tacaacagcg gtgccaaggt ctttgacttc 840
ccgctctact acaagatgga cgaagccttt gacaacacca acatccccgc tttggtttac 900
gccctccaga acggaggaac agtcgtttcc cgcgatccct tcaaggcagt aactttcgtt 960
gccaaccacg ataccgatat aatctggaac aagtatccgg cttatgcgtt catccttacc 1020
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tacgataacg atgagctaat attcatgagg gagggctacg ggagcaagcc gggcctcata 1200
acctacataa acctcggaaa cgactgggcc gagcgctggg tgaacgtcgg ctcaaagttt 1260
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ggctactcag tctggagcta cgcaggcgtc ggatga 1416
<210>112
<211>471
<212>PRT
<213>环境的
<400>112
Met Pro Ala Phe Lys Ser Lys Val Met His Met Lys Leu Lys Tyr Leu
1 5 10 15
Ala Leu Val Leu Leu Ala Val Ala Ser Ile Gly Leu Leu Ser Thr Pro
20 25 30
Val Gly Ala Ala Lys Tyr Ser Glu Leu Glu Glu Gly Gly Val Ile Met
35 40 45
Gln Ala Phe Tyr Trp Asp Val Pro Thr Gly Gly Ile Trp Trp Asp Thr
50 55 60
Ile Arg Gln Lys Ile Pro Glu Trp Tyr Asp Ala Gly Ile Ser Ala Ile
65 70 75 80
Trp Ile Pro Pro Ala Ser Lys Gly Met Gly Gly Ala Tyr Ser Met Gly
85 90 95
Tyr Asp Pro Tyr Asp Phe Phe Asp Leu Gly Glu Tyr Tyr Gln Lys Gly
100 105 110
Thr Val Glu Thr Arg Phe Gly Ser Lys Glu Glu Leu Val Asn Met Ile
115 120 125
Asn Thr Ala His Ser Tyr Gly Ile Lys Val Ile Ala Asp Ile Val Ile
130 135 140
Asn His Arg Ala Gly Gly Asp Leu Glu Trp Asn Pro Phe Val Asn Asn
145 150 155 160
Tyr Thr Trp Thr Asp Phe Ser Lys Val Ala Ser Gly Lys Tyr Thr Ala
165 170 175
Asn Tyr Leu Asp Phe His Pro Asn Glu Val Lys Cys Cys Asp Glu Gly
180 185 190
Thr Phe Gly Asp Phe Pro Asp Ile Ala His Glu Lys Ser Trp Asp Gln
195 200 205
Tyr Trp Leu Trp Ala Ser Asn Glu Ser Tyr Ala Ala Tyr Leu Arg Ser
210 215 220
Ile Gly Ile Asp Ala Trp Arg Phe Asp Tyr Val Lys Gly Tyr Gly Ala
225 230 235 240
Trp Val Val Asn Asp Trp Leu Ser Trp Trp Gly Gly Trp Ala Val Gly
245 250 255
Glu Tyr Trp Asp Thr Asn Val Asp Ala Leu Leu Asn Trp Ala Tyr Asn
260 265 270
Ser Gly Ala Lys Val Phe Asp Phe Pro Leu Tyr Tyr Lys Met Asp Glu
275 280 285
Ala Phe Asp Asn Thr Asn Ile Pro Ala Leu Val Tyr Ala Leu Gln Asn
290 295 300
Gly Gly Thr Val Val Ser Arg Asp Pro Phe Lys Ala Val Thr Phe Val
305 310 315 320
Ala Asn His Asp Thr Asp Ile Ile Trp Asn Lys Tyr Pro Ala Tyr Ala
325 330 335
Phe Ile Leu Thr Tyr Glu Gly Gln Pro Val Ile Phe Tyr Arg Asp Tyr
340 345 350
Glu Glu Trp Leu Asn Lys Asp Lys Leu Asn Asn Leu Ile Trp Ile His
355 360 365
Glu His Leu Ala Gly Gly Ser Thr Lys Ile Leu Tyr Tyr Asp Asn Asp
370 375 380
Glu Leu Ile Phe Met Arg Glu Gly Tyr Gly Ser Lys Pro Gly Leu Ile
385 390 395 400
Thr Tyr Ile Asn Leu Gly Asn Asp Trp Ala Glu Arg Trp Val Asn Val
405 410 415
Gly Ser Lys Phe Ala Gly Tyr Thr Ile His Glu Tyr Thr Gly Asn Leu
420 425 430
Gly Gly Trp Val Asp Arg Trp Val Gln Tyr Asp Gly Trp Val Lys Leu
435 440 445
Thr Ala Pro Pro His Asp Pro Ala Asn Gly Tyr Tyr Gly Tyr Ser Val
450 455 460
Trp Ser Tyr Ala Gly Val Gly
465 470
<210>113
<211>1539
<212>DNA
<213>环境的
<400>113
atgaaacaac aaaaacggct ttacgcccga ttgctgacgc tgttatttgc gctcatcttc 60
ttgctgcctc attctgcagc agcggcggca aatcttaatg ggacgctgat gcagtatttt 120
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aactatgatt atttgatgta tgccgacatc gattatgacc atcctgatgt cgcagcagaa 720
attaagagat ggggcacttg gtatgccaat gaactgcaat tggacggttt ccgtcttgat 780
gctgtcaaac acattaaatt ttcttttttg cgggattggg ttaatcatgt cagggaaaaa 840
acggggaagg aaatgtttac ggtagctgaa tattggcaga atgacttggg cgcgctggaa 900
aactatttga acaaaacaaa ttttaatcat tcagtgtttg acgtgccgct tcattatcag 960
ttccatgctg catcgacaca gggaggcggc tatgatatga ggaaattgct gaacggtacg 1020
gtcgtttcca agcatccgtt gaaagcggtt acatttgtcg ataaccatga tacacagccg 1080
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gtaaacggcg ggtcggtttc aatttatgtt caaagatag 1539
<210>114
<211>512
<212>PRT
<213>环境的
<400>114
Met Lys Gln Gln Lys Arg Leu Tyr Ala Arg Leu Leu Thr Leu Leu Phe
1 5 10 15
Ala Leu Ile Phe Leu Leu Pro His Ser Ala Ala Ala Ala Ala Asn Leu
20 25 30
Asn Gly Thr Leu Met Gln Tyr Phe Glu Trp Tyr Met Pro Asn Asp Gly
35 40 45
Gln His Trp Lys Arg Leu Gln Asn Asp Ser Ala Tyr Leu Ala Glu His
50 55 60
Gly Ile Thr Ala Val Trp Ile Pro Pro Ala Tyr Lys Gly Thr Ser Gln
65 70 75 80
Ala Asp Val Gly Tyr Gly Ala Tyr Asp Leu Tyr Asp Leu Gly Glu Phe
85 90 95
His Gln Lys Gly Thr Val Arg Thr Lys Tyr Gly Thr Lys Gly Glu Leu
100 105 110
Gln Ser Ala Ile Lys Ser Leu His Ser Arg Asp Ile Asn Val Tyr Gly
115 120 125
Asp Val Val Ile Asn His Lys Gly Gly Ala Asp Ala Thr Glu Asp Val
130 135 140
Thr Ala Val Glu Val Asp Pro Ala Asp Arg Asn Arg Val Ile Ser Gly
145 150 155 160
Glu His Arg Ile Lys Ala Trp Thr His Phe His Phe Pro Gly Arg Gly
165 170 175
Ser Thr Tyr Ser Asp Phe Lys Trp His Trp Tyr His Phe Asp Gly Thr
180 185 190
Asp Trp Asp Glu Ser Arg Lys Leu Asn Arg Ile Tyr Lys Phe Gln Gly
195 200 205
Lys Ala Trp Asp Trp Glu Val Ser Asn Glu Asn Gly Asn Tyr Asp Tyr
210 215 220
Leu Met Tyr Ala Asp Ile Asp Tyr Asp His Pro Asp Val Ala Ala Glu
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Ile Lys Arg Trp Gly Thr Trp Tyr Ala Asn Glu Leu Gln Leu Asp Gly
245 250 255
Phe Arg Leu Asp Ala Val Lys His Ile Lys Phe Ser Phe Leu Arg Asp
260 265 270
Trp Val Asn His Val Arg Glu Lys Thr Gly Lys Glu Met Phe Thr Val
275 280 285
Ala Glu Tyr Trp Gln Asn Asp Leu Gly Ala Leu Glu Asn Tyr Leu Asn
290 295 300
Lys Thr Asn Phe Asn His Ser Val Phe Asp Val Pro Leu His Tyr Gln
305 310 315 320
Phe His Ala Ala Ser Thr Gln Gly Gly Gly Tyr Asp Met Arg Lys Leu
325 330 335
Leu Asn Gly Thr Val Val Ser Lys His Pro Leu Lys Ala Val Thr Phe
340 345 350
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Ser Gly Tyr Pro Gln Val Phe Tyr Gly Asp Met Tyr Gly Thr Lys Gly
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Asp Ser Gln Arg Glu Ile Pro Ala Leu Lys His Lys Ile Glu Pro Ile
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Leu Lys Ala Arg Lys Gln Tyr Ala Tyr Gly Ala Gln His Asp Tyr Phe
420 425 430
Asp His His Asp Ile Val Gly Trp Thr Arg Glu Gly Asp Ser Ser Val
435 440 445
Ala Asn Ser Gly Leu Ala Ala Leu Ile Thr Asp Gly Pro Gly Gly Ala
450 455 460
Lys Arg Met Tyr Val Gly Arg Gln Asn Ala Gly Glu Thr Trp His Asp
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Ile Thr Gly Asn Arg Ser Glu Pro Val Val Ile Asn Ser Glu Gly Trp
485 490 495
Gly Glu Phe His Val Asn Gly Gly Ser Val Ser Ile Tyr Val Gln Arg
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<210>115
<211>1338
<212>DNA
<213>真核细胞
<400>115
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atgggctacg acccctacga ttacttcgat ctgggcgagt tttaccagaa gggaaccgtt 240
gagacccgct tcggctccaa ggaagagctc gtcaacatga tctccacggc ccaccagtac 300
ggcatcaagg ttatagcgga catagtgata aaccaccgcg caggtggaga cctcgaatgg 360
aacccatacg tcggcgacta tacctggacg gacttttcta aggtcgcctc cgggaaatac 420
aaggcccact acatggactt ccatccaaac aactacagca cctcagacga gggaaccttc 480
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aacgagagct acgccgccta cctcaggagc atagggatcg atgcgtggcg ctttgactac 600
gttaagggct acggcgcgtg ggtcgtcaag gactggctga gtcagtgggg cggctgggcc 660
gtcggcgagt actgggacac caacgtcgat gcgctcctca actgggccta cagcagcggc 720
gccaaggtct tcgacttccc gctctactac aagatggacg aggcctttga caacaagaac 780
attcccgccc tcgtttacgc catccagaac ggtgaaaccg tcgtcagcag ggatcccttc 840
aaggccgtta ccttcgtggc taaccacgat acgaacataa tctggaacaa gtaccctgcc 900
tatgccttca tcctgaccta cgaaggtcag cccgtcatct tctaccgcga ctacgaggag 960
tggctcaaca aggacaaact caacaacctc atatggattc acgagcacct ggcaggggga 1020
agcaccaaga tcctctacta cgacgacgat gagctcatct tcatgaggga aggctacggc 1080
gacaggcccg ggcttataac ctacatcaac ctcggtagcg actgggcgga gagatgggtg 1140
aacgttggct caaagttcgc gggctataca atccacgaat acaccggaaa cctcggcggc 1200
tgggtcgaca ggtacgtcca gtacgacggc tgggtcaagc ttaccgctcc gccacacgat 1260
ccggcaaacg gctattacgg ctactcggtc tggagctacg ccggagttgg aagatctcat 1320
caccatcacc atcactaa 1338
<210>116
<211>445
<212>PRT
<213>真核细胞
<400>116
Met Ala Lys Tyr Ser Glu Leu Glu Gln Gly Gly Val Ile Met Gln Ala
1 5 10 15
Phe Tyr Trp Asp Val Pro Glu Gly Gly Ile Trp Trp Asp Thr Ile Arg
20 25 30
Gln Lys Ile Pro Glu Trp Tyr Asp Ala Gly Ile Ser Ala Ile Trp Ile
35 40 45
Pro Pro Ala Ser Lys Gly Met Gly Gly Ala Tyr Ser Met Gly Tyr Asp
50 55 60
Pro Tyr Asp Tyr Phe Asp Leu Gly Glu Phe Tyr Gln Lys Gly Thr Val
65 70 75 80
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85 90 95
Ala His Gln Tyr Gly Ile Lys Val Ile Ala Asp Ile Val Ile Asn His
100 105 110
Arg Ala Gly Gly Asp Leu Glu Trp Asn Pro Tyr Val Gly Asp Tyr Thr
115 120 125
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130 135 140
Met Asp Phe His Pro Asn Asn Tyr Ser Thr Ser Asp Glu Gly Thr Phe
145 150 155 160
Gly Gly Phe Pro Asp Ile Asp His Leu Val Pro Phe Asn Gln Tyr Trp
165 170 175
Leu Trp Ala Ser Asn Glu Ser Tyr Ala Ala Tyr Leu Arg Ser Ile Gly
180 185 190
Ile Asp Ala Trp Arg Phe Asp Tyr Val Lys Gly Tyr Gly Ala Trp Val
195 200 205
Val Lys Asp Trp Leu Ser Gln Trp Gly Gly Trp Ala Val Gly Glu Tyr
210 215 220
Trp Asp Thr Asn Val Asp Ala Leu Leu Asn Trp Ala Tyr Ser Ser Gly
225 230 235 240
Ala Lys Val Phe Asp Phe Pro Leu Tyr Tyr Lys Met Asp Glu Ala Phe
245 250 255
Asp Asn Lys Asn Ile Pro Ala Leu Val Tyr Ala Ile Gln Asn Gly Glu
260 265 270
Thr Val Val Ser Arg Asp Pro Phe Lys Ala Val Thr Phe Val Ala Asn
275 280 285
His Asp Thr Asn Ile Ile Trp Asn Lys Tyr Pro Ala Tyr Ala Phe Ile
290 295 300
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305 310 315 320
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325 330 335
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340 345 350
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355 360 365
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385 390 395 400
Trp Val Asp Arg Tyr Val Gln Tyr Asp Gly Trp Val Lys Leu Thr Ala
405 410 415
Pro Pro His Asp Pro Ala Asn Gly Tyr Tyr Gly Tyr Ser Val Trp Ser
420 425 430
Tyr Ala Gly Val Gly Arg Ser His His His His His His
435 440 445
<210>117
<211>1476
<212>DNA
<213>环境的
<400>117
atgcgagtgt tcctggttgt gccaaagctg agccgcccat ttcaggcaga gtcacaacaa 60
caagacaggg acataacaat gaaacacaca gcgggaatgc tggcgatcgc aggtatgctg 120
atcgccccct tggcgcatgc cgatgtcata ctgcacgcct tcaactggaa atacagtgaa 180
gtcaccgcca aggccgatct catcaaggct gccggctaca agcaggtgct catctcaccg 240
cctctgaagt cctcgggcaa cgagtggtgg gctcgttacc agccccagga tctgcgcctg 300
gtcgacaccc cccttggcaa caagcaggat ctggagcagc tgatcgccgc gatgcagacc 360
cggggcattg ccgtctacgc ggacgtggtg ctcaaccaca tggccaacga aagctggaag 420
cgcagcgacc tcaactaccc cggcagcgag ctgctgcaaa gctacgccgg caatccggcc 480
tactttgaac gccagaagct ctttggcgat ctggggcaga acttcctcgc cggccaggat 540
tttcatccgg aggggtgcat caccgactgg aacaatccgg gccatgtcca gtactggcga 600
ctgtgcggcg gggcgggtga caaggggctg ccggatctgg accccaacaa ctgggtggtg 660
aaccagcaac aggcttacct gcaggcgctc aaggggatgg ggatcaaggg ttttcgggtc 720
gatgcggtca agcacatgag cgattaccag atcaacgccg tgttcacccc cgagatcaaa 780
caggggatgc acgtctttgg cgaggtgatc accacggggg gcgccggcaa cagcgactat 840
gagaacttcc tcaaacccta cctcgacagc agcggccagg gggcctacga cttcccgctc 900
ttcgcctccc tgcgtggagc gctgggctac ggcggcagca tgaacctgct ggccgatccc 960
ggtgcctatg gtcaggcgct gccgggtagc cgcgccgtca ccttcgccat cacccacgac 1020
atccccacca acgacggttt ccgctaccag atcctcaacc agaccgacga gagactggcc 1080
tatgcctacc tgctcggtcg cgatggcggt tcgcctctgg tctactccga tcacggtgaa 1140
accagggaca aggacggatt gcgctggcag gactactatc tgcgcaccga tctcaaaggg 1200
atgatccgct tccataacac agtgcagggt caaccgatgc agctcatcgg cagtaacgac 1260
tgcttcgtgc tgttcaagcg tggcaagcag ggcgtggtcg gcatcaacaa gtgcgactac 1320
gagcaggagt actggctcga taccgccaga ttcgagatga actggtatcg caactaccgg 1380
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ccggcccgcg gcgccagaat gtggctgcag gagtga 1476
<210>118
<211>491
<212>PRT
<213>环境的
<400>118
Met Arg Val Phe Leu Val Val Pro Lys Leu Ser Arg Pro Phe Gln Ala
1 5 10 15
Glu Ser Gln Gln Gln Asp Arg Asp Ile Thr Met Lys His Thr Ala Gly
20 25 30
Met Leu Ala Ile Ala Gly Met Leu Ile Ala Pro Leu Ala His Ala Asp
35 40 45
Val Ile Leu His Ala Phe Asn Trp Lys Tyr Ser Glu Val Thr Ala Lys
50 55 60
Ala Asp Leu Ile Lys Ala Ala Gly Tyr Lys Gln Val Leu Ile Ser Pro
65 70 75 80
Pro Leu Lys Ser Ser Gly Asn Glu Trp Trp Ala Arg Tyr Gln Pro Gln
85 90 95
Asp Leu Arg Leu Val Asp Thr Pro Leu Gly Asn Lys Gln Asp Leu Glu
100 105 110
Gln Leu Ile Ala Ala Met Gln Thr Arg Gly Ile Ala Val Tyr Ala Asp
115 120 125
Val Val Leu Asn His Met Ala Asn Glu Ser Trp Lys Arg Ser Asp Leu
130 135 140
Asn Tyr Pro Gly Ser Glu Leu Leu Gln Ser Tyr Ala Gly Asn Pro Ala
145 150 155 160
Tyr Phe Glu Arg Gln Lys Leu Phe Gly Asp Leu Gly Gln Asn Phe Leu
165 170 175
Ala Gly Gln Asp Phe His Pro Glu Gly Cys Ile Thr Asp Trp Asn Asn
180 185 190
Pro Gly His Val Gln Tyr Trp Arg Leu Cys Gly Gly Ala Gly Asp Lys
195 200 205
Gly Leu Pro Asp Leu Asp Pro Asn Asn Trp Val Val Asn Gln Gln Gln
210 215 220
Ala Tyr Leu Gln Ala Leu Lys Gly Met Gly Ile Lys Gly Phe Arg Val
225 230 235 240
Asp Ala Val Lys His Met Ser Asp Tyr Gln Ile Asn Ala Val Phe Thr
245 250 255
Pro Glu Ile Lys Gln Gly Met His Val Phe Gly Glu Val Ile Thr Thr
260 265 270
Gly Gly Ala Gly Asn Ser Asp Tyr Glu Asn Phe Leu Lys Pro Tyr Leu
275 280 285
Asp Ser Ser Gly Gln Gly Ala Tyr Asp Phe Pro Leu Phe Ala Ser Leu
290 295 300
Arg Gly Ala Leu Gly Tyr Gly Gly Ser Met Asn Leu Leu Ala Asp Pro
305 310 315 320
Gly Ala Tyr Gly Gln Ala Leu Pro Gly Ser Arg Ala Val Thr Phe Ala
325 330 335
Ile Thr His Asp Ile Pro Thr Asn Asp Gly Phe Arg Tyr Gln Ile Leu
340 345 350
Asn Gln Thr Asp Glu Arg Leu Ala Tyr Ala Tyr Leu Leu Gly Arg Asp
355 360 365
Gly Gly Ser Pro Leu Val Tyr Ser Asp His Gly Glu Thr Arg Asp Lys
370 375 380
Asp Gly Leu Arg Trp Gln Asp Tyr Tyr Leu Arg Thr Asp Leu Lys Gly
385 390 395 400
Met Ile Arg Phe His Asn Thr Val Gln Gly Gln Pro Met Gln Leu Ile
405 410 415
Gly Ser Asn Asp Cys Phe Val Leu Phe Lys Arg Gly Lys Gln Gly Val
420 425 430
Val Gly Ile Asn Lys Cys Asp Tyr Glu Gln Glu Tyr Trp Leu Asp Thr
435 440 445
Ala Arg Phe Glu Met Asn Trp Tyr Arg Asn Tyr Arg Asp Val Leu Asp
450 455 460
Gln Asn Ala Val Val Asn Val Gln Ser Gln Trp Val Arg Leu Thr Ile
465 470 475 480
Pro Ala Arg Gly Ala Arg Met Trp Leu Gln Glu
485 490
<210>119
<211>1695
<212>DNA
<213>细菌的
<400>119
atgcaaacgt ttgcattctt attttactca aagaaaggat gggtgtgcat gaattatttg 60
aaaaaagtgt ggttgtatta cgctatcgtc gctaccttaa tcatttcctt tcttacacct 120
ttttcaacag cacaagctaa tactgcacct gttaacggaa caatgatgca atatttcgaa 180
tgggacttac ctaatgatgg gacgctttgg acgaaagtaa aaaatgaagc taccaatctt 240
tcttcactag gtatcacagc actatggctc cctccagcat ataaaggaac gagccaaagc 300
gatgtcggat acggtgttta cgatttatat gaccttgggg aatttaatca aaaagggacg 360
atccgaacga aatacggaac aaaaacacaa tatattcaag ccattcaaac tgcccaagcc 420
gcagggatgc aagtatatgc ggatgttgta tttaatcata aggcaggggc tgacagtaca 480
gaatttgtcg atgcagttga ggtaaaccct tctaatcgaa atcaagaaac atctggcaca 540
tatcaaattc aagcatggac aaaatttgat tttcctggtc gtggaaacac atactccagc 600
ttcaaatggc gctggtacca ttttgatggt acggattggg acgaaagtcg taaattaaat 660
cgtatttaca aattccgcgg tacaggaaaa gcgtgggact gggaagtcga tacagaaaac 720
ggaaactatg attatttaat gttcgctgat ttagatatgg atcaccctga ggttgtgaca 780
gaattaaaaa actggggaac gtggtacgtc aatactacaa atatcgatgg attccgctta 840
gatgccgtaa aacatattaa atacagcttt ttccctgact ggctaacata tgtacgtaat 900
caaacaggaa aaaatttatt tgccgttggg gaattttgga gctatgacgt caataagctg 960
cataattaca ttacaaaaac aaatgggtcg atgtcattat ttgatgcacc cttgcataac 1020
aacttttata ccgcttccaa atcgagtgga tattttgaca tgcgttattt attgaataat 1080
acattaatga aagatcaacc ttcactcgct gtaacacttg tcgataacca cgacacgcaa 1140
ccagggcaat ctttacagtc atgggtcgaa ccttggttta aacagcttgc ttacgccttt 1200
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aaatacaata tcccggggtt aaaaagtaaa atcgacccgc ttttaattgc tcgtcgtgat 1320
tacgcttatg gaacacaacg tgattacatt gatcatcaag acattatcgg atggacacga 1380
gaaggcattg atgcaaaacc gaactctgga ctggcggctt taattaccga cggtcctggt 1440
ggaagtaaat ggatgtatgt cggtaaaaag catgccggga aagtatttta tgatttaact 1500
ggaaatcgaa gtgacacagt aacgattaat gcggatggtt ggggagaatt taaagtaaac 1560
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tgtcgcacgg gttaa 1695
<210>120
<211>564
<212>PRT
<213>细菌的
<400>120
Met Gln Thr Phe Ala Phe Leu Phe Tyr Ser Lys Lys Gly Trp Val Cys
1 5 10 15
Met Asn Tyr Leu Lys Lys Val Trp Leu Tyr Tyr Ala Ile Val Ala Thr
20 25 30
Leu Ile Ile Ser Phe Leu Thr Pro Phe Ser Thr Ala Gln Ala Asn Thr
35 40 45
Ala Pro Val Asn Gly Thr Met Met Gln Tyr Phe Glu Trp Asp Leu Pro
50 55 60
Asn Asp Gly Thr Leu Trp Thr Lys Val Lys Asn Glu Ala Thr Asn Leu
65 70 75 80
Ser Ser Leu Gly Ile Thr Ala Leu Trp Leu Pro Pro Ala Tyr Lys Gly
85 90 95
Thr Ser Gln Ser Asp Val Gly Tyr Gly Val Tyr Asp Leu Tyr Asp Leu
100 105 110
Gly Glu Phe Asn Gln Lys Gly Thr Ile Arg Thr Lys Tyr Gly Thr Lys
115 120 125
Thr Gln Tyr Ile Gln Ala Ile Gln Thr Ala Gln Ala Ala Gly Met Gln
130 135 140
Val Tyr Ala Asp Val Val Phe Asn His Lys Ala Gly Ala Asp Ser Thr
145 150 155 160
Glu Phe Val Asp Ala Val Glu Val Asn Pro Ser Asn Arg Asn Gln Glu
165 170 175
Thr Ser Gly Thr Tyr Gln Ile Gln Ala Trp Thr Lys Phe Asp Phe Pro
180 185 190
Gly Arg Gly Asn Thr Tyr Ser Ser Phe Lys Trp Arg Trp Tyr His Phe
195 200 205
Asp Gly Thr Asp Trp Asp Glu Ser Arg Lys Leu Asn Arg Ile Tyr Lys
210 215 220
Phe Arg Gly Thr Gly Lys Ala Trp Asp Trp Glu Val Asp Thr Glu Asn
225 230 235 240
Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Met Phe Ala Asp Leu Asp Met Asp His Pro
245 250 255
Glu Val Val Thr Glu Leu Lys Asn Trp Gly Thr Trp Tyr Val Asn Thr
260 265 270
Thr Asn Ile Asp Gly Phe Arg Leu Asp Ala Val Lys His Ile Lys Tyr
275 280 285
Ser Phe Phe Pro Asp Trp Leu Thr Tyr Val Arg Asn Gln Thr Gly Lys
290 295 300
Asn Leu Phe Ala Val Gly Glu Phe Trp Ser Tyr Asp Val Asn Lys Leu
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His Asn Tyr Ile Thr Lys Thr Asn Gly Ser Met Ser Leu Phe Asp Ala
325 330 335
Pro Leu His Asn Asn Phe Tyr Thr Ala Ser Lys Ser Ser Gly Tyr Phe
340 345 350
Asp Met Arg Tyr Leu Leu Asn Asn Thr Leu Met Lys Asp Gln Pro Ser
355 360 365
Leu Ala Val Thr Leu Val Asp Asn His Asp Thr Gln Pro Gly Gln Ser
370 375 380
Leu Gln Ser Trp Val Glu Pro Trp Phe Lys Gln Leu Ala Tyr Ala Phe
385 390 395 400
Ile Leu Thr Arg Gln Glu Gly Tyr Pro Cys Val Phe Tyr Gly Asp Tyr
405 410 415
Tyr Gly Ile Pro Lys Tyr Asn Ile Pro Gly Leu Lys Ser Lys Ile Asp
420 425 430
Pro Leu Leu Ile Ala Arg Arg Asp Tyr Ala Tyr Gly Thr Gln Arg Asp
435 440 445
Tyr Ile Asp His Gln Asp Ile Ile Gly Trp Thr Arg Glu Gly Ile Asp
450 455 460
Ala Lys Pro Asn Ser Gly Leu Ala Ala Leu Ile Thr Asp Gly Pro Gly
465 470 475 480
Gly Ser Lys Trp Met Tyr Val Gly Lys Lys His Ala Gly Lys Val Phe
485 490 495
Tyr Asp Leu Thr Gly Asn Arg Ser Asp Thr Val Thr Ile Asn Ala Asp
500 505 510
Gly Trp Gly Glu Phe Lys Val Asn Gly Gly Ser Val Ser Ile Trp Val
515 520 525
Ala Lys Thr Ser Asn Val Thr Phe Thr Val Asn Asn Ala Thr Thr Thr
530 535 540
Ser Gly Gln Asn Val Tyr Val Val Gly Asn Ile Pro Glu Leu Gly Asn
545 550 555 560
Cys Arg Thr Gly
<210>121
<211>1556
<212>DNA
<213>环境的
<400>121
atgctcgccc tgtcgctcgg cggctgcggc atcgacgcgg gcccgacagg ccctcgcgtc 60
gtggagccgc tgccgcagcg ccccacgctt ccgcaggagt accgcgccag cggccacgcg 120
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gcgctgagcc gcagcggcac gggcgtggag ttcagcaaca tgatcagccg gtgcaaggcc 360
gccggcgtgg acatctacgt ggacgccgtc atcaaccaca tgacggccgg tgcggggacg 420
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tttcacccgc agtgcgcggt gggcgactac accagcgccg ccaacgtgca ggactgcgaa 540
ctgctggggc tggctgacct gaacaccggc gcggccggcg tgcagcagaa gatcgcggac 600
tacctggtct cgctggcgcg gctgggcgtg gcgggttttc gcatcgacgc cgccaagcac 660
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gggcgcccgc ttccctactg gttcgccgag gtgatcgaca acggcggcga gggggtgcgg 780
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<210>122
<211>517
<212>PRT
<213>环境的
<400>122
Met Leu Ala Leu Ser Leu Gly Gly Cys Gly Ile Asp Ala Gly Pro Thr
1 5 10 15
Gly Pro Arg Val Val Glu Pro Leu Pro Gln Arg Pro Thr Leu Pro Gln
20 25 30
Glu Tyr Arg Ala Ser Gly His Ala Ala Ala Gly Asp Val Phe Val His
35 40 45
Leu Phe Glu Trp Lys Trp Pro Asp Ile Ala Glu Glu Cys Glu Asn Val
50 55 60
Leu Gly Pro Ala Gly Tyr Glu Ala Val Gln Val Ser Pro Pro Gln Glu
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His Leu Val Gln Gln Gly Ala Pro Trp Trp Gln Arg Tyr Gln Pro Val
85 90 95
Ser Tyr Ser Val Ala Leu Ser Arg Ser Gly Thr Gly Val Glu Phe Ser
100 105 110
Asn Met Ile Ser Arg Cys Lys Ala Ala Gly Val Asp Ile Tyr Val Asp
115 120 125
Ala Val Ile Asn His Met Thr Ala Gly Ala Gly Thr Gly Ser Asn Gly
130 135 140
Thr Ala Tyr Thr Lys Tyr Asn Tyr Pro Gly Leu Tyr Ala Gln Ala Asp
145 150 155 160
Phe His Pro Gln Cys Ala Val Gly Asp Tyr Thr Ser Ala Ala Asn Val
165 170 175
Gln Asp Cys Glu Leu Leu Gly Leu Ala Asp Leu Asn Thr Gly Ala Ala
180 185 190
Gly Val Gln Gln Lys Ile Ala Asp Tyr Leu Val Ser Leu Ala Arg Leu
195 200 205
Gly Val Ala Gly Phe Arg Ile Asp Ala Ala Lys His Ile Gln Pro Val
210 215 220
Glu Leu Asp Ala Ile Val Asp Arg Val Asn Gln Thr Leu Ala Ala Glu
225 230 235 240
Gly Arg Pro Leu Pro Tyr Trp Phe Ala Glu Val Ile Asp Asn Gly Gly
245 250 255
Glu Gly Val Arg Arg Glu His Tyr Tyr Gly Leu Gly Tyr Gly Thr Gly
260 265 270
Gly Ala Ala Asp Ile Thr Glu Phe Arg Tyr Lys Gly Val Gly Asp Lys
275 280 285
Phe Leu Gly Ser Gly Gly Gln Arg Leu Val Asp Leu Lys Asn Phe Ser
290 295 300
Ala Val Thr Trp Asn Leu Met Pro Ser Asp Lys Ala Val Val Phe Leu
305 310 315 320
Glu Asn His Asp Thr Gln Arg Gly Gly Gly Ile Gly Tyr Arg Asp Gly
325 330 335
Thr Ala Phe Arg Leu Ala Asn Val Trp Met Leu Ala Gln Pro Tyr Gly
340 345 350
Tyr Pro Ser Val Met Ser Ser Tyr Ala Phe Asp Arg Thr Ser Pro Phe
355 360 365
Gly Arg Asp Ala Gly Pro Pro Ser Glu Asp Gly Ala Thr Lys Asp Val
370 375 380
Thr Cys Ala Pro Thr Leu Glu Thr Ala Val Leu Gly Thr Trp Val Cys
385 390 395 400
Glu His Arg Asp Pro Val Ile Gln Arg Met Val Gly Phe Arg Arg Ala
405 410 415
Met Ala Gly Thr Asp Leu Asn Arg Trp Trp Asp Asn Gly Gly Asn Ala
420 425 430
Ile Ala Phe Ser Arg Gly Asp Arg Gly Phe Val Ala Ile Ser Arg Glu
435 440 445
Pro Lys Val Thr Met Ala Ala Val Pro Ser Gly Leu Ser Pro Gly Thr
450 455 460
Tyr Cys Asp Val Leu Thr Gly Gly Lys Val Gly Asn Ala Cys Ala Gly
465 470 475 480
Thr Ser Val Thr Val Asp Ser Gln Gly Val Val Gln Leu Ser Ile Val
485 490 495
Glu Asn Ser Ala Leu Val Ile His Leu Gly Ala Lys Leu Arg Arg Ala
500 505 510
Gly Gly Cys Ala Glu
515
<210>123
<211>1770
<212>DNA
<213>环境的
<400>123
atgccccagg ccattcgcac tttttcacgt tggacgttgt tcggcttaat cggcgttttt 60
ctgcttggtc tcgtcttttc tgtcccaccc cgggcaatcc aggcccagac aaccccggcc 120
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tatgtcgatg ccgtgatcaa ccatatgacg actgtcggct ccggcactgg tatggctgga 420
tcgacctaca ccagctacac ctatccgggg ctgtatcaga cccaggactt ccaccactgc 480
gggcgcaatg gcaacgatga tatcagcagc tacggcgatc gctgggaagt acaaaactgc 540
gaactgctca acctagccga cctcaacacc ggcgctgagt atgtccgggg taaactcgcc 600
gcctatatga acgatctgcg cggcctgggc gtcgccggat ttcggatcga tgccgccaag 660
cacatggata ccaacgacat caacaatatc gttggccgcc tgcccaacgc gccctacatc 720
taccaggaag tgatcgacca gggcggcgag ccaattaccg ccggcgaata cttccagaat 780
ggcgatgtga ccgagttcaa gtacagccgc gagatctcgc gcatgttcaa aaccggccag 840
ctgacccata tgagccagtt cggcactgcc tggggcttca tgtccagcga cctggcagta 900
gttttcaccg ataaccacga caaccagcgc ggtcacggcg gcgccggcga tgtcttgacc 960
tacaaagatg gccagctgta caccctgggc aatatcttcg agctagcctg gccgtatggc 1020
tacccacagg tcatgtcgag ctacacgttc agcaacggcg accaggggcc gccatcgacc 1080
aatgtgtacg caaccacaac gcctgattgt ggcaacggcc gctgggtctg tgagcaccgc 1140
tggcgaggaa tcgccaacat ggtcgcgttc cgcaactaca ccgccccgac cttcagcacc 1200
agcaactggt ggagcaacgg caacaaccag atcgctttca gccgcgggac cctgggcttt 1260
gtggcgatca atcgggaagg tggcagcctg aaccgcacct tccaaaccgg cctgcccgtc 1320
ggcacctact gcgatgtcat tcacggcgat ttcaatgcca gcgccggcac ctgttccggc 1380
ccaactatcg ctgtcaacgg ctccggacag gcaaccatca cggtcaacgc gatggacgcg 1440
gtggcgatct acggcggagc caggctcgcc actccggcca gtgtcaacgt gacattcaac 1500
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gcgggcaatg tggtgtggga aagcggcgcc aaccgcgtct ttaccacccc cggcagcggc 1740
agtgccacgc gcaacgatac ctggaaatag 1770
<210>124
<211>589
<212>PRT
<213>环境的
<400>124
Met Pro Gln Ala Ile Arg Thr Phe Ser Arg Trp Thr Leu Phe Gly Leu
1 5 10 15
Ile Gly Val Phe Leu Leu Gly Leu Val Phe Ser Val Pro Pro Arg Ala
20 25 30
Ile Gln Ala Gln Thr Thr Pro Ala Arg Thr Val Met Val His Leu Phe
35 40 45
Glu Trp Lys Trp Thr Asp Ile Ala Lys Glu Cys Glu Asn Phe Leu Gly
50 55 60
Pro Lys Gly Phe Ala Ala Ile Gln Val Ser Pro Pro Gln Glu His Val
65 70 75 80
Gln Gly Ser Gln Trp Trp Thr Arg Tyr Gln Pro Val Ser Tyr Lys Ile
85 90 95
Glu Ser Arg Ser Gly Thr Arg Ala Glu Phe Ala Asn Met Val Ser Arg
100 105 110
Cys Lys Ala Val Gly Val Asp Ile Tyr Val Asp Ala Val Ile Asn His
115 120 125
Met Thr Thr Val Gly Ser Gly Thr Gly Met Ala Gly Ser Thr Tyr Thr
130 135 140
Ser Tyr Thr Tyr Pro Gly Leu Tyr Gln Thr Gln Asp Phe His His Cys
145 150 155 160
Gly Arg Asn Gly Asn Asp Asp Ile Ser Ser Tyr Gly Asp Arg Trp Glu
165 170 175
Val Gln Asn Cys Glu Leu Leu Asn Leu Ala Asp Leu Asn Thr Gly Ala
180 185 190
Glu Tyr Val Arg Gly Lys Leu Ala Ala Tyr Met Asn Asp Leu Arg Gly
195 200 205
Leu Gly Val Ala Gly Phe Arg Ile Asp Ala Ala Lys His Met Asp Thr
210 215 220
Asn Asp Ile Asn Asn Ile Val Gly Arg Leu Pro Asn Ala Pro Tyr Ile
225 230 235 240
Tyr Gln Glu Val Ile Asp Gln Gly Gly Glu Pro Ile Thr Ala Gly Glu
245 250 255
Tyr Phe Gln Asn Gly Asp Val Thr Glu Phe Lys Tyr Ser Arg Glu Ile
260 265 270
Ser Arg Met Phe Lys Thr Gly Gln Leu Thr His Met Ser Gln Phe Gly
275 280 285
Thr Ala Trp Gly Phe Met Ser Ser Asp Leu Ala Val Val Phe Thr Asp
290 295 300
Asn His Asp Asn Gln Arg Gly His Gly Gly Ala Gly Asp Val Leu Thr
305 310 315 320
Tyr Lys Asp Gly Gln Leu Tyr Thr Leu Gly Asn Ile Phe Glu Leu Ala
325 330 335
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340 345 350
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355 360 365
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370 375 380
Ala Asn Met Val Ala Phe Arg Asn Tyr Thr Ala Pro Thr Phe Ser Thr
385 390 395 400
Ser Asn Trp Trp Ser Asn Gly Asn Asn Gln Ile Ala Phe Ser Arg Gly
405 410 415
Thr Leu Gly Phe Val Ala Ile Asn Arg Glu Gly Gly Ser Leu Asn Arg
420 425 430
Thr Phe Gln Thr Gly Leu Pro Val Gly Thr Tyr Cys Asp Val Ile His
435 440 445
Gly Asp Phe Asn Ala Ser Ala Gly Thr Cys Ser Gly Pro Thr Ile Ala
450 455 460
Val Asn Gly Ser Gly Gln Ala Thr Ile Thr Val Asn Ala Met Asp Ala
465 470 475 480
Val Ala Ile Tyr Gly Gly Ala Arg Leu Ala Thr Pro Ala Ser Val Asn
485 490 495
Val Thr Phe Asn Glu Asn Ala Thr Thr Thr Trp Gly Gln Asn Val Tyr
500 505 510
Ile Val Gly Asn Val Ala Ala Leu Gly Ser Trp Asn Ala Gly Ser Ala
515 520 525
Val Leu Leu Ser Ser Ala Asn Tyr Pro Ile Trp Ser Lys Thr Ile Ala
530 535 540
Leu Pro Ala Asn Thr Ala Ile Glu Tyr Lys Tyr Ile Lys Lys Asp Gly
545 550 555 560
Ala Gly Asn Val Val Trp Glu Ser Gly Ala Asn Arg Val Phe Thr Thr
565 570 575
Pro Gly Ser Gly Ser Ala Thr Arg Asn Asp Thr Trp Lys
580 585
<210>125
<211>1395
<212>DNA
<213>环境的
<400>125
gtggtgcaca tgaagttgaa gtaccttgcc ttagttttgt tggctgtggc ttcgataggc 60
ctactctcga ctccagtggg tgctgccaag tactccgaac tcgaagaggg cggtgttata 120
atgcaggcct tctactggga tgttcccgga gggggaatct ggtgggacac cataagacag 180
aaaatcccgg agtggtacga cgctggaatc tcggcgatat ggattcctcc agctagcaaa 240
gggatgggcg gtggttattc catgggctac gatccctacg atttctttga cctcggcgag 300
tactatcaga agggaacagt tgagacgcgc ttcggctcaa aggaggaact ggtgaacatg 360
ataaacaccg cacactccta tggcataaag gtgatagcgg acatagtcat aaaccaccgc 420
gccggtggag accttgagtg gaaccccttt gtaaacaact atacttggac agacttctcc 480
aaggtcgcct ccggtaaata cacggccaac taccttgact tccacccaaa cgaggtcaag 540
tgctgcgatg agggtacatt tggtgacttt ccggacatcg cccacgagaa gagctgggat 600
cagtactggc tctgggcaag caatgagagc tacgccgcat atctccggag catagggatc 660
gatgcatggc gtttcgacta cgtcaaaggt tacggagcgt gggttgttaa tgactggctc 720
agctggtggg gaggctgggc cgttggagag tactgggaca cgaacgttga tgcactcctt 780
aactgggcat acgacagcgg tgccaaggtc tttgacttcc cgctctacta caagatggac 840
gaagcctttg acaacaccaa catccccgct ttggtttacg ccctccagaa cggaggaaca 900
gtcgtttccc gcgatccctt caaggcagta actttcgttg ccaaccacga tacagatata 960
atctggaaca agtatccggc ttatgcgttc atccttacct atgagggaca gcctgttata 1020
ttttaccgcg actacgagga gtggctcaac aaggataagc ttaacaacct tatctggata 1080
cacgagcacc ttgccggagg aagtaccaag atcctctact acgataacga tgagctaata 1140
ttcatgaggg agggctacgg gagcaagccg ggcctcataa cctacataaa cctcggaaac 1200
gactgggccg agcgctgggt gaacgtcggc tcaaagtttg ccggctacac aatccatgaa 1260
tacacaggca atctcggtgg ctgggttgac aggtgggttc agtacgatgg atgggttaaa 1320
ctgacggcac ctcctcatga tccagccaac ggatattacg gctactcagt ctggagctac 1380
gcaggcgtcg gatga 1395
<210>126
<211>464
<212>PRT
<213>环境的
<400>126
Val Val His Met Lys Leu Lys Tyr Leu Ala Leu Val Leu Leu Ala Val
1 5 10 15
Ala Ser Ile Gly Leu Leu Ser Thr Pro Val Gly Ala Ala Lys Tyr Ser
20 25 30
Glu Leu Glu Glu Gly Gly Val Ile Met Gln Ala Phe Tyr Trp Asp Val
35 40 45
Pro Gly Gly Gly Ile Trp Trp Asp Thr Ile Arg Gln Lys Ile Pro Glu
50 55 60
Trp Tyr Asp Ala Gly Ile Ser Ala Ile Trp Ile Pro Pro Ala Ser Lys
65 70 75 80
Gly Met Gly Gly Gly Tyr Ser Met Gly Tyr Asp Pro Tyr Asp Phe Phe
85 90 95
Asp Leu Gly Glu Tyr Tyr Gln Lys Gly Thr Val Glu Thr Arg Phe Gly
100 105 110
Ser Lys Glu Glu Leu Val Asn Met Ile Asn Thr Ala His Ser Tyr Gly
115 120 125
Ile Lys Val Ile Ala Asp Ile Val Ile Asn His Arg Ala Gly Gly Asp
130 135 140
Leu Glu Trp Asn Pro Phe Val Asn Asn Tyr Thr Trp Thr Asp Phe Ser
145 150 155 160
Lys Val Ala Ser Gly Lys Tyr Thr Ala Asn Tyr Leu Asp Phe His Pro
165 170 175
Asn Glu Val Lys Cys Cys Asp Glu Gly Thr Phe Gly Asp Phe Pro Asp
180 185 190
Ile Ala His Glu Lys Ser Trp Asp Gln Tyr Trp Leu Trp Ala Ser Asn
195 200 205
Glu Ser Tyr Ala Ala Tyr Leu Arg Ser Ile Gly Ile Asp Ala Trp Arg
210 215 220
Phe Asp Tyr Val Lys Gly Tyr Gly Ala Trp Val Val Asn Asp Trp Leu
225 230 235 240
Ser Trp Trp Gly Gly Trp Ala Val Gly Glu Tyr Trp Asp Thr Asn Val
245 250 255
Asp Ala Leu Leu Asn Trp Ala Tyr Asp Ser Gly Ala Lys Val Phe Asp
260 265 270
Phe Pro Leu Tyr Tyr Lys Met Asp Glu Ala Phe Asp Asn Thr Asn Ile
275 280 285
Pro Ala Leu Val Tyr Ala Leu Gln Asn Gly Gly Thr Val Val Ser Arg
290 295 300
Asp Pro Phe Lys Ala Val Thr Phe Val Ala Asn His Asp Thr Asp Ile
305 310 315 320
Ile Trp Asn Lys Tyr Pro Ala Tyr Ala Phe Ile Leu Thr Tyr Glu Gly
325 330 335
Gln Pro Val Ile Phe Tyr Arg Asp Tyr Glu Glu Trp Leu Asn Lys Asp
340 345 350
Lys Leu Asn Asn Leu Ile Trp Ile His Glu His Leu Ala Gly Gly Ser
355 360 365
Thr Lys Ile Leu Tyr Tyr Asp Asn Asp Glu Leu Ile Phe Met Arg Glu
370 375 380
Gly Tyr Gly Ser Lys Pro Gly Leu Ile Thr Tyr Ile Asn Leu Gly Asn
385 390 395 400
Asp Trp Ala Glu Arg Trp Val Asn Val Gly Ser Lys Phe Ala Gly Tyr
405 410 415
Thr Ile His Glu Tyr Thr Gly Asn Leu Gly Gly Trp Val Asp Arg Trp
420 425 430
Val Gln Tyr Asp Gly Trp Val Lys Leu Thr Ala Pro Pro His Asp Pro
435 440 445
Ala Asn Gly Tyr Tyr Gly Tyr Ser Val Trp Ser Tyr Ala Gly Val Gly
450 455 460
<210>127
<211>1848
<212>DNA
<213>环境的
<400>127
gtgtgcatga attatttgaa aaaagtgtgg ttgtattacg ctatcgtcgc taccttaatc 60
atttactttc ttacgccctt ttcaactgca caagccaaca ctgcaccagt caacggaacg 120
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aacgaagcaa gcagtctttc ttctttaggt attactgcgt tatggttacc acctgcatac 240
aaaggaacga gccaagggga tgtcgggtat ggcgtgtacg atttgtatga cttaggagaa 300
tttaatcaaa aagggacgat tcgaacgaaa tacggaacaa aaacgcaata tttacaagcc 360
attcaagcgg caaaaagcgc tggcatgcaa gtatacgctg atgtcgtatt taatcacaag 420
gcgggggcag atagtacaga atgggttgac gcagtcgaag tgaatccttc taatcgaaac 480
caagaaacat ctggcacata tcaaattcaa gcatggacaa aatttgattt ccctggccgt 540
gggaacacat actcaagctt taaatggcga tggtatcatt ttgacggtac ggattgggat 600
gaaagccgaa aactaaatcg tatttacaaa tttcgtggca caggaaaagc atgggattgg 660
gaagtagaca cagagaacgg aaactatgac tacttaatgt ttgctgattt agatatggat 720
caccctgaag tcgtgacaga gctaaaaaac tggggaacat ggtacgtcaa tacgacaaat 780
gtcgatgggt ttcgcttaga tgcagtaaag catattaaat atagcttctt cccagattgg 840
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cgctatttgt taaataatac gttgatgaaa gaccagcctt ctcttgcggt cacactcgtt 1080
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ccgcttgctt atgcctttat tttgacaaga caagaaggat atccttgcgt attttacggc 1200
gactattacg gcatccctaa atacaacatt ccgggattga aaagtaaaat cgatccgctt 1260
ctcattgccc gtagagacta cgcatacgga acacaacgtg attatattga ccatcaagac 1320
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acgtttaccg tcaacaatgc gacaacgata agcggacaaa atgtgtatgt cgttggtaac 1620
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aaaaaagacc aatcgggaaa tgttgtttgg gaaagcattc caaaccgaac atacaccgtt 1800
ccatttttat caacaggctc atatacagct agttggaatg taccttaa 1848
<210>128
<211>615
<212>PRT
<213>环境的
<400>128
Val Cys Met Asn Tyr Leu Lys Lys Val Trp Leu Tyr Tyr Ala Ile Val
1 5 10 15
Ala Thr Leu Ile Ile Tyr Phe Leu Thr Pro Phe Ser Thr Ala Gln Ala
20 25 30
Asn Thr Ala Pro Val Asn Gly Thr Met Met Gln Tyr Phe Glu Trp Asp
35 40 45
Leu Pro Asn Asp Gly Thr Leu Trp Thr Lys Val Lys Asn Glu Ala Ser
50 55 60
Ser Leu Ser Ser Leu Gly Ile Thr Ala Leu Trp Leu Pro Pro Ala Tyr
65 70 75 80
Lys Gly Thr Ser Gln Gly Asp Val Gly Tyr Gly Val Tyr Asp Leu Tyr
85 90 95
Asp Leu Gly Glu Phe Asn Gln Lys Gly Thr Ile Arg Thr Lys Tyr Gly
100 105 110
Thr Lys Thr Gln Tyr Leu Gln Ala Ile Gln Ala Ala Lys Ser Ala Gly
115 120 125
Met Gln Val Tyr Ala Asp Val Val Phe Asn His Lys Ala Gly Ala Asp
130 135 140
Ser Thr Glu Trp Val Asp Ala Val Glu Val Asn Pro Ser Asn Arg Asn
145 150 155 160
Gln Glu Thr Ser Gly Thr Tyr Gln Ile Gln Ala Trp Thr Lys Phe Asp
165 170 175
Phe Pro Gly Arg Gly Asn Thr Tyr Ser Ser Phe Lys Trp Arg Trp Tyr
180 185 190
His Phe Asp Gly Thr Asp Trp Asp Glu Ser Arg Lys Leu Asn Arg Ile
195 200 205
Tyr Lys Phe Arg Gly Thr Gly Lys Ala Trp Asp Trp Glu Val Asp Thr
210 215 220
Glu Asn Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Met Phe Ala Asp Leu Asp Met Asp
225 230 235 240
His Pro Glu Val Val Thr Glu Leu Lys Asn Trp Gly Thr Trp Tyr Val
245 250 255
Asn Thr Thr Asn Val Asp Gly Phe Arg Leu Asp Ala Val Lys His Ile
260 265 270
Lys Tyr Ser Phe Phe Pro Asp Trp Leu Thr His Val Arg Ser Gln Thr
275 280 285
Arg Lys Asn Leu Phe Ala Val Gly Glu Phe Trp Ser Tyr Asp Val Asn
290 295 300
Lys Leu His Asn Tyr Ile Thr Lys Thr Ser Gly Thr Met Ser Leu Phe
305 310 315 320
Asp Ala Pro Leu His Asn Asn Phe Tyr Thr Ala Ser Lys Ser Ser Gly
325 330 335
Tyr Phe Asp Met Arg Tyr Leu Leu Asn Asn Thr Leu Met Lys Asp Gln
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Pro Ser Leu Ala Val Thr Leu Val Asp Asn His Asp Thr Gln Pro Gly
355 360 365
Gln Ser Leu Gln Ser Trp Val Glu Pro Trp Phe Lys Pro Leu Ala Tyr
370 375 380
Ala Phe Ile Leu Thr Arg Gln Glu Gly Tyr Pro Cys Val Phe Tyr Gly
385 390 395 400
Asp Tyr Tyr Gly Ile Pro Lys Tyr Asn Ile Pro Gly Leu Lys Ser Lys
405 410 415
Ile Asp Pro Leu Leu Ile Ala Arg Arg Asp Tyr Ala Tyr Gly Thr Gln
420 425 430
Arg Asp Tyr Ile Asp His Gln Asp Ile Ile Gly Trp Thr Arg Glu Gly
435 440 445
Ile Asp Ser Lys Pro Asn Ser Gly Leu Ala Ala Leu Ile Thr Asp Gly
450 455 460
Pro Gly Gly Ser Lys Trp Met Tyr Val Gly Lys Lys His Ala Gly Lys
465 470 475 480
Val Phe Tyr Asp Leu Thr Gly Asn Arg Ser Asp Thr Val Thr Ile Asn
485 490 495
Ala Asp Gly Trp Gly Glu Phe Lys Val Asn Gly Gly Ser Val Ser Ile
500 505 510
Trp Val Ala Lys Thr Ser Gln Val Thr Phe Thr Val Asn Asn Ala Thr
515 520 525
Thr Ile Ser Gly Gln Asn Val Tyr Val Val Gly Asn Ile Pro Glu Leu
530 535 540
Gly Asn Trp Asn Thr Ala Asn Ala Ile Lys Met Thr Pro Ser Ser Tyr
545 550 555 560
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565 570 575
Phe Lys Phe Ile Lys Lys Asp Gln Ser Gly Asn Val Val Trp Glu Ser
580 585 590
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595 600 605
Thr Ala Ser Trp Asn Val Pro
610 615
<210>129
<211>1854
<212>DNA
<213>环境的
<400>129
atgcgttgcc gccgtggcag ggacgggtgt tggtgcgggc ggcgtaatgc gctgccgcga 60
cacccgcgtg aacaaaataa tatgaattat ttgaatagga tgggggtgtc aagaatgaca 120
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accgggacca gtgattcgtg gtggacgcat ttggccaagc aagccaacgg tctaaaacgg 300
gcggggttca ccgccgtatg gattcctccg gtgcttaaag gggcttcagg gggctattcc 360
aacgggtacg atccctttga cgactatgat atcggaagca aggaccagaa aggtaccgtg 420
gcgacgcgat gggggacgcg agaagaactg caacgtgccg tggccgtgat gcgcgcgaac 480
ggtctggatg tgtatgtgga tctggtgctg aaccaccgca acggggacga cgggaattgg 540
aattttcatt acaaagatgc gtacggcaaa gtgggttacg ggcggtttca aaaggggttt 600
tacgattttc accccaacta caacattcag gatgccaatg ttcccaacga ggattccagc 660
ttcgggcgcg atttagccca tgacaatccg tatgtggccg atggactgaa ggctgcaggc 720
gattggctga ccaaagccct cgatgttcag ggatatcgtc tggattacgt gaaaggcatc 780
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ggtgagtact gggatgccaa ccgggatacg ttgaactggt gggcgaacac ggcgatggaa 900
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gattactacc aatacggaat gaagccgatc atcgacaacc tcatttggat ccacgaacac 1200
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aagccggcct actggttaaa ggtaacgtat acggcgccgc aattgcttca gtaa 1854
<210>130
<211>617
<212>PRT
<213>环境的
<400>130
Met Arg Cys Arg Arg Gly Arg Asp Gly Cys Trp Cys Gly Arg Arg Asn
1 5 10 15
Ala Leu Pro Arg His Pro Arg Glu Gln Asn Asn Met Asn Tyr Leu Asn
20 25 30
Arg Met Gly Val Ser Arg Met Thr Lys Ser Arg Glu Leu Arg Cys Ser
35 40 45
Trp Lys Val Phe Val Val Gly Cys Leu Leu Trp Met Ala Trp Gly Ser
50 55 60
Ser Ala Ser Ala Gly Val Leu Met Gln Gly Phe Tyr Trp Asp Ala Ser
65 70 75 80
Thr Gly Thr Ser Asp Ser Trp Trp Thr His Leu Ala Lys Gln Ala Asn
85 90 95
Gly Leu Lys Arg Ala Gly Phe Thr Ala Val Trp Ile Pro Pro Val Leu
100 105 110
Lys Gly Ala Ser Gly Gly Tyr Ser Asn Gly Tyr Asp Pro Phe Asp Asp
115 120 125
Tyr Asp Ile Gly Ser Lys Asp Gln Lys Gly Thr Val Ala Thr Arg Trp
130 135 140
Gly Thr Arg Glu Glu Leu Gln Arg Ala Val Ala Val Met Arg Ala Asn
145 150 155 160
Gly Leu Asp Val Tyr Val Asp Leu Val Leu Asn His Arg Asn Gly Asp
165 170 175
Asp Gly Asn Trp Asn Phe His Tyr Lys Asp Ala Tyr Gly Lys Val Gly
180 185 190
Tyr Gly Arg Phe Gln Lys Gly Phe Tyr Asp Phe His Pro Asn Tyr Asn
195 200 205
Ile Gln Asp Ala Asn Val Pro Asn Glu Asp Ser Ser Phe Gly Arg Asp
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Leu Ala His Asp Asn Pro Tyr Val Ala Asp Gly Leu Lys Ala Ala Gly
225 230 235 240
Asp Trp Leu Thr Lys Ala Leu Asp Val Gln Gly Tyr Arg Leu Asp Tyr
245 250 255
Val Lys Gly Ile Ser Tyr Thr Phe Leu Lys Ser Tyr Leu Ser Tyr Gly
260 265 270
Ala Met Asn Gly Lys Phe Ala Val Gly Glu Tyr Trp Asp Ala Asn Arg
275 280 285
Asp Thr Leu Asn Trp Trp Ala Asn Thr Ala Met Glu Gly Arg Ala Hps
290 295 300
Val Phe Asp Phe Ala Leu Arg Glu Glu Leu Lys Asn Met Cys Asn Ala
305 310 315 320
Asp Gly Tyr Tyr Asp Met Arg Arg Leu Asp His Ala Gly Leu Val Gly
325 330 335
Ile Asp Pro Trp Lys Ala Val Thr Phe Val Glu Asn His Asp Thr Asp
340 345 350
Arg His Asp Pro Ile Tyr Asn Asn Lys His Leu Ala Tyr Ala Tyr Ile
355 360 365
Leu Thr Ser Glu Gly Tyr Pro Thr Val Phe Trp Lys Asp Tyr Tyr Gln
370 375 380
Tyr Gly Met Lys Pro Ile Ile Asp Asn Leu Ile Trp Ile His Glu His
385 390 395 400
Ile Ala Tyr Gly Thr Thr Gln Glu Arg Trp Lys Asp Glu Asp Val Phe
405 410 415
Val Tyr Glu Arg Thr Gly Gly Lys Arg Leu Leu Val Gly Leu Asn Asp
420 425 430
Asn Arg Ala Thr Ser Lys Thr Val Thr Val Gln Thr Gly Phe Gly Ala
435 440 445
Asn Val Ala Leu His Asp Tyr Thr Gly Asn Gly Pro Asp Leu Arg Thr
450 455 460
Asp Ala Tyr Gly Arg Val Thr Leu Thr Ile Pro Ala Asn Gly Tyr Val
465 470 475 480
Ala Tyr Ser Val Pro Gly Ile Ser Gly Ser Phe Val Pro Val Glu Lys
485 490 495
Thr Val Thr Gln Glu Phe Ala Gly Ala Ser AspLeu Asp Ile Arg Pro
500 505 510
Ala Asp Asn Thr Gln Phe Val Gln Val Gly Arg Ile Tyr Ala Lys Ala
515 520 525
Asn Lys Pro Val Thr Ala Glu Leu Tyr Trp Asp Ala Lys Asp Trp Thr
530 535 540
Thr Ser Thr Ser Ile Leu Leu Glu Val Arg Ser Ala Ser Gly Thr Leu
545 550 555 560
Ile Thr Thr Lys Thr Val Thr Gln Leu Ser Ser Gln Gly Thr Arg Val
565 570 575
Ser Phe Thr Pro Ser Ala Thr Gly Trp Tyr Val Phe Ser Ile Arg Ser
580 585 590
Tyr Asn Thr Pro Ser Thr Asn Pro Lys Pro Ala Tyr Trp Leu Lys Val
595 600 605
Thr Tyr Thr Ala Pro Gln Leu Leu Gln
610 615
<210>131
<211>1881
<212>DNA
<213>环境的
<400>131
atgccgcagc tttacccatt gccgccgcgc tggcggcgcg cggcccggca gggcctggcc 60
gccttgacgc tggccaccac ggccctgggc atctcgacgg cccaggccca gagtgcaccg 120
cgcacggcct tcgtgcatct gttcgaatgg aagtggaccg acatcgcgcg cgagtgcgag 180
accttcctcg ggcccaaggg cttcgcggcg gtgcaggtgt cgcccccgaa cgagcacaac 240
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tacagcctgg accgcagccg cagcggcacg cgcgccgagt tccaggacat ggtcaaccga 360
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acgggcggca cctcgagcgc tgggcgcagc tggagctatc acaactaccc tgggctctat 480
ggccccaacg acttccacca gccggtgtgc agcatcacca actacgggga tgcgaacaat 540
gtgcagcgtt gcgagctctc gggcttgcag gacctggaca ctgggagcgc ttatgtgcgc 600
ggcaagatcg ccgactatct ggtggatctg gtcaacatgg gggtcaaggg cttccgggtg 660
gatgcggcca agcacatcag cccgaccgac ctgggcgcca tcatcgatgc ggtcaacagc 720
cgcaccggcg cgaaccgccc tttctggttt ctggaggtga ttggcgcggc cggcgaggca 780
gtgcagccga accagtactt ctcgctcggc ggcggccagg tcaccgtgac cgagttcaac 840
tatgggaagc aaatcttcgg caagttcgcc ggtggcggcc gtctggccga gctgcgcagc 900
ttcggtgaaa cctggggcct gatgcccagc agcaaagcga ttgctttcat cgacaaccac 960
gacaagcagc gcggtcatgg cggcggtggc aactatctga cctaccacca tggctcgacc 1020
tacgatctgg ccaacatctt catgctggct tggccttatg gctacccggc gctgatgtcc 1080
agctatgcct tcaaccgcag cacggcctac gacacgagct ttggcccgcc acacgacagt 1140
ggtggcgcca cccgtggccc ctgggatggt ggcggcagcc agccggcctg cttcaaccag 1200
agcatcggtg gctgggtgtg tgagcaccgc tggcggggca tcgccaatat ggtggccttc 1260
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acgcgcaact tcaagaccag cctgccagcc ggccagtact gcgatgtcat ctccggggac 1440
ttcaacaatg gtcagtgcac gggccatgtg gtgacggtcg atgccggcgg ctacgtgacg 1500
ctgacggccg ggcccaatgg tgcggcggcc atccacgtgg gcgcccgtct ggacggcgcc 1560
tctcagccgc cgacgaccgc ctcggtgacg ttcaacgcgt cggccgatac cttttgggga 1620
cagaacctgt tcgtcgtggg caaccacagc gcactgggca actggtcgcc ggcggccgcc 1680
aggccgatga cttggatttc cggttcgggc acgcgcggga actggcgcgc ggtgctcaat 1740
ttgccggcca ataccaccta ccaatacaag ttcatcaaga aggacggggc tggaaacgtg 1800
gtttgggagg gcggtggcaa tcgcgtcgtg accacgccgt ctgggggcgg atcggtgagc 1860
acgggcggca attggcagta g 1881
<210>132
<211>626
<212>PRT
<213>环境的
<400>132
Met Pro Gln Leu Tyr Pro Leu Pro Pro Arg Trp Arg Arg Ala Ala Arg
1 5 10 15
Gln Gly Leu Ala Ala Leu Thr Leu Ala Thr Thr Ala Leu Gly Ile Ser
20 25 30
Thr Ala Gln Ala Gln Ser Ala Pro Arg Thr Ala Phe Val His Leu Phe
35 40 45
Glu Trp Lys Trp Thr Asp Ile Ala Arg Glu Cys Glu Thr Phe Leu Gly
50 55 60
Pro Lys Gly Phe Ala Ala Val Gln Val Ser Pro Pro Asn Glu His Asn
65 70 75 80
Trp Val Thr Ser Gly Asp Gly Ala Pro Tyr Pro Trp Trp Met Arg Tyr
85 90 95
Gln Pro Val Ser Tyr Ser Leu Asp Arg Ser Arg Ser Gly Thr Arg Ala
100 105 110
Glu Phe Gln Asp Met Val Asn Arg Cys Asn Ala Val Gly Val Gly Ile
115 120 125
Tyr Val Asp Ala Val Ile Asn His Met Ser Gly Gly Thr Gly Gly Thr
130 135 140
Ser Ser Ala Gly Arg Ser Trp Ser Tyr His Asn Tyr Pro Gly Leu Tyr
145 150 155 160
Gly Pro Asn Asp Phe His Gln Pro Val Cys Ser Ile Thr Asn Tyr Gly
165 170 175
Asp Ala Asn Asn Val Gln Arg Cys Glu Leu Ser Gly Leu Gln Asp Leu
180 185 190
Asp Thr Gly Ser Ala Tyr Val Arg Gly Lys Ile Ala Asp Tyr Leu Val
195 200 205
Asp Leu Val Asn Met Gly Val Lys Gly Phe Arg Val Asp Ala Ala Lys
210 215 220
His Ile Ser Pro Thr Asp Leu Gly Ala Ile Ile Asp Ala Val Asn Ser
225 230 235 240
Arg Thr Gly Ala Asn Arg Pro Phe Trp Phe Leu Glu Val Ile Gly Ala
245 250 255
Ala Gly Glu Ala Val Gln Pro Asn Gln Tyr Phe Ser Leu Gly Gly Gly
260 265 270
Gln Val Thr Val Thr Glu Phe Asn Tyr Gly Lys Gln Ile Phe Gly Lys
275 280 285
Phe Ala Gly Gly Gly Arg Leu Ala Glu Leu Arg Ser Phe Gly Glu Thr
290 295 300
Trp Gly Leu Met Pro Ser Ser Lys Ala Ile Ala Phe Ile Asp Asn His
305 310 315 320
Asp Lys Gln Arg Gly His Gly Gly Gly Gly Asn Tyr Leu Thr Tyr His
325 330 335
His Gly Ser Thr Tyr Asp Leu Ala Asn Ile Phe Met Leu Ala Trp Pro
340 345 350
Tyr Gly Tyr Pro Ala Leu Met Ser Ser Tyr Ala Phe Asn Arg Ser Thr
355 360 365
Ala Tyr Asp Thr Ser Phe Gly Pro Pro His Asp Ser Gly Gly Ala Thr
370 375 380
Arg Gly Pro Trp Asp Gly Gly Gly Ser Gln Pro Ala Cys Phe Asn Gln
385 390 395 400
Ser Ile Gly Gly Trp Val Cys Glu His Arg Trp Arg Gly Ile Ala Asn
405 410 415
Met Val Ala Phe Arg Asn Ala Thr Leu Pro Asn Trp Thr Val Thr Asp
420 425 430
Trp Trp Asp Asn Gly Asn Asn Gln Ile Ala Phe Gly Arg Gly Asp Lys
435 440 445
Gly Phe Val Val Ile Asn Arg Glu Asp Ala Ala Leu Thr Arg Asn Phe
450 455 460
Lys Thr Ser Leu Pro Ala Gly Gln Tyr Cys Asp Val Ile Ser Gly Asp
465 470 475 480
Phe Asn Asn Gly Gln Cys Thr Gly His Val Val Thr Val Asp Ala Gly
485 490 495
Gly Tyr Val Thr Leu Thr Ala Gly Pro Asn Gly Ala Ala Ala Ile His
500 505 510
Val Gly Ala Arg Leu Asp Gly Ala Ser Gln Pro Pro Thr Thr Ala Ser
515 520 525
Val Thr Phe Asn Ala Ser Ala Asp Thr Phe Trp Gly Gln Asn Leu Phe
530 535 540
Val Val Gly Asn His Ser Ala Leu Gly Asn Trp Ser Pro Ala Ala Ala
545 550 555 560
Arg Pro Met Thr Trp Ile Ser Gly Ser Gly Thr Arg Gly Asn Trp Arg
565 570 575
Ala Val Leu Asn Leu Pro Ala Asn Thr Thr Tyr Gln Tyr Lys Phe Ile
580 585 590
Lys Lys Asp Gly Ala Gly Asn Val Val Trp Glu Gly Gly Gly Asn Arg
595 600 605
Val Val Thr Thr Pro Ser Gly Gly Gly Ser Val Ser Thr Gly Gly Asn
610 615 620
Trp Gln
625
<210>133
<211>1638
<212>DNA
<213>环境的
<400>133
atgaataatg tgaaaaaagt atggttgtat tattctataa ttgctacctt agttatttcc 60
tttttcacac ctttttcaac agcacaagct aatactgcac ctgtcaacgg aacaatgatg 120
caatatttcg aatgggattt accgaatgat gggacgcttt ggacgaaagt aaaaaatgaa 180
gctaccaatc tttcttcgct aggtattaca gcgttatggc tccctccagc atataaagga 240
acgagccaaa gcgatgtcgg atatggcgtg tacgatttat atgaccttgg ggaatttaat 300
caaaaaggga cgatccgaac gaaatacgga acaaaagcac aatatattca agccatccaa 360
gctgccaaag ccgcagggat gcaagtatat gcagatgttg tatttaatca taaggcgggg 420
gctgacggca cagaatttgt cgatgcagtt gaggtaaacc cttctaatcg aaatcaagaa 480
acatctggca catatcaaat tcaagcatgg acaaaatttg attttcctgg tcgtggaaac 540
acatactcca gcttcaaatg gcgctggtat cattttgacg gtaccgattg ggatgaaagt 600
cgtaaattaa atcgtattta caaattccgc ggtacaggaa aagcgtggga ctgggaagtc 660
gatacagaaa acggaaacta tgattattta atgttcgctg atttagatat ggatcaccct 720
gaagttgtga cagagttaaa aaactgggga aaatggtatg taaatacgac aaatgtagac 780
ggatttcgtt tggatgccgt aaaacatatt aaatacagct ttttccctga ctggctaaca 840
tatgtacgta atcaaacagg aaaaaattta tttgctgttg gggaattttg gagctatgac 900
gtcaataagc tgcataacta cattacaaaa acaaatggat cgatgtcgtt atttgatgca 960
cctttgcata acaactttta tatcgcttcc aaatcgagtg gatattttga catgcgttat 1020
ttattgaata atacattaat gaaagatcaa ccttcactcg ctgtaacact tgtcgataac 1080
catgatacac aaccaggtca atctttacaa tcatgggtag aagcttggtt taaaccgctt 1140
gcttacgcct ttattttaac aagacaagag gggtatcctt gcgtatttta cggtgactat 1200
tacggaatcc cgaaatacaa tattccggga ttaaaaagta aaattgatcc gcttttaatt 1260
gctcgtcgtg attatgctta tggaacacaa cgtgattaca ttgatcatca agacattatc 1320
ggatggacac gagaaggcat tgatgcaaaa ccgaactctg gacttgcggc tttaattacc 1380
gacggccctg gcggaagtaa atggatgtat gtcggtaaaa aacatgctgg gaaagtgttt 1440
tatgatttaa ctggaaatcg aagtgacaca gtaacgatta atgcggacgg ttggggagaa 1500
tttaaagtaa acggcggctc cgtttcgatt tgggtggcta aaacatcaaa cgtcacattt 1560
acagtcaata acgccacaac aacaagtgga caaaacgtat atgttgttgg caacattcca 1620
gagctaggca attctttg 1638
<210>134
<211>546
<212>PRT
<213>环境的
<400>134
Met Asn Asn Val Lys Lys Val Trp Leu Tyr Tyr Ser Ile Ile Ala Thr
1 5 10 15
Leu Val Ile Ser Phe Phe Thr Pro Phe Ser Thr Ala Gln Ala Asn Thr
20 25 30
Ala Pro Val Asn Gly Thr Met Met Gln Tyr Phe Glu Trp Asp Leu Pro
35 40 45
Asn Asp Gly Thr Leu Trp Thr Lys Val Lys Asn Glu Ala Thr Asn Leu
50 55 60
Ser Ser Leu Gly Ile Thr Ala Leu Trp Leu Pro Pro Ala Tyr Lys Gly
65 70 75 80
Thr Ser Gln Ser Asp Val Gly Tyr Gly Val Tyr Asp Leu Tyr Asp Leu
85 90 95
Gly Glu Phe Asn Gln Lys Gly Thr Ile Arg Thr Lys Tyr Gly Thr Lys
100 105 110
Ala Gln Tyr Ile Gln Ala Ile Gln Ala Ala Lys Ala Ala Gly Met Gln
115 120 125
Val Tyr Ala Asp Val Val Phe Asn His Lys Ala Gly Ala Asp Gly Thr
130 135 140
Glu Phe Val Asp Ala Val Glu Val Asn Pro Ser Asn Arg Asn Gln Glu
145 150 155 160
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165 170 175
Gly Arg Gly Asn Thr Tyr Ser Ser Phe Lys Trp Arg Trp Tyr His Phe
180 185 190
Asp Gly Thr Asp Trp Asp Glu Ser Arg Lys Leu Asn Arg Ile Tyr Lys
195 200 205
Phe Arg Gly Thr Gly Lys Ala Trp Asp Trp Glu Val Asp Thr Glu Asn
210 215 220
Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Met Phe Ala Asp Leu Asp Met Asp His Pro
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Glu Val Val Thr Glu Leu Lys Asn Trp Gly Lys Trp Tyr Val Asn Thr
245 250 255
Thr Asn Val Asp Gly Phe Arg Leu Asp Ala Val Lys His Ile Lys Tyr
260 265 270
Ser Phe Phe Pro Asp Trp Leu Thr Tyr Val Arg Asn Gln Thr Gly Lys
275 280 285
Asn Leu Phe Ala Val Gly Glu Phe Trp Ser Tyr Asp Val Asn Lys Leu
290 295 300
His Asn Tyr Ile Thr Lys Thr Asn Gly Ser Met Ser Leu Phe Asp Ala
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Pro Leu His Asn Asn Phe Tyr Ile Ala Ser Lys Ser Ser Gly Tyr Phe
325 330 335
Asp Met Arg Tyr Leu Leu Asn Asn Thr Leu Met Lys Asp Gln Pro Ser
340 345 350
Leu Ala Val Thr Leu Val Asp Asn His Asp Thr Gln Pro Gly Gln Ser
355 360 365
Leu Gln Ser Trp Val Glu Ala Trp Phe Lys Pro Leu Ala Tyr Ala Phe
370 375 380
Ile Leu Thr Arg Gln Glu Gly Tyr Pro Cys Val Phe Tyr Gly Asp Tyr
385 390 395 400
Tyr Gly Ile Pro Lys Tyr Asn Ile Pro Gly Leu Lys Ser Lys Ile Asp
405 410 415
Pro Leu Leu Ile Ala Arg Arg Asp Tyr Ala Tyr Gly Thr Gln Arg Asp
420 425 430
Tyr Ile Asp His Gln Asp Ile Ile Gly Trp Thr Arg Glu Gly Ile Asp
435 440 445
Ala Lys Pro Asn Ser Gly Leu Ala Ala Leu Ile Thr Asp Gly Pro Gly
450 455 460
Gly Ser Lys Trp Met Tyr Val Gly Lys Lys His Ala Gly Lys Val Phe
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485 490 495
Gly Trp Gly Glu Phe Lys Val Asn Gly Gly Ser Val Ser Ile Trp Val
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Ala Lys Thr Ser Asn Val Thr Phe Thr Val Asn Asn Ala Thr Thr Thr
515 520 525
Ser Gly Gln Asn Val Tyr Val Val Gly Asn Ile Pro Glu Leu Gly Asn
530 535 540
Ser Leu
545
<210>135
<211>1935
<212>DNA
<213>环境的
<400>135
gtgacaggca ccccgtcttt atacattcct ccacataaaa taaccataca gctttcaaat 60
ttgttgaaat gtataaaaat aaaaaatagt attgtaagcg ttaacatccg tcattataat 120
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ggatgtgtgt gcatgaatta tttgaaaaaa gtgtggttgt attacgctat cgtcgctacc 240
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gacatgcgct atttgttaaa taatacgttg atgaaagacc agccttctct tgcggtcaca 1260
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cgccatggcc cttga 1935
<210>136
<211>644
<212>PRT
<213>环境的
<400>136
Val Thr Gly Thr Pro Ser Leu Tyr Ile Pro Pro His Lys Ile Thr Ile
1 5 10 15
Gln Leu Ser Asn Leu Leu Lys Cys Ile Lys Ile Lys Asn Ser Ile Val
20 25 30
Ser Val Asn Ile Arg His Tyr Asn Asn Phe Lys Arg Val Tyr Val Leu
35 40 45
Met Gln Thr Phe Ala Ser Ser Phe Tyr Leu Lys Lys Gly Cys Val Cys
50 55 60
Met Asn Tyr Leu Lys Lys Val Trp Leu Tyr Tyr Ala Ile Val Ala Thr
65 70 75 80
Leu Ile Ile Ser Phe Leu Thr Pro Phe Ser Thr Ala Gln Ala Asn Thr
85 90 95
Ala Pro Val Asn Gly Thr Met Met Gln Tyr Phe Glu Trp Asp Leu Pro
100 105 110
Asn Asp Gly Thr Leu Trp Thr Lys Val Lys Asn Glu Ala Ser Ser Leu
115 120 125
Ser Ser Leu Gly Ile Thr Ala Leu Trp Leu Pro Pro Ala Tyr Lys Gly
130 135 140
Thr Ser Gln Gly Asp Val Gly Tyr Gly Val Tyr Asp Leu Tyr Asp Leu
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Gly Glu Phe Asn Gln Lys Gly Thr Ile Arg Thr Lys Tyr Gly Thr Lys
165 170 175
Thr Gln Tyr Leu Gln Ala Ile Gln Ala Ala Lys Ser Ala Gly Met Gln
180 185 190
Val Tyr Ala Asp Val Val Phe Asn His Lys Ala Gly Ala Asp Ser Thr
195 200 205
Glu Trp Val Asp Ala Val Glu Val Asn Pro Ser Asn Arg Asn Gln Glu
210 215 220
Thr Ser Gly Thr Tyr Gln Ile Gln Ala Trp Thr Lys Phe Asp Phe Pro
225 230 235 240
Asp Arg Gly Asn Thr Tyr Ser Ser Phe Lys Trp Arg Trp Tyr His Phe
245 250 255
Asp Gly Thr Asp Trp Asp Glu Ser Arg Lys Leu Asn Arg Ile Tyr Lys
260 265 270
Phe Arg Gly Thr Gly Lys Ala Trp Asp Trp Glu Val Asp Thr Glu Asn
275 280 285
Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Met Phe Ala Asp Leu Asp Met Asp His Pro
290 295 300
Glu Val Val Thr Glu Leu Lys Asn Trp Gly Thr Trp Tyr Val Asn Thr
305 310 315 320
Thr Asn Val Asp Gly Phe Arg Leu Asp Ala Val Lys His Ile Lys Tyr
325 330 335
Ser Phe Phe Pro Asp Trp Leu Thr Tyr Val Arg Ser Gln Thr Gln Lys
340 345 350
Asn Leu Phe Ala Val Gly Glu Phe Trp Ser Tyr Asp Val Asn Lys Leu
355 360 365
His Asn Tyr Ile Thr Lys Thr Ser Gly Thr Met Ser Leu Phe Asp Ala
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385 390 395 400
Asp Met Arg Tyr Leu Leu Asn Asn Thr Leu Met Lys Asp Gln Pro Ser
405 410 415
Leu Ala Val Thr Leu Val Asp Asn His Asp Thr Gln Pro Gly Gln Ser
420 425 430
Leu Gln Ser Trp Val Glu Pro Trp Phe Lys Pro Leu Ala Tyr Ala Phe
435 440 445
Ile Leu Thr Arg Gln Glu Gly Tyr Pro Cys Val Phe Tyr Gly Asp Tyr
450 455 460
Tyr Gly Ile Pro Lys Tyr Asn Ile Pro Gly Leu Lys Ser Lys Ile Asp
465 470 475 480
Pro Leu Leu Ile Ala Arg Arg Asp Tyr Ala Tyr Gly Thr Gln Arg Asp
485 490 495
Tyr Ile Asp His Gln Asp Ile Ile Gly Trp Thr Arg Glu Gly Ile Asp
500 505 510
Ser Lys Pro Asn Ser Gly Leu Ala Ala Leu Ile Thr Asp Gly Pro Gly
515 520 525
Gly Ser Lys Trp Met Tyr Val Gly Lys Lys His Ala Gly Lys Val Phe
530 535 540
Tyr Asp Leu Thr Gly Asn Arg Ser Asp Thr Val Thr Ile Asn Ala Asp
545 550 555 560
Gly Trp Gly Glu Phe Lys Val Asn Gly Gly Ser Val Ser Ile Trp Val
565 570 575
Ala Lys Thr Ser Gln Val Thr Phe Thr Val Asn Asn Ala Thr Thr Thr
580 585 590
Ser Gly Gln Asn Val Tyr Val Val Gly Asn Ile Pro Glu Leu Gly Asn
595 600 605
Trp Asn Thr Ala Asn Ala Ile Lys Met Thr Pro Ser Ser Tyr Pro Thr
610 615 620
Trp Lys Thr Thr Ile Ala Leu Pro Gln Gly Lys Ala Ile Gly Gly Val
625 630 635 640
Arg His Gly Pro
<210>137
<211>1320
<212>DNA
<213>环境的
<400>137
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ctcgccctgg aacagctcca ccacggtccg gcaggcgcgc cgggcgaaca gggcgccggc 780
ttcctcctcg taccagatcg tgcggacgcc gtcgaaatcg acctggggga agcggctccg 840
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cacgtacaga cggtcgggtc cgtaggcgcc gcggatgatc cgcgtctcgc caccggagct 1080
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accggagtat cctggaaaat tcgaagaagg agatcgacat gcaatcgaac ggaaacgtga 1320
<210>138
<211>439
<212>PRT
<213>环境的
<400>138
Val Gly Arg Ala Gly Leu Ala His His Ser Asn Thr Ser Ala Lys Gly
1 5 10 15
Thr Tyr Gly Ser Pro Leu Glu Leu Arg Pro Asp Arg Pro Ala Val Ala
20 25 30
Gly Ala Val Glu Leu Glu Asp Val Gln Arg Gly Ala Ala Ala Glu Asp
35 40 45
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50 55 60
Ala Gly Ala Ala Ser Gln Glu Pro Asp Val Gly Gly Pro Arg Met Ala
65 70 75 80
Val Glu Glu Glu Val Ala Val Gly Ala Val Leu Val Leu Ala Asp Ala
85 90 95
Gly Leu Asp Gln Arg Arg Val Leu Gln Gly Arg Glu Pro Ala Gly His
100 105 110
Leu Gly Pro Gly Arg Phe Gln Gln Gly Arg Gly Asp Arg Pro Leu Ala
115 120 125
Arg Arg Gly Ile Asp Gly Leu Ala Pro Gly Val Val Arg His Leu Glu
130 135 140
Ala Ala Val Leu Val Ala Gly Asp Ala Val Val Asp Pro Leu Ala Glu
145 150 155 160
Ile Asp Pro Asp Arg Thr Ala Ala Leu Leu Glu Ala Arg Val Ala Arg
165 170 175
Arg Arg Ala Glu Glu Glu His Leu Leu Ala Gly Val Ala Glu Glu Pro
180 185 190
Leu Thr Asp His Val Arg Glu Gln Pro Gly Gln Pro Gly Thr Ala Gly
195 200 205
Glu Asp Val Glu Val Gly Arg Glu Ser Gly Ala Val Arg Lys Val Lys
210 215 220
Pro Leu Gln Gly Pro Arg Asp His Gly Gly Leu Pro Val Leu Pro Ala
225 230 235 240
Leu Ala Leu Glu Gln Leu His His Gly Pro Ala Gly Ala Pro Gly Glu
245 250 255
Gln Gly Ala Gly Phe Leu Leu Val Pro Asp Arg Ala Asp Ala Val Glu
260 265 270
Ile Asp Leu Gly Glu Ala Ala Pro Gly Leu Pro Leu Arg Gln Leu Gly
275 280 285
Asp Arg Gln Pro Arg Val Leu Gln Lys Arg Lys Gly Val Ala Asp Val
290 295 300
Ala Val Val Leu Ala Ala His Pro Glu Asp Pro Gly Pro Phe Val Gln
305 310 315 320
Pro Val Thr Gly Leu Asp Phe Gly Val Pro Pro Glu Leu Glu Gly Ala
325 330 335
Gly Asp Pro Leu His Val Gln Thr Val Gly Ser Val Gly Ala Ala Asp
340 345 350
Asp Pro Arg Leu Ala Thr Gly Ala Gly Ala Gly Val Pro Arg Thr Pro
355 360 365
Gly Val Gln Glu Gly His Pro Gly Ser Ala Ala Glu Glu Met Gln Gly
370 375 380
Gly Pro Ala Ala Glu Gly Ala Gly Ala Asp Asp Gly Asp Met Gly Met
385 390 395 400
Gly Gly His Gly Gly Arg Lys Val Ile Ala Ala Arg Ser Phe Ala Gly
405 410 415
Ile Pro Ser Pro Thr Gly Val Ser Trp Lys Ile Arg Arg Arg Arg Ser
420 425 430
Thr Cys Asn Arg Thr Glu Thr
435
<210>139
<211>1524
<212>DNA
<213>环境的
<400>139
atgaaaacat tcaaccttaa acccacactt ttacctttaa ctttgctgct gagttcgccg 60
gtattggcgg cacaaaatgg aactatgatg cagtatttcc attggtatgt gccaaatgac 120
ggcgcactct ggacacaagt tgaaaacaat gcgccagcac tatccgacaa cggttttaca 180
gcgctgtggt tgccaccagc atataaaggc gcaggtggta gcaacgacgt tggttacggt 240
gtttacgata tgtatgactt aggggagttt gatcaaaaag gatcggtacg aactaagtac 300
ggcaccaaag accaatatct aaatgccatc aaagcagcac acaaaaacaa tatccaaatt 360
tatggtgacg tagtgttcaa ccatcgtggc ggtgcagatg gcaagtcgtg ggtcgatacc 420
aagcgtgtgg attggaataa ccgcaatatt gaacttggcg ataaatggat tgaagcatgg 480
gttgaattta gcttcccagg acgtaacgat aaatactcag acttccattg gacgtggtat 540
cactttgatg gcgtcgattg ggatgacgca ggtaaagaga aagcgatctt taaattcaaa 600
ggtgatggta aagcatggga ttgggaagtc agttctgaaa aaggcaacta tgactacctc 660
atgtacgcag acttagacat ggatcaccca gaagtgaagc aagagctgaa agattggggt 720
gaatggtact taaacatgac gggtgttgat ggcttccgaa tggatgcagt gaaacacatc 780
aaatatcagt acctacaaga gtggatcgat tacttgcgta agaaaacggg caaagagctc 840
tttaccgttg gtgagtactg gaactacgac gtgaacaatc tgcacaactt tatgactaag 900
acttctggca gcatgtcatt gtttgatgcg cctttacata tgaacttcta taacgcttca 960
cgctctggtg gcaactttga tatgcgccga atcatggatg gcaccttgat gaaagacaac 1020
ccagtgaaag cagtaacact ggttgagaac catgatacgc aaccactaca ggccttagag 1080
tctccggtgg attggtggtt caaaccactt gcgtacgcgt tcattttgct tcgtgaggaa 1140
ggttatccgt cagtcttcta cgcagattac tacggtgcgc aatacagcga taaagggcac 1200
gatatcaaca tggtgaaagt gccttacatt gagcaattgg tgaaagcgcg taaagattat 1260
gcttatggta aacaacattc ttaccttgac cactgggatg tgattggttg gacacgagaa 1320
ggggatgcgg aacatccgaa ctctatggcg gttatcatga gtgatggtcc tggcggaaca 1380
aagtggatgt acacaggttc accgagcaca cgttatgtcg ataaactagg tattcgtacc 1440
gaagaagtat ggactaacgc tagtggatgg gccgaattcc cagtgaacgg cggatcggtt 1500
tctgtttggg ttggcgttaa ataa 1524
<210>140
<211>507
<212>PRT
<213>环境的
<400>140
Met Lys Thr Phe Asn Leu Lys Pro Thr Leu Leu Pro Leu Thr Leu Leu
1 5 10 15
Leu Ser Ser Pro Val Leu Ala Ala Gln Asn Gly Thr Met Met Gln Tyr
20 25 30
Phe His Trp Tyr Val Pro Asn Asp Gly Ala Leu Trp Thr Gln Val Glu
35 40 45
Asn Asn Ala Pro Ala Leu Ser Asp Asn Gly Phe Thr Ala Leu Trp Leu
50 55 60
Pro Pro Ala Tyr Lys Gly Ala Gly Gly Ser Asn Asp Val Gly Tyr Gly
65 70 75 80
Val Tyr Asp Met Tyr Asp Leu Gly Glu Phe Asp Gln Lys Gly Ser Val
85 90 95
Arg Thr Lys Tyr Gly Thr Lys Asp Gln Tyr Leu Asn Ala Ile Lys Ala
100 105 110
Ala His Lys Asn Asn Ile Gln Ile Tyr Gly Asp Val Val Phe Asn His
115 120 125
Arg Gly Gly Ala Asp Gly Lys Ser Trp Val Asp Thr Lys Arg Val Asp
130 135 140
Trp Asn Asn Arg Asn Ile Glu Leu Gly Asp Lys Trp Ile Glu Ala Trp
145 150 155 160
Val Glu Phe Ser Phe Pro Gly Arg Asn Asp Lys Tyr Ser Asp Phe His
165 170 175
Trp Thr Trp Tyr His Phe Asp Gly Val Asp Trp Asp Asp Ala Gly Lys
180 185 190
Glu Lys Ala Ile Phe Lys Phe Lys Gly Asp Gly Lys Ala Trp Asp Trp
195 200 205
Glu Val Ser Ser Glu Lys Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Met Tyr Ala Asp
210 215 220
Leu Asp Met Asp His Pro Glu Val Lys Gln Glu Leu Lys Asp Trp Gly
225 230 235 240
Glu Trp Tyr Leu Asn Met Thr Gly Val Asp Gly Phe Arg Met Asp Ala
245 250 255
Val Lys His Ile Lys Tyr Gln Tyr Leu Gln Glu Trp Ile Asp Tyr Leu
260 265 270
Arg Lys Lys Thr Gly Lys Glu Leu Phe Thr Val Gly Glu Tyr Trp Asn
275 280 285
Tyr Asp Val Asn Asn Leu His Asn Phe Met Thr Lys Thr Ser Gly Ser
290 295 300
Met Ser Leu Phe Asp Ala Pro Leu His Met Asn Phe Tyr Asn Ala Ser
305 310 315 320
Arg Ser Gly Gly Asn Phe Asp Met Arg Arg Ile Met Asp Gly Thr Leu
325 330 335
Met Lys Asp Asn Pro Val Lys Ala Val Thr Leu Val Glu Asn His Asp
340 345 350
Thr Gln Pro Leu Gln Ala Leu Glu Ser Pro Val Asp Trp Trp Phe Lys
355 360 365
Pro Leu Ala Tyr Ala Phe Ile Leu Leu Arg Glu Glu Gly Tyr Pro Ser
370 375 380
Val Phe Tyr Ala Asp Tyr Tyr Gly Ala Gln Tyr Ser Asp Lys Gly His
385 390 395 400
Asp Ile Asn Met Val Lys Val Pro Tyr Ile Glu Gln Leu Val Lys Ala
405 410 415
Arg Lys Asp Tyr Ala Tyr Gly Lys Gln His Ser Tyr Leu Asp His Trp
420 425 430
Asp Val Ile Gly Trp Thr Arg Glu Gly Asp Ala Glu His Pro Asn Ser
435 440 445
Met Ala Val Ile Met Ser Asp Gly Pro Gly Gly Thr Lys Trp Met Tyr
450 455 460
Thr Gly Ser Pro Ser Thr Arg Tyr Val Asp Lys Leu Gly Ile Arg Thr
465 470 475 480
Glu Glu Val Trp Thr Asn Ala Ser Gly Trp Ala Glu Phe Pro Val Asn
485 490 495
Gly Gly Ser Val Ser Val Trp Val Gly Val Lys
500 505
<210>141
<211>1401
<212>DNA
<213>环境的
<400>141
atgaaaccaa taaataccct actcatatcc gcccttgctg tttgttcttt cagttccgcg 60
acttacgccg atactatttt gcacgcgttc aattggaagt attcagatgt gacggccaac 120
gcgaatcaaa ttgctcaagc tggttataag aaagtgcttg ttgcgcctgc aatgaaatcg 180
agtggcagcc aatggtgggc tcgctatcaa cctcaagatc tacgcactat cgattctcct 240
ttgggcaata aacaagattt agccgcaatg attgccgcac tcaaaggtgt gggcgtcgat 300
gtgtatgccg atgtggtact caaccatatg gcgaatgaaa gctggaagcg aagtgacttg 360
aattaccctg gcacagaagt gctaaacgat tatgctagcc gttcaagcta ctatgctgac 420
cagactctgt ttggcaacct agcacaaggt tatgtgtcag cgaacgactt tcatccagcg 480
ggctgtattt cagattggaa cgaccctggt catgttcagt attggcgttt gtgtggcgca 540
gatggtgatg taggtttacc tgaccttgat ccaaacaact gggtggtttc acaacagcgt 600
ttgtatctga aagcgctaaa agatatgggc atcaaagggt tccgaattga tgcagtgaag 660
cacatgagcc aataccaaat cgatcaggta ttcacgtctg aaattactgc gaacatgcat 720
gtgtttggtg aagtgattac tagcggtgga gcagggaata gcggctatga atcgttctta 780
gcgccttacc tgaataatac taatcactct gcctacgatt tcccgctgtt tgcatcgatt 840
cgctcggcat tttctatggg gggcggttta aatcaactgc atgatcctaa agcgtacggt 900
caggcacttg atgataatcg ctcgatcacc tttgcgatca cacatgatat tccaaccaat 960
gacggcttcc gctaccaaat tatggaccca caagacgagc agcttgctta cgcgtatatc 1020
cttggtaaag acggtggcac gccgctgatc tacagtgatg atcttcctga ttctgaagac 1080
aaggataacg gtcgttgggg caatgtttgg aacagttcga caatgaaaaa catgttgagc 1140
ttccataacg cgatgcaagg caaaacaatg acgatgattt ctagcgacca ttgcactttg 1200
ttgtttaagc gtggcaaaga aggtgttgtg ggtattaaca agtgtggtga aacgcgtggc 1260
gtgacggttg atacctacca acatgagttt aattggcatg ttcaatacaa agacgtgtta 1320
agcagcgcaa cagaaaccgt gacttctcgt taccatacgt tcaatctacc accacgcagt 1380
gcgcgtatgt ttaagctgta g 1401
<210>142
<211>466
<212>PRT
<213>环境的
<400>142
Met Lys Pro Ile Asn Thr Leu Leu Ile Ser Ala Leu Ala Val Cys Ser
1 5 10 15
Phe Ser Ser Ala Thr Tyr Ala Asp Thr Ile Leu His Ala Phe Asn Trp
20 25 30
Lys Tyr Ser Asp Val Thr Ala Asn Ala Asn Gln Ile Ala Gln Ala Gly
35 40 45
Tyr Lys Lys Val Leu Val Ala Pro Ala Met Lys Ser Ser Gly Ser Gln
50 55 60
Trp Trp Ala Arg Tyr Gln Pro Gln Asp Leu Arg Thr Ile Asp Ser Pro
65 70 75 80
Leu Gly Asn Lys Gln Asp Leu Ala Ala Met Ile Ala Ala Leu Lys Gly
85 90 95
Val Gly Val Asp Val Tyr Ala Asp Val Val Leu Asn His Met Ala Asn
100 105 110
Glu Ser Trp Lys Arg Ser Asp Leu Asn Tyr Pro Gly Thr Glu Val Leu
115 120 125
Asn Asp Tyr Ala Ser Arg Ser Ser Tyr Tyr Ala Asp Gln Thr Leu Phe
130 135 140
Gly Asn Leu Ala Gln Gly Tyr Val Ser Ala Asn Asp Phe His Pro Ala
145 150 155 160
Gly Cys Ile Ser Asp Trp Asn Asp Pro Gly His Val Gln Tyr Trp Arg
165 170 175
Leu Cys Gly Ala Asp Gly Asp Val Gly Leu Pro Asp Leu Asp Pro Asn
180 185 190
Asn Trp Val Val Ser Gln Gln Arg Leu Tyr Leu Lys Ala Leu Lys Asp
195 200 205
Met Gly Ile Lys Gly Phe Arg Ile Asp Ala Val Lys His Met Ser Gln
210 215 220
Tyr Gln Ile Asp Gln Val Phe Thr Ser Glu Ile Thr Ala Asn Met His
225 230 235 240
Val Phe Gly Glu Val Ile Thr Ser Gly Gly Ala Gly Asn Ser Gly Tyr
245 250 255
Glu Ser Phe Leu Ala Pro Tyr Leu Asn Asn Thr Asn His Ser Ala Tyr
260 265 270
Asp Phe Pro Leu Phe Ala Ser Ile Arg Ser Ala Phe Ser Met Gly Gly
275 280 285
Gly Leu Asn Gln Leu His Asp Pro Lys Ala Tyr Gly Gln Ala Leu Asp
290 295 300
Asp Asn Arg Ser Ile Thr Phe Ala Ile Thr His Asp Ile Pro Thr Asn
305 310 315 320
Asp Gly Phe Arg Tyr Gln Ile Met Asp Pro Gln Asp Glu Gln Leu Ala
325 330 335
Tyr Ala Tyr Ile Leu Gly Lys Asp Gly Gly Thr Pro Leu Ile Tyr Ser
340 345 350
Asp Asp Leu Pro Asp Ser Glu Asp Lys Asp Asn Gly Arg Trp Gly Asn
355 360 365
Val Trp Asn Ser Ser Thr Met Lys Asn Met Leu Ser Phe His Asn Ala
370 375 380
Met Gln Gly Lys Thr Met Thr Met Ile Ser Ser Asp His Cys Thr Leu
385 390 395 400
Leu Phe Lys Arg Gly Lys Glu Gly Val Val Gly Ile Asn Lys Cys Gly
405 410 415
Glu Thr Arg Gly Val Thr Val Asp Thr Tyr Gln His Glu Phe Asn Trp
420 425 430
His Val Gln Tyr Lys Asp Val Leu Ser Ser Ala Thr Glu Thr Val Thr
435 440 445
Ser Arg Tyr His Thr Phe Asn Leu Pro Pro Arg Ser Ala Arg Met Phe
450 455 460
Lys Leu
465
<210>143
<211>1422
<212>DNA
<213>环境的
<400>143
atgccaaaga gcacttttac caaatccata acaaaatcac ttcttgctac ttccgttgtt 60
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atttcaccgc cgctgaagtc cacaggccca caatggtggg cacgttacca accacaggac 240
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aatatggctt acatgaacca gcaaaaattg tttggagatt tagagcaaaa tcagttctct 480
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tactggcgct tatgtggtgg taatggtgac actgggttac ctgatcttga tcctaactcg 600
tgggtgatcg atcaacaaaa acgttattta cgtgctttga aagacatggg aataaagggc 660
ttccgagttg atgcggtaaa acacatgagc gattaccaaa tcaaccaagt gtttacgcca 720
gacatcatcg caggcttaca tgtatttggt gaagtgatca ccagtggtgg caagggcagc 780
aatgactacc actcttttct ggaaccgtat ttaaataaca ccaatcacgc cgcgtatgac 840
ttcccgctat ttgcctctat ccgaaatgca tttagttatc atggcagctt gtctcaatta 900
catgatccac aagcttacgg gcaagcactt cctaacgaca gagccattac tttcaccatc 960
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<210>144
<211>473
<212>PRT
<213>环境的
<400>144
Met Pro Lys Ser Thr Phe Thr Lys Ser Ile Thr Lys Ser Leu Leu Ala
1 5 10 15
Thr Ser Val Val Val Ser Leu Leu Pro Ala Tyr Ala Gln Ala Asp Thr
20 25 30
Ile Leu His Ala Phe Asn Trp Lys Tyr Ser Asp Ile Thr Arg Gln Ala
35 40 45
Glu Gln Ile Ala Gln Ala Gly Tyr Lys Lys Val Leu Ile Ser Pro Pro
50 55 60
Leu Lys Ser Thr Gly Pro Gln Trp Trp Ala Arg Tyr Gln Pro Gln Asp
65 70 75 80
Ile Arg Val Ile Asp Ser Pro Val Gly Asn Lys Gln Asp Leu Gln Ala
85 90 95
Leu Ile Ala Ala Leu Lys Ala Gln Gly Val Glu Val Tyr Ala Asp Ile
100 105 110
Val Leu Asn His Met Ala Asn Glu Ser Trp Lys Arg Asp Asp Leu Asn
115 120 125
Tyr Pro Gly Ser Asp Leu Leu Thr Gln Tyr Ser Gln Asn Met Ala Tyr
130 135 140
Met Asn Gln Gln Lys Leu Phe Gly Asp Leu Glu Gln Asn Gln Phe Ser
145 150 155 160
Ala Asn Asp Phe His Pro Ala Gly Cys Ile Thr Asp Trp Ser Asn Pro
165 170 175
Gly His Val Gln Tyr Trp Arg Leu Cys Gly Gly Asn Gly Asp Thr Gly
180 185 190
Leu Pro Asp Leu Asp Pro Asn Ser Trp Val Ile Asp Gln Gln Lys Arg
195 200 205
Tyr Leu Arg Ala Leu Lys Asp Met Gly Ile Lys Gly Phe Arg Val Asp
210 215 220
Ala Val Lys His Met Ser Asp Tyr Gln Ile Asn Gln Val Phe Thr Pro
225 230 235 240
Asp Ile Ile Ala Gly Leu His Val Phe Gly Glu Val Ile Thr Ser Gly
245 250 255
Gly Lys Gly Ser Asn Asp Tyr His Ser Phe Leu Glu Pro Tyr Leu Asn
260 265 270
Asn Thr Asn His Ala Ala Tyr Asp Phe Pro Leu Phe Ala Ser Ile Arg
275 280 285
Asn Ala Phe Ser Tyr His Gly Ser Leu Ser Gln Leu His Asp Pro Gln
290 295 300
Ala Tyr Gly Gln Ala Leu Pro Asn Asp Arg Ala Ile Thr Phe Thr Ile
305 310 315 320
Thr His Asp Ile Pro Thr Asn Asp Gly Phe Arg Tyr Gln Ile Met Asp
325 330 335
Pro Thr Ser Glu Lys Leu Ala Tyr Ala Tyr Ile Leu Gly Lys Asp Gly
340 345 350
Gly Ser Pro Leu Ile Tyr Ser Asp Ala Leu Asp Pro Ser Glu Asp Lys
355 360 365
Asp Lys Gly Arg Trp Arg Asp Val Trp Asn Gln Glu Tyr Met Val Asn
370 375 380
Met Ile Ser Phe His Asn Lys Val Gln Gly Lys Ser Met Glu Val Met
385 390 395 400
Tyr Ser Asp Gln Cys Leu Leu Val Phe Lys Arg Glu Lys Gln Gly Leu
405 410 415
Val Gly Ile Asn Lys Cys Ala Glu Ser Arg Thr Tyr Thr Ile Asp Thr
420 425 430
His Arg Phe Glu Phe Asn Trp Tyr Gln Pro Tyr Asn Asp Thr Leu Ser
435 440 445
Gln His Ser Glu Thr Phe Ser Ser Arg Tyr His Ala Leu Thr Ile Pro
450 455 460
Ala Gln Thr Ala Arg Met Leu Ala Leu
465 470
<210>145
<211>1542
<212>DNA
<213>环境的
<400>145
atgttgaaaa ggattacggt agtctgttta ttatttattt tgctttttcc taatatatat 60
gggaggaata aggcggaagc agcaacgata aataatggaa cattaatgca gtattttgag 120
tggtacgctc cgaatgatgg gaatcattgg aatcgtttgc gttatgatgc tgaaagttta 180
gctcataagg gaatcacatc tgtatggata ccacctgcat ataaagggac ttcgcaaaat 240
gatgtagggt atggggccta tgatttatac gatttagggg agttcaatca aaaaggaacg 300
gtgcggacga aatatgggac aaaggcacag ttgaaatctg caattgacgc tttacataag 360
caaaacatcg acgtatacgg tgatgtagtt atgaatcata aaggtggggc tgattatact 420
gaaaccgtaa cagctgttga ggtagaccgt aacaatcgaa atattgaagt atcaggtgat 480
tatgaaatta gtgcgtggac gggttttaac tttccagggc gcagagatgc ttattctaat 540
ttcaaatgga aatggtatca ttttgacgga acggattggg atgaaggaag gaaattaaac 600
cgaatttata aatttagggg tataggtaaa gcgtgggact gggaagtgtc tagcgaaaat 660
ggaaattatg attatttgat gtatgcagat cttgattttg atcatccaga tgttgcgaat 720
gaaatgaaaa gttggggaac gtggtatgcg aatgaattaa atttagatgg atttcgttta 780
gatgctgtta aacatattga tcatgaatat ttacgcgatt gggtaaatca tgtcagacag 840
caaacgggga aagaaatgtt tacggtggct gaatattggc aaaatgatat ccagacttta 900
aacaattatt tggcgaaagt caattataat caatctgtat ttgatgcacc gcttcattac 960
aattttcatt atgcttcaac aggaaatggg aattatgata tgagaaatat tttaaatgga 1020
acagtaatga aaaatcatcc tgcactcgca gttactctcg ttgagaatca tgattctcaa 1080
cctgggcaat cattggaatc tgtagtaagt ccgtggttta agccgctggc atatgcattt 1140
attttaactc gtgcagaggg ctatccttca gttttttatg gtgattacta tgggacaagc 1200
ggaaatagta gttatgaaat tccagcgtta aaagataaaa ttgatccaat tttgacggca 1260
cgaaaaaact ttgcatatgg tacgcagcgt gattatttag accatccaga tgtgattggc 1320
tggacaagag aaggagatag tgtacatgct aagtctggtt tagcggcatt aatctccgat 1380
ggaccaggag gatcaaagtg gatggatgtt ggaaagaata acgctgggga agtatggtac 1440
gatattacgg gtaatcaaac aaatactgta acaattaata aagatggatc ggggcaattc 1500
catgtaagtg gaggctctgt ttctatatat gttcaacagt aa 1542
<210>146
<211>513
<212>PRT
<213>环境的
<400>146
Met Leu Lys Arg Ile Thr Val Val Cys Leu Leu Phe Ile Leu Leu Phe
1 5 10 15
Pro Asn Ile Tyr Gly Arg Asn Lys Ala Glu Ala Ala Thr Ile Asn Asn
20 25 30
Gly Thr Leu Met Gln Tyr Phe Glu Trp Tyr Ala Pro Asn Asp Gly Asn
35 40 45
His Trp Asn Arg Leu Arg Tyr Asp Ala Glu Ser Leu Ala His Lys Gly
50 55 60
Ile Thr Ser Val Trp Ile Pro Pro Ala Tyr Lys Gly Thr Ser Gln Asn
65 70 75 80
Asp Val Gly Tyr Gly Ala Tyr Asp Leu Tyr Asp Leu Gly Glu Phe Asn
85 90 95
Gln Lys Gly Thr Val Arg Thr Lys Tyr Gly Thr Lys Ala Gln Leu Lys
100 105 110
Ser Ala Ile Asp Ala Leu His Lys Gln Asn Ile Asp Val Tyr Gly Asp
115 120 125
Val Val Met Asn His Lys Gly Gly Ala Asp Tyr Thr Glu Thr Val Thr
130 135 140
Ala Val Glu Val Asp Arg Asn Asn Arg Asn Ile Glu Val Ser Gly Asp
145 150 155 160
Tyr Glu Ile Ser Ala Trp Thr Gly Phe Asn Phe Pro Gly Arg Arg Asp
165 170 175
Ala Tyr Ser Asn Phe Lys Trp Lys Trp Tyr His Phe Asp Gly Thr Asp
180 185 190
Trp Asp Glu Gly Arg Lys Leu Asn Arg Ile Tyr Lys Phe Arg Gly Ile
195 200 205
Gly Lys Ala Trp Asp Trp Glu Val Ser Ser Glu Asn Gly Asn Tyr Asp
210 215 220
Tyr Leu Met Tyr Ala Asp Leu Asp Phe Asp His Pro Asp Val Ala Asn
225 230 235 240
Glu Met Lys Ser Trp Gly Thr Trp Tyr Ala Asn Glu Leu Asn Leu Asp
245 250 255
Gly Phe Arg Leu Asp Ala Val Lys His Ile Asp His Glu Tyr Leu Arg
260 265 270
Asp Trp Val Asn His Val Arg Gln Gln Thr Gly Lys Glu Met Phe Thr
275 280 285
Val Ala Glu Tyr Trp Gln Asn Asp Ile Gln Thr Leu Asn Asn Tyr Leu
290 295 300
Ala Lys Val Asn Tyr Asn Gln Ser Val Phe Asp Ala Pro Leu His Tyr
305 310 315 320
Asn Phe His Tyr Ala Ser Thr Gly Asn Gly Asn Tyr Asp Met Arg Asn
325 330 335
Ile Leu Asn Gly Thr Val Met Lys Asn His Pro Ala Leu Ala Val Thr
340 345 350
Leu Val Glu Asn His Asp Ser Gln Pro Gly Gln Ser Leu Glu Ser Val
355 360 365
Val Ser Pro Trp Phe Lys Pro Leu Ala Tyr Ala Phe Ile Leu Thr Arg
370 375 380
Ala Glu Gly Tyr Pro Ser Val Phe Tyr Gly Asp Tyr Tyr Gly Thr Ser
385 390 395 400
Gly Asn Ser Ser Tyr Glu Ile Pro Ala Leu Lys Asp Lys Ile Asp Pro
405 410 415
Ile Leu Thr Ala Arg Lys Asn Phe Ala Tyr Gly Thr Gln Arg Asp Tyr
420 425 430
Leu Asp His Pro Asp Val Ile Gly Trp Thr Arg Glu Gly Asp Ser Val
435 440 445
His Ala Lys Ser Gly Leu Ala Ala Leu Ile Ser Asp Gly Pro Gly Gly
450 455 460
Ser Lys Trp Met Asp Val Gly Lys Asn Asn Ala Gly Glu Val Trp Tyr
465 470 475 480
Asp Ile Thr Gly Asn Gln Thr Asn Thr Val Thr Ile Asn Lys Asp Gly
485 490 495
Ser Gly Gln Phe His Val Ser Gly Gly Ser Val Ser Ile Tyr Val Gln
500 505 510
Gln
<210>147
<211>2343
<212>DNA
<213>环境的
<400>147
atgagcttaa ataactttaa ggtaaaactg cttagttttg ctgtgtcttc tgctgtattg 60
tcactggctc caaatttagc caatgctgca aattttgaaa gtgagatggt gataatccat 120
ccgtttcagt ggacatatga caatatagca aaagagtgta cagagtacct tggtccagcc 180
ggatttgacg gtgtacagat ttcccagcca gcggaacata agcgggctga aggagtatgg 240
tgggccgtat atcagccggt taattataag aattttacaa ccatgaccgg taacgaggag 300
cagcttaagg caatgatcaa gacctgtaat gatgcaggtg ttaaggtgtt cgctgacgct 360
gttttcaacc aaaaggctac agacggtgta ggctggggcg gttcaacttg gagttataag 420
aactaccctg acggattctc cggatcagat ttccatggag actgttccat tgacaaaagc 480
tatactgatg caaataatgt cagaacctgt gcactctcag gtatgccgga cgttgccaca 540
gataactccg ctactcagga aaagattgca gattacctcg cttctttaat gaatatgggg 600
gtctatggtt tccgtattga cgctgcaaag cacatgggat acaacgatat caactccatt 660
ctttcaaaaa ctgcacagaa gactggaaga agacctcctg catatctgga agtaatcgga 720
gccggtaacg aagctgccga cattcagccg gacaagtata cctttattga gaatgcggtt 780
gtaactgact tcggttatgt ctgggatgca aatgagagtt tcggaaaggg taattacggt 840
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gattataatc tggctcagtc ctggcttgct gtatggcctg taggtacagt aagacagata 1020
tattccggtt attcattccc tgtaaaagat aatgatcctt atcgcgtcag tgatgcaact 1080
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tcaaccaagg gatttgacaa tggtgctttg tggtttaaca gaggaagcaa aggtttttat 1260
gcacagaata ctaccaacag tcctataacc cagacattct ctgttgaagt acctgacgga 1320
aattactgtg atatcttagg aacatcagat cctaagagca atccatgcgg agcagacgtt 1380
gtcgtaagcg gcggtaaggc tacctttact attcctgcaa agacagctgt ggctatctgt 1440
acagactcag actggtgcgg caagggggtt gatccttgtg aaagtgatcc gaccggtgct 1500
gcctgtgttt gtaaggggga aaccaccgtt aatggtgtgt gcgtcagctg gtgtaatgcg 1560
cattcatcaa atgaggaatg cacctgtgta ttgaatccga atgatgccaa ctgtcaggct 1620
gatattgaac ctaccaaggg taaactctgt tacgccggta cttcaaacgg gtggaaacag 1680
gatcctttaa catataaccg taaaacaggt ttctggacta ttaatctgac tcttgacggt 1740
gcaggtgata ccagcggagc tcagcgcttc aaggttacag acggatgttc atggaccgga 1800
acagtttacg gttcttcagg tactgccgga aagttggatg taaatacatc atcaaccggc 1860
gatgaacctg tgtctcttgt tggtgattat gttctttcca ttaacgataa gaccatggaa 1920
tatacattca ccaaggcaga tgaagtaact aatcagccac cggttgcatc atttaccgcg 1980
acagttaacg gtctgaccgt ttcttttgcc aataattcat ccgaccctga gaatgatgaa 2040
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acctatgaag aatccggtaa gtatactgtt actttaaagg ttactgattc agctaataac 2160
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gattggaccg gcgtctttga attctttgga tccactagtg tcgacctgca ggcgcgcgag 2340
ctc 2343
<210>148
<211>781
<212>PRT
<213>环境的
<400>148
Met Ser Leu Asn Asn Phe Lys Val Lys Leu Leu Ser Phe Ala Val Ser
1 5 10 15
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20 25 30
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Gly Val Lys Val Phe Ala Asp Ala Val Phe Asn Gln Lys Ala Thr Asp
115 120 125
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130 135 140
Gly Phe Ser Gly Ser Asp Phe His Gly Asp Cys Ser Ile Asp Lys Ser
145 150 155 160
Tyr Thr Asp Ala Asn Asn Val Arg Thr Cys Ala Leu Ser Gly Met Pro
165 170 175
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180 185 190
Leu Ala Ser Leu Met Asn Met Gly Val Tyr Gly Phe Arg Ile Asp Ala
195 200 205
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210 215 220
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225 230 235 240
Ala Gly Asn Glu Ala Ala Asp Ile Gln Pro Asp Lys Tyr Thr Phe Ile
245 250 255
Glu Asn Ala Val Val Thr Asp Phe Gly Tyr Val Trp Asp Ala Asn Glu
260 265 270
Ser Phe Gly Lys Gly Asn Tyr Gly Lys Ala Leu Glu Leu Ser Thr Trp
275 280 285
Leu Gly Ala Asn Ser Glu Thr Phe Val Asn Asn His Asp Asp Glu Trp
290 295 300
Gly Arg Cys Ser Ala Gly Ser Cys Ser Met Lys Thr Gln Asn Tyr Ala
305 310 315 320
Asp Tyr Asn Leu Ala Gln Ser Trp Leu Ala Val Trp Pro Val Gly Thr
325 330 335
Val Arg Gln Ile Tyr Ser Gly Tyr Ser Phe Pro Val Lys Asp Asn Asp
340 345 350
Pro Tyr Arg Val Ser Asp Ala Thr His Asp Gln Gly Gly Pro Leu Gly
355 360 365
Ala Asp Arg Cys Glu Gly Gly Trp Leu Cys Gln His Arg Val Ser Phe
370 375 380
Val Leu Asn Ser Pro Arg Phe Ala Arg Ala Thr Arg Gly Thr Ala Val
385 390 395 400
Ser Thr Lys Gly Phe Asp Asn Gly Ala Leu Trp Phe Asn Arg Gly Ser
405 410 415
Lys Gly Phe Tyr Ala Gln Asn Thr Thr Asn Ser Pro Ile Thr Gln Thr
420 425 430
Phe Ser Val Glu Val Pro Asp Gly Asn Tyr Cys Asp Ile Leu Gly Thr
435 440 445
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450 455 460
Gly Lys Ala Thr Phe Thr Ile Pro Ala Lys Thr Ala Val Ala Ile Cys
465 470 475 480
Thr Asp Ser Asp Trp Cys Gly Lys Gly Val Asp Pro Cys Glu Ser Asp
485 490 495
Pro Thr Gly Ala Ala Cys Val Cys Lys Gly Glu Thr Thr Val Asn Gly
500 505 510
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515 520 525
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595 600 605
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Phe Gly Ser Thr Ser Val Asp Leu Gln Ala Arg Glu Leu
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<210>149
<211>2502
<212>DNA
<213>环境的
<400>149
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<400>150
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Gly Asn Pro Gly Gln Glu Ala Asp Asp Ile Gln Pro Asn Lys Tyr Thr
245 250 255
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275 280 285
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485 490 495
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565 570 575
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595 600 605
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675 680 685
Asn Phe Gly Asn Gly Lys Thr Ser Ser Glu Lys Asn Pro Ser Val Thr
690 695 700
Tyr Asp Lys Ala Gly Lys Tyr Thr Val Ser Leu Lys Val Thr Asp Thr
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Tyr Gly Thr Asn Leu Leu Thr Arg Asn Gly Ser Glu Trp Thr Gly Ile
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Phe Glu Phe Ser Lys Thr Thr Lys Phe Lys Leu Glu Ala Leu Pro Pro
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Ala Ala Asp Gln Cys Ile Phe Leu Gly Gly Asn Arg Gly Glu Ala Leu
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Thr Ala Ser Gly Gly Phe Ile Ser Leu Pro Ala Gly Arg Tyr Thr Ile
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Lys Phe Asn Glu Glu Ser Lys Val Leu Thr Ala Gly Asp Val Asp Cys
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<210>151
<211>2112
<212>DNA
<213>环境的
<400>151
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agccgtacat tcaccttcca ggctgcaaac acctccgagt attacacagc caccatgcac 1560
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ctcctcgtcg gg 2112
<210>152
<211>704
<212>PRT
<213>环境的
<400>152
Met Lys Thr Ile Leu Ser Thr Ile Met Val Met Ala Ala Ala Ala Ala
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Thr Thr Val Glu Ala Gln Gly Trp Pro Glu Asn Tyr Gly Gly Val Met
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Asp Gly Met Arg Asp Leu Asp His Lys Ser Gln Asn Val Gln Lys Ser
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Val Leu Ala Tyr Thr Lys Tyr Leu Val Asp Asp Leu Gly Tyr Thr Gly
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Phe Arg Tyr Asp Met Val Lys Gly Phe Asp Gly Ser His Val Ala Asp
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Tyr Asn Thr Asn Ala Gly Val Gln Phe Ser Val Gly Glu Tyr Trp Asp
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Gly Thr Ala Ser Lys Val Tyr Ser Trp Ile Asn Ser Thr Lys Lys Ser
245 250 255
Asp Val Pro Gln Ser Ala Ala Phe Asp Phe Ala Phe Arg Tyr Thr Cys
260 265 270
Arg Asp Ala Val Asn Asn Lys Asn Trp Ala Asn Leu Lys Asn Thr Ser
275 280 285
Gly Ile Ser Asp Ala Asp Tyr Arg Arg Tyr Ser Val Thr Phe Val Glu
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325 330 335
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Lys Asn Leu Ile Glu Ala Arg Arg Leu Val Gly Ile His Asn Gln Ser
355 360 365
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370 375 380
Thr Gly Thr Asn Gly Thr Leu Arg Val Leu Cys Gly Ser Tyr Gln Tyr
385 390 395 400
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Tyr Tyr Val Leu Asn Thr Leu Glu Ala Pro Trp Ile Gly Lys Gly Ser
420 425 430
Gly Ser Tyr Thr Glu Gly Glu Thr Val Thr Val Pro Leu Ile Ala Ile
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595 600 605
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675 680 685
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<212>DNA
<213>环境的
<400>153
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aaatggactg cgttagcact atctttacca ctagttatga gcttatcaac aaacatacaa 120
gcagaaacat tacataataa taagggtcaa aaggcgcaaa caggaaataa agacggaatt 180
ttttatgaac tgtatgttaa ttctttttat gatactgata gcaatggaca tggtgattta 240
aaaggcgtca caaagaaact tgattattta aatgatggaa atccaagaac aaataatgat 300
cttcaaataa acggtatctg gatgatgcct attaacacct ctcctagtta tcacaaatat 360
gatgtaacag attactataa tatcgatcct cagtatggaa gtttacaaga tttccgtgaa 420
ctaacaacag aagcgcataa acgcaacgta aaggtagtaa tagatcttgt tattaatcat 480
acaagcagtg agcatccttg gtttgtcgat gcattaaaaa ataaaaacag taagtatcga 540
gattactata tttgggctga taaaaataca gacttaaatg aaaaaggccc atggggtcaa 600
caagtatggc acaaagcgtc gaacggagag tatttctacg caacgttctg ggaagggatg 660
ccggacttaa actatgacaa ccctaaagta agagaagaaa tgattaaaat cgggaaattt 720
tggctcaaac aaggagctga tggctttcgt ctagatgcag ccatgcacat ctttaaaggg 780
caaacacctg aaggagcaaa gaaaaatatt gaatggtgga atgaattccg cgacgcgatg 840
agagaaacga atccaaatac gtatctagtt ggtgaaatat gggatcaacc agaagtagtt 900
gctccgtatt atcaatcgtt agattctaca tttaacttcg acttagcata taaaatcgtt 960
aattccgtta aaaatggtac tgatcaaggg gtagccgcgg cagctgttgc aacggatgag 1020
ttatataaaa catataatcc aaataaaatt gatggaacgt ttttaacgaa tcatgaccaa 1080
aatcgtgtaa tgagtgagtt aaatggtgat gtaaacaaag caaaatcagc agcctctatt 1140
ctgttgacac tccctggtaa tccgttcatt tattatggcg aagaaatcgg catgacaggc 1200
caaaaaccag atgagttgat tcgtgagcct ttccgttggt atgaagatga taaagaaggt 1260
caaacgagct gggagactcc agtatataac attgatcata atggtgtttc agttgaagca 1320
caagataaac aaaaagcttc tcttctaagc cattatcgta aaatgattcg tgttcgtcag 1380
caacacgatg aacttgtcaa aggtaattta gaacctattt ctgtcaataa ttcacaggtt 1440
gttgcctata atcgtacgta taaaaataaa tcaattcaag tgtaccataa tatttcagac 1500
aagccggtta cattaactgt ttcaaacaaa ggaaaactga ttttttctag tgaattagga 1560
gcaaaaaagg aaaaatcaac attagtaatt ccagcgaata cgacagtgct agtaaagtaa 1620
<210>154
<211>539
<212>PRT
<213>环境的
<400>154
Met Pro Ser Ile Asn Ala Ser Asp Cys Lys Lys Lys Gly Asp Arg Ser
1 5 10 15
Met Lys Arg Lys Lys Trp Thr Ala Leu Ala Leu Ser Leu Pro Leu Val
20 25 30
Met Ser Leu Ser Thr Asn Ile Gln Ala Glu Thr Leu His Asn Asn Lys
35 40 45
Gly Gln Lys Ala Gln Thr Gly Asn Lys Asp Gly Ile Phe Tyr Glu Leu
50 55 60
Tyr Val Asn Ser Phe Tyr Asp Thr Asp Ser Asn Gly His Gly Asp Leu
65 70 75 80
Lys Gly Val Thr Lys Lys Leu Asp Tyr Leu Asn Asp Gly Asn Pro Arg
85 90 95
Thr Asn Asn Asp Leu Gln Ile Asn Gly Ile Trp Met Met Pro Ile Asn
100 105 110
Thr Ser Pro Ser Tyr His Lys Tyr Asp Val Thr Asp Tyr Tyr Asn Ile
115 120 125
Asp Pro Gln Tyr Gly Ser Leu Gln Asp Phe Arg Glu Leu Thr Thr Glu
130 135 140
Ala His Lys Arg Asn Val Lys Val Val Ile Asp Leu Val Ile Asn His
145 150 155 160
Thr Ser Ser Glu His Pro Trp Phe Val Asp Ala Leu Lys Asn Lys Asn
165 170 175
Ser Lys Tyr Arg Asp Tyr Tyr Ile Trp Ala Asp Lys Asn Thr Asp Leu
180 185 190
Asn Glu Lys Gly Pro Trp Gly Gln Gln Val Trp His Lys Ala Ser Asn
195 200 205
Gly Glu Tyr Phe Tyr Ala Thr Phe Trp Glu Gly Met Pro Asp Leu Asn
210 215 220
Tyr Asp Asn Pro Lys Val Arg Glu Glu Met Ile Lys Ile Gly Lys Phe
225 230 235 240
Trp Leu Lys Gln Gly Ala Asp Gly Phe Arg Leu Asp Ala Ala Met His
245 250 255
Ile Phe Lys Gly Gln Thr Pro Glu Gly Ala Lys Lys Asn Ile Glu Trp
260 265 270
Trp Asn Glu Phe Arg Asp Ala Met Arg Glu Thr Asn Pro Asn Thr Tyr
275 280 285
Leu Val Gly Glu Ile Trp Asp Gln Pro Glu Val Val Ala Pro Tyr Tyr
290 295 300
Gln Ser Leu Asp Ser Thr Phe Asn Phe Asp Leu Ala Tyr Lys Ile Val
305 310 315 320
Asn Set Val Lys Asn Gly Thr Asp Gln Gly Val Ala Ala Ala Ala Val
325 330 335
Ala Thr Asp Glu Leu Tyr Lys Thr Tyr Asn Pro Asn Lys Ile Asp Gly
340 345 350
Thr Phe Leu Thr Asn His Asp Gln Asn Arg Val Met Ser Glu Leu Asn
355 360 365
Gly Asp Val Asn Lys Ala Lys Ser Ala Ala Ser Ile Leu Leu Thr Leu
370 375 380
Pro Gly Asn Pro Phe Ile Tyr Tyr Gly Glu Glu Ile Gly Met Thr Gly
385 390 395 400
Gln Lys Pro Asp Glu Leu Ile Arg Glu Pro Phe Arg Trp Tyr Glu Asp
405 410 415
Asp Lys Glu Gly Gln Thr Ser Trp Glu Thr Pro Val Tyr Asn Ile Asp
420 425 430
His Asn Gly Val Ser Val Glu Ala Gln Asp Lys Gln Lys Ala Ser Leu
435 440 445
Leu Ser His Tyr Arg Lys Met Ile Arg Val Arg Gln Gln His Asp Glu
450 455 460
Leu Val Lys Gly Asn Leu Glu Pro Ile Ser Val Asn Asn Ser Gln Val
465 470 475 480
Val Ala Tyr Asn Arg Thr Tyr Lys Asn Lys Ser Ile Gln Val Tyr His
485 490 495
Asn Ile Ser Asp Lys Pro Val Thr Leu Thr Val Ser Asn Lys Gly Lys
500 505 510
Leu Ile Phe Ser Ser Glu Leu Gly Ala Lys Lys Glu Lys Ser Thr Leu
515 520 525
Val Ile Pro Ala Asn Thr Thr Val Leu Val Lys
530 535
<210>155
<211>1773
<212>DNA
<213>环境的
<400>155
gtgtcaagaa tgtttgcaaa acgattcaaa acctctttac tgccgttatt cgctggattt 60
ttattgctgt ttcatttggt tctggcagga ccaacggctg cgaatgctga aacggctaac 120
aaatcaaatg agcttacagc accgtcgatc aaagcggaa ccattcttca tgcttggaat 180
tggtcgttca atacgttaaa acacaatatg aaggatattc atgatgcagg atatacagcg 240
attcagacgt ctccgattaa ccaagtcaag gaagggaacc aaggaaataa aaacatgtcg 300
aactggtact ggctctatca gccgacatcg taccaaattg gcaaccgtta cttaggtact 360
gaacaagaat ttaaagaaat gtgtgcagcc gctgaagaat atggcataaa ggttattgtt 420
gacgcggtca tcaatcatac caccagtgac tatgccgcga tttccaatga gattaagagt 480
attccaaact ggacacatgg aaacacacaa attaaaaact ggtctgatcg atgggatgtc 540
acgcagaatg cattgctcgg gctgtatgac tggaatacac aaaatacaca agtacagtcc 600
tatttgaaac ggttcttaga aagagcattg aatgacgggg cagacggttt tcgatttgat 660
gccgccaaac atatagagct tccggatgat ggcagttacg gcagtcaatt ttggccgaat 720
atcacaaata catctgcaga gttccaatac ggagaaatcc tgcaggatag tgcttcaaga 780
gatgcttcat atgcgaatta tatgaatgtg acagcgtcta actatgggca ttccataagg 840
tccgctttaa agaatcgtaa tctgggcgtg tcgaatatct cccactatgc atcagatgtg 900
tctgcggaca agctagtgac atgggtagaa tcgcatgata cgtatgccaa tgatgatgaa 960
gagtcgacat ggatgagcga tgatgatatc cgtttaggct gggcggtgat agcttctcgt 1020
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ccggggaaaa gccaaatagg cgatcgcggg agtgctttat ttgaagatca ggctatcact 1140
gcggtcaata gatttcacaa tgtgatggct ggacagcctg aggaactctc gaacccaaat 1200
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ggttcatcct ctgtttctat caatacgcca acaaaattgc ctgatggcag gtatgataat 1320
aaagctgggg caggttcatt tcaagtaaat gacggtaaac tgacaggcac gatcaatgcc 1380
aggtctgtgg ctgtgcttta tcctgatgat attgcaaaag cgcctcatgt tttccttgag 1440
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gatgcgaata caacaaaagc cgtttatcaa atcaataatg gaccagagac ggcgtttaag 1560
gatggagatc aattcacaat cggaaaagga gatccatttg gcaaaacata caccatcatg 1620
ttaaaaggaa cgaacagtga tggtgtaacg aggaccgagg aatacagttt tgttaaaaga 1680
gatccagctt cggccaaaac catcggctat caaaatccga atcattggag ccaggtaaat 1740
gcttatatct ataaacatga tgggggccgg gca 1773
<210>156
<211>591
<212>PRT
<213>环境的
<400>156
Val Ser Arg Met Phe Ala Lys Arg Phe Lys Thr Ser Leu Leu Pro Leu
1 5 10 15
Phe Ala Gly Phe Leu Leu Leu Phe His Leu Val Leu Ala Gly Pro Thr
20 25 30
Ala Ala Asn Ala Glu Thr Ala Asn Lys Ser Asn Glu Leu Thr Ala Pro
35 40 45
Ser Ile Lys Ser Gly Thr Ile Leu His Ala Trp Asn Trp Ser Phe Asn
50 55 60
Thr Leu Lys His Asn Met Lys Asp Ile His Asp Ala Gly Tyr Thr Ala
65 70 75 80
Ile Gln Thr Ser Pro Ile Asn Gln Val Lys Glu Gly Asn Gln Gly Asn
85 90 95
Lys Asn Met Ser Asn Trp Tyr Trp Leu Tyr Gln Pro Thr Ser Tyr Gln
100 105 110
Ile Gly Asn Arg Tyr Leu Gly Thr Glu Gln Glu Phe Lys Glu Met Cys
115 120 125
Ala Ala Ala Glu Glu Tyr Gly Ile Lys Val Ile Val Asp Ala Val Ile
130 135 140
Asn His Thr Thr Ser Asp Tyr Ala Ala Ile Ser Asn Glu Ile Lys Ser
145 150 155 160
Ile Pro Asn Trp Thr His Gly Asn Thr Gln Ile Lys Asn Trp Ser Asp
165 170 175
Arg Trp Asp Val Thr Gln Asn Ala Leu Leu Gly Leu Tyr Asp Trp Asn
180 185 190
Thr Gln Asn Thr Gln Val Gln Ser Tyr Leu Lys Arg Phe Leu Glu Arg
195 200 205
Ala Leu Asn Asp Gly Ala Asp Gly Phe Arg Phe Asp Ala Ala Lys His
210 215 220
Ile Glu Leu Pro Asp Asp Gly Ser Tyr Gly Ser Gln Phe Trp Pro Asn
225 230 235 240
Ile Thr Asn Thr Ser Ala Glu Phe Gln Tyr Gly Glu Ile Leu Gln Asp
245 250 255
Ser Ala Ser Arg Asp Ala Ser Tyr Ala Asn Tyr Met Asn Val Thr Ala
260 265 270
Ser Asn Tyr Gly His Ser Ile Arg Ser Ala Leu Lys Asn Arg Asn Leu
275 280 285
Gly Val Ser Asn Ile Ser His Tyr Ala Ser Asp Val Ser Ala Asp Lys
290 295 300
Leu Val Thr Trp Val Glu Ser His Asp Thr Tyr Ala Asn Asp Asp Glu
305 310 315 320
Glu Ser Thr Trp Met Ser Asp Asp Asp Ile Arg Leu Gly Trp Ala Val
325 330 335
Ile Ala Ser Arg Ser Gly Ser Thr Pro Leu Phe Phe Ser Arg Pro Glu
340 345 350
Gly Gly Gly Asn Gly Val Arg Phe Pro Gly Lys Ser Gln Ile Gly Asp
355 360 365
Arg Gly Ser Ala Leu Phe Glu Asp Gln Ala Ile Thr Ala Val Asn Arg
370 375 380
Phe His Asn Val Met Ala Gly Gln Pro Glu Glu Leu Ser Asn Pro Asn
385 390 395 400
Gly Asn Asn Gln Ile Phe Met Asn Gln Arg Gly Ser His Gly Val Val
405 410 415
Leu Ala Asn Ala Gly Ser Ser Ser Val Ser Ile Asn Thr Pro Thr Lys
420 425 430
Leu Pro Asp Gly Arg Tyr Asp Asn Lys Ala Gly Ala Gly Ser Phe Gln
435 440 445
Val Asn Asp Gly Lys Leu Thr Gly Thr Ile Asn Ala Arg Ser Val Ala
450 455 460
Val Leu Tyr Pro Asp Asp Ile Ala Lys Ala Pro His Val Phe Leu Glu
465 470 475 480
Asn Tyr Lys Thr Gly Val Thr His Ser Phe Asn Asp Gln Leu Thr Ile
485 490 495
Thr Leu Arg Ala Asp Ala Asn Thr Thr Lys Ala Val Tyr Gln Ile Asn
500 505 510
Asn Gly Pro Glu Thr Ala Phe Lys Asp Gly Asp Gln Phe Thr Ile Gly
515 520 525
Lys Gly Asp Pro Phe Gly Lys Thr Tyr Thr Ile Met Leu Lys Gly Thr
530 535 540
Asn Ser Asp Gly Val Thr Arg Thr Glu Glu Tyr Ser Phe Val Lys Arg
545 550 555 560
Asp Pro Ala Ser Ala Lys Thr Ile Gly Tyr Gln Asn Pro Asn His Trp
565 570 575
Ser Gln Val Asn Ala Tyr Ile Tyr Lys His Asp Gly Gly Arg Ala
580 585 590
<210>157
<211>1596
<212>DNA
<213>环境的
<400>157
atgcaaacga ttgcaaaaaa aggggatgaa acgatgaaag ggaaaaaatg gacagcatta 60
gctctaacac tgccgctggc tgctagctta tcaacaggcg ttcacgccga aaccgtacat 120
aaaggtaaag ctccaacagc agataaaaac ggtgtctttt atgaggtgta tgtaaactct 180
ttttacgatg caaataaaga tggacatggt gatttaaaag gtcttacaca aaagctggat 240
tatttgaatg acggcaattc tcataccaaa aatgatcttc aagtaaacgg aatttggatg 300
atgccggtaa acccttctcc tagctatcat aaatatgatg taacggacta ttataacatt 360
gatccgcagt acggaaatct gcaagatttt cgcaagctga tgaaagaagc agataaacga 420
gacgtaaagg ttattatgga cctcgttgtg aatcatacaa gcagtgaaca tccttggttt 480
caagctgcat taaaagataa aaacagcaag tacagagatt actatatttg ggccgataaa 540
aatactgatt taaatgaaaa aggatcttgg gggcagcaag tatggcataa agctccaaac 600
ggagagtatt tttatggtac gttttgggaa ggaatgcctg acttaaatta cgataatccc 660
gaagtaagaa aagaaatgat taacgtcggg aaattttggc taaagcaagg cgttgacggg 720
ttccgcttag atgctgcgct tcatattttt aaaggtcaaa cacctgaagg cgctaagaaa 780
aatatcgtgt ggtggaatga gtttagagat gcaatgaaaa aagaaaaccc taacgtatat 840
ctaacgggtg aagtatggga tcaaccggaa gtagtagctc cttactatca atcgcttgat 900
tctttattta actttgattt agcaggaaag attgtaaact ctgtaaaatc aggaaatgat 960
caaggaatcg cgactgcagc agccgcaact gatgagctgt tcaaatcata caatccaaat 1020
aaaattgacg gcattttctt aaccaaccat gaccaaaatc gcgtcatgag tgagctaagc 1080
ggcgatgtga ataaagcaaa gtcagctgcc tctatcttac ttacgcttcc tggcaacccg 1140
tatatttatt acggtgaaga aattggaatg accggtgaaa agcctgatga gttaatccgt 1200
gaaccgttcc gctggtacga aggcaatgga cttggacaaa ccagctggga aacatccgta 1260
tacaacaaag gcggcaatgg tgtgtcagta gagacacaaa caaaacaaaa ggattctttg 1320
ttaaatcatt accgtgaaat gattcgcgtg cgtcagcagc atgaagagtt agtaaaagga 1380
acccttcaat ctatttcagt agacagtaaa gaagtcgttg cctatagccg cacgtataaa 1440
ggcaaatcga ttagcgtgta tcataatatt tcaaatcaac cggtaaaagt atctgtaaca 1500
gcgaaaggta aattgatttt tgctagtgaa aaaggtgcaa aaaaagtcaa aaatcagctt 1560
gtggttccag ctaatacaac ggttttaata aaataa 1596
<210>158
<211>531
<212>PRT
<213>环境的
<400>158
Met Gln Thr Ile Ala Lys Lys Gly Asp Glu Thr Met Lys Gly Lys Lys
1 5 10 15
Trp Thr Ala Leu Ala Leu Thr Leu Pro Leu Ala Ala Ser Leu Ser Thr
20 25 30
Gly Val His Ala Glu Thr Val His Lys Gly Lys Ala Pro Thr Ala Asp
35 40 45
Lys Asn Gly Val Phe Tyr Glu Val Tyr Val Asn Ser Phe Tyr Asp Ala
50 55 60
Asn Lys Asp Gly His Gly Asp Leu Lys Gly Leu Thr Gln Lys Leu Asp
65 70 75 80
Tyr Leu Asn Asp Gly Asn Ser His Thr Lys Asn Asp Leu Gln Val Asn
85 90 95
Gly Ile Trp Met Met Pro Val Asn Pro Ser Pro Ser Tyr His Lys Tyr
100 105 110
Asp Val Thr Asp Tyr Tyr Asn Ile Asp Pro Gln Tyr Gly Asn Leu Gln
115 120 125
Asp Phe Arg Lys Leu Met Lys Glu Ala Asp Lys Arg Asp Val Lys Val
130 135 140
Ile Met Asp Leu Val Val Asn His Thr Ser Ser Glu His Pro Trp Phe
145 150 155 160
Gln Ala Ala Leu Lys Asp Lys Asn Ser Lys Tyr Arg Asp Tyr Tyr Ile
165 170 175
Trp Ala Asp Lys Asn Thr Asp Leu Asn Glu Lys Gly Ser Trp Gly Gln
180 185 190
Gln Val Trp His Lys Ala Pro Asn Gly Glu Tyr Phe Tyr Gly Thr Phe
195 200 205
Trp Glu Gly Met Pro Asp Leu Asn Tyr Asp Asn Pro Glu Val Arg Lys
210 215 220
Glu Met Ile Asn Val Gly Lys Phe Trp Leu Lys Gln Gly Val Asp Gly
225 230 235 240
Phe Arg Leu Asp Ala Ala Leu His Ile Phe Lys Gly Gln Thr Pro Glu
245 250 255
Gly Ala Lys Lys Asn Ile Val Trp Trp Asn Glu Phe Arg Asp Ala Met
260 265 270
Lys Lys Glu Asn Pro Asn Val Tyr Leu Thr Gly Glu Val Trp Asp Gln
275 280 285
Pro Glu Val Val Ala Pro Tyr Tyr Gln Ser Leu Asp Ser Leu Phe Asn
290 295 300
Phe Asp Leu Ala Gly Lys Ile Val Asn Ser Val Lys Ser Gly Asn Asp
305 310 315 320
Gln Gly Ile Ala Thr Ala Ala Ala Ala Thr Asp Glu Leu Phe Lys Ser
325 330 335
Tyr Asn Pro Asn Lys Ile Asp Gly Ile Phe Leu Thr Asn His Asp Gln
340 345 350
Asn Arg Val Met Ser Glu Leu Ser Gly Asp Val Asn Lys Ala Lys Ser
355 360 365
Ala Ala Ser Ile Leu Leu Thr Leu Pro Gly Asn Pro Tyr Ile Tyr Tyr
370 375 380
Gly Glu Glu Ile Gly Met Thr Gly Glu Lys Pro Asp Glu Leu Ile Arg
385 390 395 400
Glu Pro Phe Arg Trp Tyr Glu Gly Asn Gly Leu Gly Gln Thr Ser Trp
405 410 415
Glu Thr Ser Val Tyr Asn Lys Gly Gly Asn Gly Val Ser Val Glu Thr
420 425 430
Gln Thr Lys Gln Lys Asp Ser Leu Leu Asn His Tyr Arg Glu Met Ile
435 440 445
Arg Val Arg Gln Gln His Glu Glu Leu Val Lys Gly Thr Leu Gln Ser
450 455 460
Ile Ser Val Asp Ser Lys Glu Val Val Ala Tyr Ser Arg Thr Tyr Lys
465 470 475 480
Gly Lys Ser Ile Ser Val Tyr His Asn Ile Ser Asn Gln Pro Val Lys
485 490 495
Val Ser Val Thr Ala Lys Gly Lys Leu Ile Phe Ala Ser Glu Lys Gly
500 505 510
Ala Lys Lys Val Lys Asn Gln Leu Val Val Pro Ala Asn Thr Thr Val
515 520 525
Leu Ile Lys
530
<210>159
<211>1587
<212>DNA
<213>环境的
<400>159
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ctgccgctgg ctgctagctt atcaacaggc gttcacgccg aaaccgtaca taaaggtaaa 120
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gtcattatgg acctcgttgt gaatcatacg agcagtgaac acccttggtt tcaagctgca 480
ttaaaagata aaaacagcaa gtacagagat tactatatct gggctgataa aaataccgac 540
ttgaatgaaa aaggatcttg gggacagcaa gtatggcata aagctccaaa cggagagtat 600
ttttacggaa cgttttggga aggaatgccg gacttaaatt acgataatcc tgaagtaaga 660
aaagaaatga ttaacgtagg aaagttttgg ctaaagcaag gagttgatgg gttccgtcta 720
gatgctgcgc ttcatatttt taaaggccaa acacctgaag gcgctaagaa aaatctcctg 780
tggtggaatg aatttagaga tgcaatgaaa aaggaaaacc ctaacgtata tctaacgggt 840
gaagtatggg atcaaccgga agtagtagct ccttactatc aatcgcttga ttctttattt 900
aactttgatt tagcaggaaa gattgtaaac tctgtaaaat caggaaatga tcaaggaatc 960
gcgactgcag cagcggcaac ggatgaactg ttcaaatcat acaatccaaa taaaattgac 1020
ggtattttct taaccaacca tgaccaaaat cgcgtcatga gtgagctaaa cggcgatgtg 1080
aataaagcaa agtcagctgc ctctatctta cttacgcttc ctggcaaccc gtatatttat 1140
tacggtgaag aaatcggcat gaccggtgaa aagcctgatg agttaatccg tgaaccgttc 1200
ccctggtacg aaggaaacgg acttggacaa accagctggg aaacacctgt atataacaaa 1260
ggcggcaacg gcgtgtctgt agaagcacaa acaaaacaaa aggactcttt gttaaatcat 1320
taccgtgaaa tgattcgcgt gcgtcagcag cacgaagagt tagtaaaagg aacgcttcaa 1380
tctatttcag tagacagtaa agaagtcgtt gcctatagcc gtacgtataa aggcaaatcg 1440
attagcgtgt atcataatat ttcaaatcaa ccggtaaaag tatctgtagc agcaaaaggt 1500
aaattgattt ttgctagtga aaaaggtgct aagaaagtca aaaatcagct tgtgattccg 1560
gcgaatacaa cggttttaat aaaataa 1587
<210>160
<211>528
<212>PRT
<213>环境的
<400>160
Met Gln Lys Lys Gly Asp Glu Thr Met Lys Gly Lys Lys Trp Thr Ala
1 5 10 15
Leu Ala Leu Thr Leu Pro Leu Ala Ala Ser Leu Ser Thr Gly Val His
20 25 30
Ala Glu Thr Val His Lys Gly Lys Ser Pro Thr Ala Asp Lys Asn Gly
35 40 45
Val Phe Tyr Glu Val Tyr Val Asn Ser Phe Tyr Asp Ala Asn Lys Asp
50 55 60
Gly His Gly Asp Leu Lys Gly Leu Thr Gln Lys Leu Asp Tyr Leu Asn
65 70 75 80
Asp Gly Asn Ser His Thr Lys Asn Asp Leu Gln Val Asn Gly Ile Trp
85 90 95
Met Met Pro Val Asn Pro Ser Pro Ser Tyr His Lys Tyr Asp Val Thr
100 105 110
Asp Tyr Tyr Asn Ile Asp Pro Gln Tyr Gly Asn Leu Gln Asp Phe Arg
115 120 125
Lys Leu Met Lys Glu Ala Asp Lys Arg Asp Val Lys Val Ile Met Asp
130 135 140
Leu Val Val Asn His Thr Ser Ser Glu His Pro Trp Phe Gln Ala Ala
145 150 155 160
Leu Lys Asp Lys Asn Ser Lys Tyr Arg Asp Tyr Tyr Ile Trp Ala Asp
165 170 175
Lys Asn Thr Asp Leu Asn Glu Lys Gly Ser Trp Gly Gln Gln Val Trp
180 185 190
His Lys Ala Pro Asn Gly Glu Tyr Phe Tyr Gly Thr Phe Trp Glu Gly
195 200 205
Met Pro Asp Leu Asn Tyr Asp Asn Pro Glu Val Arg Lys Glu Met Ile
210 215 220
Asn Val Gly Lys Phe Trp Leu Lys Gln Gly Val Asp Gly Phe Arg Leu
225 230 235 240
Asp Ala Ala Leu His Ile Phe Lys Gly Gln Thr Pro Glu Gly Ala Lys
245 250 255
Lys Asn Leu Leu Trp Trp Asn Glu Phe Arg Asp Ala Met Lys Lys Glu
260 265 270
Asn Pro Asn Val Tyr Leu Thr Gly Glu Val Trp Asp Gln Pro Glu Val
275 280 285
Val Ala Pro Tyr Tyr Gln Ser Leu Asp Ser Leu Phe Asn Phe Asp Leu
290 295 300
Ala Gly Lys Ile Val Asn Ser Val Lys Ser Gly Asn Asp Gln Gly Ile
305 310 315 320
Ala Thr Ala Ala Ala Ala Thr Asp Glu Leu Phe Lys Ser Tyr Asn Pro
325 330 335
Asn Lys Ile Asp Gly Ile Phe Leu Thr Asn His Asp Gln Asn Arg Val
340 345 350
Met Ser Glu Leu Asn Gly Asp Val Asn Lys Ala Lys Ser Ala Ala Ser
355 360 365
Ile Leu Leu Thr Leu Pro Gly Asn Pro Tyr Ile Tyr Tyr Gly Glu Glu
370 375 380
Ile Gly Met Thr Gly Glu Lys Pro Asp Glu Leu Ile Arg Glu Pro Phe
385 390 395 400
Pro Trp Tyr Glu Gly Asn Gly Leu Gly Gln Thr Ser Trp Glu Thr Pro
405 410 415
Val Tyr Asn Lys Gly Gly Asn Gly Val Ser Val Glu Ala Gln Thr Lys
420 425 430
Gln Lys Asp Ser Leu Leu Asn His Tyr Arg Glu Met Ile Arg Val Arg
435 440 445
Gln Gln His Glu Glu Leu Val Lys Gly Thr Leu Gln Ser Ile Ser Val
450 455 460
Asp Ser Lys Glu Val Val Ala Tyr Ser Arg Thr Tyr Lys Gly Lys Ser
465 470 475 480
Ile Ser Val Tyr His Asn Ile Ser Asn Gln Pro Val Lys Val Ser Val
485 490 495
Ala Ala Lys Gly Lys Leu Ile Phe Ala Ser Glu Lys Gly Ala Lys Lys
500 505 510
Val Lys Asn Gln Leu Val Ile Pro Ala Asn Thr Thr Val Leu Ile Lys
515 520 525
<210>161
<211>1623
<212>DNA
<213>细菌的
<400>161
gtggatccaa agaattgtag tcaatttatg caaacgattg caaa aaagg ggatgaaacg 60
atgaaaggga aaaaatggac agctttagct ctaacactgc cgctggctgc tagcttatca 120
acaggtgttc acgccgaaac cgtacataaa ggtaaagctc caacagcaga taaaaacggt 180
gtcttttatg aggtatatgt aaactctttt tacgatgcaa ataaagatgg acatggtgat 240
ttaaaaggcc ttacacaaaa gttggactat ttaaatgacg gaaattctca tacaaagaat 300
gatcttcaag taaacgggat ttggatgatg ccggtcaacc cttctcctag ctatcataaa 360
tatgatgtaa cggactatta taatattgat ccgcagtatg gaaatctgca agattttcgc 420
aaacttatga aagaagcaga taaacgagac gtaaaagtca ttatggacct tgttgtgaat 480
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agagattact atatttgggc tgataaaaat actgacttga atgaaaaagg atcttgggga 600
caacaagtat ggcataaagc tccaaacgga gagtattttt acggaacgtt ctgggaagga 660
atgcctgact taaattacga taaccctgaa gtaagaaaag aaatgattaa cgtcggaaag 720
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caaaatcgcg tcatgagtga gttaagcggc gatgtgaata aagcaaaatc agccgcctct 1140
atcttactta cgcttcctgg aaatccgtat atttattacg gtgaagaaat tggcatgaca 1200
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ggtgctaaga aagtcaaaaa tcagcttgtg attccggcga atgcgacggt tttaataaaa 1620
taa 1623
<210>162
<211>540
<212>PRT
<213>细菌的
<400>162
Val Asp Pro Lys Asn Cys Ser Gln Phe Met Gln Thr Ile Ala Lys Lys
1 5 10 15
Gly Asp Glu Thr Met Lys Gly Lys Lys Trp Thr Ala Leu Ala Leu Thr
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Leu Pro Leu Ala Ala Ser Leu Ser Thr Gly Val His Ala Glu Thr Val
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50 55 60
Val Tyr Val Asn Ser Phe Tyr Asp Ala Asn Lys Asp Gly His Gly Asp
65 70 75 80
Leu Lys Gly Leu Thr Gln Lys Leu Asp Tyr Leu Asn Asp Gly Asn Ser
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Ile Asp Pro Gln Tyr Gly Asn Leu Gln Asp Phe Arg Lys Leu Met Lys
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Asn Ser Lys Tyr Arg Asp Tyr Tyr Ile Trp Ala Asp Lys Asn Thr Asp
180 185 190
Leu Asn Glu Lys Gly Ser Trp Gly Gln Gln Val Trp His Lys Ala Pro
195 200 205
Asn Gly Glu Tyr Phe Tyr Gly Thr Phe Trp Glu Gly Met Pro Asp Leu
210 215 220
Asn Tyr Asp Asn Pro Glu Val Arg Lys Glu Met Ile Asn Val Gly Lys
225 230 235 240
Phe Trp Leu Lys Gln Gly Val Asp Gly Phe Arg Leu Asp Ala Ala Leu
245 250 255
His Ile Phe Lys Gly Gln Thr Pro Glu Gly Ala Lys Lys Asn Ile Leu
260 265 270
Trp Trp Asn Glu Phe Arg Asp Ala Met Lys Lys Glu Asn Pro Asn Val
275 280 285
Tyr Leu Thr Gly Glu Val Trp Asp Gln Pro Glu Val Val Ala Pro Tyr
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Tyr Gln Ser Leu Asp Ser Leu Phe Asn Phe Asp Leu Ala Gly Lys Ile
305 310 315 320
Val Ser Ser Val Lys Ala Gly Asn Asp Gln Gly Ile Ala Thr Ala Ala
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Ala Ala Thr Asp Glu Leu Phe Lys Ser Tyr Asn Pro Asn Lys Ile Asp
340 345 350
Gly Ile Phe Leu Thr Asn His Asp Gln Asn Arg Val Met Ser Glu Leu
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Ser Gly Asp Val Asn Lys Ala Lys Ser Ala Ala Ser Ile Leu Leu Thr
370 375 380
Leu Pro Gly Asn Pro Tyr Ile Tyr Tyr Gly Glu Glu Ile Gly Met Thr
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Gly Glu Lys Pro Asp Glu Leu Ile Arg Glu Pro Phe Arg Trp Tyr Glu
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Gly Asn Gly Ile Gly Gln Thr Ser Trp Glu Thr Pro Val Tyr Asn Lys
420 425 430
Gly Gly Asn Gly Val Ser Val Glu Ala Gln Thr Lys Gln Lys Asp Ser
435 440 445
Leu Leu Asn His Tyr Arg Glu Met Ile Arg Val Arg Gln Gln His Glu
450 455 460
Glu Leu Val Lys Gly Thr Leu Gln Ser Ile Ser Val Asp Ser Lys Glu
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Val Val Ala Tyr Ser Arg Thr Tyr Lys Gly Lys Ser Ile Ser Val Tyr
485 490 495
His Asn Ile Ser Asn Gln Pro Val Lys Val Ser Val Ala Ala Lys Gly
500 505 510
Asn Leu Ile Phe Ala Ser Glu Lys Gly Ala Lys Lys Val Lys Asn Gln
515 520 525
Leu Val Ile Pro Ala Asn Ala Thr Val Leu Ile Lys
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<210>163
<211>1422
<212>DNA
<213>环境的
<400>163
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<210>164
<211>473
<212>PRT
<213>环境的
<400>164
Met Val Arg Pro Glu Arg Arg Ala Ala Leu Glu Pro Thr Ile Glu Arg
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Leu Ala Ala Leu Glu Arg His Trp Val Thr Thr Val Trp He Pro Pro
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Leu Tyr Asp Leu Gly Glu Phe Asn Gln Lys Gly Thr Thr Arg Thr Lys
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Arg Ile Tyr Lys Phe Lys Ser Thr Gly Lys Ala Trp Asp Thr Asp Val
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Ser Asn Glu Asn Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Met Tyr Ala Asp Val Asp
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His Ile Ser His Ser Tyr Leu Lys Glu Trp Val Thr Ser Val Arg Gln
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Thr Thr Gly Lys Glu Met Phe Thr Val Ala Glu Tyr Trp Lys Asn Asp
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Leu Gly Ala Ile Asn Asp Tyr Leu Tyr Lys Thr Gly Tyr Thr His Ser
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Gln Asn Ala Gly Glu Val Trp Lys Asp Met Thr Asn Asn Asn Ala Arg
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Gly Ser Val Ser Ile Tyr Thr Gln Gln
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<212>DNA
<213>细菌的
<400>165
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<210>166
<211>478
<212>PRT
<213>细菌的
<400>166
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1 5 10 15
Arg Leu Arg Asn Asp Ala Glu Asn Leu Ala His Lys Gly Ile Thr Ser
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Glu Ala Leu His Asn Gln Asn Ile Asp Val Tyr Gly Asp Val Val Met
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Val Asp Arg Asn Asn Arg Asn Ile Glu Thr Ser Ser Asp Tyr Gln Ile
115 120 125
Asp Ala Trp Thr Gly Phe Asp Phe Pro Gly Arg Arg Asp Ser Tyr Ser
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Asn Phe Lys Trp Arg Trp Phe His Phe Asp Gly Thr Asp Trp Asp Glu
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Gly Arg Lys Leu Asn Arg Ile Tyr Lys Phe Lys Gly Val Gly Lys Ala
165 170 175
Trp Asp Trp Glu Val Ser Ser Glu Asn Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Met
180 185 190
Tyr Ala Asp Leu Asp Phe Asp His Pro Glu Val Ala Asn Glu Met Lys
195 200 205
Asn Trp Gly Thr Trp Tyr Ala Asp Glu Leu Asn Leu Asp Gly Phe Arg
210 215 220
Leu Asp Ala Val Lys His Ile Asp His Glu Tyr Leu Arg Asp Trp Val
225 230 235 240
Asn His Val Arg Lys Gln Thr Gly Lys Glu Met Phe Thr Val Ala Glu
245 250 255
Tyr Trp Gln Asn Asp Ile Arg Thr Leu Asn Asn Tyr Leu Gly Lys Val
260 265 270
Asn Tyr Asn Gln Ser Val Phe Asp Ala Pro Leu His Tyr Asn Phe His
275 280 285
Tyr Ala Ser Thr Gly Asn Gly Asn Tyr Asp Met Arg Asn Ile Leu Lys
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Gly Thr Val Val Glu Ser His Pro Thr Leu Ala Val Thr Leu Val Glu
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Asn His Asp Ser Gln Pro Gly Gln Ser Leu Glu Ser Val Val Ser Pro
325 330 335
Trp Phe Lys Pro Leu Ala Tyr Ala Phe Ile Leu Thr Arg Ala Glu Gly
340 345 350
Tyr Pro Ser Val Phe Tyr Gly Asp Tyr Tyr Gly Thr Asn Gly Asn Ser
355 360 365
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Ala Arg Lys Asn Phe Ala Tyr Gly Thr Gln His Asp Tyr Leu Asp His
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Pro Asp Val Ile Gly Trp Thr Arg Glu Gly Asp Ser Ile His Ala Asn
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<212>DNA
<213>环境的
<400>167
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gatccgcagt atggaaatct gcaagatttt cgcaaactga tgaaagaagc agataaacga 420
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gaagtaagaa aagaaatgat taacgtagga aagttttggc taaagcaagg agttgacggg 720
ttccgtctag atgctgcgct tcatattttt aaaggccaaa cacctgaagg cgctaagaaa 780
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tctttattta actttgattt agcaggaaag attgtaaact ctgtaaaatc aggaaatgat 960
caaggaatcg cgactgcagc agcggcaacg gatgaactgt tcaaatcata caatccaaat 1020
aaaattgacg gtattttctt aaccaaccat gaccaaaatc gcgtcatgag tgagctaagc 1080
ggcgatgtga ataaagcaaa gtcagctgcc tctatcttac ttacgcttcc tggcaacccg 1140
tatatttatt acggtgaaga aatcggcatg accggtgaaa agcctgatga gttaatccgt 1200
gaaccgttcc gctggtacga aggaaacgga cttggacaaa ccagctggga aacacctgta 1260
tacaacaaag gcggcaacgg cgtgtctgta gaagcacaaa caaaacaaaa ggactctttg 1320
ttaaatcatt accgtgaaat gattcgcgtg cgtcagcagc acgaagagtt agtaaaagga 1380
acgcttcaat ctatttcagt agacagtaaa gaagtcgttg cctatagccg cacgtataaa 1440
ggcaaatcga ttagcgtgta tcataatatt tcaaatcaac cggtaaaagt atctgtagca 1500
gcaaaaggta aattgatttt tggtagtgaa aaaggtgcta agaaagtcaa aaatcagctt 1560
gtgattccgg cgaatacaac ggttttaata aaataa 1596
<210>168
<211>531
<212>PRT
<213>环境的
<400>168
Met Gln Thr Ile Ala Lys Lys Gly Asp Glu Thr Met Lys Gly Lys Lys
1 5 10 15
Trp Thr Ala Leu Ala Leu Thr Leu Pro Leu Ala Ala Ser Leu Ser Thr
20 25 30
Gly Val His Ala Glu Thr Val His Lys Gly Lys Ser Pro Thr Ala Asp
35 40 45
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Asn Lys Asp Gly His Gly Asp Leu Lys Gly Leu Thr Gln Lys Leu Asp
65 70 75 80
Tyr Leu Asn Asp Gly Asn Ser His Thr Lys Asn Asp Leu Gln Val Asn
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Asp Phe Arg Lys Leu Met Lys Glu Ala Asp Lys Arg Asp Val Lys Val
130 135 140
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165 170 175
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180 185 190
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195 200 205
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245 250 255
Gly Ala Lys Lys Asn Leu Leu Trp Trp Asn Glu Phe Arg Asp Ala Met
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275 280 285
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340 345 350
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355 360 365
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405 410 415
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Leu Ile Lys
530
<210>169
<211>1524
<212>DNA
<213>环境的
<400>169
atgaaaacat tcaaattaaa acgcactttt ttaccgctaa ccttgctgct cagtgctcct 60
gcctttgctg ggcaaaatgg caccatgatg cagtattttc attggtatgt acctaatgat 120
ggcgcattat ggacgcaggt tgaaagcaat gctccagcac tcgctgaaaa cggttttaca 180
gcgctctggc taccgccagc ttacaaaggc gcgggcggca gtaatgacgt cggttatggc 240
gtctatgata tgtacgattt aggtgagttt gatcaaaaag gctcagtacg aaccaaatac 300
ggcaccaagg ctcagtacat ctctgcaatc aatgccgcgc acaacaacaa tatccaaatc 360
tacggcgatg ttgtgtttaa ccaccgaggt ggtgctgatg ggaagtcgtg ggtcgatacc 420
aagcgcgttg attgggacaa ccgtaacatt gaactgggcg acaaatggat tgaagcttgg 480
gttgagttta attttcctgg ccgcaacgac aaatactcaa acttccattg gacttggtat 540
cactttgacg gtgttgactg ggatgatgcc ggcaaagaaa aagcgatctt taaattcaaa 600
ggcgaaggaa aagcatggga ttgggaagtc agctctgaaa aaggcaatta cgactaccta 660
atgtacgccg atttagacat ggatcaccaa gaagttaaac aagagctgaa agattggggt 720
gagtggtaca tcaacatgac cggcgttgat ggctttagaa tggatgccgt gaagcacatt 780
aaatatcagt atctacaaga gtggattgat catttacgtt ggaaaacagg caaagagctt 840
ttcaccgttg gtgagtattg gaattacgac gtaaatcaac tgcataactt tattactaag 900
acctctggca gtatgtcgtt gttcgatgcg ccgcttcaca tgaacttcta caacgcgtca 960
aaatctggcg gcaattacga tatgcgccaa atcatgaatg gcacgttgat gaaggacaac 1020
ccagtcaaag ctgtgactct cgtagaaaac cacgatacac agccattgca ggcgttagag 1080
tcgacagtgg attggtggtt caagcctctt gcttacgcat tcattttatt gcgtgaagaa 1140
ggttatccat cagtgttcta cgcagattac tacggcgcgc agtacagcga caaaggctac 1200
aacatcaata tggccaaagt tccttacatt gaagaacttg taacactgcg taaagagtat 1260
gcgtatggca aacagaattc ttatctcgac cactgggatg tgattggctg gacccgagag 1320
ggcgatgctg aacatccaaa ctcaatggcg gtgatcatga gtgatggacc aggtggcaaa 1380
aaatggatgt ataccggtaa gccaagcacg cgctatgtcg acaagctggg tatccgaact 1440
gaagaagttt ggaccgatac caatggctgg gcagaatttc ctgtcaatgg tggttcagtc 1500
tcggtttggg tgggcgttaa gtaa 1524
<210>170
<211>507
<212>PRT
<213>环境的
<400>170
Met Lys Thr Phe Lys Leu Lys Arg Thr Phe Leu Pro Leu Thr Leu Leu
1 5 10 15
Leu Ser Ala Pro Ala Phe Ala Gly Gln Asn Gly Thr Met Met Gln Tyr
20 25 30
Phe His Trp Tyr Val Pro Asn Asp Gly Ala Leu Trp Thr Gln Val Glu
35 40 45
Ser Asn Ala Pro Ala Leu Ala Glu Asn Gly Phe Thr Ala Leu Trp Leu
50 55 60
Pro Pro Ala Tyr Lys Gly Ala Gly Gly Ser Asn Asp Val Gly Tyr Gly
65 70 75 80
Val Tyr Asp Met Tyr Asp Leu Gly Glu Phe Asp Gln Lys Gly Ser Val
85 90 95
Arg Thr Lys Tyr Gly Thr Lys Ala Gln Tyr Ile Ser Ala Ile Asn Ala
100 105 110
Ala His Asn Asn Asn Ile Gln Ile Tyr Gly Asp Val Val Phe Asn His
115 120 125
Arg Gly Gly Ala Asp Gly Lys Ser Trp Val Asp Thr Lys Arg Val Asp
130 135 140
Trp Asp Asn Arg Asn Ile Glu Leu Gly Asp Lys Trp Ile Glu Ala Trp
145 150 155 160
Val Glu Phe Asn Phe Pro Gly Arg Asn Asp Lys Tyr Ser Asn Phe His
165 170 175
Trp Thr Trp Tyr His Phe Asp Gly Val Asp Trp Asp Asp Ala Gly Lys
180 185 190
Glu Lys Ala Ile Phe Lys Phe Lys Gly Glu Gly Lys Ala Trp Asp Trp
195 200 205
Glu Val Ser Ser Glu Lys Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Met Tyr Ala Asp
210 215 220
Leu Asp Met Asp His Gln Glu Val Lys Gln Glu Leu Lys Asp Trp Gly
225 230 235 240
Glu Trp Tyr Ile Asn Met Thr Gly Val Asp Gly Phe Arg Met Asp Ala
245 250 255
Val Lys His Ile Lys Tyr Gln Tyr Leu Gln Glu Trp Ile Asp His Leu
260 265 270
Arg Trp Lys Thr Gly Lys Glu Leu Phe Thr Val Gly Glu Tyr Trp Asn
275 280 285
Tyr Asp Val Asn Gln Leu His Asn Phe Ile Thr Lys Thr Ser Gly Ser
290 295 300
Met Ser Leu Phe Asp Ala Pro Leu His Met Asn Phe Tyr Asn Ala Ser
305 310 315 320
Lys Ser Gly Gly Asn Tyr Asp Met Arg Gln Ile Met Asn Gly Thr Leu
325 330 335
Met Lys Asp Asn Pro Val Lys Ala Val Thr Leu Val Glu Asn His Asp
340 345 350
Thr Gln Pro Leu Gln Ala Leu Glu Ser Thr Val Asp Trp Trp Phe Lys
355 360 365
Pro Leu Ala Tyr Ala Phe Ile Leu Leu Arg Glu Glu Gly Tyr Pro Ser
370 375 380
Val Phe Tyr Ala Asp Tyr Tyr Gly Ala Gln Tyr Ser Asp Lys Gly Tyr
385 390 395 400
Asn Ile Asn Met Ala Lys Val Pro Tyr Ile Glu Glu Leu Val Thr Leu
405 410 415
Arg Lys Glu Tyr Ala Tyr Gly Lys Gln Asn Ser Tyr Leu Asp His Trp
420 425 430
Asp Val Ile Gly Trp Thr Arg Glu Gly Asp Ala Glu His Pro Asn Ser
435 440 445
Met Ala Val Ile Met Ser Asp Gly Pro Gly Gly Lys Lys Trp Met Tyr
450 455 460
Thr Gly Lys Pro Ser Thr Arg Tyr Val Asp Lys Leu Gly Ile Arg Thr
465 470 475 480
Glu Glu Val Trp Thr Asp Thr Asn Gly Trp Ala Glu Phe Pro Val Asn
485 490 495
Gly Gly Ser Val Ser Val Trp Val Gly Val Lys
500 505
<210>171
<211>1431
<212>DNA
<213>环境的
<400>171
gtgtatgtaa actcttttta cgatgcaaat aaagatggac atggtgattt aaaaggtctt 60
acacaaaagt tggattattt aaatgatggc aattctcata caaagaatga tcttcaagta 120
aacgggattt ggatgatgcc ggtcaaccct tctcccagct atcataaata tgatgtaacg 180
gactattata atattgatcc gcagtatgga aatctgcaag attttcgcaa actgatgaaa 240
gaagcagata aacgagatgt aaaagtcatt atggacctcg ttgtgaatca tacgagcagt 300
gaacaccctt ggtttcaagc tgcattaaaa gataaaaaca gcaagtacag agattactat 360
atctgggctg ataaaaatac cgacttgaat gaaaaaggat cttggggaca gcaagtatgg 420
cataaagccc caaacggaga gtatttttac ggaacgtttt gggaaggaat gccggactta 480
aattacgata atcctgaagt aagaaaagaa atgattaacg taggaaagtt ttggctaaag 540
caaggagttg acgggttccg tctagatgct gcgcttcata tttttaaagg ccaaacacct 600
gaaggcgcta agaaaaatct cctgtggtgg aatgaattta gagatgcaat gaaaaaggaa 660
aaccctaacg tatatctaac gggtgaagta tgggatcaac cggaagtagt agctccttac 720
tatcaatcgc ttgattcttt atttaacttt gatttagcag gaaagattgt aaactctgta 780
aaatcaggaa atgatcaagg aatcgcgact gcagcagcgg caacggatga actgttcaaa 840
tcatacaatc caaataaaat tgacggtatt ttcttaacca accatgacca aaatcgcgtc 900
atgagtgagc taagcggcga tgtgaataaa gcaaagtcag ctgcctctat cttacttacg 960
cttcctggca acccgtatat ttattacggt gaagaaatcg gcatgaccgg tgaaaagcct 1020
gatgagttaa tccgtgaacc gttccgctgg tacgaaggaa acggacttgg acaaaccagc 1080
tgggaaacac ctgtatacaa caaaggcggc aacggcgtgt ctgtagaagc acaaacaaaa 1140
caaaaggact ctttgttaaa tcattaccgt gaaatgattc gcgtgcgtca gcagcacgaa 1200
gagttagtaa aaggaacgct tcaatctatt tcagtagaca gtaaagaagt cgttgcctat 1260
agccgcacgt ataaaggcaa atcgattagc gtgtatcata atatttcaaa tcaaccggta 1320
aaagtatctg tagcagcaaa aggtaaattg atttttggta gtgaaaaagg tgctaagaaa 1380
gtcaaaaatc agcttgtgat tccggcgaat acaacggttt taataaaata a 1431
<210>172
<211>476
<212>PRT
<213>环境的
<400>172
Val Tyr Val Asn Ser Phe Tyr Asp Ala Asn Lys Asp Gly His Gly Asp
1 5 10 15
Leu Lys Gly Leu Thr Gln Lys Leu Asp Tyr Leu Asn Asp Gly Asn Ser
20 25 30
His Thr Lys Asn Asp Leu Gln Val Asn Gly Ile Trp Met Met Pro Val
35 40 45
Asn Pro Ser Pro Ser Tyr His Lys Tyr Asp Val Thr Asp Tyr Tyr Asn
50 55 60
Ile Asp Pro Gln Tyr Gly Asn Leu Gln Asp Phe Arg Lys Leu Met Lys
65 70 75 80
Glu Ala Asp Lys Arg Asp Val Lys Val Ile Met Asp Leu Val Val Asn
85 90 95
His Thr Ser Ser Glu His Pro Trp Phe Gln Ala Ala Leu Lys Asp Lys
100 105 110
Asn Ser Lys Tyr Arg Asp Tyr Tyr Ile Trp Ala Asp Lys Asn Thr Asp
115 120 125
Leu Asn Glu Lys Gly Ser Trp Gly Gln Gln Val Trp His Lys Ala Pro
130 135 140
Asn Gly Glu Tyr Phe Tyr Gly Thr Phe Trp Glu Gly Met Pro Asp Leu
145 150 155 160
Asn Tyr Asp Asn Pro Glu Val Arg Lys Glu Met Ile Asn Val Gly Lys
165 170 175
Phe Trp Leu Lys Gln Gly Val Asp Gly Phe Arg Leu Asp Ala Ala Leu
180 185 190
His Ile Phe Lys Gly Gln Thr Pro Glu Gly Ala Lys Lys Asn Leu Leu
195 200 205
Trp Trp Asn Glu Phe Arg Asp Ala Met Lys Lys Glu Asn Pro Asn Val
210 215 220
Tyr Leu Thr Gly Glu Val Trp Asp Gln Pro Glu Val Val Ala Pro Tyr
225 230 235 240
Tyr Gln Ser Leu Asp Ser Leu Phe Asn Phe Asp Leu Ala Gly Lys Ile
245 250 255
Val Asn Ser Val Lys Ser Gly Asn Asp Gln Gly Ile Ala Thr Ala Ala
260 265 270
Ala Ala Thr Asp Glu Leu Phe Lys Ser Tyr Asn Pro Asn Lys Ile Asp
275 280 285
Gly Ile Phe Leu Thr Asn His Asp Gln Asn Arg Val Met Ser Glu Leu
290 295 300
Ser Gly Asp Val Asn Lys Ala Lys Ser Ala Ala Ser Ile Leu Leu Thr
305 310 315 320
Leu Pro Gly Asn Pro Tyr Ile Tyr Tyr Gly Glu Glu Ile Gly Met Thr
325 330 335
Gly Glu Lys Pro Asp Glu Leu Ile Arg Glu Pro Phe Arg Trp Tyr Glu
340 345 350
Gly Asn Gly Leu Gly Gln Thr Ser Trp Glu Thr Pro Val Tyr Asn Lys
355 360 365
Gly Gly Asn Gly Val Ser Val Glu Ala Gln Thr Lys Gln Lys Asp Ser
370 375 380
Leu Leu Asn His Tyr Arg Glu Met Ile Arg Val Arg Gln Gln His Glu
385 390 395 400
Glu Leu Val Lys Gly Thr Leu Gln Ser Ile Ser Val Asp Ser Lys Glu
405 410 415
Val Val Ala Tyr Ser Arg Thr Tyr Lys Gly Lys Ser Ile Ser Val Tyr
420 425 430
His Asn Ile Ser Asn Gln Pro Val Lys Val Ser Val Ala Ala Lys Gly
435 440 445
Lys Leu Ile Phe Gly Ser Glu Lys Gly Ala Lys Lys Val Lys Asn Gln
450 455 460
Leu Val Ile Pro Ala Asn Thr Thr Val Leu Ile Lys
465 470 475
<210>173
<211>1596
<212>DNA
<213>环境的
<400>173
atgcaaacga ttgcaaaaaa aggggatgaa acgatgaaag ggaaaaaatg gacagcttta 60
gctctaacac tgccgctggc tgctagctta tcaacaggcg ttcacgcaga aactgtacat 120
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ttttacgatg caaataaaga tggacatggt gatttaaaag gtctgacaca aaagttggat 240
tatttaaatg acggcaattc tcatacaaag aatgatcttc aagtaaacgg gatttggatg 300
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gatcctcagt acggaagtct gcaagatttc cgcaaactga tgaaagaagc agataaacga 420
gacgtaaaag ttattatgga ccttgttgtg aatcatacga gcagtgaaca cccttggttt 480
caagctgcac taaaagataa aaacagcaag tacagagatt actatatttg ggctgataaa 540
aataccgatt tgaatgaaaa aggatcttgg ggacagcaag tatggcataa agctccaaac 600
ggagagtatt tttacggaac gttctgggaa ggaatgcctg acttaaatta cgataaccct 660
gaagtaagaa aagaaatgat taacgtcgga aagttttggc taaagcaagg cgttgatggc 720
ttccgcttag atgctgccct tcatatcttt aaaggtcaaa ctcctgaagg cgctaagaaa 780
aatctcctgt ggtggaatga gtttagagat gcaatgaaaa aagaaaaccc taacgtatat 840
ctaacgggtg aagtatggga tcagccggaa gtagtagctc cttattatca atcgcttgat 900
tccctattta actttgattt agcaggaaaa attgtcagct ctgtaaaagc aggaaatgat 960
caaggaatcg ccactgcagc agcggcaacg gatgagctgt tcaaatcata caatccaaat 1020
aaaattgacg gcattttctt aaccaaccat gaccaaaacc gcgtcatgag tgagctaagc 1080
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tatatttatt acggtgaaga aattggcatg accggtgaaa agcctgatga attaatccgt 1200
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tataacaaag gcggcaatgg tgtgtctgta gaagcacaaa ccaaacaaaa ggattctttg 1320
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ggcaactcca ttagtgtgta tcataatatt tcaaatcaac ctgtaaaagt atctgtagcg 1500
gcgaaaggta aattgatttt tgctagtgaa aaaggtgcta aaaaaggcaa aaatcagctt 1560
gtgattccgg cgaatgcgac ggttttaata aaataa 1596
<210>174
<211>531
<212>PRT
<213>环境的
<400>174
Met Gln Thr Ile Ala Lys Lys Gly Asp Glu Thr Met Lys Gly Lys Lys
1 5 10 15
Trp Thr Ala Leu Ala Leu Thr Leu Pro Leu Ala Ala Ser Leu Ser Thr
20 25 30
Gly Val His Ala Glu Thr Val His Lys Gly Lys Ala Pro Thr Ala Asp
35 40 45
Lys Asn Gly Val Phe Tyr Glu Val Tyr Val Asn Ser Phe Tyr Asp Ala
50 55 60
Asn Lys Asp Gly His Gly Asp Leu Lys Gly Leu Thr Gln Lys Leu Asp
65 70 75 80
Tyr Leu Asn Asp Gly Asn Ser His Thr Lys Asn Asp Leu Gln Val Asn
85 90 95
Gly Ile Trp Met Met Pro Val Asn Pro Ser Pro Ser Tyr His Lys Tyr
100 105 110
Asp Val Thr Asp Tyr Tyr Asn Ile Asp Pro Gln Tyr Gly Ser Leu Gln
115 120 125
Asp Phe Arg Lys Leu Met Lys Glu Ala Asp Lys Arg Asp Val Lys Val
130 135 140
Ile Met Asp Leu Val Val Asn His Thr Ser Ser Glu His Pro Trp Phe
145 150 155 160
Gln Ala Ala Leu Lys Asp Lys Asn Ser Lys Tyr Arg Asp Tyr Tyr Ile
165 170 175
Trp Ala Asp Lys Asn Thr Asp Leu Asn Glu Lys Gly Ser Trp Gly Gln
180 185 190
Gln Val Trp His Lys Ala Pro Asn Gly Glu Tyr Phe Tyr Gly Thr Phe
195 200 205
Trp Glu Gly Met Pro Asp Leu Asn Tyr Asp Asn Pro Glu Val Arg Lys
210 215 220
Glu Met Ile Asn Val Gly Lys Phe Trp Leu Lys Gln Gly Val Asp Gly
225 230 235 240
Phe Arg Leu Asp Ala Ala Leu His Ile Phe Lys Gly Gln Thr Pro Glu
245 250 255
Gly Ala Lys Lys Asn Leu Leu Trp Trp Asn Glu Phe Arg Asp Ala Met
260 265 270
Lys Lys Glu Asn Pro Asn Val Tyr Leu Thr Gly Glu Val Trp Asp Gln
275 280 285
Pro Glu Val Val Ala Pro Tyr Tyr Gln Ser Leu Asp Ser Leu Phe Asn
290 295 300
Phe Asp Leu Ala Gly Lys Ile Val Ser Ser Val Lys Ala Gly Asn Asp
305 310 315 320
Gln Gly Ile Ala Thr Ala Ala Ala Ala Thr Asp Glu Leu Phe Lys Ser
325 330 335
Tyr Asn Pro Asn Lys Ile Asp Gly Ile Phe Leu Thr Asn His Asp Gln
340 345 350
Asn Arg Val Met Ser Glu Leu Ser Gly Asp Val Asn Lys Ala Lys Ser
355 360 365
Ala Ala Ser Ile Leu Leu Thr Leu Pro Gly Asn Pro Tyr Ile Tyr Tyr
370 375 380
Gly Glu Glu Ile Gly Met Thr Gly Glu Lys Pro Asp Glu Leu Ile Arg
385 390 395 400
Glu Pro Phe Arg Trp Tyr Glu Gly Asn Gly Ile Gly Gln Thr Ser Trp
405 410 415
Glu Thr Pro Val Tyr Asn Lys Gly Gly Asn Gly Val Ser Val Glu Ala
420 425 430
Gln Thr Lys Gln Lys Asp Ser Leu Leu Asn His Tyr Arg Glu Met Ile
435 440 445
Arg Val Arg Gln Gln His Glu Glu Leu Val Lys Gly Thr Leu Gln Ser
450 455 460
Ile Ser Val Asp Ser Lys Glu Val Val Ala Tyr Ser Arg Thr Tyr Lys
465 470 475 480
Gly Asn Ser Ile Ser Val Tyr His Asn Ile Ser Asn Gln Pro Val Lys
485 490 495
Val Ser Val Ala Ala Lys Gly Lys Leu Ile Phe Ala Ser Glu Lys Gly
500 505 510
Ala Lys Lys Gly Lys Asn Gln Leu Val Ile Pro Ala Asn Ala Thr Val
515 520 525
Leu Ile Lys
530
<210>175
<211>1398
<212>DNA
<213>环境的
<400>175
atgaaaaata taatacgact ttgtgctgcc agcgctatcc tcacggtgtc ccacgccagt 60
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aatcaaattg ccgcaaatgg ctttaaaaaa gtcctcattt cacccgcaat gaaatccagc 180
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ggcaacaaac aagatttagt cgcgatgatc aatgcgctca acagcgttgg ggtcgacgtg 300
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ttcggagaag tcattaccag tggtgggcaa ggtgatagcg gctatgaggc ttttcttgcc 780
ccttacctta ataataccga tcacgccgct tatgacttcc cgctatttgc atcgattcga 840
gccgcgtttt cattctctgg tgggttaaat cagctacaca atccacaagc ctatggccaa 900
gcgttacagg actcacgtgc gatcaccttt acgattaccc acgacattcc aaccaatgac 960
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aggatgtgga aactataa 1398
<210>176
<211>465
<212>PRT
<213>环境的
<400>176
Met Lys Asn Ile Ile Arg Leu Cys Ala Ala Ser Ala Ile Leu Thr Val
1 5 10 15
Ser His Ala Ser Tyr Ala Asp Ala Ile Leu His Ala Phe Asn Trp Gln
20 25 30
Tyr Thr Asp Val Thr Ala Asn Ala Asn Gln Ile Ala Ala Asn Gly Phe
35 40 45
Lys Lys Val Leu Ile Ser Pro Ala Met Lys Ser Ser Gly Ser Gln Trp
50 55 60
Trp Ala Arg Tyr Gln Pro Gln Asp Leu Arg Val Ile Asp Ser Pro Leu
65 70 75 80
Gly Asn Lys Gln Asp Leu Val Ala Met Ile Asn Ala Leu Asn Ser Val
85 90 95
Gly Val Asp Val Tyr Ala Asp Val Val Leu Asn His Met Ala Asn Glu
100 105 110
Ser Trp Lys Arg Ser Asp Leu Asn Tyr Pro Gly Ser Glu Val Leu Asn
115 120 125
Asp Tyr Gln Ser Arg Ser Ala Tyr Tyr Gln Arg Gln Thr Leu Phe Gly
130 135 140
Asn Leu Gln Glu Asn Leu Phe Ser Glu Asn Asp Phe His Pro Ala Gly
145 150 155 160
Cys Ile Thr Asn Trp Asn Asp Pro Gly His Val Gln Tyr Trp Arg Leu
165 170 175
Cys Gly Gly Gln Gly Asp Thr Gly Leu Pro Asp Leu Asp Pro Asn Gln
180 185 190
Trp Val Val Ser Gln Gln Lys Ser Tyr Leu Asn Ala Leu Lys Ser Met
195 200 205
Gly Ile Lys Gly Phe Arg Ile Asp Ala Val Lys His Met Ser Gln Tyr
210 215 220
Gln Ile Asp Gln Val Phe Thr Pro Asp Ile Thr Ala Gly Met His Ile
225 230 235 240
Phe Gly Glu Val Ile Thr Ser Gly Gly Gln Gly Asp Ser Gly Tyr Glu
245 250 255
Ala Phe Leu Ala Pro Tyr Leu Asn Asn Thr Asp His Ala Ala Tyr Asp
260 265 270
Phe Pro Leu Phe Ala Ser Ile Arg Ala Ala Phe Ser Phe Ser Gly Gly
275 280 285
Leu Asn Gln Leu His Asn Pro Gln Ala Tyr Gly Gln Ala Leu Gln Asp
290 295 300
Ser Arg Ala Ile Thr Phe Thr Ile Thr His Asp Ile Pro Thr Asn Asp
305 310 315 320
Gly Phe Arg Tyr Gln Ile Met Asp Pro Thr Asp Glu Gln Leu Ala Tyr
325 330 335
Ala Tyr Ile Leu Gly Lys Asp Gly Gly Thr Pro Leu Val Tyr Ser Asp
340 345 350
Asp Leu Pro Asp Ser Glu Asp Lys Asp Ser Gly Arg Trp Ala Asp Val
355 360 365
Trp Gln Asp Pro Asn Met Ile Asn Met Leu Ala Phe His Asn Ala Met
370 375 380
Gln Gly Gln Ser Met Thr Val Val Ala Ser Asp Gln Cys Thr Leu Leu
385 390 395 400
Phe Lys Arg Gly Lys Gln Gly Val Val Gly Ile Asn Lys Cys Gly Glu
405 410 415
Ser Lys Ser Val Thr Val Asp Thr Tyr Gln His Glu Phe Asn Trp Tyr
420 425 430
Thr Pro Tyr Gln Asp Val Leu Ser Gly Asp Ile Thr Thr Val Ser Ser
435 440 445
Arg Tyr His Gln Phe Val Leu Pro Ala Arg Ser Ala Arg Met Trp Lys
450 455 460
Leu
465
<210>177
<211>1524
<212>DNA
<213>环境的
<400>177
atgaaaacat tcaaattaaa acgcactttt ttaccgctga ccttgctgct cagtgctcct 60
gcctttgctg ggcaaaatgg caccatgatg cagtattttc attggtacgt acctaatgat 120
ggcgcattat ggacgcaggt tgaaagcaat gctccagtac tcgctgaaaa cggttttaca 180
gcgctctggc taccgcccgc atacaaaggc gcgggcggca gtaatgacgt cggttatggc 240
gtctatgata tgtacgattt aggtgagttt gaccaaaaag gctcagtacg aaccaaatac 300
ggcaccaagg ctcagtacat ctctgcaatc aatgccgcgc acaacaacaa tatccaaatt 360
tacggcgacg ttgtgtttaa ccaccgaggt ggcgctgatg ggaagtcgtg ggtcgatacc 420
aagcgcgttg attgggacaa ccgcaatatt gaactgggcg acaaatggat tgaagcttgg 480
gttgagttta attttcctgg ccgcaacgac aaatactcga acttccattg gacttggtat 540
cactttgacg gtgttgactg ggatgatgcc ggcaaagaaa aagcgatctt taaattcaaa 600
ggcgaaggaa aagcatggga ttgggaagtc agctctgaaa aaggcaatta cgactaccta 660
atgtacgccg atttagacat ggatcaccca gaagttaaac aagagctgaa agattggggt 720
gagtggtaca tcaacatgac cggcgttgat ggctttagaa tggatgccgt gaagcacatt 780
aaatatcagt atctacaaga gtggattgat catttacgtt ggaaaacagg caaagagctt 840
ttcaccgttg gtgagtattg gaattacgac gtaaatcaac tgcacaactt tattactaag 900
acctctggca gtatgtcgtt gttcgatgcg ccgcttcaca tgaatttcta caacgcgtca 960
aaatctggcg gcacttacga tatgcgccaa atcatgaatg gcacgttgat gaaggacaac 1020
ccagtcaaag cagtgactct cgtagaaaac cacgatacgc agccattgca ggcgttagag 1080
tcgacagtag attggtggtt caagcctctt gcttacgcat tcattttatt gcgtgaagaa 1140
ggttatccat cggtgttcta cgcagattac tacggcgcgc agtacagcga caaaggttac 1200
aacattaata tggccaaagt gccttacatt gaagaacttg taacactgcg taaagagtat 1260
gcgtatggca aacagaattc ttatctcgac cattgggatg tgattggctg gacccgagag 1320
ggcgatgctg aacatccaaa ctcaatggcg gtgatcatga gtgatggacc gggcggcaca 1380
aaatggatgt ataccggtaa gccaagtacg cgctatgtcg acaagctggg tatccgaact 1440
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<210>178
<211>507
<212>PRT
<213>环境的
<400>178
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1 5 10 15
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Phe His Trp Tyr Val Pro Asn Asp Gly Ala Leu Trp Thr Gln Val Glu
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Ser Asn Ala Pro Val Leu Ala Glu Asn Gly Phe Thr Ala Leu Trp Leu
50 55 60
Pro Pro Ala Tyr Lys Gly Ala Gly Gly Ser Asn Asp Val Gly Tyr Gly
65 70 75 80
Val Tyr Asp Met Tyr Asp Leu Gly Glu Phe Asp Gln Lys Gly Ser Val
85 90 95
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115 120 125
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130 135 140
Trp Asp Asn Arg Asn Ile Glu Leu Gly Asp Lys Trp Ile Glu Ala Trp
145 150 155 160
Val Glu Phe Asn Phe Pro Gly Arg Asn Asp Lys Tyr Ser Asn Phe His
165 170 175
Trp Thr Trp Tyr His Phe Asp Gly Val Asp Trp Asp Asp Ala Gly Lys
180 185 190
Glu Lys Ala Ile Phe Lys Phe Lys Gly Glu Gly Lys Ala Trp Asp Trp
195 200 205
Glu Val Ser Ser Glu Lys Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Met Tyr Ala Asp
210 215 220
Leu Asp Met Asp His Pro Glu Val Lys Gln Glu Leu Lys Asp Trp Gly
225 230 235 240
Glu Trp Tyr Ile Asn Met Thr Gly Val Asp Gly Phe Arg Met Asp Ala
245 250 255
Val Lys His Ile Lys Tyr Gln Tyr Leu Gln Glu Trp Ile Asp His Leu
260 265 270
Arg Trp Lys Thr Gly Lys Glu Leu Phe Thr Val Gly Glu Tyr Trp Asn
275 280 285
Tyr Asp Val Asn Gln Leu His Asn Phe Ile Thr Lys Thr Ser Gly Ser
290 295 300
Met Ser Leu Phe Asp Ala Pro Leu His Met Asn Phe Tyr Asn Ala Ser
305 310 315 320
Lys Ser Gly Gly Thr Tyr Asp Met Arg Gln Ile Met Asn Gly Thr Leu
325 330 335
Met Lys Asp Asn Pro Val Lys Ala Val Thr Leu Val Glu Asn His Asp
340 345 350
Thr Gln Pro Leu Gln Ala Leu Glu Ser Thr Val Asp Trp Trp Phe Lys
355 360 365
Pro Leu Ala Tyr Ala Phe Ile Leu Leu Arg Glu Glu Gly Tyr Pro Ser
370 375 380
Val Phe Tyr Ala Asp Tyr Tyr Gly Ala Gln Tyr Ser Asp Lys Gly Tyr
385 390 395 400
Asn Ile Asn Met Ala Lys Val Pro Tyr Ile Glu Glu Leu Val Thr Leu
405 410 415
Arg Lys Glu Tyr Ala Tyr Gly Lys Gln Asn Ser Tyr Leu Asp His Trp
420 425 430
Asp Val Ile Gly Trp Thr Arg Glu Gly Asp Ala Glu His Pro Asn Ser
435 440 445
Met Ala Val Ile Met Ser Asp Gly Pro Gly Gly Thr Lys Trp Met Tyr
450 455 460
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465 470 475 480
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<212>DNA
<213>环境的
<400>179
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gagtggtaca tcaacatgac cggcgttgat ggctttagaa tggatgccgt taagcacatt 780
aaatatcagt atctacaaga gtggattgat catttacgtt ggaaaacagg caaagagctt 840
ttcaccgttg gtgagtattg gaattacgac gtaaatcaac tgcataactt tattactaag 900
acctctggca gtatgtcgtt gttcgatgcg ccgcttcaca tgaacttcta caacgcgtca 960
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gaagatgttt ggaccgatgc caatggctgg gcagaatttc ctgtcaatgg tggttcagtc 1500
tcggtttggg tgggcgttaa gtaa 1524
<210>180
<211>507
<212>PRT
<213>环境的
<400>180
Met Lys Thr Phe Lys Leu Lys Arg Thr Phe Leu Pro Leu Thr Leu Leu
1 5 10 15
Leu Ser Ala Pro Ala Phe Ala Gly Gln Asn Gly Thr Met Met Gln Tyr
20 25 30
Phe His Trp Tyr Val Pro Asn Asp Gly Ala Leu Trp Thr Gln Val Glu
35 40 45
Ser Asn Ala Pro Ala Leu Ala Glu Asn Gly Phe Thr Ala Leu Trp Leu
50 55 60
Pro Pro Ala Tyr Lys Gly Ala Gly Gly Ser Asn Asp Val Gly Tyr Gly
65 70 75 80
Val Tyr Asp Met Tyr Asp Leu Gly Glu Phe Asp Gln Lys Gly Ser Val
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Ala His Asn Asn Asn Ile Gln Ile Tyr Gly Asp Val Val Phe Asn His
115 120 125
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130 135 140
Trp Asp Asn Arg Asn Ile Glu Leu Gly Asp Lys Trp Ile Glu Ala Trp
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Trp Thr Trp Tyr His Phe Asp Gly Val Asp Trp Asp Asp Ala Gly Lys
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Glu Lys Ala Ile Phe Lys Phe Lys Gly Glu Gly Lys Ala Trp Asp Trp
195 200 205
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Leu Asp Met Asp His Pro Glu Val Lys Gln Glu Leu Lys Asp Trp Gly
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245 250 255
Val Lys His Ile Lys Tyr Gln Tyr Leu Gln Glu Trp Ile Asp His Leu
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Arg Trp Lys Thr Gly Lys Glu Leu Phe Thr Val Gly Glu Tyr Trp Asn
275 280 285
Tyr Asp Val Asn Gln Leu His Asn Phe Ile Thr Lys Thr Ser Gly Ser
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Asp Val Ile Gly Trp Tlhr Arg Glu Gly Asp Ala Glu His Pro Asn Ser
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Gly Gly Ser Val Ser Val Trp Val Gly Val Lys
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<210>181
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<212>DNA
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<400>181
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<210>182
<211>609
<212>PRT
<213>环境的
<400>182
Met Pro Glu Ala Phe Gly Leu Ala Ile Thr Pro Ser His Ser Arg Arg
1 5 10 15
Gly Arg Leu Val Gly Val Ser Arg Gly Gly Ser Leu Pro Met Pro Val
20 25 30
Leu His Trp Pro Ala Phe Ile Leu Val Arg Arg Phe Val Ala Gly His
35 40 45
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50 55 60
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Gln Ala Gly Lys Ser Pro Ala Gly Val Arg Tyr His Gly Gly Asp Glu
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100 105 110
Asp Trp Tyr Asn Ile Leu Arg Gln Gln Ala Ser Thr Ile Ala Ala Asp
115 120 125
Gly Phe Ser Ala Ile Trp Met Pro Val Pro Trp Arg Asp Phe Ser Ser
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Trp Thr Asp Gly Gly Lys Ser Gly Gly Gly Glu Gly Tyr Phe Trp His
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Asp Phe Asn Lys Asn Gly Arg Tyr Gly Ser Asp Ala Gln Leu Arg Gln
165 170 175
Ala Ala Gly Ala Leu Gly Gly Ala Gly Val Lys Val Leu Tyr Asp Val
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195 200 205
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Tyr Pro Asn Asp Cys Asp Asp Gly Asp Arg Phe Ile Gly Gly Lys Ser
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Leu Ala Asn Leu Arg Ser Gly Tyr Gly Ala Gly Gly Phe Arg Phe Asp
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Ser Ala Asp Ser Ser Phe Cys Val Gly Glu Leu Trp Lys Ser Pro Ser
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Ile Lys Asp Trp Ser Asp Arg Ala Lys Cys Pro Val Phe Asp Phe Ala
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Leu Lys Glu Arg Met Gln Asn Gly Ser Val Ala Asp Trp Lys His Gly
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435 440 445
Ser Gly Leu Val Ala Thr Val Ser Gly Ser His Gln Thr Leu Val Val
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Phe Ser Glu Ala Val Asn Ala Ser Asn Gly Gln Val Arg Val Trp Arg
485 490 495
Ser Gly Ser Gly Asp Gly Gly Gly Asn Asp Gly Gly Glu Gly Gly Leu
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Ser Val Tyr Ala Val Gly Asn Val Ser Gln Leu Gly Asn Trp Ser Pro
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Ala Ser Ala Val Arg Leu Thr Asp Thr Ser Ser Tyr Pro Thr Trp Lys
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Gly Ser Ile Ala Leu Pro Asp Gly Gln Asn Val Glu Trp Lys Cys Leu
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Ile Arg Asn Glu Ala Asp Ala Thr Leu Val Arg Gln Trp Gln Ser Gly
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Gly Asn Asn Gln Val Gln Ala Ala Ala Gly Ala Ser Thr Ser Gly Ser
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Phe
<210>183
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<212>DNA
<213>环境的
<400>183
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ttccgcttag atgctgcgct tcatattttt aaaggtcaaa cacctgaagg cgctaagaaa 780
aatatcctgt ggtggaatga gtttagagat gcgatgaaaa aagaaaaccc taacgtatat 840
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<400>184
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Gln Ala Ala Leu Lys Asp Lys Asn Ser Lys Tyr Arg Asp Tyr Tyr Ile
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180 185 190
Gln Val Trp His Lys Ala Pro Asn Gly Glu Tyr Phe Tyr Gly Thr Phe
195 200 205
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275 280 285
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325 330 335
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370 375 380
Gly Glu Glu Ile Gly Met Thr Gly Glu Lys Pro Asp Glu Leu Ile Arg
385 390 395 400
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405 410 415
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420 425 430
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435 440 445
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450 455 460
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485 490 495
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agcttatcaa caggcgttca cgccgaaact gtacataaag gtaaagctcc aacagcagat 120
aaaaacggtg tcttttatga ggtgtatgta aactcttttt acgatgcaaa taaagatgga 180
catggtgatt taaaaggtct tacacaaaag ctggactatt taaatgacgg aaattctcat 240
acaaagaatg atcttcaagt aaacgggatt tggatgatgc cagtcaaccc ttctcctagc 300
tatcataaat atgatgtaac ggattattat aacattgatc cgcagtacgg aaatctgcaa 360
gattttcgca agctgatgaa agaagcagac aaacgagacg taaaagtcat tatggacctt 420
gttgtgaatc atacgagcag cgaacaccct tggtttcaag ctgcgttaaa agataaaaac 480
agcaagtaca gagattacta tatttgggct gataaaaata ccgacttgaa tgaaaaagga 540
tcttggggac agcaagtatg gcataaagct ccaaacggag agtattttta cggaacgttt 600
tgggaaggaa tgcctgactt aaattacgat aaccctgaag taagaaa ga aatgattaac 660
gtcggaaagt tttggctaaa gcaaggcgtt gatggcttcc gcttagatgc tgcgcttcat 720
atttttaaag gtcaaacgcc tgaaggcgct aagaaaaata ttctgtggtg gaatgagttt 780
agagatgcga tgaaaaaaga aaaccctaac gtatatctaa cgggtgaagt atgggatcag 840
cctgaagtgg tagctcctta ctatcaatcg cttgattccc tatttaactt tgatttagca 900
gggaaaattg tcagttctgt aaaagcagga aatgatcaag gaatcgccac tgcagcagcg 960
gcaacggatg agctgttcaa atcatacaat ccaaa aaaa ttgacggcat tttcttaacc 1020
aaccatgacc aaaaccgcgt catgagtgaa ctgatcggcg atgtgaacaa agcaaaatca 1080
gctgcttcta tcttacttac gcttcctggc aacccgtata tttattacgg tgaagaaatt 1140
ggcatgaccg gtgaaaagcc tgatgagtta atccgtgaac cgttccgctg gtacgaagga 1200
aacggacttg gacaaaccag ctgggaaaca cctgtatata acaaaggcgg caacggcgtg 1260
tctgtagaag cacaaaccaa acaaaaggat tctttgttaa atcattaccg tgaaatgatt 1320
cgcgtgcgtc agcagcatga agagttagta aaaggaacgc ttcaatctat tttagtagac 1380
agtaaagaag ttgttgccta tagccgtacg tataaagaca actcgattag cgtgtatcat 1440
aatatttcaa atcaaccggt aaaagtatct gtagcagcaa aaggtaaatt aatttttgct 1500
agtgaaaaag gtgctaaaaa agtcaagaat cagcttgtga ttccggctaa tacaacggtt 1560
ttaataaaat aa 1572
<210>186
<211>523
<212>PRT
<213>环境的
<400>186
Met Lys Leu Met Lys Gly Lys Lys Trp Thr Ala Leu Ala Leu Thr Leu
1 5 10 15
Pro Leu Ala Ala Ser Leu Ser Thr Gly Val His Ala Glu Thr Val His
20 25 30
Lys Gly Lys Ala Pro Thr Ala Asp Lys Asn Gly Val Phe Tyr Glu Val
35 40 45
Tyr Val Asn Ser Phe Tyr Asp Ala Asn Lys Asp Gly His Gly Asp Leu
50 55 60
Lys Gly Leu Thr Gln Lys Leu Asp Tyr Leu Asn Asp Gly Asn Ser His
65 70 75 80
Thr Lys Asn Asp Leu Gln Val Asn Gly Ile Trp Met Met Pro Val Asn
85 90 95
Pro Ser Pro Ser Tyr His Lys Tyr Asp Val Thr Asp Tyr Tyr Asn Ile
100 105 110
Asp Pro Gln Tyr Gly Asn Leu Gln Asp Phe Arg Lys Leu Met Lys Glu
115 120 125
Ala Asp Lys Arg Asp Val Lys Val Ile Met Asp Leu Val Val Asn His
130 135 140
Thr Ser Ser Glu His Pro Trp Phe Gln Ala Ala Leu Lys Asp Lys Asn
145 150 155 160
Ser Lys Tyr Arg Asp Tyr Tyr Ile Trp Ala Asp Lys Asn Thr Asp Leu
165 170 175
Asn Glu Lys Gly Ser Trp Gly Gln Gln Val Trp His Lys Ala Pro Asn
180 185 190
Gly Glu Tyr Phe Tyr Gly Thr Phe Trp Glu Gly Met Pro Asp Leu Asn
195 200 205
Tyr Asp Asn Pro Glu Val Arg Lys Glu Met Ile Asn Val Gly Lys Phe
210 215 220
Trp Leu Lys Gln Gly Val Asp Gly Phe Arg Leu Asp Ala Ala Leu His
225 230 235 240
Ile Phe Lys Gly Gln Thr Pro Glu Gly Ala Lys Lys Asn Ile Leu Trp
245 250 255
Trp Asn Glu Phe Arg Asp Ala Met Lys Lys Glu Asn Pro Asn Val Tyr
260 265 270
Leu Thr Gly Glu Val Trp Asp Gln Pro Glu Val Val Ala Pro Tyr Tyr
275 280 285
Gln Ser Leu Asp Ser Leu Phe Asn Phe Asp Leu Ala Gly Lys Ile Val
290 295 300
Ser Ser Val Lys Ala Gly Asn Asp Gln Gly Ile Ala Thr Ala Ala Ala
305 310 315 320
Ala Thr Asp Glu Leu Phe Lys Ser Tyr Asn Pro Asn Lys Ile Asp Gly
325 330 335
Ile Phe Leu Thr Asn His Asp Gln Asn Arg Val Met Ser Glu Leu Ile
340 345 350
Gly Asp Val Asn Lys Ala Lys Ser Ala Ala Ser Ile Leu Leu Thr Leu
355 360 365
Pro Gly Asn Pro Tyr Ile Tyr Tyr Gly Glu Glu Ile Gly Met Thr Gly
370 375 380
Glu Lys Pro Asp Glu Leu Ile Arg Glu Pro Phe Arg Trp Tyr Glu Gly
385 390 395 400
Asn Gly Leu Gly Gln Thr Ser Trp Glu Thr Pro Val Tyr Asn Lys Gly
405 410 415
Gly Asn Gly Val Ser Val Glu Ala Gln Thr Lys Gln Lys Asp Ser Leu
420 425 430
Leu Asn His Tyr Arg Glu Met Ile Arg Val Arg Gln Gln His Glu Glu
435 440 445
Leu Val Lys Gly Thr Leu Gln Ser Ile Leu Val Asp Ser Lys Glu Val
450 455 460
Val Ala Tyr Ser Arg Thr Tyr Lys Asp Asn Ser Ile Ser Val Tyr His
465 470 475 480
Asn Ile Ser Asn Gln Pro Val Lys Val Ser Val Ala Ala Lys Gly Lys
485 490 495
Leu Ile Phe Ala Ser Glu Lys Gly Ala Lys Lys Val Lys Asn Gln Leu
500 505 510
Val Ile Pro Ala Asn Thr Thr Val Leu Ile Lys
515 520
<210>187
<211>2052
<212>DNA
<213>环境的
<400>187
atgtatctca tccaggaggg gcacatgcgt tttccgccca ttattcaccc gcttaccggc 60
ctggccgttc cggttggagc tctgcgtacc gcacagagct gcggcatagg ggagtttgcc 120
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cacccgctgt atatcaggct ttccgacctg cctgaagcag cgggtttcga aaagcagatt 300
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gccaaactgg atatcctgcg tgcagtgttt gataaaaaca aggcaaccat catcggcagt 420
gccgaactgg aagcctggat ttcagataac ccctggatca tcgaatatgc ggtttttatg 480
aaccagaaac accgcaactt tgaagccggc tggaaacatt gggaaaagct gcgcaacccc 540
actcataacg aaatacaaaa aacctggcag ggtaaaacct ggcaggctga ccatcaattc 600
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gccctgggtg tctatcttaa gggcgatata cctataatga tgaacgagga ttccgcagat 720
gcctgggcga atccggaatt cttccgtgac gatcttcggg ccggaagtcc ccctgacggt 780
gaaaaccccc agggacaaaa ctggggcttc cccatttata actgggaaaa ccttgcaaat 840
gacgggtaca gctggtggaa aaaacgtctg aagcacagcg cacggtatta ccatgcctac 900
cgcattgacc atattcttgg gtttttccgg atatgggcta taccctatgg cgaatactcc 960
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ggcttttcca aggaccgctt gcgctggctt accgaacccc acttgcctac acgggcagcc 1080
gaggaagcga ataactggga ctatctggga acacacggct atctgaatca gatcatgaac 1140
cgtatcggtg aagaagaact atggctgttc aagcccgaga tcacctgcga ggcagatata 1200
cgaaacacaa acctgccgga tgccctgaaa gaggttctgg tacggcagtg gaaaaaccgg 1260
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ttccgtgaca gcactgcatg gcagacgctt accgatggcg agaaacactc cctggaagag 1380
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caacttataa ccgcaatcca gaccgcgttg caggaccgcc gggcgaggaa ggcacaagga 2040
gcacagcaat ga 2052
<210>188
<211>683
<212>PRT
<213>环境的
<400>188
Met Tyr Leu Ile Gln Glu Gly His Met Arg Phe Pro Pro Ile Ile His
1 5 10 15
Pro Leu Thr Gly Leu Ala Val Pro Val Gly Ala Leu Arg Thr Ala Gln
20 25 30
Ser Cys Gly Ile Gly Glu Phe Ala Asp Leu Pro Val Leu Ala Glu Phe
35 40 45
Cys Lys Lys Ala Gly Phe Asp Leu Val Gln Leu Leu Pro Val Asn Asp
50 55 60
Thr Gly Thr Glu Ser Ser Pro Tyr Ser Ala Leu Ser Ala Phe Ala Leu
65 70 75 80
His Pro Leu Tyr Ile Arg Leu Ser Asp Leu Pro Glu Ala Ala Gly Phe
85 90 95
Glu Lys Gln Ile Thr Asp Leu Lys Ser Arg Phe Glu Asp Leu Pro Arg
100 105 110
Phe Ser Tyr Thr Glu Leu Arg Arg Ala Lys Leu Asp Ile Leu Arg Ala
115 120 125
Val Phe Asp Lys Asn Lys Ala Thr Ile Ile Gly Ser Ala Glu Leu Glu
130 135 140
Ala Trp Ile Ser Asp Asn Pro Trp Ile Ile Glu Tyr Ala Val Phe Met
145 150 155 160
Asn Gln Lys His Arg Asn Phe Glu Ala Gly Trp Lys His Trp Glu Lys
165 170 175
Leu Arg Asn Pro Thr His Asn Glu Ile Gln Lys Thr Trp Gln Gly Lys
180 185 190
Thr Trp Gln Ala Asp His Gln Phe Phe Ala Trp Leu Gln Met Arg Leu
195 200 205
Asp Gln Gln Phe Thr Ala Ala Ala Thr Glu Cys Asn Ala Leu Gly Val
210 215 220
Tyr Leu Lys Gly Asp Ile Pro Ile Met Met Asn Glu Asp Ser Ala Asp
225 230 235 240
Ala Trp Ala Asn Pro Glu Phe Phe Arg Asp Asp Leu Arg Ala Gly Ser
245 250 255
Pro Pro Asp Gly Glu Asn Pro Gln Gly Gln Asn Trp Gly Phe Pro Ile
260 26 270
Tyr Asn Trp Glu Asn Leu Ala Asn Asp Gly Tyr Ser Trp Trp Lys Lys
275 280 285
Arg Leu Lys His Ser Ala Arg Tyr Tyr His Ala Tyr Arg Ile Asp His
290 295 300
Ile Leu Gly Phe Phe Arg Ile Trp Ala Ile Pro Tyr Gly Glu Tyr Ser
305 310 315 320
Gly Tyr Leu Gly Trp Pro Leu Pro His Glu Pro Val Ser Ala Ala Glu
325 330 335
Leu Ala Glu Arg Gly Phe Ser Lys Asp Arg Leu Arg Trp Leu Thr Glu
340 345 350
Pro His Leu Pro Thr Arg Ala Ala Glu Glu Ala Asn Asn Trp Asp Tyr
355 360 365
Leu Gly Thr His Gly Tyr Leu Asn Gln Ile Met Asn Arg Ile Gly Glu
370 375 380
Glu Glu Leu Trp Leu Phe Lys Pro Glu Ile Thr Cys Glu Ala Asp Ile
385 390 395 400
Arg Asn Thr Asn Leu Pro Asp Ala Leu Lys Glu Val Leu Val Arg Gln
405 410 415
Trp Lys Asn Arg Leu Leu Gln Val Thr Gly Arg Asp Glu Lys Gly Arg
420 425 430
Thr Ile Tyr Tyr Pro Leu Trp Arg Phe Arg Asp Ser Thr Ala Trp Gln
435 440 445
Thr Leu Thr Asp Gly Glu Lys His Ser Leu Glu Glu Leu Phe Ala Gln
450 455 460
Lys Ala Ala His Asn Glu Thr Leu Trp Arg Glu Gln Ala Val Glu Leu
465 470 475 480
Leu Gly Glu Leu Thr Arg Ser Thr Asp Met Leu Ala Cys Ala Glu Asp
485 490 495
Leu Gly Ser Ile Pro His Ser Val Pro Glu Val Leu Ser Asn Leu Ser
500 505 510
Ile Tyr Ser Leu Arg Val Thr Arg Trp Ala Arg Gln Trp Asp Ala Pro
515 520 525
Gly Gln Pro Phe His Arg Leu Glu Glu Tyr Pro Leu Met Ser Val Ala
530 535 540
Thr Pro Ser Val His Asp Ser Ser Thr Leu Arg Gly Trp Trp Glu Thr
545 550 555 560
Glu Gly Gly Asp Arg Ala Phe Met Asp Ala Trp Pro Pro Glu Gln Asp
565 570 575
Ala Tyr Ala Gly Ala Gly Arg His Glu Phe Glu Gly Ala Trp Gly Pro
580 585 590
Arg Gln Ala Ser Trp Val Leu Arg Lys Leu Cys Glu Ala Arg Ser Ala
595 600 605
Leu Cys Val Phe Pro Ile Gln Asp Ile Leu Ala Leu Ser Ser Asp Phe
610 615 620
Tyr Ala Met Thr Ala Asp Glu Glu Arg Ile Asn Ile Pro Gly Ser Val
625 630 635 640
Ser Gly Phe Asn Trp Thr Tyr Arg Leu Pro Ala Ala Ile Glu Asp Leu
645 650 655
Ser Lys Asn Ser Gln Leu Ile Thr Ala Ile Gln Thr Ala Leu Gln Asp
660 665 670
Arg Arg Ala Arg Lys Ala Gln Gly Ala Gln Gln
675 680
<210>189
<211>1596
<212>DNA
<213>环境的
<400>189
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gctctaacac tgccgctggc tgctagctta tcaacaggcg ttcacgccga aaccgtacat 120
aaaggtaaat ctccagctgc agataaaaac ggtgtctttt atgaggtgta tgtaaactct 180
ttttacgatg caaataaaga tggacatggt gatttaaaag gtcttacaca aaaactggac 240
tatttaaatg atggcaattc tcatacaaag aatgatcttc aagtaaacgg gatttggatg 300
atgccgatca acccttctcc tagctatcat aaatatgatg taacggacta ttataacatt 360
gattctcagt acggaaatct gcaagatttt cgcaagctaa tgaaagaagc agataaacga 420
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caagctgcgt taaaagataa aaacagcaag tacagagatt actatatttg ggctgataaa 540
aataccgatt tgaatgaaaa aggatcttgg ggacaacaag tatggcacaa agctccaaac 600
ggagagtatt tttacggaac gttctgggaa ggaatgcctg acttaaatta cgataaccct 660
gaagtaagaa aagaaatgat taacgtcgga aagttttggc taaagcaagg cgttgacggc 720
ttccgcttag atgctgccct tcatatcttt aaaggtcaaa cacctgaagg cgctaagaaa 780
aatattgtgt ggtggaatga atttagagat gcgatgaaaa aagaaaaccc gaacgtatat 840
ctaacgggcg aagtatggga tcagccggaa gtggtagctc cttattatca gtcgcttgat 900
tccctattta actttgattt agcaggaaaa attgtcagct ctgtaaaagc aggaaatgat 960
caaggaatcg ctactgcagc agcggcaaca gatgaactgt tcaaatcata caatccaaat 1020
aaaattgacg gcattttctt aaccaatcat gaccaaaatc gcgtcatgag tgagttaagc 1080
ggagatgtca ataaagcaaa gtcagctgcc tctatcttac ttacgcttcc tggaaatccg 1140
tatatttatt acggtgaaga aatcggcatg accggtgaaa agcctgatga attaatccgt 1200
gaaccgttcc gctggtacga aggaaacgga cttggacaaa ctagttggga aacacctgta 1260
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ggcaactcca ttagtgtgta tcataatatt tcaaatcaac ctgtaaaagt atctgtagca 1500
gcgaaaggta aattgatttt tgctagtgaa aaaggtgcta aaaaggtcaa aaatcagctt 1560
gtgattccgg cgaatacaac ggttttagta aaataa 1596
<210>190
<211>531
<212>PRT
<213>环境的
<400>190
Met Gln Thr Ile Ala Lys Lys Gly Asp Glu Thr Met Lys Gly Lys Lys
1 5 10 15
Trp Thr Ala Leu Ala Leu Thr Leu Pro Leu Ala Ala Ser Leu Ser Thr
20 25 30
Gly Val His Ala Glu Thr Val His Lys Gly Lys Ser Pro Ala Ala Asp
35 40 45
Lys Asn Gly Val Phe Tyr Glu Val Tyr Val Asn Ser Phe Tyr Asp Ala
50 55 60
Asn Lys Asp Gly His Gly Asp Leu Lys Gly Leu Thr Gln Lys Leu Asp
65 70 75 80
Tyr Leu Asn Asp Gly Asn Ser His Thr Lys Asn Asp Leu Gln Val Asn
85 90 95
Gly Ile Trp Met Met Pro Ile Asn Pro Ser Pro Ser Tyr His Lys Tyr
100 105 110
Asp Val Thr Asp Tyr Tyr Asn Ile Asp Ser Gln Tyr Gly Asn Leu Gln
115 120 125
Asp Phe Arg Lys Leu Met Lys Glu Ala Asp Lys Arg Asp Val Lys Val
130 135 140
Ile Met Asp Leu Val Val Asn His Thr Ser Ser Glu His Pro Trp Phe
145 150 155 160
Gln Ala Ala Leu Lys Asp Lys Asn Ser Lys Tyr Arg Asp Tyr Tyr Ile
165 170 175
Trp Ala Asp Lys Asn Thr Asp Leu Asn Glu Lys Gly Ser Trp Gly Gln
180 185 190
Gln Val Trp His Lys Ala Pro Asn Gly Glu Tyr Phe Tyr Gly Thr Phe
195 200 205
Trp Glu Gly Met Pro Asp Leu Asn Tyr Asp Asn Pro Glu Val Arg Lys
210 215 220
Glu Met Ile Asn Val Gly Lys Phe Trp Leu Lys Gln Gly Val Asp Gly
225 230 235 240
Phe Arg Leu Asp Ala Ala Leu His Ile Phe Lys Gly Gln Thr Pro Glu
245 250 255
Gly Ala Lys Lys Asn Ile Val Trp Trp Asn Glu Phe Arg Asp Ala Met
260 265 270
Lys Lys Glu Asn Pro Asn Val Tyr Leu Thr Gly Glu Val Trp Asp Gln
275 280 285
Pro Glu Val Val Ala Pro Tyr Tyr Gln Ser Leu Asp Ser Leu Phe Asn
290 295 300
Phe Asp Leu Ala Gly Lys Ile Val Ser Ser Val Lys Ala Gly Asn Asp
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Gln Gly Ile Ala Thr Ala Ala Ala Ala Thr Asp Glu Leu Phe Lys Ser
325 330 335
Tyr Asn Pro Asn Lys Ile Asp Gly Ile Phe Leu Thr Asn His Asp Gln
340 345 350
Asn Arg Val Met Ser Glu Leu Ser Gly Asp Val Asn Lys Ala Lys Ser
355 360 365
Ala Ala Ser Ile Leu Leu Thr Leu Pro Gly Asn Pro Tyr Ile Tyr Tyr
370 375 380
Gly Glu Glu Ile Gly Met Thr Gly Glu Lys Pro Asp Glu Leu Ile Arg
385 390 395 400
Glu Pro Phe Arg Trp Tyr Glu Gly Asn Gly Leu Gly Gln Thr Ser Trp
405 410 415
Glu Thr Pro Val Tyr Asn Lys Gly Gly Asn Gly Val Ser Val Glu Ala
420 425 430
Gln Thr Lys Gln Lys Asp Ser Leu Leu Asn His Tyr Arg Glu Met Ile
435 440 445
Arg Val Arg Gln Gln His Glu Glu Leu Val Lys Gly Thr Leu Gln Ser
450 455 460
Ile Ser Val Asp Ser Lys Glu Val Val Ala Tyr Ser Arg Thr Tyr Lys
465 470 475 480
Gly Asn Ser Ile Ser Val Tyr His Asn Ile Ser Asn Gln Pro Val Lys
485 490 495
Val Ser Val Ala Ala Lys Gly Lys Leu Ile Phe Ala Ser Glu Lys Gly
500 505 510
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515 520 525
Leu Val Lys
530
<210>191
<211>1596
<212>DNA
<213>环境的
<400>191
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ttccgcttag atgctgcgct tcatattttt aaaggtcaaa cagctgaagg cgctaagaaa 780
aatatcctgt ggtggaatga gtttagagat gcgatgaaaa aagaaaatcc gaatgtatat 840
ctaacgggtg aagtatggga tcagcctgaa gtggtagctc cttattatca atcgcttgat 900
tctttattta attttgattt agcaggaaaa attgtcagct ctgtaaaagc aggaaatgat 960
caaggaatcg ccactgcagc agcagcaaca gatgaactgt tcaaatcata caatccaaac 1020
aaaattgatg gcatattctt aaccaaccat gaccaaaatc gcgtcatgag tgagctgagc 1080
ggcgatgtga gcaaagcaaa atcagctgct tctatcttac ttacgcttcc tggcaacccg 1140
tatatttatt acggtgaaga aatcggcatg accggtgaaa agcctgatga attaatccgt 1200
gaaccgttcc gctggtacga aggaaacgga cttggacaaa ccagttggga aacacctgta 1260
tacaataaag gcggaaacgg tgtgtctgta gaagcacaaa ccaaacaaaa ggattctttg 1320
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ggcaactcca ttagtgtgta tcataatatt tcaaatcaac cggtaaaagt atctgtagca 1500
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<210>192
<211>531
<212>PRT
<213>环境的
<400>192
Met Gln Thr Ile Ala Lys Lys Gly Asp Glu Thr Met Lys Gly Lys Lys
1 5 10 15
Trp Thr Ala Leu Ala Leu Thr Leu Pro Leu Ala Ala Ser Leu Ser Thr
20 25 30
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35 40 45
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115 120 125
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130 135 140
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145 150 155 160
Gln Ala Ala Leu Lys Asp Lys Asn Ser Lys Tyr Arg Asp Tyr Tyr Ile
165 170 175
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180 185 190
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195 200 205
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210 215 220
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225 230 235 240
Phe Arg Leu Asp Ala Ala Leu His Ile Phe Lys Gly Gln Thr Ala Glu
245 250 255
Gly Ala Lys Lys Asn Ile Leu Trp Trp Asn Glu Phe Arg Asp Ala Met
260 265 270
Lys Lys Glu Asn Pro Asn Val Tyr Leu Thr Gly Glu Val Trp Asp Gln
275 280 285
Pro Glu Val Val Ala Pro Tyr Tyr Gln Ser Leu Asp Ser Leu Phe Asn
290 295 300
Phe Asp Leu Ala Gly Lys Ile Val Ser Ser Val Lys Ala Gly Asn Asp
305 310 315 320
Gln Gly Ile Ala Thr Ala Ala Ala Ala Thr Asp Glu Leu Phe Lys Ser
325 330 335
Tyr Asn Pro Asn Lys Ile Asp Gly Ile Phe Leu Thr Asn His Asp Gln
340 345 350
Asn Arg Val Met Ser Glu Leu Ser Gly Asp Val Ser Lys Ala Lys Ser
355 360 365
Ala Ala Ser Ile Leu Leu Thr Leu Pro Gly Asn Pro Tyr Ile Tyr Tyr
370 375 380
Gly Glu Glu Ile Gly Met Thr Gly Glu Lys Pro Asp Glu Leu Ile Arg
385 390 395 400
Glu Pro Phe Arg Trp Tyr Glu Gly Asn Gly Leu Gly Gln Thr Ser Trp
405 410 415
Glu Thr Pro Val Tyr Asn Lys Gly Gly Asn Gly Val Ser Val Glu Ala
420 425 430
Gln Thr Lys Gln Lys Asp Ser Leu Leu Asn His Tyr Arg Glu Met Ile
435 440 445
Arg Val Arg Gln Gln His Glu Glu Leu Val Lys Gly Thr Leu Gln Ser
450 455 460
Ile Ser Val Asp Ser Lys Glu Val Val Ala Tyr Ser Arg Thr Tyr Lys
465 470 475 480
Gly Asn Ser Ile Ser Val Tyr His Asn Ile Ser Asn Gln Pro Val Lys
485 490 495
Val Ser Val Ala Ala Lys Gly Lys Leu Ile Phe Ala Ser Glu Lys Gly
500 505 510
Ala Lys Lys Val Lys Asn Gln Leu Val Val Pro Ala Asn Thr Thr Val
515 520 525
Leu Met Lys
530
<210>193
<211>1962
<212>DNA
<213>环境的
<400>193
atgaaattca aaaagagttt atctgccggg ctccttttgt tcggaggtct gagcggtgtg 60
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gttagttact cttttgaagg gcgcagtgga acccgggctc aatttgcgga tatggtccag 300
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caagatcgct attttccaga agtaccttac agcagtaatg attttcacag ttgcacgggc 420
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ctcggtaacg tgtttactct ggcgtatcct tacggctacc caaaagtgat gtcggggtac 960
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tttgacagcc agacgaaggc catcaccgtg acttcgcagt aa 1962
<210>194
<211>653
<212>PRT
<213>环境的
<400>194
Met Lys Phe Lys Lys Ser Leu Ser Ala Gly Leu Leu Leu Phe Gly Gly
1 5 10 15
Leu Ser Gly Val Thr Pro Ser Val Ala Ala Glu Val Pro Arg Thr Ala
20 25 30
Phe Val His Leu Phe Glu Trp Ser Trp Pro Asp Ile Ala Thr Glu Cys
35 40 45
Glu Thr Phe Leu Gly Pro Lys Gly Phe Ser Ala Val Gln Val Ser Pro
50 55 60
Pro Gln Lys Ser Val Ser Asn Ala Ala Trp Trp Ala Arg Tyr Gln Pro
65 70 75 80
Val Ser Tyr Ser Phe Glu Gly Arg Ser Gly Thr Arg Ala Gln Phe Ala
85 90 95
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100 105 110
Ala Val Ile Asn His Met Ala Ala Gln Asp Arg Tyr Phe Pro Glu Val
115 120 125
Pro Tyr Ser Ser Asn Asp Phe His Ser Cys Thr Gly Asp Ile Asp Tyr
130 135 140
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Leu Lys Thr Glu Ser Glu Tyr Val Arg Gln Lys Ile Ala Asp Tyr Met
165 170 175
Asn Asp Ala Leu Ser Leu Gly Val Ala Gly Phe Arg Ile Asp Ala Ala
180 185 190
Lys His Ile Pro Ala Gly Asp Ile Ala Ala Ile Lys Ser Lys Leu Asn
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210 215 220
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Phe Ala Arg Thr Ile Gly Pro Lys Phe Lys Gln Gly Asn Ile Lys Asp
245 250 255
Leu Gln Gly Ile Gly Ser Trp Ser Gly Trp Leu Ser Ser Asp Asp Ala
260 265 270
Val Thr Phe Val Thr Asn His Asp Glu Glu Arg His Asn Pro Gly Gln
275 280 285
Val Leu Ser His Gln Asp Phe Gly Asn Leu Tyr Phe Leu Gly Asn Val
290 295 300
Phe Thr Leu Ala Tyr Pro Tyr Gly Tyr Pro Lys Val Met Ser Gly Tyr
305 310 315 320
Tyr Phe Ser Asn Phe Asp Ala Gly Pro Pro Ser Thr Gly Val His Ser
325 330 335
Gly Asn Ala Cys Gly Phe Asp Gly Gly Asp Trp Val Cys Glu His Lys
340 345 350
Trp Arg Gly Val Ala Asn Met Val Ala Phe Arg Asn His Thr Ala Ala
355 360 365
Gln Trp Gln Val Thr Asp Trp Trp Asp Asp Gly Tyr Asn Gln Val Ala
370 375 380
Phe Gly Arg Gly Gly Leu Gly Phe Val Val Ile Asn Arg Asp Asp Asn
385 390 395 400
Lys Gly Ile Asn Gln Ser Phe Gln Thr Gly Met Pro Ala Gly Glu Tyr
405 410 415
Cys Asp Ile Ile Ala Gly Asp Phe Asp Thr Gln Ser Gly His Cys Ser
420 425 430
Ala Thr Thr Ile Thr Val Asp Ser Gln Gly Tyr Ala His Phe Thr Val
435 440 445
Gly Ser His Gln Ala Ala Ala Ile His Ile Gly Ala Lys Leu Gly Ser
450 455 460
Val Cys Gln Asp Cys Gly Gly Thr Ala Ala Glu Thr Lys Val Cys Phe
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Asp Asn Ala Gln Asn Phe Ser Gln Pro Tyr Leu His Tyr Trp Asn Val
485 490 495
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500 505 510
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515 520 525
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Asp Ser Asp Phe Cys Gln Ser Ser Asn Val Gly Asn Glu Ser Trp Tyr
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Phe Arg Gly Thr Ser Asn Gly Trp Gly Val Ser Ala Leu Thr Tyr Glu
580 585 590
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595 600 605
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Pro Ser Ala Asp Tyr Gln Val Gly Asp Tyr Ala Thr Tyr Thr Ile Thr
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<210>195
<211>2790
<212>DNA
<213>环境的
<400>195
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<210>196
<211>929
<212>PRT
<213>环境的
<400>196
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1 5 10 15
Tyr Asn Gln Asn Tyr Asp Ala Lys Asn Asp Arg Gly Thr Tyr Gln Gly
20 25 30
Gly Asp Phe Lys Gly Ile Thr Gln Lys Leu Asp Tyr Leu Asp Lys Leu
35 40 45
Gly Val Asn Thr Ile Trp Ile Ser Pro Ile Val Glu Asn Ile Lys His
50 55 60
Asp Val Arg Tyr Asp Asn Ser Glu Gly His Ser Tyr Tyr Ala Tyr His
65 70 75 80
Gly Tyr Trp Ala Ser Asn Phe Gly Ala Leu Asn Pro His Phe Gly Thr
85 90 95
Met Glu Asp Phe His Thr Leu Ile Asp Ala Ala His Glu Lys Gly Ile
100 105 110
Lys Ile Met Val Asp Val Val Leu Asn His Thr Gly Tyr Gly Leu Lys
115 120 125
Asp Ile Asn Gly Glu Val Ser Asn Pro Pro Ala Gly Tyr Pro Thr Asp
130 135 140
Ala Glu Arg Ser Thr Tyr Ser Ser Leu Leu Arg Gln Gly Ser Asn Val
145 150 155 160
Gly Ser Asp Glu Val Val Gly Glu Leu Ala Gly Leu Pro Asp Leu Lys
165 170 175
Thr Glu Asp Pro Ala Val Arg Gln Thr Ile Ile Asp Trp Gln Thr Asp
180 185 190
Trp Ile Thr Lys Ala Thr Thr Ala Lys Gly Asn Thr Ile Asp Tyr Phe
195 200 205
Arg Val Asp Thr Val Lys His Val Glu Asp Ala Thr Trp Met Ala Phe
210 215 220
Lys Asn Asp Leu Thr Glu Lys Met Pro Thr His Lys Met Ile Gly Glu
225 230 235 240
Ala Trp Gly Ala Ser Ala Asn Asn Gln Leu Gly Tyr Leu Glu Thr Gly
245 250 255
Met Met Asp Ser Leu Leu Asp Phe Asp Phe Lys Gly Ile Ala His Asp
260 265 270
Phe Val Asn Gly Lys Leu Lys Ala Ala Asn Asp Ala Leu Thr Ala Arg
275 280 285
Asn Gly Lys Ile Asp Asn Thr Ala Thr Leu Gly Ser Phe Leu Gly Ser
290 295 300
His Asp Glu Asp Gly Phe Leu Phe Lys Glu Gly Asn Asp Lys Gly Lys
305 310 315 320
Leu Lys Val Ala Ala Ser Leu Gln Ala Thr Ser Lys Gly Gln Pro Val
325 330 335
Ile Tyr Tyr Gly Glu Glu Leu Gly Gln Ser Gly Ala Asn Asn Tyr Pro
340 345 350
Gln Tyr Asp Asn Arg Tyr Asp Leu Ala Trp Asp Lys Val Glu Asn Asn
355 360 365
Asp Val Leu Glu His Tyr Thr Lys Val Leu Asn Phe Arg Ser Ala His
370 375 380
Ser Glu Val Phe Ala Lys Gly Glu Arg Ala Thr Ile Gly Gly Ser Asp
385 390 395 400
Ala Asp Lys Phe Leu Leu Phe Ala Arg Lys Asn Gly Asn Glu Ala Ala
405 410 415
Tyr Val Gly Leu Asn Val Ala Asp Thr Ala Lys Asp Val Thr Leu Thr
420 425 430
Val Ser Ala Gly Ala Val Val Thr Asp His Tyr Ala Asp Lys Thr Tyr
435 440 445
Thr Ala Ser Glu Ala Gly Glu Ile Thr Leu Thr Ile Pro Ala Lys Ala
450 455 460
Asp Gly Gly Thr Val Leu Leu Thr Val Glu Gly Gly Glu Ile Thr Ala
465 470 475 480
Ala Lys Ala Ala Ser Glu Gly Asp Gly Thr Val Glu Pro Val Pro Ala
485 490 495
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500 505 510
Tyr Gly Ala Trp Leu Trp Asn Asp Val Ala Ser Pro Ser Ala Asn Trp
515 520 525
Pro Thr Gly Ala Thr Met Phe Glu Lys Thr Asp Ser Tyr Gly Ala Tyr
530 535 540
Ile Asp Val Pro Leu Lys Glu Gly Ala Lys Asn Ile Gly Phe Leu Val
545 550 555 560
Met Asp Val Thr Lys Gly Asp Gln Gly Lys Asp Gly Gly Asp Lys Gly
565 570 575
Phe Thr Ile Ser Ser Pro Glu Met Asn Glu Ile Trp Ile Lys Gln Gly
580 585 590
Ser Asp Lys Val Tyr Thr Tyr Glu Pro Val Asp Leu Pro Ala Asn Thr
595 600 605
Val Arg Val His Tyr Val Arg Asp Asn Ala Asp Tyr Glu Asn Phe Gly
610 615 620
Ile Trp Asn Trp Gly Asp Val Thr Ala Pro Ser Glu Asn Trp Pro Thr
625 630 635 640
Gly Ala Ala Lys Phe Asp Gly Thr Asp Arg Tyr Gly Ala Tyr Val Asp
645 650 655
Ile Thr Leu Lys Glu Gly Ala Lys Asn Ile Gly Met Ile Ala Leu Asn
660 665 670
Thr Ala Asn Gly Glu Lys Asp Gly Gly Asp Lys Ser Phe Asn Leu Leu
675 680 685
Asp Lys Tyr Asn Arg Ile Trp Ile Lys Gln Gly Asp Asp Asn Val Tyr
690 695 700
Val Ser Pro Tyr Trp Glu Gln Ala Thr Gly Ile Thr Asn Ala Glu Val
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Ala Asn Phe Phe Asp Lys Asn Asn Ala Ala Glu Lys Ile Gly Ser Val
835 840 845
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850 855 860
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885 890 895
Ser Met Ala Ala Phe Thr Val Asn Thr Glu Gly Asn Ala Gly Pro Asp
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Gly Asp Thr Val Gly Lys Ala Ala Ile Gln Lys Ala Ser Arg Glu Tyr
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Phe
<210>197
<211>1401
<212>DNA
<213>环境的
<400>197
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cttggcaaca aaagtgactt aaaatccatg attgatgctc tgaaggcggt cggcgttgat 300
gtgtatgccg atgtggtgct taaccatatg gccaatgaaa catggaagcg tgaagactta 360
aattaccctg gcagtgaagt gctgcaacaa tacgcagcta acaccagtta ttatgeggac 420
caaacgcttt ttggcaattt aacggaaaac ctattctctg gctttgactt ccacccagaa 480
ggctgtatta gcgattggaa tgatgccggc aatgttcagt actggcgtct ttgtggcggt 540
gctggtgacc gagggctgcc agacttagat ccgaacaact gggtggtgtc acagcaacgt 600
ttgtatttga atgcgctaaa aggtttaggt gtgaaaggct tccgcattga tgcggttaaa 660
cacatgagcc aatatcaaat cgaccagatt ttcactgcag agattaccgc cggaatgcac 720
gtgtttggtg aagtgatcac cagtggtggc aaaggcgact ccagctatga gaacttctta 780
gcgccttatc tcaacgccac caaccattcg gcttacgatt tcccactgtt tgcctctatt 840
cgcaacgcct tctcctacag cggtggcatg aacatgcttc atgatccaca agcctatggc 900
caagggcttg aaaacgcacg ttcaattacc tttaccatca cgcacgacat cccaacgaac 960
gacggtttcc gttatcaaat catggatccg aaagatgaag agctggctta cgcttatatc 1020
ctcggtaaag atggcggcac acctctgatt tacagcgaca acttacctga taacgaagat 1080
cgtgataatc gccgttggga aggtgtttgg aaccgtgacc tgatgaagaa catgttgcgc 1140
ttccataacc aaatgcaagg gcaagagatg acgatgctgt acagegacca atgtctactg 1200
atgtttaagc gcggtaaaca aggggtggtc ggcattaata aatgcggtga agagcgttct 1260
cataccgttg acacctatca gcatgagttc aactggtatc agccttacac agatacactc 1320
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<212>PRT
<213>环境的
<400>198
Met Lys Pro Ser Lys Phe Val Phe Leu Ser Ala Ala Ile Ala Cys Ser
1 5 10 15
Leu Ser Ser Thr Ala Asn Ala Asp Ala Ile Leu His Ala Phe Asn Trp
20 25 30
Lys Tyr Ser Asp Val Thr Gln Asn Ala Ser Gln Ile Ala Ala Ala Gly
35 40 45
Tyr Lys Lys Val Leu Ile Ser Pro Ala Leu Lys Ser Ser Gly Asn Glu
50 55 60
Trp Trp Ala Arg Tyr Gln Pro Gln Asp Leu Arg Val Ile Asp Ser Pro
65 70 75 80
Leu Gly Asn Lys Ser Asp Leu Lys Ser Met Ile Asp Ala Leu Lys Ala
85 90 95
Val Gly Val Asp Val Tyr Ala Asp Val Val Leu Asn His Met Ala Asn
100 105 110
Glu Thr Trp Lys Arg Glu Asp Leu Asn Tyr Pro Gly Ser Glu Val Leu
115 120 125
Gln Gln Tyr Ala Ala Asn Thr Ser Tyr Tyr Ala Asp Gln Thr Leu Phe
130 135 140
Gly Asn Leu Thr Glu Asn Leu Phe Ser Gly Phe Asp Phe His Pro Glu
145 150 155 160
Gly Cys Ile Ser Asp Trp Asn Asp Ala Gly Asn Val Gln Tyr Trp Arg
165 170 175
Leu Cys Gly Gly Ala Gly Asp Arg Gly Leu Pro Asp Leu Asp Pro Asn
180 185 190
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195 200 205
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Tyr Gln Ile Asp Gln Ile Phe Thr Ala Glu Ile Thr Ala Gly Met His
225 230 235 240
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Gly Met Asn Met Leu His Asp Pro Gln Ala Tyr Gly Gln Gly Leu Glu
290 295 300
Asn Ala Arg Ser Ile Thr Phe Thr Ile Thr His Asp Ile Pro Thr Asn
305 310 315 320
Asp Gly Phe Arg Tyr Gln Ile Met Asp Pro Lys Asp Glu Glu Leu Ala
325 330 335
Tyr Ala Tyr Ile Leu Gly Lys Asp Gly Gly Thr Pro Leu Ile Tyr Ser
340 345 350
Asp Asn Leu Pro Asp Asn Glu Asp Arg Asp Asn Arg Arg Trp Glu Gly
355 360 365
Val Trp Asn Arg Asp Leu Met Lys Asn Met Leu Arg Phe His Asn Gln
370 375 380
Met Gln Gly Gln Glu Met Thr Met Leu Tyr Ser Asp Gln Cys Leu Leu
385 390 395 400
Met Phe Lys Arg Gly Lys Gln Gly Val Val Gly Ile Asn Lys Cys Gly
405 410 415
Glu Glu Arg Ser His Thr Val Asp Thr Tyr Gln His Glu Phe Asn Trp
420 425 430
Tyr Gln Pro Tyr Thr Asp Thr Leu Thr Gly Val Thr Glu Thr Val Ser
435 440 445
Ser Arg Tyr His Thr Phe Arg Ile Pro Ala Arg Ser Ala Arg Met Tyr
450 455 460
Met Leu
465
<210>199
<211>399
<212>DNA
<213>环境的
<400>199
gtgagtttga ccaaaaaggc tcagtacgaa ccaaatacgg caccaaggct cagtacatct 60
ctgcaatcaa tgccgcgcac aacaacaata tccaaattta cggcgatgtt gtgtttaacc 120
accgaggtgg tgctgatggg aagtcgtggg tcgataccaa gcgcgttgat tgggacaacc 180
gcaatattga actgggcgac aaatggattg aagcttgggt tgagtttaat tttcctggcc 240
gcaacgacaa atactcgaac ttccattgga cttggtatca ctttgacggt gttgactggg 300
atgacgccgg caaagaaaaa gcgatcttta aattc aagg cgaagga aa gcatgggatt 360
gggaagtcag ctctgaaaaa ggcaattacg actacctaa 399
<210>200
<211>132
<212>PRT
<213>环境的
<400>200
Val Ser Leu Thr Lys Lys Ala Gln Tyr Glu Pro Asn Thr Ala Pro Arg
1 5 10 15
Leu Ser Thr Ser Leu Gln Ser Met Pro Arg Thr Thr Thr Ile Ser Lys
20 25 30
Phe Thr Ala Met Leu Cys Leu Thr Thr Glu Val Val Leu Met Gly Ser
35 40 45
Arg Gly Ser Ile Pro Ser Ala Leu Ile Gly Thr Thr Ala Ile Leu Asn
50 55 60
Trp Ala Thr Asn Gly Leu Lys Leu Gly Leu Ser Leu Ile Phe Leu Ala
65 70 75 _ 80
Ala Thr Thr Asn Thr Arg Thr Ser Ile Gly Leu Gly Ile Thr Leu Thr
85 90 95
Val Leu Thr Gly Met Thr Pro Ala Lys Lys Lys Arg Ser Leu Asn Ser
100 105 110
Lys Ala Lys Glu Lys His Gly Ile Gly Lys Ser Ala Leu Lys Lys Ala
115 120 125
Ile Thr Thr Thr
130
<210>201
<211>1911
<212>DNA
<213>环境的
<400>201
atgacagcca aggctgatga cttacgcatt taccagatca tggtggaaag ctttgtggat 60
ggcgataaac aggtcggcca tggcaccggc tacggtacca gccatcacaa aggcgatctg 120
caagggatca ttgactcgct ggattacatt caatcgctgg gcgtcaatgc catttggcta 180
acgccgattt ttgaatctat tccggtggag ggacaagacc attgggcgga caggcttgat 240
gctacaggct actttgccag tgactatttc aagatagacc ctcgctttgg cacgttagaa 300
caagcccgtg agctggtgga aaaggcacac gcgaaaggct tgtatgtctt ctttgatgga 360
gtatttggtc accataaagg caatgtggtg ccatcaccac aaggtagact gcctgtcggt 420
gaaaataacc cggtcagcta cccagagagc ctggcgtttt acgaagaagt cgccagttac 480
tgggtgaaag agttaaagat tgatggctgg cgtctggatc aagcctatca agtgccgacc 540
gatgcatgga aagcgatccg tcagagcgtt gatgaagcgt cacagtccgt aacttatgtg 600
aataacaaag gggaaaccgt ccatcctttg ggttacatgg tggctgaaat ttggaataac 660
gaacgttaca tcacagaaac cggttacggc aaagaaggcg atccggcgtt gtgctcggct 720
tttgattttc cgatgcgttt ccgagtggtc gaaacctttg cggttaacga aagtggtgtc 780
agccgaaaag gcggcgaatg gttgaatgac ggcatgtcac tgcacagtca gtatccggat 840
catgccaagc ctaatttaat gttgggcaac catgatgtgg tgcgctttgg ggatctgctg 900
caacgtggcg gtattgcgtc accagaacaa ccgcaatact ggcagcgtca taaagcggcg 960
atgtctttct tagcagcgta taccggccca attaccttgt attacggtga agaaattggc 1020
gatcaggttg acggctttgc taaaaaaatc aaagaagatt gtgccgttat tggtttgtgt 1080
gatgaccacg tggcgcgcac cagtgcgaag attgatggcg tgacggcgtc actgaatgca 1140
cagcagtctg aactcaaagt atatgtctct tcattgatga cattacgtca gcaacatcct 1200
gcgttatcac aaggggaacg tactaatgtg atggcgacag agacagtata cgtagaccat 1260
aaacaggcag acaatgaagc cctgttgtac atggtgagta cgactgataa cgcggagtca 1320
gtcaccttga agggcaaagc gattggttca caaggtgtgc tgattgattt gttaacgaac 1380
gagcgtttta tgcccaataa tggggagtat gccattccat taacgggctt tggcgcacga 1440
ttcctcaaga ttgacactcc gacagcggcg ggtgtgatgg cgcaatctgc tgcctcggta 1500
tcgctagtag gtgaagggat catggcccaa tgtgataccc caaccgttga aggcaccggt 1560
ccggtagcag aaaccttgta cgtggttggc gattttgccg atgctggttg gaagcaaaag 1620
ccgcagcgcg cgtatcaata caaaggcaag cacaatggca gcaacttgta tcaagtggtt 1680
gtcgatgaaa aagcgggcgc ctacaagatg caatacgcca cgaaagattg gagcccacag 1740
tttactgcag acggtatggc attgaagccg ggtaccgcaa agtcgctcat agcgggtggc 1800
tacggtaaag acaccgccgt gacgttgccg gaatccggta agtatgtgtg gagcttaaca 1860
ttcagtgatc ttggcgagcc ggagcaaatc atggtgtcta agtgtcagta a 1911
<210>202
<211>630
<212>PRT
<213>环境的
<400>202
Met Thr Ala Lys Ala Asp Asp Leu Arg Ile Tyr Gln Ile Met Val Glu
1 5 10 15
Ser Phe Val Asp Gly Asp Lys Gln Val Gly His Gly Thr Gly Tyr Gly
20 25 30
Thr Ser His His Lys Gly Asp Leu Gln Gly Ile Ile Asp Ser Leu Asp
35 40 45
Tyr Ile Gln Ser Leu Gly Val Asn Ala Ile Trp Leu Thr Pro Ile Phe
50 55 60
Glu Ser Ile Pro Val Glu Gly Gln Asp His Trp Ala Asp Arg Leu Asp
65 70 75 80
Ala Thr Gly Tyr Phe Ala Ser Asp Tyr Phe Lys Ile Asp Pro Arg Phe
85 90 95
Gly Thr Leu Glu Gln Ala Arg Glu Leu Val Glu Lys Ala His Ala Lys
100 105 110
Gly Leu Tyr Val Phe Phe Asp Gly Val Phe Gly His His Lys Gly Asn
115 120 125
Val Val Pro Ser Pro Gln Gly Arg Leu Pro Val Gly Glu Asn Asn Pro
130 135 140
Val Ser Tyr Pro Glu Ser Leu Ala Phe Tyr Glu Glu Val Ala Ser Tyr
145 150 155 160
Trp Val Lys Glu Leu Lys Ile Asp Gly Trp Arg Leu Asp Gln Ala Tyr
165 170 175
Gln Val Pro Thr Asp Ala Trp Lys Ala Ile Arg Gln Ser Val Asp Glu
180 185 190
Ala Ser Gln Ser Val Thr Tyr Val Asn Asn Lys Gly Glu Thr Val His
195 200 205
Pro Leu Gly Tyr Met Val Ala Glu Ile Trp Asn Asn Glu Arg Tyr Ile
210 215 220
Thr Glu Thr Gly Tyr Gly Lys Glu Gly Asp Pro Ala Leu Cys Ser Ala
225 230 235 240
Phe Asp Phe Pro Met Arg Phe Arg Val Val Glu Thr Phe Ala Val Asn
245 250 255
Glu Ser Gly Val Ser Arg Lys Gly Gly Glu Trp Leu Asn Asp Gly Met
260 265 270
Ser Leu His Ser Gln Tyr Pro Asp His Ala Lys Pro Asn Leu Met Leu
275 280 285
Gly Asn His Asp Val Val Arg Phe Gly Asp Leu Leu Gln Arg Gly Gly
290 295 300
Ile Ala Ser Pro Glu Gln Pro Gln Tyr Trp Gln Arg His Lys Ala Ala
305 310 315 320
Met Ser Phe Leu Ala Ala Tyr Thr Gly Pro Ile Thr Leu Tyr Tyr Gly
325 330 335
Glu Glu Ile Gly Asp Gln Val Asp Gly Phe Ala Lys Lys Ile Lys Glu
340 345 350
Asp Cys Ala Val Ile Gly Leu Cys Asp Asp His Val Ala Arg Thr Ser
355 360 365
Ala Lys Ile Asp Gly Val Thr Ala Ser Leu Asn Ala Gln Gln Ser Glu
370 375 380
Leu Lys Val Tyr Val Ser Ser Leu Met Thr Leu Arg Gln Gln His Pro
385 390 395 400
Ala Leu Ser Gln Gly Glu Arg Thr Asn Val Met Ala Thr Glu Thr Val
405 410 415
Tyr Val Asp His Lys Gln Ala Asp Asn Glu Ala Leu Leu Tyr Met Val
420 425 430
Ser Thr Thr Asp Asn Ala Glu Ser Val Thr Leu Lys Gly Lys Ala Ile
435 440 445
Gly Ser Gln Gly Val Leu Ile Asp Leu Leu Thr Asn Glu Arg Phe Met
450 455 460
Pro Asn Asn Gly Glu Tyr Ala Ile Pro Leu Thr Gly Phe Gly Ala Arg
465 470 475 480
Phe Leu Lys Ile Asp Thr Pro Thr Ala Ala Gly Val Met Ala Gln Ser
485 490 495
Ala Ala Ser Val Ser Leu Val Gly Glu Gly Ile Met Ala Gln Cys Asp
500 505 510
Thr Pro Thr Val Glu Gly Thr Gly Pro Val Ala Glu Thr Leu Tyr Val
515 520 525
Val Gly Asp Phe Ala Asp Ala Gly Trp Lys Gln Lys Pro Gln Arg Ala
530 535 540
Tyr Gln Tyr Lys Gly Lys His Asn Gly Ser Asn Leu Tyr Gln Val Val
545 550 555 560
Val Asp Glu Lys Ala Gly Ala Tyr Lys Met Gln Tyr Ala Thr Lys Asp
565 570 575
Trp Ser Pro Gln Phe Thr Ala Asp Gly Met Ala Leu Lys Pro Gly Thr
580 585 590
Ala Lys Ser Leu Ile Ala Gly Gly Tyr Gly Lys Asp Thr Ala Val Thr
595 600 605
Leu Pro Glu Ser Gly Lys Tyr Val Trp Ser Leu Thr Phe Ser Asp Leu
610 615 620
Gly Glu Pro Glu Gln Ile
625 630
<210>203
<211>2601
<212>DNA
<213>环境的
<400>203
atgaagatga agtcccgggc gtggttgtta ggtagtgcag tggccatggc gttggcctct 60
tcggcagcca atgccggtgt catggttcac ctgttccaht ggaagtacaa tgacatcgcc 120
aacgagtgcg aaaaggtgct cggtcccaaa gggtatgaag cagtgcagat cacgccgcct 180
gctgaacacc tgcaaggctc ctcctggtgg gtggtctatc agcccgtcag ctacaagaac 240
ttcacttctc tgggcggtaa cgaggccgaa ctcaaaagca tgatcgcccg ttgcaaggcc 300
gccggggtca agatttacgc cgatgcggta ttcaaccagc tggctggtgg atcaggcgtc 360
ggtacaggtg gtagcagcta caatgccggc agcttcagct atccccaatt tggctacaac 420
gatttccatc acgctgggag cctcaccaac tatgccgacc gcaacaatgt gcaaaacggt 480
gccctgctgg ggctgccgga tctggatacc ggctctgcct atgtgcagga tcagctggct 540
acctatatga agaccctgag tggctggggt gtggcaggtt ttcgtcttga tgcagcaaag 600
catatgagcg ttgccgatct ctcggccatc gtcagcaagg cgggcaatcc ttttgtctac 660
tccgaggtga ttggtgccac gggtgaacca atccagccgg gcgaatatac cggcattggt 720
gccgtgaccg aatttaaata cggcaccgat ctggcctcca acttcaaggg gcagatcaag 780
aatctcaaga gcatgggcga gagctggggt ctgcttgcgt cgaacaaggc tgaagtcttt 840
gtggtcaacc atgaccgtga gcggggacat ggcggtggcg gtatgctgac ctacaaggat 900
ggtgccctct acaatctggc caacatcttc atgctggcct ggccctatgg cgcctatccc 960
caggtgatgt ccggctatga tttcggcacc aataccgata ttggtgggcc gagcgctacc 1020
ccttgttctt ccggctctag ctggaactgc gaacaccgct ggagcaacat cgccaacatg 1080
gtctcgttcc acaatgccgc ccaaggcacg tccatgacca actggtggga taatggtaat 1140
aaccagatcg cctttggtcg cggcgccaag gcctttgtgg tgatcaacaa tgaatcttcc 1200
actctgagca agagcctgca gacgggtctg ccagccgggg agtactgcaa cattctggcc 1260
ggtgatgccc tgtgcagcgg cagcaccatc aaggtggatg ccagcggtat ggccaccttc 1320
aacgtggcag ggatgaaggc ggcagcgatc catatcaatg ccaagcccga tagcaccagc 1380
agtggcagct caggctcttc ctctggctct tcttcctctg ccaccagtaa caagtttgcc 1440
agcatgaatc tgcggggcac caacaatggc tgggccagca ccgccatgac agtggatgcc 1500
aaccgtgtct ggtcggcgga tgtcaccttt accggggccg cggatgccaa tggtgcccag 1560
cgcttcaagt ttgatgtcta tggcaactgg acagagagct atggcgatac acaagccgat 1620
ggcattgccg acaaggggag cgccaaggac atctatttca atggtgtggg caagtatcgt 1680
gtctcgctca aggagagcga catgagctac accctgaccc agctctccag caatcaggca 1740
ccggtggcgg ccatcacccc caagacactc tccgtcaagc tgggtgactc agtggtgttc 1800
gatgcctccg gctccaccga tgatgtgggt gtcactggct acagctggtc taccggtggc 1860
agtgccaaga ccgaaactgt gctgtttgat gctctgggta ccaagaccat taccgtgaca 1920
gtggccgatg ccgatggctt gacctccaag gccagtgcca ccgtcaccgt caccgatggc 1980
agcgtggctt ataacagcaa ctttgccagc ctgaacttcc gtggcactcc caacagttgg 2040
ggcgcggcag ccatgacgct ggtggcagac aacacctggg aggcaacggt caacttcgat 2100
ggtcaggcca atcagcgctt caagttcgat atcaagggtg actggagcca gaactatggt 2160
gatagcaaca aggatggggt ggccgaacgt accggtgccg atatttacac cactgtgacc 2220
ggtcaatata aggtgcaatt taacgactcc actttgaagt acaccctgac caagctggcc 2280
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aacagctggg gcaccaccgc catgaagctg gtggccaata acagctggca ggccgaggtg 2400
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tacaccctga ccgccaaata a 2601
<210>204
<211>866
<212>PRT
<213>环境的
<400>204
Met Lys Met Lys Ser Arg Ala Trp Leu Leu Gly Ser Ala Val Ala Met
1 5 10 15
Ala Leu Ala Ser Ser Ala Ala Asn Ala Gly Val Met Val His Leu Phe
20 25 30
Gln Trp Lys Tyr Asn Asp Ile Ala Asn Glu Cys Glu Lys Val Leu Gly
35 40 45
Pro Lys Gly Tyr Glu Ala Val Gln Ile Thr Pro Pro Ala Glu His Leu
50 55 60
Gln Gly Ser Ser Trp Trp Val Val Tyr Gln Pro Val Ser Tyr Lys Asn
65 70 75 80
Phe Thr Ser Leu Gly Gly Asn Glu Ala Glu Leu Lys Ser Met Ile Ala
85 90 95
Arg Cys Lys Ala Ala Gly Val Lys Ile Tyr Ala Asp Ala Val Phe Asn
100 105 110
Gln Leu Ala Gly Gly Ser Gly Val Gly Thr Gly Gly Ser Ser Tyr Asn
115 120 125
Ala Gly Ser Phe Ser Tyr Pro Gln Phe Gly Tyr Asn Asp Phe His His
130 135 140
Ala Gly Ser Leu Thr Asn Tyr Ala Asp Arg Asn Asn Val Gln Asn Gly
145 150 155 160
Ala Leu Leu Gly Leu Pro Asp Leu Asp Thr Gly Ser Ala Tyr Val Gln
165 170 175
Asp Gln Leu Ala Thr Tyr Met Lys Thr Leu Ser Gly Trp Gly Val Ala
180 185 190
Gly Phe Arg Leu Asp Ala Ala Lys His Met Ser Val Ala Asp Leu Ser
195 200 205
Ala Ile Val Ser Lys Ala Gly Asn Pro Phe Val Tyr Ser Glu Val Ile
210 215 220
Gly Ala Thr Gly Glu Pro Ile Gln Pro Gly Glu Tyr Thr Gly Ile Gly
225 230 235 240
Ala Val Thr Glu Phe Lys Tyr Gly Thr Asp Leu Ala Ser Asn Phe Lys
245 250 255
Gly Gln Ile Lys Asn Leu Lys Ser Met Gly Glu Ser Trp Gly Leu Leu
260 265 270
Ala Ser Asn Lys Ala Glu Val Phe Val Val Asn His Asp Arg Glu Arg
275 280 285
Gly His Gly Gly Gly Gly Met Leu Thr Tyr Lys Asp Gly Ala Leu Tyr
290 295 300
Asn Leu Ala Asn Ile Phe Met Leu Ala Trp Pro Tyr Gly Ala Tyr Pro
305 310 315 320
Gln Val Met Ser Gly Tyr Asp Phe Gly Thr Asn Thr Asp Ile Gly Gly
325 330 335
Pro Ser Ala Thr Pro Cys Ser Ser Gly Ser Ser Trp Asn Cys Glu His
340 345 350
Arg Trp Ser Asn Ile Ala Asn Met Val Ser Phe His Asn Ala Ala Gln
355 360 365
Gly Thr Ser Met Thr Asn Trp Trp Asp Asn Gly Asn Asn Gln Ile Ala
370 375 380
Phe Gly Arg Gly Ala Lys Ala Phe Val Val Ile Asn Asn Glu Ser Ser
385 390 395 400
Thr Leu Ser Lys Ser Leu Gln Thr Gly Leu Pro Ala Gly Glu Tyr Cys
405 410 415
Asn Ile Leu Ala Gly Asp Ala Leu Cys Ser Gly Ser Thr Ile Lys Val
420 425 430
Asp Ala Ser Gly Met Ala Thr Phe Asn Val Ala Gly Met Lys Ala Ala
435 440 445
Ala Ile His Ile Asn Ala Lys Pro Asp Ser Thr Ser Ser Gly Ser Ser
450 455 460
Gly Ser Ser Ser Gly Ser Ser Ser Ser Ala Thr Ser Asn Lys Phe Ala
465 470 475 480
Ser Met Asn Leu Arg Gly Thr Asn Asn Gly Trp Ala Ser Thr Ala Met
485 490 495
Thr Val Asp Ala Asn Arg Val Trp Ser Ala Asp Val Thr Phe Thr Gly
500 505 510
Ala Ala Asp Ala Asn Gly Ala Gln Arg Phe Lys Phe Asp Val Tyr Gly
515 520 525
Asn Trp Thr Glu Ser Tyr Gly Asp Thr Gln Ala Asp Gly Ile Ala Asp
530 535 540
Lys Gly Ser Ala Lys Asp Ile Tyr Phe Asn Gly Val Gly Lys Tyr Arg
545 550 555 560
Val Ser Leu Lys Glu Ser Asp Met Ser Tyr Thr Leu Thr Gln Leu Ser
565 570 575
Ser Asn Gln Ala Pro Val Ala Ala Ile Thr Pro Lys Thr Leu Ser Val
580 585 590
Lys Leu Gly Asp Ser Val Val Phe Asp Ala Ser Gly Ser Thr Asp Asp
595 600 605
Val Gly Val Thr Gly Tyr Ser Trp Ser Thr Gly Gly Ser Ala Lys Thr
610 615 620
Glu Thr Val Leu Phe Asp Ala Leu Gly Thr Lys Thr Ile Thr Val Thr
625 630 635 640
Val Ala Asp Ala Asp Gly Leu Thr Ser Lys Ala Ser Ala Thr Val Thr
645 650 655
Val Thr Asp Gly Ser Val Ala Tyr Asn Ser Asn Phe Ala Ser Leu Asn
660 665 670
Phe Arg Gly Thr Pro Asn Ser Trp Gly Ala Ala Ala Met Thr Leu Val
675 680 685
Ala Asp Asn Thr Trp Glu Ala Thr Val Asn Phe Asp Gly Gln Ala Asn
690 695 700
Gln Arg Phe Lys Phe Asp Ile Lys Gly Asp Trp Ser Gln Asn Tyr Gly
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Asp Ser Asn Lys Asp Gly Val Ala Glu Arg Thr Gly Ala Asp Ile Tyr
725 730 735
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740 745 750
Lys Tyr Thr Leu Thr Lys Leu Ala Asp Ser Ser Ala Thr Ser Tyr Ser
755 760 765
Ala Asn Phe Ala Ser Leu Tyr Leu Arg Gly Thr Pro Asn Ser Trp Gly
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Thr Thr Ala Met Lys Leu Val Ala Asn Asn Ser Trp Gln Ala Glu Val
785 790 795 800
Thr Phe Thr Gly Lys Gly Asp Ala Thr Gly Ala Gln Arg Phe Lys Phe
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Asp Val Lys Gly Asp Trp Ser Gln Asn Tyr Gly Asp Ser Asn Met Asp
820 825 830
Gly Thr Ala Glu Arg Thr Gly Gly Asp Ile Thr Ser Ala Val Val Gly
835 840 845
Thr Tyr Leu Val Thr Phe Asn Asp Ser Thr Leu Lys Tyr Thr Leu Thr
850 855 860
Ala Lys
865
<210>205
<211>1674
<212>DNA
<213>环境的
<400>205
atgtaccgcg taatacctat tattttgatt atgagtatga ttgtagcttg tgagtctcca 60
aagaaaaaaa caaccgaaac cgctcaacct tcaacaaatg ccgaaaaacc ctttgtttgg 120
gaggctgcca atgtatattt tttgttaact gaccgtttta acaacggtaa cccaaacaat 180
gacatcaatt ttaataggac taaagaatca ggaaa ctcc gcaattttat gggaggcgat 240
atcaagggca tcacccaaaa aataaatgag gggtatttta gtaaactagg cgttaatgcc 300
atctggctta ccccggttgt tgaacaaata catggcagtg ttgatgaagg taccggcaat 360
acctatgcct ttcatggcta ttgggccaaa gattggacaa acttagaccc aaattttggc 420
acaaaagaag accttgccga actggtggca actgcccatg caaaaggcat caggatactt 480
ttagatgtgg taataaacca caccggcccg gtaaccgacc aagacccggt ttggggagaa 540
gattgggtac gtacaggccc gcagtgtacc tatgataatt acaccaatac caccagttgc 600
acgctggtag ccaatttacc tgatatactt acagaaagta atgaaaatgt ggccttacca 660
acctttttgt tagataaatg gaaagccgaa ggcagattag agcaagaact aaaagaactt 720
gacgattttt tttcccgcac aggccaccca cgcgcacccc gcttttacat tattaaatgg 780
cttaccgatt acatccgaga atttggggta gatgggttta gggttgatac cgtaaaacat 840
accgaagaaa cggtttgggc cgagttgtat gatgaagccg taattgcttt tgccgaatat 900
aaaaaagcca acccagacaa ggtattggac gataatgaat tttatatggt aggcgaagtg 960
tacaactacg gtatttccgg cggaaggttc tatgatttcg gcgataaaaa ggtggactat 1020
tttgaccacg gatttaaaag cctcatcaat tttgaaatga aatatgatgc caattttacc 1080
tacgatacac tttttaggaa gtacgatacc cttttgcata ccaaacttaa aggcagaagt 1140
gtgctcaact acctctcatc tcacgacgat ggaagtccat ttgataaaat gcggcaaaaa 1200
ccatacgagt cggctacaaa attactgctc actccgggcg catcccaaat ttattacggt 1260
gacgaaaccg ccagaagcct taacatagaa ggcgcacagg gagatgctac gcttcgttcg 1320
tttatgaatt gggaagagct cgcagaagac cctgccaagc aaaaaatact tcagcattgg 1380
caaaaactgg gcagtttcag gaacaaccac cccgcagttg gtgccggaag gcacaaaacc 1440
cttggcaaaa agccgtttta cacctttagc agggtttatc aaaaaaatgg ttttattgac 1500
aaagttgtgg tagcattaga tgcccctaaa ggccaaaaac aaattaccgt taatggtgtt 1560
tttgatgacg gtacaaaact tgtagatgcc tattcaggca aagaaacctc agttaaaaat 1620
ggtatcgttt cactttcttc tgaatttgat attgttttgt tagaacaaaa ataa 1674
<210>206
<211>557
<212>PRT
<213>环境的
<400>206
Met Tyr Arg Val Ile Pro Ile Ile Leu Ile Met Ser Met Ile Val Ala
1 5 10 15
Cys Glu Ser Pro Lys Lys Lys Thr Thr Glu Thr Ala Gln Pro Ser Thr
20 25 30
Asn Ala Glu Lys Pro Phe Val Trp Glu Ala Ala Asn Val Tyr Phe Leu
35 40 45
Leu Thr Asp Arg Phe Asn Asn Gly Asn Pro Asn Asn Asp Ile Asn Phe
50 55 60
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65 70 75 80
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85 90 95
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100 105 110
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115 120 125
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130 135 140
Leu Ala Glu Leu Val Ala Thr Ala His Ala Lys Gly Ile Arg Ile Leu
145 150 155 160
Leu Asp Val Val Ile Asn His Thr Gly Pro Val Thr Asp Gln Asp Pro
165 170 175
Val Trp Gly Glu Asp Trp Val Arg Thr Gly Pro Gln Cys Thr Tyr Asp
180 185 190
Asn Tyr Thr Asn Thr Thr Ser Cys Thr Leu Val Ala Asn Leu Pro Asp
195 200 205
Ile Leu Thr Glu Ser Asn Glu Asn Val Ala Leu Pro Thr Phe Leu Leu
210 215 220
Asp Lys Trp Lys Ala Glu Gly Arg Leu Glu Gln Glu Leu Lys Glu Leu
225 230 235 240
Asp Asp Phe Phe Ser Arg Thr Gly His Pro Arg Ala Pro Arg Phe Tyr
245 250 255
Ile Ile Lys Trp Leu Thr Asp Tyr Ile Arg Glu Phe Gly Val Asp Gly
260 265 270
Phe Arg Val Asp Thr Val Lys His Thr Glu Glu Thr Val Trp Ala Glu
275 280 285
Leu Tyr Asp Glu Ala Val Ile Ala Phe Ala Glu Tyr Lys Lys Ala Asn
290 295 300
Pro Asp Lys Val Leu Asp Asp Asn Glu Phe Tyr Met Val Gly Glu Val
305 310 315 320
Tyr Asn Tyr Gly Ile Ser Gly Gly Arg Phe Tyr Asp Phe Gly Asp Lys
325 330 335
Lys Val Asp Tyr Phe Asp His Gly Phe Lys Ser Leu Ile Asn Phe Glu
340 345 350
Met Lys Tyr Asp Ala Asn Phe Thr Tyr Asp Thr Leu Phe Arg Lys Tyr
355 360 365
Asp Thr Leu Leu His Thr Lys Leu Lys Gly Arg Ser Val Leu Asn Tyr
370 375 380
Leu Ser Ser His Asp Asp Gly Ser Pro Phe Asp Lys Met Arg Gln Lys
385 390 395 400
Pro Tyr Glu Ser Ala Thr Lys Leu Leu Leu Thr Pro Gly Ala Ser Gln
405 410 415
Ile Tyr Tyr Gly Asp Glu Thr Ala Arg Ser Leu Asn Ile Glu Gly Ala
420 425 430
Gln Gly Asp Ala Thr Leu Arg Ser Phe Met Asn Trp Glu Glu Leu Ala
435 440 445
Glu Asp Pro Ala Lys Gln Lys Ile Leu Gln His Trp Gln Lys Leu Gly
450 455 460
Ser Phe Arg Asn Asn His Pro Ala Val Gly Ala Gly Arg His Lys Thr
465 470 475 480
Leu Gly Lys Lys Pro Phe Tyr Thr Phe Ser Arg Val Tyr Gln Lys Asn
485 490 495
Gly Phe Ile Asp Lys Val Val Val Ala Leu Asp Ala Pro Lys Gly Gln
500 505 510
Lys Gln Ile Thr Val Asn Gly Val Phe Asp Asp Gly The Lys Leu Val
515 520 525
Asp Ala Try Ser Gly Lys Glu Thr Ser Val Lys Asn Gly Ile Val Ser
530 535 540
Leu Ser Ser Glu Phe Asp Ile Val Leu Leu Glu Gln Lys
545 550 555
<210>207
<211>1378
<212>DNA
<213>环境的
<400>207
ctgtcgactg agcctttcgt tttgggctcg agactgactc tcagcccacc ccgcagtagc 60
tccagacgga gtagccgtaa tagccgttgg ccgggtcgtg ggcaggggcc tcgaggtaca 120
cccacccgct tgagtccacc cacttgtcca cccagccgcc gaggttgccg gtgtactcgt 180
ggatgcacgc tcccgcgaac ttcggaacgt agacccacct tccggctttg cttgaggcga 240
ggttgatgta tgttatcagt cccggcttgc ttccgtagcc gtttctcacg aatatcagct 300
cgtcgttgtc gtagtaaacg acgtcagtgc ttcctccggc caggttgtca tgtatccaga 360
tgaggttctt gagcttatcc ttgttgagcc actcctcgta gtcgcggtag aatattgtcg 420
gctggccctc gtaggtgagg atgaacgcgt aggctggata cttgttccag attatatcgg 480
tgtcgtggtt tgcaacgaag gttacggcct taaacgggtc gcggctgacg actgtgcccc 540
cgttcttgag ggcctcgacg agtgcgggaa tgttcttgtt gtcaaaggcc gcgtccatct 600
tgtagtagag cgggaagtcg aagaccttgg cgccgctcga gtaggcccag ttgaggagtg 660
catcaacgtt ggtgtcccag tactcgccaa cggcccagcc gccccaccag ttgagccagt 720
ccttgacgac ccacgctccg tggcccttca cgtagtcaaa gcgccaggca tcaacgccga 780
tgctccttag gtaggcggcg tagctctcat cgctcgccca gagccagtgc tggtcccagc 840
tcttctcgtg ggctatgtct gggaagcctc caaatgtgcc ctcgtcacag cacttgacct 900
cgttggggtg gaagtcgagg tagttggcag tatatttgcc cgaggccacc tttgagaagt 960
ccgtccaggt gtagtcccca acgaacgggt tccactcgag gtctccgcct gcgcggtggt 1020
ttatgacgat gtccgctatg acctttatgc cgtaggcatg ggccgtgttt atcatgttca 1080
cgagctcctg cttggagcca aagcgcgtct ctaccgttcc cttctggtcg tactcaccga 1140
ggtcaaagaa gtcgtagggg tcgtagccca tcgaataggc gccgcccatg cccttgctcg 1200
ccgggggaat ccaaatggcg gatattcccg cctcgtacca ctccggtatc ttgctcctga 1260
tggtgtccca ccagattcct ccacctggga cgtcccagta gaaggcctgc attataacgc 1320
cgccctcttc cagctcggag tacttggcca taagttacct cctactagta gattaaaa 1378
<210>208
<211>439
<212>PRT
<213>环境的
<400>208
Leu Ser Thr Glu Pro Phe Val Leu Gly Ser Arg Leu Thr Leu Ser Pro
1 5 10 15
Pro Arg Ser Ser Ser Arg Arg Ser Ser Arg Asn Ser Arg Trp Pro Gly
20 25 30
Arg Gly Gln Gly Pro Arg Gly Thr Pro Thr Arg Leu Ser Pro Pro Thr
35 40 45
Cys Pro Pro Ser Arg Arg Gly Cys Arg Cys Thr Arg Gly Cys Thr Leu
50 55 60
Pro Arg Thr Ser Glu Arg Arg Pro Thr Phe Arg Leu Cys Leu Arg Arg
65 70 75 80
Gly Cys Met Leu Ser Val Pro Ala Cys Phe Arg Ser Arg Phe Ser Arg
85 90 95
Ile Ser Ala Arg Arg Cys Arg Ser Lys Arg Arg Gln Cys Phe Leu Arg
100 105 110
Pro Gly Cys His Val Ser Arg Gly Ser Ala Tyr Pro Cys Ala Thr Pro
115 120 125
Arg Ser Arg Gly Arg Ile Leu Ser Ala Gly Pro Arg Arg Gly Thr Arg
130 135 140
Arg Leu Asp Thr Cys Ser Arg Leu Tyr Arg Cys Arg Gly Leu Gln Arg
145 150 155 160
Arg Leu Arg Pro Thr Gly Arg Gly Arg Leu Cys Pro Arg Ser Gly Pro
165 170 175
Arg Arg Val Arg Glu Cys Ser Cys Cys Gln Arg Pro Arg Pro Ser Cys
180 185 190
Ser Arg Ala Gly Ser Arg Arg Pro Trp Arg Arg Ser Ser Arg Pro Ser
195 200 205
Gly Val His Gln Arg Trp Cys Pro Ser Thr Arg Gln Arg Pro Ser Arg
210 215 220
Pro Thr Ser Ala Ser Pro Arg Pro Thr Leu Arg Gly Pro Ser Arg Ser
225 230 235 240
Gln Ser Ala Arg His Gln Arg Arg Cys Ser Leu Gly Arg Arg Arg Ser
245 250 255
Ser His Arg Ser Pro Arg Ala Ser Ala Gly Pro Ser Ser Ser Arg Gly
260 265 270
Leu Cys Leu Gly Ser Leu Gln Met Cys Pro Arg His Ser Thr Pro Arg
275 280 285
Trp Gly Gly Ser Arg Gly Ser Trp Gln Tyr Ile Cys Pro Arg Pro Pro
290 295 300
Leu Arg Ser Pro Ser Arg Cys Ser Pro Gln Arg Thr Gly Ser Thr Arg
305 310 315 320
Gly Leu Arg Leu Arg Gly Gly Leu Arg Cys Pro Leu Pro Leu Cys Arg
325 330 335
Arg His Gly Pro Cys Leu Ser Cys Ser Arg Ala Pro Ala Trp Ser Gln
340 345 350
Ser Ala Ser Leu Pro Phe Pro Ser Gly Arg Thr His Arg Gly Gln Arg
355 360 365
Ser Arg Arg Gly Arg Ser Pro Ser Asn Arg Arg Arg Pro Cys Pro Cys
370 375 380
Ser Pro Gly Glu Ser Lys Trp Arg Ile Phe Pro Pro Arg Thr Thr Pro
385 390 395 400
Val Ser Cys Ser Trp Cys Pro Thr Arg Phe Leu His Leu Gly Arg Pro
405 410 415
Ser Arg Arg Pro Ala Leu Arg Arg Pro Leu Pro Ala Arg Ser Thr Trp
420 425 430
Pro Val Thr Ser Tyr Ile Lys
435
<210>209
<211>1416
<212>DNA
<213>环境的
<400>209
atgattcagc ccatgcactc tcgggaacag gcctgccgtc tcattccggc actgatcatg 60
acatttgcac tggcactgcc gttgcaaatt cgtgccgatg tcaccctgca tgctttcaac 120
tggagctatg ccgatgtcgc tgatcgggcc gttgacatcg ctgcagcagg gtacagtgcc 180
gtgctggtgg ccccgccact tcgatccgaa ggcacggcct ggtgggcgcg ataccagccc 240
caggatctcc gccttatcga ccatccgctg ggcaatacac atgacttcgt caacatgatc 300
gatgctctcg atgatgtggg tgtgggcgtg tacgccgaca tcgtgctcaa ccacatggcc 360
aatgaggctg cacaaaggcc tgacctgaac taccctggtc aggcagtgct tgacgaatat 420
gcttccgatc ccggtcattt cgagggcttg aggctgttcg gtaatctgag cttcaatttc 480
ctgtcggaac atgatttcgg acccgcccag tgcattcagg attacagcga tgtgtttcag 540
gtccagaact ggcggctgtg cggaccgccg ccggacccgg gcctgcccga cctggtcgcc 600
aatgactggg tgatctctca acagcgccag tatctggaag ccatcaaggc gctgggtgtg 660
gctggcatgc gcatcgacgc ggtcaagcat atgcccatga gccatatcaa tgccgttctc 720
acccccgaga tccggtcggg cttgcatgtg tttggcgaag tcatcacctc cggtggggct 780
ggtgatacat cctacgaccg ttttctggcc ccttacctgg cacaaagcga ccatggtgcc 840
tatgactttc cattgtttga aaccattcgc cgtgctttcg gcttcggtgg cagcatgagt 900
gaactggtcg atcctgctgc ctacggtcag gccctgccac cggaccgcgc catcaccttc 960
gtcatcacgc acgatattcc gaacaatgac ggatttcgct accagatact cgaccccgtc 1020
gatgaatcac tggcctacgc ctacattctg ggccgcgatg gcggtgtccc gcttctgtat 1080
tccgacaaca atgaaagcgg cgatggccgc tggatcgatg cctggcaacg tccggatctg 1140
gttgcaatgg tcggcttcca caatgcagtc cacggtcagg acatggccgt gctttcacat 1200
gacgactgcc acctgctgtt tcggcgcggc agcctcggga ttgtcggcat caacaagtgc 1260
ggccatgcac tcagctcctg ggtcaacatg aaccagagcg tactgtggtg gtacgcggac 1320
tacacagacg tgctcgacag caacagcgtt gtcaacatcc agtcatcctg gcacgagttc 1380
atccttcccg cccgccaggc acgcctgtgg ttgcga 1416
<210>210
<211>472
<212>PRT
<213>环境的
<400>210
Met Ile Gln Pro Met His Ser Arg Glu Gln Ala Cys Arg Leu Ile Pro
1 5 10 15
Ala Leu Ile Met Thr Phe Ala Leu Ala Leu Pro Leu Gln Ile Arg Ala
20 25 30
Asp Val Thr Leu His Ala Phe Asn Trp Ser Tyr Ala Asp Val Ala Asp
35 40 45
Arg Ala Val Asp Ile Ala Ala Ala Gly Tyr Ser Ala Val Leu Val Ala
50 55 60
Pro Pro Leu Arg Ser Glu Gly Thr Ala Trp Trp Ala Arg Tyr Gln Pro
65 70 75 80
Gln Asp Leu Arg Leu Ile Asp His Pro Leu Gly Asn Thr His Asp Phe
85 90 95
Val Asn Met Ile Asp Ala Leu Asp Asp Val Gly Val Gly Val Tyr Ala
100 105 110
Asp Ile Val Leu Asn His Met Ala Asn Glu Ala Ala Gln Arg Pro Asp
115 120 125
Leu Asn Tyr Pro Gly Gln Ala Val Leu Asp Glu Tyr Ala Ser Asp Pro
130 135 140
Gly His Phe Glu Gly Leu Arg Leu Phe Gly Asn Leu Ser Phe Asn Phe
145 150 155 160
Leu Ser Glu His Asp Phe Gly Pro Ala Gln Cys Ile Gln Asp Tyr Ser
165 170 175
Asp Val Phe Gln Val Gln Asn Trp Arg Leu Cys Gly Pro Pro Pro Asp
180 185 190
Pro Gly Leu Pro Asp Leu Val Ala Asn Asp Trp Val Ile Ser Gln Gln
195 200 205
Arg Gln Tyr Leu Glu Ala Ile Lys Ala Leu Gly Val Ala Gly Met Arg
210 215 220
Ile Asp Ala Val Lys His Met Pro Met Ser His Ile Asn Ala Val Leu
225 230 235 240
Thr Pro Glu Ile Arg Ser Gly Leu His Val Phe Gly Glu Val Ile Thr
245 250 255
Ser Gly Gly Ala Gly Asp Thr Ser Tyr Asp Arg Phe Leu Ala Pro Tyr
260 265 270
Leu Ala Gln Ser Asp His Gly Ala Tyr Asp Phe Pro Leu Phe Glu Thr
275 280 285
Ile Arg Arg Ala Phe Gly Phe Gly Gly Ser Met Ser Glu Leu Val Asp
290 295 300
Pro Ala Ala Tyr Gly Gln Ala Leu Pro Pro Asp Arg Ala Ile Thr Phe
305 310 315 320
Val Ile Thr His Asp Ile Pro Asn Asn Asp Gly Phe Arg Tyr Gln Ile
325 330 335
Leu Asp Pro Val Asp Glu Ser Leu Ala Tyr Ala Tyr Ile Leu Gly Arg
340 345 350
Asp Gly Gly Val Pro Leu Leu Tyr Ser Asp Asn Asn Glu Ser Gly Asp
355 360 365
Gly Arg Trp Ile Asp Ala Trp Gln Arg Pro Asp Leu Val Ala Met Val
370 375 380
Gly Phe His Asn Ala Val His Gly Gln Asp Met Ala Val Leu Ser His
385 390 395 400
Asp Asp Cys His Leu Leu Phe Arg Arg Gly Ser Leu Gly Ile Val Gly
405 410 415
Ile Asn Lys Cys Gly His Ala Leu Ser Ser Trp Val Asn Met Asn Gln
420 425 430
Ser Val Leu Trp Trp Tyr Ala Asp Tyr Thr Asp Val Leu Asp Ser Asn
435 440 445
Ser Val Val Asn Ile Gln Ser Ser Trp His Glu Phe Ile Leu Pro Ala
450 455 460
Arg Gln Ala Arg Leu Trp Leu Arg
465 470
<210>211
<211>1491
<212>DNA
<213>环境的
<400>211
gtgtttcgtt ctgacacagt ttcgcgtacc tgcatgtatg gtgcgctgcg taatgcctac 60
caacccgatc gggtgtttac tggagtcacg gtgcggacat gcaacttaaa aaagcatgct 120
catcgccagg cgctgttgtt catcgtgacg cggtgcctgt gcctgaaatc caggcagacc 180
cataaaaaca acaacaaacc gataacaaac gacccaagcc ttctaagagg agaaaacggg 240
atggctttta aactacgcaa aaaggcgctc gttggcctgt tcacggccgg cgcaatggta 300
tatgccggtg cagcggcgag tggtgaaatc attctgcagg gcttccactg gcactccaag 360
tggggcggca acaatcaggg ttggtggcag gtgatggaag gtcaggccaa caccatcgcc 420
aacgccggct ttacgcacgt gtggttcccg ccggtccata actcggccga tgccgagggt 480
tacctacccc gcgagctgaa caacctcaac tccagctatg gctccgaagc acagctgcgc 540
agcgccatcc aggcactgaa caatcgcggc gtgcatgcga ttgccgatgt ggtcatgaac 600
caccgggtgg gctgctctgg ctgggcggat ttctgtaacc cggactggcc gacctggtac 660
atcgtcgcca atgattcctg gcccggtggc ccgaaaagcc agaactggga cacgggtgag 720
acgtaccacg ccgcccgtga cctcgatcac gccaatccgc aggtgcgcaa cgatatctcg 780
cactacctga acagccgcct caaggacgtc ggcttctccg gctggcgctg ggactatgcc 840
aagggtttct ggcccggcta tgtcggcgag tacaactgga acaccaaccc gaacttctgt 900
gtgggtgagg tgtgggacga tctcgacccc aacaatccca acccgcaccg ccagcaactg 960
gtggactggg ttgatgctac cggtggcagt tgtcacgtct tcgacttcac caccaagggg 1020
ctgacgaact atgcgctgca gcatggccag tactggcgcc tgcagggtga taatggtggc 1080
ccggctggcg gcatcggctg gtggccgcaa cgcatggtga ccttcgtcga caaccatgac 1140
acgggcccga gcaatcactg tggtgacggc cagaacctct ggcccgtgcc ctgtgacaag 1200
gtcatggagg cgtatgccta catcctgacc catccgggcg tgccgtcggt gtactggacg 1260
cacttcttca actggaatct tggtagcgag atcagccagt tgatgcagat ccgcaagaac 1320
cagggcgtgc actccggttc cgacgtctgg atcgccgagg cccgtcacgg cctgtacgcc 1380
gcctatatca acggtaatgt ggcgatgaag atgggctggg ataactggag cccgggctgg 1440
ggctggtcgc tggcggcctc cggtaacaac tgggccgtct ggacacgctg a 1491
<210>212
<211>496
<212>PRT
<213>环境的
<400>212
Val Phe Arg Ser Asp Thr Val Ser Arg Thr Cys Met Tyr Gly Ala Leu
1 5 10 15
Arg Asn Ala Tyr Gln Pro Asp Arg Val Phe Thr Gly Val Thr Val Arg
20 25 30
Thr Cys Asn Leu Lys Lys His Ala His Arg Gln Ala Leu Leu Phe Ile
35 40 45
Val Thr Arg Cys Leu Cys Leu Lys Ser Arg Gln Thr His Lys Asn Asn
50 55 60
Asn Lys Pro Ile Thr Asn Asp Pro Ser Leu Leu Arg Gly Glu Asn Gly
65 70 75 80
Met Ala Phe Lys Leu Arg Lys Lys Ala Leu Val Gly Leu Phe Thr Ala
85 90 95
Gly Ala Met Val Tyr Ala Gly Ala Ala Ala Ser Gly Glu Ile Ile Leu
100 105 110
Gln Gly Phe His Trp His Ser Lys Trp Gly Gly Asn Asn Gln Gly Trp
115 120 125
Trp Gln Val Met Glu Gly Gln Ala Asn Thr Ile Ala Asn Ala Gly Phe
130 135 140
Thr His Val Trp Phe Pro Pro Val His Asn Ser Ala Asp Ala Glu Gly
145 150 155 160
Tyr Leu Pro Arg Glu Leu Asn Asn Leu Asn Ser Ser Tyr Gly Ser Glu
165 170 175
Ala Gln Leu Arg Ser Ala Ile Gln Ala Leu Asn Asn Arg Gly Val His
180 185 190
Ala Ile Ala Asp Val Val Met Asn His Arg Val Gly Cys Ser Gly Trp
195 200 205
Ala Asp Phe Cys Asn Pro Asp Trp Pro Thr Trp Tyr Ile Val Ala Asn
210 215 220
Asp Ser Trp Pro Gly Gly Pro Lys Ser Gln Asn Trp Asp Thr Gly Glu
225 230 235 240
Thr Tyr His Ala Ala Arg Asp Leu Asp His Ala Asn Pro Gln Val Arg
245 250 255
Asn Asp Ile Ser His Tyr Leu Asn Ser Arg Leu Lys Asp Val Gly Phe
260 265 270
Ser Gly Trp Arg Trp Asp Tyr Ala Lys Gly Phe Trp Pro Gly Tyr Val
275 280 285
Gly Glu Tyr Asn Trp Asn Thr Asn Pro Asn Phe Cys Val Gly Glu Val
290 295 300
Trp Asp Asp Leu Asp Pro Asn Asn Pro Asn Pro His Arg Gln Gln Leu
305 310 315 320
Val Asp Trp Val Asp Ala Thr Gly Gly Ser Cys His Val Phe Asp Phe
325 330 335
Thr Thr Lys Gly Leu Thr Asn Tyr Ala Leu Gln His Gly Gln Tyr Trp
340 345 350
Arg Leu Gln Gly Asp Asn Gly Gly Pro Ala Gly Gly Ile Gly Trp Trp
355 360 365
Pro Gln Arg Met Val Thr Phe Val Asp Asn His Asp Thr Gly Pro Ser
370 375 380
Asn His Cys Gly Asp Gly Gln Asn Leu Trp Pro Val Pro Cys Asp Lys
385 390 395 400
Val Met Glu Ala Tyr Ala Tyr Ile Leu Thr His Pro Gly Val Pro Ser
405 410 415
Val Tyr Trp Thr His Phe Phe Asn Trp Asn Leu Gly Ser Glu Ile Ser
420 425 430
Gln Leu Met Gln Ile Arg Lys Asn Gln Gly Val His Ser Gly Ser Asp
435 440 445
Val Trp Ile Ala Glu Ala Arg His Gly Leu Tyr Ala Ala Tyr Ile Asn
450 455 460
Gly Asn Val Ala Met Lys Met Gly Trp Asp Asn Trp Ser Pro Gly Trp
465 470 475 480
Gly Trp Ser Leu Ala Ala Ser Gly Asn Asn Trp Ala Val Trp Thr Arg
485 490 495
<210>213
<211>23
<212>PRT
<213>环境的
<400>213
Met Phe Leu Leu Ala Phe Leu Leu Thr Ala Ser Leu Phe Cys Pro Thr
1 5 10 15
Gly Gln Pro Ala Lys Ala Ala
20
<210>214
<211>23
<212>PRT
<213>细菌的
<400>214
Val Leu Thr Phe His Arg Ile Ile Arg Lys Gly Trp Met Phe Leu Leu
1 5 10 15
Ala Phe Leu Leu Thr Ala Ser
20
<210>215
<211>33
<212>PRT
<213>细菌的
<400>215
Met Lys Ser Phe Ala Phe Met Pro Ile Leu Phe Tyr Ala Asn Asp Phe
1 5 10 15
Ile Ser Glu Arg Glu Gly Gly Gly Lys Met Gly Lys Asn Met Arg Arg
20 25 30
Arg
<210>216
<211>31
<212>PRT
<213>细菌的
<400>216
Met Arg Lys Lys Met Ser His Ser Arg Phe Thr Phe Leu Leu Ile Leu
1 5 10 15
Ala Leu Phe Ile Phe Phe Ser Gly Cys Ile Ser Glu Val Lys Ser
20 25 30
<210>217
<211>30
<212>PRT
<213>细菌的
<400>217
Met Tyr Thr Leu Phe Ile Arg Ser Phe Tyr Asp Thr Asn Asn Asp Gly
1 5 10 15
Val Gly Asp Tyr Asn Gly Val Ala Gln Lys Val Asp Tyr Leu
20 25 30
<210>218
<211>22
<212>PRT
<213>环境的
<400>218
Val Leu Thr Phe His Arg Ile Ile Arg Lys Gly Trp Met Phe Leu Leu
1 5 10 15
Ala Phe Leu Leu Thr Ala
20
<210>219
<211>33
<212>PRT
<213>环境的
<400>219
Met Ser Leu Phe Lys Lys Ile Phe Pro Trp Ile Val Ser Leu Leu Leu
1 5 10 15
Leu Phe Ser Phe Ile Ala Pro Phe Ser Ile Gln Thr Glu Lys Val Arg
20 25 30
Ala
<210>220
<211>25
<212>PRT
<213>环境的
<400>220
Met Ala Arg Lys Thr Leu Ala Ile Phe Phe Val Leu Leu Val Leu Leu
1 5 10 15
Ser Leu Ser Ala Val Pro Ala Lys Ala
20 25
<210>221
<211>35
<212>PRT
<213>环境的
<400>221
Met Pro Ala Phe Lys Ser Lys Val Met His Met Lys Leu Lys Tyr Leu
1 5 10 15
Ala Leu Val Leu Leu Ala Val Ala Ser Ile Gly Leu Leu Ser Thr Pro
20 25 30
Val Gly Ala
35
<210>222
<211>28
<212>PRT
<213>环境的
<400>222
Met Lys Gln Gln Lys Arg Leu Tyr Ala Arg Leu Leu Thr Leu Leu Phe
1 5 10 15
Ala Leu Ile Phe Leu Leu Pro His Ser Ala Ala Ala
20 25
<210>223
<211>21
<212>PRT
<213>环境的
<400>223
Met Arg Val Phe Leu Val Val Pro Lys Leu Ser Arg Pro Phe Gln Ala
1 5 10 15
Glu Ser Gln Gln Gln
20
<210>224
<211>30
<212>PRT
<213>细菌的
<400>224
Met Gln Thr Phe Ala Phe Leu Phe Tyr Ser Lys Lys Gly Trp Val Cys
1 5 10 15
Met Asn Tyr Leu Lys Lys Val Trp Leu Tyr Tyr Ala Ile Val
20 25 30
<210>225
<211>35
<212>PRT
<213>环境的
<400>225
Met Pro Gln Ala Ile Arg Thr Phe Ser Arg Trp Thr Leu Phe Gly Leu
1 5 10 15
Ile Gly Val Phe Leu Leu Gly Leu Val Phe Ser Val Pro Pro Arg Ala
20 25 30
Ile Gln Ala
35
<210>226
<211>28
<212>PRT
<213>环境的
<400>226
Val Val His Met Lys Leu Lys Tyr Leu Ala Leu Val Leu Leu Ala Val
1 5 10 15
Ala Ser Ile Gly Leu Leu Ser Thr Pro Val Gly Ala
20 25
<210>227
<211>30
<212>PRT
<213>环境的
<400>227
Val Cys Met Asn Tyr Leu Lys Lys Val Trp Leu Tyr Tyr Ala Ile Val
1 5 10 15
Ala Thr Leu Ile Ile Tyr Phe Leu Thr Pro Phe Ser Thr Ala
20 25 30
<210>228
<211>30
<212>PRT
<213>环境的
<400>228
Met Pro Gln Leu Tyr Pro Leu Pro Pro Arg Trp Arg Arg Ala Ala Arg
1 5 10 15
Gln Gly Leu Ala Ala Leu Thr Leu Ala Thr Thr Ala Leu Gly
20 25 30
<210>229
<211>30
<212>PRT
<213>环境的
<400>229
Met Asn Asn Val Lys Lys Val Trp Leu Tyr Tyr Ser Ile Ile Ala Thr
1 5 10 15
Leu Val Ile Ser Phe Phe Thr Pro Phe Ser Thr Ala Gln Ala
20 25 30
<210>230
<211>28
<212>PRT
<213>环境的
<400>230
Val Gly Arg Ala Gly Leu Ala His His Ser Asn Thr Ser Ala Lys Gly
1 5 10 15
Thr Tyr Gly Ser Pro Leu Glu Leu Arg Pro Asp Arg
20 25
<210>231
<211>23
<212>PRT
<213>环境的
<400>231
Met Lys Thr Phe Asn Leu Lys Pro Thr Leu Leu Pro Leu Thr Leu Leu
1 5 10 15
Leu Ser Ser Pro Val Leu Ala
20
<210>232
<211>23
<212>PRT
<213>环境的
<400>232
Met Lys Pro Ile Asn Thr Leu Leu Ile Ser Ala Leu Ala Val Cys Ser
1 5 10 15
Phe Ser Ser Ala Thr Tyr Ala
20
<210>233
<211>30
<212>PRT
<213>环境的
<400>233
Met Pro Lys Ser Thr Phe Thr Lys Ser Ile Thr Lys Ser Leu Leu Ala
1 5 10 15
Thr Ser Val Val Val Ser Leu Leu Pro Ala Tyr Ala Gln Ala
20 25 30
<210>234
<211>27
<212>PRT
<213>环境的
<400>234
Met Leu Lys Arg Ile Thr Val Val Cys Leu Leu Phe Ile Leu Leu Phe
1 5 10 15
Pro Asn Ile Tyr Gly Arg Asn Lys Ala Glu Ala
20 25
<210>235
<211>29
<212>PRT
<213>环境的
<400>235
Met Ser Leu Asn Asn Phe Lys Val Lys Leu Leu Ser Phe Ala Val Ser
1 5 10 15
Ser Ala Val Leu Ser Leu Ala Pro Asn Leu Ala Asn Ala
20 25
<210>236
<211>28
<212>PRT
<213>环境的
<400>236
Met Ile Leu Ser Asn Phe Lys Val Lys Leu Leu Ser Phe Ala Val Ser
1 5 10 15
Ser Ala Val Leu Thr Leu Ala AlaAsn Val Ala Asn
20 25
<210>237
<211>27
<212>PRT
<213>环境的
<400>237
Met Leu Lys Arg Ile Thr Val Val Cys Leu Leu Phe Ile Leu Leu Phe
1 5 10 15
Pro Asn Ile Tyr Glu Gly Asn Lys Ala Glu Ala
20 25
<210>238
<211>26
<212>PRT
<213>环境的
<400>238
Met Pro Ser Ile Asn Ala Ser Asp Cys Lys Lys Lys Gly Asp Arg Ser
1 5 10 15
Met Lys Arg Lys Lys Trp Thr Ala Leu Ala
20 25
<210>239
<211>33
<212>PRT
<213>环境的
<400>239
Val Ser Arg Met Phe Ala Lys Arg Phe Lys Thr Ser Leu Leu Pro Leu
1 5 10 15
Phe Ala Gly Phe Leu Leu Leu Phe His Leu Val LeuAla Gly Pro Thr
20 25 30
Ala
<210>240
<211>25
<212>PRT
<213>环境的
<400>240
Met Gln Thr Ile Ala Lys Lys GlyAsp Glu Thr Met Lys Gly Lys Lys
1 5 10 15
Trp Thr Ala Leu Ala Leu Thr Leu Pro
20 25
<210>241
<211>25
<212>PRT
<213>环境的
<400>241
Met Gln Lys Lys Gly Asp Glu Thr Met Lys Gly Lys Lys Trp Thr Ala
1 5 10 15
Leu Ala Leu Thr Leu Pro Leu Ala Ala
20 25
<210>242
<211>36
<212>PRT
<213>细菌的
<400>242
Val Asp Pro Lys Asn Cys Ser Gln Phe Met Gln Thr Ile Ala Lys Lys
1 5 10 15
Gly Asp Glu Thr Met Lys Gly Lys Lys Trp Thr Ala Leu Ala Leu Thr
20 25 30
Leu Pro Leu Ala
35
<210>243
<211>36
<212>PRT
<213>环境的
<400>243
Met Gln Thr Ile Ala Lys Lys Gly Asp Glu Thr Met Lys Gly Lys Lys
1 5 10 15
Trp Thr Ala Leu Ala Leu Thr Leu Pro Leu Ala Ala Ser Leu Ser Thr
20 25 30
Gly Val His Ala
35
<210>244
<211>23
<212>PRT
<213>环境的
<400>244
Met Lys Thr Phe Lys Leu Lys Ahr Thr Phe Leu Pro Leu Thr Leu Leu
1 5 10 15
Leu Ser Ala Pro Ala Phe Ala
20
<210>245
<211>25
<212>PRT
<213>环境的
<400>245
Met Gln Thr Ile Ala Lys Lys Gly Asp Glu Thr Met Lys Gly Lys Lys
1 5 10 15
Trp Thr Ala Leu Ala Leu Thr Leu Pro
20 25
<210>246
<211>22
<212>PRT
<213>环境的
<400>246
Met Lys Asn Ile Ile Arg Leu Cys Ala Ala Ser Ala Ile Leu Thr Val
1 5 10 15
Ser His Ala Ser Tyr Ala
20
<210>247
<211>23
<212>PRT
<213>环境的
<400>247
Met Lys Thr Phe Lys Leu Lys Arg Thr Phe Leu Pro Leu Thr Leu Leu
1 5 10 15
Leu Ser Ala Pro Ala Phe Ala
20
<210>248
<211>23
<212>PRT
<213>环境的
<400>248
Met Lys Thr Phe Lys Leu Lys Arg Thr Phe Leu Pro Leu Thr Leu Leu
1 5 10 15
Leu Ser Ala Pro Ala Phe Ala
20
<210>249
<211>25
<212>PRT
<213>环境的
<400>249
Met Lys Leu Met Lys Gly Lys Lys Trp Thr Ala Leu Ala Leu Thr Leu
1 5 10 15
Pro Leu Ala Ala Ser Leu Ser Thr Gly
20 25
<210>250
<211>36
<212>PRT
<213>环境的
<400>250
Met Gln Thr Ile Ala Lys Lys Gly Asp Glu Thr Met Lys Gly Lys Lys
1 5 10 15
Trp ThrAla Leu Ala Leu Thr Leu Pro Leu Ala Ala Ser Leu Ser Thr
20 25 30
Gly Val His Ala
35
<210>251
<211>25
<212>PRT
<213>环境的
<400>251
Met Gln Thr Ile Ala Lys Lys Gly Asp Glu Thr Met Lys Gly Lys Lys
1 5 10 15
Trp Thr Ala Leu Ala Leu Thr Leu Pro
20 25
<210>252
<211>25
<212>PRT
<213>环境的
<400>252
Met Lys Phe Lys Lys Ser Leu SerAla Gly Leu Leu Leu Phe Gly Gly
1 5 10 15
Leu Ser Gly Val Thr Pro Ser Val Ala
20 25
<210>253
<211>23
<212>PRT
<213>环境的
<400>253
Met Lys Pro Ser Lys Phe Val Phe Leu Ser Ala Ala Ile Ala Cys Ser
1 5 10 15
Leu Ser Ser Thr Ala Asn Ala
20
<210>254
<211>23
<212>PRT
<213>环境的
<400>254
Val Ser Leu Thr Lys Lys Ala Gln Tyr Glu Pro Asn Thr Ala Pro Arg
1 5 10 15
Leu Ser Thr Ser Leu Gln Ser
20
<210>255
<211>30
<212>PRT
<213>环境的
<400>255
Met Thr Ala Lys Ala Asp Asp Leu Arg Ile Tyr Gln Ile Met Val Glu
1 5 10 15
Ser Phe Cal Asp Gly Asp Lys Gln Val Gly His Gly Thr Gly
20 25 30
<210>256
<211>25
<212>PRT
<213>环境的
<400>256
Met Lys Met Lys Ser Arg Ala Trp Leu Leu Gly Ser Ala Val Ala Met
1 5 10 15
Ala Leu Ala Ser Ser Ala Ala Asn Ala
20 25
<210>257
<211>16
<212>PRT
<213>环境的
<400>257
Met Tyr Arg Val Ile Pro Ile Ile Leu Ile Met Ser Met Ile Val Ala
1 5 10 15
<210>258
<211>47
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>258
gaacactagt aggaggtaac ttatggcaaa gtattccgag ctcgaag 47
<210>259
<211>39
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>259
gaacggtctc attccgccag ccagcaaggg gatgagcgg 39
<210>260
<211>33
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>260
gaaccgtctc aaaacacggc ccatgcctac ggc 33
<210>261
<211>38
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>261
gaacgtctca cctcgacttc caccccaacg aggtcaag 38
<210>262
<211>33
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>262
gaacgtctca ggcgctttga ctacgtgaag ggc 33
<210>263
<211>32
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>263
gaacggtctc aacaagatgg atgaggcctt tg 32
<210>264
<211>38
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>264
gaaccgtctc acgatataat ctggaacaag taccttgc 38
<210>265
<211>35
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>265
gaaccgtctc agaagcacga gcatagttta ctacg 35
<210>266
<211>30
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>266
gaaccgtctc aaaggtgggt ttatgtgccg 30
<210>267
<211>36
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>267
gaacgtctca ggaatccaaa tggcggatat tcccgc 36
<210>268
<211>33
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>268
gaacggtctc agtttatcat attgatgagc tcc 33
<210>269
<211>33
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>269
gaaccgtctc agaggtagtt ggcagtatat ttg 33
<210>270
<211>31
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>270
gaacgtctca cgccaggcat caacgccgat g 31
<210>271
<211>30
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>271
gaacgtctca ttgtagtaga gcgggaagtc 30
<210>272
<211>32
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>272
gaacggtctc aatcggtgtc gtggtttgct ac 32
<210>273
<211>31
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>273
gaaccgtctc acttccacct gcgaggtggt c 31
<210>274
<211>31
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>274
gaaccgtctc accttccaac cttgctcgag c 31
<210>275
<211>33
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>275
tcgagactga ctctcaccca acaccgcaat agc 33
<210>276
<211>50
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>276
gaacactagt aggaggtaac ttatggccaa gtacctggag ctcgaagagg 50
<210>277
<211>31
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>277
gaacggtctc attcccccgg cgagcaaggg c 31
<210>278
<211>32
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>278
gaaccgtctc aaaacaccgc ccacgcctac gg 32
<210>279
<211>29
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>279
gaacgtctca cctcgacttc caccccaac 29
<210>280
<211>31
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>280
gaacgtctca ggcgcttcga ctacgtcaag g 31
<210>281
<211>34
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>281
gaacggtctc aacaagatgg acgcggcctt tgac 34
<210>282
<211>35
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>282
gaaccgtctc acgatataat ttggaacaag taccc 35
<210>283
<211>31
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>283
gaaccgtctc agaagcaccg acatagtcta c 31
<210>284
<211>30
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>284
gaaccgtctc aaaggtgggt ctacgttccg 30
<210>285
<211>36
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>285
gaacgtctca ggaatccata ttgcggagat tccggc 36
<210>286
<211>32
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>286
gaacggtctc agtttatcat gttcacgagc tc 32
<210>287
<211>33
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>287
gaaccgtctc agaggtagtt ggccgtgtac ttg 33
<210>288
<211>30
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>288
gaacgtctca gccatgcgtc aacgccgatg 30
<210>289
<211>31
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>289
gaacgtctca ttgtagtaga gcgggaagtc g 31
<210>290
<211>33
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>290
gaacggtctc aatcggtgtc gtggtttgca acg 33
<210>291
<211>34
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>291
gaaccgtctc acttccaccg gcgaggtggt cgtg 34
<210>292
<211>32
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>292
gaaccgtctc accttccggc cttgctcgag cc 32
<210>293
<211>35
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>293
tcgagactga ctctcagccc accccgcagt agctc 35
<210>294
<211>50
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>294
gaacactagt aggaggtaac ttatggccaa gtactccgag ctggaagagg 50
<210>295
<211>30
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>295
gaacggtctc attcctcccg cgagcaaggg 30
<210>296
<211>31
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>296
gaaccgtctc aaaacaccgc ccacgcctat g 31
<210>297
<211>33
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>297
gaacgtctca cctcgacttc cacccgaacg agc 33
<210>298
<211>31
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>298
gaacgtctca ggcgcttcga ctacgtcaag g 31
<210>299
<211>32
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>299
gaacggtctc aacaagatgg acgaggcctt cg 32
<210>300
<211>30
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>300
gaaccgtctc acgatataat ctggaacaag 30
<210>301
<211>35
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>301
gaaccgtctc agaagcactg acatcgttta ctacg 35
<210>302
<211>30
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>302
gaaccgtctc aaaggtgggt ttacgttccg 30
<210>303
<211>30
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>303
gaacgtctca ggaatccata tcgccgaaat 30
<210>304
<211>30
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>304
gaacggtctc agtttatcat gtttatgagc 30
<210>305
<211>34
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>305
gaaccgtctc agaggtagtt ggccgtgtat ttac 34
<210>306
<211>30
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>306
gaacgtctca cgccaggcat cgatgccgat 30
<210>307
<211>34
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>307
gaacgtctca ttgtagtaga gggcgaagtc aaag 34
<210>308
<211>36
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>308
gaacggtctc aatcggtatc gtggttggct acaaac 36
<210>309
<211>34
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>309
gaaccgtctc acttcctccg gcgaggttgt catg 34
<210>310
<211>32
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>310
gaaccgtctc accttccggc tttgcttgag gc 32
<210>311
<211>36
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>311
tcgagactga ctctcaccca acaccgcagt agctcc 36
<210>312
<211>38
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>312
cacacagcag caaccaacct cgagactgac tctcascc 38
<210>313
<211>461
<212>PRT
<213>热球菌(Pyrococcus sp.)
<400>313
Met Lys Lys Phe Val Ala Leu Leu Ile Thr Met Phe Phe Val Val Ser
1 5 10 15
Met Ala Ala Val Ala Gln Pro Ala Ser Ala Ala Lys Tyr Ser Glu Leu
20 25 30
Glu Glu Gly Gly Val Ile Met Gln Ala Phe Tyr Trp Asp Val Pro Ala
35 40 45
Gly Gly Ile Trp Trp Asp Thr Ile Arg Ser Lys Ile Pro Glu Trp Tyr
50 55 60
Glu Ala Gly Ile Ser Ala Ile Trp Ile Pro Pro Ala Ser Lys Gly Met
65 70 75 80
Gly Gly Ala Tyr Ser Met Gly Tyr Asp Pro Tyr Asp Phe Phe Asp Leu
85 90 95
Gly Glu Tyr Asn Gln Lys Gly Thr Val Glu Thr Arg Phe Gly Ser Lys
100 105 110
Gln Glu Leu Ile Asn Met Ile Asn Thr Ala His Ala Tyr Gly Ile Lys
115 120 125
Val Ile Ala Asp Ile Val Ile Asn His Arg Ala Gly Gly Asp Leu Glu
130 135 140
Trp Asn Pro Phe Val Gly Asp Tyr Thr Trp Thr Asp Phe Ser Lys Val
145 150 155 160
Ala Ser Gly Lys Tyr Thr Ala Asn Tyr Leu Asp Phe His Pro Asn Glu
165 170 175
Val Lys Cys Cys Asp Glu Gly Thr Phe Gly Gly Phe Pro Asp Ile Ala
180 185 190
His Glu Lys Glu Trp Asp Gln His Trp Leu Trp Ala Ser Asp Glu Ser
195 200 205
Tyr Ala Ala Tyr Leu Arg Ser Ile Gly Val Asp Ala Trp Arg Phe Asp
210 215 220
Tyr Val Lys Gly Tyr Gly Ala Trp Val Val Lys Asp Trp Leu Asn Trp
225 230 235 240
Trp Gly Gly Trp Ala Val Gly Glu Tyr Trp Asp Thr Asn Val Asp Ala
245 250 255
Leu Leu Asn Trp Ala Tyr Ser Ser Gly Ala Lys Val Phe Asp Phe Pro
260 265 270
Leu Tyr Tyr Lys Met Asp Glu Ala Phe Asp Asn Thr Asn Ile Pro Ala
275 280 285
Leu Val Asp Ala Leu Gln Asn Gly Gly Thr Val Val Ser Arg Asp Pro
290 295 300
Phe Lys Ala Val Thr Phe Val Ala Asn His Asp Thr Asp Ile Ile Trp
305 310 315 320
Asn Lys Tyr Pro Ala Tyr Ala Phe Ile Leu Thr Tyr Glu Gly Gln Pro
325 330 335
Val Ile Phe Tyr Arg Asp Tyr Glu Glu Trp Leu Asn Lys Asp Lys Leu
340 345 350
Asn Asn Leu Ile Trp Ile His Asp His Leu Ala Gly Gly Ser Thr Ser
355 360 365
Ile Val Tyr Tyr Asp Ser Asp Glu Leu Ile Phe Val Arg Asn Gly Asp
370 375 380
Ser Lys Arg Pro Gly Leu Ile Thr Tyr Ile Asn Leu Gly Ser Ser Lys
385 390 395 400
Val Gly Arg Trp Val Tyr Val Pro Lys Phe Ala Gly Ala Cys Ile His
405 410 415
Glu Tyr Thr Gly Asn Leu Gly Gly Trp Val Asp Lys Tyr Val Glu Ser
420 425 430
Ser Gly Trp Val Tyr Leu Glu Ala Pro Ala Tyr Asp Pro Ala Ser Gly
435 440 445
Gln Tyr Gly Tyr Thr Val Trp Ser Tyr Cys Gly Val Gly
450 455 460
<210>314
<211>460
<212>PRT
<213>激烈热球菌(Pyrococcus furiosus)
<400>314
Val Asn Ile Lys Lys Leu Thr Pro Leu Leu Thr Leu Leu Leu Phe Phe
1 5 10 15
Ile Val Leu Ala Ser Pro Val Ser Ala Ala Lys Tyr Leu Glu Leu Glu
20 25 30
Glu Gly Gly Val Ile Met Gln Ala Phe Tyr Trp Asp Val Pro Gly Gly
35 40 45
Gly Ile Trp Trp Asp His Ile Arg Ser Lys Ile Pro Glu Trp Tyr Glu
50 55 60
Ala Gly Ile Ser Ala Ile Trp Leu Pro Pro Pro Ser Lys Gly Met Ser
65 70 75 80
Gly Gly Tyr Ser Met Gly Tyr Asp Pro Tyr Asp Tyr Phe Asp Leu Gly
85 90 95
Glu Tyr Tyr Gln Lys Gly Thr Val Glu Thr Arg Phe Gly Ser Lys Glu
100 105 110
Glu Leu Val Arg Leu Ile Gln Thr Ala His Ala Tyr Gly Ile Lys Val
115 120 125
Ile Ala Asp Val Val Ile Asn His Arg Ala Gly Gly Asp Leu Glu Trp
130 135 140
Asn Pro Phe Val Gly Asp Tyr Thr Trp Thr Asp Phe Ser Lys Val Ala
145 150 155 160
Ser Gly Lys Tyr Thr Ala Asn Tyr Leu Asp Phe His Pro Asn Glu Leu
165 170 175
His Cys Cys Asp Glu Gly Thr Phe Gly Gly Phe Pro Asp Ile Cys His
180 185 190
His Lys Glu Trp Asp Gln Tyr Trp Leu Trp Lys Ser Asrn Glu Ser Tyr
195 200 205
Ala Ala Tyr Leu Arg Ser Ile Gly Phe Asp Gly Trp Arg Phe Asp Tyr
210 215 220
Val Lys Gly Tyr Gly Ala Trp Val Val Arg Asp Trp Leu Asn Trp Trp
225 230 235 240
Gly Gly Trp Ala Val Gly Glu Tyr Trp Asp Thr Asn Val Asp Ala Leu
245 250 255
Leu Ser Trp Ala Tyr Glu Ser Gly Ala Lys Val Phe Asp Phe Pro Leu
260 265 270
Tyr Tyr Lys Met Asp Glu Ala Phe Asp Asn Asn Asn Ile Pro Ala Leu
275 280 285
Val Tyr Ala Leu Gln Asn Gly Gln Thr Val Val Ser Arg Asp Pro Phe
290 295 300
Lys Ala Val Thr Phe Val Ala Asn His Asp Thr Asp Ile Ile Trp Asn
305 310 315 320
Lys Tyr Pro Ala Tyr Ala Phe Ile Leu Thr Tyr Glu Gly Gln Pro Val
325 330 335
Ile Phe Tyr Arg Asp Phe Glu Glu Trp Leu Asn Lys Asp Lys Leu Ile
340 345 350
Asn Leu Ile Trp Ile His Asp His Leu Ala Gly Gly Ser Thr Thr Ile
355 360 365
Val Tyr Tyr Asp Asn Asp Glu Leu Ile Phe Val Arg Asn Gly Asp Ser
370 375 380
Arg Arg Pro Gly Leu Ile Thr Tyr Ile Asn Leu Ser Pro Asn Trp Val
385 390 395 400
Gly Arg Trp Val Tyr Val Pro Lys Phe Ala Gly Ala Cys Ile His Glu
405 410 415
Tyr Thr Gly Asn Leu Gly Gly Trp Val Asp Lys Arg Val Asp Ser Ser
420 425 430
Gly Trp Val Tyr Leu Glu Ala Pro Pro His Asp Pro Ala Asn Gly Tyr
435 440 445
Tyr Gly Tyr Ser Val Trp Ser Tyr Cys Gly Val Gly
450 455 460
<210>315
<211>484
<212>PRT
<213>热球菌(Thermococcus sp.)
<400>315
Ser Glu Ser Gln Cys Thr Ala Thr Cys Thr Trp Arg Val Val Tyr Met
1 5 10 15
Ser Ala Lys Lys Leu Leu Ala Leu Leu Phe Val Leu Ala Val Leu Val
20 25 30
Gly Val Ala Val Ile Pro Ala Arg Val Gly Ile Ala Pro Val Ser Ala
35 40 45
Gly Ala Thr Ser Arg Pro Ser Leu Glu Glu Gly Gly Val Ile Met Gln
50 55 60
Ala Phe Tyr Trp Asp Val Pro Ala Gly Gly Ile Trp Trp Asp Thr Ile
65 70 75 80
Arg Ser Lys Ile Pro Asp Trp Ala Ser Ala Gly Ile Ser Ala Ile Trp
85 90 95
Ile Pro Pro Ala Ser Lys Gly Met Ser Gly Ala Tyr Ser Met Gly Tyr
100 105 110
Asp Pro Tyr Asp Phe Phe Asp Leu Gly Glu Tyr Tyr Gln Lys Gly Thr
115 120 125
Val Glu Thr Arg Phe Gly Ser Lys Gln Glu Leu Ile Asn Met Ile Asn
130 135 140
Thr Ala His Ser Tyr Gly Ile Lys Val Ile Ala Asp Ile Val Ile Asn
145 150 155 160
His Arg Ala Gly Gly Asp Leu Glu Trp Asn Pro Phe Thr Asn Ser Tyr
165 170 175
Thr Trp Thr Asp Phe Ser Lys Val Ala Ser Gly Lys Tyr Thr Ala Asn
180 185 190
Tyr Leu Asp Phe His Pro Asn Glu Val Lys Cys Cys Asp Glu Gly Thr
195 200 205
Phe Gly Gly Phe Pro Asp Ile Ala His Glu Lys Ser Trp Asp Gln Tyr
210 215 220
Trp Leu Trp Ala Ser Gln Lys Ser Tyr Ala Ala Tyr Leu Arg Ser Ile
225 230 235 240
Gly Ile Asp Ala Trp Arg Phe Asp Tyr Val Lys Gly Tyr Gly Ala Trp
245 250 255
Val Val Lys Asp Trp Leu Lys Trp Trp Ala Leu Ala Val Gly Glu Tyr
260 265 270
Trp Asp Thr Asn Val Asp Ala Leu Leu Asn Trp Ala Tyr Ser Ser Gly
275 280 285
Ala Lys Val Phe Asp Phe Pro Leu Tyr Tyr Lys Met Asp Glu Ala Phe
290 295 300
Asp Asn Lys Asn Ile Pro Ala Leu Val Ser Ala Leu Gln Asn Gly Gln
305 310 315 320
Thr Val Val Ser Arg Asp Pro Phe Lys Ala Val Thr Phe Val Ala Asn
325 330 335
His Asp Thr Asp Ile Ile Trp Asn Lys Tyr Pro Ala Tyr Ala Phe Ile
340 345 350
Leu Thr Tyr Glu Gly Gln Pro Val Ile Phe Tyr Arg Asp Tyr Glu Glu
355 360 365
Trp Leu Asn Lys Asp Arg Leu Lys Asn Leu Ile Trp Ile His Asn Asn
370 375 380
Leu Ala Gly Gly Ser Thr Ser Ile Val Tyr Tyr Asp Asn Asp Glu Leu
385 390 395 400
Ile Phe Val Arg Asn Gly Tyr Gly Asn Lys Pro Gly Leu Ile Thr Tyr
405 410 415
Ile Asn Leu Gly Ser Ser Lys Val Gly Arg Trp Val Tyr Val Pro Lys
420 425 430
Phe Ala Gly Ser Cys Ile His Glu Tyr Thr Gly Asn Leu Gly Gly Trp
435 440 445
Val Asp Lys Tyr Val Gly Ser Asn Gly Trp Val Tyr Leu Glu Ala Pro
450 455 460
Ala His Asp Pro Ala Lys Gly Gln Tyr Gly Tyr Ser Val Trp Ser Tyr
465 470 475 480
Cys Gly Val Gly
<210>316
<211>457
<212>PRT
<213>热水管热球菌(Thermococcus hydrothermalis)
<400>316
Met Ala Arg Lys Val Leu Val Ala Leu Leu Val Phe Leu Val Val Leu
1 5 10 15
Ser Val Ser Ala Val Pro Ala Lys Ala Glu Thr Leu Glu Asn Gly Gly
20 25 30
Val Ile Met Gln Ala Phe Tyr Trp Asp Val Pro Gly Gly Gly Ile Trp
35 40 45
Trp Asp Thr Ile Ala Gln Lys Ile Pro Asp Trp Ala Ser Ala Gly Ile
50 55 60
Ser Ala Ile Trp Ile Pro Pro Ala Ser Lys Gly Met Ser Gly Gly Tyr
65 70 75 80
Ser Met Gly Tyr Asp Pro Tyr Asp Phe Phe Asp Leu Gly Glu Tyr Tyr
85 90 95
Gln Lys Gly Ser Val Glu Thr Arg Phe Gly Ser Lys Glu Glu Leu Val
100 105 110
Asn Met Ile Asn Thr Ala His Ala His Asn Met Lys Val Ile Ala Asp
115 120 125
Ile Val Ile Asn His Arg Ala Gly Gly Asp Leu Glu Trp Asn Pro Phe
130 135 140
Thr Asn Ser Tyr Thr Trp Thr Asp Phe Ser Lys Val Ala Ser Gly Lys
145 150 155 160
Tyr Thr Ala Asn Tyr Leu Asp Phe His Pro Asn Glu Leu His Ala Gly
165 170 175
Asp Ser Gly Thr Phe Gly Gly Tyr Pro Asp Ile Cys His Asp Lys Ser
180 185 190
Trp Asp Gln His Trp Leu Trp Ala Ser Asn Glu Ser Tyr Ala Ala Tyr
195 200 205
Leu Arg Ser Ile Gly Ile Asp Ala Trp Arg Phe Asp Tyr Val Lys Gly
210 215 220
Tyr Ala Pro Trp Val Val Lys Asn Trp Leu Asn Arg Trp Gly Gly Trp
225 230 235 240
Ala Val Gly Glu Tyr Trp Asp Thr Asn Val Asp Ala Leu Leu Ser Trp
245 250 255
Ala Tyr Asp Ser Gly Ala Lys Val Phe Asp Phe Pro Leu Tyr Tyr Lys
260 265 270
Met Asp Glu Ala Phe Asp Asn Asn Asn Ile Pro Ala Leu Val Asp Ala
275 280 285
Leu Lys Asn Gly Gly Thr Val Val Ser Arg Asp Pro Phe Lys Ala Val
290 295 300
Thr Phe Val Ala Asn His Asp Thr Asn Ile Ile Trp Asn Lys Tyr Pro
305 310 315 320
Ala Tyr Ala Phe Ile Leu Thr Tyr Glu Gly Gln Pro Ala Ile Phe Tyr
325 330 335
Arg Asp Tyr Glu Glu Trp Leu Asn Lys Asp Arg Leu Arg Asn Leu Ile
340 345 350
Trp Ile His Asp His Leu Ala Gly Gly Ser Thr Asp Ile Ile Tyr Tyr
355 360 365
Asp Ser Asp Glu Leu Ile Phe Val Arg Asn Gly Tyr Gly Asp Lys Pro
370 375 380
Gly Leu Ile Thr Tyr Ile Asn Leu Gly Ser Ser Lys Ala Gly Arg Trp
385 390 395 400
Val Tyr Val Pro Lys Phe Ala Gly Ser Cys Ile His Glu Tyr Thr Gly
405 410 415
Asn Leu Gly Gly Trp Ile Asp Lys Trp Val Asp Ser Ser Gly Arg Val
420 425 430
Tyr Leu Glu Ala Pro Ala His Asp Pro Ala Asn Gly Gln Tyr Gly Tyr
435 440 445
Ser Val Trp Ser Tyr Cys Gly Val Gly
450 455
<210>317
<211>340
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>共有序列
<400>317
Ser Ala Leu Glu Gly Gly Val Ile Met Gln Ala Phe Tyr Trp Asp Val
1 5 10 15
Pro Gly Gly Ile Trp Trp Asp Ile Lys Ile Pro Trp Ala Gly Ile Ser
20 25 30
Ala Ile Trp Pro Pro Ser Lys Gly Met Gly Tyr Ser Met Gly Tyr Asp
35 40 45
Pro Tyr Asp Phe Asp Leu Gly Glu Tyr Gln Lys Gly Glu Thr Arg Phe
50 55 60
Gly Ser Lys Glu Leu Ile Thr Ala His Lys Val Ile Ala Asp Val Ile
65 70 75 80
Asn His Arg Ala Gly Gly Asp Leu Glu Trp Asn Pro Phe Tyr Thr Trp
85 90 95
Thr Asp Phe Ser Lys Val Ala Ser Gly Lys Tyr Thr Ala Asn Tyr Leu
100 105 110
Asp Phe His Pro Asn Glu Asp Gly Thr Phe Gly Gly Pro Asp Ile His
115 120 125
Lys Trp Asp Gln Trp Leu Trp Ser Ser Tyr Ala Ala Tyr Leu Arg Ser
130 135 140
Ile Gly Asp Trp Arg Phe Asp Tyr Val Lys Gly Tyr Trp Val Val Trp
145 150 155 160
Leu Trp Ala Val Gly Glu Tyr Trp Asp Thr Asn Val Asp Ala Leu Leu
165 170 175
Trp Ala Tyr Ser Gly Ala Lys Val Phe Asp Phe Pro Leu Tyr Tyr Lys
180 185 190
Met Asp Glu Ala Phe Asp Asn Asn Ile Pro Ala Leu Val Ala Leu Asn
195 200 205
Gly Thr Val Val Ser Arg Asp Pro Phe Lys Ala Val Thr Phe Val Ala
210 215 220
Asn His Asp Thr Ile Ile Trp Asn Lys Tyr Ala Tyr Ala Phe Ile Leu
225 230 235 240
Thr Tyr Glu Gly Gln Pro Ile Phe Tyr Arg Asp Glu Glu Trp Leu Asn
245 250 255
Lys Asp Leu Asn Leu Ile Trp Ile His Leu Ala Gly Gly Ser Thr Ile
260 265 270
Tyr Tyr Asp Asp Glu Ile Phe Val Arg Asn Gly Pro Gly Leu Ile Thr
275 280 285
Tyr Ile Asn Leu Gly Arg Trp Val Tyr Val Pro Lys Phe Ala Gly Cys
290 295 300
Ile His Glu Tyr Thr Gly Asn Leu Gly Gly Trp Asp Lys Val Ser Gly
305 310 315 320
Val Tyr Glu Ala Pro Asp Pro Ala Gly Tyr Gly Tyr Val Trp Ser Tyr
325 330 335
Cys Gly Val Gly
340
<210>318
<211>463
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>克隆
<400>318
Met Arg Arg Ser Ala Arg Val Leu Val Leu Ile Ile Ala Phe Phe Leu
1 5 10 15
Leu Ala Gly Ile Tyr Tyr Pro Ser Thr Ser Ala Ala Lys Tyr Ser Glu
20 25 30
Leu Glu Gln Gly Gly Val Ile Met Gln Ala Phe Tyr Trp Asp Val Pro
35 40 45
Glu Gly Gly Ile Trp Trp Asp Thr Ile Arg Gln Lys Ile Pro Glu Trp
50 55 60
Tyr Asp Ala Gly Ile Ser Ala Ile Trp Ile Pro Pro Ala Ser Lys Gly
65 70 75 80
Met Gly Gly Ala Tyr Ser Met Gly Tyr Asp Pro Tyr Asp Tyr Phe Asp
85 90 95
Leu Gly Glu Phe Tyr Gln Lys Gly Thr Val Glu Thr Arg Phe Gly Ser
100 105 110
Lys Glu Glu Leu Val Asn Met Ile Ser Thr Ala His Gln Tyr Gly Ile
115 120 125
Lys Val Ile Ala Asp Ile Val Ile Asn His Arg Ala Gly Gly Asp Leu
130 135 140
Glu Trp Asn Pro Tyr Val Gly Asp Tyr Thr Trp Thr Asp Phe Ser Lys
145 150 155 160
Val Ala Ser Gly Lys Tyr Lys Ala His Tyr Met Asp Phe His Pro Asn
165 170 175
Asn Tyr Ser Thr Ser Asp Glu Gly Thr Phe Gly Gly Phe Pro Asp Ile
180 185 190
Asp His Leu Val Pro Phe Asn Gln Tyr Trp Leu Trp Ala Ser Asn Glu
195 200 205
Ser Tyr Ala Ala Tyr Leu Arg Ser Ile Gly Ile Asp Ala Trp Arg Phe
210 215 220
Asp Tyr Val Lys Gly Tyr Gly Ala Trp Val Val Lys Asp Trp Leu Ser
225 230 235 240
Gln Trp Gly Gly Trp Ala Val Gly Glu Tyr Trp Asp Thr Asn Val Asp
245 250 255
Ala Leu Leu Asn Trp Ala Tyr Ser Ser Gly Ala Lys Val Phe Asp Phe
260 265 270
Pro Leu Tyr Tyr Lys Met Asp Glu Ala Phe Asp Asn Lys Asn Ile Pro
275 280 285
Ala Leu Val Tyr Ala Ile Gln Asn Gly Glu Thr Val Val Ser Arg Asp
290 295 300
Pro Phe Lys Ala Val Thr Phe Val Ala Asn His Asp Thr Asn Ile Ile
305 310 315 320
Trp Asn Lys Tyr Pro Ala Tyr Ala Phe Ile Leu Thr Tyr Glu Gly Gln
325 330 335
Pro Val Ile Phe Tyr Arg Asp Tyr Glu Glu Trp Leu Asn Lys Asp Lys
340 345 350
Leu Asn Asn Leu Ile Trp Ile His Glu His Leu Ala Gly Gly Ser Thr
355 360 365
Lys Ile Leu Tyr Tyr Asp Asp Asp Glu Leu Ile Phe Met Arg Glu Gly
370 375 380
Tyr Gly Asp Arg Pro Gly Leu Ile Thr Tyr Ile Asn Leu Gly Ser Asp
385 390 395 400
Trp Ala Glu Arg Trp Val Asn Val Gly Ser Lys Phe Ala Gly Tyr Thr
405 410 415
Ile His Glu Tyr Thr Gly Asn Leu Gly Gly Trp Val Asp Arg Tyr Val
420 425 430
Gln Tyr Asp Gly Trp Val Lys Leu Thr Ala Pro Pro His Asp Pro Ala
435 440 445
Asn Gly Tyr Tyr Gly Tyr Ser Val Trp Ser Tyr Ala Gly Val Gly
450 455 460
<210>319
<211>306
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>共有序列
<400>319
Gly Gly Ile Met Gln Ala Phe Tyr Trp Asp Val Pro Gly Gly Ile Trp
1 5 10 15
Trp Asp Ile Lys Ile Pro Trp Ala Gly Ile Ser Ala Ile Trp Pro Pro
20 25 30
Ser Lys Gly Met Gly Tyr Ser Met Gly Tyr Asp Pro Tyr Asp Phe Asp
35 40 45
Leu Gly Glu Gln Lys Gly Glu Thr Arg Phe Gly Ser Lys Glu Leu Ile
50 55 60
Thr Ala His Lys Val Ile Ala Asp Val Ile Asn His Arg Ala Gly Gly
65 70 75 80
Leu Glu Trp Asn Pro Tyr Thr Trp Thr Asp Phe Ser Lys Val Ala Ser
85 90 95
Gly Lys Tyr Ala Tyr Asp Phe His Pro Asn Asp Gly Thr Phe Gly Gly
100 105 110
Pro Asp Ile His Gln Trp Leu Trp Ser Ser Tyr Ala Ala Tyr Leu Arg
115 120 125
Ser Ile Gly Asp Trp Phe Asp Tyr Val Lys Gly Tyr Trp Val Val Trp
130 135 140
Leu Trp Ala Val Gly Glu Tyr Trp Asp Thr Asn Val Asp Ala Leu Trp
145 150 155 160
Ala Tyr Ser Ala Lys Val Phe Asp Phe Leu Tyr Tyr Lys Met Asp Ala
165 170 175
Phe Asp Asn Asn Ile Pro Ala Leu Val Ala Gly Thr Val Val Ser Arg
180 185 190
Asp Pro Phe Lys Ala Val Thr Phe Val Ala Asn His Asp Thr Ile Ile
195 200 205
Trp Asn Lys Tyr Ala Tyr Ala Phe Ile Leu Thr Tyr Glu Gly Gln Pro
210 215 220
Ile Phe Tyr Arg Asp Glu Glu Trp Leu Asn Lys Asp Leu Asn Leu Ile
225 230 235 240
Trp Ile His Leu Ala Gly Gly Ser Thr Ile Tyr Tyr Asp Asp Glu Ile
245 250 255
Phe Arg Gly Pro Gly Leu Ile Thr Tyr Ile Asn Leu Arg Trp Val Val
260 265 270
Lys Phe Ala Gly Ile His Glu Tyr Thr Gly Leu Gly Gly Trp Asp Val
275 280 285
Gly Val Ala Pro Asp Pro Ala Gly Tyr Gly Tyr Val Trp Ser Tyr Gly
290 295 300
Val Gly
305
<210>320
<211>1392
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>克隆
<400> 320
atgaggagat ccgcaagggt tttggttctg attatagcgt ttttcctcct ggcggggatt 60
tactacccct ccacgagtgc cgcgaagtac tccgagctgg agcagggcgg agtcataatg 120
caggccttct actgggacgt tccggaggga ggaatctggt gggacacaat acggcagaag 180
atccctgaat ggtacgatgc aggcatatcc gccatctgga tacccccggc gagcaagggc 240
atgggcgggg cctactcgat gggctacgac ccctacgatt acttcgatct gggcgagttt 300
taccagaagg gaaccgttga gacccgcttc ggctccaagg aagagctcgt caacatgatc 360
tccacggccc accagtacgg catcaaggtt atagcggaca tagtgataaa ccaccgcgca 420
ggtggagacc tcgaatggaa cccatacgtc ggcgactata cctggacgga cttttctaag 480
gtcgcctccg ggaaatacaa ggcccactac atggacttcc atccaaacaa ctacagcacc 540
tcagacgagg gaaccttcgg tggcttccca gacattgatc acctcgtgcc cttcaaccag 600
tactggctgt gggcgagcaa cgagagctac gccgcctacc tcaggagcat agggatcgat 660
gcgtggcgct ttgactacgt taagggctac ggcgcgtggg tcgtcaagga ctggctgagt 720
cagtggggcg gctgggccgt cggcgagtac tgggacacca acgtcgatgc gctcctcaac 780
tgggcctaca gcagcggcgc caaggtcttc gacttcccgc tctactacaa gatggacgag 840
gcctttgaca acaagaacat tcccgccctc gtttacgcca tccagaacgg tgaaaccgtc 900
gtcagcaggg atcccttcaa ggccgttacc ttcgtggcta accacgatac gaacataatc 960
tggaacaagt accctgccta tgccttcatc ctgacctacg aaggtcagcc cgtcatcttc 1020
taccgcgact acgaggagtg gctcaacaag gacaaactca acaacctcat atggattcac 1080
gagcacctgg cagggggaag caccaagatc ctctactacg acgacgatga gctcatcttc 1140
atgagggaag gctacggcga caggcccggg cttataacct acatcaacct cggtagcgac 1200
tgggcggaga gatgggtgaa cgttggctca aagttcgcgg gctatacaat ccacgaatac 1260
accggaaacc tcggcggctg ggtcgacagg tacgtccagt acgacggctg ggtcaagctt 1320
accgctccgc cacacgatcc ggcaaacggc tattacggct actcggtctg gagctacgcc 1380
ggagttggat ga 1392
<210>321
<211>846
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>共有序列
<400>321
ggcggtataa tgcaggcttc tatgggagtc cggaggaatt ggtgggacac ataagatccg 60
atgggcggat tcgcattgga tccccgcaga agggatggcg ggtatcatgg gctacgaccc 120
tacgatttga ctgggagtac agaagggatg aacgttggtc aaagacttaa atgatcacgc 180
caacataagg tatgcgaatg tataaccacc gcgcgggggc tgatggaacc tcctaacctg 240
gacgatttca agtgctcgga ataagccact actgacttcc accaacagag gacttggggt 300
ccgaatcacc taccagactg gcttgggcag cgaagctacg cgctactgga gcatggtgag 360
ctgggttgac tacgtaaggg ctagctgggt gtaactggct gtggggggct gggcgtggga 420
gtactgggac acaacgtgag ctctactggg ctacagcggc aagtcttgac ttccctctac 480
tacaagatgg aggccttgaa aaaacatccg ctgtgctagg acgtgtccgg accttaagcg 540
tacttgtgca accacgaaca ataattggaa caagtacgct agcttcatcc tacctagagg 600
cagccatttt accgcgacta cgaggagtgg ctcaacaagg aataaacctc attggatcag 660
aacctgcggg gagacattta ctacgacgag atattttaga ggctaggcac cggctataac 720
taatcaacct gcggagtggg tagtcaagtt cgcggatcac gataacggac tcggggtggt 780
gacagtgttc gggggtatgc cccacgaccg caaggatagg ctactcgttg gagctacggg 840
tggtga 846
淀粉酶是用多种微生物制备的，这些微生物包括芽孢杆菌属 (Bacillus)和曲霉属(Aspergillus)，其中许多商业淀粉酶是从细菌来 源制备的，如地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)，解淀粉芽孢杆菌 (Bacillus amyloliquefaciens)，枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)，或嗜 热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus)。在最近几年，那些来自 地衣芽孢杆菌的酶已经用于商业应用中，原因在于它们的热稳定性和 性能，至少中性和弱碱性的pH值。
通常，淀粉到果糖的加工包括四个步骤：颗粒淀粉的液化，液化 淀粉糖化为葡萄糖，纯化，和异构化为果糖。淀粉液化步骤的目的是 将淀粉聚合物颗粒的浓缩悬浮液转化为低粘度的可溶性短链糊精溶 液。该步骤对于用标准设备便利地处理和有效转化为葡萄糖或103其它 糖是必要的。为了液化颗粒淀粉，必须通过将颗粒淀粉的温度升高到 高于大约72℃以使颗粒胶凝化。加热过程可以瞬间破坏不溶性淀粉颗 粒从而产生水溶性淀粉溶液。然后通过淀粉酶将溶解的淀粉溶液液化。 淀粉颗粒包括：69-74％支链淀粉，26-31％淀粉酶，11-14％水，0.2-0.4％ 蛋白质，0.5-0.9％脂质，0.05-0.1％灰分，0.02-0.03％磷，0.1％戊聚糖。 大约70％的颗粒是非晶态的，30％是晶态的。
普通的酶液化步骤涉及通过加入氢氧化钙，氢氧化钠或碳酸钠将 颗粒淀粉浆料的pH值调节到6.0-6.5之间，是衍生于地衣芽孢杆菌的α- 淀粉酶的最适pH值。加入氢氧化钙还有一个优点，就是可以提供钙离 子，已知钙离子能够稳定α-淀粉酶以免其发生失活。一旦加入α-淀粉 酶，就通过蒸汽喷嘴抽出悬浮液，这样可以将温度瞬间升高到 80℃-115℃之间。淀粉被立刻胶凝化，随后由于存在α-淀粉酶，通过α- 淀粉酶随机水解(1-4)糖苷键将其被解聚为流体物质，这样易于抽出。
在液化步骤的第二种变化形式中，α-淀粉酶被加入到淀粉悬浮液 中，悬浮液被保持在80-100℃的温度以部分地水解淀粉颗粒，然后部 分水解的淀粉颗粒通过喷嘴在超过大约105℃的温度被抽出，以彻底地 胶凝化任何剩余的颗粒结构。在冷却胶凝淀粉后，第二次加入α-淀粉 酶，以进一步水解淀粉。
该步骤的第三种变化形式被称作干磨方法。在干磨法中，将全粒 研磨，并且与水混合。通过漂浮分离或等效技术任选地去除胚芽。用α- 淀粉酶液化所得到的混合物，该混合物含有淀粉、纤维、蛋白质和谷 物的其它成分。当使用干磨法时，本技术领域通常的实践是采取在较 低温度下进行酶液化。通常，在将淀粉转化为可溶性糊精时，认为低 温液化比高温液化的效率低一些。
典型地，淀粉溶液在胶凝化后，在存在α-淀粉酶的情况下，保持 于高温下，直到DE达到10-20，通常保持1-3小时。葡萄糖当量值(DE) 是用于测量总的还原糖浓度的行业标准，是以干重量计算的D-葡萄糖 来表示。未水解的颗粒淀粉的DE实质上为零，尽管D-葡萄糖的DE 被定义为100。
玉米湿磨是一种产生玉米油、谷蛋白粉、谷蛋白饲料和淀粉的方 法。碱性淀粉酶被用于淀粉液化中，葡糖淀粉酶被用于糖化中，从而 产生葡萄糖。玉米是一种包括外种皮(纤维)、淀粉、淀粉和葡萄糖的 结合物和内胚芽的谷粒，进行一种四步骤方法，该四步骤方法导致产 生淀粉。玉米被浸泡，去胚芽，去纤维，最后分离谷蛋白。在浸泡过 程中，取出可溶性物质。去掉可溶性物质后剩余的产物被去胚芽，这 样导致产生了玉米油且产生了油饼，油饼可以被加入到来自浸泡步骤 的可溶性物质中。剩余产物被去纤维，然后纤维固体被加入到油饼/可 溶性混合物中。纤维固体、油饼和可溶性物质的混合物形成了谷蛋白 饲料。在去纤维后，剩余产物进行谷蛋白分离。该分离导致谷蛋白粉 和淀粉。然后将淀粉进行液化和糖化，产生葡萄糖。
烘烤产品(如面包)的老化(staling)已经被认为是随着面包产品 制备时刻和消费时刻之间的时间变长而变得越来越严重的一个问题。 术语老化被用于描述面包产品在离开烤箱后的不受消费者欢迎的性质 变化，如面包屑的坚硬性增加，面包屑弹性降低，面包皮发生变化， 变得坚韧嚼不动。面包屑坚硬性在储存过程中进一步增加到一个被认 为是被拒绝的水平。面包屑坚硬性的增加被认为是老化的最重要方面， 是由消费者辨认的，是在面包产品在其它方面变得不适合消费之前的 很长一段时间就发生的。
在该行业存在对于淀粉酶的鉴别和最优化的需求，淀粉酶可用于 多种用途，包括商业玉米淀粉液化工艺中。例如，相对于来自地衣芽 孢杆菌的行业标准酶而言，这些第二代酸性淀粉酶将提供改进的生产 和/或工作特性。
也存在对于鉴别和最优化在自动洗碗机(ADW)产品和洗衣行业 的去污剂中有用的淀粉酶的需求。在ADW产品中，淀粉酶将在存在 钙螯合剂和氧化条件下，在pH 10-11和45-60℃发挥作用。对于洗衣行 业，需要在适当的去污剂基料中，于pH 9-10和40℃下的活性。淀粉 酶在织物脱浆、酿造工艺、造纸和纸浆行业中的淀粉改性以及本技术 领域的其它工艺中有用。
此处讨论的公开文献只提供了它们在本发明提交日之前的公开内 容。此处没有任何内容可以被解释为承认本发明没有依赖现有发明而 以较前的时日记入这些公开内容。
发明概述
本发明提供了一种分离的核酸，其具有如下序列中所阐明的序列： SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37， 39，41，43，45，47，49，51，53，55，57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77， 79，81，83，85，87，89，91，93，95，97，99，101，103，105，107，109，111，113， 115，117，119，121，123，125，127，129，131，133，135，137，139，141，143， 145，147，149，151，153，155，157，159，161，163，165，167，169，171，173， 175，177，179，181，183，185，187，189，191，193，195，197，199，201，203， 205，207，209，211，213，215，217，219，221，223，225，227，229，231，233， 235，237，239，241，243，245，247，249，251，253，255，257，259，261，263， 265，267，269，271，273，275，277，279，281，283，285，287，289，291，293， 295，297，299及其与如下序列具有至少50％序列同一性的变体：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41， 43，45，47，49，51，53，55，57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81， 83，85，87，89，91，93，95，97，99，101，103，105，107，109，111，113，115， 117，119，121，123，125，127，129，131，133，135，137，139，141，143，145， 147，149，151，153，155，157，159，161，163，165，167，169，171，173，175， 177，179，181，183，185，187，189，191，193，195，197，199，201，203，205， 207，209，211，213，215，217，219，221，223，225，227，229，231，233，235， 237，239，241，243，245，247，249，251，253，255，257，259，261，263，265， 267，269，271，273，275，277，279，281，283，285，287，289，291，293，295， 297，299，和编码具有α-淀粉酶活性的多肽。
本发明的一个方面是一种分离的核酸，其具有如下序列中所阐明 的序列：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13，15，17，19，21，23，25，27，29，31， 33，35，37，39，41，43，45，47，49，51，53，55，57，59，61，63，65，67，69，71， 73，75，77，79，81，83，85，87，89，91，93，95，97，99，101，103，105，107， 109，111，113，115，117，119，121，123，125，127，129，131，133，135，137， 139，141，143，145，147，149，151，153，155，157，159，161，163，165，167， 169，171，173，175，177，179，181，183，185，187，189，191，193，195，197， 199，201，203，205，207，209，211，213，215，217，219，221，223，225，227， 229，231，233，235，237，239，241，243，245，247，249，251，253，255，257， 259，261，263，265，267，269，271，273，275，277，279，281，283，285，287， 289，291，293，295，297，299(下文被称作“A组核酸序列”)，与其基本 上同一的序列，和与其互补的序列。
本发明的另一个方面是一种分离的核酸，其包括至少10个连续碱 基，所述至少10个连续碱基是A组核酸序列，与其基本上同一的序列， 和与其互补的序列中所阐明的序列的碱基。
仍然在另一个方面，本发明提供了一种分离的核酸，其编码具有 如下述序列中所阐明的序列的多肽：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16， 18，20，22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56， 58，60，62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96， 98，100，102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126， 128，130，132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156， 158，160，162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186， 188，190，192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218， 220，222，224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248， 250，252，254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278， 280，282，284，286，288，290，292，294，296，298及其编码具有α-淀粉酶 活性和与这些序列具有至少50％序列同一性的多肽的变体。
本发明的另一个方面是一种分离的核酸，其编码具有如下述序列 中所阐明的序列的多肽或其功能片段：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14， 16，18，20，22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54， 56，58，60，62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94， 96，98，100，102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126， 128，130，132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156， 158，160，162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186， 188，190，192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218， 220，222，224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248， 250，252，254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278， 280，282，284，286，288，290，292，294，296，298(下文被称作“B组氨基 酸序列”)，和与其基本上同一的序列。
本发明的另一个方面是一种分离的核酸，其编码一种多肽，该多 肽具有至少10个连续氨基酸，所述10个连续氨基酸是B组氨基酸序 列和与其基本上同一的序列中所阐明的序列的氨基酸。
仍然在另一个方面，本发明提供了一种纯化的多肽，该多肽具有 如B组氨基酸序列和与其基本上同一的序列中所阐明的序列。
本发明的另一个方面是一种分离的或纯化的抗体，该抗体与具有 如B组氨基酸序列和与其基本上同一的序列中所阐明的序列的多肽特 定地结合。
本发明的另一个方面是一种分离的或纯化的抗体或其结合片段， 该抗体或其结合片段与具有至少10个连续氨基酸的多肽特定地结合， 所述10个连续氨基酸是B组氨基酸序列和与其基本上同一的序列的多 肽之一的10个连续氨基酸。
本发明的另一个方面是一种制备多肽的方法，该多肽具有B组氨 基酸序列和与其基本上同一的序列中所阐明的序列。该方法包括将编 码多肽的核酸导入宿主细胞，其中所述核酸与启动子可操作地连接. 并且在允许核酸表达的条件下培养宿主细胞。
本发明的另一个方面是一种制备多肽的方法，该多肽具有至少10 个氨基酸，是B组氨基酸序列和与其基本上同一的序列中所阐明的序 列的10个氨基酸。该方法包括将编码多肽的核酸导入宿主细胞，其中 所述核酸与启动子可操作地连接，并且在允许核酸表达的条件下培养 宿主细胞，从而产生该多肽。
本发明的另一个方面是一种产生变体的方法，该方法包括获得具 有如下序列中所阐明的一个序列的核酸：A组核酸序列，与其基本上 同一的序列，与A组核酸序列基本上互补的序列中，包括前述序列的 至少30个连续核苷酸的片段；将该序列中的一个或多个核苷酸改变为 另一个核苷酸；删除该序列中的一个或多个核苷酸；或将一个或多个 核苷酸添加到该序列中。
本发明的另一个方面是一种可用计算机读取的存储介质，其上已 经存储了A组核酸序列和与其基本上同一的序列中所阐明的序列，或 B组氨基酸序列和基本上与其同一的序列中所阐明的多肽序列。
本发明的另一个方面是一种计算机系统，该系统包括一个处理器 和一个数据存储设备，其中数据存储设备上已经存储了A组核酸序列 和与其基本上同一的序列中所阐明的序列，或具有B组氨基酸序列和 基本上与其同一的序列中所阐明的序列的多肽。
本发明的另一个方面是一种将第一个序列与参考序列进行比较的 方法，其中第一个序列是具有如A组核酸序列和与其基本上同一的序 列中所阐明的序列的核酸，或B组氨基酸序列和基本上与其同一的序 列的多肽编码。该方法包括通过使用进行序列比较的计算机程序读取 第一个序列和参考序列；用该计算机程序确定第一个序列和参考序列 之间的差异。
本发明的另一个方面是一种方法，用于鉴别A组核酸序列和与其 基本上同一的序列中所阐明的序列的特征，或鉴别具有B组氨基酸序 列和基本上与其同一的序列中所阐明的序列的多肽的特征，该方法包 括通过使用能在序列中进行特征鉴别的计算机程序读取序列；用该计 算机程序鉴别序列的特征。
本发明的另一个方面是一种分析方法，用于鉴别B组氨基酸序列 和基本上与其同一的序列的片段或变体，其保留了B组氨基酸序列和 与其基本上同一的序列的多肽的酶功能。该分析方法包括将B组氨基 酸序列和基本上与其同一的序列的多肽，或多肽片段或变体，与底物 分子在允许多肽片段或变体发挥作用的条件下接触；检测是底物水平 有所降低，还是多肽与底物之间反应的特定反应产物水平有所增加， 从而鉴别这些序列的片段或变体。
本发明也提供了一种方法，用于制备生面团或烘烤产品，该方法 包括将本发明的淀粉酶以可以显著延迟面包老化的量加入到生面团 中。本发明也提供了一种包括所述淀粉酶的生面团，和一种包括所述 淀粉酶和面粉的预混合料。最后，本发明提供了一种酶烘烤添加剂， 该添加剂含有所述淀粉酶。
根据本发明，使用淀粉酶提供了一种改进的抗老化效果，正如通 过如下特性所测定的，例如较少的面包屑变硬，持久的面包屑弹性， 改进的可切片性能(例如面包屑更少，无胶质面包屑)，改进的可口性 或味道。
附图简述
下述附图是本发明的实施方案的例证性说明，不意味着限定本发 明的范围，本发明的范围如权利要求所描述。
图1是计算机系统的流程图。
图2是例证性说明一个实施方案的流程图，所述比较方法用于将 新核苷酸或蛋白序列与序列数据库进行比较，以确定新序列和数据库 中的序列之间的同源性水平。
图3是例证性地说明计算机中一种方法的一个实施方案的流程图. 所述方法用于确定两个序列是否是同源的。
图4是例证性地说明一种识别符方法300的一个实施方案的流程 图，所述方法用于检测序列特征的存在。
图5显示了实施例1中各种淀粉酶在加热到90℃维持10分钟后的 残余活性。
图6显示了使用漂白剂和螯合剂的ADW洗涤测试中所去除的淀 粉的净百分比与酶浓度的关系曲线。
图7显示了pH8，40℃的亲代淀粉酶于55℃在ADW配方中的活 性。
图8是关于实施例4中新颖酶的H2O2耐受性的数据图。
图9是选择所表征的淀粉酶的pH和温度数据图。图9a显示了pH 8，40℃的数据，图9b显示了pH10，50℃的数据。
图10阐明了在用酶进行的重装配试验中所使用的序列。
图11例证性说明了实施例5的样本标准曲线分析。
图12例证性说明了SEQ ID NO.：127的pH等级曲线图，其具有 中性最适pH，和SEQ ID NO.：211的pH等级曲线图，其具有大约10 的最适pH值。
图13显示了Diversa淀粉酶与商业酶相比的稳定性，如实施例2 中所讨论的。
图14显示了嗜低温α-淀粉酶的序列对比，如实施例8中所阐明的。 图14a显示了淀粉酶序列的对齐。SEQ ID NO.:81＝环境克隆；pyro＝ 热球菌属(Pyrococcus sp.(菌株：KOD1))，Tachibana，Y.，Mendez，L.， Takagi，M.和Imanaka，T.，J Ferment.Bioeng.82：224-232，1996；pyro2＝激 烈热球菌(Pyrococcus furiosus)，Appl.Environ.Microbiol.63(9)： 3569-3576，1997；Thermo＝热球菌(Thermococcus sp.)；Thermo2＝热水 管热球菌(Thermococcus hydrothermalis)，Leveque，E等人专利：法国 98.05655，1998年5月5日，未公开。图14b显示了鉴别的序列的氨基 酸序列对比：SEQ ID NO.：81；pyro；SEQ ID NO.：75；SEQ ID NO.：77； SEQ ID NO.：83；SEQ ID NO.：85；thermo2；SEQ ID NO.：79；thermo； pyro2；克隆A；thermo3。图14c显示了与图5和6的多肽序列相应的 核酸序列对比。SEQ ID NO.：81；SEQ ID NO.：75；SEQ ID NO.：77；SEQ ID NO.：83；SEQ ID NO.：85；SEQ ID NO.：79；克隆A；和SEQ ID NO.： 73。
图15是用邻位相连法(Neighor-jointing)所得的热球菌目 (Thermococcales)进化树。
图16是本发明的序列。
发明详述
本发明涉及淀粉酶和编码这些酶的多核苷酸。正如此处所用，术 语“淀粉酶”包括具有α-淀粉酶活性的酶，例如能在多糖中水解内α-1，4- 葡聚糖键的淀粉酶，包括能在碱性pH或酸性pH将淀粉水解为糖的淀 粉酶。本发明的淀粉酶特别地可用于玉米湿磨法，去污剂，烘烤工艺， 饮料和油田(燃料乙醇)中。淀粉酶也可以用于织物脱浆，酿造工艺， 纸和纸浆工业中淀粉改性和本技术领域描述的其它方法中。
已经鉴定出本发明的多核苷酸编码具有α淀粉酶或碱性淀粉酶活 性的多肽。本发明的碱性淀粉酶可以包括，但不限于：SEQ ID NO.：115； SEQ ID NO.：207；SEQ ID NO.：139；SEQ ID NO.：127；SEQ ID NO.：137； SEQ ID NO.：113；SEQ ID NO.：205；SEQ ID NO.：179；SEQ ID NO.：151； SEQ ID NO.：187；SEQ ID NO.：97；SEQ ID NO.：153；SEQ ID NO.：69； SEQ ID NO.：135；SEQ ID NO.：189；SEQ ID NO.：119；SEQ ID NO.：209 和SEQ ID NO.：211。
可以在本发明的变体中实现的特性改变是如下的特性改变，例如 底物特异性、底物结合性、底物分裂型、热稳定性、pH/活性曲线、pH/ 稳定性曲线[如在低pH值(例如pH＜6，尤其是pH＜5)或高pH值(例如 pH＞9)下增加的稳定性]、抗氧化稳定性、Ca2+依赖性、比活性和其它相 关特性。例如，与亲本淀粉酶相比，可以产生改变导致具有降低的Ca2+依赖性和/或改变的pH/活性曲线的变体。
本发明涉及α淀粉酶和编码这些酶的多核苷酸。正如此处所用， 术语“α淀粉酶”包括具有α-淀粉酶活性的酶，例如能将淀粉水解为 糖的酶。与许多已知的淀粉酶不同，本发明的淀粉酶可以是不依赖于 钙的酶。
高度期望能降低α-淀粉酶的Ca2+依赖性。因此，本发明的一方面 提供了一种淀粉酶，该淀粉酶与商品酶或亲本淀粉酶相比具有降低的 Ca2+依赖性。降低的Ca2+依赖性通常将具有功能后果，即变体在存在比 商品酶或亲本酶所需要的浓度低的钙离子浓度的情况下，在外部介质 中表现出令人满意的淀粉分解活性。降低的Ca2+依赖性通常进一步具 有如下结果，即变体对于钙离子贫乏的条件不太敏感，如那些在含有 钙配位剂的介质中所获得的条件(例如某些去污剂助剂)。
“液化作用”或“液化”是指一种过程，通过该过程淀粉被转化 为短链和低粘性糊精。通过，该过程包括在加入α淀粉酶的同时或加 入α淀粉酶之后胶凝化淀粉。在商业过程中，优选地颗粒淀粉来自玉 米、小麦、蜀黍、高粱、黑麦或bulgher(一种俄罗斯作物)。然而，本 发明适用于可用于液化的任何谷物淀粉来源，例如已知可以产生适合 于液化的淀粉的任何其它谷物或植物来源。
“颗粒淀粉”或“淀粉颗粒”指可食用谷物的水不溶性成分，该 成分在去除外壳、纤维、蛋白质、脂肪、胚芽后保留下来的部分，并 且在经过谷物湿磨方法所特有的浸泡、机械破裂、分离、筛选、逆流 冲洗和离心步骤处理后可溶。颗粒淀粉包括含有，几乎是独占地含有 压紧的淀粉分子(即支链淀粉和直链淀粉)的完整淀粉颗粒。在玉米 中，颗粒淀粉成分含有大约99％淀粉；剩余1％包括蛋白质、脂肪、灰 分、纤维素和与颗粒密切相关的微量成分。颗粒淀粉的填充物结构严 重地阻碍了α-淀粉酶水解淀粉的能力。利用淀粉的胶凝化来破坏颗粒， 以得到可溶性淀粉溶液且有助于酶水解。
“淀粉溶液”指水溶性胶凝淀粉，通过加热颗粒淀粉得到。一旦 将颗粒加热到超过大约72℃，颗粒淀粉就溶解形成疏松淀粉分子的含 水混合物。该混合物形成一种粘性水溶液，所述混合物，例如在黄色 马齿种玉米中，包括大约75％支链淀粉和25％直链淀粉。“α淀粉酶” 指裂解或水解α(1-4)糖苷键的酶活性，例如淀粉，支链淀粉或直链淀粉 聚合物中的α(1-4)糖苷键。合适的α淀粉酶是天然存在的α淀粉酶，以 及可用于淀粉液化中的重组或突变淀粉酶。例如，本发明也包括了在 不同于野生型淀粉酶的pH或温度下，产生具有活性的变异淀粉酶的技 术。
液化的温度范围通常是任何已知在液化淀粉中有效的液化温度。 优选地，淀粉的温度介于大约80℃-大约115℃之间，更优选地介于大 约100℃-大约110℃之间，最优选地介于大约105℃-大约108℃之间。
在一个实施方案中，本发明的信号序列是在鉴别新颖淀粉酶多肽 后被鉴别的。蛋白质被分选，且转运到其适当细胞位置的途径是通过 被称作蛋白质导向途径实现的。在所有这些导向系统中最重要的元件 之一是称作信号序列的位于新合成的多肽的氨基末端上的短氨基酸序 列。信号序列将蛋白质指向其在细胞中的适当位置，在转运过程中或 者当蛋白质到达其最终目的地时被去除。大部分溶酶体、膜或分泌蛋 白具有一个氨基末端信号序列，该信号标记它们转移到内质网的内腔 中。该组中超过100种蛋白质的信号序列已经被确定。序列的长度在 13-36个氨基酸残基之间。识别信号序列的各种方法对于本技术领域的 普通技术人员而言是已知的。在一个实施方案中，通过一种被称作 SignalP的方法来鉴别肽。SignalP使用综合神经网络来识别信号肽以及 它们的裂解位点。(Nielsen，H.，Engelbrecht，J.，Brunalk，S.，von Heijne， G.，“Identification of prokaryotic and eukaryotic signal peptides and prediction of their cleavage sites.”Protein Engineering，第10卷，第1期， 1-6页(1997)，此处引用作为参考)。应该理解到，本发明的一些淀粉酶 可以没有信号序列。可以期望包括编码信号序列的核酸序列，所述信 号序列来自与一种不同淀粉酶的核酸序列可操作连接的淀粉酶，或任 选地来自非淀粉酶蛋白的信号序列是期望的。表3显示了本发明的信 号序列。
正如此处所用，短语“核酸”或“核酸序列”指寡核苷酸、核苷 酸、多核苷酸，或指寡核苷酸、核苷酸、多核苷酸中任一种的片段， 指基因组或合成来源的DNA或RNA，指肽核酸(PNA)，或者指任何天 然或合成来源的类似DNA或类似RNA的物质。
特定多肽或蛋白质的“编码序列”或“编码特定多肽或蛋白质的 核苷酸序列”是当在置于适当调节序列控制下时被转录或翻译到多肽 或蛋白质中的核酸序列。
术语“基因”指涉及产生多肽链的DNA片段；包括编码区之前和 之后的区(前导区和非转录尾区)，以及适当的时候，包括个体编码片 段(外显子)之间的间插序列(内含子)。
正如此处所用，“氨基酸”或“氨基酸序列”指寡肽、肽、多肽或 蛋白序列，或指寡肽、肽、多肽或蛋白序列中任意一种的片段、部分 或亚单位，指天然分子或合成分子。
正如此处所用，术语“多肽”指通过肽键或修饰的肽键即肽等排 物(peptide isostere)彼此连接在一起的氨基酸，并且可以含有除了20 个由基因编码的氨基酸以外的修饰氨基酸。多肽可以通过任一种天然 方法修饰，如翻译后加工，或通过本技术领域已知的化学修饰技术修 饰。修饰可以发生在多肽中的任何地方，包括肽骨架、氨基酸侧链和 氨基末端或羧基末端。应该意识到，在给定的多肽中，相同类型的修 饰可以在数个位点以相同或变化的程度存在。而且，给定的多肽可以 具有许多类型的修饰。这些修饰包括乙酰化作用、酰化作用、ADP-核 糖基化作用、酰胺化作用、黄素的共价附着、亚铁血红素部分的共价 附着、核苷酸或核苷酸衍生物的共价附着、脂质或脂质衍生物的共价 附着、phosphytidylinositol的共价附着、交联环化、二硫键形成、脱甲 基作用、共价交联的形成、半胱氨酸的形成、焦谷氨酸的形成、甲酰 化作用、γ-羧化作用、糖基化作用、GPI锚形成、羟基化作用、碘化作 用、甲基化作用、豆蔻酰化、氧化、pergylation、蛋白水解加工、磷酸 化作用、异戊二烯化、外消旋作用、硒化作用(selenoylation)、硫酸化 作用、t-RNA介导的将氨基酸加入到蛋白质的过程如精氨酰化。(参考 Creighton，T.E.，Proteins-structure and Molecular Properties第二版，W.H. Freeman and Company，New York(1993)；Posttranslational Covalent Modification of Proteins，B.C.Johnson编著，Academic Press，New York， 1-12页(1983))。
正如此处所用，术语“分离的”指物质离开其原始环境(例如， 如果是天然存在的，则离开其天然环境)。例如，存在于活的动物体内 的天然存在的多核苷酸或多肽不是分离的，但从天然系统中的一些或 全部共存物质中分离出的相同多核苷酸或多肽是分离的。这样的多核 苷酸可以是载体的一部分，和/或这样的多核苷酸或多肽可以是组合物 的一部分，它们仍然是分离的，原因在于这些载体或组合物不是天然 环境的一部分。
正如此处所用，术语“纯化的”不要求完全纯化；更确切地说， 该术语是一个相对定义。来自文库的个体核苷酸已经被常规地纯化达 到电泳同质性。来自这些克隆的序列不能直接从文库或者直接从总人 DNA获得。本发明的纯化的核酸已经从微生物的基因组DNA的剩余 物中纯化了至少104-106倍。然而，术语“纯化的”也包括已经从基因 组DNA的剩余物或从文库或其它环境中的其它序列纯化了至少一个 数量级的核酸，典型地是纯化了两个或三个数量级，更典型地是四个 或五个数量级。
正如此处所用，术语“重组的”指核酸与“骨架”核酸相邻，而 在其天然环境中与“骨架”核酸不是相邻的。另外，被“富集”的核 酸表示核酸骨架分子群体中的核酸插入物达到5％或更多数量。根据本 发明的骨架分子包括核酸，如表达载体、自我复制核酸、病毒、整合 核酸和其它用于维持或操纵相关核酸插入物的载体或核酸。典型地， 富集的核酸表示重组骨架分子群体中的核酸插入物达到15％或更多数 量。更典型地，富集核酸表示重组骨架分子群体中的核酸插入物为50％ 或更多数量。在一个实施方案中，富集核酸表示重组骨架分子群体中 的核酸插入物达到90％或更多数量。
“重组的”多肽或蛋白质指通过重组DNA技术产生的多肽或蛋白 质；即，通过编码期望多肽或蛋白质的外源DNA构建物转化的细胞产 生的多肽或蛋白质。“合成的”多肽或蛋白质是那些通过化学合成制备 的多肽或蛋白质。也可以固相化学肽合成方法来合成本发明的多肽或 片段。这些方法自从20世纪60年代早期在本技术领域就已经已知 (Merrifield，R.B.，J.Am.Chem.Soc.，85：2149-2154，1963)(也可以参 见Stewart，J.M.和Young，J.D.，Solid Phase Peptide Synthesis，第二版， Pierce Chemical Co.，Rockford，I11，11-12页))，并且最近已经被用于可 通过商业途径获得的实验室肽设计和合成试剂盒(Cambridge Research Biochemicals)。这些可通过商业途径获得的实验室试剂盒通常使用了 H.M.Geysen等人，Proc.Natl.Acad.Sci.，USA，81：3998(1984)的教导， 在大量“棒”或“针”的尖端上提供合成肽，所有棒或针与单个板子 相连接。当使用这样的系统时，一个具有棒或针的板子被翻转，且插 入到具有相应孔或容器的第二个板子中，所述孔或容器含有将适当氨 基酸附着或固定到针或棒尖端的溶液。通过重复这一处理步骤，即将 棒或针的尖端翻转且插入到适当溶液中，氨基酸就被构建到期望肽中。 此外，可以得到数量众多的FMOC肽合成系统。例如，多肽或片段的 装配可以使用Applied Biosystems，Inc.提供的Model 431A自动肽合成 仪在固体载体上进行。该肽合成仪提供了现成获取本发明所述肽，或 者通过直接合成或者通过合成一系列片段，这些片段可以使用其它已 知技术偶联。
当起动启动子转录的RNA聚合酶将编码序列转录到mRNA中时， 启动子序列与编码序列是“可操纵连接”的。
“质粒”由前面的小写字母“p”，和/或其后的大写字母和/或数字 标明。此处的起始质粒或者通过商业途径获得，是不受限制地公开获 得，或者可以用与公开方法一致的方法从可获得的质粒构建而来。另 外，与此处所描述的质粒等效的质粒在本领域是已知的，对于普通技 术人员而言是明了的。
DNA的“消化”指用仅在DNA中某些序列上发挥作用的限制酶 催化裂解DNA。此处使用的各种限制酶是通过商业途径获得，其反应 条件、辅因子和其它要求按照普通技术人员已知的那样使用。对于分 析目的，通常在大约20μl缓冲液中，对于1μg质粒或DNA片段，大 约使用2单位酶。对于分离DNA片段进行质粒构建的目的，通常在较 大容器中用20-250单位酶消化5-50μg DNA。对于特定限制酶，由制造 商详细说明所使用的适当缓冲液和底物的用量。一般使用37℃大约1 小时的温育时间，但可以根据供应商提供的说明书有所变化。消化后， 进行凝胶电泳来分离期望片段。
“寡核苷酸”或者指一个单链多脱氧核苷酸，或者指两个互补的 多脱氧核苷酸链，它们可以化学合成。这样化学合成的寡核苷酸没有5’ 磷酸，因此在没有用ATP添加磷酸和存在激酶的情况下，不会与另一 个寡核苷酸连接。合成寡核苷酸将与没有发生去磷酸化作用的片段连 接。
在有关核酸或多肽的上下文中，词语“基本上同一的”指两个或 更多序列，当进行最大对应的对比且对齐时，正如用已知的序列比较 算法或通过视觉观察所测定的，所述序列具有至少50％，60％，70％， 80％，在某些方面具有90-95％核苷酸或氨基酸残基同一性。典型地， 基本上的同一性存在于至少大约100个残基的区域内，最普通地是序 列在至少大约150-200个残基范围内是基本上同一的。在一些实施方案 中，序列在整个编码区是基本上同一的。
另外，“基本上同一的”氨基酸序列是这样一个序列，即该序列通 过一个或多个保守或非保守氨基酸取代、缺失或插入而与参考序列不 同，尤其当这样的取代发生的位点不是分子的活性位点时，只要多肽 实质上保留了其功能特性时。保守氨基酸取代，例如用一个氨基酸取 代另一个同类氨基酸(例如用一个疏水氨基酸取代另一个疏水氨基酸， 例如这些疏水氨基酸为异亮氨酸、缬氨酸、亮氨酸或甲硫氨酸，或者 用一个极性氨基酸取代另一个极性氨基酸，如用精氨酸取代赖氨酸， 谷氨酸取代天冬氨酸，谷氨酰胺取代天冬酰胺)。一个或多个氨基酸可 以被删除，例如从α淀粉酶多肽进行删除，导致多肽结构的修饰，而 不会显著地改变其生物活性。例如，α淀粉酶生物活性不要求的氨基或 羧基末端氨基酸可以被删除。本发明的修饰的多肽序列可以通过许多 方法分析α淀粉酶生物活性，包括用α淀粉酶底物接触修饰的多肽序 列，确定修饰的多肽是否在分析中降低了特定底物的量，或者是否增 加了功能性α淀粉酶多肽与底物的酶反应的生物产物。
正如此处所用，“片段”是天然存在的蛋白质的一部分，其可以以 至少两种不同的构象存在。片段可以具有与天然蛋白质相同或基本上 相同的氨基酸序列。“基本上相同”指氨基酸序列大部分是相同的，但 不是完全相同，但保持与其相关的序列的至少一种功能活性。通常如 果两个氨基酸序列至少大约85％是同一的，那么这两个氨基酸序列是 “基本上相同的”或“基本上同源的”。与天然蛋白质具有不同的三维 结构的片段也包括在内。这样的一个例子是“前形式(pro-from)”分 子，如可以通过裂解产生具有显著较高活性的成熟酶的具有较低活性 的前蛋白。
“杂交”指一种过程，通过该过程核酸链通过碱基配对与互补链 结合。杂交反应可以是敏感的，且是选择性的，这样相关的特定序列 即使在其存在浓度非常低的样品中也能被识别出。合适的严格条件可 以通过如下条件来确定，例如预杂交和杂交溶液中的盐或甲酰胺的浓 度，或者通过杂交温度来确定，并且这些条件在本技术领域是已知的。 尤其是，严格性的增加可以通过降低盐浓度、增加甲酰胺浓度或升高 杂交温度实现。
例如，高度严格条件下的杂交可以于大约37℃-42℃和在大约50％ 甲酰胺中发生。杂交可以在降低的严格条件下发生，于大约30℃-35℃ 在大约35％-25％甲酰胺中发生。尤其是，杂交可以在高度严格条件下 于发生，于大约42℃在50％甲酰胺、5XSSPE、0.3％SDS和200n/ml 剪切且变性的鲑精DNA中发生。杂交可以在降低的严格条件下发生， 正如上面所描述的，于降低的温度35℃在35％甲酰胺中发生。与特定 严格性水平相应的温度范围可以通过计算相关核酸的嘌呤与嘧啶的比 率并且相应地调节温度来进一步变窄。上述范围和条件的变化在本技 术领域是已知的。
术语“变体(variant)”指在一个或多个碱基对、密码子、内含子、 外显子或氨基酸残基(分别地)被修饰的本发明的多核苷酸或多肽， 但仍然保留了本发明的α淀粉酶的生物活性。变体可以通过很多方法 产生，这些方法包括，例如易错PCR、改组、寡核苷酸介导的诱变、 装配PCR、有性PCR诱变、体内诱变、盒式诱变、递归集团诱变(recursive ensemble mutagenesis)、指数集团诱变(exponential ensemble mutagenesis)、位点特异性诱变、基因再装配、GSSM及其任意组合。 本发明也包括了产生，例如与野生型淀粉酶不同的pH或温度下具有活 性的变体淀粉酶的技术。
酶是高度选择的催化剂。它们的特点是以微妙的立体、区域和化 学选择性催化反应，这是传统合成化学难以匹敌的。而且，酶具有显 著的多种用途。它们可以在有机溶剂中发挥作用，在极端pH(例如高 pH和低pH)、极端温度(例如高温和低温)、极端盐度水平(例如高 盐度和低盐度)下工作，且可以催化在结构上与其自然的生理学底物 不相关的化合物的反应。
酶对于多种天然和非天然底物都有活性，从而能实质上修饰任何 有机前导化合物。而且，与传统的化学催化剂不同，酶是高度对映选 择和区域选择的。这些酶所表现出的高度官能基团特异性能使得人们 追踪导致新活性化合物的合成序列中的每一反应。酶也能催化与它们 的生理学功能本质上不相关的许多性质不同的反应。例如，过氧化物 酶通过过氧化氢催化苯酚的氧化。过氧化物酶也能催化与该酶的天然 功能不相关的羟基化反应。其它例子是催化多肽分解的蛋白酶。在有 机溶液中，一些蛋白酶也可以催化糖的酰化，这是与这些酶的天然功 能不相关的已知功能。
一方面，本发明包括液化含有组合物的淀粉的方法，所述方法包 括将淀粉与本发明的多肽(例如，选自具有选自如下序列的氨基酸序 列的纯化多肽：B组氨基酸序列；与至少一个B组氨基酸序列具有至 少大约50％同源性的变体，在至少大约100个残基的区域内，正如通 过用序列比较算法或通过视觉观察进行的分析所确定的那样：与任一 个B组氨基酸序列互补的序列；和在至少大约100个残基的区域内与 任一个B组氨基酸序列具有至少大约50％同源性的变体互补的序列， 正如通过用序列比较算法或通过视觉观察进行的分析所确定的那样； 和具有多肽的至少10个连续氨基酸的多肽，所述多肽具有选自B组氨 基酸序列的序列)接触。在一个优选的实施方案中，多肽是B组氨基 酸序列中所阐明的。淀粉可以来自选自如下的物质：稻米、发芽稻米、 玉米、大麦、小麦、豆类和甘薯。此处也包括通过本发明的方法产生 的葡萄糖糖浆。该糖浆可以是麦芽糖糖浆、葡萄糖糖浆或其组合。尤 其是，与通过商业酶产生的糖浆相比，用本发明的淀粉酶产生的糖浆 具有较高水平的DP2部分，较高水平的DP3(麦芽三糖和/或潘糖)和 较少的大于DP7片段的片段。这与液化曲线相符合，这是由于在本发 明的液化糖浆中有较少的大片段。
本发明也提供一种方法，用于从物质中去除含有淀粉的染料，该 方法包括将该材料与本发明的多肽接触。一方面，本发明提供了一种 洗涤目标物的方法，该方法包括将目标物与本发明的多肽在足以洗涤 的条件下接触。例如，本发明的多肽可以作为去污剂添加剂被包括进 相应产品中。本发明也包括一种用于织物脱浆的方法，该方法包括将 织物与本发明的多肽在足以脱浆的条件下接触。
本发明也提供一种降低面包产品老化的方法，该方法包括将本发 明的多肽在烘烤之前加入到面包产品中。
本发明也提供了一种处理木质纤维素的方法，其中用本发明的多 肽以足以改进纤维特性的量处理纤维。本发明包括一种用于循环纸浆 的酶法脱墨的方法，其中多肽以足以有效地使纤维表面脱墨的量使用。
此处描述的任何方法之一均包括添加第二种α-淀粉酶或者β-淀粉 酶或者它们的组合物。适合与本发明的酶组合使用的商业淀粉酶或其 它酶对于本技术领域的普通技术人员而言是已知的。
本发明也包括一种通过如下步骤从地下形成物增加生产液体流动 的方法，是通过去除生产操作过程中形成的和在地下形成物中被发现 的粘性、含淀粉的有破坏性的液体而实现，这些液体包围着整个井孔， 包括允许生产液体从井孔流出；降低从地层流出的生产液体流动达到 低于期望流速；通过将含水液体与本发明的多肽共混配制酶处理物； 将酶处理物泵到井孔中的期望位置；允许酶处理物降解粘性、含淀粉 的有破坏性的液体，从而液体可以从地下形成物移动到井表面；其中 酶处理物可以有效地破坏含有淀粉的液体中的α糖苷键。
本发明利用了酶的一种独特的催化特性。尽管在化学转化中使用 生物催化剂(即，纯化酶或者粗酶，非活细胞或者活细胞)通常需要 鉴别与特定起始化合物反应的特定生物催化剂，本发明使用了选择的 生物催化剂和反应条件，它们对于在许多起始化合物中存在的官能基 团是特异的。
每种生物催化剂对于一种官能基团或者几种相关的官能基团是特 异的，并且可以与含有该官能基团的许多起始化合物反应。
生物催化剂反应产生来自单一起始化合物的衍生物群体。这些衍 生物可以被进行另一轮生物催化剂反应，以产生第二群衍生化合物。 可以用生物催化剂衍生作用的每一次迭代产生成千上万种原始化合物 的变化。
酶在起始化合物的特定位点反应，不影响该分子的其余部分，该 过程用传统化学方法非常难以实现。这种高度的生物催化特异性提供 了在文库中鉴别单一活性化合物的方法。文库的特征在于用于产生某 种化合物的生物催化反应系列，所谓的“生物合成历史”。筛选文库的 生物活性并且跟踪生物合成历史，就能够鉴别产生活性化合物的特定 反应序列。重复反应序列，确定合成的化合物的结构。与其它合成和 筛选方法不同，鉴别模式不需要固定化技术，可以使用实质上任何类 型的筛选分析方法在溶液中以游离态合成且测试化合物。重要的是要 注意到，酶在官能基团上的反应的高度特异性允许跟踪特定酶反应， 这些反应形成生物催化产生的文库。
为基于表达而发现淀粉酶的目的，对λ噬菌体文库进行筛选有很 多优点。这些优点包括改进对于毒性克隆的检测；改进对于底物的接 近；降低对于对宿主进行遗传工程的需求；绕开对于任何由于文库的 大规模删除所导致的偏见的潜能；以及在低克隆密度下的较快速生长。 另外，在液相中筛选λ噬菌体文库相对于在固相中筛选而言有优势。 这些优势包括：分析条件下更好的灵活性；额外的底物灵活性；对于 弱克隆更高的灵敏度；以及易于自动化。
许多程序步骤是用机械自动化进行的，这样能完成大量生物催化 反应，并且每天筛选被试验物，以及确保高水平的准确性和可再现性。 这样的结果是，可以在几周内产生衍生化合物的文库，而该文库用当 前的化学方法将需要数年才能产生。(关于分子修饰的进一步教导，包 括小分子，参见PCT/US94/09174，将其完整引用于此作为参考)。
一方面，本发明提供了一种非随机方法，称作合成基因再装配 (synthetic gene reassembly)，这与随机改组有一些相关，只是核酸构 件没有任意地被改组或被连接或被嵌合，而是被非随机性地装配。
合成基因再装配方法不依赖于将被改组的多核苷酸之间存在高度 同源性。本发明可以被用于非随机地产生后代分子的文库(或集合)， 所述后代分子包括超过10100不同的后代嵌合体。令人信服地，合成基 因再装配甚至能被用于产生包括超过101000不同的后代嵌合体的文库。 因此，一方面，本发明提供了一种非随机方法，用于产生一组最终确 定的嵌合核酸分子，这些分子具有由设计所选择的全装配顺序，该方 法包括如下步骤：通过设计产生大量特定核酸构件，这些核酸构建具 有可使用的相互兼容的可连接末端；装配这些核酸构件，从而可实现 设计的总装配顺序。
如果将被装配的核酸构建的相互兼容的可连接末端能使构件以预 定顺序被偶联，那么它们被认为对于这种类型的顺序装配是“可使用 的”。因此，一方面，核酸构建可以被偶联的总装配顺序由可连接末端 的设计确定，如果将使用多于一个装配步骤，那么核酸构建能被偶联 的总装配顺序也将由装配步骤的顺序确定。在本发明的一个实施方案 中，用酶处理退火的构件部分，例如连接酶(如，T4 DNA连接酶)可 以实现构件部分的共价键合。
在另一个实施方案中，核酸构件的设计是依据一组祖先核酸模板 的序列分析获得的，模板用作产生最终确定的嵌合核酸分子的后代集 合的基础。这些祖先核酸模板从而作为序列信息的来源，该序列信息 核酸构件的设计，其将被诱变，例如被嵌合或改组。
在一个例证中，本发明提供了一个相关基因家族和它们的相关产 物的编码家族的嵌合。在一个特定的例证中，被编码的产物是酶。本 发明的淀粉酶，例如α-淀粉酶或碱性淀粉酶，可以根据此处描述的方 法被诱变。
因此根据本发明的一个方面，大量祖先核酸模板的序列(例如A 组核酸序列的多核苷酸)被对齐，以便选择一个或多个分界点，这些 分界点可以被放置在一个同源区中。分界点可以被用来描述将要产生 的核酸构件的边界。因此，在祖先分子中识别和选择的分界点在后代 分子的装配中用作潜在的嵌合点。
典型地，可使用的分界点是由至少两个祖先模板共享的同源区(包 括至少一个同源核苷酸碱基)，但分界点可以是由至少一半的祖先模 板，至少三分之二的祖先模板，至少四分之三的祖先模板，优选地最 多所有祖先模板共享的同源区。甚至更优选地，可使用的分界点仍然 是由所有祖先模板共享的同源区。
在一个实施方案中，基因再装配过程是彻底地进行的，以便产生 详尽的文库。换句话说，核酸构件的所有可能的有序重组均存在于最 终确定的核酸分子的集合中。同时，每一重组中的装配顺序(即每一 最终确定的嵌合核酸的5’-3序列中的每一构件的装配顺序)是设计的 (或者不是随机的)。由于该方法的非随机特性，大大降低了不必要的 副产品的可能性。
在另一个实施方案中，该方法提供了，系统地进行基因再装配过 程，例如以产生系统区室化的文库，该文库具有可以被系统性选择的 区室，例如一个接一个顺序。换句话说，本发明提供了，通过有选择 且明智地使用特定核酸构件，与有选择且明智使用的顺序阶段装配反 应偶联，在几个反应容器中的每一个中获得后代产物的特定集合的场 合，可以实现试验设计。这样可以允许进行系统地检验且筛选程序。 因此，这允许潜在的大量后代分子以较小的组被系统地检验。
由于以高度灵活且详尽和系统的方式进行嵌合的能力，尤其是当 祖先分子之间有低水平同源性时，本发明提供了产生一个包括大量后 代分子的文库(或集合)。由于本发明的基因再装配发明的非随机特性， 所产生的后代分子优选地包括一个最终确定的嵌合核酸分子的文库， 这些核酸分子具有由设计所选择的总装配顺序。在一个特别的实施方 案中，这样产生的文库包括超过103-超过101000个不同的后代分子种类。
一方面，正如所述所产生的最终确定的嵌合核酸分子的集合包括 编码多肽的多核苷酸。根据一个实施方案，该多核苷酸是基因，可以 是人工基因。根据另一个实施方案，该多核苷酸是基因途径，可以是 人工基因途径。本发明提供了，由本发明所产生的一种或多种人工基 因可以被整合到人工基因途径中，如在真核生物体(包括植物)中可 操作的途径。
在另一个例证中，产生构件的步骤的合成特性允许设计且导入核 苷酸(例如一个或多个核苷酸，它们可以是，例如密码子或内含子或 调节序列)，这些核苷酸随后可以以体外方法被任选地去除(例如通过 诱变)，或者以体内方法(例如通过利用宿主微生物的基因剪接能力)。 应该意识到，在许多情况下，除了产生可使用的分界点的潜在益处之 外，由于许多其它原因导入这些核苷酸也是期望的。
因此，根据另一个实施方案，本发明提供了，核酸构件可以被用 来导入内含子。因此，本发明提供了，功能内含子可以被导入到本发 明的人工基因中。本发明也提供了，功能内含子可以被导入到本发明 的人工基因途径中。此外，本发明提供了嵌合多核苷酸的产生，该嵌 合多核苷酸是含有一个(或多个)人工导入的内含子的人工基因。
另外，本发明也提供了嵌合多核苷酸的产生，该嵌合多核苷酸是 含有一个(或多个)人工导入的内含子的人工基因途径。优选地，人 工导入的内含子在一种或多种用于基因剪接的宿主细胞中起作用，主 要以天然内含子在基因剪接中功能地发挥作用的方式进行。本发明提 供了一种产生含内含子的人工多核苷酸的方法，这些多核苷酸将被导 入到用于重组和/或剪接的宿主微生物中。
用本发明产生的人工基因也用作与另一种核酸重组的模板。同样 地，用本发明产生的人工基因途径也用作与另一种核酸重组的模板。 在一种优选的情况中，重组由含内含子的人工基因和用作重组配偶体 的核酸之间的同源区促进，或者在该区发生。在一种特别优选的情况 中，重组配偶体也是本发明产生的核酸，包括人工基团或人工基因途 径。重组可以由存在于人工基因中的一个(或多个)人工导入的内含 子的同源区促进，或者在该区发生。
本发明的核酸基因再装配方法使用了大量核酸构件，每一构件优 选地具有两个可连接末端。每一核酸构件上的两个可连接末端可以是 两个钝末端(即每一个没有核苷酸突出物)，或者优选地一个钝末端和 一个突出端，或者更优选地仍然是两个突出端。
对于该目的有用的突出端可以是3’突出端或5’突出端。因此，核 酸构件可以具有3’突出端或可选择地5’突出端，或者可选择地具有两 个3’突出端，或者可选择地具有两个5’突出端。核酸构件被装配以形 成最终确定的嵌合核酸分子的总顺序由有目的的试验设计确定，不是 随机的。
根据一个优选的实施方案，核酸构件是如下产生的：两个单链核 酸(也称作单链寡核苷酸)的化学合成，并且将它们接触以允许它们 退火形成一个双链核酸构件。
双链核酸构件的尺寸是可变化的。这些构件的尺寸可小可大。构 件的优选尺寸的范围在1个碱基(不包括任何突出端)到100,000个碱 基对(不包括任何突出端)之间。也提供了其它优选的尺寸范围，下 限为1bp-10,000bp(包括1-10,000之间的每一个整数值)，上限为 2bp-100,000bp(包括2-100,000之间的每一个整数值)。
存在许多方法，通过这些方法可以产生对于本发明有用的双链核 酸构件；并且这些方法在本技术领域是已知的，可以容易地由普通技 术人员进行。
根据一个实施方案，双链核酸构件是如下产生的：首先产生两个 单链核酸，然后允许它们退火形成双链核酸构件。双链核酸构件的两 个链在除了任何形成突出端的核苷酸以外的每一核苷酸上可以是互补 的；从而除了任何突出端以外不含有失配。根据另一个实施方案，双 链核酸构件的两个链在除了任何形成突出端的核苷酸以外，即少于每 一个核苷酸的部分是互补的。因此，根据该实施方案，双链核酸构件 可以被用来导入密码子简并。优选地用此处描述的位点饱和诱变 (Site-saturation mutagenesis)导入密码子简并，用一个或多个N，N，G/T 盒子或也可以使用一个或多个N，N，N盒子进行。
本发明的体内重组方法可以根据特定多核苷酸或序列的未知杂交 或等位基因库不受抑制地进行。然而，没必要知道特定多核苷酸的实 际DNA或RNA序列。
在基因的混合群体内使用重组的方法可以用于产生任何有用的蛋 白，例如白细胞介素I，抗体，组织型纤溶酶原激活物(tPA)和生长 激素。该方法可用于产生具有改变的特异性或活性的蛋白质。该方法 也可以用于产生杂交核酸序列，例如启动子区域、内含子、外显子、 增强子序列、基因的3’未翻译区或5’未翻译区。因此该方法可以用于 产生具有增强的表达率的基因。该方法也可以用于重复DNA序列的研 究。最后，该方法可用于突变核酶或适体(aptamer)。
如此处所述，本发明的一个方面涉及使用还原重配、重组和选择 的重复循环，这些循环允许通过重组完成高度复杂的线性序列的定向 分子进化，如DNA、RNA或蛋白质。
分子的体内改组可用于提供变体，可以用细胞的天然特性进行， 以重组多聚体。而体内重组已经提供了分子多样性的主要自然路线， 基因重组保留了相对复杂的过程，该过程涉及1)同源性的识别；2)链 裂解、链侵入和导致产生重组交叉的新陈代谢步骤；以及最后3)交叉 分解为分离的重组分子。交叉的形成需要识别同源序列。
在另一个实施方案中，本发明包括一种方法，用于从至少第一个 多核苷酸和第二个多核苷酸产生杂交多核苷酸。本发明也用于产生杂 交多核苷酸，通过将共享至少一个部分序列同源区的第一个多核苷酸 和第二个多核苷酸引导进入合适的宿主细胞来实现。部分序列同源区 促进了导致产生杂交多核苷酸的序列再组织的过程。正如此处所用， 术语“杂交多核苷酸”是用本发明的方法产生的任何核苷酸序列，其 含有来自至少两个原始多核苷酸序列的序列。这样的杂交多核苷酸可 以来自分子间重组事件，这些事件可以促进DNA分子之间的序列整 合。另外，这样的杂交多核苷酸可以来自分子内还原重配过程，这些 过程使用重复序列来改变DNA分子内的核苷酸序列。
本发明提供了一种产生杂交多核苷酸的方式，所述杂交多核苷酸 可以编码生物活性的杂交多肽(例如杂交α淀粉酶)。一方面，原始多 核苷酸编码生物活性多肽。本发明的方法通过使用细胞过程产生新的 杂交多肽，这些过程整合原始多核苷酸的序列，以便产生杂交多核苷 酸编码多肽，该多肽表现出来自原始生物活性多肽的活性。例如，原 始多核苷酸可以编码来自不同微生物的特定酶。例如，来自生物体或 变体的第一个多核苷酸编码的酶可以在特定环境条件如高盐度下有效 地发挥作用。由来自不同生物体或变体的第二个多核苷酸编码的酶可 以在不同的环境条件如极度高温下有效地发挥作用。含有来自第一个 和第二个原始多核苷酸的序列的杂交多核苷酸可以编码酶，该酶表现 出由原始多核苷酸编码的两种酶的特性。因此，由杂交多核苷酸编码 的酶可以在由第一个和第二个多核苷酸编码的每一酶共有的环境条件 下有效地发挥作用，例如高盐度和极端温度。
由本发明的多核苷酸编码的酶，包括但不限于，水解酶，如α淀 粉酶和碱性淀粉酶。由本发明的方法产生的杂交多肽可以表现出原始 酶没有显示的特定酶活性。例如，在编码水解酶活性的多核苷酸的重 组和/或还原重配后，可以对所得到的由杂交多核苷酸编码的杂交多肽 筛选来自每一原始酶的特定水解酶活性，即水解酶发挥作用的键类型 和水解酶发挥作用的温度。因此，例如，可以对水解酶进行筛选以明 确那些区分杂交水解酶与原始水解酶的化学功能性，例如(a)酰胺肽 键)，即蛋白酶；(b)酯键，即淀粉酶和脂酶；(c)缩醛，即糖苷酶， 以及例如，杂交多肽发挥作用的温度、pH或盐浓度。
原始多核苷酸来源可以分离自单个生物体(“分离物”)，已经在合 成培养基(“富集培养物”)中培养的生物体采集，或未培养的生物体 (“环境样品”)。使用不依赖培养物的方法来获得来自环境样品的编码 新颖生物活性的多核苷酸是最优选的，这是因为该方法允许得到未使 用的生物多样性来源。
“环境文库”是从环境样品产生的，表示存储于克隆载体中的自 然存在的生物体的集合基因组，所述克隆载体可以在合适的原核宿主 中增殖。由于克隆DNA最初直接提取自环境样品，所以这些文库不限 于可以在纯培养中生长的小的原核生物部分。此外，这些样品中存在 的环境DNA的规格化可以允许从原始样品中存在的所有种类中更均 等地呈现DNA。这可以显著地增加从样品的较少组成部分中找到相关 基因的效率，与优势种相比，这些基因可以以数个数量级之低的数量 存在。
例如，对从一种或多种未培养的微生物产生的基因文库进行筛选， 以筛选相关活性。编码相关生物活性分子的潜在途径首先以基因表达 文库的形式在原核细胞中被捕获。编码相关活性的多核苷酸分离自这 样的文库，并且被导入到宿主细胞中。宿主细胞在这样的条件下生长， 即可以促进产生具有新颖或增强活性的潜在活性生物分子的重组和/或 还原重配。
可以制备多核苷酸的微生物包括原核微生物，如真细菌 (Eubacteria)和古细菌(Archaebacteria)，和低级真核微生物如真菌， 一些藻类和原生动物。多核苷酸可以分离自环境样品，在这种情况下 不需要培养生物体就可以回收核酸，或者从一种或多种培养的生物体 回收。一方面，这样的微生物可以是极端菌(extremophile)，如高温菌 (hyperthermophile)、嗜冷菌、嗜冷生物、嗜盐菌、嗜压微生物和嗜酸 细菌。编码分离自极端菌的酶的多核苷酸是特别优选的。这样的酶可 以如下条件下发挥作用：陆地温泉和深海热出口超过100℃的温度，北 极水中低于0℃的温度，死海的饱和盐环境，煤沉积物和富含硫的地热 温泉中pH大约为0，或者污水污泥中pH超过11。例如，用极端菌生 物体克隆且表达的几种淀粉酶和脂酶在大范围的温度和pH下显示出 高活性。
在本发明的许多新颖酶已经在40℃和50℃且pH为8的条件下， 以及在40℃和50℃且pH为10的条件下被纯化且表征。而且发现于 pH 8和40℃的条件下被纯化且表征得到的酶的比活性为地衣芽孢杆菌 酶(B.lichenoformis)(228U/mg)的三倍(682U/mg)。此外发现另一 种酶具有与地衣芽孢杆菌酶相当的比活性(250U/mg)。在pH 10和50℃ 的条件下，这些酶之一的比活性为31U/mg，另一种的比活性为 27.5U/mg，而地衣芽孢杆菌酶的比活性为27U/mg。
正如上面所述选择且分离的多核苷酸被导入合适的宿主细胞中。 合适的宿主细胞是能促进重组和/或还原重配的任何细胞。所选择的多 核苷酸优选地已经在包括适当控制序列的载体中。宿主细胞可以是高 级真核细胞，如哺乳动物细胞，或者是低级真核细胞，如酵母细胞， 或者优选地，宿主细胞是原核细胞，如细菌细胞。将构建物导入宿主 细胞可以由磷酸钙转染法、DEAE-葡聚糖介导转染法或者由电穿孔实 现(Davis等人，1986)。
适当宿主的代表性实例可以有：细菌细胞，如大肠杆菌(E.coli)、 链霉菌(Streptomyces)、鼠伤寒沙门氏杆菌(Salmonella typhimurium)； 真菌细胞，如酵母；昆虫细胞，如果蝇S2和草地夜蛾Sf9；动物细胞， 如中国仓鼠卵巢细胞(CHO)、COS或Bowes黑素瘤；腺病毒；和植 物细胞。根据此处的教导，适当宿主的选择被认为在本技术领域普通 技术人员的范围内。
尤其参考各种可以被用来表达重组蛋白的哺乳动物细胞培养系 统，哺乳动物表达系统的实例包括猴肾成纤维细胞的COS-7系，描述 在“SV40-转染的猿细胞支持早期SV40突变体的复制”(Gluzman， 1981)，和能表达匹配载体的其它细胞系，例如C127，3T3，CHO，HeLa 和BHK细胞系。哺乳动物表达载体将包括一个复制起点和合适的启动 子和增强子，也包括任何必须的核糖体结合位点，聚腺苷酸化位点， 剪接供体和受体位点，转录终止序列，和5’侧非转录序列。衍生自SV40 剪接的DNA序列和聚腺苷酸化位点可以被用来提供所要求的非转录 遗传元件。
含有相关多核苷酸的宿主细胞可以在传统的营养培养基中培养， 该传统营养培养基被修饰以适合激活启动子、选择转化体或扩增基因。 培养条件，如温度和pH等等，是先前选择用于表达的宿主细胞所用的 那些条件，这些条件对于普通技术人员而言是显然的。然后可以对克 隆进行测序，以识别编码具有增强活性的酶的多核苷酸序列，所述克 隆被鉴别出具有特定的酶活性。
另一方面，应该预期到，本发明的方法可以被用来从一种或多种 操纵子或基因簇或其部分产生编码生化途径的新颖多核苷酸。例如， 细菌和许多真核生物具有一种可调节基因的谐调机制，所述基因的产 物涉及相关过程。这些基因在单一染色体上是成簇的，这在结构上被 称作”基因簇”，并且在单一调节序列的控制下被转录在一起，包括起 动整个簇转录的单一启动子。因此，基因簇是一组邻接基因，它们通 常由于其功能或者相同或者相关。由基因簇编码的生物化学途径的一 个实例是聚酮化合物。聚酮化合物分子是生物活性的非常丰富的来源， 包括抗生素(如四环素和红霉素)，抗癌试剂(道诺霉素)，免疫抑制 剂(FK506和雷帕霉素)，以及兽医产品(莫能菌素)。许多聚酮化合 物(由聚酮化合物合酶制备)是有价值的治疗剂。聚酮化合物合酶是 多功能的酶，其催化大量在官能度和环化作用的长度和方式上不同的 碳链的生物合成。聚酮化合物合酶基因落入基因簇，至少一种类型(被 指定为类型I)的聚酮化合物合酶具有大尺寸基因和酶，这使得遗传操 纵和这些基因/蛋白的体外研究变得复杂化。
基因簇DNA可以从不同的生物体分离，且被连接到载体中，尤其 是含有表达调节序列的载体，这些表达调节序列可以控制和调节从连 接的基因簇制备可检测的蛋白质或蛋白质相关排列活性。使用对于外 源DNA导入具有异常大容量的载体对于使用这样的基因簇是尤其适 当的，此次通过实施例的方式对它们进行了描述，包括大肠杆菌的f 因子(或者致育因子)。大肠杆菌的f因子是影响其在接合过程中高频 转移的质粒，可以理想地获得且稳定地增殖大DNA片段，如来自混合 微生物样品的基因簇。尤其优选的实施方案是使用克隆载体，被称作 “fosmid”或细菌人工染色体(BAC)载体。它们来源于大肠杆菌f 因子，能稳定地整合基因组DNA大片段。当用来自混合未培养的环境 样品的DNA整合时，可以以稳定的“环境DNA文库”的形式获得大 基因组片段。用于本发明中的另一种类型的载体是粘粒载体。粘粒载 体最初被设计用来克隆且增殖基因组DNA的大片段。在Sambrook等 人的Molecular Cloning：A Laboratory Manual，第二版，Cold Spring Harbor Laboratory Press(1989)中详细描述了克隆进粘粒载体的方法。一 旦连接到适当载体中，两种或多种含有不同聚酮化合物合酶基因簇的 载体可以被导入到合适的宿主细胞中。由基因簇共享的部分序列同源 区将促进导致序列组构(reorganization)的过程，而序列组构导致杂交 基因簇。然后对新颖杂交基因簇进行筛选，以筛选在原始基因簇中不 存在的增强的活性。
因此，在一个实施方案中，本发明涉及一种方法，用于制备生物 活性杂交多肽，对这样的多肽筛选增强的活性，是通过如下步骤：
1)引导可操作连接中的至少第一多核苷酸和可操作连接中的第二 多核苷酸进入合适的宿主细胞，所述至少第一多核苷酸和第二多核苷 酸共享至少一个部分序列同源区；
2)培养宿主细胞，培养条件是促进导致可操作连接中的杂交多核 苷酸的序列组构；
3)表达由杂交多核苷酸编码的杂交多肽；
4)在促进鉴别增强生物活性的条件下筛选杂交多肽；和
5)分离编码杂交多肽的多核苷酸。
筛选各种酶活性的方法对于本技术领域的普通技术人员而言是已 知的，并且在整个说明书中对这些方法进行了讨论。当分离本发明的 多肽和多核苷酸时可以使用这些方法。
作为可以使用的表达载体的代表性实例有：病毒颗粒、杆状病毒、 噬菌体、质粒、噬菌粒、粘粒、fosmid、细菌人工染色体、病毒DNA (例如牛痘、腺病毒、禽痘病毒、假狂犬病和SV40衍生物)、P1人工 染色体、酵母质粒、酵母人工染色体以及任何其它对于相关特异宿主 特异的载体(如芽孢杆菌属、曲霉属和酵母)。因此，例如DNA可以 被包括在用于表达多肽的多种表达载体中的任一种中。这样的载体包 括染色体、非染色体和合成DNA序列。大量合适的载体对于本技术领 域普通技术人员是已知的，而且可以通过商业途径获得。通过实例的 方式提供了下述载体；细菌的：pQE载体(Qiagen)，pBluescript质粒， pNH载体，(λ-ZAP载体(Stratagene)；ptrc99a，pKK223-3，pDR540， pRIT2T(Pharmacia)；真核的：pXT1，pSG5(Stratagene)，pSVK3， pBPV，pMSG，pSVLSV40(Pharmacia)。然而，可以使用任何其它质 粒或其它载体，只要它们在宿主中是可复制的且能生存的。本发明可 以使用低拷贝数量或高拷贝数量载体。
表达载体中的DNA序列与适当的表达控制序列(启动子)可操作 地连接，以指导RNA合成。特定命名的细菌启动子包括lacI，lacZ， T3，T7，gpt，λPR，PL和trp。真核启动子包括CMV立即早期启动子、 HSV胸苷激酶启动子、早期和晚期SV40启动子、来自反转录病毒的 LTR启动子和小鼠金属硫蛋白-I启动子。适当载体和启动子的选择在 本技术领域普通技术人员的水平范围内。表达载体也含有翻译起始和 转录终止子的核糖体结合位点。载体也可以包括扩增表达的适当序列。 可以用可选择的标记物从使用了氯霉素转移酶(CAT)载体或其它载 体的任何期望的基因选择启动子区。另外，表达载体优选地含有一种 或多种可选择的标记物基因，以便为转化的宿主细胞的选择提供表型 特征，如真核细胞培养的二氢叶酸还原酶或新霉素抗性，或者如大肠 杆菌中的四环素或氨苄青霉素抗性。
体内重配集中于“分子间”过程，这些过程被集体称作“重组”， 在细菌中通常称作“RecA依赖”现象。本发明依赖于宿主细胞的重组 过程来重组和重配序列，或者细胞的能力来介导还原过程以通过缺失 在细胞中降低准重复序列的复杂性。“还原重配”的过程通过“分子内”， 是不依赖RecA的过程。
因此，在本发明的另一方面，新颖多核苷酸可以通过还原重配方 法产生。该方法涉及产生含有连续序列(原始编码序列)的构建物， 将这些构建物插入到适当的宿主中，随后导入适当的宿主细胞中。单 个分子同一性的重配通过具有同源区的构建物中的连续序列之间或者 准重复单元之间的组合过程发生。重配过程重组和/或降低重复序列的 复杂性和程度，导致产生新颖的分子种类。可以使用多种处理以提高 重配率。这些处理包括用紫外灯、DNA损伤化合物和/或使用显示出增 强水平的“遗传不稳定性”的宿主细胞系处理。因此，重配过程可以 涉及同源重组或准重复序列的自然特性，以指导它们自身的进化。
重复或“准重复”序列在遗传不稳定性中发挥着作用。在本发明 中，“准重复”是不限于其原始单元结构的重复。准重复单元可以表现 为构建物中的序列排列；小序列的连续单元。一旦连接，连续序列之 间的连接处就变得基本上看不见，所得到的构建物的准重复性质现在 在分子水平是连续的。细胞进行缺失过程以降低所产生的构建物复杂 性的缺失过程会在准重复序列之间进行操作。准重复单元提供实际上 无限的模板清单，滑动事件可以在模板上发生。因此含有准重复的构 建物可以有效地提供足够的分子弹性(molecular elasticity)，缺失(和 潜在的插入)事件实质上可以在准重复单元内的任何地方发生。
当准重复序列以相同方向被全部连接时，例如头尾相接或反之， 细胞就不能区分单个单元。因此，还原过程可以在整个序列中发生。 相反，当例如单元以头对头呈现而不是以头对尾呈现时，倒置描绘了 相邻单元的末端，这样缺失形成将有助于不连续单元的损失。因此， 用本发明方法优选的是序列以相同方向。准重复序列的随机方向将导 致重配效率的损失，而序列的一致方向将提供最高效率。然而，尽管 在相同方向具有较少的邻接序列降低了效率，但它仍然可以为有效回 收新颖分子提供充分的弹性。可以在相同方向上用准重复序列获得构 建物，以提供更高的效率。
序列可以用多种方法中的任一种以头对尾的方向装配，包括如下：
a)可以使用包括聚腺苷酸头(poly-A)和聚胸苷酸尾(poly-T)的 引物，当获得单链时它们可以提供方向。这是通过具有从RNA获得的 最初几个碱基实现的，因此易于RNAseH去除。
b)可以使用包括独特限制裂解位点的引物。将需要多个位点、一 组独特序列和重复的合成和连接步骤。
c)引物的内部少许碱基可以被硫醇化，核酸外切酶用于产生适当 的有尾分子。
重配序列的回收依赖于用还原重复指数(RI)鉴别克隆载体。然 后通过扩增回收重配编码序列。产物被再克隆且被表达。具有还原RI 的克隆载体的回收受如下因素影响：
1)使用只有当构建物的复杂性降低时才稳定地维持的载体。
2)用物理方法物理回收缩短的载体。在这种情况下，将用标准质 粒分离方法回收克隆载体，在琼脂糖凝胶上，或者用标准方法在具有 低分子量临界的柱上进行大小分级。
3)回收含有断裂基因的载体，当插入物大小降低时可以选择断裂 基因。
4)用表达载体和适当的选择使用直接选择技术。
从相关生物体编码序列(例如基因)可以表明高度同源水平，并 且编码变化相当多的蛋白产物。这些类型的序列尤其可以在本发明中 用作准重复序列。然而，尽管下面举例说明的实施例表明几乎相同的 原始编码序列(准重复序列)的重配，但该方法不限于这些几乎相同 的重复序列。
下面的实例说明了本发明的方法。描述了衍生于三(3)个独特种 类的编码核酸序列(准重复序列)。每一序列编码具有不同特性组的蛋 白质。每一序列在序列中的独特位置上通过一个或几个碱基对而不同。 准重复序列被单独或整体扩增，并且连接到随机装配中，这样可以在 连接分子群体中获得所有可能的排列和组合。准重复单元的数量可以 通过装配条件来控制。构建物中准重复单元的平均数量被定义为重复 指数(RI)。
构建物一旦形成，就可以根据出版的协议在琼脂糖凝胶上进行大 小分级，或者不进行大小分级，被插入克隆载体，转染到适当宿主细 胞中。然后细胞被增殖，进行“还原重配”。如果需要，还原重配率可 以通过导入DNA损伤来刺激。RI的降低是通过“分子内”机制由重 复序列间的缺失形成来介导，还是通过“分子间”机制由类似于重组 的事件来介导是不重要的。最终结果是分子被重配到所有可能的组合 中。
任选地，该方法包括一个额外步骤，即筛选改组池的文库成员以 鉴别单个改组文库成员，所要鉴别的单个改组成员具有结合或相互作 用或催化具有预定大分子的特定反应(如酶的催化域)，例如蛋白质受 体、寡糖、病毒或其它预定化合物或结构。
从这些文库中鉴别出的多肽可以用于治疗、诊断、研究和相关用 途(例如催化剂、增加水溶液的摩尔渗透压浓度的溶质，等等)，和/ 或可以经受一次或多次额外的改组和/或选择循环。
另一方面，应该想象到，在重组或重配之前或期间，用本发明的 方法产生的多核苷酸可以经受促进将突变导入原始多核苷酸的试剂或 方法的处理。这些突变的导入将增加所得到的杂交多核苷酸和由此所 编码的多肽的多样性。促进诱变的试剂或方法包括但不限于： (+)-CC-1065，或者一种合成类似物如(+)-CC-1065-(N3-腺嘌呤(参见Sun 和Hurley，(1992)；能抑制DNA合成的N-乙酰化或脱乙酰化4’-氟-4- 氨基联苯加成物(例如参见van de Poll等人(1992))；或能抑制DNA合 成的N-乙酰化或脱乙酰化4’-氨基联苯加成物(例如参见van de Poll等 人(1992)，751-758页)；三价铬、三价铬盐、能抑制DNA复制的多环芳 族烃(PAH)DNA加成物，如7-溴甲基-苯[a]蒽(“BMA”)，三(2，3-二溴丙 基)磷酸盐(“Tris-BP”)，1，2-二溴-3-氯丙烷(“DBCP”)，2-溴丙烯醛(2BA)， 苯并[a]芘-7，8-二氢二醇-9-10-环氧化物(“BPDE”)，铂(II)卤盐，N-羟基 -2-氨基-3-甲基咪唑[4，5-f]-喹啉(“N-羟基-IQ”)，和N-羟基-2-氨基-1-甲 基-6-苯基咪唑[4，5-f]-吡啶(“N-羟基-PhIP”)。减慢或暂停PCR扩增的尤 其优选的方法包括UV光(+)-CC-1065和(+)-CC-1065-(N3-腺嘌呤)。尤 其包括的方法是DNA加成物或来自多核苷酸或多核苷酸池的含有 DNA加成物的多核苷酸，可以用一种方法来释放或去除，该方法包括 在进一步处理之前加热含有多核苷酸溶液。
另一方面，本发明涉及一种制备具有生物活性的重组蛋白质的方 法，通过处理含有编码野生型蛋白质的双链模板多核苷酸样品，条件 是根据本发明能提供杂交或重配多核苷酸产生的条件。
本发明也提供使用专用密码子引物(含有简并N，N，N序列)引导 点突变进入多核苷酸，以便产生一组后代多肽，其中全长的单一氨基 酸取代体现在每一氨基酸位置上(基因位点饱和诱变(GSSM))。所用 的寡核苷酸连续地包括第一同源序列、简并N，N，N序列和优选地但不 是必须的第二同源序列。使用这样的寡核苷酸得到的下游后代翻译产 物在每一氨基酸位点沿着多肽包括所有可能的氨基酸变化，这是因为 N，N，N序列的简并包括所有20个氨基酸的密码子。
一方面，一个这样的简并寡核苷酸(包括一个简并N，N，N盒子) 被用于使亲本寡核苷酸模板上的每一原始密码子经受全长密码子取 代。另一方面，使用至少两个简并N，N，N盒子-或者在相同寡核苷酸上 或者不是，用于使亲本寡核苷酸模板上的至少两个原始密码子经受全 长密码子取代。因此，在一个寡核苷酸中可以含有多于一个N，N，N序 列，以便在多于一个位点上引入氨基酸突变。大多数N，N，N序列可以 直接邻接，或者被一个或多个额外的核苷酸序列分离。另一方面，可 以单独使用可用于引入添加和缺失的寡核苷酸，或者与含有N，N，N序 列的密码子组合使用，以便引导氨基酸添加、缺失和/取代的任何组合 或排列。
在一个特别的例证中，用寡核苷酸同时诱变两个或多个连续氨基 酸位置是可能的，所述寡核苷酸含有连续的N，N，N三联体，即简并 (N，N，N)n序列。
另一方面，本发明提供使用比N，N，N序列具有较低简并性的简并 盒子。例如，在某些情况下期望使用(例如在一个寡核苷酸中)仅包 括一个N的简并三联体序列，其中所述N可以是三联体的，第一，第 二或第三位置。包括其任何组合和排列的任何其它碱基可以被用在三 联体的其余两个位置上。另外，在某些情况下期望使用(例如在一个 寡核苷酸中)简并N，N，N三联体序列，N，N，G/T，或N，N，G/C三联体序 列。
然而，应该理解到，由于好几个原因，使用本发明中所公开的简 并三联体(如N，N，G/T，或N，N，G/C三联体序列)是有利的。一方面， 本发明提供一种方法，该方法可以系统地且非常简单地产生可能氨基 酸(对于总共20个氨基酸而言)到多肽中每一氨基酸位置的全长取代。 因此，对于100个氨基酸多肽，本发明提供一种途径，来系统且非常 简单地产生2000个不同种类(即每个位置20个可能的氨基酸乘以100 个氨基酸位置)。应该理解到，通过使用含有简并N，N，G/T或N，N，G/C 三联体序列的寡核苷酸，提供了32个编码20个可能氨基酸的单一序 列。因此，在反应容器中，其中用这样的寡核苷酸使亲本多核苷酸序 列经受饱和诱变，产生了32个编码20个不同多肽的不同后代多核苷 酸。相反，在定点诱变中使用非简并寡核苷酸导致每一反应容器仅有 一个后代多肽产物。
本发明也提供了使用非简并寡核苷酸，它们可以被任选地与所公 开的简并引物组合使用。应该预期到，在某些情况下，在工作寡核苷 酸中使用非简并寡核苷酸来产生特异性点突变是有利的。这提供了一 种方式，用于产生特异性沉默点突变，导致相应氨基酸变化的点突变， 引起终止密码子和多肽片段的相应表达的点突变。
因此，在本发明的一个优选实施方案中，每一饱和诱变反应容器 包括编码至少20个后代多肽分子的多核苷酸，这样所有20个氨基酸 被表示在与在亲本多核苷酸中诱变的密码子位置相应的特异性氨基酸 位置上。从每一饱和诱变反应容器产生的32倍简并后代多肽可以经受 克隆扩增(例如用表达载体克隆进合适的大肠杆菌中)，并且经受表达 筛选。当通过筛选鉴别出单个后代多肽在特性上显示出有利变化时(当 与亲本多核苷酸相比较)，可以对其进行测序以鉴别被包含在其中的相 应的有利氨基酸取代。
应该理解到，一旦用此处所公开的饱和诱变在亲本多肽上诱变每 一氨基酸位置，可以在多于一个氨基酸位置上鉴别出有利的氨基酸变 化。可以产生一个或多个新颖后代分子，它们含有这些有利的氨基酸 取代的全部或部分的组合。例如，如果在多肽中3个氨基酸位置中的 每一位置上鉴别出2个特定的有利氨基酸变化，那么排列包括每一位 置(与原始氨基酸没有变化，和两个有利变化中的每一个)和3个位 置上的3种可能性。因此，有3×3×3或27种总可能性，包括先前检 验的7种-6个单一点突变(即三个位置的每一位置上2个)并且任何 位置上都没有变化。
仍然在另一方面，位点饱和诱变可以与改组、嵌合、重组和其它 诱变过程连同筛选一起使用。本发明提供了以迭代方式使用任何诱变 过程，包括饱和诱变。在一个例证中，任何诱变过程的迭代用途被用 于与筛选组合使用。
因此，在一个非限定性例证中，本发明提供了饱和诱变与其它诱 变过程的组合使用，如两个或多个相关多核苷酸被导入合适的宿主细 胞的过程，以便通过重组和还原重配产生杂交多核苷酸。
除了沿着基因的整个序列进行诱变，本发明提供了，可以用诱变 在多核苷酸序列中取代大量碱基中的每一个，其中将被诱变的碱基数 量优选地是15-100,000之间的每一整数。因此，代替沿着分子诱变每 一位置，可以使每一或离散数量的碱基(优选地总数在15-100,000之 间的子集)经受诱变。优选地，分离的核苷酸被用于沿着多核苷酸序 列诱变每一位置或一组位置。将被诱变的一组3个位置可以是密码子。 优选地用含有异种盒子的诱变引物导入突变，也被称作诱变盒子。优 选的盒子具有1-500个碱基。这样的异种盒子中的每一核苷酸位置是 N，A，C，G，T，A/C，A/G，A/T，C/G， C/ G/T，C/G/T，A/G/T，A/C/T，A/C/G， 或E，其中E是不是A，C，G或T的任何碱基(E可以被称作设计者寡 核苷酸)。
通常意义而言，饱和诱变包括在将被诱变的确定多核苷酸序列(其 中将被诱变的序列的长度优选地在大约15-100,000个碱基之间)中诱 变一组完整的诱变盒子(其中每一盒子的长度优选地为大约1-500个碱 基)。因此，一组突变(1-100个突变)被导入将被诱变的每一盒子中。 在应用一轮饱和诱变的过程中，将被导入盒子的突变的分组可以与将 被导入第二个盒子的突变的分组不同或相同。这样的分组的例证为缺 失、添加、特定密码子的分组和特定核苷酸盒子的分组。
将被诱变的已知序列包括全基因、途径、cDNA、整个开放阅读框 (ORF)和整个启动子、增强子、阻遏物/反式激活蛋白、复制起点、 内含子、操纵子、或任何多核苷酸官能基团。通常，用于该用途的”确 定序列”可以是任何多核苷酸，15个碱基多核苷酸序列和长度在15个 碱基到15,000个碱基之间的多核苷酸序列(本发明特别是指15-15,000 之间的每一整数)。选择密码子分组要考虑的因素包括由简并诱变盒子 编码的氨基酸类型。
在一个尤其优选的例证中，可以被导入诱变盒子的突变的分组， 本发明特别地提供了在每一位置上编码2，3，4，5，6，7，8，9，10，11，12， 13，14，15，16，17，18，19和20个氨基酸的简并密码子取代(使用简并寡 核苷酸)，和由它们编码的多肽文库。
本发明的另一个方面是已知分离的核酸，其包括A组核酸序列中、 与其基本上同一的序列、与其互补的序列的一个序列，或者包括一个 片段，其包括A组核酸序列(或与其互补的序列)的序列之一的至少 10，15，20，25，30，35，40，50，75，100，150，200，300，400 或500个连续碱基。分离的核酸可以包括DNA，这包括cDNA、基因 组DNA和合成DNA。DNA可以是双链或单链的，如果单链可以是编 码链或非编码(反义)链。另外，分离的核酸可以包括RNA。
正如下面所详细讨论的，A组核酸序列和与其基本上同一的序列 的序列之一的分离的核酸可以被用于制备B组氨基酸序列和与其基本 上同一的序列的多肽之一，或者含有B组氨基酸序列和与其基本上同 一的序列的多肽之一的至少5，10，15，20，25，30，35，40，50，75， 100或150个连续氨基酸的片段。
另外，本发明的另一方面是一种分离的核酸，其编码B组氨基酸 序列和与其基本上同一的序列的多肽之一，或者含有B组氨基酸序列 的多肽之一的至少5，10，15，20，25，30，35，40，50，75，100或 150个连续氨基酸的片段。作为遗传密码子的冗余或简并的结果，这些 核酸的编码序列可以与A组核酸序列的核酸之一的编码序列之一、或 其片段相同，或者可以是不同的编码序列，其编码B组氨基酸序列和 与其基本上同一的序列的多肽之一，或者含有B组氨基酸序列多肽之 一的至少5，10，15，20，25，30，35，40，50，75，100或150个连 续氨基酸的片段。遗传密码子对于本技术领域的普通技术人员而言是 已知的，而且可以获得，例如在B.Lewin，Genes VI，Oxford University Press，1997的第214页，将其公开内容引用于此作为参考。
编码B组氨基酸序列和与其基本上同一的序列的分离的核酸包括 但不限于：仅包括A组核酸序列和与其基本上同一的序列的序列之一 的编码序列，和其它编码序列，如前导序列或前蛋白序列和非编码序 列，如内含子或编码序列的5’和/或3’非编码序列。因此，正如此处所 用，术语“编码多肽的多核苷酸”包括，仅包括多肽的编码序列的多 核苷酸，和包括其它编码和/或非编码序列的多核苷酸。
另外，A组核酸序列和与其基本上同一的序列的核酸序列可以用 传统技术来诱变，如定点诱变，或者对于本技术领域普通技术人员熟 悉的其它技术，以便引导沉默变化进入A组核酸序列和与其基本上同 一的序列的多核苷酸中。正如此处所用，“沉默变化”包括，例如不改 变由多核苷酸编码的氨基酸序列的变化。这样的变化可能是期望的， 以便通过引导密码子或密码子对增加由含有编码多肽的载体的宿主细 胞产生的多肽的水平，这在宿主生物体中频繁发生。
本发明也涉及具有核苷酸变化的多核苷酸，这些变化在B组氨基 酸序列和与其基本上同一的序列的多肽中导致氨基酸取代、添加、缺 失、融合和平截。这样的核苷酸变化可以使用诸如定点诱变、随机化 学诱变、核酸外切酶III缺失和其它重组DNA技术来引入。另外，这样 的核苷酸变化可以是自然发生的等位基因变体，它们通过鉴别核酸被 分离，所述核酸与包括A组核酸序列和与其基本上同一的序列(或与 其互补的序列)的序列之一的至少10，15，20，25，30，35，40，50， 75，100，150，200，300，400或500个连续碱基的探针在此处提供的 高度严格、中度严格或低度严格条件下特定地杂交。
A组核酸序列、和与其基本上同一的序列、与其互补的序列的分 离的核酸，或含有A组核酸序列、和与其基本上同一的序列、与其互 补的序列的序列之一的至少10，15，20，25，30，35，40，50，75， 100，150，200，300，400或500个连续碱基的片段，也可以被用作探 针来确定生物样品如土壤样品是否含有具有本发明的核酸序列的生物 体或可以从其得到核酸的生物体。在这样的方法中，可以得到潜在的 含有从其可以得到核酸的生物体的生物样品，并且可以从该样品得到 核酸。将核酸与探针接触，条件是允许探针与样品中存在的任何互补 序列特定地杂交。
在必要时，允许探针与任何互补序列特定地杂交的条件可以通过 将探针与来自样品的互补序列接触来确定，所述样品已知含有互补序 列和对照序列，对照序列不含有互补序列。杂交条件，如杂交缓冲液 的盐浓度，杂交缓冲液的甲酰胺浓度，或者杂交温度可以发生变化， 以鉴别允许探针与互补核酸特定地杂交的条件。
如果样品含有生物体，从这些生物体可以得到核酸，然后检测探 针的特定杂交。可以通过用可检测试剂标记探针来检测杂交，这些可 检测试剂如放射性同位素、荧光染料、或能催化可检测产物形成的酶。
许多使用已标记的探针来检测样品中互补核酸的存在的方法对于 本技术领域的普通技术人员是熟悉的。这些方法包括Southern印迹、 Northern印迹、克隆杂交方法和斑点印迹。每一种这些方法的程序由 Ausubel等人，Current Protocols in Molecular Biology，John Wiley 503 Sons，Inc.(1997)以及Sambrook等人，Molecular Cloning：A Laboratory Manual第二版，Cold Spring Harbor Laboratory Press(1989)提供，这些参 考文献被完整引用于此作为参考。
另外，多于一个探针(至少能与核酸样品中存在的任何互补序列 特定地杂交的探针)可以被用于扩增反应中以确定样品是否含有包括 本发明的核酸序列的生物体(例如从中可以得到核酸的生物体)。典型 地，探针包括寡核苷酸。在一个实施方案中，扩增反应可以包括PCR 反应。PCR程序描述在Ausubel和Sambrook的文献中，见上文。另外， 扩增可以包括连接酶链式反应、3SR、或链置换反应。(参见Barany，F.， “The Ligase Chain Reaction in a PCR World”，PCR方法和应用1：5-16， 1991；E.Fahy等人，“Self-sustained Sequence Replication(3SR)：An Isothermal Transcription-Based Amplification System Alternative to PCR”， PCR方法和应用1：25-33，1991；和Walker G.T.等人，“Strand Displacement Amplification-an Isothermal in vitro DNA Amplification Technique”，Nucleic Acid Research 20：1691-1696，1992，将这些参考文 献引用于此作为参考)。在这样的方法中，将样品中的核酸与探针接触， 进行扩增反应，并且检测任何所得到的扩增产物。扩增产物可以通过 在反应产物上进行凝胶电泳并且用嵌入剂(interculator)如溴化乙锭染 色凝胶来检测。另外，可以用放射性同位素来标记一个或多个探针， 在凝胶电泳后通过射线自显影术检测是否存在放射性扩增产物。
来自接近A组核酸序列和与其基本上同一的序列的序列末端的序 列的探针也可以用在染色体步移方法中，以鉴别含有基因组序列的克 隆，所述基因组克隆位于与A组核酸序列和与其基本上同一的序列临 近的位置。这样的方法允许来自宿主生物体的编码其它蛋白质的基因 的分离。
A组核酸序列、和与其基本上同一的序列、与其互补的序列的分 离的核酸，或者含有A组核酸序列、和与其基本上同一的序列、或与 其互补的序列的序列之一的至少10，15，20，25，30，35，40，50， 75，100，150，200，300，400或500个连续碱基的片段，可以被用作 探针，以鉴别和分离相关核酸。在一些实施方案中，相关核酸可以是 来自生物体的cDNA或基因组DNA，而不是可以从中分离核酸的生物 体。在这样的方法中，将核酸样品与探针接触，条件是允许探针与相 关序列特定地杂交。然后用上面所描述的任一种方法检测探针与来自 相关生物体的核酸的杂交。
在核酸杂交反应中，用于获得特定严格水平的条件可以有所变化， 这依赖于将被杂交的核酸的性质。例如，在选择杂交条件时可以考虑 核酸杂交区的长度、互补程度、核苷酸序列组成(例如GC和AT含量) 和核酸类型(例如RNA和DNA)。其它的考虑因素是核酸之一是否被 固定化，例如固定化在滤器上。
杂交可以在低度严格、中度严格或高度严格条件下进行。作为核 酸杂交的一个实例，含有被固定化的变性核酸的高分子膜被首先于 45℃在溶液中预杂交30分钟，所述溶液含有0.9M NaCl、50mM NaH2PO4、pH7.0、5.0mM Na2EDTA、0.5％SDS、10X Denhardt’s溶液 和0.5mg/ml多核糖腺苷酸。然后将大约2×107cpm(比活性4-9×10 cpm/μg)的P末端标记的寡核苷酸探针加入到上述溶液中。温育12-16 小时后，用含有0.5％SDS的1XSET(150mM NaCl、20mM三氢氯 化物、pH7.8、1mM Na2EDTA)中于室温下将膜冲洗30分钟，随后用 对于寡核苷酸探针而言为Tm-10℃的新鲜1XSET冲洗30分钟。然后 将膜暴露于放射自显影薄膜以检测杂交信号。
通过改变用于鉴别核酸杂交条件的严格性，所述核酸如cDNA或 基因组DNA，其与可检测到的探针杂交，可以鉴别且分离与探针具有 不同同源性水平的核酸。通过在低于探针的解链温度的变化温度下完 成杂交来改变严格性。解链温度Tm是指，在该温度下(在已知的离 子强度和pH下)50％的靶序列与优选的互补探针杂交。对于特定探针. 选择非常严格的条件为等于5℃或比Tm低大约5℃。探针的解链温度 可以用如下公式计算：
对于长度在14-70个核苷酸之间的探针，解链温度(Tm)的计算 公式为：Tm＝81.5+16.6(log[Na+])+0.41(分数G+C)-(600/N)，其中N 是探针的长度。
如果杂交是在含有甲酰胺的溶液中完成的，解链温度的计算公式 为：Tm＝81.5+16.6(log[Na+])+0.41(分数G+C)-(0.63％甲酰胺)-(600/N). 其中N是探针的长度。
预杂交可以在6 X SSC、5 X Denhardt’s试剂、0.5％SDS、100μg 变性断裂鲑精DNA或6 X SSC、5 X Denhardt’s试剂、0.5％SDS、100μg 变性断裂鲑精DNA、50％甲酰胺中进行。对于SSC和Denhardt’s溶液 的阐述罗列在Sambrook等人的文献中，见上文。
通过将可检测探针加入到上面所罗列的预杂交溶液中完成杂交。 其中探针包括双链DNA，它在加入到杂交溶液之前被变性。将滤器与 杂交溶液接触足够长的时间，以允许探针与含有与其互补的序列或与 其同源的序列的cDNA或基因组DNA杂交。多于长度超过200个核苷 酸的探针，杂交可以在低于Tm的15-25℃进行。低于较短的探针，如 寡核苷酸探针，杂交可以在低于Tm的5-10℃进行。典型地，对于在6 XSSC中进行的杂交，杂交在大约68℃进行。通常，对于在含有50％ 甲酰胺的溶液中进行的杂交，杂交在大约42℃进行。
前述所有杂交将在高度严格条件下考虑。
杂交后，冲洗滤器以去除任何没有特定结合的可检测探针。用于 冲洗滤器的严格性也可以变化，依赖于将被杂交的核酸的性质、将被 杂交的核酸的长度、互补程度、核苷酸组成(例如GC和AT含量)和 核酸类型(例如RNA和DNA)。逐渐增加的严格性条件的实例如下： 2 X SSC、0.1％SDS于室温下15分钟(低严格性)；0.1 X SSC、0.5％SDS 于室温下30分钟到1小时(中度严格性)；0.1 X SSC、0.5％SDS在杂 交温度和68℃之间15-30分钟(非常高的严格性)。最终的低严格性冲 洗可以在0.1 X SSC中于室温下进行。上述实例仅仅是对可用于冲洗滤 器的一组条件的例证性说明。本技术领域的普通技术人员将知道对于 不同的严格性冲洗有许多方法。下面给出了一些其它的实例。
通过放射自显影术或其它传统技术来鉴别已经与探针杂交的核 酸。
可以对上述方法进行修正以鉴别与探针序列具有降低水平的同源 性的核酸。例如，为了获得与可检测探针具有降低的同源性的核酸. 可以使用较低的严格条件。例如，杂交温度可以在具有大约1M Na-浓 度的杂交缓冲液中以5℃的增量从68℃降低到42℃。杂交后，在杂交 温度下用2 X SSC，0.5％SDS冲洗滤器。高于50℃的条件被认为是” 中度”条件，低于50℃被认为是”低度”条件。”中度”杂交条件的一个特 定实例是当上述杂交在55℃完成时。”低度严格性”杂交条件的一个特 定实例是当上述杂交在45℃完成时。
另外，杂交可以于42℃在缓冲液中进行，如含有甲酰胺的6 X SSC。 在这种情况下，杂交缓冲液中的甲酰胺浓度可以以5％的增量从50％降 低到0％，以鉴别与探针具有降低水平的同源性的克隆。杂交后，于50℃ 用6 X SSC，0.5％SDS冲洗滤器。高于25％的甲酰胺被认为是”中度” 条件，低于25％的甲酰胺被认为是“低度”条件。“中度”杂交条件的 一个特定实例是当上述杂交在30％的甲酰胺中完成时。“低度严格性” 杂交条件的一个特定实例是当上述杂交在10％的甲酰胺中完成时。
例如，可以用前述方法来分离核酸，所述核酸具有与选自如下序 列的核酸序列具有至少大约97％，至少95％，至少90％，至少85％， 至少80％，至少70％，至少65％，至少60％，至少55％或至少50％同 源性的序列：A组核酸序列和与其基本上同一的序列，或包括其至少 大约10，15，20，25，30，35，40，50，75，100，150，200，300， 400或500个连续碱基的片段，和与其互补的序列。用对齐算法来测定 同源性。例如，同源的多核苷酸可能具有一个编码序列，该编码序列 是此处描述的编码序列之一的天然存在的等位基因变体。与A组核酸 序列或与其互补的序列的核酸相比，这样的等位基因变体可能具有一 个或多个核苷酸的取代、缺失或添加。
另外，上述方法可以用于分离编码多肽的核酸，所述多肽与具有 如下序列之一的序列的多肽具有至少大约99％，95％，至少90％，至 少85％，至少80％，至少75％，至少70％，至少65％，至少60％，至 少55％或至少50％同源性的序列：B组氨基酸序列和与其基本上同一 的序列，或包括其至少大约5，10，15，20，25，30，35，40，50，75， 100或150个连续碱基的片段，正如用序列对齐算法所测定的(例如， 如具有缺省参数的FASTA版本3.0t78算法)。
本发明的另一个发明是一种分离或纯化的多肽，其包括如下序列 之一的序列：A组核酸序列和与其基本上同一的序列，或包括其至少 大约5，10，15，20，25，30，35，40，50，75，100或150个连续碱 基的片段。正如上面所讨论的，这样的多肽可以通过将编码多肽的核 酸插入到载体中获得，这样编码序列与能够驱动被编码的多肽在合适 的宿主细胞中表达的序列可操作地连接在一起。例如，表达载体可以 包括启动子、翻译起始的核糖体结合位点和转录终止子。载体也可以 包括用于扩增表达的适当的序列。
适合在细菌中表达多肽或其片段的启动子包括大肠杆菌lac或trp 启动子、lacI启动子、lacZ启动子、T3启动子、T7启动子、gpt启动 子、λPR启动子、来自编码如3-磷酸甘油酸激酶(PGK)的操纵子的启动 子、和酸性磷酸酶启动子。真菌启动子包括V因子启动子。真核启动 子包括CMV立即早期启动子、HSV胸腺嘧啶核苷激酶启动子、热休 克启动子、早期和晚期SV40启动子、来自反转录病毒的长末端重复序 列(LTR)和小鼠金属硫蛋白-I启动子。也可以使用已知在原核或真核 细胞或其病毒中控制基因表达的其它启动子。
哺乳动物表达载体也可以包括复制起点、任何必须的核糖体结合 位点、聚腺苷酸化位点、剪接供体和受体位点、转录终止序列和5’侧 非转录序列。在一些实施方案中，衍生于SV40剪接和聚腺苷酸化位点 的DNA序列可以用于提供所需要的非转录遗传元件。
用于在真核细胞中表达多肽或其片段的载体也可以含有增强子以 增加表达水平。增强子是DNA的顺式作用元件，长度通常在大约10- 大约300bp之间，其作用于启动子以增强其转录。实例包括复制起点 bp 100-270后侧上的SV40增强子、巨细胞病毒早期启动子增强子、复 制起点后侧上的多瘤病毒增强子、和反转录病毒增强子。
另外，表达载体通常含有一个或多个选择性标记物基因，以允许 选择含有载体的宿主细胞。这样的选择性标记物包括编码二氢叶酸还 原酶的基因、或为真核细胞培养物提供新霉素抗性的基因、在大肠杆 菌中提供四环素或氨苄青霉素抗性的基因、和酿酒酵母(S.cerevisiae) TRP1基因。
在一些实施方案中，编码如下序列的多肽之一的核酸以适当相与 能指导翻译多肽或其片段分泌的前导序列装配：B组氨基酸序列和与 其基本上同一的序列，或者含有其至少5，10，15，20，25，30，35， 40，50，75，100或150个连续氨基酸的片段。任选地，核酸可以编码 融合多肽，其中B组氨基酸序列和与其基本上同一的序列，或者含有 其至少5，10，15，20，25，30，35，40，50，75，100或150个连续 氨基酸的片段的多肽之一被融合到异种肽或多肽上，如赋予期望特性， 诸如增强的稳定性或简易纯化特性的N-末端鉴别肽。
适当的DNA序列可以通过多种方法被插入到载体中。通常，在用 适当的限制性核酸内切酶消化插入物和载体后，DNA序列被连接到载 体中的期望位置。另外，插入物和载体的钝末端可以被连接。在如下 文献中公开了多种克隆技术：Ausubel等人，Current Protocols in Molecular Biology，John Wiley 503 Sons，Inc.1997和Sambrook等人， Molecular Cloning：A Laboratory Manual第二版，Cold Spring Harbor Laboratory Press (1989)，将这些文献的全部公开内容引用于此作为参 考。这些方法和其它方法被认为在本技术领域的普通技术人员的范围 内。
载体的形式可以是，例如质粒、病毒颗粒或噬菌体。其它载体包 括染色体、非染色体和合成DNA序列、SV40衍生物；细菌质粒、噬 菌体DNA、杆状病毒、酵母质粒、衍生于质粒和噬菌体DNA的组合 的载体、病毒DNA如牛痘、腺病毒、禽痘病毒以及假狂犬病。原核和 真核宿主中使用的多种克隆和表达载体由Sambrook等人描述在 Molecular Cloning：A Laboratory Manual第二版，Cold Spring Harbor Laboratory Press(1989)中，将该文献的公开内容引用于此作为参考。
可以被使用的特定细菌载体包括可以通过商业途径获得的质粒， 其含有如下已知的克隆载体的遗传成分：pBR322(ATCC 37017)、 pKK223 3(Pharmacia Fine Chemicals，Uppsala，Sweden)，GEM1 (Promega Biotec，Madison，WI，USA)pQE70，pQE60，pQE-9(Qiagen)， pD10，psiX174 pBluescript II KS，pNH8A，pNH16a，pNH18A，pNH46A (Stratagene)，ptrc99a，pKK223-3，pKK233-3，pDR540，pRIT5(Pharmacia)， pKK232-8和pCM7。特定的真核载体包括pSV2CAT，pOG44，pXT1，pSG (Stratagene)pSVK3，pBPV，pMSG和pSVL(Pharmacia)。然而，可以使 用任何其它载体，只要它在宿主细胞中可复制且可存活。
宿主细胞可以是本技术领域普通技术人员所熟悉的任何宿主细 胞，包括原核细胞、真核细胞、哺乳动物细胞、昆虫细胞或植物细胞。 作为适当宿主的代表性实例有：细菌细胞，如大肠杆菌、链霉菌属、 枯草杆菌、鼠伤寒沙门氏杆菌和假单胞菌属、链霉菌属和葡萄球菌属 中的多种种类；真菌细胞，如酵母；昆虫细胞，如果蝇S2和草地夜蛾 Sf9；动物细胞，如CHO、COS或Bowes黑素瘤；以及腺病毒。适当 宿主的选择在本技术领域普通技术人员的能力范围内。
可以用多种技术中的任一种将载体导入宿主细胞中，包括转化、 转染、转导、病毒感染、基因枪或Ti-介导的基因转移。特定的方法包 括磷酸钙转染法、DEAE-葡聚糖介导的转染法、脂质转染法或者电穿 孔(Davis，L.，Dibner，M.，Battey，I.，Basic Methods in Molecular Biology， (1986))。
适当的时候，进行了遗传工程的宿主细胞可以在传统营养培养基 中培养，所述培养基被修饰以适合激活启动子、选择转化体或扩增本 发明的基因。在转化了合适的宿主株并且使宿主株生长到适当的细胞 密度后，可以通过适当的方法诱导所选择的启动子(例如温度变化或 化学诱导)，并且可以将细胞再培养一段时间，以使得它们制备出期望 的多肽或其片段。
细胞通常通过离心来收获，通过物理或化学方法来破坏，保留所 得到的粗提取物，以进一步纯化。用于表达蛋白的微生物细胞可以通 过任何便利的方法来破坏，包括冻-融循环、超声处理、机械破坏、或 使用细胞裂解剂。这样的方法对于本技术领域的普通技术人员是已知 的。被表达的多肽或其片段可以通过如下方法被回收或从重组细胞培 养物中纯化：硫酸铵或乙醇沉淀、酸萃取、阴离子或阳离子交换层析、 磷酸纤维素层析、疏水相互作用层析、亲和层析、羟基磷灰石层析和 凝集素层析。需要时，在完成多肽的构型中，可以使用蛋白质再折叠 步骤。如果期望，可以将高效液相色谱(HPLC)用于最终的纯化步骤。
也可以用多种哺乳动物细胞培养系统来表达重组蛋白质。哺乳动 物表达系统的实例包括猴肾成纤维细胞的COS-7系(由Gluzman描述， Cell，23：175，1981)，和能表达来自相容载体的蛋白质的其它细胞系， 如C127，3T3，CHO，HeLa和BHK细胞系。
宿主细胞中的构建物可以以传统方式来使用，以产生由重组序列 所编码的基因产物。依赖于重组产生方法中所用的宿主，由含有载体 的宿主细胞产生的多肽可以被糖基化，或者不被糖基化。本发明的多 肽也可以或者不可以包括起始甲硫氨酸氨基酸残基。
另外，B组氨基酸序列和与其基本上同一的序列的多肽，或者其 含有至少5，10，15，20，25，30，35，40，50，75，100或150个连 续氨基酸的片段，可以通过传统肽合成仪通过合成方法制备。在其它 实施方案中，多肽的片段或部分可以通过肽合成仪被用于制备相应的 全长多肽；于此，这些片段可以被用作制备全长多肽的中间物。
也可以通过使用从DNA构建物转录的mRNA将不含细胞的翻译 系统用于制备B组氨基酸序列和与其基本上同一的序列的多肽，或者 其含有至少5，10，15，20，25，30，35，40，50，75，100或150个 连续氨基酸的片段的多肽之一，所述DNA构建物含有与编码多肽或其 片段的核酸可操作连接的启动子。在一些实施方案中，DNA构建物可 以在进行体外转录反应之前被线性化。然后用适当的不含细胞的翻译 提取物温育转录的mRNA，如兔网织红细胞提取物，以制备期望的多 肽或其片段。
本发明也涉及如下序列的多肽的变体：B组氨基酸序列，和与其 基本上同一的序列，或者其含有至少5，10，15，20，25，30，35，40. 50，75，100或150个连续氨基酸的片段。术语”变体”包括这些多肽的 衍生物或类似物。尤其是，通过一个或多个取代、添加、缺失、融合 和平截，它们可以以任意的组合出现，变体可以在氨基酸序列上与B 组氨基酸序列和与其基本上同一的序列的多肽不同。
变体可以是自然存在或在体外产生。尤其是，这样的变体可以用 遗传工程技术产生，如定向诱变、随机化学诱变、核酸外切酶III缺失 方法和标准克隆技术。另外，这样的变体、片段、类似物或衍生物可 以用化学合成或修饰方法产生。
产生变体的其它方法对于本技术领域的普通技术人员也是熟悉 的。这些方法包括，其中从天然分离物得到的核酸序列被修饰以产生 编码多肽的核酸，所述多肽具有增强它们在工业或实验室应用中的价 值。在这样的方法中，由于从天然分离物得到的序列，得到了具有一 个或多个核苷酸差异的大量变体序列，并且它们被表征。典型地，相 对对于来自天然分离物的核酸编码的多肽，这些核苷酸差异导致氨基 酸变化。
例如，可以用易错PCR产生变体。在易错PCR中，PCR是在DNA 聚合酶的拷贝保真度较低的条件下进行的，这样沿着PCR产物的全长 可以获得高比率点突变。易错PCR描述在Leung，D.W.，等人，Technique， 1：11-15，1989)和Caldwell，R.C.& Joyce G.F.，PCR Methods Applic.，2： 28-33，1992，将其公开内容完整引用于此作为参考。简单地说，在这些 方法中，将要被诱变的核酸与PCR引物、反应缓冲液、MgCl2、MnCl2、 Taq聚合酶和适当浓度的dNTPs混合，以沿着PCR产物的全长获得高 比率点突变。例如，可以使用如下物质进行反应：20fmol将被诱变的 核酸，30pmol每一PCR引物，含有50mM KCl、10mM Tris HCl(pH 8.3)和0.01％凝胶的反应缓冲液，7mM MgCl2，0.5mM MnCl2，5单位 Taq聚合酶，0.2mM dGTP，0.2mM dATP，1mM dCTP和1mM dTTP。 PCR可以进行30个循环：94℃ 1分钟，45℃1分钟，72℃1分钟。然 而，应该意识到这些参数在需要时可以有所变化。将被诱变的核酸克 隆到适当的载体中，并且评价由诱变的核酸编码的多肽的活性。
也可以用寡核苷酸定向诱变产生变体，以便在任何相关的克隆 DNA中产生位点特异性突变。寡核苷酸诱变描述在Reidhaar-Olson，J.F. & Sauer，R.T.，等人，Scicence，241：53-57，1988，将其公开内容完整引用 于此作为参考。简单地说，在这些方法中合成了大量具有一次或多次 将要被导入克隆DNA的突变的双链寡核苷酸，并且被插入到将被诱变 的克隆DNA中。回收含有诱变DNA的克隆，评价由它们编码的多肽 的活性。
产生变体的另一种方法是装配PCR(assembly PCR)。装配PCR 涉及从小DNA片段的混合物装配PCR产物。大量不同的PCR反应在 同一小管中平行发生，一次反应的产物作为另一次反应的产物的引物。 装配PCR描述在：1996年7月9日提交的美国专利5,965,408，题 为”Method of DNA Reassembly by Interrupting Synthesis”，将其公开内 容完整引用于此作为参考。
仍然产生变体的另一种方法是有性PCR诱变。在有性PCR诱变中， 强制同源重组在体外发生于具有不同但高度相关DNA序列的DNA分 子之间，结果基于序列同源性的DNA分子之间发生随机断裂，随后在 PCR反应中通过引物延伸固定交换。有性PCR诱变描述在：Stemmer，W. P.，PNAS，USA，91：10747-10751，1994，将其公开内容完整引用于此作 为参考。简单地说，在这些方法中，用DNAse消化大量将被用于重组 的核酸，以产生具有平均大小为50-200核苷酸的片段。纯化具有期望 的平均大小的片段，且再次悬浮于PCR混合物中。PCR在有助于核酸 片段之间重组的条件下进行。例如，PCR可以通过如下进行：将纯化 的片段以10-30ng/：1的浓度再次悬浮于下述溶液中，其中每一种dNTP 为0.2mM、2.2mM MgCl2、50mM KCL、10mM Tris HCl、pH9.0和0.1％ Triton X-100的溶液中。每100∶1反应混合物加入2.5单位Taq聚合物， 用如下方式进行PCR：94℃ 60秒，50-55℃30秒，72℃30秒(30-45 次)和72℃5分钟。然而，应该意识到，这些参数当需要时可以有所 变化。在一些实施方案中，寡核苷酸可以被包括在PCR反应中。在其 它实施方案中，DNA聚合酶I的克列诺片段(Klenow fragment)可以 被用于第一组PCR反应中，Taq聚合物可以被用于随后的PCR反应组 中。分离重组序列，并且评价它们编码的多肽的活性。
也可以用体内诱变(in vivo mutagenesis)产生变体。在一些实施 方案中，通过在细菌株如大肠杆菌株中增殖相关序列产生相关序列中 的随机突变，所述细菌株在一种或多种DNA修复途径中发生了突变。 这些”增变”株比野生型亲本具有更高的随机突变率。在这些菌株中增 殖DNA将最终在该DNA中产生随机突变。适合用于体内诱变的增变 株描述在：PCR Publication No.WO 91/16427，于1991年10月31日出 版，题为“Methods for Phenotype Creation from Multiple Gene Populations”，将其公开内容完整引用于此作为参考。
也可以用盒式诱变(cassette mutagenesis)产生变体。在盒式诱变 中，用与天然序列不同的合成寡核苷酸”盒子”取代双链DNA分子的小 区域。寡核苷酸通常含有完全和/或部分随机化的天然序列。
递归集团诱变(recursive ensemble mutagenesis)也可以用来产生 变体。递归集团诱变是一种蛋白质工程(蛋白质诱变)算法，该算法 被用来开发产生不同群体的表型相关突变体，所述表型相关突变体的 成员在氨基酸序列上不同。该方法使用反馈机制来控制连续轮回的组 合盒式诱变。递归集团诱变描述在：Arkin，A.P.和Youvan，D.C.，PNAS， USA，89：7811-7815，1992，将其公开内容完整引用于此作为参考。
在一些实施方案中，用指数集团诱变(exponential ensemble mutagenesis)产生变体。指数集团诱变是一种用于产生高百分比的独 特和功能性突变体的组合文库的方法，其中残基小组中被随机化，以 便平行地在每一被改变的位置鉴别导致功能蛋白质的氨基酸。指数集 团诱变描述在：Delegrave，S.和Youvan，D.C.，Biotechnology Research，11： 1548-1552，1993，将其公开内容完整引用于此作为参考。随机和定点诱 变描述在：Arnold，F.H.，Current Opinion in Biotechnology，4：450-455， 1993，将其公开内容完整引用于此作为参考。
在一些实施方案中，用改组方法(shuffling procedure)产生变体， 其中编码不同多肽的多个核酸部分被融合到一起，产生编码嵌合多肽 的嵌合核酸序列，描述在：1996年7月9日提出申请的美国专利 5,965,408中，题为“Method of DNA Reassembly by Interupting Synthesis”，和美国专利5,939,250中，1996年5月2日提出申请，题 为“Production of Enzymes Having Desired Activities by Mutagenesis”， 将它们都引用于此作为参考。
B氨基酸序列的多肽的变体可以是这样的变体，即其中B组氨基 酸序列的多肽的一个或多个氨基酸残基被保守或非保守氨基酸残基 (优选地一个保守氨基酸残基)取代，这样取代的氨基酸残基可以是 或者不是由遗传密码子编码的残基。
保守置换是那些用具有类似特性的另一个氨基酸取代多肽中的给 定氨基酸。通常认为的保守置换是下述取代：用另一个脂族氨基酸取 代脂族氨基酸如丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸；用苏氨酸取代 丝氨酸，或反之亦然；用另一个酸性残基取代酸性残基，如天冬氨酸 和谷氨酸；用另一个具有酰胺基团的残基取代具有酰胺基团的残基， 如天冬酰胺和谷氨酰胺；用另一个碱性残基交换碱性残基，如赖氨酸 和精氨酸；用另一个芳族残基取代芳族残基，如苯丙氨酸、酪氨酸。
其它变体是那些其中B组氨基酸序列的多肽的一个或多个氨基酸 残基包括取代基的变体。
仍然地，其它的变体是那些其中多肽与另一种化合物结合的变体， 例如增加多肽的半衰期的化合物(例如聚乙二醇)。
其它变体是那些其中其它的氨基酸被融合到多肽上的变体，例如 前导序列、分泌序列、前蛋白序列或有助于多肽的纯化、富集或稳定 的序列。
在一些实施方案中，片段、衍生物和类似物保持与B组氨基酸序 列和与其基本上同一的序列的多肽系统的生物功能或活性。在其它实 施方案中，片段、衍生物或类似物包括前蛋白，这样片段、衍生物或 类似物可以通过前蛋白部分的裂解激活，以产生活性多肽。
本发明的另一个方面是多肽或其片段，其与如下序列的多肽之一 具有至少大约50％，至少大约55％，至少大约60％，至少大约65％， 至少大约70％，至少大约75％，至少大约80％，至少大约85％、至少 大约90％、至少大约95％或高于大约95％同源性的序列：B组氨基酸 序列和与其基本上同一的序列，或其包括至少大约5，10，15，20，25， 30，35，40，50，75，100或150个连续氨基酸的片段。同源性可以用 上面描述的任一种程序来确定，上面描述的程序对齐将比较的多肽或 片段，并且确定它们之间的氨基酸同一性或类似性程度。应该意识到， 氨基酸”同源性”包括保守氨基酸置换，如上面所描述的那些。
与如下序列的多肽之一具有同源性的多肽或片段可以使用上面描 述的技术通过分离编码它们的核酸获得：B组氨基酸序列，和与其基 本上同一的序列，或其包括至少大约5，10，15，20，25，30，35，40， 50，75，100或150个连续氨基酸的片段。
另外，同源的多肽或片段可以通过生物化学富集或纯化方法获得。 潜在的同源多肽或片段的序列可以通过蛋白水解消化、凝胶电泳和/或 微量测序确定。预期同源的多肽或片段的序列可以使用上面所描述的 任一种程序与如下序列的多肽之一比较：B组氨基酸序列，和与其基 本上同一的序列，或其包括至少大约5，10，15，20，25，30，35，40， 50，75，100或150个连续氨基酸的片段。
本发明的另一方面是一种分析方法，用于鉴定B组氨基酸序列和 与其基本上同一的序列的片段或变体，它们保留了B组氨基酸序列和 与其基本上同一的序列的多肽的酶功能。例如，所述多肽的片段或变 体可以被用来催化生化反应，这表明片段或变体保留了B组氨基酸序 列中的多肽的酶活性。
确定变体的片段是否保留了B组氨基酸序列和与其基本上同一的 序列的多肽的酶活性的分析方法包括如下步骤：将多肽片段或变体与 底物分子在允许多肽片段或变体发挥作用的条件下接触，检测底物水 平是否有所降低，或者多肽和底物之间反应的特定反应产物的水平是 否有所增加。
B组氨基酸序列，和与其基本上同一的序列，或其包括至少大约5， 10，15，20，25，30，35，40，50，75，100或150个连续氨基酸的片 段的多肽可以用于多种应用中。例如，其多肽或片段可用于催化生化 反应。根据本发明的一方面，提供了一种方法，所述方法使用B组氨 基酸序列和与其基本上同一的序列的多肽，或编码这样的多肽的多核 苷酸来水解糖苷键。在这样的方法中，将含有糖苷键的底物(例如淀 粉)与B组氨基酸序列和与其基本上同一的序列的多肽之一接触，条 件是有助于糖苷键的水解。
B组氨基酸序列，和与其基本上同一的序列，或其包括至少大约5， 10，15，20，25，30，35，40，50，75，100或150个连续氨基酸的片 段的多肽，也可以被用于淀粉的液化和糖化中。使用本发明的多肽或 其片段，液化可以在比先前的酶所用的pH更低的pH下进行。在一个 实施方案中，液化在pH 4.5进行。另外，与这些方法中先前所用的酶 相比，本发明的多肽或其片段对钙的依赖性更低。在液化中用淀粉酶 来水解淀粉。在优选的实施方案中，本发明的多肽或其片段在90-95℃ 是热稳定的。
B组氨基酸序列，和与其基本上同一的序列，或其包括至少大约5， 10，15，20，25，30，35，40，50，75，100或150个连续氨基酸的片 段的多肽，也可以用来产生与多肽或片段特定结合的抗体。所得到的 抗体可以用在免疫亲和层析方法中，以分离或纯化多肽，或者确定生 物样品中是否存在多肽。在这样的方法中，将蛋白质制剂如提取物， 或者生物样品与能与如下序列的多肽之一特定结合的抗体接触：B组 氨基酸序列，和与其基本上同一的序列，或其包括至少大约5，10，15， 20，25，30，35，40，50，75，100或150个连续氨基酸的片段。
在免疫亲和方法中，抗体被附着在固体载体上，如珠子或其它柱 基质上。蛋白质制剂被置于与抗体接触，条件是抗体与B组氨基酸序 列，和与其基本上同一的序列，或其片段的多肽之一特定地结合。在 洗涤以去除非特定地结合的蛋白质之后，洗脱出特定结合的多肽。
可以用本技术领域普通技术人员熟悉的多种技术中的任一种来确 定蛋白质在生物样品中结合抗体的能力。例如，可以通过用可检测的 标记物如荧光试剂、酶标记物或放射性同位素标记抗体来确定结合。 另外，抗体与蛋白质的结合可以使用其上具有可检测标记物的第二抗 体来检测。特定的方法方法包括酶联免疫吸附测定(ELISA分析)、夹 心分析、放射免疫分析和Western印迹。
针对如下序列的多肽产生的多克隆抗体可以通过将多肽直接注射 到动物体内和通过将多肽施用于动物例如非人动物获得：B组氨基酸 序列，和与其基本上同一的序列，或其包括至少大约5，10，15，20， 25，30，35，40，50，75，100或150个连续氨基酸的片段。然后，这 样获得的抗体将与多肽自身结合。用这样方式，甚至仅编码多肽的一 个片段的序列可以用于产生抗体，所述抗体可能与完整的天然多肽结 合。这样的抗体然后被用于从表达该多肽的细胞分离多肽。
为了制备单克隆抗体，可以使用能提供连续细胞系培养产生抗体 的任何技术。实例包括杂交瘤技术(Kohler和Milstein，Nature，256： 495-497，1975，将其公开内容引用于此作为参考)，三系杂交瘤技术 (trioma技术)，人B-细胞杂交瘤技术(Kozbor等人，Immunology Today 4：72，1983，将其公开内容引用于此作为参考)，以及EBV-杂交瘤技术 (Cole等人，1985，Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy，Alan R. Liss，Inc.，77-96页，将其公开内容引用于此作为参考)。
描述单链抗体产生的技术(美国专利4,946,778，将其公开内容引 用于此作为参考)可以适用于产生B组氨基酸序列，和与其基本上同 一的序列，或其包括至少大约5，10，15，20，25，30，35，40，50， 75，100或150个连续氨基酸的片段的单链抗体。另外，转基因小鼠可 以被用于表达这些多肽或其片段的人源化抗体。
针对B组氨基酸序列，和与其基本上同一的序列，或其包括至少 大约5，10，15，20，25，30，35，40，50，75，100或150个连续氨 基酸的片段的多肽而产生的抗体可以被用于从其它生物体和样品中筛 选类似多肽。在这样的技术中，将来自生物体的多肽与抗体接触，并 且检测那些与抗体特定地结合的多肽。上面所描述的任何技术可以被 用来检测抗体结合。一种这样的筛选分析方法描述在“Methods for Measuring Cellulase Activities”，Methods in Enzymology，160卷，87-116 页，将其完整引用于此作为参考。
正如此处所用，术语“如下序列中所阐明的核酸序列：SEQ ID NO.： 1，3，5，9，11，13，15，17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43， 45，47，49，51，53，55，57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83， 85，87，89，91，93，95，97，99，101，103，105，107，109，111，113，115，117， 119，121，123，125，127，129，131，133，135，137，139，141，143，145，147， 149，151，153，155，157，159，161，163，165，167，169，171，173，175，177， 179，181，183，185，187，189，191，193，195，197，199，201，203，205，207， 209，211，213，215，217，219，221，223，225，227，229，231，233，235，237， 239，241，243，245，247，249，251，253，255，257，259，261，263，265，267， 269，271，273，275，277，279，281，283，285，287，289，291，293，295，297， 299”包括如下序列的核苷酸序列：A组核酸序列，和与其基本上同一 的序列，以及与A组核酸序列及其片段同源的序列，和与所有前述序 列互补的序列。片段包括如下序列的部分：SEQ ID NO.：1，3，5，9，11，13， 15，17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49，51，53， 55，57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89，91，93， 95，97，99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，119，121，123，125， 127，129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151，153，155， 157，159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181，183，185， 187，189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，211，213，215， 217，219，221，223，225，227，229，231，233，235，237，239，241，243，245， 247，249，251，253，255，257，259，261，263，265，267，269，271，273，275， 277，279，281，283，285，287，289，291，293，295，297和299，包括A组核 酸序列，和与其基本上同一的序列的至少10，15，20，25，30，35， 40，50，75，100，150，200，300，400或500个连续核苷酸。A组核 酸序列，和与其基本上同一的序列的同源序列和片段，是指与这些序 列具有至少99％，98％，96％，95％，90％，85％，80％，75％，70％， 65％，60％，55％或50％同源性的序列。同源性可以使用此处描述的任 一种计算机程序和参数来确定，包括具有缺省参数的FASTA版本 3.0t78。同源序列也包括RNA序列，其中尿嘧啶取代A组核酸序列中 所阐明的核酸序列中的胸腺嘧啶。可以使用此处描述的任何方法获得 同源序列，或者可以从校正测序误差获得同源序列。应该意识到，A 组核酸序列和与其基本上同一的序列中所阐明的核酸序列，可以以传 统的单字母格式表示(参见Stryer，Lubert.Biochemistry，第三版，W.H Freeman & Co.，New York的封三)或者以在序列中记录核苷酸同一性 的任何其它格式表示。
正如此处所用，术语“如下序列中所阐明的多肽序列：SEQ ID NO.： 2，4，6，10，12，14，16，18，20，22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44， 46，48，50，52，54，56，58，60，62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84， 86，88，90，92，94，96，98，100，102，104，106，108，110，112，114，116，118， 120，122，124，126，128，130，132，134，136，138，140，142，144，146，148， 150，152，154，156，158，160，162，164，166，168，170，172，174，176，178， 180，182，184，186，188，190，192，194，196，198，202，204，206，208，210， 212，214，216，218，220，222，224，226，228，230，232，234，236，238，240， 242，244，246，248，250，252，254，256，258，260，262，264，266，268，270， 272，274，276，278，280，282，284，286，288，290，292，294，296，298”包括 如下序列的多肽序列：B组氨基酸序列，和与其基本上同一的序列， 它们由如下序列中的序列编码：SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16，18， 20，22，24，26，28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56，58， 60，62，64，66，68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96，98， 100，102，104，106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126，128 ， 130，132，134，136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156，158， 160，162，164，166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186，188， 190，192，194，196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218，220， 222，224，226，228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248，250， 252，254，256，258，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278，280， 282，284，286，288，290，292，294，296，298中所阐明的序列，与B组氨 基酸序列同源的多肽序列，和与其基本上同一的序列，或任何前述序 列的片段。同源的多肽序列指与B组氨基酸的多肽序列之一具有至少 99％，98％，97％，96％，95％，90％，85％，80％，75％，70％，65％， 60％，55％或50％同源性的序列。同源性可以使用此处描述的任一种计 算机程序和参数来确定，包括具有缺省参数或任何被修改参数的 FASTA版本3.0t78。可以使用此处描述的任何方法获得同源序列，或 者可以从校正测序误差获得同源序列。多肽片段包括B组氨基酸序列， 和与其基本上同一的序列的多肽的至少5，10，15，20，25，30，35， 40，50，75，100或150个连续氨基酸。应该意识到，B组氨基酸序列 和与其基本上同一的序列中所阐明的多肽序列，可以以传统的单字母 格式或三字母格式表示(参见Stryer，Lubert.Biochemistry，第三版，W.H Freeman & Co.，New York的封三)或者以在序列中叙述多肽同一性的 任何其它格式表示。
本技术领域普通技术人员应该可以意识到，SEQ ID NO.：1，3，5，9， 11，13，15，17，19，21，23，25，27，29，31，33，35，37，39，41，43，45，47，49， 51，53，55，57，59，61，63，65，67，69，71，73，75，77，79，81，83，85，87，89， 91，93，95，97，99，101，103，105，107，109，111，113，115，117，119，121， 123，125，127，129，131，133，135，137，139，141，143，145，147，149，151， 153，155，157，159，161，163，165，167，169，171，173，175，177，179，181， 183，185，187，189，191，193，195，197，199，201，203，205，207，209，211， 213，215，217，219，221，223，225，227，229，231，233，235，237，239，241， 243，245，247，249，251，253，255，257，259，261，263，265，267，269，271， 273，275，277，279，281，283，285，287，289，291，293，295，297，299中所 阐明的核酸序列，和SEQ ID NO.：2，4，6，10，12，14，16，18，20，22，24，26， 28，30，32，34，36，38，40，42，44，46，48，50，52，54，56，58，60，62，64，66， 68，70，72，74，76，78，80，82，84，86，88，90，92，94，96，98，100，102，104， 106，108，110，112，114，116，118，120，122，124，126，128，130，132，134， 136，138，140，142，144，146，148，150，152，154，156，158，160，162，164， 166，168，170，172，174，176，178，180，182，184，186，188，190，192，194， 196，198，202，204，206，208，210，212，214，216，218，220，222，224，226， 228，230，232，234，236，238，240，242，244，246，248，250，252，254，256， 25 8，260，262，264，266，268，270，272，274，276，278，280，282，284，286， 288，290，292，294，296，298中所阐明的多肽序列可以在任何计算机可 以阅读且访问的介质上被储存、记录和操作。正如此处所用，词语“被 记录”和“被储存”指将信息储存在计算机介质上的过程。熟练技术 人员将可以容易地采用任何当前已知的方法，将信息记录在计算机可 读的介质上，以便产生包括如下序列的制品：A组核酸序列和与其基 本上同一的序列中所阐明的一个或多个核酸序列，B组氨基酸序列和 与其基本上同一的序列中所阐明的一个或多个多肽序列。本发明的另 一个方面是其上储存了A组核酸序列和与其基本上同一的序列中所阐 明的至少2，5，10，15或20个核酸序列的计算机可读介质。
本发明的另一方面是其上已经储存了A组核酸序列和与其基本上 同一的序列中所阐明的一个或多个核酸序列的计算机可读介质。本发 明的另一方面是其上储存了B组氨基酸序列和与其基本上同一的序列 中所阐明的至少一个或多个多肽序列的计算机可读介质。本发明的另 一个方面是其上储存了如上所阐明的至少2，5，10，15或20个序列 的计算机可读介质。
计算机可读介质包括磁性可读介质、光学可读介质、电子可读介 质和磁性/光学介质。例如，计算机可读介质可以是硬盘、软盘、磁带、 CD-ROM、数字通用盘(DVD)、随机存取存储器(RAM)或只读存 储器(ROM)以及本技术领域已知的其它类型的其它介质。
本发明的实施方案包括系统(例如基于因特网的系统)，尤其是存 储且操纵此处描述的序列信息的计算机系统。在图1中以方块图形式 说明了计算机系统100的一个实例。正如此处所用，”计算机系统”指 硬件部分、软件部分和数据存储部分，所述计算机系统用于分析如下 序列：A组核酸序列和与其基本上同一的序列中所阐明的核酸序列的 核苷酸序列，或B组氨基酸序列中所阐明的多肽序列。计算机系统100 通常包括一个用于处理、访问和操纵序列数据的处理器。处理器105 可以是任何已知类型的中央处理器单元，如Intel公司的奔腾III，或 Sun、Motorola、Compag、AMD或国际商业机器公司(IBM公司)的 类似处理器。
通常计算机系统100是一种具有通用目的的系统，其包括处理器 105，和用于储存数据的一个或多个内部数据存储部分110，和一个或 多个用于恢复数据存储部分上存储的数据的数据恢复设备。熟练技术 人员可以容易地意识到，当前可获得的任一种计算机系统是适合的。
在一个特定实施方案中，计算机系统100包括与总线相连的处理 器105，所述总线与主存储器115相连(优选地为RAM)，和一个或多 个内部数据存储设备110，如硬盘驱动器和/或其上已经存储了数据的 其它计算机可读介质。在一些实施方案中，计算机系统100进一步包 括一个或多个数据恢复设备118，用于读取存储在内部数据存储设备 110上的数据。
数据恢复设备118表示，例如软盘驱动器、光盘驱动器、磁带驱 动器或能连接远程数据存储系统(如通过因特网)等的调制解调器。 在一些实施方案中，内部数据存储设备110是可移动的计算机可读介 质，如包括控制逻辑和/或其上记录了数据的软盘、光盘、磁带等等。 计算机系统100可以有利地包括或通过适当的软件被编程，以便数据 存储部分一旦插入到数据恢复设备就从其上阅读控制逻辑和/或数据。
计算机系统100包括显示器120，其用于将输出显示给计算机用 户。也应该注意到，计算机系统100可以被连接到因特网或广域网中 的其它计算机系统125a-c上，以便集中访问计算机系统100。
访问和处理如下序列的核苷酸的软件(如搜索工具、比较工具和 建模工具等)在执行过程中可以驻留在主存储器115中：A组核酸序 列和与其基本上同一的序列中所阐明的核酸序列，或B组氨基酸序列 和与其基本上同一的序列中所阐明的多肽序列。
在一些实施方案中，计算机系统100可以进一步包括序列比较算 法，用于将存储在计算机可读介质上的A组核酸序列和与其基本上同 一的序列中所阐明的核酸序列，或B组氨基酸序列和与其基本上同一 的序列中所阐明的多肽序列，与存储在计算机可读介质上的参考核苷 酸或多肽序列进行比较。“序列比较算法”指一个或单个程序，它们在 计算机系统100上(本地或远程)运行，以便将核苷酸序列与数据存 储设备中所存储的其它核苷酸序列和/或化合物进行比较。例如，序列 比较算法可以将存储在计算机可读介质上的A组核酸序列和与其基本 上同一的序列中所阐明的核酸序列，或B组氨基酸序列和与其基本上 同一的序列中所阐明的多肽序列，与存储在计算机可读介质上的参考 序列进行比较，以鉴别同源性或结构基序。在本发明说明书中任何地 方标明的多种序列比较程序尤其期望用于本发明的这一方面。蛋白质 和/或核酸序列同源性可以用本技术领域已知的多种序列比较算法和程 序来评价。这样的算法和程序包括但决不限于：TBLASTN、BLASTP、 FASTA、TFASTA和CLUSTALW(Pearson和Lipman，Proc.Natl.Acad. Sci.USA 85(8)：2444-2448，1988；Altschul等人，J.Mol.Biol.215(3)： 403-410，1990；Thompson等人，Nucleic Acids Res.22(2)：4673-4680， 1994；Higgins等人，Methods Enzymol.266：383-402，1996；Altschul等人， J.Mol.Biol.215(3)：403-410，1990；Altschul等人，Nature Genetics 3： 266-272，1993)。
同源性或同一性通常用序列分析软件来测定(例如Genetics Computer Group，University of Wisconsin Biotechnology Center，1710 University Avenue，Madison，WI 53705的序列分析软件包)。该软件通过 给各种缺失、取代和其它修饰分配同源性程度来匹配类似序列。在上 下文中对于两种或多种核酸或多肽序列，术语”同源性”和”同一性”指相 同或具有特定百分比的氨基酸残基或核苷酸的两个或多个序列或子序 列，当在同一比较窗口或指定区域内尽可能一致地比较或对齐时，所 述氨基酸残基或核苷酸是相同的，这正如用大量序列比较算法或通过 人工对齐和视觉观察所测定那样。
对于序列比较，通常一个序列作为参考序列，测试序列与其进行 比较。当使用序列比较算法时，将测试序列和参考序列输入计算机， 如果需要，指定子序列坐标系，指定序列算法程序参数。然后用序列 比较算法基于程序参数计算测试序列相对于参考序列的序列同一性百 分比。
正如此处所用，“比较窗口(comparison window)”是指包括选自 20～600，通常为大约50～大约200，更通常大约100～大约150的邻 接位置的任一个数目的片断，在这些片断中，在两个序列被最优地对 比后，一个序列可以与具有相同数目的邻接位置的参考序列进行比较。 用于比较的序列对比方法在本领域是熟知的。可以进行最优的序列对 比比较，如通过local homology algorithm，由Smith & Waterman，Adv. Appl.Math.2：482，1981提供；通过homology alignment algorithm，由 Needleman & Wunsch，J.Mol.Biol 48：443，1970提供；通过search for similarity method，由person & Lipman，Proc.Nat’l.Acad.Sci.USA 85：2444，1988提供，通过这些算法的计算机化实施(Wisconsin Genetics Software Package，Genetics Computer Group，575 Science Dr.，Madison， WI中的GAP、BESTFIT、FASTA和TFASTA)，或通过人工对比和视 觉观察。例如，用于确定同源性或同一性的其它算法包括，除了BLAST 程序(Basic Local Alignment Search Tool at the National Center for Biological Information)、ALIGN、AMAS(Analysis of Multiply Aligned Sequences)、AMPS(Protein Multiple Sequence Alignment)、ASSET (Aligned Segment Statistical Evaluation Tool)、BANDS、BESTSCOR、 BIOSCAN(Biological Sequence Comparative Analysis Node)、BLIMPS (Blocks IMProved Searcher)、FASTA、Intervals & Points、BMB、 CLUSTAL V、CLUSTAL W、CONSENSUS、LCONSENSUS、 WCONSENSUS、Smith-Waterman algorithm、DARWIN、Las Vegas algorithm、FNAT(Forced Nucleotide Alignment Tool)、Framealign、 Framesearch、DYNAMIC、FILTER、FSAP(Fristensky Sequence Analysis Package)、GAP(Global Alignment Program)、GENAL、GIBB S、 GenQuest、ISSC(Sensitive Sequence Comparison)、LALIGN(Local Sequence Alignment)、LCP(Local Content Program)、MACAW(Multiple Alignment Construction & Analysis Workbench)、MAP(Multiple Alignment Program)、MBLKP、MBLKN、PIMA(Pattern-Induced Multi-sequence Alignment)、SAGA(Sequence Alignment by Genetic Algorithm)和WHAT-IF。这些对比程序也可以用来筛选基因组数据库， 以区分序列基本上一样的多核苷酸序列。许多基因组数据库是可利用 的，例如，人类基因组的实质部分可以作为人类基因组测序项目的一 部分来利用(J.Roach， http：//weber.u.Washington.edu/～roach/human genome progess 2.html) (Gibbs，1995)。至少21个其它基因组已经被测序.例如包括 M.genitalium(Fraser等人，1995)、M.jannaschii(Bult等人.1996)、 H.influenzae(Fleischmann等人，1995)、大肠杆菌(Blattner等人，1997)和 酵母(S.cerevisiae)(Mewes等人，1997)和果蝇(D.melanogaster)(Adams 等人，2000)。在模型生物的基因组的测序上已经取得了显著的进步，如 鼠、C.elegans和Arabadopsis sp。几个含有注解有某些功能信息的基因 组信息由不同的组织所保存，可以通过因特网访问，例如 http：//www.tigr.org/tdb； http：//www.genetics.wisc.edu； http：//genome-www.stanford.edu/～ball； http：//hiv-web.lanl.gov； http：//www.ncbi.nlm.nih.gov； http：//www.ebi.ac.uk； http：//Pasteur.fr/other/biology；和 http：//www.genome.wi.mit.edu。
一个有用算法的实例是BLAST和BLAST 2.0算法，对它们的描述 分别在Altschul等人，Nuc.Acids Res.25：3389-3402，1977和Altschul等 人，J.Mol.Biol.215：403-410，1990中。完成BLAST分析的软件可以通过 National Center for Biotechnology Information ( http：//www.ncbi.nlm.nih.gov/)公开获得。该算法首先涉及通过识别查 询序列中的长度W的短单词来识别高计分序列对(HSP)，当在数据库 序列中用相同长度的单词对比时，该高记录序列对或者匹配或者满足 一些正阈值T。T是指相邻单词分数阈值(Altschul等人，见上文)。这 些起始的相邻单词击中作为寻找包括它们的更长HSP的初始搜索的种 子。这些单词击中在两个方向沿着每一个序列一直延伸，直到累积对 比值增加。对于核苷酸序列，用参数M(一对匹配残基的得分；通常 ＞0)对累积值进行计算。对于氨基酸序列，用计分矩阵来计算累积值。 当发生下列情况时暂停在每一方向的单词击中的延伸：累积对比值随 着数量X从其最大获得值而下降；由于一个或多个负得分残基对比值 的累积，累积值达到零或零以下；或者达到了任一序列的末端。BLAST 算法参数w、T和X确定对比的选择性和速度。BLASTN程序(用于 核苷酸序列)使用的缺省值为：单词长度(W)为11，期望值(E)为 10，M＝5，N＝-4，以及比较两个链。对于氨基酸序列，BLASTP程 序使用的缺省值为：单词长度为3，期望值(E)为10，BLOSUM62 计分矩阵(参考Henikoff & Henikoff，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 89：10915，1989)对比值(B)为50，期望值(E)为10，M＝5，N＝-4， 以及比较两个链。
BLAST算法也进行两个序列之间相似性的统计分析(如参考 Karlin & Altchul，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 90：5873，1993)。由BLAST 算法提供的相似性的一个测量值是最小总计几率(P(N))，该值提供了几 率指标，通过它两个核苷酸或氨基酸序列之间的匹配将偶然地发生。 例如，如果测试核酸与参考核酸的比较中最小总计几率小于大约0.2， 更优选小于大约0.01，最优选小于大约0.001，那么核酸被认为与参考 序列是相似的。
在一个实施方案中，用Basic Local Alignment Search Tool (”BLAST”)来评价蛋白质和核酸序列同源性。尤其是，使用五个特 定BLAST程序来完成下述任务：
(1)BLASTP和BLAST3将氨基酸查询序列与蛋白质序列数据库 进行比较；
(2)BLASTN将核苷酸查询序列与核苷酸序列数据库进行比较；
(3)BLASTX将查询核苷酸序列(两个链)的六读框概念翻译产 物与蛋白质序列数据库进行比较；
(4)TBLASTN将查询蛋白质序列与以总共六个阅读框(两个链) 翻译的核苷酸序列数据库进行比较；和
(5)TBLASTX将核苷酸查询序列的六读框翻译与核苷酸序列数 据库的六读框翻译进行比较。
BLAST程序通过识别查询氨基酸或核酸序列与测试序列之间相似 片断，在此处被称作”高计分片断对”，来识别同源序列，其中测试序 列优选从蛋白质或核酸序列数据库获得。高计分片断对优选通过计分 矩阵方法来识别(即对比)，其中大部分方法在本领域是已知的。优选 地，所用的计分矩阵是BLOSUM62矩阵(Gonnet等人，Science 256：1443-1445，1992；Henikoff和Henikoff，Proteins 17：49-61，1993)。不 太优选地，也可以使用PAM或PAM250矩阵(如参考Schwartz和 Dayhoff编著，1978，Matrices for Detecting Distance Relationships：Atlas of Protein Sequence and Structure，Washington：National Biomedical Research Foundation)。BLAST程序可以通过美国National Library of Medicine获得，例如www.ncbi.nlm.nih.gov。
可以根据序列长度和所研究的同源性程度对上述算法所用的参数 进行修改。在一些实施方案中，在没有用户说明书的情况下，这些参 数可以是这些算法所用的缺省参数。
图2是说明方法200的一个实施方案的流程图，该方法200用于 将新核苷酸或蛋白质序列与序列数据库进行比较，以便确定新序列和 数据库中序列之间的同源性水平。序列数据库可以是存储在计算机系 统100中的专用数据库，或者可以是公开数据库，如通过因特网获得 的GENBANK数据库。
方法200在起点状态201开始，然后进展至状态202，其中将被比 较的新数据库被存储在计算机系统100的存储器中。正如上面所讨论 的，存储器可以是任何类型的存储器，包括RAM或内部存储设备。
方法200然后进展至状态204，其中打开序列数据库以便用于分析 和比较。方法200然后进展至状态206，其中存储在数据库中的第一序 列被读入计算机上的存储器中。然后在状态210进行比较，以确定第 一序列是否与第二序列相同。重要的是要注意到，这一步不限于在新 序列和数据库中的第一序列之间进行精确的比较。用于比较两个核苷 酸或蛋白质序列的著名方法对于本技术领域普通技术人员是已知的， 即使它们不相同。例如，可以将间隙引入序列中，以便提高两个测试 序列之间的同源性水平。比较过程中控制间隙或其它特征是否被引入 序列中的参数通常通过计算机系统的用户输入。
一旦两个序列的比较已经在状态210进行，就要在状态210做出 一个判断，即两个序列是否相同。当然，术语”相同”不限于完全相同 的序列。在方法200中，处于由用户输入的同源参数内的序列将被记 录为”相同”。
如果做出的判断是两个序列是相同的，方法200进展至状态214， 其中来自数据库的序列的名称被显示给用户。该状态通知用户，具有 所显示名称的序列满足输入的同源性约束。一旦所存储的序列的名称 被显示给用户，方法200就进展至判断状态218，其中要做出判断，即 数据库中是否存在更多的序列。如果数据库中不存在更多的序列，那 么方法200就在终止状态220结束。然而，如果数据库中存在更多的 序列，那么方法200就进展至状态224，其中指针被指向数据库中的下 一个序列，这样该序列可以与新序列进行比较。用这种方式，新序列 被对齐，并且与数据库中的每一序列进行比较。
应该注意到，如果在判断状态212已经做出这两个序列不同源的 判断，那么方法200将立即进展至判断状态218，以便确定数据库中是 否有任何其它序列可进行比较。
因此，本发明的一个方面是一个计算机系统，该系统包括一个处 理器；一个其上已经存储了如下述序列中所阐明的序列的数据存储设 备：A组核酸序列和与其基本上同一的序列中所阐明的核酸序列，或B 组氨基酸序列和与其基本上同一的序列中所阐明的多肽序列；一个其 上已经可检索地存储了将要与如下序列中所阐明的序列进行比较的参 考核苷酸序列或多肽序列：A组核酸序列和与其基本上同一的序列中 所阐明的核酸序列，或B组氨基酸序列和与其基本上同一的序列中所 阐明的多肽序列；和一个进行比较的序列比较器。序列比较器可以表 明所要比较的序列之间的同源性，或者可以鉴别上面所描述的A组核 酸序列和与其基本上同一的序列的核酸密码子，或B组氨基酸序列和 与其基本上同一的序列中所阐明的多肽序列中的结构基序，或者它可 以鉴别相对于这些核酸密码子和多肽密码子的序列中的结构基序。在 一些实施方案中，数据存储设备上可以存储如下序列中所阐明的至少 2，5，10，15，20，25，30或40或更多个序列：A组核酸序列和与其 基本上同一的序列中所阐明的核酸序列，或B组氨基酸序列和与其基 本上同一的序列中所阐明的多肽序列。
本发明的另一个方面是一种方法，用于确定如下序列中所阐明的 序列和参考核苷酸序列之间的同源性水平：A组核酸序列和与其基本 上同一的序列中所阐明的核酸序列，或B组氨基酸序列和与其基本上 同一的序列中所阐明的多肽序列。该方法包括通过使用一个确定同源 性水平的计算机程序读取核酸密码子或多肽密码子，和参考核苷酸或 多肽序列，用该计算机程序确定核酸密码子或多肽密码子和参考核苷 酸或多肽序列之间的同源性。该计算机程序可以是用于确定同源性水 平的大量计算机程序中的任一个，包括此处特别列举的那些(例如具 有缺省参数或任何修改参数的BLAST2N)。该方法可以用上面所描述 的计算机系统来执行。该方法也可以通过使用计算机程序读取至少2， 5，10，15，20，25，30或40或更多个上面所描述的A组核酸序列中 所阐明的核酸序列，或B组氨基酸序列中所阐明的多肽序列并且确定 核酸密码子或多肽密码子与参考核苷酸序列或多肽序列之间的同源性 来进行。
图3是说明计算机中方法250的一个实施方案的流程图，该方法 用于确定两个序列是否同源。方法250在开始状态252开始，然后进 展至状态254，其中将要被比较的第一序列被存储在存储器上。将要被 比较的第二序列然后在状态256被存储在存储器上。方法250然后进 展至状态260，其中读取第一序列中的第一个字母，然后进展至状态 262，其中读取第二序列的第一个字母。应该理解到，如果该序列是核 苷酸序列，那么该字母将通常是A，T，C，G或U。如果该序列是蛋白质 序列，那么优选地它是单字母氨基酸密码子，这样可以容易地比较第 一和第二序列。
然后在判断状态264做出这两个字母是否相同的判断。如果它们 相同，那么方法250进展至状态268，其中读取第一和第二序列中的下 一个字母。然后做出下一个字母是否相同的判断。如果它们相同，那 么方法250继续这一循环，直到两个字母不相同。如果做出的判断是 下两个字母不相同，那么方法250进展至判断状态274，以确定是否有 更多的字母或者序列可以读取。
如果没有更多的字母可以读取，那么方法250进展至状态276，其 中第一和第二序列之间的同源性水平被显示给用户。同源性水平通过 计算第一序列中相同序列之间的字母在总序列中的百分比来确定。因 此，如果第一个含有100个核苷酸的序列中的每一字母与第二序列中 的每一字母进行对齐，同源性将是100％。
另外，计算机程序可以是这样的计算机程序，即将本发明中所阐 明的核酸序列的核苷酸序列与一个或多个参考核苷酸序列进行比较， 以便确定A组核酸序列和与其基本上同一的序列的核酸密码子是否与 参考核酸序列在一个或多个位置上不同。任选地这样的程序记录了被 插入、删除或取代的核苷酸的长度和相对于参考多核苷酸序列或A组 核酸序列和与其基本上同一的序列中所阐明的核酸序列的序列的同一 性。在一个实施方案中，计算机程序可以是这样的程序，即确定A组 核酸序列和与其基本上同一的序列中所阐明的核酸序列相对于参考核 苷酸序列是否含有单核苷酸多态现象(SNP)。
因此，本发明的另一个方面是一种方法，用于确定A组核酸序列 和与其基本上同一的序列中所阐明的核酸序列是否与参考核苷酸序列 在一个或多个核苷酸上不同，所述方法包括如下步骤：通过鉴别核酸 序列间差异的计算机程序读取核酸密码子和参考核苷酸序列，用该计 算机程序鉴别核酸密码子和参考核苷酸序列之间的差异。在一些实施 方案中，计算机程序是鉴别单核苷酸多态现象的程序。该方法可以通 过上面说明的计算机程序和图3中所说明的方法来完成。该方法也可 以通过用计算机程序读取A组核酸序列和与其基本上同一的序列中所 阐明的至少2，5，10，15，25，30或40或更多个核酸序列，以及参 考核苷酸序列，并且用该计算机程序鉴别核酸密码子和参考核苷酸序 列之间的差异来进行。
在其它实施方案中，基于计算机的系统可以进一步包括一个鉴别 器，用于鉴别A组核酸序列和与其基本上同一的序列中所阐明的核酸 序列，或B组氨基酸序列和与其基本上同一的序列中所阐明的多肽序 列中的特征。
“鉴别器”指一个或多个程序，所述程序鉴别A组核酸序列和与 其基本上同一的序列中所阐明的核酸序列，或B组氨基酸序列和与其 基本上同一的序列中所阐明的多肽序列中的某些特征。在一个实施方 案中，鉴别器可以包括一个程序，该程序鉴别用于在A组核酸序列和 与其基本上同一的序列中所阐明的核酸序列中鉴别开放阅读框。
图4是说明鉴别器方法300的一个实施方案的流程图，该方法用 于检测序列中某个特征的存在。方法300在起始状态302开始，然后 进展至状态304，其中将被检查特征的第一序列被存储到计算机系统 100中的存储器115中。方法300然后进展至状态306，其中开放序列 特征的数据库。这样的数据库将包括每一特征属性连同特征名称的列 表。例如，特征名称可以是“起始密码子”，属性将是“ATG”。另一 个实例将是特征名称“TAATAA盒”，特征属性将是“TAATAA”。这 样的一个数据库的实例是由University of Wisconsin Genetics Computer Group( www.gcg.com)产生的。另外，这些特征是结构多肽基序，如α- 螺旋、β-片层或功能多肽基序，如酶活性位点、螺旋-转角-螺旋基序或 本技术领域普通技术人员已知的其它基序。
一旦特征数据库在状态306开放，方法300进展至状态308，其中 从数据库读取第一特征。然后在状态310进行第一特征的属性与第一 序列的比较。在状态316进行判断，即在第一序列中是否存在该特征 的属性。如果存在该属性，那么方法300进展至状态318，其中所存在 的特征的名称被显示给用户。
方法300然后进展至判断状态320，其中做出数据库中是否存在更 多特征的判断。如果不存在更多的特征，方法300在结束状态324结 束。然而，通过数据库中存在更多的特征，那么方法300在状态326 读取下一个序列特征，并且循环回到状态310，其中将下一特征的属性 再次与第一序列进行比较。
应该注意到，如果在判断状态316中发现第一序列中不存在特征 属性，那么方法300直接进展至判断状态320，以便确定数据库中是否 存在更多的特征。
因此，本发明的另一方面是一种方法，用于鉴别A组核酸序列和 与其基本上同一的序列中所阐明的核酸序列，或B组氨基酸序列和与 其基本上同一的序列中所阐明的多肽序列中的特征，该方法包括通过 在其中鉴别特征的计算机程序读取核酸密码子或多肽密码子，并且用 该程序在核酸密码子内鉴别特征。在一个实施方案中，计算机程序包 括一个鉴别开放阅读框的计算机程序。该方法可以通过用计算机程序 读取A组核酸序列和与其基本上同一的序列中所阐明的一个单一序列 或者至少2，5，10，15，25，30或40或更多个核酸序列，或B组氨 基酸序列和与其基本上同一的序列中所阐明的多肽序列，并且用该计 算机程序鉴别核酸密码子或多肽密码子内的特征来进行。
A组核酸序列和与其基本上同一的序列中所阐明的核酸序列，或B 组氨基酸序列和与其基本上同一的序列中所阐明的多肽序列可以以多 种格式存储在多种数据存储程序且用多种数据存储程序来操纵。例如， A组核酸序列和与其基本上同一的序列中所阐明的核酸序列，或B组 氨基酸序列和与其基本上同一的序列中所阐明的多肽序列可以以文本 存储在字处理文件中，如MicrosofiWORD或WORDPERFECT或以 ASCII文件存储在本技术领域普通技术人员熟悉的多种数据库程序中， 如DB2、SYBASE或ORACLE。而且，许多计算机程序和数据库可以 被用作序列比较算法、鉴别器或参考核苷酸序列或多肽序列源。这些 序列将要与A组核酸序列和与其基本上同一的序列中所阐明的核酸序 列，或B组氨基酸序列和与其基本上同一的序列中所阐明的多肽序列 进行比较。下述列表目的不在于限定本发明，而是对有用的程序和数 据库提供指导，这是对于A组核酸序列和与其基本上同一的序列中所 阐明的核酸序列，或B组氨基酸序列和与其基本上同一的序列中所阐 明的多肽序列有用的程序和数据库。
可以使用的程序和数据库包括但不限于：MacPattern(EMBL)， DiscoveryBase(Molecular Application Group)，GeneMine(Molecular Applications Group)，Look(Molecular Applications Group)，MacLook (Molecular Applications Group)，BLAST和BLAST2(NCBI)，BLASTN和 BLASTX(Altschul等人，J.Mol.Biol.215：403，1990)，FASTA(Pearson 和Lipman，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，85：2444，1988)，FASTDB(Brutlag 等人，Comp.App.Biosci.6：237-245，1990)，Catalyst(Molecular Simulations Inc.)，Catalyst/SHAPE(Molecular Simulations Inc.)， Cerius2.DBAccess(Molecular Simulations Inc.)，HypoGen(Molecular Simulations Inc.)，Insight II，(Molecular Simulations Inc.)，Discover (Molecular Simulations Inc.)，CHARMm(Molecular Simulations Inc.)， Felix(Molecular Simulations Inc.)，DelPhi，(Molecular Simulations Inc.)， QuanteMM，(Molecular Simulations Inc.)，Homology(Molecular Simulations Inc.)，Modeler(Molecular Simulations Inc.)，ISIS(Molecular Simulations Inc.)，Quanta/Protein Design(Molecular Simulations Inc.)， WebLab(Molecular Simulations Inc.)，WebLeb Diversity Explorer (Molecular Simulations Inc.)，Gene Explorer(Molecular Simulations Inc.)， SeqFold(Molecular Simulations Inc.)，the MDL Available Chemicals Direnctory数据库，Derwent’s World Drug Index数据库， BioByteMasterFile数据库，Genbank数据库和Genseqn数据库。通过所 给出的本发明的公开内容，许多其它程序和数据库对于本技术领域普 通技术人员是显而易见的。
可以用上述程序检测的基序包括编码亮氨酸拉链的序列、螺旋-转 角-螺旋基序、糖基化位点、遍在蛋白化位点、α-螺旋、β-片层、编码 信号肽的信号序列，所述信号肽指导所编码的蛋白的分泌，在转录调 节中相关的序列，如同源框、酸性序列、酶活性位点、底物结合位点 和酶裂解位点。
本发明利用了酶的独特的催化特性。尽管在化学转化中使用生物 催化剂(即纯化酶或粗酶，非活性或活性细胞)通常需要鉴别与特定 起始化合物反应的特定生物催化剂，本发明使用对于许多起始化合物 如小分子中存在的官能基团特异的选择的生物催化剂和反应条件。每 一种生物催化剂对于一个官能基团或几个相关的官能基团特异，并且 可以与许多含有该官能基团的起始化合物反应。
生物催化反应产生了来自单一起始化合物的衍生物群体。这些衍 生物可以进行另一轮生物催化反应，以产生衍生化合物的第二群体。 每一次生物催化衍生的重复就会产生成千上万的原始小分子或化合物 的变异物。
酶在起始化合物的特定位点反应，不会影响分子的其余部分，该 过程用传统化学方法很难实现。高度生物催化特异性提供了在文库中 鉴别单一活性化合物的方法。该文库的特征在于用于产生该文库的生 物催化反应系列，被称作“生物合成历史”。筛选该文库的生物活性并 且跟踪生物合成历史可以鉴别产生活性化合物的特定反应序列。重复 反应序列，并且确定所合成的化合物的结构。这种鉴别模式不同于其 它合成和筛选方法，不需要固定化技术，并且可以使用实质上任何类 型的筛选分析方法在溶液中合成且测试化合物。重要的是要注意到， 官能基团上的酶反应的高度特异性允许“跟踪”特定酶反应，所述特 定酶反应形成生物催化法产生的文库。
许多程序步骤是用机械人自动化进行的，这样能完成大量生物催 化反应，并且每天筛选被试验物，以及确保高水平的准确性和可再现 性。这样的结果是，可以在几周内产生衍生化合物的文库，该文库用 当前的化学方法将需要数年才能产生。
在一个特定的实施方案中，本发明提供了一种用于修饰小分子的 方法，该方法包括用小分子接触由此处描述的多核苷酸编码的多肽或 其酶活性判断，以产生修饰的小分子。测试修饰的小分子文库，以确 定文库中是否存在表现出期望活性的小分子。通过系统地去除用于产 生文库部分的每一生物催化反应，然后测试文库部分中产生的小分子 是否存在或不存在具有期望活性的修饰的小分子，从而鉴别产生具有 期望活性的修饰小分子的特定生物催化反应。任选地重复产生期望活 性的修饰小分子的特定生物催化反应。用一组生物催化剂来完成生物 催化反应，所述生物催化剂与小分子结构中发现的不同结构部分反应， 每一生物催化剂对于一个结构部分或一组相关结构部分特异；并且每 一生物催化剂与含有不同结构部分的许多不同小分子反应。
在一个实施方案中，本发明的新颖碱性淀粉酶通过如下来鉴别： 在高pH下筛选活性，并且鉴别在自动洗碗(ADW)配方中具有稳定 性的淀粉酶。对于衍生自地衣芽孢杆菌的淀粉酶进行比较。水解对于 pH的依赖性研究表明，本发明的大部分碱性淀粉酶的最适pH为7， 或更低，除了克隆B的最适pH为大约8。本发明的碱性淀粉酶保留了 在ADW配方中的活性，尽管克隆B对于高温敏感。优选地，当在ADW 产品中使用时，本发明的碱性淀粉酶将在pH10-11和45-60℃下发挥作 用。
本发明参考下述实施例进行了进一步的描述；然而，应该理解到 本发明不限于这些实施例。
实施例
实施例1
耐热α-淀粉酶的鉴别和表征
本实施例显示了新颖酸性淀粉酶的鉴别。筛选程序是在中性和低 pH条件下进行的。目标是发现用低pH样品产生的DNA文库。这一努 力发现了数百种有能力降解淀粉的克隆。DNA序列和生物信息分析将 这些基因中的大多数分类为以前未曾鉴别的淀粉酶。
生化研究
淀粉酶基因组克隆的生化分析表明许多克隆的最适pH低于6。通 过在70℃，80℃，90℃或100℃温育10分钟并且测量在pH为4.5时 的残余活性来测试这些基因组克隆的裂解物的耐热性。选择在80℃热 处理后保留＞50％活性的克隆进行进一步分析。将这些克隆在90℃和 pH6.0和pH4.5温育10分钟，并且在pH4.5测试残余活性(图1)。 在处理后大部分克隆保留的活性＞40％。为了便于比较，所进化的淀粉 酶，克隆c的残余活性等于第二代酶中最好的酶；克隆c的比活性比 较高。
在pH为4.5室温、70℃和90℃测量在90℃和pH4.5进行热处理 后具有残余活性的克隆的热活性。表1表明SEQ ID NO.：87(嗜热脂 肪芽孢杆菌淀粉酶)和SEQ ID NO.：113(地衣芽孢杆菌淀粉酶)的水 解率在较高温度下有所降低，尽管SEQ ID NO.：125的水解率随着温度 升高到70℃继续增加，并且在90℃仅仅降低了大约50％。
候选者评价
基于在90℃进行热处理后在pH为4.5时的残余活性，比活性和在 90℃时的淀粉水解率，当与地衣芽孢杆菌淀粉酶比较时，在淀粉液化 分析方法中将SEQ ID NO.：125与进化的淀粉酶克隆c进行比较。 室温 70℃ 90℃ SEQ ID NO.：871 1.25 1.43 0.33 SEQ ID NO.：1132 3.3 1.9 0.39 SEQ ID NO.：125 1.9 47 19
表1：三个基因组克隆在pH为4.5和3个不同温度时的染料标记 淀粉水解率(相对荧光单位/秒)。1B.stearothermophilus淀粉酶，2B. licheniformis淀粉酶。
实施例2
碱性pH下耐热淀粉酶活性
该实施例的起始焦点是评价商业自动洗碗(ADW)配方中的现有 淀粉酶系列。这一努力鉴别出了两个候选者：一个在高pH具有活性 (SEQ ID NO.：115)，另一个在ADW配方中具有稳定性(SEQ ID NO.： 207)。研究也包括高pH淀粉酶的鉴别。这一努力发现了数百种具有降 解淀粉能力的克隆。DNA序列和生物信息分析将这些基因中的大多数 分类为先前没有鉴别的淀粉酶。剩余的开放阅读框是新支链淀粉酶 (neopullulanase)、淀粉支链淀粉酶(amylopullulanase)和淀粉麦芽糖 酶。广泛的生化和应用研究表明了3个候选者：克隆B，SEQ ID NO.： 147，和SEQ ID NO.：139)，在pH10具有高比活性，但不幸的是在ADW 配方中缺乏稳定性。总之，已经鉴别了新颖淀粉酶系列，其中每一淀 粉酶对于ADW应用具有期望表型。
生化研究
淀粉酶基因组克隆地生化分析表明，这些克隆中大多数在pH10 和50℃水解淀粉。为了产生足够数量的酶以便进一步进行生化和应用 测试，40个最具活性的基因组克隆的淀粉酶开放阅读框被亚克隆到表 达载体中。这一努力包括：对于那些含有推定信号序列的克隆构建两 个构建物，为每一亚克隆建立生长和诱导条件(加上或减去淀粉酶信 号肽)。
可溶的活性蛋白质从34个亚克隆中被成功地纯化到同质性，用缓 冲液中的2％淀粉于pH8和pH10(40℃和50℃)测量比活性(单位/mg， 其中1单位＝μmol还原糖/分钟)。选择来自地衣芽孢杆菌的淀粉酶 (SEQ ID NO.：113)作为这些研究的基准。比活性通过在30分钟反应 过程中在不同时间点去除样品并且分析还原糖来确定比活性。起始比 率通过将进展曲线适合线性方程来确定。最好的候选者的比较如表2 所示。
确定水解率对pH的依赖性的研究表明，只有克隆B是“碱性淀 粉酶”，其最适pH为大约8；所有其它的最适pH为大约7或更低。不 过，应该清楚击中系列包括在pH10和50℃具有明显活性的几种榜样 淀粉酶。
表2淀粉酶的比活性(U/mg纯酶) 酶 比活性pH8，40℃ 比活性pH10，50℃ 克隆B 682 20 SEQ ID NO.：139 430 33 SEQ ID NO.：127 250 47 SEQ ID NO.：137 230 3 SEQ ID NO.：113 (地衣芽孢杆菌) 228 27 SEQ ID NO.：205 163 4 其余 ＜40
稳定性
测量通过生化分析鉴别的3个最佳候选者中每一个在存在ADW 配方的情况下的稳定性。这些研究的基准是配方基质中的商业酶。图 13说明了在存在ADW配方的多种组分的情况下在50℃温育30分钟 后的残余活性(于pH8和50℃测量)；pH8，pH10.8，ADW溶液(有 漂白剂)和ADW溶液(无漂白剂)。温育后，所测量的活性以原始活 性的百分比表示。该数据表明，克隆B对于高温非常敏感，尽管其它 淀粉酶受影响很小。当在高pH和高温温育这些酶时，商业酶SEQ ID NO.：139稳定性变差；然而，SEQ ID NO.：127保留了全部活性。在重 复试验中在pH 10温育对pH 8温育后，观察到SEQ ID NO.：127的显 而易见的反常行为。
当在ADW基质中于50℃测量了染料标记的淀粉的淀粉酶活性时， 商业淀粉酶表现出活性在pH为8时的大约5％。在相同分析中，克隆 B、SEQ ID NO.：139和SEQ ID NO.：127表现出其在pH为8时测量的 原始活性的不到2％。
洗涤测试
用淀粉涂敷玻片进行洗涤测试，以测量每一纯化酶与商业淀粉酶 相比的性能。根据试验程序，准备用空心面条淀粉涂敷的玻片。将两 个预先称重的淀粉涂敷玻片背对背置于50mL圆锥管中，每个管加入 25mLADW溶液，+/-酶。将试管在垂直的圆盘传送带上轻轻旋转的 同时于50℃温育20分钟。在温育期后，将玻片立即在水中洗涤，烘干 过夜。所有试验进行两次，商业酶作为阳性对照组。这些试验的结果 (图6)以所去除的淀粉的净百分比表示，例如，在有酶的ADW中去 除的淀粉百分比，减去在单独ADW中去除的淀粉百分比。
实施例3
基因最优化
酶的特性可以通过多种进化策略来提高，包括基因位点饱和诱变 (GSSMTM)和基因再装配TM(Diversa Corporation，San Diego，CA)。 这样的技术将被用于所发现的淀粉酶基因，以便产生可以筛选改进的 特性的变体库。
进化的亲本分子将是下述分子中的一种或多种：SEQ ID NO.：113， SEQ ID NO.：139，SEQ ID NO.：115和SEQ ID NO.：127(SEQ ID NO.： 127的平截形式)。
已经开发出了高产量筛选(high throughput screen)来评价存在 ADW特性情况下的酶特性。高产量筛选(HTS)的开发在任何进化程 序中是最重要的。HTS已经实现自动化，且对于亲本淀粉酶，已经显 示出一致结果(图7)。亲本淀粉酶在ADW配方中具有可测量的活性， 然而相对于pH8活性降低了很多。
通过GSSM或随机突变产生的SEQ ID NO.：81的突变体
GSSM
宿主： 大肠杆菌，XL1-Blue MRF’
载体： pSE420
亲本： SEQ ID NO.：81
突变的残基包括#2-93，#118-159，#389和#433。
已经被测序的提高活性的淀粉酶克隆列表 名称 变化 大肠杆菌中的数据 SEQ ID NO.：81/4V Y4V，TAT到GTG 活性增加2倍 SEQ ID NO.：81/4V Y4V，TAT到GCG 活性增加2倍 SEQ ID NO.：81/30V T30，ACC到GTT 活性增加2.5倍 SEQ ID NO.：81/31V I31Q，ATC到TAG 活性增加1.5倍 SEQ ID NO.：81-4V-30V 4V+30V 活性增加3倍 SEQ ID NO.：81-2C C154A&C155A 活性增加1.2倍 SEQ ID NO.：81-4C C154，C155A& C389A，C433A 活性增加2倍
备注：
●对于SEQ ID NO.：81/31Q，TAG密码子应该编码终止密码子， 但由于宿主的supE突变它编码XL1-Blue MRF’中的Gln。
随机突变
通过易错PCR按照如下方法将随机突变导入SEQ ID NO.：81中
◆ 在反应中使用不平衡的dATP，dCTP，dGTP或dTTP来导入突 变
◆ 在反应中使用不同浓度的MnCl2来导入诱变
◆ 使用上述两种方法的组合
新活性克隆的确认：
◆ 在15ml Falcon管中从初级筛选中培养上调突变体，并且用 1mM IPTG诱导
◆ 用RBB-淀粉作为底物再次进行分析
◆ 对克隆进行测量以确认突变
已经被测序的提高活性的淀粉酶克隆列表
名称 摇瓶中的数据 发酵罐中的数据
SEQ ID NO.：81-4C-UM1 活性增加1.3-2倍 与SEQ ID NO.：81-4C相同
SEQ ID NO.：81-4C-UM1 活性增加2倍 与SEQ ID NO.：81-4C相同
实施例4
在碱性pH下对具有活性的α-淀粉酶的表征
进一步对本发明的在碱性pH下具有活性的淀粉酶进行表征。已经 在pH8和10(40℃和50℃)进行了对2％淀粉的动力学分析。
表4
克隆，比活性 pH8，40℃ pH10，50℃
SEQ ID NO.：113 228单位/mg 27单位/mg
(地衣芽孢杆菌)
克隆B 682单位/mg 31单位/mg
SEQ ID NO.：139 430单位/mg 33单位/mg
SEQ ID NO.：127 540单位/mg 50单位/mg
对照组0GL5(大肠杆菌) 1.8单位/mg 0单位/mg
1单位活性倍定义为每分钟释放1μmol还原糖
实施例5
淀粉酶活性分析：BCA还原端分析
相关克隆地淀粉酶的活性使用下面的方法学进行确定。
1.如下准备2种底物溶液：
a)2％可溶淀粉(马铃薯)溶液，pH为8，通过将2mg马铃 薯淀粉溶解在pH为8的100ml 100mM磷酸钠中制备。
b)2％可溶淀粉(马铃薯)溶液，pH为10，通过将2mg马铃 薯淀粉溶解在100ml 100mM碳酸钠中制备。
在沸腾的水浴中加热这两种溶液，同时混合，持续30-40分钟直到 淀粉溶解。
2.制备溶液A，使用64mg/ml一水合碳酸钠，24mg/ml碳酸氢钠， 和1.95mg/ml BCA(4，4’-二羧基-2，2’-二喹啉二钠盐(Sigma Chemical cat #D-8284)来制备。将上述加入到dH2O中。
3.制备溶液B，通过将1.24mg/ml五水合硫酸铜和1.26mg/ml L- 丝氨酸混合而制备。将该混合物加入到dH2O中。
4.用溶液A和B制备一种工作试剂，其中溶液A和B的比率为 1∶1。
5.制备dH2O中的10mM麦芽糖的麦芽糖标准溶液，其中10mM 麦芽糖在期望pH下混合到2％可溶淀粉中，使最终浓度为0，100，200， 300，400，600μM。标准曲线将通过每组时间-点产生。由于该曲线是 通过将10μl标准物加入到工作溶剂中来确定，所以它能确定出0，1， 2，3，4，6nmol麦芽糖。
6.将1ml底物溶液等分到微型离心管中，在加热块或被加热的水 浴中使其平衡到期望温度(5分钟)。将50μl酶溶液加入到管盖子的内 部。
7.该溶液用溶液A&B的混合溶液5ml进行平衡，将100μl等分 到96孔PCR板中。将板放在冰上。
8.在5分钟温度平衡后，盖上管子的盖子，倒置且涡流3次。将 10μl立刻等分到板子上，t＝0(零时间点)。将酶混合物留在加热块中， 在每一期望时间点等分10μl(例如0，5，10，15，20，30分钟)。
9.确保12个孔是空的(只有工作试剂被等分)，以便加入10μl标 准物作标准曲线。
10.当所有时间点被收集以及加入了标准物之后，盖住板，加热到 80℃维持35分钟。在冰上将板冷却10分钟。所有孔中加入100μl H2O。 混合均匀并将100μl样品加入到平底96孔板上，在560nm下读取吸光 值。
11.对每一样品的时间点根据其自己的t＝0调零(从其它A560值 的平均值中减去平均的t＝0 A560值)。通过标准曲线的斜率将A560值 (实验值)转化为微摩尔(将A560值(实验值)作被除数，除以标准 曲线的斜率(A560/umole))。生成时间点和微摩尔(以微摩尔/分表示) 的斜率，乘以100(作为微摩尔值，只是因为在检试中使用了10μl，而 不是1ml rxn中所含的量)。斜率(以微摩尔/分表示)除以用以毫克为 单位表示的蛋白质数值可以得到比活性。在三个测试样品中，所有的 点应该至少是以双份方式重复。一个例示性的标准曲线图示在图11中。
表5：样品数据 A560 实验 值/标 准斜 率 克隆 稀释 度 分钟 A-560-1 A-560-2 平均A 560 调零A 560 微 摩 尔 ENZ 50 0 0.1711 0.1736 0.17235 0 0.000 5 0.2104 0.2165 0.21345 0.0411 0.0005 10 0.2492 0.2481 0.24865 0.0763 0.0009 15 0.2984 0.2882 0.2933 0.12095 0.0014 20 0.3355 0.3409 0.3382 0.16585 0.0020 30 0.3942 0.3805 0.38735 0.215 0.0026 40 0.4501 0.4412 0.44565 0.2733 0.0033
活性＝0.008646微摩尔/分
蛋白质浓度(mg/ml)除以任意稀释度，就可以得到测试中所用毫 克数值。
上述斜率除以测试中所用毫克数值，得到比活性
比活性＝24.93微摩尔/分/毫克
(例如，参见，Dominic W.S.Wong，Sarah B.Batt，和George H. Robertson(2000).Microassay for rapid screening of alpha-amylase activity. J.Agric.Food Chem.48，4540-4543，以及Jeffrey D.Fox和John F. Robyt，(1991).Minituratization of three carbohydrate analyses using a micro sample plate reader.Anal.Biochem.195，93-96，在此引用加以参 考)。
实施例6
筛选α-淀粉酶活性
克隆的淀粉酶活性可以通过本技术领域的多种方法进行评价。下 面是有关本发明所用的一般方法学的叙述。每个板上用于筛选的噬菌 斑的数目大约是10,000噬菌斑形成单位(pfu)。对于每个DNA文库： 对于一个分离文库而言，至少筛选50,000个噬菌斑；对于一个非分离 文库而言，至少筛选200,000个噬菌斑。这取决于相对λZap Express 扩增裂解物而言的噬菌斑形成单位的滴度。
λ文库的滴度确定
1)将微升量的λZap Express扩增文库原种加到600μl大肠杆菌 MRF细胞中(OD600＝1.0)。为稀释MRF原种，使用了10mM MgSO4。
2)在37℃温育15分钟。
3)将细胞悬液转移到50℃的5-6ml NZY培养基的顶层琼脂中，轻 轻混合。
4)立即将琼脂溶液倾倒到大的(150mm)NZY培养基平板上。
5)然后让顶层琼脂完全凝固(大约30分钟)，然后倒置平板。
6)在39℃将平板温育8-12小时。
7)估计噬菌斑的数目。确定出噬菌体滴度为10,000pfu/板。如果 需要，用SM缓冲液稀释文库噬菌体等分试样。
底物筛选
1)将来自扩增文库的λZap Express(50,000pfu)加到600μl大肠 杆菌MRF细胞中(OD600＝1.0)。对于非环境文库，制备4管(50.000pfu/ 管)。
2)在37℃温育15分钟。
3)当噬菌体/细胞悬液正在温育时，将1.0mL红色淀粉底物(1.2％ w/v)加入到50℃的6.0mL NZY培养基的顶层琼脂中，彻底混合。将 溶液于50℃保存，直到使用。
4)将1/5(10,000pfu)细胞悬液转移到底物/培养基的顶层琼脂中， 轻轻混合。
5)立即将琼脂溶液倾倒到大的(150mm)NZY培养基平板上。
6)然后让顶层琼脂完全凝固(大约30分钟)，然后倒置平板。
7)将剩余细胞悬液重复步骤4-6四次(每次1/5悬液)。
8)在39℃将平板温育8-12小时。
9)观察平板上噬菌斑周围的清澈区(孔环区)。
10)将具有孔环的噬菌斑从琼脂中取出，并且转移到无菌微量管 中。大孔200μL移液管管尖正好用于移出含有期望噬菌斑的(核心) 琼脂塞。
11)将噬菌体再次悬浮于500μL SM缓冲液中。加入20μL氯仿， 以抑制任何进一步的细胞生长。
12)在开始下一步之前，将纯噬菌体悬液在室温温育4小时，或 者过夜。
分离纯克隆
1)将10mL再悬浮的噬菌体悬液加到500μl大肠杆菌MRF细胞 中(OD600＝1.0)。
2)在37℃温育15分钟。
3)当噬菌体/细胞悬液正在温育时，将1.0mL红色淀粉底物(1.2％ w/v)加入到50℃的6.0mL NZY培养基的顶层琼脂中，彻底混合。将 溶液于50℃保存，直到使用。
4)将细胞悬液转移到底物/培养基的顶层琼脂中，轻轻混合。
5)立即将琼脂溶液倾倒到大的(150mm)NZY培养基平板上。
6)然后让顶层琼脂完全凝固(大约30分钟)，然后倒置平板。
7)在39℃将平板温育8-12小时。
8)观察平板上单个噬菌斑(纯克隆)周围的清澈区(孔环区)。 如果单个噬菌斑不能分离，调节滴度和并且再次对噬菌体悬液铺板。
9)将具有孔环的单个噬菌斑从琼脂中取出，并且转移到无菌微量 管中。大孔200μL移液管管尖正好用于移出含有期望噬菌斑的(核心) 琼脂塞。为了扩增滴度，将5个单个活性噬菌斑装入到微量管中。
10)将噬菌斑再次悬浮于500μL SM缓冲液中。加入20μL氯仿， 以抑制任何进一步的细胞生长。
11)在开始下一步之前，将纯噬菌斑悬液在室温温育4小时，或 者过夜。通过将DMSO加入到噬菌体悬液(7％v/v)中，将纯噬菌体 悬液储存于-80℃。
排除纯克隆
1)将100μL纯噬菌体悬液加到200μl大肠杆菌MRF细胞中 (OD600＝1.0)。向其中加入1.0μL ExAssist噬菌体(＞1X106pfu/mL； Stratagene)。使用2059 Falcon管来排除。
2)将悬液在37℃温育15分钟。
3)将3.0mL 2xYT介质加入到细胞悬液中。
4)在摇动的同时将悬液在30℃温育至少6小时或过夜。
5)将管子变为70℃20分钟。噬菌粒悬液可以在4℃储存1-2月。
6)将100μL噬菌粒悬液转移到含有200μL大肠杆菌Exp 505细 胞(OD600＝1.0)的微量管中。
7)将悬液在37℃温育15分钟。
8)将300μL SOB加入到悬液中。
9)将悬液在37℃温育30-45分钟。
10)将100μL悬液转移到小的(90mm)LB培养基平板中，所述 平板含有用于Zap Express DNA文库的卡那霉素(含有卡那霉素 50μg/mL的LB培养基)或用于Zap II DNA文库的氨苄青霉素(含有 卡那霉素100μg/mL的LB培养基)。
11)剩余悬液被转移到另一个小的LB培养基平板上。
12)使用无菌玻璃珠将悬液均匀地分配到平板上。
13)将平板在30℃温育12-24小时。
14)观察平板的集落。
15)将单个集落接种到含有适当的抗生素的LB液体培养基中，并 且在30℃温育12-24小时。
16)甘油原种可以通过将80％甘油加入到液体培养物(15％v/v) 中来制备，并且于-80℃储存。
活性检验
1)将50μL液体培养物转移到微量管中。将500μL 8％pH 7 Amylopectin Azure加入到同一管子中。每一克隆准备2个管子。
2)在50℃测试活性3小时或过夜。使用pH7缓冲液作为对照组。
3)在冰水浴中将试验样品冷却5分钟。
4)加入750μL Ethaqnol并且彻底混合。
5)在13000rpm(16000g)离心5分钟。
6)在595nm测量上清液的OD。
RFIP分析
1)将1.0mL液体培养物转移到无菌微量管中。
2)在13200rpm(16000g)离心1分钟。
3)丢弃上清液。将另一种1.0mL液体培养物加入到同一无菌微量 管中。
4)在13200rpm(16000g)离心1分钟。
5)丢弃上清液。
6)按照QIAprep旋转微型试剂盒规程以进行质粒分离。
7)使用BioPhotometer检查DNA浓度。
8)使用Sac I和Kpn I进行第一次双重消化。在37℃温育1小时。
9)使用Pst I和Xho I进行第二次双重消化。在37℃温育1小时。
10)将加样染料加入到消化后的样品中。
11)以120伏特在1.0％琼脂糖凝胶上对消化后的样品电泳1-1.5 小时。
12)用凝胶成象仪观察凝胶。所有具有不同消化模式的克隆将进 行序列分析。
实施例7
淀粉酶分析
宿主培养物的制备
1.开始过夜培养XL 1-Blue MRF宿主细胞。使用来自划线平板的 单菌落接种用20μg/mL四环素补充的10mL LB。过夜培养培养物，在 37℃摇动至少16小时。
2.使用无菌技术，用具有来自过夜LBTet培养物的XL 1-Blue MRF 宿主接种新鲜的100mL LBTet每日培养物。
3.在37℃振荡器中培养，直到OD值到达0.75-1.0。
4.使宿主细胞在1000xg离心10分钟得以沉淀，然后轻轻地再悬 浮于10mM OD值为5的MgSO4中。
5.将少量宿主细胞稀释到OD1，用于滴度测定和pintooling。
6.当宿主制备物被储存于冰中或4℃时，可以使用长达1周时间。
注释
-为了缩短日培养的时间，在LB中使用_X通常的Tet浓度(_X ＝10μg/mL)，或者完全略去抗生素。
-当用四环素选择时不使用NZY。NZY培养基中的高Mg++浓度使 得Tet不起作用。
测定λ文库的滴度
7.将三个无菌微量离心管放置到支架上。
8.将995μL制备的宿主细胞等分到一个管子中，并且将45μL制 备的OD1宿主细胞等分到两个剩余的管子的每一个中。
9.将5μLλ文库加入到含有995μL宿主细胞的管子中，涡流搅拌 混合。这导致稀释因子为200。
10.通过将5μL先前的稀释液连续地加入到含有45μL制备的宿主 细胞的其余两个管子中，制备1/2,000和1/20,000稀释液。
11.通过在37℃温育15分钟，使噬菌体吸附到宿主上。
12.同时，将100μL制备的OD1宿主细胞移入三个Falcon 2059 管子的每一个中。
13.将5μL每一稀释液加入到含有宿主细胞的独立的2059管子 中。
14.通过将3mL顶层琼脂加入到每一个管子中，并且快速地倾倒 在90mm NZY板上，对每一稀释液铺平板。在顶层琼脂变硬之前确保 平滑且均匀地分配。
15.倒置平板，在37℃过夜培养。
16.数出噬菌斑的数量，并且计算文库原种的滴度(单位为：噬菌 斑形成单位(pfu)/μL)。
淀粉酶的λ微量滴度筛选
制备
1.如上所述制备足量的XL1-Blue MRF宿主培养物，用于计划的 筛选量。100mL培养物通常足以筛选2-3个文库。
2.高压灭菌与QFill2分配器相容的几个瓶子。这些瓶子是广口科 尔希(Corning)瓶，250mL，在瓶口有密封环。
3.确保具有足量的适于筛选的平板，顶层琼脂，BODIPY淀粉， 红色淀粉溶液等等。
4.规定用自动化代表形式设定运转Day 2自动仪器循环。
第一天
1.用文库筛选和平板数目标记1536-孔平板(黑色)。Tough-TagsTM 管粘着剂，在宽度方向切割成两半，是标记1536-孔平板的理想标记物。
2.计算筛选所必须的文库、宿主细胞和NZY介质的体积。这用 Excel电子表格很容易实现。
3.将所计算的λ文库和OD5宿主细胞的体积混合到一个无菌 250mL广口科尔希瓶中(具有密封环)。
4.允许在37℃发生吸附作用15分钟。
5.加如所计算的体积的NZY介质并且很好地混合。这被称作细胞 -噬菌体-介质悬浮液。
6.通过将50μL细胞-噬菌体-介质悬浮液与250μL OD1细胞在 Falcon 2059管中混合进行伴随滴度测定，然后与9mL顶层琼脂一起铺 平板于150mm NZY平板上。在37℃将伴随滴度平板培养过夜。
7.用剩余的悬浮液装载分配器，并且将每一标记的1536-孔平板以 4μL/孔进行排列。如果分配器在一些孔中留下了气泡，可以通过在200 xg离心1分钟去除这些气泡。
8.将0.5μL阳性对照组噬菌体加入到至少两个分析平板的AD46 孔位置处。为了完成这一目的，使用具有强大的淀粉酶阳性的λ克隆。 SEQ ID NO.：113或SEQ ID NO.：199的λ版本是阳性对照组的很好的 选择。
9.在一个加湿温育器中(≥95％)将排列平板于37℃培养过夜。
第二天
1.计算伴随滴度测定平板上的pfu数量，确定每孔的平均接种密 度(单位为pfu/孔)。
2.如下pintool每一文库筛选的至少两个平板(优选地2个含阳性 对照组)：
a)准备两个宿主菌苔平板作为其上进行pintool的表面：将250μL OD1宿主细胞与2mL 2％红色淀粉混合，并且用9mL顶层琼脂铺平板 于150mm NZY平板上。尽可能地将每一平板与顶层琼脂凝固保持水 平，以便在平板上产生均匀的红色色彩。
b)使用两次火焰消毒的1536位置pintool，在宿主菌苔平板上重 复至少两个筛选平板。
c)将pintool的受体平板放置在层流罩超静台中，将其盖子打开大 约15-30分钟(以排出过量的湿气)。
d)将盖子放回原处，在37℃倒置培养过夜。
3.如下制备2X BODIPY淀粉底物缓冲液：
a)计算以4μL/孔的所有筛选平板所需要的2X底物缓冲溶液的总 体积(包括分配器所需要的任何额外的死区体积)，并且将100mM CAPS pH10.4的量计量为适合于所用分配器的容器。
b)收回足量0.5mg的BODIPY淀粉管子，以产生终浓度为 20-30μg/mL的所需体积的2X底物缓冲液(在上面步骤a)中所计算的)。
c)于室温将50μL DMSO溶解在每一0.5mg管子中，避光，同时 频繁涡流。这需要超过15分钟时间；一些生产批量的BODIPY淀粉比 其它淀粉溶解的好一些。
d)在每一管子中加入50μL 100mM CAPS缓冲液，pH10.4，并且 涡流混合。
e)合并所有管子的内容物，并且通过在微型离心机中以最大速度 离心速度离心1分钟去除任何未溶解的聚集物。
f)将上清液加入到上述步骤a)中测量的剩余的100mM CAPS缓 冲液中。
g)通过用金属箔包裹使2X底物缓冲液避光。
4.将平板和底物缓冲液放入自动化室中，用下述参数设计自动仪 器的程序：
a)每孔分配4μL底物缓冲液
b)第一次读数在加入底物后1小时，第二次读数在9小时，第三 次读数在17小时；读数之间于37℃温育
c)激发过滤器：485nm；发射过滤器：535nm
d)将荧光增益设置为70，或者设置所准备的2X底物缓冲液批次 的最适增益。
e)确保所用的培育箱可以使分析平板避光
第三天
1.检查pintool平板在与相关分析平板上的孔对应的所有位置上在 细菌菌苔中已透明。而且检查在任何针刺(pin)位置上在红色淀粉中 已透明。如果含有阳性对照组的平板被用于pintool，应该能在红色背 景上看到一个大的透明区。注意要提防也会在红色淀粉中形成透明区 的污染(参见实施例7最后的评论”在红色淀粉中形成透明区地污染 物”)。
2.从自动仪器计算机产生的数据表中鉴别出推定的击中。通过遗 传工程产生的KANAL程序简化了数据分析。作为单凭经验的方法， 推定击中的特征在于具有在整个背景上信号密度清洗至少1.5倍的孔。
3.对于每一推定，从孔中取出2μL，加入到含有500μL SM缓冲 液和50μL CHCl3的管子中。涡流混合，并且于4℃储存。该溶液在下 文被称作4e-3原种。原始筛选平板应当于4℃避光储存，至少储存到 对数据进行分类总结结束时。
这是推荐的用于突破推定击中的方法。这是一种依赖于确认 BODIPY淀粉上活性的液相分析方法。另外，推定击中可以被直接铺 平板于含有红色淀粉的固相平板上，这样对于2,000-3,000pfu/击中就可 以检查透明区。然而，不能观察到红色淀粉上的透明区的一个指示不 必是，推定击中是假阳性。然后必需用最初鉴别的格式进行分析(即 用BODIPY淀粉作为底物的液相分析)。另外，非常弱的阳性用下面详 细描述的方法将更加易于鉴别。
第一天
1.在无菌50mL圆锥管中，将0.5mL OD5宿主细胞与45.5mL NZY 混合。这将被称作宿主-介质悬浮液。
2.对于将要分析的每一推定击中，将1mL宿主介质悬浮液等分到 3个无菌微量离心管的每一管中。
3.将12道自动移液管设置为多次分配模式，等分试样为20μL， 等分量为2x。将具有无菌尖端的清洁装置安放到自动移液管上。
4.将大约1mL宿主介质悬浮液倾倒到一个新无菌溶液盆中，并且 加到多道自动移液管上。
5.将20μL/孔分配到黑色384-孔平板(12道×2＝24孔)的最后 一行(行P)。这一行在下文将被用作对照组。
6.通过用尖端接触盆表面并且按下自动移液管上的RESET按钮 将剩余液体排出尖端。将自动移液管稍微朝下放置以阻止尖端受到污 染。此时没有必要替换尖端。
7.将盆中的剩余液体倾倒到一个废物容器中(像烧杯)，注意避免 防溅挡板的污染。
8.对于将要分析的第一推定，取出111μL 4e-3原种(参见淀粉酶 的λ微量滴度筛选的第二天)，并且将其加入到一组含有1mL宿主介 质悬浮液的三个管子中的第一个中(步骤2)。涡流混合。这是稀释物 A。
9.取出111μL溶液A，并且将其加入到该组管子的下一个管子中。 涡流混合。这是稀释物B。
10.取出111μL溶液B，并且将其加入到该组管子的最后一个管子 中。涡流混合。这是稀释物C。现在应该有三种噬菌体稀释物，每一 稀释物的浓度以因子10而不同。
11.将稀释物C的内容物(三个样品中最稀的)倾倒到溶液盆中， 加到多道自动移液管上。
12.按照20μL/孔分配到384-孔平板(12道×2＝24孔)的第一行。
13.通过用尖端接触盆表面并且按下自动移液管上的RESET按钮 将剩余液体排出尖端。将自动移液管稍微朝下放置以阻止尖端受到污 染。此时没有必要替换尖端。
14.如上所述倒空盆子。
15.将稀释物B的内容物倾倒到相同的盆子中，并且加到多道自 动移液管上。
16.按照20μL/孔分配到384-孔平板的第二行。
17.类似地进行步骤13-16以便将稀释物A分配到平板的第三行 中。
18.在所有三种稀释物已经被排列到平板的最初3行中后，将所有 尖端和溶液盆抛到生物危险废物容器中。
19.用一组干净的无菌尖端放置到自动移液管上，并且打开一个新 的无菌溶液盆。
20.对每一剩余的推定击中重复步骤8-19，使用平板上剩余的行， 直到行O。在一个384-孔平板上可以分析五个推定击中，保留最后一 行(行P)作为对照组。
21.将0.5μL每一对照组加入到一个独立的孔中。使用至少2-3个 独立对照组，优选地能覆盖活性范围。
22.在加湿(≥95％)培养箱中于37℃过夜培养分析平板。
第二天
1.将所有幸免平板pintool到具有红色淀粉的宿主菌苔上，使用与 淀粉酶的λ微量滴度筛选中的第二天所描述的相同方法，除了使用384- 位置pintool之外。
2.如下制备2X BODIPY淀粉底物缓冲液：
a)计算以20μL/孔的所有幸免平板所需要的2X底物缓冲溶液的总 体积(包括分配器所需要的任何额外的死区体积)，并且将100mM CAPS pH10.4的量计量为适合于所用分配器的容器。
b)收回足量0.5mg的BODIPY淀粉管子，以产生终浓度为 20-30μg/mL的所需体积的2X底物缓冲液(在上面步骤a)中所计算的)。
c)于室温将每一0.5mg管子中的物质溶解在50μL DMSO中，避 光，同时频繁涡流。这需要超过15分钟时间；一些生产批量的BODIPY 淀粉比其它淀粉溶解的好一些。
d)在每一管子中加入50μL 100mM CAPS缓冲液，pH10.4，并且 涡流混合。
e)合并所有管子的内容物，并且通过在微型离心机中以最大速度 离心1分钟去除任何未溶解的聚集物。
f)将上清液加入到上述步骤a)中测量的剩余的100mM CAPS缓 冲液中。
g)通过用金属箔包裹使2X底物缓冲液避光。
3.按照20μL/孔分配到所有幸免平板中。
4.在铝箔包裹所有平板，并且于室温温育2-6小时。
5.用下述设置在Spectrafluor中读取每一平板：
a)荧光读数(激发过滤器：485nm；发射过滤器：535nm
b)平板定义：384孔黑色
c)从顶部读数
d)最适增益
e)闪光次数：3
6.在所得到的Excel电子表格中，以独立的图表绘制推定的3行 中的每一行的图表，并且检查其活性。确保阳性对照组在整个背景上 产生信号。
7.对于在孔中具有每一真实信号的每一推定，按照如下方法从阳 性孔中收获样品：
a)从代表最高的原始稀释度的行中选择阳性孔。
b)将2μL从上述孔中转移到含有500μL SM和50μL CHCl3的管 子中。这被称作机会原种。
c)于4℃储存。
8.使用先前所描述的方法，用红色淀粉将大约10μL每一机会原 种铺平板于150mm NZY平板上。目的是获得几个(至少20个)孔独 立的噬菌斑，从这些噬菌斑中来取出分离物。
第三天
1.检查pintool平板在与相关分析平板上的孔对应的所有位置上在 细菌菌苔中的透明区可接受发生率。而且检查在任何阳性对照组和任 何测试推定中红色淀粉中的透明区。注意要提防也会在红色淀粉中形 成透明区的污染物(参见如下)。
2.从含有机会原种的稀释物的固相平板上，取出几个分离的噬菌 斑，将每一噬菌斑移入含有50μL CHCl3的500μL SM中。这被称作分 离原种。
3.然后可以用上述描述的方法在BODIPY淀粉上个别地测试分离 原种。如果在步骤2中被取出的噬菌斑在红色淀粉背景中产生了透明 区的话，这一步可以忽略。然后用上述描述的方法在BODIPY淀粉上 个别地测试分离原种。然而，如果在步骤2中被取出的噬菌斑在红色 淀粉背景中产生了透明区的话，这一步可以忽略。
排除
第一天
1.在Falcon 2059管子中混合200μL OD1 XL1-Blue MRF宿主， 100μLλ分离原种和1μL ExAssist噬菌体原种。
2.在37℃振荡器中温育15分钟。
3.加入3mL NZY培养基。
4.在37℃振荡器中培养过夜。
第二天
1.在20分钟内将排除管加热到70℃。
2.在1000xg离心10分钟。
3.在Falcon 2059管子中，混合50μL上清液和200μL EXP505 OD1 宿主。
4.在37℃振荡器中温育15分钟。
5.加入300μL SOB培养基。
6.在37℃振荡器中温育30-45分钟。
7.使用无菌玻璃珠将50μL铺平板于大的LBKan50平板上。如果这 些平板是“干的”，可以加入另外的SOB培养基，以帮助分配细胞。
8.将平板在30℃至少培养24小时。
9.培养分离物以用于测序和/或RFLP。
在30℃培养降低了噬菌粒的拷贝数量，并且被用于减轻一些淀粉 酶克隆的显而易见的毒性。
在红色淀粉中形成透明区的污染物
当在固体培养基上使用红色淀粉来分析噬菌体的淀粉酶活性时， 通常可以看见在红色淀粉中形成透明区的污染集落生成单位(cfu)。对 于pintool平板，重要的是，不管何时这些污染物与特定孔位置对齐时。 需要区分淀粉酶阳性噬菌体克隆与这些污染物。污染微生物的来源大 概是2％红色淀粉原种，该原种不能通过高压灭菌或通过在制备后过滤 来灭菌。应该可以认为，它们是通过使红色淀粉产生代谢变化而存洉 的机会微生物。为了降低这些污染物，当准备2％红色淀粉溶液时需要 使用无菌技术，并且将原种于4℃或冰中储存。
实施例8
生物信息分析
用已知的嗜高温α-淀粉酶序列进行最初的生物信息分析。图14a 显示了序列的对齐状况，一些序列已经储存在NCBI数据库中。该分 析显示了用于PCR的简并引物的设计潜力，PCR完整基因减去其信号 序列(参见图14a)的部分，从文库中潜在地得到了新颖的全长α淀粉 酶。
通过PCR从基因组DNA筛选下述文库：
表6 文库 名称 PCR阳性 亚克隆 5 A.lithotropicus 否 13 隐蔽热网菌(Pyrodictium occultum) 否 17 热网菌TAG11(Pyrodictium TAG11) 否 是 113 深海富集物(Deep sea enrichment) 是 是 170 深海富集物(Deep sea enrichment) 是 是 198 古生菌属(Archaeglobus) 否 206 酸菌属(Acidianus sp) 否 453 混合的冰岛富集物(Mixed iceland enrich) 否 455 混合的冰岛富集物(Mixed iceland enrich) 是 是
图14b显示了所鉴别的序列的对齐，下面的表罗列了它们相对的 同一性百分比。
表7：核苷酸序列同一性％ SEQ ID NO.：81 pyro Pyro 2 thermo therm2 SEQ ID NO.：75 SEQ ID NO.：77 SEQ ID NO.：83 SEQ ID NO.：85 SEQ ID NO.：79 SEQ ID NO.：81 100 91.7 75.1 82.1 80.1 82.5 82.6 82.1 82.6 83 pyro 100 74.8 82.5 80.5 82 82.2 82.9 82.8 84 Pyro2 100 71.5 71.1 74 74.2 77 77.1 73 therm 100 81.7 83.5 83.8 82.8 83.2 83.8 Therm2 100 88.9 88.8 84.1 84.7 84 SEQ ID NO.：75 100 98.3 84.6 85.2 85.5 SEQ ID NO.：77 100 84.8 84.9 85.4 SEQ ID NO.：83 100 96 83.3 SEQ ID NO.：85 100 83 SEQ ID NO.：79 100 克隆A
氨基酸同一性的范围在大约85-98％之间。因此，正如此处所述，这些序列可用于基因的改组。
图14c显示了上面的相应多肽序列的核酸对齐。这些淀粉酶在表达载体pSE420和宿主细胞系XL-Blue中的表达 显示了1703和1706具有淀粉酶活性。
实施例9
文库63 GP-1α淀粉酶最适pH的表征和比活性的确定
在最初的试验中，来自Thermococcus的SEQ ID NO.：81显示了， 它不仅对于用于谷物湿研磨的淀粉液化有效，而且对于用于织物脱浆 有效。该酶的最适pH为4.5-5.0。在这样低的pH下，可能使用很少的 钙或不使用钙，这会降低整个运作成本和减少副产物形成。另外，在 这样低的pH下，减少了化学品的使用和离子交换载体的使用。工业标 准的地衣芽孢杆菌淀粉酶的热稳定性和最适pH属于次最佳的。与地衣 芽孢杆菌淀粉酶相比，63GP-1淀粉酶具有较高的应用比活性，因此水 解一吨淀粉需要的酶会更少(使用的酶可以少至20倍)。
水解淀粉的最适pH通过将50μL GP-1，0.35U/ml与100ml 1％可 溶淀粉溶液(淀粉0.0175U/g)在95℃反应30分钟来确定。正如此处 所述，在液化淀粉溶液中产生的还原端通过neocupronine分析测量。 玉米淀粉的水解百分比通过用neocupronine分析测量所产生的糖还原 端来确定。称取70g缓冲溶液(pH4-7)，加入100ppm钙。将30g玉 米淀粉混合到缓冲溶液中，形成淀粉浆料。加入酶，密封容器，用每 分钟6℃的起始加热速率在95℃温育30分钟。从反应烧杯中提取1ml 样品，并且用neocupronine分析法进行分析。GP-1的最适pH为4.5 到5之间，而商业上的地衣芽孢杆菌淀粉酶在大约pH 6.0发挥最佳作 用。
实施例10
淀粉酶连接再装配
从亲本克隆SEQ ID NO.：81，SEQ ID NO.：77，SEQ ID NO.：79中 的每一个扩增9个片段(每一个片段大约150bp)，覆盖了整个开放阅 读框。引物提供在表8中。
表8
SEQ ID NO：
GAACACTAGTAGGAGGTAACTTATGGCAAAGTATTCCGAGCTCGAAG 258 SpeI
GAACGGTCTCATTCCGCCAGCCAGCAAGGGGATGAGCGG 259 BsaI
GAACCGTCTCAAAACACGGCCCATGCCTACGGC 260 BsmBI
GAACGTCTCACCTCGACTTCCACCCCAACGAGGTCAAG 261 BsmAI
GAACGTCTCAGGCGCTTTGACTACGTGAAGGGC 262 BsmAI
GAACGGTCTCAACAAGATGGATGAGGCCTTTG 263 BsaI
GAACCGTCTCACGATATAATCTGGAACAAGTACCTTGC 264 BsmBI
GAACCGTCTCAGAAGCACGAGCATAGTTTACTACG 265 BsmBI
GAACCGTCTCAAAGGTGGGTTTATGTGCCG 266 BsmBI
GAACGTCTCAGGAATCCAAATGGCGGATATTCCCGC 267 BsmAI
GAACGGTCTCAGTTTATCATATTGATGAGCTCC 268 BsaI
GAACCGTCTCAGAGGTAGTTGGCAGTATATTTG 269 BsmBI
GAACGTCTCACGCCAGGCATCAACGCCGATG 270 BsmAI
GAACGTCTCATTGTAGTAGAGCGGGAAGTC 271 BsmAI
GAACGGTCTCAATCGGTGTCGTGGTTTGCTAC 272 BsaI
GAACCGTCTCACTTCCACCTGCGAGGTGGTC 273 BsmBI
GAACCGTCTCACCTTCCAACCTTGCTCGAGC 274 BsmBI
TCGAGACTGACTCTCACCCAACACCGCAATAGC 275
GAACACTAGTAGGAGGTAACTTATGGCCAAGTACCTGGAGCTCGAAG 276 SpeI
AGG
GAACGGTCTCATTCCCCCGGCGAGCAAGGGC 277 BsaI
GAACCGTCTCAAAACACCGCCCACGCCTACGG 278 BsmBI
GAACGTCTCACCTCGACTTCCACCCCAAC 279 BsmAI
GAACGTCTCAGGCGCTTCGACTACGTCAAGG 280 BsmAI
GAACGGTCTCAACAAGATGGACGCGGCCTTTGAC 281 BsaI
GAACCGTCTCACGATATAATTTGGAACAAGTACCC 282 BsmBI
GAACCGTCTCAGAAGCACCGACATAGTCTAC 283 BsmBI
GAACCGTCTCAAAGGTGGGTCTACGTTCCG 284 BsmBI
GAACGTCTCAGGAATCCATATTGCGGAGATTCCGGC 285 BsmAI
GAACGGTCTCAGTTTATCATGTTCACGAGCTC 286 BsaI
GAACCGTCTCAGAGGTAGTTGGCCGTGTACTTG 287 BsmBI
GAACGTCTCAGCCATGCGTCAACGCCGATG 288 BsmAI
GAACGTCTCATTGTAGTAGAGCGGGAAGTCG 289 BsmAI
GAACGGTCTCAATCGGTGTCGTGGTTTGCAACG 290 BsaI
GAACCGTCTCACTTCCACCGGCGAGGTGGTCGTG 291 BsmBI
GAACCGTCTCACCTTCCGGCCTTGCTCGAGCC 292 BsmBI
TCGAGACTGACTCTCAGCCCACCCCGCAGTAGCTC 293
GAACACTAGTAGGAGGTAACTTATGGCCAAGTACTCCGAGCTGGAAG 294 SpeI
AGG
GAACGGTCTCATTCCTCCCGCGAGCAAGGG 295 BsaI
GAACCGTCTCAAAACACCGCCCACGCCTATG 296 BsmBI
GAACGTCTCACCTCGACTTCCACCCGAACGAGC 297 BsmAI
GAACGTCTCAGGCGCTTCGACTACGTCAAGG 298 BsmAI
GAACGGTCTCAACAAGATGGACGAGGCCTTCG 299 BsaI
GAACCGTCTCACGATATAATCTGGAACAAG 300 BsmBI
GAACCGTCTCAGAAGCACTGACATCGTTTACTACG 301 BsmBI
GAACCGTCTCAAAGGTGGGTTTACGTTCCG 302 BsmBI
GAACGTCTCAGGAATCCATATCGCCGAAAT 303 BsmAI
GAACGGTCTCAGTTTATCATGTTTATGAGC 304 BsaI
GAACCGTCTCAGAGGTAGTTGGCCGTGTATTTAC 305 BsmBI
GAACGTCTCACGCCAGGCATCGATGCCGAT 306 BsmAI
GAACGTCTCATTGTAGTAGAGGGCGAAGTCAAAG 307 BsmAI
GAACGGTCTCAATCGGTATCGTGGTTGGCTACAAAC 308 BsaI
GAACCGTCTCACTTCCTCCGGCGAGGTTGTCATG 309 BsmBI
GAACCGTCTCACCTTCCGGCTTTGCTTGAGGC 310 BsmBI
TCGAGACTGACTCTCACCCAACACCGCAGTAGCTCC 311
CACACAGCAGCAACCAACCTCGAGACTGACTCTCASCC 312 BbvI
PCR所用的条件是：3分钟94℃，(30秒94℃；30秒55℃，30 秒68℃)×30个循环，随后10分钟68℃。将与来自三个亲本的同源 区相对应的PCR产物集中(1∶1∶1)，用适当的限制酶切割(参见表 8)，并且凝胶纯化。混合等量的片段库，并且将其连接(16℃；过夜)。 将所得到的450bp连接产物凝胶纯化并且连接，得到全长淀粉酶基因。 将所得到的全长产物凝胶纯化，并且用F1引物SEQ ID NO.：81，SEQ ID NO.：77，SEQ ID NO.：79和引物(SEQ ID NO.：312)的混合物进行PCR 扩增。PCR所用的条件如下：3分钟94℃，(30秒94℃；30秒50℃， 30秒68℃)×30个循环，随后10分钟68℃。纯化所得到的PCR产物 (～1.4kbp)，用SpeI和BbvI切割，凝胶纯化，连接到pMYC来自 Mycogen的载体，用SpeI/XhoI切割)中，并且转化到大肠杆菌Top10 中。分离来自～21000集落库中的质粒DNA，并且将其转化到假单孢 菌属(Pseudomonas)中。
重配α-淀粉酶的筛选
将所转化的荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens(MB214))通 过FACS挑选到96孔或384孔平板中，并且用6M尿素进行处理，所 述转化的荧光假单胞菌(MB214)含有衍生自亲本克隆SEQ ID NO.：81， SEQ ID NO.：77，SEQ ID NO.：79的pMYC。如下面所更详细描述的， 用RBB-淀粉和/或异硫氰酸荧光素淀粉(FITC-淀粉)作为底物完成最 初筛选。使用诱导的培养物并且通过液化分析，用RBB-淀粉作为底物 筛选提高活性的克隆。基于液化数据，储存新的提高活性的克隆，并 且对其进行测序。
收集所转化的重配淀粉酶文库(MB214(Pf))，并且在50μL LB+Tet 中以1细胞/孔将其挑选到96孔平板(或384孔平板)中。复制与每孔 相应的平板，用于储存。将45μL 12M尿素加入到每一孔中，将平板振 荡10分钟。将平板于室温保持至少1小时，将溶菌产物于4℃储存。
用RBB-淀粉进行分析
75μL RBB-淀粉底物(在50mM NaAc缓冲液中的1％RBB-不可溶 玉米淀粉，pH＝4.5)加入到新96孔平板(V-底)中的每一孔中。用 Biomek或Zymark将5μL酶溶菌产物转移到每一含有底物的孔中。用 铝封条密封平板，在摇床上短暂地振荡。于90℃将平板温育30分钟， 随后于室温冷却5-10分钟。将100μL 100％乙醇加入到每一孔中，密封 平板，在摇床上短暂地振荡。然后用台式离心机以4000rpm将平板离 心20分钟。用Biomek将100μL上清液转移到一个新的96孔平板(平 底)中，并且读取OD595。对照组：SEQ ID NO.：81，SEQ ID NO.：77， SEQ ID NO.：79。
用FITC-淀粉进行分析
将50μL底物(在100mM NaAc缓冲液中的0.01％FITC淀粉，pH ＝4.5)加入到一个新的384孔平板的每一孔中。将5μL酶溶菌产物转 移到含有底物的每一孔中，于室温将平板温育过夜。读取每一孔底物 的极化变换，激发485nm，发射535nm。对照组：SEQ ID NO.：81，SEQ ID NO.：77，SEQ ID NO.：79。优选地，所有分析使用96孔平板。
新活性克隆的确认
培养筛选所得的每一阳性克隆，用标准方法进行诱导。检查每一 克隆的生长(即，一段时间内的细胞密度)，每细胞水平的活性(RBB- 淀粉分析和液化分析)，蛋白质的表达(蛋白凝胶)和可溶性(通过显 微镜分析)。转移所确认的新的升高克隆，用于发酵。
尽管本发明已经参考其某些优选实施方案进行了详细描述，应该 可以理解到修饰和变化也在所描述的和所请求保护的范围和精神内。
序列表
<110>戴弗萨公司
<120>具有α淀粉酶活性的酶及其使用方法
<130>09010-108WO1
<140>PCT/US02/05068
<141>2002-02-21
<150>US 60/270,495
<151>2001-02-21
<150>US 60/270,496
<151>2001-02-21
<150>US 60/291,122
<151>2001-05-14
<160>321
<170>FastSEQ for Windows Version 4.0
<210>1
<211>1311
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>合成产生的寡核苷酸
<400>1
atggcaaagt attccgagct cgaagagggc gggctcataa tgcaggcctt ctactgggac 60
gtccccatgg gaggaatctg gtgggacacg atagcccaga agatacccga ctgggcaagc 120
gccgggattt cggcgatatg gattcccccg gcgagcaagg gcatgggcgg cgcctattcg 180
atgggctacg acccctacga cttctttgac ctcggtgagt acgaccagaa gggaacggta 240
gagacgcgct ttggctccaa gcaggagctc gtgaacatga taaacaccgc ccacgcctat 300
ggcatgaagg taatagccga tatagtcatc aaccaccgcg ccggcggtga cctggagtgg 360
aaccccttcg tgaacgacta tacctggacc gacttctcaa aggtcgcgtc gggtaaatac 420
acggccaact acctcgactt ccacccgaac gagctccatg cgggcgattc cggaacattt 480
ggaggctatc ccgacatatg ccacgacaag agctgggacc agtactggct ctgggccagc 540
caggagagct acgcggcata tctcaggagc atcggcatcg atgcctggcg cttcgactac 600
gtcaagggct acggagcgtg ggtcgtcaag gactggctgg actggtgggg aggctgggcc 660
gtcggggagt actgggacac aaacgttgat gcactgctca actgggccta ctcgagcgat 720
gcaaaagtct tcgacttccc gctctactac aagatggacg cggcctttga eaacaagaac 780
attcccgcac tcgtcgaggc cctcaagaac gggggcacag tcgtcagccg cgacccgttt 840
aaggccgtaa ccttcgttgc aaaccacgac accgatataa tctggaacaa gtatccagcc 900
tacgcgttca tcctcaccta cgagggccag ccgacaatat tctaccgcga ctacgaggag 960
tggctcaaca aggataagct caagaacctc atctggatac atgacaacct cgccggagga 1020
agcactgaca tcgtttacta cgacaacgac gagctgatat tcgtgagaaa cggctacgga 1080
agcaagccgg gactgataac atacatcaac ctcgcctcaa gcaaagccgg aaggtgggtt 1140
tacgttccga agttcgcagg ctcgtgcata cacgagtaca ccggcaatct cggcggctgg 1200
gtggacaagt gggtggactc aagcggctgg gtctacctcg aggctcctgc ccacgacccg 1260
gccaacggcc agtacggcta ctccgtctgg agctactgcg gtgttgggtg a 1311
<210>2
<211>436
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>合成产生的多肽
<400>2
Met Ala Lys Tyr Ser Glu Leu Glu Glu Gly Gly Leu Ile Met Gln Ala
1 5 10 15
Phe Tyr Trp Asp Val Pro Met Gly Gly Ile Trp Trp Asp Thr Ile Ala
20 25 30
Gln Lys Ile Pro Asp Trp Ala Ser Ala Gly Ile Ser Ala Ile Trp Ile
35 40 45
Pro Pro Ala Ser Lys Gly Met Gly Gly Ala Tyr Ser Met Gly Tyr Asp
50 55 60
Pro Tyr Asp Phe Phe Asp Leu Gly Glu Tyr Asp Gln Lys Gly Thr Val
65 70 75 80
Glu Thr Arg Phe Gly Ser Lys Gln Glu Leu Val Asn Met Ile Asn Thr
85 90 95
Ala His Ala Tyr Gly Met Lys Val Ile Ala Asp Ile Val Ile Asn His
100 105 110
Arg Ala Gly Gly Asp Leu Glu Trp Asn Pro Phe Val Asn Asp Tyr Thr
115 120 125
Trp Thr Asp Phe Ser Lys Val Ala Ser Gly Lys Tyr Thr Ala Asn Tyr
130 135 140
Leu Asp Phe His Pro Asn Glu Leu His Ala Gly Asp Ser Gly Thr Phe
145 150 155 160
Gly Gly Tyr Pro Asp Ile Cys His Asp Lys Ser Trp Asp Gln Tyr Trp
165 170 175
Leu Trp Ala Ser Gln Glu Ser Tyr Ala Ala Tyr Leu Arg Ser Ile Gly
180 185 190
Ile Asp Ala Trp Arg Phe Asp Tyr Val Lys Gly Tyr Gly Ala Trp Val
195 200 205
Val Lys Asp Trp Leu Asp Trp Trp Gly Gly Trp Ala Val Gly Glu Tyr
210 215 220
Trp Asp Thr Asn Val Asp Ala Leu Leu Asn Trp Ala Tyr Ser Ser Asp
225 230 235 240
Ala Lys Val Phe Asp Phe Pro Leu Tyr Tyr Lys Met Asp Ala Ala Phe
245 250 255
Asp Asn Lys Asn Ile Pro Ala Leu Val Glu Ala Leu Lys Asn Gly Gly
260 265 270
Thr Val Val Ser Arg Asp Pro Phe Lys Ala Val Thr Phe Val Ala Asn
275 280 285
His Asp Thr Asp Ile Ile Trp Asn Lys Tyr Pro Ala Tyr Ala Phe Ile
290 295 300
Leu Thr Tyr Glu Gly Gln Pro Thr Ile Phe Tyr Arg Asp Tyr Glu Glu
305 310 315 320
Trp Leu Asn Lys Asp Lys Leu Lys Asn Leu Ile Trp Ile His Asp Asn
325 330 335
Leu Ala Gly Gly Ser Thr Asp Ile Val Tyr Tyr Asp Asn Asp Glu Leu
340 345 350
Ile Phe Val Arg Asn Gly Tyr Gly Ser Lys Pro Gly Leu Ile Thr Tyr
355 360 365
Ile Asn Leu Ala Ser Ser Lys Ala Gly Arg Trp Val Tyr Val Pro Lys
370 375 380
Phe Ala Gly Ser Cys Ile His Glu Tyr Thr Gly Asn Leu Gly Gly Trp
385 390 395 400
Val Asp Lys Trp Val Asp Ser Ser Gly Trp Val Tyr Leu Glu Ala Pro
405 410 415
Ala His Asp Pro Ala Asn Gly Gln Tyr Gly Tyr Ser Val Trp Ser Tyr
420 425 430
Cys Gly Val Gly
435
<210>3
<211>1311
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>合成产生的寡核苷酸
<400>3
atggccaagt acctggagct cgaagagggc gggctcataa tgcaggcctt ctactgggac 60
gtccccatgg gaggaatctg gtgggacacg atagcccaga agatacccga ctgggcaagc 120
gccgggattt cggcgatatg gattcccccg gcgagcaagg gcatgggcgg cgcctattcg 180
atgggctacg acccctacga cttctttgac ctcggtgagt acgaccagaa gggaacggta 240
gagacgcgct ttggctccaa gcaggagctc gtgaacatga taaacaccgc ccacgcctac 300
ggcatcaagg tcatcgcaga catagtaatc aaccaccgcg ccggaggaga ccttgagtgg 360
aaccccttcg tcaatgacta cacctggacg gacttctcga aggtcgcttc cggcaagtac 420
acggccaatt acctcgactt ccacccgaac gagctccatg cgggcgattc cggaacattt 480
ggaggctatc ccgacatatg ccacgacaag agctgggacc agtactggct ctgggccagc 540
caggagagct acgcggcata tctcaggagc atcggcatcg atgcctggcg cttcgactac 600
gtcaagggct atgctccctg ggtcgtcaag gactggctga actggtgggg aggctgggcg 660
gttggagagt actgggacac caacgtcgac gctgttctca actgggcata ctcgagcggt 720
gccaaggtct ttgacttcgc cctctactac aagatggatg aggcctttga caacaaaaac 780
attccagcgc tcgtctctgc ccttcagaac ggccagactg ttgtctcccg cgacccgttc 840
aaggccgtaa cctttgtagc aaaccacgac accgatataa tctggaacaa gtatccagcc 900
tacgcgttca tcctcaccta cgagggccag ccgacaatat tctaccgcga ctacgaggag 960
tggctcaaca aggataagct caagaacctc atctggatac atgacaacct cgccggagga 1020
agcactgaca tcgtttacta cgacaacgac gagctgatat tcgtgagaaa cggctacgga 1080
agcaagccgg gactgataac atacatcaac ctcgcctcaa gcgaagccgg aaggtgggtc 1140
tacgttccga agttcgcggg agcgtgcatc cacgagtaca ccggcaacct cggcggctgg 1200
gtggacaagt gggtggactc aagcgggtgg gtgtacctcg aggcccctgc ccacgacccg 1260
gccaacggct attacggcta ctccgtctgg agctattgcg gtgttgggtg a 1311
<210>4
<211>436
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>合成产生的多肽
<400> 4
Met Ala Lys Tyr Leu Glu Leu Glu Glu Gly Gly Leu Ile Met Gln Ala
1 5 10 15
Phe Tyr Trp Asp Val Pro Met Gly Gly Ile Trp Trp Asp Thr Ile Ala
20 25 30
Gln Lys Ile Pro Asp Trp Ala Ser Ala Gly Ile Ser Ala Ile Trp Ile
35 40 45
Pro Pro Ala Ser Lys Gly Met Gly Gly Ala Tyr Ser Met Gly Tyr Asp
50 55 60
Pro Tyr Asp Phe Phe Asp Leu Gly Glu Tyr Asp Gln Lys Gly Thr Val
65 70 75 80
Glu Thr Arg Phe Gly Ser Lys Gln Glu Leu Val Asn Met Ile Asn Thr
85 90 95
Ala His Ala Tyr Gly Ile Lys Val Ile Ala Asp Ile Val Ile Asn His
100 105 110
Arg Ala Gly Gly Asp Leu Glu Trp Asn Pro Phe Val Asn Asp Tyr Thr
115 120 125
Trp Thr Asp Phe Ser Lys Val Ala Ser Gly Lys Tyr Thr Ala Asn Tyr
130 135 140
Leu Asp Phe His Pro Asn Glu Leu His Ala Gly Asp Ser Gly Thr Phe
145 150 155 160
Gly Gly Tyr Pro Asp Ile Cys His Asp Lys Ser Trp Asp Gln Tyr Trp
165 170 175
Leu Trp Ala Ser Gln Glu Ser Tyr Ala Ala Tyr Leu Arg Ser Ile Gly
180 185 190
Ile Asp Ala Trp Arg Phe Asp Tyr Val Lys Gly Tyr Ala Pro Trp Val
195 200 205
Val Lys Asp Trp Leu Asn Trp Trp Gly Gly Trp Ala Val Gly Glu Tyr
210 215 220
Trp Asp Thr Asn Val Asp Ala Val Leu Asn Trp Ala Tyr Ser Ser Gly
225 230 235 240
Ala Lys Val Phe Asp Phe Ala Leu Tyr Tyr Lys Met Asp Glu Ala Phe
245 250 255
Asp Asn Lys Asn Ile Pro Ala Leu Val Ser Ala Leu Gln Asn Gly Gln
260 265 270
Thr Val Val Ser Arg Asp Pro Phe Lys Ala Val Thr Phe Val Ala Asn
275 280 285
His Asp Thr Asp Ile Ile Trp Asn Lys Tyr Pro Ala Tyr Ala Phe Ile
290 295 300
Leu Thr Tyr Glu Gly Gln Pro Thr Ile Phe Tyr Arg Asp Tyr Glu Glu
305 310 315 320
Trp Leu Asn Lys Asp Lys Leu Lys Asn Leu Ile Trp Ile His Asp Asn
325 330 335
Leu Ala Gly Gly Ser Thr Asp Ile Val Tyr Tyr Asp Asn Asp Glu Leu
340 345 350
Ile Phe Val Arg Asn Gly Tyr Gly Ser Lys Pro Gly Leu Ile Thr Tyr
355 360 365
Ile Asn Leu Ala Ser Ser Glu Ala Gly Arg Trp Val Tyr Val Pro Lys
370 375 380
Phe Ala Gly Ala Cys Ile His Glu Tyr Thr Gly Asn Leu Gly Gly Trp
385 390 395 400
Val Asp Lys Trp Val Asp Ser Ser Gly Trp Val Tyr Leu Glu Ala Pro
405 410 415
Ala His Asp Pro Ala Asn Gly Tyr Tyr Gly Tyr Ser Val Trp Ser Tyr
420 425 430
Cys Gly Val Gly
435
<210>5
<211>1311
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>合成产生的寡核苷酸
<400>5
atggccaagt actccgagct ggaagagggc ggcgttataa tgcaggcctt ctactgggac 60
gtcccaggtg gaggaatctg gtgggacacc atcaggagca agataccgga gtggtacgag 120
gcgggaatat ccgccatttg gattcccccg gcaagcaagg gcatgggcgg cgcctattcg 180
atgggctacg acccctacga cttctttgac ctcggtgagt acgaccagaa gggaacggta 240
gagacgcgct ttggctccaa gcaggagctc gtgaacatga taaacaccgc ccacgcctat 300
ggcatgaagg taatagccga tatagtcatc aaccaccgcg ccggcggtga cctggagtgg 360
aaccccttcg tgaacgacta tacctggacc gacttctcaa aggtcgcgtc gggtaaatac 420
acggccaact acctcgactt ccacccgaac gagctccatg cgggcgattc cggaacattt 480
ggaggctatc ccgacatatg ccacgacaag agctgggacc agtactggct ctgggccagc 540
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gtcaagggct atgctccctg ggtcgtcaag gactggctga actggtgggg aggctgggcg 660
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<212>PRT
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<220>
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<400>36
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65 70 75 80
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aaggccgtaa cctttgtagc aaaccacgac accgatataa tctggaacaa gtatccagcc 900
tacgcgttca tcctcaccta cgagggccag ccgacaatat tctatcgcga ctacgaggag 960
tggctcaaca aggataagct caagaacctc atctggatac atgacaacct cgccggagga 1020
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260 265 270
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gcaaaagtct tcgacttccc gctctactac aagatggatg aggcctttga caacaaaaac 780
attccagcgc tcgtctctgc ccttcagaac ggccagactg ttgtctcccg cgacccgttc 840
aaggccgtaa cctttgtagc aaaccacgac accgatataa tctggaacaa gtatccagcc 900
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165 170 175
Leu Trp Ala Ser Asp Glu Ser Tyr Ala Ala Tyr Leu Arg Ser Ile Gly
180 185 190
Val Asp Ala Trp Arg Phe Asp Tyr Val Lys Gly Tyr Gly Ala Trp Val
195 200 205
Val Lys Asp Trp Leu Asp Trp Trp Gly Gly Trp Ala Val Gly Glu Tyr
210 215 220
Trp Asp Thr Asn Val Asp Ala Leu Leu Asn Trp Ala Tyr Ser Ser Asp
225 230 235 240
Ala Lys Val Phe Asp Phe Pro Leu Tyr Tyr Lys Met Asp Glu Ala Phe
245 250 255
Asp Asn Lys Asn Ile Pro Ala Leu Val Ser Ala Leu Gln Asn Gly Gln
260 265 270
Thr Val Val Ser Arg Asp Pro Phe Lys Ala Val Thr Phe Val Ala Asn
275 280 285
His Asp Thr Asp Ile Ile Trp Asn Lys Tyr Pro Ala Tyr Ala Phe Ile
290 295 300
Leu Thr Tyr Glu Gly Gln Pro Thr Ile Phe Tyr Arg Asp Tyr Glu Glu
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Trp Leu Asn Lys Asp Lys Leu Lys Asn Leu Ile Trp Ile His Asp Asn
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Leu Val Gly Gly Ser Thr Ser Ile Val Tyr Tyr Asp Ser Asp Glu Met
340 345 350
Ile Phe Val Arg Asn Gly Tyr Gly Ser Lys Pro Gly Leu Ile Thr Tyr
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Ile Asn Leu Gly Ser Ser Lys Val Gly Arg Trp Val Tyr Val Pro Lys
370 375 380
Phe Ala Gly Ser Cys Ile His Glu Tyr Thr Gly Asn Leu Gly Gly Trp
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Val Asp Lys Trp Val Asp Ser Ser Gly Trp Val Tyr Leu Glu Ala Pro
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Ala His Asp Pro Ala Asn Gly Gln Tyr Gly Tyr Ser Val Trp Ser Tyr
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Cys Gly Val Gly
435
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<212>DNA
<213>人工序列
<220>
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<400>46
Met Ala Lys Tyr Ser Asp Leu Glu Glu Gly Gly Val Ile Met Gln Ala
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Val Asp Ala Trp Arg Phe Asp Tyr Val Lys Gly Tyr Gly Ala Trp Val
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Val Lys Asp Trp Leu Asn Trp Trp Gly Gly Trp Ala Val Gly Glu Tyr
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Trp Asp Thr Asn Val Asp Ala Leu Leu Asn Trp Ala Tyr Ser Ser Gly
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275 280 285
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Trp Leu Asn Lys Asp Lys Leu Lys Asn Leu Ile Trp Ile His Asp Asn
325 330 335
Leu Ala Gly Gly Ser Thr Asp Ile Val Tyr Tyr Asp Asn Asp Glu Leu
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Ile Phe Val Arg Asn Gly Tyr Gly Asp Lys Pro Gly Leu Ile Thr Tyr
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Ile Asn Leu Gly Ser Ser Lys Ala Gly Arg Trp Val Tyr Val Pro Lys
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<223>合成产生的多肽
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<223>合成产生的多肽
<400>54
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Leu Asp Phe His Pro Asn Glu Val Lys Cys Cys Asp Glu Gly Thr Phe
145 150 155 160
Gly Gly Phe Pro Asp Ile Ala His Glu Lys Ser Trp Asp Gln His Trp
165 170 175
Leu Trp Ala Ser Asp Glu Ser Tyr Ala Ala Tyr Leu Arg Ser Ile Gly
180 185 190
Val Asp Ala Trp Arg Phe Asp Tyr Val Lys Gly Tyr Gly Ala Trp Val
195 200 205
Val Lys Asp Trp Leu Asn Trp Trp Gly Gly Trp Ala Val Gly Glu Tyr
210 215 220
Trp Asp Thr Asn Val Asp Ala Leu Leu Asn Trp Ala Tyr Ser Ser Gly
225 230 235 240
Ala Lys Val Phe Asp Phe Pro Leu Tyr Tyr Lys Met Asp Ala Ala Phe
245 250 255
Asp Asn Lys Asn Ile Pro Ala Leu Val Glu Ala Leu Lys Asn Gly Gly
260 265 270
Thr Val Val Ser Arg Asp Pro Phe Lys Ala Val Thr Phe Val Ala Asn
275 280 285
His Asp Thr Asp Ile Ile Trp Asn Lys Tyr Pro Ala Tyr Ala Phe Ile
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355 360 365
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Cys Gly Val Gly
435
<210>65
<211>1311
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>合成产生的寡核苷酸
<400>65
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<210>66
<211>436
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>合成产生的多肽
<400>66
Met Ala Lys Tyr Ser Glu Leu Glu Glu Gly Gly Val Ile Met Gln Ala
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Ser Lys Ile Pro Glu Trp Tyr Glu Ala Gly Ile Ser Ala Ile Trp Ile
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Pro Tyr Asp Tyr Phe Asp Leu Gly Glu Tyr Tyr Gln Lys Gly Thr Val
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Leu Ala Gly Gly Ser Thr Ser Ile Val Tyr Tyr Asp Ser Asp Glu Met
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Ile Phe Val Arg Asn Gly Tyr Gly Ser Lys Pro Gly Leu Ile Thr Tyr
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Ile Asn Leu Gly Ser Ser Lys Val Gly Arg Trp Val Tyr Val Pro Lys
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Phe Ala Gly Ser Cys Ile His Glu Tyr Thr Gly Asn Leu Gly Gly Trp
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Ala His Asp Pro Ala Asn Gly Gln Tyr Gly Tyr Ser Val Trp Ser Tyr
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Cys Gly Val Gly
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165 170 175
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195 200 205
Val Lys Asp Trp Leu Asp Trp Trp Gly Gly Trp Ala Val Gly Glu Tyr
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Trp Leu Asn Lys Asp Lys Leu Lys Asn Leu Ile Trp Ile His Asp Asn
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Leu Ala Gly Gly Ser Thr Ser Ile Val Tyr Tyr Asp Ser Asp Glu Met
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gctccctggg tcgttaagaa ctggctgaac cggtggggcg gctgggcggt tggagagtac 660
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1 5 10 15
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<212>DNA
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ggagaccttg agtggaaccc cttcgtcaat gactacacct ggacggactt ctcgaaggtc 480
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<400>80
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195 200 205
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<400>82
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100 105 110
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115 120 125
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145 150 155 160
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165 170 175
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180 185 190
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195 200 205
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260 265 270
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275 280 285
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305 310 315 320
Asn Lys Tyr Leu Ala Tyr Ala Phe Ile Leu Thr Tyr Glu Gly Gln Pro
325 330 335
Val Ile Phe Tyr Arg Asp Tyr Glu Glu Trp Leu Asn Lys Asp Arg Leu
340 345 350
Asn Asn Leu Ile Trp Ile His Asp His Leu Ala Gly Gly Ser Thr Ser
355 360 365
Ile Val Tyr Tyr Asp Ser Asp Glu Met Ile Phe Val Arg Asn Gly Tyr
370 375 380
Gly Ser Lys Pro Gly Leu Ile Thr Tyr Ile Asn Leu Gly Ser Ser Lys
385 390 395 400
Val Gly Arg Trp Val Tyr Val Pro Lys Phe Ala Gly Ala Cys Ile His
405 410 415
Glu Tyr Thr Gly Asn Leu Gly Gly Trp Val Asp Lys Tyr Val Tyr Ser
420 425 430
Ser Gly Trp Val Tyr Leu Glu Ala Pro Ala Tyr Asp Pro Ala Asn Gly
435 440 445
Gln Tyr Gly Tyr Ser Val Trp Ser Tyr Cys Gly Val Gly
450 455 460
<210>83
<211>1299
<212>DNA
<213>环境的
<400>83
atggctctgg aagacggcgg gctcataatg caggccttct actgggatgt tcctggagga 60
ggaatctggt gggacacaat agctcaaaag atacccgaat gggcaagtgc aggaatctca 120
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ggctcaaagg aagaactggt gaacatgata aacaccgcac actcctacgg cataaaggtg 300
atagcagaca tagtcataaa ccaccgcgcc ggtggagacc ttgagtggaa ccccttcgtg 360
aacgactata cctggacaga cttctcaaaa gtcgcctccg gtaaatatac ggccaactac 420
cttgacttcc acccaaacga gcttcactgt tgtgatgaag gtacctttgg aggataccct 480
gatatatgtc acgacaaaag ctgggaccag tactggctct gggcgagcag cgaaagctac 540
gctgcctacc tcaggagcat aggggttgac gcctggcgtt tcgactacgt caagggctac 600
ggagcatggg ttgttaacga ctggctcagc tggtggggag gctgggccgt tggagagtac 660
tgggacacga acgttgatgc actcctcaac tgggcataca gcagcggcgc caaggtcttt 720
gacttcccgc tctactacaa gatggacgaa gccttcgaca acaccaacat cccggcatta 780
gtggatgcac tcagatacgg ccagacagtg gtcagccgcg atcccttcaa ggcggtaact 840
ttcgttgcca accacgatac agatataatc tggaacaagt atccggctta tgcattcatc 900
cttacctatg agggacagcc tgttatattc taccgcgact acgaggagtg gctcaacaag 960
gataagctta acaacctcat ctggatacac gatcaccttg ctggagggag tactgacatt 1020
gtttactacg acagcgacga gcttatcttt gtgagaaacg gctatggcac caaaccagga 1080
ctgataacct atatcaacct cggctcaagc aaagttggaa ggtgggtcta cgttccaaag 1140
ttcgccggtt catgcatcca cgagtacacc ggcaacctcg gcggttggat agacaagtac 1200
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tacggctact ccgtatggag ctactgcggg gttgggtga 1299
<210>84
<211>432
<212>PRT
<213>环境的
<400>84
Met Ala Leu Glu Asp Gly Gly Leu Ile Met Gln Ala Phe Tyr Trp Asp
1 5 10 15
Val Pro Gly Gly Gly Ile Trp Trp Asp Thr Ile Ala Gln Lys Ile Pro
20 25 30
Glu Trp Ala Ser Ala Gly Ile Ser Ala Ile Trp Ile Pro Pro Ala Ser
35 40 45
Lys Gly Met Ser Gly Gly Tyr Ser Met Gly Tyr Asp Pro Tyr Asp Phe
50 55 60
Phe Asp Leu Gly Glu Tyr Tyr Gln Lys Gly Thr Val Glu Thr Arg Phe
65 70 75 80
Gly Ser Lys Glu Glu Leu Val Asn Met Ile Asn Thr Ala His Ser Tyr
85 90 95
Gly Ile Lys Val Ile Ala Asp Ile Val Ile Asn His Arg Ala Gly Gly
100 105 110
Asp Leu Glu Trp Asn Pro Phe Val Asn Asp Tyr Thr Trp Thr Asp Phe
115 120 125
Ser Lys Val Ala Ser Gly Lys Tyr Thr Ala Asn Tyr Leu Asp Phe His
130 135 140
Pro Asn Glu Leu His Cys Cys Asp Glu Gly Thr Phe Gly Gly Tyr Pro
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Asp Ile Cys His Asp Lys Ser Trp Asp Gln Tyr Trp Leu Trp Ala Ser
165 170 175
Ser Glu Ser Tyr Ala Ala Tyr Leu Arg Ser Ile Gly Val Asp Ala Trp
180 185 190
Arg Phe Asp Tyr Val Lys Gly Tyr Gly Ala Trp Val Val Asn Asp Trp
195 200 205
Leu Ser Trp Trp Gly Gly Trp Ala Val Gly Glu Tyr Trp Asp Thr Asn
210 215 220
Val Asp Ala Leu Leu Asn Trp Ala Tyr Ser Ser Gly Ala Lys Val Phe
225 230 235 240
Asp Phe Pro Leu Tyr Tyr Lys Met Asp Glu Ala Phe Asp Asn Thr Asn
245 250 255
Ile Pro Ala Leu Val Asp Ala Leu Arg Tyr Gly Gln Thr Val Val Ser
260 265 270
Arg Asp Pro Phe Lys Ala Val Thr Phe Val Ala Asn His Asp Thr Asp
275 280 285
Ile Ile Trp Asn Lys Tyr Pro Ala Tyr Ala Phe Ile Leu Thr Tyr Glu
290 295 300
Gly Gln Pro Val Ile Phe Tyr Arg Asp Tyr Glu Glu Trp Leu Asn Lys
305 310 315 320
Asp Lys Leu Asn Asn Leu Ile Trp Ile His Asp His Leu Ala Gly Gly
325 330 335
Ser Thr Asp Ile Val Tyr Tyr Asp Ser Asp Glu Leu Ile Phe Val Arg
340 345 350
Asn Gly Tyr Gly Thr Lys Pro Gly Leu Ile Thr Tyr Ile Asn Leu Gly
355 360 365
Ser Ser Lys Val Gly Arg Trp Val Tyr Val Pro Lys Phe Ala Gly Ser
370 375 380
Cys Ile His Glu Tyr Thr Gly Asn Leu Gly Gly Trp Ile Asp Lys Tyr
385 390 395 400
Val Ser Ser Ser Gly Trp Val Tyr Leu Glu Ala Pro Ala His Asp Pro
405 410 415
Ala Asn Gly Tyr Tyr Gly Tyr Ser Val Trp Ser Tyr Cys Gly Val Gly
420 425 430
<210>85
<211>1299
<212>DNA
<213>环境的
<400>85
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ggaatctggt gggacaccat agcccagaag atacccgaat gggcaagtgc aggaatctca 120
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tatggctact ccgtctggag ctattgcggg gttgggtga 1299
<210>86
<211>432
<212>PRT
<213>环境的
<400> 86
Met Ala Leu Glu Glu Gly Gly Leu Ile Met Gln Ala Phe Tyr Trp Asp
1 5 10 15
Val Pro Gly Gly Gly Ile Trp Trp Asp Thr Ile Ala Gln Lys Ile Pro
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Glu Trp Ala Ser Ala Gly Ile Ser Ala Ile Trp Ile Pro Pro Ala Ser
35 40 45
Lys Gly Met Ser Gly Gly Tyr Ser Met Gly Tyr Asp Pro Tyr Asp Phe
50 55 60
Phe Asp Leu Gly Glu Tyr Tyr Gln Lys Gly Thr Val Glu Thr Arg Phe
65 70 75 80
Gly Ser Lys Glu Glu Leu Val Asn Met Ile Asn Thr Ala His Ser Tyr
85 90 95
Gly Ile Lys Val Ile Ala Asp Ile Val Ile Asn His Arg Ala Gly Gly
100 105 110
Gly Leu Glu Trp Asn Pro Phe Val Asn Asp Tyr Thr Trp Thr Asp Phe
115 120 125
Ser Lys Val Ala Ser Gly Lys Tyr Thr Ala Asn Tyr Leu Asp Phe His
130 135 140
Pro Asn Glu Leu His Cys Cys Asp Glu Gly Thr Phe Gly Gly Tyr Pro
145 150 155 160
Asp Ile Cys His Asp Lys Ser Trp Asp Gln Tyr Trp Leu Trp Ala Ser
165 170 175
Ser Glu Ser Tyr Ala Ala Tyr Leu Arg Ser Ile Gly Val Asp Ala Trp
180 185 190
Cys Phe Asp Tyr Val Lys Gly Tyr Gly Ala Trp Val Val Asn Asp Trp
195 200 205
Leu Ser Trp Trp Gly Gly Trp Ala Val Gly Glu Tyr Trp Asp Thr Asn
210 215 220
Val Asp Ala Leu Leu Asn Trp Ala Tyr Asn Ser Gly Ala Lys Val Phe
225 230 235 240
Asp Phe Pro Leu Tyr Tyr Lys Met Asp Glu Ala Phe Asp Asn Thr Asn
245 250 255
Ile Pro Ala Leu Val Tyr Ala Leu Lys Asn Gly Gly Thr Val Val Ser
260 265 270
Arg Asp Pro Phe Lys Ala Val Thr Phe Val Ala Asn His Asp Thr Asp
275 280 285
Ile Ile Trp Asn Lys Tyr Pro Ala Tyr Ala Phe Ile Leu Thr Tyr Glu
290 295 300
Gly Gln Pro Val Ile Phe Tyr Arg Asp Tyr Glu Glu Trp Leu Asn Lys
305 310 315 320
Asp Lys Leu Asn Asn Leu Ile Trp Ile His Asp His Leu Ala Gly Gly
325 330 335
Ser Thr Asp Ile Val Tyr Tyr Asp Ser Asp Glu Leu Ile Phe Val Arg
340 345 350
Asn Gly Tyr Gly Thr Lys Pro Gly Leu Ile Thr Tyr Ile Asn Leu Gly
355 360 365
Ser Ser Lys Ala Gly Arg Trp Val Tyr Val Pro Lys Phe Ala Gly Ser
370 375 380
Cys Ile His Glu Tyr Thr Gly Ser Leu Gly Gly Trp Ile Asp Lys Tyr
385 390 395 400
Val Ser Ser Ser Gly Trp Val Tyr Leu Glu Ala Pro Ala His Asp Pro
405 410 415
Ala Asn Gly Gln Tyr Gly Tyr Ser Val Trp Ser Tyr Cys Gly Val Gly
420 425 430
<210>87
<211>1419
<212>DNA
<213>环境的
<400>87
atgttcctgc tcgcgttttt gctcactgcc tcgctgttct gcccaacagg acagcccgcc 60
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<210>88
<211>472
<212>PRT
<213>环境的
<400>88
Met Phe Leu Leu Ala Phe Leu Leu Thr Ala Ser Leu Phe Cys Pro Thr
1 5 10 15
Gly Gln Pro Ala Lys Ala Ala Ala Pro Phe Asn Gly Thr Met Met Gln
20 25 30
Tyr Phe Glu Trp Tyr Leu Pro Asp Asp Gly Thr Leu Trp Thr Lys Val
35 40 45
Ala Asn Glu Ala Asn Asn Leu Ser Ser Leu Gly Ile Thr Ala Leu Trp
50 55 60
Leu Pro Pro Ala Tyr Lys Gly Thr Ser Arg Ser Asp Val Gly Tyr Gly
65 70 75 80
Val Tyr Asp Leu Tyr Asp Leu Gly Glu Phe Asn Gln Lys Gly Thr Val
85 90 95
Arg Thr Lys Tyr Gly Thr Lys Ala Gln Tyr Leu Gln Ala Ile Gln Ala
100 105 110
Ala His Ala Ala Gly Met Gln Val Tyr Ala Asp Val Val Phe Asp His
115 120 125
Lys Gly Gly Ala Asp Gly Thr Glu Trp Val Asp Ala Val Glu Val Asn
130 135 140
Pro Ser Asp Arg Asn Gln Glu Ile Ser Gly Thr Tyr Gln Ile Gln Ala
145 150 155 160
Trp Thr Lys Phe Asp Phe Pro Gly Arg Gly Asn Thr Tyr Ser Ser Phe
165 170 175
Lys Trp Arg Trp Tyr His Phe Asp Gly Val Asp Trp Asp Glu Ser Arg
180 185 190
Lys Leu Ser Arg Ile Tyr Lys Phe Arg Gly Ile Gly Lys Ala Trp Asp
195 200 205
Trp Glu Val Asp Thr Glu Asn Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Met Tyr Ala
210 215 220
Asp Leu Asp Met Asp His Pro Glu Val Val Thr Glu Leu Lys Asn Trp
225 230 235 240
Gly Lys Trp Tyr Val Asn Thr Thr Asn Ile Asp Gly Phe Arg Leu Asp
245 250 255
Ala Val Lys His Ile Lys Phe Ser Phe Phe Pro Asp Trp Leu Ser Tyr
260 265 270
Val Arg Ser Gln Thr Gly Lys Pro Leu Phe Thr Val Gly Glu Tyr Trp
275 280 285
Ser Tyr Asp Ile Asn Lys Leu His Asn Tyr Ile Thr Lys Thr Asp Gly
290 295 300
Thr Met Ser Leu Phe Asp Ala Pro Leu His Asn Lys Phe Tyr Thr Ala
305 310 315 320
Ser Lys Ser Gly Gly Ala Phe Asp Met Arg Thr Leu Met Thr Asn Thr
325 330 335
Leu Met Lys Asp Gln Pro Thr Leu Ala Val Thr Phe Val Asp Asn His
340 345 350
Asp Thr Glu Pro Gly Gln Ala Leu Gln Ser Trp Val Asp Pro Trp Phe
355 360 365
Lys Pro Leu Ala Tyr Ala Phe Ile Leu Thr Arg Gln Glu Gly Tyr Pro
370 375 380
Cys Val Phe Tyr Gly Asp Tyr Tyr Gly Ile Pro Gln Tyr Asn Ile Pro
385 390 395 400
Ser Leu Lys Ser Lys Ile Asp Pro Leu Leu Ile Ala Arg Arg Asp Tyr
405 410 415
Ala Tyr Gly Thr Gln His Asp Tyr Leu Asp His Ser Asp Ile Ile Gly
420 425 430
Trp Thr Arg Glu Gly Val Thr Glu Lys Pro Gly Ser Gly Leu Ala Ala
435 440 445
Leu Ile Thr Asp Gly Pro Gly Gly Ser Lys Trp Met Tyr Cys Trp Gln
450 455 460
Thr Thr Arg Trp Lys Ser Val Leu
465 470
<210>89
<211>3301
<212>DNA
<213>细菌的
<400>89
atgaaagaag cggttgtgta tcaaattttc ccggatcggt tctttaatgg caacccttca 60
aatgataaca gcaagcagca ggcacgcggg gcgcagccga ttgagcatcg cgattggtcg 120
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tatgatgcga gcaattacaa agaattggat ccgatgttcg gttccccgga agaattccaa 360
tcgtttgtgc aggcgcttgc gaaccggggg atgcatctca tcttagacgg ggtgttcaac 420
cacgtatccg acgattcgat ttactttgac cgctaccacc gctatccgac cgtcggtgcg 480
tatgaatatt gggaagcggt ttacgatttg atgaatgaaa aaggattgag cgaggaagaa 540
gcgcggaaac aagtggaaga gaagttcaaa caagagggac agacgttcag cccgtatggg 600
tttcatcttt ggttcaatat tgaaaacaaa aaagtcaatg gccattatca ataccaatca 660
tggtggggct atgacagtct gccggagttt aagtcggtga cgggggaaaa agtgccgcat 720
ccgagtgaat tgaacaacga tgcgctcgcg aattacattt tccgtgaatc ggattcggtg 780
gcgaaaagct ggattgccct cggcgcctcc ggctggcggt tggatgtggc caatgaggtg 840
gatccggcgt tttggcgcga gtttcgccaa gaattgcttc aagggtcgta cggccgcggt 900
ccgacgttaa aagaggggga gcagccgctc attttagggg aaatttggga tgacgcatcg 960
aaatattttc taggcgacca gtacgattcc gtgatgaact accggttccg cggggcggtg 1020
cttgactttt tgaaaaacgg aaatgcagaa gaggcggaca agcggctgac ggccataagg 1080
gaagactacc caagtgaagc gttttatgcg ctgatgaact taatcggttc gcatgacacg 1140
gcgcgggcgg tctttctgct tgggaacgga acggattcat ccgagcgggc ggagcttgat 1200
ccgaattata atgaggaact tgggaaaaag cggctcaagc tggcggtgat tttgcagatg 1260
ggatacccgg gagcgccgac gatttattac ggcgatgaag cgggagtaac aggctcaaaa 1320
gacccagaca accgccgcac gtatccgtgg ggcaaagaag atcaaaatct gttgtcccat 1380
tatcagaaag tggggcacat tcgccagcac catcaatcgt tgttggccca tggcgacatc 1440
aagacggtgt atgcgcaagg ggatgtatac gtatttgccc gccaatacgg gcgtgaagcg 1500
gcgctcattg ccatcaaccg cggcaatgag gacaagacgg tggcgcttga cgtcgcttcg 1560
ttgcttccga acggcaccgt gcttacggat gagttgcatg atggcgggga agctacggtc 1620
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gtgacgttaa cgtgggaagg aaatgcatcg agataccgaa tttacgagtc cacgttaaaa 1800
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ttcgtgacaa cgttaagcga tgccacactg gatttgtcaa agccgcagca agtggatgtc 2040
catgtcaaca tcgacaatgt gacaagcaaa ggagcagctg atgggttgca agcggtgttg 2100
caagtgaaag gcccgcatga cgaaacatgg aaagaataca gagcggctta ccaaggacaa 2160
gacggcgacg ccaacgtgtt ccgagctgcc ttcactccgc tcgccgcagg gacgtatacg 2220
tatcgttatg cgctgacgac caaccttggc gaggagtgga tgtatacaga agagaagcaa 2280
gtgacgtttg cggcagacaa cagcgaccaa atagcgccag cagacgccat cgagctgcgg 2340
cagcctgcgg ttgaatcggg acaagtgaat ttatcatgga cgtttgttgg gaaaaaagat 2400
ggggatgctt atttgttagc catcgagcgc aacggtgata tcgtgcatac aaccacttcg 2460
atcggcgatt catttacaga ctacgatgtc gaaaacggca ccgagtacac gtatgttgtc 2520
aagttgtatg accgcgccgg caatgttgtg gcgtcaaaca cggtcaaggt gacgccggac 2580
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aagggcaatg ccattaaaaa cggtgttttg acgatcaatg gcgagcgggt gccgattgat 3060
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gagagtactt ctagagcggc cgcgggccca tcgattttcc acccgggtgg ggtaccaggt 3300
a 3301
<210>90
<211>1100
<212>PRT
<213>细菌的
<400>90
Met Lys Glu Ala Val Val Tyr Gln Ile Phe Pro Asp Arg Phe Phe Asn
1 5 10 15
Gly Asn Pro Ser Asn Asp Asn Ser Lys Gln Gln Ala Arg Gly Ala Gln
20 25 30
Pro Ile Glu His Arg Asp Trp Ser Asp Leu Pro Asp Asn Pro Arg Leu
35 40 45
Lys Gly Thr Ser Gly Tyr Asp Gly Asp Gly Glu Trp Ser Asn Asp Phe
50 55 60
Phe Gly Gly Asp Ile Ala Gly Ile Glu Gln Lys Leu Asp Tyr Leu Gln
65 70 75 80
Ser Leu Gly Val Asn Thr Ile Tyr Leu Asn Pro Ile Ala Asn Ala Pro
85 90 95
Ser Asn His Lys Tyr Asp Ala Ser Asn Tyr Lys Glu Leu Asp Pro Met
100 105 110
Phe Gly Ser Pro Glu Glu Phe Gln Ser Phe Val Gln Ala Leu Ala Asn
115 120 125
Arg Gly Met His Leu Ile Leu Asp Gly Val Phe Asn His Val Ser Asp
130 135 140
Asp Ser Ile Tyr Phe Asp Arg Tyr His Arg Tyr Pro Thr Val Gly Ala
145 150 155 160
Tyr Glu Tyr Trp Glu Ala Val Tyr Asp Leu Met Asn Glu Lys Gly Leu
165 170 175
Ser Glu Glu Glu Ala Arg Lys Gln Val Glu Glu Lys Phe Lys Gln Glu
180 185 190
Gly Gln Thr Phe Ser Pro Tyr Gly Phe His Leu Trp Phe Asn Ile Glu
195 200 205
Asn Lys Lys Val Asn Gly His Tyr Gln Tyr Gln Ser Trp Trp Gly Tyr
210 215 220
Asp Ser Leu Pro Glu Phe Lys Ser Val Thr Gly Glu Lys Val Pro His
225 230 235 240
Pro Ser Glu Leu Asn Asn Asp Ala Leu Ala Asn Tyr Ile Phe Arg Glu
245 250 255
Ser Asp Ser Val Ala Lys Ser Trp Ile Ala Leu Gly Ala Ser Gly Trp
260 265 270
Arg Leu Asp Val Ala Asn Glu Val Asp Pro Ala Phe Trp Arg Glu Phe
275 280 285
Arg Gln Glu Leu Leu Gln Gly Ser Tyr Gly Arg Gly Pro Thr Leu Lys
290 295 300
Glu Gly Glu Gln Pro Leu Ile Leu Gly Glu Ile Trp Asp Asp Ala Ser
305 310 315 320
Lys Tyr Phe Leu Gly Asp Gln Tyr Asp Ser Val Met Asn Tyr Arg Phe
325 330 335
Arg Gly Ala Val Leu Asp Phe Leu Lys Asn Gly Asn Ala Glu Glu Ala
340 345 350
Asp Lys Arg Leu Thr Ala Ile Arg Glu Asp Tyr Pro Ser Glu Ala Phe
355 360 365
Tyr Ala Leu Met Asn Leu Ile Gly Ser His Asp Thr Ala Arg Ala Val
370 375 380
Phe Leu Leu Gly Asn Gly Thr Asp Ser Ser Glu Arg Ala Glu Leu Asp
385 390 395 400
Pro Asn Tyr Asn Glu Glu Leu Gly Lys Lys Arg Leu Lys Leu Ala Val
405 410 415
Ile Leu Gln Met Gly Tyr Pro Gly Ala Pro Thr Ile Tyr Tyr Gly Asp
420 425 430
Glu Ala Gly Val Thr Gly Ser Lys Asp Pro Asp Asn Arg Arg Thr Tyr
435 440 445
Pro Trp Gly Lys Glu Asp Gln Asn Leu Leu Ser His Tyr Gln Lys Val
450 455 460
Gly His Ile Arg Gln His His Gln Ser Leu Leu Ala His Gly Asp Ile
465 470 475 480
Lys Thr Val Tyr Ala Gln Gly Asp Val Tyr Val Phe Ala Arg Gln Tyr
485 490 495
Gly Arg Glu Ala Ala Leu Ile Ala Ile Asn Arg Gly Asn Glu Asp Lys
500 505 510
Thr Val Ala Leu Asp Val Ala Ser Leu Leu Pro Asn Gly Thr Val Leu
515 520 525
Thr Asp Glu Leu His Asp Gly Gly Glu Ala Thr Val Ala Gly Gly Thr
530 535 540
Leu Thr Val Thr Ile Pro Ala Leu Asp Gly Arg Met Met Phe Gly Thr
545 550 555 560
Val Thr Ala Glu Met Pro Ala Ala Val Ser Asn Leu Gln Ala Ser Ala
565 570 575
Ser Asp Gly Cys Val Thr Leu Thr Trp Glu Gly Asn Ala Ser Arg Tyr
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Arg Ile Tyr Glu Ser Thr Leu Lys Gly Ala Gly Tyr Thr Met Val Gln
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610 615 620
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625 630 635 640
Pro Lys Val Glu Thr Asn Arg Val Val Pro His Tyr Pro Leu Thr Ser
645 650 655
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675 680 685
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Pro His Asp Glu Thr Trp Lys Glu Tyr Arg Ala Ala Tyr Gln Gly Gln
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Asp Gly Asp Ala Asn Val Phe Arg Ala Ala Phe Thr Pro Leu Ala Ala
725 730 735
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740 745 750
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Glu Ser Gly Gln Val Asn Leu Ser Trp Thr Phe Val Gly Lys Lys Asp
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Gly Asp Ala Tyr Leu Leu Ala Ile Glu Arg Asn Gly Asp Ile Val His
805 810 815
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820 825 830
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835 840 845
Val Val Ala Ser Asn Thr Val Lys Val Thr Pro Asp Ile Val Met Val
850 855 860
Lys Val Ile Phe Lys Val Arg Ala Pro Asp Tyr Thr Pro Leu Asp Ala
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Arg Ile Thr Ile Pro Asn Ser Leu Asn Gly Trp Asn Thr Gly Ala Trp
885 890 895
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Arg Ile Leu Arg Trp Ile Asp Met Pro Val Val Ile Glu Glu Val Gln
980 985 990
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Gly Gly Ala Ile Ala Lys Asn Thr Lys Asp Tyr Val Leu Asn Leu Glu
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Gly Pro Ser Ile Phe His Pro Gly Gly Val Pro Gly
1090 1095 1100
<210>91
<211>1650
<212>DNA
<213>细菌的
<400>91
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tggttgtcgt atgtgcgttc tcagactggc aagccgctat ttaccgtcgg ggaatattgg 900
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atgcgcacgt taatgaccaa tactctcatg aaagatcaac cgacattggc cgtcaccttc 1080
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accgaaccac ggttggtggc atggccttga 1650
<210>92
<211>549
<212>PRT
<213>细菌的
<400>92
Val Leu Thr Phe His Arg Ile Ile Arg Lys Gly Trp Met Phe Leu Leu
1 5 10 15
Ala Phe Leu Leu Thr Ala Ser Leu Phe Cys Pro Thr Gly Gln Pro Ala
20 25 30
Lys Ala Ala Ala Pro Phe Asn Gly Thr Met Met Gln Tyr Phe Glu Trp
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50 55 60
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Tyr Lys Gly Thr Ser Arg Ser Asp Val Gly Tyr Gly Val Tyr Asp Leu
85 90 95
Tyr Asp Leu Gly Glu Phe Asn Gln Lys Gly Thr Val Arg Thr Lys Tyr
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Gly Thr Lys Ala Gln Tyr Leu Gln Ala Ile Gln Ala Ala His Ala Ala
115 120 125
Gly Met Gln Val Tyr Ala Asp Val Val Phe Asp His Lys Gly Gly Ala
130 135 140
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Asn Gln Glu Ile Ser Gly Thr Tyr Gln Ile Gln Ala Trp Thr Lys Phe
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Asp Phe Pro Gly Arg Gly Asn Thr Tyr Ser Ser Phe Lys Trp Arg Trp
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Thr Glu Asn Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Met Tyr Ala Asp Leu Asp Met
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Asp His Pro Glu Val Val Thr Glu Leu Lys Asn Trp Gly Lys Trp Tyr
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Val Asn Thr Thr Asn Ile Asp Gly Phe Arg Leu Asp Ala Val Lys His
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275 280 285
Thr Gly Lys Pro Leu Phe Thr Val Gly Glu Tyr Trp Ser Tyr Asp Ile
290 295 300
Asn Lys Leu His Asn Tyr Ile Thr Lys Thr Asn Gly Thr Met Ser Leu
305 310 315 320
Phe Asp Ala Pro Leu His Asn Lys Phe Tyr Thr Ala Ser Lys Ser Gly
325 330 335
Gly Ala Phe Asp Met Arg Thr Leu Met Thr Asn Thr Leu Met Lys Asp
340 345 350
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355 360 365
Gly Gln Ala Leu Gln Ser Trp Val Asp Pro Trp Phe Lys Pro Leu Ala
370 375 380
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385 390 395 400
Gly Asp Tyr Tyr Gly Ile Pro Gln Tyr Asn Ile Pro Ser Leu Lys Ser
405 410 415
Lys Ile Asp Pro Leu Leu Ile Ala Arg Arg Asp Tyr Ala Tyr Gly Thr
420 425 430
Gln His Asp Tyr Leu Asp His Ser Asp Ile Ile Gly Trp Thr Arg Glu
435 440 445
Gly Val Thr Glu Lys Pro Gly Ser Gly Leu Ala Ala Leu Ile Thr Asp
450 455 460
Gly Pro Gly Gly Ser Lys Trp Met Tyr Val Gly Lys Gln His Ala Gly
465 470 475 480
Lys Val Phe Tyr Asp Leu Thr Gly Asn Arg Ser Asp Thr Val Thr Ile
485 490 495
Asn Ser Asp Gly Trp Gly Glu Phe Lys Val Asn Gly Gly Ser Val Ser
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Val Trp Val Pro Arg Lys Thr Thr Val Ser Thr Ile Ala Trp Pro Ile
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530 535 540
Leu Val Ala Trp Pro
545
<210>93
<211>1545
<212>DNA
<213>细菌的
<400>93
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<210>94
<211>515
<212>PRT
<213>细菌的
<400>94
Met Lys Ser Phe Ala Phe Met Pro Ile Leu Phe Tyr Ala Asn Asp Phe
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Ile Ser Glu Arg Glu Gly Gly Gly Lys Met Gly Lys Asn Met Arg Arg
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Arg Phe Thr Tyr Phe Ser Ile Phe Leu Leu Phe Val Gln Leu Phe Ser
35 40 45
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Thr Ser Glu Trp Asp Pro Lys Ala Thr Ala Thr Val Met Lys Lys Glu
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210 215 220
Gly Gly Arg Asp Gly Gly Asn Ile Lys Leu Leu Leu Asn Glu Gln Thr
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Thr Val Thr Phe Tyr Tyr Asn Asp Arg Thr His Ala Ile Ala Asp Ser
245 250 255
Thr Trp Tyr Ala Pro Ile Leu Lys Glu Lys Gln Pro Arg Leu Val Gly
260 265 270
Thr Ile Leu Pro Ala Ile Gly Tyr Glu Thr Asp Val Asn Gly Trp Thr
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Pro Gln Thr Ser Thr Ala Leu Leu Ser Asp Asp Asp Phe Asp Ser Ile
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Tyr Thr Phe Lys Ala Arg Val Pro Lys Gly Thr Tyr Glu Tyr Lys Val
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Val Leu Gly Asn Asp Trp Thr Tyr Glu Asn Tyr Pro Gln Asp Asn Ala
325 330 335
Lys Leu Asn Val Leu Glu Glu Thr Thr Ile Thr Phe Phe Phe Asn Ala
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Lys Thr Lys Val Val Tyr Thr Asp Tyr Asn Pro Ser Gly Ser Asp Gly
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Ile Val Gln Lys Asp Arg Leu Lys His Asn Thr Trp Asp Ser Leu Tyr
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Arg Gln Pro Phe Gly Ala Val Lys Ala Gly Thr Glu Val Thr Leu Arg
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Leu Ser Ala Lys Lys Gly Asp Leu Thr Lys Ala Asp Val Tyr Val Lys
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Asn Thr Thr Thr Gly Thr Ala Lys Leu Tyr Ser Met Lys Lys Ala Gly
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Val Leu Gly Glu Glu Glu Tyr Trp Glu Ala Thr Phe Thr Pro Asp Val
435 440 445
Lys Gly Val Tyr Gly Tyr Lys Phe Ile Ala Val Asp Ala Gly Thr Lys
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515
<210>95
<211>1524
<212>DNA
<213>细菌的
<400>95
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ggagatgtaa tatctgccac aaaacaatat ttgctagtta atgctttact actctcatta 960
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<211>507
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<213>细菌的
<400>96
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Phe Asn Phe Ser Phe Met Tyr Asn Leu Arg Gly Asn Phe Glu Gly Arg
245 250 255
Asp Asn Leu Ile Ser Asp Ser Ile Ser Trp Val Asp Ser Ser Leu Tyr
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Asn Leu Asn Val Phe His Phe Pro Phe Ile Asp Ser His Asp Leu Asp
275 280 285
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340 345 350
Gln Trp Tyr Lys Asp Gln Lys Gly Asn Gly Gln Thr Tyr Trp Thr Lys
355 360 365
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370 375 380
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420 425 430
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<211>2931
<212>DNA
<213>细菌的
<400>97
atgaggaaga agatgtcgca ttcaagattt acttttcttt tgatcttagc actttttatt 60
ttcttctccg gttgtatttc agaagttaaa agcgaaagcc agctactaaa ttcaaagcaa 120
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gatgtaaatg atcagattgt atttactaag gaaacaacga acaaaacaaa tatttatttt 300
gaaattgaac ttcttcctgg aacttataca tttgaggtaa aaggatatga ggaagattta 360
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gtcgaaactt tttttgttaa tggaatagtt aggacaataa ttgaagttga cgatattatt 480
tataaaaatt atgatattac atcggcaacg ttgatcttca aaaaagatac agcacaagaa 540
gattatgaag aggtacctgt aacacttaca ggtacttcca ctttaattaa taaagaatta 600
tatcctggta tgtggactgt aaaatttgaa gttgatctta aatcaaagga tgcaagtatg 660
ttaccagaaa aagttcatct tgaaaatgaa tttagcatag aagtgcttcc agcaaagaca 720
aaaagtttaa catttaatgt agtctttgat acagaggtta atgaaccgaa attagtagtt 780
gtatttccgc aaattgagtt gccttttgtg gatcctgtaa caaatttaag tggagagata 840
aatgaattag aagggaatct ttcaatgaat tgggactatt cagatccaaa tgcagaattt 900
tatgtgtata aagaattaga ggaacaagga gaatatttgt atgaatttgt tggaaaaaca 960
cgcgagaaaa gttatacaat agaaaatttt accaagcaag aattcgataa atttagtgga 1020
atcgctatta atgtttatgc caacggtaaa gagagtggat tagttgttct aaaaaaagaa 1080
aatattaaac ttatagattt agaaagtgtt gacagtataa gtgctactta taacgttgat 1140
acgaatgagc ttaagttgga ttggaattat accaattcaa gtgttacttt tgaagttttg 1200
aaaaaaggta taaatagcaa tgaatacgaa ataatttctc aactaacaca aaattctttt 1260
tcaacagaat tcacaggcag gcaattttgg gatcttgaga aaattgcgat tagagtagtt 1320
gctaatggat ttgaaagtaa gattaatgag atttcaagag atgatataac tataacatca 1380
ttgaatcttc ctcttacatc gtctactatg tatacactat tcatccgttc atattttgat 1440
actgatggtg atggtgtagg agactttagt ggagttgctg aaaaggtaga ttatctaaaa 1500
tctcttggag tagatacagt ctggttttta ccatttaata aaagtaaatc ttatcatgga 1560
tatgatgttg aagattacta tgatgtagaa ccagattatg gaacactaca agatcttgat 1620
aatatgataa aagttctaaa tgaaaatgga ataaaggtag taatggatct tgttgttaat 1680
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tattggaact attacattat gagcttggat gagcctcaaa ataagaatca ttggcattat 1800
aaggttaatt caaaaggaca aactgtgtgg tattttggat tgtttgattc atcaatgccg 1860
gaccttaatt acgacaaccc taaagtaatg gatgaagtga aa aaataat agatttttgg 1920
gcagatatgg gagtagatgg atttagatta gatgcagcaa aacattatta tggatttgac 1980
tggagcgatg gaattgaaca gtcagcaagc gttgcaaaag agatagaaga ctatataaaa 2040
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cttttaaaat ttgctccaat gcctgtgttt aattttagtt ttatgtacaa tttgagagga 2160
aattttgaag ggagagataa cttaatttca gactctatta gttgggttga ttcctcgttg 2220
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ctagttaatg ctttactact ctcattaaca ggcatgccaa ctatttacta tggtgatgaa 2400
ataggactta ggggatggaa gtggcattca gaaccatggg atatacctgt gcgtgagcca 2460
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aatacaagtt ggacgataaa tccaaggcaa atttatatat ttgtaaagta a 2931
<210>98
<211>976
<212>PRT
<213>细菌的
<400>98
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1 5 10 15
Ala Leu Phe Ile Phe Phe Ser Gly Cys Ile Ser Glu Val Lys Ser Glu
20 25 30
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Asn Thr Pro Phe Ile Glu Asn Ala Thr Thr Asn Thr Trp Ser Val Ser
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Asn Gln Ile Ile Asp Glu Lys Asn Asn Ile Val Asn Val Glu Thr Phe
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<212>DNA
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<400>99
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<211>511
<212>PRT
<213>细菌的
<400>100
Met Tyr Thr Leu Phe Ile Arg Ser Phe Tyr Asp Thr Asn Asn Asp Gly
1 5 10 15
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115 120 125
Trp His Trp Lys Ile Asn Ser Lys Gly Gln Lys Val Tyr Tyr Phe Gly
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Tyr Asp Gly Asn Pro Ser Val Leu Ser Gln Phe Ala Pro Met Pro Ala
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Phe Asn Phe Thr Phe Met Tyr Gly Ile Thr Gly Asn His Glu Gly Lys
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Asp Asn Leu Leu Gly Glu Thr Ile Ser Trp Val Asn Gly Ala Ser Tyr
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Asn Gly Met Pro Val Ile Tyr Tyr Gly Asn Glu Ile Gly Leu Arg Gly
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Leu Phe Glu Phe Gly Asn Lys Asn Glu Ser Pro Leu Ser Gln Asp Thr
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Asn Trp Thr Val Asn Pro Arg Gln Val Tyr Val Phe Val Lys Asp
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<212>DNA
<213>环境的
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<211>711
<212>PRT
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Ala Ala Lys His Ile Pro Ala Gly Asp Ile Ala Ala Ile Lys Gly Lys
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<212>DNA
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<400>103
gtgctaacgt ttcaccgcat cattcgaaaa ggatggatgt tcctgctcgc gtttttgctc 60
actgcctcgc tgttctgccc aacaggacag cccgccaagg ctgccgcacc gtttaacggc 120
accatgatgc agtattttga atggtacttg ccggatgatg gcacgttatg gaccaaagtg 180
gccaatgaag ccaacaactt atccagcctt ggcatcaccg ctctttggct gccgcccgct 240
tacaaaggaa caagccgcag cgacgtaggg tacggagtat acgacttgta tgacctcggc 300
gaattcaatc aaaaagggac cgtccgcaca aaatacggaa caaaagctca atatcttcaa 360
gccattcaag ccgcccacgc cgctggaatg caagtgtacg ccgatgtcgt gttcgaccat 420
aaaggcggcg ccgacggcac ggaatgggtg gacgccgtcg aagtcaatcc gtccgaccgc 480
aaccaagaaa tctcgggcac ctatcaaatc caagcatgga cgaaatttga ttttcccggg 540
cggggcaaca cctactccag ctttaagtgg cgctggtacc attttgacgg cgttgattgg 600
gacgaaagcc gaaaattgag ccgcatttac aaattccgcg gcatcggcaa agcgtgggat 660
tgggaagtag acacggaaaa cggaaactat gactacttaa tgtatgccga ccttgatatg 720
gatcatcccg aagtcgtgac cgagctgaaa aactgggggg aatggtatgt caacacaacg 780
aacattgatg ggttccggct tgatgccgtc aagcatatta agttcagttt ttttcctgat 840
tggttgtcgt atgtgcgttc tcagactggc aagccgctat ttaccgtcgg ggaatattgg 900
agctatgaca tcaacaagtt gcacaattac attacgaaaa caaacggaac gatgtctttg 960
tttgatgccc cgttacacaa caaattttat accgcttcca aatcaggggg cgcatttgat 1020
atgcgcacgt taatgaccaa tactctcatg aaagatcaac cgacattggc cgtcaccttc 1080
gttgataatc atgacaccga acccggccaa gcgctgcagt catgggtcga cccatggttc 1140
aaaccgttgg cttacgcctt tattctaact cggcaggaag gatacccgtg cgtcttttat 1200
ggtgactatt atggcattcc acaatataac attccttcgc tgaaaagcaa aatcgatccg 1260
ctcctcatcg cgcgcaggga ttatgcttac ggaacgcaac atgattatct tgatcactcc 1320
gacatcatcg ggtggacaag ggaaggggtc actgaaaaac caggatccgg gctggccgca 1380
ctgatcaccg atgggccggg aggaagcaaa tggatgtacg ttggcaaaca acacgctgga 1440
aaagtgttct atgaccttac cggcaaccgg agtgacaccg tcaccatcaa cagtgatgga 1500
tggggggaat tcaaagtcaa tggcggttcg gtttcggttt gggttcctag aaaaacgacc 1560
gtttctacca tcgctcggcc gatcacaacc cgaccgtgga ctggtgaatt cgtccgttgg 1620
accgaaccac ggttggtggc atggccttga 1650
<210>104
<211>549
<212>PRT
<213>环境的
<400>104
Val Leu Thr Phe His Arg Ile Ile Arg Lys Gly Trp Met Phe Leu Leu
1 5 10 15
Ala Phe Leu Leu Thr Ala Ser Leu Phe Cys Pro Thr Gly Gln Pro Ala
20 25 30
Lys Ala Ala Ala Pro Phe Asn Gly Thr Met Met Gln Tyr Phe Glu Trp
35 40 45
Tyr Leu Pro Asp Asp Gly Thr Leu Trp Thr Lys Val Ala Asn Glu Ala
50 55 60
Asn Asn Leu Ser Ser Leu Gly Ile Thr Ala Leu Trp Leu Pro Pro Ala
65 70 75 80
Tyr Lys Gly Thr Ser Arg Ser Asp Val Gly Tyr Gly Val Tyr Asp Leu
85 90 95
Tyr Asp Leu Gly Glu Phe Asn Gln Lys Gly Thr Val Arg Thr Lys Tyr
100 105 110
Gly Thr Lys Ala Gln Tyr Leu Gln Ala Ile Gln Ala Ala His Ala Ala
115 120 125
Gly Met Gln Val Tyr Ala Asp Val Val Phe Asp His Lys Gly Gly Ala
130 135 140
Asp Gly Thr Glu Trp Val Asp Ala Val Glu Val Asn Pro Ser Asp Arg
145 150 155 160
Asn Gln Glu Ile Ser Gly Thr Tyr Gln Ile Gln Ala Trp Thr Lys Phe
165 170 175
Asp Phe Pro Gly Arg Gly Asn Thr Tyr Ser Ser Phe Lys Trp Arg Trp
180 185 190
Tyr His Phe Asp Gly Val Asp Trp Asp Glu Ser Arg Lys Leu Ser Arg
195 200 205
Ile Tyr Lys Phe Arg Gly Ile Gly Lys Ala Trp Asp Trp Glu Val Asp
210 215 220
Thr Glu Asn Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Met Tyr Ala Asp Leu Asp Met
225 230 235 240
Asp His Pro Glu Val Val Thr Glu Leu Lys Asn Trp Gly Glu Trp Tyr
245 250 255
Val Asn Thr Thr Asn Ile Asp Gly Phe Arg Leu Asp Ala Val Lys His
260 265 270
Ile Lys Phe Ser Phe Phe Pro Asp Trp Leu Ser Tyr Val Arg Ser Gln
275 280 285
Thr Gly Lys Pro Leu Phe Thr Val Gly Glu Tyr Trp Ser Tyr Asp Ile
290 295 300
Asn Lys Leu His Asn Tyr Ile Thr Lys Thr Asn Gly Thr Met Ser Leu
305 310 315 320
Phe Asp Ala Pro Leu His Asn Lys Phe Tyr Thr Ala Ser Lys Ser Gly
325 330 335
Gly Ala Phe Asp Met Arg Thr Leu Met Thr Asn Thr Leu Met Lys Asp
340 345 350
Gln Pro Thr Leu Ala Val Thr Phe Val Asp Asn His Asp Thr Glu Pro
355 360 365
Gly Gln Ala Leu Gln Ser Trp Val Asp Pro Trp Phe Lys Pro Leu Ala
370 375 380
Tyr Ala Phe Ile Leu Thr Arg Gln Glu Gly Tyr Pro Cys Val Phe Tyr
385 390 395 400
Gly Asp Tyr Tyr Gly Ile Pro Gln Tyr Asn Ile Pro Ser Leu Lys Ser
405 410 415
Lys Ile Asp Pro Leu Leu Ile Ala Arg Arg Asp Tyr Ala Tyr Gly Thr
420 425 430
Gln His Asp Tyr Leu Asp His Ser Asp Ile Ile Gly Trp Thr Arg Glu
435 440 445
Gly Val Thr Glu Lys Pro Gly Ser Gly Leu Ala Ala Leu Ile Thr Asp
450 455 460
Gly Pro Gly Gly Ser Lys Trp Met Tyr Val Gly Lys Gln His Ala Gly
465 470 475 480
Lys Val Phe Tyr Asp Leu Thr Gly Asn Arg Ser Asp Thr Val Thr Ile
485 490 495
Asn Ser Asp Gly Trp Gly Glu Phe Lys Val Asn Gly Gly Ser Val Ser
500 505 510
Val Trp Val Pro Arg Lys Thr Thr Val Ser Thr Ile Ala Arg Pro Ile
515 520 525
Thr Thr Arg Pro Trp Thr Gly Glu Phe Val Arg Trp Thr Glu Pro Arg
530 535 540
Leu Val Ala Trp Pro
545
<210>105
<211>1650
<212>DNA
<213>环境的
<400>105
atgtccctat tcaaaaaaat ctttccgtgg attgtatctc tacttctttt gttttcgttt 60
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gcaaataacg cccaatcttt agcgaatctt ggcattactg ccctttggct tccccctgcc 240
tataaaggaa caagcagcag tgacgttgga tatggcgttt atgatttata tgacctagga 300
gagtttaatc aaaaaggaac tgtccgaaca aaatacggaa caaaaacaca atatatccaa 360
gcaatccaag cggcgcatac agcaggaatg caagtatatg cagatgtcgt ctttaaccat 420
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aatcaagaaa tatcaggaac atatcaaatc caagcgtgga caaaatttga ttttcctggt 540
cgtggaaaca cctattctag ttttaaatgg cgttggtatc atttcgatgg aacggactgg 600
gatgagagta gaaaactaaa tcgtatttac aaattccgcg gcacgggaaa agcatgggat 660
tgggaagtag atacagaaaa tgggaattat gactatctca tgtatgcaga tttggatatg 720
gatcatccag aggttgtatc tgaactaaaa aattggggaa agtggtatgt aaccacaacc 780
aatatcgacg gattccgtct ggatgcagtg aagcatatta aatatagctt tttcccagac 840
tggctatcgt atgtacgaac ccaaacacaa aagcctcttt ttgccgttgg cgaattttgg 900
agctatgaca ttaacaagct acacaactat attacaaaga cgaacggctc tatgtcccta 960
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<210>106
<211>550
<212>PRT
<213>环境的
<400>106
Met Ser Leu Phe Lys Lys Ile Phe Pro Trp Ile Val Ser Leu Leu Leu
1 5 10 15
Leu Phe Ser Phe Ile Ala Pro Phe Ser Ile Gln Thr Glu Lys Val Arg
20 25 30
Ala Gly Ser Val Pro Val Asn Gly Thr Met Met Gln Tyr Phe Glu Trp
35 40 45
Tyr Leu Pro Asp Asp Gly Thr Leu Trp Thr Lys Val Ala Asn Asn Ala
50 55 60
Gln Ser Leu Ala Asn Leu Gly Ile Thr Ala Leu Trp Leu Pro Pro Ala
65 70 75 80
Tyr Lys Gly Thr Ser Ser Ser Asp Val Gly Tyr Gly Val Tyr Asp Leu
85 90 95
Tyr Asp Leu Gly Glu Phe Asn Gln Lys Gly Thr Val Arg Thr Lys Tyr
100 105 110
Gly Thr Lys Thr Gln Tyr Ile Gln Ala Ile Gln Ala Ala His Thr Ala
115 120 125
Gly Met Gln Val Tyr Ala Asp Val Val Phe Asn His Lys Ala Gly Ala
130 135 140
Asp Gly Thr Glu Leu Val Asp Ala Val Glu Val Asn Pro Ser Asp Arg
145 150 155 160
Asn Gln Glu Ile Ser Gly Thr Tyr Gln Ile Gln Ala Trp Thr Lys Phe
165 170 175
Asp Phe Pro Gly Arg Gly Asn Thr Tyr Ser Ser Phe Lys Trp Arg Trp
180 185 190
Tyr His Phe Asp Gly Thr Asp Trp Asp Glu Ser Arg Lys Leu Asn Arg
195 200 205
Ile Tyr Lys Phe Arg Gly Thr Gly Lys Ala Trp Asp Trp Glu Val Asp
210 215 220
Thr Glu Asn Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Met Tyr Ala Asp Leu Asp Met
225 230 235 240
Asp His Pro Glu Val Val Ser Glu Leu Lys Asn Trp Gly Lys Trp Tyr
245 250 255
Val Thr Thr Thr Asn Ile Asp Gly Phe Arg Leu Asp Ala Val Lys His
260 265 270
Ile Lys Tyr Ser Phe Phe Pro Asp Trp Leu Ser Tyr Val Arg Thr Gln
275 280 285
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Asn Lys Leu His Asn Tyr Ile Thr Lys Thr Asn Gly Ser Met Ser Leu
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Phe Asp Ala Pro Leu His Asn Asn Phe Tyr Ile Ala Ser Lys Ser Gly
325 330 335
Gly Tyr Phe Asp Met Arg Thr Leu Leu Asn Asn Thr Leu Met Lys Asp
340 345 350
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355 360 365
Gly Gln Ser Leu Gln Ser Trp Val Glu Pro Trp Phe Lys Pro Leu Ala
370 375 380
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Gly Asp Tyr Tyr Gly Ile Pro Lys Tyr Asn Ile Pro Ala Leu Lys Ser
405 410 415
Lys Leu Asp Pro Leu Leu Ile Ala Arg Arg Asp Tyr Ala Tyr Gly Thr
420 425 430
Gln His Asp Tyr Ile Asp Asn Ala Asp Ile Ile Gly Trp Thr Arg Glu
435 440 445
Gly Val Ala Glu Lys Ala Asn Ser Gly Leu Ala Ala Leu Ile Thr Asp
450 455 460
Gly Pro Gly Gly Ser Lys Trp Met Tyr Val Gly Lys Gln His Ala Gly
465 470 475 480
Lys Thr Phe Tyr Asp Leu Thr Gly Asn Arg Ser Asp Thr Val Thr Ile
485 490 495
Asn Ala Asp Gly Trp Gly Glu Phe Lys Val Asn Gly Gly Ser Val Ser
500 505 510
Ile Trp Val Pro Lys Thr Ser Thr Thr Ser Gln Ile Thr Phe Thr Val
515 520 525
Asn Asn Ala Thr Thr Val Trp Gly Gln Asn Val Tyr Val Val Gly Asn
530 535 540
Ile Ser Gln Leu Gly Asn
545 550
<210>107
<211>1509
<212>DNA
<213>环境的
<400>107
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cccgcgtag 1509
<210>108
<211>502
<212>PRT
<213>环境的
<400>108
Met Asp Ser Leu Asp Ala Pro Glu Gln Lys Pro Trp Val Lys Asp Gly
1 5 10 15
Arg Leu Ser Ala Tyr Leu Asp Thr Gly Thr Gly Thr Val Val Ala Pro
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Glu Ala Pro Ala Pro Pro Pro Pro Pro Ala Glu Glu Val Arg Pro Val
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Asp Lys Trp Lys Asn Asp Ile Ile Tyr Phe Val Leu Thr Asp Arg Phe
50 55 60
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65 70 75 80
Lys Lys Tyr His Gly Gly Asp Ile Gln Gly Leu Ile Asp Lys Leu Asp
85 90 95
Tyr Ile Lys Glu Thr Gly Ser Thr Ala Ile Trp Leu Thr Pro Pro Met
100 105 110
Lys Gly Gln Thr His Phe Phe Glu Thr Asp Asn Tyr His Gly Tyr Trp
115 120 125
Pro Ile Asp Phe Tyr Asp Thr Asp Pro His Val Gly Thr Met Gln Lys
130 135 140
Phe Glu Glu Leu Ile Glu Lys Ala His Glu Lys Gly Leu Lys Ile Val
145 150 155 160
Leu Asp Ile Pro Leu Asn His Thr Ala Trp Glu His Pro Phe Tyr Lys
165 170 175
Asp Asp Ser Lys Lys Asp Trp Phe His His Ile Gly Asp Val Lys Asp
180 185 190
Trp Glu Asp Pro Tyr Trp Ala Glu Asn Gly Ser Ile Phe Gly Leu Pro
195 200 205
Asp Leu Ala Gln Glu Asn Pro Ala Val Glu Lys Tyr Leu Ile Asp Val
210 215 220
Ala Lys Phe Trp Val Asp Lys Gly Ile Asp Gly Phe Arg Leu Asp Ala
225 230 235 240
Val Lys Asn Val Pro Leu Asn Phe Trp Ala Lys Phe Asp Arg Ala Ile
245 250 255
His Asp Tyr Ala Gly Lys Asp Phe Leu Leu Val Gly Glu Tyr Phe Asp
260 265 270
Gly Asn Pro Ala Lys Val Ala Asn Tyr Gln Arg Glu Asp Met Ser Ser
275 280 285
Leu Phe Asp Tyr Pro Leu Tyr Trp Thr Leu Lys Asp Thr Phe Ala Lys
290 295 300
Asp Gly Ser Met Arg Asn Leu Ala Ala Lys Leu Asp Glu Cys Asp Arg
305 310 315 320
Asn Tyr Pro Asp Pro Gly Leu Met Ser Val Phe Leu Asp Asn His Asp
325 330 335
Thr Pro Arg Phe Leu Thr Glu Ala Asn Gly Asn Lys Asp Lys Leu Lys
340 345 350
Leu Ala Leu Ala Phe Ala Met Thr Ile Asn Arg Met Pro Thr Ile Tyr
355 360 365
Tyr Gly Thr Glu Val Ala Met Glu Gly Asn Cys Asp Ile Met Gly Ala
370 375 380
Val Asp Asn Arg Arg Asp Met Gln Trp Asp Lys Asp Pro Asp Met Phe
385 390 395 400
Lys Tyr Phe Lys Thr Leu Thr Thr Ala Arg Asn Glu His Glu Ser Leu
405 410 415
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420 425 430
Tyr Gly Arg Gln Thr Pro Lys Asp Glu Ser Ile Val Val Leu Asn Asn
435 440 445
Gly Tyr Asp Thr Gln Glu Arg Asp Ile Pro Leu Arg Pro Glu Ser Gly
450 455 460
Ile Lys Asn Gly Thr Val Leu Lys Asp Val Ile Thr Gly Glu Thr Val
465 470 475 480
Thr Val Gln Asn Gly Lys Ile His Ala Lys Cys Gly Gly Lys Gln Ala
485 490 495
Arg Ile Tyr Val Pro Ala
500
<210>109
<211>1374
<212>DNA
<213>环境的
<400>109
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aacatcccgg cattagtgga tgcactcaga tacggccaga cagtggtcag ccgcgatccc 900
ttcaaggcgg taactttcgt tgccaaccac gatacagata taatctggaa caagtatccg 960
gcttatgcat tcatccttac ctatgaggga cagcctgtta tattctaccg cgactacgag 1020
gagtggctca acaaggataa gcttaacaac ctcatctgga tacacgatca ccttgctgga 1080
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ccggcgaacg gctactacgg ctactctgtc tggagctact gcggtgtggg ttga 1374
<210>110
<211>457
<212>PRT
<213>环境的
<400>110
Met Ala Arg Lys Thr Leu Ala Ile Phe Phe Val Leu Leu Val Leu Leu
1 5 10 15
Ser Leu Ser Ala Val Pro Ala Lys Ala Glu Thr Leu Glu Asn Gly Gly
20 25 30
Val Ile Met Gln Ala Phe Tyr Trp Asp Val Pro Gly Gly Gly Ile Trp
35 40 45
Trp Asp Thr Ile Ala Gln Lys Ile Pro Glu Trp Ala Ser Ala Gly Ile
50 55 60
Ser Ala Ile Trp Ile Pro Pro Ala Ser Lys Gly Met Ser Gly Gly Tyr
65 70 75 80
Ser Met Gly Tyr Asp Pro Tyr Asp Phe Phe Asp Leu Gly Glu Tyr Tyr
85 90 95
Gln Lys Gly Thr Val Glu Thr Arg Phe Gly Ser Lys Glu Glu Leu Val
100 105 110
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115 120 125
Ile Val Ile Asn His Arg Ala Gly Gly Asp Leu Glu Trp Asn Pro Phe
130 135 140
Val Asn Asp Tyr Thr Trp Thr Asp Phe Ser Lys Val Ala Ser Gly Lys
145 150 155 160
Tyr Thr Ala Asn Tyr Leu Asp Phe His Pro Asn Glu Leu His Cys Cys
165 170 175
Asp Glu Gly Thr Phe Gly Gly Tyr Pro Asp Ile Cys His Asp Lys Ser
180 185 190
Trp Asp Gln Tyr Trp Leu Trp Ala Ser Ser Glu Ser Tyr Ala Ala Tyr
195 200 205
Leu Arg Ser Ile Gly Val Asp Ala Trp Arg Phe Asp Tyr Val Lys Gly
210 215 220
Tyr Gly Ala Trp Val Val Asn Asp Trp Leu Ser Trp Trp Gly Gly Trp
225 230 235 240
Ala Val Gly Glu Tyr Trp Asp Thr Asn Val Asp Ala Leu Leu Asn Trp
245 250 255
Ala Tyr Ser Ser Gly Ala Lys Val Phe Asp Phe Pro Leu Tyr Tyr Lys
260 265 270
Met Asp Glu Ala Phe Asp Asn Thr Asn Ile Pro Ala Leu Val Asp Ala
275 280 285
Leu Arg Tyr Gly Gln Thr Val Val Ser Arg Asp Pro Phe Lys Ala Val
290 295 300
Thr Phe Val Ala Asn His Asp Thr Asp Ile Ile Trp Asn Lys Tyr Pro
305 310 315 320
Ala Tyr Ala Phe Ile Leu Thr Tyr Glu Gly Gln Pro Val Ile Phe Tyr
325 330 335
Arg Asp Tyr Glu Glu Trp Leu Asn Lys Asp Lys Leu Asn Asn Leu Ile
340 345 350
Trp Ile His Asp His Leu Ala Gly Gly Ser Thr Asp Ile Val Tyr Tyr
355 360 365
Asp Ser Asp Glu Leu Ile Phe Val Arg Asn Gly Tyr Gly Thr Lys Pro
370 375 380
Gly Leu Ile Thr Tyr Ile Asn Leu Gly Ser Ser Lys Val Gly Arg Trp
385 390 395 400
Val Tyr Val Pro Lys Phe Ala Gly Ser Cys Ile His Glu Tyr Thr Gly
405 410 415
Asn Leu Gly Gly Trp Ile Asp Lys Tyr Val Ser Ser Ser Gly Trp Val
420 425 430
Tyr Leu Glu Ala Pro Ala His Asp Pro Ala Asn Gly Tyr Tyr Gly Tyr
435 440 445
Ser Val Trp Ser Tyr Cys Gly Val Gly
450 455
<210>111
<211>1416
<212>DNA
<213>环境的
<400>111
atgcccgcgt tcaaatctaa ggtgatgcac atgaagttga agtaccttgc tttagttttg 60
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ctcgaagagg gcggtgttat aatgcaggcc ttctactggg acgtccctac cggtgggatc 180
tggtgggaca ccataagaca gaaaatcccg gagtggtacg acgctggaat ctcggcgata 240
tggattcctc cagctagcaa aggtatgggt ggtgcatact ccatgggtta tgacccctac 300
gatttctttg acctcggcga gtactatcag aagggaacag ttgagacgcg cttcggctca 360
aaggaggaac tggtgaacat gataaacacc gcacactcct atggcataaa ggtgatagcg 420
gacatagtca taaaccaccg cgccggcggc gacctggagt ggaacccctt tgtaaacaac 480
tatacttgga cagacttctc caaggtcgcc tccggtaaat acacggccaa ctaccttgac 540
ttccacccaa acgaggtcaa gtgctgcgat gagggtacat ttggtgactt tccggacatc 600
gcccacgaga agagctggga tcagtactgg ctctgggcaa gcaatgagag ctacgccgcc 660
tatctccgga gcatagggat cgatgcatgg cgtttcgact acgtcaaagg ttacggagcg 720
tgggttgtta acgactggct cagctggtgg ggaggttggg ccgttggaga gtactgggac 780
accaacgttg atgcactcct taactgggca tacaacagcg gtgccaaggt ctttgacttc 840
ccgctctact acaagatgga cgaagccttt gacaacacca acatccccgc tttggtttac 900
gccctccaga acggaggaac agtcgtttcc cgcgatccct tcaaggcagt aactttcgtt 960
gccaaccacg ataccgatat aatctggaac aagtatccgg cttatgcgtt catccttacc 1020
tatgagggac agcctgttat attctaccgc gactacgagg agtggctcaa caaggataag 1080
cttaacaacc ttatctggat acacgagcac cttgccggag gaagtaccaa gatcctctac 1140
tacgataacg atgagctaat attcatgagg gagggctacg ggagcaagcc gggcctcata 1200
acctacataa acctcggaaa cgactgggcc gagcgctggg tgaacgtcgg ctcaaagttt 1260
gccggctaca caatccatga atacacaggc aatctcggtg gctgggttga caggtgggtt 1320
cagtacgacg gatgggttaa actgacggca cctcctcacg atccagccaa cggatattac 1380
ggctactcag tctggagcta cgcaggcgtc ggatga 1416
<210>112
<211>471
<212>PRT
<213>环境的
<400>112
Met Pro Ala Phe Lys Ser Lys Val Met His Met Lys Leu Lys Tyr Leu
1 5 10 15
Ala Leu Val Leu Leu Ala Val Ala Ser Ile Gly Leu Leu Ser Thr Pro
20 25 30
Val Gly Ala Ala Lys Tyr Ser Glu Leu Glu Glu Gly Gly Val Ile Met
35 40 45
Gln Ala Phe Tyr Trp Asp Val Pro Thr Gly Gly Ile Trp Trp Asp Thr
50 55 60
Ile Arg Gln Lys Ile Pro Glu Trp Tyr Asp Ala Gly Ile Ser Ala Ile
65 70 75 80
Trp Ile Pro Pro Ala Ser Lys Gly Met Gly Gly Ala Tyr Ser Met Gly
85 90 95
Tyr Asp Pro Tyr Asp Phe Phe Asp Leu Gly Glu Tyr Tyr Gln Lys Gly
100 105 110
Thr Val Glu Thr Arg Phe Gly Ser Lys Glu Glu Leu Val Asn Met Ile
115 120 125
Asn Thr Ala His Ser Tyr Gly Ile Lys Val Ile Ala Asp Ile Val Ile
130 135 140
Asn His Arg Ala Gly Gly Asp Leu Glu Trp Asn Pro Phe Val Asn Asn
145 150 155 160
Tyr Thr Trp Thr Asp Phe Ser Lys Val Ala Ser Gly Lys Tyr Thr Ala
165 170 175
Asn Tyr Leu Asp Phe His Pro Asn Glu Val Lys Cys Cys Asp Glu Gly
180 185 190
Thr Phe Gly Asp Phe Pro Asp Ile Ala His Glu Lys Ser Trp Asp Gln
195 200 205
Tyr Trp Leu Trp Ala Ser Asn Glu Ser Tyr Ala Ala Tyr Leu Arg Ser
210 215 220
Ile Gly Ile Asp Ala Trp Arg Phe Asp Tyr Val Lys Gly Tyr Gly Ala
225 230 235 240
Trp Val Val Asn Asp Trp Leu Ser Trp Trp Gly Gly Trp Ala Val Gly
245 250 255
Glu Tyr Trp Asp Thr Asn Val Asp Ala Leu Leu Asn Trp Ala Tyr Asn
260 265 270
Ser Gly Ala Lys Val Phe Asp Phe Pro Leu Tyr Tyr Lys Met Asp Glu
275 280 285
Ala Phe Asp Asn Thr Asn Ile Pro Ala Leu Val Tyr Ala Leu Gln Asn
290 295 300
Gly Gly Thr Val Val Ser Arg Asp Pro Phe Lys Ala Val Thr Phe Val
305 310 315 320
Ala Asn His Asp Thr Asp Ile Ile Trp Asn Lys Tyr Pro Ala Tyr Ala
325 330 335
Phe Ile Leu Thr Tyr Glu Gly Gln Pro Val Ile Phe Tyr Arg Asp Tyr
340 345 350
Glu Glu Trp Leu Asn Lys Asp Lys Leu Asn Asn Leu Ile Trp Ile His
355 360 365
Glu His Leu Ala Gly Gly Ser Thr Lys Ile Leu Tyr Tyr Asp Asn Asp
370 375 380
Glu Leu Ile Phe Met Arg Glu Gly Tyr Gly Ser Lys Pro Gly Leu Ile
385 390 395 400
Thr Tyr Ile Asn Leu Gly Asn Asp Trp Ala Glu Arg Trp Val Asn Val
405 410 415
Gly Ser Lys Phe Ala Gly Tyr Thr Ile His Glu Tyr Thr Gly Asn Leu
420 425 430
Gly Gly Trp Val Asp Arg Trp Val Gln Tyr Asp Gly Trp Val Lys Leu
435 440 445
Thr Ala Pro Pro His Asp Pro Ala Asn Gly Tyr Tyr Gly Tyr Ser Val
450 455 460
Trp Ser Tyr Ala Gly Val Gly
465 470
<210>113
<211>1539
<212>DNA
<213>环境的
<400>113
atgaaacaac aaaaacggct ttacgcccga ttgctgacgc tgttatttgc gctcatcttc 60
ttgctgcctc attctgcagc agcggcggca aatcttaatg ggacgctgat gcagtatttt 120
gaatggtaca tgcccaatga cggccaacat tggaagcgct tgcaaaacga ctcggcatat 180
ttggctgaac acggtattac tgccgtctgg attcccccgg catataaggg aacgagccaa 240
gcggatgtgg gctacggtgc ttacgacctt tatgatttag gggagtttca tcaaaaaggg 300
acggttcgga caaagtacgg cacaaaagga gagctgcaat ctgcgatcaa aagtcttcat 360
tcccgcgaca ttaacgttta cggggatgtg gtcatcaacc acaaaggcgg cgctgatgcg 420
accgaagatg taaccgcggt tgaagtcgat cccgctgacc gcaaccgcgt aatttcagga 480
gaacaccgaa ttaaagcctg gacacatttt cattttccgg ggcgcggcag cacatacagc 540
gattttaaat ggcattggta ccattttgac ggaaccgatt gggacgagtc ccgaaagctg 600
aaccgcatct ataagtttca aggaaaggct tgggattggg aagtttccaa tgaaaacggc 660
aactatgatt atttgatgta tgccgacatc gattatgacc atcctgatgt cgcagcagaa 720
attaagagat ggggcacttg gtatgccaat gaactgcaat tggacggttt ccgtcttgat 780
gctgtcaaac acattaaatt ttcttttttg cgggattggg ttaatcatgt cagggaaaaa 840
acggggaagg aaatgtttac ggtagctgaa tattggcaga atgacttggg cgcgctggaa 900
aactatttga acaaaacaaa ttttaatcat tcagtgtttg acgtgccgct tcattatcag 960
ttccatgctg catcgacaca gggaggcggc tatgatatga ggaaattgct gaacggtacg 1020
gtcgtttcca agcatccgtt gaaagcggtt acatttgtcg ataaccatga tacacagccg 1080
gggcaatcgc ttgagtcgac tgtccaaaca tggtttaagc cgcttgctta cgctttcatt 1140
ctcacaaggg aatctggata ccctcaggtt ttctacgggg atatgtacgg gacgaaagga 1200
gactcccagc gcgaaattcc tgccttgaaa cacaaaattg aaccgatctt aaaagcgaga 1260
aaacagtatg cgtacggagc acagcatgat tatttcgacc accatgacat tgtcggctgg 1320
acaagggaag gcgacagctc ggttgcaaat tcaggtttgg cggcattaat aacagacgga 1380
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gtaaacggcg ggtcggtttc aatttatgtt caaagatag 1539
<210>114
<211>512
<212>PRT
<213>环境的
<400>114
Met Lys Gln Gln Lys Arg Leu Tyr Ala Arg Leu Leu Thr Leu Leu Phe
1 5 10 15
Ala Leu Ile Phe Leu Leu Pro His Ser Ala Ala Ala Ala Ala Asn Leu
20 25 30
Asn Gly Thr Leu Met Gln Tyr Phe Glu Trp Tyr Met Pro Asn Asp Gly
35 40 45
Gln His Trp Lys Arg Leu Gln Asn Asp Ser Ala Tyr Leu Ala Glu His
50 55 60
Gly Ile Thr Ala Val Trp Ile Pro Pro Ala Tyr Lys Gly Thr Ser Gln
65 70 75 80
Ala Asp Val Gly Tyr Gly Ala Tyr Asp Leu Tyr Asp Leu Gly Glu Phe
85 90 95
His Gln Lys Gly Thr Val Arg Thr Lys Tyr Gly Thr Lys Gly Glu Leu
100 105 110
Gln Ser Ala Ile Lys Ser Leu His Ser Arg Asp Ile Asn Val Tyr Gly
115 120 125
Asp Val Val Ile Asn His Lys Gly Gly Ala Asp Ala Thr Glu Asp Val
130 135 140
Thr Ala Val Glu Val Asp Pro Ala Asp Arg Asn Arg Val Ile Ser Gly
145 150 155 160
Glu His Arg Ile Lys Ala Trp Thr His Phe His Phe Pro Gly Arg Gly
165 170 175
Ser Thr Tyr Ser Asp Phe Lys Trp His Trp Tyr His Phe Asp Gly Thr
180 185 190
Asp Trp Asp Glu Ser Arg Lys Leu Asn Arg Ile Tyr Lys Phe Gln Gly
195 200 205
Lys Ala Trp Asp Trp Glu Val Ser Asn Glu Asn Gly Asn Tyr Asp Tyr
210 215 220
Leu Met Tyr Ala Asp Ile Asp Tyr Asp His Pro Asp Val Ala Ala Glu
225 230 235 240
Ile Lys Arg Trp Gly Thr Trp Tyr Ala Asn Glu Leu Gln Leu Asp Gly
245 250 255
Phe Arg Leu Asp Ala Val Lys His Ile Lys Phe Ser Phe Leu Arg Asp
260 265 270
Trp Val Asn His Val Arg Glu Lys Thr Gly Lys Glu Met Phe Thr Val
275 280 285
Ala Glu Tyr Trp Gln Asn Asp Leu Gly Ala Leu Glu Asn Tyr Leu Asn
290 295 300
Lys Thr Asn Phe Asn His Ser Val Phe Asp Val Pro Leu His Tyr Gln
305 310 315 320
Phe His Ala Ala Ser Thr Gln Gly Gly Gly Tyr Asp Met Arg Lys Leu
325 330 335
Leu Asn Gly Thr Val Val Ser Lys His Pro Leu Lys Ala Val Thr Phe
340 345 350
Val Asp Asn His Asp Thr Gln Pro Gly Gln Ser Leu Glu Ser Thr Val
355 360 365
Gln Thr Trp Phe Lys Pro Leu Ala Tyr Ala Phe Ile Leu Thr Arg Glu
370 375 380
Ser Gly Tyr Pro Gln Val Phe Tyr Gly Asp Met Tyr Gly Thr Lys Gly
385 390 395 400
Asp Ser Gln Arg Glu Ile Pro Ala Leu Lys His Lys Ile Glu Pro Ile
405 410 415
Leu Lys Ala Arg Lys Gln Tyr Ala Tyr Gly Ala Gln His Asp Tyr Phe
420 425 430
Asp His His Asp Ile Val Gly Trp Thr Arg Glu Gly Asp Ser Ser Val
435 440 445
Ala Asn Ser Gly Leu Ala Ala Leu Ile Thr Asp Gly Pro Gly Gly Ala
450 455 460
Lys Arg Met Tyr Val Gly Arg Gln Asn Ala Gly Glu Thr Trp His Asp
465 470 475 480
Ile Thr Gly Asn Arg Ser Glu Pro Val Val Ile Asn Ser Glu Gly Trp
485 490 495
Gly Glu Phe His Val Asn Gly Gly Ser Val Ser Ile Tyr Val Gln Arg
500 505 510
<210>115
<211>1338
<212>DNA
<213>真核细胞
<400>115
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gccaaggtct tcgacttccc gctctactac aagatggacg aggcctttga caacaagaac 780
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caccatcacc atcactaa 1338
<210>116
<211>445
<212>PRT
<213>真核细胞
<400>116
Met Ala Lys Tyr Ser Glu Leu Glu Gln Gly Gly Val Ile Met Gln Ala
1 5 10 15
Phe Tyr Trp Asp Val Pro Glu Gly Gly Ile Trp Trp Asp Thr Ile Arg
20 25 30
Gln Lys Ile Pro Glu Trp Tyr Asp Ala Gly Ile Ser Ala Ile Trp Ile
35 40 45
Pro Pro Ala Ser Lys Gly Met Gly Gly Ala Tyr Ser Met Gly Tyr Asp
50 55 60
Pro Tyr Asp Tyr Phe Asp Leu Gly Glu Phe Tyr Gln Lys Gly Thr Val
65 70 75 80
Glu Thr Arg Phe Gly Ser Lys Glu Glu Leu Val Asn Met Ile Ser Thr
85 90 95
Ala His Gln Tyr Gly Ile Lys Val Ile Ala Asp Ile Val Ile Asn His
100 105 110
Arg Ala Gly Gly Asp Leu Glu Trp Asn Pro Tyr Val Gly Asp Tyr Thr
115 120 125
Trp Thr Asp Phe Ser Lys Val Ala Ser Gly Lys Tyr Lys Ala His Tyr
130 135 140
Met Asp Phe His Pro Asn Asn Tyr Ser Thr Ser Asp Glu Gly Thr Phe
145 150 155 160
Gly Gly Phe Pro Asp Ile Asp His Leu Val Pro Phe Asn Gln Tyr Trp
165 170 175
Leu Trp Ala Ser Asn Glu Ser Tyr Ala Ala Tyr Leu Arg Ser Ile Gly
180 185 190
Ile Asp Ala Trp Arg Phe Asp Tyr Val Lys Gly Tyr Gly Ala Trp Val
195 200 205
Val Lys Asp Trp Leu Ser Gln Trp Gly Gly Trp Ala Val Gly Glu Tyr
210 215 220
Trp Asp Thr Asn Val Asp Ala Leu Leu Asn Trp Ala Tyr Ser Ser Gly
225 230 235 240
Ala Lys Val Phe Asp Phe Pro Leu Tyr Tyr Lys Met Asp Glu Ala Phe
245 250 255
Asp Asn Lys Asn Ile Pro Ala Leu Val Tyr Ala Ile Gln Asn Gly Glu
260 265 270
Thr Val Val Ser Arg Asp Pro Phe Lys Ala Val Thr Phe Val Ala Asn
275 280 285
His Asp Thr Asn Ile Ile Trp Asn Lys Tyr Pro Ala Tyr Ala Phe Ile
290 295 300
Leu Thr Tyr Glu Gly Gln Pro Val Ile Phe Tyr Arg Asp Tyr Glu Glu
305 310 315 320
Trp Leu Asn Lys Asp Lys Leu Asn Asn Leu Ile Trp Ile His Glu His
325 330 335
Leu Ala Gly Gly Ser Thr Lys Ile Leu Tyr Tyr Asp Asp Asp Glu Leu
340 345 350
Ile Phe Met Arg Glu Gly Tyr Gly Asp Arg Pro Gly Leu Ile Thr Tyr
355 360 365
Ile Asn Leu Gly Ser Asp Trp Ala Glu Arg Trp Val Asn Val Gly Ser
370 375 380
Lys Phe Ala Gly Tyr Thr Ile His Glu Tyr Thr Gly Asn Leu Gly Gly
385 390 395 400
Trp Val Asp Arg Tyr Val Gln Tyr Asp Gly Trp Val Lys Leu Thr Ala
405 410 415
Pro Pro His Asp Pro Ala Asn Gly Tyr Tyr Gly Tyr Ser Val Trp Ser
420 425 430
Tyr Ala Gly Val Gly Arg Ser His His His His His His
435 440 445
<210>117
<211>1476
<212>DNA
<213>环境的
<400>117
atgcgagtgt tcctggttgt gccaaagctg agccgcccat ttcaggcaga gtcacaacaa 60
caagacaggg acataacaat gaaacacaca gcgggaatgc tggcgatcgc aggtatgctg 120
atcgccccct tggcgcatgc cgatgtcata ctgcacgcct tcaactggaa atacagtgaa 180
gtcaccgcca aggccgatct catcaaggct gccggctaca agcaggtgct catctcaccg 240
cctctgaagt cctcgggcaa cgagtggtgg gctcgttacc agccccagga tctgcgcctg 300
gtcgacaccc cccttggcaa caagcaggat ctggagcagc tgatcgccgc gatgcagacc 360
cggggcattg ccgtctacgc ggacgtggtg ctcaaccaca tggccaacga aagctggaag 420
cgcagcgacc tcaactaccc cggcagcgag ctgctgcaaa gctacgccgg caatccggcc 480
tactttgaac gccagaagct ctttggcgat ctggggcaga acttcctcgc cggccaggat 540
tttcatccgg aggggtgcat caccgactgg aacaatccgg gccatgtcca gtactggcga 600
ctgtgcggcg gggcgggtga caaggggctg ccggatctgg accccaacaa ctgggtggtg 660
aaccagcaac aggcttacct gcaggcgctc aaggggatgg ggatcaaggg ttttcgggtc 720
gatgcggtca agcacatgag cgattaccag atcaacgccg tgttcacccc cgagatcaaa 780
caggggatgc acgtctttgg cgaggtgatc accacggggg gcgccggcaa cagcgactat 840
gagaacttcc tcaaacccta cctcgacagc agcggccagg gggcctacga cttcccgctc 900
ttcgcctccc tgcgtggagc gctgggctac ggcggcagca tgaacctgct ggccgatccc 960
ggtgcctatg gtcaggcgct gccgggtagc cgcgccgtca ccttcgccat cacccacgac 1020
atccccacca acgacggttt ccgctaccag atcctcaacc agaccgacga gagactggcc 1080
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accagggaca aggacggatt gcgctggcag gactactatc tgcgcaccga tctcaaaggg 1200
atgatccgct tccataacac agtgcagggt caaccgatgc agctcatcgg cagtaacgac 1260
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ccggcccgcg gcgccagaat gtggctgcag gagtga 1476
<210>118
<211>491
<212>PRT
<213>环境的
<400>118
Met Arg Val Phe Leu Val Val Pro Lys Leu Ser Arg Pro Phe Gln Ala
1 5 10 15
Glu Ser Gln Gln Gln Asp Arg Asp Ile Thr Met Lys His Thr Ala Gly
20 25 30
Met Leu Ala Ile Ala Gly Met Leu Ile Ala Pro Leu Ala His Ala Asp
35 40 45
Val Ile Leu His Ala Phe Asn Trp Lys Tyr Ser Glu Val Thr Ala Lys
50 55 60
Ala Asp Leu Ile Lys Ala Ala Gly Tyr Lys Gln Val Leu Ile Ser Pro
65 70 75 80
Pro Leu Lys Ser Ser Gly Asn Glu Trp Trp Ala Arg Tyr Gln Pro Gln
85 90 95
Asp Leu Arg Leu Val Asp Thr Pro Leu Gly Asn Lys Gln Asp Leu Glu
100 105 110
Gln Leu Ile Ala Ala Met Gln Thr Arg Gly Ile Ala Val Tyr Ala Asp
115 120 125
Val Val Leu Asn His Met Ala Asn Glu Ser Trp Lys Arg Ser Asp Leu
130 135 140
Asn Tyr Pro Gly Ser Glu Leu Leu Gln Ser Tyr Ala Gly Asn Pro Ala
145 150 155 160
Tyr Phe Glu Arg Gln Lys Leu Phe Gly Asp Leu Gly Gln Asn Phe Leu
165 170 175
Ala Gly Gln Asp Phe His Pro Glu Gly Cys Ile Thr Asp Trp Asn Asn
180 185 190
Pro Gly His Val Gln Tyr Trp Arg Leu Cys Gly Gly Ala Gly Asp Lys
195 200 205
Gly Leu Pro Asp Leu Asp Pro Asn Asn Trp Val Val Asn Gln Gln Gln
210 215 220
Ala Tyr Leu Gln Ala Leu Lys Gly Met Gly Ile Lys Gly Phe Arg Val
225 230 235 240
Asp Ala Val Lys His Met Ser Asp Tyr Gln Ile Asn Ala Val Phe Thr
245 250 255
Pro Glu Ile Lys Gln Gly Met His Val Phe Gly Glu Val Ile Thr Thr
260 265 270
Gly Gly Ala Gly Asn Ser Asp Tyr Glu Asn Phe Leu Lys Pro Tyr Leu
275 280 285
Asp Ser Ser Gly Gln Gly Ala Tyr Asp Phe Pro Leu Phe Ala Ser Leu
290 295 300
Arg Gly Ala Leu Gly Tyr Gly Gly Ser Met Asn Leu Leu Ala Asp Pro
305 310 315 320
Gly Ala Tyr Gly Gln Ala Leu Pro Gly Ser Arg Ala Val Thr Phe Ala
325 330 335
Ile Thr His Asp Ile Pro Thr Asn Asp Gly Phe Arg Tyr Gln Ile Leu
340 345 350
Asn Gln Thr Asp Glu Arg Leu Ala Tyr Ala Tyr Leu Leu Gly Arg Asp
355 360 365
Gly Gly Ser Pro Leu Val Tyr Ser Asp His Gly Glu Thr Arg Asp Lys
370 375 380
Asp Gly Leu Arg Trp Gln Asp Tyr Tyr Leu Arg Thr Asp Leu Lys Gly
385 390 395 400
Met Ile Arg Phe His Asn Thr Val Gln Gly Gln Pro Met Gln Leu Ile
405 410 415
Gly Ser Asn Asp Cys Phe Val Leu Phe Lys Arg Gly Lys Gln Gly Val
420 425 430
Val Gly Ile Asn Lys Cys Asp Tyr Glu Gln Glu Tyr Trp Leu Asp Thr
435 440 445
Ala Arg Phe Glu Met Asn Trp Tyr Arg Asn Tyr Arg Asp Val Leu Asp
450 455 460
Gln Asn Ala Val Val Asn Val Gln Ser Gln Trp Val Arg Leu Thr Ile
465 470 475 480
Pro Ala Arg Gly Ala Arg Met Trp Leu Gln Glu
485 490
<210>119
<211>1695
<212>DNA
<213>细菌的
<400>119
atgcaaacgt ttgcattctt attttactca aagaaaggat gggtgtgcat gaattatttg 60
aaaaaagtgt ggttgtatta cgctatcgtc gctaccttaa tcatttcctt tcttacacct 120
ttttcaacag cacaagctaa tactgcacct gttaacggaa caatgatgca atatttcgaa 180
tgggacttac ctaatgatgg gacgctttgg acgaaagtaa aaaatgaagc taccaatctt 240
tcttcactag gtatcacagc actatggctc cctccagcat ataaaggaac gagccaaagc 300
gatgtcggat acggtgttta cgatttatat gaccttgggg aatttaatca aaaagggacg 360
atccgaacga aatacggaac aaaaacacaa tatattcaag ccattcaaac tgcccaagcc 420
gcagggatgc aagtatatgc ggatgttgta tttaatcata aggcaggggc tgacagtaca 480
gaatttgtcg atgcagttga ggtaaaccct tctaatcgaa atcaagaaac atctggcaca 540
tatcaaattc aagcatggac aaaatttgat tttcctggtc gtggaaacac atactccagc 600
ttcaaatggc gctggtacca ttttgatggt acggattggg acgaaagtcg taaattaaat 660
cgtatttaca aattccgcgg tacaggaaaa gcgtgggact gggaagtcga tacagaaaac 720
ggaaactatg attatttaat gttcgctgat ttagatatgg atcaccctga ggttgtgaca 780
gaattaaaaa actggggaac gtggtacgtc aatactacaa atatcgatgg attccgctta 840
gatgccgtaa aacatattaa atacagcttt ttccctgact ggctaacata tgtacgtaat 900
caaacaggaa aaaatttatt tgccgttggg gaattttgga gctatgacgt caataagctg 960
cataattaca ttacaaaaac aaatgggtcg atgtcattat ttgatgcacc cttgcataac 1020
aacttttata ccgcttccaa atcgagtgga tattttgaca tgcgttattt attgaataat 1080
acattaatga aagatcaacc ttcactcgct gtaacacttg tcgataacca cgacacgcaa 1140
ccagggcaat ctttacagtc atgggtcgaa ccttggttta aacagcttgc ttacgccttt 1200
attttaacaa gacaagaagg gtatccttgc gtattttacg gtgattatta tggaatccct 1260
aaatacaata tcccggggtt aaaaagtaaa atcgacccgc ttttaattgc tcgtcgtgat 1320
tacgcttatg gaacacaacg tgattacatt gatcatcaag acattatcgg atggacacga 1380
gaaggcattg atgcaaaacc gaactctgga ctggcggctt taattaccga cggtcctggt 1440
ggaagtaaat ggatgtatgt cggtaaaaag catgccggga aagtatttta tgatttaact 1500
ggaaatcgaa gtgacacagt aacgattaat gcggatggtt ggggagaatt taaagtaaac 1560
ggaggatccg tctcaatttg ggtggctaaa acgtcaaacg tcacatttac agtcaataac 1620
gccacaacaa caagcggaca aaacgtatat gttgtcggca acattccaga gctaggcaat 1680
tgtcgcacgg gttaa 1695
<210>120
<211>564
<212>PRT
<213>细菌的
<400>120
Met Gln Thr Phe Ala Phe Leu Phe Tyr Ser Lys Lys Gly Trp Val Cys
1 5 10 15
Met Asn Tyr Leu Lys Lys Val Trp Leu Tyr Tyr Ala Ile Val Ala Thr
20 25 30
Leu Ile Ile Ser Phe Leu Thr Pro Phe Ser Thr Ala Gln Ala Asn Thr
35 40 45
Ala Pro Val Asn Gly Thr Met Met Gln Tyr Phe Glu Trp Asp Leu Pro
50 55 60
Asn Asp Gly Thr Leu Trp Thr Lys Val Lys Asn Glu Ala Thr Asn Leu
65 70 75 80
Ser Ser Leu Gly Ile Thr Ala Leu Trp Leu Pro Pro Ala Tyr Lys Gly
85 90 95
Thr Ser Gln Ser Asp Val Gly Tyr Gly Val Tyr Asp Leu Tyr Asp Leu
100 105 110
Gly Glu Phe Asn Gln Lys Gly Thr Ile Arg Thr Lys Tyr Gly Thr Lys
115 120 125
Thr Gln Tyr Ile Gln Ala Ile Gln Thr Ala Gln Ala Ala Gly Met Gln
130 135 140
Val Tyr Ala Asp Val Val Phe Asn His Lys Ala Gly Ala Asp Ser Thr
145 150 155 160
Glu Phe Val Asp Ala Val Glu Val Asn Pro Ser Asn Arg Asn Gln Glu
165 170 175
Thr Ser Gly Thr Tyr Gln Ile Gln Ala Trp Thr Lys Phe Asp Phe Pro
180 185 190
Gly Arg Gly Asn Thr Tyr Ser Ser Phe Lys Trp Arg Trp Tyr His Phe
195 200 205
Asp Gly Thr Asp Trp Asp Glu Ser Arg Lys Leu Asn Arg Ile Tyr Lys
210 215 220
Phe Arg Gly Thr Gly Lys Ala Trp Asp Trp Glu Val Asp Thr Glu Asn
225 230 235 240
Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Met Phe Ala Asp Leu Asp Met Asp His Pro
245 250 255
Glu Val Val Thr Glu Leu Lys Asn Trp Gly Thr Trp Tyr Val Asn Thr
260 265 270
Thr Asn Ile Asp Gly Phe Arg Leu Asp Ala Val Lys His Ile Lys Tyr
275 280 285
Ser Phe Phe Pro Asp Trp Leu Thr Tyr Val Arg Asn Gln Thr Gly Lys
290 295 300
Asn Leu Phe Ala Val Gly Glu Phe Trp Ser Tyr Asp Val Asn Lys Leu
305 310 315 320
His Asn Tyr Ile Thr Lys Thr Asn Gly Ser Met Ser Leu Phe Asp Ala
325 330 335
Pro Leu His Asn Asn Phe Tyr Thr Ala Ser Lys Ser Ser Gly Tyr Phe
340 345 350
Asp Met Arg Tyr Leu Leu Asn Asn Thr Leu Met Lys Asp Gln Pro Ser
355 360 365
Leu Ala Val Thr Leu Val Asp Asn His Asp Thr Gln Pro Gly Gln Ser
370 375 380
Leu Gln Ser Trp Val Glu Pro Trp Phe Lys Gln Leu Ala Tyr Ala Phe
385 390 395 400
Ile Leu Thr Arg Gln Glu Gly Tyr Pro Cys Val Phe Tyr Gly Asp Tyr
405 410 415
Tyr Gly Ile Pro Lys Tyr Asn Ile Pro Gly Leu Lys Ser Lys Ile Asp
420 425 430
Pro Leu Leu Ile Ala Arg Arg Asp Tyr Ala Tyr Gly Thr Gln Arg Asp
435 440 445
Tyr Ile Asp His Gln Asp Ile Ile Gly Trp Thr Arg Glu Gly Ile Asp
450 455 460
Ala Lys Pro Asn Ser Gly Leu Ala Ala Leu Ile Thr Asp Gly Pro Gly
465 470 475 480
Gly Ser Lys Trp Met Tyr Val Gly Lys Lys His Ala Gly Lys Val Phe
485 490 495
Tyr Asp Leu Thr Gly Asn Arg Ser Asp Thr Val Thr Ile Asn Ala Asp
500 505 510
Gly Trp Gly Glu Phe Lys Val Asn Gly Gly Ser Val Ser Ile Trp Val
515 520 525
Ala Lys Thr Ser Asn Val Thr Phe Thr Val Asn Asn Ala Thr Thr Thr
530 535 540
Ser Gly Gln Asn Val Tyr Val Val Gly Asn Ile Pro Glu Leu Gly Asn
545 550 555 560
Cys Arg Thr Gly
<210>121
<211>1556
<212>DNA
<213>环境的
<400>121
atgctcgccc tgtcgctcgg cggctgcggc atcgacgcgg gcccgacagg ccctcgcgtc 60
gtggagccgc tgccgcagcg ccccacgctt ccgcaggagt accgcgccag cggccacgcg 120
gccgccggcg acgtgttcgt gcacctgttc gagtggaagt ggccggacat cgcggaggaa 180
tgcgagaacg tgctggggcc ggcgggctac gaggcggtgc aggtgtcgcc gccgcaggag 240
cacctggtgc agcagggggc gccgtggtgg cagcggtacc agccggtgag ctactcggtg 300
gcgctgagcc gcagcggcac gggcgtggag ttcagcaaca tgatcagccg gtgcaaggcc 360
gccggcgtgg acatctacgt ggacgccgtc atcaaccaca tgacggccgg tgcggggacg 420
gggagcaacg gcaccgccta caccaagtac aactaccccg gcctgtacgc gcaggcggac 480
tttcacccgc agtgcgcggt gggcgactac accagcgccg ccaacgtgca ggactgcgaa 540
ctgctggggc tggctgacct gaacaccggc gcggccggcg tgcagcagaa gatcgcggac 600
tacctggtct cgctggcgcg gctgggcgtg gcgggttttc gcatcgacgc cgccaagcac 660
atccagccgg tggaactgga cgccatcgtg gaccgcgtga accagacgct ggcggcggag 720
gggcgcccgc ttccctactg gttcgccgag gtgatcgaca acggcggcga gggggtgcgg 780
cgcgagcact actacggcct gggatacggc accggcggcg ccgcggacat cacggagttc 840
cgctacaagg gcgtgggcga caagttcctg ggcagcggcg gccagcggct ggtggacctg 900
aagaacttct cggcggtgac gtggaacctg atgccgtcgg acaaggccgt cgtctttctg 960
gagaaccacg atacgcagcg cggcggcggc atcggctacc gcgatggcac ggcgttccgg 1020
ctggccaacg tgtggatgct ggcgcagccg tacggctatc cgtcggtgat gtccagctac 1080
gcctttgacc gcacctcccc ctttggccgc gacgccggcc cgccctccga ggacggcgcg 1140
acgaaggacg tgacgtgcgc gcccacgctg gagacggcgg tgctgggcac ctgggtgtgc 1200
gagcaccgcg accccgtcat tcagcggatg gtgggctttc gccgcgcgat ggcgggcacg 1260
gacctgaacc gctggtggga caacggcggc aacgccattg ccttttcgcg cggggaccgg 1320
ggcttcgtcg ccatcagccg cgagccgaag gtgaccatgg cggccgtgcc cagcggactg 1380
tcccccggca cctactgcga cgtgctgacc ggcggcaagg tgggcaacgc ctgcgcggga 1440
accagcgtga cggtcgactc tcagggcgtg gtgcagctga gcatcgtcga gaactcggct 1500
ctggtgatcc acctcggggc caagctgtaa cggcgcgctg gcggatgtgc ggaggg 1556
<210>122
<211>517
<212>PRT
<213>环境的
<400>122
Met Leu Ala Leu Ser Leu Gly Gly Cys Gly Ile Asp Ala Gly Pro Thr
1 5 10 15
Gly Pro Arg Val Val Glu Pro Leu Pro Gln Arg Pro Thr Leu Pro Gln
20 25 30
Glu Tyr Arg Ala Ser Gly His Ala Ala Ala Gly Asp Val Phe Val His
35 40 45
Leu Phe Glu Trp Lys Trp Pro Asp Ile Ala Glu Glu Cys Glu Asn Val
50 55 60
Leu Gly Pro Ala Gly Tyr Glu Ala Val Gln Val Ser Pro Pro Gln Glu
65 70 75 80
His Leu Val Gln Gln Gly Ala Pro Trp Trp Gln Arg Tyr Gln Pro Val
85 90 95
Ser Tyr Ser Val Ala Leu Ser Arg Ser Gly Thr Gly Val Glu Phe Ser
100 105 110
Asn Met Ile Ser Arg Cys Lys Ala Ala Gly Val Asp Ile Tyr Val Asp
115 120 125
Ala Val Ile Asn His Met Thr Ala Gly Ala Gly Thr Gly Ser Asn Gly
130 135 140
Thr Ala Tyr Thr Lys Tyr Asn Tyr Pro Gly Leu Tyr Ala Gln Ala Asp
145 150 155 160
Phe His Pro Gln Cys Ala Val Gly Asp Tyr Thr Ser Ala Ala Asn Val
165 170 175
Gln Asp Cys Glu Leu Leu Gly Leu Ala Asp Leu Asn Thr Gly Ala Ala
180 185 190
Gly Val Gln Gln Lys Ile Ala Asp Tyr Leu Val Ser Leu Ala Arg Leu
195 200 205
Gly Val Ala Gly Phe Arg Ile Asp Ala Ala Lys His Ile Gln Pro Val
210 215 220
Glu Leu Asp Ala Ile Val Asp Arg Val Asn Gln Thr Leu Ala Ala Glu
225 230 235 240
Gly Arg Pro Leu Pro Tyr Trp Phe Ala Glu Val Ile Asp Asn Gly Gly
245 250 255
Glu Gly Val Arg Arg Glu His Tyr Tyr Gly Leu Gly Tyr Gly Thr Gly
260 265 270
Gly Ala Ala Asp Ile Thr Glu Phe Arg Tyr Lys Gly Val Gly Asp Lys
275 280 285
Phe Leu Gly Ser Gly Gly Gln Arg Leu Val Asp Leu Lys Asn Phe Ser
290 295 300
Ala Val Thr Trp Asn Leu Met Pro Ser Asp Lys Ala Val Val Phe Leu
305 310 315 320
Glu Asn His Asp Thr Gln Arg Gly Gly Gly Ile Gly Tyr Arg Asp Gly
325 330 335
Thr Ala Phe Arg Leu Ala Asn Val Trp Met Leu Ala Gln Pro Tyr Gly
340 345 350
Tyr Pro Ser Val Met Ser Ser Tyr Ala Phe Asp Arg Thr Ser Pro Phe
355 360 365
Gly Arg Asp Ala Gly Pro Pro Ser Glu Asp Gly Ala Thr Lys Asp Val
370 375 380
Thr Cys Ala Pro Thr Leu Glu Thr Ala Val Leu Gly Thr Trp Val Cys
385 390 395 400
Glu His Arg Asp Pro Val Ile Gln Arg Met Val Gly Phe Arg Arg Ala
405 410 415
Met Ala Gly Thr Asp Leu Asn Arg Trp Trp Asp Asn Gly Gly Asn Ala
420 425 430
Ile Ala Phe Ser Arg Gly Asp Arg Gly Phe Val Ala Ile Ser Arg Glu
435 440 445
Pro Lys Val Thr Met Ala Ala Val Pro Ser Gly Leu Ser Pro Gly Thr
450 455 460
Tyr Cys Asp Val Leu Thr Gly Gly Lys Val Gly Asn Ala Cys Ala Gly
465 470 475 480
Thr Ser Val Thr Val Asp Ser Gln Gly Val Val Gln Leu Ser Ile Val
485 490 495
Glu Asn Ser Ala Leu Val Ile His Leu Gly Ala Lys Leu Arg Arg Ala
500 505 510
Gly Gly Cys Ala Glu
515
<210>123
<211>1770
<212>DNA
<213>环境的
<400>123
atgccccagg ccattcgcac tttttcacgt tggacgttgt tcggcttaat cggcgttttt 60
ctgcttggtc tcgtcttttc tgtcccaccc cgggcaatcc aggcccagac aaccccggcc 120
cgtaccgtta tggttcacct cttcgagtgg aaatggaccg acatcgctaa agaatgcgag 180
aatttcctcg gaccgaaagg ctttgccgca atccaggtat cgccgcccca ggagcatgtc 240
caggggtcgc aatggtggac ccgctatcag ccggtcagct acaagatcga gagccgctcc 300
ggcacccggg ccgagttcgc caatatggtc tcgcgctgca aagccgtcgg ggtcgatatc 360
tatgtcgatg ccgtgatcaa ccatatgacg actgtcggct ccggcactgg tatggctgga 420
tcgacctaca ccagctacac ctatccgggg ctgtatcaga cccaggactt ccaccactgc 480
gggcgcaatg gcaacgatga tatcagcagc tacggcgatc gctgggaagt acaaaactgc 540
gaactgctca acctagccga cctcaacacc ggcgctgagt atgtccgggg taaactcgcc 600
gcctatatga acgatctgcg cggcctgggc gtcgccggat ttcggatcga tgccgccaag 660
cacatggata ccaacgacat caacaatatc gttggccgcc tgcccaacgc gccctacatc 720
taccaggaag tgatcgacca gggcggcgag ccaattaccg ccggcgaata cttccagaat 780
ggcgatgtga ccgagttcaa gtacagccgc gagatctcgc gcatgttcaa aaccggccag 840
ctgacccata tgagccagtt cggcactgcc tggggcttca tgtccagcga cctggcagta 900
gttttcaccg ataaccacga caaccagcgc ggtcacggcg gcgccggcga tgtcttgacc 960
tacaaagatg gccagctgta caccctgggc aatatcttcg agctagcctg gccgtatggc 1020
tacccacagg tcatgtcgag ctacacgttc agcaacggcg accaggggcc gccatcgacc 1080
aatgtgtacg caaccacaac gcctgattgt ggcaacggcc gctgggtctg tgagcaccgc 1140
tggcgaggaa tcgccaacat ggtcgcgttc cgcaactaca ccgccccgac cttcagcacc 1200
agcaactggt ggagcaacgg caacaaccag atcgctttca gccgcgggac cctgggcttt 1260
gtggcgatca atcgggaagg tggcagcctg aaccgcacct tccaaaccgg cctgcccgtc 1320
ggcacctact gcgatgtcat tcacggcgat ttcaatgcca gcgccggcac ctgttccggc 1380
ccaactatcg ctgtcaacgg ctccggacag gcaaccatca cggtcaacgc gatggacgcg 1440
gtggcgatct acggcggagc caggctcgcc actccggcca gtgtcaacgt gacattcaac 1500
gaaaacgcca cgaccacctg ggggcagaat gtgtatatcg tcggcaacgt cgccgccctg 1560
ggcagctgga acgcaggcag cgcggtctta ctctcctccg ctaactaccc aatctggagc 1620
aagaccatcg ccctgccagc caacaccgcc attgagtaca agtacatcaa aaaggatggc 1680
gcgggcaatg tggtgtggga aagcggcgcc aaccgcgtct ttaccacccc cggcagcggc 1740
agtgccacgc gcaacgatac ctggaaatag 1770
<210>124
<211>589
<212>PRT
<213>环境的
<400>124
Met Pro Gln Ala Ile Arg Thr Phe Ser Arg Trp Thr Leu Phe Gly Leu
1 5 10 15
Ile Gly Val Phe Leu Leu Gly Leu Val Phe Ser Val Pro Pro Arg Ala
20 25 30
Ile Gln Ala Gln Thr Thr Pro Ala Arg Thr Val Met Val His Leu Phe
35 40 45
Glu Trp Lys Trp Thr Asp Ile Ala Lys Glu Cys Glu Asn Phe Leu Gly
50 55 60
Pro Lys Gly Phe Ala Ala Ile Gln Val Ser Pro Pro Gln Glu His Val
65 70 75 80
Gln Gly Ser Gln Trp Trp Thr Arg Tyr Gln Pro Val Ser Tyr Lys Ile
85 90 95
Glu Ser Arg Ser Gly Thr Arg Ala Glu Phe Ala Asn Met Val Ser Arg
100 105 110
Cys Lys Ala Val Gly Val Asp Ile Tyr Val Asp Ala Val Ile Asn His
115 120 125
Met Thr Thr Val Gly Ser Gly Thr Gly Met Ala Gly Ser Thr Tyr Thr
130 135 140
Ser Tyr Thr Tyr Pro Gly Leu Tyr Gln Thr Gln Asp Phe His His Cys
145 150 155 160
Gly Arg Asn Gly Asn Asp Asp Ile Ser Ser Tyr Gly Asp Arg Trp Glu
165 170 175
Val Gln Asn Cys Glu Leu Leu Asn Leu Ala Asp Leu Asn Thr Gly Ala
180 185 190
Glu Tyr Val Arg Gly Lys Leu Ala Ala Tyr Met Asn Asp Leu Arg Gly
195 200 205
Leu Gly Val Ala Gly Phe Arg Ile Asp Ala Ala Lys His Met Asp Thr
210 215 220
Asn Asp Ile Asn Asn Ile Val Gly Arg Leu Pro Asn Ala Pro Tyr Ile
225 230 235 240
Tyr Gln Glu Val Ile Asp Gln Gly Gly Glu Pro Ile Thr Ala Gly Glu
245 250 255
Tyr Phe Gln Asn Gly Asp Val Thr Glu Phe Lys Tyr Ser Arg Glu Ile
260 265 270
Ser Arg Met Phe Lys Thr Gly Gln Leu Thr His Met Ser Gln Phe Gly
275 280 285
Thr Ala Trp Gly Phe Met Ser Ser Asp Leu Ala Val Val Phe Thr Asp
290 295 300
Asn His Asp Asn Gln Arg Gly His Gly Gly Ala Gly Asp Val Leu Thr
305 310 315 320
Tyr Lys Asp Gly Gln Leu Tyr Thr Leu Gly Asn Ile Phe Glu Leu Ala
325 330 335
Trp Pro Tyr Gly Tyr Pro Gln Val Met Ser Ser Tyr Thr Phe Ser Asn
340 345 350
Gly Asp Gln Gly Pro Pro Ser Thr Asn Val Tyr Ala Thr Thr Thr Pro
355 360 365
Asp Cys Gly Asn Gly Arg Trp Val Cys Glu His Arg Trp Arg Gly Ile
370 375 380
Ala Asn Met Val Ala Phe Arg Asn Tyr Thr Ala Pro Thr Phe Ser Thr
385 390 395 400
Ser Asn Trp Trp Ser Asn Gly Asn Asn Gln Ile Ala Phe Ser Arg Gly
405 410 415
Thr Leu Gly Phe Val Ala Ile Asn Arg Glu Gly Gly Ser Leu Asn Arg
420 425 430
Thr Phe Gln Thr Gly Leu Pro Val Gly Thr Tyr Cys Asp Val Ile His
435 440 445
Gly Asp Phe Asn Ala Ser Ala Gly Thr Cys Ser Gly Pro Thr Ile Ala
450 455 460
Val Asn Gly Ser Gly Gln Ala Thr Ile Thr Val Asn Ala Met Asp Ala
465 470 475 480
Val Ala Ile Tyr Gly Gly Ala Arg Leu Ala Thr Pro Ala Ser Val Asn
485 490 495
Val Thr Phe Asn Glu Asn Ala Thr Thr Thr Trp Gly Gln Asn Val Tyr
500 505 510
Ile Val Gly Asn Val Ala Ala Leu Gly Ser Trp Asn Ala Gly Ser Ala
515 520 525
Val Leu Leu Ser Ser Ala Asn Tyr Pro Ile Trp Ser Lys Thr Ile Ala
530 535 540
Leu Pro Ala Asn Thr Ala Ile Glu Tyr Lys Tyr Ile Lys Lys Asp Gly
545 550 555 560
Ala Gly Asn Val Val Trp Glu Ser Gly Ala Asn Arg Val Phe Thr Thr
565 570 575
Pro Gly Ser Gly Ser Ala Thr Arg Asn Asp Thr Trp Lys
580 585
<210>125
<211>1395
<212>DNA
<213>环境的
<400>125
gtggtgcaca tgaagttgaa gtaccttgcc ttagttttgt tggctgtggc ttcgataggc 60
ctactctcga ctccagtggg tgctgccaag tactccgaac tcgaagaggg cggtgttata 120
atgcaggcct tctactggga tgttcccgga gggggaatct ggtgggacac cataagacag 180
aaaatcccgg agtggtacga cgctggaatc tcggcgatat ggattcctcc agctagcaaa 240
gggatgggcg gtggttattc catgggctac gatccctacg atttctttga cctcggcgag 300
tactatcaga agggaacagt tgagacgcgc ttcggctcaa aggaggaact ggtgaacatg 360
ataaacaccg cacactccta tggcataaag gtgatagcgg acatagtcat aaaccaccgc 420
gccggtggag accttgagtg gaaccccttt gtaaacaact atacttggac agacttctcc 480
aaggtcgcct ccggtaaata cacggccaac taccttgact tccacccaaa cgaggtcaag 540
tgctgcgatg agggtacatt tggtgacttt ccggacatcg cccacgagaa gagctgggat 600
cagtactggc tctgggcaag caatgagagc tacgccgcat atctccggag catagggatc 660
gatgcatggc gtttcgacta cgtcaaaggt tacggagcgt gggttgttaa tgactggctc 720
agctggtggg gaggctgggc cgttggagag tactgggaca cgaacgttga tgcactcctt 780
aactgggcat acgacagcgg tgccaaggtc tttgacttcc cgctctacta caagatggac 840
gaagcctttg acaacaccaa catccccgct ttggtttacg ccctccagaa cggaggaaca 900
gtcgtttccc gcgatccctt caaggcagta actttcgttg ccaaccacga tacagatata 960
atctggaaca agtatccggc ttatgcgttc atccttacct atgagggaca gcctgttata 1020
ttttaccgcg actacgagga gtggctcaac aaggataagc ttaacaacct tatctggata 1080
cacgagcacc ttgccggagg aagtaccaag atcctctact acgataacga tgagctaata 1140
ttcatgaggg agggctacgg gagcaagccg ggcctcataa cctacataaa cctcggaaac 1200
gactgggccg agcgctgggt gaacgtcggc tcaaagtttg ccggctacac aatccatgaa 1260
tacacaggca atctcggtgg ctgggttgac aggtgggttc agtacgatgg atgggttaaa 1320
ctgacggcac ctcctcatga tccagccaac ggatattacg gctactcagt ctggagctac 1380
gcaggcgtcg gatga 1395
<210>126
<211>464
<212>PRT
<213>环境的
<400>126
Val Val His Met Lys Leu Lys Tyr Leu Ala Leu Val Leu Leu Ala Val
1 5 10 15
Ala Ser Ile Gly Leu Leu Ser Thr Pro Val Gly Ala Ala Lys Tyr Ser
20 25 30
Glu Leu Glu Glu Gly Gly Val Ile Met Gln Ala Phe Tyr Trp Asp Val
35 40 45
Pro Gly Gly Gly Ile Trp Trp Asp Thr Ile Arg Gln Lys Ile Pro Glu
50 55 60
Trp Tyr Asp Ala Gly Ile Ser Ala Ile Trp Ile Pro Pro Ala Ser Lys
65 70 75 80
Gly Met Gly Gly Gly Tyr Ser Met Gly Tyr Asp Pro Tyr Asp Phe Phe
85 90 95
Asp Leu Gly Glu Tyr Tyr Gln Lys Gly Thr Val Glu Thr Arg Phe Gly
100 105 110
Ser Lys Glu Glu Leu Val Asn Met Ile Asn Thr Ala His Ser Tyr Gly
115 120 125
Ile Lys Val Ile Ala Asp Ile Val Ile Asn His Arg Ala Gly Gly Asp
130 135 140
Leu Glu Trp Asn Pro Phe Val Asn Asn Tyr Thr Trp Thr Asp Phe Ser
145 150 155 160
Lys Val Ala Ser Gly Lys Tyr Thr Ala Asn Tyr Leu Asp Phe His Pro
165 170 175
Asn Glu Val Lys Cys Cys Asp Glu Gly Thr Phe Gly Asp Phe Pro Asp
180 185 190
Ile Ala His Glu Lys Ser Trp Asp Gln Tyr Trp Leu Trp Ala Ser Asn
195 200 205
Glu Ser Tyr Ala Ala Tyr Leu Arg Ser Ile Gly Ile Asp Ala Trp Arg
210 215 220
Phe Asp Tyr Val Lys Gly Tyr Gly Ala Trp Val Val Asn Asp Trp Leu
225 230 235 240
Ser Trp Trp Gly Gly Trp Ala Val Gly Glu Tyr Trp Asp Thr Asn Val
245 250 255
Asp Ala Leu Leu Asn Trp Ala Tyr Asp Ser Gly Ala Lys Val Phe Asp
260 265 270
Phe Pro Leu Tyr Tyr Lys Met Asp Glu Ala Phe Asp Asn Thr Asn Ile
275 280 285
Pro Ala Leu Val Tyr Ala Leu Gln Asn Gly Gly Thr Val Val Ser Arg
290 295 300
Asp Pro Phe Lys Ala Val Thr Phe Val Ala Asn His Asp Thr Asp Ile
305 310 315 320
Ile Trp Asn Lys Tyr Pro Ala Tyr Ala Phe Ile Leu Thr Tyr Glu Gly
325 330 335
Gln Pro Val Ile Phe Tyr Arg Asp Tyr Glu Glu Trp Leu Asn Lys Asp
340 345 350
Lys Leu Asn Asn Leu Ile Trp Ile His Glu His Leu Ala Gly Gly Ser
355 360 365
Thr Lys Ile Leu Tyr Tyr Asp Asn Asp Glu Leu Ile Phe Met Arg Glu
370 375 380
Gly Tyr Gly Ser Lys Pro Gly Leu Ile Thr Tyr Ile Asn Leu Gly Asn
385 390 395 400
Asp Trp Ala Glu Arg Trp Val Asn Val Gly Ser Lys Phe Ala Gly Tyr
405 410 415
Thr Ile His Glu Tyr Thr Gly Asn Leu Gly Gly Trp Val Asp Arg Trp
420 425 430
Val Gln Tyr Asp Gly Trp Val Lys Leu Thr Ala Pro Pro His Asp Pro
435 440 445
Ala Asn Gly Tyr Tyr Gly Tyr Ser Val Trp Ser Tyr Ala Gly Val Gly
450 455 460
<210>127
<211>1848
<212>DNA
<213>环境的
<400>127
gtgtgcatga attatttgaa aaaagtgtgg ttgtattacg ctatcgtcgc taccttaatc 60
atttactttc ttacgccctt ttcaactgca caagccaaca ctgcaccagt caacggaacg 120
atgatgcaat atttcgaatg ggatttaccg aatgatggca cactttggac gaaagtaaaa 180
aacgaagcaa gcagtctttc ttctttaggt attactgcgt tatggttacc acctgcatac 240
aaaggaacga gccaagggga tgtcgggtat ggcgtgtacg atttgtatga cttaggagaa 300
tttaatcaaa aagggacgat tcgaacgaaa tacggaacaa aaacgcaata tttacaagcc 360
attcaagcgg caaaaagcgc tggcatgcaa gtatacgctg atgtcgtatt taatcacaag 420
gcgggggcag atagtacaga atgggttgac gcagtcgaag tgaatccttc taatcgaaac 480
caagaaacat ctggcacata tcaaattcaa gcatggacaa aatttgattt ccctggccgt 540
gggaacacat actcaagctt taaatggcga tggtatcatt ttgacggtac ggattgggat 600
gaaagccgaa aactaaatcg tatttacaaa tttcgtggca caggaaaagc atgggattgg 660
gaagtagaca cagagaacgg aaactatgac tacttaatgt ttgctgattt agatatggat 720
caccctgaag tcgtgacaga gctaaaaaac tggggaacat ggtacgtcaa tacgacaaat 780
gtcgatgggt ttcgcttaga tgcagtaaag catattaaat atagcttctt cccagattgg 840
ttaacacatg tgcgttcaca aacacgaaaa aatctttttg cagtaggaga attttggagc 900
tacgatgtca ataaactgca taactacatt acaaaaacaa gtggaaccat gtcgttattt 960
gatgcgccac ttcataacaa cttttacact gcttcaaaat ctagcgggta ttttgacatg 1020
cgctatttgt taaataatac gttgatgaaa gaccagcctt ctcttgcggt cacactcgtt 1080
gataatcatg acacgcaacc gggacaatct ttacaatcat gggtagagcc ttggtttaag 1140
ccgcttgctt atgcctttat tttgacaaga caagaaggat atccttgcgt attttacggc 1200
gactattacg gcatccctaa atacaacatt ccgggattga aaagtaaaat cgatccgctt 1260
ctcattgccc gtagagacta cgcatacgga acacaacgtg attatattga ccatcaagac 1320
attattggat ggacacggga aggaattgac tcaaaaccga actctggact tgcggcttta 1380
attactgacg gccctggtgg aagtaaatgg atgtatgtag gtaaaaagca tgctggaaaa 1440
gtgttttacg atctcactgg aaatcgaagc gatacggtaa cgattaatgc agacggctgg 1500
ggagagttta aagtaaacgg tggctccgtt tccatttggg ttgccaaaac atcacaagtc 1560
acgtttaccg tcaacaatgc gacaacgata agcggacaaa atgtgtatgt cgttggtaac 1620
attccagagc tcggaaattg gaacacagca aacgcaatca aaatgacccc atcttcttat 1680
ccaacgtgga aagcaaccat tgctcttcca caaggaaaag ccattgaatt taaatttatt 1740
aaaaaagacc aatcgggaaa tgttgtttgg gaaagcattc caaaccgaac atacaccgtt 1800
ccatttttat caacaggctc atatacagct agttggaatg taccttaa 1848
<210>128
<211>615
<212>PRT
<213>环境的
<400>128
Val Cys Met Asn Tyr Leu Lys Lys Val Trp Leu Tyr Tyr Ala Ile Val
1 5 10 15
Ala Thr Leu Ile Ile Tyr Phe Leu Thr Pro Phe Ser Thr Ala Gln Ala
20 25 30
Asn Thr Ala Pro Val Asn Gly Thr Met Met Gln Tyr Phe Glu Trp Asp
35 40 45
Leu Pro Asn Asp Gly Thr Leu Trp Thr Lys Val Lys Asn Glu Ala Ser
50 55 60
Ser Leu Ser Ser Leu Gly Ile Thr Ala Leu Trp Leu Pro Pro Ala Tyr
65 70 75 80
Lys Gly Thr Ser Gln Gly Asp Val Gly Tyr Gly Val Tyr Asp Leu Tyr
85 90 95
Asp Leu Gly Glu Phe Asn Gln Lys Gly Thr Ile Arg Thr Lys Tyr Gly
100 105 110
Thr Lys Thr Gln Tyr Leu Gln Ala Ile Gln Ala Ala Lys Ser Ala Gly
115 120 125
Met Gln Val Tyr Ala Asp Val Val Phe Asn His Lys Ala Gly Ala Asp
130 135 140
Ser Thr Glu Trp Val Asp Ala Val Glu Val Asn Pro Ser Asn Arg Asn
145 150 155 160
Gln Glu Thr Ser Gly Thr Tyr Gln Ile Gln Ala Trp Thr Lys Phe Asp
165 170 175
Phe Pro Gly Arg Gly Asn Thr Tyr Ser Ser Phe Lys Trp Arg Trp Tyr
180 185 190
His Phe Asp Gly Thr Asp Trp Asp Glu Ser Arg Lys Leu Asn Arg Ile
195 200 205
Tyr Lys Phe Arg Gly Thr Gly Lys Ala Trp Asp Trp Glu Val Asp Thr
210 215 220
Glu Asn Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Met Phe Ala Asp Leu Asp Met Asp
225 230 235 240
His Pro Glu Val Val Thr Glu Leu Lys Asn Trp Gly Thr Trp Tyr Val
245 250 255
Asn Thr Thr Asn Val Asp Gly Phe Arg Leu Asp Ala Val Lys His Ile
260 265 270
Lys Tyr Ser Phe Phe Pro Asp Trp Leu Thr His Val Arg Ser Gln Thr
275 280 285
Arg Lys Asn Leu Phe Ala Val Gly Glu Phe Trp Ser Tyr Asp Val Asn
290 295 300
Lys Leu His Asn Tyr Ile Thr Lys Thr Ser Gly Thr Met Ser Leu Phe
305 310 315 320
Asp Ala Pro Leu His Asn Asn Phe Tyr Thr Ala Ser Lys Ser Ser Gly
325 330 335
Tyr Phe Asp Met Arg Tyr Leu Leu Asn Asn Thr Leu Met Lys Asp Gln
340 345 350
Pro Ser Leu Ala Val Thr Leu Val Asp Asn His Asp Thr Gln Pro Gly
355 360 365
Gln Ser Leu Gln Ser Trp Val Glu Pro Trp Phe Lys Pro Leu Ala Tyr
370 375 380
Ala Phe Ile Leu Thr Arg Gln Glu Gly Tyr Pro Cys Val Phe Tyr Gly
385 390 395 400
Asp Tyr Tyr Gly Ile Pro Lys Tyr Asn Ile Pro Gly Leu Lys Ser Lys
405 410 415
Ile Asp Pro Leu Leu Ile Ala Arg Arg Asp Tyr Ala Tyr Gly Thr Gln
420 425 430
Arg Asp Tyr Ile Asp His Gln Asp Ile Ile Gly Trp Thr Arg Glu Gly
435 440 445
Ile Asp Ser Lys Pro Asn Ser Gly Leu Ala Ala Leu Ile Thr Asp Gly
450 455 460
Pro Gly Gly Ser Lys Trp Met Tyr Val Gly Lys Lys His Ala Gly Lys
465 470 475 480
Val Phe Tyr Asp Leu Thr Gly Asn Arg Ser Asp Thr Val Thr Ile Asn
485 490 495
Ala Asp Gly Trp Gly Glu Phe Lys Val Asn Gly Gly Ser Val Ser Ile
500 505 510
Trp Val Ala Lys Thr Ser Gln Val Thr Phe Thr Val Asn Asn Ala Thr
515 520 525
Thr Ile Ser Gly Gln Asn Val Tyr Val Val Gly Asn Ile Pro Glu Leu
530 535 540
Gly Asn Trp Asn Thr Ala Asn Ala Ile Lys Met Thr Pro Ser Ser Tyr
545 550 555 560
Pro Thr Trp Lys Ala Thr Ile Ala Leu Pro Gln Gly Lys Ala Ile Glu
565 570 575
Phe Lys Phe Ile Lys Lys Asp Gln Ser Gly Asn Val Val Trp Glu Ser
580 585 590
Ile Pro Asn Arg Thr Tyr Thr Val Pro Phe Leu Ser Thr Gly Ser Tyr
595 600 605
Thr Ala Ser Trp Asn Val Pro
610 615
<210>129
<211>1854
<212>DNA
<213>环境的
<400>129
atgcgttgcc gccgtggcag ggacgggtgt tggtgcgggc ggcgtaatgc gctgccgcga 60
cacccgcgtg aacaaaataa tatgaattat ttgaatagga tgggggtgtc aagaatgaca 120
aaatctcgag agttgcggtg ttcatggaaa gtatttgttg ttgggtgcct gttgtggatg 180
gcttggggat cttccgcgtc cgccggcgta ttgatgcaag gcttctactg ggacgccagt 240
accgggacca gtgattcgtg gtggacgcat ttggccaagc aagccaacgg tctaaaacgg 300
gcggggttca ccgccgtatg gattcctccg gtgcttaaag gggcttcagg gggctattcc 360
aacgggtacg atccctttga cgactatgat atcggaagca aggaccagaa aggtaccgtg 420
gcgacgcgat gggggacgcg agaagaactg caacgtgccg tggccgtgat gcgcgcgaac 480
ggtctggatg tgtatgtgga tctggtgctg aaccaccgca acggggacga cgggaattgg 540
aattttcatt acaaagatgc gtacggcaaa gtgggttacg ggcggtttca aaaggggttt 600
tacgattttc accccaacta caacattcag gatgccaatg ttcccaacga ggattccagc 660
ttcgggcgcg atttagccca tgacaatccg tatgtggccg atggactgaa ggctgcaggc 720
gattggctga ccaaagccct cgatgttcag ggatatcgtc tggattacgt gaaaggcatc 780
agctacacct tcctgaaaag ttatctgtcc tatggggcca tgaacggaaa atttgccgtc 840
ggtgagtact gggatgccaa ccgggatacg ttgaactggt gggcgaacac ggcgatggaa 900
gggcgggccc atgtgtttga ttttgcgttg cgcgaggagc tgaaaaacat gtgcaatgcg 960
gacgggtact acgacatgcg tcgattggac cacgcgggtc tggtcggaat cgacccgtgg 1020
aaggcggtga cgtttgtcga aaaccatgat acggatcggc acgaccccat ctacaataac 1080
aagcatttgg cgtatgccta catcttgacg tcggaagggt atccgacggt gttctggaag 1140
gattactacc aatacggaat gaagccgatc atcgacaacc tcatttggat ccacgaacac 1200
attgcgtacg gaacgaccca agagcgttgg aaagacgaag atgtctttgt gtatgagcgg 1260
accggaggca agcggctatt ggtggggctt aacgacaatc gcgccaccag caaaacggtc 1320
accgtacaga ccggctttgg tgccaacgtg gccttgcacg actacaccgg caacggcccc 1380
gatctccgta ccgacgccta cggtcgggta accttgacca ttcctgcaaa cgggtacgtg 1440
gcctattccg ttccgggcat ctccggatcc tttgtgccgg tcgagaaaac cgtgacgcag 1500
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gtcgggcgga tatacgccaa ggcaaacaag ccggttacag cggaattgta ttgggatgcc 1620
aaagactgga cgacctccac gtcgattctc ctagaagtgc gttcggcttc gggaacgctc 1680
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tcggctaccg gatggtacgt cttttccatt cgaagctata acacgccttc gacgaaccca 1800
aagccggcct actggttaaa ggtaacgtat acggcgccgc aattgcttca gtaa 1854
<210>130
<211>617
<212>PRT
<213>环境的
<400>130
Met Arg Cys Arg Arg Gly Arg Asp Gly Cys Trp Cys Gly Arg Arg Asn
1 5 10 15
Ala Leu Pro Arg His Pro Arg Glu Gln Asn Asn Met Asn Tyr Leu Asn
20 25 30
Arg Met Gly Val Ser Arg Met Thr Lys Ser Arg Glu Leu Arg Cys Ser
35 40 45
Trp Lys Val Phe Val Val Gly Cys Leu Leu Trp Met Ala Trp Gly Ser
50 55 60
Ser Ala Ser Ala Gly Val Leu Met Gln Gly Phe Tyr Trp Asp Ala Ser
65 70 75 80
Thr Gly Thr Ser Asp Ser Trp Trp Thr His Leu Ala Lys Gln Ala Asn
85 90 95
Gly Leu Lys Arg Ala Gly Phe Thr Ala Val Trp Ile Pro Pro Val Leu
100 105 110
Lys Gly Ala Ser Gly Gly Tyr Ser Asn Gly Tyr Asp Pro Phe Asp Asp
115 120 125
Tyr Asp Ile Gly Ser Lys Asp Gln Lys Gly Thr Val Ala Thr Arg Trp
130 135 140
Gly Thr Arg Glu Glu Leu Gln Arg Ala Val Ala Val Met Arg Ala Asn
145 150 155 160
Gly Leu Asp Val Tyr Val Asp Leu Val Leu Asn His Arg Asn Gly Asp
165 170 175
Asp Gly Asn Trp Asn Phe His Tyr Lys Asp Ala Tyr Gly Lys Val Gly
180 185 190
Tyr Gly Arg Phe Gln Lys Gly Phe Tyr Asp Phe His Pro Asn Tyr Asn
195 200 205
Ile Gln Asp Ala Asn Val Pro Asn Glu Asp Ser Ser Phe Gly Arg Asp
210 215 220
Leu Ala His Asp Asn Pro Tyr Val Ala Asp Gly Leu Lys Ala Ala Gly
225 230 235 240
Asp Trp Leu Thr Lys Ala Leu Asp Val Gln Gly Tyr Arg Leu Asp Tyr
245 250 255
Val Lys Gly Ile Ser Tyr Thr Phe Leu Lys Ser Tyr Leu Ser Tyr Gly
260 265 270
Ala Met Asn Gly Lys Phe Ala Val Gly Glu Tyr Trp Asp Ala Asn Arg
275 280 285
Asp Thr Leu Asn Trp Trp Ala Asn Thr Ala Met Glu Gly Arg Ala Hps
290 295 300
Val Phe Asp Phe Ala Leu Arg Glu Glu Leu Lys Asn Met Cys Asn Ala
305 310 315 320
Asp Gly Tyr Tyr Asp Met Arg Arg Leu Asp His Ala Gly Leu Val Gly
325 330 335
Ile Asp Pro Trp Lys Ala Val Thr Phe Val Glu Asn His Asp Thr Asp
340 345 350
Arg His Asp Pro Ile Tyr Asn Asn Lys His Leu Ala Tyr Ala Tyr Ile
355 360 365
Leu Thr Ser Glu Gly Tyr Pro Thr Val Phe Trp Lys Asp Tyr Tyr Gln
370 375 380
Tyr Gly Met Lys Pro Ile Ile Asp Asn Leu Ile Trp Ile His Glu His
385 390 395 400
Ile Ala Tyr Gly Thr Thr Gln Glu Arg Trp Lys Asp Glu Asp Val Phe
405 410 415
Val Tyr Glu Arg Thr Gly Gly Lys Arg Leu Leu Val Gly Leu Asn Asp
420 425 430
Asn Arg Ala Thr Ser Lys Thr Val Thr Val Gln Thr Gly Phe Gly Ala
435 440 445
Asn Val Ala Leu His Asp Tyr Thr Gly Asn Gly Pro Asp Leu Arg Thr
450 455 460
Asp Ala Tyr Gly Arg Val Thr Leu Thr Ile Pro Ala Asn Gly Tyr Val
465 470 475 480
Ala Tyr Ser Val Pro Gly Ile Ser Gly Ser Phe Val Pro Val Glu Lys
485 490 495
Thr Val Thr Gln Glu Phe Ala Gly Ala Ser AspLeu Asp Ile Arg Pro
500 505 510
Ala Asp Asn Thr Gln Phe Val Gln Val Gly Arg Ile Tyr Ala Lys Ala
515 520 525
Asn Lys Pro Val Thr Ala Glu Leu Tyr Trp Asp Ala Lys Asp Trp Thr
530 535 540
Thr Ser Thr Ser Ile Leu Leu Glu Val Arg Ser Ala Ser Gly Thr Leu
545 550 555 560
Ile Thr Thr Lys Thr Val Thr Gln Leu Ser Ser Gln Gly Thr Arg Val
565 570 575
Ser Phe Thr Pro Ser Ala Thr Gly Trp Tyr Val Phe Ser Ile Arg Ser
580 585 590
Tyr Asn Thr Pro Ser Thr Asn Pro Lys Pro Ala Tyr Trp Leu Lys Val
595 600 605
Thr Tyr Thr Ala Pro Gln Leu Leu Gln
610 615
<210>131
<211>1881
<212>DNA
<213>环境的
<400>131
atgccgcagc tttacccatt gccgccgcgc tggcggcgcg cggcccggca gggcctggcc 60
gccttgacgc tggccaccac ggccctgggc atctcgacgg cccaggccca gagtgcaccg 120
cgcacggcct tcgtgcatct gttcgaatgg aagtggaccg acatcgcgcg cgagtgcgag 180
accttcctcg ggcccaaggg cttcgcggcg gtgcaggtgt cgcccccgaa cgagcacaac 240
tgggtgacca gcggtgatgg tgcaccttat ccgtggtgga tgcgctacca gccggtgagc 300
tacagcctgg accgcagccg cagcggcacg cgcgccgagt tccaggacat ggtcaaccga 360
tgcaatgccg tgggcgtggg catctacgtg gacgccgtga tcaatcacat gtccggcggc 420
acgggcggca cctcgagcgc tgggcgcagc tggagctatc acaactaccc tgggctctat 480
ggccccaacg acttccacca gccggtgtgc agcatcacca actacgggga tgcgaacaat 540
gtgcagcgtt gcgagctctc gggcttgcag gacctggaca ctgggagcgc ttatgtgcgc 600
ggcaagatcg ccgactatct ggtggatctg gtcaacatgg gggtcaaggg cttccgggtg 660
gatgcggcca agcacatcag cccgaccgac ctgggcgcca tcatcgatgc ggtcaacagc 720
cgcaccggcg cgaaccgccc tttctggttt ctggaggtga ttggcgcggc cggcgaggca 780
gtgcagccga accagtactt ctcgctcggc ggcggccagg tcaccgtgac cgagttcaac 840
tatgggaagc aaatcttcgg caagttcgcc ggtggcggcc gtctggccga gctgcgcagc 900
ttcggtgaaa cctggggcct gatgcccagc agcaaagcga ttgctttcat cgacaaccac 960
gacaagcagc gcggtcatgg cggcggtggc aactatctga cctaccacca tggctcgacc 1020
tacgatctgg ccaacatctt catgctggct tggccttatg gctacccggc gctgatgtcc 1080
agctatgcct tcaaccgcag cacggcctac gacacgagct ttggcccgcc acacgacagt 1140
ggtggcgcca cccgtggccc ctgggatggt ggcggcagcc agccggcctg cttcaaccag 1200
agcatcggtg gctgggtgtg tgagcaccgc tggcggggca tcgccaatat ggtggccttc 1260
cgcaacgcca cgctgcccaa ctggaccgtg accgactggt gggacaacgg caacaaccag 1320
atcgctttcg ggcggggtga caagggcttc gtggtgatca accgcgaaga cgccgcgctg 1380
acgcgcaact tcaagaccag cctgccagcc ggccagtact gcgatgtcat ctccggggac 1440
ttcaacaatg gtcagtgcac gggccatgtg gtgacggtcg atgccggcgg ctacgtgacg 1500
ctgacggccg ggcccaatgg tgcggcggcc atccacgtgg gcgcccgtct ggacggcgcc 1560
tctcagccgc cgacgaccgc ctcggtgacg ttcaacgcgt cggccgatac cttttgggga 1620
cagaacctgt tcgtcgtggg caaccacagc gcactgggca actggtcgcc ggcggccgcc 1680
aggccgatga cttggatttc cggttcgggc acgcgcggga actggcgcgc ggtgctcaat 1740
ttgccggcca ataccaccta ccaatacaag ttcatcaaga aggacggggc tggaaacgtg 1800
gtttgggagg gcggtggcaa tcgcgtcgtg accacgccgt ctgggggcgg atcggtgagc 1860
acgggcggca attggcagta g 1881
<210>132
<211>626
<212>PRT
<213>环境的
<400>132
Met Pro Gln Leu Tyr Pro Leu Pro Pro Arg Trp Arg Arg Ala Ala Arg
1 5 10 15
Gln Gly Leu Ala Ala Leu Thr Leu Ala Thr Thr Ala Leu Gly Ile Ser
20 25 30
Thr Ala Gln Ala Gln Ser Ala Pro Arg Thr Ala Phe Val His Leu Phe
35 40 45
Glu Trp Lys Trp Thr Asp Ile Ala Arg Glu Cys Glu Thr Phe Leu Gly
50 55 60
Pro Lys Gly Phe Ala Ala Val Gln Val Ser Pro Pro Asn Glu His Asn
65 70 75 80
Trp Val Thr Ser Gly Asp Gly Ala Pro Tyr Pro Trp Trp Met Arg Tyr
85 90 95
Gln Pro Val Ser Tyr Ser Leu Asp Arg Ser Arg Ser Gly Thr Arg Ala
100 105 110
Glu Phe Gln Asp Met Val Asn Arg Cys Asn Ala Val Gly Val Gly Ile
115 120 125
Tyr Val Asp Ala Val Ile Asn His Met Ser Gly Gly Thr Gly Gly Thr
130 135 140
Ser Ser Ala Gly Arg Ser Trp Ser Tyr His Asn Tyr Pro Gly Leu Tyr
145 150 155 160
Gly Pro Asn Asp Phe His Gln Pro Val Cys Ser Ile Thr Asn Tyr Gly
165 170 175
Asp Ala Asn Asn Val Gln Arg Cys Glu Leu Ser Gly Leu Gln Asp Leu
180 185 190
Asp Thr Gly Ser Ala Tyr Val Arg Gly Lys Ile Ala Asp Tyr Leu Val
195 200 205
Asp Leu Val Asn Met Gly Val Lys Gly Phe Arg Val Asp Ala Ala Lys
210 215 220
His Ile Ser Pro Thr Asp Leu Gly Ala Ile Ile Asp Ala Val Asn Ser
225 230 235 240
Arg Thr Gly Ala Asn Arg Pro Phe Trp Phe Leu Glu Val Ile Gly Ala
245 250 255
Ala Gly Glu Ala Val Gln Pro Asn Gln Tyr Phe Ser Leu Gly Gly Gly
260 265 270
Gln Val Thr Val Thr Glu Phe Asn Tyr Gly Lys Gln Ile Phe Gly Lys
275 280 285
Phe Ala Gly Gly Gly Arg Leu Ala Glu Leu Arg Ser Phe Gly Glu Thr
290 295 300
Trp Gly Leu Met Pro Ser Ser Lys Ala Ile Ala Phe Ile Asp Asn His
305 310 315 320
Asp Lys Gln Arg Gly His Gly Gly Gly Gly Asn Tyr Leu Thr Tyr His
325 330 335
His Gly Ser Thr Tyr Asp Leu Ala Asn Ile Phe Met Leu Ala Trp Pro
340 345 350
Tyr Gly Tyr Pro Ala Leu Met Ser Ser Tyr Ala Phe Asn Arg Ser Thr
355 360 365
Ala Tyr Asp Thr Ser Phe Gly Pro Pro His Asp Ser Gly Gly Ala Thr
370 375 380
Arg Gly Pro Trp Asp Gly Gly Gly Ser Gln Pro Ala Cys Phe Asn Gln
385 390 395 400
Ser Ile Gly Gly Trp Val Cys Glu His Arg Trp Arg Gly Ile Ala Asn
405 410 415
Met Val Ala Phe Arg Asn Ala Thr Leu Pro Asn Trp Thr Val Thr Asp
420 425 430
Trp Trp Asp Asn Gly Asn Asn Gln Ile Ala Phe Gly Arg Gly Asp Lys
435 440 445
Gly Phe Val Val Ile Asn Arg Glu Asp Ala Ala Leu Thr Arg Asn Phe
450 455 460
Lys Thr Ser Leu Pro Ala Gly Gln Tyr Cys Asp Val Ile Ser Gly Asp
465 470 475 480
Phe Asn Asn Gly Gln Cys Thr Gly His Val Val Thr Val Asp Ala Gly
485 490 495
Gly Tyr Val Thr Leu Thr Ala Gly Pro Asn Gly Ala Ala Ala Ile His
500 505 510
Val Gly Ala Arg Leu Asp Gly Ala Ser Gln Pro Pro Thr Thr Ala Ser
515 520 525
Val Thr Phe Asn Ala Ser Ala Asp Thr Phe Trp Gly Gln Asn Leu Phe
530 535 540
Val Val Gly Asn His Ser Ala Leu Gly Asn Trp Ser Pro Ala Ala Ala
545 550 555 560
Arg Pro Met Thr Trp Ile Ser Gly Ser Gly Thr Arg Gly Asn Trp Arg
565 570 575
Ala Val Leu Asn Leu Pro Ala Asn Thr Thr Tyr Gln Tyr Lys Phe Ile
580 585 590
Lys Lys Asp Gly Ala Gly Asn Val Val Trp Glu Gly Gly Gly Asn Arg
595 600 605
Val Val Thr Thr Pro Ser Gly Gly Gly Ser Val Ser Thr Gly Gly Asn
610 615 620
Trp Gln
625
<210>133
<211>1638
<212>DNA
<213>环境的
<400>133
atgaataatg tgaaaaaagt atggttgtat tattctataa ttgctacctt agttatttcc 60
tttttcacac ctttttcaac agcacaagct aatactgcac ctgtcaacgg aacaatgatg 120
caatatttcg aatgggattt accgaatgat gggacgcttt ggacgaaagt aaaaaatgaa 180
gctaccaatc tttcttcgct aggtattaca gcgttatggc tccctccagc atataaagga 240
acgagccaaa gcgatgtcgg atatggcgtg tacgatttat atgaccttgg ggaatttaat 300
caaaaaggga cgatccgaac gaaatacgga acaaaagcac aatatattca agccatccaa 360
gctgccaaag ccgcagggat gcaagtatat gcagatgttg tatttaatca taaggcgggg 420
gctgacggca cagaatttgt cgatgcagtt gaggtaaacc cttctaatcg aaatcaagaa 480
acatctggca catatcaaat tcaagcatgg acaaaatttg attttcctgg tcgtggaaac 540
acatactcca gcttcaaatg gcgctggtat cattttgacg gtaccgattg ggatgaaagt 600
cgtaaattaa atcgtattta caaattccgc ggtacaggaa aagcgtggga ctgggaagtc 660
gatacagaaa acggaaacta tgattattta atgttcgctg atttagatat ggatcaccct 720
gaagttgtga cagagttaaa aaactgggga aaatggtatg taaatacgac aaatgtagac 780
ggatttcgtt tggatgccgt aaaacatatt aaatacagct ttttccctga ctggctaaca 840
tatgtacgta atcaaacagg aaaaaattta tttgctgttg gggaattttg gagctatgac 900
gtcaataagc tgcataacta cattacaaaa acaaatggat cgatgtcgtt atttgatgca 960
cctttgcata acaactttta tatcgcttcc aaatcgagtg gatattttga catgcgttat 1020
ttattgaata atacattaat gaaagatcaa ccttcactcg ctgtaacact tgtcgataac 1080
catgatacac aaccaggtca atctttacaa tcatgggtag aagcttggtt taaaccgctt 1140
gcttacgcct ttattttaac aagacaagag gggtatcctt gcgtatttta cggtgactat 1200
tacggaatcc cgaaatacaa tattccggga ttaaaaagta aaattgatcc gcttttaatt 1260
gctcgtcgtg attatgctta tggaacacaa cgtgattaca ttgatcatca agacattatc 1320
ggatggacac gagaaggcat tgatgcaaaa ccgaactctg gacttgcggc tttaattacc 1380
gacggccctg gcggaagtaa atggatgtat gtcggtaaaa aacatgctgg gaaagtgttt 1440
tatgatttaa ctggaaatcg aagtgacaca gtaacgatta atgcggacgg ttggggagaa 1500
tttaaagtaa acggcggctc cgtttcgatt tgggtggcta aaacatcaaa cgtcacattt 1560
acagtcaata acgccacaac aacaagtgga caaaacgtat atgttgttgg caacattcca 1620
gagctaggca attctttg 1638
<210>134
<211>546
<212>PRT
<213>环境的
<400>134
Met Asn Asn Val Lys Lys Val Trp Leu Tyr Tyr Ser Ile Ile Ala Thr
1 5 10 15
Leu Val Ile Ser Phe Phe Thr Pro Phe Ser Thr Ala Gln Ala Asn Thr
20 25 30
Ala Pro Val Asn Gly Thr Met Met Gln Tyr Phe Glu Trp Asp Leu Pro
35 40 45
Asn Asp Gly Thr Leu Trp Thr Lys Val Lys Asn Glu Ala Thr Asn Leu
50 55 60
Ser Ser Leu Gly Ile Thr Ala Leu Trp Leu Pro Pro Ala Tyr Lys Gly
65 70 75 80
Thr Ser Gln Ser Asp Val Gly Tyr Gly Val Tyr Asp Leu Tyr Asp Leu
85 90 95
Gly Glu Phe Asn Gln Lys Gly Thr Ile Arg Thr Lys Tyr Gly Thr Lys
100 105 110
Ala Gln Tyr Ile Gln Ala Ile Gln Ala Ala Lys Ala Ala Gly Met Gln
115 120 125
Val Tyr Ala Asp Val Val Phe Asn His Lys Ala Gly Ala Asp Gly Thr
130 135 140
Glu Phe Val Asp Ala Val Glu Val Asn Pro Ser Asn Arg Asn Gln Glu
145 150 155 160
Thr Ser Gly Thr Tyr Gln Ile Gln Ala Trp Thr Lys Phe Asp Phe Pro
165 170 175
Gly Arg Gly Asn Thr Tyr Ser Ser Phe Lys Trp Arg Trp Tyr His Phe
180 185 190
Asp Gly Thr Asp Trp Asp Glu Ser Arg Lys Leu Asn Arg Ile Tyr Lys
195 200 205
Phe Arg Gly Thr Gly Lys Ala Trp Asp Trp Glu Val Asp Thr Glu Asn
210 215 220
Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Met Phe Ala Asp Leu Asp Met Asp His Pro
225 230 235 240
Glu Val Val Thr Glu Leu Lys Asn Trp Gly Lys Trp Tyr Val Asn Thr
245 250 255
Thr Asn Val Asp Gly Phe Arg Leu Asp Ala Val Lys His Ile Lys Tyr
260 265 270
Ser Phe Phe Pro Asp Trp Leu Thr Tyr Val Arg Asn Gln Thr Gly Lys
275 280 285
Asn Leu Phe Ala Val Gly Glu Phe Trp Ser Tyr Asp Val Asn Lys Leu
290 295 300
His Asn Tyr Ile Thr Lys Thr Asn Gly Ser Met Ser Leu Phe Asp Ala
305 310 315 320
Pro Leu His Asn Asn Phe Tyr Ile Ala Ser Lys Ser Ser Gly Tyr Phe
325 330 335
Asp Met Arg Tyr Leu Leu Asn Asn Thr Leu Met Lys Asp Gln Pro Ser
340 345 350
Leu Ala Val Thr Leu Val Asp Asn His Asp Thr Gln Pro Gly Gln Ser
355 360 365
Leu Gln Ser Trp Val Glu Ala Trp Phe Lys Pro Leu Ala Tyr Ala Phe
370 375 380
Ile Leu Thr Arg Gln Glu Gly Tyr Pro Cys Val Phe Tyr Gly Asp Tyr
385 390 395 400
Tyr Gly Ile Pro Lys Tyr Asn Ile Pro Gly Leu Lys Ser Lys Ile Asp
405 410 415
Pro Leu Leu Ile Ala Arg Arg Asp Tyr Ala Tyr Gly Thr Gln Arg Asp
420 425 430
Tyr Ile Asp His Gln Asp Ile Ile Gly Trp Thr Arg Glu Gly Ile Asp
435 440 445
Ala Lys Pro Asn Ser Gly Leu Ala Ala Leu Ile Thr Asp Gly Pro Gly
450 455 460
Gly Ser Lys Trp Met Tyr Val Gly Lys Lys His Ala Gly Lys Val Phe
465 470 475 480
Tyr Asp Leu Thr Gly Asn Arg Ser Asp Thr Val Thr Ile Asn Ala Asp
485 490 495
Gly Trp Gly Glu Phe Lys Val Asn Gly Gly Ser Val Ser Ile Trp Val
500 505 510
Ala Lys Thr Ser Asn Val Thr Phe Thr Val Asn Asn Ala Thr Thr Thr
515 520 525
Ser Gly Gln Asn Val Tyr Val Val Gly Asn Ile Pro Glu Leu Gly Asn
530 535 540
Ser Leu
545
<210>135
<211>1935
<212>DNA
<213>环境的
<400>135
gtgacaggca ccccgtcttt atacattcct ccacataaaa taaccataca gctttcaaat 60
ttgttgaaat gtataaaaat aaaaaatagt attgtaagcg ttaacatccg tcattataat 120
aacttcaaac gcgtttatgt tttaatgcaa acgtttgcat cctcatttta tttaaagaaa 180
ggatgtgtgt gcatgaatta tttgaaaaaa gtgtggttgt attacgctat cgtcgctacc 240
ttaatcattt cctttcttac gcccttttca actgcacaag ccaacactgc accagtcaac 300
ggaacgatga tgcaatattt cgaatgggat ttaccgaatg atggcacact ttggacgaaa 360
gtaaaaaacg aagcaagcag cctttcttct ttaggtatta ctgcgttatg gttaccacct 420
gcatacaaag gaacgagcca aggggatgtc gggtatggcg tgtacgattt gtatgactta 480
ggagaattta atcaaaaagg gacgattcga acgaaatacg gaacaaaaac gcaatattta 540
caagccattc aagcggcaaa aagcgctggc atgcaagtat acgctgatgt cgtatttaat 600
cacaaggcgg gggcagatag tacagaatgg gttgacgcag tcgaagtgaa tccttctaat 660
cgaaaccaag aaacatctgg cacatatcaa attcaagcat ggacaaaatt tgatttccct 720
gaccgtggga acacatactc aagctttaaa tggcgctggt atcattttga cggtacggat 780
tgggatgaaa gtcgaaaact aaatcgcatt tacaaatttc gtggcacagg aaaagcatgg 840
gattgggaag tagacacaga gaacggaaac tatgactact taatgtttgc tgatttagat 900
atggatcacc ctgaagtcgt gacagagcta aaaaactggg gaacatggta cgtcaatacg 960
acaaatgtcg atgggtttcg cttagatgca gtaaagcata ttaaatatag ctttttccca 1020
gattggttaa catatgtgcg ctcacaaaca caaaaaaatc tgtttgcagt aggagaattt 1080
tggagctacg atgtcaataa actgcataac tacattacaa aaacaagtgg aaccatgtcg 1140
ttatttgatg cgccacttca taacaacttt tacactgctt caaaatctag cgggtatttt 1200
gacatgcgct atttgttaaa taatacgttg atgaaagacc agccttctct tgcggtcaca 1260
ctcgttgata atcatgacac gcaaccggga caatctttac aatcatgggt agagccttgg 1320
tttaagccgc ttgcttatgc ctttattttg acaagacaag aaggatatcc ttgcgtattt 1380
tacggcgact attacggcat ccctaaatac aatattccgg gattgaaaag taaaatcgat 1440
ccgcttctca ttgcccgtag agactacgca tacggaacac aacgtgatta tattgaccat 1500
caagacatta ttggatggac acgggaagga attgactcaa aaccgaactc tggacttgcg 1560
gctttaatta ctgacggtcc tggtggaagt aaatggatgt atgtaggtaa aaagcatgct 1620
ggaaaagtgt tttacgatct cactggaaat cgaagcgata cggtaacgat taatgcagac 1680
ggctggggag agtttaaagt aaacggtggc tccgtttcca tttgggttgc caaaacatca 1740
caagtcacgt ttaccgtcaa caatgcgaca acgacaagcg gacaaaatgt gtatgtcgtt 1800
ggcaacattc cagagctcgg aaattggaac acagcaaacg caatcaaaat gaccccatct 1860
tcttatccaa cgtggaaaac aaccattgct cttccacaag gaaaagcaat tggcggcgta 1920
cgccatggcc cttga 1935
<210>136
<211>644
<212>PRT
<213>环境的
<400>136
Val Thr Gly Thr Pro Ser Leu Tyr Ile Pro Pro His Lys Ile Thr Ile
1 5 10 15
Gln Leu Ser Asn Leu Leu Lys Cys Ile Lys Ile Lys Asn Ser Ile Val
20 25 30
Ser Val Asn Ile Arg His Tyr Asn Asn Phe Lys Arg Val Tyr Val Leu
35 40 45
Met Gln Thr Phe Ala Ser Ser Phe Tyr Leu Lys Lys Gly Cys Val Cys
50 55 60
Met Asn Tyr Leu Lys Lys Val Trp Leu Tyr Tyr Ala Ile Val Ala Thr
65 70 75 80
Leu Ile Ile Ser Phe Leu Thr Pro Phe Ser Thr Ala Gln Ala Asn Thr
85 90 95
Ala Pro Val Asn Gly Thr Met Met Gln Tyr Phe Glu Trp Asp Leu Pro
100 105 110
Asn Asp Gly Thr Leu Trp Thr Lys Val Lys Asn Glu Ala Ser Ser Leu
115 120 125
Ser Ser Leu Gly Ile Thr Ala Leu Trp Leu Pro Pro Ala Tyr Lys Gly
130 135 140
Thr Ser Gln Gly Asp Val Gly Tyr Gly Val Tyr Asp Leu Tyr Asp Leu
145 150 155 160
Gly Glu Phe Asn Gln Lys Gly Thr Ile Arg Thr Lys Tyr Gly Thr Lys
165 170 175
Thr Gln Tyr Leu Gln Ala Ile Gln Ala Ala Lys Ser Ala Gly Met Gln
180 185 190
Val Tyr Ala Asp Val Val Phe Asn His Lys Ala Gly Ala Asp Ser Thr
195 200 205
Glu Trp Val Asp Ala Val Glu Val Asn Pro Ser Asn Arg Asn Gln Glu
210 215 220
Thr Ser Gly Thr Tyr Gln Ile Gln Ala Trp Thr Lys Phe Asp Phe Pro
225 230 235 240
Asp Arg Gly Asn Thr Tyr Ser Ser Phe Lys Trp Arg Trp Tyr His Phe
245 250 255
Asp Gly Thr Asp Trp Asp Glu Ser Arg Lys Leu Asn Arg Ile Tyr Lys
260 265 270
Phe Arg Gly Thr Gly Lys Ala Trp Asp Trp Glu Val Asp Thr Glu Asn
275 280 285
Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Met Phe Ala Asp Leu Asp Met Asp His Pro
290 295 300
Glu Val Val Thr Glu Leu Lys Asn Trp Gly Thr Trp Tyr Val Asn Thr
305 310 315 320
Thr Asn Val Asp Gly Phe Arg Leu Asp Ala Val Lys His Ile Lys Tyr
325 330 335
Ser Phe Phe Pro Asp Trp Leu Thr Tyr Val Arg Ser Gln Thr Gln Lys
340 345 350
Asn Leu Phe Ala Val Gly Glu Phe Trp Ser Tyr Asp Val Asn Lys Leu
355 360 365
His Asn Tyr Ile Thr Lys Thr Ser Gly Thr Met Ser Leu Phe Asp Ala
370 375 380
Pro Leu His Asn Asn Phe Tyr Thr Ala Ser Lys Ser Ser Gly Tyr Phe
385 390 395 400
Asp Met Arg Tyr Leu Leu Asn Asn Thr Leu Met Lys Asp Gln Pro Ser
405 410 415
Leu Ala Val Thr Leu Val Asp Asn His Asp Thr Gln Pro Gly Gln Ser
420 425 430
Leu Gln Ser Trp Val Glu Pro Trp Phe Lys Pro Leu Ala Tyr Ala Phe
435 440 445
Ile Leu Thr Arg Gln Glu Gly Tyr Pro Cys Val Phe Tyr Gly Asp Tyr
450 455 460
Tyr Gly Ile Pro Lys Tyr Asn Ile Pro Gly Leu Lys Ser Lys Ile Asp
465 470 475 480
Pro Leu Leu Ile Ala Arg Arg Asp Tyr Ala Tyr Gly Thr Gln Arg Asp
485 490 495
Tyr Ile Asp His Gln Asp Ile Ile Gly Trp Thr Arg Glu Gly Ile Asp
500 505 510
Ser Lys Pro Asn Ser Gly Leu Ala Ala Leu Ile Thr Asp Gly Pro Gly
515 520 525
Gly Ser Lys Trp Met Tyr Val Gly Lys Lys His Ala Gly Lys Val Phe
530 535 540
Tyr Asp Leu Thr Gly Asn Arg Ser Asp Thr Val Thr Ile Asn Ala Asp
545 550 555 560
Gly Trp Gly Glu Phe Lys Val Asn Gly Gly Ser Val Ser Ile Trp Val
565 570 575
Ala Lys Thr Ser Gln Val Thr Phe Thr Val Asn Asn Ala Thr Thr Thr
580 585 590
Ser Gly Gln Asn Val Tyr Val Val Gly Asn Ile Pro Glu Leu Gly Asn
595 600 605
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Trp Lys Thr Thr Ile Ala Leu Pro Gln Gly Lys Ala Ile Gly Gly Val
625 630 635 640
Arg His Gly Pro
<210>137
<211>1320
<212>DNA
<213>环境的
<400>137
gtgggacggg caggcttggc gcatcactcg aacacttccg ccaaggggac atacgggtca 60
cctctcgaac tgcgtccgga tcgccccgcc gtggccgggg cggtcgagct tgaagatgtc 120
cagcggggag ccgccgccga ggatcacccc ggcggcgtac tcgcccaggg cggggctcag 180
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gtcgaggagg aggtggccgt cggggctgtt ctcgtactgg cagacgcggg tctcgaccag 300
cggcgcgtcc ttcagggccg ggaaccggcg ggccacctcg gcccgggccg cttccagcag 360
ggccggggtg atcgtccgct cgcccgccgt gggatcgatg ggctcgcccc gggtgtcgtc 420
cgccaccttg aagccgcggt gctcgttgcc ggggatgccg tagtagatcc gctcgccgag 480
atcgacccag accggacagc cgccctcctg gaagcgcggg tcgcccggcg gcgtgccgaa 540
gaagaacacc tcctggcggg tgttgcggag gaaccgctca ccgatcacgt ccgggaacag 600
cccggccagc cagggaccgc aggcgaagac gtagaggtcg gccgcgagag tggagccgtc 660
cgaaaggtga agccgctcca agggccccgg gaccatggcg gcctgccggt actccccgcc 720
ctcgccctgg aacagctcca ccacggtccg gcaggcgcgc cgggcgaaca gggcgccggc 780
ttcctcctcg taccagatcg tgcggacgcc gtcgaaatcg acctggggga agcggctccg 840
ggcctccccc tgagacagct cggcgaccgg cagccccgcg tcctccagaa aaggaaggga 900
gtcgcggacg tagctgtcgt cctcgccgca catccagagg accccggtcc ttttgtacag 960
ccggtaaccg gactggactt cggcgtcccg ccagagctcg aaggagcggg cgacccactc 1020
cacgtacaga cggtcgggtc cgtaggcgcc gcggatgatc cgcgtctcgc caccggagct 1080
ggagcgggag tgccccggac cccaggcgtc caggagggtc acccgggctc cgcggcggag 1140
gagatgcagg gcggtccagc cgccgaaggc gccggcgccg acgacggcga tatggggatg 1200
ggagggcatg gcgggcgtaa ggttatcgca gcccgatcct tcgctggcat cccatctccg 1260
accggagtat cctggaaaat tcgaagaagg agatcgacat gcaatcgaac ggaaacgtga 1320
<210>138
<211>439
<212>PRT
<213>环境的
<400>138
Val Gly Arg Ala Gly Leu Ala His His Ser Asn Thr Ser Ala Lys Gly
1 5 10 15
Thr Tyr Gly Ser Pro Leu Glu Leu Arg Pro Asp Arg Pro Ala Val Ala
20 25 30
Gly Ala Val Glu Leu Glu Asp Val Gln Arg Gly Ala Ala Ala Glu Asp
35 40 45
His Pro Gly Gly Val Leu Ala Gln Gly Gly Ala Gln Leu Glu Ala Val
50 55 60
Ala Gly Ala Ala Ser Gln Glu Pro Asp Val Gly Gly Pro Arg Met Ala
65 70 75 80
Val Glu Glu Glu Val Ala Val Gly Ala Val Leu Val Leu Ala Asp Ala
85 90 95
Gly Leu Asp Gln Arg Arg Val Leu Gln Gly Arg Glu Pro Ala Gly His
100 105 110
Leu Gly Pro Gly Arg Phe Gln Gln Gly Arg Gly Asp Arg Pro Leu Ala
115 120 125
Arg Arg Gly Ile Asp Gly Leu Ala Pro Gly Val Val Arg His Leu Glu
130 135 140
Ala Ala Val Leu Val Ala Gly Asp Ala Val Val Asp Pro Leu Ala Glu
145 150 155 160
Ile Asp Pro Asp Arg Thr Ala Ala Leu Leu Glu Ala Arg Val Ala Arg
165 170 175
Arg Arg Ala Glu Glu Glu His Leu Leu Ala Gly Val Ala Glu Glu Pro
180 185 190
Leu Thr Asp His Val Arg Glu Gln Pro Gly Gln Pro Gly Thr Ala Gly
195 200 205
Glu Asp Val Glu Val Gly Arg Glu Ser Gly Ala Val Arg Lys Val Lys
210 215 220
Pro Leu Gln Gly Pro Arg Asp His Gly Gly Leu Pro Val Leu Pro Ala
225 230 235 240
Leu Ala Leu Glu Gln Leu His His Gly Pro Ala Gly Ala Pro Gly Glu
245 250 255
Gln Gly Ala Gly Phe Leu Leu Val Pro Asp Arg Ala Asp Ala Val Glu
260 265 270
Ile Asp Leu Gly Glu Ala Ala Pro Gly Leu Pro Leu Arg Gln Leu Gly
275 280 285
Asp Arg Gln Pro Arg Val Leu Gln Lys Arg Lys Gly Val Ala Asp Val
290 295 300
Ala Val Val Leu Ala Ala His Pro Glu Asp Pro Gly Pro Phe Val Gln
305 310 315 320
Pro Val Thr Gly Leu Asp Phe Gly Val Pro Pro Glu Leu Glu Gly Ala
325 330 335
Gly Asp Pro Leu His Val Gln Thr Val Gly Ser Val Gly Ala Ala Asp
340 345 350
Asp Pro Arg Leu Ala Thr Gly Ala Gly Ala Gly Val Pro Arg Thr Pro
355 360 365
Gly Val Gln Glu Gly His Pro Gly Ser Ala Ala Glu Glu Met Gln Gly
370 375 380
Gly Pro Ala Ala Glu Gly Ala Gly Ala Asp Asp Gly Asp Met Gly Met
385 390 395 400
Gly Gly His Gly Gly Arg Lys Val Ile Ala Ala Arg Ser Phe Ala Gly
405 410 415
Ile Pro Ser Pro Thr Gly Val Ser Trp Lys Ile Arg Arg Arg Arg Ser
420 425 430
Thr Cys Asn Arg Thr Glu Thr
435
<210>139
<211>1524
<212>DNA
<213>环境的
<400>139
atgaaaacat tcaaccttaa acccacactt ttacctttaa ctttgctgct gagttcgccg 60
gtattggcgg cacaaaatgg aactatgatg cagtatttcc attggtatgt gccaaatgac 120
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gcgctgtggt tgccaccagc atataaaggc gcaggtggta gcaacgacgt tggttacggt 240
gtttacgata tgtatgactt aggggagttt gatcaaaaag gatcggtacg aactaagtac 300
ggcaccaaag accaatatct aaatgccatc aaagcagcac acaaaaacaa tatccaaatt 360
tatggtgacg tagtgttcaa ccatcgtggc ggtgcagatg gcaagtcgtg ggtcgatacc 420
aagcgtgtgg attggaataa ccgcaatatt gaacttggcg ataaatggat tgaagcatgg 480
gttgaattta gcttcccagg acgtaacgat aaatactcag acttccattg gacgtggtat 540
cactttgatg gcgtcgattg ggatgacgca ggtaaagaga aagcgatctt taaattcaaa 600
ggtgatggta aagcatggga ttgggaagtc agttctgaaa aaggcaacta tgactacctc 660
atgtacgcag acttagacat ggatcaccca gaagtgaagc aagagctgaa agattggggt 720
gaatggtact taaacatgac gggtgttgat ggcttccgaa tggatgcagt gaaacacatc 780
aaatatcagt acctacaaga gtggatcgat tacttgcgta agaaaacggg caaagagctc 840
tttaccgttg gtgagtactg gaactacgac gtgaacaatc tgcacaactt tatgactaag 900
acttctggca gcatgtcatt gtttgatgcg cctttacata tgaacttcta taacgcttca 960
cgctctggtg gcaactttga tatgcgccga atcatggatg gcaccttgat gaaagacaac 1020
ccagtgaaag cagtaacact ggttgagaac catgatacgc aaccactaca ggccttagag 1080
tctccggtgg attggtggtt caaaccactt gcgtacgcgt tcattttgct tcgtgaggaa 1140
ggttatccgt cagtcttcta cgcagattac tacggtgcgc aatacagcga taaagggcac 1200
gatatcaaca tggtgaaagt gccttacatt gagcaattgg tgaaagcgcg taaagattat 1260
gcttatggta aacaacattc ttaccttgac cactgggatg tgattggttg gacacgagaa 1320
ggggatgcgg aacatccgaa ctctatggcg gttatcatga gtgatggtcc tggcggaaca 1380
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gaagaagtat ggactaacgc tagtggatgg gccgaattcc cagtgaacgg cggatcggtt 1500
tctgtttggg ttggcgttaa ataa 1524
<210>140
<211>507
<212>PRT
<213>环境的
<400>140
Met Lys Thr Phe Asn Leu Lys Pro Thr Leu Leu Pro Leu Thr Leu Leu
1 5 10 15
Leu Ser Ser Pro Val Leu Ala Ala Gln Asn Gly Thr Met Met Gln Tyr
20 25 30
Phe His Trp Tyr Val Pro Asn Asp Gly Ala Leu Trp Thr Gln Val Glu
35 40 45
Asn Asn Ala Pro Ala Leu Ser Asp Asn Gly Phe Thr Ala Leu Trp Leu
50 55 60
Pro Pro Ala Tyr Lys Gly Ala Gly Gly Ser Asn Asp Val Gly Tyr Gly
65 70 75 80
Val Tyr Asp Met Tyr Asp Leu Gly Glu Phe Asp Gln Lys Gly Ser Val
85 90 95
Arg Thr Lys Tyr Gly Thr Lys Asp Gln Tyr Leu Asn Ala Ile Lys Ala
100 105 110
Ala His Lys Asn Asn Ile Gln Ile Tyr Gly Asp Val Val Phe Asn His
115 120 125
Arg Gly Gly Ala Asp Gly Lys Ser Trp Val Asp Thr Lys Arg Val Asp
130 135 140
Trp Asn Asn Arg Asn Ile Glu Leu Gly Asp Lys Trp Ile Glu Ala Trp
145 150 155 160
Val Glu Phe Ser Phe Pro Gly Arg Asn Asp Lys Tyr Ser Asp Phe His
165 170 175
Trp Thr Trp Tyr His Phe Asp Gly Val Asp Trp Asp Asp Ala Gly Lys
180 185 190
Glu Lys Ala Ile Phe Lys Phe Lys Gly Asp Gly Lys Ala Trp Asp Trp
195 200 205
Glu Val Ser Ser Glu Lys Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Met Tyr Ala Asp
210 215 220
Leu Asp Met Asp His Pro Glu Val Lys Gln Glu Leu Lys Asp Trp Gly
225 230 235 240
Glu Trp Tyr Leu Asn Met Thr Gly Val Asp Gly Phe Arg Met Asp Ala
245 250 255
Val Lys His Ile Lys Tyr Gln Tyr Leu Gln Glu Trp Ile Asp Tyr Leu
260 265 270
Arg Lys Lys Thr Gly Lys Glu Leu Phe Thr Val Gly Glu Tyr Trp Asn
275 280 285
Tyr Asp Val Asn Asn Leu His Asn Phe Met Thr Lys Thr Ser Gly Ser
290 295 300
Met Ser Leu Phe Asp Ala Pro Leu His Met Asn Phe Tyr Asn Ala Ser
305 310 315 320
Arg Ser Gly Gly Asn Phe Asp Met Arg Arg Ile Met Asp Gly Thr Leu
325 330 335
Met Lys Asp Asn Pro Val Lys Ala Val Thr Leu Val Glu Asn His Asp
340 345 350
Thr Gln Pro Leu Gln Ala Leu Glu Ser Pro Val Asp Trp Trp Phe Lys
355 360 365
Pro Leu Ala Tyr Ala Phe Ile Leu Leu Arg Glu Glu Gly Tyr Pro Ser
370 375 380
Val Phe Tyr Ala Asp Tyr Tyr Gly Ala Gln Tyr Ser Asp Lys Gly His
385 390 395 400
Asp Ile Asn Met Val Lys Val Pro Tyr Ile Glu Gln Leu Val Lys Ala
405 410 415
Arg Lys Asp Tyr Ala Tyr Gly Lys Gln His Ser Tyr Leu Asp His Trp
420 425 430
Asp Val Ile Gly Trp Thr Arg Glu Gly Asp Ala Glu His Pro Asn Ser
435 440 445
Met Ala Val Ile Met Ser Asp Gly Pro Gly Gly Thr Lys Trp Met Tyr
450 455 460
Thr Gly Ser Pro Ser Thr Arg Tyr Val Asp Lys Leu Gly Ile Arg Thr
465 470 475 480
Glu Glu Val Trp Thr Asn Ala Ser Gly Trp Ala Glu Phe Pro Val Asn
485 490 495
Gly Gly Ser Val Ser Val Trp Val Gly Val Lys
500 505
<210>141
<211>1401
<212>DNA
<213>环境的
<400>141
atgaaaccaa taaataccct actcatatcc gcccttgctg tttgttcttt cagttccgcg 60
acttacgccg atactatttt gcacgcgttc aattggaagt attcagatgt gacggccaac 120
gcgaatcaaa ttgctcaagc tggttataag aaagtgcttg ttgcgcctgc aatgaaatcg 180
agtggcagcc aatggtgggc tcgctatcaa cctcaagatc tacgcactat cgattctcct 240
ttgggcaata aacaagattt agccgcaatg attgccgcac tcaaaggtgt gggcgtcgat 300
gtgtatgccg atgtggtact caaccatatg gcgaatgaaa gctggaagcg aagtgacttg 360
aattaccctg gcacagaagt gctaaacgat tatgctagcc gttcaagcta ctatgctgac 420
cagactctgt ttggcaacct agcacaaggt tatgtgtcag cgaacgactt tcatccagcg 480
ggctgtattt cagattggaa cgaccctggt catgttcagt attggcgttt gtgtggcgca 540
gatggtgatg taggtttacc tgaccttgat ccaaacaact gggtggtttc acaacagcgt 600
ttgtatctga aagcgctaaa agatatgggc atcaaagggt tccgaattga tgcagtgaag 660
cacatgagcc aataccaaat cgatcaggta ttcacgtctg aaattactgc gaacatgcat 720
gtgtttggtg aagtgattac tagcggtgga gcagggaata gcggctatga atcgttctta 780
gcgccttacc tgaataatac taatcactct gcctacgatt tcccgctgtt tgcatcgatt 840
cgctcggcat tttctatggg gggcggttta aatcaactgc atgatcctaa agcgtacggt 900
caggcacttg atgataatcg ctcgatcacc tttgcgatca cacatgatat tccaaccaat 960
gacggcttcc gctaccaaat tatggaccca caagacgagc agcttgctta cgcgtatatc 1020
cttggtaaag acggtggcac gccgctgatc tacagtgatg atcttcctga ttctgaagac 1080
aaggataacg gtcgttgggg caatgtttgg aacagttcga caatgaaaaa catgttgagc 1140
ttccataacg cgatgcaagg caaaacaatg acgatgattt ctagcgacca ttgcactttg 1200
ttgtttaagc gtggcaaaga aggtgttgtg ggtattaaca agtgtggtga aacgcgtggc 1260
gtgacggttg atacctacca acatgagttt aattggcatg ttcaatacaa agacgtgtta 1320
agcagcgcaa cagaaaccgt gacttctcgt taccatacgt tcaatctacc accacgcagt 1380
gcgcgtatgt ttaagctgta g 1401
<210>142
<211>466
<212>PRT
<213>环境的
<400>142
Met Lys Pro Ile Asn Thr Leu Leu Ile Ser Ala Leu Ala Val Cys Ser
1 5 10 15
Phe Ser Ser Ala Thr Tyr Ala Asp Thr Ile Leu His Ala Phe Asn Trp
20 25 30
Lys Tyr Ser Asp Val Thr Ala Asn Ala Asn Gln Ile Ala Gln Ala Gly
35 40 45
Tyr Lys Lys Val Leu Val Ala Pro Ala Met Lys Ser Ser Gly Ser Gln
50 55 60
Trp Trp Ala Arg Tyr Gln Pro Gln Asp Leu Arg Thr Ile Asp Ser Pro
65 70 75 80
Leu Gly Asn Lys Gln Asp Leu Ala Ala Met Ile Ala Ala Leu Lys Gly
85 90 95
Val Gly Val Asp Val Tyr Ala Asp Val Val Leu Asn His Met Ala Asn
100 105 110
Glu Ser Trp Lys Arg Ser Asp Leu Asn Tyr Pro Gly Thr Glu Val Leu
115 120 125
Asn Asp Tyr Ala Ser Arg Ser Ser Tyr Tyr Ala Asp Gln Thr Leu Phe
130 135 140
Gly Asn Leu Ala Gln Gly Tyr Val Ser Ala Asn Asp Phe His Pro Ala
145 150 155 160
Gly Cys Ile Ser Asp Trp Asn Asp Pro Gly His Val Gln Tyr Trp Arg
165 170 175
Leu Cys Gly Ala Asp Gly Asp Val Gly Leu Pro Asp Leu Asp Pro Asn
180 185 190
Asn Trp Val Val Ser Gln Gln Arg Leu Tyr Leu Lys Ala Leu Lys Asp
195 200 205
Met Gly Ile Lys Gly Phe Arg Ile Asp Ala Val Lys His Met Ser Gln
210 215 220
Tyr Gln Ile Asp Gln Val Phe Thr Ser Glu Ile Thr Ala Asn Met His
225 230 235 240
Val Phe Gly Glu Val Ile Thr Ser Gly Gly Ala Gly Asn Ser Gly Tyr
245 250 255
Glu Ser Phe Leu Ala Pro Tyr Leu Asn Asn Thr Asn His Ser Ala Tyr
260 265 270
Asp Phe Pro Leu Phe Ala Ser Ile Arg Ser Ala Phe Ser Met Gly Gly
275 280 285
Gly Leu Asn Gln Leu His Asp Pro Lys Ala Tyr Gly Gln Ala Leu Asp
290 295 300
Asp Asn Arg Ser Ile Thr Phe Ala Ile Thr His Asp Ile Pro Thr Asn
305 310 315 320
Asp Gly Phe Arg Tyr Gln Ile Met Asp Pro Gln Asp Glu Gln Leu Ala
325 330 335
Tyr Ala Tyr Ile Leu Gly Lys Asp Gly Gly Thr Pro Leu Ile Tyr Ser
340 345 350
Asp Asp Leu Pro Asp Ser Glu Asp Lys Asp Asn Gly Arg Trp Gly Asn
355 360 365
Val Trp Asn Ser Ser Thr Met Lys Asn Met Leu Ser Phe His Asn Ala
370 375 380
Met Gln Gly Lys Thr Met Thr Met Ile Ser Ser Asp His Cys Thr Leu
385 390 395 400
Leu Phe Lys Arg Gly Lys Glu Gly Val Val Gly Ile Asn Lys Cys Gly
405 410 415
Glu Thr Arg Gly Val Thr Val Asp Thr Tyr Gln His Glu Phe Asn Trp
420 425 430
His Val Gln Tyr Lys Asp Val Leu Ser Ser Ala Thr Glu Thr Val Thr
435 440 445
Ser Arg Tyr His Thr Phe Asn Leu Pro Pro Arg Ser Ala Arg Met Phe
450 455 460
Lys Leu
465
<210>143
<211>1422
<212>DNA
<213>环境的
<400>143
atgccaaaga gcacttttac caaatccata acaaaatcac ttcttgctac ttccgttgtt 60
gtaagcttat tgcctgccta cgcacaggcc gacactatct tgcatgcctt taactggaaa 120
tacagcgaca ttacccgcca agcagagcaa attgcgcaag ctggttataa aaaagtactg 180
atttcaccgc cgctgaagtc cacaggccca caatggtggg cacgttacca accacaggac 240
attcgagtga ttgactcccc tgtcggcaac aagcaagatt tacaagccct cattgcagcc 300
ttaaaggcac aaggcgttga agtatacgca gacatcgtac tcaaccacat ggccaacgaa 360
agctggaaac gagacgatct gaactacccg ggaagtgatt tacttaccca atacagccaa 420
aatatggctt acatgaacca gcaaaaattg tttggagatt tagagcaaaa tcagttctct 480
gccaatgatt ttcacccggc tggctgcatt actgattgga gtaacccggg gcatgttcaa 540
tactggcgct tatgtggtgg taatggtgac actgggttac ctgatcttga tcctaactcg 600
tgggtgatcg atcaacaaaa acgttattta cgtgctttga aagacatggg aataaagggc 660
ttccgagttg atgcggtaaa acacatgagc gattaccaaa tcaaccaagt gtttacgcca 720
gacatcatcg caggcttaca tgtatttggt gaagtgatca ccagtggtgg caagggcagc 780
aatgactacc actcttttct ggaaccgtat ttaaataaca ccaatcacgc cgcgtatgac 840
ttcccgctat ttgcctctat ccgaaatgca tttagttatc atggcagctt gtctcaatta 900
catgatccac aagcttacgg gcaagcactt cctaacgaca gagccattac tttcaccatc 960
actcacgaca ttccaaccaa tgatggtttc cgttaccaaa tcatggatcc aaccagtgaa 1020
aaactcgcgt acgcgtacat tctaggcaaa gatgggggta gcccacttat ctatagcgat 1080
gctttagacc caagtgaaga taaagataag ggccgctggc gtgatgtatg gaaccaagaa 1140
tacatggtta acatgatcag cttccacaac aaggtgcaag gtaaaagcat ggaggtcatg 1200
tacagcgatc aatgcttgct ggtctttaaa cgtgaaaaac aaggcttagt cggtattaat 1260
aagtgcgctg aaagccgtac ctacaccata gatacccatc gttttgaatt taactggtac 1320
caaccgtaca acgacacatt aagccagcac agcgagacct ttagcagccg ttatcatgct 1380
ctgaccattc cggcgcaaac agcacgaatg ttggcgctat aa 1422
<210>144
<211>473
<212>PRT
<213>环境的
<400>144
Met Pro Lys Ser Thr Phe Thr Lys Ser Ile Thr Lys Ser Leu Leu Ala
1 5 10 15
Thr Ser Val Val Val Ser Leu Leu Pro Ala Tyr Ala Gln Ala Asp Thr
20 25 30
Ile Leu His Ala Phe Asn Trp Lys Tyr Ser Asp Ile Thr Arg Gln Ala
35 40 45
Glu Gln Ile Ala Gln Ala Gly Tyr Lys Lys Val Leu Ile Ser Pro Pro
50 55 60
Leu Lys Ser Thr Gly Pro Gln Trp Trp Ala Arg Tyr Gln Pro Gln Asp
65 70 75 80
Ile Arg Val Ile Asp Ser Pro Val Gly Asn Lys Gln Asp Leu Gln Ala
85 90 95
Leu Ile Ala Ala Leu Lys Ala Gln Gly Val Glu Val Tyr Ala Asp Ile
100 105 110
Val Leu Asn His Met Ala Asn Glu Ser Trp Lys Arg Asp Asp Leu Asn
115 120 125
Tyr Pro Gly Ser Asp Leu Leu Thr Gln Tyr Ser Gln Asn Met Ala Tyr
130 135 140
Met Asn Gln Gln Lys Leu Phe Gly Asp Leu Glu Gln Asn Gln Phe Ser
145 150 155 160
Ala Asn Asp Phe His Pro Ala Gly Cys Ile Thr Asp Trp Ser Asn Pro
165 170 175
Gly His Val Gln Tyr Trp Arg Leu Cys Gly Gly Asn Gly Asp Thr Gly
180 185 190
Leu Pro Asp Leu Asp Pro Asn Ser Trp Val Ile Asp Gln Gln Lys Arg
195 200 205
Tyr Leu Arg Ala Leu Lys Asp Met Gly Ile Lys Gly Phe Arg Val Asp
210 215 220
Ala Val Lys His Met Ser Asp Tyr Gln Ile Asn Gln Val Phe Thr Pro
225 230 235 240
Asp Ile Ile Ala Gly Leu His Val Phe Gly Glu Val Ile Thr Ser Gly
245 250 255
Gly Lys Gly Ser Asn Asp Tyr His Ser Phe Leu Glu Pro Tyr Leu Asn
260 265 270
Asn Thr Asn His Ala Ala Tyr Asp Phe Pro Leu Phe Ala Ser Ile Arg
275 280 285
Asn Ala Phe Ser Tyr His Gly Ser Leu Ser Gln Leu His Asp Pro Gln
290 295 300
Ala Tyr Gly Gln Ala Leu Pro Asn Asp Arg Ala Ile Thr Phe Thr Ile
305 310 315 320
Thr His Asp Ile Pro Thr Asn Asp Gly Phe Arg Tyr Gln Ile Met Asp
325 330 335
Pro Thr Ser Glu Lys Leu Ala Tyr Ala Tyr Ile Leu Gly Lys Asp Gly
340 345 350
Gly Ser Pro Leu Ile Tyr Ser Asp Ala Leu Asp Pro Ser Glu Asp Lys
355 360 365
Asp Lys Gly Arg Trp Arg Asp Val Trp Asn Gln Glu Tyr Met Val Asn
370 375 380
Met Ile Ser Phe His Asn Lys Val Gln Gly Lys Ser Met Glu Val Met
385 390 395 400
Tyr Ser Asp Gln Cys Leu Leu Val Phe Lys Arg Glu Lys Gln Gly Leu
405 410 415
Val Gly Ile Asn Lys Cys Ala Glu Ser Arg Thr Tyr Thr Ile Asp Thr
420 425 430
His Arg Phe Glu Phe Asn Trp Tyr Gln Pro Tyr Asn Asp Thr Leu Ser
435 440 445
Gln His Ser Glu Thr Phe Ser Ser Arg Tyr His Ala Leu Thr Ile Pro
450 455 460
Ala Gln Thr Ala Arg Met Leu Ala Leu
465 470
<210>145
<211>1542
<212>DNA
<213>环境的
<400>145
atgttgaaaa ggattacggt agtctgttta ttatttattt tgctttttcc taatatatat 60
gggaggaata aggcggaagc agcaacgata aataatggaa cattaatgca gtattttgag 120
tggtacgctc cgaatgatgg gaatcattgg aatcgtttgc gttatgatgc tgaaagttta 180
gctcataagg gaatcacatc tgtatggata ccacctgcat ataaagggac ttcgcaaaat 240
gatgtagggt atggggccta tgatttatac gatttagggg agttcaatca aaaaggaacg 300
gtgcggacga aatatgggac aaaggcacag ttgaaatctg caattgacgc tttacataag 360
caaaacatcg acgtatacgg tgatgtagtt atgaatcata aaggtggggc tgattatact 420
gaaaccgtaa cagctgttga ggtagaccgt aacaatcgaa atattgaagt atcaggtgat 480
tatgaaatta gtgcgtggac gggttttaac tttccagggc gcagagatgc ttattctaat 540
ttcaaatgga aatggtatca ttttgacgga acggattggg atgaaggaag gaaattaaac 600
cgaatttata aatttagggg tataggtaaa gcgtgggact gggaagtgtc tagcgaaaat 660
ggaaattatg attatttgat gtatgcagat cttgattttg atcatccaga tgttgcgaat 720
gaaatgaaaa gttggggaac gtggtatgcg aatgaattaa atttagatgg atttcgttta 780
gatgctgtta aacatattga tcatgaatat ttacgcgatt gggtaaatca tgtcagacag 840
caaacgggga aagaaatgtt tacggtggct gaatattggc aaaatgatat ccagacttta 900
aacaattatt tggcgaaagt caattataat caatctgtat ttgatgcacc gcttcattac 960
aattttcatt atgcttcaac aggaaatggg aattatgata tgagaaatat tttaaatgga 1020
acagtaatga aaaatcatcc tgcactcgca gttactctcg ttgagaatca tgattctcaa 1080
cctgggcaat cattggaatc tgtagtaagt ccgtggttta agccgctggc atatgcattt 1140
attttaactc gtgcagaggg ctatccttca gttttttatg gtgattacta tgggacaagc 1200
ggaaatagta gttatgaaat tccagcgtta aaagataaaa ttgatccaat tttgacggca 1260
cgaaaaaact ttgcatatgg tacgcagcgt gattatttag accatccaga tgtgattggc 1320
tggacaagag aaggagatag tgtacatgct aagtctggtt tagcggcatt aatctccgat 1380
ggaccaggag gatcaaagtg gatggatgtt ggaaagaata acgctgggga agtatggtac 1440
gatattacgg gtaatcaaac aaatactgta acaattaata aagatggatc ggggcaattc 1500
catgtaagtg gaggctctgt ttctatatat gttcaacagt aa 1542
<210>146
<211>513
<212>PRT
<213>环境的
<400>146
Met Leu Lys Arg Ile Thr Val Val Cys Leu Leu Phe Ile Leu Leu Phe
1 5 10 15
Pro Asn Ile Tyr Gly Arg Asn Lys Ala Glu Ala Ala Thr Ile Asn Asn
20 25 30
Gly Thr Leu Met Gln Tyr Phe Glu Trp Tyr Ala Pro Asn Asp Gly Asn
35 40 45
His Trp Asn Arg Leu Arg Tyr Asp Ala Glu Ser Leu Ala His Lys Gly
50 55 60
Ile Thr Ser Val Trp Ile Pro Pro Ala Tyr Lys Gly Thr Ser Gln Asn
65 70 75 80
Asp Val Gly Tyr Gly Ala Tyr Asp Leu Tyr Asp Leu Gly Glu Phe Asn
85 90 95
Gln Lys Gly Thr Val Arg Thr Lys Tyr Gly Thr Lys Ala Gln Leu Lys
100 105 110
Ser Ala Ile Asp Ala Leu His Lys Gln Asn Ile Asp Val Tyr Gly Asp
115 120 125
Val Val Met Asn His Lys Gly Gly Ala Asp Tyr Thr Glu Thr Val Thr
130 135 140
Ala Val Glu Val Asp Arg Asn Asn Arg Asn Ile Glu Val Ser Gly Asp
145 150 155 160
Tyr Glu Ile Ser Ala Trp Thr Gly Phe Asn Phe Pro Gly Arg Arg Asp
165 170 175
Ala Tyr Ser Asn Phe Lys Trp Lys Trp Tyr His Phe Asp Gly Thr Asp
180 185 190
Trp Asp Glu Gly Arg Lys Leu Asn Arg Ile Tyr Lys Phe Arg Gly Ile
195 200 205
Gly Lys Ala Trp Asp Trp Glu Val Ser Ser Glu Asn Gly Asn Tyr Asp
210 215 220
Tyr Leu Met Tyr Ala Asp Leu Asp Phe Asp His Pro Asp Val Ala Asn
225 230 235 240
Glu Met Lys Ser Trp Gly Thr Trp Tyr Ala Asn Glu Leu Asn Leu Asp
245 250 255
Gly Phe Arg Leu Asp Ala Val Lys His Ile Asp His Glu Tyr Leu Arg
260 265 270
Asp Trp Val Asn His Val Arg Gln Gln Thr Gly Lys Glu Met Phe Thr
275 280 285
Val Ala Glu Tyr Trp Gln Asn Asp Ile Gln Thr Leu Asn Asn Tyr Leu
290 295 300
Ala Lys Val Asn Tyr Asn Gln Ser Val Phe Asp Ala Pro Leu His Tyr
305 310 315 320
Asn Phe His Tyr Ala Ser Thr Gly Asn Gly Asn Tyr Asp Met Arg Asn
325 330 335
Ile Leu Asn Gly Thr Val Met Lys Asn His Pro Ala Leu Ala Val Thr
340 345 350
Leu Val Glu Asn His Asp Ser Gln Pro Gly Gln Ser Leu Glu Ser Val
355 360 365
Val Ser Pro Trp Phe Lys Pro Leu Ala Tyr Ala Phe Ile Leu Thr Arg
370 375 380
Ala Glu Gly Tyr Pro Ser Val Phe Tyr Gly Asp Tyr Tyr Gly Thr Ser
385 390 395 400
Gly Asn Ser Ser Tyr Glu Ile Pro Ala Leu Lys Asp Lys Ile Asp Pro
405 410 415
Ile Leu Thr Ala Arg Lys Asn Phe Ala Tyr Gly Thr Gln Arg Asp Tyr
420 425 430
Leu Asp His Pro Asp Val Ile Gly Trp Thr Arg Glu Gly Asp Ser Val
435 440 445
His Ala Lys Ser Gly Leu Ala Ala Leu Ile Ser Asp Gly Pro Gly Gly
450 455 460
Ser Lys Trp Met Asp Val Gly Lys Asn Asn Ala Gly Glu Val Trp Tyr
465 470 475 480
Asp Ile Thr Gly Asn Gln Thr Asn Thr Val Thr Ile Asn Lys Asp Gly
485 490 495
Ser Gly Gln Phe His Val Ser Gly Gly Ser Val Ser Ile Tyr Val Gln
500 505 510
Gln
<210>147
<211>2343
<212>DNA
<213>环境的
<400>147
atgagcttaa ataactttaa ggtaaaactg cttagttttg ctgtgtcttc tgctgtattg 60
tcactggctc caaatttagc caatgctgca aattttgaaa gtgagatggt gataatccat 120
ccgtttcagt ggacatatga caatatagca aaagagtgta cagagtacct tggtccagcc 180
ggatttgacg gtgtacagat ttcccagcca gcggaacata agcgggctga aggagtatgg 240
tgggccgtat atcagccggt taattataag aattttacaa ccatgaccgg taacgaggag 300
cagcttaagg caatgatcaa gacctgtaat gatgcaggtg ttaaggtgtt cgctgacgct 360
gttttcaacc aaaaggctac agacggtgta ggctggggcg gttcaacttg gagttataag 420
aactaccctg acggattctc cggatcagat ttccatggag actgttccat tgacaaaagc 480
tatactgatg caaataatgt cagaacctgt gcactctcag gtatgccgga cgttgccaca 540
gataactccg ctactcagga aaagattgca gattacctcg cttctttaat gaatatgggg 600
gtctatggtt tccgtattga cgctgcaaag cacatgggat acaacgatat caactccatt 660
ctttcaaaaa ctgcacagaa gactggaaga agacctcctg catatctgga agtaatcgga 720
gccggtaacg aagctgccga cattcagccg gacaagtata cctttattga gaatgcggtt 780
gtaactgact tcggttatgt ctgggatgca aatgagagtt tcggaaaggg taattacggt 840
aaggcactgg aactcagtac ctggctcggt gcaaattcag aaacattcgt aaacaatcat 900
gatgatgaat ggggcagatg ctcagccggt agctgctcaa tgaaaactca gaattatgct 960
gattataatc tggctcagtc ctggcttgct gtatggcctg taggtacagt aagacagata 1020
tattccggtt attcattccc tgtaaaagat aatgatcctt atcgcgtcag tgatgcaact 1080
catgatcagg gcgggcctct tggtgccgac cgctgtgaag gtggctggtt gtgtcagcac 1140
cgtgtgtcct tcgttctcaa ttccccaaga tttgcgagag ctaccagagg tactgctgta 1200
tcaaccaagg gatttgacaa tggtgctttg tggtttaaca gaggaagcaa aggtttttat 1260
gcacagaata ctaccaacag tcctataacc cagacattct ctgttgaagt acctgacgga 1320
aattactgtg atatcttagg aacatcagat cctaagagca atccatgcgg agcagacgtt 1380
gtcgtaagcg gcggtaaggc tacctttact attcctgcaa agacagctgt ggctatctgt 1440
acagactcag actggtgcgg caagggggtt gatccttgtg aaagtgatcc gaccggtgct 1500
gcctgtgttt gtaaggggga aaccaccgtt aatggtgtgt gcgtcagctg gtgtaatgcg 1560
cattcatcaa atgaggaatg cacctgtgta ttgaatccga atgatgccaa ctgtcaggct 1620
gatattgaac ctaccaaggg taaactctgt tacgccggta cttcaaacgg gtggaaacag 1680
gatcctttaa catataaccg taaaacaggt ttctggacta ttaatctgac tcttgacggt 1740
gcaggtgata ccagcggagc tcagcgcttc aaggttacag acggatgttc atggaccgga 1800
acagtttacg gttcttcagg tactgccgga aagttggatg taaatacatc atcaaccggc 1860
gatgaacctg tgtctcttgt tggtgattat gttctttcca ttaacgataa gaccatggaa 1920
tatacattca ccaaggcaga tgaagtaact aatcagccac cggttgcatc atttaccgcg 1980
acagttaacg gtctgaccgt ttcttttgcc aataattcat ccgaccctga gaatgatgaa 2040
ttaacctaca gctggaattt cggtaatggt aaaacatcat ccgagaaagc tcctagcata 2100
acctatgaag aatccggtaa gtatactgtt actttaaagg ttactgattc agctaataac 2160
actgatacat ttactaaaga tataactgta acagcacctt ctagtggcaa gtacttaaag 2220
gttgcagtca gaggttcgca tgataattac ggaactgatc tgttaaccaa gaacggttct 2280
gattggaccg gcgtctttga attctttgga tccactagtg tcgacctgca ggcgcgcgag 2340
ctc 2343
<210>148
<211>781
<212>PRT
<213>环境的
<400>148
Met Ser Leu Asn Asn Phe Lys Val Lys Leu Leu Ser Phe Ala Val Ser
1 5 10 15
Ser Ala Val Leu Ser Leu Ala Pro Asn Leu Ala Asn Ala Ala Asn Phe
20 25 30
Glu Ser Glu Met Val Ile Ile His Pro Phe Gln Trp Thr Tyr Asp Asn
35 40 45
Ile Ala Lys Glu Cys Thr Glu Tyr Leu Gly Pro Ala Gly Phe Asp Gly
50 55 60
Val Gln Ile Ser Gln Pro Ala Glu His Lys Arg Ala Glu Gly Val Trp
65 70 75 80
Trp Ala Val Tyr Gln Pro Val Asn Tyr Lys Asn Phe Thr Thr Met Thr
85 90 95
Gly Asn Glu Glu Gln Leu Lys Ala Met Ile Lys Thr Cys Asn Asp Ala
100 105 110
Gly Val Lys Val Phe Ala Asp Ala Val Phe Asn Gln Lys Ala Thr Asp
115 120 125
Gly Val Gly Trp Gly Gly Ser Thr Trp Ser Tyr Lys Asn Tyr Pro Asp
130 135 140
Gly Phe Ser Gly Ser Asp Phe His Gly Asp Cys Ser Ile Asp Lys Ser
145 150 155 160
Tyr Thr Asp Ala Asn Asn Val Arg Thr Cys Ala Leu Ser Gly Met Pro
165 170 175
Asp Val Ala Thr Asp Asn Ser Ala Thr Gln Glu Lys Ile Ala Asp Tyr
180 185 190
Leu Ala Ser Leu Met Asn Met Gly Val Tyr Gly Phe Arg Ile Asp Ala
195 200 205
Ala Lys His Met Gly Tyr Asn Asp Ile Asn Ser Ile Leu Ser Lys Thr
210 215 220
Ala Gln Lys Thr Gly Arg Arg Pro Pro Ala Tyr Leu Glu Val Ile Gly
225 230 235 240
Ala Gly Asn Glu Ala Ala Asp Ile Gln Pro Asp Lys Tyr Thr Phe Ile
245 250 255
Glu Asn Ala Val Val Thr Asp Phe Gly Tyr Val Trp Asp Ala Asn Glu
260 265 270
Ser Phe Gly Lys Gly Asn Tyr Gly Lys Ala Leu Glu Leu Ser Thr Trp
275 280 285
Leu Gly Ala Asn Ser Glu Thr Phe Val Asn Asn His Asp Asp Glu Trp
290 295 300
Gly Arg Cys Ser Ala Gly Ser Cys Ser Met Lys Thr Gln Asn Tyr Ala
305 310 315 320
Asp Tyr Asn Leu Ala Gln Ser Trp Leu Ala Val Trp Pro Val Gly Thr
325 330 335
Val Arg Gln Ile Tyr Ser Gly Tyr Ser Phe Pro Val Lys Asp Asn Asp
340 345 350
Pro Tyr Arg Val Ser Asp Ala Thr His Asp Gln Gly Gly Pro Leu Gly
355 360 365
Ala Asp Arg Cys Glu Gly Gly Trp Leu Cys Gln His Arg Val Ser Phe
370 375 380
Val Leu Asn Ser Pro Arg Phe Ala Arg Ala Thr Arg Gly Thr Ala Val
385 390 395 400
Ser Thr Lys Gly Phe Asp Asn Gly Ala Leu Trp Phe Asn Arg Gly Ser
405 410 415
Lys Gly Phe Tyr Ala Gln Asn Thr Thr Asn Ser Pro Ile Thr Gln Thr
420 425 430
Phe Ser Val Glu Val Pro Asp Gly Asn Tyr Cys Asp Ile Leu Gly Thr
435 440 445
Ser Asp Pro Lys Ser Asn Pro Cys Gly Ala Asp Val Val Val Ser Gly
450 455 460
Gly Lys Ala Thr Phe Thr Ile Pro Ala Lys Thr Ala Val Ala Ile Cys
465 470 475 480
Thr Asp Ser Asp Trp Cys Gly Lys Gly Val Asp Pro Cys Glu Ser Asp
485 490 495
Pro Thr Gly Ala Ala Cys Val Cys Lys Gly Glu Thr Thr Val Asn Gly
500 505 510
Val Cys Val Ser Trp Cys Asn Ala His Ser Ser Asn Glu Glu Cys Thr
515 520 525
Cys Val Leu Asn Pro Asn Asp Ala Asn Cys Gln Ala Asp Ile Glu Pro
530 535 540
Thr Lys Gly Lys Leu Cys Tyr Ala Gly Thr Ser Asn Gly Trp Lys Gln
545 550 555 560
Asp Pro Leu Thr Tyr Asn Arg Lys Thr Gly Phe Trp Thr Ile Asn Leu
565 570 575
Thr Leu Asp Gly Ala Gly Asp Thr Ser Gly Ala Gln Arg Phe Lys Val
580 585 590
Thr Asp Gly Cys Ser Trp Thr Gly Thr Val Tyr Gly Ser Ser Gly Thr
595 600 605
Ala Gly Lys Leu Asp Val Asn Thr Ser Ser Thr Gly Asp Glu Pro Val
610 615 620
Ser Leu Val Gly Asp Tyr Val Leu Ser Ile Asn Asp Lys Thr Met Glu
625 630 635 640
Tyr Thr Phe Thr Lys Ala Asp Glu Val Thr Asn Gln Pro Pro Val Ala
645 650 655
Ser Phe Thr Ala Thr Val Asn Gly Leu Thr Val Ser Phe Ala Asn Asn
660 665 670
Ser Ser Asp Pro Glu Asn Asp Glu Leu Thr Tyr Ser Trp Asn Phe Gly
675 680 685
Asn Gly Lys Thr Ser Ser Glu Lys Ala Pro Ser Ile Thr Tyr Glu Glu
690 695 700
Ser Gly Lys Tyr Thr Val Thr Leu Lys Val Thr Asp Ser Ala Asn Asn
705 710 715 720
Thr Asp Thr Phe Thr Lys Asp Ile Thr Val Thr Ala Pro Ser Ser Gly
725 730 735
Lys Tyr Leu Lys Val Ala Val Arg Gly Ser His Asp Asn Tyr Gly Thr
740 745 750
Asp Leu Leu Thr Lys Asn Gly Ser Asp Trp Thr Gly Val Phe Glu Phe
755 760 765
Phe Gly Ser Thr Ser Val Asp Leu Gln Ala Arg Glu Leu
770 775 780
<210>149
<211>2502
<212>DNA
<213>环境的
<400>149
atgatcttaa gtaattttaa ggtaaaactt cttagttttg ctgtgtcttc tgctgtactg 60
acactggctg caaatgtcgc caatgccaag aattatgaaa gtgaaatggt tattattcat 120
ccatttcagt ggacatatga caatatagca aaagaatgta ctgagtatct gggacctgcg 180
ggatttgacg gggtgcagat ttcccaggcg gctgagcata aagatgccgg tggtgcatgg 240
tggggtacct accagcctgt aaacttcaag agttttacta ccatggttgg taatgaagaa 300
cagcttagag caatgattaa aacctgtaac gaggcaggtg ttaaggtctt tgccgatgcc 360
gtgattaatc agaaagccgg cgacggtgta ggtataggtg gttcaacttt cggaaattat 420
aattatcctg acggatttac cagtgatgat tttcatcata ataactgcag tataggtaat 480
aattattcag atgcatgggt agtaagattc tgtgacctca gtggcatgcc ggatatagca 540
actgataacg acagtaccag aaataagatt gctgattact tcgccagcct tatgaatatg 600
ggggtatacg gattccgtat tgatgctgcc aagcacttta gctatgatga tatagacgct 660
attgtagaga aaacagcaac caaagcaggc aggagacctc ctgtctatat ggaggttatc 720
ggtaatccgg gtcaagaggc ggatgatatc cagccgaaca agtatacatg gattgataat 780
gccgttgtaa cagattttac ttatgctaat agcatgcata atatttttaa cggaagcggt 840
tatgccaagg ctttgaacat ggggctaggg catgttgatg ctgaaaatgc cgaagtcttt 900
ataagtaatc atgataatga atggggaaga aagtctgccg gttcctgctc aataagaacc 960
cagaataatc cggattacca tctggctcag tcctggctcg cagtttggcc tttaggcaag 1020
gttagacaga tttattctgc atatcagttc ccggtctttg aagatagttg tgagcgggtc 1080
agtcagcaag cccatgatca gggcggtcct atcggggcag cccgctgtga aggtggctgg 1140
ttgtgtcagc accgtgtacc gtttgtgctc aattctccta gatttgcaag agcaaccaga 1200
gggacagtcg ttactactaa aggttttgat gacggagctt tgtggtttaa cagaggaagc 1260
aagggcttct atgcccagaa tactaccggc agttctataa ctcatacatt ctcagttgaa 1320
ttacctgatg gaaattactg tgatatcctt ggagcaaccg atccgaagaa taatccttgc 1380
ggagcggatg tcactgtaag cggaggtaaa gcaaccttta ccattccggc aaagaccgcc 1440
gtagctatct gtactgatga aaagtggtgt ggcaaggggg ttgacccttg tgaaagcgat 1500
cctaccggtt ccgcctgtgt atgtaagggt gaaaccacag ttaacggcgt atgtgtaagc 1560
tggtgtaatg ctcactcatc taatgaagaa tgtgcctgtg tgctaaatcc taatgacgct 1620
gagtgtcagg ccgacattga gccgaccaag ggtaaactct gctatgtagg tacctccaac 1680
aagtggactc aggaaccttt aacctataat cgcaagaccg gtttctggac tctcaacgtt 1740
gaacttgacg gtaaggggga taccagcggg gcgcagcgct ttaaagttac cgacggctgt 1800
tcatggcagg gtactgttta cggttcatca ggagtagaag gcagacttga cgtaaatact 1860
tcagccaccg gagatgaacc ggtttcactg acaggtaaat atgttctttc cataaatgat 1920
aagaccatgg aatacacatt cattcctgca ggcagtggaa acaagcctcc ggttgcgtca 1980
tttactccga ctgttaaaga tctgactgta tcttttgtca ataattcatc cgaccctgag 2040
aatgatgaat taacctacag ctggaatttc ggtaacggta aaacctcatc tgaaaagaat 2100
ccgagtgtta catatgataa agccggtaaa tatactgttt cactcaaagt aaccgatact 2160
gcaaacaaca ctgataccaa aacactggaa atcgatttaa catctcctgt taacggaaaa 2220
tattccaagg ttgcagtcag aggttcacat gataactacg gaacaaatct gttaaccagg 2280
aatggttcag aatggaccgg tatctttgaa ttcagtaaga caaccaaatt caagcttgaa 2340
gctctgcctc ctgcagctga ccagtgtatc ttcctcggcg gtaatcgagg tgaggcattg 2400
actgcctccg gtggatttat atctcttcct gccggaaggt atactataaa gtttaatgag 2460
gaaagcaagg ttcttactgc aggcgatgtt gactgcaccg gg 2502
<210>150
<211>834
<212>PRT
<213>环境的
<400>150
Met Ile Leu Ser Asn Phe Lys Val Lys Leu Leu Ser Phe Ala Val Ser
1 5 10 15
Ser Ala Val Leu Thr Leu Ala Ala Asn Val Ala Asn Ala Lys Asn Tyr
20 25 30
Glu Ser Glu Met Val Ile Ile His Pro Phe Gln Trp Thr Tyr Asp Asn
35 40 45
Ile Ala Lys Glu Cys Thr Glu Tyr Leu Gly Pro Ala Gly Phe Asp Gly
50 55 60
Val Gln Ile Ser Gln Ala Ala Glu His Lys Asp Ala Gly Gly Ala Trp
65 70 75 80
Trp Gly Thr Tyr Gln Pro Val Asn Phe Lys Ser Phe Thr Thr Met Val
85 90 95
Gly Asn Glu Glu Gln Leu Arg Ala Met Ile Lys Thr Cys Asn Glu Ala
100 105 110
Gly Val Lys Val Phe Ala Asp Ala Val Ile Asn Gln Lys Ala Gly Asp
115 120 125
Gly Val Gly Ile Gly Gly Ser Thr Phe Gly Asn Tyr Asn Tyr Pro Asp
130 135 140
Gly Phe Thr Ser Asp Asp Phe His His Asn Asn Cys Ser Ile Gly Asn
145 150 155 160
Asn Tyr Ser Asp Ala Trp Val Val Arg Phe Cys Asp Leu Ser Gly Met
165 170 175
Pro Asp Ile Ala Thr Asp Asn Asp Ser Thr Arg Asn Lys Ile Ala Asp
180 185 190
Tyr Phe Ala Ser Leu Met Asn Met Gly Val Tyr Gly Phe Arg Ile Asp
195 200 205
Ala Ala Lys His Phe Ser Tyr Asp Asp Ile Asp Ala Ile Val Glu Lys
210 215 220
Thr Ala Thr Lys Ala Gly Arg Arg Pro Pro Val Tyr Met Glu Val Ile
225 230 235 240
Gly Asn Pro Gly Gln Glu Ala Asp Asp Ile Gln Pro Asn Lys Tyr Thr
245 250 255
Trp Ile Asp Asn Ala Val Val Thr Asp Phe Thr Tyr Ala Asn Ser Met
260 265 270
His Asn Ile Phe Asn Gly Ser Gly Tyr Ala Lys Ala Leu Asn Met Gly
275 280 285
Leu Gly His Val Asp Ala Glu Asn Ala Glu Val Phe Ile Ser Asn His
290 295 300
Asp Asn Glu Trp Gly Arg Lys Ser Ala Gly Ser Cys Ser Ile Arg Thr
305 310 315 320
Gln Asn Asn Pro Asp Tyr His Leu Ala Gln Ser Trp Leu Ala Val Trp
325 330 335
Pro Leu Gly Lys Val Arg Gln Ile Tyr Ser Ala Tyr Gln Phe Pro Val
340 345 350
Phe Glu Asp Ser Cys Glu Arg Val Ser Gln Gln Ala His Asp Gln Gly
355 360 365
Gly Pro Ile Gly Ala Ala Arg Cys Glu Gly Gly Trp Leu Cys Gln His
370 375 380
Arg Val Pro Phe Val Leu Asn Ser Pro Arg Phe Ala Arg Ala Thr Arg
385 390 395 400
Gly Thr Val Val Thr Thr Lys Gly Phe Asp Asp Gly Ala Leu Trp Phe
405 410 415
Asn Arg Gly Ser Lys Gly Phe Tyr Ala Gln Asn Thr Thr Gly Ser Ser
420 425 430
Ile Thr His Thr Phe Ser Val Glu Leu Pro Asp Gly Asn Tyr Cys Asp
435 440 445
Ile Leu Gly Ala Thr Asp Pro Lys Asn Asn Pro Cys Gly Ala Asp Val
450 455 460
Thr Val Ser Gly Gly Lys Ala Thr Phe Thr Ile Pro Ala Lys Thr Ala
465 470 475 480
Val Ala Ile Cys Thr Asp Glu Lys Trp Cys Gly Lys Gly Val Asp Pro
485 490 495
Cys Glu Ser Asp Pro Thr Gly Ser Ala Cys Val Cys Lys Gly Glu Thr
500 505 510
Thr Val Asn Gly Val Cys Val Ser Trp Cys Asn Ala His Ser Ser Asn
515 520 525
Glu Glu Cys Ala Cys Val Leu Asn Pro Asn Asp Ala Glu Cys Gln Ala
530 535 540
Asp Ile Glu Pro Thr Lys Gly Lys Leu Cys Tyr Val Gly Thr Ser Asn
545 550 555 560
Lys Trp Thr Gln Glu Pro Leu Thr Tyr Asn Arg Lys Thr Gly Phe Trp
565 570 575
Thr Leu Asn Val Glu Leu Asp Gly Lys Gly Asp Thr Ser Gly Ala Gln
580 585 590
Arg Phe Lys Val Thr Asp Gly Cys Ser Trp Gln Gly Thr Val Tyr Gly
595 600 605
Ser Ser Gly Val Glu Gly Arg Leu Asp Val Asn Thr Ser Ala Thr Gly
610 615 620
Asp Glu Pro Val Ser Leu Thr Gly Lys Tyr Val Leu Ser Ile Asn Asp
625 630 635 640
Lys Thr Met Glu Tyr Thr Phe Ile Pro Ala Gly Ser Gly Asn Lys Pro
645 650 655
Pro Val Ala Ser Phe Thr Pro Thr Val Lys Asp Leu Thr Val Ser Phe
660 665 670
Val Asn Asn Ser Ser Asp Pro Glu Asn Asp Glu Leu Thr Tyr Ser Trp
675 680 685
Asn Phe Gly Asn Gly Lys Thr Ser Ser Glu Lys Asn Pro Ser Val Thr
690 695 700
Tyr Asp Lys Ala Gly Lys Tyr Thr Val Ser Leu Lys Val Thr Asp Thr
705 710 715 720
Ala Asn Asn Thr Asp Thr Lys Thr Leu Glu Ile Asp Leu Thr Ser Pro
725 730 735
Val Asn Gly Lys Tyr Ser Lys Val Ala Val Arg Gly Ser His Asp Asn
740 745 750
Tyr Gly Thr Asn Leu Leu Thr Arg Asn Gly Ser Glu Trp Thr Gly Ile
755 760 765
Phe Glu Phe Ser Lys Thr Thr Lys Phe Lys Leu Glu Ala Leu Pro Pro
770 775 780
Ala Ala Asp Gln Cys Ile Phe Leu Gly Gly Asn Arg Gly Glu Ala Leu
785 790 795 800
Thr Ala Ser Gly Gly Phe Ile Ser Leu Pro Ala Gly Arg Tyr Thr Ile
805 810 815
Lys Phe Asn Glu Glu Ser Lys Val Leu Thr Ala Gly Asp Val Asp Cys
820 825 830
Thr Gly
<210>151
<211>2112
<212>DNA
<213>环境的
<400>151
atgaaaacta ttctttcaac aatcatggtg atggcggctg cggctgccac caccgtagag 60
gctcaaggct ggccggaaaa ctacggcggc gtcatgttgc agggattcta ctgggattcc 120
tattcagcca ccaagtggac taaactggaa gcacaggctg acgagatctg caactatttc 180
tcgctggtat gggtaccaca gtcggcctat accggcagca gtacctccat gggctacgac 240
ccgctgtatt acttcgacca gcattcatcg ttcggcaccg aagagcagct acggtcgttc 300
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aagaatgtct caaactgggt ggatttcccg gccgagacct acaacggtgt aacctatcag 420
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gacctggacc acaagtcgca gaacgtgcag aaatcggttc ttgcctacac caaatatctg 600
gttgacgact taggctatac cggattccgc tacgatatgg taaagggatt tgacggatcg 660
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aatgtagccg ccaactacat tcagattctc tcaggcaaaa actataaata ctacgtactc 1260
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gtaacggttc cgctcatcgc catatcggcc gatgccaatg ccaagctggt atataccacc 1380
gacggcacag accccaccgc aacctcaaca gccgtaacca gcggaacgga actgaccatc 1440
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agccgtacat tcaccttcca ggctgcaaac acctccgagt attacacagc caccatgcac 1560
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aacgagcaga ttaacggcaa ctggccgggc accaagctca ccgctaccat taccgaaaac 1680
aaccttacct ggtacacgca gtcgttccag attccgaaga acgtggacta tgtcgtgaac 1740
tttgttttca ccacaaccgg cggcggtacg cagacagtgg atgttaccgg catgaaggcc 1800
gatgtctggt acattattaa cagtaccaag agcggcaaca agtacacggt aaccgacgtt 1860
acctcacagt attcttcgtt agaggccatc tttgatgaag aaaactccgg ctccttccct 1920
gtctatgacc tgcagggacg ccgcgtcagc gaaattagaa acaggacaat tatatcttca 1980
gaacggaaag aagatactca tcagataaac agaggttccg aaccattctc ctattatgaa 2040
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ctcctcgtcg gg 2112
<210>152
<211>704
<212>PRT
<213>环境的
<400>152
Met Lys Thr Ile Leu Ser Thr Ile Met Val Met Ala Ala Ala Ala Ala
1 5 10 15
Thr Thr Val Glu Ala Gln Gly Trp Pro Glu Asn Tyr Gly Gly Val Met
20 25 30
Leu Gln Gly Phe Tyr Trp Asp Ser Tyr Ser Ala Thr Lys Trp Thr Lys
35 40 45
Leu Glu Ala Gln Ala Asp Glu Ile Cys Asn Tyr Phe Ser Leu Val Trp
50 55 60
Val Pro Gln Ser Ala Tyr Thr Gly Ser Ser Thr Ser Met Gly Tyr Asp
65 70 75 80
Pro Leu Tyr Tyr Phe Asp Gln His Ser Ser Phe Gly Thr Glu Glu Gln
85 90 95
Leu Arg Ser Phe Ile Ser Thr Tyr Lys Gln Lys Gly Thr Gly Ile Ile
100 105 110
Ala Asp Val Val Val Asn His Arg Lys Asn Val Ser Asn Trp Val Asp
115 120 125
Phe Pro Ala Glu Thr Tyr Asn Gly Val Thr Tyr Gln Met Val Ser Thr
130 135 140
Asp Ile Val Ser Asn Asp Asp Gly Gly Lys Thr Ala Thr Trp Ala Asn
145 150 155 160
Gln Asn Gly Tyr Ser Leu Ser Ser Asn Ala Asp Glu Gly Glu Gly Trp
165 170 175
Asp Gly Met Arg Asp Leu Asp His Lys Ser Gln Asn Val Gln Lys Ser
180 185 190
Val Leu Ala Tyr Thr Lys Tyr Leu Val Asp Asp Leu Gly Tyr Thr Gly
195 200 205
Phe Arg Tyr Asp Met Val Lys Gly Phe Asp Gly Ser His Val Ala Asp
210 215 220
Tyr Asn Thr Asn Ala Gly Val Gln Phe Ser Val Gly Glu Tyr Trp Asp
225 230 235 240
Gly Thr Ala Ser Lys Val Tyr Ser Trp Ile Asn Ser Thr Lys Lys Ser
245 250 255
Asp Val Pro Gln Ser Ala Ala Phe Asp Phe Ala Phe Arg Tyr Thr Cys
260 265 270
Arg Asp Ala Val Asn Asn Lys Asn Trp Ala Asn Leu Lys Asn Thr Ser
275 280 285
Gly Ile Ser Asp Ala Asp Tyr Arg Arg Tyr Ser Val Thr Phe Val Glu
290 295 300
Asn His Asp Thr Glu Tyr Arg Ser Ala Thr Ala Ser Gln Asp Pro Ile
305 310 315 320
Lys Gly Asp Thr Val Ala Leu Asn Ala Trp Met Leu Ala Met Pro Gly
325 330 335
Thr Pro Cys Val Phe Leu Lys His Trp Thr Asp Cys Lys Glu Glu Ile
340 345 350
Lys Asn Leu Ile Glu Ala Arg Arg Leu Val Gly Ile His Asn Gln Ser
355 360 365
Thr Tyr Ala Glu Trp Met Ser Gly Ala Ala Tyr Ile Gly Arg Thr Val
370 375 380
Thr Gly Thr Asn Gly Thr Leu Arg Val Leu Cys Gly Ser Tyr Gln Tyr
385 390 395 400
Asn Val Ala Ala Asn Tyr Ile Gln Ile Leu Ser Gly Lys Asn Tyr Lys
405 410 415
Tyr Tyr Val Leu Asn Thr Leu Glu Ala Pro Trp Ile Gly Lys Gly Ser
420 425 430
Gly Ser Tyr Thr Glu Gly Glu Thr Val Thr Val Pro Leu Ile Ala Ile
435 440 445
Ser Ala Asp Ala Asn Ala Lys Leu Val Tyr Thr Thr Asp Gly Thr Asp
450 455 460
Pro Thr Ala Thr Ser Thr Ala Val Thr Ser Gly Thr Glu Leu Thr Ile
465 470 475 480
Thr Ser Asp Ala Val Leu Lys Val Gly Leu Leu Ser Gly Gly Ile Val
485 490 495
Arg Asn Ile Gln Ser Arg Thr Phe Thr Phe Gln Ala Ala Asn Thr Ser
500 505 510
Glu Tyr Tyr Thr Ala Thr Met His Val Cys Asn Gln Ser Gly Ala Leu
515 520 525
Asn Pro Leu Phe Ala Tyr Val Trp Ala Gly Pro Asp Asn Glu Gln Ile
530 535 540
Asn Gly Asn Trp Pro Gly Thr Lys Leu Thr Ala Thr Ile Thr Glu Asn
545 550 555 560
Asn Leu Thr Trp Tyr Thr Gln Ser Phe Gln Ile Pro Lys Asn Val Asp
565 570 575
Tyr Val Val Asn Phe Val Phe Thr Thr Thr Gly Gly Gly Thr Gln Thr
580 585 590
Val Asp Val Thr Gly Met Lys Ala Asp Val Trp Tyr Ile Ile Asn Ser
595 600 605
Thr Lys Ser Gly Asn Lys Tyr Thr Val Thr Asp Val Thr Ser Gln Tyr
610 615 620
Ser Ser Leu Glu Ala Ile Phe Asp Glu Glu Asn Ser Gly Ser Phe Pro
625 630 635 640
Val Tyr Asp Leu Gln Gly Arg Arg Val Ser Glu Ile Arg Asn Arg Thr
645 650 655
Ile Ile Ser Ser Glu Arg Lys Glu Asp Thr His Gln Ile Asn Arg Gly
660 665 670
Ser Glu Pro Phe Ser Tyr Tyr Glu Asn Gln Thr Leu Ser Asn Leu Ser
675 680 685
Thr Ala Gly Phe Gly Gly Leu Val His His Gln Leu Leu Leu Val Gly
690 695 700
<210>153
<211>1620
<212>DNA
<213>环境的
<400>153
atgccttcaa ttaatgcaag cgattgcaaa aaaaagggag ataggagtat gaagaggaaa 60
aaatggactg cgttagcact atctttacca ctagttatga gcttatcaac aaacatacaa 120
gcagaaacat tacataataa taagggtcaa aaggcgcaaa caggaaataa agacggaatt 180
ttttatgaac tgtatgttaa ttctttttat gatactgata gcaatggaca tggtgattta 240
aaaggcgtca caaagaaact tgattattta aatgatggaa atccaagaac aaataatgat 300
cttcaaataa acggtatctg gatgatgcct attaacacct ctcctagtta tcacaaatat 360
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gattactata tttgggctga taaaaataca gacttaaatg aaaaaggccc atggggtcaa 600
caagtatggc acaaagcgtc gaacggagag tatttctacg caacgttctg ggaagggatg 660
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caaacacctg aaggagcaaa gaaaaatatt gaatggtgga atgaattccg cgacgcgatg 840
agagaaacga atccaaatac gtatctagtt ggtgaaatat gggatcaacc agaagtagtt 900
gctccgtatt atcaatcgtt agattctaca tttaacttcg acttagcata taaaatcgtt 960
aattccgtta aaaatggtac tgatcaaggg gtagccgcgg cagctgttgc aacggatgag 1020
ttatataaaa catataatcc aaataaaatt gatggaacgt ttttaacgaa tcatgaccaa 1080
aatcgtgtaa tgagtgagtt aaatggtgat gtaaacaaag caaaatcagc agcctctatt 1140
ctgttgacac tccctggtaa tccgttcatt tattatggcg aagaaatcgg catgacaggc 1200
caaaaaccag atgagttgat tcgtgagcct ttccgttggt atgaagatga taaagaaggt 1260
caaacgagct gggagactcc agtatataac attgatcata atggtgtttc agttgaagca 1320
caagataaac aaaaagcttc tcttctaagc cattatcgta aaatgattcg tgttcgtcag 1380
caacacgatg aacttgtcaa aggtaattta gaacctattt ctgtcaataa ttcacaggtt 1440
gttgcctata atcgtacgta taaaaataaa tcaattcaag tgtaccataa tatttcagac 1500
aagccggtta cattaactgt ttcaaacaaa ggaaaactga ttttttctag tgaattagga 1560
gcaaaaaagg aaaaatcaac attagtaatt ccagcgaata cgacagtgct agtaaagtaa 1620
<210>154
<211>539
<212>PRT
<213>环境的
<400>154
Met Pro Ser Ile Asn Ala Ser Asp Cys Lys Lys Lys Gly Asp Arg Ser
1 5 10 15
Met Lys Arg Lys Lys Trp Thr Ala Leu Ala Leu Ser Leu Pro Leu Val
20 25 30
Met Ser Leu Ser Thr Asn Ile Gln Ala Glu Thr Leu His Asn Asn Lys
35 40 45
Gly Gln Lys Ala Gln Thr Gly Asn Lys Asp Gly Ile Phe Tyr Glu Leu
50 55 60
Tyr Val Asn Ser Phe Tyr Asp Thr Asp Ser Asn Gly His Gly Asp Leu
65 70 75 80
Lys Gly Val Thr Lys Lys Leu Asp Tyr Leu Asn Asp Gly Asn Pro Arg
85 90 95
Thr Asn Asn Asp Leu Gln Ile Asn Gly Ile Trp Met Met Pro Ile Asn
100 105 110
Thr Ser Pro Ser Tyr His Lys Tyr Asp Val Thr Asp Tyr Tyr Asn Ile
115 120 125
Asp Pro Gln Tyr Gly Ser Leu Gln Asp Phe Arg Glu Leu Thr Thr Glu
130 135 140
Ala His Lys Arg Asn Val Lys Val Val Ile Asp Leu Val Ile Asn His
145 150 155 160
Thr Ser Ser Glu His Pro Trp Phe Val Asp Ala Leu Lys Asn Lys Asn
165 170 175
Ser Lys Tyr Arg Asp Tyr Tyr Ile Trp Ala Asp Lys Asn Thr Asp Leu
180 185 190
Asn Glu Lys Gly Pro Trp Gly Gln Gln Val Trp His Lys Ala Ser Asn
195 200 205
Gly Glu Tyr Phe Tyr Ala Thr Phe Trp Glu Gly Met Pro Asp Leu Asn
210 215 220
Tyr Asp Asn Pro Lys Val Arg Glu Glu Met Ile Lys Ile Gly Lys Phe
225 230 235 240
Trp Leu Lys Gln Gly Ala Asp Gly Phe Arg Leu Asp Ala Ala Met His
245 250 255
Ile Phe Lys Gly Gln Thr Pro Glu Gly Ala Lys Lys Asn Ile Glu Trp
260 265 270
Trp Asn Glu Phe Arg Asp Ala Met Arg Glu Thr Asn Pro Asn Thr Tyr
275 280 285
Leu Val Gly Glu Ile Trp Asp Gln Pro Glu Val Val Ala Pro Tyr Tyr
290 295 300
Gln Ser Leu Asp Ser Thr Phe Asn Phe Asp Leu Ala Tyr Lys Ile Val
305 310 315 320
Asn Set Val Lys Asn Gly Thr Asp Gln Gly Val Ala Ala Ala Ala Val
325 330 335
Ala Thr Asp Glu Leu Tyr Lys Thr Tyr Asn Pro Asn Lys Ile Asp Gly
340 345 350
Thr Phe Leu Thr Asn His Asp Gln Asn Arg Val Met Ser Glu Leu Asn
355 360 365
Gly Asp Val Asn Lys Ala Lys Ser Ala Ala Ser Ile Leu Leu Thr Leu
370 375 380
Pro Gly Asn Pro Phe Ile Tyr Tyr Gly Glu Glu Ile Gly Met Thr Gly
385 390 395 400
Gln Lys Pro Asp Glu Leu Ile Arg Glu Pro Phe Arg Trp Tyr Glu Asp
405 410 415
Asp Lys Glu Gly Gln Thr Ser Trp Glu Thr Pro Val Tyr Asn Ile Asp
420 425 430
His Asn Gly Val Ser Val Glu Ala Gln Asp Lys Gln Lys Ala Ser Leu
435 440 445
Leu Ser His Tyr Arg Lys Met Ile Arg Val Arg Gln Gln His Asp Glu
450 455 460
Leu Val Lys Gly Asn Leu Glu Pro Ile Ser Val Asn Asn Ser Gln Val
465 470 475 480
Val Ala Tyr Asn Arg Thr Tyr Lys Asn Lys Ser Ile Gln Val Tyr His
485 490 495
Asn Ile Ser Asp Lys Pro Val Thr Leu Thr Val Ser Asn Lys Gly Lys
500 505 510
Leu Ile Phe Ser Ser Glu Leu Gly Ala Lys Lys Glu Lys Ser Thr Leu
515 520 525
Val Ile Pro Ala Asn Thr Thr Val Leu Val Lys
530 535
<210>155
<211>1773
<212>DNA
<213>环境的
<400>155
gtgtcaagaa tgtttgcaaa acgattcaaa acctctttac tgccgttatt cgctggattt 60
ttattgctgt ttcatttggt tctggcagga ccaacggctg cgaatgctga aacggctaac 120
aaatcaaatg agcttacagc accgtcgatc aaagcggaa ccattcttca tgcttggaat 180
tggtcgttca atacgttaaa acacaatatg aaggatattc atgatgcagg atatacagcg 240
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aactggtact ggctctatca gccgacatcg taccaaattg gcaaccgtta cttaggtact 360
gaacaagaat ttaaagaaat gtgtgcagcc gctgaagaat atggcataaa ggttattgtt 420
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attccaaact ggacacatgg aaacacacaa attaaaaact ggtctgatcg atgggatgtc 540
acgcagaatg cattgctcgg gctgtatgac tggaatacac aaaatacaca agtacagtcc 600
tatttgaaac ggttcttaga aagagcattg aatgacgggg cagacggttt tcgatttgat 660
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atcacaaata catctgcaga gttccaatac ggagaaatcc tgcaggatag tgcttcaaga 780
gatgcttcat atgcgaatta tatgaatgtg acagcgtcta actatgggca ttccataagg 840
tccgctttaa agaatcgtaa tctgggcgtg tcgaatatct cccactatgc atcagatgtg 900
tctgcggaca agctagtgac atgggtagaa tcgcatgata cgtatgccaa tgatgatgaa 960
gagtcgacat ggatgagcga tgatgatatc cgtttaggct gggcggtgat agcttctcgt 1020
tcaggcagta cgcctctttt cttttccaga cctgagggag gcggaaatgg tgtgagattc 1080
ccggggaaaa gccaaatagg cgatcgcggg agtgctttat ttgaagatca ggctatcact 1140
gcggtcaata gatttcacaa tgtgatggct ggacagcctg aggaactctc gaacccaaat 1200
ggaaacaacc agatatttat gaatcagcgc ggctcacatg gcgttgtgct ggcaaatgca 1260
ggttcatcct ctgtttctat caatacgcca acaaaattgc ctgatggcag gtatgataat 1320
aaagctgggg caggttcatt tcaagtaaat gacggtaaac tgacaggcac gatcaatgcc 1380
aggtctgtgg ctgtgcttta tcctgatgat attgcaaaag cgcctcatgt tttccttgag 1440
aattacaaaa caggtgtaac acattctttc aatgatcaac tgacgattac actgcgtgca 1500
gatgcgaata caacaaaagc cgtttatcaa atcaataatg gaccagagac ggcgtttaag 1560
gatggagatc aattcacaat cggaaaagga gatccatttg gcaaaacata caccatcatg 1620
ttaaaaggaa cgaacagtga tggtgtaacg aggaccgagg aatacagttt tgttaaaaga 1680
gatccagctt cggccaaaac catcggctat caaaatccga atcattggag ccaggtaaat 1740
gcttatatct ataaacatga tgggggccgg gca 1773
<210>156
<211>591
<212>PRT
<213>环境的
<400>156
Val Ser Arg Met Phe Ala Lys Arg Phe Lys Thr Ser Leu Leu Pro Leu
1 5 10 15
Phe Ala Gly Phe Leu Leu Leu Phe His Leu Val Leu Ala Gly Pro Thr
20 25 30
Ala Ala Asn Ala Glu Thr Ala Asn Lys Ser Asn Glu Leu Thr Ala Pro
35 40 45
Ser Ile Lys Ser Gly Thr Ile Leu His Ala Trp Asn Trp Ser Phe Asn
50 55 60
Thr Leu Lys His Asn Met Lys Asp Ile His Asp Ala Gly Tyr Thr Ala
65 70 75 80
Ile Gln Thr Ser Pro Ile Asn Gln Val Lys Glu Gly Asn Gln Gly Asn
85 90 95
Lys Asn Met Ser Asn Trp Tyr Trp Leu Tyr Gln Pro Thr Ser Tyr Gln
100 105 110
Ile Gly Asn Arg Tyr Leu Gly Thr Glu Gln Glu Phe Lys Glu Met Cys
115 120 125
Ala Ala Ala Glu Glu Tyr Gly Ile Lys Val Ile Val Asp Ala Val Ile
130 135 140
Asn His Thr Thr Ser Asp Tyr Ala Ala Ile Ser Asn Glu Ile Lys Ser
145 150 155 160
Ile Pro Asn Trp Thr His Gly Asn Thr Gln Ile Lys Asn Trp Ser Asp
165 170 175
Arg Trp Asp Val Thr Gln Asn Ala Leu Leu Gly Leu Tyr Asp Trp Asn
180 185 190
Thr Gln Asn Thr Gln Val Gln Ser Tyr Leu Lys Arg Phe Leu Glu Arg
195 200 205
Ala Leu Asn Asp Gly Ala Asp Gly Phe Arg Phe Asp Ala Ala Lys His
210 215 220
Ile Glu Leu Pro Asp Asp Gly Ser Tyr Gly Ser Gln Phe Trp Pro Asn
225 230 235 240
Ile Thr Asn Thr Ser Ala Glu Phe Gln Tyr Gly Glu Ile Leu Gln Asp
245 250 255
Ser Ala Ser Arg Asp Ala Ser Tyr Ala Asn Tyr Met Asn Val Thr Ala
260 265 270
Ser Asn Tyr Gly His Ser Ile Arg Ser Ala Leu Lys Asn Arg Asn Leu
275 280 285
Gly Val Ser Asn Ile Ser His Tyr Ala Ser Asp Val Ser Ala Asp Lys
290 295 300
Leu Val Thr Trp Val Glu Ser His Asp Thr Tyr Ala Asn Asp Asp Glu
305 310 315 320
Glu Ser Thr Trp Met Ser Asp Asp Asp Ile Arg Leu Gly Trp Ala Val
325 330 335
Ile Ala Ser Arg Ser Gly Ser Thr Pro Leu Phe Phe Ser Arg Pro Glu
340 345 350
Gly Gly Gly Asn Gly Val Arg Phe Pro Gly Lys Ser Gln Ile Gly Asp
355 360 365
Arg Gly Ser Ala Leu Phe Glu Asp Gln Ala Ile Thr Ala Val Asn Arg
370 375 380
Phe His Asn Val Met Ala Gly Gln Pro Glu Glu Leu Ser Asn Pro Asn
385 390 395 400
Gly Asn Asn Gln Ile Phe Met Asn Gln Arg Gly Ser His Gly Val Val
405 410 415
Leu Ala Asn Ala Gly Ser Ser Ser Val Ser Ile Asn Thr Pro Thr Lys
420 425 430
Leu Pro Asp Gly Arg Tyr Asp Asn Lys Ala Gly Ala Gly Ser Phe Gln
435 440 445
Val Asn Asp Gly Lys Leu Thr Gly Thr Ile Asn Ala Arg Ser Val Ala
450 455 460
Val Leu Tyr Pro Asp Asp Ile Ala Lys Ala Pro His Val Phe Leu Glu
465 470 475 480
Asn Tyr Lys Thr Gly Val Thr His Ser Phe Asn Asp Gln Leu Thr Ile
485 490 495
Thr Leu Arg Ala Asp Ala Asn Thr Thr Lys Ala Val Tyr Gln Ile Asn
500 505 510
Asn Gly Pro Glu Thr Ala Phe Lys Asp Gly Asp Gln Phe Thr Ile Gly
515 520 525
Lys Gly Asp Pro Phe Gly Lys Thr Tyr Thr Ile Met Leu Lys Gly Thr
530 535 540
Asn Ser Asp Gly Val Thr Arg Thr Glu Glu Tyr Ser Phe Val Lys Arg
545 550 555 560
Asp Pro Ala Ser Ala Lys Thr Ile Gly Tyr Gln Asn Pro Asn His Trp
565 570 575
Ser Gln Val Asn Ala Tyr Ile Tyr Lys His Asp Gly Gly Arg Ala
580 585 590
<210>157
<211>1596
<212>DNA
<213>环境的
<400>157
atgcaaacga ttgcaaaaaa aggggatgaa acgatgaaag ggaaaaaatg gacagcatta 60
gctctaacac tgccgctggc tgctagctta tcaacaggcg ttcacgccga aaccgtacat 120
aaaggtaaag ctccaacagc agataaaaac ggtgtctttt atgaggtgta tgtaaactct 180
ttttacgatg caaataaaga tggacatggt gatttaaaag gtcttacaca aaagctggat 240
tatttgaatg acggcaattc tcataccaaa aatgatcttc aagtaaacgg aatttggatg 300
atgccggtaa acccttctcc tagctatcat aaatatgatg taacggacta ttataacatt 360
gatccgcagt acggaaatct gcaagatttt cgcaagctga tgaaagaagc agataaacga 420
gacgtaaagg ttattatgga cctcgttgtg aatcatacaa gcagtgaaca tccttggttt 480
caagctgcat taaaagataa aaacagcaag tacagagatt actatatttg ggccgataaa 540
aatactgatt taaatgaaaa aggatcttgg gggcagcaag tatggcataa agctccaaac 600
ggagagtatt tttatggtac gttttgggaa ggaatgcctg acttaaatta cgataatccc 660
gaagtaagaa aagaaatgat taacgtcggg aaattttggc taaagcaagg cgttgacggg 720
ttccgcttag atgctgcgct tcatattttt aaaggtcaaa cacctgaagg cgctaagaaa 780
aatatcgtgt ggtggaatga gtttagagat gcaatgaaaa aagaaaaccc taacgtatat 840
ctaacgggtg aagtatggga tcaaccggaa gtagtagctc cttactatca atcgcttgat 900
tctttattta actttgattt agcaggaaag attgtaaact ctgtaaaatc aggaaatgat 960
caaggaatcg cgactgcagc agccgcaact gatgagctgt tcaaatcata caatccaaat 1020
aaaattgacg gcattttctt aaccaaccat gaccaaaatc gcgtcatgag tgagctaagc 1080
ggcgatgtga ataaagcaaa gtcagctgcc tctatcttac ttacgcttcc tggcaacccg 1140
tatatttatt acggtgaaga aattggaatg accggtgaaa agcctgatga gttaatccgt 1200
gaaccgttcc gctggtacga aggcaatgga cttggacaaa ccagctggga aacatccgta 1260
tacaacaaag gcggcaatgg tgtgtcagta gagacacaaa caaaacaaaa ggattctttg 1320
ttaaatcatt accgtgaaat gattcgcgtg cgtcagcagc atgaagagtt agtaaaagga 1380
acccttcaat ctatttcagt agacagtaaa gaagtcgttg cctatagccg cacgtataaa 1440
ggcaaatcga ttagcgtgta tcataatatt tcaaatcaac cggtaaaagt atctgtaaca 1500
gcgaaaggta aattgatttt tgctagtgaa aaaggtgcaa aaaaagtcaa aaatcagctt 1560
gtggttccag ctaatacaac ggttttaata aaataa 1596
<210>158
<211>531
<212>PRT
<213>环境的
<400>158
Met Gln Thr Ile Ala Lys Lys Gly Asp Glu Thr Met Lys Gly Lys Lys
1 5 10 15
Trp Thr Ala Leu Ala Leu Thr Leu Pro Leu Ala Ala Ser Leu Ser Thr
20 25 30
Gly Val His Ala Glu Thr Val His Lys Gly Lys Ala Pro Thr Ala Asp
35 40 45
Lys Asn Gly Val Phe Tyr Glu Val Tyr Val Asn Ser Phe Tyr Asp Ala
50 55 60
Asn Lys Asp Gly His Gly Asp Leu Lys Gly Leu Thr Gln Lys Leu Asp
65 70 75 80
Tyr Leu Asn Asp Gly Asn Ser His Thr Lys Asn Asp Leu Gln Val Asn
85 90 95
Gly Ile Trp Met Met Pro Val Asn Pro Ser Pro Ser Tyr His Lys Tyr
100 105 110
Asp Val Thr Asp Tyr Tyr Asn Ile Asp Pro Gln Tyr Gly Asn Leu Gln
115 120 125
Asp Phe Arg Lys Leu Met Lys Glu Ala Asp Lys Arg Asp Val Lys Val
130 135 140
Ile Met Asp Leu Val Val Asn His Thr Ser Ser Glu His Pro Trp Phe
145 150 155 160
Gln Ala Ala Leu Lys Asp Lys Asn Ser Lys Tyr Arg Asp Tyr Tyr Ile
165 170 175
Trp Ala Asp Lys Asn Thr Asp Leu Asn Glu Lys Gly Ser Trp Gly Gln
180 185 190
Gln Val Trp His Lys Ala Pro Asn Gly Glu Tyr Phe Tyr Gly Thr Phe
195 200 205
Trp Glu Gly Met Pro Asp Leu Asn Tyr Asp Asn Pro Glu Val Arg Lys
210 215 220
Glu Met Ile Asn Val Gly Lys Phe Trp Leu Lys Gln Gly Val Asp Gly
225 230 235 240
Phe Arg Leu Asp Ala Ala Leu His Ile Phe Lys Gly Gln Thr Pro Glu
245 250 255
Gly Ala Lys Lys Asn Ile Val Trp Trp Asn Glu Phe Arg Asp Ala Met
260 265 270
Lys Lys Glu Asn Pro Asn Val Tyr Leu Thr Gly Glu Val Trp Asp Gln
275 280 285
Pro Glu Val Val Ala Pro Tyr Tyr Gln Ser Leu Asp Ser Leu Phe Asn
290 295 300
Phe Asp Leu Ala Gly Lys Ile Val Asn Ser Val Lys Ser Gly Asn Asp
305 310 315 320
Gln Gly Ile Ala Thr Ala Ala Ala Ala Thr Asp Glu Leu Phe Lys Ser
325 330 335
Tyr Asn Pro Asn Lys Ile Asp Gly Ile Phe Leu Thr Asn His Asp Gln
340 345 350
Asn Arg Val Met Ser Glu Leu Ser Gly Asp Val Asn Lys Ala Lys Ser
355 360 365
Ala Ala Ser Ile Leu Leu Thr Leu Pro Gly Asn Pro Tyr Ile Tyr Tyr
370 375 380
Gly Glu Glu Ile Gly Met Thr Gly Glu Lys Pro Asp Glu Leu Ile Arg
385 390 395 400
Glu Pro Phe Arg Trp Tyr Glu Gly Asn Gly Leu Gly Gln Thr Ser Trp
405 410 415
Glu Thr Ser Val Tyr Asn Lys Gly Gly Asn Gly Val Ser Val Glu Thr
420 425 430
Gln Thr Lys Gln Lys Asp Ser Leu Leu Asn His Tyr Arg Glu Met Ile
435 440 445
Arg Val Arg Gln Gln His Glu Glu Leu Val Lys Gly Thr Leu Gln Ser
450 455 460
Ile Ser Val Asp Ser Lys Glu Val Val Ala Tyr Ser Arg Thr Tyr Lys
465 470 475 480
Gly Lys Ser Ile Ser Val Tyr His Asn Ile Ser Asn Gln Pro Val Lys
485 490 495
Val Ser Val Thr Ala Lys Gly Lys Leu Ile Phe Ala Ser Glu Lys Gly
500 505 510
Ala Lys Lys Val Lys Asn Gln Leu Val Val Pro Ala Asn Thr Thr Val
515 520 525
Leu Ile Lys
530
<210>159
<211>1587
<212>DNA
<213>环境的
<400>159
atgcaaaaaa aaggggatga aacgatgaaa gggaaaaaat ggacagcttt agctctaaca 60
ctgccgctgg ctgctagctt atcaacaggc gttcacgccg aaaccgtaca taaaggtaaa 120
tctccaacag cagataaaaa cggtgtattt tatgaggtgt atgtaaactc tttttacgat 180
gcaaataaag atggacatgg tgatttaaaa ggtcttacac aaaagttgga ttatttaaat 240
gatggcaatt ctcatacaaa gaatgatctt caagtaaacg ggatttggat gatgccggtc 300
aacccttctc ccagctatca taaatatgat gtaacggact attataatat tgatccgcag 360
tatggaaatc tgcaagattt tcgcaaactg atgaaagaag cagataaacg agatgtaaaa 420
gtcattatgg acctcgttgt gaatcatacg agcagtgaac acccttggtt tcaagctgca 480
ttaaaagata aaaacagcaa gtacagagat tactatatct gggctgataa aaataccgac 540
ttgaatgaaa aaggatcttg gggacagcaa gtatggcata aagctccaaa cggagagtat 600
ttttacggaa cgttttggga aggaatgccg gacttaaatt acgataatcc tgaagtaaga 660
aaagaaatga ttaacgtagg aaagttttgg ctaaagcaag gagttgatgg gttccgtcta 720
gatgctgcgc ttcatatttt taaaggccaa acacctgaag gcgctaagaa aaatctcctg 780
tggtggaatg aatttagaga tgcaatgaaa aaggaaaacc ctaacgtata tctaacgggt 840
gaagtatggg atcaaccgga agtagtagct ccttactatc aatcgcttga ttctttattt 900
aactttgatt tagcaggaaa gattgtaaac tctgtaaaat caggaaatga tcaaggaatc 960
gcgactgcag cagcggcaac ggatgaactg ttcaaatcat acaatccaaa taaaattgac 1020
ggtattttct taaccaacca tgaccaaaat cgcgtcatga gtgagctaaa cggcgatgtg 1080
aataaagcaa agtcagctgc ctctatctta cttacgcttc ctggcaaccc gtatatttat 1140
tacggtgaag aaatcggcat gaccggtgaa aagcctgatg agttaatccg tgaaccgttc 1200
ccctggtacg aaggaaacgg acttggacaa accagctggg aaacacctgt atataacaaa 1260
ggcggcaacg gcgtgtctgt agaagcacaa acaaaacaaa aggactcttt gttaaatcat 1320
taccgtgaaa tgattcgcgt gcgtcagcag cacgaagagt tagtaaaagg aacgcttcaa 1380
tctatttcag tagacagtaa agaagtcgtt gcctatagcc gtacgtataa aggcaaatcg 1440
attagcgtgt atcataatat ttcaaatcaa ccggtaaaag tatctgtagc agcaaaaggt 1500
aaattgattt ttgctagtga aaaaggtgct aagaaagtca aaaatcagct tgtgattccg 1560
gcgaatacaa cggttttaat aaaataa 1587
<210>160
<211>528
<212>PRT
<213>环境的
<400>160
Met Gln Lys Lys Gly Asp Glu Thr Met Lys Gly Lys Lys Trp Thr Ala
1 5 10 15
Leu Ala Leu Thr Leu Pro Leu Ala Ala Ser Leu Ser Thr Gly Val His
20 25 30
Ala Glu Thr Val His Lys Gly Lys Ser Pro Thr Ala Asp Lys Asn Gly
35 40 45
Val Phe Tyr Glu Val Tyr Val Asn Ser Phe Tyr Asp Ala Asn Lys Asp
50 55 60
Gly His Gly Asp Leu Lys Gly Leu Thr Gln Lys Leu Asp Tyr Leu Asn
65 70 75 80
Asp Gly Asn Ser His Thr Lys Asn Asp Leu Gln Val Asn Gly Ile Trp
85 90 95
Met Met Pro Val Asn Pro Ser Pro Ser Tyr His Lys Tyr Asp Val Thr
100 105 110
Asp Tyr Tyr Asn Ile Asp Pro Gln Tyr Gly Asn Leu Gln Asp Phe Arg
115 120 125
Lys Leu Met Lys Glu Ala Asp Lys Arg Asp Val Lys Val Ile Met Asp
130 135 140
Leu Val Val Asn His Thr Ser Ser Glu His Pro Trp Phe Gln Ala Ala
145 150 155 160
Leu Lys Asp Lys Asn Ser Lys Tyr Arg Asp Tyr Tyr Ile Trp Ala Asp
165 170 175
Lys Asn Thr Asp Leu Asn Glu Lys Gly Ser Trp Gly Gln Gln Val Trp
180 185 190
His Lys Ala Pro Asn Gly Glu Tyr Phe Tyr Gly Thr Phe Trp Glu Gly
195 200 205
Met Pro Asp Leu Asn Tyr Asp Asn Pro Glu Val Arg Lys Glu Met Ile
210 215 220
Asn Val Gly Lys Phe Trp Leu Lys Gln Gly Val Asp Gly Phe Arg Leu
225 230 235 240
Asp Ala Ala Leu His Ile Phe Lys Gly Gln Thr Pro Glu Gly Ala Lys
245 250 255
Lys Asn Leu Leu Trp Trp Asn Glu Phe Arg Asp Ala Met Lys Lys Glu
260 265 270
Asn Pro Asn Val Tyr Leu Thr Gly Glu Val Trp Asp Gln Pro Glu Val
275 280 285
Val Ala Pro Tyr Tyr Gln Ser Leu Asp Ser Leu Phe Asn Phe Asp Leu
290 295 300
Ala Gly Lys Ile Val Asn Ser Val Lys Ser Gly Asn Asp Gln Gly Ile
305 310 315 320
Ala Thr Ala Ala Ala Ala Thr Asp Glu Leu Phe Lys Ser Tyr Asn Pro
325 330 335
Asn Lys Ile Asp Gly Ile Phe Leu Thr Asn His Asp Gln Asn Arg Val
340 345 350
Met Ser Glu Leu Asn Gly Asp Val Asn Lys Ala Lys Ser Ala Ala Ser
355 360 365
Ile Leu Leu Thr Leu Pro Gly Asn Pro Tyr Ile Tyr Tyr Gly Glu Glu
370 375 380
Ile Gly Met Thr Gly Glu Lys Pro Asp Glu Leu Ile Arg Glu Pro Phe
385 390 395 400
Pro Trp Tyr Glu Gly Asn Gly Leu Gly Gln Thr Ser Trp Glu Thr Pro
405 410 415
Val Tyr Asn Lys Gly Gly Asn Gly Val Ser Val Glu Ala Gln Thr Lys
420 425 430
Gln Lys Asp Ser Leu Leu Asn His Tyr Arg Glu Met Ile Arg Val Arg
435 440 445
Gln Gln His Glu Glu Leu Val Lys Gly Thr Leu Gln Ser Ile Ser Val
450 455 460
Asp Ser Lys Glu Val Val Ala Tyr Ser Arg Thr Tyr Lys Gly Lys Ser
465 470 475 480
Ile Ser Val Tyr His Asn Ile Ser Asn Gln Pro Val Lys Val Ser Val
485 490 495
Ala Ala Lys Gly Lys Leu Ile Phe Ala Ser Glu Lys Gly Ala Lys Lys
500 505 510
Val Lys Asn Gln Leu Val Ile Pro Ala Asn Thr Thr Val Leu Ile Lys
515 520 525
<210>161
<211>1623
<212>DNA
<213>细菌的
<400>161
gtggatccaa agaattgtag tcaatttatg caaacgattg caaa aaagg ggatgaaacg 60
atgaaaggga aaaaatggac agctttagct ctaacactgc cgctggctgc tagcttatca 120
acaggtgttc acgccgaaac cgtacataaa ggtaaagctc caacagcaga taaaaacggt 180
gtcttttatg aggtatatgt aaactctttt tacgatgcaa ataaagatgg acatggtgat 240
ttaaaaggcc ttacacaaaa gttggactat ttaaatgacg gaaattctca tacaaagaat 300
gatcttcaag taaacgggat ttggatgatg ccggtcaacc cttctcctag ctatcataaa 360
tatgatgtaa cggactatta taatattgat ccgcagtatg gaaatctgca agattttcgc 420
aaacttatga aagaagcaga taaacgagac gtaaaagtca ttatggacct tgttgtgaat 480
catacgagca gtgaacaccc ttggtttcaa gctgcgttga aagataaaaa cagcaagtac 540
agagattact atatttgggc tgataaaaat actgacttga atgaaaaagg atcttgggga 600
caacaagtat ggcataaagc tccaaacgga gagtattttt acggaacgtt ctgggaagga 660
atgcctgact taaattacga taaccctgaa gtaagaaaag aaatgattaa cgtcggaaag 720
ttttggctaa aacaaggcgt tgacggcttc cgcttagatg ctgcccttca tatttttaaa 780
ggtcaaacgc ctgaaggcgc taagaaaaac attctatggt ggaatgagtt tagagatgcg 840
atgaaaaaag aaaacccgaa cgtatatcta acgggtgaag tgtgggacca gccagaagta 900
gtagcccctt actatcaatc acttgattct ctatttaatt ttgatttagc aggaaaaatt 960
gtcagctctg taaaagcagg aaatgatcaa ggaatcgcca ctgcagcagc ggcaactgat 1020
gagctgttca aatcatacaa tccaaataaa attgacggca ttttcttaac caaccatgac 1080
caaaatcgcg tcatgagtga gttaagcggc gatgtgaata aagcaaaatc agccgcctct 1140
atcttactta cgcttcctgg aaatccgtat atttattacg gtgaagaaat tggcatgaca 1200
ggtgaaaagc ctgatgaatt aatccgtgaa ccgttccgct ggtacgaagg caacggaatt 1260
ggacaaacta gctgggaaac acctgtatat aacaaaggcg gtaacggcgt gtctgtagaa 1320
gcacaaacaa aacaaaagga ttccttgtta aatcattacc gtgaaatgat tcgtgtgcgc 1380
cagcagcacg aagagttagt aaaaggaacg cttcaatcca tttcagtaga cagtaaagaa 1440
gtcgttgcct atagccgcac gtacaaaggc aaatcgatta gcgtgtatca taatatttca 1500
aatcaacctg taaaagtatc tgtagcagcg aaaggtaact tgatttttgc tagtgaaaaa 1560
ggtgctaaga aagtcaaaaa tcagcttgtg attccggcga atgcgacggt tttaataaaa 1620
taa 1623
<210>162
<211>540
<212>PRT
<213>细菌的
<400>162
Val Asp Pro Lys Asn Cys Ser Gln Phe Met Gln Thr Ile Ala Lys Lys
1 5 10 15
Gly Asp Glu Thr Met Lys Gly Lys Lys Trp Thr Ala Leu Ala Leu Thr
20 25 30
Leu Pro Leu Ala Ala Ser Leu Ser Thr Gly Val His Ala Glu Thr Val
35 40 45
His Lys Gly Lys Ala Pro Thr Ala Asp Lys Asn Gly Val Phe Tyr Glu
50 55 60
Val Tyr Val Asn Ser Phe Tyr Asp Ala Asn Lys Asp Gly His Gly Asp
65 70 75 80
Leu Lys Gly Leu Thr Gln Lys Leu Asp Tyr Leu Asn Asp Gly Asn Ser
85 90 95
His Thr Lys Asn Asp Leu Gln Val Asn Gly Ile Trp Met Met Pro Val
100 105 110
Asn Pro Ser Pro Ser Tyr His Lys Tyr Asp Val Thr Asp Tyr Tyr Asn
115 120 125
Ile Asp Pro Gln Tyr Gly Asn Leu Gln Asp Phe Arg Lys Leu Met Lys
130 135 140
Glu Ala Asp Lys Arg Asp Val Lys Val Ile Met Asp Leu Val Val Asn
145 150 155 160
His Thr Ser Ser Glu His Pro Trp Phe Gln Ala Ala Leu Lys Asp Lys
165 170 175
Asn Ser Lys Tyr Arg Asp Tyr Tyr Ile Trp Ala Asp Lys Asn Thr Asp
180 185 190
Leu Asn Glu Lys Gly Ser Trp Gly Gln Gln Val Trp His Lys Ala Pro
195 200 205
Asn Gly Glu Tyr Phe Tyr Gly Thr Phe Trp Glu Gly Met Pro Asp Leu
210 215 220
Asn Tyr Asp Asn Pro Glu Val Arg Lys Glu Met Ile Asn Val Gly Lys
225 230 235 240
Phe Trp Leu Lys Gln Gly Val Asp Gly Phe Arg Leu Asp Ala Ala Leu
245 250 255
His Ile Phe Lys Gly Gln Thr Pro Glu Gly Ala Lys Lys Asn Ile Leu
260 265 270
Trp Trp Asn Glu Phe Arg Asp Ala Met Lys Lys Glu Asn Pro Asn Val
275 280 285
Tyr Leu Thr Gly Glu Val Trp Asp Gln Pro Glu Val Val Ala Pro Tyr
290 295 300
Tyr Gln Ser Leu Asp Ser Leu Phe Asn Phe Asp Leu Ala Gly Lys Ile
305 310 315 320
Val Ser Ser Val Lys Ala Gly Asn Asp Gln Gly Ile Ala Thr Ala Ala
325 330 335
Ala Ala Thr Asp Glu Leu Phe Lys Ser Tyr Asn Pro Asn Lys Ile Asp
340 345 350
Gly Ile Phe Leu Thr Asn His Asp Gln Asn Arg Val Met Ser Glu Leu
355 360 365
Ser Gly Asp Val Asn Lys Ala Lys Ser Ala Ala Ser Ile Leu Leu Thr
370 375 380
Leu Pro Gly Asn Pro Tyr Ile Tyr Tyr Gly Glu Glu Ile Gly Met Thr
385 390 395 400
Gly Glu Lys Pro Asp Glu Leu Ile Arg Glu Pro Phe Arg Trp Tyr Glu
405 410 415
Gly Asn Gly Ile Gly Gln Thr Ser Trp Glu Thr Pro Val Tyr Asn Lys
420 425 430
Gly Gly Asn Gly Val Ser Val Glu Ala Gln Thr Lys Gln Lys Asp Ser
435 440 445
Leu Leu Asn His Tyr Arg Glu Met Ile Arg Val Arg Gln Gln His Glu
450 455 460
Glu Leu Val Lys Gly Thr Leu Gln Ser Ile Ser Val Asp Ser Lys Glu
465 470 475 480
Val Val Ala Tyr Ser Arg Thr Tyr Lys Gly Lys Ser Ile Ser Val Tyr
485 490 495
His Asn Ile Ser Asn Gln Pro Val Lys Val Ser Val Ala Ala Lys Gly
500 505 510
Asn Leu Ile Phe Ala Ser Glu Lys Gly Ala Lys Lys Val Lys Asn Gln
515 520 525
Leu Val Ile Pro Ala Asn Ala Thr Val Leu Ile Lys
530 535 540
<210>163
<211>1422
<212>DNA
<213>环境的
<400>163
atggtacgtc ccgaacgacg ggctgcattg gaaccgacta tcgaacgact cgcagcactt 60
gaaagacatt gggtgacgac ggtgtggatt ccgccggcgt acaaaggcac gtcacagaac 120
gatgtcgggt atggggcgta cgatttatac gatctcggcg aattcaacca aaaagggacg 180
acccggacga agtacgggac gaaagcgcag ctccagaccg ccatctcgaa cttgcgcggt 240
aaagggatcg gtgtgtacgg cgacgtcgtc atgaatcaca agggcggggc cgattatacc 300
gaatccgttc aggcgatcga ggtcaatccg tcgaaccgga accaagaaac gtccggtgag 360
tatggcatct cggcctggac tgggttcaac ttcgcggggc gcaacaatac atactcgccg 420
ttcaaatggc gctggtacca ttttgacggt accgattggg atcagtcacg cagcttgagc 480
cgcatctata agttcaagag cacaggcaag gcgtgggaca cggacgtgtc gaacgagaac 540
ggcaactatg attatcttat gtatgccgac gtcgatttcg agcatcccga ggtccgccaa 600
gagatgaaga actggggcaa atggtacgcc gactcgctcg ggctcgacgg tttccggttg 660
gatgcggtca aacatatcag ccactcgtac ttgaaggagt gggtgacgag cgtgcgccag 720
acgaccggga aagagatgtt cacggtcgcc gagtattgga agaacgatct cggtgccatc 780
aacgactatc tgtataagac gggctacacg cactccgtct tcgatgtgcc gctccattat 840
aacttccaag cggccggtaa cggcggcggg tattacgata tgcgcaacat cttgaaaggc 900
accgtcaccg aacagcatcc gtcgctgtcc gtgacgattg tcgataacca cgactcacag 960
ccgggccagt cgctcgagtc gacggtcgcc aactggttca aaccgctcgc ctacgcgacg 1020
atcatgacgc gcggtcaggg ttatccggcc ctcttctatg gagactatta tggcacgaaa 1080
gggacgacga accgcgaaat cccgaacatg tcgggcacgc tccaaccgat tttgaaggca 1140
cgaaaagact tcgcctacgg gacgcagcat gactacctcg atcatcagga cgtcatcggc 1200
tggacacgtg aaggtgtgac cgaccgtgcc aaatcgggtc tcgcgacgat tctatcggac 1260
ggtccgggcg gctcgaagtg gatgtacgtc ggcaaacaga acgccggcga ggtatggaaa 1320
gacatgacga acaacaacgc ccgtctcgtc acgatcaatg ctgacggctg gggtcagttc 1380
ttcgtcaacg gaggctcggt ctcgatttat acgcaacaat aa 1422
<210>164
<211>473
<212>PRT
<213>环境的
<400>164
Met Val Arg Pro Glu Arg Arg Ala Ala Leu Glu Pro Thr Ile Glu Arg
1 5 10 15
Leu Ala Ala Leu Glu Arg His Trp Val Thr Thr Val Trp He Pro Pro
20 25 30
Ala Tyr Lys Gly Thr Ser Gln Asn Asp Val Gly Tyr Gly Ala Tyr Asp
35 40 45
Leu Tyr Asp Leu Gly Glu Phe Asn Gln Lys Gly Thr Thr Arg Thr Lys
50 55 60
Tyr Gly Thr Lys Ala Gln Leu Gln Thr Ala Ile Ser Asn Leu Arg Gly
65 70 75 80
Lys Gly Ile Gly Val Tyr Gly Asp Val Val Met Asn His Lys Gly Gly
85 90 95
Ala Asp Tyr Thr Glu Ser Val Gln Ala Ile Glu Val Asn Pro Ser Asn
100 105 110
Arg Asn Gln Glu Thr Ser Gly Glu Tyr Gly Ile Ser Ala Trp Thr Gly
115 120 125
Phe Asn Phe Ala Gly Arg Asn Asn Thr Tyr Ser Pro Phe Lys Trp Arg
130 135 140
Trp Tyr His Phe Asp Gly Thr Asp Trp Asp Gln Ser Arg Ser Leu Ser
145 150 155 160
Arg Ile Tyr Lys Phe Lys Ser Thr Gly Lys Ala Trp Asp Thr Asp Val
165 170 175
Ser Asn Glu Asn Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Met Tyr Ala Asp Val Asp
180 185 190
Phe Glu His Pro Glu Val Arg Gln Glu Met Lys Asn Trp Gly Lys Trp
195 200 205
Tyr Ala Asp Ser Leu Gly Leu Asp Gly Phe Arg Leu Asp Ala Val Lys
210 215 220
His Ile Ser His Ser Tyr Leu Lys Glu Trp Val Thr Ser Val Arg Gln
225 230 235 240
Thr Thr Gly Lys Glu Met Phe Thr Val Ala Glu Tyr Trp Lys Asn Asp
245 250 255
Leu Gly Ala Ile Asn Asp Tyr Leu Tyr Lys Thr Gly Tyr Thr His Ser
260 265 270
Val Phe Asp Val Pro Leu His Tyr Asn Phe Gln Ala Ala Gly Asn Gly
275 280 285
Gly Gly Tyr Tyr Asp Met Arg Asn Ile Leu Lys Gly Thr Val Thr Glu
290 295 300
Gln His Pro Ser Leu Ser Val Thr Ile Val Asp Asn His Asp Ser Gln
305 310 315 320
Pro Gly Gln Ser Leu Glu Ser Thr Val Ala Asn Trp Phe Lys Pro Leu
325 330 335
Ala Tyr Ala Thr Ile Met Thr Arg Gly Gln Gly Tyr Pro Ala Leu Phe
340 345 350
Tyr Gly Asp Tyr Tyr Gly Thr Lys Gly Thr Thr Asn Arg Glu Ile Pro
355 360 365
Asn Met Ser Gly Thr Leu Gln Pro Ile Leu Lys Ala Arg Lys Asp Phe
370 375 380
Ala Tyr Gly Thr Gln His Asp Tyr Leu Asp His Gln Asp Val Ile Gly
385 390 395 400
Trp Thr Arg Glu Gly Val Thr Asp Arg Ala Lys Ser Gly Leu Ala Thr
405 410 415
Ile Leu Ser Asp Gly Pro Gly Gly Ser Lys Trp Met Tyr Val Gly Lys
420 425 430
Gln Asn Ala Gly Glu Val Trp Lys Asp Met Thr Asn Asn Asn Ala Arg
435 440 445
Leu Val Thr Ile Asn Ala Asp Gly Trp Gly Gln Phe Phe Val Asn Gly
450 455 460
Gly Ser Val Ser Ile Tyr Thr Gln Gln
465 470
<210>165
<211>1437
<212>DNA
<213>细菌的
<400>165
atgcagtatt tcgagtggta cgtgccaaat gatggggaac attggaatcg tttgcgtaat 60
gatgctgaaa atttagctca taaaggaatt acatctgtat ggataccacc cgtatataaa 120
ggaacttcac aaaatgatgt agggtatgga gtgtatgatg tatatgattt gggagaattc 180
aatcaaaaag gaacgatacg gacaaaatat gggacaaaag cacaattaaa atctgcaatt 240
gaggctttac ataatcaaaa tatcgatgta tacggtgatg ttgttatgaa ccataaaggt 300
ggggcagatt atactgaggt tgtaacagcc gttgaggtag accgtaacaa tcgaaatatt 360
gaaacatcga gtgattatca aatagatgcg tggacgggat ttgattttcc aggacgcagg 420
gactcctatt ctaattttaa atggagatgg tttcattttg atggaacaga ttgggatgag 480
ggaaggaaat taaatagaat ttataaattt aaaggcgtag gtaaagcttg ggactgggaa 540
gtgtctagtg agaatggtaa ctatgattat ttaatgtatg cagatcttga tttcgatcat 600
cctgaagttg caaatgaaat gaaaaactgg ggaacctggt atgcggacga attaaattta 660
gatggctttc gtttagacgc agttaaacat attgaccatg agtatcttcg tgattgggta 720
aatcatgtta gaaagcaaac ggggaaggaa atgtttacag tagctgaata ttggcaaaat 780
gatattcgta ctttaaacaa ttatttaggg aaagtaaatt ataatcaatc tgtgttcgat 840
gcacctcttc attataattt tcattatgct tcaacaggga atggaaatta tgatatgagg 900
aatattttaa agggtacggt agtagaaagt catcctacac ttgctgttac tcttgttgag 960
aatcatgatt ctcagcctgg acagtcatta gaatctgttg tgagtccttg gtttaagccg 1020
ttggcctatg catttatttt aacgcgtgca gaagggtatc cttctgtttt ttatggagat 1080
tactatggca caaatggaaa tagtagttat gaaattccaa cgttaaagga taaaattgat 1140
ccaattctga cggcacgaaa aaactttgca tatggtacgc aacatgatta tttagaccat 1200
ccagatgtga ttggctggac aagagaaggg gatagtatac atgctaattc tggtttagca 1260
acattaatct ctgatggacc aggaggatca aaatggatga atgttggaaa gaacaacgca 1320
ggggaaatat ggtacgatat tacgggcaat caaacaaata ctgtaacgat taataaagat l380
ggatgggggc agttccatgt aaatgggggc tctgtttcaa tatatgttca gaagtaa 1437
<210>166
<211>478
<212>PRT
<213>细菌的
<400>166
Met Gln Tyr Phe Glu Trp Tyr Val Pro Asn Asp Gly Glu His Trp Asn
1 5 10 15
Arg Leu Arg Asn Asp Ala Glu Asn Leu Ala His Lys Gly Ile Thr Ser
20 25 30
Val Trp Ile Pro Pro Val Tyr Lys Gly Thr Ser Gln Asn Asp Val Gly
35 40 45
Tyr Gly Val Tyr Asp Val Tyr Asp Leu Gly Glu Phe Asn Gln Lys Gly
50 55 60
Tlhr Ile Arg Thr Lys Tyr Gly Thr Lys Ala Gln Leu Lys Ser Ala Ile
65 70 75 80
Glu Ala Leu His Asn Gln Asn Ile Asp Val Tyr Gly Asp Val Val Met
85 90 95
Asn His Lys Gly Gly Ala Asp Tyr Thr Glu Val Val Thr Ala Val Glu
100 105 110
Val Asp Arg Asn Asn Arg Asn Ile Glu Thr Ser Ser Asp Tyr Gln Ile
115 120 125
Asp Ala Trp Thr Gly Phe Asp Phe Pro Gly Arg Arg Asp Ser Tyr Ser
130 135 140
Asn Phe Lys Trp Arg Trp Phe His Phe Asp Gly Thr Asp Trp Asp Glu
145 150 155 160
Gly Arg Lys Leu Asn Arg Ile Tyr Lys Phe Lys Gly Val Gly Lys Ala
165 170 175
Trp Asp Trp Glu Val Ser Ser Glu Asn Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Met
180 185 190
Tyr Ala Asp Leu Asp Phe Asp His Pro Glu Val Ala Asn Glu Met Lys
195 200 205
Asn Trp Gly Thr Trp Tyr Ala Asp Glu Leu Asn Leu Asp Gly Phe Arg
210 215 220
Leu Asp Ala Val Lys His Ile Asp His Glu Tyr Leu Arg Asp Trp Val
225 230 235 240
Asn His Val Arg Lys Gln Thr Gly Lys Glu Met Phe Thr Val Ala Glu
245 250 255
Tyr Trp Gln Asn Asp Ile Arg Thr Leu Asn Asn Tyr Leu Gly Lys Val
260 265 270
Asn Tyr Asn Gln Ser Val Phe Asp Ala Pro Leu His Tyr Asn Phe His
275 280 285
Tyr Ala Ser Thr Gly Asn Gly Asn Tyr Asp Met Arg Asn Ile Leu Lys
290 295 300
Gly Thr Val Val Glu Ser His Pro Thr Leu Ala Val Thr Leu Val Glu
305 310 315 320
Asn His Asp Ser Gln Pro Gly Gln Ser Leu Glu Ser Val Val Ser Pro
325 330 335
Trp Phe Lys Pro Leu Ala Tyr Ala Phe Ile Leu Thr Arg Ala Glu Gly
340 345 350
Tyr Pro Ser Val Phe Tyr Gly Asp Tyr Tyr Gly Thr Asn Gly Asn Ser
355 360 365
Ser Tyr Glu Ile Pro Thr Leu Lys Asp Lys Ile Asp Pro Ile Leu Thr
370 375 380
Ala Arg Lys Asn Phe Ala Tyr Gly Thr Gln His Asp Tyr Leu Asp His
385 390 395 400
Pro Asp Val Ile Gly Trp Thr Arg Glu Gly Asp Ser Ile His Ala Asn
405 410 415
Ser Gly Leu Ala Thr Leu Ile Ser Asp Gly Pro Gly Gly Ser Lys Trp
420 425 430
Met Asn Val Gly Lys Asn Asn Ala Gly Glu Ile Trp Tyr Asp Ile Thr
435 440 445
Gly Asn Gln Thr Asn Thr Val Thr Ile Asn Lys Asp Gly Trp Gly Gln
450 455 460
Phe Hls Val Asn Gly Gly Ser Val Ser Ile Tyr Val Gln Lys
465 470 475
<210>167
<211>1596
<212>DNA
<213>环境的
<400>167
atgcaaacga ttgcaaaaaa aggggatgaa acgatgaaag ggaaaaaatg gacagcttta 60
gctctaacac tgccgctggc tgctagctta tcaacaggcg ttcacgccga aaccgtacat 120
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tatttaaatg atggcaattc tcatacaaag aatgatcttc aagtaaacgg gatttggatg 300
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caagctgcat taaaagataa aaacagcaag tacagagatt actatatctg ggctgataaa 540
aataccgact tgaatgaaaa aggatcttgg ggacagcaag tatggcataa agccccaaac 600
ggagagtatt tttacggaac gttttgggaa ggaatgccgg acttaaatta cgataatcct 660
gaagtaagaa aagaaatgat taacgtagga aagttttggc taaagcaagg agttgacggg 720
ttccgtctag atgctgcgct tcatattttt aaaggccaaa cacctgaagg cgctaagaaa 780
aatctcctgt ggtggaatga atttagagat gcaatgaaaa aggaaaaccc taacgtatat 840
ctaacgggtg aagtatggga tcaaccggaa gtagtagctc cttactatca atcgcttgat 900
tctttattta actttgattt agcaggaaag attgtaaact ctgtaaaatc aggaaatgat 960
caaggaatcg cgactgcagc agcggcaacg gatgaactgt tcaaatcata caatccaaat 1020
aaaattgacg gtattttctt aaccaaccat gaccaaaatc gcgtcatgag tgagctaagc 1080
ggcgatgtga ataaagcaaa gtcagctgcc tctatcttac ttacgcttcc tggcaacccg 1140
tatatttatt acggtgaaga aatcggcatg accggtgaaa agcctgatga gttaatccgt 1200
gaaccgttcc gctggtacga aggaaacgga cttggacaaa ccagctggga aacacctgta 1260
tacaacaaag gcggcaacgg cgtgtctgta gaagcacaaa caaaacaaaa ggactctttg 1320
ttaaatcatt accgtgaaat gattcgcgtg cgtcagcagc acgaagagtt agtaaaagga 1380
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gcaaaaggta aattgatttt tggtagtgaa aaaggtgcta agaaagtcaa aaatcagctt 1560
gtgattccgg cgaatacaac ggttttaata aaataa 1596
<210>168
<211>531
<212>PRT
<213>环境的
<400>168
Met Gln Thr Ile Ala Lys Lys Gly Asp Glu Thr Met Lys Gly Lys Lys
1 5 10 15
Trp Thr Ala Leu Ala Leu Thr Leu Pro Leu Ala Ala Ser Leu Ser Thr
20 25 30
Gly Val His Ala Glu Thr Val His Lys Gly Lys Ser Pro Thr Ala Asp
35 40 45
Lys Asn Gly Val Phe Tyr Glu Val Tyr Val Asn Ser Phe Tyr Asp Ala
50 55 60
Asn Lys Asp Gly His Gly Asp Leu Lys Gly Leu Thr Gln Lys Leu Asp
65 70 75 80
Tyr Leu Asn Asp Gly Asn Ser His Thr Lys Asn Asp Leu Gln Val Asn
85 90 95
Gly Ile Trp Met Met Pro Val Asn Pro Ser Pro Ser Tyr His Lys Tyr
100 105 110
Asp Val Thr Asp Tyr Tyr Asn Ile Asp Pro Gln Tyr Gly Asn Leu Gln
115 120 125
Asp Phe Arg Lys Leu Met Lys Glu Ala Asp Lys Arg Asp Val Lys Val
130 135 140
Ile Met Asp Leu Val Val Asn His Thr Ser Ser Glu His Pro Trp Phe
145 150 155 160
Gln Ala Ala Leu Lys Asp Lys Asn Ser Lys Tyr Arg Asp Tyr Tyr Ile
165 170 175
Trp Ala Asp Lys Asn Thr Asp Leu Asn Glu Lys Gly Ser Trp Gly Gln
180 185 190
Gln Val Trp His Lys Ala Pro Asn Gly Glu Tyr Phe Tyr Gly Thr Phe
195 200 205
Trp Glu Gly Met Pro Asp Leu Asn Tyr Asp Asn Pro Glu Val Arg Lys
210 215 220
Glu Met Ile Asn Val Gly Lys Phe Trp Leu Lys Gln Gly Val Asp Gly
225 230 235 240
Phe Arg Leu Asp Ala Ala Leu His Ile Phe Lys Gly Gln Thr Pro Glu
245 250 255
Gly Ala Lys Lys Asn Leu Leu Trp Trp Asn Glu Phe Arg Asp Ala Met
260 265 270
Lys Lys Glu Asn Pro Asn Val Tyr Leu Thr Gly Glu Val Trp Asp Gln
275 280 285
Pro Glu Val Val Ala Pro Tyr Tyr Gln Ser Leu Asp Ser Leu Phe Asn
290 295 300
Phe Asp Leu Ala Gly Lys Ile Val Asn Ser Val Lys Ser Gly Asn Asp
305 310 315 320
Gln Gly Ile Ala Thr Ala Ala Ala Ala Thr Asp Glu Leu Phe Lys Ser
325 330 335
Tyr Asn Pro Asn Lys Ile Asp Gly Ile Phe Leu Thr Asn His Asp Gln
340 345 350
Asn Arg Val Met Ser Glu Leu Ser Gly Asp Val Asn Lys Ala Lys Ser
355 360 365
Ala Ala Ser Ile Leu Leu Thr Leu Pro Gly Asn Pro Tyr Ile Tyr Tyr
370 375 380
Gly Glu Glu Ile Gly Met Thr Gly Glu Lys Pro Asp Glu Leu Ile Arg
385 390 395 400
Glu Pro Phe Arg Trp Tyr Glu Gly Asn Gly Leu Gly Gln Thr Ser Trp
405 410 415
Glu Thr Pro Val Tyr Asn Lys Gly Gly Asn Gly Val Ser Val Glu Ala
420 425 430
Gln Thr Lys Gln Lys Asp Ser Leu Leu Asn His Tyr Arg Glu Met Ile
435 440 445
Arg Val Arg Gln Gln His Glu Glu Leu Val Lys Gly Thr Leu Gln Ser
450 455 460
Ile Ser Val Asp Ser Lys Glu Val Val Ala Tyr Ser Arg Thr Tyr Lys
465 470 475 480
Gly Lys Ser Ile Ser Val Tyr His Asn Ile Ser Asn Gln Pro Val Lys
485 490 495
Val Ser Val Ala Ala Lys Gly Lys Leu Ile Phe Gly Ser Glu Lys Gly
500 505 510
Ala Lys Lys Val Lys Asn Gln Leu Val Ile Pro Ala Asn Thr Thr Val
515 520 525
Leu Ile Lys
530
<210>169
<211>1524
<212>DNA
<213>环境的
<400>169
atgaaaacat tcaaattaaa acgcactttt ttaccgctaa ccttgctgct cagtgctcct 60
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ggcgcattat ggacgcaggt tgaaagcaat gctccagcac tcgctgaaaa cggttttaca 180
gcgctctggc taccgccagc ttacaaaggc gcgggcggca gtaatgacgt cggttatggc 240
gtctatgata tgtacgattt aggtgagttt gatcaaaaag gctcagtacg aaccaaatac 300
ggcaccaagg ctcagtacat ctctgcaatc aatgccgcgc acaacaacaa tatccaaatc 360
tacggcgatg ttgtgtttaa ccaccgaggt ggtgctgatg ggaagtcgtg ggtcgatacc 420
aagcgcgttg attgggacaa ccgtaacatt gaactgggcg acaaatggat tgaagcttgg 480
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cactttgacg gtgttgactg ggatgatgcc ggcaaagaaa aagcgatctt taaattcaaa 600
ggcgaaggaa aagcatggga ttgggaagtc agctctgaaa aaggcaatta cgactaccta 660
atgtacgccg atttagacat ggatcaccaa gaagttaaac aagagctgaa agattggggt 720
gagtggtaca tcaacatgac cggcgttgat ggctttagaa tggatgccgt gaagcacatt 780
aaatatcagt atctacaaga gtggattgat catttacgtt ggaaaacagg caaagagctt 840
ttcaccgttg gtgagtattg gaattacgac gtaaatcaac tgcataactt tattactaag 900
acctctggca gtatgtcgtt gttcgatgcg ccgcttcaca tgaacttcta caacgcgtca 960
aaatctggcg gcaattacga tatgcgccaa atcatgaatg gcacgttgat gaaggacaac 1020
ccagtcaaag ctgtgactct cgtagaaaac cacgatacac agccattgca ggcgttagag 1080
tcgacagtgg attggtggtt caagcctctt gcttacgcat tcattttatt gcgtgaagaa 1140
ggttatccat cagtgttcta cgcagattac tacggcgcgc agtacagcga caaaggctac 1200
aacatcaata tggccaaagt tccttacatt gaagaacttg taacactgcg taaagagtat 1260
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aaatggatgt ataccggtaa gccaagcacg cgctatgtcg acaagctggg tatccgaact 1440
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tcggtttggg tgggcgttaa gtaa 1524
<210>170
<211>507
<212>PRT
<213>环境的
<400>170
Met Lys Thr Phe Lys Leu Lys Arg Thr Phe Leu Pro Leu Thr Leu Leu
1 5 10 15
Leu Ser Ala Pro Ala Phe Ala Gly Gln Asn Gly Thr Met Met Gln Tyr
20 25 30
Phe His Trp Tyr Val Pro Asn Asp Gly Ala Leu Trp Thr Gln Val Glu
35 40 45
Ser Asn Ala Pro Ala Leu Ala Glu Asn Gly Phe Thr Ala Leu Trp Leu
50 55 60
Pro Pro Ala Tyr Lys Gly Ala Gly Gly Ser Asn Asp Val Gly Tyr Gly
65 70 75 80
Val Tyr Asp Met Tyr Asp Leu Gly Glu Phe Asp Gln Lys Gly Ser Val
85 90 95
Arg Thr Lys Tyr Gly Thr Lys Ala Gln Tyr Ile Ser Ala Ile Asn Ala
100 105 110
Ala His Asn Asn Asn Ile Gln Ile Tyr Gly Asp Val Val Phe Asn His
115 120 125
Arg Gly Gly Ala Asp Gly Lys Ser Trp Val Asp Thr Lys Arg Val Asp
130 135 140
Trp Asp Asn Arg Asn Ile Glu Leu Gly Asp Lys Trp Ile Glu Ala Trp
145 150 155 160
Val Glu Phe Asn Phe Pro Gly Arg Asn Asp Lys Tyr Ser Asn Phe His
165 170 175
Trp Thr Trp Tyr His Phe Asp Gly Val Asp Trp Asp Asp Ala Gly Lys
180 185 190
Glu Lys Ala Ile Phe Lys Phe Lys Gly Glu Gly Lys Ala Trp Asp Trp
195 200 205
Glu Val Ser Ser Glu Lys Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Met Tyr Ala Asp
210 215 220
Leu Asp Met Asp His Gln Glu Val Lys Gln Glu Leu Lys Asp Trp Gly
225 230 235 240
Glu Trp Tyr Ile Asn Met Thr Gly Val Asp Gly Phe Arg Met Asp Ala
245 250 255
Val Lys His Ile Lys Tyr Gln Tyr Leu Gln Glu Trp Ile Asp His Leu
260 265 270
Arg Trp Lys Thr Gly Lys Glu Leu Phe Thr Val Gly Glu Tyr Trp Asn
275 280 285
Tyr Asp Val Asn Gln Leu His Asn Phe Ile Thr Lys Thr Ser Gly Ser
290 295 300
Met Ser Leu Phe Asp Ala Pro Leu His Met Asn Phe Tyr Asn Ala Ser
305 310 315 320
Lys Ser Gly Gly Asn Tyr Asp Met Arg Gln Ile Met Asn Gly Thr Leu
325 330 335
Met Lys Asp Asn Pro Val Lys Ala Val Thr Leu Val Glu Asn His Asp
340 345 350
Thr Gln Pro Leu Gln Ala Leu Glu Ser Thr Val Asp Trp Trp Phe Lys
355 360 365
Pro Leu Ala Tyr Ala Phe Ile Leu Leu Arg Glu Glu Gly Tyr Pro Ser
370 375 380
Val Phe Tyr Ala Asp Tyr Tyr Gly Ala Gln Tyr Ser Asp Lys Gly Tyr
385 390 395 400
Asn Ile Asn Met Ala Lys Val Pro Tyr Ile Glu Glu Leu Val Thr Leu
405 410 415
Arg Lys Glu Tyr Ala Tyr Gly Lys Gln Asn Ser Tyr Leu Asp His Trp
420 425 430
Asp Val Ile Gly Trp Thr Arg Glu Gly Asp Ala Glu His Pro Asn Ser
435 440 445
Met Ala Val Ile Met Ser Asp Gly Pro Gly Gly Lys Lys Trp Met Tyr
450 455 460
Thr Gly Lys Pro Ser Thr Arg Tyr Val Asp Lys Leu Gly Ile Arg Thr
465 470 475 480
Glu Glu Val Trp Thr Asp Thr Asn Gly Trp Ala Glu Phe Pro Val Asn
485 490 495
Gly Gly Ser Val Ser Val Trp Val Gly Val Lys
500 505
<210>171
<211>1431
<212>DNA
<213>环境的
<400>171
gtgtatgtaa actcttttta cgatgcaaat aaagatggac atggtgattt aaaaggtctt 60
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gactattata atattgatcc gcagtatgga aatctgcaag attttcgcaa actgatgaaa 240
gaagcagata aacgagatgt aaaagtcatt atggacctcg ttgtgaatca tacgagcagt 300
gaacaccctt ggtttcaagc tgcattaaaa gataaaaaca gcaagtacag agattactat 360
atctgggctg ataaaaatac cgacttgaat gaaaaaggat cttggggaca gcaagtatgg 420
cataaagccc caaacggaga gtatttttac ggaacgtttt gggaaggaat gccggactta 480
aattacgata atcctgaagt aagaaaagaa atgattaacg taggaaagtt ttggctaaag 540
caaggagttg acgggttccg tctagatgct gcgcttcata tttttaaagg ccaaacacct 600
gaaggcgcta agaaaaatct cctgtggtgg aatgaattta gagatgcaat gaaaaaggaa 660
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tatcaatcgc ttgattcttt atttaacttt gatttagcag gaaagattgt aaactctgta 780
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tcatacaatc caaataaaat tgacggtatt ttcttaacca accatgacca aaatcgcgtc 900
atgagtgagc taagcggcga tgtgaataaa gcaaagtcag ctgcctctat cttacttacg 960
cttcctggca acccgtatat ttattacggt gaagaaatcg gcatgaccgg tgaaaagcct 1020
gatgagttaa tccgtgaacc gttccgctgg tacgaaggaa acggacttgg acaaaccagc 1080
tgggaaacac ctgtatacaa caaaggcggc aacggcgtgt ctgtagaagc acaaacaaaa 1140
caaaaggact ctttgttaaa tcattaccgt gaaatgattc gcgtgcgtca gcagcacgaa 1200
gagttagtaa aaggaacgct tcaatctatt tcagtagaca gtaaagaagt cgttgcctat 1260
agccgcacgt ataaaggcaa atcgattagc gtgtatcata atatttcaaa tcaaccggta 1320
aaagtatctg tagcagcaaa aggtaaattg atttttggta gtgaaaaagg tgctaagaaa 1380
gtcaaaaatc agcttgtgat tccggcgaat acaacggttt taataaaata a 1431
<210>172
<211>476
<212>PRT
<213>环境的
<400>172
Val Tyr Val Asn Ser Phe Tyr Asp Ala Asn Lys Asp Gly His Gly Asp
1 5 10 15
Leu Lys Gly Leu Thr Gln Lys Leu Asp Tyr Leu Asn Asp Gly Asn Ser
20 25 30
His Thr Lys Asn Asp Leu Gln Val Asn Gly Ile Trp Met Met Pro Val
35 40 45
Asn Pro Ser Pro Ser Tyr His Lys Tyr Asp Val Thr Asp Tyr Tyr Asn
50 55 60
Ile Asp Pro Gln Tyr Gly Asn Leu Gln Asp Phe Arg Lys Leu Met Lys
65 70 75 80
Glu Ala Asp Lys Arg Asp Val Lys Val Ile Met Asp Leu Val Val Asn
85 90 95
His Thr Ser Ser Glu His Pro Trp Phe Gln Ala Ala Leu Lys Asp Lys
100 105 110
Asn Ser Lys Tyr Arg Asp Tyr Tyr Ile Trp Ala Asp Lys Asn Thr Asp
115 120 125
Leu Asn Glu Lys Gly Ser Trp Gly Gln Gln Val Trp His Lys Ala Pro
130 135 140
Asn Gly Glu Tyr Phe Tyr Gly Thr Phe Trp Glu Gly Met Pro Asp Leu
145 150 155 160
Asn Tyr Asp Asn Pro Glu Val Arg Lys Glu Met Ile Asn Val Gly Lys
165 170 175
Phe Trp Leu Lys Gln Gly Val Asp Gly Phe Arg Leu Asp Ala Ala Leu
180 185 190
His Ile Phe Lys Gly Gln Thr Pro Glu Gly Ala Lys Lys Asn Leu Leu
195 200 205
Trp Trp Asn Glu Phe Arg Asp Ala Met Lys Lys Glu Asn Pro Asn Val
210 215 220
Tyr Leu Thr Gly Glu Val Trp Asp Gln Pro Glu Val Val Ala Pro Tyr
225 230 235 240
Tyr Gln Ser Leu Asp Ser Leu Phe Asn Phe Asp Leu Ala Gly Lys Ile
245 250 255
Val Asn Ser Val Lys Ser Gly Asn Asp Gln Gly Ile Ala Thr Ala Ala
260 265 270
Ala Ala Thr Asp Glu Leu Phe Lys Ser Tyr Asn Pro Asn Lys Ile Asp
275 280 285
Gly Ile Phe Leu Thr Asn His Asp Gln Asn Arg Val Met Ser Glu Leu
290 295 300
Ser Gly Asp Val Asn Lys Ala Lys Ser Ala Ala Ser Ile Leu Leu Thr
305 310 315 320
Leu Pro Gly Asn Pro Tyr Ile Tyr Tyr Gly Glu Glu Ile Gly Met Thr
325 330 335
Gly Glu Lys Pro Asp Glu Leu Ile Arg Glu Pro Phe Arg Trp Tyr Glu
340 345 350
Gly Asn Gly Leu Gly Gln Thr Ser Trp Glu Thr Pro Val Tyr Asn Lys
355 360 365
Gly Gly Asn Gly Val Ser Val Glu Ala Gln Thr Lys Gln Lys Asp Ser
370 375 380
Leu Leu Asn His Tyr Arg Glu Met Ile Arg Val Arg Gln Gln His Glu
385 390 395 400
Glu Leu Val Lys Gly Thr Leu Gln Ser Ile Ser Val Asp Ser Lys Glu
405 410 415
Val Val Ala Tyr Ser Arg Thr Tyr Lys Gly Lys Ser Ile Ser Val Tyr
420 425 430
His Asn Ile Ser Asn Gln Pro Val Lys Val Ser Val Ala Ala Lys Gly
435 440 445
Lys Leu Ile Phe Gly Ser Glu Lys Gly Ala Lys Lys Val Lys Asn Gln
450 455 460
Leu Val Ile Pro Ala Asn Thr Thr Val Leu Ile Lys
465 470 475
<210>173
<211>1596
<212>DNA
<213>环境的
<400>173
atgcaaacga ttgcaaaaaa aggggatgaa acgatgaaag ggaaaaaatg gacagcttta 60
gctctaacac tgccgctggc tgctagctta tcaacaggcg ttcacgcaga aactgtacat 120
aaaggtaaag ctccaacagc agataaaaac ggtgtttttt atgaggtgta tgtaaactct 180
ttttacgatg caaataaaga tggacatggt gatttaaaag gtctgacaca aaagttggat 240
tatttaaatg acggcaattc tcatacaaag aatgatcttc aagtaaacgg gatttggatg 300
atgccggtaa acccttctcc tagctatcat aaatatgatg taacggacta ttataacatt 360
gatcctcagt acggaagtct gcaagatttc cgcaaactga tgaaagaagc agataaacga 420
gacgtaaaag ttattatgga ccttgttgtg aatcatacga gcagtgaaca cccttggttt 480
caagctgcac taaaagataa aaacagcaag tacagagatt actatatttg ggctgataaa 540
aataccgatt tgaatgaaaa aggatcttgg ggacagcaag tatggcataa agctccaaac 600
ggagagtatt tttacggaac gttctgggaa ggaatgcctg acttaaatta cgataaccct 660
gaagtaagaa aagaaatgat taacgtcgga aagttttggc taaagcaagg cgttgatggc 720
ttccgcttag atgctgccct tcatatcttt aaaggtcaaa ctcctgaagg cgctaagaaa 780
aatctcctgt ggtggaatga gtttagagat gcaatgaaaa aagaaaaccc taacgtatat 840
ctaacgggtg aagtatggga tcagccggaa gtagtagctc cttattatca atcgcttgat 900
tccctattta actttgattt agcaggaaaa attgtcagct ctgtaaaagc aggaaatgat 960
caaggaatcg ccactgcagc agcggcaacg gatgagctgt tcaaatcata caatccaaat 1020
aaaattgacg gcattttctt aaccaaccat gaccaaaacc gcgtcatgag tgagctaagc 1080
ggagatgtga ataaagcaaa atcagctgct tctatcttac ttacgcttcc tggaaatccg 1140
tatatttatt acggtgaaga aattggcatg accggtgaaa agcctgatga attaatccgt 1200
gaaccgttcc gctggtacga aggcaacgga attggacaaa ctagctggga aacacctgta 1260
tataacaaag gcggcaatgg tgtgtctgta gaagcacaaa ccaaacaaaa ggattctttg 1320
ttaaatcatt accgtgaaat gattcgcgtg cgtcagcagc acgaagagtt agtaaaagga 1380
acgcttcagt ctatttcagt agacagtaaa gaagttgtcg cttatagccg tacgtataaa 1440
ggcaactcca ttagtgtgta tcataatatt tcaaatcaac ctgtaaaagt atctgtagcg 1500
gcgaaaggta aattgatttt tgctagtgaa aaaggtgcta aaaaaggcaa aaatcagctt 1560
gtgattccgg cgaatgcgac ggttttaata aaataa 1596
<210>174
<211>531
<212>PRT
<213>环境的
<400>174
Met Gln Thr Ile Ala Lys Lys Gly Asp Glu Thr Met Lys Gly Lys Lys
1 5 10 15
Trp Thr Ala Leu Ala Leu Thr Leu Pro Leu Ala Ala Ser Leu Ser Thr
20 25 30
Gly Val His Ala Glu Thr Val His Lys Gly Lys Ala Pro Thr Ala Asp
35 40 45
Lys Asn Gly Val Phe Tyr Glu Val Tyr Val Asn Ser Phe Tyr Asp Ala
50 55 60
Asn Lys Asp Gly His Gly Asp Leu Lys Gly Leu Thr Gln Lys Leu Asp
65 70 75 80
Tyr Leu Asn Asp Gly Asn Ser His Thr Lys Asn Asp Leu Gln Val Asn
85 90 95
Gly Ile Trp Met Met Pro Val Asn Pro Ser Pro Ser Tyr His Lys Tyr
100 105 110
Asp Val Thr Asp Tyr Tyr Asn Ile Asp Pro Gln Tyr Gly Ser Leu Gln
115 120 125
Asp Phe Arg Lys Leu Met Lys Glu Ala Asp Lys Arg Asp Val Lys Val
130 135 140
Ile Met Asp Leu Val Val Asn His Thr Ser Ser Glu His Pro Trp Phe
145 150 155 160
Gln Ala Ala Leu Lys Asp Lys Asn Ser Lys Tyr Arg Asp Tyr Tyr Ile
165 170 175
Trp Ala Asp Lys Asn Thr Asp Leu Asn Glu Lys Gly Ser Trp Gly Gln
180 185 190
Gln Val Trp His Lys Ala Pro Asn Gly Glu Tyr Phe Tyr Gly Thr Phe
195 200 205
Trp Glu Gly Met Pro Asp Leu Asn Tyr Asp Asn Pro Glu Val Arg Lys
210 215 220
Glu Met Ile Asn Val Gly Lys Phe Trp Leu Lys Gln Gly Val Asp Gly
225 230 235 240
Phe Arg Leu Asp Ala Ala Leu His Ile Phe Lys Gly Gln Thr Pro Glu
245 250 255
Gly Ala Lys Lys Asn Leu Leu Trp Trp Asn Glu Phe Arg Asp Ala Met
260 265 270
Lys Lys Glu Asn Pro Asn Val Tyr Leu Thr Gly Glu Val Trp Asp Gln
275 280 285
Pro Glu Val Val Ala Pro Tyr Tyr Gln Ser Leu Asp Ser Leu Phe Asn
290 295 300
Phe Asp Leu Ala Gly Lys Ile Val Ser Ser Val Lys Ala Gly Asn Asp
305 310 315 320
Gln Gly Ile Ala Thr Ala Ala Ala Ala Thr Asp Glu Leu Phe Lys Ser
325 330 335
Tyr Asn Pro Asn Lys Ile Asp Gly Ile Phe Leu Thr Asn His Asp Gln
340 345 350
Asn Arg Val Met Ser Glu Leu Ser Gly Asp Val Asn Lys Ala Lys Ser
355 360 365
Ala Ala Ser Ile Leu Leu Thr Leu Pro Gly Asn Pro Tyr Ile Tyr Tyr
370 375 380
Gly Glu Glu Ile Gly Met Thr Gly Glu Lys Pro Asp Glu Leu Ile Arg
385 390 395 400
Glu Pro Phe Arg Trp Tyr Glu Gly Asn Gly Ile Gly Gln Thr Ser Trp
405 410 415
Glu Thr Pro Val Tyr Asn Lys Gly Gly Asn Gly Val Ser Val Glu Ala
420 425 430
Gln Thr Lys Gln Lys Asp Ser Leu Leu Asn His Tyr Arg Glu Met Ile
435 440 445
Arg Val Arg Gln Gln His Glu Glu Leu Val Lys Gly Thr Leu Gln Ser
450 455 460
Ile Ser Val Asp Ser Lys Glu Val Val Ala Tyr Ser Arg Thr Tyr Lys
465 470 475 480
Gly Asn Ser Ile Ser Val Tyr His Asn Ile Ser Asn Gln Pro Val Lys
485 490 495
Val Ser Val Ala Ala Lys Gly Lys Leu Ile Phe Ala Ser Glu Lys Gly
500 505 510
Ala Lys Lys Gly Lys Asn Gln Leu Val Ile Pro Ala Asn Ala Thr Val
515 520 525
Leu Ile Lys
530
<210>175
<211>1398
<212>DNA
<213>环境的
<400>175
atgaaaaata taatacgact ttgtgctgcc agcgctatcc tcacggtgtc ccacgccagt 60
tacgccgacg caattttaca cgcgtttaac tggcaatata ccgatgtaac cgccaatgca 120
aatcaaattg ccgcaaatgg ctttaaaaaa gtcctcattt cacccgcaat gaaatccagc 180
ggcagtcaat ggtgggcccg ctatcaaccg caagacttgc gtgtcattga ttctccgctg 240
ggcaacaaac aagatttagt cgcgatgatc aatgcgctca acagcgttgg ggtcgacgtg 300
tatgctgacg tggtgcttaa ccatatggct aacgagtcat ggaagcgcag tgacctgaac 360
tacccgggga gtgaggtgct caacgactat caatcccgca gtgcttacta tcaaaggcaa 420
acacttttcg gcaatttaca ggagaacctt ttttccgaga atgatttcca tccggcaggc 480
tgtattacca attggaatga tcctggccac gtccagtatt ggcgcttgtg cggcggacag 540
ggcgatactg ggctaccgga tctcgatcct aatcaatggg ttgtgagtca gcagaagagt 600
tacttgaacg cactcaaatc aatgggaatc aaagggttcc gtatcgatgc ggtcaaacat 660
atgagtcaat atcaaataga ccaagtgttt accccagaca ttaccgctgg tatgcatata 720
ttcggagaag tcattaccag tggtgggcaa ggtgatagcg gctatgaggc ttttcttgcc 780
ccttacctta ataataccga tcacgccgct tatgacttcc cgctatttgc atcgattcga 840
gccgcgtttt cattctctgg tgggttaaat cagctacaca atccacaagc ctatggccaa 900
gcgttacagg actcacgtgc gatcaccttt acgattaccc acgacattcc aaccaatgac 960
ggtttccgct accagatcat ggatccaacc gatgaacagc tcgcctatgc ctacatcttg 1020
ggcaaagatg gaggaacgcc acttgtctat agtgatgacc tacctgacag cgaagacaaa 1080
gacagtggtc gttgggccga tgtgtggcaa gatccgaaca tgattaacat gcttgccttc 1140
cacaacgcga tgcaaggaca aagcatgact gtagtggcta gcgatcaatg taccttgcta 1200
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ggcgacatca ccacagtgag ttctcgttat caccaatttg ttttgccagc gcgcagtgca 1380
aggatgtgga aactataa 1398
<210>176
<211>465
<212>PRT
<213>环境的
<400>176
Met Lys Asn Ile Ile Arg Leu Cys Ala Ala Ser Ala Ile Leu Thr Val
1 5 10 15
Ser His Ala Ser Tyr Ala Asp Ala Ile Leu His Ala Phe Asn Trp Gln
20 25 30
Tyr Thr Asp Val Thr Ala Asn Ala Asn Gln Ile Ala Ala Asn Gly Phe
35 40 45
Lys Lys Val Leu Ile Ser Pro Ala Met Lys Ser Ser Gly Ser Gln Trp
50 55 60
Trp Ala Arg Tyr Gln Pro Gln Asp Leu Arg Val Ile Asp Ser Pro Leu
65 70 75 80
Gly Asn Lys Gln Asp Leu Val Ala Met Ile Asn Ala Leu Asn Ser Val
85 90 95
Gly Val Asp Val Tyr Ala Asp Val Val Leu Asn His Met Ala Asn Glu
100 105 110
Ser Trp Lys Arg Ser Asp Leu Asn Tyr Pro Gly Ser Glu Val Leu Asn
115 120 125
Asp Tyr Gln Ser Arg Ser Ala Tyr Tyr Gln Arg Gln Thr Leu Phe Gly
130 135 140
Asn Leu Gln Glu Asn Leu Phe Ser Glu Asn Asp Phe His Pro Ala Gly
145 150 155 160
Cys Ile Thr Asn Trp Asn Asp Pro Gly His Val Gln Tyr Trp Arg Leu
165 170 175
Cys Gly Gly Gln Gly Asp Thr Gly Leu Pro Asp Leu Asp Pro Asn Gln
180 185 190
Trp Val Val Ser Gln Gln Lys Ser Tyr Leu Asn Ala Leu Lys Ser Met
195 200 205
Gly Ile Lys Gly Phe Arg Ile Asp Ala Val Lys His Met Ser Gln Tyr
210 215 220
Gln Ile Asp Gln Val Phe Thr Pro Asp Ile Thr Ala Gly Met His Ile
225 230 235 240
Phe Gly Glu Val Ile Thr Ser Gly Gly Gln Gly Asp Ser Gly Tyr Glu
245 250 255
Ala Phe Leu Ala Pro Tyr Leu Asn Asn Thr Asp His Ala Ala Tyr Asp
260 265 270
Phe Pro Leu Phe Ala Ser Ile Arg Ala Ala Phe Ser Phe Ser Gly Gly
275 280 285
Leu Asn Gln Leu His Asn Pro Gln Ala Tyr Gly Gln Ala Leu Gln Asp
290 295 300
Ser Arg Ala Ile Thr Phe Thr Ile Thr His Asp Ile Pro Thr Asn Asp
305 310 315 320
Gly Phe Arg Tyr Gln Ile Met Asp Pro Thr Asp Glu Gln Leu Ala Tyr
325 330 335
Ala Tyr Ile Leu Gly Lys Asp Gly Gly Thr Pro Leu Val Tyr Ser Asp
340 345 350
Asp Leu Pro Asp Ser Glu Asp Lys Asp Ser Gly Arg Trp Ala Asp Val
355 360 365
Trp Gln Asp Pro Asn Met Ile Asn Met Leu Ala Phe His Asn Ala Met
370 375 380
Gln Gly Gln Ser Met Thr Val Val Ala Ser Asp Gln Cys Thr Leu Leu
385 390 395 400
Phe Lys Arg Gly Lys Gln Gly Val Val Gly Ile Asn Lys Cys Gly Glu
405 410 415
Ser Lys Ser Val Thr Val Asp Thr Tyr Gln His Glu Phe Asn Trp Tyr
420 425 430
Thr Pro Tyr Gln Asp Val Leu Ser Gly Asp Ile Thr Thr Val Ser Ser
435 440 445
Arg Tyr His Gln Phe Val Leu Pro Ala Arg Ser Ala Arg Met Trp Lys
450 455 460
Leu
465
<210>177
<211>1524
<212>DNA
<213>环境的
<400>177
atgaaaacat tcaaattaaa acgcactttt ttaccgctga ccttgctgct cagtgctcct 60
gcctttgctg ggcaaaatgg caccatgatg cagtattttc attggtacgt acctaatgat 120
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gtctatgata tgtacgattt aggtgagttt gaccaaaaag gctcagtacg aaccaaatac 300
ggcaccaagg ctcagtacat ctctgcaatc aatgccgcgc acaacaacaa tatccaaatt 360
tacggcgacg ttgtgtttaa ccaccgaggt ggcgctgatg ggaagtcgtg ggtcgatacc 420
aagcgcgttg attgggacaa ccgcaatatt gaactgggcg acaaatggat tgaagcttgg 480
gttgagttta attttcctgg ccgcaacgac aaatactcga acttccattg gacttggtat 540
cactttgacg gtgttgactg ggatgatgcc ggcaaagaaa aagcgatctt taaattcaaa 600
ggcgaaggaa aagcatggga ttgggaagtc agctctgaaa aaggcaatta cgactaccta 660
atgtacgccg atttagacat ggatcaccca gaagttaaac aagagctgaa agattggggt 720
gagtggtaca tcaacatgac cggcgttgat ggctttagaa tggatgccgt gaagcacatt 780
aaatatcagt atctacaaga gtggattgat catttacgtt ggaaaacagg caaagagctt 840
ttcaccgttg gtgagtattg gaattacgac gtaaatcaac tgcacaactt tattactaag 900
acctctggca gtatgtcgtt gttcgatgcg ccgcttcaca tgaatttcta caacgcgtca 960
aaatctggcg gcacttacga tatgcgccaa atcatgaatg gcacgttgat gaaggacaac 1020
ccagtcaaag cagtgactct cgtagaaaac cacgatacgc agccattgca ggcgttagag 1080
tcgacagtag attggtggtt caagcctctt gcttacgcat tcattttatt gcgtgaagaa 1140
ggttatccat cggtgttcta cgcagattac tacggcgcgc agtacagcga caaaggttac 1200
aacattaata tggccaaagt gccttacatt gaagaacttg taacactgcg taaagagtat 1260
gcgtatggca aacagaattc ttatctcgac cattgggatg tgattggctg gacccgagag 1320
ggcgatgctg aacatccaaa ctcaatggcg gtgatcatga gtgatggacc gggcggcaca 1380
aaatggatgt ataccggtaa gccaagtacg cgctatgtcg acaagctggg tatccgaact 1440
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tcggtttggg tgggcgttaa gtaa 1524
<210>178
<211>507
<212>PRT
<213>环境的
<400>178
Met Lys Thr Phe Lys Leu Lys Arg Thr Phe Leu Pro Leu Thr Leu Leu
1 5 10 15
Ieu Ser Ala Pro Ala Phe Ala Gly Gln Asn Gly Thr Met Met Gln Tyr
20 25 30
Phe His Trp Tyr Val Pro Asn Asp Gly Ala Leu Trp Thr Gln Val Glu
35 40 45
Ser Asn Ala Pro Val Leu Ala Glu Asn Gly Phe Thr Ala Leu Trp Leu
50 55 60
Pro Pro Ala Tyr Lys Gly Ala Gly Gly Ser Asn Asp Val Gly Tyr Gly
65 70 75 80
Val Tyr Asp Met Tyr Asp Leu Gly Glu Phe Asp Gln Lys Gly Ser Val
85 90 95
Arg Thr Lys Tyr Gly Thr Lys Ala Gln Tyr Ile Ser Ala Ile Asn Ala
100 105 110
Ala His Asn Asn Asn Ile Gln Ile Tyr Gly Asp Val Val Phe Asn His
115 120 125
Arg Gly Gly Ala Asp Gly Lys Ser Trp Val Asp Thr Lys Arg Val Asp
130 135 140
Trp Asp Asn Arg Asn Ile Glu Leu Gly Asp Lys Trp Ile Glu Ala Trp
145 150 155 160
Val Glu Phe Asn Phe Pro Gly Arg Asn Asp Lys Tyr Ser Asn Phe His
165 170 175
Trp Thr Trp Tyr His Phe Asp Gly Val Asp Trp Asp Asp Ala Gly Lys
180 185 190
Glu Lys Ala Ile Phe Lys Phe Lys Gly Glu Gly Lys Ala Trp Asp Trp
195 200 205
Glu Val Ser Ser Glu Lys Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Met Tyr Ala Asp
210 215 220
Leu Asp Met Asp His Pro Glu Val Lys Gln Glu Leu Lys Asp Trp Gly
225 230 235 240
Glu Trp Tyr Ile Asn Met Thr Gly Val Asp Gly Phe Arg Met Asp Ala
245 250 255
Val Lys His Ile Lys Tyr Gln Tyr Leu Gln Glu Trp Ile Asp His Leu
260 265 270
Arg Trp Lys Thr Gly Lys Glu Leu Phe Thr Val Gly Glu Tyr Trp Asn
275 280 285
Tyr Asp Val Asn Gln Leu His Asn Phe Ile Thr Lys Thr Ser Gly Ser
290 295 300
Met Ser Leu Phe Asp Ala Pro Leu His Met Asn Phe Tyr Asn Ala Ser
305 310 315 320
Lys Ser Gly Gly Thr Tyr Asp Met Arg Gln Ile Met Asn Gly Thr Leu
325 330 335
Met Lys Asp Asn Pro Val Lys Ala Val Thr Leu Val Glu Asn His Asp
340 345 350
Thr Gln Pro Leu Gln Ala Leu Glu Ser Thr Val Asp Trp Trp Phe Lys
355 360 365
Pro Leu Ala Tyr Ala Phe Ile Leu Leu Arg Glu Glu Gly Tyr Pro Ser
370 375 380
Val Phe Tyr Ala Asp Tyr Tyr Gly Ala Gln Tyr Ser Asp Lys Gly Tyr
385 390 395 400
Asn Ile Asn Met Ala Lys Val Pro Tyr Ile Glu Glu Leu Val Thr Leu
405 410 415
Arg Lys Glu Tyr Ala Tyr Gly Lys Gln Asn Ser Tyr Leu Asp His Trp
420 425 430
Asp Val Ile Gly Trp Thr Arg Glu Gly Asp Ala Glu His Pro Asn Ser
435 440 445
Met Ala Val Ile Met Ser Asp Gly Pro Gly Gly Thr Lys Trp Met Tyr
450 455 460
Thr Gly Lys Pro Ser Thr Arg Tyr Val Asp Lys Leu Gly Ile Arg Thr
465 470 475 480
Glu Asp Val Trp Thr Asp Ala Asn Gly Trp Ala Glu Phe Pro Val Asn
485 490 495
Gly Gly Ser Val Ser Val Trp Val Gly Val Lys
500 505
<210>179
<211>1524
<212>DNA
<213>环境的
<400>179
atgaaaacat tcaaattaaa acgcactttt ttaccgctaa ccttgctgct cagtgctcct 60
gcctttgccg ggcaaaatgg caccatgatg cagtactttc attggtacgt acctaatgat 120
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gtctacgata tgtacgattt aggtgagttt gatcaaaaag gctcagtacg aaccaaatac 300
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gttgagttta attttcctag ccgcaacgac aaatactcga acttccattg gacttggtat 540
cactttgacg gtgttgactg ggatgatgcc ggcaaagaaa aagcgatctt taaattcaaa 600
ggcgaaggaa aagcatggga ttgggaagtc agctctgaaa aaggcaatta cgactaccta 660
atgtacgccg atttagacat ggatcaccca gaagttaaac aagagctgaa agattggggt 720
gagtggtaca tcaacatgac cggcgttgat ggctttagaa tggatgccgt taagcacatt 780
aaatatcagt atctacaaga gtggattgat catttacgtt ggaaaacagg caaagagctt 840
ttcaccgttg gtgagtattg gaattacgac gtaaatcaac tgcataactt tattactaag 900
acctctggca gtatgtcgtt gttcgatgcg ccgcttcaca tgaacttcta caacgcgtca 960
aaatctggcg gcaattacga tatgcgccaa atcatgaatg gcacgttgat gaaggacaac 1020
ccagtcaaag ctgtgactct cgtagaaaac cacgatacgc agccattgca ggcgttagag 1080
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<210>180
<211>507
<212>PRT
<213>环境的
<400>180
Met Lys Thr Phe Lys Leu Lys Arg Thr Phe Leu Pro Leu Thr Leu Leu
1 5 10 15
Leu Ser Ala Pro Ala Phe Ala Gly Gln Asn Gly Thr Met Met Gln Tyr
20 25 30
Phe His Trp Tyr Val Pro Asn Asp Gly Ala Leu Trp Thr Gln Val Glu
35 40 45
Ser Asn Ala Pro Ala Leu Ala Glu Asn Gly Phe Thr Ala Leu Trp Leu
50 55 60
Pro Pro Ala Tyr Lys Gly Ala Gly Gly Ser Asn Asp Val Gly Tyr Gly
65 70 75 80
Val Tyr Asp Met Tyr Asp Leu Gly Glu Phe Asp Gln Lys Gly Ser Val
85 90 95
Arg Thr Lys Tyr Gly Thr Lys Ala Gln Tyr Ile Ser Ala Ile Asn Ala
100 105 110
Ala His Asn Asn Asn Ile Gln Ile Tyr Gly Asp Val Val Phe Asn His
115 120 125
Arg Gly Gly Ala Asp Gly Lys Ser Trp Val Asp Thr Lys Arg Val Asp
130 135 140
Trp Asp Asn Arg Asn Ile Glu Leu Gly Asp Lys Trp Ile Glu Ala Trp
145 150 155 160
Val Glu Phe Asn Phe Pro Ser Arg Asn Asp Lys Tyr Ser Asn Phe His
165 170 175
Trp Thr Trp Tyr His Phe Asp Gly Val Asp Trp Asp Asp Ala Gly Lys
180 185 190
Glu Lys Ala Ile Phe Lys Phe Lys Gly Glu Gly Lys Ala Trp Asp Trp
195 200 205
Glu Val Ser Ser Glu Lys Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Met Tyr Ala Asp
210 215 220
Leu Asp Met Asp His Pro Glu Val Lys Gln Glu Leu Lys Asp Trp Gly
225 230 235 240
Glu Trp Tyr Ile Asn Met Thr Gly Val Asp Gly Phe Arg Met Asp Ala
245 250 255
Val Lys His Ile Lys Tyr Gln Tyr Leu Gln Glu Trp Ile Asp His Leu
260 265 270
Arg Trp Lys Thr Gly Lys Glu Leu Phe Thr Val Gly Glu Tyr Trp Asn
275 280 285
Tyr Asp Val Asn Gln Leu His Asn Phe Ile Thr Lys Thr Ser Gly Ser
290 295 300
Met Ser Leu Phe Asp Ala Pro Leu His Met Asn Phe Tyr Asn Ala Ser
305 310 315 320
Lys Ser Gly Gly Asn Tyr Asp Met Arg Gln Ile Met Asn Gly Thr Leu
325 330 335
Met Lys Asp Asn Pro Val Lys Ala Val Thr Leu Val Glu Asn His Asp
340 345 350
Thr Gln Pro Leu Gln Ala Leu Glu Ser Thr Val Asp Trp Trp Phe Lys
355 360 365
Pro Leu Ala Tyr Ala Phe Ile Leu Leu Arg Glu Glu Gly Tyr Pro Ser
370 375 380
Val Phe Tyr Ala Asp Tyr Tyr Gly Ala Gln Tyr Ser Asp Lys Gly Tyr
385 390 395 400
Asn Ile Asn Met Ala Lys Val Pro Tyr Ile Glu Glu Leu Val Thr Leu
405 410 415
Arg Lys Glu Tyr Ala Tyr Gly Lys Gln Asn Ser Tyr Leu Asp His Trp
420 425 430
Asp Val Ile Gly Trp Tlhr Arg Glu Gly Asp Ala Glu His Pro Asn Ser
435 440 445
Met Ala Val Ile Met Ser Asp Gly Pro Gly Gly Thr Lys Trp Met Tyr
450 455 460
Thr Gly Asn Pro Ser Thr Arg Tyr Val Asp Lys Leu Gly Ile Arg Thr
465 470 475 480
Glu Asp Val Trp Thr Asp Ala Asn Gly Trp Ala Glu Phe Pro Val Asn
485 490 495
Gly Gly Ser Val Ser Val Trp Val Gly Val Lys
500 505
<210>181
<211>1830
<212>DNA
<213>环境的
<400>181
atgccagagg ccttcggcct ggccattacg ccgtcacata gccggcgggg gaggttggtg 60
ggcgtgtcgc gcgggggcag cctgccgatg ccggtcctcc actggccggc gttcatcctc 120
gtccggcgct tcgtcgccgg tcatccgaac aagcacaaga accggagtat tgcgatgagc 180
cacaccctgc gtgccgccgt attggcggcg atcctgctgc cgttccccgc cctcgctgac 240
caggccggca agagcccggc cggcgtgcgc taccacggcg gcgacgaaat catcctccag 300
ggcttccact ggaacgtcgt ccgcgaagcg cccaacgact ggtacaacat ccttcgccag 360
caggcctcga cgatcgccgc ggacggcttc tcggcaatct ggatgccggt gccctggcgt 420
gacttctcca gctggaccga cggcggcaag tcaggcggcg gcgaaggcta cttctggcac 480
gacttcaaca agaacggccg ctacggcagc gacgcccagc tgcgccaggc cgccggcgca 540
ctcggtggcg ccggggtgaa ggtgctctac gatgtggtgc ccaatcacat gaaccgcggc 600
tatccggaca aggagatcaa cctgccggcc ggccagggct tctggcgcaa cgactgcacc 660
gacccgggca actaccccaa cgactgcgat gacggtgacc gcttcatcgg cggcaagtcg 720
gacctgaaca ccggccatcc gcagatctac ggcatgtttc gcgacgagct tgccaacctg 780
cgcagcgggt acggcgccgg cggcttccgc ttcgacttcg ttcgcggcta tgcgcccgaa 840
cgggtcgaca gctggatgag cgacagcgcc gacagcagtt tctgcgttgg cgagctgtgg 900
aaaagcccgt ccgagtaccc gagctgggac tggcgcaaca cggcgagctg gcagcagatc 960
atcaaggact ggtccgaccg ggccaagtgc ccggtgttcg acttcgcgct caaggagcgc 1020
atgcagaacg gctcggtcgc cgactggaag catggcctca atggcaaccc ggacccgcgc 1080
tggcgcgagg tggcggtgac ctttgtcgac aaccacgaca ccggctattc gcccgggcag 1140
aacggcggcc agcaccactg ggcgctgcag gacgggctga tccgccaggc ctacgcctac 1200
atcctcacca gcccgggcac gccggtggtg tactggtcgc acatgtacga ctggggctac 1260
ggcgacttca ttcgccagct gatccaggtg cggcgcaccg ctggcgtgcg cgccgattcg 1320
gcgatcagct tccacagcgg ctacagcggc ctggtcgcta ccgtcagcgg cagccatcag 1380
accctggtgg tggcgctcaa ctccgatctg gccaaccccg gccaggtcgc cagcggcagc 1440
ttcagcgagg cggtcaacgc cagcaacggc caggtgcgcg tctggcgcag cggtagcggc 1500
gatggcggcg gcaatgacgg cggcgagggc ggtctggtca atgtgaactt ccgctgcgac 1560
aacggcgtga cgcagatggg cgacagcgtc tacgcggtgg gcaacgtcag ccagctcggc 1620
aactggagcc cggcctccgc ggtacggctg accgacacca gcagctatcc gacctggaag 1680
ggcagcatcg ccctgcctga cggtcagaac gtggaatgga agtgcctgat ccgtaacgag 1740
gcggacgcga cgctggtgcg ccagtggcaa tcgggcggca acaaccaggt ccaggccgct 1800
gccggcgcga gcaccagcgg ctcgttctga 1830
<210>182
<211>609
<212>PRT
<213>环境的
<400>182
Met Pro Glu Ala Phe Gly Leu Ala Ile Thr Pro Ser His Ser Arg Arg
1 5 10 15
Gly Arg Leu Val Gly Val Ser Arg Gly Gly Ser Leu Pro Met Pro Val
20 25 30
Leu His Trp Pro Ala Phe Ile Leu Val Arg Arg Phe Val Ala Gly His
35 40 45
Pro Asn Lys His Lys Asn Arg Ser Ile Ala Met Ser His Thr Leu Arg
50 55 60
Ala Ala Val Leu Ala Ala Ile Leu Leu Pro Phe Pro Ala Leu Ala Asp
65 70 75 80
Gln Ala Gly Lys Ser Pro Ala Gly Val Arg Tyr His Gly Gly Asp Glu
85 90 95
Ile Ile Leu Gln Gly Phe His Trp Asn Val Val Arg Glu Ala Pro Asn
100 105 110
Asp Trp Tyr Asn Ile Leu Arg Gln Gln Ala Ser Thr Ile Ala Ala Asp
115 120 125
Gly Phe Ser Ala Ile Trp Met Pro Val Pro Trp Arg Asp Phe Ser Ser
130 135 140
Trp Thr Asp Gly Gly Lys Ser Gly Gly Gly Glu Gly Tyr Phe Trp His
145 150 155 160
Asp Phe Asn Lys Asn Gly Arg Tyr Gly Ser Asp Ala Gln Leu Arg Gln
165 170 175
Ala Ala Gly Ala Leu Gly Gly Ala Gly Val Lys Val Leu Tyr Asp Val
180 185 190
Val Pro Asn His Met Asn Arg Gly Tyr Pro Asp Lys Glu Ile Asn Leu
195 200 205
Pro Ala Gly Gln Gly Phe Trp Arg Asn Asp Cys Thr Asp Pro Gly Asn
210 215 220
Tyr Pro Asn Asp Cys Asp Asp Gly Asp Arg Phe Ile Gly Gly Lys Ser
225 230 235 240
Asp Leu Asn Thr Gly His Pro Gln Ile Tyr Gly Met Phe Arg Asp Glu
245 250 255
Leu Ala Asn Leu Arg Ser Gly Tyr Gly Ala Gly Gly Phe Arg Phe Asp
260 265 270
Phe Val Arg Gly Tyr Ala Pro Glu Arg Val Asp Ser Trp Met Ser Asp
275 280 285
Ser Ala Asp Ser Ser Phe Cys Val Gly Glu Leu Trp Lys Ser Pro Ser
290 295 300
Glu Tyr Pro Ser Trp Asp Trp Arg Asn Thr Ala Ser Trp Gln Gln Ile
305 310 315 320
Ile Lys Asp Trp Ser Asp Arg Ala Lys Cys Pro Val Phe Asp Phe Ala
325 330 335
Leu Lys Glu Arg Met Gln Asn Gly Ser Val Ala Asp Trp Lys His Gly
340 345 350
Leu Asn Gly Asn Pro Asp Pro Arg Trp Arg Glu Val Ala Val Thr Phe
355 360 365
Val Asp Asn His Asp Thr Gly Tyr Ser Pro Gly Gln Asn Gly Gly Gln
370 375 380
His His Trp Ala Leu Gln Asp Gly Leu Ile Arg Gln Ala Tyr Ala Tyr
385 390 395 400
Ile Leu Thr Ser Pro Gly Thr Pro Val Val Tyr Trp Ser His Met Tyr
405 410 415
Asp Trp Gly Tyr Gly Asp Phe Ile Arg Gln Leu Ile Gln Val Arg Arg
420 425 430
Thr Ala Gly Val Arg Ala Asp Ser Ala Ile Ser Phe His Ser Gly Tyr
435 440 445
Ser Gly Leu Val Ala Thr Val Ser Gly Ser His Gln Thr Leu Val Val
450 455 460
Ala Leu Asn Ser Asp Leu Ala Asn Pro Gly Gln Val Ala Ser Gly Ser
465 470 475 480
Phe Ser Glu Ala Val Asn Ala Ser Asn Gly Gln Val Arg Val Trp Arg
485 490 495
Ser Gly Ser Gly Asp Gly Gly Gly Asn Asp Gly Gly Glu Gly Gly Leu
500 505 510
Val Asn Val Asn Phe Arg Cys Asp Asn Gly Val Thr Gln Met Gly Asp
515 520 525
Ser Val Tyr Ala Val Gly Asn Val Ser Gln Leu Gly Asn Trp Ser Pro
530 535 540
Ala Ser Ala Val Arg Leu Thr Asp Thr Ser Ser Tyr Pro Thr Trp Lys
545 550 555 560
Gly Ser Ile Ala Leu Pro Asp Gly Gln Asn Val Glu Trp Lys Cys Leu
565 570 575
Ile Arg Asn Glu Ala Asp Ala Thr Leu Val Arg Gln Trp Gln Ser Gly
580 585 590
Gly Asn Asn Gln Val Gln Ala Ala Ala Gly Ala Ser Thr Ser Gly Ser
595 600 605
Phe
<210>183
<211>1596
<212>DNA
<213>环境的
<400>183
atgcaaacga ttgcaaaaaa aggggatgaa acgatgaaag ggaaaaaatg gacagcttta 60
gctctaacac tgccgctggc tgctagctta tcaacaggcg ttcacgccga aaccgtacat 120
aaaggtaagt ctgaagcaac agataaaaac ggtgtctttt atgaggtgta tgtaaactct 180
ttttacgata caaataaaga tggacatggt gatttaaaag gtctgacaca aaagttggat 240
tatttaaatg acggcaattc tcatacaaag aatgatcttc aagtaaacgg gatttggatg 300
atgccagtca acccttctcc tagctatcat aaatatgatg taacggacta ttataacatt 360
gatcctcagt acggaaatct gcaagatttt cgcaagctga tgaaagaagc agacaaacga 420
gacgtaaaag tcattatgga ccttgttgtg aatcatacga gcagcgaaca cccttggttt 480
caagctgcat taaaagataa aaacagcaag tacagagatt actatatttg ggctgataaa 540
aataccgatt tgaatgaaaa aggatcttgg gggcagcaag tatggcataa agctccaaac 600
ggagagtatt tttacggaac gttttgggaa ggaatgcctg acttaaatta cgataaccct 660
gaagtaagaa aagaaatgat taacgtcgga aagttttggc taaagcaagg cgttaatggc 720
ttccgcttag atgctgcgct tcatattttt aaaggtcaaa cacctgaagg cgctaagaaa 780
aatatcctgt ggtggaatga gtttagagat gcgatgaaaa aagaaaaccc taacgtatat 840
ctaacgggtg aagtatggga tcagcctgaa gtggtagctc cttactatca atcgcttgat 900
tctttattta attttgattt agcaggaaaa attgtcagct ctgtaaaagc aggaaatgat 960
caaggaatcg ccactgcagc agcggcaaca gatgaactgt tcaaatcata caatccaaat 1020
aaaattgacg gcattttctt aaccaaccat gaccaaaatc gcgtcatgag tgagctgagc 1080
ggcgatgtga acaaagcaaa atcagctgct tctatcttac ttacgcttcc tggcaacccg 1140
tatatttatt acggtgaaga aattggcatg accggtgaaa agcctgatga gttaatccgt 1200
gaaccattcc gctggtacga aggaaacgga cttggacaaa ctagctggga aacacctgta 1260
tataacaaag gcggcaacgg cgtgtctgta gaagtacaaa ccaaacaaaa ggattctttg 1320
ttaaatcatt atcgtgaaat gattcgcgtg cgtcagcagc atgaagagtt agtaaaagga 1380
acgcttcaat ctatttcagt agacagtaaa gaagtggttg cctatagtcg cacgtataaa 1440
ggcaactcga ttagcgtgta tcataatatt tcaaatcaac ctgtaaaagt atctgtagca 1500
gcgaaaggta aattgatttt tgctagtgaa aaaggtgcta aaaaagtcaa aaatcagctt 1560
gtaattccgg ctaatacaac ggttttaata aaataa 1596
<210>184
<211>531
<212>PRT
<213>环境的
<400>184
Met Gln Thr Ile Ala Lys Lys Gly Asp Glu Thr Met Lys Gly Lys Lys
1 5 10 15
Trp Thr Ala Leu Ala Leu Thr Leu Pro Leu Ala Ala Ser Leu Ser Thr
20 25 30
Gly Val His Ala Glu Thr Val His Lys Gly Lys Ser Glu Ala Thr Asp
35 40 45
Lys Asn Gly Val Phe Tyr Glu Val Tyr Val Asn Ser Phe Tyr Asp Thr
50 55 60
Asn Lys Asp Gly His Gly Asp Leu Lys Gly Leu Thr Gln Lys Leu Asp
65 70 75 80
Tyr Leu Asn Asp Gly Asn Ser His Thr Lys Asn Asp Leu Gln Val Asn
85 90 95
Gly Ile Trp Met Met Pro Val Asn Pro Ser Pro Ser Tyr His Lys Tyr
100 105 110
Asp Val Thr Asp Tyr Tyr Asn Ile Asp Pro Gln Tyr Gly Asn Leu Gln
115 120 125
Asp Phe Arg Lys Leu Met Lys Glu Ala Asp Lys Arg Asp Val Lys Val
130 135 140
Ile Met Asp Leu Val Val Asn His Thr Ser Ser Glu His Pro Trp Phe
145 150 155 160
Gln Ala Ala Leu Lys Asp Lys Asn Ser Lys Tyr Arg Asp Tyr Tyr Ile
165 170 175
Trp Ala Asp Lys Asn Thr Asp Leu Asn Glu Lys Gly Ser Trp Gly Gln
180 185 190
Gln Val Trp His Lys Ala Pro Asn Gly Glu Tyr Phe Tyr Gly Thr Phe
195 200 205
Trp Glu Gly Met Pro Asp Leu Asn Tyr Asp Asn Pro Glu Val Arg Lys
210 215 220
Glu Met Ile Asn Val Gly Lys Phe Trp Leu Lys Gln Gly Val Asn Gly
225 230 235 240
Phe Arg Leu Asp Ala Ala Leu His Ile Phe Lys Gly Gln Thr Pro Glu
245 250 255
Gly Ala Lys Lys Asn Ile Leu Trp Trp Asn Glu Phe Arg Asp Ala Met
260 265 270
Lys Lys Glu Asn Pro Asn Val Tyr Leu Thr Gly Glu Val Trp Asp Gln
275 280 285
Pro Glu Val Val Ala Pro Tyr Tyr Gln Ser Leu Asp Ser Leu Phe Asn
290 295 300
Phe Asp Leu Ala Gly Lys Ile Val Ser Ser Val Lys Ala Gly Asn Asp
305 310 315 320
Gln Gly Ile Ala Thr Ala Ala Ala Ala Thr Asp Glu Leu Phe Lys Ser
325 330 335
Tyr Asn Pro Asn Lys Ile Asp Gly Ile Phe Leu Thr Asn His Asp Gln
340 345 350
Asn Arg Val Met Ser Glu Leu Ser Gly Asp Val Asn Lys Ala Lys Ser
355 360 365
Ala Ala Ser Ile Leu Leu Thr Leu Pro Gly Asn Pro Tyr Ile Tyr Tyr
370 375 380
Gly Glu Glu Ile Gly Met Thr Gly Glu Lys Pro Asp Glu Leu Ile Arg
385 390 395 400
Glu Pro Phe Arg Trp Tyr Glu Gly Asn Gly Leu Gly Gln Thr Ser Trp
405 410 415
Glu Thr Pro Val Tyr Asn Lys Gly Gly Asn Gly Val Ser Val Glu Val
420 425 430
Gln Thr Lys Gln Lys Asp Ser Leu Leu Asn His Tyr Arg Glu Met Ile
435 440 445
Arg Val Arg Gln Gln His Glu Glu Leu Val Lys Gly Thr Leu Gln Ser
450 455 460
Ile Ser Val Asp Ser Lys Glu Val Val Ala Tyr Ser Arg Thr Tyr Lys
465 470 475 480
Gly Asn Ser Ile Ser Val Tyr His Asn Ile Ser Asn Gln Pro Val Lys
485 490 495
Val Ser Val Ala Ala Lys Gly Lys Leu Ile Phe Ala Ser Glu Lys Gly
500 505 510
Ala Lys Lys Val Lys Asn Gln Leu Val Ile Pro Ala Asn Thr Thr Val
515 520 525
Leu Ile Lys
530
<210>185
<211>1572
<212>DNA
<213>环境的
<400>185
atgaaactga tgaaagggaa aaaatggaca gctttagctc taacactgcc gctggctgct 60
agcttatcaa caggcgttca cgccgaaact gtacataaag gtaaagctcc aacagcagat 120
aaaaacggtg tcttttatga ggtgtatgta aactcttttt acgatgcaaa taaagatgga 180
catggtgatt taaaaggtct tacacaaaag ctggactatt taaatgacgg aaattctcat 240
acaaagaatg atcttcaagt aaacgggatt tggatgatgc cagtcaaccc ttctcctagc 300
tatcataaat atgatgtaac ggattattat aacattgatc cgcagtacgg aaatctgcaa 360
gattttcgca agctgatgaa agaagcagac aaacgagacg taaaagtcat tatggacctt 420
gttgtgaatc atacgagcag cgaacaccct tggtttcaag ctgcgttaaa agataaaaac 480
agcaagtaca gagattacta tatttgggct gataaaaata ccgacttgaa tgaaaaagga 540
tcttggggac agcaagtatg gcataaagct ccaaacggag agtattttta cggaacgttt 600
tgggaaggaa tgcctgactt aaattacgat aaccctgaag taagaaa ga aatgattaac 660
gtcggaaagt tttggctaaa gcaaggcgtt gatggcttcc gcttagatgc tgcgcttcat 720
atttttaaag gtcaaacgcc tgaaggcgct aagaaaaata ttctgtggtg gaatgagttt 780
agagatgcga tgaaaaaaga aaaccctaac gtatatctaa cgggtgaagt atgggatcag 840
cctgaagtgg tagctcctta ctatcaatcg cttgattccc tatttaactt tgatttagca 900
gggaaaattg tcagttctgt aaaagcagga aatgatcaag gaatcgccac tgcagcagcg 960
gcaacggatg agctgttcaa atcatacaat ccaaa aaaa ttgacggcat tttcttaacc 1020
aaccatgacc aaaaccgcgt catgagtgaa ctgatcggcg atgtgaacaa agcaaaatca 1080
gctgcttcta tcttacttac gcttcctggc aacccgtata tttattacgg tgaagaaatt 1140
ggcatgaccg gtgaaaagcc tgatgagtta atccgtgaac cgttccgctg gtacgaagga 1200
aacggacttg gacaaaccag ctgggaaaca cctgtatata acaaaggcgg caacggcgtg 1260
tctgtagaag cacaaaccaa acaaaaggat tctttgttaa atcattaccg tgaaatgatt 1320
cgcgtgcgtc agcagcatga agagttagta aaaggaacgc ttcaatctat tttagtagac 1380
agtaaagaag ttgttgccta tagccgtacg tataaagaca actcgattag cgtgtatcat 1440
aatatttcaa atcaaccggt aaaagtatct gtagcagcaa aaggtaaatt aatttttgct 1500
agtgaaaaag gtgctaaaaa agtcaagaat cagcttgtga ttccggctaa tacaacggtt 1560
ttaataaaat aa 1572
<210>186
<211>523
<212>PRT
<213>环境的
<400>186
Met Lys Leu Met Lys Gly Lys Lys Trp Thr Ala Leu Ala Leu Thr Leu
1 5 10 15
Pro Leu Ala Ala Ser Leu Ser Thr Gly Val His Ala Glu Thr Val His
20 25 30
Lys Gly Lys Ala Pro Thr Ala Asp Lys Asn Gly Val Phe Tyr Glu Val
35 40 45
Tyr Val Asn Ser Phe Tyr Asp Ala Asn Lys Asp Gly His Gly Asp Leu
50 55 60
Lys Gly Leu Thr Gln Lys Leu Asp Tyr Leu Asn Asp Gly Asn Ser His
65 70 75 80
Thr Lys Asn Asp Leu Gln Val Asn Gly Ile Trp Met Met Pro Val Asn
85 90 95
Pro Ser Pro Ser Tyr His Lys Tyr Asp Val Thr Asp Tyr Tyr Asn Ile
100 105 110
Asp Pro Gln Tyr Gly Asn Leu Gln Asp Phe Arg Lys Leu Met Lys Glu
115 120 125
Ala Asp Lys Arg Asp Val Lys Val Ile Met Asp Leu Val Val Asn His
130 135 140
Thr Ser Ser Glu His Pro Trp Phe Gln Ala Ala Leu Lys Asp Lys Asn
145 150 155 160
Ser Lys Tyr Arg Asp Tyr Tyr Ile Trp Ala Asp Lys Asn Thr Asp Leu
165 170 175
Asn Glu Lys Gly Ser Trp Gly Gln Gln Val Trp His Lys Ala Pro Asn
180 185 190
Gly Glu Tyr Phe Tyr Gly Thr Phe Trp Glu Gly Met Pro Asp Leu Asn
195 200 205
Tyr Asp Asn Pro Glu Val Arg Lys Glu Met Ile Asn Val Gly Lys Phe
210 215 220
Trp Leu Lys Gln Gly Val Asp Gly Phe Arg Leu Asp Ala Ala Leu His
225 230 235 240
Ile Phe Lys Gly Gln Thr Pro Glu Gly Ala Lys Lys Asn Ile Leu Trp
245 250 255
Trp Asn Glu Phe Arg Asp Ala Met Lys Lys Glu Asn Pro Asn Val Tyr
260 265 270
Leu Thr Gly Glu Val Trp Asp Gln Pro Glu Val Val Ala Pro Tyr Tyr
275 280 285
Gln Ser Leu Asp Ser Leu Phe Asn Phe Asp Leu Ala Gly Lys Ile Val
290 295 300
Ser Ser Val Lys Ala Gly Asn Asp Gln Gly Ile Ala Thr Ala Ala Ala
305 310 315 320
Ala Thr Asp Glu Leu Phe Lys Ser Tyr Asn Pro Asn Lys Ile Asp Gly
325 330 335
Ile Phe Leu Thr Asn His Asp Gln Asn Arg Val Met Ser Glu Leu Ile
340 345 350
Gly Asp Val Asn Lys Ala Lys Ser Ala Ala Ser Ile Leu Leu Thr Leu
355 360 365
Pro Gly Asn Pro Tyr Ile Tyr Tyr Gly Glu Glu Ile Gly Met Thr Gly
370 375 380
Glu Lys Pro Asp Glu Leu Ile Arg Glu Pro Phe Arg Trp Tyr Glu Gly
385 390 395 400
Asn Gly Leu Gly Gln Thr Ser Trp Glu Thr Pro Val Tyr Asn Lys Gly
405 410 415
Gly Asn Gly Val Ser Val Glu Ala Gln Thr Lys Gln Lys Asp Ser Leu
420 425 430
Leu Asn His Tyr Arg Glu Met Ile Arg Val Arg Gln Gln His Glu Glu
435 440 445
Leu Val Lys Gly Thr Leu Gln Ser Ile Leu Val Asp Ser Lys Glu Val
450 455 460
Val Ala Tyr Ser Arg Thr Tyr Lys Asp Asn Ser Ile Ser Val Tyr His
465 470 475 480
Asn Ile Ser Asn Gln Pro Val Lys Val Ser Val Ala Ala Lys Gly Lys
485 490 495
Leu Ile Phe Ala Ser Glu Lys Gly Ala Lys Lys Val Lys Asn Gln Leu
500 505 510
Val Ile Pro Ala Asn Thr Thr Val Leu Ile Lys
515 520
<210>187
<211>2052
<212>DNA
<213>环境的
<400>187
atgtatctca tccaggaggg gcacatgcgt tttccgccca ttattcaccc gcttaccggc 60
ctggccgttc cggttggagc tctgcgtacc gcacagagct gcggcatagg ggagtttgcc 120
gacttgccgg ttcttgccga attctgcaaa aaagccggat ttgatcttgt acagcttctt 180
ccggtcaatg acaccggcac agaaagttct ccatacagcg cgctttctgc ctttgccctg 240
cacccgctgt atatcaggct ttccgacctg cctgaagcag cgggtttcga aaagcagatt 300
acagatctga aaagccggtt tgaggacttg cctcgtttca gctatacgga gctgcgccgt 360
gccaaactgg atatcctgcg tgcagtgttt gataaaaaca aggcaaccat catcggcagt 420
gccgaactgg aagcctggat ttcagataac ccctggatca tcgaatatgc ggtttttatg 480
aaccagaaac accgcaactt tgaagccggc tggaaacatt gggaaaagct gcgcaacccc 540
actcataacg aaatacaaaa aacctggcag ggtaaaacct ggcaggctga ccatcaattc 600
tttgcatggc tgcagatgcg gctggaccag cagtttactg ccgccgctac agagtgcaac 660
gccctgggtg tctatcttaa gggcgatata cctataatga tgaacgagga ttccgcagat 720
gcctgggcga atccggaatt cttccgtgac gatcttcggg ccggaagtcc ccctgacggt 780
gaaaaccccc agggacaaaa ctggggcttc cccatttata actgggaaaa ccttgcaaat 840
gacgggtaca gctggtggaa aaaacgtctg aagcacagcg cacggtatta ccatgcctac 900
cgcattgacc atattcttgg gtttttccgg atatgggcta taccctatgg cgaatactcc 960
ggctacctgg gatggccctt gccgcatgaa ccggtaagtg cagcagaact ggcagaacgg 1020
ggcttttcca aggaccgctt gcgctggctt accgaacccc acttgcctac acgggcagcc 1080
gaggaagcga ataactggga ctatctggga acacacggct atctgaatca gatcatgaac 1140
cgtatcggtg aagaagaact atggctgttc aagcccgaga tcacctgcga ggcagatata 1200
cgaaacacaa acctgccgga tgccctgaaa gaggttctgg tacggcagtg gaaaaaccgg 1260
ctgctgcagg ttaccggccg cgacgaaaaa ggacggacaa tctactatcc gctgtggcgt 1320
ttccgtgaca gcactgcatg gcagacgctt accgatggcg agaaacactc cctggaagag 1380
ctgttcgccc aaaaagcggc gcacaatgaa accctgtggc gagaacaggc ggtggaactt 1440
ctgggtgagc tgacgcgatc tacggatatg cttgcctgtg ctgaagatct gggaagtatt 1500
ccccacagtg taccggaagt gctttcaaac ctttcaattt acagtctgcg ggttacccgc 1560
tgggcccgcc aatgggatgc ccccggccag ccctttcaca gactggagga gtatccgctc 1620
atgtcggtag cgaccccatc ggttcatgat tcctctaccc tgcgcggatg gtgggaaacc 1680
gaaggcggcg accgggcctt tatggacgca tggcctccgg aacaggatgc atacgcagga 1740
gcaggccgcc atgagttcga aggcgcctgg ggaccccgcc aggcatcctg ggtactccgt 1800
aaactctgcg aagcccgttc cgcgctctgt gttttcccca tccaggatat tttggccctg 1860
tcttcagact tttatgcaat gacagcggac gaggaacgca tcaatattcc gggcagtgta 1920
tccggattta actggacata ccggttgcct gcggcaatcg aggatttatc taaaaacagc 1980
caacttataa ccgcaatcca gaccgcgttg caggaccgcc gggcgaggaa ggcacaagga 2040
gcacagcaat ga 2052
<210>188
<211>683
<212>PRT
<213>环境的
<400>188
Met Tyr Leu Ile Gln Glu Gly His Met Arg Phe Pro Pro Ile Ile His
1 5 10 15
Pro Leu Thr Gly Leu Ala Val Pro Val Gly Ala Leu Arg Thr Ala Gln
20 25 30
Ser Cys Gly Ile Gly Glu Phe Ala Asp Leu Pro Val Leu Ala Glu Phe
35 40 45
Cys Lys Lys Ala Gly Phe Asp Leu Val Gln Leu Leu Pro Val Asn Asp
50 55 60
Thr Gly Thr Glu Ser Ser Pro Tyr Ser Ala Leu Ser Ala Phe Ala Leu
65 70 75 80
His Pro Leu Tyr Ile Arg Leu Ser Asp Leu Pro Glu Ala Ala Gly Phe
85 90 95
Glu Lys Gln Ile Thr Asp Leu Lys Ser Arg Phe Glu Asp Leu Pro Arg
100 105 110
Phe Ser Tyr Thr Glu Leu Arg Arg Ala Lys Leu Asp Ile Leu Arg Ala
115 120 125
Val Phe Asp Lys Asn Lys Ala Thr Ile Ile Gly Ser Ala Glu Leu Glu
130 135 140
Ala Trp Ile Ser Asp Asn Pro Trp Ile Ile Glu Tyr Ala Val Phe Met
145 150 155 160
Asn Gln Lys His Arg Asn Phe Glu Ala Gly Trp Lys His Trp Glu Lys
165 170 175
Leu Arg Asn Pro Thr His Asn Glu Ile Gln Lys Thr Trp Gln Gly Lys
180 185 190
Thr Trp Gln Ala Asp His Gln Phe Phe Ala Trp Leu Gln Met Arg Leu
195 200 205
Asp Gln Gln Phe Thr Ala Ala Ala Thr Glu Cys Asn Ala Leu Gly Val
210 215 220
Tyr Leu Lys Gly Asp Ile Pro Ile Met Met Asn Glu Asp Ser Ala Asp
225 230 235 240
Ala Trp Ala Asn Pro Glu Phe Phe Arg Asp Asp Leu Arg Ala Gly Ser
245 250 255
Pro Pro Asp Gly Glu Asn Pro Gln Gly Gln Asn Trp Gly Phe Pro Ile
260 26 270
Tyr Asn Trp Glu Asn Leu Ala Asn Asp Gly Tyr Ser Trp Trp Lys Lys
275 280 285
Arg Leu Lys His Ser Ala Arg Tyr Tyr His Ala Tyr Arg Ile Asp His
290 295 300
Ile Leu Gly Phe Phe Arg Ile Trp Ala Ile Pro Tyr Gly Glu Tyr Ser
305 310 315 320
Gly Tyr Leu Gly Trp Pro Leu Pro His Glu Pro Val Ser Ala Ala Glu
325 330 335
Leu Ala Glu Arg Gly Phe Ser Lys Asp Arg Leu Arg Trp Leu Thr Glu
340 345 350
Pro His Leu Pro Thr Arg Ala Ala Glu Glu Ala Asn Asn Trp Asp Tyr
355 360 365
Leu Gly Thr His Gly Tyr Leu Asn Gln Ile Met Asn Arg Ile Gly Glu
370 375 380
Glu Glu Leu Trp Leu Phe Lys Pro Glu Ile Thr Cys Glu Ala Asp Ile
385 390 395 400
Arg Asn Thr Asn Leu Pro Asp Ala Leu Lys Glu Val Leu Val Arg Gln
405 410 415
Trp Lys Asn Arg Leu Leu Gln Val Thr Gly Arg Asp Glu Lys Gly Arg
420 425 430
Thr Ile Tyr Tyr Pro Leu Trp Arg Phe Arg Asp Ser Thr Ala Trp Gln
435 440 445
Thr Leu Thr Asp Gly Glu Lys His Ser Leu Glu Glu Leu Phe Ala Gln
450 455 460
Lys Ala Ala His Asn Glu Thr Leu Trp Arg Glu Gln Ala Val Glu Leu
465 470 475 480
Leu Gly Glu Leu Thr Arg Ser Thr Asp Met Leu Ala Cys Ala Glu Asp
485 490 495
Leu Gly Ser Ile Pro His Ser Val Pro Glu Val Leu Ser Asn Leu Ser
500 505 510
Ile Tyr Ser Leu Arg Val Thr Arg Trp Ala Arg Gln Trp Asp Ala Pro
515 520 525
Gly Gln Pro Phe His Arg Leu Glu Glu Tyr Pro Leu Met Ser Val Ala
530 535 540
Thr Pro Ser Val His Asp Ser Ser Thr Leu Arg Gly Trp Trp Glu Thr
545 550 555 560
Glu Gly Gly Asp Arg Ala Phe Met Asp Ala Trp Pro Pro Glu Gln Asp
565 570 575
Ala Tyr Ala Gly Ala Gly Arg His Glu Phe Glu Gly Ala Trp Gly Pro
580 585 590
Arg Gln Ala Ser Trp Val Leu Arg Lys Leu Cys Glu Ala Arg Ser Ala
595 600 605
Leu Cys Val Phe Pro Ile Gln Asp Ile Leu Ala Leu Ser Ser Asp Phe
610 615 620
Tyr Ala Met Thr Ala Asp Glu Glu Arg Ile Asn Ile Pro Gly Ser Val
625 630 635 640
Ser Gly Phe Asn Trp Thr Tyr Arg Leu Pro Ala Ala Ile Glu Asp Leu
645 650 655
Ser Lys Asn Ser Gln Leu Ile Thr Ala Ile Gln Thr Ala Leu Gln Asp
660 665 670
Arg Arg Ala Arg Lys Ala Gln Gly Ala Gln Gln
675 680
<210>189
<211>1596
<212>DNA
<213>环境的
<400>189
atgcaaacga ttgcaaaaaa aggggatgaa acgatgaaag ggaaaaaatg gacagcttta 60
gctctaacac tgccgctggc tgctagctta tcaacaggcg ttcacgccga aaccgtacat 120
aaaggtaaat ctccagctgc agataaaaac ggtgtctttt atgaggtgta tgtaaactct 180
ttttacgatg caaataaaga tggacatggt gatttaaaag gtcttacaca aaaactggac 240
tatttaaatg atggcaattc tcatacaaag aatgatcttc aagtaaacgg gatttggatg 300
atgccgatca acccttctcc tagctatcat aaatatgatg taacggacta ttataacatt 360
gattctcagt acggaaatct gcaagatttt cgcaagctaa tgaaagaagc agataaacga 420
gatgtaaaag ttattatgga cctcgttgtg aatcatacga gcagtgaaca cccttggttt 480
caagctgcgt taaaagataa aaacagcaag tacagagatt actatatttg ggctgataaa 540
aataccgatt tgaatgaaaa aggatcttgg ggacaacaag tatggcacaa agctccaaac 600
ggagagtatt tttacggaac gttctgggaa ggaatgcctg acttaaatta cgataaccct 660
gaagtaagaa aagaaatgat taacgtcgga aagttttggc taaagcaagg cgttgacggc 720
ttccgcttag atgctgccct tcatatcttt aaaggtcaaa cacctgaagg cgctaagaaa 780
aatattgtgt ggtggaatga atttagagat gcgatgaaaa aagaaaaccc gaacgtatat 840
ctaacgggcg aagtatggga tcagccggaa gtggtagctc cttattatca gtcgcttgat 900
tccctattta actttgattt agcaggaaaa attgtcagct ctgtaaaagc aggaaatgat 960
caaggaatcg ctactgcagc agcggcaaca gatgaactgt tcaaatcata caatccaaat 1020
aaaattgacg gcattttctt aaccaatcat gaccaaaatc gcgtcatgag tgagttaagc 1080
ggagatgtca ataaagcaaa gtcagctgcc tctatcttac ttacgcttcc tggaaatccg 1140
tatatttatt acggtgaaga aatcggcatg accggtgaaa agcctgatga attaatccgt 1200
gaaccgttcc gctggtacga aggaaacgga cttggacaaa ctagttggga aacacctgta 1260
tacaataaag gcggcaacgg cgtgtctgta gaagcacaaa ccaaacaaaa ggactctttg 1320
ttaaatcatt accgtgaaat gattcgcgtg cgtcagcagc acgaagagtt agtaaaagga 1380
acgcttcaat ctatttcagt agacagtaaa gaagttgttg cttatagccg tacgtataaa 1440
ggcaactcca ttagtgtgta tcataatatt tcaaatcaac ctgtaaaagt atctgtagca 1500
gcgaaaggta aattgatttt tgctagtgaa aaaggtgcta aaaaggtcaa aaatcagctt 1560
gtgattccgg cgaatacaac ggttttagta aaataa 1596
<210>190
<211>531
<212>PRT
<213>环境的
<400>190
Met Gln Thr Ile Ala Lys Lys Gly Asp Glu Thr Met Lys Gly Lys Lys
1 5 10 15
Trp Thr Ala Leu Ala Leu Thr Leu Pro Leu Ala Ala Ser Leu Ser Thr
20 25 30
Gly Val His Ala Glu Thr Val His Lys Gly Lys Ser Pro Ala Ala Asp
35 40 45
Lys Asn Gly Val Phe Tyr Glu Val Tyr Val Asn Ser Phe Tyr Asp Ala
50 55 60
Asn Lys Asp Gly His Gly Asp Leu Lys Gly Leu Thr Gln Lys Leu Asp
65 70 75 80
Tyr Leu Asn Asp Gly Asn Ser His Thr Lys Asn Asp Leu Gln Val Asn
85 90 95
Gly Ile Trp Met Met Pro Ile Asn Pro Ser Pro Ser Tyr His Lys Tyr
100 105 110
Asp Val Thr Asp Tyr Tyr Asn Ile Asp Ser Gln Tyr Gly Asn Leu Gln
115 120 125
Asp Phe Arg Lys Leu Met Lys Glu Ala Asp Lys Arg Asp Val Lys Val
130 135 140
Ile Met Asp Leu Val Val Asn His Thr Ser Ser Glu His Pro Trp Phe
145 150 155 160
Gln Ala Ala Leu Lys Asp Lys Asn Ser Lys Tyr Arg Asp Tyr Tyr Ile
165 170 175
Trp Ala Asp Lys Asn Thr Asp Leu Asn Glu Lys Gly Ser Trp Gly Gln
180 185 190
Gln Val Trp His Lys Ala Pro Asn Gly Glu Tyr Phe Tyr Gly Thr Phe
195 200 205
Trp Glu Gly Met Pro Asp Leu Asn Tyr Asp Asn Pro Glu Val Arg Lys
210 215 220
Glu Met Ile Asn Val Gly Lys Phe Trp Leu Lys Gln Gly Val Asp Gly
225 230 235 240
Phe Arg Leu Asp Ala Ala Leu His Ile Phe Lys Gly Gln Thr Pro Glu
245 250 255
Gly Ala Lys Lys Asn Ile Val Trp Trp Asn Glu Phe Arg Asp Ala Met
260 265 270
Lys Lys Glu Asn Pro Asn Val Tyr Leu Thr Gly Glu Val Trp Asp Gln
275 280 285
Pro Glu Val Val Ala Pro Tyr Tyr Gln Ser Leu Asp Ser Leu Phe Asn
290 295 300
Phe Asp Leu Ala Gly Lys Ile Val Ser Ser Val Lys Ala Gly Asn Asp
305 310 315 320
Gln Gly Ile Ala Thr Ala Ala Ala Ala Thr Asp Glu Leu Phe Lys Ser
325 330 335
Tyr Asn Pro Asn Lys Ile Asp Gly Ile Phe Leu Thr Asn His Asp Gln
340 345 350
Asn Arg Val Met Ser Glu Leu Ser Gly Asp Val Asn Lys Ala Lys Ser
355 360 365
Ala Ala Ser Ile Leu Leu Thr Leu Pro Gly Asn Pro Tyr Ile Tyr Tyr
370 375 380
Gly Glu Glu Ile Gly Met Thr Gly Glu Lys Pro Asp Glu Leu Ile Arg
385 390 395 400
Glu Pro Phe Arg Trp Tyr Glu Gly Asn Gly Leu Gly Gln Thr Ser Trp
405 410 415
Glu Thr Pro Val Tyr Asn Lys Gly Gly Asn Gly Val Ser Val Glu Ala
420 425 430
Gln Thr Lys Gln Lys Asp Ser Leu Leu Asn His Tyr Arg Glu Met Ile
435 440 445
Arg Val Arg Gln Gln His Glu Glu Leu Val Lys Gly Thr Leu Gln Ser
450 455 460
Ile Ser Val Asp Ser Lys Glu Val Val Ala Tyr Ser Arg Thr Tyr Lys
465 470 475 480
Gly Asn Ser Ile Ser Val Tyr His Asn Ile Ser Asn Gln Pro Val Lys
485 490 495
Val Ser Val Ala Ala Lys Gly Lys Leu Ile Phe Ala Ser Glu Lys Gly
500 505 510
Ala Lys Lys Val Lys Asn Gln Leu Val Ile Pro Ala Asn Thr Thr Val
515 520 525
Leu Val Lys
530
<210>191
<211>1596
<212>DNA
<213>环境的
<400>191
atgcaaacga ttgcaaaaaa aggggatgaa acgatgaaag ggaaaaaatg gacagcttta 60
gctctaacac tgccgctggc tgctagctta tcaacaggcg ttcacgccga aaccgtacat 120
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ttttacgatg caaataaaga tggacatggt gacttaaaag gtcttacaca aaagttggac 240
tatttaaatg acggcaattc tcatacaaaa aatgatcttc aagtaaacgg gatttggatg 300
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gaagtaagaa aagaaatgat taacgtcgga aagttttggc taaagcaagg cgttgacggg 720
ttccgcttag atgctgcgct tcatattttt aaaggtcaaa cagctgaagg cgctaagaaa 780
aatatcctgt ggtggaatga gtttagagat gcgatgaaaa aagaaaatcc gaatgtatat 840
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tctttattta attttgattt agcaggaaaa attgtcagct ctgtaaaagc aggaaatgat 960
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tatatttatt acggtgaaga aatcggcatg accggtgaaa agcctgatga attaatccgt 1200
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tacaataaag gcggaaacgg tgtgtctgta gaagcacaaa ccaaacaaaa ggattctttg 1320
ttaaatcatt accgtgaaat gattcgcgtg cgtcagcagc atgaagagtt agtaaaagga 1380
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ggcaactcca ttagtgtgta tcataatatt tcaaatcaac cggtaaaagt atctgtagca 1500
gcgaaaggta aattgatttt tgctagtgaa aaaggtgcta agaaagtcaa aaatcagctt 1560
gtggttccgg cgaatacaac ggttttaatg aaataa 1596
<210>192
<211>531
<212>PRT
<213>环境的
<400>192
Met Gln Thr Ile Ala Lys Lys Gly Asp Glu Thr Met Lys Gly Lys Lys
1 5 10 15
Trp Thr Ala Leu Ala Leu Thr Leu Pro Leu Ala Ala Ser Leu Ser Thr
20 25 30
Gly Val His Ala Glu Thr Val His Lys Gly Lys Ser Pro Thr Ala Asp
35 40 45
Lys Asn Gly Val Phe Tyr Glu Val Tyr Val Asn Ser Phe Tyr Asp Ala
50 55 60
Asn Lys Asp Gly His Gly Asp Leu Lys Gly Leu Thr Gln Lys Leu Asp
65 70 75 80
Tyr Leu Asn Asp Gly Asn Ser His Thr Lys Asn Asp Leu Gln Val Asn
85 90 95
Gly Ile Trp Met Met Pro Val Asn Pro Ser Pro Ser Tyr His Lys Tyr
100 105 110
Asp Val Thr Asp Tyr Tyr Asn Ile Asp Pro Gln Tyr Gly Asn Leu Gln
115 120 125
Asp Phe Arg Lys Leu Met Lys Glu Ala Asp Lys Arg Asp Val Lys Val
130 135 140
Ile Met Asp Leu Val Val Asn His Thr Ser Ser Glu His Pro Trp Phe
145 150 155 160
Gln Ala Ala Leu Lys Asp Lys Asn Ser Lys Tyr Arg Asp Tyr Tyr Ile
165 170 175
Trp Ala Asp Lys Asn Thr Asp Leu Asn Glu Lys Gly Ser Trp Gly Gln
180 185 190
Gln Val Trp His Lys Ala Pro Asn Gly Glu Tyr Phe Tyr Gly Thr Phe
195 200 205
Trp Glu Gly Met Pro Asp Leu Asn Tyr Asp Asn Pro Glu Val Arg Lys
210 215 220
Glu Met Ile Asn Val Gly Lys Phe Trp Leu Lys Gln Gly Val Asp Gly
225 230 235 240
Phe Arg Leu Asp Ala Ala Leu His Ile Phe Lys Gly Gln Thr Ala Glu
245 250 255
Gly Ala Lys Lys Asn Ile Leu Trp Trp Asn Glu Phe Arg Asp Ala Met
260 265 270
Lys Lys Glu Asn Pro Asn Val Tyr Leu Thr Gly Glu Val Trp Asp Gln
275 280 285
Pro Glu Val Val Ala Pro Tyr Tyr Gln Ser Leu Asp Ser Leu Phe Asn
290 295 300
Phe Asp Leu Ala Gly Lys Ile Val Ser Ser Val Lys Ala Gly Asn Asp
305 310 315 320
Gln Gly Ile Ala Thr Ala Ala Ala Ala Thr Asp Glu Leu Phe Lys Ser
325 330 335
Tyr Asn Pro Asn Lys Ile Asp Gly Ile Phe Leu Thr Asn His Asp Gln
340 345 350
Asn Arg Val Met Ser Glu Leu Ser Gly Asp Val Ser Lys Ala Lys Ser
355 360 365
Ala Ala Ser Ile Leu Leu Thr Leu Pro Gly Asn Pro Tyr Ile Tyr Tyr
370 375 380
Gly Glu Glu Ile Gly Met Thr Gly Glu Lys Pro Asp Glu Leu Ile Arg
385 390 395 400
Glu Pro Phe Arg Trp Tyr Glu Gly Asn Gly Leu Gly Gln Thr Ser Trp
405 410 415
Glu Thr Pro Val Tyr Asn Lys Gly Gly Asn Gly Val Ser Val Glu Ala
420 425 430
Gln Thr Lys Gln Lys Asp Ser Leu Leu Asn His Tyr Arg Glu Met Ile
435 440 445
Arg Val Arg Gln Gln His Glu Glu Leu Val Lys Gly Thr Leu Gln Ser
450 455 460
Ile Ser Val Asp Ser Lys Glu Val Val Ala Tyr Ser Arg Thr Tyr Lys
465 470 475 480
Gly Asn Ser Ile Ser Val Tyr His Asn Ile Ser Asn Gln Pro Val Lys
485 490 495
Val Ser Val Ala Ala Lys Gly Lys Leu Ile Phe Ala Ser Glu Lys Gly
500 505 510
Ala Lys Lys Val Lys Asn Gln Leu Val Val Pro Ala Asn Thr Thr Val
515 520 525
Leu Met Lys
530
<210>193
<211>1962
<212>DNA
<213>环境的
<400>193
atgaaattca aaaagagttt atctgccggg ctccttttgt tcggaggtct gagcggtgtg 60
acaccatccg tcgctgcgga ggtgccacga accgcatttg tccatttatt cgaatggagt 120
tggccggata ttgccaccga atgcgaaacc tttcttggcc ctaaggggtt ctctgcggtt 180
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gttagttact cttttgaagg gcgcagtgga acccgggctc aatttgcgga tatggtccag 300
cgttgtaaag cggtgggggt cgatatttat ctggatgcgg tgatcaacca tatggcagca 360
caagatcgct attttccaga agtaccttac agcagtaatg attttcacag ttgcacgggc 420
gatatcgatt attccaaccg ctggtcgatt caaaattgcg atctggttgg gctgaacgat 480
ctcaaaaccg agtcagaata cgttcggcag aaaattgcag actatatgaa cgatgcgctc 540
agtctgggcg tggcggggtt tcggattgat gccgccaagc atatcccggc cggcgacatc 600
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ttcgcccgga ccatcgggcc taaatttaag caaggtaata ttaaagacct gcaggggatt 780
ggttcgtgga gcggctggct gagcagcgac gatgcggtga cctttgtgac caaccatgac 840
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tacttcagta attttgatgc cgggccacca tcgacagggg tacattctgg taatgcgtgt 1020
ggctttgatg gcggtgattg ggtctgcgaa cacaaatggc gtggtgtagc caacatggtg 1080
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gacaatgcac aaaactttag ccaaccgtat ttgcattact ggaatgtcaa tgcggatcag 1500
gccgtagcga atgcaacctg gccgggcgtc gcgatgacgg ctgaaaatgg cggttactgc 1560
tacgattttg gtgtcggtct caattcactt caggtaattt tcagcgataa cggcgccagc 1620
caaaccgctg atctgaccgc cagcagtccg acgttgtgtt accagaacgg aacgtggcgt 1680
gacagtgact tctgtcagag tagcaatgtg ggcaacgaga gttggtattt ccgtggaacc 1740
tcaaacggtt ggggcgtgag cgcactcact tatgaggctg cgacaggcct gtacactacg 1800
gtgcagagct ttaacgggga ggagtcgccc gcacgcttta aaattgatga tggcaactgg 1860
agtgagtcgt atccaagtgc tgattatcaa gtcggtgatt atgccaccta cacgatcacg 1920
tttgacagcc agacgaaggc catcaccgtg acttcgcagt aa 1962
<210>194
<211>653
<212>PRT
<213>环境的
<400>194
Met Lys Phe Lys Lys Ser Leu Ser Ala Gly Leu Leu Leu Phe Gly Gly
1 5 10 15
Leu Ser Gly Val Thr Pro Ser Val Ala Ala Glu Val Pro Arg Thr Ala
20 25 30
Phe Val His Leu Phe Glu Trp Ser Trp Pro Asp Ile Ala Thr Glu Cys
35 40 45
Glu Thr Phe Leu Gly Pro Lys Gly Phe Ser Ala Val Gln Val Ser Pro
50 55 60
Pro Gln Lys Ser Val Ser Asn Ala Ala Trp Trp Ala Arg Tyr Gln Pro
65 70 75 80
Val Ser Tyr Ser Phe Glu Gly Arg Ser Gly Thr Arg Ala Gln Phe Ala
85 90 95
Asp Met Val Gln Arg Cys Lys Ala Val Gly Val Asp Ile Tyr Leu Asp
100 105 110
Ala Val Ile Asn His Met Ala Ala Gln Asp Arg Tyr Phe Pro Glu Val
115 120 125
Pro Tyr Ser Ser Asn Asp Phe His Ser Cys Thr Gly Asp Ile Asp Tyr
130 135 140
Ser Asn Arg Trp Ser Ile Gln Asn Cys Asp Leu Val Gly Leu Asn Asp
145 150 155 160
Leu Lys Thr Glu Ser Glu Tyr Val Arg Gln Lys Ile Ala Asp Tyr Met
165 170 175
Asn Asp Ala Leu Ser Leu Gly Val Ala Gly Phe Arg Ile Asp Ala Ala
180 185 190
Lys His Ile Pro Ala Gly Asp Ile Ala Ala Ile Lys Ser Lys Leu Asn
195 200 205
Gly Ser Pro Tyr Ile Tyr Gln Glu Val Ile Gly Ala Ala Gly Glu Pro
210 215 220
Val Gln Thr Ser Glu Tyr Thr Tyr Ile Gly Asp Val Thr Glu Phe Asn
225 230 235 240
Phe Ala Arg Thr Ile Gly Pro Lys Phe Lys Gln Gly Asn Ile Lys Asp
245 250 255
Leu Gln Gly Ile Gly Ser Trp Ser Gly Trp Leu Ser Ser Asp Asp Ala
260 265 270
Val Thr Phe Val Thr Asn His Asp Glu Glu Arg His Asn Pro Gly Gln
275 280 285
Val Leu Ser His Gln Asp Phe Gly Asn Leu Tyr Phe Leu Gly Asn Val
290 295 300
Phe Thr Leu Ala Tyr Pro Tyr Gly Tyr Pro Lys Val Met Ser Gly Tyr
305 310 315 320
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325 330 335
Gly Asn Ala Cys Gly Phe Asp Gly Gly Asp Trp Val Cys Glu His Lys
340 345 350
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355 360 365
Gln Trp Gln Val Thr Asp Trp Trp Asp Asp Gly Tyr Asn Gln Val Ala
370 375 380
Phe Gly Arg Gly Gly Leu Gly Phe Val Val Ile Asn Arg Asp Asp Asn
385 390 395 400
Lys Gly Ile Asn Gln Ser Phe Gln Thr Gly Met Pro Ala Gly Glu Tyr
405 410 415
Cys Asp Ile Ile Ala Gly Asp Phe Asp Thr Gln Ser Gly His Cys Ser
420 425 430
Ala Thr Thr Ile Thr Val Asp Ser Gln Gly Tyr Ala His Phe Thr Val
435 440 445
Gly Ser His Gln Ala Ala Ala Ile His Ile Gly Ala Lys Leu Gly Ser
450 455 460
Val Cys Gln Asp Cys Gly Gly Thr Ala Ala Glu Thr Lys Val Cys Phe
465 470 475 480
Asp Asn Ala Gln Asn Phe Ser Gln Pro Tyr Leu His Tyr Trp Asn Val
485 490 495
Asn Ala Asp Gln Ala Val Ala Asn Ala Thr Trp Pro Gly Val Ala Met
500 505 510
Thr Ala Glu Asn Gly Gly Tyr Cys Tyr Asp Phe Gly Val Gly Leu Asn
515 520 525
Ser Leu Gln Val Ile Phe Ser Asp Asn Gly Ala Ser Gln Thr Ala Asp
530 535 540
Leu Thr Ala Ser Ser Pro Thr Leu Cys Tyr Gln Asn Gly Thr Trp Arg
545 550 555 560
Asp Ser Asp Phe Cys Gln Ser Ser Asn Val Gly Asn Glu Ser Trp Tyr
565 570 575
Phe Arg Gly Thr Ser Asn Gly Trp Gly Val Ser Ala Leu Thr Tyr Glu
580 585 590
Ala Ala Thr Gly Leu Tyr Thr Thr Val Gln Ser Phe Asn Gly Glu Glu
595 600 605
Ser Pro Ala Arg Phe Lys Ile Asp Asp Gly Asn Trp Ser Glu Ser Tyr
610 615 620
Pro Ser Ala Asp Tyr Gln Val Gly Asp Tyr Ala Thr Tyr Thr Ile Thr
625 630 635 640
Phe Asp Ser Gln Thr Lys Ala Ile Thr Val Thr Ser Gln
645 650
<210>195
<211>2790
<212>DNA
<213>环境的
<400>195
atgctgacag accgtttctt tgatggcgat acatcaaaca acgaccctta caaccagaac 60
tacgatgcta aaaacgaccg gggaacttat cagggcggcg attttaaagg aatcacgcaa 120
aaattggatt atctcgataa gctaggcgtg aacacaatct ggatcagccc gatcgtggaa 180
aatatcaagc atgatgtccg ttatgacaac tctgaagggc attcatacta tgcttaccac 240
ggctactggg caagcaactt cggtgcgtta aacccacact tcggtacaat ggaagatttc 300
catacactga ttgacgctgc ccatgaaaaa ggcatcaaga tcatggttga cgtagtatta 360
aaccacactg gttatggctt aaa gatatc aacggagaag tttccaatcc tccagccggt 420
tacccaactg acgcagaacg cagcacatat agcagcctgc ttcgccaggg ttcaaatgtc 480
ggctctgatg aggttgttgg cgaattagct ggcctacctg acttaaaaac agaagacccc 540
gcagtccgcc agacaatcat cgactggcaa acagactgga tcacgaaagc tactacagct 600
aaaggaaaca caattgacta cttccgtgtc gacactgtga agcacgttga agacgcaaca 660
tggatggcat tcaaaaatga cctcactgaa aaaatgccga cacacaaaat gatcggggaa 720
gcttggggag caagtgccaa taaccaactt ggataccttg aaacaggtat gatggactca 780
ctgcttgact tcgacttcaa aggcattgcg cacgatttcg tgaacggcaa gcttaaggca 840
gcaaacgatg ccctgactgc ccgcaacggt aaaattgaca acacagctac tttaggttca 900
ttccttggaa gccatgacga agatggtttc ctatttaaag aaggaaatga caaaggcaag 960
cttaaggttg ctgcttccct gcaagcaaca tcaaaaggcc agccggtcat ctattatggt 1020
gaagagcttg gtcaaagtgg agcaaacaac tatccgcaat acgataaccg ttatgacctg 1080
gcatgggaca aagttgaaaa caacgacgtc cttgagcact acactaaggt cctgaacttc 1140
agaagcgctc attcagaagt gttcgctaaa ggtgaacgcg caacaattgg cggttctgac 1200
gctgataaat tcttactttt tgctcgtaaa aatggaaacg aagctgctta cgtcggcttg 1260
aacgttgctg acacagcaaa agacgtaaca ctgactgttt ctgcaggtgc agtcgtaact 1320
gaccactatg cagataaaac ttatactgct tcagaagctg gagaaatcac attgacgatc 1380
ccggcaaaag ctgatggcgg tactgtttta ctaacggttg aaggcggaga aatcacagct 1440
gctaaagcgg caagcgaagg cgacggcaca gttgagccag tccctgcgaa ccacatccgc 1500
attcactaca accgtacaga caacaactat gaaaactacg gtgcatggct gtggaacgat 1560
gtagcctccc cttctgccaa ctggccgact ggcgctacaa tgtttgaaaa aacagacagc 1620
tacggtgcat acatcgacgt accacttaaa gagggcgcta agaacatcgg cttcctcgtt 1680
atggatgtaa caaaaggtga tcagggtaaa gacggcggcg acaaaggttt tacgatctca 1740
tcacctgaaa tgaacgaaat ttggatcaag caaggttctg acaaggtgta cacttacgag 1800
ccagttgatc ttccggcgaa cactgtccgc gtccactatg tacgtgacaa cgcagactac 1860
gaaaacttcg gtatctggaa ctggggcgat gtaacagcac cttccgaaaa ctggcctaca 1920
ggcgcagcga aattcgatgg tacagaccgt tacggtgcgt atgtcgacat tacgctaaaa 1980
gaaggcgcaa agaacattgg aatgattgct cttaacactg caaatggaga gaaagacggc 2040
ggagataaat ccttcaacct tctggataaa tataatcgca tttggattaa acaaggtgat 2100
gacaatgtct acgtttctcc atactgggag caggcaacag gaatcaccaa tgcagaggta 2160
atctctgaag atacgattct attaggcttc acaatgactg acggcttaac acctgaatct 2220
ttaaaaggag gtcttgtaat taaagattca actggtgctg aagttgccat cgaaagtgct 2280
gaaatcacaa gcgcaacctc tgtaaaagta aaagcaacat tcgatttaga aaagcttcca 2340
ttatccatca catacgcagg cagaacagtt tcagcttcaa ctggctggag aatgcttgat 2400
gaaatgtacg cttatgatgg aaacgacctt ggtgcgactt acaaggacgg agcagcgacg 2460
cttaaattat gggctccgaa agcgagcaag gtaaccgcta acttctttga taaaaataat 2520
gccgctgaaa aaatcggcag cgtcgagtta acgaagggtg aaaaaggagt ctggtcagct 2580
atggttgctc ctggcgacct gaacgtaacc gatcttgaag gttattttta ccagtatgat 2640
gtaacaaatg acggtataac tcgccaggtg ttagatcctt atgcaaaatc aatggcagcc 2700
tttactgtga atacagaagg caatgctggt cctgacgggg acactgttgg caaggcggca 2760
attcaaaaag cttctcgaga gtacttctag 2790
<210>196
<211>929
<212>PRT
<213>环境的
<400>196
Met Leu Thr Asp Arg Phe Phe Asp Gly Asp Thr Ser Asn Asn Asp Pro
1 5 10 15
Tyr Asn Gln Asn Tyr Asp Ala Lys Asn Asp Arg Gly Thr Tyr Gln Gly
20 25 30
Gly Asp Phe Lys Gly Ile Thr Gln Lys Leu Asp Tyr Leu Asp Lys Leu
35 40 45
Gly Val Asn Thr Ile Trp Ile Ser Pro Ile Val Glu Asn Ile Lys His
50 55 60
Asp Val Arg Tyr Asp Asn Ser Glu Gly His Ser Tyr Tyr Ala Tyr His
65 70 75 80
Gly Tyr Trp Ala Ser Asn Phe Gly Ala Leu Asn Pro His Phe Gly Thr
85 90 95
Met Glu Asp Phe His Thr Leu Ile Asp Ala Ala His Glu Lys Gly Ile
100 105 110
Lys Ile Met Val Asp Val Val Leu Asn His Thr Gly Tyr Gly Leu Lys
115 120 125
Asp Ile Asn Gly Glu Val Ser Asn Pro Pro Ala Gly Tyr Pro Thr Asp
130 135 140
Ala Glu Arg Ser Thr Tyr Ser Ser Leu Leu Arg Gln Gly Ser Asn Val
145 150 155 160
Gly Ser Asp Glu Val Val Gly Glu Leu Ala Gly Leu Pro Asp Leu Lys
165 170 175
Thr Glu Asp Pro Ala Val Arg Gln Thr Ile Ile Asp Trp Gln Thr Asp
180 185 190
Trp Ile Thr Lys Ala Thr Thr Ala Lys Gly Asn Thr Ile Asp Tyr Phe
195 200 205
Arg Val Asp Thr Val Lys His Val Glu Asp Ala Thr Trp Met Ala Phe
210 215 220
Lys Asn Asp Leu Thr Glu Lys Met Pro Thr His Lys Met Ile Gly Glu
225 230 235 240
Ala Trp Gly Ala Ser Ala Asn Asn Gln Leu Gly Tyr Leu Glu Thr Gly
245 250 255
Met Met Asp Ser Leu Leu Asp Phe Asp Phe Lys Gly Ile Ala His Asp
260 265 270
Phe Val Asn Gly Lys Leu Lys Ala Ala Asn Asp Ala Leu Thr Ala Arg
275 280 285
Asn Gly Lys Ile Asp Asn Thr Ala Thr Leu Gly Ser Phe Leu Gly Ser
290 295 300
His Asp Glu Asp Gly Phe Leu Phe Lys Glu Gly Asn Asp Lys Gly Lys
305 310 315 320
Leu Lys Val Ala Ala Ser Leu Gln Ala Thr Ser Lys Gly Gln Pro Val
325 330 335
Ile Tyr Tyr Gly Glu Glu Leu Gly Gln Ser Gly Ala Asn Asn Tyr Pro
340 345 350
Gln Tyr Asp Asn Arg Tyr Asp Leu Ala Trp Asp Lys Val Glu Asn Asn
355 360 365
Asp Val Leu Glu His Tyr Thr Lys Val Leu Asn Phe Arg Ser Ala His
370 375 380
Ser Glu Val Phe Ala Lys Gly Glu Arg Ala Thr Ile Gly Gly Ser Asp
385 390 395 400
Ala Asp Lys Phe Leu Leu Phe Ala Arg Lys Asn Gly Asn Glu Ala Ala
405 410 415
Tyr Val Gly Leu Asn Val Ala Asp Thr Ala Lys Asp Val Thr Leu Thr
420 425 430
Val Ser Ala Gly Ala Val Val Thr Asp His Tyr Ala Asp Lys Thr Tyr
435 440 445
Thr Ala Ser Glu Ala Gly Glu Ile Thr Leu Thr Ile Pro Ala Lys Ala
450 455 460
Asp Gly Gly Thr Val Leu Leu Thr Val Glu Gly Gly Glu Ile Thr Ala
465 470 475 480
Ala Lys Ala Ala Ser Glu Gly Asp Gly Thr Val Glu Pro Val Pro Ala
485 490 495
Asn His Ile Arg Ile His Tyr Asn Arg Thr Asp Asn Asn Tyr Glu Asn
500 505 510
Tyr Gly Ala Trp Leu Trp Asn Asp Val Ala Ser Pro Ser Ala Asn Trp
515 520 525
Pro Thr Gly Ala Thr Met Phe Glu Lys Thr Asp Ser Tyr Gly Ala Tyr
530 535 540
Ile Asp Val Pro Leu Lys Glu Gly Ala Lys Asn Ile Gly Phe Leu Val
545 550 555 560
Met Asp Val Thr Lys Gly Asp Gln Gly Lys Asp Gly Gly Asp Lys Gly
565 570 575
Phe Thr Ile Ser Ser Pro Glu Met Asn Glu Ile Trp Ile Lys Gln Gly
580 585 590
Ser Asp Lys Val Tyr Thr Tyr Glu Pro Val Asp Leu Pro Ala Asn Thr
595 600 605
Val Arg Val His Tyr Val Arg Asp Asn Ala Asp Tyr Glu Asn Phe Gly
610 615 620
Ile Trp Asn Trp Gly Asp Val Thr Ala Pro Ser Glu Asn Trp Pro Thr
625 630 635 640
Gly Ala Ala Lys Phe Asp Gly Thr Asp Arg Tyr Gly Ala Tyr Val Asp
645 650 655
Ile Thr Leu Lys Glu Gly Ala Lys Asn Ile Gly Met Ile Ala Leu Asn
660 665 670
Thr Ala Asn Gly Glu Lys Asp Gly Gly Asp Lys Ser Phe Asn Leu Leu
675 680 685
Asp Lys Tyr Asn Arg Ile Trp Ile Lys Gln Gly Asp Asp Asn Val Tyr
690 695 700
Val Ser Pro Tyr Trp Glu Gln Ala Thr Gly Ile Thr Asn Ala Glu Val
705 710 715 720
Ile Ser Glu Asp Thr Ile Leu Leu Gly Phe Thr Met Thr Asp Gly Leu
725 730 735
Thr Pro Glu Ser Leu Lys Gly Gly Leu Val Ile Lys Asp Ser Thr Gly
740 745 750
Ala Glu Val Ala Ile Glu Ser Ala Glu Ile Thr Ser Ala Thr Ser Val
755 760 765
Lys Val Lys Ala Thr Phe Asp Leu Glu Lys Leu Pro Leu Ser Ile Thr
770 775 780
Tyr Ala Gly Arg Thr Val Ser Ala Ser Thr Gly Trp Arg Met Leu Asp
785 790 795 800
Glu Met Tyr Ala Tyr Asp Gly Asn Asp Leu Gly Ala Thr Tyr Lys Asp
805 810 815
Gly Ala Ala Thr Leu Lys Leu Trp Ala Pro Lys Ala Ser Lys Val Thr
820 825 830
Ala Asn Phe Phe Asp Lys Asn Asn Ala Ala Glu Lys Ile Gly Ser Val
835 840 845
Glu Leu Thr Lys Gly Glu Lys Gly Val Trp Ser Ala Met Val Ala Pro
850 855 860
Gly Asp Leu Asn Val Thr Asp Leu Glu Gly Tyr Phe Tyr Gln Tyr Asp
865 870 875 880
Val Thr Asn Asp Gly Ile Thr Arg Gln Val Leu Asp Pro Tyr Ala Lys
885 890 895
Ser Met Ala Ala Phe Thr Val Asn Thr Glu Gly Asn Ala Gly Pro Asp
900 905 910
Gly Asp Thr Val Gly Lys Ala Ala Ile Gln Lys Ala Ser Arg Glu Tyr
915 920 925
Phe
<210>197
<211>1401
<212>DNA
<213>环境的
<400>197
atgaaaccgt caaaattcgt ttttctctct gctgccatcg cttgcagcct ctccagtacc 60
gccaatgctg acgccatttt gcatgcattt aactggaagt actccgacgt cacgcaaaac 120
gcctcgcaaa tcgcggcggc gggttataaa aaagtgctga tttcgccagc actgaaatcg 180
agtggcaatg aatggtgggc acgttatcaa ccgcaagatc tgcgcgtgat cgattcccca 240
cttggcaaca aaagtgactt aaaatccatg attgatgctc tgaaggcggt cggcgttgat 300
gtgtatgccg atgtggtgct taaccatatg gccaatgaaa catggaagcg tgaagactta 360
aattaccctg gcagtgaagt gctgcaacaa tacgcagcta acaccagtta ttatgeggac 420
caaacgcttt ttggcaattt aacggaaaac ctattctctg gctttgactt ccacccagaa 480
ggctgtatta gcgattggaa tgatgccggc aatgttcagt actggcgtct ttgtggcggt 540
gctggtgacc gagggctgcc agacttagat ccgaacaact gggtggtgtc acagcaacgt 600
ttgtatttga atgcgctaaa aggtttaggt gtgaaaggct tccgcattga tgcggttaaa 660
cacatgagcc aatatcaaat cgaccagatt ttcactgcag agattaccgc cggaatgcac 720
gtgtttggtg aagtgatcac cagtggtggc aaaggcgact ccagctatga gaacttctta 780
gcgccttatc tcaacgccac caaccattcg gcttacgatt tcccactgtt tgcctctatt 840
cgcaacgcct tctcctacag cggtggcatg aacatgcttc atgatccaca agcctatggc 900
caagggcttg aaaacgcacg ttcaattacc tttaccatca cgcacgacat cccaacgaac 960
gacggtttcc gttatcaaat catggatccg aaagatgaag agctggctta cgcttatatc 1020
ctcggtaaag atggcggcac acctctgatt tacagcgaca acttacctga taacgaagat 1080
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gcgcgcatgt acatgctcta a 1401
<210>198
<211>466
<212>PRT
<213>环境的
<400>198
Met Lys Pro Ser Lys Phe Val Phe Leu Ser Ala Ala Ile Ala Cys Ser
1 5 10 15
Leu Ser Ser Thr Ala Asn Ala Asp Ala Ile Leu His Ala Phe Asn Trp
20 25 30
Lys Tyr Ser Asp Val Thr Gln Asn Ala Ser Gln Ile Ala Ala Ala Gly
35 40 45
Tyr Lys Lys Val Leu Ile Ser Pro Ala Leu Lys Ser Ser Gly Asn Glu
50 55 60
Trp Trp Ala Arg Tyr Gln Pro Gln Asp Leu Arg Val Ile Asp Ser Pro
65 70 75 80
Leu Gly Asn Lys Ser Asp Leu Lys Ser Met Ile Asp Ala Leu Lys Ala
85 90 95
Val Gly Val Asp Val Tyr Ala Asp Val Val Leu Asn His Met Ala Asn
100 105 110
Glu Thr Trp Lys Arg Glu Asp Leu Asn Tyr Pro Gly Ser Glu Val Leu
115 120 125
Gln Gln Tyr Ala Ala Asn Thr Ser Tyr Tyr Ala Asp Gln Thr Leu Phe
130 135 140
Gly Asn Leu Thr Glu Asn Leu Phe Ser Gly Phe Asp Phe His Pro Glu
145 150 155 160
Gly Cys Ile Ser Asp Trp Asn Asp Ala Gly Asn Val Gln Tyr Trp Arg
165 170 175
Leu Cys Gly Gly Ala Gly Asp Arg Gly Leu Pro Asp Leu Asp Pro Asn
180 185 190
Asn Trp Val Val Ser Gln Gln Arg Leu Tyr Leu Asn Ala Leu Lys Gly
195 200 205
Leu Gly Val Lys Gly Phe Arg Ile Asp Ala Val Lys His Met Ser Gln
210 215 220
Tyr Gln Ile Asp Gln Ile Phe Thr Ala Glu Ile Thr Ala Gly Met His
225 230 235 240
Val Phe Gly Glu Val Ile Thr Ser Gly Gly Lys Gly Asp Ser Ser Tyr
245 250 255
Glu Asn Phe Leu Ala Pro Tyr Leu Asn Ala Thr Asn His Ser Ala Tyr
260 265 270
Asp Phe Pro Leu Phe Ala Ser Ile Arg Asn Ala Phe Ser Tyr Ser Gly
275 280 285
Gly Met Asn Met Leu His Asp Pro Gln Ala Tyr Gly Gln Gly Leu Glu
290 295 300
Asn Ala Arg Ser Ile Thr Phe Thr Ile Thr His Asp Ile Pro Thr Asn
305 310 315 320
Asp Gly Phe Arg Tyr Gln Ile Met Asp Pro Lys Asp Glu Glu Leu Ala
325 330 335
Tyr Ala Tyr Ile Leu Gly Lys Asp Gly Gly Thr Pro Leu Ile Tyr Ser
340 345 350
Asp Asn Leu Pro Asp Asn Glu Asp Arg Asp Asn Arg Arg Trp Glu Gly
355 360 365
Val Trp Asn Arg Asp Leu Met Lys Asn Met Leu Arg Phe His Asn Gln
370 375 380
Met Gln Gly Gln Glu Met Thr Met Leu Tyr Ser Asp Gln Cys Leu Leu
385 390 395 400
Met Phe Lys Arg Gly Lys Gln Gly Val Val Gly Ile Asn Lys Cys Gly
405 410 415
Glu Glu Arg Ser His Thr Val Asp Thr Tyr Gln His Glu Phe Asn Trp
420 425 430
Tyr Gln Pro Tyr Thr Asp Thr Leu Thr Gly Val Thr Glu Thr Val Ser
435 440 445
Ser Arg Tyr His Thr Phe Arg Ile Pro Ala Arg Ser Ala Arg Met Tyr
450 455 460
Met Leu
465
<210>199
<211>399
<212>DNA
<213>环境的
<400>199
gtgagtttga ccaaaaaggc tcagtacgaa ccaaatacgg caccaaggct cagtacatct 60
ctgcaatcaa tgccgcgcac aacaacaata tccaaattta cggcgatgtt gtgtttaacc 120
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gggaagtcag ctctgaaaaa ggcaattacg actacctaa 399
<210>200
<211>132
<212>PRT
<213>环境的
<400>200
Val Ser Leu Thr Lys Lys Ala Gln Tyr Glu Pro Asn Thr Ala Pro Arg
1 5 10 15
Leu Ser Thr Ser Leu Gln Ser Met Pro Arg Thr Thr Thr Ile Ser Lys
20 25 30
Phe Thr Ala Met Leu Cys Leu Thr Thr Glu Val Val Leu Met Gly Ser
35 40 45
Arg Gly Ser Ile Pro Ser Ala Leu Ile Gly Thr Thr Ala Ile Leu Asn
50 55 60
Trp Ala Thr Asn Gly Leu Lys Leu Gly Leu Ser Leu Ile Phe Leu Ala
65 70 75 _ 80
Ala Thr Thr Asn Thr Arg Thr Ser Ile Gly Leu Gly Ile Thr Leu Thr
85 90 95
Val Leu Thr Gly Met Thr Pro Ala Lys Lys Lys Arg Ser Leu Asn Ser
100 105 110
Lys Ala Lys Glu Lys His Gly Ile Gly Lys Ser Ala Leu Lys Lys Ala
115 120 125
Ile Thr Thr Thr
130
<210>201
<211>1911
<212>DNA
<213>环境的
<400>201
atgacagcca aggctgatga cttacgcatt taccagatca tggtggaaag ctttgtggat 60
ggcgataaac aggtcggcca tggcaccggc tacggtacca gccatcacaa aggcgatctg 120
caagggatca ttgactcgct ggattacatt caatcgctgg gcgtcaatgc catttggcta 180
acgccgattt ttgaatctat tccggtggag ggacaagacc attgggcgga caggcttgat 240
gctacaggct actttgccag tgactatttc aagatagacc ctcgctttgg cacgttagaa 300
caagcccgtg agctggtgga aaaggcacac gcgaaaggct tgtatgtctt ctttgatgga 360
gtatttggtc accataaagg caatgtggtg ccatcaccac aaggtagact gcctgtcggt 420
gaaaataacc cggtcagcta cccagagagc ctggcgtttt acgaagaagt cgccagttac 480
tgggtgaaag agttaaagat tgatggctgg cgtctggatc aagcctatca agtgccgacc 540
gatgcatgga aagcgatccg tcagagcgtt gatgaagcgt cacagtccgt aacttatgtg 600
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tttgattttc cgatgcgttt ccgagtggtc gaaacctttg cggttaacga aagtggtgtc 780
agccgaaaag gcggcgaatg gttgaatgac ggcatgtcac tgcacagtca gtatccggat 840
catgccaagc ctaatttaat gttgggcaac catgatgtgg tgcgctttgg ggatctgctg 900
caacgtggcg gtattgcgtc accagaacaa ccgcaatact ggcagcgtca taaagcggcg 960
atgtctttct tagcagcgta taccggccca attaccttgt attacggtga agaaattggc 1020
gatcaggttg acggctttgc taaaaaaatc aaagaagatt gtgccgttat tggtttgtgt 1080
gatgaccacg tggcgcgcac cagtgcgaag attgatggcg tgacggcgtc actgaatgca 1140
cagcagtctg aactcaaagt atatgtctct tcattgatga cattacgtca gcaacatcct 1200
gcgttatcac aaggggaacg tactaatgtg atggcgacag agacagtata cgtagaccat 1260
aaacaggcag acaatgaagc cctgttgtac atggtgagta cgactgataa cgcggagtca 1320
gtcaccttga agggcaaagc gattggttca caaggtgtgc tgattgattt gttaacgaac 1380
gagcgtttta tgcccaataa tggggagtat gccattccat taacgggctt tggcgcacga 1440
ttcctcaaga ttgacactcc gacagcggcg ggtgtgatgg cgcaatctgc tgcctcggta 1500
tcgctagtag gtgaagggat catggcccaa tgtgataccc caaccgttga aggcaccggt 1560
ccggtagcag aaaccttgta cgtggttggc gattttgccg atgctggttg gaagcaaaag 1620
ccgcagcgcg cgtatcaata caaaggcaag cacaatggca gcaacttgta tcaagtggtt 1680
gtcgatgaaa aagcgggcgc ctacaagatg caatacgcca cgaaagattg gagcccacag 1740
tttactgcag acggtatggc attgaagccg ggtaccgcaa agtcgctcat agcgggtggc 1800
tacggtaaag acaccgccgt gacgttgccg gaatccggta agtatgtgtg gagcttaaca 1860
ttcagtgatc ttggcgagcc ggagcaaatc atggtgtcta agtgtcagta a 1911
<210>202
<211>630
<212>PRT
<213>环境的
<400>202
Met Thr Ala Lys Ala Asp Asp Leu Arg Ile Tyr Gln Ile Met Val Glu
1 5 10 15
Ser Phe Val Asp Gly Asp Lys Gln Val Gly His Gly Thr Gly Tyr Gly
20 25 30
Thr Ser His His Lys Gly Asp Leu Gln Gly Ile Ile Asp Ser Leu Asp
35 40 45
Tyr Ile Gln Ser Leu Gly Val Asn Ala Ile Trp Leu Thr Pro Ile Phe
50 55 60
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65 70 75 80
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85 90 95
Gly Thr Leu Glu Gln Ala Arg Glu Leu Val Glu Lys Ala His Ala Lys
100 105 110
Gly Leu Tyr Val Phe Phe Asp Gly Val Phe Gly His His Lys Gly Asn
115 120 125
Val Val Pro Ser Pro Gln Gly Arg Leu Pro Val Gly Glu Asn Asn Pro
130 135 140
Val Ser Tyr Pro Glu Ser Leu Ala Phe Tyr Glu Glu Val Ala Ser Tyr
145 150 155 160
Trp Val Lys Glu Leu Lys Ile Asp Gly Trp Arg Leu Asp Gln Ala Tyr
165 170 175
Gln Val Pro Thr Asp Ala Trp Lys Ala Ile Arg Gln Ser Val Asp Glu
180 185 190
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195 200 205
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210 215 220
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225 230 235 240
Phe Asp Phe Pro Met Arg Phe Arg Val Val Glu Thr Phe Ala Val Asn
245 250 255
Glu Ser Gly Val Ser Arg Lys Gly Gly Glu Trp Leu Asn Asp Gly Met
260 265 270
Ser Leu His Ser Gln Tyr Pro Asp His Ala Lys Pro Asn Leu Met Leu
275 280 285
Gly Asn His Asp Val Val Arg Phe Gly Asp Leu Leu Gln Arg Gly Gly
290 295 300
Ile Ala Ser Pro Glu Gln Pro Gln Tyr Trp Gln Arg His Lys Ala Ala
305 310 315 320
Met Ser Phe Leu Ala Ala Tyr Thr Gly Pro Ile Thr Leu Tyr Tyr Gly
325 330 335
Glu Glu Ile Gly Asp Gln Val Asp Gly Phe Ala Lys Lys Ile Lys Glu
340 345 350
Asp Cys Ala Val Ile Gly Leu Cys Asp Asp His Val Ala Arg Thr Ser
355 360 365
Ala Lys Ile Asp Gly Val Thr Ala Ser Leu Asn Ala Gln Gln Ser Glu
370 375 380
Leu Lys Val Tyr Val Ser Ser Leu Met Thr Leu Arg Gln Gln His Pro
385 390 395 400
Ala Leu Ser Gln Gly Glu Arg Thr Asn Val Met Ala Thr Glu Thr Val
405 410 415
Tyr Val Asp His Lys Gln Ala Asp Asn Glu Ala Leu Leu Tyr Met Val
420 425 430
Ser Thr Thr Asp Asn Ala Glu Ser Val Thr Leu Lys Gly Lys Ala Ile
435 440 445
Gly Ser Gln Gly Val Leu Ile Asp Leu Leu Thr Asn Glu Arg Phe Met
450 455 460
Pro Asn Asn Gly Glu Tyr Ala Ile Pro Leu Thr Gly Phe Gly Ala Arg
465 470 475 480
Phe Leu Lys Ile Asp Thr Pro Thr Ala Ala Gly Val Met Ala Gln Ser
485 490 495
Ala Ala Ser Val Ser Leu Val Gly Glu Gly Ile Met Ala Gln Cys Asp
500 505 510
Thr Pro Thr Val Glu Gly Thr Gly Pro Val Ala Glu Thr Leu Tyr Val
515 520 525
Val Gly Asp Phe Ala Asp Ala Gly Trp Lys Gln Lys Pro Gln Arg Ala
530 535 540
Tyr Gln Tyr Lys Gly Lys His Asn Gly Ser Asn Leu Tyr Gln Val Val
545 550 555 560
Val Asp Glu Lys Ala Gly Ala Tyr Lys Met Gln Tyr Ala Thr Lys Asp
565 570 575
Trp Ser Pro Gln Phe Thr Ala Asp Gly Met Ala Leu Lys Pro Gly Thr
580 585 590
Ala Lys Ser Leu Ile Ala Gly Gly Tyr Gly Lys Asp Thr Ala Val Thr
595 600 605
Leu Pro Glu Ser Gly Lys Tyr Val Trp Ser Leu Thr Phe Ser Asp Leu
610 615 620
Gly Glu Pro Glu Gln Ile
625 630
<210>203
<211>2601
<212>DNA
<213>环境的
<400>203
atgaagatga agtcccgggc gtggttgtta ggtagtgcag tggccatggc gttggcctct 60
tcggcagcca atgccggtgt catggttcac ctgttccaht ggaagtacaa tgacatcgcc 120
aacgagtgcg aaaaggtgct cggtcccaaa gggtatgaag cagtgcagat cacgccgcct 180
gctgaacacc tgcaaggctc ctcctggtgg gtggtctatc agcccgtcag ctacaagaac 240
ttcacttctc tgggcggtaa cgaggccgaa ctcaaaagca tgatcgcccg ttgcaaggcc 300
gccggggtca agatttacgc cgatgcggta ttcaaccagc tggctggtgg atcaggcgtc 360
ggtacaggtg gtagcagcta caatgccggc agcttcagct atccccaatt tggctacaac 420
gatttccatc acgctgggag cctcaccaac tatgccgacc gcaacaatgt gcaaaacggt 480
gccctgctgg ggctgccgga tctggatacc ggctctgcct atgtgcagga tcagctggct 540
acctatatga agaccctgag tggctggggt gtggcaggtt ttcgtcttga tgcagcaaag 600
catatgagcg ttgccgatct ctcggccatc gtcagcaagg cgggcaatcc ttttgtctac 660
tccgaggtga ttggtgccac gggtgaacca atccagccgg gcgaatatac cggcattggt 720
gccgtgaccg aatttaaata cggcaccgat ctggcctcca acttcaaggg gcagatcaag 780
aatctcaaga gcatgggcga gagctggggt ctgcttgcgt cgaacaaggc tgaagtcttt 840
gtggtcaacc atgaccgtga gcggggacat ggcggtggcg gtatgctgac ctacaaggat 900
ggtgccctct acaatctggc caacatcttc atgctggcct ggccctatgg cgcctatccc 960
caggtgatgt ccggctatga tttcggcacc aataccgata ttggtgggcc gagcgctacc 1020
ccttgttctt ccggctctag ctggaactgc gaacaccgct ggagcaacat cgccaacatg 1080
gtctcgttcc acaatgccgc ccaaggcacg tccatgacca actggtggga taatggtaat 1140
aaccagatcg cctttggtcg cggcgccaag gcctttgtgg tgatcaacaa tgaatcttcc 1200
actctgagca agagcctgca gacgggtctg ccagccgggg agtactgcaa cattctggcc 1260
ggtgatgccc tgtgcagcgg cagcaccatc aaggtggatg ccagcggtat ggccaccttc 1320
aacgtggcag ggatgaaggc ggcagcgatc catatcaatg ccaagcccga tagcaccagc 1380
agtggcagct caggctcttc ctctggctct tcttcctctg ccaccagtaa caagtttgcc 1440
agcatgaatc tgcggggcac caacaatggc tgggccagca ccgccatgac agtggatgcc 1500
aaccgtgtct ggtcggcgga tgtcaccttt accggggccg cggatgccaa tggtgcccag 1560
cgcttcaagt ttgatgtcta tggcaactgg acagagagct atggcgatac acaagccgat 1620
ggcattgccg acaaggggag cgccaaggac atctatttca atggtgtggg caagtatcgt 1680
gtctcgctca aggagagcga catgagctac accctgaccc agctctccag caatcaggca 1740
ccggtggcgg ccatcacccc caagacactc tccgtcaagc tgggtgactc agtggtgttc 1800
gatgcctccg gctccaccga tgatgtgggt gtcactggct acagctggtc taccggtggc 1860
agtgccaaga ccgaaactgt gctgtttgat gctctgggta ccaagaccat taccgtgaca 1920
gtggccgatg ccgatggctt gacctccaag gccagtgcca ccgtcaccgt caccgatggc 1980
agcgtggctt ataacagcaa ctttgccagc ctgaacttcc gtggcactcc caacagttgg 2040
ggcgcggcag ccatgacgct ggtggcagac aacacctggg aggcaacggt caacttcgat 2100
ggtcaggcca atcagcgctt caagttcgat atcaagggtg actggagcca gaactatggt 2160
gatagcaaca aggatggggt ggccgaacgt accggtgccg atatttacac cactgtgacc 2220
ggtcaatata aggtgcaatt taacgactcc actttgaagt acaccctgac caagctggcc 2280
gatagcagcg ccaccagcta tagcgcgaac tttgccagcc tctacctgcg tggcaccccg 2340
aacagctggg gcaccaccgc catgaagctg gtggccaata acagctggca ggccgaggtg 2400
accttcaccg gcaagggcga tgccactggt gcccaacgct tcaagttcga cgtcaagggt 2460
gactggagcc agaactacgg tgacagcaac atggacggga ctgccgaacg gactggtggc 2520
gatatcacca gtgccgtggt gggcacctat ctggtgacct ttaatgacag cacactgaaa 2580
tacaccctga ccgccaaata a 2601
<210>204
<211>866
<212>PRT
<213>环境的
<400>204
Met Lys Met Lys Ser Arg Ala Trp Leu Leu Gly Ser Ala Val Ala Met
1 5 10 15
Ala Leu Ala Ser Ser Ala Ala Asn Ala Gly Val Met Val His Leu Phe
20 25 30
Gln Trp Lys Tyr Asn Asp Ile Ala Asn Glu Cys Glu Lys Val Leu Gly
35 40 45
Pro Lys Gly Tyr Glu Ala Val Gln Ile Thr Pro Pro Ala Glu His Leu
50 55 60
Gln Gly Ser Ser Trp Trp Val Val Tyr Gln Pro Val Ser Tyr Lys Asn
65 70 75 80
Phe Thr Ser Leu Gly Gly Asn Glu Ala Glu Leu Lys Ser Met Ile Ala
85 90 95
Arg Cys Lys Ala Ala Gly Val Lys Ile Tyr Ala Asp Ala Val Phe Asn
100 105 110
Gln Leu Ala Gly Gly Ser Gly Val Gly Thr Gly Gly Ser Ser Tyr Asn
115 120 125
Ala Gly Ser Phe Ser Tyr Pro Gln Phe Gly Tyr Asn Asp Phe His His
130 135 140
Ala Gly Ser Leu Thr Asn Tyr Ala Asp Arg Asn Asn Val Gln Asn Gly
145 150 155 160
Ala Leu Leu Gly Leu Pro Asp Leu Asp Thr Gly Ser Ala Tyr Val Gln
165 170 175
Asp Gln Leu Ala Thr Tyr Met Lys Thr Leu Ser Gly Trp Gly Val Ala
180 185 190
Gly Phe Arg Leu Asp Ala Ala Lys His Met Ser Val Ala Asp Leu Ser
195 200 205
Ala Ile Val Ser Lys Ala Gly Asn Pro Phe Val Tyr Ser Glu Val Ile
210 215 220
Gly Ala Thr Gly Glu Pro Ile Gln Pro Gly Glu Tyr Thr Gly Ile Gly
225 230 235 240
Ala Val Thr Glu Phe Lys Tyr Gly Thr Asp Leu Ala Ser Asn Phe Lys
245 250 255
Gly Gln Ile Lys Asn Leu Lys Ser Met Gly Glu Ser Trp Gly Leu Leu
260 265 270
Ala Ser Asn Lys Ala Glu Val Phe Val Val Asn His Asp Arg Glu Arg
275 280 285
Gly His Gly Gly Gly Gly Met Leu Thr Tyr Lys Asp Gly Ala Leu Tyr
290 295 300
Asn Leu Ala Asn Ile Phe Met Leu Ala Trp Pro Tyr Gly Ala Tyr Pro
305 310 315 320
Gln Val Met Ser Gly Tyr Asp Phe Gly Thr Asn Thr Asp Ile Gly Gly
325 330 335
Pro Ser Ala Thr Pro Cys Ser Ser Gly Ser Ser Trp Asn Cys Glu His
340 345 350
Arg Trp Ser Asn Ile Ala Asn Met Val Ser Phe His Asn Ala Ala Gln
355 360 365
Gly Thr Ser Met Thr Asn Trp Trp Asp Asn Gly Asn Asn Gln Ile Ala
370 375 380
Phe Gly Arg Gly Ala Lys Ala Phe Val Val Ile Asn Asn Glu Ser Ser
385 390 395 400
Thr Leu Ser Lys Ser Leu Gln Thr Gly Leu Pro Ala Gly Glu Tyr Cys
405 410 415
Asn Ile Leu Ala Gly Asp Ala Leu Cys Ser Gly Ser Thr Ile Lys Val
420 425 430
Asp Ala Ser Gly Met Ala Thr Phe Asn Val Ala Gly Met Lys Ala Ala
435 440 445
Ala Ile His Ile Asn Ala Lys Pro Asp Ser Thr Ser Ser Gly Ser Ser
450 455 460
Gly Ser Ser Ser Gly Ser Ser Ser Ser Ala Thr Ser Asn Lys Phe Ala
465 470 475 480
Ser Met Asn Leu Arg Gly Thr Asn Asn Gly Trp Ala Ser Thr Ala Met
485 490 495
Thr Val Asp Ala Asn Arg Val Trp Ser Ala Asp Val Thr Phe Thr Gly
500 505 510
Ala Ala Asp Ala Asn Gly Ala Gln Arg Phe Lys Phe Asp Val Tyr Gly
515 520 525
Asn Trp Thr Glu Ser Tyr Gly Asp Thr Gln Ala Asp Gly Ile Ala Asp
530 535 540
Lys Gly Ser Ala Lys Asp Ile Tyr Phe Asn Gly Val Gly Lys Tyr Arg
545 550 555 560
Val Ser Leu Lys Glu Ser Asp Met Ser Tyr Thr Leu Thr Gln Leu Ser
565 570 575
Ser Asn Gln Ala Pro Val Ala Ala Ile Thr Pro Lys Thr Leu Ser Val
580 585 590
Lys Leu Gly Asp Ser Val Val Phe Asp Ala Ser Gly Ser Thr Asp Asp
595 600 605
Val Gly Val Thr Gly Tyr Ser Trp Ser Thr Gly Gly Ser Ala Lys Thr
610 615 620
Glu Thr Val Leu Phe Asp Ala Leu Gly Thr Lys Thr Ile Thr Val Thr
625 630 635 640
Val Ala Asp Ala Asp Gly Leu Thr Ser Lys Ala Ser Ala Thr Val Thr
645 650 655
Val Thr Asp Gly Ser Val Ala Tyr Asn Ser Asn Phe Ala Ser Leu Asn
660 665 670
Phe Arg Gly Thr Pro Asn Ser Trp Gly Ala Ala Ala Met Thr Leu Val
675 680 685
Ala Asp Asn Thr Trp Glu Ala Thr Val Asn Phe Asp Gly Gln Ala Asn
690 695 700
Gln Arg Phe Lys Phe Asp Ile Lys Gly Asp Trp Ser Gln Asn Tyr Gly
705 710 715 720
Asp Ser Asn Lys Asp Gly Val Ala Glu Arg Thr Gly Ala Asp Ile Tyr
725 730 735
Thr Thr Val Thr Gly Gln Tyr Lys Val Gln Phe Asn Asp Ser Thr Leu
740 745 750
Lys Tyr Thr Leu Thr Lys Leu Ala Asp Ser Ser Ala Thr Ser Tyr Ser
755 760 765
Ala Asn Phe Ala Ser Leu Tyr Leu Arg Gly Thr Pro Asn Ser Trp Gly
770 775 780
Thr Thr Ala Met Lys Leu Val Ala Asn Asn Ser Trp Gln Ala Glu Val
785 790 795 800
Thr Phe Thr Gly Lys Gly Asp Ala Thr Gly Ala Gln Arg Phe Lys Phe
805 810 815
Asp Val Lys Gly Asp Trp Ser Gln Asn Tyr Gly Asp Ser Asn Met Asp
820 825 830
Gly Thr Ala Glu Arg Thr Gly Gly Asp Ile Thr Ser Ala Val Val Gly
835 840 845
Thr Tyr Leu Val Thr Phe Asn Asp Ser Thr Leu Lys Tyr Thr Leu Thr
850 855 860
Ala Lys
865
<210>205
<211>1674
<212>DNA
<213>环境的
<400>205
atgtaccgcg taatacctat tattttgatt atgagtatga ttgtagcttg tgagtctcca 60
aagaaaaaaa caaccgaaac cgctcaacct tcaacaaatg ccgaaaaacc ctttgtttgg 120
gaggctgcca atgtatattt tttgttaact gaccgtttta acaacggtaa cccaaacaat 180
gacatcaatt ttaataggac taaagaatca ggaaa ctcc gcaattttat gggaggcgat 240
atcaagggca tcacccaaaa aataaatgag gggtatttta gtaaactagg cgttaatgcc 300
atctggctta ccccggttgt tgaacaaata catggcagtg ttgatgaagg taccggcaat 360
acctatgcct ttcatggcta ttgggccaaa gattggacaa acttagaccc aaattttggc 420
acaaaagaag accttgccga actggtggca actgcccatg caaaaggcat caggatactt 480
ttagatgtgg taataaacca caccggcccg gtaaccgacc aagacccggt ttggggagaa 540
gattgggtac gtacaggccc gcagtgtacc tatgataatt acaccaatac caccagttgc 600
acgctggtag ccaatttacc tgatatactt acagaaagta atgaaaatgt ggccttacca 660
acctttttgt tagataaatg gaaagccgaa ggcagattag agcaagaact aaaagaactt 720
gacgattttt tttcccgcac aggccaccca cgcgcacccc gcttttacat tattaaatgg 780
cttaccgatt acatccgaga atttggggta gatgggttta gggttgatac cgtaaaacat 840
accgaagaaa cggtttgggc cgagttgtat gatgaagccg taattgcttt tgccgaatat 900
aaaaaagcca acccagacaa ggtattggac gataatgaat tttatatggt aggcgaagtg 960
tacaactacg gtatttccgg cggaaggttc tatgatttcg gcgataaaaa ggtggactat 1020
tttgaccacg gatttaaaag cctcatcaat tttgaaatga aatatgatgc caattttacc 1080
tacgatacac tttttaggaa gtacgatacc cttttgcata ccaaacttaa aggcagaagt 1140
gtgctcaact acctctcatc tcacgacgat ggaagtccat ttgataaaat gcggcaaaaa 1200
ccatacgagt cggctacaaa attactgctc actccgggcg catcccaaat ttattacggt 1260
gacgaaaccg ccagaagcct taacatagaa ggcgcacagg gagatgctac gcttcgttcg 1320
tttatgaatt gggaagagct cgcagaagac cctgccaagc aaaaaatact tcagcattgg 1380
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ggtatcgttt cactttcttc tgaatttgat attgttttgt tagaacaaaa ataa 1674
<210>206
<211>557
<212>PRT
<213>环境的
<400>206
Met Tyr Arg Val Ile Pro Ile Ile Leu Ile Met Ser Met Ile Val Ala
1 5 10 15
Cys Glu Ser Pro Lys Lys Lys Thr Thr Glu Thr Ala Gln Pro Ser Thr
20 25 30
Asn Ala Glu Lys Pro Phe Val Trp Glu Ala Ala Asn Val Tyr Phe Leu
35 40 45
Leu Thr Asp Arg Phe Asn Asn Gly Asn Pro Asn Asn Asp Ile Asn Phe
50 55 60
Asn Arg Thr Lys Glu Ser Gly Lys Leu Arg Asn Phe Met Gly Gly Asp
65 70 75 80
Ile Lys Gly Ile Thr Gln Lys Ile Asn Glu Gly Tyr Phe Ser Lys Leu
85 90 95
Gly Val Asn Ala Ile Trp Leu Thr Pro Val Val Glu Gln Ile His Gly
100 105 110
Ser Val Asp Glu Gly Thr Gly Asn Thr Tyr Ala Phe His Gly Tyr Trp
115 120 125
Ala Lys Asp Trp Thr Asn Leu Asp Pro Asn Phe Gly Thr Lys Glu Asp
130 135 140
Leu Ala Glu Leu Val Ala Thr Ala His Ala Lys Gly Ile Arg Ile Leu
145 150 155 160
Leu Asp Val Val Ile Asn His Thr Gly Pro Val Thr Asp Gln Asp Pro
165 170 175
Val Trp Gly Glu Asp Trp Val Arg Thr Gly Pro Gln Cys Thr Tyr Asp
180 185 190
Asn Tyr Thr Asn Thr Thr Ser Cys Thr Leu Val Ala Asn Leu Pro Asp
195 200 205
Ile Leu Thr Glu Ser Asn Glu Asn Val Ala Leu Pro Thr Phe Leu Leu
210 215 220
Asp Lys Trp Lys Ala Glu Gly Arg Leu Glu Gln Glu Leu Lys Glu Leu
225 230 235 240
Asp Asp Phe Phe Ser Arg Thr Gly His Pro Arg Ala Pro Arg Phe Tyr
245 250 255
Ile Ile Lys Trp Leu Thr Asp Tyr Ile Arg Glu Phe Gly Val Asp Gly
260 265 270
Phe Arg Val Asp Thr Val Lys His Thr Glu Glu Thr Val Trp Ala Glu
275 280 285
Leu Tyr Asp Glu Ala Val Ile Ala Phe Ala Glu Tyr Lys Lys Ala Asn
290 295 300
Pro Asp Lys Val Leu Asp Asp Asn Glu Phe Tyr Met Val Gly Glu Val
305 310 315 320
Tyr Asn Tyr Gly Ile Ser Gly Gly Arg Phe Tyr Asp Phe Gly Asp Lys
325 330 335
Lys Val Asp Tyr Phe Asp His Gly Phe Lys Ser Leu Ile Asn Phe Glu
340 345 350
Met Lys Tyr Asp Ala Asn Phe Thr Tyr Asp Thr Leu Phe Arg Lys Tyr
355 360 365
Asp Thr Leu Leu His Thr Lys Leu Lys Gly Arg Ser Val Leu Asn Tyr
370 375 380
Leu Ser Ser His Asp Asp Gly Ser Pro Phe Asp Lys Met Arg Gln Lys
385 390 395 400
Pro Tyr Glu Ser Ala Thr Lys Leu Leu Leu Thr Pro Gly Ala Ser Gln
405 410 415
Ile Tyr Tyr Gly Asp Glu Thr Ala Arg Ser Leu Asn Ile Glu Gly Ala
420 425 430
Gln Gly Asp Ala Thr Leu Arg Ser Phe Met Asn Trp Glu Glu Leu Ala
435 440 445
Glu Asp Pro Ala Lys Gln Lys Ile Leu Gln His Trp Gln Lys Leu Gly
450 455 460
Ser Phe Arg Asn Asn His Pro Ala Val Gly Ala Gly Arg His Lys Thr
465 470 475 480
Leu Gly Lys Lys Pro Phe Tyr Thr Phe Ser Arg Val Tyr Gln Lys Asn
485 490 495
Gly Phe Ile Asp Lys Val Val Val Ala Leu Asp Ala Pro Lys Gly Gln
500 505 510
Lys Gln Ile Thr Val Asn Gly Val Phe Asp Asp Gly The Lys Leu Val
515 520 525
Asp Ala Try Ser Gly Lys Glu Thr Ser Val Lys Asn Gly Ile Val Ser
530 535 540
Leu Ser Ser Glu Phe Asp Ile Val Leu Leu Glu Gln Lys
545 550 555
<210>207
<211>1378
<212>DNA
<213>环境的
<400>207
ctgtcgactg agcctttcgt tttgggctcg agactgactc tcagcccacc ccgcagtagc 60
tccagacgga gtagccgtaa tagccgttgg ccgggtcgtg ggcaggggcc tcgaggtaca 120
cccacccgct tgagtccacc cacttgtcca cccagccgcc gaggttgccg gtgtactcgt 180
ggatgcacgc tcccgcgaac ttcggaacgt agacccacct tccggctttg cttgaggcga 240
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tgaggttctt gagcttatcc ttgttgagcc actcctcgta gtcgcggtag aatattgtcg 420
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tgtcgtggtt tgcaacgaag gttacggcct taaacgggtc gcggctgacg actgtgcccc 540
cgttcttgag ggcctcgacg agtgcgggaa tgttcttgtt gtcaaaggcc gcgtccatct 600
tgtagtagag cgggaagtcg aagaccttgg cgccgctcga gtaggcccag ttgaggagtg 660
catcaacgtt ggtgtcccag tactcgccaa cggcccagcc gccccaccag ttgagccagt 720
ccttgacgac ccacgctccg tggcccttca cgtagtcaaa gcgccaggca tcaacgccga 780
tgctccttag gtaggcggcg tagctctcat cgctcgccca gagccagtgc tggtcccagc 840
tcttctcgtg ggctatgtct gggaagcctc caaatgtgcc ctcgtcacag cacttgacct 900
cgttggggtg gaagtcgagg tagttggcag tatatttgcc cgaggccacc tttgagaagt 960
ccgtccaggt gtagtcccca acgaacgggt tccactcgag gtctccgcct gcgcggtggt 1020
ttatgacgat gtccgctatg acctttatgc cgtaggcatg ggccgtgttt atcatgttca 1080
cgagctcctg cttggagcca aagcgcgtct ctaccgttcc cttctggtcg tactcaccga 1140
ggtcaaagaa gtcgtagggg tcgtagccca tcgaataggc gccgcccatg cccttgctcg 1200
ccgggggaat ccaaatggcg gatattcccg cctcgtacca ctccggtatc ttgctcctga 1260
tggtgtccca ccagattcct ccacctggga cgtcccagta gaaggcctgc attataacgc 1320
cgccctcttc cagctcggag tacttggcca taagttacct cctactagta gattaaaa 1378
<210>208
<211>439
<212>PRT
<213>环境的
<400>208
Leu Ser Thr Glu Pro Phe Val Leu Gly Ser Arg Leu Thr Leu Ser Pro
1 5 10 15
Pro Arg Ser Ser Ser Arg Arg Ser Ser Arg Asn Ser Arg Trp Pro Gly
20 25 30
Arg Gly Gln Gly Pro Arg Gly Thr Pro Thr Arg Leu Ser Pro Pro Thr
35 40 45
Cys Pro Pro Ser Arg Arg Gly Cys Arg Cys Thr Arg Gly Cys Thr Leu
50 55 60
Pro Arg Thr Ser Glu Arg Arg Pro Thr Phe Arg Leu Cys Leu Arg Arg
65 70 75 80
Gly Cys Met Leu Ser Val Pro Ala Cys Phe Arg Ser Arg Phe Ser Arg
85 90 95
Ile Ser Ala Arg Arg Cys Arg Ser Lys Arg Arg Gln Cys Phe Leu Arg
100 105 110
Pro Gly Cys His Val Ser Arg Gly Ser Ala Tyr Pro Cys Ala Thr Pro
115 120 125
Arg Ser Arg Gly Arg Ile Leu Ser Ala Gly Pro Arg Arg Gly Thr Arg
130 135 140
Arg Leu Asp Thr Cys Ser Arg Leu Tyr Arg Cys Arg Gly Leu Gln Arg
145 150 155 160
Arg Leu Arg Pro Thr Gly Arg Gly Arg Leu Cys Pro Arg Ser Gly Pro
165 170 175
Arg Arg Val Arg Glu Cys Ser Cys Cys Gln Arg Pro Arg Pro Ser Cys
180 185 190
Ser Arg Ala Gly Ser Arg Arg Pro Trp Arg Arg Ser Ser Arg Pro Ser
195 200 205
Gly Val His Gln Arg Trp Cys Pro Ser Thr Arg Gln Arg Pro Ser Arg
210 215 220
Pro Thr Ser Ala Ser Pro Arg Pro Thr Leu Arg Gly Pro Ser Arg Ser
225 230 235 240
Gln Ser Ala Arg His Gln Arg Arg Cys Ser Leu Gly Arg Arg Arg Ser
245 250 255
Ser His Arg Ser Pro Arg Ala Ser Ala Gly Pro Ser Ser Ser Arg Gly
260 265 270
Leu Cys Leu Gly Ser Leu Gln Met Cys Pro Arg His Ser Thr Pro Arg
275 280 285
Trp Gly Gly Ser Arg Gly Ser Trp Gln Tyr Ile Cys Pro Arg Pro Pro
290 295 300
Leu Arg Ser Pro Ser Arg Cys Ser Pro Gln Arg Thr Gly Ser Thr Arg
305 310 315 320
Gly Leu Arg Leu Arg Gly Gly Leu Arg Cys Pro Leu Pro Leu Cys Arg
325 330 335
Arg His Gly Pro Cys Leu Ser Cys Ser Arg Ala Pro Ala Trp Ser Gln
340 345 350
Ser Ala Ser Leu Pro Phe Pro Ser Gly Arg Thr His Arg Gly Gln Arg
355 360 365
Ser Arg Arg Gly Arg Ser Pro Ser Asn Arg Arg Arg Pro Cys Pro Cys
370 375 380
Ser Pro Gly Glu Ser Lys Trp Arg Ile Phe Pro Pro Arg Thr Thr Pro
385 390 395 400
Val Ser Cys Ser Trp Cys Pro Thr Arg Phe Leu His Leu Gly Arg Pro
405 410 415
Ser Arg Arg Pro Ala Leu Arg Arg Pro Leu Pro Ala Arg Ser Thr Trp
420 425 430
Pro Val Thr Ser Tyr Ile Lys
435
<210>209
<211>1416
<212>DNA
<213>环境的
<400>209
atgattcagc ccatgcactc tcgggaacag gcctgccgtc tcattccggc actgatcatg 60
acatttgcac tggcactgcc gttgcaaatt cgtgccgatg tcaccctgca tgctttcaac 120
tggagctatg ccgatgtcgc tgatcgggcc gttgacatcg ctgcagcagg gtacagtgcc 180
gtgctggtgg ccccgccact tcgatccgaa ggcacggcct ggtgggcgcg ataccagccc 240
caggatctcc gccttatcga ccatccgctg ggcaatacac atgacttcgt caacatgatc 300
gatgctctcg atgatgtggg tgtgggcgtg tacgccgaca tcgtgctcaa ccacatggcc 360
aatgaggctg cacaaaggcc tgacctgaac taccctggtc aggcagtgct tgacgaatat 420
gcttccgatc ccggtcattt cgagggcttg aggctgttcg gtaatctgag cttcaatttc 480
ctgtcggaac atgatttcgg acccgcccag tgcattcagg attacagcga tgtgtttcag 540
gtccagaact ggcggctgtg cggaccgccg ccggacccgg gcctgcccga cctggtcgcc 600
aatgactggg tgatctctca acagcgccag tatctggaag ccatcaaggc gctgggtgtg 660
gctggcatgc gcatcgacgc ggtcaagcat atgcccatga gccatatcaa tgccgttctc 720
acccccgaga tccggtcggg cttgcatgtg tttggcgaag tcatcacctc cggtggggct 780
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tatgactttc cattgtttga aaccattcgc cgtgctttcg gcttcggtgg cagcatgagt 900
gaactggtcg atcctgctgc ctacggtcag gccctgccac cggaccgcgc catcaccttc 960
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gatgaatcac tggcctacgc ctacattctg ggccgcgatg gcggtgtccc gcttctgtat 1080
tccgacaaca atgaaagcgg cgatggccgc tggatcgatg cctggcaacg tccggatctg 1140
gttgcaatgg tcggcttcca caatgcagtc cacggtcagg acatggccgt gctttcacat 1200
gacgactgcc acctgctgtt tcggcgcggc agcctcggga ttgtcggcat caacaagtgc 1260
ggccatgcac tcagctcctg ggtcaacatg aaccagagcg tactgtggtg gtacgcggac 1320
tacacagacg tgctcgacag caacagcgtt gtcaacatcc agtcatcctg gcacgagttc 1380
atccttcccg cccgccaggc acgcctgtgg ttgcga 1416
<210>210
<211>472
<212>PRT
<213>环境的
<400>210
Met Ile Gln Pro Met His Ser Arg Glu Gln Ala Cys Arg Leu Ile Pro
1 5 10 15
Ala Leu Ile Met Thr Phe Ala Leu Ala Leu Pro Leu Gln Ile Arg Ala
20 25 30
Asp Val Thr Leu His Ala Phe Asn Trp Ser Tyr Ala Asp Val Ala Asp
35 40 45
Arg Ala Val Asp Ile Ala Ala Ala Gly Tyr Ser Ala Val Leu Val Ala
50 55 60
Pro Pro Leu Arg Ser Glu Gly Thr Ala Trp Trp Ala Arg Tyr Gln Pro
65 70 75 80
Gln Asp Leu Arg Leu Ile Asp His Pro Leu Gly Asn Thr His Asp Phe
85 90 95
Val Asn Met Ile Asp Ala Leu Asp Asp Val Gly Val Gly Val Tyr Ala
100 105 110
Asp Ile Val Leu Asn His Met Ala Asn Glu Ala Ala Gln Arg Pro Asp
115 120 125
Leu Asn Tyr Pro Gly Gln Ala Val Leu Asp Glu Tyr Ala Ser Asp Pro
130 135 140
Gly His Phe Glu Gly Leu Arg Leu Phe Gly Asn Leu Ser Phe Asn Phe
145 150 155 160
Leu Ser Glu His Asp Phe Gly Pro Ala Gln Cys Ile Gln Asp Tyr Ser
165 170 175
Asp Val Phe Gln Val Gln Asn Trp Arg Leu Cys Gly Pro Pro Pro Asp
180 185 190
Pro Gly Leu Pro Asp Leu Val Ala Asn Asp Trp Val Ile Ser Gln Gln
195 200 205
Arg Gln Tyr Leu Glu Ala Ile Lys Ala Leu Gly Val Ala Gly Met Arg
210 215 220
Ile Asp Ala Val Lys His Met Pro Met Ser His Ile Asn Ala Val Leu
225 230 235 240
Thr Pro Glu Ile Arg Ser Gly Leu His Val Phe Gly Glu Val Ile Thr
245 250 255
Ser Gly Gly Ala Gly Asp Thr Ser Tyr Asp Arg Phe Leu Ala Pro Tyr
260 265 270
Leu Ala Gln Ser Asp His Gly Ala Tyr Asp Phe Pro Leu Phe Glu Thr
275 280 285
Ile Arg Arg Ala Phe Gly Phe Gly Gly Ser Met Ser Glu Leu Val Asp
290 295 300
Pro Ala Ala Tyr Gly Gln Ala Leu Pro Pro Asp Arg Ala Ile Thr Phe
305 310 315 320
Val Ile Thr His Asp Ile Pro Asn Asn Asp Gly Phe Arg Tyr Gln Ile
325 330 335
Leu Asp Pro Val Asp Glu Ser Leu Ala Tyr Ala Tyr Ile Leu Gly Arg
340 345 350
Asp Gly Gly Val Pro Leu Leu Tyr Ser Asp Asn Asn Glu Ser Gly Asp
355 360 365
Gly Arg Trp Ile Asp Ala Trp Gln Arg Pro Asp Leu Val Ala Met Val
370 375 380
Gly Phe His Asn Ala Val His Gly Gln Asp Met Ala Val Leu Ser His
385 390 395 400
Asp Asp Cys His Leu Leu Phe Arg Arg Gly Ser Leu Gly Ile Val Gly
405 410 415
Ile Asn Lys Cys Gly His Ala Leu Ser Ser Trp Val Asn Met Asn Gln
420 425 430
Ser Val Leu Trp Trp Tyr Ala Asp Tyr Thr Asp Val Leu Asp Ser Asn
435 440 445
Ser Val Val Asn Ile Gln Ser Ser Trp His Glu Phe Ile Leu Pro Ala
450 455 460
Arg Gln Ala Arg Leu Trp Leu Arg
465 470
<210>211
<211>1491
<212>DNA
<213>环境的
<400>211
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catcgccagg cgctgttgtt catcgtgacg cggtgcctgt gcctgaaatc caggcagacc 180
cataaaaaca acaacaaacc gataacaaac gacccaagcc ttctaagagg agaaaacggg 240
atggctttta aactacgcaa aaaggcgctc gttggcctgt tcacggccgg cgcaatggta 300
tatgccggtg cagcggcgag tggtgaaatc attctgcagg gcttccactg gcactccaag 360
tggggcggca acaatcaggg ttggtggcag gtgatggaag gtcaggccaa caccatcgcc 420
aacgccggct ttacgcacgt gtggttcccg ccggtccata actcggccga tgccgagggt 480
tacctacccc gcgagctgaa caacctcaac tccagctatg gctccgaagc acagctgcgc 540
agcgccatcc aggcactgaa caatcgcggc gtgcatgcga ttgccgatgt ggtcatgaac 600
caccgggtgg gctgctctgg ctgggcggat ttctgtaacc cggactggcc gacctggtac 660
atcgtcgcca atgattcctg gcccggtggc ccgaaaagcc agaactggga cacgggtgag 720
acgtaccacg ccgcccgtga cctcgatcac gccaatccgc aggtgcgcaa cgatatctcg 780
cactacctga acagccgcct caaggacgtc ggcttctccg gctggcgctg ggactatgcc 840
aagggtttct ggcccggcta tgtcggcgag tacaactgga acaccaaccc gaacttctgt 900
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gtggactggg ttgatgctac cggtggcagt tgtcacgtct tcgacttcac caccaagggg 1020
ctgacgaact atgcgctgca gcatggccag tactggcgcc tgcagggtga taatggtggc 1080
ccggctggcg gcatcggctg gtggccgcaa cgcatggtga ccttcgtcga caaccatgac 1140
acgggcccga gcaatcactg tggtgacggc cagaacctct ggcccgtgcc ctgtgacaag 1200
gtcatggagg cgtatgccta catcctgacc catccgggcg tgccgtcggt gtactggacg 1260
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cagggcgtgc actccggttc cgacgtctgg atcgccgagg cccgtcacgg cctgtacgcc 1380
gcctatatca acggtaatgt ggcgatgaag atgggctggg ataactggag cccgggctgg 1440
ggctggtcgc tggcggcctc cggtaacaac tgggccgtct ggacacgctg a 1491
<210>212
<211>496
<212>PRT
<213>环境的
<400>212
Val Phe Arg Ser Asp Thr Val Ser Arg Thr Cys Met Tyr Gly Ala Leu
1 5 10 15
Arg Asn Ala Tyr Gln Pro Asp Arg Val Phe Thr Gly Val Thr Val Arg
20 25 30
Thr Cys Asn Leu Lys Lys His Ala His Arg Gln Ala Leu Leu Phe Ile
35 40 45
Val Thr Arg Cys Leu Cys Leu Lys Ser Arg Gln Thr His Lys Asn Asn
50 55 60
Asn Lys Pro Ile Thr Asn Asp Pro Ser Leu Leu Arg Gly Glu Asn Gly
65 70 75 80
Met Ala Phe Lys Leu Arg Lys Lys Ala Leu Val Gly Leu Phe Thr Ala
85 90 95
Gly Ala Met Val Tyr Ala Gly Ala Ala Ala Ser Gly Glu Ile Ile Leu
100 105 110
Gln Gly Phe His Trp His Ser Lys Trp Gly Gly Asn Asn Gln Gly Trp
115 120 125
Trp Gln Val Met Glu Gly Gln Ala Asn Thr Ile Ala Asn Ala Gly Phe
130 135 140
Thr His Val Trp Phe Pro Pro Val His Asn Ser Ala Asp Ala Glu Gly
145 150 155 160
Tyr Leu Pro Arg Glu Leu Asn Asn Leu Asn Ser Ser Tyr Gly Ser Glu
165 170 175
Ala Gln Leu Arg Ser Ala Ile Gln Ala Leu Asn Asn Arg Gly Val His
180 185 190
Ala Ile Ala Asp Val Val Met Asn His Arg Val Gly Cys Ser Gly Trp
195 200 205
Ala Asp Phe Cys Asn Pro Asp Trp Pro Thr Trp Tyr Ile Val Ala Asn
210 215 220
Asp Ser Trp Pro Gly Gly Pro Lys Ser Gln Asn Trp Asp Thr Gly Glu
225 230 235 240
Thr Tyr His Ala Ala Arg Asp Leu Asp His Ala Asn Pro Gln Val Arg
245 250 255
Asn Asp Ile Ser His Tyr Leu Asn Ser Arg Leu Lys Asp Val Gly Phe
260 265 270
Ser Gly Trp Arg Trp Asp Tyr Ala Lys Gly Phe Trp Pro Gly Tyr Val
275 280 285
Gly Glu Tyr Asn Trp Asn Thr Asn Pro Asn Phe Cys Val Gly Glu Val
290 295 300
Trp Asp Asp Leu Asp Pro Asn Asn Pro Asn Pro His Arg Gln Gln Leu
305 310 315 320
Val Asp Trp Val Asp Ala Thr Gly Gly Ser Cys His Val Phe Asp Phe
325 330 335
Thr Thr Lys Gly Leu Thr Asn Tyr Ala Leu Gln His Gly Gln Tyr Trp
340 345 350
Arg Leu Gln Gly Asp Asn Gly Gly Pro Ala Gly Gly Ile Gly Trp Trp
355 360 365
Pro Gln Arg Met Val Thr Phe Val Asp Asn His Asp Thr Gly Pro Ser
370 375 380
Asn His Cys Gly Asp Gly Gln Asn Leu Trp Pro Val Pro Cys Asp Lys
385 390 395 400
Val Met Glu Ala Tyr Ala Tyr Ile Leu Thr His Pro Gly Val Pro Ser
405 410 415
Val Tyr Trp Thr His Phe Phe Asn Trp Asn Leu Gly Ser Glu Ile Ser
420 425 430
Gln Leu Met Gln Ile Arg Lys Asn Gln Gly Val His Ser Gly Ser Asp
435 440 445
Val Trp Ile Ala Glu Ala Arg His Gly Leu Tyr Ala Ala Tyr Ile Asn
450 455 460
Gly Asn Val Ala Met Lys Met Gly Trp Asp Asn Trp Ser Pro Gly Trp
465 470 475 480
Gly Trp Ser Leu Ala Ala Ser Gly Asn Asn Trp Ala Val Trp Thr Arg
485 490 495
<210>213
<211>23
<212>PRT
<213>环境的
<400>213
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1 5 10 15
Gly Gln Pro Ala Lys Ala Ala
20
<210>214
<211>23
<212>PRT
<213>细菌的
<400>214
Val Leu Thr Phe His Arg Ile Ile Arg Lys Gly Trp Met Phe Leu Leu
1 5 10 15
Ala Phe Leu Leu Thr Ala Ser
20
<210>215
<211>33
<212>PRT
<213>细菌的
<400>215
Met Lys Ser Phe Ala Phe Met Pro Ile Leu Phe Tyr Ala Asn Asp Phe
1 5 10 15
Ile Ser Glu Arg Glu Gly Gly Gly Lys Met Gly Lys Asn Met Arg Arg
20 25 30
Arg
<210>216
<211>31
<212>PRT
<213>细菌的
<400>216
Met Arg Lys Lys Met Ser His Ser Arg Phe Thr Phe Leu Leu Ile Leu
1 5 10 15
Ala Leu Phe Ile Phe Phe Ser Gly Cys Ile Ser Glu Val Lys Ser
20 25 30
<210>217
<211>30
<212>PRT
<213>细菌的
<400>217
Met Tyr Thr Leu Phe Ile Arg Ser Phe Tyr Asp Thr Asn Asn Asp Gly
1 5 10 15
Val Gly Asp Tyr Asn Gly Val Ala Gln Lys Val Asp Tyr Leu
20 25 30
<210>218
<211>22
<212>PRT
<213>环境的
<400>218
Val Leu Thr Phe His Arg Ile Ile Arg Lys Gly Trp Met Phe Leu Leu
1 5 10 15
Ala Phe Leu Leu Thr Ala
20
<210>219
<211>33
<212>PRT
<213>环境的
<400>219
Met Ser Leu Phe Lys Lys Ile Phe Pro Trp Ile Val Ser Leu Leu Leu
1 5 10 15
Leu Phe Ser Phe Ile Ala Pro Phe Ser Ile Gln Thr Glu Lys Val Arg
20 25 30
Ala
<210>220
<211>25
<212>PRT
<213>环境的
<400>220
Met Ala Arg Lys Thr Leu Ala Ile Phe Phe Val Leu Leu Val Leu Leu
1 5 10 15
Ser Leu Ser Ala Val Pro Ala Lys Ala
20 25
<210>221
<211>35
<212>PRT
<213>环境的
<400>221
Met Pro Ala Phe Lys Ser Lys Val Met His Met Lys Leu Lys Tyr Leu
1 5 10 15
Ala Leu Val Leu Leu Ala Val Ala Ser Ile Gly Leu Leu Ser Thr Pro
20 25 30
Val Gly Ala
35
<210>222
<211>28
<212>PRT
<213>环境的
<400>222
Met Lys Gln Gln Lys Arg Leu Tyr Ala Arg Leu Leu Thr Leu Leu Phe
1 5 10 15
Ala Leu Ile Phe Leu Leu Pro His Ser Ala Ala Ala
20 25
<210>223
<211>21
<212>PRT
<213>环境的
<400>223
Met Arg Val Phe Leu Val Val Pro Lys Leu Ser Arg Pro Phe Gln Ala
1 5 10 15
Glu Ser Gln Gln Gln
20
<210>224
<211>30
<212>PRT
<213>细菌的
<400>224
Met Gln Thr Phe Ala Phe Leu Phe Tyr Ser Lys Lys Gly Trp Val Cys
1 5 10 15
Met Asn Tyr Leu Lys Lys Val Trp Leu Tyr Tyr Ala Ile Val
20 25 30
<210>225
<211>35
<212>PRT
<213>环境的
<400>225
Met Pro Gln Ala Ile Arg Thr Phe Ser Arg Trp Thr Leu Phe Gly Leu
1 5 10 15
Ile Gly Val Phe Leu Leu Gly Leu Val Phe Ser Val Pro Pro Arg Ala
20 25 30
Ile Gln Ala
35
<210>226
<211>28
<212>PRT
<213>环境的
<400>226
Val Val His Met Lys Leu Lys Tyr Leu Ala Leu Val Leu Leu Ala Val
1 5 10 15
Ala Ser Ile Gly Leu Leu Ser Thr Pro Val Gly Ala
20 25
<210>227
<211>30
<212>PRT
<213>环境的
<400>227
Val Cys Met Asn Tyr Leu Lys Lys Val Trp Leu Tyr Tyr Ala Ile Val
1 5 10 15
Ala Thr Leu Ile Ile Tyr Phe Leu Thr Pro Phe Ser Thr Ala
20 25 30
<210>228
<211>30
<212>PRT
<213>环境的
<400>228
Met Pro Gln Leu Tyr Pro Leu Pro Pro Arg Trp Arg Arg Ala Ala Arg
1 5 10 15
Gln Gly Leu Ala Ala Leu Thr Leu Ala Thr Thr Ala Leu Gly
20 25 30
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<211>30
<212>PRT
<213>环境的
<400>229
Met Asn Asn Val Lys Lys Val Trp Leu Tyr Tyr Ser Ile Ile Ala Thr
1 5 10 15
Leu Val Ile Ser Phe Phe Thr Pro Phe Ser Thr Ala Gln Ala
20 25 30
<210>230
<211>28
<212>PRT
<213>环境的
<400>230
Val Gly Arg Ala Gly Leu Ala His His Ser Asn Thr Ser Ala Lys Gly
1 5 10 15
Thr Tyr Gly Ser Pro Leu Glu Leu Arg Pro Asp Arg
20 25
<210>231
<211>23
<212>PRT
<213>环境的
<400>231
Met Lys Thr Phe Asn Leu Lys Pro Thr Leu Leu Pro Leu Thr Leu Leu
1 5 10 15
Leu Ser Ser Pro Val Leu Ala
20
<210>232
<211>23
<212>PRT
<213>环境的
<400>232
Met Lys Pro Ile Asn Thr Leu Leu Ile Ser Ala Leu Ala Val Cys Ser
1 5 10 15
Phe Ser Ser Ala Thr Tyr Ala
20
<210>233
<211>30
<212>PRT
<213>环境的
<400>233
Met Pro Lys Ser Thr Phe Thr Lys Ser Ile Thr Lys Ser Leu Leu Ala
1 5 10 15
Thr Ser Val Val Val Ser Leu Leu Pro Ala Tyr Ala Gln Ala
20 25 30
<210>234
<211>27
<212>PRT
<213>环境的
<400>234
Met Leu Lys Arg Ile Thr Val Val Cys Leu Leu Phe Ile Leu Leu Phe
1 5 10 15
Pro Asn Ile Tyr Gly Arg Asn Lys Ala Glu Ala
20 25
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<212>PRT
<213>环境的
<400>235
Met Ser Leu Asn Asn Phe Lys Val Lys Leu Leu Ser Phe Ala Val Ser
1 5 10 15
Ser Ala Val Leu Ser Leu Ala Pro Asn Leu Ala Asn Ala
20 25
<210>236
<211>28
<212>PRT
<213>环境的
<400>236
Met Ile Leu Ser Asn Phe Lys Val Lys Leu Leu Ser Phe Ala Val Ser
1 5 10 15
Ser Ala Val Leu Thr Leu Ala AlaAsn Val Ala Asn
20 25
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<211>27
<212>PRT
<213>环境的
<400>237
Met Leu Lys Arg Ile Thr Val Val Cys Leu Leu Phe Ile Leu Leu Phe
1 5 10 15
Pro Asn Ile Tyr Glu Gly Asn Lys Ala Glu Ala
20 25
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<212>PRT
<213>环境的
<400>238
Met Pro Ser Ile Asn Ala Ser Asp Cys Lys Lys Lys Gly Asp Arg Ser
1 5 10 15
Met Lys Arg Lys Lys Trp Thr Ala Leu Ala
20 25
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<211>33
<212>PRT
<213>环境的
<400>239
Val Ser Arg Met Phe Ala Lys Arg Phe Lys Thr Ser Leu Leu Pro Leu
1 5 10 15
Phe Ala Gly Phe Leu Leu Leu Phe His Leu Val LeuAla Gly Pro Thr
20 25 30
Ala
<210>240
<211>25
<212>PRT
<213>环境的
<400>240
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1 5 10 15
Trp Thr Ala Leu Ala Leu Thr Leu Pro
20 25
<210>241
<211>25
<212>PRT
<213>环境的
<400>241
Met Gln Lys Lys Gly Asp Glu Thr Met Lys Gly Lys Lys Trp Thr Ala
1 5 10 15
Leu Ala Leu Thr Leu Pro Leu Ala Ala
20 25
<210>242
<211>36
<212>PRT
<213>细菌的
<400>242
Val Asp Pro Lys Asn Cys Ser Gln Phe Met Gln Thr Ile Ala Lys Lys
1 5 10 15
Gly Asp Glu Thr Met Lys Gly Lys Lys Trp Thr Ala Leu Ala Leu Thr
20 25 30
Leu Pro Leu Ala
35
<210>243
<211>36
<212>PRT
<213>环境的
<400>243
Met Gln Thr Ile Ala Lys Lys Gly Asp Glu Thr Met Lys Gly Lys Lys
1 5 10 15
Trp Thr Ala Leu Ala Leu Thr Leu Pro Leu Ala Ala Ser Leu Ser Thr
20 25 30
Gly Val His Ala
35
<210>244
<211>23
<212>PRT
<213>环境的
<400>244
Met Lys Thr Phe Lys Leu Lys Ahr Thr Phe Leu Pro Leu Thr Leu Leu
1 5 10 15
Leu Ser Ala Pro Ala Phe Ala
20
<210>245
<211>25
<212>PRT
<213>环境的
<400>245
Met Gln Thr Ile Ala Lys Lys Gly Asp Glu Thr Met Lys Gly Lys Lys
1 5 10 15
Trp Thr Ala Leu Ala Leu Thr Leu Pro
20 25
<210>246
<211>22
<212>PRT
<213>环境的
<400>246
Met Lys Asn Ile Ile Arg Leu Cys Ala Ala Ser Ala Ile Leu Thr Val
1 5 10 15
Ser His Ala Ser Tyr Ala
20
<210>247
<211>23
<212>PRT
<213>环境的
<400>247
Met Lys Thr Phe Lys Leu Lys Arg Thr Phe Leu Pro Leu Thr Leu Leu
1 5 10 15
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20
<210>248
<211>23
<212>PRT
<213>环境的
<400>248
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1 5 10 15
Leu Ser Ala Pro Ala Phe Ala
20
<210>249
<211>25
<212>PRT
<213>环境的
<400>249
Met Lys Leu Met Lys Gly Lys Lys Trp Thr Ala Leu Ala Leu Thr Leu
1 5 10 15
Pro Leu Ala Ala Ser Leu Ser Thr Gly
20 25
<210>250
<211>36
<212>PRT
<213>环境的
<400>250
Met Gln Thr Ile Ala Lys Lys Gly Asp Glu Thr Met Lys Gly Lys Lys
1 5 10 15
Trp ThrAla Leu Ala Leu Thr Leu Pro Leu Ala Ala Ser Leu Ser Thr
20 25 30
Gly Val His Ala
35
<210>251
<211>25
<212>PRT
<213>环境的
<400>251
Met Gln Thr Ile Ala Lys Lys Gly Asp Glu Thr Met Lys Gly Lys Lys
1 5 10 15
Trp Thr Ala Leu Ala Leu Thr Leu Pro
20 25
<210>252
<211>25
<212>PRT
<213>环境的
<400>252
Met Lys Phe Lys Lys Ser Leu SerAla Gly Leu Leu Leu Phe Gly Gly
1 5 10 15
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20 25
<210>253
<211>23
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<213>环境的
<400>253
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1 5 10 15
Leu Ser Ser Thr Ala Asn Ala
20
<210>254
<211>23
<212>PRT
<213>环境的
<400>254
Val Ser Leu Thr Lys Lys Ala Gln Tyr Glu Pro Asn Thr Ala Pro Arg
1 5 10 15
Leu Ser Thr Ser Leu Gln Ser
20
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<211>30
<212>PRT
<213>环境的
<400>255
Met Thr Ala Lys Ala Asp Asp Leu Arg Ile Tyr Gln Ile Met Val Glu
1 5 10 15
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20 25 30
<210>256
<211>25
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<213>环境的
<400>256
Met Lys Met Lys Ser Arg Ala Trp Leu Leu Gly Ser Ala Val Ala Met
1 5 10 15
Ala Leu Ala Ser Ser Ala Ala Asn Ala
20 25
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<211>16
<212>PRT
<213>环境的
<400>257
Met Tyr Arg Val Ile Pro Ile Ile Leu Ile Met Ser Met Ile Val Ala
1 5 10 15
<210>258
<211>47
<212>DNA
<213>人工序列
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<223>引物
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gaacactagt aggaggtaac ttatggcaaa gtattccgag ctcgaag 47
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<211>39
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<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>259
gaacggtctc attccgccag ccagcaaggg gatgagcgg 39
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<211>33
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
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<211>38
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<220>
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<211>33
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<213>人工序列
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<220>
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<211>38
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<220>
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<212>DNA
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<220>
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<211>33
<212>DNA
<213>人工序列
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tcgagactga ctctcaccca acaccgcaat agc 33
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gaacactagt aggaggtaac ttatggccaa gtacctggag ctcgaagagg 50
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gaacggtctc attcccccgg cgagcaaggg c 31
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gaaccgtctc aaaacaccgc ccacgcctac gg 32
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<211>29
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<220>
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<220>
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<211>34
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<220>
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gaacggtctc aacaagatgg acgcggcctt tgac 34
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<211>35
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
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gaaccgtctc acgatataat ttggaacaag taccc 35
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<211>31
<212>DNA
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<220>
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gaaccgtctc agaagcaccg acatagtcta c 31
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<211>30
<212>DNA
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<220>
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gaaccgtctc aaaggtgggt ctacgttccg 30
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gaacgtctca ggaatccata ttgcggagat tccggc 36
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gaaccgtctc agaggtagtt ggccgtgtac ttg 33
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gaacgtctca gccatgcgtc aacgccgatg 30
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<211>31
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gaacgtctca ttgtagtaga gcgggaagtc g 31
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<211>33
<212>DNA
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gaacggtctc aatcggtgtc gtggtttgca acg 33
<210>291
<211>34
<212>DNA
<213>人工序列
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gaaccgtctc acttccaccg gcgaggtggt cgtg 34
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<211>32
<212>DNA
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<220>
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<400>292
gaaccgtctc accttccggc cttgctcgag cc 32
<210>293
<211>35
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
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tcgagactga ctctcagccc accccgcagt agctc 35
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<211>50
<212>DNA
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<220>
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<400>294
gaacactagt aggaggtaac ttatggccaa gtactccgag ctggaagagg 50
<210>295
<211>30
<212>DNA
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<223>引物
<400>295
gaacggtctc attcctcccg cgagcaaggg 30
<210>296
<211>31
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<400>296
gaaccgtctc aaaacaccgc ccacgcctat g 31
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<211>33
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<400>297
gaacgtctca cctcgacttc cacccgaacg agc 33
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<211>31
<212>DNA
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gaacgtctca ggcgcttcga ctacgtcaag g 31
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<211>32
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gaacggtctc aacaagatgg acgaggcctt cg 32
<210>300
<211>30
<212>DNA
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<400>300
gaaccgtctc acgatataat ctggaacaag 30
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<211>35
<212>DNA
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gaaccgtctc agaagcactg acatcgttta ctacg 35
<210>302
<211>30
<212>DNA
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<220>
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<400>302
gaaccgtctc aaaggtgggt ttacgttccg 30
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<211>30
<212>DNA
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<220>
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<400>303
gaacgtctca ggaatccata tcgccgaaat 30
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<211>30
<212>DNA
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gaacggtctc agtttatcat gtttatgagc 30
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<400>305
gaaccgtctc agaggtagtt ggccgtgtat ttac 34
<210>306
<211>30
<212>DNA
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<400>306
gaacgtctca cgccaggcat cgatgccgat 30
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<211>34
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<400>307
gaacgtctca ttgtagtaga gggcgaagtc aaag 34
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<211>36
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<400>308
gaacggtctc aatcggtatc gtggttggct acaaac 36
<210>309
<211>34
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>309
gaaccgtctc acttcctccg gcgaggttgt catg 34
<210>310
<211>32
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>310
gaaccgtctc accttccggc tttgcttgag gc 32
<210>311
<211>36
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>311
tcgagactga ctctcaccca acaccgcagt agctcc 36
<210>312
<211>38
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物
<400>312
cacacagcag caaccaacct cgagactgac tctcascc 38
<210>313
<211>461
<212>PRT
<213>热球菌(Pyrococcus sp.)
<400>313
Met Lys Lys Phe Val Ala Leu Leu Ile Thr Met Phe Phe Val Val Ser
1 5 10 15
Met Ala Ala Val Ala Gln Pro Ala Ser Ala Ala Lys Tyr Ser Glu Leu
20 25 30
Glu Glu Gly Gly Val Ile Met Gln Ala Phe Tyr Trp Asp Val Pro Ala
35 40 45
Gly Gly Ile Trp Trp Asp Thr Ile Arg Ser Lys Ile Pro Glu Trp Tyr
50 55 60
Glu Ala Gly Ile Ser Ala Ile Trp Ile Pro Pro Ala Ser Lys Gly Met
65 70 75 80
Gly Gly Ala Tyr Ser Met Gly Tyr Asp Pro Tyr Asp Phe Phe Asp Leu
85 90 95
Gly Glu Tyr Asn Gln Lys Gly Thr Val Glu Thr Arg Phe Gly Ser Lys
100 105 110
Gln Glu Leu Ile Asn Met Ile Asn Thr Ala His Ala Tyr Gly Ile Lys
115 120 125
Val Ile Ala Asp Ile Val Ile Asn His Arg Ala Gly Gly Asp Leu Glu
130 135 140
Trp Asn Pro Phe Val Gly Asp Tyr Thr Trp Thr Asp Phe Ser Lys Val
145 150 155 160
Ala Ser Gly Lys Tyr Thr Ala Asn Tyr Leu Asp Phe His Pro Asn Glu
165 170 175
Val Lys Cys Cys Asp Glu Gly Thr Phe Gly Gly Phe Pro Asp Ile Ala
180 185 190
His Glu Lys Glu Trp Asp Gln His Trp Leu Trp Ala Ser Asp Glu Ser
195 200 205
Tyr Ala Ala Tyr Leu Arg Ser Ile Gly Val Asp Ala Trp Arg Phe Asp
210 215 220
Tyr Val Lys Gly Tyr Gly Ala Trp Val Val Lys Asp Trp Leu Asn Trp
225 230 235 240
Trp Gly Gly Trp Ala Val Gly Glu Tyr Trp Asp Thr Asn Val Asp Ala
245 250 255
Leu Leu Asn Trp Ala Tyr Ser Ser Gly Ala Lys Val Phe Asp Phe Pro
260 265 270
Leu Tyr Tyr Lys Met Asp Glu Ala Phe Asp Asn Thr Asn Ile Pro Ala
275 280 285
Leu Val Asp Ala Leu Gln Asn Gly Gly Thr Val Val Ser Arg Asp Pro
290 295 300
Phe Lys Ala Val Thr Phe Val Ala Asn His Asp Thr Asp Ile Ile Trp
305 310 315 320
Asn Lys Tyr Pro Ala Tyr Ala Phe Ile Leu Thr Tyr Glu Gly Gln Pro
325 330 335
Val Ile Phe Tyr Arg Asp Tyr Glu Glu Trp Leu Asn Lys Asp Lys Leu
340 345 350
Asn Asn Leu Ile Trp Ile His Asp His Leu Ala Gly Gly Ser Thr Ser
355 360 365
Ile Val Tyr Tyr Asp Ser Asp Glu Leu Ile Phe Val Arg Asn Gly Asp
370 375 380
Ser Lys Arg Pro Gly Leu Ile Thr Tyr Ile Asn Leu Gly Ser Ser Lys
385 390 395 400
Val Gly Arg Trp Val Tyr Val Pro Lys Phe Ala Gly Ala Cys Ile His
405 410 415
Glu Tyr Thr Gly Asn Leu Gly Gly Trp Val Asp Lys Tyr Val Glu Ser
420 425 430
Ser Gly Trp Val Tyr Leu Glu Ala Pro Ala Tyr Asp Pro Ala Ser Gly
435 440 445
Gln Tyr Gly Tyr Thr Val Trp Ser Tyr Cys Gly Val Gly
450 455 460
<210>314
<211>460
<212>PRT
<213>激烈热球菌(Pyrococcus furiosus)
<400>314
Val Asn Ile Lys Lys Leu Thr Pro Leu Leu Thr Leu Leu Leu Phe Phe
1 5 10 15
Ile Val Leu Ala Ser Pro Val Ser Ala Ala Lys Tyr Leu Glu Leu Glu
20 25 30
Glu Gly Gly Val Ile Met Gln Ala Phe Tyr Trp Asp Val Pro Gly Gly
35 40 45
Gly Ile Trp Trp Asp His Ile Arg Ser Lys Ile Pro Glu Trp Tyr Glu
50 55 60
Ala Gly Ile Ser Ala Ile Trp Leu Pro Pro Pro Ser Lys Gly Met Ser
65 70 75 80
Gly Gly Tyr Ser Met Gly Tyr Asp Pro Tyr Asp Tyr Phe Asp Leu Gly
85 90 95
Glu Tyr Tyr Gln Lys Gly Thr Val Glu Thr Arg Phe Gly Ser Lys Glu
100 105 110
Glu Leu Val Arg Leu Ile Gln Thr Ala His Ala Tyr Gly Ile Lys Val
115 120 125
Ile Ala Asp Val Val Ile Asn His Arg Ala Gly Gly Asp Leu Glu Trp
130 135 140
Asn Pro Phe Val Gly Asp Tyr Thr Trp Thr Asp Phe Ser Lys Val Ala
145 150 155 160
Ser Gly Lys Tyr Thr Ala Asn Tyr Leu Asp Phe His Pro Asn Glu Leu
165 170 175
His Cys Cys Asp Glu Gly Thr Phe Gly Gly Phe Pro Asp Ile Cys His
180 185 190
His Lys Glu Trp Asp Gln Tyr Trp Leu Trp Lys Ser Asrn Glu Ser Tyr
195 200 205
Ala Ala Tyr Leu Arg Ser Ile Gly Phe Asp Gly Trp Arg Phe Asp Tyr
210 215 220
Val Lys Gly Tyr Gly Ala Trp Val Val Arg Asp Trp Leu Asn Trp Trp
225 230 235 240
Gly Gly Trp Ala Val Gly Glu Tyr Trp Asp Thr Asn Val Asp Ala Leu
245 250 255
Leu Ser Trp Ala Tyr Glu Ser Gly Ala Lys Val Phe Asp Phe Pro Leu
260 265 270
Tyr Tyr Lys Met Asp Glu Ala Phe Asp Asn Asn Asn Ile Pro Ala Leu
275 280 285
Val Tyr Ala Leu Gln Asn Gly Gln Thr Val Val Ser Arg Asp Pro Phe
290 295 300
Lys Ala Val Thr Phe Val Ala Asn His Asp Thr Asp Ile Ile Trp Asn
305 310 315 320
Lys Tyr Pro Ala Tyr Ala Phe Ile Leu Thr Tyr Glu Gly Gln Pro Val
325 330 335
Ile Phe Tyr Arg Asp Phe Glu Glu Trp Leu Asn Lys Asp Lys Leu Ile
340 345 350
Asn Leu Ile Trp Ile His Asp His Leu Ala Gly Gly Ser Thr Thr Ile
355 360 365
Val Tyr Tyr Asp Asn Asp Glu Leu Ile Phe Val Arg Asn Gly Asp Ser
370 375 380
Arg Arg Pro Gly Leu Ile Thr Tyr Ile Asn Leu Ser Pro Asn Trp Val
385 390 395 400
Gly Arg Trp Val Tyr Val Pro Lys Phe Ala Gly Ala Cys Ile His Glu
405 410 415
Tyr Thr Gly Asn Leu Gly Gly Trp Val Asp Lys Arg Val Asp Ser Ser
420 425 430
Gly Trp Val Tyr Leu Glu Ala Pro Pro His Asp Pro Ala Asn Gly Tyr
435 440 445
Tyr Gly Tyr Ser Val Trp Ser Tyr Cys Gly Val Gly
450 455 460
<210>315
<211>484
<212>PRT
<213>热球菌(Thermococcus sp.)
<400>315
Ser Glu Ser Gln Cys Thr Ala Thr Cys Thr Trp Arg Val Val Tyr Met
1 5 10 15
Ser Ala Lys Lys Leu Leu Ala Leu Leu Phe Val Leu Ala Val Leu Val
20 25 30
Gly Val Ala Val Ile Pro Ala Arg Val Gly Ile Ala Pro Val Ser Ala
35 40 45
Gly Ala Thr Ser Arg Pro Ser Leu Glu Glu Gly Gly Val Ile Met Gln
50 55 60
Ala Phe Tyr Trp Asp Val Pro Ala Gly Gly Ile Trp Trp Asp Thr Ile
65 70 75 80
Arg Ser Lys Ile Pro Asp Trp Ala Ser Ala Gly Ile Ser Ala Ile Trp
85 90 95
Ile Pro Pro Ala Ser Lys Gly Met Ser Gly Ala Tyr Ser Met Gly Tyr
100 105 110
Asp Pro Tyr Asp Phe Phe Asp Leu Gly Glu Tyr Tyr Gln Lys Gly Thr
115 120 125
Val Glu Thr Arg Phe Gly Ser Lys Gln Glu Leu Ile Asn Met Ile Asn
130 135 140
Thr Ala His Ser Tyr Gly Ile Lys Val Ile Ala Asp Ile Val Ile Asn
145 150 155 160
His Arg Ala Gly Gly Asp Leu Glu Trp Asn Pro Phe Thr Asn Ser Tyr
165 170 175
Thr Trp Thr Asp Phe Ser Lys Val Ala Ser Gly Lys Tyr Thr Ala Asn
180 185 190
Tyr Leu Asp Phe His Pro Asn Glu Val Lys Cys Cys Asp Glu Gly Thr
195 200 205
Phe Gly Gly Phe Pro Asp Ile Ala His Glu Lys Ser Trp Asp Gln Tyr
210 215 220
Trp Leu Trp Ala Ser Gln Lys Ser Tyr Ala Ala Tyr Leu Arg Ser Ile
225 230 235 240
Gly Ile Asp Ala Trp Arg Phe Asp Tyr Val Lys Gly Tyr Gly Ala Trp
245 250 255
Val Val Lys Asp Trp Leu Lys Trp Trp Ala Leu Ala Val Gly Glu Tyr
260 265 270
Trp Asp Thr Asn Val Asp Ala Leu Leu Asn Trp Ala Tyr Ser Ser Gly
275 280 285
Ala Lys Val Phe Asp Phe Pro Leu Tyr Tyr Lys Met Asp Glu Ala Phe
290 295 300
Asp Asn Lys Asn Ile Pro Ala Leu Val Ser Ala Leu Gln Asn Gly Gln
305 310 315 320
Thr Val Val Ser Arg Asp Pro Phe Lys Ala Val Thr Phe Val Ala Asn
325 330 335
His Asp Thr Asp Ile Ile Trp Asn Lys Tyr Pro Ala Tyr Ala Phe Ile
340 345 350
Leu Thr Tyr Glu Gly Gln Pro Val Ile Phe Tyr Arg Asp Tyr Glu Glu
355 360 365
Trp Leu Asn Lys Asp Arg Leu Lys Asn Leu Ile Trp Ile His Asn Asn
370 375 380
Leu Ala Gly Gly Ser Thr Ser Ile Val Tyr Tyr Asp Asn Asp Glu Leu
385 390 395 400
Ile Phe Val Arg Asn Gly Tyr Gly Asn Lys Pro Gly Leu Ile Thr Tyr
405 410 415
Ile Asn Leu Gly Ser Ser Lys Val Gly Arg Trp Val Tyr Val Pro Lys
420 425 430
Phe Ala Gly Ser Cys Ile His Glu Tyr Thr Gly Asn Leu Gly Gly Trp
435 440 445
Val Asp Lys Tyr Val Gly Ser Asn Gly Trp Val Tyr Leu Glu Ala Pro
450 455 460
Ala His Asp Pro Ala Lys Gly Gln Tyr Gly Tyr Ser Val Trp Ser Tyr
465 470 475 480
Cys Gly Val Gly
<210>316
<211>457
<212>PRT
<213>热水管热球菌(Thermococcus hydrothermalis)
<400>316
Met Ala Arg Lys Val Leu Val Ala Leu Leu Val Phe Leu Val Val Leu
1 5 10 15
Ser Val Ser Ala Val Pro Ala Lys Ala Glu Thr Leu Glu Asn Gly Gly
20 25 30
Val Ile Met Gln Ala Phe Tyr Trp Asp Val Pro Gly Gly Gly Ile Trp
35 40 45
Trp Asp Thr Ile Ala Gln Lys Ile Pro Asp Trp Ala Ser Ala Gly Ile
50 55 60
Ser Ala Ile Trp Ile Pro Pro Ala Ser Lys Gly Met Ser Gly Gly Tyr
65 70 75 80
Ser Met Gly Tyr Asp Pro Tyr Asp Phe Phe Asp Leu Gly Glu Tyr Tyr
85 90 95
Gln Lys Gly Ser Val Glu Thr Arg Phe Gly Ser Lys Glu Glu Leu Val
100 105 110
Asn Met Ile Asn Thr Ala His Ala His Asn Met Lys Val Ile Ala Asp
115 120 125
Ile Val Ile Asn His Arg Ala Gly Gly Asp Leu Glu Trp Asn Pro Phe
130 135 140
Thr Asn Ser Tyr Thr Trp Thr Asp Phe Ser Lys Val Ala Ser Gly Lys
145 150 155 160
Tyr Thr Ala Asn Tyr Leu Asp Phe His Pro Asn Glu Leu His Ala Gly
165 170 175
Asp Ser Gly Thr Phe Gly Gly Tyr Pro Asp Ile Cys His Asp Lys Ser
180 185 190
Trp Asp Gln His Trp Leu Trp Ala Ser Asn Glu Ser Tyr Ala Ala Tyr
195 200 205
Leu Arg Ser Ile Gly Ile Asp Ala Trp Arg Phe Asp Tyr Val Lys Gly
210 215 220
Tyr Ala Pro Trp Val Val Lys Asn Trp Leu Asn Arg Trp Gly Gly Trp
225 230 235 240
Ala Val Gly Glu Tyr Trp Asp Thr Asn Val Asp Ala Leu Leu Ser Trp
245 250 255
Ala Tyr Asp Ser Gly Ala Lys Val Phe Asp Phe Pro Leu Tyr Tyr Lys
260 265 270
Met Asp Glu Ala Phe Asp Asn Asn Asn Ile Pro Ala Leu Val Asp Ala
275 280 285
Leu Lys Asn Gly Gly Thr Val Val Ser Arg Asp Pro Phe Lys Ala Val
290 295 300
Thr Phe Val Ala Asn His Asp Thr Asn Ile Ile Trp Asn Lys Tyr Pro
305 310 315 320
Ala Tyr Ala Phe Ile Leu Thr Tyr Glu Gly Gln Pro Ala Ile Phe Tyr
325 330 335
Arg Asp Tyr Glu Glu Trp Leu Asn Lys Asp Arg Leu Arg Asn Leu Ile
340 345 350
Trp Ile His Asp His Leu Ala Gly Gly Ser Thr Asp Ile Ile Tyr Tyr
355 360 365
Asp Ser Asp Glu Leu Ile Phe Val Arg Asn Gly Tyr Gly Asp Lys Pro
370 375 380
Gly Leu Ile Thr Tyr Ile Asn Leu Gly Ser Ser Lys Ala Gly Arg Trp
385 390 395 400
Val Tyr Val Pro Lys Phe Ala Gly Ser Cys Ile His Glu Tyr Thr Gly
405 410 415
Asn Leu Gly Gly Trp Ile Asp Lys Trp Val Asp Ser Ser Gly Arg Val
420 425 430
Tyr Leu Glu Ala Pro Ala His Asp Pro Ala Asn Gly Gln Tyr Gly Tyr
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Ser Val Trp Ser Tyr Cys Gly Val Gly
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<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>共有序列
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20 25 30
Ala Ile Trp Pro Pro Ser Lys Gly Met Gly Tyr Ser Met Gly Tyr Asp
35 40 45
Pro Tyr Asp Phe Asp Leu Gly Glu Tyr Gln Lys Gly Glu Thr Arg Phe
50 55 60
Gly Ser Lys Glu Leu Ile Thr Ala His Lys Val Ile Ala Asp Val Ile
65 70 75 80
Asn His Arg Ala Gly Gly Asp Leu Glu Trp Asn Pro Phe Tyr Thr Trp
85 90 95
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100 105 110
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115 120 125
Lys Trp Asp Gln Trp Leu Trp Ser Ser Tyr Ala Ala Tyr Leu Arg Ser
130 135 140
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Leu Trp Ala Val Gly Glu Tyr Trp Asp Thr Asn Val Asp Ala Leu Leu
165 170 175
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180 185 190
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195 200 205
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210 215 220
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245 250 255
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Tyr Tyr Asp Asp Glu Ile Phe Val Arg Asn Gly Pro Gly Leu Ile Thr
275 280 285
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290 295 300
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305 310 315 320
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325 330 335
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340
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<213>人工序列
<220>
<223>克隆
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20 25 30
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50 55 60
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65 70 75 80
Met Gly Gly Ala Tyr Ser Met Gly Tyr Asp Pro Tyr Asp Tyr Phe Asp
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100 105 110
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115 120 125
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145 150 155 160
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Ser Tyr Ala Ala Tyr Leu Arg Ser Ile Gly Ile Asp Ala Trp Arg Phe
210 215 220
Asp Tyr Val Lys Gly Tyr Gly Ala Trp Val Val Lys Asp Trp Leu Ser
225 230 235 240
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245 250 255
Ala Leu Leu Asn Trp Ala Tyr Ser Ser Gly Ala Lys Val Phe Asp Phe
260 265 270
Pro Leu Tyr Tyr Lys Met Asp Glu Ala Phe Asp Asn Lys Asn Ile Pro
275 280 285
Ala Leu Val Tyr Ala Ile Gln Asn Gly Glu Thr Val Val Ser Arg Asp
290 295 300
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305 310 315 320
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325 330 335
Pro Val Ile Phe Tyr Arg Asp Tyr Glu Glu Trp Leu Asn Lys Asp Lys
340 345 350
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355 360 365
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370 375 380
Tyr Gly Asp Arg Pro Gly Leu Ile Thr Tyr Ile Asn Leu Gly Ser Asp
385 390 395 400
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405 410 415
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420 425 430
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<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>共有序列
<400>319
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1 5 10 15
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20 25 30
Ser Lys Gly Met Gly Tyr Ser Met Gly Tyr Asp Pro Tyr Asp Phe Asp
35 40 45
Leu Gly Glu Gln Lys Gly Glu Thr Arg Phe Gly Ser Lys Glu Leu Ile
50 55 60
Thr Ala His Lys Val Ile Ala Asp Val Ile Asn His Arg Ala Gly Gly
65 70 75 80
Leu Glu Trp Asn Pro Tyr Thr Trp Thr Asp Phe Ser Lys Val Ala Ser
85 90 95
Gly Lys Tyr Ala Tyr Asp Phe His Pro Asn Asp Gly Thr Phe Gly Gly
100 105 110
Pro Asp Ile His Gln Trp Leu Trp Ser Ser Tyr Ala Ala Tyr Leu Arg
115 120 125
Ser Ile Gly Asp Trp Phe Asp Tyr Val Lys Gly Tyr Trp Val Val Trp
130 135 140
Leu Trp Ala Val Gly Glu Tyr Trp Asp Thr Asn Val Asp Ala Leu Trp
145 150 155 160
Ala Tyr Ser Ala Lys Val Phe Asp Phe Leu Tyr Tyr Lys Met Asp Ala
165 170 175
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180 185 190
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195 200 205
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210 215 220
Ile Phe Tyr Arg Asp Glu Glu Trp Leu Asn Lys Asp Leu Asn Leu Ile
225 230 235 240
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245 250 255
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260 265 270
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275 280 285
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290 295 300
Val Gly
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atccctgaat ggtacgatgc aggcatatcc gccatctgga tacccccggc gagcaagggc 240
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taccagaagg gaaccgttga gacccgcttc ggctccaagg aagagctcgt caacatgatc 360
tccacggccc accagtacgg catcaaggtt atagcggaca tagtgataaa ccaccgcgca 420
ggtggagacc tcgaatggaa cccatacgtc ggcgactata cctggacgga cttttctaag 480
gtcgcctccg ggaaatacaa ggcccactac atggacttcc atccaaacaa ctacagcacc 540
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tactggctgt gggcgagcaa cgagagctac gccgcctacc tcaggagcat agggatcgat 660
gcgtggcgct ttgactacgt taagggctac ggcgcgtggg tcgtcaagga ctggctgagt 720
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ggagttggat ga 1392
<210>321
<211>846
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>共有序列
<400>321
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ccgaatcacc taccagactg gcttgggcag cgaagctacg cgctactgga gcatggtgag 360
ctgggttgac tacgtaaggg ctagctgggt gtaactggct gtggggggct gggcgtggga 420
gtactgggac acaacgtgag ctctactggg ctacagcggc aagtcttgac ttccctctac 480
tacaagatgg aggccttgaa aaaacatccg ctgtgctagg acgtgtccgg accttaagcg 540
tacttgtgca accacgaaca ataattggaa caagtacgct agcttcatcc tacctagagg 600
cagccatttt accgcgacta cgaggagtgg ctcaacaagg aataaacctc attggatcag 660
aacctgcggg gagacattta ctacgacgag atattttaga ggctaggcac cggctataac 720
taatcaacct gcggagtggg tagtcaagtt cgcggatcac gataacggac tcggggtggt 780
gacagtgttc gggggtatgc cccacgaccg caaggatagg ctactcgttg gagctacggg 840
tggtga 846
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