1.一种脱细胞神经支架的制备方法，其特征在于采用TritonX-100加冻融酶的复合方法进行脱细胞神经支架制备，包括如下步骤：
1.1动物称重，以质量浓度3.5%的水合氯醛麻醉动物，待麻醉生效后，用体积浓度75%的乙醇浸泡消毒10-15min，切片，分离肌肉，无菌条件下切取双侧坐骨神经；将坐骨神经放于装有超纯水的培养皿中，室温下震荡24-25小时；
1.2在质量浓度0.5%的TritonX-100溶液中震荡36-37小时；
1.3然后转入液氮中反复冻融5-6次；
1.4将冻融后的坐骨神经移入装有胰酶的培养皿中，37℃过夜；然后用DNase-I、RNase-A进行处理，37℃ 2-2.5h；
1.5后转入蒸馏水中振荡、漂洗，每1-1.5小时换液1次；
1.6将坐骨神经取出，进行修剪定型，即为做好的脱细胞支架材料，转入PBS缓冲液中4℃，pH 7.2保存；
1.7脱细胞支架材料消毒处理：支架消毒剂选用质量浓度为0.1％的PAA；室温下，将脱细胞支架材料放入15ml离心管中，倒入新鲜配置的质量浓度为0.1％的PAA，浸泡消毒 3-
3.5 h，超净台内无菌PBS震荡24-25h，毎2-2.5h换液一次，漂洗结束，封口膜封管，4℃保存备用。
2.一种脱细胞神经支架的制备方法的效果评价方法，其特征在于包括如下步骤：
A组（未处理组）：新鲜对照神经；
B组（TritonX-100 加酶组）：脱细胞神经支架；
C组（NaOH组）：脱细胞神经支架；
D组（TritonX-100加冻融酶组）：脱细胞神经支架；
2.1 脱细胞神经支架组织形态学观察
将各组神经进行HE染色处理，HE染色结果显示，D组（TritonX-100加冻融酶组）许旺细胞，轴突及髓鞘等成分基本完全脱除，未见散在的细胞核及周边束膜、外膜，支架结构松散适度，Laminin保留充分，基底膜基本完整；
2.2脱细胞神经支架超微结构观察
通过透射电镜、扫描电镜分别观察各组神经；
透射电镜结果显示，D组（TritonX-100加冻融酶组）去细胞神经支架轴突、施万细胞去除彻底，细胞外基质成分良好，显微结构松散有序；扫描电镜结果显示，D组（TritonX-100加冻融酶组）去细胞神经支架，轴突、髓鞘成分几乎完全消失，管内未见残留结构，基膜完整，基膜管更通畅，基底膜管排列整齐，空隙均匀，空间骨架结构保存良好，为细胞的黏附生长提供了理想的三维空间；
2.3脱细胞神经支架DNA含量测定
对各组神经进行DNA含量测定；
DNA含量测定结果显示：D组（TritonX-100加冻融酶组）去细胞神经支架DNA含量最低，
95%DNA被去除；
2.4 CCK-8细胞毒性检测
对各组神经进行CCK-8细胞毒性检测；
CCK-8测定结果显示：D组（TritonX-100加冻融酶组）细胞数目无明显降低，细胞生长状态良好；
2.5脱细胞神经支架细胞生物相容性测定
将各组神经进行细胞生物相容性测定；
细胞生物相容性测定结果：D组（TritonX-100加冻融酶组），可见大量细胞黏附，细胞充分伸展，黏附生长状态良好；
2.6脱细胞神经支架组织生物相容性测定
将各组神经进行组织生物相容性测定；
组织生物相容性测定结果：D组（TritonX-100加冻融酶组）炎症反应轻微，可见炎症细胞极少；
2.7细胞支架复合体冰冻切片观察
将各组神经的细胞支架复合体冰冻切片观察；
细胞支架复合体冰冻切片观察结果：D组（TritonX-100加冻融酶组）显示大量细胞黏附生长，密度较大且分布均一；
2.8细胞支架复合体扫描电镜观察
将各组神经的细胞支架复合体扫描电镜观察；
细胞支架复合体扫描电镜观察结果：D组（TritonX-100加冻融酶组）细胞大量黏附生长，细胞胞体饱满，突起充分伸展，贴附与支架空隙间。
3.根据权利要求2所述的一种脱细胞神经支架的制备方法的效果评价方法，其特征在于所述的脱细胞神经支架组织形态学观察的步骤如下：
A组（未处理组）的新鲜对照神经进行染色处理：经质量浓度为4%的多聚甲醛和质量浓度为3%的戊二醛固定，4℃过夜，蔗糖梯度脱水（质量浓度为15%蔗糖1天，质量浓度为30%蔗糖2-3天），液氮冷冻后采用OCT包埋剂进行OCT包埋；组织由冰冻切片机进行切片至10μm，冰冻切片贴片后室温放置待自然晾干，-20度保存，染色之前取出，放室温自然解冻至风干；
冰冻切片行HE染色：质量浓度为4%的多聚甲醛固定30min,蒸馏水洗3次，每次2min，苏木精染色2min，流水冲洗5min，盐酸酒精分化20秒，流水冲洗10min,蒸馏水30秒，体积浓度为75%酒精30秒，伊红2min，体积浓度为85%酒精30秒，体积浓度为95%酒精30秒, 体积浓度为100%酒精30秒，二甲苯 I 30秒，二甲苯II 30秒，中性树胶封片；
冰冻切片行甲苯胺蓝染色：质量浓度为4%的多聚甲醛固定30min,蒸馏水洗3次，每次
2min，质量浓度为1%甲苯胺蓝溶液60℃，5-10min，质量浓度为0.5%冰醋酸分化，镜下控制分化程度，蒸馏水漂洗，酒精梯度脱水，二甲苯透明，中性树胶封片；
HE染色结果显示：A组（未处理组）的新鲜对照神经，纵切面可见大量呈波浪状致密排列的神经纤维，细胞核蓝染，清晰明显，施万细胞长条状包绕轴突，轴突及髓鞘结构完好，未见细胞碎片；；横切面可见直径不一，排列紧密的类圆形轴突细胞，周围包绕施万细胞形成，神经内膜，外膜及神经束膜完整；髓鞘特异性染色甲苯胺蓝染色结果显示，A组（未处理组）的新鲜对照神经，横切面可见清晰蓝染的包裹轴突的髓鞘；免疫荧光Laminin染色结果显示，A组（未处理组）的新鲜对照神经，Laminin含量丰富，基底膜结构完好；
 将B组（TritonX-100 加酶组）脱细胞神经支架进行染色处理：经质量浓度为4%的多聚甲醛和质量浓度为3%的戊二醛固定，4℃过夜，蔗糖梯度脱水（质量浓度为15%蔗糖1天，质量浓度为30%蔗糖2-3天），液氮冷冻后OCT包埋；组织由冰冻切片机进行切片至10μm，冰冻切片贴片后室温放置待自然晾干，-20度保存，染色之前取出，放室温自然解冻至风干；
冰冻切片行HE染色：质量浓度为4%的多聚甲醛固定30min,蒸馏水洗3次，每次2min，苏木精染色2min，流水冲洗5min，盐酸酒精分化20秒，流水冲洗10min,蒸馏水30秒，体积浓度为75%酒精30秒，伊红2min，体积浓度为85%酒精30秒，体积浓度为95%酒精30秒, 体积浓度为100%酒精30秒，二甲苯 I 30秒，二甲苯II 30秒，中性树胶封片；
冰冻切片行甲苯胺蓝染色：质量浓度为4%的多聚甲醛固定30min,蒸馏水洗3次，每次
2min，质量浓度为1%甲苯胺蓝溶液60℃，5-10min，质量浓度为0.5%冰醋酸分化，镜下控制分化程度，蒸馏水漂洗，酒精梯度脱水，二甲苯透明，中性树胶封片；
HE染色结果显示：许旺细胞部分去除，支架结构疏松，轴突及髓鞘等成分大部分脱失，但仍可见散在的细胞核及周边束膜、外膜；甲苯胺蓝染色结果显示，轴突和髓鞘大量残留；
免疫荧光Laminin染色结果显示，Laminin部分保留，基底膜尚好；
将C组（NaOH组）脱细胞神经支架进行染色处理：经质量浓度为4%的多聚甲醛和质量浓度为3%的戊二醛固定，4℃过夜，蔗糖梯度脱水（质量浓度为15%蔗糖1天，质量浓度为30%蔗糖2-3天），液氮冷冻后OCT包埋；组织由冰冻切片机进行切片（10μm），冰冻切片贴片后室温放置待自然晾干，-20度保存，染色之前取出，放室温自然解冻至风干；
冰冻切片行HE染色：质量浓度为4%的多聚甲醛固定30min,蒸馏水洗3次，每次2min，苏木精染色2min，流水冲洗5min，盐酸酒精分化20秒，流水冲洗10min,蒸馏水30秒，体积浓度为75%酒精30秒，伊红2min，体积浓度为85%酒精30秒，体积浓度为95%酒精30秒, 体积浓度为100%酒精30秒，二甲苯 I 30秒，二甲苯II 30秒，中性树胶封片；
冰冻切片行甲苯胺蓝染色：质量浓度为4%的多聚甲醛固定30min,蒸馏水洗3次，每次
2min，质量浓度为1%甲苯胺蓝溶液60℃，5-10min，质量浓度为0.5%冰醋酸分化，镜下控制分化程度，蒸馏水漂洗，酒精梯度脱水，二甲苯透明，中性树胶封片；
HE染色结果显示：许旺细胞，轴突及髓鞘等成分大部分去除，仍可见少量细胞核及细胞碎片，支架过于松散，出现不规则空洞；免疫荧光染色显示Laminin脱失较多，基底膜破坏较严重；
将D组（TritonX-100加冻融酶组）脱细胞神经支架进行染色处理：经质量浓度为4%的多聚甲醛和质量浓度为3%的戊二醛固定，4℃过夜，蔗糖梯度脱水（质量浓度为15%蔗糖1天，质量浓度为30%蔗糖2-3天），液氮冷冻后OCT包埋；组织由冰冻切片机进行切片（10μm），冰冻切片贴片后室温放置待自然晾干，-20度保存，染色之前取出，放室温自然解冻至风干；
冰冻切片行HE染色：质量浓度为4%的多聚甲醛固定30min,蒸馏水洗3次，每次2min，苏木精染色2min，流水冲洗5min，盐酸酒精分化20秒，流水冲洗10min,蒸馏水30秒，体积浓度为75%酒精30秒，伊红2min，体积浓度为85%酒精30秒，体积浓度为95%酒精30秒, 体积浓度为100%酒精30秒，二甲苯 I 30秒，二甲苯II 30秒，中性树胶封片；
冰冻切片行甲苯胺蓝染色：质量浓度为4%的多聚甲醛固定30min,蒸馏水洗3次，每次
2min，质量浓度为1%甲苯胺蓝溶液60℃，5-10min，质量浓度为0.5%冰醋酸分化，镜下控制分化程度，蒸馏水漂洗，酒精梯度脱水，二甲苯透明，中性树胶封片；
HE染色结果显示：许旺细胞，轴突及髓鞘等成分基本完全脱除，未见散在的细胞核及周边束膜、外膜，支架结构松散适度，Laminin保留充分，基底膜基本完整。
4.根据权利要求2所述的一种脱细胞神经支架的制备方法的效果评价方法，其特征在于所述的脱细胞神经支架超微结构观察的步骤如下：
通过透射电镜观察A组（未处理组）；B组（TritonX-100 加酶组）；C组（NaOH组）；D组（TritonX-100加冻融酶组）；
透射电镜步骤：各组神经经过质量浓度为2.5%戊二醛前固定过夜，用质量浓度为0.1M 的PB漂洗，然后用锇酸进行后固定，再用质量浓度为0.1M PB漂洗，酒精梯度脱水，然后经过丙酮置换，包埋剂梯度浸透，加热聚合，修块切片，行透射电镜观察；
透射电镜结果显示：A组（未处理组）的新鲜神经，轴突、髓鞘完整，施万细胞包绕致密，可见丰富细胞外基质成分如胶原蛋白和弹力蛋白；经脱细胞处理，B组（TritonX-100 加酶组）去细胞神经支架，轴突、施万细胞大部分去除，但仍能见到部分残留；C组（NaOH组）去细胞神经支架，轴突、施万细胞基本去除，但胶原成分、层粘连蛋白等丢失较多，纤维结构散乱，支撑功能不佳；D组（TritonX-100加冻融酶组）去细胞神经支架轴突、施万细胞去除彻底，细胞外基质成分良好，显微结构松散有序；
通过扫描电镜观察A组（未处理组）；B组（TritonX-100 加酶组）；C组（NaOH组）；D组（TritonX-100加冻融酶组）；
扫描电镜步骤：各组神经经过质量浓度为2.5%的戊二醛固定过夜，用质量浓度为0.1M 的PB漂洗3次，每次10-15min，酒精梯度脱水至100%，叔丁醇脱水15min，CO2临界点干燥，真空镀膜仪喷金，行环境扫描电镜观察；
扫描电镜结果显示：A组（未处理组）的新鲜神经可见其中神经纤维完整，神经束粗细不一，可见中央轴突及外周包绕的髓鞘；经脱细胞处理，B组（TritonX-100 加酶组）去细胞神经支架轴突及髓鞘大部分去除，呈现管状通道，但基膜管欠通畅，空间结构欠规整；C组（NaOH组）去细胞神经支架，轴突及髓鞘成分基本消失，管内无明显残留结构，但基膜管通部分塌陷，空间骨架结构破坏较重；D组（TritonX-100加冻融酶组）去细胞神经支架，轴突、髓鞘成分几乎完全消失，管内未见残留结构，基膜完整，基膜管更通畅，基底膜管排列整齐，空隙均匀，空间骨架结构保存良好，为细胞的黏附生长提供了理想的三维空间。
5.根据权利要求2所述的一种脱细胞神经支架的制备方法的效果评价方法，其特征在于所述的脱细胞神经支架DNA含量测定的步骤如下：
对A组（未处理组）；B组（TritonX-100 加酶组）；C组（NaOH组）；D组（TritonX-100加冻融酶组）进行DNA含量测定；
DNA含量测定步骤：1.分别取各组脱细胞神经支架30mg粉碎，并放入1.5ml离心管，加
200μl Buffer TL；加25μl OB Protease 并震荡混匀，在55℃震荡水浴中孵育至组织完全溶解；2.10000 g离心5min沉淀去除不溶解的组织碎片，小心吸取上清液并转移到另外一个无菌离心管，不留有任何不溶解的碎片；3.加220μl Buffer BL并震荡混匀，70℃下孵育
10min，加220μl 无水乙醇（室温，质量浓度为96-100%），并以最大震荡速度震荡15s； 4.在
2ml收集管中放置HiBind DNA柱，把包括沉淀在内的所有溶解产物转移到柱内，8000 g离心
1 min集结DNA，弃流过的液体；5.把柱放到另外一个2 ml 收集管，并用500μl Buffer HB吹打冲洗；8000 g离心1 min；弃滤过液及收集管；6.把柱放到另外一个2 ml 收集管，并用700μl乙醇稀释过的DNA Wash Buffer 吹打冲洗；8000 g离心1 min；弃滤过液，收集管在下一个步骤中重复利用；7.把柱放回步骤6中的2 ml 收集管，按上面的方法用700μl乙醇稀释过的DNA Wash Buffer 吹打冲洗，弃滤过液；8.把柱放回同一个的2ml 收集管，并以最大速度（大于12000g）离心空柱2min干燥柱；把柱放到1.5ml无菌离心管，加50-200μl 预热（70℃）的洗脱液，在室温下放置3min；从柱中洗脱DNA，10000 g离心1min，再加100-200μl洗脱液重复洗脱，Nanodrop测定DNA浓度；
DNA含量测定结果显示：A组（未处理组）神经DNA含量丰富，经过脱细胞处理，各组支架DNA有不同程度的降低，与正常对照组相比，B组（TritonX-100 加酶组）支架DNA，一半以上被脱除，C组（NaOH组）支架70%DNA被去除，D组（TritonX-100加冻融酶组）去细胞神经支架DNA含量最低，95%DNA被去除。
6.根据权利要求2所述的一种脱细胞神经支架的制备方法的效果评价方法，其特征在于所述的CCK-8细胞毒性检测的步骤如下：
对A组（未处理组）；B组（TritonX-100 加酶组）；C组（NaOH组）；D组（TritonX-100加冻融酶组）进行CCK-8细胞毒性检测；
CCK-8测定方法：1.胎盘间充质干细胞的培养：复苏胎盘间充质干细胞，加入含体积分数为10% FBS的DMEM/F12培养，待细胞生长平铺80-90%，2.5 g/L胰酶消化传代，调整细胞浓度为1×107/L，100μl/孔接种于96孔板，置于37℃，5% CO2培养箱中培养；2.脱细胞神经支架浸提液的制备：将各组脱细胞神经支架消毒灭菌后，按0.1g/ml无血清DMEM的比例置于
15mlEP管中，封口膜封闭，37℃浸泡72 h，取出神经支架，将浸提液离心，取上清液加入体积分数为10% 的胎牛血清及青链霉素混合液备用；3. CCK-8检测脱细胞神经支架的细胞毒性：胎盘间充质干细胞培养24h，将96孔细胞培养板PBS洗涤2次，实验组加入 100μl脱细胞神经支架浸提液培养，对照组加入等量含体积分数10%胎牛血清的DMEM培养液；分别于培养的1、3、5天，每组取5孔平行样，每孔加入10μl CCK-8液，继续培养4h，用酶标仪测定450 nm处吸光度，比较各组吸光度值有无差异；
CCK-8测定结果反应细胞数目及增殖趋势，与空白对照组相比，同一时间点，A组（未处理组）和D组（TritonX-100加冻融酶组）细胞数目无明显降低，细胞生长状态良好；B组（TritonX-100 加酶组）和C组（NaOH组），细胞数目降低少，但无明显差异，细胞生长状态尚可，D组（TritonX-100加冻融酶组）细胞数目无明显降低，细胞生长状态良好，不同时间点，同组细胞之间，细胞数目显著增多，差异明显。
7.根据权利要求2所述的一种脱细胞神经支架的制备方法的效果评价方法，其特征在于所述的脱细胞神经支架细胞生物相容性测定的步骤如下：
脱细胞神经支架细胞生物相容性测定方法：将各组脱细胞神经支架制备成5mm长的节段，置于培养皿中，和胎盘间充质干细胞共培养48小时，观察细胞的生长状态，取出共培养支架，固定脱水，行冰冻切片，HE染色，观察细胞与支架的黏附情况；
脱细胞神经支架细胞生物相容性测定结果：细胞支架共培养48小时，倒置显微镜下观察细胞生长状态，结果显示细胞胞体饱满，胞质均一，生长良好，细胞平铺80-90%，各组支架之间细胞生长状态无显著差异图；共培养支架取出固定后行冰冻切片，HE染色结果显示，B组（TritonX-100 加酶组）和C组（NaOH组）支架，细胞附着较少；D组（TritonX-100加冻融酶组）支架，可见大量细胞黏附，细胞充分伸展，黏附生长状态良好。
8.根据权利要求2所述的一种脱细胞神经支架的制备方法的效果评价方法，其特征在于所述的脱细胞神经支架组织生物相容性测定的步骤如下：
脱细胞神经支架组织生物相容性测定方法：健康成年SD大鼠，雌雄各半，在严格无菌条件下，将消毒各组脱细胞神经支架植入大鼠背背肌肉内，分别于手术后第1、4周每组各取4只SD大鼠全身麻醉心脏灌注，切开皮肤肉眼观察植入部位组织反应的特异和程度；随后移植物取样，制备标本，记录组织病理学试验反应分级，评价生物学反应程度；
脱细胞神经支架组织生物相容性测定结果：术后各组大鼠活动正常，进食良好，切口处无红肿，感染或坏死；1周时打开肌肉，暴露移植物，各组支架被肌肉组织包裹，将移植物与周围肌肉同时取下，行冰冻切片，HE染色结果显示，A组（未处理组）炎症反应非常严重，镜下可见大量炎症细胞包裹神经，聚集成团；与A组比较，B组（TritonX-100 加酶组）、C组（NaOH组）炎症反应减轻，但仍可见较多炎症细胞浸润；D组（TritonX-100加冻融酶组）支架炎症反应轻微，可见炎症细胞极少。
9.根据权利要求2所述的一种脱细胞神经支架的制备方法的效果评价方法，其特征在于所述的细胞支架复合体冰冻切片观察的步骤如下：
细胞支架复合体冰冻切片观察步骤：将感染GFP的胎盘间充质干细胞，2.5 g/L胰酶消化离心，调整细胞浓度为1×106/ml，在解剖显微镜下，应用5μl Hamilton微量进样器吸取细胞悬液，在培养皿中采用散点注射法将细胞注入脱细胞神经支架，于37℃，5% CO2培养箱中培养，构建神经支架复合体，分别于术后24h，取材，行冰冻切片，倒置荧光显微镜下观察细胞的黏附状况；
细胞支架复合体冰冻切片观察结果：倒置荧光显微镜显示A组（未处理组）新鲜未处理神经内几乎无细胞长入；B组（TritonX-100 加酶组）和C组（NaOH组）支架显示细胞进入支架并存活生长，但数量不多，且细胞分布不均匀；D组（TritonX-100加冻融酶组）支架显示大量细胞黏附生长，密度较大且分布均一。
10.根据权利要求2所述的一种脱细胞神经支架的制备方法的效果评价方法，其特征在于所述的细胞支架复合体扫描电镜观察的步骤如下：
细胞支架复合体扫描电镜观察步骤：将感染GFP的胎盘间充质干细胞，2.5 g/L胰酶消化离心，调整细胞浓度为1×106/ml，在解剖显微镜下，应用5μl Hamilton微量进样器吸取细胞悬液，在培养皿中采用散点注射法将细胞注入脱细胞神经支架，于37℃，5% CO2培养箱中培养，构建神经支架复合体，分别于术后24h，取材，行扫描电镜观察，检测细胞的黏附，生长及迁移状况；
细胞支架复合体扫描电镜观察结果： D组（TritonX-100加冻融酶组）支架细胞大量黏附生长，细胞胞体饱满，突起充分伸展，贴附与支架空隙间；B组（TritonX-100 加酶组）、C组（NaOH组）支架，细胞少量黏附生长；A组（未处理组）几乎无细胞长入。