许多活性药剂，包括药物和药物前体，已经被配制成可口服给药的剂型， 该剂型在一段时间内持续释放(sustained release)(或已知为缓慢释放(slow release)、延长释放(extended release)或改良释放(modified release))这种药剂， 以允许每天给药一次。一种众所周知的配制这种剂型的体系涉及包含亲水性 聚合物的基质，该活性药剂分散于其中；当该基质溶解或浸蚀后该活性药剂 在胃肠道中释放一段时间。包含这种基质体系的持续释放剂型通常制备成压 制片剂，在此描述为“骨架片”。
在水中具有相对低溶解度的药物和药物前体，对想要提供缓释剂型的配 制者提出了挑战。化合物8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基 -1-(羟基甲基)-乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮是p38激酶抑制剂，其用 于治疗p38激酶介导的疾病。一类涉及该化合物、用途和合成方法的文献可 参考公开于2002年8月1日的国际申请号：PCT/US01/50493、国际公开号WO 02/059083A2，包括第13页，31至36行，其列出了式(I)种类的具体盐，将其 全部公开在此引入作为参考。
对于速释(immediate-release)8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯 基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮片剂的一 天两次的给药方案目前正在研究，但是如果是一天一次的给药方案的话，患 者适应性将会更加改善。一天一次的给药方案将尤其适用于增强老年患者的 适应性。
在许多专利和申请中，涉及可侵蚀的骨架片的为U.S.Pat.No.6,197,339， 其公开了包含药物活性药剂的持续释放片剂，该活性药剂(R)-5，6-二氢-5-(甲 基氨基)-4H-咪唑并[4，5-ij]-喹啉-2(-1H)-酮(Z)-2-丁烯二酸盐(1∶1)(sumanirole maleate)在包含羟丙基甲基纤维素(HPMC)和淀粉的基质中。其中公开的淀粉 合适地包括预胶化淀粉。
US 2004/0192690公开了拉莫三嗪缓释制剂或其可药用衍生物，包括用 HPMC配制的骨架片，以及其它的改良释放制剂。
因此，本发明一个目的是提供8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯 基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮的水溶性 盐的缓释片剂组合物，其适用于每天一次口服给药。
本发明另一个目的是在制备8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯 基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮的方法中 对关键中间体的合成加以改进，适用于商业性开发。
发明概述
本发明一个实施方案提供以可口服给药的片剂形式的药物组合物，其包 含8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基]氨基} 吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮的水溶性盐，特别是甲苯磺酸盐。
本发明一个实施方案提供以可口服给药的改良释放片剂形式的药物组 合物，其包含8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基) 乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮的水溶性盐。在一个实施方案中所述 水溶性盐为甲苯磺酸盐。在另一个实施方案中当每天一次给药时所述片剂在 哺乳动物中提供一整天的治疗作用。
本发明另一个实施方案为以可口服给药的改良释放片剂形式的药物组 合物，其包含8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)- 乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮4-甲基苯磺酸盐(甲苯磺酸盐)。
本发明另一个实施方案为8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2- 羟基-1-(羟基甲基)-乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮的水溶性盐在亲水 性骨架片中的制剂。在一个实施方案中所述水溶性盐为甲苯磺酸盐。
本发明一个目的是提供改良释放组合物，其包含8-(2，6-二氟苯基)-4-(4- 氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)-乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶 -7(8H)-酮的水溶性盐，该组合物具有足够的硬度以经受高速压片过程，特别 是当需要时在涂布涂层过程中耐溶蚀。
本发明另一个实施方案为新的8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯 基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)-乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮的甲苯 磺酸盐、包含该甲苯磺酸盐和可药用载体或稀释剂的药物组合物，以及甲苯 磺酸盐在治疗由p38激酶活性介导的或由细胞因子介导的病症或疾病状态的 用途，该细胞因子通过p38激酶活性产生。
本发明另一个实施方案为新的多晶型物，8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲 基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲苯 磺酸盐的晶型1至4，包含这些多晶型物(单独或其组合或混合物)和可药用 载体或稀释剂的药物组合物；以及这些甲苯磺酸盐的多晶型物在治疗由p38 激酶活性介导的或由细胞因子介导的病症或疾病状态的用途，该细胞因子通 过p38激酶活性产生。
本发明另一个实施方案为下式(II)的新的中间体：

其中
R1独立地选自氢、C(Z)N(R10’)(CR10R20)vRb、C(Z)O(CR10R20)vRb、 N(R10’)C(Z)(CR10R20)vRb、N(R10’)C(Z)N(R10’)(CR10R20)vRb或 N(R10’)OC(Z)(CR10R20)vRb；
R1′在各种情况下独立地选自氢、卤素、C1-4烷基、卤素取代的-C1-4 烷基、氰基、硝基、(CR10R20)v’NRdRd’、(CR10R20)v’C(O)R12、SR5、S(O)R5、 S(O)2R5或(CR10R20)v’OR13；
R3在各种情况下独立地选自氢、卤素、C1-4烷基或卤素取代的C1-4烷 基；
R4和R14在各种情况下各自独立地选自氢或C1-4烷基，或R4和R14 和与其连接的氮一起形成5至7元杂环，该环任选包含其它选自NR9的杂 原子；
R5在各种情况下独立地选自氢、C1-4烷基、C2-4链烯基、C2-4炔基或 NR4R14，以下情况除外：SR5是SNR4R14，S(O)2R5是SO2H和S(O)R5 是SOH；
R9和R9′在各种情况下独立地选自氢或C1-4烷基；
R12在各种情况下独立地选自氢、C1-4烷基、卤素取代的C1-4烷基、 C2-4链烯基、C2-4炔基、C3-7环烷基、C3-7环烷基C1-4烷基、C5-7环烯 基、C5-7环烯基C1-4烷基、芳基、芳基C1-4烷基、杂芳基、杂芳基C1-4 烷基、杂环基或杂环基C1-4烷基，且其中除氢外，这些基团中每个可任选 被取代；
R13在各种情况下独立地选自氢、C1-4烷基、卤素取代的C1-4烷基、 C2-4链烯基、C2-4炔基、C3-7环烷基、C3-7环烷基C1-4烷基、C5-7环烯 基、C5-7环烯基C1-4烷基、芳基、芳基C1-4烷基、杂芳基、杂芳基C1-4烷 基、杂环基或杂环基C1-4烷基，且其中除氢外，这些基团中每个可任选被 取代；
Rd和Rd’在各种情况下各自独立地选自氢、C1-4烷基、C3-6环烷基、 C3-6环烷基C1-4烷基，且其中除氢外，这些基团中每个可任选被取代；或 Rd和Rd’和与其连接的氮一起形成任选取代的5至6元杂环，该环任选包含 其它选自氧、硫或NR9’的杂原子；
Rb为氢、C1-10烷基、C3-7环烷基、C3-7环烷基C1-10烷基、芳基、 芳基C1-10烷基、杂芳基、杂芳基C1-10烷基、杂环基或杂环基C1-10烷基， 除氢外，这些基团都任选被取代；
Rg为C1-10烷基或芳基；
m为0，或1或2的整数；
s为1、2、3或4的整数；和
t为1、2、3或4的整数。
v为0，或1或2的整数；
v’在各种情况下独立地选自0，或1或2的整数；
Z独立地选自氧或硫；
R10和R20在各种情况下独立地选自氢或C1-4烷基；和
R10′在各种情况下独立地选自氢或C1-4烷基。
本发明另一个实施方案为制备式(II)化合物的新方法，其通过对式(IV) 化合物与选自麦德鲁姆酸(Meldrum’s acid)或丙二酸的缩合剂在有机溶剂中 与碱一起进行环化，从而生成式(II)化合物

其中R1、R1′、R3、s和t如同上式(II)所述，m为0、1或2和Rg为 C1-10烷基或芳基。
本发明另一个方面为式(II)化合物与硫代酸(thioacid)或硫代酸的盐的新 的脱羧作用，以生成下式(III)化合物：

其中
R1独立地选自氢、C(Z)N(R10’)(CR10R20)vRb、C(Z)O(CR10R20)vRb、 N(R10’)C(Z)(CR10R20)vRb、N(R10’)C(Z)N(R10’)(CR10R20)vRb或 N(R10’)OC(Z)(CR10R20)vRb；
R1′在各种情况下独立地选自氢、卤素、C1-4烷基、卤素取代的-C1-4 烷基、氰基、硝基、(CR10R20)v’NRdRd’、(CR10R20)v’C(O)R12、SR5、S(O)R5、 S(O)2R5或(CR10R20)v’OR13；
R3在各种情况下独立地选自氢、卤素、C1-4烷基或卤素取代的C1-4烷 基；
R4和R14在各种情况下各自独立地选自氢或C1-4烷基，或R4和R14 和与其连接的氮一起形成5至7元杂环，该环任选包含其它选自NR9的杂 原子；
R5在各种情况下独立地选自氢、C1-4烷基、C2-4链烯基、C2-4炔基 或NR4R14，以下情况除外：SR5是SNR4R14，S(O)2R5是SO2H和S(O)R5 是SOH；
R9和R9′在各种情况下独立地选自氢或C1-4烷基；
R12在各种情况下独立地选自氢、C1-4烷基、卤素取代的C1-4烷基、 C2-4链烯基、C2-4炔基、C3-7环烷基、C3-7环烷基C1-4烷基、C5-7环烯 基、C5-7环烯基C1-4烷基、芳基、芳基C1-4烷基、杂芳基、杂芳基C1-4 烷基、杂环基或杂环基C1-4烷基，且其中除氢外，这些基团中每个可任选 被取代；
R13在各种情况下独立地选自氢、C1-4烷基、卤素取代的C1-4烷基、 C2-4链烯基、C2-4炔基、C3-7环烷基、C3-7环烷基C1-4烷基、C5-7环烯 基、C5-7环烯基C1-4烷基、芳基、芳基C1-4烷基、杂芳基、杂芳基C1-4 烷基、杂环基或杂环基C1-4烷基，且其中除氢外，这些基团中每个可任选 被取代；
Rd和Rd’在各种情况下各自独立地选自氢、C1-4烷基、C3-6环烷基、 C3-6环烷基C1-4烷基，且其中除氢外，这些基团中每个可任选被取代；或 Rd和Rd’和与其连接的氮一起形成任选取代的5至6元杂环，该环任选包含 其它选自氧、硫或NR9’的杂原子；
Rb为氢、C1-10烷基、C3-7环烷基、C3-7环烷基C1-10烷基、芳基、 芳基C1-10烷基、杂芳基、杂芳基C1-10烷基、杂环基或杂环基C1-10烷基， 除氢外，这些基团都任选被取代；
Rg为C1-10烷基或芳基；
m为0，或1或2的整数；
s为1、2、3或4的整数；和
t为1、2、3或4的整数。
v为0，或1或2的整数；
v’在各种情况下独立地选自0，或1或2的整数；
Z独立地选自氧或硫；
R10和R20在各种情况下独立地选自氢或C1-4烷基；和
R10′在各种情况下独立地选自氢或C1-4烷基。
本发明另一方面为一种新的一锅法、原位合成制备式(III)化合物的方法， 如在此所述，通过对所述式(IV)化合物与选自麦德鲁姆酸或丙二酸的缩合剂 在有机溶剂中与碱一起进行环化，从而生成所述式(II)化合物，然后用硫代 酸衍生物或硫代酸衍生物的盐对式(II)化合物进行脱羧作用，从而生成式(III) 化合物。
附图说明
图1a提供实施例1的制剂(作为2.5和5mg速释片剂)的溶出曲线 (dissolution profile)，其为使用美国药典(美国药典II，章<711>)的桨装置 (paddle apparatus)获得的。
图1b提供实施例2至4的制剂的溶出曲线，其为使用美国药典(美国药 典III，章<711>)的往复圆筒装置(reciprocating cylinder apparatus)获得的。
图2提供实施例2至4的制剂的溶出曲线，其为使用美国药典I，章 <711>的篮式装置(basket apparatus)获得的。
图3用图示说明实施例1至4的制剂从人中获得的pK曲线。该速释制 剂为7.5mg剂量。
图4提供实施例5至6的制剂的溶出曲线，其使用美国药典(美国药典 I，章<711>)的篮式装置获得的。
图5提供8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基) 乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮的4-甲基-苯磺酸盐(甲苯磺酸盐)的多 晶型1的XRPD数据。
图6提供8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基) 乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮的4-甲基-苯磺酸盐(甲苯磺酸盐)的多 晶型2的XRPD数据。
图7提供8-(2，6-二氟苯基)-7-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基) 乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮的4-甲基-苯磺酸盐(甲苯磺酸盐)的多 晶型3的XRPD数据。
图8提供8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基) 乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮的4-甲基-苯磺酸盐(甲苯磺酸盐)的多 晶型4的XRPD数据。
图9提供晶型1的差示扫描量热法(DSC)热分析图。
图10提供晶型2的差示扫描量热法(DSC)热分析图。
图11提供晶型3的差示扫描量热法(DSC)热分析图。
图12提供晶型4的差示扫描量热法(DSC)热分析图。
图13提供晶型1的FT-IR光谱，提供的数据为4000-700cm-1(上图，图 13(a))和2000-700cm-1(下图，图13(b))。
图14提供晶型2的FT-IR光谱，提供的数据为4000-700cm-1(上图，图 14(a))和2000-700cm-1(下图，图14(b))。
图15提供晶型3的FT-IR光谱，提供的数据为4000-700cm-1(上图，图 15(a))和2000-700cm-1(下图，图15(b))。
图16提供晶型4的FT-IR光谱，提供的数据为4000-700cm-1(上图，图 16(a))和2000-700cm-1(下图，图16(b))。
图17提供8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲 基)-乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮的4-甲基-苯磺酸盐(甲苯磺酸盐) 的无定形物质的差示扫描量热法(DSC)热分析图；其使用Perkin Elmer Thermal Analysis，显示出峰为63.89℃，δH＝3.070J/gm；面积＝5.149mJ；起 始58.20℃。
发明详述
提供了一种以可口服给药的片剂形式的持续释放药物组合物，该组合物 包含分散于基质中的8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟 基甲基)乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮的水溶性盐，所述基质包含亲 水性聚合物和其他的可药用赋形剂。
合适的水溶性的可药用盐包括但不限于甲苯磺酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐 和硫酸盐。所述甲苯磺酸盐优选用于本文公开的速释(IR)和改良释放(MR)剂 型。
应当理解本文所述的8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基 -1-(羟基甲基)乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮的水溶性盐包括其外消 旋体、对映异构体、多晶型、水合物和溶剂合物。
所述甲苯磺酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐和硫酸盐形式具有相似的溶解性和 稳定性。所述硫酸盐不如其他盐形式稳定。所述氢溴酸盐和甲苯磺酸盐似乎 具有较不复杂的热廓线(less complicated thermal profiles)。
本发明进一步提供治疗具有表征p38激酶抑制剂的症状或疾病的患者的 方法，该方法包括将片剂形式的持续释放药物组合物口服给药于患者，该组 合物包括分散于基质中的8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-([2-羟基 -1-(羟基甲基)乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮的水溶性盐，所述基质 包含亲水性聚合物和其他的可药用赋形剂。
所述化合物8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲 基)乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐用于治疗包括预防由 p38激酶活性介导的或由细胞因子介导的病症或疾病状态，该细胞因子通过 p38激酶活性产生。
该化合物8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基) 乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐可用于制备预防性或治疗 性治疗人或其他哺乳动物中任何由过量或紊乱的细胞因子加剧或引起的疾 病状态的药物，该细胞因子由此类哺乳动物细胞产生，例如但不限于单核细 胞和/或巨噬细胞。
适合的CSBP/RK/p38激酶介导的疾病包括银屑病关节炎、莱特尔综合 征、痛风、外伤性关节炎、风疹性关节炎、急性滑膜炎、类风湿性关节炎、 类风湿性脊椎炎、骨关节炎、痛风性关节炎及其他关节炎症状、败血症、感 染性休克、内毒素血症、内毒素休克、革兰阴性败血症、中毒性休克综合征、 脑型疟疾、脑膜炎、缺血性和出血性中风、神经外伤/闭锁性头部外伤、哮喘、 成人呼吸窘迫综合征、慢性肺部炎症性疾病、慢性阻塞性肺疾病、慢性心脏 衰竭、硅肺病、肺结节病(pulmonary sarcososis)、骨吸收疾病、骨质疏松症、 再狭窄、心脏和脑和肾缺血再灌注损伤、充血性心力衰竭、冠状动脉旁路移 植术(CABG)手术、血栓形成、肾小球肾炎、慢性肾功能衰竭、糖尿病、糖 尿病性视网膜病变、黄斑变性、移植物抗宿主反应、同种异体移植物排斥反 应、炎症性肠病、克罗恩病、溃疡性结肠炎、肠易激综合征、神经退行性疾 病、肌肉变性、糖尿病视网膜病变、阿尔茨海默病、帕金森氏病、亨廷顿病、 肌萎缩侧索硬化症、癫痫、多发性硬化症、黄斑变性、肿瘤生长和转移、血 管生成疾病、流感引起的肺炎、湿疹、接触性皮炎、银屑病、晒伤、结膜炎、 过敏性鼻炎、过敏性结膜炎、精神失常、动脉瘤、中风、移植物抗宿主反应、 同种异体移植物排斥反应、全身性恶病质、恶病质的继发感染或恶性肿瘤、 恶病质继发获得性免疫缺陷综合症(AIDS)、疟疾、麻风病、传染性关节炎、 利什曼病、莱姆病、脊椎炎、和非关节的炎症，例如、椎间盘脱出/破裂/脱 垂综合征、滑囊炎、腱炎、腱鞘炎、纤维肌痛综合征和其他与韧带扭伤和局 部肌肉骨骼劳损、疼痛相关的炎症症状，例如，与炎症和/或创伤相关的疾病、 血栓形成、血管生成，和癌症包括乳腺癌、结肠癌、肺癌或前列腺癌。
也已发现P38抑制剂在具有不适当生成血管的成分的慢性疾病中有效， 包括各种眼新血管形成，例如糖尿病性视网膜病和黄斑变性。其它具有过度 或增加的脉管系统增生的慢性疾病为肿瘤生长和转移、动脉粥样硬化和某些 关节炎病症。
优选的疾病包括类风湿性关节炎、急性或慢性炎性疾病状态，如由内毒 素诱导的炎症反应、或炎性肠病、克罗恩病、溃疡性结肠炎、肠易激综合征、 动脉粥样硬化、神经性疼痛、慢性阻塞性肺疾病(COPD)、哮喘、囊性纤维 化病和多发性骨髓瘤。
因此，本发明提供在需要的哺乳动物(优选人)中治疗CSBP激酶介导的 疾病的方法，其包括给药所述哺乳动物有效量的8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2- 甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲 苯磺酸盐。
为了使用8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基) 乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐，通常将其按标准药物操 作配制成药物组合物。因此，本发明还涉及包括有效的非毒性量的8-(2，6- 二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)-乙基]氨基}吡啶并 [2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐和可药用载体或稀释剂的药物组合物。该配 制和组合物可参见2002年8月1日公开的WO 02/059083 A2。合适的药物 教科书包括Remington’s Pharmaceutical Sciences。
8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基]氨 基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐可通过任何常规给药方式方便的 给药，例如，口服、局部、肠胃外或吸入给药。该甲苯磺酸盐可以按常规方 法与标准药物载体结合而制备的常规剂型给药。该化合物还可以常规剂量与 已知的第二治疗活性化合物组合给药。这些方法可包括混合、造粒和压制或 溶解这些成分，视需要制成所需的制剂。应当理解可药用载体(character)或 稀释剂的形式和特性由与其结合的活性成分的量、给药途径和其它已知的变 量而决定。所述载体必须为“可接受的”，理解为与制剂的其它成分配无而 对其接受者无害。
对于所有在此公开的甲苯磺酸盐的使用方法，每天的口服给药方案优选 为总体重的约0.1至约30mg/kg，优选约0.5mg至15mg。所述每天的肠胃 外给药方案为总体重的约0.1至约30mg/kg，优选约0.5mg至15mg/kg。所 述每天的局部给药方案优选为0.1mg至50mg，每天给药1至4次，优选2 或3次。所述每天的吸入给药方案优选为每天约0.01mg/kg至约1mg/kg。 本领域技术人员应理解甲苯磺酸盐的最佳量和各给药之间的间隔将取决于 待治疗症状的特性和程度、给药的形式、途径和位点、以及待治疗的具体患 者，且这些最佳条件可通过常规技术来决定。
所述术语“水溶性的”是指在pH范围内溶解度为至少约0.5mg/ml。除 非另有指定，本文的“溶解度”是指在20-25℃下的在任何生理可接受的pH 中的溶解度，例如在pH为约1至约8的任何值。当涉及盐时，本文所述的在水 中的溶解度是指8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲 基)乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮的盐形式，而非其游离碱形式。已 发现所述化合物8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲 基)乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐在pH为2.9时在水中的 溶解度为0.7mg/ml。
所述术语“可口服给药的”在此是指适用于口服给药的，包括经口(peioral) 给药和口腔内(intraoral)给药(例如，舌下或口含)给药，但本发明的片剂主要 适用于经口给药，即吞咽，典型地整体的或破裂的，借助于水或其它可饮用 液体。
本文中“受试者”是指任何种类的动物，优选哺乳动物，最优选人。在 此所述对具体药剂“有指示的”受试者中的症状和疾病并不限于被管理当局 明确批准的药剂所针对的症状和疾病，而且包括医师已知或认为能用该药剂 治疗的其它症状和疾病。
本文中“治疗”包括预防性治疗，除非上下文指定。本文使用的术语“治 疗”包括治疗确认的疾病也包括预防该疾病，除非另有环境需要。
当在此使用时，所述术语“可药用盐”是指一种盐，当给药于受试者(如 人)时能提供(直接或间接)活性化合物或其活性代谢物给人。
当在此使用时，所述术语“持续释放(sustained release)”或“改良释放 (modified release)”是指口服给药后在任何持续期逐渐而连续地释放8-(2，6- 二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基]氨基}吡啶并 [2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮，在哺乳动物中，优选人在24小时期间内逐渐而连续地 释放。该释放开始于制剂到达胃并开始崩解/溶解/溶蚀。该释放将持续一段 时间，且可继续穿过小肠，之后制剂到达大肠直到穿过结肠。
适合地，对于相应于实施例2的组合物，预期在1至2小时内体内释放约 15至约55％，优选释放约20至50％，更适合地释放约25至45％。在2至3小时 预期释放约35至约75％，优选释放40至70％，更优选释放45至65％。在3至4 小时，预期释放约60至约100％，优选释放65至95％，更优选释放70至90％。
适合地，对于相应于实施例3的组合物，预期在1至2小时内体内释放约5 至约35％，优选释放约10至35％，更适合地释放约15至30％。在2至4小时预 期释放约20至约65％，优选释放25至60％，更优选释放25至55％。在5至7小 时，预期释放约65至约100％，优选释放70至95％，更优选释放70至90％。
适合地，对于相应于实施例4的组合物，预期在1至3小时内体内释放约0 至约30％，优选释放5至30％，更优选释放10至25％。在4至8小时预期释放约 25至65％，优选释放30至55％，更优选释放30至50％。在12至16小时，预期 释放约70至约100％，优选释放75至95％，更优选释放75至90％。
适合地，对于相应于实施例5的组合物，预期在1至3小时内体内释放约0 至约30％，优选释放5至30％，更优选释放10至25％。在4至8小时预期释放约 20至60％，优选释放25至50％，更优选释放30至45％。在12至16小时，预期 释放约60至约100％，优选释放65至95％，更优选释放70至90％。
适合地，对于相应于实施例6的组合物，预期在1至3小时内体内释放约0 至25％，优选释放5至20％，更优选释放10至20％。在4至8小时预期释放约15 至50％，优选释放20至45％，更优选释放25至45％。在14至18小时，预期释 放约60至约100％，优选释放65至95％，更优选释放70至90％。
当在此使用，“基本上全部”是指多于85％，优选多于90％。
当在此使用，当涉及8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基 -1-(羟基甲基)乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮的甲苯磺酸盐时，所述 术语“基本上纯”是指大于约90％纯的产物。优选地，“基本上纯”是指大 于约95％纯的产物，更优选大于约97％纯，最优选约99％纯。这意味着该产 物分别不含任何大于约10％、5％、3％或1％的任何其它化合物或杂质或任 何其它非所需晶型(例如晶型1、2、3或4)的甲苯磺酸盐的多晶型。
给药8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基] 氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮或其可药用盐，经过一段时间，适合地高达 18小时，逐渐将其输送至易于吸收的位点，且伴随着较慢的血清浓度升高和 给药后峰值降低，以减轻潜在的给药相关的不利作用(AE′s)，且同时提供充 分的最小血浆/血清浓度以保持功效。
其中曲线下面积(AUC)等于常规即释(instant release)/速释(immediate release)(IR)片剂(与对照IR产物相比，几何最小二乘(geometric least squares， GLS)平均比值的90％置信区间(CI)应落在80-125％的范围内)的制剂称为“生 物等价物”。如果相对具有AUC保持在80-125％范围内的IR产物(与参比IR 产物相比)，该对Cmax的点估计值(points estimate)和相关的90％置信区间 没有落在80-125％的限定范围内，则持续释放制剂很可能不被食品和药品管 理局(FDA)认定。适合地，所述制剂将配制成活性物质主要释放在胃、小肠 并进入结肠。
8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基]氨 基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐的常规速释片剂剂型预期为在45 分钟内溶解80％。该溶出曲线按标准溶出试验测定，例如<724>溶出试验， 桨装置，(美国药典(USP)II，章<711>)，在37.0+/-0.5C°下，使用0.01M盐酸 (500ml)和转速75rpm。实施例1所示的2.5和5mg IR片剂的介绍由图1a图 解。
所述持续释放制剂当体内给药时可提供等于现有速释IR片剂的体内“曲 线下面积”(AUC)值的AUC值，例如至少80％，优选至少90％至110％，更 优选约100％，但不超过125％的8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2- 羟基-1-(羟基甲基)-乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮的水溶性盐的相应 剂量的AUC值，与按常规(速释)制剂服用相比，经过相同的给药期间(dosage period)，从而从缓释制剂中最大化地吸收8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯 基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)-乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮的水溶 性盐。适合地，速释或持续释放制剂中使用的水溶性盐为8-(2，6-二氟苯 基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)-乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧 啶-7(8H)-酮的甲苯磺酸盐。
本发明剂量的药物动力学分布可容易地从人志愿者的单剂量生物利用 率研究中测定。然后8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟 基甲基)乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐的血浆浓度可按 现有技术中熟知和记载的方法容易地从患者的血样中测定。在此已测定相应 于实施例1至4的制剂的类似的药物动力学分布，如图3所示。
相似系数(f2)是一种公认的方法，其用于测定参照化合物和测试化合物 的溶出曲线之间的相似性。相似系数(f2)为平方误差的和的对数转换。当测 试和参照曲线相同时相似系数(f2)是100，而随着差异增大相似系数(f2)接近 零。也已将相似系数调整以用于测定参照和测试化合物溶出曲线之间的相似 性，这些溶出曲线涉及改良释放制剂，如在此示例的。
该f2相似系数已被SUPAC准则采纳和被FDA指导以用于速释剂型的溶 解测试(FDA Guidance for Industry，Dissolution Testing of Immediate Release Solid Oral Dosage Forms，FDA，(CDER)，August 1997(Dissolution Tech.4， 15-22，1997)。
该f2相似系数已被SUPAC准则中FDA采纳用于改良释放固体口服剂型 (FDA Guidance for Industry，SUPAC-MR：Modified Release Solid Oral Dosage Form，Scale-Up and Postapproval Changes：Chemistry，Manufacturing，and Controls；In Vitro Dissolution Testing and In Vivo Bioequivalence Documentation；CDER；September 1997)。该FDA Guidance for Industry on Dissolution Testing of Immediate Release Solid Oral Dosage Forms可见于 http://www.fda.gov/cder/guidance/1713bpl.pdf。
本发明一个实施方案为包括8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯 基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮的水溶性 盐的持续释放组合物，其具有使用USP(USP I，章<711>)的篮式装置(basket apparatus)产生的体外溶出曲线，其中当使用图2或图4中的实施例之一作为 对照曲线而计算时该相似系数(f2)为50至100。
本领域技术人员将理解治疗有效量的确定将取决于患者的年龄、大小、 疾病的严重性和其它药物治疗。
适合地，所述缓释制剂为(未)包衣的或包衣的片剂或小胶囊。
本发明一方面为包括8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基 -1-(羟基甲基)乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮或其可药用衍生物和延 缓释放(release retarding)赋形剂的制剂，该延缓释放赋形剂使8-(2，6-二氟苯 基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)-乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧 啶-7(8H)-酮或其可药用衍生物持续释放。合适地所述其可药用衍生物为水溶 性盐，且该水溶性盐优选为甲苯磺酸盐。
合适的延缓释放赋形剂包括可在与水或含水介质如胃内含物接触时溶 胀或不溶胀的延缓释放聚合物；在与水或含水介质接触时形成胶化的聚合物 材料；在与水或含水介质接触时具有溶胀和胶化特性的聚合物材料，以及pH 敏感性聚合物，例如基于甲基丙烯酸共聚物的聚合物如Eudragit(商标)聚合 物，例如Eudragit L(商标)，其可单独使用或与增塑剂一起使用。
这些缓释制剂经常在现有技术中提及，称为“基质制剂(matrix formulation)”，其中将药物掺入聚合物基质体系中，优选该药物在肠道的环 境流体中水合，且通过扩散或溶蚀从基质释放。
可溶胀或不溶胀的延缓释放聚合物(release retarding polymer)包括，尤其 是，交联羧甲基纤维素钠、羟丙基纤维素、交联羟丙基纤维素、羟基乙基纤 维素、高分子量羟丙基甲基纤维素、羧甲基酰胺、甲基丙烯酸钾二乙烯基苯 (potassium methacrylatedivinylbenzene)共聚物、聚甲基丙烯酸甲酯、交联聚乙 烯吡咯烷酮、羟乙基纤维素或高分子量聚乙烯醇等，和其组合或混合物。
本文所述延缓释放聚合物也可指亲水性聚合物，其为具有足够数量和分 布的亲水性取代基，从而将亲水性特性作为整体赋予聚合物的聚合物材料， 该亲水性取代基如羟基和羧基。合适的亲水性聚合物包括，但不限于，甲基 纤维素、羟丙基甲基纤维素(HPMC或羟丙甲纤维素)、羧甲醚纤维素(羧甲基 纤维素)钠、黄原胶和卡波姆(聚丙烯酸)。可任选使用多于一种的此类聚合物、 其组合或混合物。
在本发明一个实施方案中HPMC为所述亲水性聚合物。
延缓释放可胶凝的聚合物包括甲基纤维素、羧甲基纤维素、低分子量羟 丙基甲基纤维素、羟乙基纤维素、低分子量聚乙烯醇、聚氧乙烯二醇 (polyoxyethylene glycol)、非交联聚乙烯吡咯烷酮或黄原胶等、以及其组合或 混合物。可任选使用多于一种的此类聚合物、其组合或与其它在此示例的聚 合物的混合物。
同时具有溶胀特性和胶化特性的缓释聚合物包括中等粘度的羟丙基甲 基纤维素和中等粘度的聚乙烯醇。
适合地，所使用的延缓释放聚合物的分子量范围为5,000至95,000，更 优选为10,000至50,000。
该延缓释放聚合物在制剂中的适合存在量为约15至约50％w/w。在本发 明另一个实施方案中所述延缓释放聚合物的存在量为约20％至约45％w/w。
本发明一方面为该缓释聚合物为可商购级别的羟丙基甲基纤维素或为 羟乙基纤维素。
适合使用的可商购聚合物的实例包括但不限于MethocelK4M(商标)、 Metolose 90SH(商标)、Methocel E5M(商标)、Methocel E50(商标)、Methocel E4M(商标)、Methocel E10M(商标)、Methocel E100M(商标)、Methocel K15M (商标)、Methocel K100M(商标)和Methocel K100LV(商标)，或POLYOX WSR N-80、Walocel HM 3PA 2910(商标)和Walocel HM 15PA 2910(商标)，及其组 合或混合物。
当所述延缓释放聚合物为羟丙基甲基纤维素时，其合适的存在量为约 15％至约50％，取决于HPMC级别。在一个实施方案中，该HPMC的存在 量为约20％至约45％w/w，也取决于所使用的HPMC级别，且其可为可获 得级别的混合物。如上所述，可获得各种类型和级别的HPMC。该羟丙基甲 基纤维素可为羟丙基甲基纤维素型2208，合适地满足标准药典如USP 28所 述的说明。HPMC型2208包含19-24％重量甲氧基和4-12％重量羟基丙氧基 取代基。HPMC类具有的标称粘度(norminal viscosity)为约100至约 100,000cP；举例来说合适的HPMC型2208标称粘度为约4,000cP，其测量 粘度为约3,000至约5,600cP。这种HPMC可通过以下获得，例如，得自 Dow Chemical Co.公司的Methocel K4M Premium，且基本相当的产物可从其 它制造商获得，例如得自Shinetsu的Metolose 90SH。
其它羟丙基甲基纤维素聚合物包括型2208USP 100cP、羟丙基甲基纤维 素2208USP 4,000cP、羟丙基甲基纤维素2208USP 15,000cP、羟丙基甲基 纤维素2208USP 100,000cP、羟丙基甲基纤维素2910USP 4,000cP、羟丙基 甲基纤维素2910USP 10,000cP或其混合物。
在一个实施方案中，优选所述羟丙基甲基纤维素为羟丙基甲基纤维素 2208USP 4,000cP或羟丙基甲基纤维素2910USP 4,000cP。该羟丙基甲基纤 维素可为任何单独的羟丙基甲基纤维素或为混合物。该HPMC K100和K4M 的centepoid值(在20℃下，2％于水中)分别为80-120和3000-5600。
其它已知延缓释放聚合物，在此也称为“天然延缓释放聚合物”，其可 包括水状胶体如天然或合成的胶、除以上所述之外的纤维素衍生物，碳水化 合物类物质如阿拉伯胶、黄蓍胶、槐豆胶、瓜尔胶、琼脂、果胶、角叉菜胶 (carragenen)、可溶的和不可溶的藻酸盐、壳聚糖、羧聚乙烯、酪蛋白、玉米 蛋白等，以及蛋白质类物质如明胶。可任选使用多于一种的此类聚合物、其 组合或与其它在此示例的聚合物的混合物。这些聚合物可单独使用或与亲水 性的或可胶化的聚合物组合使用。
该天然延缓释放聚合物在制剂中的存在量任选为约0.1％至约50％ w/w。
本发明一个实施方案为使用延缓释放聚合物Methocel E4M Grade和/或 Methocel K100LV。在本发明一个实施方案中，当所述缓释聚合物为Methocel K100LV或其相同级别时，该聚合物适合的存在量为约15至约50％w/w。在一 个实施方案中，该聚合物的存在量为约20％至约45％。在另一个实施方案中， 为约30至约45％w/w。
在本发明另一个实施方案中，当所述延缓释放聚合物为Methocel K4M 时，该聚合物适合的存在量为约15至约50％w/w。在一个实施方案中，所述 聚合物的存在量为约20％至约45％。在另一个实施方案中所述聚合物的存在 量为约20％至约29％。
所述持续释放制剂还可包含稀释剂，包括，但不限于填充型甜味剂(bulk sweetener)，如糖，例如葡萄糖、蔗糖、乳糖、糖果或粉糖和其组合或混合 物；或多元醇，如甘露糖醇、山梨糖醇、木糖醇、麦芽糖醇、麦芽糖和聚葡 萄糖和其组合或混合物。所述稀释剂还可适合为至少一种填充型甜味剂和至 少一种多元醇的组合。这种稀释剂的存在量可为约20至约70％重量。在本 发明一个实施方案中，所述稀释剂的存在量为约25至约55％w/w。
所述制剂还可包括粘合剂，如淀粉。适合在此使用的淀粉可得自任何适 合的植物来源，例如玉米、小麦、水稻、木薯淀粉、马铃薯等，且包括其改 性型式，如改良玉米淀粉、改良小麦淀粉、淀粉1500或预胶化淀粉；单独 或组合或以其混合物使用。某些淀粉具有的直链淀粉比例比支链淀粉高，例 如含至少约20％的直链淀粉。预胶化淀粉是一种改性淀粉，将其加工以使该 淀粉更易流动和可直接压缩。可使用部分或全部预胶凝的淀粉。所述淀粉的 存在量为片剂重量的约3％至约10％w/w。
其它合适的粘合剂包括低粘度纤维素衍生物，包括但不限于卡波姆、羟 丙基甲基纤维素(HPMC)、羟丙基纤维素(HPC)、MCC、羧甲基纤维素(CMC)、 羟基乙基纤维素(HEC)或甲基纤维素(MC)，以其组合或混合物。所述纤维素 的存在量为片剂重量的约1％至约10％。
其它合适的粘合剂是天然胶如阿拉伯树胶、阿拉伯胶(acacia)、角叉菜胶、 瓜尔胶或黄蓍胶，以其组合或混合物。所述胶的存在量为片剂重量的约1％ 至约10％。
其它可选的粘合剂包括聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、泊洛沙姆、PEG或聚甲 基丙烯酸酯，以其组合或混合物。可选的粘合剂的存在量为片剂重量的约1％ 至约10％。也已公认上述填充型甜味剂也可作为粘合剂使用，例如麦芽糖 糊精、甘露糖醇、山梨糖醇或聚葡萄糖。所有上述粘合剂可适合于彼此组合 或以混合物使用，这可由技术人员决定。
也已公认某些粘合剂也可以可溶胀的聚合物或作为天然延缓释放聚合 物存在，单独或与其它粘合剂组合。
所述持续释放制剂还可包括润滑剂以提高片剂从形成片剂的装置上释 放，例如通过防止粘结至上冲头(″采集(picking)″)或下冲头(″粘附(sticking)″) 表面。合适的润滑剂包括硬脂酸镁、硬脂酸钙、硬脂酸钠、低芥酸菜子油、 棕榈酰硬脂酰甘油酯、氢化植物油、氧化镁、矿物油、泊洛沙姆、聚乙二醇、 聚乙烯醇苯甲酸钠、月桂基硫酸钠、硬脂酰基富马酸钠、硬脂酸、Cab-O-Sil、 Syloid、滑石、氢化植物油、硬脂酸锌等。适合地，所述润滑剂的存在量为 片剂重量的约0.1％至约2.5％w/w。在一个实施方案中，所述润滑剂的存在 量为片剂重量的约0.5％重量。在另一个实施方案中，硬脂酸镁为该润滑剂， 存在量为片剂的约0.1％至约2.5％w/w。
所述持续释放制剂还可包括压缩助剂，例如微晶纤维素；磷酸钙(二水 合物或无水合物)、甘露糖醇、乳糖或山梨糖醇。该压缩助剂的存在量可为 约0至约80％，适合地为约10至约80％重量。也已公认某些稀释剂也可作 为压缩助剂，如麦芽糖糊精、甘露糖醇、山梨糖醇或聚葡萄糖。
所述缓释制剂还可包含崩解剂或超级崩解剂，如交联聚乙烯吡咯烷酮 (CLPVP)和淀粉羟乙酸钠，以及其组合或混合物；可选的聚维酮(聚乙烯吡咯 烷酮)。所述崩解剂的存在量可为约0至约70％重量。在本发明一个实施方 案中为约1％至约70％w/w。
可在压片之前和压片过程中使用流动性助剂或助流剂以提高粉末流动 性，从而减少结块。合适的助流剂包括胶体二氧化硅、三硅酸镁、粉状纤维 素、滑石、磷酸三钙等，任选以其组合或混合物。助流剂的存在量可高达片 剂重量的约2％，优选约0.2％至约0.6％重量。在本发明一个实施方案中所述 助流剂为胶体二氧化硅。
通常，所述持续释放制剂包含约1至20％重量的水溶性盐；0至约70％ 重量的稀释剂/压缩助剂；约0.1至约2.5％重量的润滑剂；和约15至约50％ 的缓释赋形剂。
本发明另一方面为包含8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟 基-1-(羟基甲基)乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮或其可药用盐和在片 剂一个或多个外表面的延缓释放涂层的制剂。在本发明一个实施方案中，该 可药用盐为水溶性盐，优选为甲苯磺酸盐。
所述延缓释放涂层可为薄膜涂层，其可压制或喷雾干燥，且可作为半渗 透屏障通过水不溶性聚合物或部分水溶性的聚合物从而控制药物释放的扩 散。或者该薄膜涂层可控制溶出速率。这种薄膜涂层，例如可由水或含水介 质基本上或完全不渗透的聚合物组成，或者该聚合物在水或含水介质或生物 液体中缓慢溶蚀和/或在与水或含水介质或生物液体接触时溶胀。适合地，所 述薄膜涂层应能保持这些特性至少到完全或基本上完全将活性物质内含物 传送至周围介质。这种薄膜涂覆的片剂也称为功能性薄膜涂覆的片剂。
适合用于薄膜涂层的聚合物包括但不限于丙烯酸酯、甲基丙烯酸酯、丙 烯酸或其酯的共聚物、纤维素和其衍生物如乙基纤维素、乙酸丙酸纤维素、 聚乙烯和聚乙烯醇等。包含在与水或含水介质接触时溶胀的聚合物的薄膜涂 层可溶胀至一定程度以使溶胀的层形成相对大的溶胀块，其尺寸延迟其从胃 到肠的快速释放。薄膜涂层的单独厚度通常为2微米至10微米。
适合用于薄膜涂层的相对不透水的聚合物包括羟丙基甲基纤维素聚合 物，例如上述Methocel(商标)系列的聚合物，例如Methocel K100M、Methocel K15M；Eudragit(商标)聚合物家族，Aquacoat(商标)，且可单独或组合使用， 或任选与Ethocel(商标)聚合物组合。适用于涂层的另一聚合物为 SURELEASE(商标)，其为含水乙基纤维素分散体。其可从Berwind Pharmaceuticals Services，Inc的部门COLORCON获得。此外，可使用 SURELEASE聚合物或其它合适的部分渗透的聚合物和起泡剂(例如 OPADAY，欧巴代，商标(YS-2-7013)，也从COLORCON获得)的混合物。 薄膜涂层聚合物的一个合适范围为片剂涂层的约3至约5％w/w。
所述涂层，如果存在的话，可任选包含其他的可药用赋形剂，如增塑剂、 染料等。一种合适的增塑剂为氢化的蓖麻油，其可与所述涂层聚合物组合。 所述薄膜涂层还可包括常规粘合剂、充填剂、润滑剂、着色剂如氧化铁或有 机染料，以及压缩助剂等如Polyvidon K30(商标)、硬脂酸镁和二氧化硅例如 Syloid 244(商标)。
如上所述的骨架片可用所述聚合物的水溶液压制或喷雾涂覆以生成薄 膜涂层。可以在本领域技术人员已知的任何标准涂层机中进行涂敷，例如 VectorTM机。
片剂可为任何合适尺寸和形状，例如圆形、卵形、多边形或枕形 (pillow-shaped)、椭圆形、盾形或胶囊形，浅至深的凸面和任选具有非功能 性表面印记。优选地，所述片剂为圆形或卵形的标准的凸面体。本发明的片 剂可包装在容器内，并具有提供相关信息的包装说明书，该相关信息例如剂 量和给药信息、禁忌、预防、药物相互作用和副作用。
在一个实施方案中，所述持续释放制剂包括；
a)约2.5至约25％重量的8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2- 羟基-1-(羟基甲基)乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮或其水溶性盐或可 药用盐；
b)约15至约50％重量的延缓释放聚合物；
d)约25至约55％重量的稀释剂；
c)0至约40％重量的压缩助剂；和
e)约0.1至约2.5％重量的润滑剂。
适合地，所述缓释聚合物为HPMC型2208或2910。在本发明一个实施 方案中，所述延缓释放聚合物为Methocel K100LV。在本发明另一个实施方 案中，当该延缓释放聚合物为HPMC型2208时，其存在量为约30至约45 ％w/w。在本发明另一个实施方案中，当为HPMC型2208时，其存在量为 约20至约25％w/w。
本发明组合物中存在的8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟 基-1-(羟基甲基)乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮的水溶性盐的量足以 提供每天一次性给药的日剂量。优选地，该全部日剂量在单一片剂中给予。
片剂中存在的8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基 甲基)乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮的水溶性盐的量适合为约0.5至 约30mg/片剂。在本发明一个方面，该8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯 基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)-乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮的水溶 性盐为片剂的约1％至约20％重量。适合地，该水溶性盐为甲苯磺酸盐。
在本发明另一个实施方案中，该8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯 基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮的水溶性 盐的存在量为每单位剂型(适合地为片剂)约0.5mg、0.75mg、1mg、2mg、3mg、 4mg、5mg、6mg、7mg、8mg、9mg、10mg、11mg、12mg、13mg、14mg、 15mg、16mg、17mg、18mg、19mg、20mg至约30mg。在本发明一个实施 方案中，所述水溶性盐为甲苯磺酸盐。
通常批量制备方法：
所述片剂可通过直接压片法或湿法制粒而制备，两种方法都为本领域技 术人员所熟知。如果使用常规直接压片法，首先将活性成分和赋形剂(除了 润滑剂)转移至合适大小的混合圆筒中，并混合。将混合物过筛/筛分然后进 一步混合。加入硬脂酸镁或其它合适润滑剂并进一步混合。通过本领域技术 人员已知的方法将润滑了的混合物压制成所需重量和物理规格的片剂。
或者，如果使用常规湿法制粒，将活性成分和赋形剂转移至合适大小的 造粒桶中并混合。使用喷雾器将水加入混合物中同时进行混合，直到形成颗 粒。然后干燥颗粒直到达到所需颗粒含水量，优选2.5％至3％含水量。将颗 粒过筛/筛分并混合。加入硬脂酸镁或其它合适润滑剂并进一步混合。通过本 领域技术人员已知的方法将润滑了的混合物压制成所需重量和物理规格的 片剂。
实施例1
8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基]氨 基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐速释(IR)制剂
用于1mg和5mg片剂的颗粒(Platform Granule)
成分                                      ％w/w
甲苯磺酸盐药物                            5.80
微晶纤维素(Avicel PH101)                  20.00
乳糖(常规一水合物)                        71.20
Kollidon(聚乙烯吡咯酮)30                  3.00
无菌水                                    适量
总共                                      100.00
用于5mg至10mg片剂的颗粒
成分                                      ％w/w
甲苯磺酸盐药物                            11.60
微晶纤维素(Avicel PH101)                  18.73
乳糖(常规一水合物)                        66.67
Kollidon 30                               3.00
无菌水                                    适量
总共                                      100.00
用于2.5mg片剂
成分                                      ％w/w
用于1mg至5mg片剂的颗粒                    20.00
乳糖(无水合物)                            24.88
微晶纤维素(Avicel PH102)                  49.77
淀粉羟乙酸钠(Glycolis)                    5.00
硬脂酸镁                                  0.35
总共                                      100.00
用于5mg片剂
成分                                      ％w/w
用于1mg至5mg片剂的颗粒                    40.00
乳糖(无水合物)                            18.22
微晶纤维素(Avicel PH102)                  36.43
淀粉羟乙酸钠(Glycolis)                    5.00
硬脂酸镁                                  0.35
总共                                      100.00
用于7.5mg片剂
成分                                      ％w/w
用于5mg至10mg片剂的颗粒                   30.00
乳糖(无水)                                21.55
微晶纤维素(Avicel PH102)                  43.10
淀粉羟乙酸钠(Glycolis)                    5.00
硬脂酸镁                                  0.35
总共                                      100.00
用于10mg片剂
成分                                      ％w/w
用于5mg至10mg片剂的颗粒                   40.00
乳糖(无水)                                18.22
微晶纤维素(Avicel PH102)                  36.43
淀粉羟乙酸钠(Glycolis)                    5.00
硬脂酸镁                                  0.35
总共                                      100.00
批量制备方法
将实施例1至5中每一个的适当颗粒的组分称重，并将其通过1mm筛进入 高减切制粒机桶(bowl)，如PMA65碗。使用速度为300rpm的叶轮将该成分干 燥混合3分钟。使用以约600g/分钟输送水的振动泵经4分钟添加结合用水。在 添加水时，叶轮速度为300rpm且斩波器(chopper)速度为I。加入水后，使用 同样的叶轮速度和斩波器速度II使该混合物湿聚集10分钟。
将该湿颗粒从该造粒桶倒入流化床干燥器，如Glatt 3/5。使用205m3/hr的 供气速率和70℃的入口温度干燥颗粒。颗粒干燥至LOD为约1至3％w/w。将 该颗粒通过0.094”comil筛碾磨。
适当量的载体颗粒和赋形剂(除了硬脂酸镁)称重并加至100L混合圆筒 中并用混合器(如Fordertechnik)以17rpm混合10分钟。称重硬脂酸镁并加至该 混合物中，以17rpm进一步搅拌该2分钟。使用合适的转盘式压片机，如 Betapress或等价物，将该混合物压至9.0mm圆形片剂，其靶重量为300mg(范 围从285mg至315mg)和靶厚度为4.5mm(范围从4.0mm至5.0mm)。
借助合适大小的桨式混合机，将所需量的欧巴代粉末分散于水中从而制 备12％w/w的含水膜涂层悬浮液(aqueous film coat suspension)。
将合适的涂膜机预热至40℃保持15分钟。将片芯加入涂膜机中并在 40℃以20rpm旋转。将含水膜涂层悬浮液以约4.5g/分钟喷雾至片芯上，直 到达到约3％的重量增加。
直接压片IR片剂的批量制备法
将药物和赋形剂(除了硬脂酸镁润滑剂)称重并转移至合适的混合圆筒或 混合器中，如Pharma-Tech立方混合器。然后将其一起以17rpm混合15分 钟。
过量硬脂酸镁通过250微米筛过筛并分配所需的量。然后将硬脂酸镁加 至混合物中，并以17rpm再混合1分钟。
然后将最终混合物转送至合适的转盘式压片机，如Killian并压至9.0mm 圆形片剂，其靶重量为300mg(285mg至315mg)和靶厚度为4.5mm(4.0mm 至5.0mm)。
在整个压制过程以有规律的间隔检测片剂重量、厚度和硬度以保证片剂 在规格之内。在开始和结束时进行脆碎性试验以保证片剂足够坚固以用于涂 覆。
借助合适大小的桨式混合机，将所需量的欧巴代粉末分散于水中从而制 备12％w/w的含水膜涂层悬浮液。
将合适的涂布器预热至40℃保持约15分钟，并装载片芯。然后使用 4.5g-6.0g/分钟的喷雾速率以20rpm的速度涂布片芯，直到施加约3％w/w 的薄膜涂层(基于片芯重)。
在整个涂布过程可以有规律的间隔监测片剂重量以确定膜涂层终点。
合适地采样涂布的片剂的最终样品以检测平均重量、厚度、硬度，并评 估涂层的质量。
实施例2
8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基]氨 基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐缓释(MR)制剂
具有30％聚合物的骨架片
在此使用的聚合物为Methocel K 100LV或Hypromellose 2208
组分                                 量(mg/片)(％w/w)：
8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基
苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)        10.44mg/6.96％w/w
乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶
-7(8H)-酮甲苯磺酸盐
乳糖(无水)                           71.01mg/47.3％w/w
微晶纤维素(Avicel PH200)             22.50mg/15.0％w/w
Methocel KL00LV                      45.00mg/30.00％w/w
硬脂酸镁                             0.75mg/0.50％w/w
二氧化硅(无水)                       0.30mg/0.20％w/w
                                     150mg总片剂重(100％)
批量制备方法
首先如上所述以以下量从散装容器(bulk containers)称重该组分。
将该药物、微晶纤维素、无水乳糖、羟丙甲纤维素2208和胶体二氧化硅 转移至混合圆筒或合适的混合器中，如Pharma-Tech立方混合器。然后将药 物和赋形剂一起以17rpm混合5分钟。将混合的成分通过0.032英寸筛过筛， 然后再以17rpm混合10分钟。将硬脂酸镁加至混合物中并以17rpm混合1分 钟。
使用合适的转盘式压片机将混合的药物和赋形剂压紧，压片机通常为 Fette 2090或等价物，压制成7.5mm圆形片剂，其靶压缩重量为150mg(142 至158mg)和靶厚度为3.0至3.5mm。
在整个压缩过程以合适间隔进行片剂重量和厚度的工序间控制，且视需 要对压片机进行调节。
实施例3
8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基]氨 基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐缓释(MR)制剂
具有40％聚合物的骨架片
聚合物为Methocel K 100LV或Hypromellose 2208
组分                                  量(mg/片)(％w/w)
8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基
苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)         10.44mg/6.96％w/w
乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶
-7(8H)-酮甲苯磺酸盐
乳糖(无水合物)                        39.26mg/26.17％w/w
微晶纤维素(Avicel PH200)              39.26mg/26.17％w/w
Methocel K4M                          60.00mg/40.00％w/w
硬脂酸镁                              0.75mg/0.50％w/w
二氧化硅(无水)                        0.30mg/0.20％w/w
                                      150mg总片剂重(100％)
批量制备方法
将这些组分以上述量从散装容器称重，并按实施例2指示进行加工，得 到剂量浓度(dosage strength)为7.5mg/片。
实施例4
8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基]氨 基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐缓释(MR)制剂
具有25％聚合物的骨架片
聚合物为Methocel K4MP或Hypromellose 2208
组分                                   量(mg/片)(％w/w)
8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基
苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)          10.44mg/6.96％w/w
乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶
-7(8H)-酮甲苯磺酸盐
乳糖(无水合物)                         50.51mg/33.67％w/w
微晶纤维素(Avicel PH200)               50.51mg/33.67.0％w/w
Methocel K4M                           37.50mg/25.00％w/w
硬脂酸镁                               0.75mg/0.50％w/w
二氧化硅(无水)                         0.30mg/0.20％w/w
                                       150mg总片剂重(100％)
批量制备方法
将这些组分以上述量从散装容器称重，并按实施例2指示进行加工，得 到的剂量浓度(dosage strength)为7.5mg/片。
实施例5
8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基]氨 基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐缓释(MR)制剂
具有29％聚合物的骨架片
聚合物为Methocel K4M或Hypromellose 2208
组分                                   量(mg/片)(％w/w)
8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基
苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)            3.5mg/1.13％w/w
乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶
-7(8H)-酮甲苯磺酸盐
乳糖(一水合物)                           205.1mg/66.38％w/w
Methocel K4M                             90.0mg/29.13％w/w
硬脂酸镁                                 1.5mg/0.49％w/w
欧巴代膜涂层                             9.0mg/2.91％w/w
无菌水                                   适量
                                         309mg总片剂重(100％)
批量制备方法
除了硬脂酸镁和欧巴代膜涂层，将所有材料以上述实施例5的量称重装 入造粒桶中。使用叶轮以300rpm将粉末在Eurovent制粒机中混合3分钟。
将叶轮设定为500rpm且斩波器设定为1000rpm，然后使用设定为1bar 的喷雾器将水以9g/分钟加至混合物中，直到制备成可接受的颗粒，该颗粒 使用同样设定的叶轮和斩波器湿法制粒(wet massed)5分钟。将湿颗粒转移 至合适的干燥器中，将其在60℃干燥，直到干燥失重约3％。
将颗粒转移至玻璃紊流瓶(glass turbulajar)中并将硬脂酸镁加至该瓶中。 将粉末以22rpm混合1分钟。使用合适的压片机将混合的颗粒和硬脂酸镁 压片成9.0mm圆形片剂，其靶压缩重量为300mg(291至309mg)和靶厚度 为4.1至4.5mm。
在整个压缩过程以合适间隔进行片剂重量和厚度的工序间控制，且视需 要对压片机进行调节。
借助合适大小的桨式混合机，将所需量的欧巴代粉末分散于水中从而制 备12％w/w的水膜涂层悬浮液。将合适的涂膜机预热至80℃保持1小时。 将片芯加入涂膜机中并在80℃以20rpm旋转。将水膜涂层悬浮液以约4.5g/ 分钟喷雾至片芯上，直到达到约3％的重量增加。
实施例6
8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基]氨 基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐缓释(MR)制剂
具有27％聚合物的骨架片
聚合物为Methocel K4M或Hypromellose 2208
组分                                     量(mg/片)(％w/w)
8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基
苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)           10.4mg/3.37％w/w
乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶
-7(8H)-酮甲苯磺酸盐
乳糖(一水合物)                          154.7mg/50.06％w/w
微晶纤维素                              49.5mg/16.02％w/w
Methocel K4M                            84.0mg/27.18％w/w
硬脂酸镁                                1.5mg/0.49％w/w
欧巴代膜涂层                            9.0mg/2.91％w/w
无菌水                                  适量
                                        309mg总片剂重(100％)
批量制备方法
将这些组分以上述量从散装容器称重，并按实施例5指示进行加工，得 到的剂量浓度为7.5mg/片剂。
在本发明一个实施方案中，本发明的组合物视需要可与一种或多种必需 的或所需的其它药物或药物前体组合治疗给药。
在此术语“组合治疗(combination therapy)”是指一种治疗方法，其中本 发明组合物提供的药剂和第二药剂单独或一起、依次或同时以使这些药剂共 同作用产生有益效果的方式给药。这些有益效果可包括，但不限于，这些治 疗剂的药物动力学或药效学的共同作用。组合治疗可以，例如，以比单一治 疗时的正常给药低的剂量给药一种或两种药剂，从而降低高剂量给药产生的 不利影响的风险或发生率。或者，组合治疗可以导致在每种药剂单一治疗时 的正常剂量下产生增加的治疗效果。在此“组合治疗”并不包括作为独立的 单一治疗方案的一部分的两种或更多种治疗剂的给药，该单一治疗方法偶然 和任意地导致依次或同时的治疗。
本发明的组合物可特别适合于组合治疗，尤其适合于其中第二药剂是或 可以是每天给药一次的药剂。当组合治疗中的两种组分可同时并以相同频率 给药时，在患者便利性和适应性方面有明显优点。
当同时给药时，该组合治疗的两种组分可以单独剂型或以共制剂形式 (即单一剂型)给药。当以依次或单独剂型给药时，该第二药剂可通过任何适 合的途径以任何可药用剂型给药，例如以不同于本发明组合物的途径和/或剂 型。在一个优选实施方案中，组合治疗的两种组分都配制在一个单一剂型中。
确切的剂量和给药频率取决于被治疗的症状的严重性、具体患者的重 量、通常身体条件、患者可能经受的其它药物治疗，其是本领域技术人员熟 知的，且可通过测量患者血中8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2- 羟基-1-(羟基甲基)乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮游离碱的血中含量 或浓度和/或患者对被治疗的具体症状的反应来确定。
适合地，在组合治疗类风湿性关节炎中，8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲 基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮的水 溶性盐，尤其是甲苯磺酸盐，可与缓解疾病的抗风湿性药物(DMARDs)组合 治疗给药，缓解疾病的抗风湿性药物如阿巴西普(abatacept)(Orencia)、依那 西普(entanercept)(Enbrel)、英夫利昔单抗(infliximab)(Remicade)；阿达木 单抗(adalimumab)(Humira)、甲氨蝶呤(MTX)、羟氯喹(Plaquenil)、柳 氮磺吡啶(Azulfidine)、来氟米特(Arava)、阿那白滞素(Kineret)、利妥昔 单抗(rituximab)(Rituxin)或各种皮质类固醇，如泼尼松；NSAID’s、COX-2 抑制剂(Vioxx、Celebrex、Bextra)、非乙酰化水杨酸盐(Trilisate或Disalcid)； 单独或互相组合。其它不经常使用的DMARD包括但不限于硫唑嘌呤、环孢 霉素、D-青霉胺、金盐和米诺环素，单独或与其它DMARD组合。最近已知 称为他汀类药物(阿托伐他汀、氟伐他汀、洛伐他汀、普伐他汀、罗苏伐他 汀和辛伐他汀)的药物种类被建议用于治疗类风湿性关节炎。与这些药剂一 起使用的支持性选项，包括元素钙、维生素D、激素取代疗法和抗再吸收剂， 以及雷洛昔芬(通常用于与低剂量皮质类固醇组合治疗)。其它用于与NSAID 或COX-2抑制剂组合的支持性药剂包括使用胃保护药剂，如质子泵抑制剂 或口服前列腺素类似物(Cytotec)。
尽管认识到这些DMARDs的频率、持续时间和剂量会随着被治疗的症 状的严重性、具体患者的体重、通常身体条件，以及患者可采用其它的药物 治疗而改变，但下表为维持疗法所推荐的剂量日程表，其是本领域技术人员 熟知的。
  药物   维持疗法的常用剂量   甲氨蝶呤   口服：7.5-20mg/周   注射用：7.5-20mg/周   羟氯喹(Plaquenil)   200mg每日两次   柳氮磺吡啶(Azulfidine)   1,000mg每日2-3次   来氟米特(Arava)   如果耐受，单剂量20mg/天。   如果不耐受，10mg/天。   依那西普(Etanercept)   (Enbrel)   每周25mg SCb两次   英夫利昔单抗(Remicade)   和甲氨蝶呤   每8周3-10mg/kg IVb或   每4周3-5mg/kg IVb   阿达木单抗(Humira)   每隔一周40mg或   每周40mg SCb   阿那白滞素(Kineret)   每天100mg SCb   皮质类固醇   每天＜10mg的泼尼松或等价物
bSC＝皮下；IV＝静脉输液
具体的合成中间体，如在本文所述的，在以下用于详细合成8-(2，6-二氟 苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基]氨基}吡啶并[2，3-d] 嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐的方案图(方案1)中阐明，该方案图是制备式(II)和 (III)的化合物的通用方法的代表，其中在式(II)和(III)的化合物中S(O)m-Rg 基团可被合适的“X”基团替代/反应，如在以下所示或如在许多专利申请如 WO 02/059083、WO 04/073628、US 6,809,199、WO 2006104889、WO 2006/104915、WO 2006/104917和US 2006217401中所述。用于该反应的合适 的起始原料和中间体是本领域熟知的，其可通过标准方法制备，也可在上述 申请中找到，这些申请的公开在此引入作为参考。
而且，这些方案中的化合物具有视为S(O)m-Rg基团的代表的S-甲基， 这仅仅是用来举例说明本发明化合物的制备，以及具体的R1、R1′、R3、Rg、 m、s和t，其也视为是式(II)、(III)和(IV)的化合物的取代基的代表，其也更 详细的在此描述。
在合成本发明的化合物(如式(III)化合物)过程中可能需要在进行反应的 分子中衍生活性官能团以避免不希望的副反应。官能团如羟基、氨基和酸根 通常被合适基团保护，该合适基团可在需要时轻易除去。用于羟基和氮基团 的合适的常用保护基团是现有技术中熟知的且在许多文献中描述，例如 Protecting Groups in Organic Synthesis，Greene等人，John Wiley&Sons，New York，New York，(2nd版，1991或更早的1981版)。合适的羟基保护基团的实 例包括成醚基团如苄基和芳基，如叔丁氧基羰基(Boc)，甲硅烷基醚，如叔丁 基二甲基或叔丁基二苯基，和烷基醚，如被可变连接基的烷基链连接的甲基。 氨基保护基可包括苄基、芳基如乙酰基和三烷基甲硅烷基。羧酸基团通常通 过转变为酯而保护，该酯容易被水解，例如三氯乙基(trichloethyl)、叔丁基、 苄基等。
方案1

方案2

方案2是制备中间体(3)的合成途径的描述，该中间体(3)为式(IV)的代表 性化合物且其在本文许多合成实施例中出现。
本发明另一方面是下式表示的式(II)的新化合物：

其中
R1独立地选自氢、C(Z)N(R10’)(CR10R20)vRb、C(Z)O(CR10R20)vRb、 N(R10’)C(Z)(CR10R20)vRb、N(R10’)C(Z)N(R10’)(CR10R20)vRb或 N(R10’)OC(Z)(CR10R20)vRb；
R1′在各种情况下独立地选自氢、卤素、C1-4烷基、卤素取代的-C1-4 烷基、氰基、硝基、(CR10R20)v’NdRd’、(CR10R20)v’C(O)R12、SR5、S(O)R5、 S(O)2R5或(CR10R20)v’OR13；
R3在各种情况下独立地选自氢、卤素、C1-4烷基或卤素取代的C1-4烷 基；
R4和R14在各种情况下各自独立地选自氢或C1-4烷基，或R4和R14 和与其连接的氮一起形成5至7元杂环，该环任选含有选自NR9的其它杂 原子；
R5在各种情况下独立地选自氢、C1-4烷基、C2-4链烯基、C2-4炔基或 NR4R14，以下情况除外：SR5是SNR4R14，S(O)2R5是SO2H和S(O)R5是 SOH；
R9和R9′在各种情况下独立地选自氢或C1-4烷基；
R12在各种情况下独立地选自氢、C1-4烷基、卤素取代的C1-4烷基、 C2-4链烯基、C2-4炔基、C3-7环烷基、C3-7环烷基C1-4烷基、C5-7环烯 基、C5-7环烯基C1-4烷基、芳基、芳基C1-4烷基、杂芳基、杂芳基C1-4烷 基、杂环基或杂环基C1-4烷基，且其中除氢外，这些基团中每个可任选被 取代；
R13在各种情况下独立地选自氢、C1-4烷基、卤素取代的C1-4烷基、 C2-4链烯基、C2-4炔基、C3-7环烷基、C3-7环烷基C1-4烷基、C5-7环烯 基、C5-7环烯基C1-4烷基、芳基、芳基C1-4烷基、杂芳基、杂芳基C1-4 烷基、杂环基或杂环基C1-4烷基，且其中除氢外，这些基团中每个可任选 被取代；
Rd和Rd’在各种情况下各自独立地选自氢、C1-4烷基、C3-6环烷基、 C3-6环烷基C1-4烷基，且其中除氢外，这些基团中每个可任选被取代；或 Rd和Rd’和与其连接的氮一起形成任选取代的5至6元杂环，该环任选包含 其它选自氧、硫或NR9’的杂原子；
Rb为氢、C1-10烷基、C3-7环烷基、C3-7环烷基C1-10烷基、芳基、 芳基C1-10烷基、杂芳基、杂芳基C1-10烷基、杂环基或杂环基C1-10烷基， 除氢外，这些基团都任选被取代；
Rg为C1-10烷基或芳基；
m为0，或1或2的整数；
s为1、2、3或4的整数；和
t为1、2、3或4的整数。
v为0，或1或2的整数；
v’在各种情况下独立地选自0，或1或2的整数；
Z独立地选自氧或硫；
R10和R20在各种情况下独立地选自氢或C1-4烷基；和
R10′在各种情况下独立地选自氢或C1-4烷基。
适合地，R1′在各种情况下独立地选自氢、卤素、C1-4烷基、卤素取代 的-C1-4烷基、氰基、硝基、(CR10R20)v’NRdRd’、(CR10R20)v’C(O)R12、 SR5、S(O)R5、S(O)2R5或(CR10R20)v’OR13。
在一个实施方案中，R1′独立地选自氢、卤素、C1-4烷基或卤素取代的 -C1-4烷基。该卤素优选选自氟或氯，该C1-4烷基为甲基，和该卤素取代的 -C1-4烷基为CF3。在另一个实施方案中，R1′独立地选自氢、卤素或C1-4 烷基。优选地卤素选自氟或氯，且该C1-4烷基为甲基。在本发明一个实施 方案中，所述苯环被氟或甲基独立取代1或2次。
适合地，s为1、2、3或4的整数。优选当s为1时，R1为氢。
适合地，R1独立地选自氢、C(Z)N(R10’)(CR10R20)vRb、 C(Z)O(CR10R20)vRb、N(R10’)C(Z)(CR10R20)vRb、 N(R10’)C(Z)N(R10’)(CR10R20)vRb或N(R10’)OC(Z)(CR10R20)vRb。
在一个实施方案中，R1为C(Z)O(CR10R20)vRb，Rb为C1-10烷基，Z 为氧和v为0。优选地，Rb为甲基。
在一个实施方案中，R1为C(Z)O(CR10R20)vRb，Rb为甲基，Z为氧， v为0，和R1’为甲基。优选地，R1在5-位而R1’在2-位。
该苯环当被R1’取代时，优选在2、4或6-位，或在2，4-位二取代，如 2-氟、4-氟、2，4-二氟或2-甲基-4-氟；或在2，4，6-位三取代如2，4，6-三氟。
该苯环当被R1取代时，如果R1′为氢优选在2-位，当R1’不是氢时在 5-位。优选当该环被R1和R1’二取代时其在2，5-位被取代。更优选R1′在2- 位，且R1在5-位。
适合地，R4和R14在各种情况下各自独立地选自氢或C1-4烷基，或 R4和R14和与其连接的氮一起形成5至7元杂环，该环任选包含选自NR9’ 的其它杂原子。
适合地，R5在各种情况下独立地选自氢、C1-4烷基、C2-4链烯基、C2-4 炔基或NR4R14，以下情况除外：SR5是SNR4R14，S(O)2R5是SO2H和 S(O)R5是SOH。
适合地，R9和R9′在各种情况下独立地选自氢或C1-4烷基。
适合地，R12在各种情况下独立地选自氢、C1-4烷基、卤素取代的C1-4 烷基、C2-4链烯基、C2-4炔基、C3-7环烷基、C3-7环烷基C1-4烷基、C5-7 环烯基、C5-7环烯基C1-4烷基、芳基、芳基C1-4烷基、杂芳基、杂芳基 C1-4烷基、杂环基或杂环基C1-4烷基，且其中除氢外，这些基团中每个可 任选被取代。
适合地，R13在各种情况下独立地选自氢、C1-4烷基、卤素取代的C1-4 烷基、C2-4链烯基、C2-4炔基、C3-7环烷基、C3-7环烷基C1-4烷基、C5-7 环烯基、C5-7环烯基C1-4烷基、芳基、芳基C1-4烷基、杂芳基、杂芳基 C1-4烷基、杂环基或杂环基C1-4烷基，且其中除氢外，这些基团中每个可 任选被取代。
适合地，Rd和Rd’在各种情况下各自独立地选自氢、C1-4烷基、C3-6 环烷基、C3-6环烷基C1-4烷基，且其中除氢外，这些基团中每个可任选被 取代；或Rd和Rd’和与其连接的氮一起形成任选取代的5至6元杂环，该 环任选包含其它选自氧、硫或NR9’的杂原子。
适合地，Rb为氢、C1-10烷基、C3-7环烷基、C3-7环烷基C1-10烷基、 芳基、芳基C1-10烷基、杂芳基、杂芳基C1-10烷基、杂环基或杂环基C1-10 烷基，除氢外，这些基团都任选被取代。
适合地，Rg为C1-10烷基或芳基。在本发明一个实施方案中，Rg为 C1-4烷基，优选甲基或丙基，更优选甲基。
适合地，m为0，或1或2的整数。在本发明一个实施方案中，m为0。 在本发明另一个实施方案中，m为0，和Rg为甲基或丙基，优选甲基。
适合地，s为1、2、3或4的整数。
适合地，t为1、2、3或4的整数。
适合地，v为0，或1或2的整数。
适合地，v’在各种情况下独立地选自0，或1或2的整数。
适合地，Z独立地选自氧或硫。
适合地，R10和R20在各种情况下独立地选自氢或C1-4烷基。
适合地，R10′在各种情况下独立地选自氢或C1-4烷基。
适合地，R3独立地选自氢、卤素、C1-4烷基或卤素取代的C1-4烷基。 优选该卤素为氟或氯，该C1-4烷基为甲基，和该卤素取代的-C1-4烷基为 CF3。更优选地，所述苯环被R3取代，该R3在各种情况下独立地选自卤素 或C1-4烷基，例如氟或甲基。在本发明一个实施方案中，所述苯环被氟独 立地取代1、2或3次，例如t为1、2或3。
优选地，该苯环当被R3取代时是在2、4或6-位，或在2，4-位二取代， 如2-氟、4-氟、2，4-二氟或2，6-二氟、2-甲基-4-氟；或在2，4，6-位三取代，如 2，4，6-三氟。
在本发明一个实施方案中，当t为1，R3为氢。
式(III)化合物由以下结构表示：

其中
R1独立地选自氢、C(Z)N(R10’)(CR10R20)vRb、C(Z)O(CR10R20)vRb、 N(R10’)C(Z)(CR10R20)vRb、N(R10’)C(Z)N(R10’)(CR10R20)vRb或 N(R10’)OC(Z)(CR10R20)vRb；
R1′在各种情况下独立地选自氢、卤素、C1-4烷基、卤素取代的-C1-4 烷基、氰基、硝基、(CR10R20)v’NRdRd’、(CR10R20)v’C(O)R12、SR5、S(O)R5、 S(O)2R5或(CR10R20)v’OR13；
R3在各种情况下独立地选自氢、卤素、C1-4烷基或卤素取代的C1-4烷 基；
R4和R14在各种情况下各自独立地选自氢或C1-4烷基，或R4和R14 和与其连接的氮一起形成5至7元杂环，该环任选包含其它选自NR9的杂 原子；
R5在各种情况下独立地选自氢、C1-4烷基、C2-4链烯基、C2-4炔基或 NR4R14，以下情况除外：SR5是SNR4R14，S(O)2R5是SO2H和S(O)R5 是SOH；
R9和R9′在各种情况下独立地选自氢或C1-4烷基；
R12在各种情况下独立地选自氢、C1-4烷基、卤素取代的C1-4烷基、 C2-4链烯基、C2-4炔基、C3-7环烷基、C3-7环烷基C1-4烷基、C5-7环烯 基、C5-7环烯基C1-4烷基、芳基、芳基C1-4烷基、杂芳基、杂芳基C1-4 烷基、杂环基或杂环基C1-4烷基，且其中除氢外，这些基团中每个可任选 被取代；
R13在各种情况下独立地选自氢、C1-4烷基、卤素取代的C1-4烷基、 C2-4链烯基、C2-4炔基、C3-7环烷基、C3-7环烷基C1-4烷基、C5-7环烯 基、C5-7环烯基C1-4烷基、芳基、芳基C1-4烷基、杂芳基、杂芳基C1-4 烷基、杂环基或杂环基C1-4烷基，且其中除氢外，这些基团中每个可任选 被取代；
Rd和Rd’在各种情况下各自独立地选自氢、C1-4烷基、C3-6环烷基、 C3-6环烷基C1-4烷基，且其中除氢外，这些基团中每个可任选被取代；或 Rd和Rd’和与其连接的氮一起形成任选取代的5至6元杂环，该环任选包含 其它选自氧、硫或NR9’的杂原子；
Rb为氢、C1-10烷基、C3-7环烷基、C3-7环烷基C1-10烷基、芳基、 芳基C1-10烷基、杂芳基、杂芳基C1-10烷基、杂环基或杂环基C1-10烷基， 除氢外，这些基团都任选被取代；
Rg为C1-10烷基或芳基；
m为0，或1或2的整数；
s为1、2、3或4的整数；和
t为1、2、3或4的整数。
V为0，或1或2的整数；
v’在各种情况下独立地选自0，或1或2的整数；
Z独立地选自氧或硫；
R10和R20在各种情况下独立地选自氢或C1-4烷基；和
R10′在各种情况下独立地选自氢或C1-4烷基。
式IV的化合物由以下结构表示：

其中R1、R1′、R3、s和t等都如上式(II)所述，Rg为C1-10烷基或芳基， 且m为0、1或2。
适合地，Rg为C1-10烷基或芳基，优选Rg为C1-4烷基，更优选甲基 或丙基。在本发明一个实施方案中，m为0且Rg为甲基或丙基，优选甲基。
尽管方案I说明了用硫代乙酸盐衍生物的脱羧步骤，但可以使用任何硫 代酸衍生物，例如硫代乙酸、硫代苯甲酸和硫代丙酸或其盐。合适的硫代酸 的盐，如钾、钠、钙、镁、铯或锂盐都在本发明范围内。硫代酸的pKa范围 为＜0。因此，应当相信所使用的硫代酸的一个重要特征是其相应硫代羧酸盐 衍生物的亲核性。相信使用任何合适的硫代酸以在吡啶环或双环吡啶嘧啶环 上实现脱羧作用是该方法的一个新的特征。
该反应可包含使用任何有机溶剂，任选与水组合。适合地该有机溶剂是 沸点可高达110℃或在该溶剂回流时的有机溶剂。溶剂包括但不限于THF、 乙酸乙酯、DIPEA、吡啶、甲苯、N，N-二甲基甲酰胺、N-甲基吡咯烷、二氯 甲烷、二噁烷或乙腈。在本发明一个实施方案中所述有机溶剂是THF或甲苯。
尽管温度通常不是该反应的关键，但典型地温度稍高于室温，适合地约 30℃。在30℃以下该反应以较慢速度进行。在一个实施方案中，该反应在 约20至约50℃下进行。
在本发明一个实施方案中所述硫代酸为硫代乙酸钾、硫代乙酸钠、硫代 乙酸钙、硫代乙酸镁、硫代乙酸铯或硫代乙酸锂。
因此本发明的一个新方法，如以下方案3所示，是式(II)化合物的脱羧 作用，其如上所示使用硫代酸衍生物以生成式(III)化合物，其中s、t、m、 Rg、R1、R1’和R3如上述式(II)所述：
方案3

在本发明一个实施方案中，适合地，m为0。在本发明另一个实施方案 中，m为0，且Rg为C1-10烷基，优选甲基或丙基，更优选甲基。
本发明另一方面是式(IV)化合物环化生成式(II)化合物的新方法，其在有 机溶剂中使用麦德鲁姆酸或适合的等价物如丙二酸(未环化的)和合适碱。以 前已经在苯底物上使用麦德鲁姆酸生成双环体系，如Suzuki，M.，等人，Chem. Pharm.Bull.，49(1)，29(2001)；Suzuki，M.等人，Heterocycles，53(11)2471 (2000)；或Kaneko，T.，等人，Jpn.Kokai Tokkyo Koho，10245374，14Sept.1998， Heisei中所示的。然而，认为使用式(IV)的嘧啶底物生成式(II)的双环体系是 新的。使用丙二酸也应认为是同样新的。Blano，M.等人，Heterocycles，36(6) 1387(1993)；Hayes，R.等人，Tetrahydron Lett.，23(15)，1613(1982)；和 Lippmann，E.等人，Zeitschrift fur Chemie，19(11)，422(1979)。
在此使用的合适碱包括无机和有机碱。
适合在此使用的有机碱包括但不限于2，3-二甲基吡啶、2，4，6-三甲基吡 啶、2，5-二甲基哌嗪、2，6-二甲基哌啶、2，6-二叔丁基吡啶、2，6-二甲基吡啶、 2-甲基哌啶、4-甲基苄胺、4-甲基环己胺、4-甲基吗啉、4-苯基吗啉、苄胺、 丁胺、环己胺、环戊胺、DABCO、DBN、DBU、二环己胺、二乙胺、二己 胺、二异丙基胺、DIPEA、二苯胺、二丙基胺、二仲丁基胺、DMAP、乙胺、 异丁胺、异戊胺、异丙基胺、异喹啉、吗啉、N-乙基哌啶、N-甲基丁胺、 N-甲基哌嗪、N-甲基哌啶、哌嗪、哌啶、吡啶、吡咯烷、喹啉、仲丁胺、叔 丁胺、四甲基吡嗪、三丁胺、三乙胺、三丙胺。
在本发明一个实施方案中，所述有机碱为2，4，6-三甲基吡啶、DIPEA、 DBN、二己胺、二乙胺、二仲丁基胺、二甲基胺、异丙基胺、二丙基胺、异 喹啉、2，6-二甲基吡啶、N-甲基哌啶、2，6-二甲基哌啶、吡啶、吡咯烷或三乙 胺。
适合在此使用的无机碱包括但不限于氨、碳酸钡、氢氧化钡、碳酸钙、 氢氧化钙、碳酸铯、氢氧化铯、碳酸锂、氢氧化锂、碳酸镁、氢氧化镁、乙 酸钾、氨基钾、碳酸钾、磷酸二氢钾、乙醇钾、氢化钾、碳酸氢钾、磷酸氢 钾、氢氧化钾、甲醇钾、磷酸钾、叔丁醇钾、碳酸铷、乙酸钠、氨基钠、碳 酸钠或甲醇钠。
在本发明一个实施方案中，所述无机碱为氢氧化铯、碳酸铯和乙酸盐如 乙酸钠、乙酸铯、乙酸镁、乙酸钙或乙酸钾。
在另一个实施方案中所述碱为乙酸钠、乙酸钾或乙酸铯、2，6-二甲基哌 啶、DIPEA、2，4，6-三甲基吡啶或二己胺。
如工作实施例所述，所述碱可分为液体或固体碱，以替代无机/有机碱。 在可选条件下，认为实施例中所述的固体碱将通过例如使用亲脂性溶剂或变 化反应温度而起作用。
适合地，所述反应高于室温，例如40至70℃或更高。在一个实施方案 中，该反应在约55℃+/-10℃下进行。
适合地，该有机溶剂为沸点可高达110℃或在该溶剂回流时的有机溶剂。 适合在此使用的有机溶剂包括但不限于三氟甲苯、三甘醇二甲基醚、三甘醇、 三乙胺、三氯乙烷、甲苯、四氢呋喃、四甘醇、叔丁基甲基醚、喹诺酮、吡 啶、乙酸丙酯、丙酸、丙腈、2-丙醇、正丙醇、哌啶、戊烷、3-戊酮、2-戊 醇、壬烷、N-甲基甲酰胺、N-甲基乙酰胺、硝基甲烷、硝基苯、乙酸正丁酯、 N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺、甲基异丁基酮、乙酸甲酯、甲醇、 乙酸异丙酯、HMPT、己烷、庚烷、甲酰胺、氟苯、乙基苯、乙酸乙酯、乙 氧基苯、乙醇、DMPU、DMEU、二丙基醚、二苯基醚、二甲亚砜、二异丙 基醚、二乙基醚、二甘醇二甲醚、二甘醇、碳酸二乙酯、二氯甲烷、二丁基 醚、环已酮、环己醇、环己烷、顺-萘烷、氯仿、氯苯、2-丁酮、2-丁醇、正 丁醇、苯甲醇、苄腈、苯甲醚、苯乙酮、乙腈、丙酮、乙酸、4-甲基-1，3-二 氧杂环戊烯-2-酮、3-戊醇、3-甲基-1-丁醇、3-甲基-2-丁酮、3，3-二甲基-2-丁 酮、2-戊酮、2-甲基-2-丙醇、2-甲基-2-丁醇、2-甲基-1-丙醇、2-甲氧基乙醇、 2-氨基乙醇、2，6-二甲基-3-庚酮、2，4-二甲基-3-戊酮、2，2，4-三甲基戊烷、1- 戊醇、1-甲基-2-吡咯烷酮、1，4-二噁烷、1，4-二甲基苯、1，3，5-三甲基苯、1，2- 乙二醇、1，2-二甲氧基乙烷、1，2-二氯乙烷、1，2-二氯苯、1，1，3，3-四甲基脲、 1，1，1-三氯乙烷、2-甲基-四氢呋喃，所有物质当使用时任选与水组合。
在本发明一个实施方案中，合适的溶剂包括THF、DIPEA、吡啶、甲苯、 N，N-二甲基甲酰胺、N-甲基吡咯烷、二氯甲烷、二噁烷或乙腈。应当注意到， 在一些情况下有机碱也可用作溶剂，如在DIPEA或吡啶的情况下。在本发 明另一个实施方案中，所述有机溶剂为THF或甲苯。
治疗研究方法
按照开标(open-label)、4-向、随机交叉设计的研究在18至55岁的健康 男性和女性受试者中进行。在研究过程中，受试者以单个中心(at a single center)接受四种处理的每一种。共登记26名受试者。这些受试者禁食过夜然 后给予7.5mg口服剂量的8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基 -1-(羟基甲基)-乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮。在IR制剂的情况下， 其以7.5mg(由2.5mg和5mg片剂组成)提供，在早晨给予；在本文实施例2 至4的MR制剂的情况下，单一的7.5mg片剂在早晨给予。在48小时的期 间内采取一系列血样用于药物动力学评估。在相同期间内记录不良事件。
通过HPLC-MS/MS方法定量血浆浓度并确认。所有检测应满足校正标 准和质量控制的生物分析验收标准。
通过标准非分段方法(standard non-compartmental method)评估8-(2，6-二 氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基]氨基}吡啶并 [2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐的PK参数。每个受试者中单独的血浆浓度 数据和血样的实际时间点用于分析。药物动力学参数包括曲线下面积(AUC)、 最大观测血浆浓度(Cmax)、Cmax的时间(Tmax)、排出半衰期(T1/2)、和给药 后24小时的血浆浓度(C24)。
任选地，每种MR制剂的体外/体内相互关系可通过评估体内吸收作为 体外溶解的函数的线性关系来测定。
该研究应测定在本文使用的各种参数，如Tmax、Cmax、Cmin、AUC0- 无穷大。
Cmax在现有技术中已充分理解为受试者的血清或血浆的最大药物浓度 的缩写。体内试验方案可以以多个方式设计。通过测定给予试验组合物的人 群的Cmax并将其与给予对照物的同样人群的Cmax进行比较，从而可评估 试验组合物。
AUC为沿着纵座标(Y-轴)的药物血清或血浆浓度与沿着横座标(X-轴)的 时间的所绘曲线下面积(AUC)的定义。通常，AUC值表示从患者测试人群中 的所有受试者得到的许多值，因此，AUC值为从整个测试人群平均得到的 平均值。通过测定给予试验组合物的人群的AUC，并将其与给予对照物的 同样人群的AUC进行比较，从而可将试验组合物进行评估。或者，可测定 每个受试者的AUC试验/AUC对照的比例，然后进行平均。AUC的方法在 药物技术中已被充分理解，且经常使用的工具，且已被广泛描述，例如在 ″Pharmacokinetics Processes and Mathematics″，Peter E.Welling，ACS Monograph 185；1986。
因此，如果组合物产生的体内Cmax或AUC至少为速释制剂(作为比较 者)的0.80至1.25倍，则该组合物在本发明的范围内，该速释制剂包括等量 的药物和赋形剂，但无聚合物。
Cmax和AUC可在人或合适动物模型(如狗)中测定。缩写：AUC0-24＝0-24 小时的浓度-时间曲线下面积；AUC0-无穷大＝0-无穷大的浓度-时间曲线下面积； Cav＝24小时内的曲线下面积(AUC0-24)除以24小时的计算值；Cmax＝血浆中 的最大浓度；t1/2＝半衰期；tmax＝血浆中最大浓度的时间。本文所用的“变异 系数”具有其标准含意，即标准偏差与Cmax或AUC的平均值的比。
可以使用计算机模拟方式授权的Gastro-Plus(Simulations Plus，Inc.)，来 计算本文实施例2至4的MR片剂的PK参数，人的数据是可得到的。上述 治疗研究方法提供实施例2至4的IR片剂和MR片剂的以下PK参数(平均 值+/-标准偏差)：AUC0-无穷大(ng h/ml)分别为86.8(IR)；82.9；75.7；和62.6； Cmax(ng/ml)分别为37.5(IR)；16.6，10.5；5.59；Tmax(h)分别为642(IR)； 3.13；3.41；和3.25。
实施例2的MR剂型进行体外测试，当通过USP 1篮式方法(USP I，章 <711>)以150rpm在500ml的0.01M盐酸中于37℃测量时，提供以下体外溶出 速率：1小时后释放小于或等于20％的8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯 基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)-乙基]-氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺 酸盐，1.5小时后释放26-56％的8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2- 羟基-1-(羟基甲基)-乙基]-氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐，4小 时后释放大于80％的8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟 基甲基)乙基]-氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐。
实施例2的MR剂型进行体外测试，当通过USP 3往复圆筒方法(USPIII， 章<711>)以每分钟3-10的浸渍的浸渍速率(dip rate)在250ml含水基缓冲液 (pH 1.6至6.5)于37℃测量时，提供以下体外溶出速率：1小时后释放小于或等 于40％的8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)-乙 基]-氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐，2小时后释放43-63％的 8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基]-氨基}吡 啶并[2，3-d]-嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐，4小时后释放大于80％的8-(2，6-二氟苯 基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)-乙基]-氨基}吡啶并[2，3-d] 嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐。
实施例3的MR剂型进行体外测试，当通过USP 1篮式方法(USP I，章 <711>)以150rpm在500ml的0.01M盐酸中测量时，提供以下体外溶出速率： 1小时后释放小于或等于20％的8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-S甲基苯基)-2-{[2- 羟基-1-(羟基甲基)乙基]-氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐，2.5小 时后释放36-66％的8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基 甲基)-乙基]-氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐，7小时后释放大于 80％的8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基]- 氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐。
实施例3的MR剂型进行体外测试，当通过USP 3往复圆筒方法(USPIII， 章<711>)以每分钟3至10浸渍的浸渍速率在250ml含水基缓冲液(pH 1.6至 6.5)于37℃测量时，提供以下体外溶出速率：1小时后释放小于或等于30％的 8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基]-氨基}吡 啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐，3小时后释放40-60％的8-(2，6-二氟苯 基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基]-氨基}吡啶并[2，3-d]- 嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐，8小时后释放大于80％的8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟 -2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)-乙基]-氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)- 酮甲苯磺酸盐。
实施例4的MR剂型进行体外测试，当通过USP 1篮式方法(USP I，章 <711>)以150rpm在500ml的0.01M盐酸中测量时，提供以下体外溶出速率： 1小时后释放小于或等于20％的8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2- 羟基-1-(羟基甲基)乙基]-氨基}吡啶并[2，3-d]-嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐，4小 时后释放31-61％的8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基 甲基)-乙基]-氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐，8小时后释放大于 80％的8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基]- 氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐。
实施例4的MR剂型进行体外测试，当通过USP 3往复圆筒方法(USPIII， 章<711>)以每分钟3至10浸渍的浸渍速率在250ml含水基缓冲液(pH 1.6-6.5)于37℃测量时，提供以下体外溶出速率：2小时后释放小于或等于 30％的8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基]- 氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐，6小时后释放42-62％的8-(2，6- 二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基]-氨基}吡啶并 [2，3-d]-嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐，16小时后释放大于80％的8-(2，6-二氟苯 基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)-乙基]-氨基}吡啶并[2，3-d] 嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐。
实施例5的MR剂型进行体外测试，当通过USP篮式方法(USP I，章 <711>)以150rpm在500ml的0.05M磷酸盐缓冲液中于pH 6.0测量时，提供以 下体外溶出速率：1小时后释放小于或等于20％的8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2- 甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基]-氨基}吡啶并[2，3-d]-嘧啶-7(8H)-酮 甲苯磺酸盐，4小时后释放24-54％的8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯 基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)-乙基]-氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺 酸盐，13小时后释放大于80％的8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2- 羟基-1-(羟基甲基)乙基]-氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐。
实施例6的MR剂型进行体外测试，当通过USP篮式方法(USP I，章 <711>)以150rpm在500ml的0.05M磷酸盐缓冲液中于pH 6.0测量时，提供以 下体外溶出速率：1小时后释放小于或等于20％的8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2- 甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基]-氨基}吡啶并[2，3-d]-嘧啶-7(8H)-酮 甲苯磺酸盐，7小时后释放29-69％的8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯 基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)-乙基]-氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺 酸盐，18小时后释放大于80％的8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2- 羟基-1-(羟基甲基)乙基]-氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐。
与之相比，该常规的实施例1的速释8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯 基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮片剂在45 分钟内溶解80％。该溶出曲线通过标准溶出试验测定，例如通过USP篮式方 法(USPI，章<711>)以37.0+-0.5℃，使用0.01M盐酸或其它合适介质 (500ml)，且转速为75rpm。
多晶型物
本发明另一个方面为8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基 -1-(羟基甲基)乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮的4-甲基苯磺酸盐(甲苯 磺酸盐)的新的多晶型物。
本发明另一个实施方案为制备多晶型物1至4的方法。特别是本发明一个 实施方案为晶型4的制备，其包括：
a)获得纯的或基本上纯的8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2- 羟基-1-(羟基甲基)乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐；和
b)在导致形成8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基 甲基)乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐晶型4的条件下从合 适溶剂中结晶8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基) 乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐。
在此，晶型1和晶型I、晶型2和晶型II、晶型3和晶型III、以及晶型4和晶 型IV可交换使用。同样，晶型(form)1和晶型(Form)1、晶型2和晶型2、晶型3 和晶型3、晶型4和晶型4也可交换使用。
本发明还提供8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基 甲基)乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐的混合物，其包括晶 型1、晶型2、晶型3和晶型4。在一个实施方案中，所述混合物可包括晶型1 和晶型4两者。所述组合物可包括1、2、3、4、5、10、15、20、25、30、35、 40、45、50、55、60、70、75、80、85、90、95、97或大于约99百分比的晶 型1或晶型4。在另一个实施方案中所述混合物可包括1、2、3、4、5、10、 15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、70、75、80、85、90、95、97 或大于约99百分比的晶型1或晶型3。在另一个实施方案中所述混合物可包括 1、2、3、4、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、70、75、 80、85、90、95、97或大于约99百分比的晶型3或晶型4。
在本发明一个实施方案中，组合物可包括1、2、3、4、5、10、15、20、 25、30、35、40、45、50、55、60、70、75、80、85、90、95、97或大于约 99百分比的单个多晶型，其为晶型1、晶型2、晶型3或晶型4。
在本发明另一个实施方案中，组合物可包括一种或多种在此所述的多晶 型物和甲苯磺酸盐化合物的无定形形式。
正如所知，化合物的结晶状态可由几种结晶学参数描述：晶胞大小、空 间群和化合物中原始晶胞的相对原子位置。这些参数通过晶体X射线分析进 行实验测定。对一种化合物有可能形成多于一种类型的晶体。这些不同的晶 型称为多晶型。
已发现有4种具有特征的和有重现性的8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基 苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)-乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮的4- 甲基苯磺酸盐(甲苯磺酸盐)的多晶型固态形式。这些晶型可通过固体晶型的 X射线粉末衍射(XRPD)区分，如图5至8(分别为晶型1至4)所示。如在此 所示和所述，FT-IR和差示扫描量热法(DSC)数据也可用于帮助区分固体晶 型。
多晶型的特征粉末X射线衍射图峰位置以角位置(2θ)记录，并具有通常 约0.1+/-°2-θ的容许偏差。由于校正、设置的差异和其它仪器之间的变化以 及不同操作者之间的操作，整个图形峰或大多数图形峰也可移位约0.1+/-°。
在此所述的XRPD数据通过使用X’Celerator检测器在PANalytical X’Pert Pro粉末衍射计上获得，其型号为PW3040/60、序号DY1850。其获得条件为： 辐射：Cu Kα，发电机电压：40kV，发电机电流：45mA，起始角：2.0°2θ， 终止角：40.0°2θ，步长：0.0167°2θ，每步的时间：31.75秒。通过将几毫克 样品安置在Si晶片(无反射)板上而制备样品，从而制备粉末薄层。特征XRPD 角度和d-间距在下表1中记录。XRPD图中仅有少量的峰能使晶型1、2、3和4 加以区别。
特征峰位计算的d-间距总结在表1中，其为使用Highscore软件从原始 数据计算得到的。具有暗色背景的峰区别这几种晶型。其它峰(下方划线的 和加粗的)也区别这些晶型，然而，另一种晶型在相近位置具有肩峰或低强 度峰从而使这些峰相比暗色背景的峰具有较低的特异性。
因此，多晶型1的特征可为任何一个、任何两个、任何三个、任何四个 或任何五个或更多个2-θ角的峰。特别是在8.22θ角的峰；或在7.5和8.22θ 角的峰。使用DSC热分析图和FT-IR可有助于本发明多晶型的鉴定。
因此，多晶型2的特征可为任何一个、任何两个、任何三个、任何四个 或任何五个或更多个2-θ角的峰。特别是在3.7和7.22θ角的峰；或在3.7、 7.2，和11.7、19.4和21.2的峰。
因此，多晶型3的特征可为任何一个、任何两个、任何三个、任何四个 或任何五个或更多个2-θ角的峰。特别是在7.82θ角的峰；或在4.4、7.8、 8.7、9.0和19.32θ角的峰。
因此，多晶型4的特征可为任何一个、任何两个、任何三个、任何四个 或任何五个或更多个2-θ角的峰。特别是在8.02θ角的峰；或在4.3、8.0、 9.2、16.7、20.9、和23.92θ角的峰。
任何一个、任何两个、任何三个、任何四个或任何五个或更多个的类似 特征也可归因于下表1所示的d-间距/埃。
表1

固体晶型的FT-IR光谱通过使用装配有Diamond/ZnSe ATR Accessory 的序列号为AEA0001623的Nicolet Avatar 360FT-IR分光计记录，分辨率 (resolution)为4cm-1。
观察到晶型1的谱带(band)如下：
3442、3219、3072、2935、1697、1654、1619、1558、1501、1479、1454、 1382、1360、1341、1314、1282、1247、1150、1119、1107、1076、1062、 1030、1011、1005、983、947、913、876、838、820、798和709cm-1。
适合地，晶型1显示这些特征带的任何一个、任何两个、任何三个、任 何四个或任何五个或更多个带。
观察到晶型2的谱带如下：
2950、1703、1654、1622、1554、1499、1480、1451、1360、1319、1289、 1238、1183、1155、1117、1076、1052、1029、1007、982、943、864、848、 816、797和710cm-1。
适合地，晶型2显示这些特征带的任何一个、任何两个、任何三个、任 何四个或任何五个或更多个带。
观察到晶型3的谱带如下：
3369、3076、2963、1705、1653、1624、1574、1559、1501、1477、1455、 1360、1314、1286、1278、1231、1183、1156、1141、1119、1101、1069、 1030、1006、983、964、947、885、836、818、799和784cm-1。
适合地，晶型3显示这些特征带的任何一个、任何两个、任何三个、任 何四个或任何五个或更多个带。
观察到晶型4的谱带如下：
3336、3084、1706、1648、1626、1590、1556、1501、1478、1455、1361、 1311、1286、1245、1233、1181、1141、1121、1097、1065、1031、1007、 981、947、865、834、818、800、781、741和729cm-1。
适合地，晶型4显示这些特征带的任何一个、任何两个、任何三个、任 何四个或任何五个或更多个带。
晶型1至4的IR数据分别如图13-16所示。
认为晶型4是室温热力学最稳定的，通过DSC测定在约218℃开始熔化。 晶型1、2和3较不稳定，其分别在约230℃、206℃和211℃开始熔化。对于晶 型1和4，熔化紧接着降解。因此，该熔化焓值可能不精确。晶型2熔化后可 伴随高温活动。在图11所示，在晶型3的示图中，晶型3熔化之后伴随少量晶 型4熔化。
晶型的DSC热分析图通过使用TA Instruments Q1000量热计(仪器号： 970001.901，序号：1000-0126)获得。将样品于铝锅中称重，将锅盖置于其上 稍微折边使不密封该锅。以10℃min-1的加热速率进行实验。晶型1至4的数 据分别如图9-12所示。
溶解度、熟化(ripening)和熔点数据表明对映异构的体系，其中晶型4在 低于约135℃下是热力学最稳定的晶型，而晶型1在高于135℃热力学更稳 定(因此熔点更高)。
因此，本发明一个实施方案为多晶型晶型1，基本上如图5的X射线衍 射图所示，或如图9的差示扫描量热法热分析图所示，或如图13(a)和/或13(b) 的红外光谱所示。
本发明另一个实施方案为为多晶型晶型1，其特征为包含以2θ角表示 的峰的X射线衍射图，其中
i)所述X射线衍射图包含位于8.2+/-0.1°的峰；或
ii)所述X射线衍射图包含位于7.5和8.2+/-0.1°的峰；或
iii)所述X射线衍射图包含位于8.2+/-0.1°和9.9+/-0.1°的峰；或
iv)所述X射线衍射图包含位于8.2+/-0.1°和13.0+/-0.1°的峰；或
v)所述X射线衍射图包含位于8.2+/-0.1°和16.3+/-0.1°的峰；或
vi)所述X射线衍射图包含位于8.2+/-0.1°和19.8+/-0.1°的峰；或
vii)所述X射线衍射图包含位于8.2+/-0.1°和21.1+/-0.1°的峰；或
viii)所述X射线衍射图包含位于8.2+/-0.1°和21.8+/-0.1°的峰；或
ix)所述X射线衍射图包含位于7.5、8.2和9.9+/-0.1°的峰；或
x)所述X射线衍射图包含位于7.5、8.2和13.0+/-0.1°的峰；或
xi)所述X射线衍射图包含位于7.5、8.2和16.3+/-0.1°的峰；或
xii)所述X射线衍射图包含位于7.5、8.2和19.8+/-0.1°的峰；或
xiii)所述X射线衍射图包含位于7.5、8.2和21.1+/-0.1°的峰；或
xiv)所述X射线衍射图包含位于7.5、8.2和21.8+/-0.1°的峰；或
xv)所述X射线衍射图包含位于7.5、8.2、9.9和13.0+/-0.1°的峰；或
xvi)所述X射线衍射图包含位于7.5、8.2、9.9、13.0和16.3+/-0.1°的 峰；或
xvii)所述X射线衍射图包含位于7.5、8.2、9.9、13.0和19.8+/-0.1°的 峰；或
xviii)所述X射线衍射图包含位于7.5、8.2、9.9、13.0和21.1+/-0.1°的 峰；或
xix)所述X射线衍射图包含位于7.5、8.2、9.9、13.0和21.8+/-0.1°的 峰；或
xx)所述X射线衍射图包含位于7.5、8.2、9.9、13.0、16.3、19.8、21.1 和21.8+/-0.1°的峰。
本发明另一个实施方案为多晶型晶型1，其具有粉末X射线衍射图，其 中该粉末X射线衍射图包含2θ在约7.5+/-0.1°和8.2+/-0.1°的特征峰。
本发明另一个实施方案为多晶型晶型1，其具有粉末X射线衍射图，其 中该粉末X射线衍射图包含2θ在约7.5+/-0.1°和8.2+/-0.1°的特征峰，以 及至少1个另外的以2θ表示的特征峰，其选自9.9+/-0.1°、13.0+/-0.1°、 16.3+/-0.1°、19.8+/-0.1°、21.1+/-0.1°和21.8+/-0.1°。
本发明另一个实施方案为为多晶型晶型1，其具有粉末X射线衍射图， 其中该粉末X射线衍射图包含2θ在约7.5+/-0.1°和8.2+/-0.1°的特征峰， 以及至少3个另外的以2θ表示的特征峰，其选自9.9+/-0.1°、13.0+/-0.1°、 16.3+/-0.1°、19.8+/-0.1°、21.1+/-0.1°和21.8+/-0.1°。
另一个实施方案为以基本上纯结晶形式的多晶型1、或晶型2、或晶型3、 或晶型4。
另一个实施方案为其中所述组合物中总的8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲 基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲苯 磺酸盐中至少30％重量为多晶型1。合适地，存在至少50％、至少60、至少 70、至少80、至少90、至少95和至少97％重量的多晶型1。
另一个实施方案为包括8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟 基-1-(羟基甲基)乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐的多晶型 1和可药用赋形剂或载体的药物组合物。
本发明另一个实施方案为多晶型晶型1，其中所述多晶型的特征为通过 DSC测定在约230℃开始熔化。
本发明另一个实施方案为多晶型晶型1，其中所述多晶型的特征为通过 DSC测定在约230℃开始熔化，且其红外光谱为图13(a)和/或13(b)。
本发明另一个实施方案为从溶于溶剂中的甲苯磺酸盐制备晶型1的方 法，该溶剂为氯仿、氯仿和醇(如甲醇或乙醇)的混合物、或二氯甲烷和和醇(如 甲醇或乙醇)的混合物。
本发明另一个实施方案为制备基本上纯的晶态多晶型1的方法，包括：
a)将8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙 基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐溶于合适溶剂中，如二氯甲 烷和共溶剂，且视需要加热以得到溶液；
b)冷却步骤(a)的溶液，任选在冰浴中或任选用晶态甲苯磺酸盐晶型1种 晶(seed)该溶液以得到结晶晶型1。
适合地，该大规模生产的冷却速率为约1℃/分钟或至多1℃/分钟。
在另一个实施方案中，首先将所述甲苯磺酸盐悬浮于氯仿或氯仿混合物 然后冷却形成晶型(任选种晶)。合适的共溶剂为甲醇或乙醇。或者可将氯仿 (无共溶剂)用作浆液。
本发明另一个实施方案为多晶型晶型2，基本上如图6的X射线衍射图 所示，或如图10的差示扫描量热法热分析图所示，或如图14(a)和/或14(b) 的红外光谱所示。
本发明另一个实施方案为包含晶型2的组合物，其中所述组合物中总的 8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基]氨基}吡 啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐中至少30％重量为晶型2。
本发明另一个实施方案为包含多晶型2和可药用赋形剂或载体的药物组 合物。
本发明另一个实施方案为多晶型晶型2，其中所述多晶型的特征为通过 DSC测定在约206℃开始熔化。
本发明另一个实施方案为制备晶型2的方法，其包括通过从乙腈和水的 溶剂混合物缓慢蒸发而结晶甲苯磺酸盐。
本发明另一个实施方案为多晶型晶型3，基本上如图5的X射线衍射图 所示，或如图11的差示扫描量热法热分析图所示，或如图15(a)和/或15(b) 的红外光谱所示。
本发明另一个实施方案为包含晶型3的组合物，其中所述组合物中总的 8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基]氨基}吡 啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐中至少30％重量为晶型3。
本发明另一个实施方案为包含多晶型3和可药用赋形剂或载体的药物组 合物。
本发明另一个实施方案为多晶型晶型3，其中所述多晶型的特征为通过 DSC测定在约211℃开始熔化。
本发明另一个实施方案为多晶型晶型3，其中所述多晶型的特征为通过 DSC测定在约211℃开始熔化，且其红外光谱为图15(a)和/或15(b)。
本发明另一个实施方案为制备晶型3的方法，其包括通过从甲醇缓慢蒸 发而结晶甲苯磺酸盐。
或者，可通过浆液方法(slurry method)制备晶型3，其在高温(如约30℃) 下将所述甲苯磺酸盐溶于环己烷溶剂中保持延长的时间，以产生晶型3。
本发明另一个实施方案为为多晶型晶型4，基本上如图8的X射线衍射 图所示，或如图12的差示扫描量热法热分析图所示，或如图16(a)和/或16(b) 的红外光谱所示。
本发明另一个实施方案为多晶型晶型4，其特征为包含下列以2θ角表 示的峰的X射线衍射图：
i)所述X射线衍射图包含位于8.0+/-0.1°的峰；或
ii)所述X射线衍射图包含位于4.3+/-0.1°和8.0+/-0.1°的峰；或
iii)所述X射线衍射图包含位于9.2+/-0.1°和8.0+/-0.1°的峰；或
iv)所述X射线衍射图包含位于16.7+/-0.1°和8.0+/-0.1°的峰；或
v)所述X射线衍射图包含位于20.9+/-0.1°和8.0+/-0.1°的峰；或
vi)所述X射线衍射图包含位于23.9+/-0.1°和8.0+/-0.1°的峰；或
vii)所述X射线衍射图包含位于4.3+/-0.1°、8.0+/-0.1°和9.2+/-0.1° 的峰；或
viii)所述X射线衍射图包含位于4.3+/-0.1°、8.0+/-0.1°和16.7+/-0.1° 的峰；或
ix)所述X射线衍射图包含位于4.3+/-0.1°、8.0+/-0.1°和20.9+/-0.1° 的峰；或
x)所述X射线衍射图包含位于4.3+/-0.1°、8.0+/-0.1°和23.9+/-0.1° 的峰；或
xi)所述X射线衍射图包含位于8.0+/-0.1°、9.2+/-0.1°和16.7+/-0.1° 的峰；或
xii)所述X射线衍射图包含位于8.0+/-0.1°、9.2+/-0.1°和20.9+/-0.1° 的峰；或
xiii)所述X射线衍射图包含位于8.0+/-0.1°、9.2+/-0.1°和23.9+/-0.1° 的峰；或
xiv)所述X射线衍射图包含位于8.0+/-0.1°、16.7+/-0.1°和20.9+/-0.1° 的峰；或
xv)所述X射线衍射图包含位于8.0+/-0.1°、16.7+/-0.1°和23.9+/-0.1° 的峰；或
xvi)所述X射线衍射图包含位于4.3+/-0.1°、8.0+/-0.1°、9.2+/-0.1° 和16.7+/-0.1°的峰；或
xviii)所述X射线衍射图包含位于4.3+/-0.1°、8.0+/-0.1°、9.2+/-0.1° 和20.9+/-0.1°的峰；或
xix)所述X射线衍射图包含位于4.3+/-0.1°、8.0+/-0.1°、9.2+/-0.1° 和23.9+/-0.1°的峰；或
xx)所述X射线衍射图包含位于8.0+/-0.1°、9.2+/-0.1°、16.7+/-0.1° 和20.9+/-0.1°的峰；或
xxi)所述X射线衍射图包含位于8.0+/-0.1°、9.2+/-0.1°、16.7+/-0.1° 和23.9+/-0.1°的峰；或
xxii)所述X射线衍射图包含位于8.0+/-0.1°、16.7+/-0.1°、20.9+/-0.1° 和23.9+/-0.1°的峰；或
xxiii)所述X射线衍射图包含位于8.0+/-0.1°、9.2+/-0.1°、16.7+/-0.1° 和23.9+/-0.1°的峰；或
xxiv)所述X射线衍射图包含位于4.3+/-0.1°、8.0+/-0.1°、9.2+/-0.1° 和20.9+/-0.1°的峰；或
xxv)所述X射线衍射图包含位于4.3+/-0.1°、8.0+/-0.1°、9.2+/-0.1° 和23.9+/-0.1°的峰；或
xxvi)所述X射线衍射图包含位于4.3+/-0.1°、8.0+/-0.1°、9.2+/-0.1°、 20.9+/-0.1°和23.9+/-0.1°的峰；或
xxvii)所述X射线衍射图包含位于4.3+/-0.1°、8.0+/-0.1°、16.7+/-0.1°、 20.9+/-0.1°和23.9+/-0.1°的峰；或
xxviii)所述X射线衍射图包含位于4.3+/-0.1°、8.0+/-0.1°、9.2+/-0.1°、 16.7+/-0.1°和20.9+/-0.1°的峰；或
xxix)所述X射线衍射图包含位于8.0+/-0.1°、9.2+/-0.1°、16.7+/-0.1° 和20.9+/-0.1°和23.9+/-0.1°的峰；或
xxx)所述X射线衍射图包含位于4.3+/-0.1°、8.0+/-0.1°、9.2+/-0.1°、 16.7+/-0.1°、20.9+/-0.1°和23.9+/-0.1°的峰。
本发明另一个实施方案为多晶型晶型4，其特征为包含下列以2θ角表 示的峰的X射线衍射图：
i)所述X射线衍射图包含位于8.0+/-0.1°的峰；或
ii)所述X射线衍射图包含位于4.3+/-0.1°和8.0+/-0.1°的峰；或
iii)所述X射线衍射图包含位于4.3+/-0.1°、8.0+/-0.1°和9.2+/-0.1° 的峰；或
iv)所述X射线衍射图包含位于4.3+/-0.1°、8.0+/-0.1°、9.2+/-0.1°和 16.7+/-0.1°的峰；或
v)所述X射线衍射图包含位于4.3+/-0.1°、8.0+/-0.1°、9.2+/-0.1°、 16.7+/-0.1°和20.9+/-0.1°的峰；或
vi)所述X射线衍射图包含位于4.3+/-0.1°、8.0+/-0.1°、9.2+/-0.1°、 16.7+/-0.1°、20.9+/-0.1°和23.9+/-0.1°的峰。
本发明另一个实施方案为多晶型晶型4，其具有粉末X射线衍射图，其 中该粉末X射线衍射图包含2θ在约8.0+/-0.1°的特征峰，以及至少2个另 外的以2θ表示的特征峰，其选自4.3+/-0.1°、9.2+/-0.1°、16.7+/-0.1°、20.9 +/-0.1°和23.9+/-0.1°。
本发明另一个实施方案为多晶型晶型4，其具有粉末X射线衍射图，其 中该粉末X射线衍射图包含2θ在约8.0+/-0.1°的特征峰，以及至少3个另 外的以2θ表示的特征峰，其选自4.3+/-0.1°、9.2+/-0.1°、16.7+/-0.1°、20.9 +/-0.1°和23.9+/-0.1°。
本发明另一个实施方案为多晶型晶型4，其中所述多晶型的特征为通过 DSC测定在约218℃开始熔化。
本发明另一个实施方案为多晶型晶型4，其中所述多晶型的特征为通过 DSC测定在约218℃开始熔化，且其红外光谱为图16(a)和/或16(b)。
本发明另一个实施方案为其中所述组合物中总的8-(2，6-二氟苯基)-4-(4- 氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)- 酮甲苯磺酸盐中至少30％重量为多晶型4。合适地，存在至少50％、至少60、 至少70、至少80、至少90、至少95、至少97％和至少99％重量的多晶型4。
本发明另一个实施方案为包括多晶型4和可药用赋形剂或载体的组合 物。
本发明另一个实施方案为制备基本上纯的晶态多晶型4的方法，包括：
a)将8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙 基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐溶于合适溶剂中，如TBME∶ 工业用甲醇变性酒精(IMS)、TBME∶IPA(9∶1)或正丙醇，并视需要加热以得 到溶液；
b)冷却步骤(a)的溶液，任选在冰浴中或任选用晶态甲苯磺酸盐晶型4种 晶该溶液以得到晶型4。
适合地，该大规模生产的冷却速率为约1℃/分钟或至多1℃/分钟。
另一个实施方案将使用其它合适的溶剂，如长链醇，例如丁醇、异丁醇、 或异丙醇等或其混合物，包括TBME。优选溶剂为TBME∶IPA或正丙醇。
在另一个实施方案中，该结晶方法可首先将甲苯磺酸盐悬浮于合适溶剂 中，例如叔丁基甲基醚(TBME)、甲苯、丁醇或丙醇，然后冷却以形成该晶 型(任选种晶)。另一个实施方案将使用其它合适的溶剂，如长链醇，例如异 丁醇或异丙醇等或其混合物，包括TBME。
实验
晶型1通过从二氯甲烷和共溶剂乙醇中结晶来制备，如本文的实施例Q、 部分(b)所显示。其它研究的溶剂中支持存在晶型I的包括从氯仿和氯仿/甲醇 (实施例Q，部分(c))结晶，其在以下所示。
晶型1的奥斯特瓦尔德熟化实验：将甲苯磺酸盐样品在指定温度悬浮于 指定溶剂中并搅拌3至5天，然后分离并测试：
1)使用晶型1和晶型4的混合物，氯仿，在2℃下，保持3天，生成的 DSC(231.9-233.8；dH＝79.5J/g)和XRPD与支持晶型1的数据一致。
2)使用晶型1和晶型4的混合物，四氢呋喃，在2℃下，保持3天，生 成的DSC 229.9-231.3；dH＝85J/g)和XRPD与支持晶型1的数据一致。
3)使用晶型1，于水中在2℃保持4天，生成的XRPD与晶型1相匹配。
得到晶型1物质的缓慢蒸发过程：
将8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基] 氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐样品在室温下溶于指定溶剂，过 滤并使之在大气压下缓慢蒸发直到出现固体，然后分离并测试：
1)将搅拌的晶型1甲苯磺酸盐的混合物溶于溶剂(如氯仿)中，并且在无搅 拌下将该溶剂蒸发，从而得到的DSC和XRPD与支持晶型1的数据一致。
晶型2物质的缓慢蒸发过程：
将8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基] 氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐晶型1样品用乙腈/水80/20(体积 /体积)处理，直到所有固体溶解。过滤该澄清溶液以保证没有晶种剩下。将 该澄清溶液在大气压和室温下蒸发直到出现固体。过滤分离该固体并分析。 通过XRPD和DSC确认该固体为晶型2。
晶型3物质的缓慢蒸发过程：
将8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基] 氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐晶型1样品用MeOH处理，直到 所有固体溶解。过滤该澄清溶液以保证没有晶种剩下。将该澄清溶液在大气 压和室温下蒸发直到出现固体。过滤分离该固体并分析。通过XRPD和DSC 确认该固体为晶型3。
晶型3物质的奥斯特瓦尔德熟化实验：将甲苯磺酸盐样品在指定温度于 指定溶剂中搅拌3至5天，然后分离并测试：
1)在30℃下于环己烷中搅拌晶型1和晶型4的混合物5天，得到的DSC和 XRPD与支持晶型3的数据一致。
晶型4
有许多方法制备晶型4。其被认为是在室温下热力学最稳定的。其与晶 型1是互变的，交换(cross-over)温度为约135℃，该温度值为实验测定。
从正丙醇中结晶
如可通过本文许多工作实施例测定，具体地为实施例R和S，8-(2，6-二 氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基]氨基}吡啶并 [2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐可从正丙醇结晶为晶型4；如实施例D所述 进行种晶；且如本文实施例C从TBME∶IPA种晶。
晶型4物质的奥斯特瓦尔德熟化实验：将甲苯磺酸盐样品在指定温度下 于指定溶剂中搅拌3至5天，然后分离并测试：
1)于0℃下在叔丁基甲基醚中搅拌晶型1和晶型4的混合物3天，通 过DSC和XRPD测定支持晶型4。
2)于0℃下在甲苯中搅拌晶型1和晶型4的混合物3天，通过DSC和 XRPD测定支持晶型4。
3)于35℃下在甲苯中搅拌晶型1和晶型4的混合物4天，通过DSC 和XRPD测定支持晶型4。
4)于30℃下在1-丁醇中搅拌晶型I和晶型IV的混合物5天，通过DSC 和XRPD测定支持晶型4。
5)于2℃下在1-丁醇中搅拌晶型I和晶型IV的混合物5天，通过DSC 和XRPD测定支持晶型4。
6)于0℃下在1-丙醇中搅拌晶型I和晶型IV的混合物4天，通过DSC 和XRPD测定支持晶型4。
无定形物质
8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基]氨 基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐的无定形固体形式也已被测定。
无定形物质的奥斯特瓦尔德熟化实验：将甲苯磺酸盐样品在指定温度于 指定溶剂中搅拌3至5天，然后分离并测试：
1)使用晶型1和晶型4的混合物于水中在30℃下保持5天，通过XRPD 和DSC(图17)测定生成的无定形产物；数据表明剩余一些晶型4物质，但 无定形物质占主要。
2)使用晶型1和晶型4的混合物于1/10比例的THF/水中在30℃下保 持7天，通过XRPD和DSC测定生成无定形物质；数据表明剩余一些晶型 4物质，但无定形物质占主要。
因此，本发明另一个方面为8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2- 羟基-1-(羟基甲基)乙基]氨基}吡啶并-[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮甲苯磺酸盐的无定 形形式和包含该无定形形式和可药用载体或稀释剂的药物组合物。
定义和惯常用法
以下的定义和解释用于全文的术语，包括说明书和权利要求。
定义
所有温度为摄氏度。
TLC是指薄层色谱法。
HPLC是指高效液相色谱法。
盐水是指饱和氯化钠水溶液。
色谱法(柱色谱法和快速色谱法)是指纯化/分离所表达的化合物(载体；洗 脱剂)。应理解将合适的级分合并并浓缩以得到所需化合物。
IR是指红外光谱法。
IMS是指工业用甲醇变性酒精
NMR是指核(质子)磁共振波谱法，化学位移以从四甲基硅烷向低场的 ppm(δ)值记录。
MS是指以m/e、m/z或质量/电荷单位表达的质谱波谱法。[M+H]+是指 母体加氢原子的阳离子。El是指电子冲击。CI是指化学电离。FAB是指快 原子轰击。
Eq或eq是指等价物
醚(ether)是指乙醚(diethyl ether)。
DIPEA是指N，N-二异丙基胺，也称为Hunig’s碱
DBN是指1，5-二氮杂二环[4.3.0]壬-5-烯
DCM是指二氯甲烷
THF是指四氢呋喃
IMS是指工业用甲醇变性酒精(Industrial Methylated Spirits)
CLLE是指离心液液体提取(Centrifugal Liquid Liquid Extraction)
NMP是指N-甲基2-吡咯烷酮
M是指摩尔浓度
THF是指四氢呋喃
LiOH是指氢氧化锂
H或h是指小时
MTBE或TBME可互换且是指叔丁基甲基醚
a/a是指面积/面积
ca.是指约。
USP是指美国药典。
cps是指厘泊。
可药用是指从药理学/毒理学观点看对于患者是可接受的性质和/或物质 以及从有关组合物、制剂、稳定性、患者接受度和生物利用率来看对于制造 药物的化学家是可接受的。
当使用一组溶剂时，溶剂的比例为体积/体积(v/v)。
当使用固体在溶剂中的溶解度时，固体与溶剂的比例为重量/体积(wt/v)。
合成实施例
本发明将通过以下实施例进行描述作为参考，其仅为解释性的并不用来 限制本发明的范围。所有温度以摄氏度给出，所有溶剂都以可得到的最高纯 度，和所有反应在无水条件下且视情况在氩气氛中进行。
实施例A
8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基]氨 基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮
使用2002年8月1日公开的国际申请号：PCT/US01/50493，国际公开 号WO 02/059083A2，实施例64示例的方法，可得到游离碱8-(2，6-二氟苯 基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧 啶-7(8H)-酮。
以下将会进一步举例说明，所述游离碱也可按本文的工作实施例和方案 进行制备。
实施例B

制备8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-(甲硫基)吡啶并[2，3-d]嘧啶 -7(8H)-酮
将4-[(2，6-二氟苯基)氨基]-6-(4-氟-2-甲基苯基)-2-(甲硫基)-5-嘧啶甲醛 (18g，46mmol)、丙二酸异亚丙基酯(麦德鲁姆酸，8.6克(此后称‘g”)、60毫 摩尔(此后称“mmol”))和无水乙酸钠(3.4g，39mmol)一起在四氢呋喃(THF，90 毫升(此后称“mL”))中搅拌，并将所得混合物加热至50-55℃维持4小时。 将该反应温度降低至30℃，加入硫代乙酸(6.6mL，92mmol)并将该溶液在 30℃保持16小时。所得悬浮液用2摩尔每升的(此后称“M”)氢氧化钠水溶液 (36ml每次洗涤)洗涤两次，然后添加10％w/v氯化钠水溶液、工业用甲醇变 性酒精(IMS，54mL)和水(45mL)，将该溶液种晶(seeded)，搅拌2小时，并经 1小时再次加入水(45mL)。
24小时后将该浆液过滤。将滤饼用3∶3∶5THF∶IMS∶水(36mL)洗涤并 用20％IMS水溶液(2x 36mL)洗涤两次，然后在真空烘箱中干燥，得到8-(2，6- 二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-(甲硫基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮 (14.5g 76％产率)1H NMR(CDCl3)δ：7.49(1H，m)；7.48(1H，d，J＝9.8)；7.28 (1H，d ofd)；7.12(2H，t，J＝7.6)；7.00-7.10(2H，m)；6.64(1H，d，J＝9.8)； 2.26(3H，s)；2.23(3H，s)。
4-[(2，6-二氟苯基)氨基]-6-(4-氟-2-甲基苯基)-2-(甲硫基)-5-嘧啶甲醛可通 过WO 02/059083实施例12的方法或本文实施例F的方法制备。
在大规模的情况下，使用类似条件，8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯 基)-2-(甲硫基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮也可按如下获得：
向4-[(2，6-二氟苯基)氨基]-6-(4-氟-2-甲基苯基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲醛 (13.0千克(此后称“kg”)，33.4摩尔(此后称“mol”))中添加2，2-二甲基-1，3-二噁 烷-4，6-二酮(麦德鲁姆酸，6.26kg，43.4mol)和无水乙酸钠(2.2kg，39mmol)，并 在四氢呋喃(65升(此后称“L”))中一起搅拌，所得混合物加热至50-55℃保持 4小时。该反应温度降低至30℃，加入硫代乙酸(5.1kg，92mmol)并将溶液在 30℃保持19小时。所得悬浮液用2M氢氧化钠水溶液(26L每次洗涤)洗涤 两次，然后用10％w/v氯化钠水溶液(26L)洗涤。加入工业用甲醇变性酒精 (39L)和水(32.5mL)，将该溶液种晶，搅拌2小时并加入更多水(32.5L)。
16小时后将该浆液过滤。将滤饼用7∶7∶12THF∶IMS∶水(26L)洗涤和 用20％IMS水溶液(2x26L)洗涤两次，干燥，得到标题化合物(10.4kg 75％ 产率)。1H NMR(CDCl3)δ(ppm)：7.49(1H，m，芳香族CH)；7.48(1H，d，烯 烃CH，J＝9.8)；7.28(1H，双二重峰，芳香族CH)；7.12(2H，t，芳香族CH，J ＝7.6)；7.00-7.10(2H，m，芳香族CH)；6.64(1H，d，烯烃CH，J＝9.8)；2.26 (3H，s，苯基CH3)；2.23(3H，s，SMe)。
在另一个方案中制备所述标题化合物：
将4-[(2，6-二氟苯基)氨基]-6-(4-氟-2-甲基苯基)-2-(甲硫基)-嘧啶-5-甲醛 (化合物1)(42kg)、乙酸钠(6.7kg)和麦德鲁姆酸(20.2kg)在THF(126L)中在 约62℃下加热3小时。然后加入THF(210L)并将混合物经常压蒸馏浓缩至 231L。将混合物冷却至32±2℃，并缓慢加入硫代乙酸(15.7kg)使内含物温度 保持在32±2℃。然后将混合物在32±2℃下搅拌10小时。
将THF溶液冷却至40±3℃，并用2M氢氧化钠溶液(84L)洗涤，然后用 10％w/v碳酸钾溶液(2x84L)洗涤。将该批料冷却至22±3℃，然后加入异丙 醇(126L)和水(84L)，并将该混合物用8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯 基)-2-(甲硫基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮SB-691761(0.42kg)种晶。将该溶 液在22±3℃下搅拌1小时。经30分钟在22±3℃下加入另外的水(231L)。 然后以30分钟将浆液冷却至1±2℃，并在1±2℃下搅拌30-60分钟。然后 通过过滤收集产物。将滤饼用异丙醇∶水(4∶1，3x84L)洗涤，且产物在真空 和60-65℃下干燥，得到标题化合物(38.4kg)。1H NMR(400MHz，氯仿-D) 以四甲基硅烷在0.00ppm处作为基准δppm 2.22(s，3H)，2.26(s，3H)，6.65 (d，J＝9.78Hz，1H)，7.07(td，J＝8.62，2.32Hz，2H)，7.14(t，J＝8.07Hz，2H)， 7.28-7.30(m，1H)，7.47-7.53(m，2H)。
实施例C
制备4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-(甲硫基)-7-氧代-8-(2，6-二氟苯基)-7，8-二氢 吡啶并[2，3-d]嘧啶-6-羧酸

将4-[(2，6-二氟苯基)氨基]-6-(4-氟-2-甲基苯基)-2-(甲硫基)-嘧啶-5-甲醛 (0.1g，0.26mmol)、2，2-二甲基-1，3-二噁烷-4，6-二酮(麦德鲁姆酸，0.05g， 0.35mmol)和乙酸铯(0.029g，0.15mmol)一起在乙腈(1ml)中搅拌。并将所得混 合物于50-55℃下加热1小时。将该混合物于环境温度搅拌过夜并加入0.3mL 水。搅拌1小时后，将该混合物过滤，滤饼用乙腈(2x0.5mL)洗涤，干燥， 得到标题化合物(0.083g，69％产率)。1H NMR(CDCl3)δ(ppm)：2.28(3H)s； 2.29(3H)s；7.09(1H)t J＝8.10Hz；7.12(1H)d J＝9.0Hz；7.20(2H)t J＝8.4Hz； 7.28(1H)dd J＝8.8和3.2Hz；7.59(1H)m；8.71(1H)s；13.03(1H)宽峰s；
实施例D
制备8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基] 氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮4-甲基苯磺酸盐

将35％过氧化氢(7.6L，87mol)于18-21℃下加至8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟 -2-甲基苯基)-2-(甲硫基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(9.0kg，21.8mol)、四丁基 硫酸氢铵(370g 1.1mol)、钨酸钠二水合物(140g，0.4mol)在二氯甲烷(46L)中的 搅拌的混合物中。然后加入乙酸(3.7L)，并将混合物在21℃下搅拌21小时。 分离各相，并将有机层用1M偏亚硫酸氢钠(sodium metabisulphite)(18L)洗涤， 然后用水(2x18L)洗涤。
将二氯甲烷(47L)加至有机相中，然后将其常压浓缩至45L。将该溶液在 38℃下经1小时添加入丝氨醇(3.98kg，43.5mol)在1-甲基-2-吡咯烷酮(NMP， 27L)的溶液中。1小时后将混合物冷却至19℃，并加入水(45L)。分离各相， 并将有机相用水(4x36L)洗涤，然后在大气压下通过蒸馏浓缩至45L。加入叔 丁基甲基醚(TBME，35L)使体积达到(80L)。然后连续加入TBME(230L)并伴 随在大气压蒸馏，直到加入的体积被除掉。用异丙醇(IPA，44L)和TBME(19L) 稀释有机溶液(80L)，并将温度调节至48℃。向该温溶液中加入7L的4-甲基 苯磺酸一水合物(3.72kg)在IPA(27L)和TBME(27L)中的溶液。将该溶液用 晶型4种晶(20g)，并以1小时添加剩余的4-甲基-苯磺酸溶液。将该混合物 在48℃搅拌1小时，然后以1℃/分钟冷却至20℃。搅拌15小时后，过滤 该混合物，用TBME∶IPA(9∶1，36L)和TBME(2x36L)洗涤滤饼，干燥，得 到标题化合物(10.7kg，80％产率)，(m.p.215℃，通过DSC测定)；400MHz NMR在DMSO-d6中。以DMSO-d5在2.52ppm处作为基准。δ(ppm)：2.22 (1.5H)s，2.25(1，5H)s，2.31(3H)s，3.28-3.51(4.5H)m，4.03(0.5H)m，6.32 (0.5H)d J＝9.4Hz，6.34(0.5H)d J＝9.7Hz，7.15(2H)d J＝7.9Hz，7.17-7.26(1.5H) m，7.30(1H)d J＝9.9Hz，7.32-7.40(3H)m，7.43(1H)dd J＝8.5和6.1，7.52(2H)d J＝8.0，7.60-7.72(1.5H)m。
实施例E
制备8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基] 氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮4-甲基苯磺酸盐

在对上述实施例D可代替的结晶中，设计了以下步骤：在18-21℃下，将 30％过氧化氢(172mL，1.67mol)加至8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯 基)-2-(甲硫基)吡啶并-[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(200g，0.48mol)、四丁基硫酸氢铵 (8.2g，24mmol)、钨酸钠二水合物(3.2g，9mmol)在二氯甲烷(1L)中的搅拌的混 合物中。20小时后，加入乙酸(86.6mL)并分离各相，有机层在连续的液-液提 取器中用1M偏亚硫酸氢钠和5％氯化钠水溶液洗涤。加入1-甲基-2-吡咯烷酮 (NMP，400mL)，将该溶液浓缩至750mL，并在42℃下经1.5小时加入至丝氨 醇(88.4g，0.96mol)在NMP(500mL)中的溶液中。2小时后，该溶液冷却至20℃， 在连续的液-液提取器中用5％氯化钠水溶液洗涤以除去NMP，并在加入1- 丙醇(2.8L)的情况下蒸馏直到除去所有二氯甲烷。加入1-丙醇(300mL)以使体 积达到3L，并将溶液温热至75℃。向该温溶液中加入4-甲基苯磺酸一水合物 (82.6g)在1-丙醇(500mL)中的溶液。将该溶液种晶(0.2g)，且将混合物在75℃ 下搅拌2.5小时，然后冷却至0℃。过滤该混合物，滤饼用1-丙醇(3x 800mL) 洗涤，干燥一部分，得到标题化合物(29.0g)。400MHz NMR在DMSO-d6中。 以DMSO-d5在2.52ppm处作为基准。δ(ppm)：2.22(1.5H)s，2.25(1.5H)s，2.31 (3H)s，3.27-3.49(4.5H)m，4.01(0.5H)m部分被水信号遮挡，6.32(0.5H)d J＝9.7Hz，6.33(0.5H)d J＝9.5H，7.14(2H)d J＝7.9Hz，7.21(1H)tt J＝8.5和2.0Hz， 7.25-7.33(1.5H)m，7.33-7.46(4H)m，7.50(2H)d J＝8.0，7.60-7.73(1.5H)m。
实施例F
制备4-[(2，6-二氟苯基)氨基]-6-(4-氟-2-甲基苯基)-2-(甲硫基)-5-嘧啶甲醛 (pyrimidinecarbaldehyde)

将4，6-二氯-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲醛(carboxaldehyde)(40kg)在室温溶于无 水THF(200L)中。加入三乙胺(20kg)然后加入2，6-二氟苯胺(26kg)，将反应 混合物在60-65℃下加热12小时。该混合物冷却至室温。向该混合物中加 入水(160L)，然后加入三乙胺(25.6kg)、4-氟-2-甲基苯硼酸(33.2kg)、乙酸钯 (0.8kg，2mol％)和三苯基膦(1.88kg，4mol％)。将反应混合物加热至65℃，并 在该温度剧烈搅拌3小时。将混合物冷却至55-60℃，并加入THF(160L)。 在55-60℃下分离底层水相。有机相浓缩至200L，加入甲醇(400L)并常压蒸 馏除去THF(直到通过NMR＜3mol％THF)，通过加入甲醇(600-800L)保持该 溶液的体积为约600L。将溶液冷却至55-60℃并用标题化合物(0.16kg)种晶。 该浆液在55℃搅拌至少30分钟然后以1小时冷却至20℃。该浆液在20℃ 下搅拌至少2小时，并过滤。滤饼用甲醇(160L)洗涤然后用MeOH∶水(4∶ 1，120L)洗涤，且在60-65℃和真空下干燥过夜，得到标题化合物(43.8kg)。 400MHz NMR在CDCl3中。以四甲基硅烷在0.00ppm处作为基准。δ(ppm)： 2.29(3H)s，2.33(3H)s，6.97-7.05(4H)m，7.24-7.32(3H)m，9.64(1H)s， 10.38(1H)s。
实施例G
制备4-(2，4-二氟苯基)-2-(甲硫基)-8-(2，4，6-三氟苯基)吡啶并[2，3-d]嘧啶 -7(8H)-酮

将4-(2，4-二氟苯基)-2-(甲硫基)-6-[(2，4，6-三氟苯基)-氨基]嘧啶-5-甲醛 (1.35Kg，，3.2mol)、2，2-二甲基-1，3-二噁烷-4，6-二酮(麦德鲁姆酸，607g，4.2mol) 和无水乙酸铯(257g，1.34mol)一起在四氢呋喃(6.75L)中搅拌，并将所得混合 物加热至55±5℃保持2.5小时。将反应混合物冷却至35℃，并加入硫代乙 酸(229mL，3.2mol)。2小时后，将混合物冷却至室温，并进一步搅拌16小时。
将该混合物用水(1.35L)洗涤，将1-丙醇(2.03L)加至有机相中，然后加入 晶种，15分钟后，加入水(675mL)。再搅拌1小时后，经1小时再次加入水 (2.7L)。搅拌1小时后，再次添加水(1.35L)。搅拌16小时后，过滤该产物浆 液。该滤饼用工业用甲醇变性酒精(2.7L每次洗涤)洗涤两次，并在55℃下 于真空烘箱中干燥，得到标题化合物(1.09Kg，76％)。1H NMR(DMSO-d6)δ： 7.80(1H，d，烯烃CH，J＝9.8)；7.78(1H，m，芳香族CH)；7.58(2H，t，芳香族 CH，J＝9.1)；7.56(1H，m，芳香族CH)；7.36(1H，m，芳香族CH)；6.78(1H， d，烯烃CH，J＝9.8)；2.30(3H，s，SMe)。
4-(2，4-二氟苯基)-2-(甲硫基)-7-氧代-8-(2，4，6-三氟苯基)-7，8-二氢吡啶并 [2，3-d]嘧啶的制备也可按照WO 03/088972，实施例1，C部分所描述的制备。
实施例H
制备8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基] 氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮4-甲基苯磺酸盐

将8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-(甲硫基)吡啶并-[2，3-d]嘧啶 -7(8H)-酮(18.0kg)溶于二氯甲烷(90L)中，且添加四丁基硫酸氢铵(0.74kg)和钨 酸钠二水合物(0.3kg)。在30℃下经2小时添加30％wt过氧化氢(17kg)。然后在 30℃搅拌该反应混合物5小时然后冷却至20±5℃。分离底层有机层并用19％ w/v偏亚硫酸氢钠水溶液(90L)和水(90L)洗涤。将DCM(90L)加入有机物中并 将该溶液常压浓缩至81L。添加NMP(36L)得到溶液A。在42±2℃下，经1小 时向丝氨醇(9.9kg)在NMP(45L)中的溶液中加入溶液A。将该混合物在 42±2℃搅拌1小时并冷却至20-25℃。使用CLLE，将上述反应溶液萃取进入 DCM中并用盐水洗涤以除去NMP。将DCM溶液浓缩至72L并添加正丙醇 (234L)。将溶液浓缩至180L，添加正丙醇(90L)并将溶液加热至80±5℃。在 80±5℃下，添加4-甲基苯磺酸一水合物(9.9kg)在正丙醇(45L)中的溶液。将该 溶液以8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)-乙基] 氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮4-甲基苯磺酸盐(180g)种晶，并在75±3℃下 搅拌1.5小时，然后冷却至1±3℃。在1±3℃下，搅拌该混合物1.5小时然后过 滤。将滤饼用正丙醇(3x72L)洗涤，并在真空和70℃下干燥，得到标题化合物 (21.06kg)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)，以四甲基硅烷在0.00ppm处作为 基准。δppm 2.22和2.25(2x s，3H)，2.30(s，3H)，3.34-3.43(m，2.5H)，3.48(d， J＝5.19Hz，2H)，4.04(m，0.5H)，6.33(2x d，1H)，7.14(d，J＝7.63Hz，2H)，7.17 -7.25(m，1H)，7.29(d，J＝9.77Hz，1H)，7.33-7.40(m，3H)，7.41-7.45(m，1 H)，7.52(d，J＝7.93Hz，2H)，7.61-7.69(m，2H)。
实施例I
制备3-[8-(2，6-二氟苯基)-2-(甲硫基)-7-氧代-7，8-二氢吡啶并[2，3-d]嘧啶 -4-基]-4-甲基苯甲酸

将3-[6-(2，6-二氟苯基)-氨基]-5-甲酰基-2-甲硫基-4-嘧啶基-4-甲基苯甲酸 酯(30kg)、麦德鲁姆酸(13.1kg)、磨碎的NaOAc(5.7kg)和THF(135L)加热 至回流，持续约6至12小时。将另外在水(4L)中的0.2当量的NaOAc(1.1kg) 加至该反应混合物中。该反应回流约12小时，然后将另外的在THF(约6L) 中的麦德鲁姆酸(1.9kg)加至该反应混合物中。将该反应混合物回流13小时。 加入更多的THF(6L)中的麦德鲁姆酸(2.0kg)，并将该反应回流6小时。
真空蒸馏除去溶剂以调节体积为约160L。向该反应混合物中加入硫代 乙酸(5.83kg)，用THF(15L)冲洗。将该反应混合物回流11小时，然后冷却 至室温。添加于水(140L)中的LiOH(11.7kg)，并将该反应混合物回流2-3 小时。向该反应混合物加入水(130L)和50％NaOH(12kg)。向该反应混合物 添加庚烷(150L)用来萃取。丢弃有机层。该水层用MTBE(150L)洗涤一次 以上。再次丢弃有机相。水溶液用6M HCl调整pH至目标pH≤2(实际读数： pH＝0.81)。水溶液用DCM(150L)萃取两次。该合并的有机相真空蒸馏降至 150L。经最少4小时加入庚烷(300L)，然后将混合物冷却至0-5℃并在该温 度搅拌1小时。经4小时加入另外部分的庚烷(300L)。过滤收集产物并用庚 烷(150L)洗涤，在滤器上干燥，得到标题化合物(31.3kg)。
500MHz NMR在DMSO-d6中。以TMS在0.00ppm处作为基准。δ(ppm)： 2.25(3H)s，2.26(3H)s，6.72(1H)d J＝9.9Hz，7.42(2H)dd J＝8.6和8.6Hz，7.57 (2H)m，7.57(1H)d J＝7.8Hz，7.71(1H)m，7.94(1H)d J＝1.4Hz，8.04(1H)dd J＝8.0Hz和1.6Hz，13.0(1H)宽峰s。
实施例J
制备4-(3-甲基-4-氟苯基)-2-(甲硫基)-8-(2，6-三氟苯基)吡啶并[2，3-d]嘧啶 -7(8H)-酮

将4-(3-甲基-4-氟苯基)-2-(甲硫基)-6-[(2，6-三氟苯基)氨基]-嘧啶-5-甲醛 (10.09g，25.9mmol)、2，2-二甲基-1，3-二噁烷-4，6-二酮(麦德鲁姆酸，4.86g， 33.7mmol)和无水乙酸钠(1.59g，19.4mmol)一起在四氢呋喃(30mL)中搅拌，并 将所得混合物加热至60±5℃保持6小时。向该反应中加入四氢呋喃(50mL) 然后在大气压下从该反应中蒸馏掉溶剂(30mL)。将该反应混合物冷却至34℃ 并加入硫代乙酸(3.7mL，51.8mmol)和四氢呋喃(50mL)。在该温度下24小时 后，在大气压下蒸馏除掉溶剂(40mL)。将溶液冷却至室温，然后加入2-丙醇 (30mL)和水(20mL)。将所得溶液缓慢冷却至0℃，在其间产生沉淀。搅拌90 分钟后，过滤该产物浆液。滤饼用2-丙醇和水(4∶1，3x 20mL)的混合物洗涤 三次并在真空烘箱中于50℃下干燥，得到标题化合物(4.48g，84％)。1H NMR (CDCl3)δ(ppm)：δ(ppm)：2.22(3H)s，2.39(3H)s，6.69(1H)d，J＝9.8Hz， 7.12(2H)t，J＝8.1Hz，7.18(1H)t，J＝8.9Hz，7.45-7.51(2H)m，7.55(1H)d， J＝7.0Hz，7.90(1H)d，J＝10.1Hz。
实施例K
制备4-(2-甲基-5-氟苯基)-2-(甲硫基)-8-(2，6-三氟苯基)-吡啶并[2，3-d]嘧 啶-7(8H)-酮

将4-(2-甲基-5-氟苯基)-2-(甲硫基)-6-[(2，6-三氟苯基)-氨基]嘧啶-5-甲醛 (12g，30.8mmol)、2，2-二甲基-1，3-二噁烷-4，6-二酮(麦德鲁姆酸，5.77g， 40.1mmol)和无水乙酸钠(1.90g，23.1mmol)一起在四氢呋喃(36mL)中搅拌，并 将所得混合物加热至64±5℃保持3小时。向该反应中加入四氢呋喃(60mL) 然后在大气压下从该反应中蒸馏掉溶剂(36mL)。将反应混合物冷却至33℃ 并加入硫代乙酸(4.4mL，61.6mmol)。在该温度下23小时后，将溶液冷却至 室温，并用2M氢氧化钠(24mL)洗涤，然后用10％碳酸钾溶液(2x24mL) 洗涤两次。加入2-丙醇(36mL)和水(24mL)，然后经1小时加入另外的水 (66mL)。所得溶液缓慢冷却至0℃。搅拌1小时后，过滤产物浆液。滤饼用 2-丙醇和水(4∶1，3x24mL)的混合物洗涤三次，并在真空烘箱中于50℃下干 燥，得到标题化合物(8.50g，67％)。1H NMR(CDCl3)δ(ppm)：2.20(3H)s，2.23 (3H)s，6.65(1H)d，J＝9.8Hz，7.04(1H)dd，J＝8.8，2.7Hz，7.13(2H)t，J＝8.2 Hz，7.32(1H)dd，J＝8.6，5.6Hz，7.45-7.53(2H)m。
实施例L
制备8-(2，6-二氟苯基)-4-(2-甲基-5-(甲氧基羰基)苯基)-2-(甲硫基)-7-氧代 -7，8-二氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-6-羰酸

在环境温度下，将三乙胺(0.52ml，3.7mmol)加至3-[6-(2，6-二氟苯基)-氨 基]-5-甲酰基-2-甲硫基-4-嘧啶基-4-甲基苯甲酸酯(1.6g，3.7mmol)和麦德鲁姆 酸(0.7g，4.8mmol，1.3当量)在THF(15ml)中的搅拌的悬浮液中。所得黄色溶 液在环境温度下搅拌2小时。加入水(25ml)，并将混合物萃取至乙酸乙酯 (25ml)中。分离各相，并用水(25ml)洗涤有机物，用硫酸镁干燥，浓缩，得 到标题化合物(1.89g)。400MHz NMR在DMSO-d6中。以TMS在0.00ppm 处作为基准。δ(ppm)：2.27(3H)s，2.29(3H)s，3.87(3H)s，7.45(2H)t J＝8.6Hz， 7.63(1H)d J＝8.1Hz，7.73(1H)m，8.03(1H)s，8.03(1H)d J＝1.8Hz，8.08(1H) dd J＝8.0和1.8Hz，13.19(1H)br s。
实施例M
制备4-(2，4-二氟苯基)-2-(甲硫基)-7-氧代-8-(2，4，6-三氟苯基)-7，8-二氢吡 啶并[2，3-d]嘧啶-6-羧酸

在室温下，将上述方案中的化合物1的4-(2，4，6-三氟苯基)-6-(2，4-二氟苯 基)-2-甲硫基)-5-嘧啶甲醛(2.8g，1当量)在DCM(28ml)和吡啶(1.3ml)中与麦 德鲁姆酸(0.97g，1当量)搅拌过夜。所得溶液加热回流，直到用HPLC检测 剩余6％的起始原料，然后加入DCM(15ml)和2M HCl(5ml)。用2M HCL(5ml) 洗涤该DCM相并在真空蒸掉DCM。将1∶1MeCN∶H2O(20ml)加入残余物 中，并将其搅拌且在65℃下加热，以得到固体。搅拌该混合物，并使其冷 却过夜，然后过滤。用1∶1MeCN∶H2O(3x5ml)洗涤该滤饼，干燥，得到 标题化合物(2.4g，74％产率)。1H NMR(400MHz，氯仿-D)以四甲基硅烷在 0.00ppm处作为基准。δppm 2.35(s，3H)，6.98(t，J＝8.07Hz，2H)，7.04-7.11 (m，1H)，7.15(t，J＝8.07Hz，1H)，7.58-7.69(m，1H)，8.81(d，J＝4.16Hz，1 H)。
在可选的实施方案中，与在上述使用DCM可能的温度相比，筛选该反 应条件，使其在较高温度下使用溶剂和碱。将化合物1，4-(2，4，6-三氟苯 基)-6-(2，4-二氟苯基)-2-甲硫基)-5-嘧啶甲醛(0.5g)和麦德鲁姆酸(0.22g，1.25当 量)在DIPEA(0.1ml，0.5当量)或碳酸钾(0.08g，0.5当量)的存在下在乙腈、甲 苯或乙酸乙酯中在60℃下加热3小时。所有使用DIPEA的反应如同在乙酸 乙酯中使用碳酸钾一样，得到了标题化合物。在乙腈中使用碳酸钾的反应非 常慢且在甲苯中没有观察到反应。
实施例N
制备4-(2-甲基-4-氟苯基)-2-(甲硫基)-8-(2，6-三氟苯基)吡啶并[2，3-d]嘧啶 -7(8H)-酮

将4-(2-甲基-4-氟苯基)-2-(甲硫基)-6-[(2，6-二氟苯基)-氨基]嘧啶-5-甲醛 (5.30g，13.6mmol)、2，2-二甲基-1，3-二噁烷-4，6-二酮(麦德鲁姆酸，2.55g， 17.7mmol)和无水乙酸钠(0.84g，10.2mmol)一起在四氢呋喃(16mL)中搅拌，并 将所得混合物加热至65±3℃保持3小时。将反应混合物冷却至35℃并加入 硫代乙酸钾(2.00g，17.7mmol)。在该温度下60小时后，该溶液冷却至室温 并用5％碳酸钾溶液(21mL)洗涤，然后用10％碳酸钾溶液(10.5mL)洗涤。 加入2-丙醇(16mL)和水(10.5mL)，然后经1小时加入另外的水(29mL)。所得 溶液缓慢冷却至0℃。搅拌1小时后，过滤产物浆液。用2-丙醇和水(4∶1，3 x10mL)的混合物洗涤滤饼三次，并在真空烘箱中于50℃下干燥，得到标题 化合物(4.74g，84％)。1H NMR与前面制备的物质一致。
实施例O
制备4-(2，4-二氟苯基)-2-(甲硫基)-7-氧代-8-(2，4，6-三氟苯基)-7，8-二氢吡 啶并[2，3-d]嘧啶-6-羧酸

进行另外的实验以筛选用于缩合反应的可选碱以获得标题化合物。
固体碱
向4-(2，4，6-三氟苯基)-6-(2，4-二氟苯基)-2-甲硫基)-5-嘧啶甲醛(50mg，1 当量)中加入麦德鲁姆酸(0.021g，+/-3mg，1.2当量)，之后加入以下所述碱之 一，然后加入乙腈(0.5ml)。
1)氢氧化铯一水合物(0.035g，1.75当量)
2)氢氧化锂(0.003g，1当量)
3)碳酸铯(0.024g，0.6当量)
4)氢氧化钠(0.005g，1当量)
5)碳酸锂(0.007，0.65当量)
6)碳酸钙(0.0077g，0.63当量)
7)碳酸氢钾(0.0114g，0.94当量)
8)乙酸钠(0.0049g，0.5当量)
9)碳酸镁(水合碱)(0.0084g，未知当量)
10)二苯胺(0.0094g，0.5当量)
11)四甲基吡嗪(0.0105g，0.5当量)
将该混合物搅拌并在55℃下加热4小时。
液体碱
向4-(2，4，6-三氟苯基)-6-(2，4-二氟苯基)-2-甲硫基)-5-嘧啶甲醛(50mg，1 当量)中加入麦德鲁姆酸(0.021g，+/-3mg，1.2当量)，之后加入以下所述碱之 一的溶液和乙腈。
A)三乙胺(0.03ml)在乙腈(2ml)中
B)Hunig’s碱(0.04ml)在乙腈(2ml)中
C)吡啶(0.02ml)在乙腈(2ml)中
D)2，4，6-三甲基吡啶(0.03ml)在乙腈(2ml)中
E)二-仲丁胺(0.04ml)在乙腈(2ml)中
F)2，6-二甲基哌啶在乙腈(2ml)中
G)二己胺(0.06ml)在乙腈(2ml)中
H)DBN(二氮杂二环[4.3.0]壬-5-烯)(0.06ml)在乙腈(2ml)中
I)2，6-二叔丁基吡啶(0.03ml)在乙腈(1ml)中
J)异喹啉(0.03ml)在乙腈(2ml)中
K)N-甲基哌啶(0.03ml)在乙腈(2ml)中
L)2，6-二甲基吡啶(0.03ml)在乙腈(2ml)中
M)吡咯烷(0.0ml)在乙腈(2ml)中
搅拌该混合物并在55℃下加热4小时。
结论：
无机碱：LiOH、NaOH、Li2CO3、CaCO3、KHCO3、MgCO3无明显反应； CsOH和Cs2CO3反应，含有高含量杂质；乙酸钠反应干净，且几乎反应完全。
有机碱：四甲基吡嗪、2，6-二叔丁基吡啶、二苯胺无明显反应；吡啶、 二仲丁基胺、异喹啉、2，6-二甲基吡啶部分反应；DIPEA、三乙胺、DBN反 应完全但含有杂质；
吡咯烷、N-甲基哌啶、二己胺、二甲基哌啶和2，4，6-三甲基吡啶具有完 全和反应干净。
其它大规模反应使用乙酸钾、乙酸铯和乙酸钠进行。将4-(2，4，6-三氟苯 基)-6-(2，4-二氟苯基)-2-甲硫基)-5-嘧啶甲醛(0.5g)、麦德鲁姆酸(0.23g，1.3当 量)和上述3种碱之一(0.5当量)在乙腈中搅拌并于60℃下加热。所有3种乙 酸盐都反应干净，铯盐最快。将乙酸加入乙酸钠反应试管中并不利于产物溶 解。
实施例P
制备4-(2，4-二氟苯基)-8-(2，4，6-三氟苯基)-2-(甲硫基)吡啶并[2，3-D]嘧啶 -7(8H)-酮

将4-(2，4，6-三氟苯基)-6-(2，4-二氟苯基)-2-甲硫基)-5-嘧啶甲醛(上述方 案中的化合物1)(0.48g，1wt.，1当量)、丙二酸(0.15g，1.2当量，Aldrich)和甲 苯一起搅拌。将哌啶(0.05ml，0.5当量)加至该混合物中，并在95℃油浴中加 热。小时后，将吡啶加至该反应中，并连续加热过夜，得到标题化合物， 为主要产物。
或者在另一实验中，将以下物质一起混合：4-(2，4，6-三氟苯基)-6-(2，4-二 氟苯基)-2-甲硫基)-5-嘧啶甲醛(100mg)、丙二酸(8mg)、哌啶(30ml)、乙酸 (5ml)、Ac2O(5ml)和DMF(360ml)。向所得混合物中再加入260ml DMF。将 该溶液在50℃(浴)下加热30分钟。小时后，HPLC表明8∶1变化。
该标题化合物也可按WO 03/088972，实施例1，部分c制备，将其在此 引入作为参考。
在另一个可替代反应中，将化合物1(100mg，0.243mmol，1当量)、丙二 酸(28mg，0.268mmol，1.1当量)、哌啶(30ml)、AcOH(5ml)、Ac2O(5ml)、DMF (360ml)一起混合。进一步向该溶液加入DMF(360ml)并在50℃(浴)下加热 2.5小时。HPLC显示其为起始原料和标题化合物的8∶1的混合物。
实施例Q
制备8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基] 氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮4-甲基苯磺酸盐，晶型1

(a)乙腈晶态多晶型
将三批8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙 基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(6.34g；标记“A”，0.77g.；和标记“B” 3.33g-10.44g总共)加至CH3CN(30mL)中，并在搅拌下将其加至对甲苯磺酸 一水合物[4.75g.(0.025mol)，Aldrich Chem.]的溶液中。其具有非常适度的放 热；冷却得到晶体。得到第1批产物9.4g(m.p.217°-19°d.)；浓缩该滤液至 1/3体积，得到第2批产物2.4g(m.p.217°-19°d.)；通过夜过冷却该滤液得 到第3批产物0.8g(m.p.210°-12°d.)。
搅拌该第2批产物(2.4g)，并用一些丙酮超声处理得到均一混合物。收 集固体并干燥。Wt.1.5g(m.p.115°-16°d.)。
上述第1批产物(9.4g.)和该1.5g合并，然后从CH3CN重结晶，得到白 色固体。Wt.8.2g。该物质通过分析型HPLC分析是纯的(100％)，具有对甲 苯磺酸峰，LC/MS(100％)，具有对甲苯磺酸峰；1H NMR(400MHz，MeOD4) δ7.65-7.71(m，3H)，7.40-7.47(m，2H)，7.24-7.27(m，6H)，6.59(s，1H)，3.63(s， 4H)，2.35-2.40(m，6H)LC MS(m/e)＝457(MH+)Rt＝1.67分钟.m.p. 217°-18°d.元素分析(C30H27F3N4O6S)计算值：C，57.32；H，4.33；N，8.91。 实测值：C，57.33；H，4.18；N，8.75。
(b)氯仿、乙醇、醚衍生的晶态多晶型
将8.1g上述乙腈多晶型溶于CHCl3(300mL)中，并在搅拌下温热至轻 微回流；加入足够的共溶剂EtOH(200标准酒精度(proof))，得到溶液(约6 mL)。在搅拌下冷却该澄清溶液，并加入乙醚至初始的混浊度。该混合物‘一 起’结晶。在冰浴中冷却后，收集固体并在真空中干燥，得到产物，为白色 固体。Wt.7.9g。该物质是纯的(100％)，通过分析型HPLC分析，具有对甲 苯磺酸峰，LC/MS(100％)，具有对甲苯磺酸峰；1H NMR(400MHz，DMSOd6) δ7.55-7.75(m，2H)，7.10-7.48(m，9H)，6.29-6.33(m，1H)，4.50-5.50(bm，2H)， 3.99(s，1H)，3.30-3.35(m，5H)，2.29(s，3H)，2.22(d，J＝3.2Hz，3H)LC MS (m/e)＝457(MH+)Rt＝1.67分钟.m.p.230°-31°d.元素分析 (C30H27F3N4O6S)计算值：C，57.32；H，4.33；N，8.91。实测值：C，56.99； H，4.28；N，8.82。mp＝230-231℃。将该样品进行XRPD，并指定为晶型1。
实施例R
制备8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基] 氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮4-甲基苯磺酸盐，晶型4
在75℃下，将在1-丙醇(20mL)中的4-甲基苯磺酸一水合物(4.4g)加至 8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基]氨基}吡 啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(8.83)于正丙醇(120ml，按实施例H制备)中的溶液 中。该混合物加热至80℃，并将该溶液在该温度下搅拌，直到其结晶(约1.5 小时)。然后搅拌该悬浮液，并冷却至0℃，过滤。用正丙醇(4x32ml)洗涤该 滤饼并干燥，得到标题化合物(8.6g)，具有与晶型4一致的XRPD。
实施例S
制备8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基] 氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮4-甲基苯磺酸盐，晶型4
将8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基] 氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(15.0g；0.033摩尔)于正丙醇(195mL)中的 溶液加入反应器中。加热反应器的内含物至约80℃。加入对甲苯磺酸一水合 物(6.6g；1.05当量)于正丙醇(30mL)中的溶液。用晶型4晶种在约75℃下 种晶该溶液。冷却至0℃，并过滤。产物为17.1g的晶型4甲苯磺酸盐，通 过DSC和XRPD确证。
实施例T
制备8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基] 氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮4-甲基苯磺酸盐，晶型1
将6gm 8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基) 乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮氢溴酸盐悬浮于甲醇(15ml)中且滴加 入NaOH(1.5gm在10ml中)直到pH达到14。该溶液变黑，并将该反应用 50ml EtOAc和50ml水稀释。有机物用50ml水洗涤，且用硫酸钠(Na2SO4) 干燥，过滤，并浓缩至泡沫(5.1gm)。
将对甲苯磺酸(1.66g)溶于35ml ACN。该游离碱(3.66gm)溶于105ml乙 腈中。将该对甲苯磺酸在室温下加至游离碱溶液中。使该反应在室温下搅拌， 并用晶型1种晶。没有发生结晶。将该混合物在丙酮冰浴中骤冷。1小时后 过滤该混合物，并用乙腈洗涤，干燥过夜，得到3.5gm产物。
将3.5gm产物悬浮于47ml氯仿和3ml甲醇中，并加热至回流以实现完 全溶解，并将其冷却至室温。搅拌该沉淀物60分钟并过滤，并用10ml氯仿 洗涤，空气干燥，得到2gm甲苯磺酸盐。
产物通过DSC分析，并支持晶型1的存在。
已经发现几乎在任何温度下，氯仿用于制备晶型1，例如在浆液实验中， 约2℃至约40℃下。
实施例U
制备8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基] 氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮4-甲基苯磺酸盐，晶型1和晶型4混合物
在烧瓶中加入悬浮于甲醇(15ml)中的6gm 8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲 基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基]氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮4- 甲基苯磺酸盐氰化酸盐。在另一个烧瓶中加入NaOH(1.5gm溶于10ml水) 以得到一种溶液，将该溶液滴加至HBr盐溶液中，直到pH达到14。将50ml EtOAc和50ml水加至该烧瓶中。用硫酸钠(Na2SO4)干燥有机物，并过滤， 浓缩至游离碱的泡沫(5.7gm)。
将该游离碱(5.7gm)溶于16ml乙腈中。将对甲苯磺酸(2.6gm)溶于40ml 乙腈中。将两部分合并，搅拌。10分钟后，观察到稠状溶液。将其过滤，并 用乙腈洗涤，得到2gm产物。浓缩滤液并与该2gm产物合并，并在50ml 96∶ 4氯仿∶甲醇v/v中形成浆液。将该混合物骤冷，但没有沉淀形成。加入2ml 乙醚且产物结晶。然后过滤产物并用乙醚洗涤。将该产物空气干燥整个周末， 得到5gm。通过DSC和XRPD的分析确定存在晶型1和晶型4。
实施例V
制备8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基] 氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮4-甲基苯磺酸盐，晶型1
将8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基] 氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮4-甲基苯磺酸盐(1g，晶型4)悬浮于氯仿 (15ml)中，并使用以下循环过程将温度在0-40℃循环3天。以4℃/分钟从 20℃加热至40℃，在40℃下搅拌1小时，以0.66℃/分钟冷却至0℃，在 0℃下搅拌1小时，以4℃/分钟加热至40℃。过滤该混合物并干燥滤饼，得 到标题化合物。XRPD和DSC分析表明为晶型1。
实施例W
制备8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基] 氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮4-甲基苯磺酸盐，晶型3
将8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基] 氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮4-甲基苯磺酸盐(50mg)加入反应容器中。 手动分配甲醇(750μl)，并将浆液在涡旋混合器中于20℃下以500rpm摇动2小 时。然后过滤该反应，并将滤液在氮气流下蒸发至干。当样品在氮气下干燥 2小时后，将其分离用于分析。Raman、XRPD和DSC分析表明为晶型3。
实施例X
制备8-(2，6-三氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基] 氨基}吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮4-甲基苯磺酸盐，晶型4
在75℃下，将于1-丙醇(20mL)中的4-甲基苯磺酸一水合物(4.4g)加至 8-(2，6-二氟苯基)-4-(4-氟-2-甲基苯基)-2-{[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基]氨基}吡 啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮(8.83)于正丙醇(120ml，按实施例H制备)中的溶液 中。将该混合物加热至80℃，并在该温度下搅拌溶液，直到结晶(约1.5小 时)。然后搅拌该悬浮液并冷却至0℃和过滤。用正丙醇(4x8ml)洗涤滤饼并 干燥，得到标题化合物(8.6g)。XRPD和DSC分析确证为晶型4。
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