一种乳腺癌基因检测试剂盒
专利汇可以提供一种乳腺癌基因检测试剂盒专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种 乳腺癌 基因检测 试剂 盒 ，包括 包装 盒体、 衬垫 和试管，所述衬垫设置在包装盒体的内部并且衬垫上设置有容器孔，试管包括引物试管、PCR反应液试管、SAP反应液试管、CODE反应液试管、接头试管、 磁珠 试管、阳性对照品试管和阴性对照品试管。本发明还公布了该试剂盒的使用方法。该产品实现了同时检测4个乳腺癌相关基因全部外显子序列的目的，从而告知被检者患乳腺癌的 风 险数值，提前 预防 和控制，指导医师选择正确的临床 治疗 方案 ，有利于患者进行针对性治疗；该产品将同一 疾病 相关基因的全部外显子检测整合在一个试剂盒内，使用更方便而且成本更低，对患乳腺癌风险性的评估也更便捷，更科学。，下面是一种乳腺癌基因检测试剂盒专利的具体信息内容。
1.一种乳腺癌基因检测试剂盒，其特征在于，包括包装盒体、衬垫和试管，所述衬垫设置在包装盒体的内部并且衬垫上设置有容器孔，试管包括引物试管、PCR反应液试管、SAP反应液试管、CODE反应液试管、接头试管、磁珠试管、阳性对照品试管和阴性对照品试管，引物试管、PCR反应液试管、SAP反应液试管、CODE反应液试管、接头试管、磁珠试管、阳性对照品试管和阴性对照品试管均放置在容器孔中，引物试管的数量为七个，第一个引物试管中引物的上游引物序列如SEQIDNo.1所述，第一个引物试管中引物的下游引物序列如SEQIDNo.2所述，第二个引物试管中引物的上游引物序列如SEQIDNo.3所述，第二个引物试管中引物的下游引物序列如SEQIDNo.4所述，第三个引物试管中引物的上游引物序列如SEQIDNo.5所述，第三个引物试管中引物的下游引物序列如SEQIDNo.6所述，第四个引物试管中引物的上游引物序列如SEQIDNo.7所述，第四个引物试管中引物的下游引物序列如SEQIDNo.8所述，第五个引物试管中引物的上游引物序列如SEQIDNo.9所述，第五个引物试管中引物的下游引物序列如SEQIDNo.10所述，第六个引物试管中引物的上游引物序列如SEQIDNo.11所述，第六个引物试管中引物的下游引物序列如SEQIDNo.12所述，第七个引物试管中引物的上游引物序列如SEQIDNo.13所述，第七个引物试管中引物的下游引物序列如SEQIDNo.14所述。
2.根据权利要求1所述的乳腺癌基因检测试剂盒，其特征在于，所述PCR反应液试管、SAP反应液试管、CODE反应液试管、磁珠试管、阳性对照品试管和阴性对照品试管的数量均为一个，接头试管的数量为12的整数倍。
3.根据权利要求1或2所述的乳腺癌基因检测试剂盒，其特征在于，所述包装盒体上端设置有封盖。
4.一种如权利要求1-3任一所述的乳腺癌基因检测试剂盒的使用方法，其特征在于，具体步骤如下：
步骤一，在PCR仪上扩增基因片段，每支引物试管的PCR扩增使用3个反应管，其中1个反应管为被检测样本，阳性对照和阴性对照各使用1个反应管，每个试管中总体积6.5ul，其中
3ulPCR反应液、1ul引物和2.5ul检测样本（基因组DNA、阳性对照和阴性对照）。
5.反应条件为：95℃下进行2分钟；45个循环的95℃，30秒，56℃，30秒，72℃，1分钟；72℃，5分钟；最终在4℃保存；
步骤二，扩增反应结束之后，使用SAP反应液对每管产物进行纯化，反应条件为：37℃，
60分钟；80℃、20分钟；最终在4℃保存；
步骤三，SAP反应液反应完成后，使用CODE反应液对每个样本的产物加不同的接头，反应条件为：95℃、10分钟；12个循环的95℃、15秒，60℃、30秒，72℃、30秒；72℃、3分钟；最终在4℃保存；
步骤四，CODE反应结束之后，使用磁珠对产物进行纯化，并使用QIAquick® Gel Extraction Kit回收产物中200-500bp的片段，反应结束后在Hiseq X10仪器上进行测序，根据得到的测序结果进行生物信息学分析，判断BRCA1、BRCA2、PALB2和RECQL基因的外显子序列是否存在致病突变。
一种乳腺癌基因检测试剂盒
技术领域
背景技术
发明内容
3ulPCR反应液、1ul引物和2.5ul检测样本（基因组DNA、阳性对照和阴性对照）。反应条件为：
95℃下进行2分钟；45个循环的95℃，30秒，56℃，30秒，72℃，1分钟；72℃，5分钟；最终在4℃保存；
步骤二，扩增反应结束之后，使用SAP反应液对每管产物进行纯化，反应条件为：37℃，
60分钟；80℃、20分钟；最终在4℃保存；
步骤三，SAP反应液反应完成后，使用CODE反应液对每个样本的产物加不同的接头，反应条件为：95℃、10分钟；12个循环的95℃、15秒，60℃、30秒，72℃、30秒；72℃、3分钟；最终在4℃保存；
步骤四，CODE反应结束之后，使用磁珠对产物进行纯化，并使用QIAquick® Gel Extraction Kit回收产物中200-500bp的片段，反应结束后在Hiseq X10仪器上进行测序，根据得到的测序结果进行生物信息学分析，判断BRCA1、BRCA2、PALB2和RECQL基因的外显子序列是否存在致病突变。
具体实施方式
4、SAP反应液试管5、CODE反应液试管6、接头试管7、磁珠试管8、阳性对照品试管9和阴性对照品试管10，引物试管3、PCR反应液试管4、SAP反应液试管5、CODE反应液试管6、接头试管7、磁珠试管8、阳性对照品试管9和阴性对照品试管10均放置在容器孔中，引物试管3的数量为七个。PCR反应液试管4、SAP反应液试管5、CODE反应液试管6、磁珠试管8、阳性对照品试管9和阴性对照品试管10的数量均为一个，接头试管7的数量为12的整数倍。包装盒体1上端设置有封盖。其中PCR反应液的成分包含：KAPA2G Robust 热启动DNA聚合酶、dNTP、MgCl2和PCR缓冲液。SAP反应液的成分包含：SAP、SAP反应缓冲液、核酸外切酶1和核酸外切酶1反应缓冲液。CODE反应液的成分包含：KAPA HIFI 缓冲液，KAPA HIFI 热启动DNA聚合酶和dNTP。
纯化产物用的磁珠为：Axygen的AMPure XP beads。对照品分为阳性对照品和阴性对照品，阴性对照品为无菌双蒸水样品，阳性对照品为血液DNA样本。
实施例
72℃、1分钟；72℃、5分钟；最终在4℃保存。扩增反应结束之后，使用SAP反应液对每管产物进行纯化，反应条件为：37℃、60分钟；80℃、20分钟；最终在4℃保存。SAP反应液反应完成后，使用CODE反应液对每个样本的产物加不同的接头，反应条件为：95℃、10分钟；12个循环的95℃、15秒，60℃、30秒，72℃、30秒；72℃、3分钟；最终在4℃保存。CODE反应结束之后，使用磁珠对产物进行纯化，并使用QIAquick® Gel Extraction Kit回收产物中200-500bp的片段。反应结束后在Hiseq X10仪器上进行测序。根据得到的测序结果进行生物信息学分析，判断BRCA1、BRCA2、PALB2、和RECQL基因的外显子序列是否存在致病突变即可。
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