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利用超高压技术富集纯化大麻二酚的方法

阅读:170发布:2024-02-21

专利汇可以提供利用超高压技术富集纯化大麻二酚的方法专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 属于天然 有机化学 领域,涉及一种从工业大麻中分离纯化大麻二酚的新方法,特别是涉及一种利用超高压( 离子液体 作为 溶剂 )提取,聚酰胺藕联大孔 树脂 吸附 ,高速逆流色谱分离纯化大麻二酚的新方法。本发明优点:1、离子液体与超高压结合,具有提取更快、更高效的优势。并且工艺简便易行,有效成分提取充分, 生物 碱 含量高。2、聚酰胺藕联大孔树脂吸附纯化技术,能很好的富集大麻二酚,进一步纯化有效成分。树脂易处理、分离速度快、 费用 低,可以工业化使用。3、高速逆流色谱技术具有操作灵活、高效、分离速度快、制备量大、费用低等优点,并且可以工业化使用。,下面是利用超高压技术富集纯化大麻二酚的方法专利的具体信息内容。

1.一种采用超高压提取技术(离子液体作为溶剂),聚酰胺藕联大孔树脂吸附,再用高速逆流色谱分离纯化,得到高纯度大麻二酚的新方法,其步骤如下:
(1)超高压提取:大麻叶或根切断,以不同浓度离子液体溶液为溶剂,在一定料液比、适当超高压下处理几分钟;
(2)精滤处理:采用聚四氟乙烯膜,过滤精度0.1μm,在一定温度和压力下精滤处理;
(3)聚酰胺树脂吸附及洗脱:
采用一定目数的聚酰胺粉末,控制上样液浓度,上样液体积,室温下以一定流速吸附饱和;解吸时先除杂,再用一定浓度的乙醇溶液解吸,控制流速,收集洗脱液,检测大麻二酚含量;
(4)大孔树脂二次吸附及洗脱:
选用不同型号的大孔树脂,控制上样液质量浓度,上样速率;先用2BV去离子冲洗树脂,再用不同浓度的乙醇溶液,以一定流速洗脱,收集洗脱液,检测大麻二酚含量;
(5)真空冷冻干燥:收集大麻二酚溶液,在适当温度、干燥压力下冷冻干燥;
(6)分相:称取大麻二酚提取物,选择HSCCC溶剂系统,按比例将各种溶剂加入分液漏斗中,震荡使溶液充分混合,放置过夜。分相平衡后分出上相和下相;
(7)HSCCC纯化:以溶剂系统的上相为固定相,下相为流动相,调整转速,以一定流速入流动相,纯化大麻二酚提取物;
(8)检测.:采用高效液相色谱法,紫外检测器在一定波长进行检测。
2.根据权利要求1所述的采用超高压提取技术(离子液体作为溶剂),聚酰胺藕联大孔树脂吸附,再用高速逆流色谱分离纯化,得到高纯度大麻二酚的新方法,其特征是:在所述的步骤(1)中,离子液体为1-辛基-3-甲基咪唑四氟酸盐、1-丁基-3-甲基咪唑溴盐、1-羟乙基-3-甲基六氟磷酸盐中的任意一种,体积浓度为50-70%。
3.根据权利要求2所述的超高压提取技术(离子液体作为溶剂),聚酰胺藕联大孔树脂吸附,再用高速逆流色谱分离纯化,得到高纯度大麻二酚的新方法,其特征是:在所述的步骤(3)中,聚酰胺树脂为80-200目,上样液浓度控制在0.5-1.5mg/mL,上样液体积2-3BV,室温下以2-4BV/h流速吸附饱和;解析时除杂水2-4BV,乙醇解析浓度为75-85%,洗脱体积4-
6BV,流速2-4BV/h。
4.根据权利要求3所述的超高压提取技术(离子液体作为溶剂),聚酰胺藕联大孔树脂吸附,再用高速逆流色谱分离纯化,得到高纯度大麻二酚的新方法,其特征是:在所述的步骤(4)中,大孔树脂为D312、DM130、D101中的任意一种;上样液质量浓度为3-4.5mg/ml,上样速率2-4BV/h,上样体积4-6BV/h;洗脱时乙醇溶液浓度为80-90%,洗脱流速为1-3BV/h,洗脱体积为5-7BV。
5.根据权利要求4所述的超高压提取技术(离子液体作为溶剂),聚酰胺藕联大孔树脂吸附,再用高速逆流色谱分离纯化,得到高纯度大麻二酚的新方法,其特征是:在所述的步骤(5)中,大麻二酚溶液预冻温度为-15℃至-25℃,工作压力20-30Pa,升华温度50-55℃,解析温度60-65℃。
6.根据权利要求5所述的超高压提取技术(离子液体作为溶剂),聚酰胺藕联大孔树脂吸附,再用高速逆流色谱分离纯化,得到高纯度大麻二酚的新方法,其特征是:在所述的步骤(6)中,离子液体为乙酸乙酯-甲醇-水(4∶1∶3)、正己烷-醋酸乙酯-乙醇-水(5∶∶3∶2∶4)、氯仿-甲醇-丁醇-水(4∶3∶2∶1)中的任意一种。
7.根据权利要求6所述的超高压提取技术(离子液体作为溶剂),聚酰胺藕联大孔树脂吸附,再用高速逆流色谱分离纯化,得到高纯度大麻二酚的新方法,其特征是:在所述的步骤(7)中,转速700-850r/min,流速为2.0-3.0mL/min。

说明书全文

利用超高压技术富集纯化大麻二酚的方法

技术领域:

[0001] 本发明属于天然有机化学领域,涉及一种从工业大麻中分离纯化大麻二酚的新方法,特别是涉及一种利用超高压(离子液体作为溶剂)提取,聚酰胺藕联大孔树脂吸附,高速逆流色谱分离纯化大麻二酚的新方法。背景技术:
[0002] 工业大麻是指四氢大麻酚含量低于0.3%的大麻,我国将工业大麻称为汉麻(hemp),是大麻科(Cannabinaceae)大麻属(Cannabis)1年生草本植物。获准合法种植的工业大麻,均是低含毒量的品种,这些工业大麻(THC<0.3%)被认为不具备毒品利用价值,但依旧全身是宝,其应用至少包括纺织、造纸、食品、医药、卫生、日化、皮革、汽车、建筑、装饰、包装等领域,是经典的生产资料。
[0003] 随着美国GWPH(吉瓦制药)公司宣布大麻二酚治疗癫痫三期临床获得成功,大麻二酚的药用价值终于得到提现,Epidiolex是目前GW公司研发的主要利用大麻二酚治疗难治性癫痫候选药物,该口服药物制剂被发展用于治疗一些罕见的儿童期癫痫疾病。大麻酚是大麻叶所含的大麻酚类化合物的一种,是大麻在贮存过程中,其所含的四氢衍生物被空气化而产生的。
[0004] 自2007年以来,GWPH已进行了广泛的大麻治疗癫痫的临床前研究,在各种体外和体内模型中,研究结果表明大麻可显著抗痫和抗惊厥活性;在动物急性癫痫模型中有效减少癫痫发作。迄今为止,GW已经从FDA获得多个针对Epidiolex的孤儿药资格认定,包括Dravet综合征、LGS、结节性硬化症和婴儿痉挛症。此外,GW还获得了FDA的快速通道资格认定,使用Epidiolex治疗Dravet综合征,在本试验中平均年龄16岁,显示了普遍良好耐受性和安全性。
[0005] 本发明的不同之处在于主要采用生物酶解技术,超高压藕联亚临界提取,酶法分离精制,后期采用高速逆流色谱法分离纯化大麻二酚,产品不仅得率高,而且纯度高。所得提取物用HPLC进行检测。
[0006] 本发明的不同之处在于主要采用超高压技术(离子液体作为溶剂)提取,聚酰胺藕联大孔树脂吸附,再用高速逆流色谱分离纯化。通过以上技术提取、纯化的大麻二酚具有较强的抗氧化能,产品不仅得率高,而且纯度高。发明内容:
[0007] 本发明优点:提取快捷、产品纯度高,大大提高了提取速度,同时极大提高有效成分含量,克服了常规提取提取物纯度低、得率低的缺点。
[0008] 为实现上述目的,本发明采用的技术方案是:
[0009] 一种采用超高压提取技术(离子液体作为溶剂),聚酰胺藕联大孔树脂吸附,再用高速逆流色谱分离纯化,得到高纯度大麻二酚的新方法,其步骤如下:
[0010] (1)超高压提取:泽大麻叶或根切断,以不同浓度离子液体溶液为溶剂,在一定料液比、适当超高压力下处理几分钟;
[0011] (2)精滤处理:采用聚四氟乙烯膜,过滤精度0.1μm,在一定温度和压力下精滤处理;
[0012] (3)聚酰胺树脂吸附及洗脱:
[0013] 采用一定目数的聚酰胺粉末,控制上样液浓度,上样液体积,室温下以一定流速吸附饱和;解吸时先除杂,再用一定浓度的乙醇溶液解吸,控制流速,收集洗脱液,检测大麻二酚含量;
[0014] (4)大孔树脂二次吸附及洗脱:
[0015] 选用不同型号的大孔树脂(XAD-16、DM130、D312),控制上样液质量浓度,上样速率;先用2BV去离子水冲洗树脂,再用不同浓度的乙醇溶液,以一定流速洗脱,收集洗脱液,检测大麻二酚含量;
[0016] (5)真空冷冻干燥:收集大麻二酚溶液,在适当温度、干燥压力下冷冻干燥;
[0017] (6)分相:称取大麻二酚提取物,选择HSCCC溶剂系统,按比例将各种溶剂加入分液漏斗中,震荡使溶液充分混合,放置过夜。分相平衡后分出上相和下相;
[0018] (7)HSCCC分离纯化:以溶剂系统的上相为固定相,下相为流动相,调整转速,以一定流速入流动相,分离大麻二酚提取物;
[0019] (8)检测.:采用高效液相色谱法,紫外检测器在一定波长进行检测。具体实施方式:
[0020] 实施案例1:
[0021] 一种采用超高压提取技术(离子液体作为溶剂),聚酰胺藕联大孔树脂吸附,再用高速逆流色谱分离纯化,得到高纯度大麻二酚的新方法,其步骤如下:
[0022] (1)超高压提取:大麻叶或根切断,以50%浓度的1-辛基-3-甲基咪唑四氟酸盐溶液为溶剂,料液比1∶8,200-400MPA压力下处理2min;
[0023] (2)精滤处理:收集提取液,采用聚四氟乙烯膜,过滤精度0.1μm,在60℃,0.2MPa压力下精滤处理;
[0024] (3)聚酰胺树脂吸附及洗脱:
[0025] 采用80目的聚酰胺粉末,上样液浓度控制在0.5mg/mL,上样液体积2BV,室温下以2BV/h流速吸附饱和;解吸时先用2BV水除杂,再用75%乙醇解吸,洗脱体积为4BV,流速2BV/h,收集洗脱液;
[0026] (4)大孔树脂二次吸附及洗脱:
[0027] 接着用DM130大孔树脂二次吸附纯化,上样液质量浓度为3mg/ml,上样速率2BV/h,上样体积4BV/h;洗脱时先用2BV去离子水冲洗树脂,再用80%浓度的乙醇溶液,以1BV/h流速洗脱,洗脱体积为5BV;收集洗脱液;
[0028] (5)真空冷冻干燥:收集大麻二酚溶液,在预冻温度-15℃,工作压力20Pa,升华温度55℃,解析温度60℃下冷冻干燥;
[0029] (6)分相:称取大麻二酚提取物,采用乙酸乙酯-甲醇-水(4∶1∶3)HSCCC溶剂系统,按比例将各种溶剂加入分液漏斗中,震荡使溶液充分混合,放置过夜。分相平衡后分出上相和下相;
[0030] (7)HSCCC分离纯化:以溶剂系统的上相为固定相,下相为流动相,调整转速700r/min,以2.0mL/min流速泵入流动相,分离大麻二酚提取物;
[0031] (8)检测:采用高效液相色谱法,紫外检测器进行检测。
[0032] 实施案例2:
[0033] 一种采用超高压提取技术(离子液体作为溶剂),聚酰胺藕联大孔树脂吸附,再用高速逆流色谱分离纯化,得到高纯度大麻二酚的新方法,其步骤如下:
[0034] (1)超高压提取:大麻叶或根切断,以60%浓度的1-丁基-3-甲基咪唑溴盐溶液为溶剂,料液比1∶10,300MPA压力下处理3min;
[0035] (2)精滤处理:收集提取液,采用聚四氟乙烯膜,过滤精度0.1μm,在65℃,0.3MPa压力下精滤处理;
[0036] (3)聚酰胺树脂吸附及洗脱:
[0037] 采用100目的聚酰胺粉末,上样液浓度控制在1.5mg/mL,上样液体积3BV,室温下以3BV/h流速吸附饱和;解吸时先用3BV水除杂,再用80%乙醇解吸,洗脱体积为5BV,流速3BV/h,收集洗脱液;
[0038] (4)大孔树脂二次吸附及洗脱:
[0039] 接着用D312大孔树脂二次吸附纯化,上样液质量浓度为4mg/ml,上样速率3BV/h,上样体积5BV/h;洗脱时先用3BV去离子水冲洗树脂,再用90%浓度的乙醇溶液,以2BV/h流速洗脱,洗脱体积为6BV,收集洗脱液;
[0040] (5)真空冷冻干燥:收集大麻二酚溶液,在预冻温度-20℃,工作压力25Pa,升华温度50℃,解析温度65℃下冷冻干燥;
[0041] (6)分相:称取大麻二酚提取物200mg,采用正己烷-醋酸乙酯-乙醇-水(5∶∶3∶2∶4)HSCCC溶剂系统,按比例将各种溶剂加入分液漏斗中,震荡使溶液充分混合,放置过夜。分相平衡后分出上相和下相;
[0042] (7)HSCCC分离纯化:以溶剂系统的上相为固定相,下相为流动相,调整转速800r/min,以3.0mL/min流速泵入流动相,分离大麻二酚提取物;
[0043] (8)检测:采用高效液相色谱法,紫外检测器进行检测。
[0044] 实施案例3:
[0045] 一种采用超高压提取技术(离子液体作为溶剂),聚酰胺藕联大孔树脂吸附,再用高速逆流色谱分离纯化,得到高纯度大麻二酚的新方法,其步骤如下:
[0046] (1)超高压提取:大麻叶或根切断,以70%浓度的1-羟乙基-3-甲基六氟磷酸盐溶液为溶剂,料液比1∶12,400MPA压力下处理2min;
[0047] (2)精滤处理:收集提取液,采用聚四氟乙烯膜,过滤精度0.1μm,在60℃,0.4MPa压力下精滤处理;
[0048] (3)聚酰胺树脂吸附及洗脱:
[0049] 采用200目的聚酰胺粉末,上样液浓度控制在1.0mg/mL,上样液体积2BV,室温下以4BV/h流速吸附饱和;解吸时先用4BV水除杂,再用85%乙醇解吸,洗脱体积为6BV,流速3BV/h,收集洗脱液;
[0050] (4)大孔树脂二次吸附及洗脱:
[0051] 接着用D101大孔树脂二次吸附纯化,上样液质量浓度为4.5mg/ml,上样速率4BV/h;上样体积6BV/h;洗脱时先用2BV去离子水冲洗树脂,再用85%浓度的乙醇溶液,以1BV/h流速洗脱,洗脱体积7BV,收集洗脱液;
[0052] (5)真空冷冻干燥:收集大麻二酚溶液,在预冻温度-25℃,工作压力30Pa,升华温度50℃,解析温度60℃下冷冻干燥;
[0053] (6)分相:称取大麻二酚提取物200mg,采用氯仿-甲醇-丁醇-水(4∶3∶2∶1)HSCCC溶剂系统,按比例将各种溶剂加入分液漏斗中,震荡使溶液充分混合,放置过夜。分相平衡后分出上相和下相;
[0054] (7)HSCCC分离纯化:以溶剂系统的上相为固定相,下相为流动相,调整转速850r/min,以2.0mL/min流速泵入流动相,分离大麻二酚提取物;
[0055] (8)检测:采用高效液相色谱法,紫外检测器进行检测。
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