防治番茄根结线虫的拮抗菌及其微生物有机肥料
专利汇可以提供防治番茄根结线虫的拮抗菌及其微生物有机肥料专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 涉及防治番茄根结 线虫 的拮抗菌和利用其生产的 微 生物 有机 肥料 ，属于农业集约化生产技术。固体 发酵 拮抗菌X5和 有机肥 制成微生物有机肥，肥料中含有1×108个/g以上的拮抗菌、全氮4~5%，总氮磷 钾 6~10%、有机质30~35%。试验表明，菌株X5的菌体和过滤液对根结线虫胚胎发育过程都具有显著的破坏作用，虫卵孵化率减少34%，对二龄幼虫致死率达到73%。该微生物有机肥料施入 土壤 后能够使拮抗菌迅速繁殖，在根结线虫严重的连作土壤中的根结发病指数减少40%，每株卵 块 数量减少68%，每卵块虫卵数量减少58%。施用本微生物有机肥料能有效防治作物根结线虫的危害。，下面是防治番茄根结线虫的拮抗菌及其微生物有机肥料专利的具体信息内容。
1.能防治番茄根结线虫的拮抗菌菌株)(5，属于蜡状芽孢杆菌OfeciBm caries)，保藏日期2010年9月14日，保藏号CGMCC No. 4161 ；拮抗菌)(5属于蜡状芽孢杆菌OfeciBm carem)，主要形态特性为：革兰氏阳性G+，能运动，有侧生鞭毛，形状为杆状，产芽孢，菌落呈乳白色，圆形，边缘不整齐，表面湿润光滑；生理生化特征：接触酶阳性、V. P.反应阴性，甲基红试验阳性，吲哚试验阳性，发酵葡萄糖、木糖、L-阿拉伯糖、甘露醇产酸，能利用柠檬酸盐，硝酸还原酶阳性，淀粉水解阳性，明胶水解阳性，分解酪蛋白阳性，油脂水解阳性，苯丙氨酸脱氢酶试验阴性。
2.用权利要求1所述拮抗菌X5生产的微生物有机肥料。
3.根据权利要求2所述的微生物有机肥料，拮抗菌)(5数量为IXlO8Cfi^g-1以上，全氮质量比含量为4飞％，全氮中质量比90%以上为有机氮，总氮磷钾养分质量比为6〜10%、有机质质量比含量为30〜35%。
4.权利要求2或3所述微生物有机肥料的生产方法，包括：将权利要求1所述的拮抗菌)(5分别接种到改良的牛肉膏液体培养基，进行发酵生产， 其发酵生产的条件为：pH 6. 8^7. 5,培养温度3(T35°C，搅拌速度为18(T300 rpm，发酵中后期形成芽孢，发酵液中的拮抗菌含菌或芽孢量> IXlO10 cfu · πιΓ1 ；2)将拮抗菌X5发酵液与腐熟后的猪粪堆肥和菜粕微生物酶解物的混合物进行固体发酵，每吨固体有机物料中加入)(5发酵液55L，混合均勻，固体发酵过程中每天翻堆1次，使固体发酵温度不超过50°C，发酵5天后结束，使拮抗菌X5含量达到1 X IO8 cfu · g—1以上，获得含拮抗菌X5的微生物有机肥，将此微生物有机肥在低于60°C下干燥至30%的含水量，包装出厂即为能防治番茄根结线虫的微生物有机肥，其中：腐熟后的猪粪堆肥：发芽指数为98%以上，有机质质量比含量> 35%，有机氮质量比含量为1. 2〜2%，含水量质量比25〜30% ；菜粕微生物酶解物的制备方法：将保藏号为CGMCC NO. 1543的嗜麦芽寡养单胞菌 QSteno trophomonas mal tophilia )菌株37_1发酵液加入到菜粕原料中，调节含水量 55飞5%和pH 6. (Γ7. 5，进行开放式固体发酵，待发酵温度上升至50°C时立即开始翻堆，以后每天翻堆，使堆温始终维持在35飞0°C共5天，固体发酵开始后，堆物的pH会不断上升，每次翻堆时用含酸液体调节含水量和PH，使它们分别维持在55飞5%和6. (Γ7. 0，发酵终止时再用含酸液体进行喷洒，直至堆物PH调整为5. 0左右，再进行低温干燥或自然凉干，即为菜粕微生物酶解物；腐熟的猪粪堆肥和菜粕微生物酶解物的混合物制备方法：将腐熟的猪粪堆肥与菜粕微生物酶解物按体积比5(Γ70% ： 5(Γ30%的比例充分混合，并后熟2〜3天，后熟过程中翻堆2 次。
5.根据权利要求4所述微生物有机肥料的生产方法，其中步骤1)所用改良的牛肉膏培养液配制方法为：称量2. 0克牛肉膏，玉米粉5. 0克，麦麸5. 0克，土豆淀粉5. 0克，氯化钠5. 0于烧杯中，搅拌，使之充分溶解混勻，pH值调至7. 2^7. 4，并用自来水定容至1000 ml, 121°C 灭菌 20 min。
6.权利要求2或3所述微生物有机肥料的在防治番茄根结线虫病中的应用。
防治番茄根结线虫的拮抗菌及其微生物有机肥料
1)肥料产品中含有抑制番茄根结线虫生长的高效拮抗菌株)(5，其抑制效果显著，肥料中该菌株的含量达到IXlO8 cfu · g—1以上，施入土壤后能形成优势群，并在土壤中存活下来。
图2拮抗菌)(5对根结线虫虫卵胚胎发育的影响（A、B、C、D为虫卵孵化过程四个阶段) a菌株)(5菌体处理后虫卵结构变化 b菌株)(5上清液处理后虫卵结构变化 c无菌水处理后虫卵结构变化图3拮抗菌对虫卵孵化率的影响图4拮抗菌对二龄虫死亡率的影响五、具体实施方式 (一）菌株的分离和鉴定
拮抗菌株的获得：从番茄根结线虫发病田块中的健康番茄植株根际土壤初筛能产生胶原蛋白酶的拮抗菌株（图1)，然后通过盆栽试验复筛进一步验证拮抗菌株)(5生防效果(表 1)，最终获得拮抗菌)(5并进行鉴定，菌种冻干-20°C保存。该菌在肉牛膏液体培养基发酵 60 h后，其过滤液对根结线虫虫卵胚胎的正常发育有显著的破坏效果，阻碍虫卵的正常孵化（图2)，并且能降低虫卵孵化率（图3)和对二龄幼虫有直接致死作用（图4)。
处理1:根结线虫发病土壤+不加拮抗菌)(5的常规“田娘”牌有机肥；
处理2:根结线虫发病土壤+拮抗菌)(5菌悬液；
处理3:根结线虫发病土壤+拮抗菌X5微生物有机肥(本发明产品）。
大田试验结果表明，在根结线虫危害严重的土壤上施用本产品后，能够显著促进番茄地上部分的生长，比对照和施用常规有机肥增加生物量约36-38% ；由于根结线虫侵入根系后根本根系形态结构，增加根结数量，从而也增加了根系的重量，施用笨产品后，能够显著减少根系根结数量，保证了根系的正常发育。根系中卵块和虫卵数量比对照分别减少了 83% 和63%。连续施用本肥料可有效控制根结线虫病害的发生。
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