专利汇可以提供北方根结线虫抗性鉴定方法专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 涉及一种 农作物 病虫害抗性鉴定方法,具体的说就是北方根结 线虫 抗性鉴定方法,属农业植保领域。本发明包括以下步骤:(1)无菌花生毛状根制备、(2)无菌胞囊线虫悬浮液的制备、(3)北方根结线虫的接种于培养、(4)抗性鉴定。本发明的优点是:该鉴定方法科学,省时省 力 ,过程简单易于操作,根据有根结根数占整个根系的百分率进行抗性评价最为简单有效。,下面是北方根结线虫抗性鉴定方法专利的具体信息内容。
1.北方根结线虫抗性鉴定方法,其特征在于:包括以下步骤:
(1)无菌花生毛状根制备
选用粒大饱满的20个花生品种的种子,清洗干净,表面消毒,接种于无激素的MSB5培养基上,采用发根农杆菌A4侵染无菌培养6d的花生子叶诱导毛状根,扩繁继代培养;
(2)无菌胞囊线虫悬浮液的制备
清洗上述发病根系,捣碎,过筛,滤液喷洒于40目、200目、325目和500目组合筛上,收集
325目和500目上的线虫和卵,获得根结线虫悬液和根结线虫卵悬液;
(3)北方根结线虫的接种于培养
将根结线虫悬液或根结线虫卵悬液,均匀接至不同花生品种的毛状根培养皿上,盒盖静置1h,用膜封口,倒置于25℃培养42d获得大量虫卵和二龄幼虫;
(4)抗性鉴定
调查记录有根结根数占整个根系的百分率。
2.根据权利要求1所述的北方根结线虫抗性鉴定方法,其特征在于:
根据计算结果和抗性评价标准,分别评价花生品种对北方根结线虫的抗性,抗性分级标准:
免疫:无根结;
高抗:有根结根数占整个根系的10%以下;
抗病:有根结根数占整个根系的10%~30%;
感病:有根结根数占整个根系的30%~50%;
高感:有根结根数占整个根系的50%以上。
3.根据权利要求1所述的北方根结线虫抗性鉴定方法,其特征在于:具体试验过程如下:
(1)无菌花生毛状根制备
选取粒大饱满的20个花生品种的种子用自来水冲洗20-30min;在无菌条件下,用75%酒精浸泡花育45种子0.5-1min;然后再在0.1%升汞中浸泡15min,进行表面消毒;其次用无菌水洗涤花育45种子3~4次,每次3-5min;最后,用无菌刀在无菌滤纸上剥去花生种子的种皮,接种于无激素的MSB5培养基上;
在无菌条件下,接种环挑取于农杆菌A4菌株,在LB+50mg/L Kan的固体平板上化线接种后置于28℃恒温培养箱中暗培养,待长出单菌落后挑取1个单菌落转入10ml LB液体培养基中;其中,LB液体培养基中添加50mg/L Kan,于28℃、180r/min的摇床内暗培养复苏21h;然后取0.05ml该菌液于上述液体培养基再次活化,使其达到对数生长期;最后使农杆菌的A600nm=0.6~0.8时,采用发根农杆菌A4侵染无菌培养6d的花生子叶诱导毛状根,扩繁继代培养;
(2)无菌胞囊线虫悬浮液的制备
收集上述花生根结样品,将发病重、根结多的根系剪成长约1cm的小段,放入组织捣碎均浆机中,加水捣碎5~10min,形成线虫与根组织碎片的混合物;
将混合物加入到1.0%NaClO溶液中,没过根系,混合3min;将含有NaClO溶液的混合物倒入组合筛上,组合筛自上而下依次为40目、200目、325目和500目;
薄雾喷洒40目筛上的混合物,喷洒0.5h,使线虫和卵从根组织内移到表面,至组合筛的底部;
取出组合筛中的325目筛,用无菌水喷淋冲洗,收集冲洗液体,获得根结线虫悬液,并配成200条/ml的浓度;
取出组合筛中的500目筛,用无菌水喷淋冲洗,收集冲洗液体,获得根结线虫卵悬液,离心,去除上清液,再加入200@10-6链霉素,继续离心,去除上清液,以上过程重复3次;倒去上清液,加入无菌水离心5min,以上过程重复3次;最后一次倒去上清液,留下底部无菌线虫悬浮液;
(3)北方根结线虫的接种于培养
将上述根结线虫悬液1ml或卵悬液1ml,均匀接至不同花生品种的毛状根培养皿,盒盖静置1h,膜封口,倒置于25℃培养42d获得大量虫卵和二龄幼虫;
(4)抗性鉴定
将步骤(3)的花生毛状根漂洗干净,调查记录根结数量,计算供试群体根内有根结根数占整个根系的百分率。
标题 | 发布/更新时间 | 阅读量 |
---|---|---|
一种集水杯污水回收装置 | 2020-05-08 | 731 |
湖泊水质PH值的智慧型检测仪器 | 2020-05-08 | 59 |
一种防止电弧击穿的多元合金电弧炉炉盖 | 2020-05-08 | 444 |
洗衣机外筒盖、洗衣机外筒及洗衣机 | 2020-05-08 | 784 |
一种水位监测浮漂 | 2020-05-08 | 16 |
一种便于收纳的水力水电用工程测量装置 | 2020-05-08 | 524 |
一种用于高温工件的冷却装置 | 2020-05-08 | 192 |
一种矿井底部用排污泵 | 2020-05-08 | 152 |
一种清理漂浮物的拦截装置 | 2020-05-08 | 505 |
一种便于操作的印刷电路板沉铜装置 | 2020-05-11 | 852 |
高效检索全球专利专利汇是专利免费检索,专利查询,专利分析-国家发明专利查询检索分析平台,是提供专利分析,专利查询,专利检索等数据服务功能的知识产权数据服务商。
我们的产品包含105个国家的1.26亿组数据,免费查、免费专利分析。
专利汇分析报告产品可以对行业情报数据进行梳理分析,涉及维度包括行业专利基本状况分析、地域分析、技术分析、发明人分析、申请人分析、专利权人分析、失效分析、核心专利分析、法律分析、研发重点分析、企业专利处境分析、技术处境分析、专利寿命分析、企业定位分析、引证分析等超过60个分析角度,系统通过AI智能系统对图表进行解读,只需1分钟,一键生成行业专利分析报告。