201 |
一种筛选奶牛酮病抗性分子标记的方法及其应用 |
CN202010517904.7 |
2020-06-09 |
CN111485027A |
2020-08-04 |
黄金明; 白佳琛; 鞠志花; 姜强; 王金鹏; 张亚冉; 王秀革; 魏晓超; 高亚平; 杨春红; 刘文浩; 李荣岭; 高运东 |
本发明提供一种筛选奶牛酮病抗性分子标记的方法及其应用,属于分子遗传生物技术领域。本发明以健康和酮病奶牛为样本,进行芯片测序、数据填充、选择信号分析和全基因组关联分析等,筛选出影响中国荷斯坦牛酮病抗性的关键基因APOA1。在APOA1基因启动子区域筛选获得单核苷酸多态性位点g.-572 A>G,通过关联分析、启动子活性分析等方法,得到GG基因型奶牛血液中β-羟丁酸浓度显著低于AA基因型,GG基因型个体的启动子活性显著高于AA基因型个体。采用本发明技术方案,对APOA1基因启动子区域位点g.-572 A>G进行基因分型,可筛选出酮病抗性强的奶牛个体,达到节省养殖成本的目的。 |
202 |
基于整合素的表达判断奶牛人工受精成功与否的方法 |
CN201811585965.6 |
2018-12-24 |
CN109680074A |
2019-04-26 |
麻柱; 郭勇; 王彦平; 王相国; 刘林; 李艳华; 吕小青 |
本发明涉及基于整合素的表达判断奶牛人工受精成功与否的方法,通过研究奶牛在受孕前后的整合素αvβ3表达变化规律,探究其与奶牛早期妊娠的关系,筛选影响早期妊娠的因子,从而研发奶牛早期孕检的检测试剂盒。本发明提供的基于整合素的表达判断奶牛人工受精成功与否的方法,将奶牛的妊娠检测窗口提前到输精后的第16天,比目前常用方法提前了12天,可有效降低奶牛养殖业的繁殖成本,提高奶牛行业中母牛的利用效率,增加经济收入。 |
203 |
一种青贮饲料的奶牛瘤胃调控饲料添加剂及其制备和饲喂方法 |
CN201710741266.5 |
2017-08-24 |
CN109418554A |
2019-03-05 |
张永花 |
一种青贮饲料的奶牛瘤胃调控饲料添加剂及其制备和饲喂方法,它涉及一种添加饲料及其制备和饲喂方法。本发明的目的是要解决现有以青贮饲料为主要多汁饲料存在pH值偏低,导致瘤胃消化功能下降的问题。一种青贮饲料的奶牛瘤胃调控添加饲料由氧化镁、碳酸氢钠、乙酸钠、人工盐、苍术和硫酸钴混合而成。制备方法:先将苍术粉碎目,然后将苍术与氧化镁、碳酸氢钠、乙酸钠和人工盐混合混匀,得到混合物,再将硫酸钴加入混合物中,混匀后即得到青贮饲料的奶牛瘤胃调控饲料添加剂;饲喂方法:添加青贮饲料中,并混匀后饲喂。本发明主要用于制备青贮饲料的奶牛瘤胃调控饲料添加剂。 |
204 |
一种治疗奶牛乳房炎的乳室注射液及其制备方法 |
CN201610582490.X |
2016-07-22 |
CN106074820A |
2016-11-09 |
马荣华 |
本发明公开了一种治疗奶牛乳房炎的乳室注射液及其制备方法,包括以下重量份的原料组成:蒲公英5‑15份,鱼腥草提取物3‑10份,黄芪4‑12份,青皮3‑10份,金银花2‑10份,益母草4‑10份。本发明采用以中草药为主制备的注射液,用以预防及其治疗奶牛乳房炎,具有疗效显著、无刺激性以及无药物残留等优点,大大提高奶牛的产奶效益,而且组分合理,制备工艺简单,生产成本低,有利于经济效益和社会效益的综合提高。 |
205 |
一种检测A1和A2型β-酪蛋白奶牛的方法及其试剂盒 |
CN201610522855.X |
2016-07-04 |
CN105925717A |
2016-09-07 |
王秀革; 黄金明; 都彦伶; 姜强; 张燕; 鞠志花; 王长法; 孙艳; 仲跻峰 |
本发明公开了一种检测A1和A2型荷斯坦牛的方法及其试剂盒,属于分子生物学检测技术领域,该方法以待测牛的DNA为模板设计专用引物,进行PCR扩增反应,扩增片段经EcoT22I酶切后进行琼脂糖凝胶电泳检测,凝胶检测DNA片段长度为434bp的牛为A1型牛;酶切后DNA片段为434bp、385bp和49bp为A1和A2杂合型牛;酶切后DNA片段为385bp和49bp为A2型牛。该检测方法操作便捷、成本低、准确性高,可以早期筛选A2型奶牛,减少养牛业的经济损失。 |
206 |
IL8基因作为奶牛耐热性能相关的分子标记及其应用 |
CN201510180881.4 |
2015-04-16 |
CN105274117A |
2016-01-27 |
孙富祥; 孙伦; 宋雪梅; 蒋永清; 姜俊芳; 吴建良; 王海燕 |
本发明属于家畜分子标记制备技术领域,具体涉及一种IL8基因作为奶牛耐热性能相关的分子标记及其应用,其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:1所示,该基因在SEQ ID NO:1的第88位发生了C→T的转换,第150位发生了C→T的转换,第188位发生了A→G的转换,这3个突变为3个单核苷酸的完全连锁突变。在中国荷斯坦牛群体中发现野生纯合型CCCCAA,突变杂合型CTCTAG和突变纯合型TTTTGG这3种基因型。本发明还公开了扩增牛IL8基因内含子1区部分序列所用的引物以及用于分子标记的检测方法。本发明为牛的标记辅助选择提供了1个新的分子标记。 |
207 |
一种改善奶牛的抗乳腺炎能力的实现方法及其应用 |
CN201210203358.5 |
2012-06-20 |
CN102899395B |
2014-12-10 |
黄金明; 王秀革; 袁金铎; 王长法; 鞠志花; 李秋玲; 齐超; 张燕; 李荣岭; 李建斌; 侯明海; 仲跻峰 |
本发明提供一种改善奶牛的抗乳腺炎能力的选种方法及其应用,属于动物遗传育种技术领域,通过实时荧光定量RT-qPCR和同位素标记相对和绝对定量iTRAQ的方法提供一个奶牛乳腺炎易感/抗性A2M候选基因;通过反转录RT-PCR和克隆测序分析可变剪切,同时通过基因直接测序技术检测到该基因的单核苷酸多态性SNPs,利用软件分析可变剪切和SNPs的关系,同时对体细胞评分SCS和A2M基因型进行关联分析,判断SNPs位点为功能性位点,选择有利的等位基因型个体作为奶牛抗乳腺炎能力留种。本发明通过遗传育种手段,可使奶牛增强乳腺炎的抗性,减少药物的使用量,改善牛奶质量安全,减少经济损失。 |
208 |
大米草为原料的奶牛后备牛TMR发酵饲料及其制备方法 |
CN201010578656.3 |
2010-12-08 |
CN101999552A |
2011-04-06 |
张克春; 范占炼; 徐国忠; 陈以意; 徐晓明 |
本发明涉及一种以大米草为原料的奶牛后备牛TMR发酵饲料及其制备方法,其质量份的组分包括:大米草600-850份、大麦40-90份、辅料补充料140-220份、中蛋白豆粕30-60份、预混料8-20份、发酵剂3-8份以及防霉剂1-5份;经搅拌机搅拌混匀后进行装袋发酵处理,生产奶牛后备牛发酵TMR饲料。本发明显著改善大米草的适口性,增加大米草的饲料营养价值,使用大米草可缓解青贮玉米在奶牛饲料生产中供应紧缺的问题,同时也缓解沿海滩涂地区大米草生物入侵式的恣意生长及其所带来的生态环境危机。 |
209 |
麦秸秆为原料的奶牛后备牛TMR发酵饲料及其制备方法 |
CN201010578162.5 |
2010-12-08 |
CN101999549A |
2011-04-06 |
张克春; 徐国忠; 范占炼; 崔彦召; 徐晓明 |
本发明涉及一种以麦秸秆为原料的奶牛后备牛TMR发酵饲料及其制备方法,其质量份的组分包括:麦秸秆400-700份、青贮玉米100-300份、基础料100-300份、糖蜜30-80份、乳酸菌3-8份以及防霉剂1-5份;经搅拌机搅拌混匀后进行装袋发酵处理,制备奶牛后备牛发酵TMR饲料。本发明的发酵饲料具有适口性好,动物消化吸收率高等优点,使后备牛日增重得到提高,抗病力增强;本发明扩大了奶牛后备牛发酵TMR原料的来源,降低原料成本,操作简单,具有良好的应用前景。 |
210 |
水稻秸秆为原料的奶牛后备牛TMR发酵饲料及其制备 |
CN201010578138.1 |
2010-12-08 |
CN101999548A |
2011-04-06 |
张克春; 徐国忠; 范占炼; 王亮; 徐晓明 |
本发明涉及一种以水稻秸秆为原料的奶牛后备牛TMR发酵饲料及其制备方法,其质量份的组分包括:青贮玉米300-500份、水稻秸秆350-500份、基础料100-150份、糖蜜30-80份、非蛋白氮10-20份、发酵剂1份以及防霉剂1-5份;经搅拌机搅拌混匀后进行装袋发酵处理,生产奶牛后备牛发酵TMR饲料。本发明改善了水稻秸秆适口性,提高消化率,增加营养价值,杜绝寄生虫污染,提高酶解能力;显著提高水稻秸秆的饲料营养成分的生物学利用率,从而降低了后备牛饲料成本,但饲喂效果不变,具有良好的应用前景。 |
211 |
一种筛选奶牛酮病抗性分子标记的方法及其应用 |
CN202010517904.7 |
2020-06-09 |
CN111485027B |
2022-07-29 |
黄金明; 白佳琛; 鞠志花; 姜强; 王金鹏; 张亚冉; 王秀革; 魏晓超; 高亚平; 杨春红; 刘文浩; 李荣岭; 高运东 |
本发明提供一种筛选奶牛酮病抗性分子标记的方法及其应用,属于分子遗传生物技术领域。本发明以健康和酮病奶牛为样本,进行芯片测序、数据填充、选择信号分析和全基因组关联分析等,筛选出影响中国荷斯坦牛酮病抗性的关键基因APOA1。在APOA1基因启动子区域筛选获得单核苷酸多态性位点g.‑572 A>G,通过关联分析、启动子活性分析等方法,得到GG基因型奶牛血液中β‑羟丁酸浓度显著低于AA基因型,GG基因型个体的启动子活性显著高于AA基因型个体。采用本发明技术方案,对APOA1基因启动子区域位点g.‑572 A>G进行基因分型,可筛选出酮病抗性强的奶牛个体,达到节省养殖成本的目的。 |
212 |
LGR4作为奶牛乳腺炎预防、诊断或治疗标志物的应用 |
CN201911006567.9 |
2019-10-22 |
CN110669838B |
2022-07-05 |
鞠志花; 黄金明; 姜强; 王金鹏; 杨春红; 孙艳; 张亚冉; 王秀革; 魏晓超; 高亚平; 刘文浩; 高运东 |
本公开属于奶牛乳腺炎标志物技术领域,具体涉及LGR4作为奶牛乳腺炎预防、诊断或治疗标志物的应用。本公开以半同胞健康和大肠杆菌乳腺炎奶牛为模型,对血液嗜中性粒细胞进行DNA甲基化和RNA‑seq测序,整合分析转录组和甲基化数据,筛选出奶牛嗜中性粒细胞中的关键基因LGR4。通过亚硫酸盐测序法、克隆测序法和实时荧光定量PCR实验等方法检测关键基因LGR4在血液嗜中性粒细胞中外显子区域的甲基化水平、可变剪接体和基因的表达情况,鉴定出调控LGR4基因可变剪接模式的DNA甲基化分子标记,揭示了基因外显子区DNA甲基化在奶牛乳腺炎中发挥调控作用的分子机制,为奶牛乳腺炎的抗病分子育种提供新证据。 |
213 |
LGR4作为奶牛乳腺炎预防、诊断或治疗标志物的应用 |
CN201911006567.9 |
2019-10-22 |
CN110669838A |
2020-01-10 |
鞠志花; 黄金明; 姜强; 王金鹏; 杨春红; 孙艳; 张亚冉; 王秀革; 魏晓超; 高亚平; 刘文浩; 高运东 |
本公开属于奶牛乳腺炎标志物技术领域,具体涉及LGR4作为奶牛乳腺炎预防、诊断或治疗标志物的应用。本公开以半同胞健康和大肠杆菌乳腺炎奶牛为模型,对血液嗜中性粒细胞进行DNA甲基化和RNA-seq测序,整合分析转录组和甲基化数据,筛选出奶牛嗜中性粒细胞中的关键基因LGR4。通过亚硫酸盐测序法、克隆测序法和实时荧光定量PCR实验等方法检测关键基因LGR4在血液嗜中性粒细胞中外显子区域的甲基化水平、可变剪接体和基因的表达情况,鉴定出调控LGR4基因可变剪接模式的DNA甲基化分子标记,揭示了基因外显子区DNA甲基化在奶牛乳腺炎中发挥调控作用的分子机制,为奶牛乳腺炎的抗病分子育种提供新证据。 |
214 |
同时检测奶牛β-酪蛋白不同变体型的一组专用引物及其试剂盒 |
CN201710423750.3 |
2017-06-07 |
CN107287292B |
2019-11-26 |
黄金明; 王秀革; 鞠志花; 张燕; 姜强; 王玲玲; 仲跻峰 |
本发明公开了同时检测奶牛β‑酪蛋白不同变体型的一组专用引物及其试剂盒,属于分子生物学检测技术领域。该方法基于牛β‑酪蛋白不同变体型的SNP位点信息,设计特异性引物进行多重PCR扩增出SNP位点所在片段,再在每个SNP位点一侧设计2条特异性检测探针,在另一侧设计1条与模板完全匹配的荧光标记探针,进行多重连接酶检测反应,当两侧的探针与目的DNA序列完全互补时链接反应才能进行,根据链接反应所产生的片段长度实现对SNP位点检测的目的。该检测方法操作便捷、通量高、成本低、准确性高,可以早期快速、准确的筛选纯合A2型奶牛,能够产生巨大的经济和社会效益。 |
215 |
一种预防奶牛乳房炎的外用药物组合及其制备方法 |
CN201610582217.7 |
2016-07-22 |
CN106074885A |
2016-11-09 |
马荣华 |
本发明公开了一种预防奶牛乳房炎的外用药物组合及其制备方法,包括以下重量份的原料组成:蒲公英10‑25份,黄芩5‑15份,紫花地丁5‑10份,大青叶2‑8份,柴胡2‑10份,皂角刺3‑10份。本发明的药物组合物主要选用了天然、安全的中草药成分,其中各种中药成分之间协同增效,相互促进,具有较好的预防奶牛乳房炎的效果,而且组分合理,制备工艺简单,生产成本低,有利于经济效益和社会效益的综合提高。 |
216 |
一种中国荷斯坦奶牛抗苗勒管激素检测方法及应用 |
CN201310485055.1 |
2013-10-15 |
CN103499696B |
2016-05-25 |
马毅; 姚强; 赵庆彬 |
本发明提供一种中国荷斯坦奶牛抗苗勒管激素检测技术。其原理是在体外通过抗原抗体反应,进行特异性检测,检测奶牛血液样品中的抗苗勒管激素水平。本发明采用定量夹心酶联免疫技术。抗体具体为AMH已经被预先涂到微孔板。标准和样品吸入井,和AMH目前任何被绑定的固定抗体。生物素共轭的抗体特异性AMH除去任何未结合的物质后,加入到孔中。抗生物素蛋白共轭的辣根过氧化物酶(HRP)的洗涤后,加入到孔中。经过洗涤,以除去任何未结合的抗生物素蛋白的酶试剂,底物溶液加入到孔中,并显色的比例AMH量的初始步骤中的约束。彩色显影被停止并测量的颜色的强度。本发明特征在于实现中国荷斯坦奶牛AMH水平的检测,作为中国荷斯坦奶牛人工授精和胚胎移植受体繁殖能力的辅助判断工具,着重提高中国荷斯坦奶牛奶牛养殖企业的繁殖效率,同时可提高中国荷斯坦奶牛卵巢储备功能、奶牛人工授精与配牛和胚胎移植受体牛的评估工作。 |
217 |
一种与奶牛体细胞评分相关的分子标记及其应用 |
CN201610017582.3 |
2016-01-12 |
CN105420402A |
2016-03-23 |
鞠志花; 李虹; 王长法; 黄金明; 王秀革; 张燕; 杨春红; 姜强; 孙艳; 仲跻峰 |
本发明公开一种与奶牛体细胞评分相关的分子标记及其应用,具体为一种影响奶牛体细胞分表型差异的CXCL10基因3'UTR区功能性分子标记位点及其在奶牛遗传改良中的应用。通过测定奶牛基因组DNA中CXCL10基因分子标记g.1742A>G,根据第1742位点是否A→G突变,预测SCS表型高低,当奶牛CXCL10基因第1742位点之间发生GG突变时,奶牛SCC表型最低。本发明首次阐明CXCL10基因功能性分子标记g.1742A>G与奶牛SCC表型差异的相关性,为奶牛优势品种的辅助育种提供了有效手段。 |
218 |
一种中国荷斯坦奶牛抗苗勒管激素检测方法及应用 |
CN201310485055.1 |
2013-10-15 |
CN103499696A |
2014-01-08 |
马毅; 姚强; 赵庆彬 |
本发明提供一种中国荷斯坦奶牛抗苗勒管激素检测技术。其原理是在体外通过抗原抗体反应,进行特异性检测,检测奶牛血液样品中的抗苗勒管激素水平。本发明采用定量夹心酶联免疫技术。抗体具体为AMH已经被预先涂到微孔板。标准和样品吸入井,和AMH目前任何被绑定的固定抗体。生物素共轭的抗体特异性AMH除去任何未结合的物质后,加入到孔中。抗生物素蛋白共轭的辣根过氧化物酶(HRP)的洗涤后,加入到孔中。经过洗涤,以除去任何未结合的抗生物素蛋白的酶试剂,底物溶液加入到孔中,并显色的比例AMH量的初始步骤中的约束。彩色显影被停止并测量的颜色的强度。本发明特征在于实现中国荷斯坦奶牛AMH水平的检测,作为中国荷斯坦奶牛人工授精和胚胎移植受体繁殖能力的辅助判断工具,着重提高中国荷斯坦奶牛奶牛养殖企业的繁殖效率,同时可提高中国荷斯坦奶牛卵巢储备功能、奶牛人工授精与配牛和胚胎移植受体牛的评估工作。 |
219 |
大豆秸秆为原料的奶牛后备牛TMR发酵饲料及其制备 |
CN201010578643.6 |
2010-12-08 |
CN101999551B |
2013-03-20 |
张克春; 范占炼; 徐国忠; 王亮; 徐晓明 |
本发明涉及一种以大豆秸秆为原料的奶牛后备牛TMR发酵饲料及其制备方法,其质量份的组分包括:大豆秸杆400-600份、青贮玉米200-400份、基础料100-200份、糖蜜30-80份、非蛋白氮10-20份、发酵剂0.005-0.01份以及防霉剂1-4份;经搅拌机搅拌混匀后进行装袋发酵处理,制备奶牛后备牛发酵TMR饲料。本发明显著提高大豆秸秆的饲料营养成分的生物学利用率以及改善其适口性;提高消化率,增加营养价值,提高酶解能力,充分利用这一资源,发展节粮型畜牧业,是农业产业化的重要内容与发展方向。 |
220 |
一种改善奶牛的抗乳腺炎能力的实现方法及其应用 |
CN201210203358.5 |
2012-06-20 |
CN102899395A |
2013-01-30 |
黄金明; 王秀革; 袁金铎; 王长法; 鞠志花; 李秋玲; 齐超; 张燕; 李荣岭; 李建斌; 侯明海; 仲跻峰 |
本发明提供一种改善奶牛的抗乳腺炎能力的选种方法及其应用,属于动物遗传育种技术领域,通过实时荧光定量RT-qPCR和同位素标记相对和绝对定量iTRAQ的方法提供一个奶牛乳腺炎易感/抗性A2M候选基因;通过反转录RT-PCR和克隆测序分析可变剪切,同时通过基因直接测序技术检测到该基因的单核苷酸多态性SNPs,利用软件分析可变剪切和SNPs的关系,同时对体细胞评分SCS和A2M基因型进行关联分析,判断SNPs位点为功能性位点,选择有利的等位基因型个体作为奶牛抗乳腺炎能力留种。本发明通过遗传育种手段,可使奶牛增强乳腺炎的抗性,减少药物的使用量,改善牛奶质量安全,减少经济损失。 |