一种点状和/或点线状沉香的结香方法及应用

申请号 CN201510630892.8 申请日 2015-09-29 公开(公告)号 CN105340602A 公开(公告)日 2016-02-24
申请人 中国医学科学院药用植物研究所海南分所; 发明人 陈旭玉; 魏建和; 杨云; 刘洋洋;
摘要 本 发明 提供了一种点状和/或点线状沉香的结香方法及应用,包括以 微 生物 促香剂为沉香诱导剂,采用网状法、斜切法、饼状切口法、钻孔接菌中的至少一种对产沉香 植物 进行处理,并将所述微生物促香剂设置在产沉香植物经处理过的 位置 ,至获得点状和/或点线状沉香;其中,所述微生物促香剂中含有微生物和/或微生物 发酵 液过滤菌体后的滤液;所述的微生物为硬孔菌属、拟层孔菌属、可可毛色二孢属、镰刀菌属、拟盘多毛孢属、头孢菌属、霉属、腐木菌属或小球壳菌属中的一种或多种。本发明提供的技术方案利用特有的 真菌 ,充分利用白木部分,除了获得沉香外还可获得自然结香中非常稀有的点状和/或点线状沉香,所获得沉香产量高及具有不腐朽的优点。本发明还提供了一种利用所述点状和/或点线状沉香的结香方法所获的点状香制备的沉香珠子。
权利要求

1.一种点状和/或点线状沉香的结香方法,其特征在于,包括如下步骤:
生物促香剂为沉香诱导剂,采用网状法、斜切法、饼状切口法、钻孔接菌中的至少一种对产沉香植物进行处理,并将所述微生物促香剂设置在产沉香植物经处理过的位置,至获得点状和/或点线状沉香;
其中,所述微生物促香剂中含有微生物和/或微生物发酵液过滤菌体后的滤液;
所述的微生物为硬孔菌属、拟层孔菌属、可可毛色二孢属、镰刀菌属、拟盘多毛孢属、头孢菌属、霉属、腐木菌属或小球壳菌属中的一种或多种。
2.如权利要求1所述的点状和/或点线状沉香的结香方法,其特征在于,所述产沉香植物为沉香属植物、拟沉香属植物或其他诱导型植物。
3.如权利要求1所述的点状和/或点线状沉香的结香方法,其特征在于,微生物促香剂中采用的微生物为硬孔菌、拟层孔菌、可可毛色二孢、镰刀菌、拟盘多毛孢、头孢菌、木霉菌、腐木菌或小球壳菌中的一种或多种。
4.如权利要求1所述的点状和/或点线状沉香的结香方法,其特征在于,所述的微生物促香剂的剂型为微生物和/或微生物发酵液过滤菌体后的滤液的溶液剂、注射剂、胶囊剂、颗粒剂、片剂、膏剂中的至少一种,进一步优选为菌丝胶囊剂或颗粒剂,或菌液的溶液剂或注射剂。
5.如权利要求1所述的点状和/或点线状沉香的结香方法,其特征在于,每隔10-150天重新接种或设置微生物促香剂,至获得点状和/或点线状沉香。
6.如权利要求1所述的点状和/或点线状沉香的结香方法,其特征在于,所述微生物促香剂中还包括其他沉香诱导剂,优选为植物激素
7.一种沉香,其特征在于,为采用如权利要求1所述的点状和/或点线状沉香的结香方法获得的沉香。
8.一种沉香珠子,为采用如权利要求1所述的点状和/或点线状沉香的结香方法获得的沉香所制备。
9.如权利要求1所述的点状和/或点线状沉香的结香方法获得的沉香在制备工艺品中的应用。

说明书全文

一种点状和/或点线状沉香的结香方法及应用

技术领域

[0001] 本发明涉及生物农业技术领域,具体涉及一种点状和/或点线状沉香的结香方法及应用、一种沉香珠子。

背景技术

[0002] 沉香为瑞香科(Thymelaeaceae)产沉香(Aquilaria)植物含有树脂的木材,沉香的形成非常特殊,健康的白木香不能产生沉香类物质,只有受到物理伤害、化学伤害及真菌侵染等外界的伤害后才诱导结香。质量高的沉香需要几年甚至几十年方能形成。由于天然沉香形成的特殊性及结香周期长,所以结香技术成为研究的热点。尤其是天然的点线状沉香更为难得。
[0003] 因此,寻找一种点状和/或点线状沉香的结香方法,对沉香的形成及产业化有着重要的意义。

发明内容

[0004] 为解决上述问题,本发明提供了一种点状和/或点线状沉香的结香方法及应用、以及一种沉香珠子。本发明提供的技术方案处理简单,采用现有的沉香结香处理技术,结合本发明发现的特有的真菌,可获得点状和/或点线状沉香。
[0005] 第一方面,本发明提供了一种点状和/或点线状沉香的结香方法,包括如下步骤:
[0006] 以微生物促香剂为沉香诱导剂,采用网状法、斜切法、饼状切口法、钻孔接菌中的至少一种对产沉香植物进行处理,并将所述微生物促香剂设置在产沉香植物经处理过的位置,至获得点状和/或点线状沉香;
[0007] 其中,所述微生物促香剂中含有微生物和/或微生物发酵液过滤菌体后的滤液;
[0008] 所述的微生物为硬孔菌属、拟层孔菌属、可可毛色二孢属、镰刀菌属、拟盘多毛孢属、头孢菌属、霉属、腐木菌属和小球壳菌属中的一种或多种。
[0009] 如本发明所述的“产沉香植物”包括但不限于沉香属(Aquilaria)、拟沉香属(Gyrinops)或其他诱导型植物,优选为沉香属植物。
[0010] 进一步优选地,所述沉香属植物包括但不限于来沉香(Aquilaria malaccensis)、越南沉香(Aquilaria crassna)或白木香(Aquilaria sinensis)。
[0011] 更进一步优选地,所述白木香(Aquilaria sinensis)的树龄优选为5或6年以上的白木香。
[0012] 如本发明所述的,所述对产沉香植物进行处理并接种的方法包括行业常用的诱导沉香的处理方法,产沉香植物经处理后可形成接种口、接种孔、接种沟等接种区域;可采用本发明提供的微生物促香剂喷、刷、涂或填充在接种区域,至获得点状和/或点线状沉香。
[0013] 本发明一个实施方式中,包括但不限于采用输液法、网状法、钻孔接菌、斜切法、饼状切口法、钻孔接菌中的至少一种对产沉香植物进行处理。
[0014] 如本发明所述的,所述的“输液法”为行业内常规输菌液操作,本领域技术人员可以理解的,所述的 “输液法”为将液态的微生物促香剂通过钻孔、切口、凿槽等方式输入产沉香植物,优选为通体香结香的输液法;所述的“通体香结香的输液法”包括但不限于专利申请号201010104119.5中提到的输液法或《沉香结香方法的历史记载、现代研究及通体结香技术》中提到的“通体香结香法”,区别在于本发明的“输液法”将现有的“通体香结香的输液法”采用的沉香促香剂(比如植物激素盐或钠盐等化学试剂)替换为本发明的微生物促香剂(溶液形式)。
[0015] 本发明一个实施方式中,所述输液法为:在产沉香植物树干和/或分枝上钻孔、切口或凿槽,采用输液装置连通装有菌液的容器和设置好的孔洞、切口或凹槽,将菌液输入产沉香植物。
[0016] 如本发明第一方面所述的,输液装置可含或不含压推送部件。不含压力推送部件时,本发明技术方案可利用植物蒸腾作用将菌液疏导至植物茎干、枝条、根等各器官。含有压力推送部件时,本发明技术方案在利用植物蒸腾作用的基础上,可加快推送菌液疏导速度。
[0017] 优选地,所述的在产沉香植物树干和/或分枝上钻孔的方式为:在树干和/或分枝上分多段打孔,每隔40cm-200cm打1个或多个孔,打孔方向为垂直或倾斜打孔,打孔的数量根据树的高度和直径设置。造孔深度优选设置为不大于树的半径或直径的2/3,比如设置为2cm-8cm深。孔径优选为0.5-1cm。
[0018] 更优选地,所述每隔40cm-200cm打多个孔的方式为:在树干和/或分枝的同一高度绕树干同时打多个孔,优选2-6个输液孔,更优选在树干同一高度绕树干打4-6个孔,分枝则在同一位高度绕树干打1-2个孔。
[0019] 本发明一个实施方式中,所述对产沉香植物进行处理并接种的方法还可采用本发明人同日递交的(与本申请同日递交)“一种适用于微生物的促进产沉香植物产生沉香的方法”发明中记载的方案。
[0020] 如本发明所述的,所述的“网状法”为行业内常规操作,具体的,为在树干上设置“面状”分布的粗糙面或者网格状沟槽区域,形成接种面,用于喷、刷、涂或填充菌株、菌丝、菌株发酵液、菌株发酵液浓缩制剂和/或微生物发酵液过滤菌体后的滤液。
[0021] 如本发明所述的,所述的“钻孔接菌”为行业内常规操作,具体的,为在树干上钻孔,将菌种接种在孔洞中,或将菌株、菌丝、菌株发酵液、菌株发酵液浓缩制剂和/或微生物发酵液过滤菌体后的滤液喷、刷、涂或填充在孔洞中。打孔方式优选为:分多段打孔,每段打孔方式为:在树干和/或分枝的同一高度绕树干同时打孔1个或多个,优选2-6个孔,更优选在树干同一高度绕树干打孔4-6个,分枝同一位高度绕树干打孔1-2个。造孔深度优选设置为不大于树的半径或直径的2/3,比如设置为2cm-8cm深。孔径优选为0.5-1cm。
[0022] 如本发明所述的,所述的“斜切法”为行业内常规操作,具体的,为在树干斜切一定数量的切口,形成接种口,用于喷、刷、涂或填充菌株、菌丝、菌株发酵液、菌株发酵液浓缩制剂和/或微生物发酵液过滤菌体后的滤液。
[0023] 如本发明所述的,所述的“饼状切口法”为行业内常规操作,具体的,为在树干上切出“饼状”区域,形成接种面,用于喷、刷、涂或填充菌株、菌丝、菌株发酵液、菌株发酵液浓缩制剂和/或微生物发酵液过滤菌体后的滤液。
[0024] 如本发明第一方面所述的,还包括但不限于同时联合使用行业内其他常规的对产沉香植物进行处理,以促进结香;包括但不限于采用《沉香结香方法的历史记载、现代研究及通体结香技术》中提到的任一种 结香方法(黄俊卿等,中国中药杂志,第38卷第3期,2013,2)。
[0025] 本发明一个实施方式中,所述硬孔菌属优选为采用硬孔菌。
[0026] 本发明一个实施方式中,所述拟层孔菌属优选为采用拟层孔菌。
[0027] 本发明一个实施方式中,所述可可毛色二孢属优选为采用可可毛色二孢。
[0028] 本发明一个实施方式中,所述镰刀菌属优选为采用镰刀菌。
[0029] 本发明一个实施方式中,所述拟盘多毛孢属优选为采用拟盘多毛孢菌。
[0030] 本发明一个实施方式中,所述头孢菌属优选为采用头孢菌。
[0031] 本发明一个实施方式中,所述霉属优选为采用木霉菌。
[0032] 本发明一个实施方式中,所述腐木菌属优选为采用腐木菌。
[0033] 本发明一个实施方式中,所述小球壳菌属优选为采用小球壳菌。
[0034] 进一步优选地,所述拟层孔菌(Fomitopsis sp.),其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为:CGMCC NO.7802。
[0035] 进一步优选地,所述可可毛色二孢(Lasiodiplodia theobromae),其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为:CGMCC NO.9591。说明:该保藏编号为CGMCC NO.9591的可可毛色二孢的相关保藏信息如下:
保藏日期:2014年09月 09日;保藏单位:中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心;保藏地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号;保藏编号:CGMCC NO.9591;分类命名:
Lasiodiplodia theobromae。
[0036] 进一步优选地,所述硬孔菌(Rigidoporus vinctus),其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为:CGMCC NO.9594。
[0037] 进一步优选地,所述拟盘多毛孢(Pestalotiopsis virgatula),来自促进沉香形成真菌ASAF05的分离、筛选和鉴定文献中所述(促进沉香形成真菌ASAF05的分离、筛选和鉴定,《中国药学杂志》,2014,Vol.49,陈旭玉等)。
[0038] 进一步优选地,所述木霉菌(Trichoderma erinaceum),为中国医学科学院药用植物研究所海南分所生物技术研究室分离。
[0039] 如本发明所述的,“所述微生物促香剂中含有微生物和/或微生物发酵液过滤菌体后的滤液”中,所述“微生物”为微生物菌株、菌丝、菌株发酵液、菌株发酵液浓缩制剂中的至少一种。为便于运输、存储和产业化应用,在所述的微生物菌株、菌丝、菌株发酵液、菌株发酵液浓缩制剂和/或微生物发酵液过滤菌体后的滤液中,加入药学上可接受的赋形剂或载体,可制备成各种剂型,比如溶液剂、注射剂、胶囊剂、颗粒剂、片剂、膏剂中的至少一种。可以理解的是,在具体应用时,各种剂型的微生物促香剂可以加溶解制备成膏状或溶液,便于输液、刷涂、喷涂;比如,采用输液法时,将各剂型加水制备成溶液即可。
[0040] 本发明一个实施方式中,所述的微生物促香剂的剂型为微生物和/或微生物发酵液过滤菌体后的滤液的溶液剂、注射剂、胶囊剂、颗粒剂、片剂、膏剂中的至少一种,进一步优选为菌丝胶囊剂、颗粒剂或菌液的溶液剂或注射剂。
[0041] 如本发明所述的,本发明采用的“微生物促香剂”还可以包含行业内其他常用的沉香促香剂中的一种或多种。
[0042] 在本发明一个实施例中,所述微生物促香剂中还包括其他沉香诱导剂,优选为植物激素。
[0043] 在本发明一个实施例中,每隔10-150天重新接种或设置微生物促香剂,至获得得点状和/或点线状沉香。
[0044] 如本发明所述的,所述“点状沉香”和“点线状沉香”是同一种香不同切面的不同形态;比如,树干横截面呈现点状分布的“点状香”,而树干纵切面呈线状分布的“线状香”;若车成珠子,则呈现“点线状沉香”。“点状香”或“点线状香”区别于树干横截面出现的结香面,为沉香和白木的镶嵌物。
[0045] 本领域技术人员可以理解的是,典型的“点状和/或点线状沉香”是树干、分枝、树根横截面呈现点状分布和纵切面呈线状分布的结香。
[0046] 本发明一个实施方式中,所述点状和/或点线状沉香的香线填充在导管上、木射线上和/或木间韧皮部。
[0047] 本发明一个实施方式中,所述点状和/或点线状沉香位于接菌处上端和/或下端3-50cm(优选为3-20cm或3-30cm)处。
[0048] 第二方面,本发明提供了一种沉香,为采用如第一方面所述的点状和/或点线状沉香的结香方法获得的沉香。
[0049] 第三方面,本发明提供了一种沉香珠子,为采用如第一方面所述的点状和/或点线状沉香的结香方法获得的沉香所制备。
[0050] 第四方面,本发明提供了如第一方面所述的点状和/或点线状沉香的结香方法获得的沉香在制备工艺品中的应用。
[0051] 如本发明所述的,所述工艺品包括但不限于笔筒、串珠、烟灰缸、木头雕刻摆件等行业常规工艺品。
[0052] 本发明提供的技术方案的有益效果:
[0053] 为解决上述问题,本发明提供的技术方案处理简单,采用现有的沉香结香处理技术,结合本发明发现的特有的真菌,可获得自然结香中非常稀有的点状和/或点线状沉香。附图说明
[0054] 图1-16分别为本发明实施例1-3提供的硬孔菌、拟层孔菌、可可毛色二孢在接菌6个月后,白木香的结香效果;
[0055] 图17为本发明实施例1提供的点状香车的沉香珠子;
[0056] 图18为本发明实施例1-3提供的白木香结香的薄层鉴定结果。

具体实施方式

[0057] 以下所述是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也视为本发明的保护范围。
[0058] 下面结合附图对本发明作进一步的说明。
[0059] 实施例1
[0060] 硬孔菌(R.vinctus)ASAF02(中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏号为(CGMCC NO.9594)促进结香效果验证
[0061] 将硬孔菌(R.vinctus)ASAF02菌株培养3-15d(天),得到菌株菌丝、发酵液,根据树的大小按不同的剂量接种白木香促进结香,具体接种方法如下:
[0062] 1、接种材料的获得:硬孔菌(R.vinctus)ASAF02菌株用液体培养基培养获得的菌丝,记为接种菌 丝1。菌丝1接种至PDA液体培养基中,在30℃200转/分摇培3-15d,得到培养液,即为菌液2。
[0063] 2、接种:以白木香(A.sinensis(Lour.)Gilg)为接种对象进行接种,接种方法分别为网状法、输液法、钻孔接菌、斜切法、饼状切口法,具体分别为:
[0064] 1)网状面式接菌:在距离地面20cm-60cm处将树干上的树皮按形状“Ц”刮下(具体的,比如,在树干一侧选择方形区域,切开两侧边线和下侧边线,保留上边线树皮不切开),揭开“∩”树皮,然后从下至上拨开,获得“∩”型结香面;“∩”型结香面高为30cm-100cm,宽为树的直径;树皮拨开后用圆锯在裸露的木质部上锯条纹,条纹形成成网状结构,网状结构包括5-15条横纹,5-15条竖纹,每条条纹深1-2cm、条纹宽1-2cm的;(每棵树每侧可设置多个“∩”型面,具体可参照本发明同一天递交的专利申请:“一种适用于微生物的促进产沉香植物产生沉香的方法”的面式接菌设置方法);如图1-a所示。
[0065] 2)通体结香技术的输液法(每棵树可设置1个或多个输液孔,本实施例中设置2个输液孔,在本发明其他实施例中,优选为4个输液孔):在6年树龄的白木香上,自根部到地上50cm-1m处部位钻洞,洞深至3-5cm,孔径1cm,然而分别将处理过的菌液2通过输液装置利用植物的蒸腾作用疏导至植物茎干、枝条、根等各器官,促使整个植株内部结香;如图1-b所示。
[0066] 1)钻孔接种:在6年以上树龄白木香的自根部到地上40-60cm处部位钻孔,孔深至3-5cm,孔径1cm-2cm,将上述接种菌丝1或菌液2注入孔洞中;如图1-c所示。
[0067] 2)斜切法:在6年以上树龄白木香的自根部到地上40-60cm处部位斜切凹口,切口深至3-5cm,长度约为树半径,每隔10-50cm斜切一条;每棵树每侧可设置多个斜切凹口区域;将上述接种菌丝1或菌液2接种在切口中;如图1-d所示。
[0068] 3)饼状接菌法:在6年以上树龄白木香的自根部到地上40-60cm处部位切开饼状切面,深为5mm-5cm,约为直径宽,每棵树每侧可设置多个饼状切面;将上述接种菌丝1或菌液2刷涂在切面处;如图1-e所示。
[0069] 结香6个月后观察,结果表明,上述接种方式均可以使白木香结香;其中:
[0070] 1)网状面式接菌:
[0071] 网状面式接菌法不仅获得点状香(如图2-a,截段-1和截段-2所示),还获得面状香(如图2-a,截段-3以及图2-b所示),点状香出现在网状面上下各10-30cm的区域。
[0072] 2)通体结香技术的输液法:
[0073] 结果如图3所示,图3上排,从左至右分别为:输液口上端(输液口,1cm处,2cm处,3cm处,4cm处15cm处,40cm处)的结香图;图3下排,从左至右分别为:输液口下端(1cm处,2cm处,3cm处,4cm处,5cm,15cm处,40cm处)的结香图。
[0074] 结果显示:硬孔菌采用输菌液法6个月可以结香并且结香距离长中间不腐朽,中间不腐朽部分即获得点线状香,除了在输液孔上下各有3cm-10cm的腐朽外,其余至少可获得80cm-100cm中间不腐朽的点状香。
[0075] 1)钻孔接菌法:
[0076] 钻孔接菌法不仅获得线香(如图4-a所示,打孔处),还可以获得点状香(如图4-b所示,其中,图4-b为孔口20cm处),点状香开始出现的位置在钻孔上下端3cm-10cm处,点状香在上下端持续出现的长 度各有20-30cm。
[0077] 2)斜切口法:
[0078] 斜切口法不仅获得线香(如图5-a所示,斜状切口处),还可以获得点状香(如图5-b和5-c所示,其中,图5-b为斜状切口5cm处;图5-c为斜状切口10cm处),点状香在斜切口的上下各3cm-5cm处开始出现,点状香在斜切口上下持续出现的长度各有10-30cm。
[0079] 3)饼状接菌法:
[0080] 饼状接菌法不仅获得线香(如图6-a所示,饼状切口处),还可以获得点状香(如图6-b和6-c所示,其中,图6-b为饼状切口5cm处;图6-c为饼状切口10cm处),点状香在饼状面的上下各1cm-3cm处开始出现,点状香在饼状面上下持续出现的长度各有10-20cm。
[0081] 实施例2
[0082] 可可毛色二孢(Lasiodiplodia theobromae),其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为:CGMCC NO.9591。
[0083] 将可可毛色二孢(Lasiodiplodia theobromae)菌株培养3-15d,得到菌丝1、菌液2;参照实施例1,根据树的大小按不同的剂量、采用1)网状面式接菌;2)通体结香技术的输液法:3)钻孔接菌法:4)斜切孔法:5)饼状接菌法:共5种不同方法接种白木香促进结香。
[0084] 结果表明,上述接种方式均可以使白木香结香。
[0085] 结香6个月后观察,结果表明,上述接种方式均可以使白木香结香;其中:
[0086] 1)网状面式接菌:
[0087] 网状面式接菌法不仅获得点状香(如图7-a所示),还获得面状香(如图7-b以及图7-c所示),点状香出现在网状面上下各10-20cm的区域。
[0088] 2)通体结香技术的输液法:
[0089] 结果如图8所示,8-a中,从左至右分别为:输液口上端(输液孔上端切口处,2cm处,5cm处,10cm处)的结香图;8-b中,从左至右分别为:输液口下端(输液口下端切口处,2cm处,5cm处,10cm处)的结香图。
[0090] 结果显示:硬孔菌采用输菌液法6个月可以结香并且结香距离比较长,中间不腐朽,中间不腐朽部分获得点状香,1个输液孔除了输液孔至上下端有1cm-3cm的腐朽外,其余至少可获得10cm-20cm中间不腐朽的点状香。
[0091] 1)钻孔接菌法:
[0092] 钻孔接菌法不仅获得线香(如图9-a所示,打孔处,输液孔处愈合),还可以获得点状香(如图9-b所示,其中,图9-b为孔口5cm处,10cm处没有点状香),点状香出现在输液口上下端1cm-3cm处,点状香在上下段持续的长度各有3-5cm。
[0093] 2)斜切口法:
[0094] 斜切口法不仅获得线香(如图10-a所示,斜状切口处),还可以获得点状香(如图10-b和10-c所示,其中,图10-b为斜状切口5cm处;图10-c为斜状切口10cm处),点状香持续出现在切口区域上下端各10-20cm的区域。
[0095] 3)饼状接菌法:
[0096] 饼状接菌法不仅获得线香(如图11-a所示,饼状切口处),还可以获得点状香(如图11-b和11-c所示,其中,图11-b为饼状切口5cm处;图11-c为饼状切口10cm处),点状香长度可达切口区域上下端各10-20cm。
[0097] 实施例3
[0098] 拟层孔菌(Fomitopsis meliae.),其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为:CGMCC NO.7802。
[0099] 将拟层孔菌(F.meliae.)菌株培养3-15d,得到菌丝1、菌液2;参照实施例1,根据树的大小按不同的剂量、采用1)网状面式接菌;2)通体结香技术的输液法:3)钻孔接菌法:4)斜切孔法:5)饼状接菌法:共5种不同方法接种白木香促进结香。
[0100] 结果表明,上述接种方式均可以使白木香结香。
[0101] 结香6个月后观察,结果表明,上述接种方式均可以使白木香结香;其中:
[0102] 1)网状面式接菌:
[0103] 如图12所示,网状面式接菌法不仅获得面状香(图12-a),也可获得点状香,点状香的距离可达网状面上下各10-20cm。图12-b为10cm处。
[0104] 2)通体结香技术的输液法:
[0105] 结果如图13所示,从左至右分别为:输液口上端(1cm处,2cm处,3cm处,15cm,50cm处)的结香图。
[0106] 结果显示:拟层孔菌采用输菌液法6个月可以结香,并且结香距离比较长,中间不腐朽,获得点状香距离比较长,
[0107] 输液口至输液口的上下端各10cm处的区域出现沉香,输液口上下端各10-50cm处的区域点状香或者点线状香。
[0108] 1)钻孔接菌法:
[0109] 钻孔接菌法不仅获得线香(如图14-a所示,打孔处),还可以获得点状香(如图14-b所示,其中,图14-b为孔口3cm处),点状香出现在钻孔口上下端的2cm-3cm处,点状香持续出现在上下端各10cm。
[0110] 2)斜切口法:
[0111] 斜切口法不仅获得线香(如图15-a所示,斜状切口处),还可以获得点状香(如图15-b和15-c所示,其中,图15-b为斜状切口5cm处;图15-c为斜状切口10cm处),点状香出现在斜切口3-5cm处,点状香持续出现在上下端各5-15cm。
[0112] 3)饼状接菌法:
[0113] 饼状接菌法不仅获得线香(如图16-a所示,饼状切口处),还可以获得点状香(如图16-b所示,其中,图16-b为饼状切口5cm处;图16-c为饼状切口10cm处,没有结香),点状香出现在斜切口1-3cm处,点状香持续出现在上下端各5-8cm。
[0114] 效果实施例
[0115] 为进一步说明本发明的有益效果;本发明将实施例1获得的点状沉香车成珠子,如图17所示,中间的为未接香白木对照。
[0116] 为更进一步说明本发明的有益效果;本发明将实施例1-3获得的结香6个月的白木香分别砍下,剖香,然后进行薄层鉴定。具体方法为:分别取沉香样品粉末1g置于具塞三瓶中,加甲醇25ml,超声处理60min,过滤,滤液定容至25ml,作为供试品溶液。取6,7-二甲基-2(2-苯乙基)色加甲醇配制成每毫升含0.05mg 6,7-二甲氧基-2(2-苯乙基)色酮的色酮对照品溶液。吸取供试品溶液、对照药材溶液和色酮对照品溶液各5μl,分别点于同一胶GF254薄层板上,以三氯甲烷-乙醚(v﹕v=10﹕1)为展开剂,展开两次,取出晾干,置紫外光灯(254nm和365nm)下检视,拍照。
[0117] 薄层鉴定结果如图18所示。18-a、b和c分别为硬孔菌、色二孢菌、拟层孔菌获得点状香的薄层鉴定结果。在图18中,ST、SY、XZ、WZ、BZ和DK分别表示:色酮对照,输液法获得的色酮,斜状法(斜切口法)获得的色酮、网状法获得的色酮、饼状法获得的色酮和钻孔接菌法获得的色酮。
[0118] 结果进一步验证了本发明实施例1-3的结香方法均可获得沉香。
[0119] 以上所述仅为本发明的较佳实施例而已,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
QQ群二维码
意见反馈