[0001] 本发明涉及一种化妆品组合物，该化妆品组合物包含具有增进记忆力及改善认知功能效果的丝柏精油（cypress essential oil）和其他有效成分。

[0002] 痴呆症一般是对人类认知功能、智力、感情及行动变化等呈现明显的损伤的复合临床综合症，是一种产生记忆力、注意力、语言功能、视觉空间能力等方面的大脑皮层功能障碍，在日常、社会生活的营造方面存在很大困难的状态。定义为痴呆症，意味着包括记忆力的其他认知功能中的一种以上功能发生障碍，仅仅记忆力下降并不能称之为痴呆症。

[0003] 痴呆症的原因在于，作为退行性脑部疾病的阿尔茨海默病（Alzheimer's Disease）或帕金森病（Parkinson's Disease）、脑出血、作为代谢性疾病的肝性脑病、威尔逊氏病（Wilson's Disease）、作为感染性疾病的神经梅毒、获得性免疫缺陷综合症、酒精等药物中毒及脑外伤等多种病因，而有些形态的对中枢神经系统造成结构性、功能性异常的疾病能引发痴呆症。其中，最常见的是由阿尔茨海默症引起的痴呆症，占50%～60%，其次是由脑血管疾病引起的痴呆症。

[0004] 当前，韩国65岁以上的老年人当中，痴呆症患者人数为46万人左右，而在2020年估计为70万人，2040年估计将达到200万人。由于痴呆症需要长时间的治疗和其症状的特性，在生活方面的不便程度比类似癌症等其他重症疾病还要严重，并且在对患者的管理和保护中所需的身体上、心理上、经济上的负担也很大。从老年人口的迅速的增加速度和痴呆症的患病率推算，痴呆症是需要社会性、国家性解决方案的重要任务。

[0005] 记忆认知障碍是阿尔茨海默病患者初次经历的症状，并且也是最常见的症状。阿尔茨海默病的初期，患者会经历无法详细记住最近的对话或事情的内容的近事记忆（recent memory）障碍，这是由于海马神经细胞被损伤而导致储存最近记忆的功能下降。但在这一时期，对很久以前发生的事情的回顾性记忆（remote long-term memory）相对保持的完好。但是，随着病情的恶化，与长期记忆的储存有关的大脑皮层也会有损伤，此时，对过去的记忆也会逐渐显露出障碍。

[0006] 此类阿尔茨海默病的症状与β-淀粉样蛋白（β-amyloid）的淀积引起的细胞毒素以及胆碱能神经系统的突触障碍也有很大的关联。胆碱能神经系统的功能障碍源于阿尔茨海默症患者的记忆和认知功能障碍。前脑的梅纳特基底核（basal nucleus of Meynert）胆碱能神经元与颞叶、海马及扁桃体相关，干预记忆和认知功能，但阿尔茨海默症患者的大脑中，神经细胞在颞叶中减少至78%，在海马中减少至60%，在基底核胆碱能中减少至67%。若脑细胞因细胞毒性而受损时，则信息的传递，即神经传递物质的代谢发生障碍，这便成为引发记忆认知障碍的原因。已有很多研究人员不断地对阿尔茨海默病中乙酰胆碱（acetylcholine）和与其合成相关的胆碱乙酰基转移酶（choline acetyltransferase）的选择性减少进行了报告。更可况，阿尔茨海默病患者的大脑与正常人的脑功能相比，不仅减少烟碱型乙酰胆碱受体（nicotinic acetylcholine receptor）、毒蕈碱型乙酰胆碱受体（muscarinic acetylcholine receptor），而且还降低胆碱的再吸收和乙酰胆碱的分泌功能。

[0007] 为了改善此类胆碱能神经系统的障碍，研发了多种的拟胆碱药。但到目前为止，最为有效和广泛使用的是乙酰胆碱酯酶抑制剂（AchEI，acetylcholinesterase Inhibitor）。目前，通过美国食品药物管理局（FDA）认证并在市场上销售的药物有多奈哌齐（donepezil）、利凡斯的明（rivastigmine）及加兰他敏（galanthamine），而此类药物通过在突触间隙抑制乙酰胆碱的分解，来提高浓度，从而呈现治疗效果。此类药物在初期对认知功能或日常生活方面有些好转，但服用9个月至1年左右之后会回到之前的状态，因此，无法在根本上抵挡疾病的进展。此类药物最好是在比较早的早期使用才能获得效果，对于重症痴呆症效果甚微。共同的副作用有乙酰胆碱的增加引起的恶心、腹泻、食欲减退、眩晕症、肌肉痉挛及睡眠障碍等，严重的副作用有伴随晕厥的心动过缓。除此之外，还有抑制神经细胞的损伤的美金刚（memantine；N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受体阻断剂）、具有神经细胞保护效果的银杏叶提取物（ginko biloba）、中国中药材中提取的石杉碱甲（huperzine A；可逆性AchEI）等，对于τ蛋白及β-淀粉样蛋白的形成、淀积抑制、抗氧化、抗炎症效果等阿尔茨海默病的病理机制研发多种治疗剂。目前，韩国的阿尔茨海默病治疗剂中，国外联属公司占98%的占有率，几乎依靠进口。更何况，一家公司占市场份额的80%，因此，事实上可视为垄断。

[0008] 另一方面，察看利用天然物的相关现有专利，韩国专利公开第10-2009-0082946号提出了一种含有以规定比率混合有绿茶提取物及茶氨酸的混合物作为有效成分的记忆力增进或集中力提高用组合物的相关技术。并且，韩国专利授权第10-0360674号提出了一种使用何首乌的痴呆症预防及治疗用组合物。并且，韩国专利授权第10-0822887号提出了一种用于治疗或预防痴呆症的组合物，其特征在于，包含白屈菜提取物、8-羟基二氢白屈菜红碱、8-羟基二氢血根碱、黄连素或它们的混合物。并且，韩国专利授权第10-0804480号提出了一种包含由远志、石菖蒲、人参、当归、银杏叶、五味子及川芎组成的混合提取物的记忆力增进组合物。并且，韩国专利授权第10-2005-0092292号提出了一种具有记忆力增进效果的药草组合物，其特征在于，由白术提取物、茯苓提取物及酸枣仁提取物组成。并且，韩国专利授权第10-0500029号提出了一种含有熟地黄（Rehmanniae radix preparata）提取物作为有效成分的记忆力提高生药组合物。如上所述，就利用现有天然植物的记忆力或痴呆症相关组合物而言，由于以口服用药组合物为主，因此在日常生活中存在需要按时服药的不便。

[0009] 技术问题

[0010] 本发明的目的在于提供一种化妆品组合物，该化妆品组合物与现有的通过口服用药来增进记忆力及改善认知功能障碍的组合物不同，而能够通过香味增进记忆力及改善认知功能障碍。

[0011] 技术方案

[0012] 本发明提供一种用于增进记忆力及改善认知功能障碍的化妆品组合物，该化妆品组合物包含：第一精油成分，其为丝柏精油；第二精油成分，其为选自松针精油、薰衣草精油、迷迭香精油、红百里香精油及佛手柑精油中的一种以上。

[0013] 上述芳香性组合物的总重量中，第一精油成分和第二精油成分的合计总使用量优选为0.01重量%至100重量%。

[0014] 优选地，相对于100重量份的上述第一精油成分，上述第二精油成分以0.01重量份至100重量份的比率使用。

[0015] 上述化妆品组合物还可包含载体、赋形剂、稀释剂、填充剂、增量剂、结合剂、润湿剂、润滑剂、崩解剂及表面活性剂中的一种以上。

[0016] 特别是，上述化妆品组合物优选为洗发剂、护发素、香水、乳液、乳霜、护肤水、清洗剂、摩丝、喷雾剂、发蜡、除臭剂、芳香剂及发胶中的任意一种剂型。

[0017] 有利的效果

[0018] 本发明的丝柏精油复合芳香性化妆品组合物确认了针对因莨菪胺而引起的记忆力损伤及认知功能障碍的改善效果，因此，能有用地利用为用于记忆力增进及认知功能障碍的预防及治疗的化妆品组合物。本发明的丝柏复合精油在多种认知功能提高实验中，整体上比单一的精油显示出了更优秀的效果，并且，在使用人工香料时，发现这种效果不如天然精油。附图说明

[0019] 图1及图2为实验例1的结果，图1是表示%自发性交叉行动量的实验结果；图2是表示进入到3个通道的总次数的实验结果。

[0020] 图3及图4为实验例2的结果，图3是表示平均逃离时间的实验结果；图4是表示不同实验日期的平均逃离时间的实验结果。

[0021] 图5及图6为实验例3的结果，图5是表示第二天把持试验（retention trial）中，在亮箱滞留的时间（step-through latency time）的测定结果；图6是表示第一天采集试验（aquisition trial）中，避暗潜伏时间的测定结果。

[0022] 图7及图8为实验例4的结果，图7是表示场景性恐惧条件化反应中，冻结反应时间的测定结果；图8是表示关联性恐惧条件化反应（cued fear conditioning）中，冻结反应时间的测定结果。

[0023] 为了达成上述目的，本发明提供一种芳香性组合物，该芳香性组合物以丝柏精油为第一精油成分，并包含选自松针精油、薰衣草精油、迷迭香精油及红百里香精油中的一种以上作为第二精油成分。本发明中的上述精油都是从天然材料中提取的精油。

[0024] 本发明的上述化妆品组合物，其特征在于，对记忆力增进及认知功能障碍的治疗或预防机制增强神经营养因子、乙酰胆碱合成酶及受体的表达，并通过阻碍乙酰胆碱酯酶的机制来发挥其作用。上述认知功能障碍包括阿尔茨海默型痴呆症、脑血管性痴呆症和因头部损伤引起的痴呆症，优选地包括阿尔茨海默病（Alzheimer's disease）。

[0025] 本发明中作为有效成分利用的迷迭香（rosemary）、红百里香（thyme red）、佛手柑（bergamot）、松针（pine needle）、薰衣草（lavender）、丝柏（cypress）等精油（essential oil）用作多种芳香疗法（aromatherapy）及香妆品的原料。上述精油可通过本发明所属技术领域的通常用到的提取及分离方法进行分离或者可以商业购买，因此，在本发明中省略精油的提取方法。

[0026] 丝柏（cypress）精油对肌肉痉挛、肌肉痛、关节炎等具有一时的镇痛效果，有助于免疫力增强、紧张、疲劳、无力、神经衰弱，由于还具有较强的杀菌、收敛、元气恢复效果，因此用于剃须后或皮肤的护理。

[0027] 迷迭香（rosemary）精油具有强壮、镇定、消化、收敛、驱风、抗菌作用，对于头痛、大脑血液循环、记忆力增进及提高集中力方面有疗效。并且，由于还具有抗老化的效果，因此，普遍用作化妆水，若用作洗发剂或护发素，则具有抑制头皮屑的功效。

[0028] 红百里香（thyme red）精油具有强心、强壮、祛痰、驱虫、驱风、血压上升、抗毒、抗风湿、壮阳、杀菌、杀虫、消毒、食欲增进、痛经、利尿的作用，并具有有助于脑细胞的活化，提高记忆力和集中力的效果。

[0029] 佛手柑（bergamot）精油，由于杀菌性物质包含在叶子中，具有消炎、抗菌作用，给予皮肤清爽感，具有控油功能，因此，广泛适用于化妆品领域中的祛痘治疗等皮肤疾病。并且，还具有优秀的皮肤镇定及抗氧化效果，具有延迟皮肤老化及预防的功效。

[0030] 松针（pine needle）精油具有祛痰、健胃、发汗、杀菌、消毒、消炎、利尿、除臭及消毒的作用，对瘀滞的皮肤有效，对湿疹和干癣、切割伤等皮肤炎症有治愈效果。

[0031] 薰衣草（lavender）精油包括英国薰衣草、法国薰衣草及长穗薰衣草等很多种类，其精油从很久以前就使用于芳香疗法（aromatherapy）。薰衣草精油对杀菌、消毒、防腐、防虫、催眠、镇定、镇痛、头痛、不眠、忧郁症、不安、焦虑、支气管炎、神经痛、类风湿、肌肉痛、烧伤、虫咬方面具有效果，特别是作为化妆水时，缓解皮肤的紧张，具有保湿、再生及清洗作用。

[0032] 另一方面，本发明中为了与天然精油的效果进行比较而使用的合成香料（人工香料）一般是组合多种类型的香料来使用的，主要是在能联想到花香的花香（floral）系列，感受到清爽的树叶和自然的绿色（green）系列，给予甜蜜和清新感的果香（fruity）系列等多种香料的系列中，单独使用或者复合使用多种系列的香料。

[0033] 并且，本发明提供一种含有丝柏复合精油作为有效成分的用于增进记忆力及预防和改善认知功能障碍的香妆品组合物。

[0034] 上述芳香性化妆品组合物的总重量中，第一精油成分和第二精油成分的总使用量优选为0.01重量%至100重量%。优选地，相对于100重量份的上述第一精油成分，上述第二精油成分以0.01重量份至100重量份的比率使用。但是，本发明作为利用芳香性来改善记忆力及认知功能的化妆品组合物，与口服用组合物不同的是，在组合比率方面并不具有很大的意义，因此，并不局限于上述组合比率，可根据患者的状态及疾病的种类及进展程度自由调节组合比率来使用。

[0035] 本发明的芳香性化妆品组合物还可包含基于通常方法的适当的载体、赋形剂或稀释剂。载体、赋形剂及稀释剂的例子可以是乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露糖醇、木糖醇、赤藓糖醇、麦芽糖醇、淀粉、阿拉伯胶、藻酸盐、明胶、磷酸钙、硅酸钙、纤维素、甲基纤维素、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、水、羟基苯甲酸甲酯，羟基苯甲酸丙酯、滑石、硬脂酸镁及矿物油，但并不局限于此。

[0036] 本发明的芳香性化妆品组合物，分别根据通常方法能够以洗发剂、护发素、香水、乳液、乳霜、护肤水、芳香剂及气溶胶等外用剂和清洗剂、摩丝、发胶、除臭剂、或涂抹在皮肤上的软膏剂等形态进行剂型化来使用。如上所述进行制剂化时，可使用普遍使用的填充剂、增量剂、结合剂、湿润剂、崩解剂及表面活性剂等稀释剂或赋形剂进行调配。并且，除了使用单纯的赋形剂之外，还能使用硬脂酸镁、滑石等润滑剂。

[0037] 以下，通过以下的实施例及实验例对本发明进行详细说明。但是，以下实施例及实验例仅仅是用来例示本发明的，而本发明的内容并不局限于以下的实施例、实验例。

[0038] 作为实验动物，使用体重在20g-25g左右的C57/BL6雄性小鼠（8周龄，孝昌科技，大邱），让它适应一周的实验环境。实验组和对照组各分成每组5只的15个组（参照表1）。适应期间及实验期间每日暴露在香味中3小时，实验动物在大邱韩医大学动物饲养室内，温度维持在21℃-26℃，湿度维持在40%-60%，并以日夜各12小时为周期进行实验。

[0039] 以下实验中，在丝柏复合精油（样品名称：I，J，K，L，M）中，丝柏精油和其他精油的混合比率为重量比1：1。

[0040] 在以下实验例中，迷迭香（rosemary）、红百里香（thyme red）、佛手柑（bergamot）、松针（pine needle）、薰衣草（lavender）及丝柏（cypress）的精油是由芳香银行公司（aroma-bank）提供，而花香系列、果香系列及绿色系列的人工香料是从成宇国际组织购买使用的。并且，在特殊研制的香料罐中使精油饱和30分钟之后，以下列表1的实验组为对象进行实验。

[0041] 表1

[0042]

[0043] 使用通过莨菪胺（scopolamine）损伤记忆力的实验动物，进行测定记忆力的行动实验，以对丝柏等精油的吸入（inhale）带给记忆力增进及认知功能障碍的治疗及预防的影响进行系统性研究。莨菪胺起乙酰胆碱受体拮抗剂作用，用于抑制记忆力。在投用莨菪胺（S0929,西格玛奥德里奇公司：Sigma-Aldrich Co.,美国）前5天开始，每日将实验组暴露于精油的香味中3小时。之后，将莨菪胺以1mg/kg投用到腹腔内，引发记忆力的损伤，并进行如下Y-迷宫实验（Y-maze test）、水迷宫实验（Morris water-maze test）、被动回避实验（passive avoi dance test）及条件性恐惧实验（fear conditioning test）。

[0044] 实验例1：Y-迷宫实验

[0045] 为了确认上述实施例中获得的精油对记忆力的效果，应用Y-迷宫方法进行如下实验。

[0046] Y-迷宫实验装置由三个相同的通道（宽度6cm，长度28cm，高度18cm）构成，每个通道之间相互按120°的规定角度进行配置。将小鼠置于一个通道的末端后，让它在Y迷宫中自由走动8分钟。测定进入每个通道（arm）的次数及顺序，来评价自发性交叉行动量（spontaneous alteration，%）。依次进入三个通道时，将自发性交叉行动量定义为ABC、BCA及CAB等。因此，根据以下数学公式1计算%自发性交叉行动量。

[0047] 数学公式1

[0048] %自发性交叉行动量=（总行动量）/（进入通道的总次数－2）×100

[0049] 通过上述Y-迷宫实验结果，如图1及图2所示，在正常组A和仅单独投用莨菪胺的对照组B之间能观察到统计性的显著差异。即，就只将莨菪胺投用到腹腔的对照组B而言，由于记忆力受损，变更行动力分数平均为51.30%±1.0%，相反，正常组A的变更行动力分数平均为79.90%±0.69%。另一方面，分别暴露在迷迭香精油、红百里香精油、佛手柑精油、松针精油、薰衣草精油、丝柏精油的香味中后，投用莨菪胺的实验组C至实验组H的变更行动力分数平均为60%，这与单独投用莨菪胺的对照组B相比，虽然显示出认知记忆力的提高，但与一同使用迷迭香精油、红百里香精油、佛手柑精油、松针精油及薰衣草精油中的任意一种成分和丝柏精油的本发明的芳香性组合物（I至M）相比时，比单独使用上述精油中的一种，效果更佳。

[0050] 特别是，复合暴露于佛手柑、松针、薰衣草和丝柏后吸入的情况（K、L、M）下，显示出较高的记忆力提高效果。另一方面，如图2所示，在相同的实验条件下，进入三个通道的总次数（total number of arm entries）在每组之间并没有显示出很大的差异。

[0051] 表2

[0052]实验组 %自发性交叉行动量（单位：%）
A 79.90±0.69
B 51.30±1.0
C 60.29±3.12
D 60.80±2.80
E 62.13±3.24
F 62.52±1.53
G 60.93±4.65
H 61.67±3.27
I 67.48±3.29
J 68.45±3.06
K 70.45±3.95
L 70.29±2.22
M 71.63±1.83

[0053] 上述实验例1中，虽然没有进行与丝柏精油一同使用迷迭香精油、红百里香精油、佛手柑精油、松针精油及薰衣草精油中的2种以上精油的实验，但根据上述实验例1的结果可以推测，使用迷迭香精油、红百里香精油、佛手柑精油、松针精油及薰衣草精油中的2种以上精油时，与仅使用一种的情况相比，效果至少相同或者得以提高。

[0054] 实验例2：水-迷宫实验

[0055] 水迷宫实验（Morris water-mazetest）是一种为了确认精油对实验动物的空间认知能力及短期和长期记忆力的恢复（short and long-term memory recovery）有没有帮助的实验。实验设备由圆形的水槽（不锈钢（stainless steel），直径120cm，高度45cm）和逃脱台（台架：platform，直径10cm，高度30cm）构成。水槽的水（温度22℃±2℃）的高度高出台架2cm，使小鼠站在逃脱台时身体露在水面。就水迷宫实验而言，由于实验动物利用水槽周边的标志物寻找逃脱台，因此，将标志物稳定地保持在规定程度上，使得实验期间的周边环境不变。实验动物找到逃脱台，在逃脱台上滞留20秒钟以上时，寻找逃脱台时所花费的时间设为逃脱潜伏期（escape latency），一天实施3次后获得的平均值设为平均逃脱潜伏期（mean escape latency）。逃脱潜伏期通过设在水槽上方天花板上的摄像头，通过电脑程序（动物运动轨迹跟踪系统：Ethovision3.1，诺达思公司：Noduls，荷兰）进行了观察和记录。实验按每日3次共进行了4天，此时，每次依次将实验动物放到水槽不同的位置，从而使偶然找到逃脱台的可能性最小化。如果实验动物在120秒钟内无法找到逃脱台时，将逃脱潜伏期设为120秒钟，当实验动物站到逃脱台时，给予20秒钟的时间，让小鼠重新记住周边线索。

[0056] 实验结果表明，暴露在精油下吸入的实验组C至实验组M与仅单独投用莨菪胺的对照组B相比，显示平均显著低的平均逃脱时间，从而能确认到呈现显著性空间认知记忆力恢复效果。特别是，作为本发明的优选实施例的实验组I至实验组M与对照组和仅暴露于1种精油成分的实验组C至实验组H相比，具有更优秀的记忆力恢复效果。

[0057] 另一方面，组合花香系列和果香系列的人工香料N和组合花香系列、果香系列及绿色系列的人工香料O的平均逃脱时间分别为61.93秒钟±7.27秒钟、62.2秒钟±3.64秒钟，这与天然香料相比显示甚微的效果（参照图3及表3）。

[0058] 表3

[0059]实验组 平均逃脱潜伏期（单位：秒钟）

[0060]A 17.67±1.58
B 90.63±1.72
C 49.67±1.69
D 52.6±2.33
E 42.13±1.18
F 35.87±2.71
G 44.33±11.35
H 40.0±6.22
I 33.6±5.40
J 35.4±4.59
K 27.13±0.98
L 26.93±2.72
M 23.33±2.31
N 61.93±7.27
O 62.2±3.64

[0061] 特别是，就正常组（SHAM）和实验组而言，在第三天后显示稳定的减少曲线图，由此可知实验期间形成了长期记忆（参见图4）。特别是，在分别将佛手柑、松针、薰衣草精油中的一种精油和丝柏精油复合暴露并吸入的情况（K、L、M）下，显示出相对较高的记忆力提高效果。

[0062] 实验例3：被动回避实验

[0063] 在相同结构的亮箱和暗箱（宽度25cm，长度20cm，高度20cm）由截断门连接的装置中进行被动回避实验。亮箱设置了灯泡，而暗箱在地面以1cm的间距设置了2mm厚度的不锈钢棒，以能够赋予电刺激。将实验动物放入亮箱适应10秒钟后，打开灯泡，并将截断门打开20秒钟。若实验动物向暗箱移动，则门会自动关闭，并施加电击（0.5mA，5秒钟）（捕获试验：acquisition trial）。经过24小时之后，将实验动物重新放入亮箱执行相同的过程，由此将实验动物在亮箱滞留的时间（step-through latency time）最多测定到300秒钟（保留试验：retention trial）。

[0064] 实验结果，如图5及表4所示，在第二天的保留试验（retention trial）期间，正常组A的在亮箱滞留的时间（step-through latency time）记录为281.86秒钟±4.46秒钟，对照组B的避暗潜伏时间记录为21.15秒钟±3.32秒钟，在统计上显示显著差异。从此，能判断对照组确实引发了记忆力损伤。本实验例中，分别对迷迭香精油、红百里香精油、佛手柑精油、松针精油、薰衣草精油及丝柏精油的香味进行处理的实验组C至实验组H，与一同使用丝柏精油和迷迭香精油、红百里香精油、佛手柑精油、松针精油、薰衣草精油中的一种精油的实验组I至实验组M都显示相似的记忆力提高，但特别是在作为实验组M的一同处理丝柏精油+薰衣草精油的实验组中显示非常好的效果。

[0065] 另一方面，在组合花香系列和果香系列的人工香料的香味中暴露3小时后投用莨菪胺的实验组N和组合花香系列、果香系列及绿色系列的人工香料的香味中暴露3小时后投用莨菪胺的实验组O的在亮箱滞留的时间（step-through latency time）分别为146.06秒钟±10.91秒钟、145秒钟±3.79秒钟，与天然香料相比显示甚微的效果。

[0066] 表4

[0067]

[0068]

[0069] 另一方面，第一天的训练期间（aquisition trial）中在亮箱滞留的时间（step-through latency time），在各组之间没有显示大的差异（参照图6）。

[0070] 实验例4：恐惧条件化实验

[0071] 恐惧条件化实验是在因莨菪胺而导致记忆力损伤的实验动物中，利用环境前后关系（context）或条件刺激（CS）与电击（US）相联合的经典条件反射模式，对学习和记忆进行评价的检查，这可以分为场景恐惧条件化（contextual fear conditioning）和关联性恐惧条件化（cued fear conditioning）。

[0072] 训练是通过声音刺激（CS，15秒钟，68-80dB，30kHz）和电击（US，1秒钟，0.5mA）配对进行2次。分别以150秒钟的间距实施，在最后的电击（US）结束后的60秒后，将小鼠从条件箱子中取出。经过24小时之后，实施以下检查。场景恐惧条件化：将动物放入条件箱的状态下，不提供声音刺激的情况下测定冻结反应，作为对场景恐惧条件化反应的尺度（海马依赖性记忆：hippocampus-dependent memory）。冻结反应定义为动物除了用于呼吸的行动之外没有动静的状态。关联性恐惧条件化：经过2小时之后，为了改变场景，将小鼠放入与训练时不同的另一个新箱子中，给予与训练时相同条件的声音刺激，由此测定冻结反应。并将其作为场景恐惧条件化反应的尺度（杏仁核依赖性记忆：amygdala-dependent memory）。

[0073] 恐惧条件化实验的结果，如图7及表5所示，将正常组A和只单独投用莨菪胺的对照组B暴露在精油中，由鼻子吸入后，在投用莨菪胺的实验组C至实验组M之间能观察到统计性的显著差异。即，在场景恐惧条件化反应（contextual fear conditioning）中，就向腹腔仅投用莨菪胺的对照组B而言，由于记忆力的损伤，冻结反应时间记录为平均23.77秒钟±2.30秒钟，与此相反，正常组A记录为平均244.5秒钟±2.42秒钟（参照图7）。另一方面，吸入精油的实验组如下列表所示，能确认与对照组具有统计上显著的认知记忆力提高。总体而言，本发明的组合物（I至M）要比单独使用的C至H效果优秀。

[0074] 表5

[0075]实验组 冻结反应时间（单位：秒钟）
A 244.5±2.42
B 23.77±2.30
C 184.6±10.52
D 185.4±2.71
E 201.8±1.85
F 209.4±10.10
G 219.2±4.90
H 225.0±5.30
I 213.5±5.24
J 215.7±3.57
K 230.6±3.23
L 233.0±5.66
M 235.4±5.61
N 145.0±6.99
O 147.8±10.11

[0076] 并且，在关联性恐惧条件化反应（cued fear conditioning）中，只将莨菪胺投用到腹腔的对照组B时，冻结反应时间为平均21.23秒钟±1.42秒钟，相反，正常组A的冻结反应时间为平均241.42秒钟±2.02秒钟（参照图8及表6）。就吸入精油的实验组C至实验组M而言，能确认与对照组在认知记忆力方面具有统计性的显著提高。特别是在佛手柑精油、松针精油、薰衣草精油及丝柏精油中复合暴露时（K、L、M），显示更高的记忆力提高效果，而在组合花香系列和果香系列的人工香料N和组合花香系列、果香系列及绿色系列的人工香料O，与天然香料相比显示出甚微的效果。

[0077] 表6

[0078]实验组 冻结反应时间（单位：秒钟）
A 241.42±2.02
B 21.23±1.42
C 178.6±9.87
D 187.8±6.12
E 191.6±3.12
F 207.8±9.40
G 218.0±3.94
H 226.3±7.14
I 216.3±4.23
J 219.2±5.57
K 223.4±3.89
L 225.2±5.53
M 234.2±3.06
N 136.6±9.37
O 144.0±8.44