嘌呤衍生物的结晶形式 |
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| 申请号 | CN201180015141.5 | 申请日 | 2011-01-24 | 公开(公告)号 | CN102985423B | 公开(公告)日 | 2017-08-08 |
| 申请人 | 西克拉塞尔有限公司; | 发明人 | B.M.斯基德; C.P.沃勒尔; J.C.C.阿瑟顿; J.S.诺森; P.费尔南德斯; | ||||
| 摘要 | 本 发明 涉及显示出优异抗 肿瘤 活性的嘌呤衍 生物 的新的结晶形式。本发明也涉及包含所述结晶形式作为活性成分的药物组合物，及其用于 预防 或 治疗 疾病 的用途。本发明进一步涉及制备所述结晶形式的方法。 | ||||||
| 权利要求 | 1.化合物(I)的结晶形式， |
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| 说明书全文 | 嘌呤衍生物的结晶形式[0002] 发明背景 [0004] [0005] 研究已经证明具有化学名(2R,3S)-3-(6-((4,6-二甲基吡啶-3-基甲基氨基)-9-异丙基-9H-嘌呤-2-基氨)戊-2-醇的化合物(I)，显示出强效的CDK抑制活性，因此在增生性疾病、免疫介导的疾病和炎性疾病、自身免疫和自身免疫-介导的障碍、肾障碍、心血管障碍、眼睛疾病、神经变性障碍、精神障碍、病毒性障碍、代谢紊乱和呼吸疾病治疗中具有潜在治疗应用。 [0006] 有利地，化合物(I)在多种不同细胞株中的细胞毒性研究中，令人惊奇地显示出高效能。 [0007] 本发明寻求提供结晶形式的化合物(I)。尤其地，本发明寻求提供保持化合物所需药物活性的结晶形式。更特别地，但非唯一地，本发明寻求提供比无定形显示出具有一种或多种改善特性的结晶形式的化合物(I)。 发明内容[0008] 本发明的第一方面涉及化合物(I)的结晶形式， [0009] [0011] 典型地，本发明的结晶形式证明比无定形具有一种或多种改善的性质。适合的性质包括例如更好的存储稳定性、更容易处理(流动性、可压缩性、稳定性)、更容易纯化以及更容易大规模合成。 [0012] 本发明的第二方面涉及包括上述结晶形式作为活性成分和药学上可接受的稀释剂、赋形剂或载体的药物组合物。 [0013] 本发明的第三方面涉及用于药物的上述结晶形式。 [0014] 本发明的第四方面涉及上述结晶形式，其用于预防或治疗增生性疾病、免疫介导的疾病和炎性疾病、自身免疫和自身免疫-介导的障碍、肾障碍、心血管障碍、眼睛疾病、神经变性障碍、精神障碍、病毒性障碍、代谢紊乱和/或呼吸疾病。 [0015] 本发明的第五方面涉及上述结晶形式在制备预防或治疗增生性疾病、免疫介导的疾病和炎性疾病、自身免疫和自身免疫-介导的障碍、肾障碍、心血管障碍、眼睛疾病、神经变性障碍、精神障碍、病毒性障碍、代谢紊乱和/或呼吸疾病的药物方面的用途。 [0016] 本发明的第六方面涉及预防或治疗增生性疾病、免疫介导的疾病和炎性疾病、自身免疫和自身免疫-介导的障碍、肾障碍、心血管障碍、眼睛疾病、神经变性障碍、精神障碍、病毒性障碍、代谢紊乱和/或呼吸疾病的方法，所述方法包括向需要的受试者给药药理学上有效量的上述结晶形式。 [0017] 本发明的第七方面涉及制备上述结晶形式的方法。 [0018] 发明详述 [0021] 通常，通过改变使用的结晶化条件可制备同样化合物的不同的多种晶形(多晶型物)。这些不同的结晶形式具有不同的三维结构和不同的理化性质。然而，多晶型物的存在天生是不可预知的，且理论计算预测多晶型物极度不可靠，预测的多晶型物实际上比实践中可分离的要多得多。 [0022] 优选地，本发明的结晶形式至少是95%纯的(根据结晶形式的纯度)，更优选地，至少是97%纯，再优选，至少98或99%纯(如以HPLC分析)。再次优选地，本发明的结晶形式至少是99.5%纯的。 [0023] 本发明包括化合物(I)游离碱的结晶形式，及其不同药学上可接受盐的结晶形式。特别是，本发明包括化合物(I)的L-酒石酸盐、柠檬酸盐、苯磺酸盐、甲磺酸盐、马来酸盐、L-苹果酸盐、富马酸盐、龙胆酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐和磷酸盐的结晶形式。 [0024] 不同的结晶形式和其特性概括于下表中。每种形式在后面更详细地讨论。 [0025] 晶型命名 结晶形式 是否溶剂化？ 开始熔融(°C) A 游离碱 否 132 B 磷酸盐(来自IPA) 水合物* 116 C 磷酸盐(来自乙醇) 水合物# 123 D L-酒石酸盐 否 147 E L-酒石酸盐 否 178 F 柠檬酸盐 否 145 G 苯磺酸盐 否 147 H 盐酸盐 水合物 85 I 盐酸盐 否 109 J 氢溴酸盐 否 119 K 氢溴酸盐 水合物 90 L 甲磺酸盐 否 121 M 马来酸盐 否 112 [0026] N 龙胆酸盐 O 龙胆酸盐 是 92 P 富马酸盐 否 135 Q L-苹果酸盐 否 83 R L-苹果酸盐 否 103 [0027] *晶型B磷酸盐(来自IPA)在67°C脱水得到在116°C熔融的无水形式 [0028] #晶型C磷酸盐(来自乙醇)在68°C脱水得到在123°C熔融的无水形式 [0029] 所选结晶形式的总结： [0030] [0031] 盐酸盐显示出数种形式，观察到四种XRPD图，在升高的RH时观察到潮解或形式改变。氢溴酸盐以两种形式存在，一种吸湿，另一种仅在升高的RH存储时观察到。甲磺酸盐在25°C/97% RH和40°C/75% RH都显示潮解。马来酸盐证明在40°C/70%RH以上为吸湿性的。L-苹果酸盐显示两种结晶形式，一种在40°C/75%RH显示潮解，第二种证明为非吸湿性的。龙胆酸盐以两种形式存在，一种为部分结晶形式，且另一种为结晶单盐，可能为乙腈溶剂合物。 [0032] 发现结晶游离碱(晶型A)是化合物(I)的非溶剂化形式，在132°C熔融，是非吸湿性的且在水中具有0.33mg/ml的水溶性。 [0033] 申请人的研究已经表明两种磷酸盐(晶型B和C)通过加热和/或减少环境湿度能脱水分别得到另外两种无水形式。脱水步骤通过冷却和/或增加湿度是可逆的。在两种磷酸盐中，发现晶型C是最稳定的水合物，显示出低吸湿性，在低于100°C时完全脱水，各个无水形式在125°C熔融，且具有高水溶性(>20mg.ml-1)。 [0034] 发现L-酒石酸盐(晶型D)是酒石酸和化合物(I)的非水合的、非溶剂化的1:1盐。其在147°C时熔融，高水溶性(>20mg.ml-1)且仅在高于70%RH时是吸湿性的。晶型D是亚稳定的且容易转化为晶型E的多晶型物。发现L-酒石酸盐(晶型E)是酒石酸和化合物(I)的非水合的、非溶剂化的1∶1盐。其在178°C时熔融，具有高水溶性(43.9mg.ml-1)且仅是轻微吸湿性的。在两种酒石酸盐中，晶型E是最稳定的形式，具有较高熔点。晶型E也是吸湿性更小的。 [0035] 发现柠檬酸盐(晶型F)是柠檬酸和化合物(I)的非水合的，非溶剂化的1∶1盐。其在145°C时熔融，然后分解，具有高水溶性(>15mg.ml-1)且仅在高于70%RH时是吸湿性的。 [0036] 发现苯磺酸盐(晶型G)是苯磺酸和化合物(I)的非水合的，非溶剂化的1∶1盐。其在147°C时熔融，具有高水溶性(>20mg.ml-1)且仅在高于75%RH时是高吸湿性的。 [0037] 结晶游离碱晶型A和L-酒石酸盐晶型E是特别优选的，因为它们是非水合的，不是高度吸湿性的且显示出有益的高熔点。 [0038] L-酒石酸盐晶型E是最优选的，因为其具有高熔点，具有良好的水溶性且仅轻微吸湿性。由于同样的理由，富马酸盐(晶型P)也是高度优选的。 [0039] 此处公开的不同形式可按如下优先顺序陈列： [0040] 1.L-酒石酸盐(晶型E)和结晶游离碱(晶型A)； [0041] 2.富马酸盐(晶型P)； [0042] 3.L-苹果酸盐(晶型R)； [0043] 4.柠檬酸盐(晶型F)、磷酸盐(晶型C)(来自乙醇)； [0044] 5.磷酸盐(晶型B)(来自IPA)； [0045] 6.苯磺酸盐(晶型G)、马来酸盐(晶型M)、甲磺酸盐(晶型L)； [0046] 7.L-苹果酸盐[晶型Q]、酒石酸盐[晶型D]； [0047] 8.盐酸盐、氢溴酸盐、龙胆酸盐(晶型H、I、J、K、N、O) [0048] 当将化合物(I)的结晶形式静置以使其暴露于大气或与水或溶剂混合时，它们可以吸收水或溶剂形成水合物或溶剂合物。本发明包括这些水合物和溶剂合物以及无水/非溶剂化形式。 [0050] 在一个优选具体实施方式中，本发明的结晶形式可由过饱和溶液得到。通过将化合物(I)溶解于适合的溶剂中、任选地调节所述溶液pH、浓缩所述溶液、冷却所述溶液、向化合物(I)在对化合物(I)易溶的溶剂中形成的溶液中加入化合物(I)微溶的溶剂可制备该过饱和溶液。 [0051] 在另一优选实施方式中，化合物(I)的晶体或无定形固体在适合溶剂中的悬浮液转化为浆液，然后搅拌转化为另一结晶形式。这称之为溶剂介导的转化。 [0053] 化合物(I)或其药学上可接受盐的结晶温度一般从约0到约100°C，优选从约5°C到约75°C。 [0054] 可通过过滤、离心或倾析方法收集沉淀的晶体。可用适合的溶剂洗涤分离的晶体。 [0056] 干燥的晶体可在约20到90%的相对湿度，约10到约30°C的温度的条件下吸收水，优选在约50到约80%的相对湿度，约20到约30°C的温度，至到晶体重量恒定。 [0057] 本发明得到的晶体可进一步通过重结晶或浆液提纯而纯化。 [0058] 重结晶可通过本领域技术人员熟知的技术完成，包括下述方法： [0059] (1)冷却法：化合物(I)，或其药学上可接受的盐，溶解于热溶剂中并将所得溶液冷却； [0060] (2)浓缩法：浓缩化合物(I)，或其药学上可接受盐的溶液； [0061] (3)沉淀法：将化合物(I)或其药学上可接受的盐微溶的溶剂加入到化合物(I)或其药学上可接受的盐在溶剂(其中化合物(I)或其药学上可接受的盐易溶)中的溶液中。 [0062] 浆液纯化一般包括搅拌化合物(I)或其药学上可接受的盐在适合溶剂中的悬浮液。 [0063] 制备化合物(I)结晶形式采用的溶剂包括ICH 2级或优选3级溶剂。例如酯类如乙酸乙酯，醇类如乙醇，酮类如甲乙酮，醚类如甲基叔丁基醚，烷烃类如庚烷，和水。这些溶剂可单独或作为混合物使用。优选的溶剂包括IMS、乙腈、四氢化萘、枯烯、3-甲基-1-丁醇、乙醇、甲醇、异丙醇、乙酸乙酯、乙酸甲酯、乙酸异丙酯、水、庚烷、TBME、THF、MEK、甲基异丁酮、nPrOH和nBuOAc。 [0064] 本发明包括上述单独的结晶形式，及其与一种或多种其它结晶形式的混合物。 [0065] 化合物(I)的结晶游离碱(晶型A) [0066] 本发明的一种优选实施方式涉及化合物(I)游离碱的结晶形式。 [0067] 优选地，所述结晶形式的特征在于X-射线粉末衍射图在选自以下2θ值具有两个或更多个衍射峰：7.53±0.2、9.60±0.2、10.22±0.2、11.29±0.2、11.66±0.2、12.26±0.2、12.62±0.2、13.17±0.2、14.06±0.2、14.85±0.2、15.15±0.2、15.57±0.2、16.99±0.2、 17.68±0.2、18.30±0.2、18.39±0.2、18.63±0.2、18.97±0.2、19.32±0.2和20.20± 0.2。更优选地，所述结晶形式的特征在于具有三个或更多个、四个或更多个、五个或更多个或六个或更多个上述提及的衍射峰。再优选地，所述结晶形式的特征在于具有至少7、8、9、 10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或更多个上述衍射峰。 [0068] 更优选地，所述结晶形式的特征在于X-射线粉末衍射图在选自以下2θ值包括两个或更多个衍射峰：7.53±0.2、12.26±0.2、14.06±0.2、14.85±0.2和15.57±0.2。更优选地，所述结晶形式的特征在于具有三个、四个或五个上述提及的衍射峰。 [0069] 在一个高度优选的实施方式中，所述结晶形式的特征在于X-射线粉末衍射图中峰的位置基本上与图5所示图的或表1所列的峰的位置一致。 [0070] 在一个优选实施方式中，所述结晶形式的特征在于以每分钟20℃的加热速率记录的差式扫描量热图显示最大吸热峰在约130℃到约140℃之间，更优选在约132℃到约138℃之间，更优选在约135℃到约138℃之间，再优选约136℃到约138℃之间。 [0071] 在一个高度优选的实施方式中，所述结晶形式的特征在于其差式扫描量热图基本上与图6所示的一致。 [0072] 在一个高度优选的实施方式中，结晶形式是单斜P21/c空间群，晶胞参数为β=95.53±2°。 [0073] 本发明的另一方面涉及化合物(I)游离碱的结晶形式的制备方法，所述方法包括自甲基叔丁基醚(MTBE)结晶游离碱形式的无定形化合物(I)。 [0074] 在一个优选实施方式中，游离碱的结晶形式由过饱和溶液得到。 [0075] 优选地，所述方法包括在MTBE中加热化合物(I)至回流，使混合物冷却到室温，过滤形成的固体，用MTBE洗涤固体并在真空下干燥。更优选地，回流后，反应混合物保持在回流温度(如45-50℃)之下1到3小时，然后冷却到室温。 [0076] 本发明的另一方面涉及通过上述方法可得到或得到的产物。 [0077] 晶体柠檬酸盐(晶型F) [0078] 在本发明的一个优选实施方式中，所述结晶形式是化合物(I)的柠檬酸盐。 [0079] 优选地，所述结晶形式的特征在于X-射线粉末衍射图在选自以下2θ值具有两个或更多个衍射峰：5.14±0.2、7.73±0.2、10.24±0.2、12.70±0.2、13.06±0.2、14.42±0.2、15.30±0.2、15.98±0.2、16.74±0.2、17.24±0.2、18.05±0.2、19.04±0.2、20.23±0.2、 21.04±0.2、22.45±0.2、22.75±0.2、24.01±0.2、25.43±0.2、26.51±0.2、27.48±0.2、 28.77±0.2和29.71±0.2[晶型F]。更优选地，所述结晶形式的特征在于具有三个或更多个、四个或更多个、五个或更多个或六个或更多个上述提及的衍射峰。再优选地，所述结晶形式的特征在于具有至少7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21或更多个上述衍射峰。 [0080] 更优选地，所述结晶形式的特征在于X-射线粉末衍射图在选自以下2θ值包括两个或更多个衍射峰：17.24±0.2,18.05±0.2,19.04±0.2,22.45±0.2,22.75±0.2,24.01±0.2和25.43±0.2[晶型F]。更优选地，所述结晶形式的特征在于具有三个、四个或五个上述提及的衍射峰。再优选地，所述结晶形式的特征在于具有6或7个上述提及的衍射峰。 [0081] 在一个高度优选的实施方式中，所述结晶形式的特征在于X-射线粉末衍射图中峰的位置基本上与图7所示图的或表3所列的峰的位置一致。 [0082] 在一个优选实施方式中，所述结晶形式的特征在于以每分钟20℃的加热速率记录的差式扫描量热图显示最大吸热峰在约145℃到约155℃和约165℃到约200℃之间。更优选，所述结晶形式的特征在于第一最大吸热峰在约146℃到约152℃之间，更优选在约147℃到约151℃之间，更宽的第二最大吸热峰在约170℃到约195℃之间，更优选在约175℃到约190℃之间。 [0083] 在一个高度优选的实施方式中，所述结晶形式的特征在于其差式扫描量热图基本上与图8一致。 [0084] 在一个优选实施方式中，化合物(I)柠檬酸盐的结晶形式由过饱和溶液得到。 [0085] 在一个优选实施方式中，本发明涉及化合物(I)柠檬酸盐的结晶形式的制备方法，所述方法包括自乙酸乙酯结晶柠檬酸盐。 [0086] 更优选地，本发明涉及化合物(I)柠檬酸盐结晶形式的制备方法，所述方法包括下述步骤： [0087] (i)制备包括游离碱形式的化合物(I)、柠檬酸和乙酸乙酯的反应混合物；和[0088] (ii)由反应混合物分离柠檬酸盐结晶形式。 [0089] 优选地，所述方法包括在环境温度下搅拌化合物(I)和柠檬酸在乙酸乙酯中的混合物，将混合物进行加热/冷却循环(60°C/RT,4小时)至少24小时，更优选48小时，再优选72小时，过滤形成的固体，用乙酸乙酯洗涤固体并在真空下干燥。更优选地，混合物在加热/冷却循环期间储存在振荡器中。 [0090] 本发明的另一方面涉及通过上述方法可得到或得到的产物。 [0091] 结晶磷酸盐(晶型B和C) [0092] 在本发明的一个优选实施方式中，所述结晶形式是磷酸盐。 [0093] 申请人的研究已经显示结晶磷酸盐以至少两种不同的形式存在，取决于结晶时使用的溶剂。依次地，该两种不同形式的每种以水合和无水形式存在，由此产生至少四种不同的结晶形式。在环境温度和湿度下，两种形式命名为晶型B和C。 [0094] 在一个优选实施方式中，磷酸盐由丙-2-醇结晶(晶型B)。 [0095] 在另一优选实施方式中，磷酸盐由乙醇结晶(晶型C)。 [0096] 结晶磷酸盐-丙-2-醇制备(晶型B) [0097] 在一优选实施方式中，所述结晶形式的特征在于X-射线粉末衍射图在选自以下2θ值具有两个或更多个衍射峰：6.46±0.2、8.88±0.2、9.67±0.2、10.47±0.2、12.78±0.2、15.33±0.2、16.12±0.2、16.82±0.2、18.13±0.2、19.38±0.2、19.95±0.2、20.97±0.2、 24.11±0.2、24.83±0.2、26.54±0.2和28.11±0.2[晶型B]。更优选地，所述结晶形式的特征在于具有三个或更多个、四个或更多个、五个或更多个或六个或更多个上述提及的衍射峰。再优选地，所述结晶形式的特征在于具有至少7、8、9、10、11、12、13、14、15或更多个上述衍射峰。 [0098] 更优选地，所述结晶形式的特征在于X-射线粉末衍射图在选自以下2θ值包括两个或更多个衍射峰：6.46±0.2、16.12±0.2、18.13±0.2、19.38±0.2、19.95±0.2、20.97±0.2、24.11±0.2B和24.83±0.2[晶型B]。更优选地，所述结晶形式的特征在于具有三个、四个或五个上述提及的衍射峰。更优选地，所述结晶形式的特征在于具有6、7或8个上述提及的衍射峰。 [0099] 在一个高度优选的实施方式中，所述结晶形式的特征在于X-射线粉末衍射图中峰的位置基本上与图11所示图的或表6所列的峰的位置一致。 [0100] 在一个优选实施方式中，所述结晶形式的特征在于以每分钟20℃的加热速率记录的差式扫描量热图显示最大吸热峰在约65℃到约90℃和约114℃到约130℃之间。优选地，结晶形式的特征在于第一最大吸热峰在约70℃到约88℃之间，更优选在约75℃到约85℃之间。优选地，结晶形式的特征在于第二最大吸热峰在约118℃到约125℃之间，更优选约120℃到约125℃之间。 [0101] 在一个高度优选的实施方式中，所述结晶形式的特征在于其差式扫描量热图基本上与图12一致。 [0102] 本发明包括无水和水合形式的晶体磷酸盐。 [0103] 在一个优选实施方式中，化合物(I)的磷酸盐结晶形式通过沉淀得到。 [0104] 在一个优选实施方式中，本发明涉及化合物(I)磷酸盐结晶形式的制备方法，所述方法包括自丙-2醇溶液结晶磷酸盐。 [0105] 更优选地，本发明涉及化合物(I)磷酸盐结晶形式的制备方法，所述方法包括下述步骤： [0106] (i)制备包括游离碱形式的化合物(I)、丙-2-醇和磷酸水溶液的反应混合物；和[0107] (ii)由反应混合物分离晶体磷酸盐。 [0108] 优选地，所述方法包括室温下将磷酸水溶液加入到冰水浴中的化合物(I)在丙-2-醇的搅拌溶液中。更优选地，所述方法包括另外在混合物中加入丙-2-醇，并搅拌至少1小时，然后过滤形成的固体，用丙-2-醇洗涤固体并在真空下干燥。优选地，固体通过真空过滤分离。 [0109] 优选地，磷酸水溶液是85%的溶液(w/w)。 [0110] 本发明的另一方面涉及通过上述方法可得到或得到的产物。 [0111] 结晶磷酸盐-乙醇制备(晶型C) [0112] 在另一优选实施方式中，所述结晶形式的特征在于X-射线粉末衍射图在选自以下2θ值具有两个或更多个衍射峰：6.49±0.2、8.91±0.2、9.75±0.2、10.52±0.2、13.03± 0.2、15.44±0.2、16.27±0.2、17.85±0.2、18.29±0.2、19.52±0.2、20.02±0.2、21.11± 0.2、22.80±0.2、24.92±0.2、28.33±0.2和29.41±0.2[晶型C]。更优选地，所述结晶形式的特征在于具有三个或更多个、四个或更多个、五个或更多个或六个或更多个上述提及的衍射峰。更优选地，所述结晶形式的特征在于具有至少7、8、9、10、11、12、13、14、15或更多个上述衍射峰。 [0113] 优选地，所述结晶形式的特征在于X-射线粉末衍射图在选自以下2θ值包括两个或更多个衍射峰：6.49±0.2、16.27±0.2、18.29±0.2、19.52±0.2、20.02±0.2、21.11±0.2、22.80±0.2、24.92±0.2和29.41±0.2[晶型C]。更优选地，所述结晶形式的特征在于具有三个、四个或五个上述提及的衍射峰。更优选地，所述结晶形式的特征在于具有6、7、8或9个上述提及的衍射峰。 [0114] 在一个高度优选的实施方式中，所述结晶形式的特征在于X-射线粉末衍射图中峰的位置基本上与图13所示图的或表5所列的峰的位置一致。 [0115] 在一个高度优选实施方式中，所述结晶形式的特征在于以每分钟20℃的加热速率记录的差式扫描量热图显示最大吸热峰在约66℃到约90℃以及约120℃到约135℃之间。优选地，结晶形式的特征在于第一最大吸热峰在约70℃到约88℃之间，更优选在约80℃到约87℃之间。优选地，结晶形式的特征在于第二最大吸热峰在约125℃到约135℃之间，更优选约130℃到约135℃之间。 [0116] 在一个高度优选的实施方式中，所述结晶形式的特征在于其差式扫描量热图基本上与图14一致。 [0117] 本发明包括无水和水合形式的晶体磷酸盐。 [0118] 在一个优选实施方式中，化合物(I)的磷酸盐结晶形式通过沉淀得到。 [0119] 在一个优选实施方式中，本发明涉及化合物(I)磷酸盐结晶形式的制备方法，所述方法包括由乙醇结晶磷酸盐。 [0120] 更优选地，本发明涉及化合物(I)磷酸盐结晶形式的制备方法，所述方法包括下述步骤： [0121] (i)制备包括游离碱形式的化合物(I)、乙醇和磷酸水溶液的反应混合物；和[0122] (ii)由该反应混合物分离结晶磷酸盐。 [0123] 优选地，所述方法包括室温下将磷酸水溶液加入到冰水浴中的化合物(I)在乙醇中的搅拌溶液中。更优选地，所述方法包括在室温下进一步搅拌混合物至少2小时，然后过滤形成的固体，用乙醇洗涤固体并在真空下干燥。优选地，固体通过真空过滤分离。优选地，所述固体在真空烘箱中干燥，在至少40℃的温度保持至少12，更优选24小时。 [0124] 优选地，磷酸水溶液是85%的溶液(w/w)。 [0125] 本发明的另一方面涉及通过上述方法可得到或得到的产物。 [0126] 结晶L-酒石酸盐 [0127] 在本发明的一个优选实施方式中，结晶形式是酒石酸盐，更优选是L-酒石酸盐。申请人的研究已经显示酒石酸盐存在至少两种不同的形式，此处命名为晶型D和晶型E。 [0128] L-酒石酸盐(晶型D) [0129] 在一优选实施方式中，所述结晶形式的特征在于X-射线粉末衍射图在选自以下2θ值具有两个或更多个衍射峰：3.82±0.2、7.57±0.2、8.12±0.2、10.53±0.2、11.39±0.2、12.00±0.2、13.54±0.2、15.15±0.2、16.35±0.2、16.88±0.2、17.37±0.2、18.51±0.2、 18.98±0.2、19.77±0.2、21.06±0.2、22.70±0.2、23.47±0.2、24.66±0.2和28.73±0.2[晶型D]。更优选地，所述结晶形式的特征在于具有三个或更多个、四个或更多个、五个或更多个或六个或更多个上述提及的衍射峰。再优选地，所述结晶形式的特征在于具有至少7、 8、9、10、11、12、13、14、15、16、17或18或更多个上述衍射峰。 [0130] 优选地，所述结晶形式的特征在于X-射线粉末衍射图在选自以下2θ值包括两个或更多个衍射峰：3.82±0.2、7.57±0.2、15.15±0.2、16.88±0.2、19.77±0.2、22.70±0.2、23.47±0.2、24.66±0.2和28.73±0.2[晶型D]。更优选地，所述结晶形式的特征在于具有三个、四个或五个上述提及的衍射峰。更优选地，所述结晶形式的特征在于具有6、7、8或9上述提及的衍射峰。 [0131] 在一个高度优选的实施方式中，所述结晶形式的特征在于X-射线粉末衍射图中峰的位置基本上与图3所示图的或表2所列的峰的位置一致。 [0132] 在一个优选实施方式中，所述结晶形式的特征在于以每分钟20℃的加热速率记录的差式扫描量热图显示最大吸热峰在约145℃到约154℃之间，更优选约148℃到约153℃之间，再优选150℃到约152℃之间。 [0133] 在一个高度优选的实施方式中，所述结晶形式的特征在于其差式扫描量热图基本上与图4一致。 [0134] 在一个优选实施方式中，化合物(I)的酒石酸盐结晶形式通过沉淀得到。 [0135] 在一个优选实施方式中，本发明涉及化合物(I)L-酒石酸盐结晶形式的制备方法，所述方法包括自乙酸乙酯溶液结晶L-酒石酸盐。 [0136] 更优选地，本发明涉及化合物(I)的L-酒石酸盐结晶形式的制备方法，所述方法包括下述步骤： [0137] (i)制备包括游离碱形式的化合物(I)、L-酒石酸和乙酸乙酯的反应混合物；和[0138] (ii)由反应混合物分离结晶L-酒石酸盐(晶型D)。 [0139] 优选地，所述方法包括在环境条件下搅拌L-酒石酸、化合物(I)和乙酸乙酯的混合物至少1小时，更优选至少2小时，并且分离形成的沉淀，用乙酸乙酯洗涤并在真空烘箱中干燥。优选地，沉淀通过真空过滤分离。优选地，所述沉淀在至少40℃的温度干燥至少12小时，更优选24小时。 [0140] 本发明的另一方面涉及通过上述方法可得到或得到的产物。 [0141] L-酒石酸盐(晶型E) [0142] 在一优选实施方式中，所述结晶形式的特征在于X-射线粉末衍射图在选自以下2θ值具有两个或更多个衍射峰：6.67±0.2、8.237±0.2、9.777±0.2、11.96±0.2、12.38±0.2、13.06±0.2、13.38±0.2、13.94±0.2、14.90±0.2、15.40±0.2、15.95±0.2、16.27± 0.2、16.54±0.2、17.36±0.2、17.57±0.2、17.86±0.2、19.64±0.2、19.86±0.2、20.12± 0.2、20.73±0.2、21.14±0.2、21.58±0.2、22.57±0.2、22.95±0.2、23.29±0.2、23.57± 0.2、24.07±0.2、24.63±0.2、25.30±0.2、26.38±0.2、27.09±0.2、27.67±0.2、27.97± 0.2、28.91±0.2、29.28±0.2、30.08±0.2、30.41±0.2、31.90±0.2和34.49±0.2[晶型E]。更优选地，所述结晶形式的特征在于具有三个或更多个、四个或更多个、五个或更多个或六个或更多个上述提及的衍射峰。再优选地，所述结晶形式的特征在于具有至少7、8、9、 10......38或更多个上述衍射峰。 [0143] 优选地，所述结晶形式的特征在于X-射线粉末衍射图在选自以下2θ值包括两个或更多个衍射峰：6.67±0.2、13.06±0.2、13.38±0.2、14.90±0.2、17.36±0.2、17.57±0.2、19.64±0.2、20.73±0.2、23.57±0.2和25.30±0.2[晶型E]。更优选地，所述结晶形式的特征在于具有三个、四个或五个上述提及的衍射峰。更优选地，所述结晶形式的特征在于具有6、7、8、9或10个上述提及的衍射峰。 [0144] 在一个高度优选的实施方式中，所述结晶形式的特征在于X-射线粉末衍射图中峰的位置基本上与图1所示图的或表7所列的峰的位置一致。 [0145] 在一个高度优选实施方式中，所述结晶形式的特征在于以每分钟20℃的加热速率记录的差式扫描量热图显示最大吸热峰在约176℃到约185℃之间，更优选约178℃到约184℃之间，再优选约180℃到约183℃之间。 [0146] 在一个高度优选的实施方式中，所述结晶形式的特征在于其差式扫描量热图基本上与图2一致。 [0147] 在一个优选实施方式中，晶型E的L-酒石酸盐通过由乙醇和乙腈的混合物重结晶化合物(I)的晶型D的L-酒石酸盐得到。 [0148] 在一个优选实施方式中，本发明涉及结晶形式的化合物(I)的L-酒石酸盐(晶型E)的制备方法，所述方法包括由由乙醇和乙腈的混合物结晶L-酒石酸盐(晶型D)。优选地，L-酒石酸盐(晶型E)由乙醇和乙腈的混合物重结晶。 [0149] 因此，本发明一方面涉及化合物(I)晶型E的L-酒石酸盐结晶形式的制备方法，所述方法包括下述步骤： [0150] (i)制备包括游离碱形式的化合物(I)、L-酒石酸和乙酸乙酯的反应混合物； [0151] (ii)由该反应混合物分离结晶L-酒石酸盐(晶型D)； [0152] (iii)由乙醇和乙腈的混合物重结晶步骤(ii)中得到的结晶L-酒石酸盐(晶型D)；和 [0153] (iv)由反应混合物分离结晶L-酒石酸盐(晶型E)； [0154] 优选地，步骤(iii)包括形成步骤(ii)中所得结晶L-酒石酸盐(晶型D)在乙醇中的悬浮液并加热至至少60℃，向混合物中加入乙腈并加热混合物至回流形成溶液。优选地，热过滤溶液并冷却至室温，更优选以约5-10℃/小时的速率。优选地，所得悬浮液接着在室温搅拌至少12小时，然后过滤固体，用乙醇洗涤并干燥。优选地，在真空烘箱中在至少50℃的温度干燥固体至少12小时，更优选24小时。这种方法在下文中称为“未加晶种的”方法。 [0155] 优选地，乙醇与乙腈的比例约3:1到约10:1。更优选地，乙醇与乙腈的比例为4:1或6:1。再优选地，乙醇与乙腈的比例为4:1、5:1或6:1。 [0156] 在另一实施方式种，由化合物(I)晶型D的L-酒石酸盐和化合物(I)晶型E的L-酒石酸盐的混合物进行浆液转化制备晶型E的L-酒石酸盐。 [0157] 因此，本发明的另一方面涉及化合物(I)晶型E的L-酒石酸盐结晶形式的制备方法，所述方法包括下述步骤： [0158] (i)通过上述方法制备结晶L-酒石酸盐(晶型D)； [0159] (ii)通过上述方法制备结晶L-酒石酸盐(晶型E)； [0160] (iii)在选自乙酸乙酯、丙-2-醇、IMS和乙腈的溶剂中形成L-酒石酸盐(晶型D)和L-酒石酸盐(晶型E)的浆液；和 [0161] (iv)从浆液中分离结晶L-酒石酸盐(晶型E)。 [0162] 在一个优选实施方式中，步骤(iii)的浆液是50-99重量%的L-酒石酸盐(晶型D)和1-50重量%的L-酒石酸盐(晶型E)的混合物。更优选地，步骤(iii)中的浆液是L-酒石酸盐(晶型D)和L-酒石酸盐(晶型E)的50:50的混合物。 [0163] 优选地，加热浆液到至少40℃的温度，更优选至少45℃，保持至少24小时，更优选至少48小时，然后过滤分离固体，洗涤并真空干燥。 [0164] 在一个优选实施方式中，用乙醇和乙腈混合物，利用一种或多种晶型E的L-酒石酸盐的晶种通过重结晶晶型D的L-酒石酸盐得到晶型E的L-酒石酸盐。 [0165] 因此，一方面涉及制备晶型E的L-酒石酸盐的方法，其包括用乙醇和乙腈混合物重结晶晶型D的L-酒石酸盐，优选利用一种或多种晶型E的L-酒石酸盐的晶种。 [0166] 因此更优选地，本发明涉及化合物(I)晶型E的L-酒石酸盐结晶形式的制备方法，所述方法包括下述步骤： [0167] (i)通过上述方法制备结晶L-酒石酸盐(晶型D)； [0168] (ii)通过上述方法制备结晶L-酒石酸盐(晶型E)； [0169] (iii)将步骤(i)得到的结晶L-酒石酸盐(晶型D)溶于乙醇和乙腈混合物，并利用结晶L-酒石酸盐(晶型E)种晶；和 [0170] (iv)从反应混合物中分离结晶L-酒石酸盐(晶型E)。 [0171] 这种方法在下文中称作“种晶”方法。这方面优选的实施方式与上述“未加晶种的”方法的那些是相同的。 [0172] 本发明另一方面涉及化合物(I)晶型E的L-酒石酸盐结晶形式的制备方法，所述方法包括下述步骤： [0173] (i)通过上述方法制备结晶L-酒石酸盐(晶型E)； [0174] (ii)制备包括游离碱形式的化合物(I)、L-酒石酸和乙酸乙酯的反应混合物； [0175] (iii)利用结晶L-酒石酸盐(晶型E)向步骤(ii)中所得混合物种晶；和 [0176] (iv)从反应混合物中分离结晶L-酒石酸盐(晶型E)。 [0177] 因此，一方面涉及制备晶型E的L-酒石酸盐的方法，其包括用乙酸乙酯的溶液结晶晶型E的L-酒石酸盐，优选利用一种或多种晶型E的L-酒石酸盐晶体种晶。 [0178] 在一优选的实施方式中，晶型E的L-酒石酸盐由游离碱形式的化合物(I)制备。优选地，利用酒石酸在水/乙醇中的溶液处理游离碱形式的化合物(I)，并利用此处公开的任意一种方法得到的晶型E的L-酒石酸盐晶体向所得混合物中种晶，获得晶型E的L-酒石酸盐。 [0179] 因此，本发明的一个特别优选实施方式涉及化合物(I)晶型E的L-酒石酸盐结晶形式的制备方法，所述方法包括下述步骤： [0180] (i)制备包括在乙醇中的游离碱化合物(I)的反应混合物； [0181] (ii)向步骤(i)中所得反应混合物添加酒石酸在水/乙醇中的溶液； [0182] (iii)过滤步骤(ii)中形成的反应混合物； [0183] (iv)根据上述方法之一，利用结晶L-酒石酸盐(晶型E)向滤液中种晶；和 [0184] (v)从反应混合物中分离结晶L-酒石酸盐(晶型E)。 [0185] 优选地，对于该实施方式，将步骤(i)中形成的反应混合物在回流加热。优选地，加入酒石酸在水/乙醇中溶液的同时，维持回流温度。优选地，步骤(ii)包括精密过滤(polish filtering)反应混合物，然后冷却至约70℃。优选地，在加入晶种后，在至少70℃的温度搅拌混合物至少1小时，然后冷却至室温。优选地，混合物接着搅拌至少1小时，更优选至少2小时，然后过滤。优选地，利用乙醇洗涤过滤步骤中所得的产物并干燥。 [0186] 本发明的另一方面涉及通过上述方法可得到或得到的产物。 [0187] 结晶苯磺酸盐(晶型G) [0188] 在本发明的一个优选实施方式中，结晶形式是苯磺酸盐。 [0189] 优选地，所述结晶形式的特征在于X-射线粉末衍射图在选自以下2θ值具有两个或更多个衍射峰：5.72±0.2、11.45±0.2、11.79±0.2、15.56±0.2、16.57±0.2、18.04±0.2、19.14±0.2、20.02±0.2、21.05±0.2、22.80±0.2、23.16±0.2、24.44±0.2、25.40± 0.2和28.74±0.2[晶型G]。更优选地，所述结晶形式的特征在于具有三个或更多个、四个或更多个、五个或更多个或六个或更多个上述提及的衍射峰。更优选地，所述结晶形式的特征在于具有7、8、9、10、11、12、13或更多个上述衍射峰。 [0190] 更优选地，所述结晶形式的特征在于X-射线粉末衍射图在选自以下2θ值包括两个或更多个衍射峰：15.56±0.2、16.57±0.2、18.04±0.2、20.02±0.2、21.05±0.2、22.80±0.2、23.16±0.2和24.44±0.2[晶型G]。更优选地，所述结晶形式的特征在于具有三个、四个或五个上述提及的衍射峰。更优选地，所述结晶形式的特征在于具有6、7、8、9、10、11、12、 13或14个上述提及的衍射峰。 [0191] 在一个高度优选的实施方式中，所述结晶形式的特征在于X-射线粉末衍射图中峰的位置基本上与图9所示图的或表4所列的峰的位置一致。 [0192] 在一个优选实施方式中，所述结晶形式的特征在于以每分钟20℃的加热速率记录的差式扫描量热图显示最大吸热峰在约145℃到约155℃之间，更优选约146℃到约154℃之间，再优选约147℃到约154℃之间。 [0193] 在一个高度优选的实施方式中，所述结晶形式的特征在于其差式扫描量热图基本上与图10一致。 [0194] 在一个优选实施方式中，化合物(I)的苯磺酸盐结晶形式通过过饱和溶液得到。 [0195] 在一个优选实施方式中，本发明涉及化合物(I)苯磺酸盐结晶形式的制备方法，所述方法包括自甲基叔丁基醚(MTBE)溶液结晶苯磺酸盐。 [0196] 更优选地，本发明涉及化合物(I)苯磺酸盐结晶形式的制备方法，所述方法包括下述步骤： [0197] (i)制备包括游离碱形式的化合物(I)、苯磺酸和甲基叔丁基醚(MTBE)的反应混合物；和 [0198] (ii)由反应混合物分离结晶苯磺酸盐。 [0199] 优选地，所述方法包括在环境条件下搅拌化合物(I)和苯磺酸在MTBE中的的混合物至少24小时。优选地，混合物接着进行热/冷循环(60℃/RT，4小时)至少24小时，更优选48小时，再优选72小时，过滤形成的固体，用MTBE洗涤固体并在真空中干燥。更优选地，在热/冷循环过程中，混合物储存于振荡器中。 [0200] 本发明的另一方面涉及通过上述方法可得到或得到的产物。 [0201] 结晶盐酸盐(晶型H) [0202] 在本发明的一个优选实施方式中，化合物(I)的结晶形式是盐酸盐。 [0203] 优选地，所述结晶形式的特征在于X-射线粉末衍射图在选自以下2θ值具有两个或更多个衍射峰：5.6±0.2、8.6±0.2、9.5±0.2、10.9±0.2、11.2±0.2、12.7±0.2、13.0±0.2、14.3±0.2、16.0±0.2、17.3±0.2、17.7±0.2、18.8±0.2、19.1±0.2、20.3±0.2、 20.7±0.2、22.9±0.2、23.6±0.2、24.5±0.2、25.0±0.2、25.5±0.2、25.8±0.2、26.4± 0.2和29.1±0.2[晶型H]。更优选地，所述结晶形式的特征在于具有1、2、3、4......22或23个上述衍射峰。 [0204] 优选地，所述结晶形式的特征在于X-射线粉末衍射图中峰的位置基本上与图19所示图的或表8所列的峰的位置一致。 [0205] 优选地，所述结晶形式的特征在于以每分钟20℃的加热速率记录的差式扫描量热图显示吸热峰在约51℃、约84℃、约97℃和约144℃的温度发生。 [0206] 在一个优选实施方式中，本发明涉及化合物(I)盐酸盐(晶型H)结晶形式的制备方法，所述方法包括自甲基叔丁基醚(MTBE)结晶盐酸盐(晶型H)。 [0207] 本发明另一方面涉及化合物(I)盐酸盐结晶形式的制备方法，所述方法包括下述步骤： [0208] (i)制备包括游离碱形式的化合物(I)、盐酸和甲基叔丁基醚(MTBE)的反应混合物；和 [0209] (ii)由反应混合物分离结晶盐酸盐。 [0210] 优选地，所述方法包括在环境温度下搅拌化合物(I)和盐酸在MTBE中的混合物。优选地，混合物接着进行热/冷循环(40℃/RT，4小时)至少24小时，更优选48小时，再优选72小时，过滤形成的固体，用MTBE洗涤固体并在真空中干燥。更优选地，在热/冷循环过程中，混合物储存于振荡器中。 [0211] 本发明的另一方面涉及通过上述方法可得到或得到的产物。 [0212] 结晶盐酸盐(晶型I) [0213] 在另一优选实施方式中，所述结晶形式的特征在于X-射线粉末衍射图在选自以下2θ值具有两个或更多个衍射峰：4.9±0.2、6.4±0.2、7.5±0.2、12.1±0.2、14.4±0.2、 19.8±0.2、21.5±0.2、23.4±0.2和25.7±0.2[晶型I]。更优选地，所述结晶形式的特征在于具有1、2、3、4、5、6、7、8或9个上述衍射峰。 [0214] 优选地，所述结晶形式的特征在于X-射线粉末衍射图中峰的位置基本上与图20所示图的或表9所列的峰的位置一致。 [0215] 优选地，所述结晶形式的特征在于以每分钟20℃的加热速率记录的差式扫描量热图显示吸热峰在约98℃和约130℃的温度发生。 [0216] 在一个优选实施方式中，本发明涉及化合物(I)盐酸盐(晶型I)结晶形式的制备方法，所述方法包括自乙酸乙酯结晶盐酸盐(晶型I)。 [0217] 本发明另一方面涉及化合物(I)盐酸盐结晶形式的制备方法，所述方法包括下述步骤： [0218] (i)制备包括游离碱形式的化合物(I)、盐酸和乙酸乙酯的反应混合物；和[0219] (ii)由反应混合物分离结晶盐酸盐。 [0220] 优选地，所述方法包括在环境温度下搅拌化合物(I)和盐酸在乙酸乙酯中的混合物。优选地，混合物接着进行热/冷循环(40℃/RT，4小时)至少24小时，更优选48小时，再优选72小时。优选地，过滤形成的固体，用乙酸乙酯洗涤并在真空中干燥。更优选地，在热/冷循环过程中，混合物储存于振荡器中。 [0221] 本发明的另一方面涉及通过上述方法可得到或得到的产物。 [0222] 结晶氢溴酸盐(晶型J) [0223] 在本发明的一个优选实施方式中，化合物(I)的结晶形式是氢溴酸盐。 [0224] 优选地，所述结晶形式的特征在于X-射线粉末衍射图在选自以下2θ值具有两个或更多个衍射峰：6.4±0.2、7.2±0.2、12.0±0.2、14.4±0.2、17.1±0.2、19.6±0.2、21.4±0.2和25.5±0.2[晶型J]。更优选地，所述结晶形式的特征在于具有1、2、3、4、5、6、7或8个上述衍射峰。 [0225] 优选地，所述结晶形式的特征在于X-射线粉末衍射图中峰的位置基本上与图21所示图的或表10所列的峰的位置一致。 [0226] 优选地，所述结晶形式的特征在于以每分钟20℃的加热速率记录的差式扫描量热图显示最大吸热峰在约138℃的温度发生。 [0227] 在一个优选实施方式中，本发明涉及化合物(I)氢溴酸盐(晶型J)结晶形式的制备方法，所述方法包括自乙酸乙酯结晶氢溴酸盐(晶型J)。 [0228] 本发明另一方面涉及化合物(I)氢溴酸盐结晶形式的制备方法，所述方法包括下述步骤： [0229] (i)制备包括游离碱形式的化合物(I)、氢溴酸和乙酸乙酯的反应混合物；和[0230] (ii)由反应混合物分离晶体氢溴酸盐。 [0231] 优选地，所述方法包括在环境温度下搅拌化合物(I)和氢溴酸在乙酸乙酯中的混合物。优选地，混合物接着进行热/冷循环(40℃/RT，4小时)至少24小时，更优选48小时，再优选72小时。优选地，过滤形成的固体，用乙酸乙酯洗涤并在真空中干燥。更优选地，在热/冷循环过程中，混合物储存于振荡器中。 [0232] 本发明的另一方面涉及通过上述方法可得到或得到的产物。 [0233] 结晶氢溴酸盐(晶型K) [0234] 在一个优选实施方式中，所述化合物(I)的结晶形式的特征在于以每分钟20℃的加热速率记录的差式扫描量热图显示最大吸热峰在约51℃和90℃的温度。 [0235] 优选地，所述结晶形式的特征在于X-射线粉末衍射图在选自以下2θ值具有两个或更多个衍射峰：5.7±0.2、16.4±0.2、17.7±0.2、18.4±0.2、19.6±0.2、20.5±0.2、24.1±0.2、25.3±0.2、26.0±0.2和28.1±0.2[晶型K]。更优选地，所述结晶形式的特征在于具有1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个上述衍射峰。 [0236] 优选地，所述结晶形式的特征在于X-射线粉末衍射图中峰的位置基本上与图28所示图的或表17所列的峰的位置一致。 [0237] 在一个优选实施方式中，所述结晶形式的特征在于DSC/TGA图基本上与图29一致。 [0238] 本发明的另一方面涉及化合物(I)氢溴酸盐(晶型K)结晶形式的制备方法，其包括将晶型J的氢溴酸盐在至少40℃的温度和至少75%的相对湿度条件下保持7天。 [0239] 更优选地，本发明涉及化合物(I)氢溴酸盐(晶型K)结晶形式的制备方法，所述方法包括下述步骤： [0240] (i)制备包括游离碱形式的化合物(I)、氢溴酸和乙酸乙酯的反应混合物； [0241] (ii)由反应混合物分离晶体氢溴酸盐(晶型J)； [0242] (iii)在40℃/75%RH储存步骤(ii)的结晶氢溴酸盐(晶型J)以形成结晶氢溴酸盐(晶型K)。 [0243] 优选地，步骤(iii)包括储存晶体氢溴酸盐(晶型J)至所需时间，更优选至少24小时，更优选48小时，再优选72小时，再优选至少7天。接着过滤晶体产物、洗涤并在真空中干燥。 [0244] 本发明的另一方面涉及通过上述方法可得到或得到的产物。 [0245] 结晶甲磺酸盐(晶型L) [0246] 在本发明的一个优选实施方式中，化合物(I)的结晶形式是甲磺酸盐。 [0247] 优选地，所述结晶形式的特征在于X-射线粉末衍射图在选自以下2θ值具有两个或更多个衍射峰：6.3±0.2、7.9±0.2、12.5±0.2、13.4±0.2、14.6±0.2、15.9±0.2、16.5±0.2、17.5±0.2、18.1±0.2、18.7±0.2、19.3±0.2、20.0±0.2、20.6±0.2、20.9±0.2、 21.7±0.2、22.6±0.2、23.8±0.2、24.5±0.2、25.1±0.2、25.5±0.2、26.1±0.2、27.5± 0.2、29.1±0.2、29.7±0.2和30.3±0.2[晶型L]。更优选地，所述结晶形式的特征在于具有 1、2、3、4、5......25个上述衍射峰。 [0248] 优选地，所述结晶形式的特征在于X-射线粉末衍射图中峰的位置基本上与图22所示图的或表11所列的峰的位置一致。 [0249] 优选地，所述结晶形式的特征在于以每分钟20℃的加热速率记录的差式扫描量热图显示最大吸热峰在约126℃的温度发生。 [0250] 在一个优选实施方式中，所述结晶形式的特征在于DSC/TGA图基本上与图30一致。 [0251] 在一个优选实施方式中，本发明涉及化合物(I)甲磺酸盐结晶形式的制备方法，所述方法包括自TBME结晶甲磺酸盐。 [0252] 更优选地，本发明涉及化合物(I)甲磺酸盐结晶形式的制备方法，所述方法包括下述步骤： [0253] (i)制备包括游离碱形式的化合物(I)、甲磺酸和TBME的反应混合物；和 [0254] (ii)由反应混合物分离结晶甲磺酸盐。 [0255] 优选地，所述方法包括在环境温度下搅拌化合物(I)和甲磺酸在TBME中的混合物至少12小时，更优选至少16小时，或至少24小时。优选地，混合物接着加热至至少40℃并搅拌至少1小时，然后冷却到室温并搅拌至少12小时。优选地，向混合物中加入THF，并继续搅拌至少2小时。优选地，混合物进行热/冷循环(40℃/RT，4小时)至少24小时，更优选48小时，再优选72小时。优选地，向混合物中加入TBME，过滤所得固体，用TBME洗涤并在真空中干燥。更优选地，在热/冷循环过程中，混合物储存于振荡器中。 [0256] 本发明的另一方面涉及通过上述方法可得到或得到的产物。 [0257] 结晶马来酸盐(晶型M) [0258] 在一个优选实施方式中，化合物(I)的结晶形式是马来酸盐。 [0259] 优选地，所述结晶形式的特征在于X-射线粉末衍射图在选自以下2θ值具有两个或更多个衍射峰：3.8±0.2、7.6±0.2、8.5±0.2、10.8±0.2、11.4±0.2、12.2±0.2、15.2±0.2、15.8±0.2、17.0±0.2、18.0±0.2、18.8±0.2、19.4±0.2、20.3±0.2、21.6±0.2、 22.6±0.2、23.6±0.2、24.3±0.2、24.8±0.2、26.0±0.2、27.2±0.2、27.9±0.2、28.2± 0.2、28.8±0.2、29.9±0.2、30.2±0.2、31.7±0.2、32.7±0.2和33.2±0.2[晶型M]。更优选地，所述结晶形式的特征在于具有1、2、3、4、5、6......或28个上述衍射峰。 [0260] 优选地，所述结晶形式的特征在于X-射线粉末衍射图中峰的位置基本上与图23所示图的或表12所列的峰的位置一致。 [0261] 优选地，所述结晶形式的特征在于以每分钟20℃的加热速率记录的差式扫描量热图显示最大吸热峰在约116℃的温度发生。 [0262] 在一个优选实施方式中，所述结晶形式的特征在于DSC/TGA图基本上与图31一致。 [0263] 在一个优选实施方式中，本发明涉及化合物(I)马来酸盐结晶形式的制备方法，所述方法包括自TBME结晶马来酸盐。 [0264] 更优选地，本发明涉及化合物(I)马来酸盐结晶形式的制备方法，所述方法包括下述步骤： [0265] (i)制备包括游离碱形式的化合物(I)、马来酸和TBME的混合物；和 [0266] (ii)由反应混合物分离结晶马来酸盐。 [0267] 优选地，所述方法包括在环境温度下搅拌化合物(I)和马来酸在TBME中的混合物至少12小时，更优选至少16小时。优选地，过滤所得固体，用TBME洗涤并在真空中干燥。更优选地，在热/冷循环过程中，混合物储存于振荡器中。 [0268] 本发明的另一方面涉及通过上述方法可得到或得到的产物。 [0269] 结晶龙胆酸盐(晶型O) [0270] 在一个优选实施方式中，化合物(I)的结晶形式是龙胆酸盐。 [0271] 优选地，所述结晶形式的特征在于X-射线粉末衍射图在选自以下2θ值具有两个或更多个衍射峰：6.32±0.2、12.16±0.2、12.45±0.2、13.13±0.2、14.41±0.2、14.83±0.2、16.37±0.2、17.12±0.2、18.79±0.2、19.49±0.2、20.42±0.2、23.37±0.2和23.77±0.2[晶型O]。更优选地，所述结晶形式的特征在于具有1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12或 13个上述衍射峰。 [0272] 优选地，所述结晶形式的特征在于X-射线粉末衍射图中峰的位置基本上与图24所示图的或表13所列的峰的位置一致。 [0273] 优选地，所述结晶形式的特征在于以每分钟20℃的加热速率记录的差式扫描量热图显示最大吸热峰在约92℃的温度发生。 [0274] 在一个优选实施方式中，所述结晶形式的特征在于DSC/TGA图基本上与图32一致。 [0275] 在一个优选实施方式中，本发明涉及化合物(I)龙胆酸盐结晶形式的制备方法，所述方法包括自乙腈结晶龙胆酸盐。 [0276] 更优选地，本发明涉及化合物(I)龙胆酸盐结晶形式的制备方法，所述方法包括下述步骤： [0277] (i)制备包括游离碱形式的化合物(I)、龙胆酸和乙酸乙酯的反应混合物；和[0278] (ii)由反应混合物分离化合物(I)的龙胆酸盐； [0279] (iii)由乙腈结晶步骤(ii)中的龙胆酸盐。 [0280] 优选地，所述方法包括在环境温度下搅拌化合物(I)和龙胆酸在乙酸乙酯中的混合物。优选地，混合物然后进行热/冷循环(40℃/RT，4小时)至少24小时，更优选48小时，再优选72小时。更优选地，在热/冷循环过程中，混合物储存于振荡器中。优选地，混合物接着冷却至约5℃保持至少24小时，接着冷却至约-18℃保持至少24小时。优选地，真空中干燥步骤(ii)中形成的龙胆酸盐，接着由乙腈结晶。更优选地，将乙腈加入到步骤(ii)中形成的龙胆酸盐中，混合物在约26℃储存于振荡器中保持至少6小时。优选地，混合物接着冷却至约5℃保持至少12或16小时，接着冷却至-18℃保持至少24小时。优选地，式(I)龙胆酸盐晶体通过缓慢蒸发乙腈得到。 [0281] 本发明的另一方面涉及通过上述方法可得到或得到的产物。 [0282] 结晶富马酸盐(晶型P) [0283] 在一个优选实施方式中，化合物(I)的结晶形式是富马酸盐。 [0284] 优选地，所述结晶形式的特征在于X-射线粉末衍射图在选自以下2θ值具有两个或更多个衍射峰：3.8±0.2、7.7±0.2、8.1±0.2、8.8±0.2、10.2±0.2、11.3±0.2、13.1±0.2、15.2±0.2、15.5±0.2、16.5±0.2、17.7±0.2、19.1±0.2、19.6±0.2、20.0±0.2、 20.9±0.2、21.5±0.2、21.9±0.2、22.7±0.2、23.2±0.2、23.8±0.2、24.1±0.2、25.0± 0.2、25.3±0.2、26.7±0.2、27.9±0.2和28.9±0.2[晶型P]。更优选地，所述结晶形式的特征在于具有1、2、3、4、5、6、7......或26个上述衍射峰。 [0285] 优选地，所述结晶形式的特征在于X-射线粉末衍射图中峰的位置基本上与图25所示图的或表14所列的峰的位置一致。 [0286] 优选地，所述结晶形式的特征在于以每分钟20℃的加热速率记录的差式扫描量热图显示最大吸热峰在约140℃的温度发生。 [0287] 在一个优选实施方式中，所述结晶形式的特征在于DSC/TGA图基本上与图33一致。 [0288] 在一个优选实施方式中，本发明涉及化合物(I)富马酸盐结晶形式的制备方法，所述方法包括自乙酸乙酯结晶富马酸盐。 [0289] 本发明另一方面涉及化合物(I)富马酸盐结晶形式的制备方法，所述方法包括下述步骤： [0290] (i)制备包括游离碱形式的化合物(I)、富马酸和乙酸乙酯的反应混合物；和[0291] (ii)和由反应混合物分离结晶富马酸盐； [0292] 优选地，所述方法包括在环境温度下搅拌化合物(I)和富马酸在乙酸乙酯中的混合物，并搅拌至少12小时，更优选至少16小时。优选地，过滤形成的固体，用乙酸乙酯洗涤并在真空下干燥。 [0293] 本发明的另一方面涉及通过上述方法可得到或得到的产物。 [0294] 结晶L-苹果酸盐(晶型Q) [0295] 在一个优选实施方式中，化合物(I)的结晶形式是L-苹果酸盐。 [0296] 优选地，所述结晶形式的特征在于X-射线粉末衍射图在选自以下2θ值具有两个或更多个衍射峰：6.7±0.2、8.6±0.2、9.3±0.2、11.0±0.2、12.7±0.2、13.6±0.2、14.1±0.2、15.1±0.2、15.8±0.2、16.5±0.2、17.8±0.2、18.7±0.2、19.5±0.2、19.8±0.2、 21.2±0.2、22.5±0.2、23.5±0.2、24.9±0.2和25.7±0.2[晶型Q]。更优选地，所述结晶形式的特征在于具有1、2、3、4、5、6、7......或19个上述衍射峰。 [0297] 优选地，所述结晶形式的特征在于X-射线粉末衍射图中峰的位置基本上与图26所示图的或表15所列的峰的位置一致。 [0298] 优选地，所述结晶形式的特征在于以每分钟20℃的加热速率记录的差式扫描量热图显示最大吸热峰在约81℃的温度发生。 [0299] 在一个优选实施方式中，所述结晶形式的特征在于DSC/TGA图基本上与图34一致。 [0300] 在一个优选实施方式中，本发明涉及化合物(I)的L-苹果酸盐结晶形式的制备方法，所述方法包括自乙酸乙酯结晶L-苹果酸盐。 [0301] 本发明另一方面涉及化合物(I)的L-苹果酸盐结晶形式的制备方法，所述方法包括下述步骤： [0302] (i)制备包括游离碱形式的化合物(I)、L-苹果酸和乙酸乙酯的反应混合物；和[0303] (ii)和由反应混合物分离结晶L-苹果酸盐； [0304] 优选地，所述方法包括在环境温度下搅拌化合物(I)和L-苹果酸在乙酸乙酯中的混合物至少24小时。优选地，接着加热混合物至约40℃并搅拌至少1小时，然后冷却至室温并搅拌至少12小时。优选地，混合物接着冷却至约5℃保持至少72小时，然后冷却至约-18℃保持至少30小时。优选地，混合物在室温下搅拌1小时，然后过滤形成的固体，用乙酸乙酯洗涤并在真空下干燥。 [0305] 本发明的另一方面涉及通过上述方法可得到或得到的产物。 [0306] 结晶L-苹果酸盐(晶型R) [0307] 在另一优选实施方式中，所述结晶形式的特征在于X-射线粉末衍射图在选自以下2θ值具有两个或更多个衍射峰：6.77±0.2、9.85±0.2、12.19±0.2、13.36±0.2、13.59± 0.2、14.15±0.2、15.88±0.2、16.44±0.2、17.33±0.2、17.75±0.2、19.73±0.2、20.11± 0.2、20.50±0.2、20.84±0.2、21.30±0.2、22.23±0.2、23.27±0.2、23.83±0.2、24.19± 0.2、24.61±0.2、25.18±0.2、25.67±0.2、26.03±0.2、26.31±0.2、26.91±0.2、27.78± 0.2、28.76±0.2、31.11±0.2、32.35±0.2和33.24±0.2[晶型R]。更优选地，所述结晶形式的特征在于具有1、2、3、4、5、6、7......或30个上述衍射峰。 [0308] 优选地，所述结晶形式的特征在于X-射线粉末衍射图中峰的位置基本上与图27所示图的或表16所列的峰的位置一致。 [0309] 优选地，所述结晶形式的特征在于以每分钟20℃的加热速率记录的差式扫描量热图显示最大吸热峰在约104℃的温度发生。 [0310] 在一个优选实施方式中，所述结晶形式的特征在于DSC/TGA图基本上与图35一致。 [0311] 在一个优选实施方式中，本发明涉及化合物(I)的L-苹果酸盐(晶型R)结晶形式的制备方法，所述方法包括将L-苹果酸盐(晶型Q)在至少40℃的温度和至少75%的相对湿度条件下保持7天。 [0312] 更优选地，本发明涉及化合物(I)的L-苹果酸盐(晶型R)结晶形式的制备方法，所述方法包括下述步骤： [0313] (i)制备包括游离碱形式的化合物(I)、L-苹果酸和乙酸乙酯的反应混合物； [0314] (ii)由反应混合物分离结晶L-苹果酸盐(晶型Q)； [0315] (iii)在40℃/75%RH储存步骤(ii)的结晶L-苹果酸盐(晶型Q)形成结晶L-苹果酸盐(晶型R)。 [0316] 优选地，步骤(iii)包括储存晶体氢溴酸盐(晶型J)至所需时间，更优选至少24小时，更优选48小时，再优选72小时，更优选至少7天。接着过滤晶体产物，洗涤并在真空中干燥。 [0317] 本发明的另一方面涉及通过上述方法可得到或得到的产物。 [0318] 治疗用途 [0319] 化合物(I)对细胞周期蛋白依赖激酶已显示出强效的抑制活性，且调节增生、转录和细胞骨架的组构，因此相信其可用于治疗增生障碍(如癌症和脱发)、免疫介导的疾病和炎性疾病(如移植物抗宿主疾病(GvHD)、移植排斥和牛皮癣)、自身免疫疾病和自身免疫介导的疾病(如桥本氏甲状腺炎、恶性贫血、艾迪生病、I型糖尿病、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、皮肌炎、斯耶格伦氏综合征、药物诱发红斑狼疮、多发性硬化、重症肌无力、莱特尔综合征和格雷夫病、寻常型天疱疮)、肾障碍(如肾小球肾炎和多囊性肾多囊性肾病)、心血管疾病(如再狭窄和心肌病)、眼睛疾病(如青光眼、渗出性与年龄相关的黄斑变性和增生性糖尿病视网膜病变)、神经变性疾病(如阿尔茨海默尔病和中风)、精神病(如双相性精神障碍)、病毒性疾病(如人巨细胞病毒(HCMV)、1型单纯疱疹病毒(HSV-1)、1型人免疫缺陷病毒(HIV-1)和水痘带状疱疹病毒(VZV)、代谢障碍(II型糖尿病、糖尿病神经病变)、和呼吸病(特发性肺纤维化、囊性纤维化和慢性阻塞性肺障碍)。 [0320] 因此，本发明一方面涉及用于药物的上述结晶形式。 [0321] 本发明的另一方面涉及用于预防或治疗增生性疾病的上述结晶形式。 [0322] 本发明的另一方面涉及上述结晶形式在制备用于预防或治疗增生性疾病的药物中的用途。 [0323] 本发明的另一方面涉及预防或治疗增生性疾病的方法，所述方法包括向需要的受试者给药药理学上有效量的上述结晶形式。优选地，所述受试者是温血动物，更优选是人。 [0324] 此处使用的短语“药物的制备”包括一种或多种上述结晶形式直接作为药物的用途，除了它们在进一步的抗增生剂的筛选程序中的用途或在该药物制备的任何阶段中的用途。 [0325] 如此处定义的，本发明范围内的抗增生效应可被在体外全细胞测定中的抑制细胞增殖能力所证实。利用这些测定，可证实本发明上下文中，化合物是否是抗增生性的。 [0326] 一个优选实施方式涉及本发明一种或多种化合物在治疗增生性疾病中的用途。优选地，增生性疾病是癌症或白血病。此处用到的术语增生性疾病以宽泛的意义包括需要控制细胞周期的任何障碍，如心血管疾病如再狭窄和心肌病，遗传性增生性疾病如多囊性肾疾病。 [0327] 在一个优选实施方式中，所述增生性疾病是实体肿瘤。 [0328] 在另一优选实施方式中，增生性疾病是血液癌症。优选地，血液癌症是白血病，更优选白血病晚期(advanced leukaemias)或骨髓增生异常综合征(MDS)。其它实例包括急性骨髓性白血病(AML)、急性淋巴细胞性白血病(ALL)或慢性淋巴细胞性白血病(CLL)。 [0329] 在另一优选实施方式中，增生性疾病选自肾小球肾炎、类风湿性关节炎、牛皮癣和慢性阻塞性肺病。 [0330] 本发明的化合物也用于制备治疗多种眼睛疾病的药物。优选地，眼睛疾病是青光眼、渗出性与年龄相关的黄斑变性(AMD)或增生性糖尿病视网膜病变(PDR)。 [0331] 药物组合物 [0332] 当本发明的结晶形式用作药物，优选作为治疗或预防增生障碍的药物时，可单独给药结晶形式，或作为结晶形式与适合药学上可接受的赋形剂和/或稀释剂和/或载体的混合物进行给药。 [0333] 本发明的另一方面涉及包括上述结晶形式和药学上可接受的稀释剂、赋形剂或载体的药物组合物。 [0334] 本发明的组合物可以是用于口服、局部(如用于牛皮癣)或肠胃外投药的单位剂量形式，如片剂、胶囊、颗粒、粉末、糖浆、注射剂、软膏、溶液、悬浮剂、气雾剂、锭剂等。 [0335] 药物的载体、赋形剂或稀释剂可根据给药的预期途径以及标准药物实践进行选择。药物组合物除了载体、赋形剂或稀释剂外，可包括任意适合的粘合剂、润滑剂、悬浮剂、包衣剂、溶解剂，或将这些试剂作为载体、赋形剂或稀释剂。药物组合物可以人或兽药形式用于人或动物。 [0336] 药物组合物可以已知方式进行制备，通过利用添加剂如赋形剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、稳定剂、矫味剂、悬浮剂、稀释剂和溶剂。 [0337] 公开于此的用于多种不同形式药物组合物的适合的赋形剂的实例，可参见“Handbook of Pharmaceutical Excipients,2nd Edition,(1994),Edited by A Wade and PJ Weller”。赋形剂的实例包括糖衍生物如乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇或山梨醇；淀粉衍生物如玉米淀粉、马铃薯淀粉、α-淀粉、糊精、羧甲基淀粉；纤维素衍生物如微晶纤维素、低取代羟丙基纤维素、羟丙甲基纤维素、羧甲基纤维素、羧甲基纤维素钙、内交联羧甲基纤维素钠；阿拉伯胶；葡聚糖；芽霉菌糖；硅酸盐衍生物如轻质硅酸酐、合成硅酸铝、硅酸铝酸镁；磷酸盐衍生物如磷酸钙；碳酸盐衍生物如碳酸钙；硫酸盐衍生物如硫酸钙；等。 [0338] 医疗用途中可接受的载体或稀释剂是药物领域中熟知的，如公开于Remington′s Pharmaceutical Sciences,Mack Publishing Co.(A.R.Gennaro edit.1985)。适合载体的实例包括乳糖、淀粉、葡萄糖、甲基纤维素、硬脂酸镁、甘露醇、山梨醇等。适合稀释剂的实例包括乙醇、甘油和水。 [0339] 崩解剂的实例包括前述赋形剂、化学改性淀粉或纤维衍生物如交联羧甲纤维素钠、羧甲基淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮等。 [0341] 稳定剂的实例包括对羟基苯甲酸酯衍生物如对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯；醇衍生物如氯丁醇、苯甲醇、苯乙醇(phenetyl alcohol)；苯扎氯铵；苯酚衍生物如苯酚、甲酚；硫柳汞；乙酐；山梨酸；等。矫味剂的实例包括甜味剂、酸味剂和增味剂等，所有这些都是一般使用的。 [0342] 溶剂的实例包括水、乙醇、甘油等。 [0343] 适合的粘合剂实例包括前述赋形剂；明胶；聚乙烯吡咯烷酮；聚乙二醇；等，淀粉，天然糖如葡萄糖、无水乳糖、自由流动乳糖、β-乳糖、玉米甜味剂、天然和合成胶，如阿拉伯树胶、黄蓍胶或海藻酸钠、羧甲基纤维素和聚乙二醇。 [0344] 润滑剂的实例包括滑石粉；硬脂酸；金属硬脂酸盐衍生物如硬脂酸钙、硬脂酸镁、硬脂酸钠；胶体二氧化硅；硅酸镁铝；蜡如蜂蜡或鲸蜡；硼酸；二醇；羧酸衍生物如富马酸、己二酸；羧酸钠如苯甲酸钠；硫酸盐如硫酸钠；亮氨酸；十二烷基硫酸盐如十二烷基硫酸钠或十二烷基硫酸镁；硅酸衍生物如硅酸酐、硅酸水合物；上述作为赋形剂的淀粉衍生物；油酸钠、乙酸钠、氯化钠等。 [0345] 给药 [0346] 本发明的药物组合物可适于口服、直肠、阴道、肠胃外、肌肉注射、腹膜内、动脉内、鞘内、支气管内、皮下、真皮内、静脉内、经鼻、含服、或舌下途径的给药。 [0347] 对于口服给药，特别的使用是制成压缩片剂、丸剂、片剂、胶囊(gellules)、滴剂和胶囊。优选地，这些组合物每剂量包含从1到250mg，更优选10-100mg的活性成分。 [0348] 其它给药形式包括溶液或乳液，可由静脉内、动脉内、鞘内、皮下、皮内、腹膜内或肌肉内注射，可由无菌或可灭菌的溶液制备。本发明的药物组合物也可为栓剂、阴道栓剂、悬液、乳状剂、洗液、软膏、乳膏剂、凝胶、喷雾剂、溶液或扑粉的形式。 [0349] 经皮肤给药的可选方式可使用皮肤贴片。例如，活性组合可包含于由聚乙二醇水性乳剂或液体石蜡水性乳剂组成的乳膏中。活性成分也可以1至10重量%之间的浓度包含于由白蜡或白凡士林基质与可能需要的稳定剂和防腐剂一起组成的软膏中。 [0350] 可注射的形式每剂量可包含10-1000mg，优选10-250mg的活性成分。 [0351] 组合物可配制为单位剂量形式，即包含单位剂量，或多或亚单位的单位剂量的分离部分的形式。 [0352] 剂量 [0353] 化合物(I)结晶形式的剂量取决于这些因素如患者的症状、体重和年龄。适合剂量水平是每天0.1mg(优选1mg)到每天100mg(优选50mg)。式(I)化合物的结晶形式既可以单一单位剂量给药，如果需要也可以所述剂量在一天中分成方便的亚单位以一次到数次进行给药，取决于患者的症状。 [0354] 本领域普通技术人员可很容易地确定给药于受试者的本发明组合物之一的适合剂量，而没有过多的试验。通常地，医师将确定最适合个体患者的实际剂量，其取决于多种因素，包括采用特殊化合物的活性、代谢稳定性和化合物作用的持续时间、年龄、体重、一般健康状况、性别、饮食、给药模式和时间、排泄速率、药物组合、特殊症状的严重程度以及个体经受的治疗。此处公开的剂量是平均案例的示例。当然会有采用较高或较低剂量范围的单独实例，其包含于本发明的范围之内。 [0356] 图1示出了实施例5.2得到的化合物(I)的L-酒石酸盐晶型E的X-射线粉末衍射图。利用PANalytical衍射计通过晶体产物的照射得到衍射图谱。 [0357] 图2示出了利用PerkinElmer DSC4000以20°C.min-1的加热速率得到的化合物(I)的L-酒石酸盐晶型E的DSC热谱图。在182.40°C观察到最大峰。 [0358] 图3示出了实施例4得到的化合物(I)的L-酒石酸盐晶型D的X-射线粉末衍射图。利用Bruker AXS C2GADDS通过晶体产物的照射得到衍射图谱。 [0359] 图4示出了利用Mettler DSC823e以20°C.min-1的加热速率得到的实施例4所得化合物(I)的L-酒石酸盐晶型D的DSC热谱图。在151.83°C观察到最大峰。 [0360] 图5示出了实施例1得到的化合物(I)结晶游离碱(晶型A)的X-射线粉末衍射图。利用PANalytical衍射计通过晶体产物的照射得到衍射图谱。 [0361] 图6示出了利用PerkinElmer Pyris 6以20°C.min-1的加热速率得到的实施例1所得化合物(I)结晶游离碱(晶型A)的DSC热谱图(较低轨迹)(在137.63°C观察到最大峰)。较高的轨迹显示了利用Pyris 1TGA以20°C.min-1的加热速率测量的相同的盐的TGA。直到250°C没有观察到明显的质量损失，在369.39°C观察到开始发生。 [0362] 图7示出了实施例2得到的化合物(I)柠檬酸盐(晶型F)的X-射线粉末衍射图。利用Bruker AXS C2 GADDS通过晶体产物的照射得到衍射图谱。 [0363] 图8示出了利用Mettler DSC823e以10°C.min-1的加热速率得到的实施例2所得化合物(I)柠檬酸盐(晶型F)的DSC热谱图(较低轨迹)(在150.83°C和187.83°C观察到最大峰)。较高的轨迹显示了利用Mettler TGA/SDTA 851e以10°C.min-1的加热速率对相同的盐得到的TGA分析。 [0364] 图9示出了实施例3得到的化合物(I)苯磺酸盐(晶型G)的X-射线粉末衍射图。利用Bruker AXS C2 GADDS通过晶体产物的照射得到衍射图谱。 [0365] 图10示出了利用Mettler DSC823e以10°C.min-1的加热速率得到的实施例3所得化合物(I)苯磺酸盐(晶型G)的DSC热谱图(较低轨迹)(在153.00°C观察到最大峰)。较高的轨迹显示了利用Mettler TGA/SDTA 851e以10°C.min-1的加热速率对相同的盐得到的TGA分析。 [0366] 图11示出了实施例7得到的化合物(I)磷酸盐(晶型B)的X-射线粉末衍射图。利用BrukerAXS C2GADDS通过晶体产物的照射得到衍射图谱。 [0367] 图12示出了利用Mettler DSC823e以10°C.min-1的加热速率得到的实施例7所得化合物(I)磷酸盐形式1(晶型B)的DSC热谱图(较低轨迹)(在84.95°C和123.93°C观察到最大峰)。较高的轨迹显示了利用Mettler TGA/SDTA 851e以10°C.min-1的加热速率对相同的盐得到的TGA分析。 [0368] 图13示出了实施例6得到的化合物(I)磷酸盐(晶型C)的X-射线粉末衍射图。利用BrukerAXS C2GADDS通过晶体产物的照射得到衍射图谱。 [0369] 图14示出了利用Mettler DSC823e以10°C.min-1的加热速率得到的实施例6所得化合物(I)磷酸盐形式2(晶型C)的DSC热谱图(在86.50°C和132.17°C观察到最大峰)。较高的-1轨迹显示了利用Mettler TGA/SDTA 851e以10°C.min 的加热速率对相同的盐得到的TGA分析。 [0370] 图15示出了利用Hiden Isochema湿气吸收分析仪测量的晶型A的等温线图(重量改变%vs RH%)。 [0371] 图16示出了晶型A的重量改变(%)vs时间和相对湿度%的动态图。 [0372] 图17示出了GVS后晶型A的XRPD分析。 [0373] 图18示出了溶解性研究前和后晶型A的XRPD分析。 [0374] 图19示出了实施例8得到的化合物(I)盐酸盐(晶型H)的X-射线粉末衍射图。利用Bruker AXS D8 Advance通过晶体产物的照射得到衍射图谱。 [0375] 图20示出了实施例9得到的化合物(I)盐酸盐(晶型I)的X-射线粉末衍射图。利用BrukerAXS D8Advance通过晶体产物的照射得到衍射图谱。 [0376] 图21示出了实施例10得到的化合物(I)氢溴酸盐(晶型J)的X-射线粉末衍射图。利用BrukerAXS D8Advance通过晶体产物的照射得到衍射图谱。 [0377] 图22示出了实施例12得到的化合物(I)甲磺酸盐(晶型L)的X-射线粉末衍射图。利用BrukerAXS D8Advance通过晶体产物的照射得到衍射图谱。 [0378] 图23示出了实施例13得到的化合物(I)马来盐(晶型M)的X-射线粉末衍射图。利用BrukerAXS D8Advance通过晶体产物的照射得到衍射图谱。 [0379] 图24示出了实施例15得到的化合物(I)龙胆酸盐(晶型O)的X-射线粉末衍射图。利用BrukerAXS D8Advance通过晶体产物的照射得到衍射图谱。 [0380] 图25示出了实施例16得到的化合物(I)富马酸盐(晶型P)的X-射线粉末衍射图。利用BrukerAXS D8Advance通过晶体产物的照射得到衍射图谱。 [0381] 图26示出了实施例17得到的化合物(I)L-苹果酸盐(晶型Q)的X-射线粉末衍射图。利用BrukerAXS D8Advance通过晶体产物的照射得到衍射图谱。 [0382] 图27示出了实施例18得到的化合物(I)L-苹果酸盐(晶型R)的X-射线粉末衍射图。利用BrukerAXS D8Advance通过晶体产物的照射得到衍射图谱。 [0383] 图28示出了实施例11得到的化合物(I)氢溴酸盐(晶型K)的X-射线粉末衍射图。利用BrukerAXS D8Advance通过晶体产物的照射得到衍射图谱。 [0384] 图29示出了利用Mettler DSC823e以10°C.min-1的加热速率得到的实施例11所得化合物(I)晶型K HBr盐的DSC热谱图(较低轨迹)(在74°C和95°C观察到最大峰)。较高的轨-1迹显示了利用Mettler TGA/SDTA 851e以10°C.min 的加热速率对相同的盐得到的TGA分析。 [0385] 图30示出了利用Mettler DSC823e以10°C.min-1的加热速率得到的实施例12所得化合物(I)甲磺酸盐晶型L的DSC热谱图(较低轨迹)(在132°C观察到最大峰)。较高的轨迹显示了利用Mettler TGA/SDTA 851e以10°C.min-1的加热速率对相同的盐得到的TGA分析。 [0386] 图31示出了利用Mettler DSC823e以10°C.min-1的加热速率得到的实施例13所得化合物(I)马来酸盐晶型M的DSC热谱图(较低轨迹)(在123°C观察到最大峰)。较高的轨迹显示了利用Mettler TGA/SDTA 851e以10°C.min-1的加热速率对相同的盐得到的TGA分析。 [0387] 图32示出了利用Mettler DSC823e以10°C.min-1的加热速率得到的实施例15所得化合物(I)龙胆酸盐晶型O的DSC热谱图(较低轨迹)(在99°C观察到最大峰)。较高的轨迹显-1示了利用Mettler TGA/SDTA 851e以10°C.min 的加热速率对相同的盐得到的TGA分析。 [0388] 图33示出了利用Mettler DSC823e以10°C.min-1的加热速率得到的实施例16所得化合物(I)富马酸盐晶型P的DSC热谱图(较低轨迹)(在143°C观察到最大峰)。较高的轨迹显示了利用Mettler TGA/SDTA 851e以10°C.min-1的加热速率对相同的盐得到的TGA分析。 [0389] 图34示出了利用Mettler DSC823e以10°C.min-1的加热速率得到的实施例17所得化合物(I)L-苹果酸盐晶型Q的DSC热谱图(较低轨迹)(在92°C观察到最大峰)。较高的轨迹显示了利用Mettler TGA/SDTA 851e以10°C.min-1的加热速率对相同的盐得到的TGA分析。 [0390] 图35示出了利用Mettler DSC823e以10°C.min-1的加热速率得到的实施例18所得化合物(I)L-苹果酸盐晶型R的DSC热谱图(较低轨迹)(在114°C观察到最大峰)。较高的轨迹显示了利用Mettler TGA/SDTA 851e以10°C.min-1的加热速率对相同的盐得到的TGA分析。 [0391] 图36示出了利用Mettler DSC823e以10°C.min-1的加热速率得到的实施例8所得化合物(I)盐酸盐晶型H的DSC热谱图(较低轨迹)(在68、87、104和148°C观察到最大峰)。较高的轨迹显示了利用Mettler TGA/SDTA 851e以10°C.min-1的加热速率对相同的盐得到的TGA分析。 [0392] 图37示出了利用Mettler DSC823e以10°C.min-1的加热速率得到的实施例9所得化合物(I)盐酸盐晶型I的DSC热谱图(较低轨迹)(在120和139°C观察到最大峰)。较高的轨迹显示了利用Mettler TGA/SDTA 851e以10°C.min-1的加热速率对相同的盐得到的TGA分析。 [0393] 图38示出了利用Mettler DSC823e以10°C.min-1的加热速率得到的实施例10所得化合物(I)HBr盐晶型J的DSC热谱图(较低轨迹)(在142°C观察到最大峰)。较高的轨迹显示了利用Mettler TGA/SDTA 851e以10°C.min-1的加热速率对相同的盐得到的TGA分析。 [0394] 参考下述非限制性的实施例进一步描述本发明。实施例 [0395] 设备和方法细节 [0396] X-射线粉末衍射(XRPD) [0397] 此处涉及的所有XRPD图是利用铜K-α照射得到的。如此处使用的，下述说明书、附图或表中公开的XRPD值是指近似值。当涉及列于表中的XRPD值，指的是2θ值，独立于表中所列任何其它参数，如峰强度等。 [0398] 利用下述Bruker AXS C2GADDS衍射计，进行磷酸盐(形式B,C)、柠檬酸盐(晶型F)、苯磺酸盐(晶型G)和L-酒石酸盐(晶型D)的XRPD。 [0399] 利用下述Bruker AXS D8Advance衍射计，进行盐酸盐(晶型H,I)、氢溴酸盐(晶型J,K)、甲磺酸盐(晶型L)、马来酸盐(晶型M)、龙胆酸盐(晶型O)、富马酸盐(晶型P)和L-苹果酸盐(晶型Q,R)的XRPD。利用下述PANalytical衍射计，进行化合物(I)的游离碱(晶型A)和L-酒石酸盐(晶型E)的XRPD。 [0400] Bruker AXS C2GADDS [0401] 在BrukerAXS C2GADDS衍射计上，利用Cu Kα照射(40kV,40mA)，自动化XYZ阶段(stage)，用于自动样品定位的激光视频显微镜和HiStar 2维平面检测器收集X-射线粉末衍射图谱。X-射线光学器件由配以0.3mm针孔型准直器的单一 多层镜组成。束流发散度，即样品上的X-射线束的有效尺寸大约是4mm。利用20cm的样品检测器距离，采用θ-θ连续扫描模式，得到有效的2θ范围为3.2°-29.7°。通常，样品将暴露在X-射线束下120秒。用于数据收集的软件是用于WNT 4.1.16的GADDS，数据利用Diffrac Plus EVA v 9.0.0.2或v 13.0.0.2分析并提供。 [0402] Bruker AXS D8Advance [0403] 在Bruker D8衍射计上，利用Cu Kα照射(40kV,40mA)，θ-2θ测角仪，V4发散和接收狭缝，Ge单色器和Lynxeye检测器，收集X-射线粉末衍射图谱。利用经过检验的Corundum标准(NIST 1976)检查仪器性能。用于数据收集的软件是Diffrac Plus XRD Commander v2.5.0，数据利用Diffrac Plus EVA v11.0.0.2或v 13.0.0.2分析并提供。如无其它说明，在该设备上收集的XRPD图谱用于产生XRPD峰列。 [0405] 角范围：2到42°2θ [0406] 步长：0.05°2θ [0407] 收集时间：0.5秒步-1 [0408] 环境条件 [0410] 非环境条件 [0411] 将在非环境条件下运行的样品安置在具有热传导化合物的硅片上。接着以约10°C.min-1加热样品至合适的温度，然后保持等温约1分钟，然后开始收集数据。 [0412] PANalytical X’Pert PRO [0413] 在PANalytical衍射计上，利用Cu Kα照射(45kV,40mA)，测角仪，聚焦镜，发散狭缝(1/2”)，在两侧的索勒狭缝和发散光束(4mm)和PIXcel检测器收集X-射线粉末衍射图谱。用于数据收集的软件是X’Pert Data Collector,version 2.2f，利用X’Pert Data Viewer,version 1.2d提供数据。 [0414] 利用接受的粉末样品，在环境条件下处理样品并通过传导箔XRPD分析。约2-5mg样品放到支撑在聚酰亚胺(Kapton,12.7μm厚)膜上的96位置样品板上。利用连续扫描(速度为0.146°/s)在范围3-40°2中收集数据。整个样品收集过程中，以2mm.s-1的速度在x平面使样品振荡±2mm，以最大化颗粒取样和最小化优选的取向效果。 [0415] 核磁共振(NMR) [0416] 在配以自动取样器的Bruker 400MHz设备上收集1H NMR谱，并通过DRX400操作台控制。利用ICONNMR v4.0.4(build 1)，用Topspin v 1.3(patch level 8)，并使用标准Bruker负载的试验，获得自动化试验。对于非常规光谱，通过单独使用Topspin获得数据。在d6-DMSO中制备样品，如无其它说明。利用ACD SpecManager v 9.09(build 7703)进行离线分析。 [0417] 差示扫描量热法(DSC) [0418] 利用下述Mettler DSC 823e对磷酸盐(晶型B,C)、柠檬酸盐(晶型F),苯磺酸盐(形式G)、L-酒石酸盐(晶型D)、盐酸盐(晶型H和I)、氢溴酸盐(晶型J和K)、甲磺酸盐(晶型L)、马来酸盐(晶型M)、龙胆酸盐(晶型O)、富马酸盐(晶型P)、L-苹果酸盐(晶型Q和R)进行DSC研究。 [0419] 利用下述PerkinElmer Pyris 6DSC对化合物(I)游离碱进行DSC研究。 [0420] 利用下述PerkinElmer DSC 4000DSC对L-酒石酸盐(晶型E)进行DSC研究。 [0421] Mettler DSC 823e [0422] 在配以50位置自动采样器的Mettler DSC 823e上收集DSC数据。利用检验合格的铟校准仪器的能量和温度。通常，0.5-3mg的每种样品，在针孔铝锅中，以10°C.min-1的速率从25°C加热至350°C。在样品上以50ml.min-1维持氮气吹扫。设备控制和数据分析软件是STARe v9.10。 [0423] PerkinElmer Pyris 6DSC/DSC 4000 [0424] 在PerkinElmer Pyris 6DSC或DSC 4000上收集DSC数据。利用检验合格的铟检验仪器以用于能量和温度的校准。预定量的样品(以mg计)放置在针孔铝锅中，以20°C.min-1的速率从30°C加热至320°C。设备控制和数据分析是Pyris Software v9.0.1.0174。 [0425] 热重分析法(TGA) [0426] Mettler TGA/SDTA 851e [0427] 在配以34位置自动采样器的Mettler TGA/SDTA 851e上收集TGA数据。利用检验合格的铟对设备进行温度校准。通常，5-30mg的每种样品装载到预称重的铝坩锅上，并以10°C.min-1的速率从环境温度加热至350°C。以50ml.min-1对样品维持氮气净化。设备控制和数据分析软件是STARe v9.10。 [0428] Pyris 1TGA [0429] 在配以20位置自动采样器的Pyris 1TGA上收集TGA数据。利用检验合格的铟对设备进行校准。6.329mg的样品装载到预称重的铝坩锅，并以20°C.min-1(或40°C.min-1)的速率从环境温度加热至500°C。以20ml.min-1对样品维持氮气净化。设备控制和数据分析是Pyris Software v9.0.1.0174。 [0430] 偏振光显微镜(PLM) [0431] 在配以用于图象捕捉的数字摄像机的Leica LM/DM偏振光显微镜对样品进行研究。少量每种样品放置在载玻片上，安置在浸油中并覆盖以玻璃滑片，尽可能的分离单个颗粒。用适合的放大倍数和部分偏振光观察样品，配以λ假彩色过滤器。 [0432] 显微镜 [0433] 在配以用于图象捕捉的数字摄像机的Leica DME偏振光显微镜对样品进行研究。少量样品放置在载玻片上，并覆盖以玻璃滑片，尽可能的分离单个颗粒。用适合的放大倍数(10x/0.22)和全偏振光观察样品以评估结晶度。 [0434] 热载台显微镜(HSM) [0435] 利用结合Mettler-Toledo MTFP82HT热载台和用于图象捕捉的数字摄像机的LM/DM偏振光显微镜进行热载台显微观察。少量每种样品放置在载玻片上，尽可能的分离单个颗粒。用适合的放大倍数和部分偏振光观察样品，配以λ假彩色过滤器，同时一般以10-20°C.min-1从环境温度加热。 [0437] SMS DVS Intrinsic [0438] 利用由SMS Analysis Suite软件控制的SMS DVS Intrinsic吸湿分析仪器得到吸附等温线。通过设备控制使得样品温度维持在25°C。通过混和干和湿氮气流控制湿度，总流速为200ml.min-1。通过位于样品附近的校准的Rotronic探针(1.0-100%RH的动态范围)测量相对湿度。通过微量天平(准确度±0.005mg)连续监测作为%RH函数的样品重量改变(质量减轻)。通常5-20mg的样品在环境条件下放置在去皮重的网状不锈钢笼中。在40%RH和25℃(典型室内条件)装载和卸载样品。吸湿等温线如下所示进行(1个完整周期，两次扫描)。在25℃以10%RH间隔，在0.5-90%RH范围完成标准等温线。 [0439] SMS DVS Intrinsic试验的方法参数： [0440] 参数 值 吸附－扫描1 40－90 解吸附/吸附－扫描2 85－干燥，干燥－40 间隔(10%RH) 10 扫描数 2 流速(ml.min-1) 200 温度(℃) 25 稳定性(℃.min-1) 0.2 吸附时间(小时) 6小时间歇(6hours time out) [0441] 完成等温线和XRPD再分析后，复原样品。 [0442] Hiden Isochema吸湿分析仪器(IGAsorp) [0443] 利用由IGAsorp Systems Software V6.50.48控制的Hiden Isochema吸湿分析仪器(IGAsorp)得到吸附等温线。通过设备控制使得样品温度维持在25°C。通过混和干和湿氮气流控制湿度，总流速为250ml.min-1。通过测量三种校准的Rotronic盐溶液(10-50-88%)检验设备的相对湿度含量。通过微量天平(准确度±0.005mg)监测作为%RH函数的样品重量改变。限定量的样品在环境条件下放置在去皮重的网状不锈钢笼中。完整的试验周期由两次扫描(吸附和解吸附)组成，在恒定温度(25℃)和以10%RH间隔，在10-90%RH范围(每个湿度水平90分钟)。 [0444] 通过Karl Fischer滴定(KF)测定水 [0445] 利用Hydranal Coulomat AG试剂和氩气净化在Mettler Toledo DL39电量计上测量每种样品的水含量。称重的固体样品引入到铂TGA锅上的容器中，所述锅连接到subaseal以避免水进入。各滴定使用大约10mg样品，并进行双份测定。 [0446] 热力学水溶性 [0447] 水溶性通过以下确定：将充足的化合物悬浮在HPLC级水中以得到最大最终浓度≥10mg.ml-1的母体游离形式化合物。悬浮液在25°C保持平衡24小时，接着测量pH。悬浮液接着通过玻璃纤维C过滤器过滤到96孔板中。滤液接着通过101因子稀释。参考DMSO中约 0.1mg.ml-1的标准溶液，通过HPLC进行定量。注入不同体积的标准、稀释和未稀释的样品溶液。利用峰面积计算溶解性，峰面积通过在标准注入中对相同保留时间的作为主峰的峰积分确定。 [0448] 溶解性测量的HPLC方法参数 [0449] [0451] 通过HPLC进行化学纯度测定 [0452] 在配有二极管阵列检测器的Agilent HP1100系列体系上，并利用ChemStation软件vB.02.01-SR1进行分析。 [0453] 用于化学纯度测定的HPLC方法参数 [0454] [0455] 离子色谱法(IC) [0456] 利用离子色谱Net software v2.3在Metrohm 761Compaction色谱(用于阳离子)和Metrohm 861Advanced Compaction色谱(用于阴离子)上收集数据。准确称量的样品作为DMSO中的原液进行制备，并以DMSO或水以1:9稀释，然后测试。通过与分析的已知离子浓度的标准溶液进行比较实现定量。 [0457] 用于阴离子色谱的HPLC方法参数 [0458] [0459] pKa测定和预测 [0460] 测定 [0461] 在具有D-PAS附件的Sirius GlpKa仪器上收集数据。25℃时，在水溶液中通过UV和在甲醇水混合物中通过电位测定法进行测量。滴定介质通过0.15M KCl(aq)进行离子强度调节(ISA)。通过Yasuda-Shedlovsky外推法将甲醇水混合物中的得到的值校正到0%共溶剂。利用Refinement Pro软件v2.2提炼数据。 [0462] 预测 [0463] 利用ACD pKa预测软件v11进行pKa值的预测。 [0464] Log P的测定 [0465] 在Sirius GlpKa设备上，利用三种比例的辛醇:离子强度调节的(ISA)水通过电位滴定法收集数据，以生成Log P，Log Pion和Log D值。利用Refinement Pro软件v2.2提炼数据。利用ACD v11软件进行Log P值的预测。 [0466] 化合物制备 [0467] 可根据公开于WO 2008/122767(Cyclacel Limited)中的方法制备化合物(I)。 [0468] 或者，化合物(I)可通过下述步骤进行制备： [0469] 将(4,6-二甲基吡啶-3-基甲基)-(2-氟-9-异丙基-9H-嘌呤-6-基)-胺(30g),(2R,3S)-3-氨基-戊-2-醇(29.5g)和DIEA(33.0mL)在乙二醇(270mL)中的溶液在125°C的氮气氛下加热过夜。另外加入0.5当量的(2R,3S)-3-氨基-戊-2-醇(4.9g)，反应混合物再搅拌6小时。HPLC分析显示残余1.9%的(4,6-二甲基吡啶-3-基甲基)-(2-氟-9-异丙基-9H-嘌呤-6-基)-胺。因此将反应保持在125°C搅拌过夜。HPLC分析显示仅残余0.35%的(4,6-二甲基吡啶-3-基甲基)-(2-氟-9-异丙基-9H-嘌呤-6-基)-胺。因此将反应冷却到室温，并加入乙酸乙酯(2460mL)。加入水(1320mL)并分离各相。水相用乙酸乙酯萃取(2x2460mL)，合并的有机相用水(2x2460mL)洗涤，MgSO4干燥，过滤并分离。通过快速柱色谱纯化(1500g二氧化硅，在DCM中的3%MeOH作为洗脱剂)，得到白色固体状的所需产物。真空烘箱中干燥得到化合物(I)，产率59%(22.3g,JCCA824).1H NMR确证了产物，HPLC得到纯度为99.16%。 [0470] 实施例1：游离碱化合物(I)结晶得到晶型A [0471] 通过下述方法自MTBE结晶化合物(I)。将MTBE(2体积)加入到化合物(I)中并加热至回流。混合物保持回流30-60分钟，然后温度降至50°C(保持2小时)。使悬浮液慢慢冷却到室温，然后过滤并用MTBE(3x1体积)洗涤。40°C时在真空烘箱中干燥固体8小时，得到所需结晶游离碱(质量回收率84.5%，LC纯度97.4%)。 [0472] 晶型A的XRPD信息示于表1中。 [0473] 晶型A的重量蒸汽吸附 [0474] 11.254mg的样品在环境条件下放置在涂了焦油的(tarred)网状不锈钢笼中。全试验周期由在恒定温度(25°C)和10%RH间隔、经40-90%范围(每个湿度水平180分钟)的两种扫描(吸附和解吸附)组成。约0.09mg( 0.8%)的质量增加以及相对湿度水平的温和的吸收和~损失表明为仅有表面潮湿的非吸湿样品。图15显示了晶型A的等温线图(重量改变%vs RH%)，而图16显示了重量改变%vs时间和相对湿度%的动态图。GVS进行后样品通过XRPD分析显示没有改变(图17)。 [0475] 晶型A的热力学水溶性 [0476] 通过将充足的化合物悬浮在HPLC级水中得到母体游离形式化合物的最大最终浓度≥10mg.ml-1而确定水溶性。悬浮液在25°C保持平衡24小时。悬浮液接着通过过滤器过滤到HPLC小瓶中。滤液接着稀释适当倍数。参考0.5mg在1mL乙腈/水(1:1)中的标准溶液，通过HPLC进行定量。注入不同体积的标准、稀释和未稀释的样品溶液。利用峰面积计算溶解性，峰面积通过在标准注入中对相同保留时间的作为主峰的峰积分确定。水溶性确定为0.329mg/mL。溶解性研究后晶型A的分析显示XRPD没有改变(图18)。 [0477] 实施例2：化合物(I)柠檬酸盐(晶型F)的制备 [0478] 化合物(I)(100mg,0.25mmol,1当量)、柠檬酸(49mg,0.26mmol,1.02当量)和乙酸乙酯(1ml,10体积)注入瓶中，并在环境条件下搅拌24小时，小块的粘性固体没有溶解。混合物储存在振荡器中，进行热/冷循环(60°C/RT,4h)68小时。所得白色沉淀通过真空过滤分离，用EtOAc洗涤(2x500μl,2x5体积)，并在30°C的真空烘箱中干燥16小时，得到白色固体状的柠檬酸盐(53mg,40%产率)。 [0479] 柠檬酸盐的1H NMR谱与结构相一致，且存在一组非对映峰对应于柠檬酸根阴离子。1H NMR分析也证实残余乙酸乙酯的存在。XRPD分析证实该物质为结晶。DSC分析显示两种吸热事件：发生于145°C的尖峰(相应于熔融)，和发生于165°C的宽峰。在熔融之前或过程中，TGA分析显示没有重量损失，然后在高于180°C时分解，证实了DSC中的第二吸热事件很可能是分解。TGA分析也证明该物质不是溶剂合物。 [0480] 在25°C和94%RH时，产品样品储存于湿气室中保持3天，然后该物质轻微发粘，虽然其没有潮解。这种物质的XRPD分析显示得到了与初始产物相同的图，但具有显著的无定形图谱。在25°C和75%RH时，第二种样品储存于湿气室中保持70小时，过后样品看起来没有改变，这种物质的XRPD图与初始产品的图一致。GVS分析证实在高RH时没有形成水合物，虽然证实该物质在高于70%RH时是吸湿的。 [0481] 柠檬酸盐的XRPD信息示于表3。 [0482] 柠檬酸盐的结果概述： [0483] 熔融开始 HPLC纯度 水溶性 145°C 99.9% >15mg.ml-1 [0484] 实施例3：化合物(I)苯磺酸盐(晶型G)的制备 [0485] 化合物(I)(100mg,0.25mmol,1当量)、苯磺酸(41mg,0.26mmol,1.02当量)和叔丁基甲基醚(1ml,10体积)在环境条件下加入到瓶中，并开始搅拌，混合物从来没有变成溶液。混合物搅拌30分钟，然后样品包含显著量的粘性固体。混合物再搅拌23.5小时，显示没有改变。混合物储存在振荡器中进行热/冷循环(60°C/RT,4h)68小时。所得白色沉淀物通过真空过滤分离，用TBME(3x500μl,3x5体积)洗涤，并在30°C的真空烘箱中干燥16小时，得到白色固体状的苯磺酸盐(65mg,47%产率)。 [0486] 苯磺酸盐的1H NMR谱清晰地显示相应于苯磺酸盐的芳香峰。然而，相应于化合物(I)的大部分峰表现为宽的多峰，可能是由于磺酸基团的存在，使得成功解析变得困难。也可见大量的残余TBME，但认为其是非结合的溶剂而不是溶剂合物。XRPD分析证实该物质是结晶。DSC分析显示仅有一个吸热事件在147°C发生，热载台显微镜证实该事件是熔融。TGA分析显示在75和120°C之间有1.1%的重量损失，其没有伴随DSC中的吸热，其原因在于未结合溶剂的损失，证明该物质是非溶剂化的。储存在25°C和94%RH的湿度室中2小时后，观察到产品样品的潮解。第二样品储存在25°C和75%RH的湿度室中70小时后，样品轻微发粘。这种物质所得的XRPD图与原始产物的一致，但具有稍微更大的无定形图谱。 [0487] 苯磺酸盐的XRPD信息示于表4中。 [0488] 苯磺酸盐结果的概述 [0489] 熔融开始 HPLC纯度 水溶性 147°C 98.9% >20mg.ml-1 [0490] 实施例4：化合物(I)L-酒石酸盐(晶型D)的制备 [0491] 化合物(I)(500mg,1.26mmol,1当量)、L-酒石酸(193mg,1.28mmol,1.02当量)和乙酸乙酯(5ml,10vol)加入烧瓶中，并在环境条件下搅拌2小时，1小时内出现沉淀。通过真空过滤分离白色沉淀，用EtOAc (3x0.5ml,2x1ml)洗涤，40°C时在真空烘箱中干燥16小时，得到白色固体状的L-酒石酸盐(565mg,82%产率)。 [0492] 酒石酸盐的1H NMR谱与结构一致，并在4.31ppm处显示出相应于酒石酸根阴离子的单峰。XRPD分析证实该物质为结晶。DSC分析显示在147°C发生的单一吸热事件，其通过热载台显微镜证实是熔融。TGA分析显示在熔融之前或过程中没有重量损失，然后在高于200°C分解，显示这种物质不是溶剂合物。 [0493] 产品样品储存在25°C和94%RH的湿度室中70小时后，物质轻微发粘，虽然其没有潮解。这种物质的XRPD分析显示存在一些峰与原始产物所得图中的峰对应，但也可见显著的无定形图谱，由于水的吸入。第二样品储存在25°C和75%RH的湿度室中4天后，样品没有改变。这种物质所得的XRPD图与原始产物的图一致。GVD分析证实在高RH时没有形成水合物，虽然证实物质在高于75%RH是吸湿的。 [0494] L-酒石酸盐(晶型D)的XRPD信息示于表2中。 [0495] L-酒石酸盐(晶型D)结果的概述： [0496] 熔融开始 HPLC纯度 水溶性 147°C 99.4% >20mg.ml-1 [0497] 实施例5：化合物(I)L-酒石酸盐(晶型E)的制备 [0498] 实施例5.1 [0499] (a)化合物(I)的L-酒石酸盐晶型D(1.0g)在乙醇(12ml)中的悬浮液加热回流。在30分钟的时间内滴加乙腈(3ml)。加入后，没有得到溶液。再加入一部分乙醇(4.5ml)和乙腈(1ml)直到得到溶液。溶液精密过滤(热)，然后以10°C/小时的速率冷却到室温(在 65°C开~ 始结晶)。室温下搅拌过夜后，过滤所得固体，用冷乙醇(5ml)洗涤并干燥。另外在50°C的真 1 空烘箱中干燥，得到白色固态晶体的所需产物(0.725g,73%)。H NMR分析证实为1:1盐，XRPD证实为晶型E。 [0500] 25°C时的溶解性研究显示，晶型E的溶解度为43.905mg/ml(恒定搅拌下在水中培养24小时)。剩余的固体干燥，XRPD分析显示，水浆液后的粉末图中没有差别。溶解性研究后溶液的pH值为5。 [0501] 也进行了晶型E的TGA研究(在100°C保持24小时)。结果显示该物质在该温度是稳定的，TGA稳定性研究后该物质的XRPD分析显示在粉末图中没有差别。 [0502] L-酒石酸盐(晶型E)的XRPD信息示于表7中。 [0503] 实施例5.2 [0504] 化合物(I)的L-酒石酸盐晶型D(10.2g)在乙醇(120ml)中的悬浮液加热至65°C。加入乙腈(20ml)，悬浮液在回流时加热10分钟，然后得到溶液。溶液经过2-3小时冷却到室温，在 50°C时开始结晶。所得悬浮液在室温下搅拌过夜。过滤所得固体，用乙醇(10ml)洗涤并~干燥。另外在50°C的真空烘箱中干燥，得到白色固态晶体的所需产物(8.76g,88%)。1H NMR分析证实为1:1的盐，XRPD证实为晶型E。 [0505] 实施例5.3－浆液转化 [0506] 化合物(I)的L-酒石酸盐的晶型E，也由四种不同的溶剂(乙酸乙酯、IPA、IMS或乙腈)通过浆液转化进行制备。L-酒石酸盐的晶型D:晶型E的重量比为1:1的混合物(总计200mg)在45°C时在2ml溶剂中加热超过48小时，然后过滤并分析。在每种浆液中生成晶型E(纯度≥98%)。 [0507] 实施例5.4－种晶 [0508] 化合物(I)的L-酒石酸盐晶型D(10.2g)在乙醇(120ml)中的悬浮液加热至65°C。加入乙腈(20ml)，悬浮液在回流时加热10分钟。混合物通过HPLC滤器(filter frit)进行精密过滤。过程中没有发现沉淀。物质接着从回流冷却，并在70°C利用晶型E的L-酒石酸盐(如上述制备)种晶，以每1.5小时10°C的速率冷却。第一晶种完全溶解并在60°C重复种晶。晶种残留且溶液改变为显示很模糊的不透明相。在约50°C时开始结晶。得到80%的分离产率。 [0509] 实施例5.5－化合物(I)游离碱的形成 [0510] CYC065游离碱的晶型A(0.2g)溶解于乙醇(9体积,1.8mL)并在回流时加热。滴加酒石酸(1当量,0.076g)在水(1.7体积,0.34mL)/乙醇(1体积,0.2mL)中的溶液并维持回流温度。所得溶液接着精密过滤，然后冷却到70°C。加入晶型E的晶种得到混浊溶液。该批料在70°C搅拌1小时，然后冷却到室温。室温搅拌2小时后，过滤固体，并用乙醇(2x0.5mL)洗涤，干燥。另外在50°C的真空烘箱中干燥，得到CYC065-L-酒石酸盐晶型E的白色固体(0.2g, 72%)。1H NMR证实为1∶1的盐，HPLC显示纯度为97.97%。XRPD和DSC证实为晶型E。 [0511] 实施例6：自乙醇制备化合物(I)的磷酸盐(晶型C) [0512] 将磷酸在水(85%w/w)(192μl,1.67mmol,1.02当量)中的溶液，在室温下在冰水浴中经过2分钟的时间加入到化合物(I)(650mg,1.64mmol,1当量)在乙醇(6.5ml,10体积)的搅拌溶液中，整个添加过程中，混合物保持淡黄色溶液。除去水浴，混合物在室温搅拌2小时，通过真空过滤分离得到白色沉淀，用乙醇(2x1.3ml,2x2体积)洗涤，在40°C的真空烘箱中干燥16小时，得到白色固态磷酸盐(641mg,66%产率)。 [0513] 得到的产物XRPD图虽然不相同，但类似于由IPA结晶的相应物质(参见实施例7)。这些结果表明由乙醇的结晶与由IPA结晶相比，生成了所得磷酸盐不同的多晶型物。DSC分析显示在67和125°C发生的两种宽吸热事件。第一吸热事件(endotherm)与形成于IPA中物质(参见实施例7)的DSC图中观察到的第一事件是相当的。有趣的是，第二吸热事件比由IPA得到的相当物质(116°C)具有显著更高的发生温度(123°C)，再次表明存在不同固体形式的。 [0514] 得到的1H NMR谱与结构相一致并显示少量的残留乙醇。 [0515] TGA分析显示在45和98°C之间有2.9%的重量损失，相应于DSC中第一吸热事件，因此证实DSC中观察到的第一吸热事件是由于结合溶剂的损失。在这个阶段，没有证实是否这种溶剂损失是由于IPA或水，或两者混合物的损失。TGA分析显示没有与DSC中观察到的第二事件相关的重量损失，然后在220°C以上分解。热载台显微镜证实DSC中观察到的第二吸热事件是熔融。 [0516] GVS分析在25°C进行，并显示该物质不吸湿，因为在60和90%RH之间观察到0.5重量%水的逐步吸收。在10和0%RH之间观察到0.5%的重量损失，其低于TGA中观察到的重量损失。 [0517] 对晶型C的样品进行可变温度XRPD分析，为了说明DSC中观察到的溶剂损失是否导致形式改变。样品加热至每个温度，保持3分钟使其平衡，并收集XRPD图。以10度的增量，将物质加热至100°C，收集图，样品在100°C保持15分钟，收集第二个图。样品冷却回室温，得到最终的参考图。 [0518] 冷却之前和之后在室温获得的XRPD图和在100°C得到的图之间观察到轻微的改变。这表明溶剂损失的确在形式上产生了改变，并且这种过程在空气存在下是可逆的。在其进行VT XRPD分析之后，样品的DSC分析显示两种宽吸热事件，在67和124°C发生，类似于在进行VT XRPD试验之前得到的样品的DSC图。这种结果证实溶剂损失在空气中是可逆的，因此暗示产物在环境条件下以水合形式存在，并不是醇溶剂合物。 [0519] 为了进一步证实这种假设，进行热/冷/热DSC分析。在这个试验中，产品的样品加热至100°C，保持10分钟，冷却到30°C，保持5分钟，接着再加热至250°C。如推测，首次加热显示所需吸热事件相应于水的损失。第二次加热仅显示单一吸热事件，相应于无定形形式的熔融，因此证实在氮气的惰性气氛下水的损失是不可逆的。 [0520] 由乙醇制备的磷酸盐(晶型C)的XRPD信息示于表5。 [0521] 由乙醇制备的磷酸盐结果的概述： [0522] 脱水发生 熔融发生 TGA重量损失 HPLC纯度 水溶性 %H2O Karl Fischer 68°C 123°C 2.8 99.6% >20mg.ml-1 3.5 [0523] 通过在60°C的真空烘箱干燥24小时(76mg的量，样品A)或在50°C的真空烘箱干燥68小时(346mg的量，样品B)除去所有残余的乙醇。1H NMR、HPLC纯度、XRPD和DSC分析都证实干燥的物质类似于起始产物，并在干燥过程中没有降解。TGA和Karl Fischer分析用于计算水的当量。 [0524] 脱水发生 熔融发生 TGA重量损失 HPLC纯度 当量水 %H2O Karl Fischer 样品A 67°C 122°C 2.5 99.6% 0.83 N/A 样品B 70°C 123°C 2.4 N/A 0.82 3.0 [0525] 实施例7：自丙-2-醇制备化合物(I)的磷酸盐(晶型B) [0526] 将磷酸在水(85%w/w)(147μl,1.28mmol,1.02当量)中的溶液，在室温下在冰水浴中经过2-3分钟的时间加入到化合物(I)(500mg,1.26mmol,1当量)在异丙醇(5ml,10体积)的搅拌溶液中。加入过程中，粘性白色物质形成为饼。剧烈搅拌混合物30分钟，然后混合物变为浓黄色泥状，搅拌减弱。另加入750μl的IPA，混合物再搅拌1小时。所得白色沉淀通过真空过滤分离，并用IPA(2x1.5ml,2x3体积)洗涤，抽滤干燥。在饼中清晰可见两种不同类型的物质－围绕外侧是干的白色粉末固体，中心是粘性灰白色固体。分离干燥固体生成白色固体状的磷酸盐(110mg,15%产率)。 [0527] 产品的1H NMR谱与结构一致，也可看到少量残余IPA。XRPD证实产品是结晶形式。DSC图显示在67和116℃发生的两种事件，TGA在45和98℃之间显示2.6%的重量损失，相应于DSC中第一吸热事件过程中结合溶剂的损失。在这个阶段，没有证实该溶剂损失是否是由于IPA或水，或其两者混合物的损失。TGA显示没有与DSC中第二事件相关的重量损失，然后在高于220℃分解。热载台显微镜证实DSC中观察到的第二吸热事件是熔融。 [0528] 由丙-2-醇(晶型B)制备的磷酸盐的XRPD信息示于表6。 [0529] 由丙-2-醇制备的磷酸盐的结果概述： [0530] 脱水发生 熔融发生 TGA重量损失 HPLC纯度 67°C 116°C 2.6% 99.5% [0531] 对产品进行可变温度XRPD分析以说明DSC中观察到的溶剂损失是否导致形式的改变。样品加热至每个温度，保持3分钟，使平衡并收集XRPD图。以10度的增量将物质加热至100°C，收集图然后样品在100°C保持15分钟，收集第二个图。样品冷却回室温，得到最终的参考图。 [0532] 在室温及100°C时得到的XRPD图中仅有微小的变化，虽然其确实显示为可逆的，因为当冷却至室温时差别再次消失。 [0533] 从VT XRPD分析中得到表明，产品可能为水合物，其可可逆的失去水然后利用加热重新获得水，在氮气的惰性气氛下进行热/冷/热DSC实验。产品的样品加热到100°C，保持10分钟，冷却到30°C，保持5分钟，然后重新加热至250°C。第一次加热如预期显示溶剂损失。然而，第二次加热显示没有相应于溶剂损失的吸热事件，因此表明该过程在氮气的惰性气氛下是不可逆的。 [0534] 为了研究磷酸盐在环境条件下是否以可以在空气存在的温度下可逆的脱水的水合物存在，进行了一系列的TGA实验以弄清楚在环境条件下物质脱水有多快。在氮气氛下利用TGA设备将一系列的样品加热至100°C，然后冷却至25°C。样品在环境条件(空气中室温)下储存不同时间，然后重新进行TGA实验。作为比较，在氮气的惰性气氛下利用TGA进行热/冷/热实验；样品加热至100°C，冷却到25°C，并再次加热至100°C。 [0535] 这些结果显示磷酸盐容易在环境条件(假定为约25°C和40%RH)下水合。在30分钟内，敞口TGA锅中的8mg产物样品完全水合。结果表明对于任何潜在的规模放大是有希望的，因为其显示即使在干燥过程中部分或全部的水从样品中失去，一旦其在环境条件下储存时将重新水合。 [0536] 产品样品储存于25°C和94%RH的湿度室中保持88小时，然后没有观察到潮解。该物质所得的XRPD图与由乙醇结晶的磷酸盐得到的那些(参见实施例6)相匹配，而不是母体化合物。DSC分析显示两种适度的熔融，相应于由IPA结晶生成的晶型和由乙醇生成的晶型，乙醇形式的熔融显示为主要事件。在25°C时进行GVS分析，显示该物质是不吸湿的，因为在高于80%RH时观察到仅有 1.5重量%水的逐步吸收。有趣的是，相比于TGA中观察到的>2%，在0%~RH时，仅有0.5重量%水的损失。这种物质所得的XRPD图匹配于由乙醇结晶的产物所得的图，而并非母体化合物所得的图。DSC分析显示相应于熔融吸热事件加宽，虽然其仍然显示为单一事件。 [0537] 推测水的完全损失可仅出现在升高的温度，因此在40°C时进行第二GVS试验。40°C时，该产物显示在高于80%RH时有 2重量%水的逐步吸收，再次证明物质是不吸湿的。在这种~情况下，一旦放在0%RH环境中，物质损失 2.6重量%水，其与TGA中观察到的质量损失非常一~ 致。该物质所得的XRPD图与由乙醇中结晶的产物所得的图相匹配，而非母体化合物。DSC分析显示两种适度的熔融，相应于由IPA结晶生成的晶型和由乙醇生成的晶型，乙醇形式的熔融显示为主要的。 [0538] 实施例8：化合物(I)盐酸盐(模式1；命名为晶型H)的制备 [0539] 在室温利用旋涡，将HCl(在水中的37wt%的溶液)(88μl,0.88mmol,1当量)滴加到游离碱化合物(I)(350.22mg,0.88mmol,1当量)在TBME(17.5ml,50相对体积)中的溶液中，立即形成粘性白色固体。样品储存在振荡器中进行热/冷循环(40°C/RT,每次4小时)63小时。熟化过程中，混合物浓缩至约1/3原体积。通过真空过滤分离所得固体并用TBME(2x5ml)洗涤。抽滤干燥固体并在30°C/3mbar的真空烘箱中保持20小时，得到白色固体状的盐酸盐(158.69mg,42%，基于单盐酸盐的形成)。 [0540] 化合物(I)盐酸盐(晶型H)数据概述 [0541] [0542] [0543] 化合物(I)盐酸盐(晶型H)的XRPD信息参见表8和图19。 [0544] 产品的XRPD分析看起来表明HCl模式1(晶型H)的形成，然而离子色谱法结果与先前得到的HCl模式1(晶型H)(其表明为单盐酸盐)的不一致。这些结果没有预期到，并且与以下观察报告不匹配，即HCl模式2(晶型I，单盐酸盐)在40°C/75%RH储存时显示转化为HCl模式1(晶型H)。 [0545] 为了证实双-HCl盐的形成，盐酸盐(晶型H)(25.99mg)的样品在3%的EtOAc(1.3ml,50相对体积)中的水中形成浆液，混合物储存在振荡器中进行热/冷循环(40°C/RT,4h)72小时。得到无色胶。在另外两个证实分离物质的化学计量的尝试中，盐酸盐(晶型H)的样品用 3%的EtOAc中的水或TBME(3x750μl)洗涤，并抽滤干燥，不幸的是，在每种情况中分离得到的是粘性固体而不是所需固体。 [0546] 产品的VT-XRPD分析表明，高于80°C时，HCl模式1(晶型H)转化成新模式(HCl模式4)，然后高于100°C时，结晶性完全丧失。用于VT-XRPD的样品视觉分析显示在升高的温度时形成泡沫，一旦结晶性已经丧失，是挥发性物质(可能的TBME或过量HCl)损失的指示。TGA显示从45到105°C有3.4%的重量损失，相当于0.8当量的H2O，比观察到的TBME水平要高。重量损失可指示溶剂合物的存在，通过VT-XRPD观察该溶剂合物脱溶剂化为不同形式。事实上，HSM显示60°C附近有双折射损失，其可能指示从85°C脱溶剂化然后是熔融，或由于硅油的存在形成胶，伴随着溶剂损失。这些结果表明HCl模式1(晶型H)物质是溶剂合物，然而由于TBME(通过NMR)和两种重量损失(通过TGA)的存在，其不能证实物质是TBME溶剂合物还是水合物。 [0547] 实施例9：化合物(I)盐酸盐(模式2；命名为晶型I)的制备 [0548] 在室温旋涡的条件下，将HCl(37wt%水溶液)(95μl,0.95mmol,0.9当量)滴加到游离碱化合物(I)(399.72mg,1.01mmol,1当量)在EtOAc(12ml,30相对体积)中的溶液中，立即形成粘性白色固体。样品储存在振荡器中进行热/冷循环(40°C/RT,每次4h)63小时。所得固体通过真空过滤分离并用EtOAc(2x3ml)洗涤。抽滤干燥固体，并在30°C/3mbar的真空烘箱中保持20小时得到黄色固态的盐酸盐(晶型I)(151.71mg,35%，基于单盐酸盐的形成)。 [0549] 化合物(I)盐酸盐(晶型I)数据的概述 [0550] [0551] 化合物(I)盐酸盐(晶型I)的XRPD信息参见表9和图20。 [0552] 产品的分析证实HCl模式2(晶型I)物质为单盐酸盐，其显示与HBr模式1等结构。HSM显示相应于DSC中观察的宽吸热事件的熔融，同时VT-XRPD显示在熔融之前形式没有改变。这些结果表明物质是非溶剂化的，因此NMR中观察到的残余溶剂很可能捕集在晶格中，并在熔融时丧失，如在TGA中观察到的。在40°C/75%RH时，HCl模式2(晶型I)物质的储存显示其在相对湿度升高的水平下是不稳定的。 [0553] HCl模式1(晶型H)的分析 [0554] 在40°C/75%储存时，HCl模式2(晶型I)显示转化为HCl模式1(晶型H)。这个结果可指示，HCl模式1(晶型H)可能是单盐酸盐。对该样品进行质子NMR和TGA分析，试图确定HCl模式1(晶型H)物质的形式，因为实施例8的分析样品伴随有残余TBME和可能过量的HCl的存在。质子NMR证实残余TBME的缺乏，同时TGA显示逐步的4.6%的重量损失，相当于1.2当量的水。这些结果表明HCl模式1(晶型H)物质是化合物(I)的单水合单盐酸盐。 [0555] 实施例10：化合物(1)氢溴酸盐(模式1；命名为晶型J)的制备 [0556] 在室温旋涡的条件下，将HBr(48wt%的水溶液)(77μl,0.45mmol,0.9当量)滴加到化合物(I)游离碱(200.46mg,0.50mmol,1当量)在EtOAc(10ml,50相对体积)中的溶液中，立即形成粘性白色固体。样品储存在振荡器中进行热/冷循环(40°C/RT,每次4h)18小时。所得粘性固体通过真空过滤分离并用EtOAc(2x2ml)洗涤。抽滤干燥固体，并在30°C/3mbar的真空烘箱中保持14小时，得到黄色固态的氢溴酸盐(86.54mg,40%，基于单氢溴酸盐的形成)。 [0557] 化合物(1)氢溴酸盐(晶型J)数据的概述 [0558] [0559] [0560] 化合物(I)氢溴酸盐(晶型J)的XRPD信息参见表10和图21。 [0561] 分析证实HBr模式1(晶型J)为部分结晶的单氢溴酸盐，其显示与HCl模式2(晶型I)等结构。HSM和DSC分析表明在约138°C开始的熔融。如HCl模式2(晶型I)，提出该物质是非溶剂化的，且TGA中观察到的重量损失是由于熔融时在晶格内捕捉的溶剂损失。储存在40°C/75%RH时，显示转化为新模式-HBr模式2(晶型K)。 [0562] 实施例11：化合物(1)氢溴酸盐(模式2；命名为晶型K)的制备 [0563] HBr模式1(晶型J)储存在40°C/75%的相对湿度时，得到相应于HBr盐的新XRPD图。HBr模式1(晶型J)显示15小时后潮解，但是7天的延长储存后观察到结晶。 [0564] 化合物(1)氢溴酸盐(晶型K)数据的概述 [0565] [0566] 分析表明HBr模式2(晶型K)为单水合单氢溴酸盐，显示在约50°C开始脱水。这种物质的进一步的扩大化和分析可有益于进一步证实这些观察。 [0567] 实施例12：化合物(1)甲磺酸盐(晶型L)的制备 [0568] 室温下，甲磺酸(59μl,0.91mmol,0.9当量)滴加到游离碱化合物(I)(400.08mg,1.0mmol,1当量)在TBME(20ml,50相对体积)中的溶液中，立即形成粘性白色固体，混合物室温下搅拌16小时。显示有沉淀形成，取等分部分(aliquot)并通过真空过滤分离。由未改善干燥情况的分离样品得到粘性固体。剩余样品在室温下再搅拌8小时，加热至40°C并再搅拌 1.5小时，然后冷却至室温并搅拌14小时。取等分部分并通过真空过滤分离固体，得到粘性固体。将THF(1ml)加入到剩余混合物中，搅拌样品3小时。混合物储存在振荡器中进行热/冷循环(40°C/RT,每次4h)63小时，观察到蒸发。加入TBME(10ml)，通过真空过滤分离固体并用TBME(2x 2ml)洗涤。抽滤干燥固体，并在30°C/3mbar的真空烘箱中保持20小时，得到白色固态甲磺酸盐(晶型L)(256.73mg,51%，基于单甲磺酸盐的形成)。 [0569] 化合物(1)甲磺酸盐(晶型L)数据的概述 [0570] [0571] 化合物(I)甲磺酸盐(晶型L)的XRPD信息参见表11和图22。 [0572] 分析表明甲磺酸盐模式1为非溶剂化的单甲磺酸盐，在约126°C时熔融。水溶性确定为 140mg.ml-1，在该研究过程中所得盐中是最高的。发现样品是吸湿的，40°C和75%RH情~况下在15小时内观察到潮解。 [0573] 实施例13：化合物(I)马来酸盐(晶型M)的制备 [0574] 游离碱化合物(I)(400.85mg,1.01mmol,1当量)、马来酸(117.01mg,1.01mmol,1当量)和TBME(20ml,50相对体积)加入到烧瓶中，并在室温下搅拌16小时。观察到细微的黄色悬浮液并伴随有块状黄色固体。取等分部分，通过真空过滤分离固体，抽滤干燥并通过XRPD分析(与马来酸模式1一致)。剩余混合物在室温下再搅拌8小时。通过真空过滤分离固体，并抽滤干燥，并在30°C/3mbar的真空烘箱中干燥15小时，得到黄色固态马来酸盐(晶型M)(279.67mg,54%产率，基于单马来酸盐的形成)。 [0575] 化合物(I)马来酸盐(晶型M)数据的概述 [0576] 分析 结果 1HNMR 1当量的马来酸(峰与化合物(I)重叠),1.3%TBME ~ XRPD 与马来酸盐模式1一致 IC 1.1当量马来酸 DSC 尖吸热事件，在116.1°C(ΔH 75J.g-1)发生 HSM 观察到熔融，在112°C发生 TGA 重135到195°C有11.1%重量损失( 0.4当量马来酸) ~ HPLC 99.0%(最大%imp 0.31@1.11RRT) AQ溶解性 73mg.ml-1,pH 3.9 40°C/75%RH 7天–粘性固体，XRPD与马来酸盐模式1一致 [0577] 化合物(I)马来酸盐(晶型M)的XRPD信息示于表12和图23中。 [0578] 分析表明，马来酸盐模式1为熔点约为116°C的非溶剂化单马来酸盐。得到马来酸盐模式1的物质在超过75%RH时显示为吸湿的，在25°C/97%时观察到潮解，且粘性固体在40°C/75%RH得到，尽管通过XRPD与马来酸模式1一致。 [0579] 实施例14：化合物(I)龙胆酸盐(形式N)的制备 [0580] 游离碱化合物(I)(400.27mg,1.01mmol,1当量)、龙胆酸(155.25mg,1.01mmol,1当量)和EtOAc(8ml,20相对体积)在室温下加入到烧瓶中。混合物储存在振荡器中进行热/冷循环(40°C/RT,每次4h)63小时，得到淡黄色溶液。混合物冷却至5°C保持24小时，没有观察到沉淀。混合物冷却至-18°C保持24小时，形成淡黄色固体。利用玻璃器皿预冷却至-18°C，通过真空过滤分离固体。一旦分离并升温到室温，该样品变为黄色油状物。潮湿的样品在30°C/3mbar的真空烘箱中干燥20小时，得到黄色泡沫状的龙胆酸盐。(160.61mg,29%，基于单龙胆酸盐的形成)。 [0581] 化合物(I)龙胆酸盐(形式N)数据的概述 [0582] 分析 结果 1HNMR 1.1当量龙胆酸，11.8%EtOAc( 0.5当量) ~ XRPD 无定形 mDSC Tg 29°C(限制14和42°C) [0583] 没有观察到所需部分结晶龙胆酸模式1的形成，而观察到无定形单龙胆酸盐的形成。在试图结晶的物质的过程中，样品在小范围内溶剂中熟化，结果概述于下表。 [0584] 实施例15：化合物(I)龙胆酸盐(晶型O)的制备 [0585] 室温下，如实施例14中制备的无定形龙胆酸盐(形式N)(15mg)溶于乙腈(20vol)中得到溶液。缓慢蒸发溶剂至原体积的一半，得到晶体龙胆酸盐(晶型O)。 [0586] 化合物(I)龙胆酸盐(晶型O)数据概述 [0587] 分析 结果 1HNMR 1.0当量龙胆酸，5.3%MeCN(0.5当量) -1 DSC 吸热事件，始于92.1°C(ΔH 54J.g ) TGA 从85到115°C有1.7%重量损失 [0588] 利用Bruker AXS C2GADDS设备得到的XRPD峰列表和龙胆酸盐模式2的标记的XRPD衍射图可参见下述表13和图24。 [0589] 这些结果表明龙胆酸盐模式2(晶型O)物质为含有约0.5当量的乙腈的单龙胆酸盐，该乙腈的损失与吸热事件相关联。由于生成少量的物质，表明样品是否是半溶剂合物或含有捕捉的溶剂的进一步分析是不可能的。 [0590] 实施例16：化合物(I)富马酸盐(晶型P)的制备 [0591] 游离碱化合物(I)(400.18mg,1.01mmol,1当量)、富马酸(116.71mg,1.01mmol,1当量)和EtOAc(4ml,10相对体积)加入烧瓶中并在室温下搅拌16小时。得到非常稠的白色悬浮液。加入EtOAc(2ml)并取等分部分。通过真空过滤分离固体，抽滤干燥，通过XRPD分析(与富马酸盐模式1一致)。剩余混合物在室温下再搅拌3小时。通过真空过滤分离固体，用EtOAc(3x2ml)洗涤，抽滤干燥，并在30°C/3mbar的真空烘箱中干燥15小时，得到黄色固态富马酸盐(261.35mg,50%产率，基于单富马酸盐的形成)。 [0592] 化合物(I)富马酸盐(晶型P)数据概述 [0593] 分析 结果 1HNMR 1.0当量富马酸，无残余溶剂 XRPD 与富马酸盐模式1一致 DSC 尖锐吸热事件139.5°C(ΔH 102J.g-1) TGA 从170to 250°C有16.3%重量损失( 0.7当量富马酸) ~ HSM 观察到熔融，发生于135°C HPLC 99.1%(最大%imp 0.28@1.1RRT) AQ溶解性 54mg.ml-1,pH 4.1 40°C /75%RH 7天–没有看得见的改变，XRPD与富马酸盐模式1一致 GVS 非吸湿性的，从0到90%RH可逆的吸收<0.4wt% [0594] 化合物(I)富马酸盐(晶型P)的XRPD信息参见表14和图25。 [0595] 分析表明富马酸模式1是非溶剂化单富马酸盐，在约140°C时熔融。水溶性确定为约50mg.ml-1，是该项研究中所得盐中最低的之一。GVS分析证实该物质是不吸湿的，从0到90%RH有少于0.4wt％的水吸收。 [0596] 实施例17：化合物(I)L-苹果酸盐(晶型Q)的制备 [0597] 游离碱化合物(I)(400.19mg,1.01mmol,1当量)、L-苹果酸(135.35mg,1.01mmol,1当量)和EtOAc(20ml,50相对体积)加入到烧瓶中并在室温下搅拌24小时。观察到酸不完全的溶解。混合物加热至40°C并搅拌1.5小时，接着冷却至室温并再搅拌14小时。混合物冷却至5°C保持72h-没有观察到较多沉淀。混合物冷却至–18°C保持30小时-形成一些沉淀。样品在室温下搅拌1小时得到流动的悬浮液。真空分离固体，用EtOAc(2x3ml)洗涤，抽滤干燥，并在30°C/3mbar的真空烘箱中干燥14小时得到白色固态L-苹果酸盐(325.99mg,61%产率，基于单L-苹果酸的形成)。 [0598] 化合物(I)L-苹果酸盐(晶型Q)数据概述 [0599] [0600] 化合物(I)L-苹果酸盐(晶型Q)的XRPD信息参见表15和图26。 [0601] 分析表明L-苹果酸盐模式1物质是非溶剂化单苹果酸盐，在约81°C时熔融。L-苹果酸盐模式1看起来是吸湿的，因为在40°C/75%RH情况下在15小时内出现潮解。然而，在40°C/75%RH延长储存(72小时)时，观察到新固体形式的结晶。XRPD分析证实这种物质与L-苹果酸盐模式1(晶型Q)不一致，给出了L-苹果酸盐模式2(晶型R)的鉴定。 [0602] 实施例18：化合物(I)L-苹果酸盐(晶型R)的制备 [0603] L-苹果酸盐晶型Q的样品(75.45mg)储存在40°C/75%RH保持72小时，2小时内观察到潮解，72小时内出现结晶。样品在40°C/3mbar的真空烘箱中干燥18小时得到白色固态L-苹果酸盐(晶型R)。对在40°C/75%RH晶型Q的储存过程中形成的晶型R样品的NMR分析证实其为单苹果酸盐。有趣的是，DSC分析表明该物质为非溶剂化的，比L-苹果酸盐晶型Q具有更高的熔点(103.5°C)。 [0604] 化合物(I)L-苹果酸盐(晶型R)数据概述 [0605] 分析 结果 1HNMR 1.1当量苹果酸，无残余溶剂 -1 DSC 吸热事件103.5°C(81J.g ) [0606] 尝试形成较大量的L-苹果酸盐模式2。化合物样品(75.45mg)储存在40°C/75%RH保持72小时，2小时内出现潮解，72小时内出现结晶。样品在40°C/3mbar的真空烘箱中干燥18小时得到白色固态产物。 [0607] 化合物(I)L-苹果酸盐(晶型R)数据概述－按比例增加 [0608] 分析 结果 1HNMR 1.1当量苹果酸，无残余溶剂 XRPD 与L-苹果酸盐模式2(晶型R)一致 DSC 吸热事件103.6°C(ΔH 84J.g-1) TGA 从175到255°C有17.5%重量损失( 0.6当量苹果酸) ~ GVS 从0到90%RH可逆的吸收~2.5wt%H2O [0609] 化合物(I)L-苹果酸盐(晶型R)的XRPD信息参见表16和图27。 [0610] 这些结果证实L-苹果酸盐模式2(晶型R)是无水单L-苹果酸盐。GVS分析表明该物质比苯磺酸盐和柠檬酸盐更少的吸湿。 [0611] 本发明所述方面的不同的修饰和变形对于本领域技术人员是明显的，而没有偏离本发明的范围和精神。虽然本发明连同具体优选的实施方式已经公开，应该理解的是本发明要求保护的不应局限于这些具体实施方式。事实上，对本领域技术人员明显的实施本发明所述模式的不同修饰都在所附权利要求的范围之内。 [0612] 表1：化合物(I)结晶游离碱(晶型A)的XRPD峰 [0613] [0614] 表2：化合物(I)L-酒石酸盐(晶型D)的XRPD峰 [0615] 角度 强度 2-θ° % 3.82 51.2 7.57 100.0 8.12 14.6 10.53 17.1 11.39 15.0 12.00 15.3 13.54 27.4 15.15 52.6 16.35 20.2 16.88 41.0 17.37 21.7 18.51 24.8 18.98 20.6 19.77 69.9 21.06 31.6 22.70 55.2 23.47 77.1 24.66 43.7 28.73 59.2 [0616] 表3：化合物(I)柠檬酸盐(晶型F)的XRPD峰 [0617] 角度 强度 2-θ° % 5.14 21.4 7.73 17.5 10.24 30.8 12.70 19.8 13.06 23.2 14.42 10.0 15.30 22.7 15.98 11.4 16.74 23.9 17.24 33.1 18.05 42.3 19.04 35.8 20.23 17.0 21.04 22.7 22.45 40.3 22.75 37.9 24.01 82.5 25.43 100.0 26.51 29.7 27.48 24.0 28.77 28.8 29.71 27.0 [0618] 表4：化合物(I)苯磺酸盐(晶型G)的XRPD峰 [0619] 角度 强度 2-θ° % 5.72 17.5 11.45 22.8 11.79 24.3 15.56 100.0 16.57 61.1 18.04 63.9 19.14 52.7 20.02 71.1 21.05 57.5 22.80 85.1 23.16 86.6 24.44 68.9 25.40 49.7 28.74 54.7 [0620] 表5：由乙醇得到的化合物(I)磷酸盐(晶型C)的XRPD峰 [0621] 角度 强度 2-θ° % 6.49 100.0 8.91 14.7 9.75 16.8 10.52 15.6 13.03 7.1 15.44 11.7 16.27 68.6 17.85 15.5 18.29 20.7 19.52 72.1 20.02 32.5 21.11 20.7 22.80 21.1 24.92 47.1 28.33 18.6 29.41 21.4 [0622] 表6：由IPA得到的化合物(I)磷酸盐(晶型B)的XRPD峰 [0623] 角度 强度 2-θ° % 6.46 100.0 8.88 15.3 9.67 14.6 10.47 13.3 12.78 9.5 15.33 9.3 16.12 48.1 16.82 9.8 18.13 22.5 19.38 46.8 19.95 19.2 20.97 17.9 24.11 17.4 24.83 28.7 26.54 14.7 28.11 16.8 [0624] 表7：化合物(I)L-酒石酸盐(晶型E)的XRPD峰 [0625] [0626] 表8：化合物(I)盐酸盐(晶型H)的XRPD峰 [0627] 角度/2-θ° 强度/% 5.6 100.0 8.6 8.0 9.5 6.2 10.9 10.2 11.2 12.2 12.7 20.5 13.0 8.9 14.3 5.9 16.0 10.9 17.3 8.0 17.7 9.4 18.8 15.9 19.1 9.8 20.3 8.5 20.7 9.4 22.9 8.1 23.6 10.1 24.5 10.7 25.0 8.4 25.5 9.9 25.8 10.2 26.4 8.4 29.1 10.2 [0628] 表9：化合物(I)盐酸盐(晶型I)的XRPD峰 [0629] 角度/2-θ° 强度/% 4.9 41.7 6.4 100.0 7.5 65.5 12.1 19.0 14.4 30.3 19.8 25.1 21.5 31.0 23.4 26.2 25.7 28.8 [0630] 表10：化合物(I)氢溴酸盐(晶型J)的XRPD峰 [0631] 角度/2-θ° 强度/% 6.4 100.0 7.2 57.0 12.0 20.5 14.4 38.7 17.1 22.7 19.6 35.3 21.4 37.9 25.5 40.4 [0632] 表11：化合物(I)甲磺酸盐(晶型L)的XRPD峰 [0633] 角度/2-θ° 强度/% 6.3 100.0 7.9 6.4 12.5 18.6 13.4 3.7 14.6 9.5 15.9 5.4 16.5 26.4 17.5 23.5 18.1 18.6 18.7 4.1 19.3 5.5 20.0 12.9 20.6 10.5 20.9 8.3 21.7 20.2 22.6 18.0 23.8 9.8 24.5 5.6 25.1 10.5 25.5 7.0 26.1 10.4 27.5 5.1 29.1 4.9 29.7 6.3 30.3 4.2 [0634] 表12：化合物(I)马来酸盐(晶型M)的XRPD峰 [0635] 角度/2-θ° 强度/% 3.8 21.7 7.6 100.0 8.5 28.0 10.8 5.6 11.4 8.6 12.2 37.2 15.2 48.5 15.8 11.1 17.0 10.0 18.0 18.1 18.8 13.5 19.4 24.1 20.3 8.9 21.6 6.0 22.6 6.2 23.6 23.2 24.3 22.0 24.8 20.5 26.0 14.7 27.2 10.6 27.9 16.2 28.2 8.6 28.8 4.8 29.9 5.9 30.2 5.0 31.7 5.1 32.7 4.2 33.2 4.7 [0636] 表13：化合物(I)龙胆酸盐(晶型O)的XRPD峰 [0637] 角度/2-θ° 强度/% 6.318 20.5 12.161 21.3 12.449 19.6 13.13 59.5 14.414 21.2 14.831 18.5 16.369 17.2 17.122 18.1 18.787 25.7 19.485 19 20.419 17.2 23.371 100 23.769 54.1 [0638] 表14：化合物(I)富马酸盐(晶型P)的XRPD峰 [0639] 角度/2-θ° 强度/% 3.8 14.1 7.7 100.0 8.1 14.6 8.8 44.6 10.2 11.2 11.3 9.9 13.1 45.4 15.2 28.7 15.5 16.7 16.5 27.1 17.7 60.0 19.1 13.7 19.6 10.9 20.0 6.0 20.9 5.0 21.5 5.4 21.9 11.2 22.7 9.9 23.3 28.6 23.8 25.4 24.1 18.3 25.0 20.0 25.3 9.6 26.7 17.7 27.9 8.8 28.9 8.9 [0640] 表15：化合物(I)L-苹果酸盐(晶型Q)的XRPD峰 [0641] 角度/2-θ° 强度/% 6.7 39.7 8.6 60.0 9.3 44.4 11.0 19.7 12.7 100.0 13.6 41.4 14.1 37.1 15.1 47.5 15.8 27.5 16.5 26.9 17.8 38.2 18.7 56.4 19.5 41.9 19.8 43.9 21.2 28.2 22.5 33.2 23.5 29.4 24.9 37.3 25.7 42.3 [0642] 表16：化合物(I)L-苹果酸盐(晶型R)的XRPD峰 [0643] 角度/2-θ° 强度/% 6.773 100 9.851 10.7 12.191 6.9 13.364 39.3 13.587 37.3 14.145 6.3 15.883 17.5 16.44 22.9 17.331 22.2 17.753 17.8 19.733 27.6 20.118 13.4 20.496 29.8 20.837 15.7 21.299 12.4 22.231 29.3 23.273 28.7 23.828 11.5 24.19 15 24.606 11.8 25.182 14.7 25.673 13.6 26.026 23.3 26.31 13.9 26.905 10.2 27.779 9.9 28.775 17.9 31.109 8.9 32.352 7 33.239 9.3 [0644] 表17：化合物(I)溴化物(晶型K)的XRPD峰 [0645] 角度/2θ° 强度/％ 5.732 100 16.386 32.1 17.675 31.8 18.369 46.3 19.633 45.9 20.542 59 24.136 85.3 25.272 59.5 25.976 46.4 28.119 45.2 |
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