用于动物的口腔基质测量的方法和工具 |
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| 申请号 | CN200680046387.8 | 申请日 | 2006-10-13 | 公开(公告)号 | CN101325922B | 公开(公告)日 | 2012-06-27 |
| 申请人 | 希尔氏宠物营养品公司; | 发明人 | D·S·谢尔; V·M·巴恩斯; L·科夫曼; R·里奇特; 徐韬; | ||||
| 摘要 | 一种齿龈轮廓探测器，包括杆部分和延长的末梢部分，该延长的末梢部分在其近端处附连在杆部分上，该末梢部分为非平面地弯曲的和/或卷曲的，并且携带有标记，该标记的数目和刻度指示测量长度；该探测器至少以标记的数目和/或刻度进行适应，用于方便地测量清醒的非人类动物的 牙齿 的 龈缘 。一种用于量化清醒的非人类动物的牙斑的方法，包括(a)将这种齿龈轮廓探测器的末梢部分与动物牙齿的龈缘对齐；(b)参考探测器的末梢部分上的标记，测量龈缘的长度，以及如果在龈缘处存在牙斑沉积，测量牙斑沉积的长度；和(c)通过比较牙斑沉积的长度与龈缘的长度，计算牙齿的牙斑得分。 | ||||||
| 权利要求 | 1.一种齿龈轮廓探测器，包括杆部分和延长的末梢部分，所述延长的末梢部分在其近端处附连在所述杆部分上，所述末梢部分为非平面地弯曲的和/或卷曲的，并且携带有标记，所述标记的数目和刻度指示测量长度；所述探测器至少以所述标记的数目和/或刻度进行适应，用于方便地测量清醒的非人类动物的牙齿的龈缘。 |
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| 说明书全文 | 用于动物的口腔基质测量的方法和工具[0001] 相关申请的交叉引用 [0002] 本申请要求2005年10月14日提交的美国临时申请号No.60/727,091的优先权，该公开通过引用而结合于本发明中。 技术领域[0003] 本发明涉及用于测量非人类动物(non-human animal)的诸如牙斑的口腔基质(oral substrate)的方法，以及对于这种方法有用的工具。 [0004] 发明背景 [0005] 在美国，与口腔健康相关的问题，尤其是牙周疾病，是小动物兽医进行的一些最常见的诊断。例如，在一次调查中，牙结石(dentalcalculus)和齿龈炎在私人兽医从业处所检查的犬科动物和猫科动物中的流行度排名第一和第二。见Lund等人(1999)，J.Am.Vet.Med.Assoc.214：1336-1341。 [0006] 牙结石和齿龈炎的共同病因是菌斑，如果任由该菌斑积聚和成熟，会助长疾病进展(disease progression)。例如，参见Lindhe等人(1975)，J.Periodontal Res.10：243-255。这反过来又可导致组织破坏、牙齿和齿龈的功能丧失、脱牙和可危及总体健康的全身感染的可能性。 [0007] 减少牙斑的形成和积聚的工作需要精确地且可重复地量化牙斑水平。多年来，不仅在人类牙周病学领域内而且在兽医牙科学中，人们已经实施、修改和改进用于牙斑和牙结石测量的多种牙斑和牙结石的指标和技术。例如，参见Hennet(1999)，J.Vet.Dent.1623-29的评论。一些早期提出的用于犬科动物的技术量化整个牙冠表面上的牙斑积聚。然而，据信更具体地是龈缘上的牙斑对牙周病，包括在诸如犬科动物的非人类动物中的牙周病的发展具有最大的影响。 [0008] 由Harrap(1974)，J.Clin.Periodontal.1：166-174提出的一种用于人类患者的牙斑评价方法关注龈缘。Xu&Barnes(2003)，J.Clin.Dent.14(4)：93-97提出了用于人类患者的“改进的龈缘牙斑指标”(MGMPI)，并且还描述了一种新型的弯曲探测器，其可用作测量龈缘处的牙斑的工具，以评定MGMPI。 [0009] 由Logan&Boyce(1994)，J.Vet.Dent.11(2)：58-63提出了一种大致精确的且可重复的犬科动物模型的示例。这种模型倾向于是资源密集的并且需要通常不适于或不便于非人类动物的常规使用的专门过程，尤其是在如下情况下，即：需要在处理(treatment)过程中反复地测量牙斑水平，或者需要例如由家中的动物护理人在非兽医临床环境下完成牙斑测量。因此，需要用于量化在非人类动物龈缘处的牙斑的新方法，尤其需要对专门过程的依赖更少的此类方法。更具体地，存在对此类方法的需求，此类方法减少了镇静或麻醉的必要性，而不负面地影响动物的顺从性或协作性。至少维持先前技术的精确度和重复性的这种方法将尤其有利，该先前技术例如Logan-Boyce模型(参见Logan&Boyce(1994)，如上所述)。适合在此类方法中使用的诸如探测器的工具将同样地在本领域中显示出有用的进步。 发明内容[0010] 本发明提供一种齿龈轮廓探测器，其包括杆部分和伸长的末梢部分。该末梢部分在其近端处附连至杆部分上，并且为非平面地弯曲的(bent)和/或卷曲的(curved)。该末梢部分携带有标记，标记的数目和刻度指示测量的长度。该探测器至少以这种标记的数目和/或刻度进行适应，用于方便地测量清醒的非人类动物的牙齿的龈缘。 [0011] 本发明还提供一种用于量化清醒的非人类动物的口腔基质(例如牙斑)的方法。该方法包括(a)将上述的齿龈轮廓探测器的末梢部分与动物牙齿的龈缘对齐；(b)参考探测器的末梢部分上的标记，测量龈缘的长度，以及如果在龈缘处存在口腔基质沉积，则测量口腔基质沉积的长度；和(c)通过比较基质沉积的长度与龈缘的长度，计算牙齿的基质得分。 [0012] 本发明还提供一种方法，用于进行研究以评价用于减少非人类动物的牙斑积聚的测试方案(regimen)的效果。该方法包括通过针对动物的多颗牙齿中的每颗牙齿执行上述步骤(a)、(b)和(c)以量化牙斑，以及与参考方案相比较，在测试方案开始之前的第一时间点和在测试方案开始之后的第二时间点计算多颗牙齿的平均牙斑得分。 [0013] 本发明提供一种套件，其包括(a)经过配制以减少非人类动物的牙斑积聚的食物和(b)上述的齿龈轮廓探测器。 [0014] 本发明还提供一种销售经配制以减少非人类动物的牙斑积聚的食物的方法。该方法包括一起销售或一起包装上述的食物。 [0015] 本发明还提供一种装置，其用于将涉及由动物护理人对上述齿龈轮廓探测器的使用的信息进行传达。该传达装置可示范性地包括标签、包装说明书、手册、广告、计算机可读的数字或光学介质、声频或视频介绍、网页或者其组合。 [0017] 图1是本发明的示范性的齿龈轮廓探测器的视图。 [0018] 图2以两个放大视图表示本发明的示范性齿龈轮廓探测器的末梢部分。 [0019] 发明详述 [0020] 本发明提供一种用于量化非人类动物的龈缘处的牙斑的新模型，其以如下方式偏离由如上所述的Xu&Bames(2003)所提出的用于人类患者的MGMPI模型，该方式适应人类和非人类动物之间的差异，例如在齿系和顺从性方面的差异。 [0021] 诸如犬科动物和猫科动物的非人类动物的齿系通常比人类的更加地不规则，尤其在龈缘的表面状况方面。在此术语“齿龈轮廓”表示与诸如犬科动物或猫科动物的非人类动物的高度不统一的(相比于人类齿系)牙齿的尺寸和形状有关的不规则的、起伏不平的龈缘。因此，为人类所开发的MGMPI探测器用作非人类动物的齿龈轮廓探测器不一定理想。 [0022] 此外，非人类动物在获得针对齿龈轮廓检查的协作性方面存在显著的挑战。在涉及对用于减少牙斑的多种处理的比较的研究中，需要重复的口腔病预防(例如在每次处理前建立基准(baseline))的任何方法进一步增大了这种挑战。这种研究中的动物协作通常通过麻醉实现，并且对于专业资源要求非常苛刻，因此耗费成本。 [0023] 如下文更详细地提出，由本发明提供的新型齿龈轮廓探测器及其使用方法解决了在将诸如MGMPI的人类模型转换至非人类动物时所遭遇一个或多个问题。 [0024] 图1显示了本发明的齿龈轮廓探测器的一个示范性实施例。该探测器包括杆部分1，其在其第一端处附有延长的末梢部分3a。在一个实施例中，如图1所示，第二延长的末梢部分3b附在杆部分1的第二端处。第二末梢部分3b可具有与末梢部分3a相同的、相似的或相反的构造。但应注意的是，第二末梢部分3b在此是可选的。末梢部分3a具有自由远端7和近端4，末梢部分3a在该近端4处附在杆部分1上。如图所示，杆部分可选地具有邻近于末梢部分3a的连接点的锥体区域2a和(在具有第二末梢部分的实施例中)邻近于第二末梢部分3b的联接点的第二锥体区域2b。 [0025] 在图2中对说明性实施例中更加详细地示出了末梢部分3a的构造，该图2具有两个视图，以能够更加清楚地辨别末梢部分的三维形状。重要地，末梢部分为非平面地弯曲的和/或卷曲的。在此术语“弯曲”指的是在沿末梢部分在一个或多个点处经历方向纵向变化的或多或少地突变，例如由在图2的点5处的弯曲所示。在此的术语“卷曲”指的是在沿末梢部分在一个或多个区域中经历方向的逐渐纵向变化，例如由在从图2的点6基本延伸至末梢部分的远端7的区域中的曲线所示。末梢部分的确切几何形状可变化，但是始终为非平面的，即当该设备位于平坦的表面上时，末梢部分不能在其整个长度上与平坦的表面连续地接触。这至少通过在图2的两个视图中明显的阴影而显得清楚，在每个视图中，末梢部分看上去搁置于平坦的表面上。在图2所示的具体实施例中，末梢部分在与杆部分的锥体区域2a相交的第一平面中具有弯曲(示范性地为大约20°)。该弯曲位于在末梢部分的近端4附近的点5处。在相同的具体实施例中，末梢部分具有卷曲(示范性地为大约180°)，其在远离该弯曲的点6处开始，并且基本延伸至远端7，至少该曲线的大部分位于不与杆部分的锥体区域2a相交的第二平面中。 [0026] 末梢部分携带有标记，标记的数目和刻度指示在末梢部分上的测量长度。通常地，但并非必须地，标记的数目和刻度指示离远端的曲线距离。可使用任何标记系统，但在一个实施例中，如图2所示，该标记包括交替的具有末梢部分本体的对比色的宽带和窄带。例如，宽带11从距离末梢部分的远端7的2mm处延伸至4mm处，第一窄带12位于离末梢部分的远端7的6mm处，宽带13从离末梢部分远端7的8mm处延伸至10mm处，第二窄带14位于离末梢部分的远端7的12mm处。 [0027] 该探测器至少以末梢部分上的标记的数目和/或刻度进行适应，但是典型地还以末梢部分的具体的三维形状进行适应，由例如在此所述的方便地测量清醒的非人类动物的牙齿的龈缘的方法使用。已经发现图2所示的探测器的三维形状和标记便于用于犬科动物。此外，借助于小的改进或不做改进，这种探测器也便于用于猫科动物。本领域技术人员可基于在此的公开而针对任何的非人类动物选择合适的非平面地弯曲的和/或卷曲的形状以及标记的合适数目和刻度。然而，在优选实施例中，末梢部分为基本如图2所示的弯曲的和/或卷曲的，并且至少以标记的数目和/或刻度进行适应，用于清醒的猫科动物或犬科动物。在一个实施例中，探测器具有在一端上的一套标记和在另一端上的另一套标记，例如，诸如一端上的米制刻度和另一端上的英制刻度的不同刻度，或者诸如一端上的1mm刻度和另一端上的2mm刻度的不同刻度。 [0028] 限定D毫米的距离增量的标记典型地允许测量至少达到0.5×D毫米的精度，这可以轻易用眼睛估计两个邻近标记之间的中点。因此，利用当从末梢部分的远端测量时限定的多个2mm增量的标记，图2的示范性的探测器允许沿齿龈轮廓的测量至少达到1mm的精度。已经发现这种精度对于根据在此所述的方法使用该探测器是足够的。 [0029] 本发明的齿龈轮廓探测器在许多方面都是有用的，例如作为诊断工具或者作为教学用具，以演示口腔基质的积聚和去除。然而，主要地，该工具为用于量化口腔基质积聚的一种新方法提供基础。 [0030] 在一个实施例中，上述的齿龈轮廓探测器用在用于量化清醒的非人类动物的口腔基质的方法中。该方法包括(a)将探测器的末梢部分与动物牙齿的龈缘对齐；(b)通过参考末梢部分上的标记测量龈缘的长度，以及如果在龈缘处存在口腔基质沉积，测量口腔基质沉积的长度；和(c)通过比较基质沉积的长度与龈缘的长度，计算该牙齿的基质得分。 [0031] 可由这种方法量化的口腔基质的类型示例包括牙斑、牙结石、污渍和碎屑。在一系列的实施例中，该基质为牙斑。 [0032] 已经发现相比于具有基本平面构造的齿龈轮廓探测器(如所描述的其根据上述的Xu&Barnes(2003)的MGMPI模型用于人类)，具有如下末梢部分的齿龈轮廓探测器更加紧密地跟随犬科动物齿系的龈缘的曲率，该末梢部分为例如图2中的非平面地弯曲的和/或卷曲的末梢部分，或者接近于例如用于人类牙科的Nabers 2N牙周探测器的形状(但是具有如在此提供的标记)。该改进的对齐使得精确的且可重复的测量能够进行，而不会对动物造成不适。 [0033] 虽然动物在该过程期间是清醒的，但是可在测量之前服用诸如阿托品(例如，每公斤体重大约0.02至大约0.1mg，皮下用药)的药物，以暂时减少可否则使对龈缘的观察模糊或扭曲的唾液流。备选地或另外地，可在测量之前将合适的染料作为显示剂(disclosing agent)施加至龈缘的区域，以增强牙斑的可视性，该合适的染料例如亚甲蓝的稀释(例如，大约0.05％至大约5％)水溶液、中性红或诸如曙红或赤藓红的荧光素基染料。示范性地，已经发现大约0.5％至大约2％的曙红的水溶液(aqueous eosin)适用。 [0034] 对于所选的牙齿测量了龈缘的长度和龈缘处的牙斑沉积(如果存在的话)的长度后，该牙齿的牙斑得分可计算为例如具有牙斑的龈缘的总长度的比值或百分数。优选地，对于多颗牙齿确定龈缘牙斑，并且平均的牙斑得分计算为例如所评价的每颗牙齿的得分的平均值。对于其它类型的口腔基质可相似地形成得分，这些其它类型的口腔基质包括牙结石、污渍和碎屑。 [0035] 该方法可用于任何非人类动物，例如非人类哺乳动物。示范性地，在哺乳动物当中，该动物可为食肉目的成员，包括但不限于犬科动物和猫科动物。在具体实施例中，动物为伴侣动物。在此“伴侣动物”为由人类护理人作为宠物饲养的任何种类的个体动物，或者已经被普遍地驯化为宠物的许多种类的任何个体动物，包括狗(犬属家族)和猫(猫属家族)，而不管个体动物是否为了伴侣关系而被单独地或部分地喂养。因此，在此“伴侣动物”包括工作犬、为啮齿动物控制而饲养的农场猫等，以及宠物狗和宠物猫。 [0036] 人类患者牙斑的量化典型地包括检查所有的牙齿。由于动物的不适和/或焦虑而导致缺乏配合，因而这对于清醒动物常常技术上是不可行的。然而，示范性地在犬科动物中，已经发现当测量仅限于对这种测量在不引起过度的焦虑或不适行为的情况下可接近的牙齿时，能够获得代表性的结果。 [0037] 在犬科动物中，为了本目的可接近的牙齿包括上颌骨的第三切齿、犬齿、第一至第四前臼齿和第一臼齿；和下颌骨的犬齿和第二至第四前臼齿。因此，在一个实施例中，对于犬科动物确定平均牙斑得分的多颗牙齿选自上述牙齿。 [0038] 上述方法的使用在评价用于减少非人类动物的牙斑积聚的方案中可尤其有利。这种方案可包括例如饮食控制、药物、提供可咀嚼的玩具或食品、口腔健康介入(例如，洗刷)等方案中的一种或多种。在一个实施例中，所评价的方案为饮食方案，包括例如给动物喂食配制以减少牙斑积聚的食物。 [0039] 在一个实施例中，一种用于进行研究以评价用于减少非人类动物的牙斑积聚的测试方案的效果的方法包括通过与参考方案相比较，在测试方案开始之前的第一时间点和在测试方案开始之后的第二时间点量化动物的牙斑。通过上述方法，更具体地为在多颗牙齿中量化龈缘牙斑的方法，在动物清醒时完成了对牙斑的量化。例如，当所关心的动物是犬科动物时，对犬科动物对其确定平均牙斑得分的多颗牙齿选自上颌骨的第三切齿、犬齿、第一至第四前臼齿和第一臼齿；以及下颌骨的犬齿和第二至第四前臼齿。 [0040] 上述的研究可以是，但并非必须是涉及多只动物的随机化试验。在一个实施例中，相同的动物在交叉试验设计或平行试验设计中经历测试方案和参考方案。意外地是已经发现，通过这种方法无需附加的口腔病预防即可获得精确的且可重复的结果，口腔病预防会昂贵而耗时，并且通常需要在开始每次处理或方案之前进行麻醉。 [0041] 用于牙斑量化的第二时间点(即在测试方案或参考方案开始之后的时间点)可处于开始之后的任何方便的时间间隔。然而已经发现，在第1天时牙斑得分可能低并且变化性较大，而到第4天时牙斑水平开始饱和，导致丧失灵敏度。因此，在方案开始之后的牙斑量化的优选时间通常为在每种方案开始之后的大约2天至大约3天。 [0042] 值得注意地，根据本发明的牙斑量化的方法足够地方便并且对动物不产生压力，通过合适的变化，这些方法可用于非临床环境，并且在一些实施例可由非专业人员例如动物护理人使用。由于牙斑积聚是通常对口腔健康并且尤其对齿龈健康(例如，齿龈炎的发生率和严重性)有害的因素，故通过使对接受用于减少牙斑的方案(例如，包括药物、食物、可咀嚼物品、机械的口腔健康装置、牙粉、清洗剂等方案中的一种或多种的方案)的动物的牙斑积聚的监测成为可能，本工具和方法可提高口腔健康。 [0043] 因此，在另一个实施例中，一种用于提高非人类动物的口腔健康的方法包括(a)给动物喂食经过配制以减少牙斑积聚的食物和(b)利用在此描述的齿龈轮廓探测器监测动物的一颗牙齿至多颗牙齿的龈缘处的牙斑积聚，该齿龈轮廓探测器至少以标记的数目和/或刻度进行适应，用于方便地测量清醒的非人类动物的牙齿的龈缘。这种监测可由例如动物护理人或专业人员完成。 [0044] 由牙斑积聚部分地造成的或恶化的齿龈炎和其它口腔疾病在病源学中是包括心血管疾病的多种全身失调的可能因素。因此，在又一个实施例中，一种用于提高非人类动物的全身健康的方法包括(a)给动物喂食经过配制以减少牙斑积聚的食物和(b)利用在此描述的齿龈轮廓探测器监测动物的一颗牙齿至多颗牙齿的龈缘处的牙斑积聚，该齿龈轮廓探测器至少以标记的数目和/或刻度进行适应，用于方便地测量清醒的非人类动物的牙齿的龈缘。又一次，这种监测可由例如动物护理人或专业人员完成。 [0045] 在另一个实施例中，为例如护理人提供一种套件，其包括用于建立用于减少牙斑的方案的材料(例如，药物、食物、可咀嚼的物品、机械的口腔健康装置、牙粉、清洗剂等材料中的一种或多种材料)和在此描述的齿龈轮廓探测器。 [0046] 说明性地，当该方案至少部分地为饮食方案时，这种套件包括(a)经过配制以减少非人类动物的牙斑积聚的食物和(b)上述的齿龈轮廓探测器，其至少以齿龈轮廓探测器的末梢部分上的标记的数目和/或刻度进行适应，用于方便地测量清醒动物的牙齿的龈缘。该食物和探测器可一起地或独立地包装。 [0047] 可选地，该套件还包括用于将信息传达至动物护理人的装置。这种信息可包括与将食物喂给动物相关的使用齿龈轮廓探测器的指示，以评价或监测食物在减少牙斑积聚方面的效果。传达装置可包括任何合适的介质，其包括例如印刷品、视频显示器、录音、计算机接口、计算机可读的光学和数字媒介、万维网以及其任意组合。这种传达装置的具体示例包括但不限于产品标签、说明书、手册、传单、广告、公告、录音磁带、录像磁带、DVD、CD-ROM、计算机可读芯片、卡片和碟片、计算机存储器或网页。该传达装置可将护理人引导至其它信息源，例如电话帮助热线、网址等。 [0048] 这种传达装置本身是本发明的另一个实施例，其携带有关在此描述的齿龈轮廓探测器的使用的信息，例如用于与将食物喂给非人类动物以评价或监测食物在减少牙斑积聚方面的效果相关的这种应用的指示。 [0049] 可选地，该套件还包括合适的染料作为用于增强牙斑的可视性的显示剂，例如亚甲蓝、中性红或诸如曙红或赤藓红的荧光素基染料，其通常以稀释的(例如大约0.05％至大约5％)水溶液的形式存在。在一个实施例中，该显示剂为大约0.5％至大约2％的曙红的水溶液。可选地，该套件还包括用于将这种显示剂施加至龈缘的装置。这种装置可示范性地包括喷药瓶、药签(可选地安装在棍上，类似于Q-tips 棉签)、棉球、毛巾、抹布或基本上相当于这些装置中的任一种的装置。在一个实施例中，显示剂预包装在施加装置中，例如在包含药剂的喷药瓶或浸有药剂的药签中。 [0050] 在另一个实施例中，本发明提供一种销售经过配制以减少非人类动物的牙斑积聚的食物的方法。该方法包括和食物一起销售或一起包装上述的齿龈轮廓探测器，该齿龈轮廓探测器至少以标记的数目和/或刻度进行适应，用于方便地测量清醒动物的牙齿的龈缘。一起销售计划可示范性地包括以下技巧中的一种或多种： [0051] 食物和探测器的一起宣传； [0052] 食物和探测器的一起贴商标，包括例如印刷或雕刻在探测器杆部分上的关于食物的商标名称或标志； [0053] 在可销售食物的零售点(retail outlet)或兽医办公室对探测器进行销售点展示； [0054] 将用于购买探测器的赠券附在食物包装上，例如以打折的价格； [0055] 如果一起购买食物和探测器，则对食物和/或探测器的价格打折； [0056] 在至少购买最低数量的食物时免费赠送探测器；等等。 [0057] 可选地，这种一起销售计划可以可选地还包括上述的用于将信息传达至动物护理人的装置。 [0058] 在一些实施例中，这种一起销售计划可包括与专业动物清洁服务(包括牙齿清洁)和/或由兽医办公室或诊所提供的口腔病预防计划进行搭卖。 [0059] 本发明不限于在此描述的具体的方法、协议和试剂，因为它们可发生变化。此外，在此使用的术语仅用于描述具体的实施例的目的，而不意图限制本发明的范围。如在此处和所附权利要求中所使用的，单数形式“一个”，“一种”以及“该”包括复数引用，除非上下文另外清楚地进行了限定。相似地，词语“包括”应解释为包括性的，而不是排他性的。 [0060] 除非另外地进行了限定，在此使用的所有的技术术语和科学术语以及任何缩写具有与本领域技术人员通常理解的意义相同的意义。虽然任何的组成、方法、制造物或与那些在此描述的装置或材料相似或等效的其它装置或材料均可用于实践本发明，但是在此描述了优选的组成、方法、制造物或其它装置或材料。 [0061] 所有专利、专利申请、公开和在此引用或参考的其它参考资料在此以法律允许的程度通过引用而结合于本发明中。这些参考资料的讨论仅意图用于总结在其中形成的主张。所有的这种专利、专利申请、公开或参考资料、或者它们的任何部分均不被承认是本发明的相关现有技术，并且特别保留质疑这种专利、专利申请、公开和其它参考资料的精确度和相关性的权利。 [0062] 示例 [0063] 可通过以下示例进一步说明本发明，但是应了解的是，包括这些示例仅出于示范性目的，而不意图限制本发明的范围，除非另外进行了特殊指示。 [0064] 材料和方法 [0065] 在开发新的牙斑量化方法期间使用了5、7或10条杂种狗和/或小猎兔犬的研究小组。用于接受进入此研究小组的标准包括适中的健康口腔和完整的齿系。所有的过程在动物实验管理委员会(Animal Careand Use Committee)的严格指导方针和Hill的Pet Nutrition，Inc.的动物福利政策内执行。当不进行测试(off-test)时，给狗喂食PrescriptionDiet t/d 犬食，该犬食营养全面并且有助于维持口腔清洁。最初，所有的狗都接受根据标准过程的口腔病预防。在预防之后，当动物不进行测试时，利用在市场上可买到的电动牙刷和宠物牙粉进行每日刷牙。预防过程大约每3个月执行，以维持最佳的清洁和口腔健康。 [0066] 反复地建立核心研究参数，并且获得最经常使用的2单元、8天交叉设计(每个单元4天)。除了下文所述的例外之外，分级者(记录牙斑水平的人)对所使用的处理不知情。此外在大多数试验中，狗随机地分配至测试组或控制组。所有量化过程均在清醒的动物上执行，但仅使用阿托品(每公斤体重0.06毫克，皮下用药)以暂时减少唾液流。在研究时段期间，在每天的相同时间进行喂食和牙斑评分。 [0067] 在第0天(基准)，彻底地洗刷狗的牙齿，并且利用图1和图2所示的齿龈轮廓探测器以1mm的精度测量所选牙齿的牙龈缘的长度。此外在基准日，还借助稀释的曙红溶液测量在洗刷之后沿这些龈缘还剩余的所有牙斑的长度。在基准测量之后，用第一食物(测试食物或控制食物)喂食狗2到7天的时间段。在每次研究的第一分支(leg)的最后一天，再次评定狗的龈缘牙斑积聚。在随后的日子里，狗进行了刷牙，并且记录新的基准牙斑得分，然后过渡至第二食物。在第二食物的指定时段之后，再次测量和记录沿龈缘的牙斑。 [0068] 对于每颗牙齿，牙斑得分计算为龈缘长度的百分数。 [0069] 各颗牙齿的得分＝(沿龈缘的牙斑长度)/(龈缘长度)×100(1) [0070] 然后，对各颗牙齿的得分进行平均以获得整张嘴的得分。 [0071] 整张嘴的得分＝(各颗牙齿的得分的总和)/(所评分的牙齿数)(2) [0072] 整张嘴的得分用于计算在每个所选的分级天从基准增加的牙斑数。 [0073] 牙斑增加＝(整张嘴的得分：第n天)-(整张嘴的得分：基准)(3) [0074] 最后，将测试食物和控制食物之间的效果差异计算为从对控制食物的基准增加的牙斑百分数。 [0075] 效果差异＝ [0076] (牙斑增加：控制-牙斑增加：测试)/(牙斑增加：控制)×100(4) [0077] 对于统计显著性(p＜0.05)利用配对的学生氏t测验(student t-test)测试差异。包括在这些研究中的上颌齿为第三切齿、犬齿、第一至第四前臼齿和第一臼齿。包括的下颌齿为犬齿和第二至第四前臼齿。 [0078] 结果 [0079] 以下实验作为验证新的牙斑量化方法的方式而实施。 [0080] 龈缘测量。在75天的时段内数次测量龈缘长度，以确定测量的一致性和偏差。结果显示在此时段内测量的龈缘长度不具有显著的偏离。离初始测量的平均差值在从-3.1％至+4.3％的范围内，并且都不具有统计显著性。从此实验的结果确定的是，如果在正在进行的基础上包括相同小组的狗作为研究对象，对龈缘长度需要的测量每年不必多于4次，并且因此在每次保养预防时随机地(opportunistically)记录龈缘长度。 [0081] 时间进程。在三个独立实验中评价允许牙斑沿龈缘积聚的最佳时段。存在争议的是，牙斑的饱和程度(限定为接近或达到100％覆盖的沿龈缘的牙斑增长)将对该方法的灵敏度产生影响。虽然可希望大的牙斑增加以能够量化多种牙斑减少技术，但是在理论方面，牙斑沿龈缘的饱和度将弱化它们之间的差异。 [0082] 在第一实验中，在基准日以及随后的1天、2天、3天和4天记录牙斑得分，以记载当用控制饮食喂食狗时的龈缘牙斑积聚速率。结果表明在第1天、第2天和第3天的牙斑增加在牙斑增长曲线的基本线性部分内，因此对于数据采集可能是可接受的。 [0083] 实施第二实验以评价数据采集时间点对所计算的牙斑减少效果影响的两种食物之间的差异。具体地，发现沿龈缘的牙斑饱和度为误差源。Hill的Prescription Diett/d (测试食物)和全维持食物(控制食物)用于该非盲法的交叉研究，其中在基准日之后的1天、2天、3天和7天测量牙斑。结果显示当狗被喂食测试食物时沿龈缘的牙斑增长速率明显降低，然而，一旦喂食控制食物的狗的牙龈缘开始充满牙斑时，则该饮食的计算优越性将受到影响。到这一点，食物之间每日计算的差异相似，当对于控制食物龈缘开始饱并且但是对于测试食物还未饱和时，第1天、第2天和第3天的差异值分别为55％、66％和60％，而在第7天时下降到35％。此外，第1天的得分存在很大的变化性(很可能由该天的低牙斑得分所引起)，因此认为第2天和第3天是最可靠的。 [0084] 实施第三实验以确定5天交叉试验(针对每种分配食物对2天的时段之后的牙斑评分)的结果是否提供与8天试验相同的统计结果。与前述研究相同的测试食物和控制食物用于此盲法研究，这导致测试食物的牙斑减少效果为51±16％。在此结果和对于相同食物在8天研究设计(下文所述)中测试的平均结果之间不存在统计差异。因此，似乎存在机会窗口，在该机会窗口内将完美地完成所有的评分。可能的是，当牙斑得分较低时(第1天)，变化性高并且结果可能是可疑的。还可能的是，当龈缘开始饱和时(第4天)，可能负面地影响研究的灵敏度。因此，最好的实践似乎是在第2天或第3天执行评价。 [0085] 研究到研究的变化性。针对牙斑减少效果数据的一致性和再现性，实施了五个独立的5条狗、8天的盲法研究，从而比较PrescriptionDiet t/d (测试食物)与全维持食物(控制食物)。这些实验的结果显示该方法的标准化变化性(变化系数)小于18％，并且测试和控制之间的平均差异为46±8％。 [0086] 喂食顺序。实施实验以评价在非盲法研究中喂食PrescriptionDiet t/d (测试食物)和全维持食物(控制食物)对牙斑减少效果数据的影响。当首先喂食测试食物时，两次处理之间的平均差异为40±11％(p＝0.0149)。当首先喂食控制食物时，处理之间的平均差异为38±15％(p＝0.0014)。因此，结果与喂食顺序无关。 [0087] 小组到小组的变化。实施研究以确定利用不同的动物小组对牙斑减少效果数据的影响。利用两个不同的5条狗的小组执行比较Prescription Diet t/d (测试食物)与全维持食物(控制食物)的研究，并且对结果进行比较。第一小组包括2条杂种狗和3条Beagle狗，导致了食物之间的40±11％差异(p＝0.0149)。第二小组包括5条Beagle狗，导致了食物之间的49±9％差异(p＝0.0004)。各组之间的统计比较表明在小组之间不存在显著差异。 [0088] 分级者内部的变化。通过使单个分级者以随机顺序对每条狗的牙斑评分，实施研究以评价分级者内部的变化。用于该实验的食物是Prescription Diet t/d (测试食物)和全维持食物(控制食物)，食物被随机分配且分级者不知情。第一分级和第二分级之间的绝对差值在3％和12％之间，4个分级段的平均差值为大约6％。该数据的统计分析表明第一分级和第二分级之间不存在显著差异(p＞0.05)。 [0089] 分级者之间的变化。通过使2个不同的分级者在不同的日子以随机顺序对每条狗的牙斑积聚评分，实施研究以评价分级者之间的变化。用于该研究的测试食物和控制食物与用于分级者内部的变化研究的测试食物和控制食物相同，并且分级者不知晓。每天来自评分段的数据用于比较由每个分级者获得的得分，然后综合这些单独的得分以计算分级者之间的平均差值。通过比较(1)每个分级者的整张嘴的牙斑得分和(2)每个分级者的计算的效果差值，来监测分级者之间的变化。所得的针对整张嘴的牙斑得分的分级者之间的变化平均为18.0％，而效果差异的变化平均为10.4％。这些测量都未显示分级者之间的统计显著差异(分别为p＝0.2920和p＝0.3586)。虽然这些数据表明本方法的结果与分级者身份无关，但是仍然推荐在每次研究中始终使用单个分级者对牙斑进行评分。 [0090] 与传统方法的差异效果和相关性。实施允许评价本方法的性能的研究，(1)以区别具有不同效果程度的食物，包括具有相对彼此已知的“楼梯级(stair-step)”轮廓的食物，和(2)与传统的牙斑量化方法的发现相关。从如下比较研究采集的数据用于记载方法对差异效果的灵敏度和与传统方法的相关性： [0091] Prescription Diet t/d VS全维持食物； [0092] Science Diet Oral Care VS全维持食物；和 [0093] 适度有效的参考食物VS全维持性食物。 [0094] 利用本方法的Prescription Diet t/d 研究获得相对控制食物的平均46±8％的效果差异。Science Diet Oral Care 研究获得相对控制食物的33.0±2.3％的效果差异。在双尾t检验中，Science Diet Oral Care 的效果与Prescription Diet t/d 的效果显著地不同(p＝0.0034)，表明本方法可区别不同的有效技术。 [0095] 为了将这些结果与由更传统的方法获得的结果进行比较，使用了已发表的历史信息。在利用Logan-Boyce牙斑评价方法(Logan&Boyce(1994)，如上所述)进行Science Diet Oral Care VS控制食物的先前检验中，Science Diet Oral Care 显示为比控制食物优越28％(文件数据)，因此与本方法描述的33％差异接近一致。 [0096] 近来，Logan等人(2002)，J.Vet.Dent.19：15-18记载了在6个月的牙斑和齿龈炎研究中、在给狗喂食Prescription Diet t/d 和给狗喂食控制食物之间的牙斑积聚差异为39％，其进一步例证了本方法和Logan-Boyce方法之间的高相关度。 [0097] 在利用本方法和Logan-Boyce方法评价适度有效的参考食物(测试食物)VS杂货店商标食物(控制食物)的直接相关研究中，从参与传统的Logan-Boyce研究的30条狗的组中选择10条狗(每单元5条狗，按牙结石和牙斑进行分类(blocked))参与该研究。除用于发现方法之间的任何可能差异的交叉设计(利用来自两分支的数据)之外，用于该方法的数据被产生并评价为两个5条狗/单元的平行研究(一个研究在传统评价的第一分支期间，另一个研究在传统评价的第二分支期间)。将狗随机地分配至测试食物组或控制食物组。来自Logan-Boyce方法的结果揭示，来自测试食物的普通的牙斑弱化效果为大约13.5％。利用来自本方法的数据，对于第一分支平行比较、第二分支平行比较和完整研究交叉比较，测试食物分别使牙斑积聚减少了10.3％、10.4％和9.9％。综合考虑，这些研究表明用于评价适度有效技术和非常有效技术的本方法和传统Logan-Boyce模型之间的高相关度，并且当比较在长时间点产生的数据时，相关系数为0.9714。 [0098] 讨论 [0099] 本发明的探测器和方法允许精确地且可重复地量化龈缘牙斑的减少效果，并且伴随有显著地减少对人类和动物资源的需求。这种方法对用于动物的改变涉及对用于人类的由上述Xu & Barnes(2003)所描述的方法进行显著地改进。这种改进包括用于测量的探测器、允许牙斑增长的时间以及与研究相关的预防的消除。基于可影响精确度和可重复性的参数对本方法进行了验证。对来自在验证过程期间实施的所有研究的数据的提炼显示，用于牙斑积聚的、利用2天或3天的交叉设计产生的结果与已知变化性相一致。例如，来自利用5条狗的交叉研究的数据揭示了大约为18％的变化系数，其允许处理之间的差值的连续检测≥平均值的35％。这些数据还允许针对增加的动物数目进行有效的预测，其显示使用10条狗将允许处理之间的差值的连续检测≥平均值的22％。因此，可通过仅利用少量的动物增加研究对象的数量，实现需要增加灵敏度的研究。明显地，这种验证过程表明本方法为精确的、可重复的并且与常规方法很好地相关联。 [0100] 已经表明本方法与如下研究很好地相关联，该研究利用传统的Logan-Boyce方法(Logan等人(2002)，如上所述)评价Prescription Diet t/d 在6个月临床研究期间的牙斑和齿龈炎减少效果。除牙斑得分之外，传统的研究记载了在观察牙斑弱化水平时，还存在齿龈炎VS控制食物的显著(36％)减少，这表明牙斑减少和牙龈健康之间的直接关系。 [0101] 近来，关于一些传统的评分方法的担忧已经上升，这些方法允许同等地衡量牙齿的牙龈和牙冠这两个半部分，并且对这种方法的临床相关性进行了质疑。然而，本发明的方法仅在良好地记载了临床相关性的龈缘处评价牙斑积聚。 [0102] 此外，对被评分的牙齿的形状和尺寸的变化性也有担忧，该变化性导致使用传统的评分方法不适当地衡量得分的可能性。为了解决这种担忧，本方法可适合于适应牙齿尺寸的差异。更具体地，可利用沿龈缘的牙斑长度的总和除以每条狗的龈缘长度的总和来计算整张嘴的牙斑得分。因此，与更大牙齿相关的更长的龈缘将比更小的龈缘对总龈缘长度影响更大。此“总龈缘”方法可提供对龈缘的总体细菌性损害的更真实的表示。使用这种“总龈缘”方法的结果被直接与上述结果相比较。未发现在此描述的任何验证实验的结果间存在显著差异。此外，利用这些方法中的每种方法产生的大多数牙斑得分均处于彼此的几个百分点的范围内，并且都良好地处于实验误差范围内。 [0103] 结论 [0104] 本发明的方法已经显示为对于非人类动物是量化牙斑和评定牙斑减少技术效果的快速、精确、可重复且资源较不密集的方法，该非人类动物在这种情况下为犬科动物。使用该探测器和执行该方法所需的技巧简单易学，因此本方法非常适合于在现场试验中执行。最后，除了执行的简易性之外，本方法基本的原理可延伸至牙结石评定，并且可延伸至除犬科动物以外的哺乳动物。 [0105] 在说明书中，已经公开了本发明的典型优选实施例，并且虽然采用特殊术语，但是它们仅以普通意义和描述性意义使用而并非出于限制目的，本发明的范围在权利要求中提出。明显地，根据上述教导本发明可能有多种改型和变型。因此，应了解的是，可在权利要求的范围内以不同于具体描述的方式实施本发明。 |
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