构建兔硬脑膜置换动物模型的方法和利用该动物模型评价硬脑膜补片的方法 |
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| 申请号 | CN201610900451.X | 申请日 | 2016-10-14 | 公开(公告)号 | CN106562834A | 公开(公告)日 | 2017-04-19 |
| 申请人 | 孙立旦; | 发明人 | 孙立旦; 杨飞霞; 李英俊; | ||||
| 摘要 | 本 发明 公开了构建兔硬脑膜置换动物模型的方法和利用该动物模型评价硬脑膜 补片 的方法，其中，构建兔硬脑膜置换动物模型的方法包括：对兔进行称重和麻醉处理；将经过麻醉处理的兔进行固定，并在头顶进行备皮处理；在颅顶正中处纵向进行切口，并依次切开头皮及 皮下组织 ，剥离骨膜，露出颅骨；在距颅顶正中线一侧约1cm处用直径5mm的磨钻打出小孔，采用弯头眼科镊将颅骨与硬脑膜分离开，并以小孔为正方形的一 角 ，用摆锯在颅骨上锯出正方形骨窗，取下骨片，暴露硬脑膜；采用弯头眼科剪将硬脑膜剪出缺损。采用上述方法获得的动物模型可以有效地对硬脑膜补片进行测试评价，进而对硬脑膜补片的修补及适应性能进行评价，对硬脑膜补片的研发提供指导。 | ||||||
| 权利要求 | 1.一种构建兔硬脑膜置换动物模型的方法，其特征在于，包括： |
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| 说明书全文 | 构建兔硬脑膜置换动物模型的方法和利用该动物模型评价硬脑膜补片的方法 技术领域背景技术[0002] 目前市场上有很多种硬脑膜补片，但是对于这些硬脑膜补片的使用评价则没有统一的规定。 发明内容[0003] 本发明旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。为此，本发明的一个目的在于提出构建兔硬脑膜置换动物模型的方法和利用该动物模型评价硬脑膜补片的方法，利用该兔硬脑膜置换动物模型可以有效地对硬脑膜补片进行评价，进而为硬脑膜补片的筛选和评价提供可靠依据。 [0004] 为此，在本发明的一个方面，本发明提出了一种构建兔硬脑膜置换动物模型的方法。根据本发明的实施例，该方法包括：对新西兰兔进行称重和麻醉处理；将经过麻醉处理的新西兰兔进行固定，并在头顶进行备皮处理；在颅顶正中处纵向进行切口，并依次切开头皮及皮下组织，剥离骨膜，露出颅骨；在距颅顶正中线一侧约1cm处用直径5mm的磨钻打出小孔，采用弯头眼科镊将颅骨与硬脑膜分离开，并以所述小孔为正方形的一角，用摆锯在颅骨上锯出正方形骨窗，取下骨片，暴露硬脑膜；采用弯头眼科剪将所述硬脑膜剪出缺损，以便得到所述兔硬脑膜置换动物模型。 [0005] 根据本发明的实施例，发明人发现，通过采用上述构建兔硬脑膜置换动物模型的方法，所获得的动物模型可以有效地对硬脑膜补片进行测试评价，进而对硬脑膜补片的修补及适应性能进行评价，对硬脑膜补片的研发提供指导。 [0006] 另外，根据本发明上述实施例的构建兔硬脑膜置换动物模型的方法还可以具有如下附加的技术特征： [0007] 在本发明的一些实施例中，所述新西兰兔的体重为2.8～3.2kg。 [0008] 在本发明的一些实施例中，所述麻醉处理是通过按照0.5mL/kg的剂量对所述新西兰兔进行耳缘静脉注射3％的戊巴比妥钠完成的。 [0009] 在本发明的一些实施例中，在颅顶正中处纵向进行切口长度为5cm。 [0010] 在本发明的一些实施例中，所述正方形骨窗的大小为2.0cm×2.0cm。 [0011] 在本发明的一些实施例中，所述硬脑膜上缺损的面积大小为1.0cm2。 [0012] 在本发明的另一方面，本发明提出了一种用于评价硬脑膜补片的方法。根据本发明的实施例，该方法包括：根据前面所述的方法构建得到所述兔硬脑膜置换动物模型；对所述兔硬脑膜置换动物模型施用所述硬脑膜补片。 [0013] 由此，采用上述实施例得到的兔硬脑膜置换动物模型可以有效地对硬脑膜补片进行筛选和评价。 [0014] 另外，根据本发明上述实施例的用于评价硬脑膜补片的方法还可以具有如下附加的技术特征： [0015] 在本发明的一些实施例中，对所述兔硬脑膜置换动物模型施用所述硬脑膜补片按照下列步骤进行：预先将硬脑膜补片修剪至与所述兔硬脑膜置换动物模型的硬脑膜缺损部位形状相似；将经过修剪得到的硬脑膜补片贴附于所述硬脑膜缺损部位；将所述骨片放回所述正方形骨窗，并缝合骨膜和头皮，伤口消毒处理。 [0016] 在本发明的一些实施例中，上述实施例的用于评价硬脑膜补片的方法进一步包括：将经过修剪得到的硬脑膜补片贴附于所述硬脑膜缺损部位，并使得所述硬脑膜补片与所述硬脑膜缺损部位的边缘重合2～3mm。 [0017] 在本发明的一些实施例中，上述实施例的用于评价硬脑膜补片的方法进一步包括：在预定时间，对所述兔硬脑膜置换动物模型进行解剖观察和病理组织学检测。 具体实施方式[0018] 下面详细描述本发明的实施例。下面描述的实施例是示例性的，仅用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。实施例中未注明具体技术或条件的，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。 [0019] 在本发明的一个方面，本发明提出了一种构建兔硬脑膜置换动物模型的方法。根据本发明的实施例，该方法包括：对新西兰兔进行称重和麻醉处理；将经过麻醉处理的新西兰兔进行固定，并在头顶进行备皮处理；在颅顶正中处纵向进行切口，并依次切开头皮及皮下组织，剥离骨膜，露出颅骨；在距颅顶正中线一侧约1cm处用直径5mm的磨钻打出小孔，采用弯头眼科镊将颅骨与硬脑膜分离开，并以小孔为正方形的一角，用摆锯在颅骨上锯出正方形骨窗，取下骨片，暴露硬脑膜；采用弯头眼科剪将硬脑膜剪出缺损，以便得到兔硬脑膜置换动物模型。 [0020] 根据本发明的实施例，发明人发现，通过采用上述构建兔硬脑膜置换动物模型的方法，所获得的动物模型可以有效地对硬脑膜补片进行测试评价，进而对硬脑膜补片的修补及适应性能进行评价，对硬脑膜补片的研发提供指导。 [0021] 根据本发明的具体实施例，新西兰兔的体重为2.8～3.2kg。 [0022] 根据本发明的具体实施例，将新西兰兔称重之后对新西兰兔进行麻醉处理。具体的，可以根据新西兰兔的体重给以适当剂量的麻醉药进行麻醉。根据本发明的具体实施例，麻醉处理可以通过按照0.5mL/kg的剂量对新西兰兔进行耳缘静脉注射3％的戊巴比妥钠完成。由此，可以有效地达到麻醉效果。3％的戊巴比妥钠为按照3g/100ml配置得到的。 [0023] 根据本发明的具体实施例，备皮处理的具体操作为将新西兰兔俯卧，将兔头固定于头架上，采用脱毛剂对头顶脱毛后，用生理盐水和碘酊对剃脱毛的部位进行清洗消毒，再用75％的酒精进行二次消毒、脱碘，然后铺上创巾，暴露术部。 [0024] 根据本发明的具体实施例，备皮处理后，在颅顶正中处纵向进行切口长度可以为5cm，并依次切开头皮及皮下组织，用钳夹止血，然后剥离骨膜，露出颅骨。发明人发现，根据新西兰兔的体型大小不同，在颅顶正中处纵向进行切口的长度可以在4～6cm之间，对于体型适中的新西兰兔，切口长度为5cm比较合适。 [0025] 根据本发明的具体实施例，在距颅中线一侧1cm处用直径5mm的磨钻打出小孔，及硬脑膜处停止，再用弯头眼科镊将颅骨与硬脑膜分离，分离直径为2cm。由此，可以有效地将颅骨与硬脑膜分离。 [0026] 根据本发明的具体实施例，以上述小孔为正方形的一角，用摆锯锯开颅骨，得到一2.0cm×2.0cm的正方形骨窗，在保留颅骨骨片完整的前提下，将骨片取下，由此可以充分暴露硬脑膜。发明人发现，锯开颅骨骨片的面积如果过小，操作视野过小，不便于操作，而如果面积过大，容易造成骨片的损坏，影响后续实验操作。 [0027] 根据本发明的具体实施例，采用弯头眼科剪将硬脑膜剪出缺损，以便得到兔硬脑膜置换动物模型。根据本发明的具体示例，可以采用弯头眼科剪剪出面积为1.0cm2的圆形缺损，操作中避免损伤脑组织。发明人发现，如果剪出的硬脑膜缺损过小，则无法有效地对硬脑膜补片进行评价，而如果缺损过大，则会影响脑部其他部位，不利于客观地评价硬脑膜补片的修补性能及适应性能。 [0028] 由此，根据本发明上述实施例的构建兔硬脑膜置换动物模型的方法是发明人通过大量实验研究得出的，利用上述方法可以有效地在兔硬脑膜上造成缺损，该缺损位置与面积适宜，可以有效地用于硬脑膜补片的筛选和评价，因此，该兔硬脑膜置换动物模型具有广泛的适用性。 [0029] 在本发明的另一方面，本发明提出了一种用于评价硬脑膜补片的方法。根据本发明的实施例，该方法包括：根据前面所述的方法构建得到所述兔硬脑膜置换动物模型；对所述兔硬脑膜置换动物模型施用所述硬脑膜补片。 [0030] 根据本发明的具体实施例，对兔硬脑膜置换动物模型施用硬脑膜补片可以按照下列步骤进行：预先将硬脑膜补片修剪至与兔硬脑膜置换动物模型的硬脑膜缺损部位形状相似；将经过修剪得到的硬脑膜补片贴附于硬脑膜缺损部位；将骨片放回正方形骨窗，并缝合骨膜和头皮，伤口消毒处理。 [0031] 根据本发明的具体实施例，将经过修剪得到的硬脑膜补片贴附于硬脑膜缺损部位，并使硬脑膜补片与缺损处边缘重叠2～3mm，优选3mm。由此，可以将硬脑膜补片稳定固定在硬脑膜缺损处。 [0032] 根据本发明的具体实施例，在手术后的3天，每天对新西兰兔进行一次青霉素肌肉注射，剂量为20万U/次。 [0034] 根据本发明的具体实施例，在预定时间，对新西兰兔进行解剖观察，观察创面愈合、脑脊液漏、脑硬膜补片降解及脑硬膜补片与脑组织的粘连情况。 [0035] 下面参考具体实施例，对本发明进行描述，需要说明的是，这些实施例仅仅是描述性的，而不以任何方式限制本发明。 [0036] 实施例1 [0037] 构建兔硬脑膜置换动物模型 [0038] (1)实验用新西兰兔(GB 14922-1994)；体重：3±0.2kg；性别：雌雄不限。 [0040] (3)术前采血：在麻醉处理前于耳缘静脉采集2mL静脉血，用于测定血相和血清生化。 [0041] (4)麻醉：先将动物称重，然后用3％戊巴比妥钠(sigma,P3761-25g；CAS Number:57-33-0)按照0.5mL/kg剂量在耳缘静脉注射麻醉。 [0042] (5)备皮 [0043] 切实麻醉后，将新西兰兔俯卧，将兔头固定于头架上，采用脱毛剂在头顶处脱毛后，用生理盐水和碘酊对剃脱毛的部位进行清洗消毒，再用75％的酒精进行二次消毒、脱碘，然后铺上创巾，暴露术部。 [0044] (6)手术 [0045] (6-1)于颅顶正中处取纵行切口，长度为5cm。依次切开皮肤及皮下组织，钳夹止血，切开并剥离骨膜。 [0046] (6-2)在距颅顶正中线一侧1cm处用直径5mm的磨钻打出小孔，及硬脑膜处停止，再用弯头眼科镊将颅骨与硬脑膜分离，分离直径2cm，以小孔为正方形的一角，用摆锯锯开颅骨，开一2.0cm×2.0cm正方形骨窗，取下骨片(保留颅骨骨片完整)，充分暴露硬脑膜，用弯2 头眼科剪剪出面积为1.0cm的圆形硬脑膜缺损(切勿损伤脑组织)，以便得到兔硬脑膜置换动物模型。 [0047] 实施例2 [0048] 利用实施例1构建得到的兔硬脑膜置换动物模型对硬脑膜补片进行评价[0049] 评价方法： [0050] (1)将硬脑膜补片修剪为缺损处相应形状，贴附于脑表面，使硬脑膜补片与缺损处边缘重叠3mm，不需缝合，植入硬脑膜补片完成后，将骨片放回原正方形骨窗固定，缝合骨膜和头皮，伤口消毒。 [0051] (2)在手术后的3天，每天对新西兰兔进行一次青霉素肌肉注射，剂量为20万U/次。 [0052] (3)在手术后观察新西兰兔的伤口感染、运动障碍、精神异常及脑脊液漏情况。 [0053] (4)在预定时间，对新西兰兔进行解剖观察，观察创面愈合、脑脊液漏、脑硬膜补片降解及脑硬膜补片与脑组织的粘连情况。 [0054] 在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。 |
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