[0001] 本发明涉及实验大鼠脑立体定位技术，具体涉及实验大鼠脑立体定位手术中精确定位Bregma点的方法，还涉及巴氏消毒液配合双氧水作为大鼠脑立体定位显示Bregma点的用途。

[0002] 实验大鼠脑立体定位技术被广泛运用于脑的损毁、刺激和脑电记录的精确定位中，成为研究脑结构和功能必不可少的工具。大鼠脑立体定位技术主要是使用脑立体定位仪作为定位仪器，利用某些颅骨外面的标志（如前囟、后囟、外耳道、眼眶、矢状缝等）或其它参考点所规定的三维坐标系统，来确定皮层下某些神经核团结构的位置，以便在非直视暴露下对其进行定向的刺激、破坏、注射药物、引导电位等研究，是神经解剖、神经生理、神经药理和神经外科等领域内的重要研究方法。

[0003] 如图1所示，前囟点即Bregma点，位于冠状缝和矢状缝的交接处，以其作为颅骨三维坐标系统原点O，再根据原点O定位脑内各结构的位置，如：神经核团、脑室、皮质功能区等，此方法应用最广泛。在用脑立体定位仪读取Bregma点数值前，必须充分暴露颅骨骨缝，然后才能精确定位Bregma点。Bregma点定位过程大体分为：1、选定靶位。剪除大鼠颅顶被毛后，用碘酒或酒精消毒，纵向切开头皮，用止血钳将皮肤左右分开，用刀片刮去颅盖骨膜，或用双氧水腐蚀头盖骨膜，彻底去除骨膜后让Bregma点显现出来。2、用脑定位仪读取Bregma点数值作为三维坐标原点O。虽然大鼠个体有差异，每只大鼠Bregma点在脑立体定位仪上显示的坐标原点O数值不一样，但确定原点O的方法一致。用脑立体定位仪上架设的微量注射器针尖为指针，对准大鼠颅顶显现的Bregma点作为原点O，然后读取原点O在脑立体定位仪三维坐标标尺上所获得的数值，作为三维坐标原点O的数值。

[0004] 由于大鼠脑体积过小，而脑中分布的众多神经核团更是非常微小，脑立体定位中一般要求精确到微米，Bregma点作为颅骨三维坐标系统的原点O，Bregma点定位准确与否直接关系到下一步骤中对某个神经核团的精准定位。差之毫厘，谬之千里，稍有偏差便导致研究结论错误。因此，Bregma点定位是实验成败的关键。

[0005] 目前，实验大鼠脑立体定位手术中，显现Bregma点的方法有两种，一是用刀片刮去颅盖骨膜，让Bregma点显现出来。这种方法易致手术区出血，导致视野模糊，影响Bregma点精确定位。二是双氧水腐蚀颅盖骨膜，显现Bregma点。双氧水腐蚀法显现的是冠状缝和矢状缝周围两条相对较宽的相交线，相交区过大也影响Bregma点精准定位。

[0006] 发明人在实验大鼠脑立体定位手术过程中，惊奇地发现采用双氧水和巴氏消毒液联合应用腐蚀颅盖骨膜，出血量极少，手术视野清晰，显现冠状缝和矢状缝两条交叉线细而清晰，暴露Bregma点非常清楚，从而定位精准。

[0007] 双氧水是过氧化氢水溶液的简称，化学式为H2O2，纯过氧化氢是淡蓝色的黏稠液体，可任意比例与水混合，是一种强氧化剂，为无色透明液体。其水溶液适用于医用伤口消毒及环境消毒和食品消毒。在一般情况下会分解成水和氧气，但分解速度极其缓慢，加快其反应速度的办法是加入催化剂——二氧化锰或用短波射线照射。3%的过氧化氢（医用级）可供伤口消毒。本发明实验过程中采用的产品生产厂家是：山东瑞泰奇洗涤消毒科技有限公司。

[0008] 巴氏消毒液是一种高效消毒剂，主要成分为次氯酸钠（NaClO），有效氯含量为5.5～6.5%，可杀灭肠道致病菌、化脓性球菌和细菌芽孢。适用于一般物体表面、白色衣物、医院污染物品的消毒，被广泛用于宾馆、旅游、医院、食品加工行业、家庭等的卫生消毒。本发明实验过程中采用的产品生产厂家是：江苏爱特福84股份有限公司。

[0009] 本发明的目的在于提供一种大鼠脑立体定位手术中精确定位Bregma点的方法。

[0010] 本发明的另一个目的是提供一种巴氏消毒液在大鼠脑立体定位手术中显示Bregma点的新用途。

[0011] 本发明的技术解决方案大鼠脑立体定位手术中精确定位Bregma点的方法，包括如下步骤：将大鼠麻醉，固定大鼠头部，并将大鼠头部消毒、剪除被毛，用手术刀沿正中矢状线切开头顶部皮肤及软组织并拉向两侧，暴露出骨缝位置；用棉签沾取3%医用双氧水擦试大鼠头部矢状线与冠状线部位，显示出较宽的带状交叉区域，用生理盐水冲洗该区域并擦试干净；然后用棉签沾取巴氏消毒液，擦试所述交叉区域，直至Bregma点清晰显露为止，再次用生理盐水冲洗并擦试干净；最后使用脑立体定位仪确定颅骨三维坐标系统原点O数值。

[0012] 采用巴氏消毒液作为大鼠立体定位手术中显示Bregma点，在医学实验中是首次，以前巴氏消毒液均是作为一种杀菌消毒药品使用。从而为巴氏消毒液开辟了一种新用途。

[0013] Bregma点清晰显现的机理：在实验大鼠脑立体定位手术中，手术区易出血，影响视野及手术操作。在双氧水强氧化作用下，通过升高局部温度、增强凝血酶活性，同时刺激创面产生自由基，促进血小板与白细胞粘合，促使毛细血管内血栓形成而达到止血的目的。因此双氧水快速阻止了手术区出血量增加，在矢状线和冠状线周围形成了两条相对较宽的淡红透白颜色的交叉区域，再用巴氏消毒液擦试时，巴氏消毒液中次氯酸钠将颅骨表面的骨膜腐蚀干净，自然清晰显露出矢状线与冠状线及其交叉点Bregma点，帮助在实验过程中快速准确找到Bregma点，从而准确定位颅骨三维坐标系统原点O。
附图说明

[0014] 图1是本发明涉及的大鼠颅盖骨结构及Bregma点位置图。

[0015] 一种大鼠脑立体定位手术中精确定位Bregma点的方法：1、大鼠麻醉；2、固定大鼠头部，消毒、剪除被毛；3、沿正中矢状线切开头顶皮肤及软组织并拉向两侧，暴露出骨缝位置；4、用棉签沾取双氧水擦试大鼠头部矢状线与冠状线部位，显示出较宽的带状交叉区域，用生理盐水冲洗该区域并擦试干净；5、用棉签沾取巴氏消毒液，擦试所述交叉区域，直至Bregma点清晰显露，再次用生理盐水冲洗并擦试干净；6、使用脑立体定位仪确定颅骨三维坐标系统原点O数值。