活细胞冷冻保存用具

申请号 CN201280048948.3 申请日 2012-10-01 公开(公告)号 CN103857783B 公开(公告)日 2015-09-23
申请人 株式会社北里生物制药; 发明人 井上太;
摘要 活细胞冷冻保存用具(1)具有:活细胞保持构件(2),其具有主体部(23)和活细胞保持部(21);以及筒状收纳构件(3),其一端封闭,能够收纳活细胞保持构件(2)。活细胞保持部(21)具有细长的活细胞附着保持部(22),活细胞附着保持部(22)具有沿活细胞附着保持部的长度方向延伸且自活细胞附着保持部的顶端突出的导热体(25、26)。筒状收纳构件具有被收纳在其顶端部内的导热构件(32)。在将活细胞保持构件从导热体的顶端侧插入到筒状收纳构件时,导热体的顶端部(25a、26a)与筒状收纳构件的导热构件 接触 。
权利要求

1.一种活细胞冷冻保存用具,其具有:活细胞保持构件,其具有由耐寒性材料形成的主体部和由耐寒性材料形成的活细胞保持部;以及筒状收纳构件,其一端封闭,能够收纳上述活细胞保持构件,且由耐寒性材料形成,
该活细胞冷冻保存用具的特征在于,
上述活细胞保持构件的上述活细胞保持部具有细长的活细胞附着保持部,上述活细胞附着保持部具有沿上述活细胞附着保持部的长度方向延伸且自上述活细胞附着保持部的顶端突出的导热体,
上述筒状收纳构件具有设于其顶端部的导热构件,
在将上述活细胞保持构件从上述导热体的顶端侧插入到上述筒状收纳构件时,上述导热体的顶端部能够与上述筒状收纳构件的上述导热构件接触
2.根据权利要求1所述的活细胞冷冻保存用具,其中,
上述导热构件被收纳在上述筒状收纳构件的顶端部内或者固定在上述筒状收纳构件的顶端部。
3.根据权利要求1或2所述的活细胞冷冻保存用具,其中,
上述导热体设于上述活细胞附着保持部的一个或者两个侧部,该导热体沿上述活细胞附着保持部的长度方向延伸且自上述活细胞附着保持部的顶端突出。
4.根据权利要求1或2所述的活细胞冷冻保存用具,其中,
上述活细胞附着保持部为薄板状,且具有活细胞收纳用凹部,该活细胞收纳用凹部在上述活细胞附着保持部的长度方向上设置有多个,上述导热体至少位于上述活细胞附着保持部的形成有上述活细胞收纳用凹部的部分的一个或者两个侧部,且自上述活细胞附着保持部的顶端突出。
5.根据权利要求4所述的活细胞冷冻保存用具,其中,
上述活细胞附着保持部具有与上述活细胞收纳用凹部连通且沿上述活细胞附着保持部的长度方向延伸的槽部。
6.根据权利要求5所述的活细胞冷冻保存用具,其中,
上述槽部将相邻的上述活细胞收纳用凹部连接起来。
7.根据权利要求4所述的活细胞冷冻保存用具,其中,
上述活细胞附着保持部具有设于比上述活细胞收纳用凹部靠上述活细胞附着保持部的顶端侧的位置的突出部。
8.根据权利要求4所述的活细胞冷冻保存用具,其中,
上述活细胞附着保持部具有活细胞收纳用凹部以及两个侧部鼓出部,该活细胞收纳用凹部在上述活细胞附着保持部的长度方向上设置有多个,这两个侧部鼓出部设于上述活细胞附着保持部的形成有上述活细胞收纳用凹部的部分的两侧部,且沿上述活细胞附着保持部的长度方向延伸。
9.根据权利要求1或2所述的活细胞冷冻保存用具,其中,
上述导热体除顶端部之外都被埋设在上述活细胞附着保持部内。
10.根据权利要求8所述的活细胞冷冻保存用具,其中,
上述导热体除顶端部之外都被埋设在上述侧部鼓出部内。
11.根据权利要求4所述的活细胞冷冻保存用具,其中,
上述活细胞附着保持部具有自上述活细胞附着保持部的最靠顶端侧的上述活细胞收纳用凹部向顶端侧延伸的槽部。
12.根据权利要求4所述的活细胞冷冻保存用具,其中,
上述活细胞附着保持部具有自上述活细胞附着保持部的最靠基端侧的上述活细胞收纳用凹部向基端侧延伸的槽部。
13.根据权利要求1或2所述的活细胞冷冻保存用具,其中,
上述耐寒性材料是耐液氮性材料。
14.根据权利要求1或2所述的活细胞冷冻保存用具,其中,
上述导热体和上述导热构件由金属或者导热陶瓷形成。

说明书全文

活细胞冷冻保存用具

技术领域

[0001] 本发明涉及一种在将哺乳动物的卵子、胚胎等卵,造血干细胞、多能干细胞等干细胞,精子等,各种活细胞冷冻保存时所使用的活细胞冷冻保存用具。

背景技术

[0002] 哺乳动物胚胎的冷冻保存能够保存特定的系统、品种的遗传资源。此外,对于维持濒临灭绝危机的动物种类也是有效的。并且,在人类的不孕治疗中也是有用的。
[0003] 作为哺乳动物胚胎的冷冻保存方法,在专利文献1(日本特开2000-189155)中提出了这样的方法:利用足够包裹哺乳动物胚胎或者卵子的最少量的玻璃化液将这些胚胎或者卵子粘在经灭菌处理后的冷冻吸管、冷冻瓶或者冷冻管等冷冻保存用容器的内表面,将该冷冻保存用容器密封,然后使该容器与液氮接触而对该容器进行急速冷却。而且,在融解方法中,将利用上述方法保存的冷冻保存用容器从上述液氮中取出,使容器的一端部开口,向该容器内直接注入33℃~39℃的稀释液,使胚胎或者卵子的冷冻融解稀释。采用该方法,具有能够无因病毒、细菌而感染之忧地以较高的存活率保存和融解稀释哺乳动物胚胎或者卵子这样的优异的效果。
[0004] 但是,利用足够包裹胚胎或者卵子等卵的最少量的玻璃化液粘在冷冻吸管、冷冻瓶或者冷冻管等冷冻保存用容器的内表面的作业未必容易。
[0005] 在先技术文献
[0006] 专利文献
[0007] 专利文献1:日本特开2000-189155
[0008] 专利文献2:日本特开2004-329202(美国公开2004-0259072)
[0009] 专利文献3:日本特开2002-315573(WO02-085110A1)

发明内容

[0010] 发明要解决的问题
[0011] 此外,本申请发明人也提出了专利文献2(日本特开2004-329202、美国公开2004-0259072)。专利文献2的卵冷冻保存用具1具有由耐液氮材料形成的卵冷冻保存用管2和用于保护管2的金属制筒状保护构件3。管2具有主体部21和内径为0.1mm~
0.5mm的卵保存用细径部22,并且能够被在细径部的顶端侧热封,能够被在主体部21热封。
筒状保护构件3具有用于收纳管2的细径部22的顶端部的筒状部31和用于收纳细径部22的未被筒状部31收纳的部分及主体部21的顶端部21a的半筒状部32。
[0012] 在上述专利文献1及专利文献2中,需要进行将卵收纳在管内的操作,需要为此花费作业时间。
[0013] 此外,本申请发明人提出了专利文献3(日本特开2002-315573、WO02-085110A1)。专利文献3的卵冷冻保存用具1由主体部2、卵附着保持用条带3和筒状构件
4构成,该主体部2由耐寒性材料形成,该卵附着保持用条带3安装在主体部2的一端,由挠性、透明性且耐液氮性材料形成,该筒状构件4由耐寒性材料形成,其能够包裹卵附着保持用条带3且装拆自如地安装在主体部2的这一端被封。对于该专利文献3的卵冷冻保存用具,将卵载置在条带上即可,具有无需将卵收纳在管内的操作,卵冷冻操作容易这样的优点。
[0014] 但是,在对比文献3的卵冷冻保存用具中,卵不得不与用于玻璃化的冷却介质(具体而言是液氮)接触。卵与液氮接触并不会对卵自身产生影响,但如果可以的话,期望卵不与液氮直接接触。
[0015] 本发明的目的在于,提供一种将活细胞载置于活细胞冷冻保存用具的操作容易,且能够在使活细胞不与冷却介质直接接触的情况下将活细胞冷冻的活细胞冷冻保存用具。
[0016] 用于解决问题的方案
[0017] 达到上述目的的活细胞冷冻保存用具如下。
[0018] 一种活细胞冷冻保存用具,其具有:活细胞保持构件,其具有由耐寒性材料形成的主体部和由耐寒性材料形成的活细胞保持部;以及筒状收纳构件,其一端封闭,能够收纳上述活细胞保持构件,且由耐寒性材料形成,在该活细胞冷冻保存用具中,上述活细胞保持构件的上述活细胞保持部具有细长的活细胞附着保持部,上述活细胞附着保持部具有沿上述活细胞附着保持部的长度方向延伸且自上述活细胞附着保持部的顶端突出的导热体,上述筒状收纳构件具有设于其顶端部的导热构件,在将上述活细胞保持构件从上述导热体的顶端侧插入到上述筒状收纳构件时,上述导热体的顶端部能够与上述筒状收纳构件的上述导热构件接触。附图说明
[0019] 图1是本发明的实施例的活细胞冷冻保存用具在活细胞保持构件被收纳在筒状收纳构件中的状态下的主视图。
[0020] 图2是本发明的实施例的活细胞冷冻保存用具在活细胞保持构件未被收纳在筒状收纳构件中的状态下的主视图。
[0021] 图3是图2所示的筒状收纳构件的纵剖视图。
[0022] 图4是图2所示的活细胞冷冻保持构件的顶端侧部分的放大主视图。
[0023] 图5是图4所示的活细胞冷冻保持构件的右视图。
[0024] 图6是图4的A-A剖视图。
[0025] 图7是图4的B-B剖视图。
[0026] 图8是图4所示的活细胞冷冻保持构件的放大仰视图。
[0027] 图9是用于说明图4的被C-C线截取而得到的截面的说明图。
[0028] 图10是图2所示的活细胞冷冻保持构件的顶端部的放大主视图。
[0029] 图11是图10的D-D剖视图。
[0030] 图12是本发明的另一实施例的活细胞冷冻保存用具所使用的活细胞保持构件的顶端部的放大主视图。
[0031] 图13是本发明的另一实施例的活细胞冷冻保存用具所使用的活细胞保持构件的顶端部的放大侧视图。
[0032] 图14是图13所示的活细胞保持构件的顶端部的放大仰视图。
[0033] 图15是本发明的另一实施例的活细胞冷冻保存用具所使用的活细胞保持构件的顶端部的放大仰视图。
[0034] 图16是本发明的另一实施例的活细胞冷冻保存用具所使用的活细胞保持构件的顶端侧部分的放大主视图。
[0035] 图17是图16所示的活细胞保持构件的放大仰视图。
[0036] 图18是图16的E-E放大剖视图。
[0037] 图19是图16所示的活细胞保持构件所使用的平板状的导热体的主视图。
[0038] 图20是用于说明本发明的另一实施例的活细胞冷冻保存用具所使用的筒状收纳构件的说明图。
[0039] 图21是本发明的另一实施例的活细胞冷冻保存用具的顶端部的放大纵剖视图。
[0040] 图22是本发明的另一实施例的活细胞冷冻保存用具的顶端部的放大纵剖视图。
[0041] 图23是本发明的另一实施例的活细胞冷冻保存用具所使用的筒状收纳构件的局部省略放大纵剖视图。
[0042] 图24是本发明的另一实施例的活细胞冷冻保存用具所使用的筒状收纳构件的局部省略放大主视图。
[0043] 图25是用于说明本发明的活细胞冷冻保存用具的作用的说明图。

具体实施方式

[0044] 使用图示的实施例说明本发明的活细胞冷冻保存用具。
[0045] 本发明的活细胞冷冻保存用具1具有:活细胞保持构件2,其具有由耐寒性材料形成的主体部23和由耐寒性材料形成的活细胞保持部21;以及筒状收纳构件3,其一端封闭,能够收纳活细胞保持构件2,且由耐寒性材料形成。活细胞保持构件2的活细胞保持部21具有细长的活细胞附着保持部22,活细胞附着保持部22具有沿活细胞附着保持部的长度方向延伸且自活细胞附着保持部22的顶端突出的导热体25、26。筒状收纳构件3具有被收纳在其顶端部内的导热构件32。而且,在将活细胞保持构件21从导热体25、26的顶端侧插入到筒状收纳构件3时,导热体25、26的顶端部能够与筒状收纳构件3的导热构件32接触。
[0046] 本发明的活细胞冷冻保存用具1由活细胞保持构件2和用于收纳活细胞保持构件2的筒状收纳构件3构成。特别是,该实施例的细胞冷冻保存用具1是卵冷冻保存用具,细胞保持构件2为卵保持构件。另外,本发明的细胞冷冻保存用具1能够用于冷冻保存卵子、胚胎等卵,造血干细胞、多能干细胞等干细胞,精子等,各种活细胞。
[0047] 如图1、图2、图4~图11所示,活细胞保持构件2具有由耐寒性材料形成的主体部23和由耐寒性材料形成的活细胞保持部21。在该实施例中,如图4~图6(特别是图6)所示,在活细胞保持部21的基端部形成有向顶端方向延伸规定长度的孔部21a,在主体部23的顶端部设有能够进入到上述孔部21a内的延伸规定长度的突出部24。而且,通过将主体部23的突出部24插入到活细胞保持部21的孔部21a内,将两者固定在一起。
[0048] 活细胞保持部21的截面为大致矩形形状,其具有像上述那样与主体部23相连接的基端部和自该基端部向顶端侧突出的活细胞附着保持部22。而且,在该实施例中,活细胞附着保持部22为细长且宽度较窄的带状。而且,其表面形成活细胞附着保持面。
[0049] 特别是,在该实施例的活细胞保持构件2中,如图4~图11所示,在活细胞附着保持部22的表面,在长度方向上设置有多个活细胞收纳用凹部28a、28b、28c、28d、28e。如图9、图11所示,活细胞收纳用凹部28a、28b、28c、 28d、28e为大致半球状的凹部。此外,多个凹部28a、28b、28c、28d、28e自比活细胞保持构件2的顶端靠基端侧规定长度的位置向基端侧以直线状排列,而且,各凹部以大致等间隔隔开。在该实施例中,凹部设有多个,但也可以是1个。此外,在设有多个凹部的情况下,优选为2个~8个。凹部的深度优选为0.05mm~
0.5mm,凹部的上表面的开口直径优选为0.1mm~0.5mm。此外,凹部之间的间隔距离优选为
1mm~3mm。并且,在该实施例中,如图8、图9及图11所示,形成有活细胞收纳用凹部28a、
28b、28c、28d、28e的部分的背面侧部分形成为鼓出部38a、38b、38c、38d、38e,形成活细胞收纳用凹部的部分并不是薄壁,而具有充分的强度。另外,也可以不设置活细胞收纳用凹部,而平坦地形成活细胞保持构件2的表面,将其平坦面作为活细胞附着保持部。此外,活细胞附着保持部22的宽度优选为0.4mm~1.0mm,长度优选为5mm~30mm,整体的厚度和凹部部分的厚度优选为0.08mm~1.0mm。此外,活细胞保持部21的厚壁的基端部的长度优选为5mm~30mm,主体部的长度优选为20mm~100mm。
[0050] 而且,在本发明的活细胞保持构件2中,活细胞附着保持部22具有沿活细胞附着保持部22的长度方向延伸且自活细胞附着保持部22的顶端突出的导热体25、26。特别是,在该实施例的活细胞保持构件2中,导热体25、26为线状导热体,设于活细胞附着保持部22的两个侧部。另外,导热体也可以仅设于活细胞附着保持部22的一个侧部。而且,导热体25、26至少位于活细胞附着保持部22的形成有活细胞收纳用凹部28a、28b、28c、28d、28e的部分的一个或者两个(在该实施例中是两个)侧部,且自活细胞附着保持部22的顶端突出。
并且,在该实施例中,导热体25、26的基端超出活细胞收纳用凹部形成部分向基端侧延伸,到达活细胞保持部21的基端或者活细胞保持部21的基端附近。因而,多个活细胞收纳用凹部28a、28b、28c、28d、28e位于两根导热体25、26之间。此外,导热体25、26除顶端部25a、
26a之外都被埋设在侧部鼓出部35、36内。换言之,顶端部25a、26a形成为自活细胞附着保持部22的顶端突出并外表面暴露的状态。
[0051] 此外,在该实施例中,导热体25、26由线状构件或者较细的棒状构件形成。而且,顶端部直接以该形状突出。另外,作为导热体25、26的顶端部的形状,并不限定于图10、图11所示那样的圆柱状,也可以像图12所示的实施例的活细胞保持构件2a那样,导热体25、
26的顶端部的顶端形成为鼓出的大致球部25b、26b。并且,也可以像图13及图14所示的实施例的活细胞保持构件2b那样,导热体25、26的顶端部的形状形成为朝向基端侧弯曲的弯曲顶端部25c、26c。在该情况下,优选如图13所示,弯曲顶端部25c、26c突出到后述的活细胞保持构件2的顶端部27的前方,并且保护顶端部27。特别是,在图13中,在对弯曲顶端部25c、26c施加了朝向基端侧的冲击时,弯曲顶端部25c、26c并不抵接于顶端部27。此外,也可以像图15所示的实施例的活细胞保持构件2c那样,在导热体25、26的自活细胞附着保持部22突出的顶端部的顶端设有平板构件38。通过设置这样的平板构件,与后述的筒状收纳构件3的导热构件32之间的接触面积增加,因此,能够更加迅速地将活细胞冷冻。
[0052] 并且,在该实施例的活细胞保持构件2中,如图8及图9所示,具有设于活细胞附着保持部22的形成有活细胞收纳用凹部28a、28b、28c、28d、28e的部分的两侧部且沿活细胞附着保持部22的长度方向延伸的两个侧部鼓出部35、36。因此,活细胞保持构件2由于在活细胞收纳用凹部的两侧部具有鼓出部,因此能够可靠地抑制在载置活细胞时活细胞向侧部方向移动,并且还能够防止载置后的活细胞自活细胞收纳凹部脱出。
[0053] 而且,在该实施例的活细胞保持构件2中,如图8及图9所示,导热体25、26除顶端部之外都被埋设在侧部鼓出部35、36内,抑制了导热体25、26自活细胞保持构件2脱离、变形。因而,在该实施例中,形成为带状部将两个鼓出部35、36之间连结起来的形态,在该带状部形成有上述活细胞收纳用凹部28a、28b、28c、28d、28e。
[0054] 并且,在该实施例的活细胞保持构件2中,如图4~图11(特别是图11)所示,活细胞附着保持部22具有设于活细胞附着保持部22的比活细胞收纳用凹部28a、28b、28c、28d、28e靠顶端侧的位置的突出部27。突出部27自活 细胞附着保持部22的顶端向上表面侧(形成活细胞收纳用凹部那一侧)突出。此外,如图11所示,突出部27的顶端面形成为向基端侧稍稍倾斜的倾斜面。通过形成这样的突出部27,假如活细胞自活细胞收纳部脱离而向顶端侧移动时,能够防止其自活细胞保持构件2落下,换言之能够防止其自活细胞附着保持部22落下。特别是,在该实施例的活细胞保持构件2中,通过与像上述那样设于活细胞附着保持部22的两侧部的鼓出部35、36协同动作,从而防止活细胞落下。
[0055] 并且,在该实施例的活细胞保持构件2中,如图4~图11(特别是图9及图11)所示,活细胞附着保持部22具有与活细胞收纳用凹部28a、28b、28c、28d、28e连通且沿活细胞附着保持部22的长度方向延伸的槽部29a、29b、29c、29d、29e、29f。特别是,在该实施例中,槽部29b、29c、29d、29e将相邻的活细胞收纳用凹部连结起来。具体而言,槽部29b将凹部28a和凹部28b连通,槽部29c将凹部28b和凹部28c连通,槽部29d将凹部28c和凹部28d连通,槽部29e将凹部28d和凹部28e连通。
[0056] 并且,在该实施例中,如图10所示,活细胞附着保持部22具有自活细胞附着保持部22的最靠顶端侧的活细胞收纳用凹部28a向顶端侧延伸的槽部29a,该槽部29a的端部到达上述突出部或者延伸至上述突出部附近。并且,在该实施例中,活细胞附着保持部22具有自活细胞附着保持部22的最靠基端侧的活细胞收纳用凹部28e向基端侧延伸的槽部29f。
[0057] 通过设置这样的与活细胞收纳用凹部连通的槽部,与活细胞一同被收纳在活细胞收纳用凹部中的冷冻保存液的剩余部分流入到该槽部内,因此,能够抑制活细胞被过量的冷冻保存液覆盖,从而能够迅速地进行冷冻。并且,由于相邻的活细胞收纳用凹部由槽部连通,因此,冷冻保存液变得容易自活细胞收纳用凹部移动,而且,残留在多个活细胞收纳用凹部的冷冻保存液量也变得均匀。作为槽部的宽度,优选为100μm~500μm,而且,作为槽部的深度,优选为50μm~500μm。
[0058] 此外,作为导热体,并不限定于上述那样的线状体或者棒状体,也可以 为板状。可以像上述的导热体25、26那样配置两根板状的导热体。此外,还可以是图16~图19所示的活细胞保持构件2d那样的方式。
[0059] 在该实施例的活细胞保持构件2d中,使用了细长的平板状的导热体37。而且,该平板状的导热体37配置为比活细胞收纳用凹部28a、28b、28c、28d、28e靠底面侧。另外,在该实施例中,导热体37具有与活细胞收纳用凹部28a、28b、28c、28d、28e相对应的多个开口39a、39b、39c、39d、39e,导热体37的开口位于各凹部的下部。此外,如图17及图18所示,导热体37的两侧部被埋设在活细胞附着保持部22的两侧部内。此外,导热体37的长度方向中央部形成为未被活细胞附着保持部22覆盖的非覆盖部37b,而暴露出来。此外,在该实施例的活细胞保持构件2d中,导热体37的顶端部37a也自活细胞附着保持部22突出。
[0060] 主体部23和活细胞保持部21由耐寒性材料形成。特别是,主体部23和活细胞保持部21优选为耐液氮性材料,换言之优选为即使与液氮接触也不会发生脆化的材料。此外,活细胞保持部21优选为透明或者半透明体,而且,优选具有一些挠性。作为主体部23和活细胞保持部21的形成材料,优选使用例如3-氟化聚乙烯、低密度聚乙烯、中密度聚乙烯、高密度聚乙烯、聚酸酯、尼龙、聚砜、聚酯、聚苯乙烯、聚酰亚胺、超高分子量聚乙烯、乙烯-醋酸乙烯酯共聚物等合成树脂,以及由这些合成树脂形成的薄膜的层叠体。
[0061] 导热体25、26、37由导热材料形成。作为导热材料,能够优选使用、不锈等金属类,氮化铝、氮化化铝等导热陶瓷等。
[0062] 如图1~图3所示,筒状收纳构件3是一端封闭、能够收纳活细胞保持构件2且由耐寒性材料形成的筒状体。筒状收纳构件3由在内部具有活细胞保持构件收纳部31的筒状体30和设于筒状体30的顶端的导热构件32构成。此外,在该实施例中,筒状收纳构件3由顶端封闭部33、基端开口部34、在内部具有活细胞保持构件收纳部31的筒状体30以及被收纳在筒状体30的顶端部内的导热构件32构成。导热构件32以无法移动的方式被收纳在筒状体30的内部,特别是在图示的实施例中,导热构件32以抵接于顶端封闭部33的内表面 的方式被收纳在筒状体30的内部。此外,导热构件32使用了金属制的圆柱状的构件。导热构件32的上表面为平坦面,即后述的活细胞保持构件32的与导热体25、26的顶端部25a、26a接触的表面为平坦面。另外,作为导热构件32a,也可以像图20所示的筒状收纳构件3a那样,在上表面具有能够收纳活细胞保持构件2的导热体25、26的顶端部25a、26a的顶端侧部分或者大致整个顶端部25a、26a的凹部32b。此外,优选如图20所示,凹部
32b具有朝向开口端去而扩径的开口部(换言之是锥形状的开口部)。
[0063] 并且,作为筒状收纳构件,也可以是在图21所示的实施例的活细胞冷冻保存用具1a中所使用的筒状收纳构件3b那样的类型。该实施例的筒状收纳构件3b由在内部具有活细胞保持构件收纳部31且顶端和后端开口的筒状体30a和固定在该筒状体30a的顶端开口部的导热构件42构成。因此,筒状体30a被导热构件42封闭,而且,导热构件42的外表面暴露,在冷却作业时导热构件42与冷却介质(例如液氮)直接接触。此外,该实施例的导热构件42的顶端部32c为半球状或者弹丸状,并且,在其后端部形成有用于收纳保持筒状体30a的顶端部的环状槽部32d。通过以将筒状体30a的顶端部插入到导热构件42的环状槽部32d中的状态将导热构件42的环状槽部32d的形成部分铆接,将导热构件42固定在筒状体30a的顶端部。
[0064] 并且,在上述类型的筒状收纳构件中,也可以像图22所示的实施例的活细胞冷冻保存用具1b的筒状收纳构件3c那样,在上表面具有能够收纳活细胞保持构件2的导热体25、26的顶端部25a、26a的顶端侧部分或者大致整个顶端部25a、26a的凹部32b。此外,优选如图22所示,凹部32b具有朝向开口端去而扩径的开口部(换言之是锥形状的开口部)。
[0065] 而且,在上述所有的筒状收纳构件中,也可以像图23所示的筒状收纳构件3d那样,筒状体30b的基端开口部为朝向基端去而扩径的扩径基端开口部34a。此外,作为筒状收纳构件,也可以像图24所示的筒状收纳构件3e那样,筒状体30c在基端开口部34具有切口部34b。通过设置这样的扩径部、切口部,容易向筒状收纳构件插入活细胞保持构件2。
[0066] 筒状体30由耐寒性材料形成。特别是,筒状体30优选为耐液氮性材料,换言之优选为即使与液氮接触也不会发生脆化的材料。此外,筒状体30优选为能够用眼睛对内部进行确认的透明或者半透明体。作为筒状体30的形成材料,优选使用例如3-氟化聚乙烯、低密度聚乙烯、中密度聚乙烯、高密度聚乙烯、聚碳酸酯、尼龙、聚砜、聚酯、聚苯乙烯、聚酰亚胺、超高分子量聚乙烯、乙烯-醋酸乙烯酯共聚物等合成树脂,以及由这些合成树脂形成的薄膜的层叠体。
[0067] 此外,筒状收纳构件3的活细胞保持构件收纳部31的长度优选比活细胞保持构件2的全长长10mm~50mm。此外,筒状收纳构件3(筒状体30)的全长优选为50mm~100mm,内径优选为2mm~5mm。
[0068] 导热构件32由导热材料形成。作为导热材料,能够优选使用银、铜、铝、不锈钢等金属类,氮化铝、氮化硅、氧化铝等导热陶瓷,金属粉末,氮化铝等导热陶瓷粉末,含有碳纤维等高导热性物质的导热性树脂等。此外,作为导热构件,能够同时与活细胞保持构件2的导热体25、26的顶端部25a、26a的顶端面接触。具体而言,导热构件使用了其直径比活细胞保持构件2的导热体25、26的顶端部25a、26a之间的距离大的构件。
[0069] 接着,说明本发明的活细胞冷冻保存用具1的使用方法。
[0070] 在该说明中,以冷冻保存作为活细胞的卵子的情况为例进行说明。
[0071] 首先,提取多个卵子,进行将卵子的细胞内液置换为平衡液的作业,再进行将细胞外液置换为玻璃化液的作业。然后,在显微镜下,使卵子与少量的玻璃化液一同配置附着在设于活细胞保持构件2的活细胞附着保持部22的各个活细胞收纳用凹部28a、28b、28c、28d、28e。将附着有卵子的活细胞保持构件2从活细胞附着保持部22侧插入到筒状收纳构件3内,如图25所示,形成为导热体25、26的自活细胞保持构件2的活细胞附着保持部22的顶端突出的顶端部25a、26b与筒状收纳构件3内的导热构件32接触的状态。然后,将收纳有活细胞保持构件2的筒状收纳构件3从顶端侧(导热构件32侧)浸渍在预先准备好的液氮中将其冷冻(玻璃化)。通过使筒状收纳构件3与液氮接 触,使筒状收纳构件3内的导热构件32急剧冷却,该冷却会自活细胞保持构件2的活细胞附着保持部22的与导热构件
32接触的导热体25、26急剧地夺取温度,从而使被保持在活细胞附着保持部22的卵子也被急剧冷却。在将附着保持玻璃化了的卵子的活细胞保持构件2与筒状收纳构件3一起收纳在收纳容器(cane)中之后,将收纳容器放入液氮罐内保存起来。
[0072] 产业上的可利用性
[0073] 本发明的活细胞冷冻保存用具如下。
[0074] (1)一种活细胞冷冻保存用具,其具有:活细胞保持构件,其具有由耐寒性材料形成的主体部和由耐寒性材料形成的活细胞保持部;以及筒状收纳构件,其一端封闭,能够收纳上述活细胞保持构件,且由耐寒性材料形成,在该活细胞冷冻保存用具中,上述活细胞保持构件的上述活细胞保持部具有细长的活细胞附着保持部,上述活细胞附着保持部具有沿上述活细胞附着保持部的长度方向延伸且自上述活细胞附着保持部的顶端突出的导热体,上述筒状收纳构件具有设于其顶端部的导热构件,在将上述活细胞保持构件从上述导热体的顶端侧插入到上述筒状收纳构件时,上述导热体的顶端部能够与上述筒状收纳构件的上述导热构件接触。
[0075] 在本发明的活细胞冷冻保存用具中,在吸取在冷冻保存液中处理后的活细胞(例如卵子)并将其配置在活细胞保持构件的活细胞附着保持部上之后,通过将保持着活细胞的活细胞保持构件插入到筒状收纳构件中,使被保持于活细胞保持构件的活细胞被筒状收纳构件保护,并且并未暴露于外部。然后,以使收纳有活细胞保持构件的筒状收纳构件的顶端侧处于下方的方式使该筒状收纳构件与冷却介质(例如液氮)接触,且以使液氮不会流入到内部的方式进行操作,由此,使筒状收纳构件冷却,且筒状收纳构件所具有的导热构件也被瞬间冷却,活细胞保持构件的与导热构件接触的导热体也被冷却,从而使活细胞保持构件及附着在该活细胞保持构件的活细胞也被迅速冷却。因而,采用本发明的活细胞冷冻保存用具,将活细胞载置于活细胞冷冻保存用具的操作容易,且能够在使活细胞不与冷却介质直接接触的情况下将活细 胞冷冻。
[0076] 而且,本发明的实施方式也可以如下。
[0077] (2)根据上述(1)所述的活细胞冷冻保存用具,其中,上述导热构件被收纳在上述筒状收纳构件的顶端部内或者固定在上述筒状收纳构件的顶端部。
[0078] (3)根据上述(1)或(2)所述的活细胞冷冻保存用具,其中,上述导热体设于上述活细胞附着保持部的一个或者两个侧部,该导热体沿上述活细胞附着保持部的长度方向延伸且自上述活细胞附着保持部的顶端突出。
[0079] (4)根据上述(1)~(3)中任一项所述的活细胞冷冻保存用具,其中,上述活细胞附着保持部为薄板状,且具有活细胞收纳用凹部,该活细胞收纳用凹部在上述活细胞附着保持部的长度方向上设置有多个,上述导热体至少位于上述活细胞附着保持部的形成有上述活细胞收纳用凹部的部分的一个或者两个侧部,且自上述活细胞附着保持部的顶端突出。
[0080] (5)根据上述(4)所述的活细胞冷冻保存用具,其中,上述活细胞附着保持部具有与上述活细胞收纳用凹部连通且沿上述活细胞附着保持部的长度方向延伸的槽部。
[0081] (6)根据上述(5)所述的活细胞冷冻保存用具,其中,上述槽部将相邻的上述活细胞收纳用凹部连接起来。
[0082] (7)根据上述(4)~(6)中任一项所述的活细胞冷冻保存用具,其中,上述活细胞附着保持部具有设于比上述活细胞收纳用凹部靠上述活细胞附着保持部的顶端侧的位置的突出部。
[0083] (8)根据上述(4)~(7)中任一项所述的活细胞冷冻保存用具,其中,上述活细胞附着保持部具有活细胞收纳用凹部以及两个侧部鼓出部,该活细胞收纳用凹部在上述活细胞附着保持部的长度方向上设置有多个,这两个侧部鼓出部设于上述活细胞附着保持部的形成有上述活细胞收纳用凹部的部分的两侧部,且沿上述活细胞附着保持部的长度方向延伸。
[0084] (9)根据上述(1)~(8)中任一项所述的活细胞冷冻保存用具,其 中,上述导热体除顶端部之外都被埋设在上述活细胞附着保持部内。
[0085] (10)根据上述(8)所述的活细胞冷冻保存用具,其中,上述导热体除顶端部之外都被埋设在上述侧部鼓出部内。
[0086] (11)根据上述(4)~(10)中任一项所述的活细胞冷冻保存用具,其中,上述活细胞附着保持部具有自上述活细胞附着保持部的最靠顶端侧的上述活细胞收纳用凹部向顶端侧延伸的槽部。
[0087] (12)根据上述(4)~(11)中任一项所述的活细胞冷冻保存用具,其中,上述活细胞附着保持部具有自上述活细胞附着保持部的最靠基端侧的上述活细胞收纳用凹部向基端侧延伸的槽部。
[0088] (13)根据上述(1)~(12)中任一项所述的活细胞冷冻保存用具,其中,上述耐寒性材料是耐液氮性材料。
[0089] (14)根据上述(1)~(13)中任一项所述的活细胞冷冻保存用具,其中,上述导热体和上述导热构件由金属或者导热陶瓷形成。
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