【発明の詳細な説明】 【０００１】 【発明の背景】 （連邦資金による研究開発でなされた発明への権利に関する記述） 本発明の開発中になされた研究の一部は合衆国政府資金を利用した。 合衆国政府は本発明において一定の権利を有する。 【０００２】 【発明の属する技術分野】 本発明は、植物抽出または植物採掘技術を用いてニッケルやコバルトなどの金属を回収する方法に関する。 ｐＨを調整するために処理された土壌にニワナズナ（Alyssum）草類などのある種の金属超蓄積植物を栽培することによって、金属を選択的に土壌から抽出することができる。 【０００３】 【従来の技術】 採掘、精錬および製造廃棄物の処理などの工業的手法は、自然環境における有毒金属の濃度を増加させてきた。 例えば、多くのニッケル採掘および精錬場所では、土壌中のニッケルおよびコバルトの含有量が非常に高くて植物が生き残ることができず、その地域の生態系に深刻な崩壊が起こっている。 一度、ニッケルおよびコバルトが土壌に入ってしまうと、それらは比較的動かず、また、毒性の少ない物質に分解することもないので、ニッケルやコバルトを除去するのは困難である。 精錬所や採掘廃棄物によって影響を受ける領域の大きさは、通常、非常に大きく、土の除去および入れ替え等の土壌改善の工学的方法は高価すぎて実施することができない（Cunningham et al., "Phytoremediation to Contaminated S
oils", Trends Biotechnol. 13: 393-397 (1995)）。 【０００４】 金属含有または金属汚染土壌において育ち、重金属をその組織に積極的に蓄積することのできる、ある種の植物の能力を活用することによって、土壌から金属を抽出するという試みがなされてきた。 穀物を含むこのような植物を汚染された土壌で栽培して汚染物質を抽出することは、植物抽出と称される。 この方法は、
土壌の肥沃性および景観を保持しつつ崩壊または分散を殆ど起こさないので、耕地の汚染された土壌に特に効果的である。 【０００５】 ニッケルは最も広く見出され、技術的に重要な金属の１つである。 ニッケルは全ての土壌にある天然の成分であり、蛇紋岩土、ラテライト状蛇紋岩土、超苦鉄質土および隕石由来の土などの、ある型の土壌および地質材料においてその濃度が特に高い。 もう１つの価値ある金属であるコバルトは、ニッケルに非常によく似た化学的性質および地質学的性質を有しており、通常、同じ土壌で発見される。 このような土壌で発見される可能性のある他の金属としては、パラジウム、ロジウム、ルテニウム、プラチナ、イリジウム、オスミウムおよびルテニウムのようなプラチナ・パラジウム族、並びにセレニウム、亜鉛およびカドミウムのような金属を挙げることができる。 【０００６】 蛇紋岩、ラテライト状蛇紋岩、超苦鉄および隕石に由来する土壌や地質材料を有する場所は、従来から、金属蓄積植物で採掘ないし耕作されてきた。 鉱化された（鉱物質の(geogenic)）土壌から金属を抽出するのにそのような植物を使用することは、植物採掘（phytomining）と称される。 【０００７】 ラスキンら（Raskin et al.）に与えられた米国特許第5,364,451号は、低コストで汚染された土壌を改善する方法に関するものである。 ラスキンらはアブラナ科の植物を金属に富んだ土壌で育てることによって、金属に富んだ土壌から金属を除去している。 ラスキンらは、様々な植物および回収が可能である多数の金属を一般的に記載しているが、例は、主として遺伝子的に改造した植物からクロムと鉛とを回収することを記載している。 このように、見込みはあるとしても、植物の栽培または培養によって土壌を植物採掘または植物抽出することを直接行うことに関して、ラスキンらは殆ど記載していない。 【０００８】 ラスキンら（Raskin et al.）に与えられた米国特許第5,785,735号は、やはり、汚染された土壌を改善する方法に関するものである。 ラスキンらは、穀物およびアブラナ科の植物の内の穀物と近戚関係にあるものを金属に富んだ土壌で栽培することによって、金属に富んだ土壌から金属を除去している。 この方法は、金属と土壌に添加されたキレート化剤とで錯体を形成すること、土壌に電場をかけること、および土壌中のｐＨを小さくすることを必要とする。 ラスキンらは様々な植物を一般的に記載しているが、明細書は主に遺伝子的に改造した植物から金属を回収することを記載している。 繰り返すが、このように、植物の栽培または培養によって土壌を植物採掘または植物抽出することを直接行うことに関して、
ラスキンらは殆ど記載していない。 【０００９】 科学者は、土壌のｐＨを増加させると農場穀物の重金属を吸収する能力が低下することを認めている。 チェイニーら（Chaney et al.）に与えられた米国特許第5,711,784号は、土壌のｐＨを低下させると「ニッケルおよびコバルトの植物処理能力を増加させる」という、この技術分野における考えを反映している。 チェイニーらによって開示されているように、「ｐＨが低くなると溶解性が増加して、根による吸収のためのこれら金属の放出、および植物の地上組織への金属の移動を最適化する。」しかしながら、土壌のｐＨを小さくすることは、金属をより動きやすくし、その場所をさらに汚染してしまうのにつながる可能性がある。
したがって、ニッケル、コバルトおよび他の金属を植物抽出または植物採掘によって超蓄積する植物を栽培することが、このような金属を回収する手段として望ましい代替手段である。 【００１０】 【発明の要約】 したがって、本発明は、金属に富んだ土壌を植物採掘または植物抽出することによって金属の回収を行う改良されたシステムに関する。 【００１１】 また、本発明は、土壌のｐＨを上げることによって植物採掘や植物抽出で使用される植物によるニッケルの取り込みを増加することに関する。 ニッケルは、究極的に、ニッケル含有場所をさらに汚染することなく、経済的に受け入れ可能なコストで植物の組織から回収される。 【００１２】 さらに、本発明は、例えば、金属含有土壌に存在するコバルトや他の金属を収集するために、ニッケルの回収に先立ってまたはニッケルの回収に続いてｐＨを低下させることに関する。 【００１３】 本発明のある特定の面においては、ニワナズナ植物類を好適なｐＨ条件下で栽培して、他の金属と比べてある特定の金属を選択的に蓄積する。 【００１４】 さらに、本発明は、金属含有土壌から回収される少なくとも一種の金属の量を選択的に増加させる方法に関し、該方法は (a) 土壌のｐＨを上昇または低下させ、 (b) 少なくとも一種の金属超蓄積植物を、該少なくとも一種の植物が土壌から得られる少なくとも一種の金属を地上組織に蓄積することを可能にするのに十分な条件下で栽培し、 (c) 工程(a)でｐＨを低下させたのであれば土壌のｐＨを上昇させ、工程(a)でｐ
Ｈを上昇させたのであれば土壌のｐＨを低下させ、 (d) 前記少なくとも一種の金属超蓄積植物を、前記少なくとも一種の植物が土壌から得られる少なくとも一種の第二の金属を地上組織に蓄積することを可能にするのに十分な条件下で栽培 することを特徴とする。 【００１５】 本発明は、さらに、ニッケルを含有する土壌からニッケルを回収する方法に関し、該方法は、 (a) 土壌のｐＨを上昇させ、 (b) 少なくとも一種のニッケル超蓄積植物を、該少なくとも一種の植物の地上組織の、乾燥重量基準で、少なくとも0.1％がニッケルであるような条件下で栽培し、 (c) 前記少なくとも一種の植物を収穫し、 (d) 該収穫された植物からニッケルを回収 することを特徴とする。 【００１６】 本発明は、また、コバルトを含有する土壌からコバルトを回収する方法に関し、該方法は、 (a) 土壌のｐＨを低下させ、 (b) 少なくとも一種のコバルト超蓄積植物を、該少なくとも一種の植物の地上組織の、乾燥重量基準で、少なくとも0.1％がコバルトであるような条件下で栽培し、 (c) 前記少なくとも一種の植物を収穫し、 (d) 該収穫された植物からコバルトを回収 することを特徴とする。 【００１７】 本発明は、さらに、採集した植物を、該植物によるニッケル摂取を基準ニッケル超蓄積種であるアー． ムラーレ103（A. murale 103）によるニッケル摂取と比較してスクリーニングことによって、ニワナズナの新規な超蓄積種を同定することに関する。 これらの新規な金属超蓄積種をニッケル含有土壌で栽培すると、組織の総乾燥重量基準で1.55％以上の濃度で地上組織にニッケルを蓄積することができる。 【００１８】 本発明は、さらにまた、ニワナズナ植物種の種に関する。 【００１９】 本発明は、さらに、ニワナズナ植物種の花粉に関する。 【００２０】 また、本発明は、ニワナズナ植物種の生理学的性質および形態学的性質の全てを有する植物に関する。 【００２１】 さらに、本発明は、ニワナズナ植物種の繁殖材に関する。 【００２２】 さらにまた、本発明は、少なくとも一種の超蓄積植物を金属含有土壌で栽培して、該少なくとも一種の超蓄積植物の地上組織における金属濃度が土壌における金属濃度を少なくとも因子２で越えることを特徴とする、金属含有土壌の浄化方法に関する。 【００２３】 【好ましい態様の詳細な記載】 本発明においては、金属の超蓄積種として分類された植物を使用する植物抽出または植物採掘技術を用いることによって、ある種の金属を選択的に回収することができることが発見された。 金属を含有している土壌で選択された植物を栽培することによって、根から吸収された植物を茎、葉、花などの地上組織並びに他の葉および茎組織に移動させることができる。 この特徴によって、土壌から抽出された金属を回収するのが容易になる。 葉も含めると、地上組織における金属濃度を約5.0％もの高濃度にすることができるので、金属回収は非常に経済的なものになる。 しかしながら、約4.0％、約3.0％、約2.5％、約1.0％または約0.1％
などの約5.0％未満の金属回収濃度であっても、やはり有用である。 例えば、約1
.0％以上の回収であれば、汚染された土壌を浄化して植物採掘するのに経済的利益が得られる。 コバルトの回収が約0.1％〜約1.0％であれば、十分に低価格で汚染された土壌を浄化することができる。 ある種の金属にあっては、回収が約0.1
％未満であっても、汚染された土壌を浄化するのにはやはり効果的であるといえる。 【００２４】 本発明は、さらに、金属含有土壌から回収される少なくとも一種の金属の量を選択的に増加させる方法に関し、該方法は、 (a) 土壌のｐＨを上昇または低下させ、 (b) 少なくとも一種の金属超蓄積植物を、該少なくとも一種の植物が土壌から得られる少なくとも一種の金属を地上組織に蓄積することを可能にするのに十分な条件下で栽培し、 (c) 工程(a)でｐＨを低下させたのであれば土壌のｐＨを上昇させ、工程(a)でｐ
Ｈを上昇させたのであれば土壌のｐＨを低下させ、 (d) 前記少なくとも一種の金属超蓄積植物を、前記少なくとも一種の植物が土壌から得られる少なくとも一種の第二の金属を地上組織に蓄積することを可能にするのに十分な条件下で栽培 することを特徴とする。 【００２５】 本発明は、さらに、ニッケルを含有する土壌からニッケルを回収する方法に関し、該方法は、 (a) 土壌のｐＨを上昇させ、 (b) 少なくとも一種のニッケル超蓄積植物を、該少なくとも一種の植物の地上組織の、乾燥重量基準で、少なくとも0.1％がニッケルであるような条件下で栽培し、 (c) 前記少なくとも一種の植物を収穫し、 (d) 該収穫された植物からニッケルを回収 することを特徴とする。 【００２６】 本発明は、また、コバルトを含有する土壌からコバルトを回収する方法に関し、該方法は、 (a) 土壌のｐＨを低下させ、 (b) 少なくとも一種のコバルト超蓄積植物を、該少なくとも一種の植物の地上組織の、乾燥重量基準で、少なくとも0.1％がコバルトであるような条件下で栽培し、 (c) 前記少なくとも一種の植物を収穫し、 (d) 該収穫された植物からコバルトを回収 することを特徴とする。 【００２７】 本発明は、さらに、採集した植物を、該植物によるニッケル摂取を基準ニッケル超蓄積種であるアー． ムラーレ103（A. murale 103）によるニッケル摂取と比較してスクリーニングすることによって、ニワナズナの新規な超蓄積種を同定することに関する。 これらの新規な金属超蓄積種をニッケル含有土壌で栽培すると、組織の総乾燥重量基準で1.55％以上の濃度で地上組織にニッケルを蓄積することができる。 【００２８】 本発明は、さらにまた、ニワナズナ植物種の種に関する。 【００２９】 本発明は、さらに、ニワナズナ植物種の花粉に関する。 【００３０】 また、本発明は、ニワナズナ植物種の生理学的性質および形態学的性質の全てを有する植物に関する。 【００３１】 さらに、本発明は、ニワナズナ植物種の繁殖材に関する。 【００３２】 さらにまた、本発明は、少なくとも一種の超蓄積植物を金属含有土壌で栽培して、該少なくとも一種の超蓄積植物の地上組織における金属濃度が土壌における金属濃度を少なくとも因子２、好ましくは因子２、３または４で越えることを特徴とする、金属含有土壌の浄化方法に関する。 【００３３】 本発明の好ましい一面においては、金属、例えばニッケルに富んだ土壌に一種以上のニッケル超蓄積植物を栽培すると共に土壌のｐＨを上げることによって、
ニッケルが選択的に蓄積される。 土壌のｐＨは植物の栽培前、栽培中、または栽培後に上昇させることができる。 ｐＨは植物の栽培前に上昇させるのが好ましい。 このように、本発明は、金属に富んだ土壌のｐＨを上げると、他の金属を上回り、ニッケルを植物組織中に蓄積するのに効果があるという驚くべき発見に関する。 植物組織中にコバルトなどの他の金属を選択的に蓄積するために、次いで、
土壌のｐＨを下げることができる。 好ましいｐＨは、特に、特定の金属および土壌に依存して決まる。 例えば、土壌が蛇紋岩土であるか、高いレベルの酸化鉄を含有している場合は、ニッケル抽出に好適なｐＨは約6.3〜約7.0である。 最も好ましいｐＨは、約6.3〜約6.7である。 しかしながら、酸化鉄のレベルが低い場合は、よりアルカリ性のｐＨを使用することもできる。 【００３４】 コバルトの抽出も土壌の化学的性質によって影響される。 例えば、アルミニウムおよび／またはマンガンが土中に存在する場合、コバルトの抽出に最も好ましいｐＨは約5.5である。 一般に、金属抽出にはｐＨ範囲が約5.5〜約7.0であると好ましい。 【００３５】 塩基や酸を用いて土壌のｐＨを上昇させたり低下させたりすることができる。
このような塩基および酸は天然に産するものでも合成されたものであってもよい。 ｐＨを上昇させるためには、石灰岩（方解石性の（CaCO ３ ）またはドロマイト性の（CaMgCO ３ ））、石灰（CaO）、水酸化石灰（Ca(OH) ２ ）、前記塩基のいずれか、または石灰岩同等物を含有する工業的、都市的または農業的副生物などを使用することができる。 「石灰岩同等物」という用語は、石灰岩と同じアルカリ性を有する塩基を含むことを意図している。 ｐＨを低下させるためには、有機酸および無機酸などの酸を使用することができる。 このような有機酸および無機酸の例としては、酢酸、塩酸、硫酸、硫黄、アンモニウム、尿素含有肥料、硝酸、
黄鉄鉱を含む（が、それに限定されない）硫化鉱などを挙げることができる。 【００３６】 添加する塩基または酸の量は土壌の添加時点でのｐＨと土壌の化学的性質に 依存する。 添加量を決定する方法としては、CaCO ３などの塩基または酸を土壌試料に添加して、添加後のｐＨを測定し、次いでｐＨ反応曲線を描いて、所望のｐ
Ｈを得るのに必要な量を外挿法によって推定する。 【００３７】 栽培の後、超蓄積植物を従来のやり方で、即ち、地面のところで切って収穫する。 次いで、収穫材を、干し草を乾燥するように、畑に放置して乾燥させる。 あるいは、アルファルファを乾燥するのと大体同じ方法で、植物組織中の水分の大部分を強制加熱した空気で乾燥することによって除去するようにして、収穫材を乾燥する。 乾燥の後、農業で通常行われている干し草作りによって植物組織を集め、焼成し、エネルギー回収を伴うか伴うことなく灰にまでする。 あるいは、乾燥した植物材を濃酸で加水分解して糖質と金属とにして、米国特許第5,407,817
号、第5,571,703号および第5,779,164号に従って回収することもできる。 糖質は、次いで、発酵させてエタノールにすることができる。 【００３８】 処理の結果得られた乾燥植物は、公知の焙焼、焼結または溶融法でさらに処理して、灰状または鉱石状の金属を、酸溶解および電界採取などの従来の金属精製法で回収することもできる。 【００３９】 約260℃〜約1000℃の従来の溶融、焙焼および焼結温度であれば、乾燥植物材を燃焼して存在する有機金属を酸化および気化し、焼成の間にダイオキシンが蓄積するのを防ぐのに十分である。 好ましい温度は、灰から有機炭素を除去するのに十分な程度の温度である。 最も好ましい温度は約1000℃である。 この工程によって、金属精製の障害となるとして知られている汚染物質を殆ど含むことなく、
蓄積された金属の残さが得られる。 さらに、灰中の他の成分の濃度は、従来法で採掘された鉱石の場合よりもはるかに低いことが期待される。 例えば、ラテライト状蛇紋岩の鉱石は、通常、10,000 ppm（１％）を越えるFeを含有しているのに対して、植物採掘技術で得られた生物体は約100〜500 ppm（0.01〜0.05％）のFe
を含有しているのみである。 【００４０】 定義によると、ニッケル超蓄積植物は、１kgの乾燥植物組織重量（該組織は植物が天然に発生する土壌で育った植物から得られるもの）当たり少なくとも約10
00 mgのニッケルを蓄積するとされている。 同様に、コバルト超蓄積直物は、１k
gの乾燥植物組織重量（該組織は植物が天然に発生する土壌で育った植物から得られるもの）当たり少なくとも約1000 mgのコバルトを蓄積すると定義されている。 しかしながら、亜鉛超蓄積植物およびマンガン超蓄積植物は、それぞれ、１
kgの乾燥植物組織重量（該組織は植物が天然に発生する土壌で育った植物から得られるもの）当たり少なくとも約10,000 mgの亜鉛およびマンガンを蓄積すると定義されている。 最後に、カドミウム超蓄積植物は、１kgの乾燥植物組織重量（
該組織は植物が天然に発生する土壌で育った植物から得られるもの）当たり少なくとも約100 mgのカドミウムを蓄積すると定義されている。 【００４１】 非常に様々な植物をスクリーニングすることにより、ニワナズナ属（アブラナ科）の植物はニッケルの超蓄積種として同定されてきた。 これらの植物は、自然にコバルトも蓄積し、Zn、MnおよびCd等の金属並びにPd、Rh、Ru、Pt、Ir、OsおよびReを有するプラチナおよびパラジウム族の金属を蓄積する場合がある。 【００４２】 より具体的には、地上組織に自然にニッケルを濃縮し、通常はコバルトおよび他の金属の高い吸収性を示す植物としては、ニワナズナ属のオドンタルヘーナ（
Odontarrhena）節のものを挙げることができる。 当該植物を汚染された土壌で栽培すると、前記金属がニッケル超蓄積ニワナズナ植物種中に蓄積する。 ニワナズナ属のオドンタルヘーナ節中の約48の分類単位がニッケルの超蓄積を行うものとして知られている。 これらは、以下の種を含んでいる。 アー． アカマシクム（A.
akamasicum）、アー． アルペストレ（A. alpestre）、アー． アナトリクム（A.
anatolicum）、アー． カルリクロウム（A. callichroum）、アー． カスシウム（A. cassium）、アー． コンドロギヌム（A. chondrogynum）、アー． キリキクム（A. cilicicum）、アー． コンデンサトゥム（A. condensatum）、アー． コンステルラトゥム（A. constellatum）、アー． クレヌラトゥム（A. crenulatum）
、アー． キプリクム（A. cypricum）、アー． ダウィシアヌム（A. davisianum）
、アー． ディスコロル（A. discolor）、アー． デュベルトレティイ（A. dubert
retii）、アー． エリオプフィルム（A. eriophyllum）、アー． エウボエウム（A
. euboeum）、アー． フロリブンドゥム（A. floribundum）、アー． ギオスナヌム（A. giosnanum）、アー． フベルモラティイ（A. hubermorathii）、アー． イャンケニイ（A. janchenii）、アー． マルクグラフィイ（A. markgrafii）、アー． マスメナエウム（A. masmenaeum）、アー． オボウァトゥム（A. obovatum）
、アー． オキシカルプム（A. oxycarpum）、アー． ペニュウィネシス（A. penjw
inensis）、アー． ピニフォリウム（A. pinifolium）、アー． プテロカルプム（
A. pterocarpum）、アー． ロベルティアヌム（A. robertianum）、アー． サマリフェルム（A. samariferum）、アー． シンガレンセ（A. singarense）、アー．
スモリカヌム（A. smolikanum）、アー． シリアクム（A. syriacum）、アー． トラペジフォルメ（A. trapeziforme）、アー． トロオディイ（A. troodii）、アー． ヴィルガトゥム（A. virgatum）、アー． ムラーレ（A. murale）、アー． ピントダシルウァエ（A. pintodasilvae）(アー．セルピルリフォリウム ウァル．ルシタニクム（A. serpyllifolium var. lusitanicum）としても知られている
)、アー． セルピルリフォリウム（A. serpyllifolium）、アー． マラキタヌム（
A. malacitanum）(アー セルピルリフォリウム ウァル．マラキタヌム（A. se
rpyllifolium var. malacitanum）としても知られている)、アー． レスビアクム（A. lesbiacum）、アー． ファルラキヌム（A. fallacinum）、アー． アルゲンテウム（A. argenteum）、アー． ベルトロニイ（A. bertolonii）、アー． テニウム（A. tenium）、アー． ヘルドレイキイ（A. heldreichii）、アー． コルシクム（A. corsicum）、アー． プテロカルプム（A. pterocarpum）およびアー．
カリクム（A. caricum）、並びにアー． コルシクム（A. corsicum）G16、アー．
ムラーレ（A. murale）G69およびアー． ムラーレ（A. murale）G82などの新しく発見された種。 これらの新種は、ブダペスト条約の規定に基づいて、1998年11月６日に、10801ユニバーシティブールバード、マナサス、バージニア州20110-220
9のアメリカンタイプカルチャーコレクション（American Type Culture Collect
ion）に預託されATCC番号203436、203437および203438をそれぞれ与えられた。 【００４３】 公知のニワナズナ超蓄積種よりも20％より多い量のニッケルを自然に蓄積するニワナズナの種を単離した。 ギリシャで単離されたアー． ムラーレG49（A. mura
le G49）、アー． ムラーレG54（A. murale G54）、アー． ムラーレG69（A. mura
le G69）およびアー． ムラーレG82（A. murale G82）、並びにトルコで単離されたアー． コルシクムG16（A. corsicum G16）は、全て、公知の種であるアー． ムラーレ103（A. murale 103）よりも多い量のニッケルを蓄積する。 アー． ムラーレ103は、蛇紋岩土の試験畑からの一植物苗条の乾燥重量の1.14％をニッケルが占めるように、ニッケルを蓄積する。 新規な超蓄積種は、苗条の乾燥重量の1.55
〜1.60％がニッケルであるような量で、ニッケルを蓄積する。 これら５種の新しい蓄積種の、基準蓄積種アー． ムラーレ103（A. murale 103）と比較した、ニッケル蓄積の結果を例４に示す。 【００４４】 熱帯起源のものを含む約250の他の植物分類単位がニッケルおよび他の金属の相当量を蓄積することが示されている。 しかしながら、これらの植物の多くは、
植物組織の乾燥重量で１kg当たり約10,000 mgを越える金属を蓄積することはできない。 他の金属蓄積植物としては、キアノティス ロンギフォリア（Cyanotis
longifolia）などの、キアノティス（Cyanotis）属の種；ブルボスティリス
ムクロナータ（Bulbostylis mucronata）などの、ブルボスティリス（Bulbostyl
is）属の種；コムブレトゥム デカンドルム（Combretum decandrum）などの、
コムブレトゥム（Combretum）属の種；セー． アルバ（C. alba）、セー． ウァギナタ（C. vaginata）およびセー． アルギロプフィア（C. argyrophylla）などの、クラススーラ（Crassula）属の種;クレトラ バルビネルヴィス（Clethra bar
binervis）などの、クレトラ（Clethra）属の種；ゲー． インテルメディア（G.
intermedia）、ゲー． マグニフィカ（G. magnifica）、ゲー． モンタナ（G. mon
tana）、ゲー． プルイノサ（G. pruinosa）、ゲー． トリフォリアータ（G. trif
oliata）およびゲー． ラセモーサ（G.racemosa）等を含むゲイスソイス（Geisso
is）属の種のようなクノニアケアエ（Cunoniaceae）科由来の植物；アルゴプフィルム（Argophyllum）属の種；トラスピ カエルレセンス（Thlaspi caerulesc
ens）、トラスピ モンタヌム ウァル． モンタヌム（Thlaspi montanum var. m
ontanum）およびトラスピ モンタヌム ウァル． シスキユーエンセ（Thlaspi m
ontanum var. siskiyouense）などのトラスピ（Thlaspi）属の種のようなアブラナ（Brassicaceae）科の植物；セルペンティーネ ポリガロイデス（Serpentine
polygaloides）などの、セルペンティーネ（Serpentine）属の種；セベルティア アクミナータ（Sebertia acuminata）などの、セベルティア（Sebertia）属の種；ヒバントゥス フロリブンダス（Hybanthus floribundas）などの、ヒバントゥス（Hybanthus）属の種；プシコトリア ドゥアルレイ（Psychotria doua
rrei）などの、プシコトリア（Psychotria）属の種；リノレア ベンガレンシス（Rinorea bengalensis）などの、リノレア（Rinorea）属の種；ペアルソニア
メタルリフェラ（Pearsonia metallifera）などの、ペアルソニア（Pearsonia）
属の種；セベルティア アクミナータ（Sebertia acuminata）などの、セベルティア（Sebertia）属の種；並びに以下の属の種：ホマリウム（Homalium）、ミリスティーカ（Myristica）、トリコスペルマム（Trichospermum）、プランコネルラ（Planchonella）およびペルトラリア（Peltraria）。 更なる植物としては、
ストレプタントゥス ポリガロイデス（Streptanthus polygaloides）、ベルケヤ コディイ（Berkheya coddii）、プフィルラントゥス パラワネネシス（Phy
llanthus palawanenesis）、ディカペタルム ゲロニオイデス エスエスピー．
トゥベルクラトゥム（Dichapetalum gelonioides ssp. Tuberculatum）およびスタックホウシア トリオニイ（Stackhousia tryonii）を含むが、これらに限定されない。 【００４５】 さらにまた別の金属超蓄積植物を以下に列挙する。 【００４６】 キツネノマゴ科（ACANTHACEAE） ブレプファリス アクミナータ（Blepharis acuminata）、イュスティシア ランスティアキイ（Justicia lanstyakii）、ロプフォスタキス ウィローサ（Lop
hostachys villosa）、プフィディアシア リンダウィイ（Phidiasia lindavii
）、ルエルリア ゲミニフローラ（Ruellia geminiflora） ウラボシ科（ADIANTACEAE） アディアンタム エスピー． （Adiantum sp.） ウルシ科（ANACARDIACEAE） ルス ウィルディイ（Rhus wildii） キク科（ASTERACEAE） ベルケヤ コディイ（Berkheya coddii）、クロモラエナ エスピー． シーエフ． メイェリ（Chromolaena sp. cf. meyeri）、ドゥコマ ニクコリフェラ（Duco
ma niccolifera）、ゴクナティア クラスシフォリア（Gochnatia crassifolia
）、ゲー． レクルウァ（G. recurva）、コアノプフィロン グランディケプス（
Koanophyllon grandiceps）、ケー． プリノデス（K. prinodes）、レウカンテモプシス アルピーナ（Leucanthemopsis alpina）、ペンタカリア（Pentacalia）
、セネキオ セネキオ パウペルクルス（Senecio Senecio pauperculus）、シャフェラ プラティプフィラ（Shafera platyphylla）、ソリダゴ ヒスピダ（S
olidago hispida） ムラサキ科（BORAGINACEAE） ヘリオトロピウム エスピー． （Heliotropium sp.） アブラナ科（BRASSICACEAE） ボルンムエルレラ（Bornmuellera）、カルダミーネ レセディフォリア（Cardam
ine resedifolia）、コクレアリア アウケリ（Cochlearia aucheri）、セー．
セムペリウィウム（C. sempervivum）、ペルタリア エマルギナータ（Peltaria
emarginata）、ストレプタントゥス ポリガロイデス（Streptanthus polygalo
ides） ツゲ科（BUXACEAE） ブクス（Buxus） キキョウ科（CAMPANULACEAE） カンパヌラ スケウクゼリ（Campanula scheuchzeri）、アレナリア（Arenaria
）、ミヌアルティア ラリキフォリア（Minuartia laricifolia）、エム． ウェルナ（M. verna） オトギリソウ科（CLUSIACEAE） ガルキニア バケリアーナ（Garcinia bakeriana）、ゲー． ポリネウラ（G. pol
yneura）、ゲー． レウォルタ（G. revoluta）、ゲー． ルスキフォリア（G. rusc
ifolia） ヒルガオ科（CONVOLVULACEAE） メルレミア キサントプフィルラ（Merremia xanthophylla） クノニアケアエ（CUNONIACEAE） パンケリア エングレリアーナ（Pancheria engleriana） ディカペタラケアエ（DICHAPETALACEAE） ディカペタルム ゲロニオイデス（Dichapetalum gelonioides）、エスエスピー． トゥベルクラトゥム（ssp. tuberculatum）、エスエスピー． アンダマニクム（ssp. Andamanicum） フタバガキ科（DIPTEROCARPACEAE） ショレア テヌイラムローサ（Shorea tenuiramulosa） エスカルロニアケアエ（ESCALLONIACEAE） アルゴプフィルム グルノウィイ（Argophyllum grunowii）、アー． ラクスム（
A.laxum） トウダイグサ科（EUPHORBIACEAE） バロギア エスピー． （Baloghia sp.）、ボナニア（Bonania）、クレイディオン ウィエルラルディイ（Cleidion viellardii）、クニドスコルス エスピー． セーエフ． バヒアヌス（Cnidoscolus sp. cf. Bahianus）、エウプフォルビア（Euphorbia）、ギムナンテス レクルウァ（Gymnanthes recurva）、レウコクロトン（Leucocroton）、プフィルラントゥス（Phyllanthus）、サピウム エリトロスペルムン（Sapium erythrospermum）、サウィア（Savia） マメ科（FABACEAE） アンティルリス エスピー． （Anthyllis sp.）、ペアルソニア メタルリフェラ（Pearsonia metallifera）、トリフォリウム パレスケンス（Trifolium pal
lescens） イイギリ科（FLACOURTIACEAE） カセアリア シルウァナ（Casearia silvana）、ホマリウム（Homalium）、キシロスマ（Xylosma） イグサ科（JUNCACEAE） ルズラ ルテア（Luzula lutea） センダン科（MELIACEAE） ワルスラ モノプフィルラ（Walsura monophylla） ニクズク科（MYRISTICACEAE） ミリスティカ ラウリフォリア（Myristica laurifolia） フトモモ科（MYRTACEAE） モシエラ アラネオサ（Mosiera araneosa）、エム． エクマニイ（M. ekmanii）
、エム． クス ミラフロレンシス（M. x miraflorensis）、エム． オプフィティコラ（M. ophiticola）、プシディウム アラネオスム（Psidium araneosum）、
ピー． ハウァネンセ（P. havanense） オクナケアエ（OCHNACEAE） ブラッケンリドゲア パルストリス およびエスエスピー． フォックスウォルティイ およびエスエスピー． キィエルベルギイ（Brackenridgea palustris and
ssp. foxworthyi and ssp. kjellbergii）、オウラテア ニティダ（Ouratea ni
tida）、オー． ストリアータ（O. striata） モクセイ科（OLEACEAE） キオナントゥス ドミンゲンシス（Chionanthus domingensis） オンコテカケアエ（ONCOTHECACEAE） オンコテカ バランサエ（Oncotheca balansae） イネ科（POACEAE） トリセトゥム ディスティコプフィルム（Trisetum distichophyllum） キンポウゲ科（RANUNCULACEAE） ラヌンクルス グラキアリス（Ranunculus glacialis） アカネ科（RUBIACEAE） アリアドネ シャフェリ エスエスピー． シャフェリ およびエスエスピー． モアエンシス（Ariadne shaferi ssp. shaferi and ssp. moaensis）、ミトラカルプス エスピー． （Mitracarpus sp.）、プフィルロメリア コロナータ（Phyll
omelia coronata）、プシコトリア クレメンティス（Psychotria clementis）
、ピー． コスティウェニア（P. costivenia）、ピー． ドウアルレイ（P. douarr
ei）、ピー． グロメラータ（P. glomerata）、ピー． オスセアーナ（P. osseana
）、ピー． ウァンヘルマニイ（P. vanhermanii）、ロンデレティア（Rondeletia
） アカテツ科（SAPOTACEAE） プランコネルラ オクイェドラ（Planchonella oxyedra）、セベルティア アクミナータ（Sebertia acuminata） ユキノシタ科（SAXIFRAGACEAE） サクシフラーガ（Saxifraga） ゴマノハグサ科（SCROPHULARIACEAE） エステルハズィヤ エスピー． およびリナリア アルピーナ（Esterhazya sp. a
nd Linaria alpina） スタックホウシアケアエ（STACKHOUSIACEAE） スタックホウシア トリオニイ（Stackhousia tryonii） シナノキ科（TILIACEAE） テトラリクス ブラキペタルス（Tetralix brachypetalus）、テー． クリスタレンシス（T. cristalensis）、テー． イャウコエンシス（T. jaucoensis）、テー． モアエンシス（T. moaensis）、テー． ニペンシス（T. nipensis）、トリコスペルムム キィエルベルギイ（Trichospermum kjellbergii） トゥルネラケアエ（TURNERACEAE） トゥルネラ スブヌーダ（Turnera subnuda） ウェロズィアケアエ（VELLOZIACEAE） ウェロズィア エスピー． （Vellozia sp.） スミレ科（VIOLACEAE） アガテア デプランケイ（Agatea deplanchei）、ヒバントゥス（Hybanthus）、
リノレア ベンガレンシス（Rinorea bengalensis）、エール． イャウァニカ（R
. javanica）、リノレア エスピー． （Rinorea sp.） カエデ科（ACERACEAE） アケル プセウドプラタヌス（Acer pseudoplatanus） アブラナ科（BRASSICACEAE） カルダミノプシス ハルレリ（Cardaminopsis halleri）、トゥラスピ アワラヌム（Thlaspi avalanum）、テー． ブラキペタルム（T. brachypetalum）、テー． カエルレセンス（T. caerulescens）、テー． オクロレウクム（T. ochroleucu
m）、テー． ロトゥンディフォリウム スブエスピー． ケパエイフォリウム（T.
rotundifolium subsp. Cepaeifolium）、テー． プラエコックス（T. praecox）
、テー． ステノプテルム（T. stenopterum）、テー． タトゥレンセ（T. tatrens
e） ナデシコ科（CARYOPHYLLACEAE） ミヌアルティア ウェルナ（Minuartia verna）、ポリカルパエア シナンドラ（Polycarpaea synandra） ゴジアオイ科（CISTACEAE） キストゥス インカヌス エスエスピー． クレティクス（Cistus incanus ssp.
creticus） ディカペタラケアエ（DICHAPETALACEAE） ディカペタルム ゲロニオイデス（Dichapetalum gelonioides） イソマツ科（PLUMBAGINACEAE） アルメリア マリティマ ウァル． ハルレリ（Armeria maritima var. halleri
） イネ科（POACEAE） アグロスティス ストロニフェラ（Agrostis stolonifera）、アー． テニウス（
A. tenuis）、アルヘナテルム エラティウス（Arrhenatherum elatius）、フェストゥカ オウィーナ（Festuca ovina） タデ科（POLYGONACEAE） ルメックス アケトーサ（Rumex acetosa） スミレ科（VIOLACEAE） ウィオラ カラミナリア（Viola calaminaria） ヒユ科（AMARANTHACEAE） パンディアーカ メタルロルム（Pandiaka metallorum）、ケロシア トリギーナ（Celosia trigyna） キク科（ASTERACEAE） アニソパップス キネンシス（Anisopappus chinensis）、アー． ダウィイ（A.
davyi）、グテンベルギア プベスケンス（Gutenbergia pubescens）、ミロティア ミオソティディフォリアプ（Millotia myosotidifoliab）、ウェルノニア
ペテルシイ（Vernonia petersii） ナデシコ科（CARYOPHYLLACEAE） ミヌアルティア ウェルナ エスエスピー． ヘルキニカ（Minuartia verna ssp.
hercynica）およびシレーネ コバルティコラ（Silene cobalticola） ツユクサ科（COMMELINACEAE） コムメリナ ジグザグ（Commelina zigzag）およびキアノティス ロンギフォリア（Cyanotis longifolia） ヒルガオ科（CONVOLVULACEAE） イポモエア アルピーナ（Ipomoea alpina） ベンケイソウ科（CRASSULACEAE） クラススラ アルバ（Crassula alba）およびセー． ウァギナータ（C. vaginata
） カヤツリグサ科（CYPERACEAE） アスコレピス メタルロルム（Ascolepis metallorum）、ブルボスティリス クプリコラ（Bulbostylis cupricola）、ベー． プセウドペレニス（B. pseudopere
nnis） トウダイグサ科（EUPHORBIACEAE） モナデニウム クプリコラ（Monadenium cupricola）およびプフィラントゥス
ウィラミオイデス（Phyllanthus willamioides） マメ科（FABACAEAE） クロタラリア コバルティコラ（Crotalaria cobalticola）およびウィグナ ドロミティカ（Vigna dolomitica） アヤメ科（IRIDACEAE） グラディオルス グレガリウス（Gladiolus gregarius） シソ科（LAMIACEAE） アエオルラントゥス スバカウリス ウァル． リネアリス（Aeollanthus subaca
ulis var. linearis）、アー． ホムブレイ（A. homblei）、アー． サクサティリス（A. saxatilis）、アー． スバカウリス ウァル． エリコイデスおよびウァル． リネアリス（A. subacaulis var. ericoides and var. linearis）、ベキウム グランディフロルム ウァル． ウァンデリスティイ（Becium grandiflorum va
r. vanderystii）、ハウマニアストゥルム ホムブレイ（Haumaniastrum homble
i）、ハー． カタンゲンセ（H. katangense）、ハー． ロベルティイ（H. roberti
i）、ハー． ロスラトゥム（H. rosulatum） アオイ科（MALVACEAE） ヒビスクス ロダントゥス（Hibiscus rhodanthus） マツ科（PINACEAE） アビエス バルサメア（Abies balsamea） イネ科（POACEAE） エラグロスティス ラケモーサ（Eragrostis racemosa）、レンドリア アルテーラ（Rendlia altera）、スポロボルス コンゴエンシス（Sporobolus congoen
sis） シダ科（PTERIDACEAE） アクティニオプテリス エスピー． （Actiniopteris sp.） ゴマノハグサ科（SCROPHULARIACEAE） アレクトラ セスシリフローラ ウァル． セネガレンシス（Alectra sessiliflo
ra var. Senegalensis）、ブクネラ ヘンリクエシイ（Buchnera henriquesii）
、クレピドロパロン テヌイーサ（Crepidorhopalon tenuisa）、セー． ペレンニサ（C. perennisa）、ソプビア マンニイ（Sopubia mannii）、エス． メタルロルム（S. metallorum）、エス． ネプトゥニイ（S. neptunii）、ストリーガ
ヘルモンテーカ（Striga hermontheca） シナノキ科（TILIACEAE） トリウムフェッタ デキンドティアーナ（Triumfetta dekindtiana）、テー． ディジタータ（T. digitata）、テー． ウェルウィットシイ ウァル． デスカンピイ（T. welwitschii var. descampii） ウェロズィアケアエ（VELLOZIACEAE） キセロピータ レティネルウィス ウァル． エクイセトイデス（Xerophyta reti
nervis var. equisetoides） キョウチクトウ科（APOCYNACEAE） アリキシア ルブリカウリス（Alyxia rubricaulis） ニシキギ科（CELASTRACEAE） マイテヌス ブレアウィアーナ（Maytenus bureaviana）、エム． パンケリアーナ（M. pancheriana）、エム． セベルティアーナ（M. sebertiana） オトギリソウ科（CLUSIACEAE） ガルキニア アムプレキシカウリス（Garcinia amplexicaulis） フトモモ科（MYRTACEAE） エウゲニア クルシオイデス（Eugenia clusioides） ヤマモガシ科（PROTEACEAE） ベアウプレオプシス パニクラータ（Beaupreopsis paniculata）、マカダミア アングスティフォリア（Macadamia angustifolia）、エム． ネウロプフィルラ（M. neurophylla） キク科（ASTERACEAE） ハプロパップス フレモンティイ（Haplopappus fremontii）、マカエランテラ グラブリウスクラ（Machaeranthera glabriuscula）、エム． ラモーサ（M. ra
mosa）、エム． ウェヌスタ（M. venusta） アブラナ科（BRASSICACEAE） スタンレィヤ ピンナタ（Stanleya pinnata）、エス． ビピンナータ（S. bipin
nata） アカザ科（CHENOPODIACEAE） アトリプレックス コンフェルティフォリア（Atriplex confertifolia） サガリバナ科（LECYTHIDACEAE） レキティス オルラリア（Lecythis ollaria） マメ科（LEGUMINOSAE） アカキア カーナ（Acacia cana）、アストラガルス ビスルカトゥス（Astraga
lus bisulcatus）、アー． オステルホウティイ（A. osterhoutii）、アー． パッテルソニイ（A. pattersonii）、アー． ペクティナトゥス（A. pectinatus）、
アー． ラケモスス（A. racemosus）、ネプトゥニア アムプレキシカウリス（Ne
ptunia amplexicaulis） アカネ科（RUBIACEAE） モリンダ レティクラータ（Morinda reticulata） ゴマノハグサ科（SCROPHULARIACEAE） カスティルレイャ クロモーサ（Castilleja chromosa）。 【００４７】 蓄積される金属としては、ニッケル、コバルト、バリウム、金、ベリリウム、
水銀、モリブデン、銅、砒素、セレニウム、アンチモン、マンガン、銀、タリウム、錫、鉛、ルビジウム、クロム、セリウム、バナジウム、セシウム、ウラン、
プルトニウム、ストロンチウム、イットリウム、テクネチウム、ルテニウム、パラジウム、ロジウム、プラチナ、オスミウム、レニウム、亜鉛およびカドミウムを挙げることができる。 【００４８】 金属イオン封鎖は、他の硝酸塩含有肥料ではなく、アンモニウム含有肥料またはアンモニウム発生肥料を使用して土壌のカルシウム濃度を最適化し、超蓄積植物が栽培されている土壌にキレート化剤を添加することによって改良することができる。 【００４９】 ニッケルやコバルトのような金属を超蓄積するニワナズナ種は、土壌中のカルシウム濃度が低く、Ca：Mg比が小さい、ニッケルを豊富に含んだ超苦鉄質の蛇紋岩土で進化した。 土中のカルシウム濃度が極端に高かったり低かったりすると、
ニワナズナによるニッケルの超蓄積が抑制されることが、今ではわかっている。
PCT/US97/15109を参照されたい。 土中の許容可能なカルシウム濃度は約0.128 mM
〜約5.0 mMの範囲である。 パーセンテージで表すと、土中の許容可能なカルシウム濃度は交換可能なカチオンの約２％〜約80％の範囲である。 好ましい範囲は、
交換可能なカチオンの約10％〜約80％である。 最も好ましい範囲は、交換可能なカチオンの約30％〜約70％である。 必要であれば、石灰岩のような土壌にカルシウム含有剤を添加することによって、上記範囲を達成することができる。 さらに、土中の交換可能なカルシウムを増加させるために石膏を添加してニッケルの蓄積を促進することができる。 【００５０】 中間的な濃度のカルシウム、即ち、約0.128 mM〜約5.0 mMの範囲の濃度のカルシウムが存在すると、ニッケルの吸収を増加することができる。 一方、カルシウム値が約0.128 mM以下、または約5.0 mM以上であると、ニッケルの吸収を低下させる。 推奨されるよりもはるかに小さい値である約0.16と約0.40との間の交換可能なCa：Mg比と組み合わせると、植物組織中におけるニッケル濃度がさらに上昇するのが観察される。 「交換可能なCa：Mg比」という用語によって、土中の抽出可能なカルシウムと抽出可能なマグネシウムとの割合を意味している。 【００５１】 ニワナズナのような超蓄積植物は地上組織に金属を超蓄積する能力を発達させてきたが、特に汚染された土壌においては成長を支援する肥料を、超蓄積を増加するための添加剤として使用することができる。 アンモニウム肥料は酸性化を根の付近に集中させ、Ni、Zn、Cd、Coなどの様々な金属の超蓄積を促進する。 アンモニウム肥料の使用それ自体はよく知られていることであり、使用可能な肥料および手順は、当業者によって、ルーチンワーク的な試験以上のことを行うことなく容易に決定することができる。 他の添加剤としては、例えば、ニッケルの産出量を最大にするのに役立つ燐酸塩などの栄養剤を挙げることができるが、それに限定されない。 【００５２】 汚染されている土壌に使用することのできる他の添加剤は、金属キレート化剤である。 金属キレートは農業分野で普通に使用されており、生体細胞中で自然に発生するものである。 ニトロロトリ酢酸（NTA）、エチレンジアミンテトラ酢酸（EDTA）、エチレングリコール-ビス-（p-アミノエチレンエーテル-N,N-テトラ酢酸）または当業者にキレート化剤として知られている様々なアミノ酢酸などのキレート化剤を植物採掘または植物抽出する土壌に添加すると、土中の金属を根の表面へと移動させて、地上組織中に摂取・移動させるのを促進する。 好ましいキレート化剤はNTAまたはEDTAである。 通常、キレート化剤は土１kg当たり約0.5
〜10ミリモルの濃度範囲で添加される。 肥料の使用と同様に、キレート化剤の最適濃度は、ルーチンワーク的な試験によって容易に決定することができる。 Fe、
MgおよびCaが高いレベルで存在する土壌において、ニッケルをキレート化するキレート化合物は、超蓄積植物によって摂取させるニッケルの量を選択的に増加させる。 【００５３】 以下の例は本発明の方法を説明するものであるが、本発明を限定しない。 当業者に自明である様々な条件を適切に変更したり改めたりすることは、通常、行われることであり、それらは本発明の精神および範囲内である。 【００５４】 【実施例】 （例１） 汚染された土壌または蛇紋岩土（窒化マグネシウムは濾過されている）の19
セットの鉢（4L）中で、２セットのアー． ムラーレ103植物（A. murale）を120
日間栽培した。 各セットの第一鉢では酸性化を行わず、第二鉢では酸性化を行った。 脱イオン水を毎日供給することによって、土地の許容量近くまでの水分を維持した。 植物は、日中約28℃で、夜は約20℃で栽培した。 硝酸を用いて土壌を酸性化し、試薬グレードの粉末CaCO ３を用いてｐＨを上昇させた。 土壌としては、
南西オレゴンから得られたニッケルに富んだ（約100〜約5000 ppmのニッケルを含有している）蛇紋岩土（土壌３〜19）、オンタリオ州ポート・コルボーン（Po
rt Colborne）から得られるニッケル精製で汚染されたウェルランドローム（Wel
land loam）（土壌１）、およびオンタリオ州ポート・コルボーンから得られたニッケル精製で汚染されたクォリー腐植土（Quarry muck）（土壌２）を使用した。 植物の生育を最適化するために、特に、ニッケル、カリウム、イオウおよびリンを含有している肥料が添加された。 【００５５】 表１および表２は汚染された土壌での試験の結果を示している。 【００５６】 【表１】 【００５７】 【表２】 【００５８】 表中、「TRT」は処理を意味する。 処理２においては土壌のｐＨは調整されていない。 処理６においては、土壌のｐＨは酸性化された。 【００５９】 表１および２に示されているように、酸性の弱いｐＨの土壌で栽培された植物は、一般に、酸性の強い土壌で栽培された植物よりもはるかに多量のニッケルを蓄積する。 さらに、酸性の弱い土壌でより多くのニッケルを吸収した植物は、コバルト、マンガンおよび亜鉛など他の金属を少量蓄積した。 コバルト、マンガンおよび亜鉛などは土壌のｐＨを上げた後の苗条中では、通常、より低い濃度で見出される。 【００６０】 （例２） 上記例を確認すると共に最適条件を得るために、ニワナズナ植物をニッケル精製で汚染されたウェルランドローム（土壌１）で栽培した。 この時、石灰岩を投入してｐＨを上昇させた（表３）。 また、植物をニッケル精製で汚染されたクォリー腐植土（土壌２）および蛇紋岩土（土壌３〜11）（表４）でも栽培した。 例１に記載したのと同じ栽培条件を例２でも使用した。 【００６１】 【表３】 幾何平均苗条産出量への燐酸塩、ｐＨおよびCa：Mg比の変化の影響、並びにニッケル精製で汚染されたウェルランドローム（土壌１）で120日間栽培された二種のニワナズナの微細栄養組成物 【００６２】 *agは、同じ文字が付いている数字はダンカン-ウォーカー Ｋ-比 ｔ-試験によるＰ＜0.05レベルであまり変わらないことを示している。 「TRT」は処理である。 【００６３】 【表４】 土壌のｐＨへの土壌処理の影響、およびニッケル精製で汚染されたウェルランドローム（土壌１）、ニッケル精製で汚染されたクォリー腐植土（土壌２）および蛇紋岩土（土壌３〜11）で120日間栽培されたアリススム ムラーレ（Alyssum m
urale）およびアリススム コルシクム（Alyssum corsicum）の微細栄養組成物 【００６４】 "TRT"は処理を意味する。 "Mlo pH"は中低ｐＨを意味する。 土壌の番号は例１における土壌の番号に対応する。 【００６５】 この「ｐＨ系列」実験によって、石灰岩を使用することによってニワナズナへのニッケル吸収が増加し、植物組織がニッケルを高濃度で蓄積するようになることが実証された。 【００６６】 （例３） 実験の結果は、ニッケル精製で汚染されたクォリー腐植土（土壌２）（表５）
、並びにニッケル精製で汚染されたウェルランドローム（土壌１）、ニッケル精製で汚染されたクォリー腐植土（土壌２）および例１から選択された蛇紋岩土（
土壌３〜11）（表６）で栽培されたニワナズナ植物に石灰水を投与することによる、植物組織中におけるニッケル摂取の幾何平均の増加を示している。 栽培条件は例１および例２の条件と同じである。 【００６７】 【表５】 全苗条における元素の平均濃度、並びにニッケル精製で汚染されたクォリー腐植土（土壌２）で60日間栽培されたアリススム ムラーレ（Alyssum murale）およびアリススム コルシクム（Alyssum corsicum）の苗条産出量への土壌処理の影響 【００６８】 *aeは同じ文字が付いている数字は、ダンカン-ウォーカー Ｋ-比 ｔ-試験によるＰ＜0.05レベルであまり変わらないことを示している。 "TRT"は処理である。 【００６９】 【表６】 燐酸塩の添加、ｐＨの調整、またはCa：Mg比の調整によって、ニッケル精製で汚染されたウェルランドローム（土壌１）、ニッケル精製で汚染されたクォリー腐植土（土壌２）および蛇紋岩土（土壌３〜11）を変えることの、土壌ｐＨ、平均産出量、および120日間栽培したニワナズナ種の苗条の微量養素組成物への影響（GMは幾何平均を意味する。） 【００７０】 "TRT"は処理を意味する。 土壌の番号は例１における土壌の番号に対応する。 【００７１】 （例４） −新規な超蓄積植物 オレゴン州ジョセフィン郡（Josephine County）の蛇紋岩堆積土（serpentine
colluvial soil）の畑で栽培したニワナズナ種の苗条における元素の濃度を下記表７に示す。 【００７２】 【表７】 【００７３】 元素は mg/kg単位の量で存在している。 【００７４】 茎および葉を含む全苗条または側枝試料を各遺伝子型毎に鉢または畑から集め、強制空気乾燥オーブン中で乾燥し、約0.1 mmよりも小さく無汚染粉砕器で粉砕した。 粉砕した試料をホウケイ酸塩製のビーカーに入れ、480℃で一晩かけて灰にした。 得られた灰を溶解するために硝酸を添加し、次いで、ホットプレート上で乾燥するまで加熱した。 塩酸（3.0 M）を添加し、回収したニッケルの濃度を測定するためにビーカーを２時間還流した。 ニッケルの濃度は誘導接続アルゴンプラズマ発生スペクトル測定器（inductively coupled argon plasma emission
spectrometer）で測定した。 低濃度のものについては、原子吸収スペクトル測定によって測定した。 【００７５】 特定の植物、および植物採掘または植物抽出によるニッケルなどの金属摂取を増加する特定の方法に関して、本発明を詳細に説明してきた。 操作性のために必要である場合を除いて、これら特定の事柄に限定することを意図していないし、
また、添付の請求項にこのような限定を与えるべきではない。 以上の記載より、
当業者であれば容易に本発明の本質的な性質を理解することができ、また、本発明の精神および範囲から外れることなく、本発明に様々な変更や修正を加えて不当な実験を行うことなく様々な用途および条件に本発明を適用することができる。 ここで引用されている全ての特許、特許出願および刊行物を、その全体を参照によって本願に取り入れる。 ───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (31)優先権主張番号 ０９／３８６，３７３ (32)優先日 平成11年８月31日(1999．8．31) (33)優先権主張国 米国（ＵＳ） (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ，ＺＷ )，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ， ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ， ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，Ｃ Ｒ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＤＭ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ， ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，Ｋ Ｚ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＡ ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ， ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，Ｓ Ｋ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ (71)出願人 ベイカー，アラン，ジェイ． ，エム． イギリス国，エス． ヨークシャー エス10 ３イージー，シェフフィェルド，エンド クリッフェ クレッセント，アーンシャー ホール，ザ ワーデンズ ハウス (72)発明者 チャニー，ルーフス，エル． アメリカ合州国，メリーランド州 20705， ベルツヴィル，10910 ドレスデン ドラ イブ (72)発明者 アンゴー，ジェイ，スコット アメリカ合衆国，メリーランド州 21042， エリコット シティー，10241 ブリスト ー チャネル (72)発明者 リー，イン−ミング アメリカ合衆国，メリーランド州 20854， ポトマック，12019 コールドストリーム ドライブ (72)発明者 ベイカー，アラン，ジェイ． ，エム． イギリス国，エス． ヨークシャー エス10 ３イージー，シェフフィェルド，エンド クリッフェ クレッセント，アーンシャー ホール，ザ ワーデンズ ハウス Ｆターム(参考） 2B022 AB11 BA01 BA02 DA19 4D004 AA41 AB03 AC07 BA03 BA05 CA17 CC20 DA03 DA20 4K001 AA07 AA19 BA24 CA09 |
