本发明的主题是用于角质纤维，特别是人体角质纤维如头发氧化染 色的组合物，该组合物在适于染色的介质中含有至少一种作为成色剂的 氧化显色碱2-氨基-3-羟基吡啶和至少一种漆酶型的酶；本发明还涉及 采用这种组合物染色的方法。

已知用于角质纤维，尤其是人体头发染色的染色组合物中含有氧化 染料前体，特别是邻-或对-苯二胺、邻-或对-氨基酚、杂环碱，它们通 常被称作氧化显色碱。氧化染料前体(氧化显色碱)是无色或浅色的化 合物，当它们与氧化产物结合时，通过氧化缩合的过程生成染料和有色 化合物。

另外已知，通过与成色剂或染发辅助剂结合，可以改变这些氧化显 色碱所产生的色泽，所述成色剂或染发辅助剂尤其选自芳香性间-二胺、 间-氨基酚、间-二元酚以及某些杂环化合物。

氧化显色碱和成色剂中所用的多种分子能够得到丰富的调和色 泽。

得自于这些氧化染料的所谓“长效”着色应该满足一些条件。因为， 它必须不具有毒理学缺陷，还须能提供所需强度的色泽，并且应能很好 地耐受外部作用(光照、恶劣的气候条件、洗涤、长效卷发、出汗、摩 擦)。

染料还必须能够掩盖住灰白色头发，并且应尽可能地没有选择性， 也就是说，它们在同一根角蛋白纤维上须产生尽可能小的色差，这种色 差实际上是由于染料在角质纤维尖部至根部之间的敏化(即损伤)差别 所造成。

角质纤维的氧化染色通常是在碱性介质中、于过氧化氢的存在下进 行。然而，使用过氧化氢存在下的碱性介质的缺陷在于，会引起显著的 角质纤维降解，以及角质纤维脱色，这种脱色并不总是有益的。

角质纤维的氧化染色还可以在不同于过氧化氢的氧化体系，例如酶 体系的辅助下进行。因此，在美国专利3251742、专利申请FR-A-2112 549、FR-A-2694018、EP-A-0504005、WO95/07988、WO95/33836、 WO95/33837、WO96/00290、WO97/19998和WO97/19999中已提出，用含 有与漆酶型的酶联合使用的至少一种氧化染料，或至少一种黑素前体的 组合物对角质纤维染色，所述组合物需和大气中的氧气接触。虽然在如 此条件下应用不会导致像在过氧化氢存在条件下的角质纤维降解，但是 从色泽在整个纤维上分布的均匀性(“一致性”)的角度来考虑，还是由 色度(亮度)和染色粉末的角度来考虑，这些染色制剂所产生的色泽均 不充分。

如今，本申请人现刚刚发现了能获得新的染料，该染料通过将至 少一种氧化显色碱，2-氨基-3-羟基吡啶作为成色剂和至少一种漆酶 型的酶联合使用，能够产生强的色泽，同时不会引起明显的角质纤维 降解，并且具有低选择性以及对纤维所受多种侵害因素的良好耐受性。

上述发现成为本发明的基础。

因此，本发明的第一主题是一种用于角质纤维，特别是人体角质纤 维如头发的氧化染色的即用组合物，其特征在于，该组合物在适于染色 的介质中含有：

-至少一种氧化显色碱；

-2-氨基-3-羟基吡啶和/或至少一种其酸加成盐作为成色剂

-至少一种漆酶型的酶。

本发明的即用染色组合物产生强着色，同时表现出低选择性，并且 对头发所受的环境作用如光照和恶劣气候条件以及出汗和多种处理(洗 涤，长效变形)具有优异的耐受性。

本发明的主题还在于用这种即用染色组合物对角质纤维氧化染色的 方法。

本发明的即用染料组合物中所采用的漆酶可以具体选自来源于植物 原料、动物原料、真菌类原料(酵母、霉菌、真菌)或细菌原料的漆酶， 这些生物体可以是单细胞生物或多细胞生物。可以通过生物工程技术获 得本发明即用染色组合物中所用的漆酶。

在可用于本发明的植物来源的漆酶中，可提及的是由植物通过叶绿 素合成产生的漆酶，例如专利申请FR-A-2694018中指出的漆酶。

特别值得提及的是由下列植物来源中发现的漆酶：漆树科植物， 如Magnifera indica、柔毛肖乳香或Pleiogynium timoriense的提 取物；罗汉松科植物、迷迭香、马铃薯、小花鸢尾属植物、咖啡属植 物、胡萝卜、小蔓长春花、鳄梨、长春花、芭蕉属植物、苹果、银杏、 松下兰(印度藤)、七叶树属植物、欧亚槭、桃和palaestina黄连木 的提取物。

在可用于本发明的、任选地通过生物工程获技术得的真菌来源的漆 酶中，可提及的是：得自于变色多孔菌(Polyporus versicolor)、 practicola丝核菌和漆树(Rhus vernicifera)的漆酶，如专利申请 FR-A-2 112 549和EP-A-504005中所公开的漆酶；在WO95/07988、WO 95/33836、WO95/33837、WO96/00290、WO97/19998和WO97/19999 中所述的漆酶，这些文献的内容构成本发明说明书整体的一部分，例如 那些衍生自：小柱孢菌素(Scytalidium)、pinsitus多孔菌、嗜温性 菌丝疫霉菌(Myceliophthora thermophila)、茄属丝核菌、orizae梨 胞菌素(Pyricularia)及其变种的漆酶。所述漆酶也可以是那些得自 于：变色栓菌、木蹄层孔菌、嗜温性毛壳酶、粗糙链孢酶、Coriolus versicol、灰色葡萄孢、木质硬孔菌、有害木层孔菌、ostreatus侧耳 菌、构巢曲霉、anserina柄孢壳菌(Podospora)、双孢蘑菇、透明灵 芝、苹果枯腐病霉、辣乳菇、delica红菇(Russula)、Heterobasidion annosum、陆生革菌、芽枝状枝孢、Cerrena unicolor、毛革盖菌、 Ceriporiopsis subvermispora、Coprinus cinereus、Panaeolus papilionaceus、Panaeolus sphinctrinus、群交裂褶菌、Dichomitius squalens及其变种的漆酶。

优选的漆酶是任选地通过生物工程技术获得的真菌原料所产生的漆 酶。

本发明所用漆酶的酶促活性和在其底物中具有的丁香醛连氮可以通 过在需氧条件下氧化该丁香醛连氮来确定。一个Lacu单位相当于在pH 5.5和30℃的条件下每1分钟1mmol丁香醛连氮的酶催化转化量。单位 U相当于在30℃和pH 6.5下，用丁香醛连氮作底物，在530nm波长下 每1分钟产生0.001个δ吸光度所需的酶量。本发明的漆酶的酶促活性 也可以由对-苯二胺的氧化定义。一个Lacu单位相当于在30℃和pH5 的条件下，用对-苯二胺作为底物(64mM)在496.5nm的波长下每分钟 产生0.001个δ吸光度时所需的酶量。

根据本发明，酶促活性优选以Lacu单位测定。

漆酶在本发明所述即用染色组合物中的用量将随所用的漆酶的性质 而变化。优选的漆酶用量约是每100g染色组合物0.5至200Lacu(也 就是约10，000至4×106u单位)。

即用染色组合物中所用的氧化显色碱具体选自对-苯二胺、二元碱、 对-氨基酚、邻-氨基酚和杂环氧化显色碱。根据本发明的优选实施方案， 所述氧化显色碱选自杂环氧化显色碱和二元碱。

在可在本发明染色组合物中用作氧化显色碱的对-苯二胺类化合物 中，特别提及的是下式(Ⅰ)所示的化合物及其酸加成盐： 其中：

-R1代表氢原子、C1-C4烷基、一羟基(C1-C4烷基)、多羟基(C2-C4 烷基)、(C1-C4)烷氧基(C1-C4)烷基、被含氮基团取代的C1-C4烷基、 苯基或4’-氨基苯基；

-R2代表氢原子、C1-C4烷基、一羟基(C1-C4烷基)、多羟基(C2-C4 烷基)、(C1-C4)烷氧基(C1-C4)烷基或由含氮基团取代的C1-C4烷基；

-R3代表氢原子、卤素原子例如氯、溴、碘或氟原子，C1-C4烷基、 一羟基(C1-C4烷基)、羟基(C1-C4烷氧基)、乙酰基氨基(C1-C4烷氧基)、 甲磺酰基氨基(C1-C4烷氧基)或氨基甲酰基氨基(C1-C4烷氧基)；

-R4代表氢原子或卤素原子或C1-C4烷基。

在上式(Ⅰ)所述的含氮基团中，可特别提及：氨基、一(C1-C4) 烷基氨基、(C1-C4)二烷基氨基、(C1-C4)三烷基氨基、一羟基(C1-C4) 烷基氨基、咪唑啉鎓和铵基。

在上述式(Ⅰ)所述的对-苯二胺中，特别值得一提的是：对-苯二 胺、对-甲苯二胺、2-氯-对-苯二胺、2，3-二甲基-对-苯二胺、2，6-二 甲基-对-苯二胺、2，6-二乙基-对-苯二胺、2，5-二甲基-对-苯二胺、N，N- 二甲基-对-苯二胺、N，N-二乙基-对-苯二胺、N，N-二丙基-对-苯二胺、 4-氨基-N，N-二乙基-3-甲苯胺、N，N-双(β-羟乙基)-对-苯二胺、4-N，N- 双(β-羟乙基)氨基-2-甲苯胺、4-N，N-双(β-羟乙基)氨基-2-氯苯胺、 2-β-羟乙基-对-苯二胺、2-氟-对-苯二胺、2-异丙基-对-苯二胺、N-(β- 羟丙基)-对-苯二胺、2-羟甲基-对-苯二胺、N，N-二甲基-3-甲基-对- 苯二胺、N，N-(乙基-β-羟乙基)-对-苯二胺、N-(β，γ-二羟基丙基)- 对-苯二胺、N-(4’-氨基苯基)-对-苯二胺、N-苯基-对-苯二胺、2-β- 羟基乙氧基-对-苯二胺、2-β-乙酰基氨基乙氧基-对-苯二胺、N-(β-甲 氧基乙基)-对-苯二胺，和它们的酸加成盐。

在上式(Ⅰ)所述的对-苯二胺中，首选对-苯二胺、对-甲苯二胺、 2-异丙基-对-苯二胺、2-β-羟乙基-对-苯二胺、2-β-羟基乙氧基-对-苯 二胺、2，6-二甲基-对-苯二胺、2，6-二乙基-对-苯二胺、2，3-二甲基- 对-苯二胺、N，N-双(β-羟乙基)-对-苯二胺、2-氯-对-苯二胺和2-β- 乙酰基氨基乙氧基-对-苯二胺，和它们的酸加成盐。

根据本发明，术语“二元碱”是指至少含有两个带有氨基和/或羟 基的芳环的化合物。

在本发明染色组合物中用作氧化显色碱的二元碱中，特别值得一提 的是下式(Ⅱ)所示的化合物及其酸加成盐： 其中：

-Z1和Z2相同或不同并且代表羟基或-NH2基，它们可以被C1-C4烷 基或连接基Y取代；

-连接基Y代表含有1至14个碳原子的直链或支链亚烷基，它可 以被一个或多个含氮基团和/或一个或多个杂原子间隔开或以它们为末 端，所述杂原子例如是氧、硫或氮原子，Y可以任选地被一个或多个羟 基或C1-C6烷氧基取代；

-R5和R6代表氢原子或卤素原子、C1-C4烷基、一羟基(C1-C4烷基)、 多羟基(C2-C4烷基)、氨基(C1-C4烷基)或连接基Y；

-R7、R8、R9、R10、R11和R12相同或不同，并且代表氢原子、连接 基Y或C1-C4烷基；

应该知道，1分子式(Ⅱ)化合物中仅含有一个连接基Y。

在式(Ⅱ)所述的含氮基团中，特别值得一提的是：氨基、一(C1-C4) 烷基氨基、(C1-C4)二烷基氨基、(C1-C4)三烷基氨基、一羟基(C1-C4) 烷基氨基、咪唑啉鎓和铵基。

在上述式(Ⅱ)所述的二元碱中，特别值得一提的是：N，N’-双(β- 羟乙基)-N，N’-双(4’-氨基苯基)-1，3-二氨基丙醇、N，N’-双(β-羟乙 基)-N，N’-双(4’-氨基苯基)乙二胺、N，N’-双(4-氨基苯基)-四亚甲 基二胺、N，N’-双(β-羟乙基)-N，N’-双(4-氨基苯基)四亚甲基二胺、 N，N’-双(4’-甲氨基苯基)四亚甲基二胺、N，N’-双(乙基)-N，N'-双(4’- 氨基-3'-甲基苯基)乙二胺和1，8-双(2，5-二氨基苯氧基)-3，5-二氧 杂辛烷及其酸加成盐。

在式(Ⅱ)的二元碱中，特别优选N，N’-双(β-羟乙基)-N，N’-双 (4’-氨基苯基)-1，3-二氨基丙醇和1，8-双(2，5-二氨基苯氧基)-3，5- 二氧杂辛烷或其一种酸加成盐。

在本发明染色组合物中用作氧化显色碱的对-氨基酚类化合物中， 特别值得一提的是相应于下式(Ⅲ)的化合物及其酸加成盐： 其中：

-R13代表氢原子或卤素原子、C1-C4烷基、一羟基(C1-C4烷基)、 (C1-C4)烷氧基(C1-C4)烷基、氨基(C1-C4烷基)或羟基(C1-C4)烷 基氨基(C1-C4烷基)；

-R14代表氢原子或卤素原子、C1-C4烷基、一羟基(C1-C4烷基)、 多羟基(C2-C4烷基)、氨基(C1-C4烷基)、氰基(C1-C4烷基)或(C1-C4) 烷氧基(C1-C4)烷基；

应该了解，基团R13或R14中至少一个表示氢原子。

在上式(Ⅲ)所示的对-氨基酚中，更特别提及的是：对-氨基酚、 4-氨基-3-甲基苯酚、4-氨基-3-氟苯酚、4-氨基-3-羟甲基苯酚、4-氨 基-2-甲基苯酚、4-氨基-2-羟甲基苯酚、4-氨基-2-甲氧基甲基苯酚、4- 氨基-2-氨基甲基苯酚、4-氨基-2-(β-羟乙基氨基甲基)苯酚和4-氨 基-2-氟苯酚，以及它们的酸加成盐。

在本发明染色组合物中可用作氧化显色碱的邻-氨基酚中，特别值 得一提的是：2-氨基苯酚、2-氨基-5-甲基苯酚、2-氨基-6-甲基苯酚和 5-乙酰氨基-2-氨基苯酚，以及它们的酸加成盐。

在本发明染色组合物中可用作氧化显色碱的杂环碱中，特别值得一 提的是：吡啶衍生物、嘧啶衍生物、吡唑衍生物和吡唑并嘧啶衍生物， 以及它们的酸加成盐。

在所述吡啶衍生物中，更值得一提的化合物是，例如，在专利 GB1，026，978和GB1，153，196中公开的那些，例如，2，5-二氨基吡啶、 2-(4-甲氧基苯基)氨基-3-氨基吡啶、2，3-二氨基-6-甲氧基吡啶、2- (β-甲氧基乙基)氨基-3-氨基-6-甲氧基吡啶、3，4-二氨基吡啶和它们 的酸加成盐。

在所述嘧啶衍生物中，特别值得一提的化合物可例如是公开在德国 专利DE2，359，399或日本专利JP88-169，571和JP91-333，495或国 际专利申请WO96/15765中的那些化合物，例如：2，4，5，6-四氨基嘧 啶、4-羟基-2，5，6-三氨基嘧啶、2-羟基-4，5，6-三氨基嘧啶、2，4-二羟 基-5，6-二氨基嘧啶、2，5，6-三氨基嘧啶和它们的酸加成盐。

在所述吡唑衍生物中，特别值得提及的化合物例如是专利DE 3，843，892、DE 4，133，957和专利申请WO94/08969、WO94/08970、 FR-A-2，733，749和DE19543988中公开的那些化合物，例如：4，5- 二氨基-1-甲基吡唑、3，4-二氨基吡唑、4，5-二氨基-1-(4’-氯苄基) 吡唑、4，5-二氨基-1，3-二甲基吡唑、4，5-二氨基-3-甲基-1-苯基吡唑、 4，5-二氨基-1-甲基-3-苯基吡唑、4-氨基-1，3-二甲基-5-肼基吡唑、1- 苄基-4，5-二氨基-3-甲基吡唑、4，5-二氨基-3-叔-丁基-1-甲基吡唑、 4，5-二氨基-1-叔-丁基-3-甲基吡唑、4，5-二氨基-1-(β-羟乙基)-3- 甲基吡唑、4，5-二氨基-1-乙基-3-甲基吡唑、4，5-二氨基-1-乙基-3-(4'- 甲氧基苯基)吡唑、4，5-二氨基-1-乙基-3-羟甲基吡唑、4，5-二氨基-3- 羟甲基-1-甲基吡唑、4，5-二氨基-3-羟甲基-1-异丙基吡唑、4，5-二氨 基-3-甲基-1-异丙基吡唑、4-氨基-5-(2’-氨乙基)氨基-1，3-二甲基 吡唑、3，4，5-三氨基吡唑、1-甲基-3，4，5-三氨基吡唑、3，5-二氨基-1- 甲基-4-甲氨基吡唑、3，5-二氨基-4-(β-羟乙基)氨基-1-甲基吡唑和 它们的酸加成盐。

在所述的吡唑并嘧啶衍生物中，特别值得一提的是专利申请FR-A- 2，750，048中所述的化合物，其中值得提及的是：

-吡唑并[1，5-a]嘧啶-3，7-二胺；

-2，5-二甲基吡唑并[1，5-a]嘧啶-3，7-二胺；

-吡唑并[1，5-a]嘧啶-3，5-二胺；

-2，7-二甲基吡唑并[1，5-a]嘧啶-3，5-二胺；

-3-氨基吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-醇；

-3-氨基吡唑并[1，5-a]嘧啶-5-醇；

-2-(3-氨基吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-基氨基)乙醇；

-2-(7-氨基吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基氨基)乙醇；

-2-[(3-氨基吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-基)-(2-羟乙基)氨基]乙 醇；

-2-[(7-氨基吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-(2-羟乙基)氨基]乙 醇；

-5，6-二甲基吡唑并[1，5-a]嘧啶-3，7-二胺；

-2，6-二甲基吡唑并[1，5-a]嘧啶-3，7-二胺；

-2，5，N7，N7-四甲基吡唑并[1，5-a]嘧啶-3，7-二胺；

和它们的加成盐，当互变异构平衡存在时，包括其互变异构体。

优选所述氧化显色碱占本发明所述染色组合物总重量的约0.0005％ 至12％(重量)，更优选约0.005％至6％(重量)。

优选所述2-氨基-3-羟基吡啶和/或其酸加成盐占本发明所述染色组 合物总重量的约0.0001％至8％(重量)，更优选约0.005％至5％(重 量)。

本发明的染色组合物中可以含有不同于2-氨基-3-羟基吡啶的一种 或多种其他成色剂和/或直接染料，特别是为了改进色泽或增强其光泽 的成色剂和/或直接染料。

在附加存在于本发明即用染色组合物中的成色剂中，特别值得提及 的是：间-苯二胺、间-氨基酚、间-二元酚，和它们的酸加成盐。

当存在时，优选这些附加成色剂占本发明所述即用染色组合物总 重量的约0.0001％至10％(重量)，更优选约0.005％至5％(重量)。

通常，可用于本发明染色组合物中的酸加成盐(氧化显色碱和成 色剂)特别选自盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐和酒石酸盐、乳酸盐和乙 酸盐。

适用于本发明即用染色组合物中的介质(或载体)一般由水或由水 和至少一种有机溶剂的混合物组成，用以将不能充分溶于水的化合物溶 解。

本发明即用染色组合物的pH需选择在使漆酶具有足够的酶促活性 的范围内。通常约在4至11，优选约6至9之间。可以用角质纤维染色 中通常使用的酸化剂或碱化剂调节至预定体积。

本发明所述即用染色组合物也可以含有多种染发组合物中常规使 用的辅剂，例如：阴离子、阳离子、非离子、两性或两性离子的表面 活性剂或其混合物，聚合物，抗氧剂；不同于本发明所用漆酶的酶， 例如过氧化物酶或含有2个电子的氧化还原酶；渗透剂，多价螯合剂， 香料，缓冲剂、分散剂，成膜剂，防腐剂、遮光剂、增稠剂、维生素。

当然，本领域技术人员应对这种或这些任选补充的化合物作出谨慎 选择，以使本发明即用染色组合物的本质优越性不受到或基本上不受到 上述加料的不良影响。

本发明即用染色组合物可以为多种形式，例如液体、霜剂或凝胶的 形式，它们可以经或不经加压密封，或者是任何其它适用于角质纤维， 尤其是人体头发染色的形式。在这种情况下，所述氧化染料和漆酶型的 酶存在于同一即用组合物中，因此该组合物应该不含有氧气，以避免氧 化染料的预先氧化。

本发明的主题还在于采用上述即用染色组合物对角质纤维，特别是 人体角质纤维如头发进行染色的方法。

按照本方法，将至少一种上述定义的即用染色组合物涂敷在纤维 上保持足够的时间，以使显色达到预期的着色，然后漂洗纤维，再经或 不经过洗发剂洗涤，再次漂洗和干化。

角质纤维上显色所需的时间一般为3至60分钟并且更适宜为5至40 分钟。

根据本发明的一个具体实施方案，该方法包括一预备步骤，包括以 分装形式储存组合物(A)和组合物(B)，一方面，所述组合物(A)在 适于染色的介质中含有至少一种氧化显色碱和2-氨基-3-羟基吡啶和/或 至少一种其酸加成盐，另一方面，所述组合物(B)在适合染色的介质 中含有至少一种漆酶型的酶，然后在使用时将它们混合，随后将该混合 物涂敷在角质纤维上。

本发明的另一主题是一种多室染色装置或染色盒，或任何其它多室 包装体系，其中第一室中装有上述组合物(A)，和第二室内装有上述组 合物(B)。该装置可配有能将所需的混合物输送到头发上的部件，如在 与本发明同一申请人的法国专利FR-2，586，913中述及的装置。

下列实施例举例说明本发明但不限定本发明的范围。

                        实施例

染色实施例1和2

即用染色组合物制备如下(含量以克计)： 组成 1 2 对-苯二胺(氧化显色碱) 0.235 - 对-氨基苯酚(氧化显色碱) - 0.235 2-氨基-3-羟基吡啶(成色剂) 0.235 0.235 含有180单位/毫克的得自于漆树的漆酶，由Sigma公司提供 1.8 1.8 常规染料载体(*) (*) (*) 软化水 适量 100g 100g

(*)常规染料载体：

-乙醇                                                20.0g

-含有60％活性物质(AS)的(C8-C10)烷基聚葡糖苷的水溶液，8.0g

由SEPPIC公司提供的商品名为ORAMIX CG110_的产品

-pH剂适量                                            pH=6.5

将上述各个即用染色组合物涂敷在白发占90％的自然灰白发绺上， 在30℃下保持40分钟。然后漂洗头发且干化。

头发染出的色泽如下表所示： 实施例 所得色泽 1 红褐色金发 2 浅铜色金发

在上述染色组合物中，由Sigma公司出售的180单位/毫克的漆树 (Rhus vernicifera)的漆酶可以用1.0g ICN公司出售的100单位/毫 克的Pyricularia orizae漆酶来代替。