余甘子萃取物用于制备提高肝脏中线粒体活性的医药组合物的用途
| 专利类型 | 发明公开 | 法律事件 | 实质审查; |
| 专利有效性 | 实质审查 | 当前状态 | 实质审查 |
| 申请号 | CN202411442356.0 | 申请日 | 2018-05-25 |
| 公开(公告)号 | CN119185394A | 公开(公告)日 | 2024-12-27 |
| 申请人 | 台湾粒线体应用技术股份有限公司; | 申请人类型 | 企业 |
| 发明人 | 郑汉中; 凃启堂; 杨舜杰; 沈曼晴; 王以庄; | 第一发明人 | 郑汉中 |
| 权利人 | 台湾粒线体应用技术股份有限公司 | 权利人类型 | 企业 |
| 当前权利人 | 台湾粒线体应用技术股份有限公司 | 当前权利人类型 | 企业 |
| 省份 | 当前专利权人所在省份： | 城市 | 当前专利权人所在城市： |
| 具体地址 | 当前专利权人所在详细地址：中国台湾新竹县竹北市生医路二段2号D202 | 邮编 | 当前专利权人邮编： |
| 主IPC国际分类 | A61K36/47 | 所有IPC国际分类 | A61K36/47 ; A61K9/48 ; A61P1/16 ; A61K131/00 |
| 专利引用数量 | 0 | 专利被引用数量 | 0 |
| 专利权利要求数量 | 7 | 专利文献类型 | A |
| 专利代理机构 | 北京睿智保诚专利代理事务所 | 专利代理人 | 李晓凤; |
| 摘要 | 本 发明 有关于制备修复肝脏损伤的医药组合物，特别是一种利用余甘子萃取物制备修复肝脏损伤的医药组合物的用途。一种余甘子萃取物用于制备修复肝脏损伤的医药组合物的用途，其中包含余甘子萃取物的医药组合物提升与自由基 接触 的 肝细胞 中的线粒体进行 氧 化磷 酸化 反应与三 磷酸 腺苷(ATP)合成的能 力 。再者，包含余甘子萃取物的医药组合物降低线粒体的氢离子 泄漏 、提升线粒体的最大耗氧能力、提升线粒体的三磷酸腺苷耦合效率、提升线粒体的预存耗氧能力、以及降低肝细胞内的自由基生成量。 | ||
| 权利要求 | 1.余甘子萃取物在制备如下任一项医药组合物中的的用途， |
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| 说明书全文 | 余甘子萃取物用于制备提高肝脏中线粒体活性的医药组合物的用途 [0002] 余甘子萃取物用于制备提高肝脏中线粒体活性的医药组合物的用途的分案申请。 技术领域[0003] 本发明有关于制备修复肝脏损伤的医药组合物，特别是一种利用余甘子萃取物制备修复肝脏损伤的医药组合物的用途。 背景技术[0004] 肝脏是人体内的主要代谢器官之一。肝脏的工作包含代谢醣类、蛋白质与脂质，以及分解、转换与排除体内毒素。然而，在肝脏进行工作的过程中，特别是在分解、转换与排除体内毒素时，自由基作为副产物也一并的被产生。再者，对于因疾病而受损的肝脏来说，在其肝脏的功能受到疾病影响的情况下，肝脏工作时产生的自由基量也随之增加。 [0005] 对于肝细胞来说，由于自由基具有强的氧化能力，使得接触自由基的肝细胞与肝细胞内的细胞器受到氧化伤害的机会大幅提高。特别是，线粒体(Mitochondria)作为肝细胞内进行氧化磷酸化和合成三磷酸腺苷(ATP)的细胞器，当线粒体因大量自由基造成的氧化伤害而受损时，肝细胞无法自活性低落的线粒体得到充分的能量供应。如此一来，活性低落的线粒体将对肝细胞的工作状况产生严重的负面影响，进而对肝脏的机能产生负面的影响。 发明内容[0006] 本发明提供利用余甘子萃取物制备修复肝脏损伤的医药组合物的用途，藉此提升肝脏的肝细胞中线粒体的活性，进而维持肝细胞的正常功能与修复肝脏损伤。 [0007] 本发明揭露一种余甘子萃取物用于制备修复肝脏损伤的医药组合物的用途，其中包含余甘子萃取物的医药组合物提升与自由基接触的肝细胞中的线粒体进行氧化磷酸化反应与三磷酸腺苷(ATP)合成的能力。 [0008] 根据上述本发明所揭露的余甘子萃取物用于制备修复肝脏损伤的医药组合物的用途，包含余甘子萃取物的医药组合物提升与自由基接触的肝细胞中的线粒体进行氧化磷酸化反应与三磷酸腺苷(ATP)合成的能力。如此一来，肝细胞中的线粒体活性得以维持，且肝细胞中的线粒体可产出足量的三磷酸腺苷供肝细胞使用，藉此使肝细胞维持正常的代谢工作。再者，由于修复细胞损伤所需的三磷酸腺苷合成效率变好，使得受损的肝细胞得到充分的修复所需的能量，藉此加速修复肝脏至正常状态。 [0011] 图2为本发明实施例一至实施例三使用的余甘子萃取物的高效液相色谱图谱。 [0012] 图3为本发明实施例一至实施例三、比较例与控制例的合成三磷酸腺苷的耗氧量示意图。 [0013] 图4为本发明实施例一至实施例三、比较例与控制例的克服氢离子泄漏的耗氧量示意图。 [0014] 图5为本发明实施例一至实施例三、比较例与控制例的最大耗氧能力的耗氧量示意图。 [0015] 图6为本发明实施例一至实施例三、比较例与控制例的耦合效率示意图。 [0016] 图7为本发明实施例一至实施例三、比较例与控制例的预存耗氧能力示意图。 [0017] 图8为本发明实施例二、实施例三、比较例与控制例的油酸诱导肝细胞自由基生成量示意图。 具体实施方式[0018] 下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。 [0019] 实施例1 [0020] 以下在实施方式中详细叙述本发明的详细特征以及优点，其内容足以使任何熟习相关技艺者了解本发明的技术内容并据以实施，且根据本说明书所揭露的内容、权利要求书及附图，任何熟习相关技艺者可轻易地理解本发明相关的目的及优点。以下的实施例是用于进一步详细说明本发明的观点，但非以任何观点限制本发明的范畴。 [0021] 余甘子(例如Phyllanthus Emblica或Emblica Officinale)，又称余柚子、油柑、庵摩勒(Amalaka)、马六甲树(Pokok Melaka)、印度醋栗(Indian Gooseberry)，属于大戟科余甘子属(Emblica)的落叶亚乔木，分布于自印度至马来西亚地区及中国南部，一般认为印度为原产地。 [0022] 本发明使用的余甘子萃取物的取得方式例如：以二氧化碳作为超临界流体萃取余甘子果实，或者以甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、浓度为0.1wt％至5wt％的氯化钠水溶液、氯化钾水溶液、氯化钙水溶液、氯化镁水溶液、或浓度为0.1wt％至5wt％的氯化钠乙醇溶液、氯化钾乙醇溶液、氯化钙乙醇溶液、氯化镁乙醇溶液作为溶剂萃取余甘子果实而得到初萃液；接着，将初萃液过滤纯化后得到本发明所使用的余甘子萃取物。余甘子萃取物可使用喷雾干燥(Spray dry)或真空干燥进行干燥程序而得到易于保存的余甘子萃取物粉末。 [0023] 余甘子萃取物含有35wt％至55wt％的Emblicanin‑A与Emblicanin‑B混合物、4wt％至15wt％的Punigluconin、10wt％至20wt％的长梗马兜铃素(Pedunculagin)、5wt％至15wt％的芸香苷(Rutin)与10wt％至30wt％的Gallo‑ellagitannoids。余甘子萃取物的‑1 ‑1 ‑1 ‑1 ‑1 红外线吸收光谱于3403.6±5公分 (cm )、2931.6±5公分 (cm )、1385.0±5公分 (cm‑1 ‑1 ‑1 ‑1 ‑1 ‑1 ‑1 )、1318.6±5公分 (cm )、1623.5±5公分 (cm )、1451.3±5公分 (cm )、1352.1±5公‑1 ‑1 ‑1 ‑1 ‑1 ‑1 ‑1 ‑1 分 (cm )、1218.4±5公分 (cm )、1148.6±5公分 (cm )、1035.7±5公分 (cm )、 ‑1 ‑1 3403.6±5公分 (cm )具有特征吸收峰。余甘子萃取物的高效液相色谱图谱 (HPLCChromatogram)于1.620±0.5分钟、2.148±0.5分钟、3.265±0.5分钟与4.370±0.5分钟具有特征峰信号。 [0024] Emblicanin‑A(2,3‑二‑O‑没食子酰基‑4,6‑(S)‑六羟基联苯‑2‑酮基‑葡萄糖醛酸‑内酯，2,3‑di‑O‑galloyl‑4,6‑(S)‑hexahydroxydiphenoyl‑2‑keto‑glucono‑lactone)的结构如式一所示。 [0025] 式一 [0026] [0027] Emblicanin‑B(2,3,4,6‑双‑(S)‑六羟基联苯‑2‑酮基‑葡萄糖醛酸‑内酯，2,3,4,6‑bis‑(S)‑hexahydroxydiphenoyl‑2‑keto‑glucono‑lactone)的结构如式二所示。 [0028] 式二 [0029] [0030] Punigluconin(2,3‑二‑O‑没食子酰基‑4,6‑(S)‑六羟基联苯葡萄糖酸，2,3‑di‑O‑galloyl‑4,6‑(S)‑hexahydroxydiphenoylgluconicacid)的结构如式三所示。 [0031] 式三 [0032] [0033] 长梗马兜铃素(2,3,4,6‑双‑(S)‑六羟基联苯‑D‑葡萄糖，2,3,4,6‑bis‑(S)‑hexahydroxydiphenoyl‑D‑glucose)的结构如式四所示。 [0034] 式四 [0035] [0036] 芸香苷(3’,4’,5,7‑四羟基黄酮‑1,3‑O‑鼠李葡糖苷，3’,4’,5,7‑‑1tetrahydroxyflavono ,3‑O‑rhamnoglucoside)的结构如式五所示。 [0037] 式五 [0038] [0039] 当向与自由基接触的肝细胞提供浓度为每毫升100至500微克(μg/ml)的余甘子萃取物水溶液时，进入肝细胞的余甘子萃取物提高肝细胞内的线粒体的活性。如此一来，经余甘子萃取物活化的线粒体进行氧化磷酸化反应合成的三磷酸腺苷数量提高，最大耗氧能力提高，预存耗氧能力提高，三磷酸腺苷耦合效率提高以及氢离子泄漏降低。 [0040] 再者，当向与自由基接触的肝细胞提供浓度为每毫升100至500微克(μg/ml)的余甘子萃取物水溶液时，经余甘子萃取物活化的线粒体进行氧化磷酸化反应合成的三磷酸腺苷数量无明显下降，三磷酸腺苷耦合效率无明显下降以及氢离子泄漏无明显提升。经余甘子萃取物活化的线粒体的最大耗氧能力略为上升，线粒体的预存耗氧能力略为上升。因此，余甘子萃取物可作为修复肝脏损伤的医药组合物的活性成分，且余甘子萃取物可维持与自由基接触的肝细胞中线粒体的活性处于接近未与自由基接触的肝细胞中线粒体的活性的水平。再者，由于修复细胞损伤所需的三磷酸腺苷合成效率与能力变好，使得受损的肝细胞得到充分的修复所需的能量，藉此加速修复肝脏至正常状态。 [0041] 向肝细胞提供余甘子萃取物或是包含余甘子萃取物的医药组合物的方法例如为以食用的方式由口摄取余甘子萃取物或是包含余甘子萃取物的医药组合物。以食用的方式向细胞提供余甘子萃取物时，余甘子萃取物的有效剂量为1.081克(g)至5.405克(g)。换算公式如下：人体有效剂量(毫克)＝细胞实验的有效剂量(微克/毫升)×小鼠体重(克)×折算系数×人体重(公斤)。折算系数是由动物与人体的每公斤体重剂量折算系数表查表得到。当小鼠体重为20g以及人体体重公斤数为60公斤时，折算系数为9.01。 [0042] 为方便以食用的方式由口摄取余甘子萃取物，余甘子萃取物可制成例如液体状、固体状、颗粒状、粉体状、糊状或凝胶状的余甘子萃取物加工品。余甘子萃取物加工品中可搭配作为添加剂的赋形剂或呈味剂，以提升风味与方便食用。 [0043] 赋形剂例如为小麦淀粉、米淀粉、玉米淀粉、马铃薯淀粉、糊精、环糊精等淀粉类；结晶纤维素类；乳糖、葡萄糖、砂糖、还原麦芽糖、饴糖、果寡糖、乳化寡糖等糖类；山梨糖醇、赤藓糖醇、木糖醇、乳糖醇、甘露醇等糖醇类。 [0044] 呈味剂例如为龙眼萃取物、荔枝萃取物、柚子萃取物等各种果汁萃取物；苹果汁、橘子汁、柠檬汁等各种果汁；桃子香料、梅子香料、酸奶酪香料等各种香料；乙酰磺胺酸钾、蔗糖素、赤藓糖醇、寡糖类、甘露糖、木糖醇、异构化糖类等各种甜味剂；柠檬酸、苹果酸、酒石酸、葡萄糖酸等各种酸味剂；绿茶、乌龙茶、巴拿巴茶(Banaba Tea)、杜仲茶、铁观音茶、薏苡茶、七叶胆茶、茭白茶、昆布茶等各种茶成分；阿拉比卡(CoffeeArabica)、罗布斯塔(Coffee Robusta)、利比里亚(Coffee Liberica)等各种咖啡成分等。 [0045] 再者，余甘子萃取物或是包含余甘子萃取物的医药组合物亦可被包覆于胶囊中以方便由口摄取余甘子萃取物。余甘子萃取物或是包含余甘子萃取物的医药组合物能够以干燥粉末的形式被包覆于硬胶囊中。余甘子萃取物或是包含余甘子萃取物的医药组合物亦能够以溶液状、悬浮液状、糊状、粉末状或颗粒状的形式被包覆于软胶囊中。 [0046] 软胶囊中用于溶解或分散余甘子萃取物的油脂类例如为鳄梨油、杏仁油、亚麻仁油、小茴香油、白苏油、橄榄油、橄榄角鲨烯、甜橙油、胸棘鲷油(orange roughy oil)、芝麻油、蒜油、可可脂、南瓜籽油、洋甘菊油、胡萝卜油、胡瓜油、牛油脂肪酸、夏威夷核果油、越橘子油、糙米胚芽油、大米油、小麦胚芽油、红花油、牛油树油脂、液状牛油树油脂、紫苏油、大豆油、月见草油、山茶油、玉米油、菜籽油、锯叶棕萃取油(sawpalmetto extract oil)、薏苡油、桃仁油、洋芹籽油、蓖麻油、葵花籽油、葡萄子油、琉璃苣油、澳洲胡桃油、绣线菊油(meadowfoam oil)、棉籽油、花生油、龟油、貂油、蛋黄油、鱼油、棕榈油、棕榈仁油、木蜡、椰子油、长链/中链/短链的脂肪酸甘油三酯、甘油二酯、牛油、猪油、角鲨烯、角鲨烷、姥鲛烷、以及该等油脂类的氢化物等。其中，琉璃苣油与月见草油含有大量伽马亚麻酸(Gamma‑LinolenicAcid，GLA)，伽马亚麻酸属于人体必需脂肪酸，其具有保湿、促进细胞再生以及提升棕脂(BrownFat)活跃度以促进脂肪燃烧的功能。 [0047] 此外，着色剂、防腐剂、增黏剂、结合剂、崩解剂、分散剂、稳定剂、胶化剂、抗氧化剂、表面活性剂、防腐剂、pH值调整剂等符合规定的添加物亦可依照规定的剂量标准与加工生产的需求添加于余甘子萃取物加工品中。 [0048] 以下藉由本发明实施例一至实施例三、控制例与比较例说明本发明所揭露的余甘子萃取物用于制备修复肝脏损伤的医药组合物的用途，并且进行实验测试以说明本发明所揭露之余甘子萃取物用于制备修复肝脏损伤的医药组合物的用途的功效。 [0049] 本发明的实验使用的余甘子萃取物为通过如下得到的余甘子萃取物粉末：将余甘子(Emblica Officinalis)的果实浸于1wt％的氯化钠水溶液中，再以65℃至75℃的蒸汽浴(Steambath)加热一小时，接着进行过滤，接着再冷冻3天，接着实施喷雾干燥(Spray dry)程序。干燥后的余甘子萃取物形态为棕色粉末(Brownpowder)。余甘子萃取物含有27wt％的Emblicanin‑A、23wt％的Emblicanin‑B、8wt％的Punigluconin、14wt％的长梗马兜铃素、10wt％的芸香苷与10wt％至30wt％的Gallo‑ellagitannoids。本发明的余甘子萃取物不以Emblica Officinalis的萃取物为限，其它具有不同学名但具有相似成分的余甘子的萃取物也具有相同的效果。 [0050] 图1为本发明实施例一至实施例三使用的余甘子萃取物的红外线吸收光谱。图2为本发明实施例一至实施例三使用的高效液相色谱图谱。如图1所示，余甘子萃取物的红外线‑1 ‑1 ‑1 ‑1 ‑1 ‑1 ‑1吸收光谱于3403.6公分 (cm )、2931.6公分 (cm )、1385.0公分 (cm )、1318.6公分‑1 ‑1 ‑1 ‑1 ‑1 ‑1 ‑1 ‑1 ‑1 (cm )、1623.5公分 (cm )、1451.3公分 (cm )、1352.1公分 (cm )、1218.4公分 (cm )、‑1 ‑1 ‑1 ‑1 ‑1 ‑1 1148.6公分 (cm )、1035.7公分 (cm )、3403.6公分 (cm )具有特征吸收峰。如图2所示，余甘子萃取物的高效液相色谱图谱(HPLC Chromatogram)于1.620分钟、2.148分钟、3.265分钟与4.370分钟具有特征峰信号。 [0051] 实验使用的细胞为肝细胞(Hep‑G2细胞)。实验样品准备方式为于24孔培养板的每一个孔中接种入20000个肝细胞后培养24个小时。接着，移除孔中的培养液，再根据各实施例、控制例与比较例的条件，对孔中的肝细胞进行处理。 [0052] 于实验过程中，准备实施例一至实施例三的实验样品时，首先将预定浓度的余甘子萃取物水溶液0.001毫升加入肝细胞所在的孔中并孵育24小时；接着，移除肝细胞所在的孔中的水溶液，并将浓度为1.5mM的H2O2水溶液加入孔中，使细胞于浓度为1.5mM的H2O2水溶液中孵育60分钟。接着，移除肝细胞所在的孔中的H2O2水溶液，并以磷酸缓冲生理盐水(Phosphate buffered saline，PBS)清洗肝细胞，完成实施例一至实施例三的实验样品准备。 [0053] 准备控制例的实验样品时，移除肝细胞所在的孔中的培养液后，留下的肝细胞即为控制例的实验样品。准备比较例的实验样品时，首先将浓度为1.5mM的H2O2水溶液加入孔中，使肝细胞于浓度为1.5mM的H2O2水溶液中孵育60分钟。接着，移肝细胞所在的孔中的H2O2水溶液，并以磷酸缓冲生理盐水(Phosphate buffered saline，PBS)清洗细胞，即完成比较例的实验样品准备。 [0054] 于实施例一中，余甘子萃取物水溶液的浓度为每毫升200微克(μg/ml)。于实施例二中，余甘子萃取物水溶液的浓度为每毫升250微克(μg/ml)。于实施例三中，余甘子萃取物水溶液的浓度为每毫升500微克(μg/ml)。 [0055] 接着，以海马生物能量测定仪量测孔中实施例一至实施例三、控制例与比较例的肝细胞的氧气消耗量。根据文献记载，以过氧化氢处理细胞可模拟细胞内氧化产生自由基的状况，藉此对细胞在氧化压力下的线粒体活动进行研究。因此，实施例一至实施例三与比较例的肝细胞系以过氧化氢处理后，再以海马生物能量测定仪量测肝细胞的氧气消耗量，并且藉此了解余甘子萃取物对肝细胞中的线粒体的活性的影响。 [0056] 海马生物能量测定仪的测量原理与流程如下：首先，监测孔中细胞的基础耗氧量。接着，加入三磷酸腺苷合成酶抑制剂以抑制线粒体产生三磷酸腺苷，此时减少的耗氧量即为线粒体进行氧化磷酸化反应以合成三磷酸腺苷的耗氧量，亦即是线粒体的基础耗氧量(Basal Respiration)。三磷酸腺苷合成酶抑制剂例如为寡霉素(Oligomycin)。接着，加入适当浓度的抗耦合剂，在不破坏线粒体内膜的电子传递链的情况下，让线粒体以极限状况空转以评估线粒体的最大耗氧能力(Maximal Respiration)。抗耦合剂例如为 Carbonylcyanide‑4‑(trifluoromethoxy)phenylhydrazone(FCCP)。最后，加入电子传递链抑制剂以完全关闭线粒体的耗氧，藉此确认测量的背景值，亦即是非线粒体耗氧量(Non‑mitochondrial Respiration)。电子传递链抑制剂例如为鱼藤酮(Rotenone)与抗霉素A(AntimycinA)的组合。 [0057] 线粒体的基础耗氧量等于细胞的基础耗氧量减去非线粒体耗氧量。线粒体的基础耗氧量减去合成三磷酸腺苷消耗的氧气量等于克服氢离子泄漏(Proton Leakage)的耗氧量。线粒体的最大耗氧能力减去线粒体的基础耗氧量等于线粒体的预存耗氧能力(SpareRespiratory Capacity)。线粒体的三磷酸腺苷耦合效率(Coupling Efficiency)等于合成三磷酸腺苷耗氧量除以线粒体的基础耗氧量。 [0058] 实施例一至实施例三、比较例一至比较例二与控制例的实验参数与实验测量结果如表一与图3至图7所示。表一中呈现的每微克蛋白质每分钟消耗的氧气皮摩尔数(pmol/min/μg蛋白质)的实验测量结果为已对细胞量进行标准化后的实验测量结果。图3为本发明实施例一至实施例三、比较例与控制例的合成三磷酸腺苷的耗氧量示意图。图4为本发明实施例一至实施例三、比较例与控制例的克服氢离子泄漏的耗氧量示意图。图5为本发明实施例一至实施例三、比较例与控制例的最大耗氧能力的耗氧量示意图。图6为本发明实施例一至实施例三、比较例与控制例的耦合效率示意图。图7为本发明实施例一至实施例三、比较例与控制例的预存耗氧能力示意图。图8为本发明实施例二、实施例三、比较例与控制例的油酸诱导肝细胞自由基生成量示意图。 [0059] 表一 [0060] [0061] 如图3所示，实施例一至实施例三的合成三磷酸腺苷的耗氧量高于比较例的合成三磷酸腺苷的耗氧量。如图5所示，实施例一至实施例三的线粒体的最大耗氧能力高于比较例的线粒体的最大耗氧能力。如图6所示，实施例一至实施例三之线粒体的耦合效率高于比较例的线粒体的耦合效率。如图7所示，实施例一至实施例三的线粒体的预存耗氧能力高于比较例一的线粒体的预存耗氧能力。因此，由图3、图5至图7可知实施例一至实施例三的肝细胞在经过余甘子萃取物处理后，肝细胞内的线粒体的活性得到提升。再者，线粒体的预存耗氧能力增加也代表了线粒体与肝细胞面对可对细胞造成压力的各种状况时，对各种状况的应变能力的提升。 [0062] 如图4所示，实施例一至实施例三的线粒体的氢离子泄漏量低于比较例的线粒体的氢离子泄漏量。因此，由图4可知实施例一至实施例三的肝细胞在经过余甘子萃取物处理后，肝细胞内的线粒体抵抗自由基的氧化伤害的能力得到提升。 [0063] 再者，如图3至图7所示，实施例一至实施例三的肝细胞中的线粒体相较于控制例的肝细胞中的线粒体，经余甘子萃取物活化的线粒体进行氧化磷酸化反应合成的三磷酸腺苷数量无明显下降，三磷酸腺苷耦合效率无明显下降以及氢离子泄漏无明显提升。经余甘子萃取物活化的线粒体的最大耗氧能力略为上升，线粒体的预存耗氧能力略为上升。因此，余甘子萃取物可维持与自由基接触的肝细胞中线粒体的活性处于接近未与自由基接触的肝细胞中线粒体的活性的水平。 [0064] 再者，如图3所示，实施例一至实施例三的合成三磷酸腺苷的耗氧量接近于控制例，且明显高于比较例。如图4所示，实施例一至实施例三的克服氢离子泄漏的耗氧量些微高于控制例，但明显低于比较例。因此，由图3与图4可知实施例一至实施例三的线粒体内膜的氢离子泄漏量未如比较例的线粒体内膜的氢离子泄漏量一般大幅的增加，代表的是线粒体内膜上未出现造成氢离子大量泄漏的严重破损。因此，线粒体重新将氢离子输送至膜间隙的所消耗氧气量减少，使得合成三磷酸腺苷的耗氧量与三磷酸腺苷耦合效率接近于控制例。 [0065] 如图8所示，以控制例的肝细胞中的自由基生成量为基准，实施例二与实施例三的肝细胞中的自由基生成率低于比较例的肝细胞中的自由基生成率，说明了实施例二与实施例三的肝细胞中产生的自由基量低于比较例一的肝细胞中产生的自由基量。因此，由图8可知，提供给肝细胞的余甘子萃取物浓度越高，抑制肝细胞中生成自由基的效果越好。以浓度为每毫升100微克至500微克(μg/ml)的余甘子萃取物水溶液处理后的肝细胞受到余甘子萃取物的保护，降低了肝细胞内的自由基对肝细胞内的线粒体内膜的破坏。因此，浓度为每毫升100微克至500微克(μg/ml)的余甘子萃取物水溶液具有保护肝细胞内的线粒体的功效。如此一来，线粒体发生崩解的时间得以推迟，进而推迟肝细胞凋亡的发生。 [0066] 根据上述本发明所揭露的余甘子萃取物用于制备修复肝脏损伤的医药组合物的用途，包含余甘子萃取物的医药组合物提升与自由基接触的肝细胞中的线粒体进行氧化磷酸化反应与三磷酸腺苷(ATP)合成的能力。如此一来，肝细胞中的线粒体活性得以维持，且肝细胞中的线粒体可产出足量的三磷酸腺苷供肝细胞使用，藉此使肝细胞维持正常的代谢工作。由于修复细胞损伤所需的三磷酸腺苷合成效率与能力变好，使得受损的肝细胞得到充分的修复所需的能量，藉此加速修复肝脏至正常状态。 [0067] 再者，向肝细胞提供余甘子萃取物降低了肝细胞内的自由基对肝细胞内的线粒体内膜的破坏。因此，余甘子萃取物水溶液亦具有保护肝细胞内的线粒体的功效。如此一来，线粒体发生崩解的时间得以推迟，进而推迟肝细胞凋亡的发生。 [0068] 【符号说明】 [0069] 无。 [0070] 以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。 |
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