| 专利类型 | 发明公开 | 法律事件 | 公开; 实质审查; 授权; |
| 专利有效性 | 有效专利 | 当前状态 | 授权 |
| 申请号 | CN202210719509.6 | 申请日 | 2022-06-23 |
| 公开(公告)号 | CN115029138A | 公开(公告)日 | 2022-09-09 |
| 申请人 | 华中农业大学; | 申请人类型 | 学校 |
| 发明人 | 吴洪洪; 李召虎; 付程程; 闫嘉森; 赵法萌; 罗可; 李燕辉; 顾江江; 朱岚; | 第一发明人 | 吴洪洪 |
| 权利人 | 华中农业大学 | 权利人类型 | 学校 |
| 当前权利人 | 华中农业大学 | 当前权利人类型 | 学校 |
| 省份 | 当前专利权人所在省份：湖北省 | 城市 | 当前专利权人所在城市：湖北省武汉市 |
| 具体地址 | 当前专利权人所在详细地址：湖北省武汉市洪山区狮子山街1号 | 邮编 | 当前专利权人邮编：430072 |
| 主IPC国际分类 | C09K11/88 | 所有IPC国际分类 | C09K11/88 ; B82Y20/00 ; B82Y40/00 ; C01B32/15 ; A01N59/02 ; A01N25/30 ; A01P21/00 ; C05D9/02 ; C05G3/50 |
| 专利引用数量 | 0 | 专利被引用数量 | 0 |
| 专利权利要求数量 | 10 | 专利文献类型 | A |
| 专利代理机构 | 河北冀华知识产权代理有限公司 | 专利代理人 | 王占华; |
| 摘要 | 本 发明 涉及 纳米材料 技术领域，公开了一种含硒 碳 量子点 ，包括以下制备方法：将硒代胱胺 盐酸 盐与间苯二胺在超纯 水 中混合，在无 氧 条件下120~200℃反应6 h~12 h，纯化后，得到含有硒元素碳量子点的纳米材料胶体。本发明制得的含硒碳量子点，可以有效提高逆境胁迫下 植物 的 生物 量和长势，提高植物光合作用能 力 ，有效维持逆境胁迫下植物ROS稳态和细胞内膜系统的完整度。制备简单、 水溶性 好、 生物相容性 好、无毒 副作用 。 | ||
| 权利要求 | 1.一种含硒碳量子点，其特征在于，包括以下制备方法：将硒代胱胺盐酸盐与间苯二胺在超纯水中混合，在无氧条件下120 200℃反应6 h 12 h，纯化后，得到含有硒元素碳量子~ ~ |
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| 说明书全文 | 一种含硒碳量子点及其在提高植物抗逆胁迫中的应用技术领域背景技术[0002] 盐碱、干旱等逆境危害是限制种子萌发、幼苗生长的一个重要环境因子。实际生产中，由于初生或次生盐碱地土壤的危害，以及继而产生的渗透胁迫以及离子毒害等对作物造成的负面影响往往导致作物减产。因此，提高作物在种子、苗期的耐盐、耐干旱性，维持其健康的营养生长至关重要。 [0003] 纳米拟酶是拥有类似于细胞抗氧化酶活性的纳米材料的统称。近年来，研究人员发现了一种高效清除活性氧的纳米拟酶：经过表面修饰的氧化铈纳米材料（PNC）。PNC能够+清除盐胁迫下拟南芥叶肉细胞内过量累计的活性氧，增强植物细胞钾离子（K）的保留和钠+ 离子（Na）的外排，从而提高植物耐盐性。但由于PNC中所含稀土元素铈是重金属，存在一定的生物安全性顾虑。硒（Se）元素作为植物编码氨基酸，硒代半胱氨酸的组成元素，在植物体内普遍存在，目前的研究表明以硒元素掺杂的碳量子点纳米材料可以清除动物细胞中的活性氧，但其在植物中的应用还未曾报道。且以往报道的合成方法原材料成本昂贵且不易合成纯化，稳定性较差，难以大面积推广使用。 发明内容[0004] 本发明提供了一种含硒碳量子点，能够提高在逆境情况下作物种植时的生物指标，植株生长更加健壮。 [0005] 本发明的技术方案如下：本发明提供了一种含硒碳量子点，包括以下制备方法：将硒代胱胺盐酸盐与间苯二胺在超纯水中混合，在无氧条件下120 200℃反应6 h 12 h，纯化后，得到含有硒元素碳~ ~ 量子点的纳米材料胶体。 [0006] 优选的，所述硒代胱胺盐酸盐与间苯二胺的质量比为2 3：1。~ [0007] 优选的，所述硒代胱胺盐酸盐与间苯二胺的总质量分数为0.5 0.75%。~ [0008] 优选的，所述纯化利用高速离心和透析的方式进行。 [0009] 优选的，反应结束后，在反应后的上清液中加入聚丙烯酸进行表面修饰。 [0010] 优选的，所述胶体中，含硒元素碳量子点纳米材料的浓度为1 g/L 5 g/L。~ [0012] 优选的，所述含硒元素碳量子点的使用浓度为1 mg/L 100 mg/L。~ [0013] 优选的，所述表面活性剂的体积百分比为0.05 0.1%。~ [0014] 本发明还包括上述的含硒碳量子点、以及叶面喷施纳米肥料在提高植物抗逆胁迫中的应用。 [0015] 本发明的有益效果：本发明提供了一种含有硒元素的碳量子点，采用类似于细胞抗氧化酶的含硒元素的碳量子点纳米拟酶，可以提高作物的耐盐性。通过体外试验表明，本发明含有硒元素的碳量子点能够能够清除体外超氧阴离子和羟基自由基，提高逆境胁迫下植物的生物量和长势，提高植物光合作用能力，有效维持盐胁迫下植物ROS稳态和细胞内膜系统的完整度。经本发明含有硒元素的碳量子点处理棉花和油菜后，植株鲜重、干重和株高皆高于对照组，叶片更绿更大，长势更好。 [0017] 图1为本发明实施例1中含硒碳量子点TEM和HRTEM的表观测试结果。 [0018] 图2为对比例1中含硒碳量子点TEM和HRTEM的表观测试结果。 [0019] 图3为对比例2中含硒碳量子点TEM和HRTEM的表观测试结果。 [0021] 图5为本发明实施例1和实施例2合成含硒碳量子点的电位情况。 [0022] 图6为本发明含硒碳量子点在体外清除羟基自由基的测试结果。 [0023] 图7为本发明含硒碳量子点在体外清除超氧阴离子的测试结果。 [0024] 图8为实施例9中叶面喷施含硒碳量子点的棉花表型对比图。 [0025] 图9为实施例10中叶面喷施含硒碳量子点后油菜(中双11)植株的表型对比图。 [0026] 图10为实施例10中叶面喷施含硒碳量子点后油菜(中双11)地上部鲜重称量结果、植株高度和地上部干重称量结果。 [0027] 图11为实施例11中叶面喷施含硒碳量子点后棉花叶片DAB染色结果。 [0028] 图12为实施例11中叶面喷施含硒碳量子点后棉花植株的相关生理指标结果，包括鲜重、根冠比、叶绿素a含量、类胡萝卜素含量、叶绿素a与叶绿素b的比值、量子产率、过氧化氢含量、超氧化物歧化酶活性、过氧化氢酶活性、过氧化物酶活性以及MDA含量。 [0029] 图13为实施例12干旱胁迫下叶面喷施含硒碳量子点处理的棉花幼苗生长情况。 [0030] 图14为实施例12干旱胁迫下叶面喷施含硒碳量子点处理棉花幼苗的鲜重及干重。 具体实施方式[0031] 本发明提供了一种含有硒元素的碳量子点，该量子点的制备方法包括：将硒代胱胺盐酸盐与间苯二胺在超纯水中混合，在无氧条件下120 200℃反应6 h 12 h，纯化后，得~ ~到含有硒元素碳量子点的纳米材料胶体。 [0032] 本发明加入了间苯二胺作为反应物，以增强所合成纳米材料胶体的荧光强度。本发明中，硒代胱胺盐酸盐与间苯二胺的质量比优选为2 3：1，更优选为2：1。作为一种实施方~式，本发明所述硒代胱胺盐酸盐与间苯二胺的总质量分数为0.5 0.75%。作为一种实施方~ 式，本发明将混合液置于磁力搅拌器上至搅拌充分，再倒入反应釜中进行反应，优选搅拌时间为2 3 h。作为一种实施方式，本发明在上述混合溶液中充氮气5 10min，排除溶液中的氧~ ~ 气。 [0033] 本发明将硒代胱胺盐酸盐和间苯二胺的混合溶液在120 200℃下反应6 12 h。可~ ~选的反应在聚四氟乙烯反应釜或高压反应釜中进行，高压反应釜由于温度控制更加精确，通入氮气后更能保证反应的无氧环境，以及反应体系较小使得反应进行更加彻底。反应温度优选为150 190℃，反应时间优选为7 9h。 ~ ~ [0034] 本发明所述纯化利用高速离心和透析的方式进行。本发明对离心的方式没有特殊限定，采用本领域中的常规离心方法即可。本发明优选离心速率为10000 15000rpm，更优选~为11000 13000rpm；离心时间优选为15 30 min，更优选为20 25min。离心后的上清液用透~ ~ ~ 析袋透析。作为一种可实施的方式，透析前，调整所述上清液的pH为6 8，优选为7。本发明的~ 透析袋采用常规透析袋，对透析袋的来源没有特殊限定。透析时间优选的为24 48h，间隔8~ ~ 12 h换一次水。透析得到含有硒元素碳量子点的纳米材料胶体。 [0036] 本发明还包括聚丙烯酸修饰的步骤，修饰过程在最后一步纯化前进行。将反应后的溶液离心，所得上清液中加入聚丙烯酸进行表面修饰，使碳量子点表面带负电荷。带负电的作用是使该含硒碳量子点更便于进入细胞中，并且含硒碳量子点在胶体中的分散性，不易产生沉淀。所述聚丙烯酸相对分子质量的选择范围为600 1800。具体的，将聚丙烯酸溶~于水中与反应后的上清液混合，滴入氨水中，搅拌。搅拌反应后透析得到经修饰的含硒元素碳量子点。 [0037] 通过对本发明制备得到的含硒元素碳量子点TEM和HRTEM图像中可以看到，本发明的含硒碳量子点为粒径大约2‑5nm的球形纳米颗粒。 [0038] 本发明还提供了一种含硒元素的叶面喷施纳米肥料，所述肥料包括上述的含硒碳量子点以及表面活性剂，两者配合使用可以提高在逆境情况下作物种植时的生物指标。作为优选的，所述药剂中的含硒碳量子点的有效作用浓度为1 100mg/L以上，更优选为25‑~70mg/L。本发明表面活性剂添加的质量浓度优选为0.05 0.5%，更优选的为0.05 0.1%。 ~ ~ [0039] 本发明所述表面活性剂可选的为Silwet L‑77或Triton X‑100，表面活性剂会与纳米拟酶相互配合，使纳米拟酶顺利进入叶片。有机硅表面活性剂毒性低，安全性好，在同等浓度的溶液中具有更低的表面张力，能更好的使含硒碳量子点均匀的附着在植物叶片的表面，来提高植物的抗逆性。表面活性剂选择Silwet L‑77，其协助纳米拟酶进入叶面的情况最佳。 [0040] 本发明将含硒碳量子点和表面活性剂混合，喷施于植物叶面上，促进植物生长，提高植物抗逆性。为防止纳米材料和光对植物叶片造成损伤，本发明优选将处理后的植物放置于暗处适应，适应时间为2 6 h，优选为3 h，若纳米材料对植物没有表现出损伤，则可无~需暗适应，直接至于光照下生长。 [0041] 本发明的含硒碳量子点以及含硒元素的叶面喷施纳米肥料可以提高植物对盐和干旱胁迫的抗性，避免逆境带来的损失。实验表明，本发明的含硒碳量子点能够清除体外超氧阴离子和羟基自由基，提高盐胁迫下植物的生物量和长势，提高植物光合作用能力，有效维持盐胁迫下植物ROS稳态和细胞内膜系统的完整度。 [0042] 为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚明白，下面结合实施例对本发明进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。 [0043] 实施例1本实施例提供一种含硒碳量子点的制备方法。 [0044] 将100 mg硒代胱胺盐酸盐，间苯二胺50 mg，溶于10 ml超纯水，搅拌3 h，倒入反应釜中，通入氮气以排除反应釜中的氧气，180℃下反应8h，反应得到棕黄色溶液，12000 rpm离心20 min。小心收集上清液，将上清液倒入500 D的透析袋透析24h，每6 8 h更换一次透~析的水，得到的含硒元素的碳量子点。 [0045] 图1的TEM和HRTEM图显示，其表观显示为球型，平均粒径为3.54 nm，与已发表的Se‑CQD（Li, Feng, et al. "Selenium‐doped carbon quantum dots for free‐radical scavenging." Angewandte Chemie International Edition 56.33 (2017): 9910‑9914.）相近，后利用光谱法测试其成分中硒元素的质量浓度为1.7 g/L，按固形物计算，产率为：61.3%。 [0046] 实施例2本实施例提供一种含硒碳量子点的制备方法。 [0047] 将100 mg硒代胱胺盐酸盐，间苯二胺50 mg，溶于10 ml超纯水，搅拌3 h，倒入高压反应釜中，通入氮气以排除反应釜中的氧气，180 ℃下反应8h，反应得到棕黄色溶液，12000 rpm离心20 min。小心收集上清液，将1.8 g相对分子质量为1800的聚丙烯酸（PAA）溶于2 ml水后与上清混合，用移液管缓慢滴入7 ml氨水中，500 rpm搅拌8 h。用10000 D的透析袋进行纯化，每6 8 h更换一次透析的水，透析48 h，得到大量体积、较低浓度的含硒元素的碳量~子点。 [0048] 利用电感耦合等离子体发射光谱仪(ICP‑OES)检测硒元素的质量浓度为1.18 g/L，按固形物计算，产率为：65.9%。 [0049] 从TEM图像上得知，制备得到的含硒碳量子点为球型，平均粒径为4.72 nm。 [0050] 实施例3本实施例提供一种含硒碳量子点的制备方法。 [0051] 将150 mg硒代胱胺盐酸盐，间苯二胺50 mg，溶于10 ml超纯水，搅拌3 h，倒入高压反应釜中，通入氮气以排除反应釜中的氧气，120℃下反应8h，反应得到棕黄色溶液，14800 rpm离心30 min。小心收集上清液，将上清液倒入200 D的透析袋透析24h，每6 8 h更换一次~透析的水，得到的含硒元素的碳量子点。 [0052] 利用电感耦合等离子体发射光谱仪(ICP‑OES)检测硒元素的质量浓度为1.4 g/L，按固形物计算，产率为：50.5%。 [0053] 从TEM图像上得知，制备得到的含硒碳量子点为球型，平均粒径为3.63 nm。 [0054] 实施例4本实施例提供一种含硒碳量子点的制备方法。 [0055] 将300 mg硒代胱胺盐酸盐，间苯二胺150 mg，溶于30 ml超纯水，搅拌3 h，倒入高压反应釜中，通入氮气以排除反应釜中的氧气，200℃下反应6h，反应得到棕黄色溶液，15000 rpm离心30 min。小心收集上清液，将上清液倒入400 D的透析袋，每6 8 h更换一次~ 透析的水，得到的含硒元素的碳量子点。 [0056] 对比例1将100 mg硒代胱胺盐酸盐，间苯二胺50 mg，溶于10 ml超纯水，搅拌3 h，倒入高压反应釜中，通入氮气以排除反应釜中的氧气，60℃下反应6h，反应得到棕黄色溶液。反应后的溶液吸取上层并分装于2 mL离心管中，12000 rpm常温离心30 min，取上清，用透析袋（MW 500）透析24小时，每隔6 8 h换水，得到硒元素掺杂的碳量子点纳米颗粒胶体。 ~ [0057] 图2的TEM图显示，由于反应温度过低，反应不充分，纳米材料发生团聚，并且分散性差，含有未反应完全的原料。 [0058] 对比例2将100 mg硒代胱胺盐酸盐，间苯二胺50 mg，溶于10 ml超纯水，搅拌3 h，倒入高压反应釜中，通入氮气以排除反应釜中的氧气，120℃下反应6h，反应后的溶液吸取上层并分装于2 mL离心管中，12000 rpm常温离心30 min，得到硒元素掺杂的碳量子点纳米颗粒胶体。 [0059] 图3的TEM结果显示，纳米材料有团聚的现象，分散性一般。而本发明中增加了透析的纯化步骤，得到的硒元素掺杂的碳量子点纳米颗粒胶体能够在水中稳定存在，不易沉淀。 [0060] 对比例3将100 mg硒代胱胺盐酸盐，溶于10 ml超纯水，搅拌3 h，倒入高压反应釜中，通入氮气以排除反应釜中的氧气，120℃下反应6h，反应后的溶液吸取上层并分装于2 mL离心管中，12000 rpm常温离心30 min，取上清，用透析袋（MW 500）透析24小时，每隔8 h换水，得到硒元素掺杂的碳量子点纳米颗粒胶体。 [0061] 单独以硒代胱胺盐酸盐为反应物，所合成纳米颗粒胶体的荧光强度弱。实施例5将实施例1 2及对比例1 3制备的含硒碳量子点纳米材料进行电位测定、稳定性及~ ~荧光强度测定，具体操作如下： 利用荧光分光光度计对所述含硒碳量子点纳米材料进行3D扫描，确定不同实施例所获得纳米胶体均在440 nm激发光波长照射时，在520 nm处发射出最强荧光(图4)；随后静置24 h，观测其是否出现沉淀。利用Malvern激光粒度仪，在工作浓度下评测各实施例与对比例纳米拟酶Zeta电位。 [0062] 表1 实施例及对比例纳米材料的水溶性及荧光特性测试情况纳米材料 沉淀情况 荧光强度 Zeta电位 实施例1 否 强 +20 +25 mV ~ 实施例2 否 强 ‑35 ‑25 mV ~ 对比例1 是 弱 ‑10 ‑8 mV ~ 对比例2 是 强 ‑5 5 mV ~ 对比例3 是 弱 ‑5 +15 mV ~ 从表1可以看出，本发明的含硒碳量子点纳米材料荧光强度更大，且在水中能更加稳定地存在。 [0063] 实施例6含硒元素的叶面喷施纳米肥料，制作方法包括：将实施例1中的含硒碳量子点溶液稀释至浓度为100 mg/L，在上述溶液中加入体积百分比为0.05%的Silwet L‑77搅拌均匀即可。 [0064] 实施例7含硒元素的叶面喷施纳米肥料，制作方法包括：将实施例2中的含硒碳量子点溶液稀释至浓度为25 mg/L，在上述溶液中加入体积百分比为0.1%的Triton X‑100搅拌均匀即可。 [0065] 实施例8含硒碳量子点体外清除超氧阴离子和羟基自由基的效率 将实施例1的含硒碳量子点配制成不同浓度：0、5、20、50和100 mg/L，进行Fendon实验，检测含硒碳量子点在体外的清除羟基自由基的效率。具体步骤如下： 配制24 umol/L甲基紫、1.08 mM FeSO4、0.1mM H2O2、pH=7.4的Tris‑HCl，将样品加入含有MV‑Fenton反应体系的溶液中并混匀，在37 ℃下水浴30 min，以Tris‑HCl缓冲液为对照调零测定混合液在582 nm处的吸光值。结果显示随含硒碳量子点浓度的升高，其体外清除羟基自由基的效率越高，即0、5、20、50和100 mg/L 的含硒碳量子点在体外的清除羟基自由基的效率分别是0%、14.68%、29.56%、77.78%和95.44%(图6)。 [0066] 将实施例1的含硒碳量子点配制成不同浓度：0、5、20、50和100 mg/L，通过超氧化物歧化酶(SOD)测定试剂盒(购于南京建成生物公司，货号：A001‑3 WST‑1法)检测含硒碳量子点在体外的清除超氧阴离子的效率。结果显示随含硒碳量子点浓度的升高，其体外清除羟基自由基的效率越高，即0、5、20、50和100 mg/L 的含硒碳量子点在体外的清除羟基自由基的效率分别是0%、19.15%、22.34%、27.66%和30.85%(图7)。 [0067] 实施例9棉花盐胁迫实验 从4 ℃冰箱中取出棉花种子置于三角瓶中，室温中静置4‑6h之后，用0.3%H2O2溶液浸没消毒5min后，清水冲洗40 min以减少种皮H2O2残留。清洗过后的种子放在烧杯中，清水中浸种3h后，在每个营养钵播种2粒种子，播种深度为3 ± 0.5 cm。出苗后，待子叶达到约两个一元硬币大小时，挑选长势一致的苗子移栽到含5 L半量 Hoagland 溶液的黑色塑料盆 (440×290×80 cm) 中，每3 天更换一次溶液。用黑色条状海绵在子叶下1 cm 处将棉苗固定于盆上的黑色塑料板上，使用气泵保持通气。生长室参数设定为：8:00至22:00照光， 2 光强 400 μmol/m /s，昼夜温度为28/22 ℃。第二片真叶平展后选取长势一致的植株开始叶面喷施25 mg/L 实施例1的Se‑CDs处理。溶液中加入0.05%表面活性剂Silwet L‑77以促进 Se‑CDs 进入叶片。以喷施表面活性剂组为对照组。每个处理至少6株苗。喷施处理之后的苗子在弱光下适应3 h 后，进行盐胁迫处理 (250 mM NaCl)。 [0068] 在第7天时，涂抹或喷施过含硒碳量子点的棉花植株的生长状况显著好于对照组(图8)，将地上部剪下，称鲜重后，结果显示涂抹或喷施过含硒碳量子点的棉花植株叶片长势明显较好。 [0069] 实施例10油菜盐胁迫实验 使用浓度为50 mg/L和100 mg/L的实施例2中的含硒碳量子点，加入0.05 % Silwet L‑77，喷施于二叶期的油菜(中双11号)叶片上。油菜采用土壤培养，暗处适应3 h后，加入200 mM的NaCl，继续在正常光下生长，观察油菜的生长情况。 [0070] 在第14天时，不同浓度的含硒碳量子点喷施的油菜的生长状态皆比对照组好，更加健壮(图9)。测量植株高度后，将地上部剪下，称鲜重后，放到牛皮纸袋中，105℃杀青后，85℃烘干至恒重，称其干重，结果显示喷施过含硒碳量子点的油菜植株的鲜重、干重和株高皆高于对照组，叶片更绿，叶面积更大，更加健康(图10)。 [0071] 实施例11本实施例针对实施例9中的实验组及对照组的生理指标进行测定。包括代表植株生长情况的干鲜重测定，反应植株光和机构性能的光合色素及量子产率测定，反应植株活性氧稳态的相关自由基含量及清除酶活性测定以及反应膜结构完整度的MDA含量测定。 [0072] 首先利用万分之一天平对各组处理材料的地上部与地下部鲜重分别进行测量，并计算出根冠比。结果表明，处理组鲜重显著高于对照组，根冠比显著低于对照组，反映了更多的植株生长量特别是地上部生长量。 [0073] 使用乙醇浸提法测定叶绿素和类胡萝卜素的含量。结果表明，处理组叶绿素a和类胡萝卜素含量显著高于对照组，且叶绿素a与叶绿素b的比值显著高于对照组，具有明显的抗盐胁迫特征，即提升了光合色素的总量并缓解了叶绿素a的相对降解速率。 [0074] 使用FP110叶绿素荧光测定仪测定叶片的量子产率（Qy），结果表明，处理组Qy相较于对照组显著上升，表明处理组光和作用性能更强。 [0075] 使用过氧化氢（H2O2）检测试剂盒（南京建成生物科技有限公司）测定过氧化氢含2− 2− 量。用于测定超氧阴离子（˙O ），˙O 使用检测试剂盒（北京雷根生物科技有限公司），根据制造商提供的说明进行测量。DAB染色反应按照Kumar等人的方案进行，并进行了合理的修 2− 改。结果表明，相较对照组，处理组的H2O2与˙O 含量均显著降低，维持了盐胁迫下棉花幼苗的ROS稳态。 [0076] 超氧化物歧化酶（SOD）活性在560nm处用硝基蓝四氮唑法测定。通过在470 nm处利用分光光度法检测愈创木酚的含量，评估过氧化物酶（POD）活性。过氧化氢酶（CAT）的活性根据Rezad Bari等人所述的标准方案进行测定。结果表明，相较对照组，处理组的超氧化物歧化酶、过氧化氢酶活性上升，但过氧化物酶活性下降，对ROS酶清除系统的意义还有待进一步研究。 [0077] 使用TBA法测定MDA含量。结果表明，相较对照组，处理组的MDA含量显著下降，表明膜脂过氧化程度的下降，说明处理组更好的维持了细胞内膜系统的完整度。 [0078] 实施例12棉花干旱胁迫实验 采用实施例9的方法培育新陆早74号的棉花种子至二叶期。第二片真叶平展后选取长势一致的植株开始分别叶面喷施5、25、50 和150 mg/L 实施例1的Se‑CDs处理。溶液中加入0.05%表面活性剂Silwet L‑77以促进 Se‑CDs 进入叶片。以喷施表面活性剂组为对照组。每个处理至少6株苗。喷施处理之后的苗子在弱光下适应3 h 后，进行干旱胁迫处理。 [0079] 试验以15% PEG（质量比，渗透势0.32MPa）水培体系模拟棉花干旱胁迫。将上述不同处理的棉花幼苗移栽至水培体系中进行培养。干旱处理3天及7天后明确植株表型，测定生物量等相关数据。 [0080] 由图13和图14可以看出，喷施过含硒碳量子点的棉花植株的生长状况显著好于对照组，将地上部剪下，称鲜重后，结果显示喷施过含硒碳量子点的棉花植株叶片长势明显较好。尤其是25mg/L硒质量浓度的含硒碳量子点能够明显改善棉花在干旱条件下的生长表型，提高棉花的生物量。 [0081] 以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。 |
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