癌症是美国和世界的一种主要健康问题。据估计，1998年美国将 诊断出一百万以上侵袭性癌症的新病例。这种疾病的最普遍形式是 肺、乳腺、前列腺、结肠和直肠的实体肿瘤。癌症通常是通过体外实 验和成像方法联合诊断的。所述成像方法包括X射线计算机断层扫 描、核磁共振成像、超声成像和放射性核素闪烁照相术 (scintigraphy)。常常将造影剂施用给患者以提高通过X射线CT、 MRI和超声获得的图象，另外，施用定位于肿瘤的放射性药物对于放 射性核素闪烁图是必需的。
癌症的治疗通常涉及利用外部光束辐射治疗和化疗，两者可以单 独使用或联用，这依赖于疾病的种类和严重程度。目前有许多化疗 剂，但它们通常都存在对肿瘤与正常组织缺乏特异性的缺陷，从而导 致严重的副作用。这些治疗药征的效力也是有限的，这已被许多癌症 /特别是更普遍的实体肿瘤疾病的高死亡率所证实。因此，仍然需要 更有效和特异性的治疗方法。
尽管有许多可用于诊断癌症的成像方法，但仍需要改进的方法。 具体地讲，需要能够更好地区分癌症和其它疾病或良性生理性异常的 方法。达到所述改进的一种方法是给患者施用通过与受体结合而特异 性地定位在肿瘤中的金属药物，所述受体仅在肿瘤中表达或者在肿瘤 中的表达显著高于在其他组织中的表达。然后，通过其可成像的发射 (对于放射性药物的情况)或其对紧邻的水的松弛率的影响(对于磁共 振成像造影剂的情况)从外部监测所述金属药物的定位。
当所述金属药物是由发射粒子的放射性同位素组成时，还可将这 种肿瘤特异性金属药物用于治疗癌症。所述同位素在肿瘤部位的放射 性衰变导致对肿瘤细胞有毒性的足够的离子辐射。这种方法对肿瘤的 特异性使暴露于细胞毒性剂的正常组织数量降到最低，由此可提供具 有较小副作用的更有效的治疗方法。
以前为在癌症成像和治疗中达到这些理想的改进所作的努力集 中在使用放射性核素标记的与肿瘤细胞表面受体结合的单克隆抗 体、抗体片段和其他蛋白质或多肽(即分子量为10，000 D以上)。这 些放射性药物的特异性常常非常高，但它们有一些缺陷。首先，由于 其分子量很高，因此，从血液中裂解得很慢，从而延长图象中的血液 背景。另外，由于其分子量，它们在肿瘤部位不容易溢出，因此，只 能缓慢地通过血管外空间扩散到肿瘤细胞表面。这使得只有很有限量 的放射性药物到达受体，因此在成像中信号强度很低，就治疗而言， 细胞毒作用不够。
另一种使癌症成像并进行治疗的方法是利用与肿瘤细胞表面受 体结合的小分子，例如肽。在许多国家，临床中使用一种111In标记的 促生长素抑制素受体结合肽，111In-DTPA-D-Phe1-octeotide，用于使 表达促生长素抑制素受体的肿瘤细胞成像(Baker等，生命科学(Life Sci.)1991，49，1583-91和Krenning等，欧洲核医学杂志(Eur.J. Nucl.Med.)，1993，20，716-31)。已用更高剂量的这种放射性药 物就对所述癌症的潜在治疗作用进行了研究(Krenning等，消化 (Digestion)1996，57，57-61)。数个研究小组正在研究将Tc-99m 标记的111In-DTPA-D-Phe1-octeotide类似物用于成像，将Re-186标 记的类似物用于治疗(Flanagan等，US 5556939，Lyle等，US 5382654 以及Albert等US 5650134)。
血管生成是从预先存在的毛细管或纤毛后小脉管形成新血管的 过程；它是各种生理过程包括排卵、胚胎发育、创伤修复以及心肌中 并行血管产生的重要部分。它对许多疾病例如肿瘤生长和迁移，糖尿 病视网膜病以及黄斑变性来说也是非常重要的。该过程开始于现有血 管内皮细胞应答各种细胞因子和生长因子而产生的激活作用。肿瘤释 放的细胞因子或血管生成因子通过与所述因子特异性的细胞表面受 体相互作用来刺激血管内皮细胞。被激活的内皮细胞分泌降解血管基 膜的酶。然后所述内皮细胞增殖并侵入肿瘤组织。内皮细胞分化形成 腔，产生已有血管的新血管分支。然后血管给肿瘤提供营养物质使其 进一步生长并产生迁移途径。
在正常条件下，内皮细胞增殖是非常缓慢的过程，但在胚胎形 成、排卵和创伤愈合过程中，它可以在短时间内增加。在细胞更新过 程中的这种暂时增加受许多生长刺激因子和生长抑制因子的联合控 制。在病理性的血管生成中，这种正常平衡被打乱，导致内皮细胞持 续增加。已鉴定的部分血管生成因子包括碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)，血管生成素，TGF-α，TGF-β和血管内皮生长因子(VEGF)， 而α干扰素、β干扰素和血小板反应蛋白是血管生成抑制剂的实例。
内皮细胞在细胞外基质中的增殖和迁移是通过与各种细胞粘附 分子的相互作用而介导的(Folkman，J.，天然药物(Nature Medicine)，1995，1，27-31)。整联蛋白是一个杂二聚体细胞表面受 体的多样化家族，通过该物质，内皮细胞与细胞外基质彼此相连并与 其他细胞相连。整联蛋白αvβ3是多种具有暴露的三肽Arg-Gly-Asp部 分的细胞外基质蛋白的受体并介导与其下列配体的粘附：玻连蛋白、 纤连蛋白和血纤蛋白原等。整联蛋白αvβ3极少在正常血管上表达，但 在各种人肿瘤内的血管细胞上显著上升表达。αvβ3受体的作用是介导 内皮细胞与细胞外基质的相互作用并在血管生成信号的指导下促进 细胞、肿瘤细胞种群的迁移。由bFGF或TNF-α诱导的血管生成作用 依赖于整联蛋白αvβ3参与，而由VEGF诱导的血管生成作用依赖于整 联蛋白αvβ5(Cheresh等，科学(Science)，1995，270，1500-2)。内 皮细胞表面上整联蛋白α1β1和α2β1表达的诱导作用是VEGF促进血管 生成的另一重要机制(Senger等，美国国家科学院院报(Proc.Natl. Acad.Sci.USA)1997，94，13612-7)。
血管生成因子与内皮细胞表面受体例如受体酪氨酸激酶EGFR、 FGFR、PDGFR、Flk-1/KDR、Flt-1、Tek、Tie、neuropilin-1、endoglin、 内皮唾液酸蛋白和Ax1相互作用。受体Flk-1/KDR、neuropilin-1 和Flt-1识别VEGF，这些作用在VEGF诱导的血管生成中起关键作用。 在血管形成过程中，还主要表达受体酪氨酸激酶的Tie亚家族。
由于血管生成对肿瘤生长和迁移的重要性，正在开发许多化疗方 法来干扰或抑制该过程。方法之一是利用抗血管生成蛋白例如制管张 素和endostatin。制管张素是纤溶酶原的一种38 kDa片段，在动物 模型中已表明是内皮细胞增殖的强抑制剂。(O’Reilly等，细胞(Cell， 1994，79，315-328)。endostatin是胶原ⅩⅧ的一种20 kDa C 末端片段，已表明其是强抑制剂。(O’Reilly等，细胞(Cell，1997，88， 277-285)。
在动物模型中用endostatin进行全身治疗产生强的抗肿瘤活 性。但是，由于缺乏受试者，因此，这两种化疗剂的人类临床试验受 到阻碍。
抗血管生成治疗的另一种方法是使用导向部分，所述导向部分与 在血管生成维管系统中表达的与化疗剂相连的内皮细胞表面受体相 互作用。Burrows和Thorpe(美国国家科学院院报(Proc.Nat.Acad. Sci.USA)，1993，90，8996-9000)描述了在小鼠模型中，利用抗体 -免疫毒素结合物通过破坏肿瘤维管系统来根除肿瘤。产生抗主要组 织相容性配合物的内皮细胞Ⅱ型抗原的抗体，然后与细胞毒性剂去 糖基化蓖麻毒蛋白A链结合。同一研究小组(临床癌症研究(Clin.Can. Res.)，1995，1，1623-1634)研究了与去糖基化蓖麻毒蛋白A链结 合的抗内皮细胞表面受体endoglin的用途。在小鼠模型中，这两种 结合物都有强抗肿瘤活性。但是，对于常规的人类应用仍有缺陷。就 大部分抗体或其他大的外源蛋白质来说，有相当的免疫毒性风险，这 就限制或抑制了给人施用的可能性。另外，尽管靶向维管系统可能提 高连接的化疗剂的局部浓度，但是，必须将所述细胞毒性试剂从抗体 载体上裂解下来，然后运输或扩散到细胞中。
因此，需要提供没有不好的扩散或运输、可能的免疫毒性、有限 的来源和/或缺乏特异性的抗血管生成药物以及肿瘤或新维管系统成 像剂。
另外，对用于改善已经局部缺血或灌注不好的身体区域血流的治 疗性血管生成越来越感兴趣。一些研究人员正在使用局部施用的生长 因子以便在体肢或心脏中形成新的维管系统。生长因子VEGF和bFGF 最常用于此方面。最新的文献包括：Takeshita，S.等，临床研究(J. Clin.Invest.)，1994，93，662-670；和Schaper，W.和Schaper， 杂志，侧支循环：心脏、脑、肾、肢体(J.，Collateral Circulation： Heart，Brain，Kidney，Limbs)，Kluwer Academic Publishers， Boston，1993。在许多实验室中正在研究的主要应用是改善心脏血流 以及肢端的外周血流。另外，Henry，T等(美国大学心脏病学杂志(J. Amer.Coll ege Cardiology)，1998，31，65A)描述了在患者中使用 重组人VEGF以便通过治疗性血管生成改善心肌输注。患者接受 rhVEGF输注，然后在治疗后30和60天，通过核灌注成像监测来确定 心肌灌注的改善情况。通过核灌注成像，约50％的患者有改善，而通 过血管造影术，5/7的患者有新的侧支形成。
因此，需要发现一种监测改善的心脏血流的方法，该方法以新的 侧支血管本身为目标，而不是象核灌注成像那样以新侧支血管的区域 结果为目标。
                      发明综述
本发明的目的之一是提供抗血管生成药物，该药物含有与在肿瘤 新维管系统中表达的受体相结合的导向部分、选择性的连接基团以及 发射离子化辐射例如β粒子、α粒子和Auger或Coster-Kronig电子 的放射性金属离子。与受体结合的化合物将放射性同位素导向肿瘤新 维管系统。发射β或α粒子的放射性同位素发射细胞毒性量的导致细胞 死亡的离子化辐射。辐射的穿透能力避免了将细胞毒性的细胞毒性试 剂扩散或运输到细胞。
本发明的另一目的是提供治疗类风湿性关节炎的药物。这些药物 含有与在血管生成过程中增量调节的受体相结合的导向部分、选择性 的连接基团以及发射细胞毒性辐射(即β粒子，α粒子以及Auger或 Coster-Kronig电子)的放射性同位素。在类风湿性关节炎中，高度 维管化的血管翳的向内生长是由浸润巨噬细胞、免疫细胞或炎症细胞 的过度生产血管生成因子而引起的。因此，发射细胞毒性辐射的本发 明放射性药物可用于破坏所产生的新血管生成维管系统并由此治疗 所述疾病。
本发明的另一目的是提供肿瘤成像剂，该成像剂含有与在血管生 成过程中增量调节的受体相结合的导向部分、选择性的连接基团以及 可成像部分，例如γ射线或者发射正电子的放射性同位素，磁共振成 像造影剂、X射线造影剂或者超声造影剂。
本发明的另一目的是提供用于监测血管生成治疗的进程和结果 的成像剂。这些试剂含有与在血管生成过程中增量调节的受体相结合 的导向部分、选择性的连接基团以及可成像部分。在施用生长因子 后，可将本发明的成像剂静脉内定期施用，然后用受影响区域、心脏 或肢端的标准技术完成成像以监测血管生成治疗的治疗进程和结果 (即，使新血管的形成成像)。
本发明的另一目的是提供用于制备本发明药物的化合物。这些化 合物含有与在血管生成过程中增量调节的受体相结合的导向部分Q、 选择性的连接基团Ln以及金属螯合剂或者结合部分Ch。所述化合物含 有一个或多个与金属螯合剂或结合部分相连的保护基团。所述保护基 团使所述试剂具有改善的长期贮存稳定性，并且在临合成所述放射性 药物之前或同时被除去。或者，本发明化合物含有与在血管生成过程 中增量调节的受体相结合的肽或肽模拟物导向部分Q、选择性的连接 基团Ln以及表面活性剂Sf。
本发明的药物可用于诊断和/或治疗目的。本发明的诊断用放射 性药物是由诊断上有用的放射性核素(即具有可成像γ射线或正电子 发射的放射性金属离子)组成的药物。本发明的治疗用放射性药物是 由治疗有用的放射性核素组成的药物，放射性核素是发射离子化辐射 例如β粒子、α粒子和Auger或Coster-Kronig电子的放射性金属离 子。
含γ射线或发射正电子的放射性金属离子的药物还可通过γ闪烁照 相术或正电子发射X射线体层照相术可用于使肿瘤成像。含γ射线或 发射正电子的放射性金属离子的药物还可通过γ闪烁照相术或正电子 发射X线体层照相术用于使治疗性血管生成作用成像。含发射粒子的 放射性金属离子的药物通过将细胞毒性剂量的辐射传递到肿瘤而用 于治疗癌症。含发射粒子的放射性金属离子的药物还可通过破坏血管 生成性维管系统的形成来治疗类风湿性关节炎。含顺磁金属离子的药 物用作磁共振成像造影剂。含一种或多种X射线吸附或原子序数为20 或20以上的“重”原子的药物用作X射线造影剂。含生物相容性气 体微泡、液体载体和表面活性剂微球的药物用作超声造影剂。
                      发明详述
[1]因此，在第一个实施方案中，本发明提供新的化合物，该化 合物含有导向部分和螯合剂，其中的导向部分与螯合剂相结合，所述 导向部分是肽或肽模拟物并且可与在血管生成过程中增量调节的受 体相结合，并且所述化合物在导向部分和螯合剂之间有0-1个连接基 团。
[2]在优选的实施方案中，导向部分是肽或其模拟物，受体选自： EGFR、FGFR、PDGFR、Flk-1/KDR、Flt-1、Tek、Tie、neuropilin- 1、endoglin、内皮唾液酸蛋白、Ax1、αvβ3、αvβ5、α5β1、α4β1、α1β1 和α2β2并且在导向部分和螯合剂之间存在连接基团。
[3]在更优选的实施方案中，受体是整联蛋白αvβ3，所述化合物 是下式的化合物：
(Q)d-Ln-Ch或(Q)d-Ln-(Ch)d，
其中Q是肽并且彼此独立地选自：
K是L-氨基酸，并且在每次出现时彼此独立地选自：精氨酸、瓜 氨酸、N-甲基精氨酸、赖氨酸、高赖氨酸、2-氨基乙基半胱氨酸、δ-N-2- 咪唑啉基鸟氨酸、δ-N-苄基氨基甲酰基鸟氨酸和β-2-苯并咪唑基乙酰 基-1，2-二氨基丙酸；
K’是D-氨基酸，并且在每次出现时彼此独立地选自：精氨酸、瓜 氨酸、N-甲基精氨酸、赖氨酸、高赖氨酸、2-氨基乙基半胱氨酸、δ-N-2- 咪唑啉基鸟氨酸、δ-N-苄基氨基甲酰基鸟氨酸和β-2-苯并咪唑基乙酰 基-1，2-二氨基丙酸；
L在每次出现时彼此独立地选自：甘氨酸、L-丙氨酸和D-丙氨酸；
M是L-天冬氨酸；
M’是D-天冬氨酸；
R1是被0-1个与Ln连接的键取代的氨基酸，并且在每次出现时彼 此独立地选自：甘氨酸、L-缬氨酸、D-缬氨酸、丙氨酸、亮氨酸、异 亮氨酸、正亮氨酸、2-氨基丁酸、2-氨基己酸、酪氨酸、苯丙氨酸、 噻吩基丙氨酸、苯基甘氨酸、环己基丙氨酸、高苯丙氨酸、1-萘基丙 氨酸、赖氨酸、丝氨酸、鸟氨酸、1，2-二氨基丁酸、1，2-二氨基丙酸、 半胱氨酸、青霉胺和蛋氨酸；
R2是被0-1个与Ln连接的键取代的氨基酸，并且在每次出现时彼 此独立地选自：甘氨酸、缬氨酸、丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、正亮 氨酸、2-氨基丁酸、2-氨基己酸、酪氨酸、L-苯丙氨酸、D-苯丙氨酸、 噻吩基丙氨酸、苯基甘氨酸、联苯基甘氨酸、环己基丙氨酸、高苯丙 氨酸、L-1-萘基丙氨酸、D-1-萘基丙氨酸、赖氨酸、丝氨酸、鸟氨酸、 1，2-二氨基丁酸、1，2-二氨基丙酸、半胱氨酸、青霉胺、蛋氨酸和2- 氨基噻唑-4-乙酸；
R3是被0-1个与Ln连接的键取代的氨基酸，并且在每次出现时彼 此独立地选自：甘氨酸、D-缬氨酸、D-丙氨酸、D-亮氨酸、D-异亮氨 酸、D-正亮氨酸、D-2-氨基丁酸、D-2-氨基己酸、D-酪氨酸、D-苯丙 氨酸、D-噻吩基丙氨酸、D-苯基甘氨酸、D-环己基丙氨酸、D-高苯丙 氨酸、D-1-萘基丙氨酸、D-赖氨酸、D-丝氨酸、D-鸟氨酸、D-1，2- 二氨基丁酸、D-1，2-二氨基丙酸、D-半胱氨酸、D-青霉胺、D-蛋氨酸；
R4是被0-1个与Ln连接的键取代的氨基酸，并且在每次出现时彼 此独立地选自：甘氨酸、D-缬氨酸、D-丙氨酸、D-亮氨酸、D-异亮氨 酸、D-正亮氨酸、D-2-氨基丁酸、D-2-氨基己酸、D-酪氨酸、D-苯丙 氨酸、D-噻吩基丙氨酸、D-苯基甘氨酸、D-环己基丙氨酸、D-高苯丙 氨酸、D-1-萘基丙氨酸、D-赖氨酸、D-丝氨酸、D-鸟氨酸、D-1，2- 二氨基丁酸、D-1，2-二氨基丙酸、D-半胱氨酸、D-青霉胺、D-蛋氨酸 和2-氨基噻唑-4-乙酸；
R5是被0-1个与Ln连接的键取代的氨基酸，并且在每次出现时彼 此独立地选自：甘氨酸、L-缬氨酸、L-丙氨酸、L-亮氨酸、L-异亮氨 酸、L-正亮氨酸、L-2-氨基丁酸、L-2-氨基己酸、L-酪氨酸、L-苯丙 氨酸、1-噻吩基丙氨酸、L-苯基甘氨酸、L-环己基丙氨酸、L-高苯丙 氨酸、L-1-萘基丙氨酸、L-赖氨酸、L-丝氨酸、L-鸟氨酸、L-1，2- 二氨基丁酸、L-1，2-二氨基丙酸、L-半胱氨酸、L-青霉胺、L-蛋氨酸 和2-氨基噻唑-4-乙酸；
条件是，各个Q中的R1、R2、R3、R4和R5之一被与Ln连接的键所 取代，进一步的条件是，当R2是2-氨基噻唑-4-乙酸时，K是N-甲基 精氨酸，进一步的条件是，当R4是2-氨基噻唑-4-乙酸时，K和K’是 N-甲基精氨酸，仍进一步条件是，当R5是2-氨基噻唑-4-乙酸时，K’ 是N-甲基精氨酸；
d选自1、2、3、4、5、6、7、8、9和10；
Ln是下式的连接基团：
(CR6R7)g-(W)h-(CR6aR7a)g′-(Z)k-(W)h′-(CR8R9)g″-(W)h″-(CR8aR9a)g′″
条件是，g+h+g’+k+h’+g″+h″+g″’不是0；
W在每次出现时彼此独立地选自：O、S、NH、NHC(=O)、C(=O)NH、 C(=O)、C(=O)O、OC(=O)、NHC(=S)NH、NHC(=O)NH、SO2、(OCH2CH2)、 (CH2CH2O)s′、(OCH2CH2CH2)s″、(CH2CH2CH2O)t和(aa)t′；
aa在每次出现时彼此独立地选自氨基酸；
Z选自：被0-3个R10取代的芳基、被0-3个R10取代的C3-10环烷 基和被0-3个R10取代的含有1-4个彼此独立地选自N、S和O的杂原 子的5-10元杂环环系；
R6、R6a、R7、R7a、R8、R8a、R9和R9a在每次出现时彼此独立地选自： H、=O、COOH、SO3H、PO3H、被0-3个R10取代的C1-C5烷基、被0-3 个R10取代的芳基、被0-3个R10取代的苄基和被0-3个R10取代的C1-C5 烷氧基、NHC(=O)R11、C(=O)NHR11、NHC(=O)NHR11、NHR11、R11和与Ch 连接的键；
R10在每次出现时彼此独立地选自：与Ch连接的键、COOR11、OH、 NHR11、SO3H、PO3H、被0-3个R11取代的芳基、被0-1个R12取代的C1-C5 烷基、被0-1个R12取代的C1-C5烷氧基和被0-3个R11取代的含有1- 4个彼此独立地选自N、S和O的杂原子的5-10元杂环环系；
R11在每次出现时彼此独立地选自：H、被0-1个R12取代的芳基、 被0-1个R12取代的含有1-4个彼此独立地选自N、S和O的杂原子的 5-10元杂环环系、被0-1个R12取代的C3-10环烷基、被0-1个R12取代 的聚亚烷基二醇、被0-1个R12取代的碳水化合物、被0-1个R12取代 的环糊精、被0-1个R12取代的氨基酸、被0-1个R12取代的多羧基烷 基、被0-1个R12取代的多氮杂烷基、被0-1个R12取代的含有2-10 个氨基酸的肽、与Ch连接的键；
R12是与Ch连接的键；
k选自0、1和2；
h选自0、1和2；
h’选自0、1、2、3、4和5；
h″选自0、1、2、3、4和5；
g选自0、1、2、3、4、5、6、7、8、9和10；
g’选自0、1、2、3、4、5、6、7、8、9和10；
g″选自0、1、2、3、4、5、6、7、8、9和10；
g″’选自0、1、2、3、4、5、6、7、8、9和10；
s选自0、1、2、3、4、5、6、7、8、9和10；
s’选自0、1、2、3、4、5、6、7、8、9和10；
s″选自0、1、2、3、4、5、6、7、8、9和10；
t选自0、1、2、3、4、5、6、7、8、9和10；
t’选自0、1、2、3、4、5、6、7、8、9和10；
Ch是具有选自如下的结构式的金属结合单元：
A1、A2、A3、A4、A5、A6、A7和A8在每次出现时彼此独立地选自N、 NR13、NR13R14、S、SH、S(Pg)、O、OH、PR13、PR13R14、P(O)R15R16和与 Ln连接的键；
E是键、CH或间隔基，所述间隔基在每次出现时彼此独立地选自： 被0-3个R17取代的C1-C10烷基、被0-3个R17取代的芳基、被0-3个 R17取代的C3-10环烷基、被0-3个R17取代的杂环-C1-10烷基，其中的杂 环基团是含有1-4个彼此独立地选自N、S和O的杂原子的5-10元 杂环环系、被0-3个R17取代的C6-10芳基-C1-10烷基、被0-3个R17取代 的C1-10烷基-C6-10芳基-、被0-3个R17取代的含有1-4个彼此独立地 选自N、S和O的杂原子的5-10元杂环环系；
R13和R14彼此独立地选自：与Ln连接的键、氢、被0-3个R17取代 的C1-C10烷基、被0-3个R17取代的芳基、被0-3个R17取代的C1-10环 烷基、被0-3个R17取代的杂环-C1-10烷基，其中的杂环基团是含有1-4 个彼此独立地选自N、S和O的杂原子的5-10元杂环环系、被0-3 个R17取代的C6-10芳基-C1-10烷基、被0-3个R17取代的C1-10烷基-C6-10 芳基-、被0-3个R17取代的含有1-4个彼此独立地选自N、S和O的 杂原子的5-10元杂环环系、电子，条件是，当R13或R14之一是电子 时，则另一个也是电子；
或者，R13和R14合在一起形成=C(R20)(R21)；
R15和R16彼此独立地选自与Ln连接的键、-OH、被0-3个R17取代 的C1-C10烷基、被0-3个R17取代的芳基、被0-3个R17取代的C3-10环 烷基、被0-3个R17取代的杂环-C1-10烷基，其中的杂环基团是含有1-4 个彼此独立地选自N、S和O的杂原子的5-10元杂环环系、被0-3 个R17取代的C6-10芳基-C1-10烷基、被0-3个R17取代的C1-10烷基-C6-10 芳基-、被0-3个R17取代的含有1-4个彼此独立地选自N、S和O的 杂原子的5-10元杂环环系；
R17在每次出现时彼此独立地选自：与Ln连接的键、
                   =O，F，Cl，Br，I，-CF3，-CN， -CO2R18，-C(=O)R18，-C(=O)N(R18)2，-CHO，-CH2OR18， -OC(=O)R18，-OC(=O)OR18a，-OR18，-OC(=O)N(R18)2， -NR19C(=O)R18，-NR19C(=O)OR18a，-NR19C(=O)N(R18)2， -NR19SO2N(R18)2，-NR19SO2R18a，-SO3H，-SO2R18a，-SR18， -S(=O)R18a，-SO2N(R18)2，-N(R18)2，-NHC(=S)NHR18，=NOR18， NO2，-C(=O)NHOR18，-C(=O)NHNR18R18a，-OCH2CO2H，
2-(1-吗啉基)乙氧基、C1-C5烷基、C2-C4链烯基、C3-C6环烷基、 C3-C6环烷基甲基、C2-C6烷氧基烷基、被0-2个R18取代的芳基、含有 1-4个彼此独立地选自N、S和O的杂原子的5-10元杂环环系；
R18、R18a和R19在每次出现时彼此独立地选自：与Ln连接的键、H、 C1-C6烷基、苯基、苄基、C1-C6烷氧基、卤化物、硝基、氰基和三氟 甲基；
Pg是巯基保护基；
R20和R21彼此独立地选自：H、C1-C10烷基、-CN、-CO2R25、-C(=O)R25、 -C(=O)N(R25)2、被0-3个R23取代的C2-C10 1-烯烃、被0-3个R23取代 的C2-C10 1-炔烃、被0-3个R23取代的芳基、被0-3个R23取代的含有 1-4个彼此独立地选自N、S和O的杂原子的不饱和5-10元杂环环系、 被0-3个R23取代的不饱和C3-10碳环；
或者，R20和R21与它们所连接的二价碳基团合在一起形成：
R22和R23彼此独立地选自：H、R24、被0-3个R24取代的C1-C10烷 基、被0-3个R24取代的C2-C10链烯基、被0-3个R24取代的C2-C10链 炔基、被0-3个R24取代的芳基、被0-3个R24取代的含有1-4个彼此 独立地选自N、S和O的杂原子的5-10元杂环环系、被0-3个R24取 代的C3-10碳环；
或者，R22、R23合在一起形成稠合芳香族环系或含有1-4个彼此独 立地选自N、S和O的杂原子的5-10元杂环环系；
a和b表示选择性双键的位置，n是0或1；
R24在每次出现时彼此独立地选自：
    =O，F，Cl，Br，I，-CF3，-CN，-CO2R25，-C(=O)R25-C(=O)N(R25)2，-N(R25)3+，-CH2OR25，-OC(=O)R25， -OC(=O)OR25a，-OR25，-OC(=O)N(R25)2，-NR26C(=O)R25， -NR26C(=O)OR25a，-NR26C(=O)N(R25)2，-NR26SO2N(R25)2， -NR26SO2R25a，-SO3H，-SO2R25a，-SR25，-S(=O)R25a， -SO2N(R25)2，-N(R25)2，=NOR25，-C(=O)NHOR25，-OCH2CO2H，
和2-(1-吗啉基)乙氧基；
R25、R25a和R26在每次出现时彼此独立地选自：氢和C1-C6烷基； 及其可药用盐。
[4]在更优选的实施方案中，本发明提供如下化合物，其中： L是甘氨酸；
R1是选择性地被与Ln连接的键取代的氨基酸，并且在每次出现时 彼此独立地选自：L-缬氨酸、D-缬氨酸、丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、 正亮氨酸、2-氨基丁酸、酪氨酸、苯丙氨酸、苯基甘氨酸、环己基丙 氨酸、高苯丙氨酸、赖氨酸、鸟氨酸、1，2-二氨基丁酸和1，2-二氨基 丙酸；
R2是选择性地被与Ln连接的键取代的氨基酸，并且在每次出现时 彼此独立地选自：缬氨酸、丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、正亮氨酸、 2-氨基丁酸、酪氨酸、L-苯丙氨酸、D-苯丙氨酸、噻吩基丙氨酸、苯 基甘氨酸、联苯基甘氨酸、环己基丙氨酸、高苯丙氨酸、L-1-萘基丙 氨酸、D-1-萘基丙氨酸、赖氨酸、鸟氨酸、1，2-二氨基丁酸、1，2- 二氨基丙酸和2-氨基噻唑-4-乙酸；
R3是选择性地被与Ln连接的键取代的氨基酸，并且在每次出现时 彼此独立地选自：D-缬氨酸、D-丙氨酸、D-亮氨酸、D-异亮氨酸、 D-正亮氨酸、D-2-氨基丁酸、D-酪氨酸、D-苯丙氨酸、D-苯基甘氨酸、 D-环己基丙氨酸、D-高苯丙氨酸、D-赖氨酸、D-丝氨酸、D-鸟氨酸、 D-1，2-二氨基丁酸和D-1，2-二氨基丙酸；
R4是选择性地被与Ln连接的键取代的氨基酸，并且在每次出现时 彼此独立地选自：D-缬氨酸、D-丙氨酸、D-亮氨酸、D-异亮氨酸、 D-正亮氨酸、D-2-氨基丁酸、D-酪氨酸、D-苯丙氨酸、D-噻吩基丙氨 酸、D-苯基甘氨酸、D-环己基丙氨酸、D-高苯丙氨酸、D-l-萘基丙氨 酸、D-赖氨酸、D-鸟氨酸、D-1，2-二氨基丁酸、D-1，2-二氨基丙酸和 2-氨基噻唑-4-乙酸；
R5是选择性地被与Ln连接的键取代的氨基酸，并且在每次出现时 彼此独立地选自：L-缬氨酸、L-丙氨酸、L-亮氨酸、L-异亮氨酸、 L-正亮氨酸、L-2-氨基丁酸、L-酪氨酸、L-苯丙氨酸、L-噻吩基丙氨 酸、L-苯基甘氨酸、L-环己基丙氨酸、L-高苯丙氨酸、L-l-萘基丙氨 酸、L-赖氨酸、L-鸟氨酸、L-1，2-二氨基丁酸、L-1，2-二氨基丙酸和 2-氨基噻唑-4-乙酸；
d选自1，2和3；
W在每次出现时彼此独立地选自： O，NH，NHC(=O)，C(=O)NH，C(=O)，C(=O)O，OC(=O)， NHC(=S)NH，NHC(=O)NH，SO2，(OCH2CH2)s，(CH2CH2O)s′， (OCH2CH2CH2)s″，和(CH2CH2CH2O)t，
Z选自：被0-1个R10取代的芳基、被0-1个R10取代的C3-10环烷 基、被0-1个R10取代的含有1-4个彼此独立地选自N、S和O的杂原 子的5-10元杂环环系；
R6、R6a、R7、R7a、R8、R8a、R9和R9a在每次出现时彼此独立地选自： H、=O、COOH、SO3H、被0-1个R10取代的C1-C5烷基、被0-1个R10取 代的芳基、被0-1个R10取代的苄基、被0-1个R10取代的C1-C5烷氧 基、NHC(=O)R11、C(=O)NHR11、NHC(=O)NHR11、NHR11、R11和与Ch连接 的键；
R10在每次出现时彼此独立地选自：COOR11、OH、NHR11、SO3H、被 0-1个R11取代的芳基、被0-1个R11取代的含有1-4个彼此独立地选 自N、S和O的杂原子的5-10元杂环环系、被0-1个R12取代的C1- C5烷基、被0-1个R12取代的C1-C5烷氧基、与Ch连接的键；
R11在每次出现时彼此独立地选自：H、被0-1个R12取代的芳基、 被0-1个R12取代的含有1-4个彼此独立地选自N、S和O的杂原子的 5-10元杂环环系、被0-1个R12取代的聚亚烷基二醇、被0-1个R12 取代的碳水化合物、被0-1个R12取代的环糊精、被0-1个R12取代的 氨基酸、与Ch连接的键；
k是0或1；
h是0或1；
h’是0或1；
s选自0、1、2、3、4和5；
s’选自0、1、2、3、4和5；
s″选自0、1、2、3、4和5；
t选自0、1、2、3、4和5；
A1、A2、A3、A4、A5、A6、A7和A8在每次出现时彼此独立地选自：NR13、 NR13R14、S、SH、S(Pg)、OH和与Ln连接的键；
E是键、CH或间隔基，所述间隔基在每次出现时彼此独立地选自： 被0-3个R17取代的C1-C10烷基、被0-3个R17取代的芳基、被0-3个 R17取代的C3-10环烷基、被0-3个R17取代的含有1-4个彼此独立地选 自N、S和O的杂原子的5-10元杂环环系；
R13和R14彼此独立地选自：与Ln连接的键、氢、被0-3个R17取代 的C1-C10烷基、被0-3个R17取代的芳基、被0-3个R17取代的含有1-4 个彼此独立地选自N、S和O的杂原子的5-10元杂环环系和电子，条 件是，当R13或R14之一是电子时，另一个也是电子；
或者，R13和R14合在一起形成=C(R20)(R21)；
R17在每次出现时彼此独立地选自：与Ln连接的键、
                   =O，F，Cl，Br，I，-CF3，-CN， -CO2R18，-C(=O)R18，-C(=O)N(R18)2，-CH2OR18，-OC(=O)R18， -OC(=O)OR18a，-OR18，-OC(=O)N(R18)2，-NR19C(=O)R18， -NR19C(=O)OR18a，-NR19C(=O)N(R18)2 ，-NR19SO2N(R18)2， -NR19SO2R18a，-SO3H，-SO2R18a，-S(=O)R18a，-SO2N(R18)2， -N(R18)2，-NHC(=S)NHR18，=NOR18，-C(=O)NHNR18R18a， -OCH2CO2H，
和2-(1-吗啉基)乙氧基；
R18、R18a和R19在每次出现时彼此独立地选自：与Ln连接的键、H和C1-C6烷基；
R20和R21彼此独立地选自：H、C1-C5烷基、-CO2R25、被0-3个R23 取代的C2-C5 1-烯烃、被0-3个R23取代的C2-C5 1-炔烃、被0-3个 R23取代的芳基、被0-3个R23取代的含有1-4个彼此独立地选自N、S和O的杂原子的5-10元不饱和杂环环系；
或者，R20和R21与它们所连接的二价碳基团合在一起形成：
R22和R23彼此独立地选自：H和R24；
或者，R22、R23合在一起形成稠合的芳香族环系或含有1-4个彼此 独立地选自N、S和O的杂原子的5-10元杂环环系；
R24在每次出现时彼此独立地选自：
-CO2R25，-C(=O)N(R25)2，-CH2OR25，-OC(=O)R25， -OR25，-SO3H，-N(R25)2，和-OCH2CO2H；和， R25在每次出现时彼此独立地选自：H和C1-C3烷基。 [5]在更优选的实施方案中，本发明提供如下化合物，其中： Q是肽，其选自：
R1是L-缬氨酸、D-缬氨酸、在ε氨基上被与Ln连接的键选择性取 代的D-赖氨酸或在ε氨基上被与Ln连接的键选择性取代的L-赖氨酸；
R2是L-苯丙氨酸、D-苯丙氨酸、D-1-萘基丙氨酸、2-氨基噻唑- 4-乙酸、在ε氨基上被与Ln连接的键选择性取代的L-赖氨酸或酪氨 酸，所述酪氨酸在羟基上被与Ln连接的键选择性地取代；
R3是D-缬氨酸、D-苯丙氨酸或在ε氨基上被与Ln连接的键选择性 取代的L-赖氨酸；
R4是D-苯丙氨酸、在羟基上被与Ln连接的键选择性取代的D-酪 氨酸或在ε氨基上被与Ln连接的键选择性取代的L-赖氨酸；
条件是，各Q中的R1和R2之一被与Ln连接的键所取代，进一步 的条件是，当R2是2-氨基噻唑-4-乙酸时，K是N-甲基精氨酸；
d是1或2；
W在每次出现时彼此独立地选自：NHC(=O)、C(=O)NH、C(=O)、 (CH2CH2O)s′和(CH2CH2CH2O)t；
R5、R6a、R7、R7a、R8、R8a、R9和R9a在每次出现时彼此独立地选自： H、NHC(=O)R11、与Ch连接的键；
k是0；
h″选自0、1、2和3；
g选自0、1、2、3、4和5；
g’选自0、1、2、3、4和5；
g″选自0、1、2、3、4和5；
g″’选自0、1、2、3、4和5；
s’是1或2； t是1或2； A1选自：OH、与Ln连接的键； A2、A4和A6均是N； A3、A5和A8均是OH； A7是与Ln连接的键或与Ln连接的NH-键； E是被0-1个R17取代的C2烷基； R17是=0； 或者，Ch是 A1是NH2或N=C(R20)(R21)； E是键； A2是NHR13； R13是被R17取代的杂环，所述杂环选自吡啶和嘧啶； R17选自与Ln连接的键、C(=O)NHR18和C(=O)R18； R18是与Ln连接的键； R24选自：-CO2R25、-OR25、-SO3H和-N(R25)2； R25在每次出现时彼此独立地选自：氢和甲基； 或者，Ch是
A1、A2、A3和A4均是N；
A5、A6和A8均是OH；
A7是与Ln连接的键；
E是被0-1个R17取代的C2烷基；
R17是=0。
[6]在另一个更优选的实施方案中，本发明提供如下化合物，所 述化合物选自：
(a)环{Arg-Gly-Asp-D-Tyr(N-[2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚 肼基]甲基]-苯磺酸]-3-氨基丙基)-Val}；
(b)环{Arg-Gly-Asp-D-Tyr((N-[2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚 肼基]甲基]-苯磺酸]-18-氨基-14-氮杂-4，7，10-氧基-15-氧代-十八 烷酰基)-3-氨基丙基)-Val}；
(c)[2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸]- Glu(环{D-Tyr(3-氨基丙基)-Val-Arg-Gly-Asp})-环{D-Tyr(3-氨基 丙基)-Val-Arg-Gly-Asp}；
(d)环(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Lys([2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基] 亚肼基]甲基]-苯磺酸])}；
(e)环{Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys([2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基] 亚肼基]甲基]-苯磺酸])}；
(f)[2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸]- Glu(环{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe})-环{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe}；
(g)[2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸]-Phe- Glu(环{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe})-环{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe}；
(h)环{Arg-Gly-Asp-D-Nal-Lys([2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基] 亚肼基]甲基)-苯磺酸])}；
(i)[2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基]-亚肼基]甲基]-苯磺酸]- Glu(环{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Nal})-环{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Nal}；
(j)环{Arg-Gly-Asp-Lys([2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基)亚肼基] 甲基]-苯磺酸])-D-Val}
(k)[2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基)亚肼基)甲基]-苯磺酸]- Glu(环{Lys-D-Val-Arg-Gly-Asp})-环{Lys-D-Val-Arg-Gly-Asp}；
(l){环(Arg-D-Val-D-Tyr(N-[2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚肼 基]甲基]-苯磺酸]-3-氨基丙基)-D-Asp-Gly}；
(m)环{D-Lys([2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚肼基)甲基]-苯磺 酸])-D-Phe-D-Asp-Gly-Arg}；
(n)[2-[[[5-[羰基)-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸]- Glu(环{D-Lys-D-Phe-D-Asp-Gly-Arg})-环{D-Lys-D-Phe-D-Asp- Gly-Arg}；
(o)环{D-Phe-D-Lys([2-[[[5-[羰基)-2-吡啶基]亚肼基]甲 基]-苯磺酸])-D-Asp-Gly-Arg}；
(p)环{N-Me-Arg-Gly-Asp-ATA-D-Lys([2-[[[5-[羰基]-2-吡 啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸])}；
(q)环{Cit-Gly-Asp-D-Phe-Lys([2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基] 亚肼基]甲基]-苯磺酸])}：
(r)2-(1，4，7，10-四氮杂-4，7，10-三(羧基甲基)-1-环十二烷 基)乙酰基-Glu(环{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe})-环{Lys-Arg-Gly- Asp-D-Phe)；
(s)环{Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys(DTPA)}；
(t)环{Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys}2(DTPA)；
(u)环{Arg-Gly-Asp-D-Tyr(N-DTPA-3-氨基丙基)-Val}；
(v)环{Orn(d-N-2-咪唑啉基)-Gly-Asp-D-Tyr(N-[2-[[[5-[羰 基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸]-3-氨基丙基)-Val}；
(w)环(Lys-Gly-Asp-D-Tyr(N-[2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚 肼基]甲基]-苯磺酸]-3-氨基丙基)-Val}；
(x)环{Cys(2-氨基乙基)-Gly-Asp-D-Tyr(N-[2-[[[5-[羰基]- 2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸]-3-氨基丙基)-Val}；
(y)环{高Lys-Gly-Asp-D-Tyr(N-[2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基] 亚肼基]甲基]-苯磺酸]-3-氨基丙基)-Val)；
(z)环{Orn(d-N-苄基氨基甲酰基)-Gly-Asp-D-Tyr(N-[2- [[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸)-3-氨基丙基)-Val}；
(aa)环{Dap(b-(2-苯并咪唑基乙酰基))-Gly-Asp-D-Tyr(N-[2- [[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸]-3-氨基丙基)-Val}；
(bb)环{Orn(d-N-2-咪唑啉基)-Gly-Asp-D-Phe-Lys(N-[2- [[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸])}；
(cc)环{Orn(d-N-苄基氨基甲酰基)-Gly-Asp-D-Phe-Lys(N-[2- [[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸])}；
(dd)环{Lys-D-Val-D-Tyr(N-[2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚肼 基]甲基]-苯磺酸]-3-氨基丙基)-D-Asp-Gly}；
(ee)环{Orn(d-N-苄基氨基甲酰基)-D-Val-D-Tyr(N-{2-[[[5- [羰基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸]-3-氨基丙基)-D-Asp-Gly}； 和
(ff)环{Orn(d-N-2-咪唑啉基)-D-Val-D-Tyr(N-[2-[[[5-[羰 基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸]-3-氨基丙基)-D-Asp-Gly}；
或其可药用盐。
[7]在另一个优选的实施方案中，本发明提供一种含有本发明化 合物的药盒。
[8]在另一个更优选的实施方案中，所述药盒还含有一种或多种 辅助配体和还原剂。
[9]在另一个更优选的实施方案中，辅助配体是tricine和 TPPTS。
[10]在另一个更优选的实施方案中，还原剂是锡(Ⅱ)。
[11]在第二个实施方案中，本发明提供新的诊断或治疗用金属 药物组合物，该组合物含有：金属、能够螯合金属的螯合剂和导向部 分，其中的导向部分与螯合剂相结合，所述导向部分是肽或肽模拟物 并且可与在血管生成过程中增量调节的受体相结合，并且所述化合物 在导向部分和螯合剂之间有0-1个连接基团。
[12]在另一个优选的实施方案中，金属药物是诊断用放射性药 物，所述金属是选自99mTc、95Tc、111In、62Cu、64Cu、67Ga和68Ga的放 射性同位素，导向部分是肽或其模拟物，受体选自：EGFR、FGFR、 PDGFR、Flk-1/KDR、Flt-1、Tek、Tie、neuropilin-1、endoglin、 内皮唾液酸蛋白、Axl、αvβ3、αvβ5、α5β1、α4β1、α1β1和α2β2并且在 导向部分和螯合剂之间存在连接基团。
[13]在另一个更优选的实施方案中，导向部分是环状五肽，受 体是αvβ3。
[14]在另一个更优选的实施方案中，放射性同位素是99mTc或 95Tc，所述放射性药物还含有能够稳定放射性药物的第一辅助配体和 第二辅助配体。
[15]在另一个更优选的实施方案中，放射性同位素是99mTc。
[16]在另一个优选的实施方案中，放射性药物选自：
99mTc(tricine)(TPPTS)(环(Arg-Gly-Asp-D-Tyr(N-[[5-[羰 基]-2-吡啶基]二氮烯基(二氮烯基)]-3-氨基丙基)-Val))；
99mTc(tricine)(TPPMS)(环(Arg-D-Val-D-Tyr(N-[[5-[羰基]- 2-吡啶基]二氮烯基]-3-氨基丙基)-D-Asp-Gly))；
99mTc(tricine)(TPPDS)(环(Arg-D-Val-D-Tyr(N-[[5-[羰基]- 2-吡啶基]二氮烯基]-3-氨基丙基)-D-Asp-Gly))；
99mTc(tricine)(TPPTS)(环(Arg-D-Val-D-Tyr(N-[[5-[羰基]- 2-吡啶基]二氮烯基]-3-氨基丙基)-D-Asp-Gly))；
99mTc(tricine)(TPPTS)(环(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys(N-[[5- [羰基]-2-吡啶基]二氮烯基])))：
99mTc(tricine)(TPPTS)(环(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Lys(N-[[5- [羰基]-2-吡啶基]二氮烯基])))；
99mTc(tricine)(TPPTS)([2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚肼基]甲 基]-苯磺酸]-Phe-Glu(环{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe})-环{Lys-Arg- Gly-Asp-D-Phe})；
99mTc(tricine)(TPPTS)(环{Arg-Gly-Asp-D-Nal-Lys([2-[[[5- [羰基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸])})；
99mTc(tricine)(TPPTS)([2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基]-亚肼基]甲 基]-苯磺酸]-Glu(环{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Nal})-环{Lys-Arg-Gly- Asp-D-Nal})；
99mTc(tricine)(TPPTS)(环(Arg-Gly-Asp-D-Tyr((N-[[5-[羰 基]-2-吡啶基]二氮烯基]-18-氨基-14-氮杂-4，7，10-氧基-15-氧代 -十八烷酰基)-3-氨基丙基)-Val))；
99mTc(tricine)(TPPTS)(N-[[5-[羰基]-2-吡啶基]二氮烯基]- Glu(O-环(Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe))-O-环(Lys-Arg-Gly-Asp-D- Phe))；
99mTc(tricine)(TPPTS)(N-[[5-[羰基]-2-吡啶基]二氮烯基]- Glu(O-环(D-Tyr(3-氨基丙基)-Val-Arg-Gly-Asp))-O-环(D-Tyr(3- 氨基丙基)-Val-Arg-Gly-Asp))；
99mTc(tricine)(TPPTS)(环(Arg-Gly-Asp-Lys(N-[[5-[羰基]- 2-吡啶基]二氮烯基])-D-Val))；
99mTc(tricine)(TPPTS)(环{D-Lys([2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基] 亚肼基]甲基]-苯磺酸])-D-Phe-D-Asp-Gly-Arg})；
99mTc(tricine)(TPPTS)([2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚肼基]甲 基]-苯磺酸]-Glu(环{D-Lys-D-Phe-D-Asp-Gly-Arg})-环{D-Lys-D- Phe-D-Asp-Gly-Arg})；
99mTc(tricine)(TPPTS)(环{D-Phe-D-Lys([2-[[[5-[羰基]-2- 吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸])-D-Asp-Gly-Arg})；
99mTc(tricine)(TPPTS)(环(N-Me-Arg-Gly-Asp-ATA-D-Lys(N- [[5-[羰基]-2-吡啶基]二氮烯基])))；
99mTc(tricine)(TPPTS)(环{Cit-Gly-Asp-D-Phe-Lys([2-[[[5- [羰基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸])})；和
99mTc(tricine)(1，2，4-三唑)(环(Arg-Gly-Asp-D-Tyr(N-[[5- [羰基]-2-吡啶基]二氮烯基]-3-氨基丙基)-Val))。
[17]在另一个更优选的实施方案中，放射性同位素是111In。
[18]在另一个更优选的实施方案中，放射性药物选自：
(DOTA-111In)-Glu(环{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe})-环{Lys-Arg- Gly-Asp-D-Phe}；
环(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys(DTPA-111In))；和
环(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys)2(DTPA-111In)。
[19]在另一个优选的实施方案中，金属药物是治疗用放射性药 物，所述金属是选自
                  186Re，188Re，153Sm，166Ho，177Lu，149Pm， 90Y，212Bi，103Pd，109Pd，159Gd，140La，198Au，199Au，169Yb， 175Yb，165Dy，166Dy，67Cu，105Rh，111Ag，和192Ir
的放射性同位素，导向部分是肽或其模拟物，受体选自：EGFR、 FGFR、PDGFR、Flk-1/KDR、Flt-1、Tek、Tie、neuropilin-1、endoglin、 内皮唾液酸蛋白、Axl、αvβ3、αvβ5、α5β1、α4β1、α1β1和α2β2并且在 导向部分和螯合剂之间存在连接基团。
[20]在另一个更优选的实施方案中，导向部分是环状五肽，受 体是αvβ3。
[21]在另一个更优选的实施方案中，放射性同位素是153Sm。
[22]在另一个更优选的实施方案中，放射性药物选自：
环(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys(DTPA-153Sm))；
环(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys)2(DTPA-153Sm)；和
环(Arg-Gly-Asp-D-Tyr(N-DTPA(153Sm)-3-氨基丙基)-Val)。
[23]在另一个更优选的实施方案中，放射性同位素是177Lu。
[24]在另一个更优选的实施方案中，放射性药物选自：
环(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys(DTPA-177Lu))；
(DOTA-177Lu)-Glu(环{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe})-环{Lys-Arg- Gly-Asp-D-Phe}；
环(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys)2(DTPA-177Lu)；和
环(Arg-Gly-Asp-D-Tyr(N-DTPA(177Lu)-3-氨基丙基)-Val)。
[25]在另一个更优选的实施方案中，放射性同位素是90Y。
[26]在另一个更优选的实施方案中，放射性药物是：
(DOTA-90y)-Glu(环{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe})-环{Lys-Arg- Gly-Asp-D-Phe}。
[27]在另一个更优选的实施方案中，金属药物是MRI造影剂， 所述金属是选自Gd(Ⅲ)、Dy(Ⅲ)、Fe(Ⅲ)和Mn(Ⅱ)的顺磁金属 离子，导向部分是肽或其模拟物，受体选自：EGFR、FGFR、PDGFR、 Flk-1/KDR、Flt-1、Tek、Tie、neuropilin-1、endoglin、内皮唾 液酸蛋白、Axl、αvβ3、αvβ5、α5β1、α4β1、α1β1和α2β2并且在导向部 分和螯合剂之间存在连接基团。
[28]在另一个更优选的实施方案中，导向部分是环状五肽，受 体是αvβ3。
[29]在另一个更优选的实施方案中，金属离子是Gd(Ⅲ)。
[30]在另一个更优选的实施方案中，造影剂是：
环(Arg-Gly-Asp-D-Tyr(N-DTPA(Gd(Ⅲ))-3-氨基丙基)- Val)。
[31]在另一个更优选的实施方案中，金属药物是X-射线造影 剂，所述金属选自Re、Sm、Ho、Lu、Pm、Y、Bi、Pd、Gd、La、Au、 Yb、Dy、Cu、Rh、Ag和Ir，导向部分是环状五肽，受体是αvβ3，并 且在导向部分和螯合剂之间存在连接基团。
[32]在另一个更优选的实施方案中，本发明提供在患者中治疗 类风湿性关节炎的新方法，该方法包括：通过注射或输注向患者施用 能够定位于新血管生成脉管系统内的本发明治疗用放射性药物。
[33]在另一个更优选的实施方案中，本发明提供在患者中治疗 癌症的新方法，该方法包括：通过注射或输注向需要治疗的患者施用 本发明的治疗用放射性药物。
[34]在另一个更优选的实施方案中，本发明提供在患者中对新 血管生成进行成像的新方法，该方法包括：(1)通过注射或输注向患 者施用本发明的诊断用放射性药物、MRI造影剂或X-射线造影剂；(2) 在新血管生成所在的区域对患者成像。
[35]在另一个更优选的实施方案中，本发明提供在患者中对癌 症成像的新方法，该方法包括：(1)通过注射或输注向患者施用本发 明的诊断用放射性药物；(2)用平面或SPECTγ闪烁照相术或正电子发 射X线断层摄影术对患者成像。
[36]在另一个更优选的实施方案中，本发明提供在患者中对癌 症成像的新方法，该方法包括：(1)施用本发明的MRI造影剂；(2) 用磁共振成像对患者成像。
[37]在另一个更优选的实施方案中，本发明提供在患者中对癌 症成像的新方法，该方法包括：(1)施用本发明的X-射线造影剂；(2) 用计算机控制的X-射线断层摄影术对患者成像。
[38]在第三个实施方案中，本发明提供能够用于超声造影剂组 合物的新化合物，该化合物含有导向部分和表面活性剂，其中的导向 部分与表面活性剂相结合，所述导向部分是肽或肽模拟物并且可与在 血管生成过程中增量调节的受体相结合，并且所述化合物在导向部分 和表面活性剂之间有0-1个连接基团。
[39]在一个优选的实施方案中，导向部分是肽或其模拟物，受 体选自：EGFR、FGFR、PDGFR、Flk-1/KDR、Flt-1、Tek、Tie、 neuropilin-1、endoglin、内皮唾液酸蛋白、Ax1、αvβ3、αvβ5、α5β1、 α4β1、α1β1和α2β2并且在导向部分和表面活性剂之间存在连接基团。
[40]在一个更优选的实施方案中，受体是整联蛋白αvβ3，所述化 合物是下式的化合物：
(Q)d-Ln-Sf
其中，Q是环状五肽并且彼此独立地选自：
K是L-氨基酸，并且在每次出现时彼此独立地选自：精氨酸、瓜 氨酸、N-甲基精氨酸、赖氨酸、高赖氨酸、2-氨基乙基半胱氨酸、δ-N-2- 咪唑啉基鸟氨酸、δ-N-苄基氨基甲酰基鸟氨酸和β-2-苯并咪唑基乙酰 基-1，2-二氨基丙酸；
K’是D-氨基酸，并且在每次出现时彼此独立地选自：精氨酸、瓜 氨酸、N-甲基精氨酸，-赖氨酸、高赖氨酸、2-氨基乙基半胱氨酸、 δ-N-2-咪唑啉基鸟氨酸、δ-N-苄基氨基甲酰基鸟氨酸和β-2-苯并咪唑 基乙酰基-1，2-二氨基丙酸；
L在每次出现时彼此独立地选自：甘氨酸、L-丙氨酸和D-丙氨酸；
M是L-天冬氨酸；
M’是D-天冬氨酸；
R1是被0-1个与Ln连接的键取代的氨基酸，并且在每次出现时彼 此独立地选自：甘氨酸、L-缬氨酸、D-缬氨酸、丙氨酸、亮氨酸、异 亮氨酸、正亮氨酸、2-氨基丁酸、2-氨基己酸、酪氨酸、苯丙氨酸、 噻吩基丙氨酸、苯基甘氨酸、环己基丙氨酸、高苯丙氨酸、1-萘基丙 氨酸、赖氨酸、丝氨酸、鸟氨酸、1，2-二氨基丁酸、1，2-二氨基丙酸、 半胱氨酸、青霉胺和蛋氨酸；
R2是被0-1个与Ln连接的键取代的氨基酸，并且在每次出现时彼 此独立地选自：甘氨酸、缬氨酸、丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、正亮 氨酸、2-氨基丁酸、2-氨基己酸、酪氨酸、L-苯丙氨酸、D-苯丙氨酸、 噻吩基丙氨酸、苯基甘氨酸、苯基甘氨酸、环己基丙氨酸、高苯丙 氨酸、L-1-萘基丙氨酸、D-1-萘基丙氨酸、赖氨酸、丝氨酸、鸟氨酸、 1，2-二氨基丁酸、1，2-二氨基丙酸、半胱氨酸、青霉胺、蛋氨酸和2- 氨基噻唑-4-乙酸；
R3是被0-1个与Ln连接的键取代的氨基酸，并且在每次出现时彼 此独立地选自：甘氨酸、D-缬氨酸、D-丙氨酸、D-亮氨酸、D-异亮氨 酸、D-正亮氨酸、D-2-氨基丁酸、D-2-氨基己酸、D-酪氨酸、D-苯丙 氨酸、D-噻吩基丙氨酸、D-苯基甘氨酸、D-环己基丙氨酸、D-高苯丙 氨酸、D-1-萘基丙氨酸、D-赖氨酸、D-丝氨酸、D-鸟氨酸、D-1，2- 二氨基丁酸、D-1，2-二氨基丙酸、D-半胱氨酸、D-青霉胺、D-蛋氨酸；
R4是被0-1个与Ln连接的键取代的氨基酸，并且在每次出现时彼 此独立地选自：甘氨酸、D-缬氨酸、D-丙氨酸、D-亮氨酸、D-异亮氨 酸、D-正亮氨酸、D-2-氨基丁酸、D-2-氨基己酸、D-酪氨酸、D-苯丙 氨酸、D-噻吩基丙氨酸、D-苯基甘氨酸、D-环己基丙氨酸、D-高苯丙 氨酸、D-1-萘基丙氨酸、D-赖氨酸、D-丝氨酸、D-鸟氨酸、D-1，2- 二氨基丁酸、D-1，2-二氨基丙酸、D-半胱氨酸、D-青霉胺、D-蛋氨酸 和2-氨基噻唑-4-乙酸；
R5是被0-1个与Ln连接的键取代的氨基酸，并且在每次出现时彼 此独立地选自：甘氨酸、L-缬氨酸、L-丙氨酸、L-亮氨酸、L-异亮氨 酸、L-正亮氨酸、L-2-氨基丁酸、L-2-氨基己酸、L-酪氨酸、L-苯丙 氨酸、L-噻吩基丙氨酸、L-苯基甘氨酸、L-环己基丙氨酸、L-高苯丙 氨酸、L-1-萘基丙氨酸、L-赖氨酸、L-丝氨酸、L-鸟氨酸、L-1，2- 二氨基丁酸、L-1，2-二氨基丙酸、L-半胱氨酸、L-青霉胺、L-蛋氨酸 和2-氨基噻唑-4-乙酸；
条件是，各个Q中的R1、R2、R3、R4和R5之一被与Ln连接的键所 取代，进一步的条件是，当R2是2-氨基噻唑-4-乙酸时，K是N-甲基 精氨酸，进一步的条件是，当R4是2-氨基噻唑-4-乙酸时，K和K’是 N-甲基精氨酸，仍进一步条件是，当R5是2-氨基噻唑-4-乙酸时，K’ 是N-甲基精氨酸；
d选自1、2、3、4、5、6、7、8、9和10；
Sf是表面活性剂，其是类脂或下式的化合物：
A9选自：OH和OR27；
A10是OR27；
R27是C(=O)C1-20烷基；
E1是被1-3个R28取代的C1-10亚烷基；
R28在每次出现时彼此独立地选自：R30、-PO3H-R30、=O、-CO2R29、 -C(=O)R29、-C(=O)N(R29)2、-CH2OR29、-OR29、-N(R29)2、C1-C5烷基和 C2-C4链烯基；
R29在每次出现时彼此独立地选自：R30、H、C1-C6烷基、苯基、苄 基和三氟甲基；
R30是与Ln连接的键；
Ln是下式的连接基团： (CR6R7)g-(W)h-(CR6aR7a)g′-(Z)k-(W)h′-(CR8R9)g″-(W)h″-(CR8aR9a)g″ W在每次出现时彼此独立地选自： O，S，NH，NHC(=O)，C(=O)NH，C(=O)，C(=O)O，OC(=O)， NHC(=S)NH，NHC(=O)NH，SO2，(OCH2CH2)20-200，(CH2CH2O)20-200，(OCH2CH2CH2)20-200，(CH2CH2CH2O)20-200，和(aa)t′；
aa在每次出现时彼此独立地选自氨基酸；
Z选自：被0-3个R10取代的芳基、被0-3个R10取代的C3-10环烷 基和被0-3个R10取代的含有1-4个彼此独立地选自N、S和O的杂原 子的5-10元杂环环系；
R6、R6a、R7、R7a、R8、R8a、R9和R9a在每次出现时彼此独立地选自： H、=O、COOH、SO3H、PO3H、被0-3个R10取代的C1-C5烷基、被0-3 个R10取代的芳基、被0-3个R10取代的苄基和被0-3个R10取代的C1-C5 烷氧基、NHC(=O)R11、C(=O)NHR11、NHC(=O)NHR11、NHR11、R11和与Sf 连接的键；
R10在每次出现时彼此独立地选自：与Sf连接的键、COOR11、OH、 NHR11、SO3H、PO3H、被0-3个R11取代的芳基、被0-1个R12取代的C1-C5 烷基、被0-1个R12取代的C1-C5烷氧基和被0-3个R11取代的含有1- 4个彼此独立地选自N、S和O的杂原子的5-10元杂环环系；
R11在每次出现时彼此独立地选自：H、被0-1个R12取代的芳基、 被0-1个R12取代的含有1-4个彼此独立地选自N、S和O的杂原子的 5-10元杂环环系、被0-1个R12取代的C3-10环烷基、被0-1个R12取代 的氨基酸、与Sf连接的键；
R12是与Sf连接的键；
k选自0、1和2；
h选自0、1和2；
h’选自0、1、2、3、4和5；
h″选自0、1、2、3、4和5；
g选自0、1、2、3、4、5、6、7、8、9和10；
g’选自0、1、2、3、4、5、6、7、8、9和10；
g″选自0、1、2、3、4、5、6、7、8、9和10；
g″’选自0、1、2、3、4、5、6、7、8、9和10；
t’选自0、1、2、3、4、5、6、7、8、9和10；
及其可药用盐。
[41]在另一个更优选的实施方案中，所述化合物是下式化合物：
Q-Ln-Sf
其中，Q是环状五肽并且彼此独立地选自：
K是L-氨基酸，并且在每次出现时彼此独立地选自：精氨酸、瓜 氨酸、N-甲基精氨酸、赖氨酸、高赖氨酸、2-氨基乙基半胱氨酸、δ-N-2- 咪唑啉基鸟氨酸、δ-N-苄基氨基甲酰基鸟氨酸和β-2-苯并咪唑基乙酰 基-1，2-二氨基丙酸；
K’是D-氨基酸，并且在每次出现时彼此独立地选自：精氨酸、瓜 氨酸、N-甲基精氨酸，-赖氨酸、高赖氨酸、2-氨基乙基半胱氨酸、 δ-N-2-咪唑啉基鸟氨酸、δ-N-苄基氨基甲酰基鸟氨酸和β-2-苯并咪唑 基乙酰基-1，2-二氨基丙酸；
L在每次出现时彼此独立地选自：甘氨酸、L-丙氨酸和D-丙氨酸；
M是L-天冬氨酸；
M’是D-天冬氨酸；
R1是被0-1个与Ln连接的键取代的氨基酸，并且在每次出现时彼 此独立地选自：甘氨酸、L-缬氨酸、D-缬氨酸、丙氨酸、亮氨酸、异 亮氨酸、正亮氨酸、2-氨基丁酸、2-氨基己酸、酪氨酸、苯丙氨酸、 噻吩基丙氨酸、苯基甘氨酸、环己基丙氨酸、高苯丙氨酸、1-萘基丙 氨酸、赖氨酸、丝氨酸、鸟氨酸、1，2-二氨基丁酸、1，2-二氨基丙酸、 半胱氨酸、青霉胺和蛋氨酸；
R2是被0-1个与Ln连接的键取代的氨基酸，并且在每次出现时彼 此独立地选自：甘氨酸、缬氨酸、丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、正亮 氨酸、2-氨基丁酸、2-氨基己酸、酪氨酸、L-苯丙氨酸、D-苯丙氨酸、 噻吩基丙氨酸、苯基甘氨酸、联苯基甘氨酸、环己基丙氨酸、高苯丙 氨酸、L-1-萘基丙氨酸、D-1-萘基丙氨酸、赖氨酸、丝氨酸、鸟氨酸、 1，2-二氨基丁酸、1，2-二氨基丙酸、半胱氨酸、青霉胺、蛋氨酸和2- 氨基噻唑-4-乙酸；
R3是被O-1个与Ln连接的键取代的氨基酸，并且在每次出现时彼 此独立地选自：甘氨酸、D-缬氨酸、D-丙氨酸、D-亮氨酸、D-异亮氨 酸、D-正亮氨酸、D-2-氨基丁酸、D-2-氨基己酸、D-酪氨酸、D-苯丙 氨酸、D-噻吩基丙氨酸、D-苯基甘氨酸、D-环己基丙氨酸、D-高苯丙 氨酸、D-1-萘基丙氨酸、D-赖氨酸、D-丝氨酸、D-鸟氨酸、D-1，2- 二氨基丁酸、D-1，2-二氨基丙酸、D-半胱氨酸、D-青霉胺、D-蛋氨酸；
R4是被O-1个与Ln连接的键取代的氨基酸，并且在每次出现时彼 此独立地选自：甘氨酸、D-缬氨酸、D-丙氨酸、D-亮氨酸、D-异亮氨 酸、D-正亮氨酸、D-2-氨基丁酸、D-2-氨基己酸、D-酪氨酸、D-苯丙 氨酸、D-噻吩基丙氨酸、D-苯基甘氨酸、D-环己基丙氨酸、D-高苯丙 氨酸、D-1-萘基丙氨酸、D-赖氨酸、D-丝氨酸、D-鸟氨酸、D-1，2- 二氨基丁酸、D-1，2-二氨基丙酸、D-半胱氨酸、D-青霉胺、D-蛋氨酸 和2-氨基噻唑-4-乙酸；
R5是被0-1个与Ln连接的键取代的氨基酸，并且在每次出现时彼 此独立地选自：甘氨酸、L-缬氨酸、L-丙氨酸、L-亮氨酸、L-异亮氨 酸、L-正亮氨酸、L-2-氨基丁酸、L-2-氨基己酸、L-酪氨酸、L-苯丙 氨酸、L-噻吩基丙氨酸、L-苯基甘氨酸、L-环己基丙氨酸、L-高苯丙 氨酸、L-1-萘基丙氨酸、L-赖氨酸、L-丝氨酸、L-鸟氨酸、L-1，2- 二氨基丁酸、L-1，2-二氨基丙酸、L-半胱氨酸、L-青霉胺、L-蛋氨酸 和2-氨基噻唑-4-乙酸；
条件是，各个Q中的R1、R2、R3、R4和R5之一被与Ln连接的键所 取代，进一步的条件是，当R2是2-氨基噻唑-4-乙酸时，K是N-甲基 精氨酸，进一步的条件是，当R4是2-氨基噻唑-4-乙酸时，K和K’是 N-甲基精氨酸，仍进一步条件是，当R5是2-氨基噻唑-4-乙酸时，K’ 是N-甲基精氨酸；
Sf是表面活性剂，其是类脂或下式的化合物：
A9是OR27；
A10是OR27；
R27是C(=O)C1-15烷基；
E1是被1-3个R28取代的C1-4亚烷基；
R28在每次出现时彼此独立地选自：R30、-PO3H-R30、=O、-CO2R29、 -C(=O)R29、-CH2OR29、-OR29和C1-C5烷基；
R29在每次出现时彼此独立地选自：R30、H、C1-C6烷基、苯基和苄 基；
R30是与Ln连接的键；
Ln是下式的连接基团： (CR6R7)g-(W)h-(CR6aR7a)g′-(Z)k-(W)h′-(CR8R9)g″-(W)h″-(CR8aR9a)g＇″ W在每次出现时彼此独立地选自： O，S，NH，NHC(=O)，C(=O)NH，C(=O)，C(=O)O，OC(=O)， NHC(=S)NH，NHC(=O)NH，SO2，(OCH2CH2)20-200， (CH2CH2O)20-200，(OCH2CH2CH2)20-200，(CH2CH2CH2O)20-200，和 (aa)t′；
aa在每次出现时彼此独立地选自氨基酸；
Z选自：被0-3个R10取代的芳基、被0-3个R10取代的C3-10环烷 基和被0-3个R10取代的含有1-4个彼此独立地选自N、S和O的杂原 子的5-10元杂环环系；
R6、R6a、R7、R7a、R8、R8a、R9和R9a在每次出现时彼此独立地选自： H、=O、被0-3个R10取代的C1-C5烷基、被0-3个R10取代的C1-C5烷 氧基和与Sf连接的键；
R10在每次出现时彼此独立地选自：与Sf连接的键、COOR11、OH、 NHR11、被0-1个R12取代的C1-C5烷基和被0-1个R12取代的C1-C5烷氧 基；
R11在每次出现时彼此独立地选自：H、被0-1个R12取代的芳基、 被0-1个R12取代的C3-10环烷基、被0-1个R12取代的氨基酸、与Sf 连接的键；
R12是与Sf连接的键；
k选自0、1和2；
h选自0、1和2；
h’选自0、1、2、3、4和5；
h″选自0、1、2、3、4和5；
g选自0、1、2、3、4和5；
g’选自0、1、2、3、4和5；
g″选自0、1、2、3、4和5；
g″’选自0、1、2、3、4和5；
s选自0、1、2、3、4和5；
s’选自0、1、2、3、4和5；
s″选自0、1、2、3、4和5；
t选自0、1、2、3、4和5；
t’选自0、1、2、3、4和5；
及其可药用盐。
[42]在另一个更优选的实施方案中，本发明提供选自如下的化 合物：
1-(1，2-二棕榈酰基-sn-甘油基-3-磷酸乙醇氨基)-12-(环(Arg- Gly-Asp-D-Phe-Lys)-十二烷-1，12-二酮；
1-(1，2-二棕榈酰基-Sn-甘油基-3-磷酸乙醇氨基)-12-((ω-氨 基-PEG3400-α-羰基)-环(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys))-十二烷-1，12-二 酮；和
1-(1，2-二棕榈酰基-sn-甘油基-3-磷酸乙醇氨基)-12-((ω-氨 基-PEG3400-α-羰基)-Glu-(环(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys))2)-十二烷- 1，12-二酮。
[43]在另一个更优选的实施方案中，本发明提供新的超声造影 剂组合物，该组合物含有：
(a)化合物，该化合物含有：与整联蛋白αvβ3结合的环状五肽、 表面活性剂以及环状五肽与表面活性剂之间的连接基团；
(b)胃肠外应用可接受的载体；和
(c)发生回波的(echogenic)气体。
[44]在另一个更优选的实施方案中，超声造影剂还含有1，2-二棕 榈酰基-sn-甘油基-3-磷脂酸、1，2-二棕榈酰基-sn-甘油基-3-磷脂酰 胆碱和N-(甲氧基聚乙二醇5000氨基甲酰基)-1，2-二棕榈酰基-sn- 甘油基-3-磷脂酰乙醇胺。
[45]在另一个优选的实施方案中，发生回波的气体是C2-5全氟化 碳。
[46]在另一个更优选的实施方案中，本发明提供在患者中对癌 症成像的方法，该方法包括：(1)通过注射或输注向患者施用本发明 的超声造影剂组合物；(2)用超声描计术对患者成像。
[47]在另一个更优选的实施方案中，本发明提供在患者中对新 血管生成进行成像的新方法，该方法包括：(1)通过注射或输注向患 者施用本发明的超声造影剂组合物；(2)在新血管生成所在的区域对 患者成像。
[48]在另一个更优选的实施方案中，本发明提供新的治疗用放 射性药物组合物，该组合物含有：
(a)本发明的治疗用放射性药物；和
(b)胃肠外应用可接受的载体。
[49]在另一个更优选的实施方案中，本发明提供新的诊断用放 射性药物组合物，该组合物含有：
(a)本发明的诊断用放射性药物，MRI造影剂或X-射线造影剂； 和
(b)胃肠外应用可接受的载体。
[50]在另一个更优选的实施方案中，本发明提供新的治疗用放 射性药物组合物，该组合物含有放射标记的导向部分，其中的导向部 分是化合物Q，放射性标记是选自35S、32P、125I、131I和211At的治疗 用同位素。
[51]在另一个优选的实施方案中，本发明提供新的治疗用放射 性药物组合物，该组合物含有放射标记的导向部分，其中的导向部分 是化合物Q，放射性标记是治疗用同位素131I。
本发明的另一个实施方案是用于制备放射性药物的诊断试剂 盒，所述放射性药物可以用作癌症造影剂或用作新血管形成成像的造 影剂。本发明的诊断试剂盒包含一个或多个含有无菌、无热源的制剂 的小瓶，所述制剂含有预定量的本发明的试剂以及选择性的其它成 分，例如一种或两种辅助配体、还原剂、转移配体、缓冲剂、冷冻干 燥助剂、稳定助剂、助溶剂和抑菌剂。在制剂中含有一种或多种选择 性成分通常可以使最终用户能够更容易地合成放射性药物、使试剂盒 更容易生产、改善试剂盒的存放时间或放射性药物的稳定性和存放时 间。对于含有带有肼或腙结合部分的试剂的诊断试剂盒，必需含有一 种或两种辅助配体。含有全部或部分制剂的一个或多个小瓶可以彼此 独立地是无菌溶液或冻干固体的形式。
定义
本文所述的化合物可以带有不对称中心。若无另外说明，本发明 包括所有的手性、非对映体和外消旋形式。在本文所述的化合物中， 还可以存在多种烯烃、C=N双键等的几何异构体，所有这些稳定的异 构体均在本发明的范围内。应当理解，本发明的化合物含有不对称取 代的碳原子，并且可以以光学活性或外消旋的形式分离得到。如何制 备光学活性的形式是本领域已知的，例如，通过拆分外消旋形式或从 光学活性的原料进行合成。已知肽键存在两种不同的异构体(顺和 反)；这两种异构体均可以存在于本文所述的化合物中，所有这些稳 定的异构体均包括在本发明的范围内。具体氨基酸的D和L-异构体在 文中用常规的氨基酸3字母缩写来表示，例如D-Leu或L-Leu。
当任何变量在任何取代基或任何结构式中出现一次以上时，其在 每次出现时的定义均是彼此独立的。例如，当基团被描述为可被0-2 个R52取代时，则所述基团可以选择性地被最多2个R52所取代，而R52 在每次出现时均彼此独立地选自可能的R52的定义列表。再例如，当 对于基团-N(R53)2，N上的两个R53均彼此独立地选自可能的R53的定义 列表。只有当取代基和/或变量的组合可以产生稳定的化合物时，这 种组合才是允许的。当与取代基连接的键与环上两个原子之间的键相 交叉时，则所述取代基可以与环上的任何原子连接。
“试剂”是指能够直接转变成本发明的金属药物的本发明化合 物。试剂可以直接用于制备本发明的金属药物或者可以作为本发明试 剂盒中的成分。
术语“结合剂”是指对玻连蛋白具有亲和性并可与其结合的本发 明的金属药物。本发明的结合剂优选其Ki＜1000nM。
本文所用的金属药物是指含有金属的可药用化合物，其中，所述 化合物可以用于成像、磁共振成像、造影剂成像或X-射线成像。金属 可以诊断应用中产生可成像的信号并且在放射治疗应用中作为细胞 毒性辐射的来源。放射性药物是其中的金属是放射性同位素的金属药 物。
“稳定的化合物”或“稳定的结构”是指具有足够的稳定性从而 能够以可应用的纯度从反应混合物中分离并且配制成有效药物的化 合物。
本文所用术语“取代的”是指，指定原子或基团上的一个或多个 氢被选自指定组的基团所代替，条件是，不超过指定原子或基团的正 常价键并且取代可以产生稳定的化合物。当取代基是酮基(即，=O) 时，则原子上的两个氢被取代。
本文所用术语“键”是指单键或双键。
本文所用术语“盐”如CRC化学或物理学手册(CRC Handbook of Chemistry and Physics)，65版，CRC Press，Boca Raton，Fla，1984 所定义，是指可以产生除氢或氢氧根离子之外的其它离子的任何物 质。本文所用术语“可药用盐”是指通过制备酸或碱盐进行修饰的所 公开化合物的衍生物。可药用盐的例子包括但不仅限于，碱性残基如 胺的无机酸或有机酸盐；酸性残基如羧酸的碱或有机盐等。
本文所用的短语“可药用的”是指化合物、物质、组合物和/或 剂量形式，在合理的医学判断范围内适用于同人类和动物的组织相接 触而不会产生过度的毒性、刺激、过敏反应或其它问题或并发症，并 且具有合理的益处/危险性比。
本文所用的“可药用盐”是指所公开化合物的衍生物，其中，通 过制备酸或碱盐对母体化合物进行了修饰。可药用盐的例子包括但不 仅限于，碱性残基如胺的无机酸或有机酸盐；酸性残基如羧酸的碱或 有机盐等。可药用盐包括母体化合物与例如无毒的无机酸或有机酸形 成的常规的无毒盐或季铵盐。例如，所述常规的无毒盐包括从无机酸 如盐酸、氢溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸、硝酸等衍生的盐；以及从 有机酸如乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、酒石酸、柠 檬酸、抗坏血酸、扑酸、马来酸、羟基马来酸、苯乙酸、谷氨酸、苯 甲酸、水杨酸、对氨基苯磺酸、2-乙酰氧基苯甲酸、富马酸、甲苯磺 酸、甲磺酸、乙磺酸、草酸、羟乙基磺酸等制备的盐。
本发明的可药用盐可以从含有碱性或酸性部分的母体化合物通 过常规的化学方法合成。通常，所述的盐可以通过将这些化合物的游 离酸或游离碱形式与化学计量量的适宜碱或酸在水或有机溶剂或二 者的混合物中反应制得；通常优选非水溶媒如乙醚、乙酸乙酯、乙醇、 异丙醇或乙腈。适宜的盐的目录可以参见Remington’s Pharmaceutical Sciences，17版，Mack Publishing Company， Easton，PA，1985，1418页，其公开的内容引入本文作为参考。
本文所用的“烷基”包括含有指定碳原子数的直链和支链饱和脂 肪族烃基。C1-10烷基包括C1、C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8、C9和C10烷 基。烷基的例子包括但不仅限于，甲基、乙基、正丙基、异丙基、正 丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基和仲戊基。“卤代烷基”包括被一个 或多个卤素取代的含有指定碳原子数的直链和支链饱和脂肪族烃基 (例如CvFw，其中v=1至3，w=1至(2v+1))。卤代烷基的例子包 括但不仅限于，三氟甲基、三氯甲基、五氟乙基和五氯乙基。“烷氧 基”表示通过氧桥连接的含有给定碳原子数的以上所定义的烷基。C1-10 烷氧基包括C1、C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8、C9和C10烷氧基。烷氧基 的例子包括但不仅限于，甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正 丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基和仲戊氧基。“环烷基”包 括饱和的环状基团，例如环丙基、环丁基或环戊基。C3-7环烷基包括 C3、C4、C5、C6和C7环烷基。“链烯基”包括直链或支链构型并且在 链上任何稳定的点可以出现一个或多个不饱和碳-碳键的烃链，例如 乙烯基和丙烯基。C2-10链烯基包括C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8、C9和 C10链烯基。“链炔基”包括直链或支链构型并且在链上任何稳定的点 可以出现一个或多个碳-碳叁键的烃链，例如乙炔基和丙炔基。C2-10 链炔基包括C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8、C9和C10链炔基。
本文所用的“碳环”或“碳环残基”包括各种稳定的3、4、5、6 或7-元的单环或二环，或7、8、9、10、11、12或13-元的二环或三 环，所述的环均可以是饱和的、部分不饱和的或芳香性的。所述碳环 的例子包括但不仅限于，环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、 金刚烷基、环辛基、[3.3.0]二环辛烷、[4.3.0]二环壬烷、[4.4.0] 二环癸烷、[2.2.2]二环辛烷、芴基、苯基、萘基、二氢化茚基、金 刚烷基和四氢萘基。
本文所用术语“烷芳基”是指带有1、2、3、4、5、6、7、8、9 或10个碳原子的烷基的芳基；术语“芳烷基”是指带有芳基的1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10个碳原子的烷基；术语“芳烷基芳基”是 指带有带有芳基的1-10个碳原子的烷基的芳基；术语“杂环烷基” 是指带有杂环的1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个碳原子的烷基。
本文所用术语“杂环”或“杂环系统”是指稳定的5、6或7-元 单环或二环或7、8、9或10-元二环杂环，所述杂环可以是饱和的、 部分不饱和的或不饱和的(芳香性的)，并且由碳原子和1、2、3或4 个彼此独立地选自N、NH、O和S的杂原子组成，其中包括由以上定 义的杂环与苯环稠合形成的各种二环基团。氮和硫杂原子可以选择性 地被氧化。杂环可以在任何能够形成稳定结构的杂原子或碳原子上与 其侧基相连接。本文所述的杂环可以在碳或氮原子上被取代，如果形 成的化合物稳定的话。杂环中的氮可以被选择性地季铵化。当杂环中 S和O原子的总数超过1时，优选这些杂原子不彼此相邻。优选杂环 中S和O原子的总数不超过1。本文所用术语“芳香族杂环系统”或 “杂芳基”是指稳定的5、6或7元单环或二环或7、8、9或10-元二 环芳香族杂环，所述杂环由碳原子和1、2、3或4个彼此独立地选自 N、NH、O和S的杂原子组成。应当注意，芳香族杂环中S和O原子的 总数不超过1。
杂环的例子包括但不仅限于，吖啶基、吖辛因基、苯并咪唑基、 苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噻吩基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、 苯并噻唑基、苯并三唑基、苯并四唑基、苯并异噁唑基、苯并异噻唑 基、苯并咪唑啉基、咔唑基、4αH-咔唑基、咔啉基、苯并二氢吡喃基、 苯并吡喃基、噌啉基、十氢喹啉基、2H，6H-1，5，2-二噻嗪基、二氢呋 喃并[2,3-b]四氢呋喃、呋喃基、呋咱基、咪唑烷基、咪唑啉基、咪 唑基、1H-吲唑基、indolenyl、二氢吲哚基、吲嗪基、吲哚基、3H- 吲哚基、异苯并呋喃基、异苯并二氢吡喃基、异吲唑基、异二氢吲哚 基、异吲哚基、异喹啉基、异噻唑基、异噁唑基、亚甲基二氧基苯基、 吗啉基、萘啶基、八氢异喹啉基、噁二唑基、1，2，3-噁二唑基、1，2，4-噁 二唑基、1，2，5-噁二唑基、1，3，4-噁二唑基、噁唑烷基、噁唑基、噁 唑烷基、嘧啶基、菲啶基、菲咯啉基、吩嗪基、吩噻嗪基、 phenoxathiinyl、吩噁嗪基、二氮杂萘基、哌嗪基、吡啶基、哌啶酮 基、4-哌啶酮基、胡椒基、蝶啶基、嘌呤基、吡喃基、吡嗪基、吡唑 烷基、吡唑啉基、吡唑基、哒嗪基、吡啶并噁唑基、吡啶并咪唑基、 吡啶并噻唑基、吡啶基、嘧啶基、吡咯烷基、吡咯啉基、2H-吡咯基、 吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、4H-喹嗪、喹喔啉基、奎宁环基、四氢 呋喃基、四氢异喹啉基、四氢喹啉基、四唑基、6H-1，2，5-噻二嗪基、 l，2，3-噻二唑基、1，2，4-噻二唑基、1，2，5-噻二唑基、1，3，4-噻二唑 基、噻蒽、噻唑基、噻吩基、噻吩并噻唑基、噻吩并噁唑基、噻吩并 咪唑基、噻吩基、三嗪基、1，2，3-三唑基、1，2，4-三唑基、1，2，5- 三唑基、1，3，4-三唑基和夹氧蒽基。优选的杂环包括但不仅限于，吡 啶基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡唑基、吡咯烷基、咪唑基、吲哚 基、苯并咪唑基、1H-吲唑基、噁唑烷基、苯并三唑基、苯并异恶唑 基、oxindolyl、苯并噁唑啉基和靛红基(isatinoyl)。还包括含有上 述杂环的稠合环和螺环化合物。
“聚亚烷基二醇”是分子量小于约5000、以羟基或烷基醚部分为 末端的聚乙二醇、聚丙二醇或聚丁二醇。
“碳水化合物”是多羟基的醛、酮、醇或酸或其衍生物，包括它 们的含有乙缩醛型聚合键的聚合物。
“环糊精”是环状低聚糖。环糊精的例子包括但不仅限于，α-环 糊精、羟基乙基-α-环糊精、羟基丙基-α-环糊精、β-环糊精、羟基 丙基-β-环糊精、羧基甲基-β-环糊精、二羟基丙基-β-环糊精、羟基 乙基-β-环糊精、2，6-二-O-甲基-β-环糊精、硫酸化-β-环糊精、γ- 环糊精、羟基丙基-γ-环糊精、二羟基丙基-γ-环糊精、羟基乙基-γ- 环糊精和硫酸化-β-环糊精。
本文所用术语“多羧基烷基”是指含有2至约100个碳原子和多 个羧基取代基的烷基；术语“多氮杂烷基”是指含有2至约100个碳 原子、被多个氨基间断或取代的直链或支链烷基。
“还原剂”是指可以与放射性核素(通常为相对不活泼的、高氧 化态的化合物)反应，通过向放射性核素转移电子降低其氧化态而使 其更活泼的化合物。可用于制备放射性药物和用于制备所述放射性药 物的诊断试剂盒的还原剂包括但不仅限于，氯化亚锡、氟化亚锡、甲 脒亚磺酸、抗坏血酸、半胱氨酸、磷化氢、亚铜盐和亚铁盐。其它还 原剂记载于Brodack等，PCT申请94/22496，该文献引入本文作为参 考。
“转移配体”是与金属离子形成中间体配合物的配体，所述金属 离子足够稳定以防止不想要的副反应，但又足够活泼以被转变成金属 药物。中间体配合物的形成受动力学的控制，而金属药物的形成受热 动力学的控制。用于制备金属药物以及用于制备诊断用放射性药物的 诊断试剂盒的转移配体包括但不限于葡萄糖酸盐、葡萄庚糖酸盐、甘 露糖醇、葡糖二酸盐、N，N，N’，N’-乙二胺四乙酸、焦磷酸盐以及亚甲 基二膦酸盐。总之，转移配体由氧或氮供体原子组成。
术语“供体原子”指通过化学键直接与金属相连的原子。
“辅助配体”或“辅配体”是在放射性药物的合成过程中掺入到 放射性药物中的配体。他们的作用是将放射性核素与螯合剂或试剂的 放射性核素结合单位一起组成内配位层。对于由二元配体系统组成的 放射性药物，放射性核素内配位层由一种或多种螯合剂或者来自一种 或多种试剂的结合单位与一种或多种辅助或辅配体组成，只要总共有 两种配体、螯合剂或结合单位即可。例如，由一种螯合剂或来自一种 试剂的结合单位以及两个相同的辅助或辅配体组成的放射性药物和 由两种螯合剂或者来自一种或两种试剂的结合单位以及一种辅助或 辅配体组成的放射性药物均被认为是由二元配体系统组成的。对于由 四元配体组成的放射性药物，放射性核素内配位层由一种或多种螯合 剂或者来自一种或多种试剂的结合单位以及一种或多种两类不同辅 助或辅配体组成，只要总共有三类配体、螯合剂或结合单位即可。例 如，由一种螯合剂或来自一种试剂的结合单位以及两种不同辅助或辅 配体组成的放射性药物被认为是由四元配体系统组成的。
用于制备放射性药物以及用于制备所述放射性药物的诊断试剂 盒的辅助配体或辅配体由一个或多个氧、氮、碳、硫、磷、砷、硒及 碲供体原子组成。配体可以是在放射性药物合成过程中的转移配体并 可作为另一放射性药物的辅助配体或辅配体。一个配体是否称为转移 配体或辅助配体或辅配体取决于所述配体是否保留在放射性药物的 放射性核素内配位层，这是由放射性核素与螯合剂或者试剂的结合单 位的配位化学决定的。
“螯合剂”或“结合单位”是试剂上通过与一个或多个供体原子 形成化学键而与金属离子结合的部分或基团。
术语“结合位点”指体内或体外结合生物活性分子的位点。
“诊断试剂盒”或“试剂盒”包括在一个或多个小瓶中的组分的 集中(称为制剂)，这些组分用于由最终用户在临床或药剂学设备中合 成诊断用放射性药物。所述试剂盒提供除最终用户通常可得到的组分 (例如水或注射用盐水)之外的所有合成及使用诊断放射性药物所必 需的组分、放射性核素溶液、在合成放射性药物过程中用于加热试剂 盒的装置，如果需要，还包括给患者施用所述放射性药物所需的装 置，例如注射器和屏幕，以及成像装置。
将治疗用放射性药物、X射线造影剂药物、超声造影剂药物以及 用于核磁共振成像造影的金属药物以其在单个小瓶中所含的制剂的 最终形式，例如冻干固体或者水溶液提供给最终用户。最终用户将冻 干物用水或盐水重新构建，然后取患者剂量或者仅从水溶液制剂中取 所提供的剂量。
“冻干助剂”是对冻干的物理特性例如玻璃化温度有利的组分， 将所述助剂加到制剂中以改善用于冻干的制剂的所有组分的组合物 的物理特性。
“稳定助剂”是加到金属药物或者诊断试剂盒中以稳定所述金属 药物或者延长所述试剂盒在其必须使用前的保存期的组分。稳定助剂 是抗氧剂、还原剂或自由基清除剂并可通过优先与降解其他组分或金 属药物的物质反应来改善稳定性。
“溶解助剂”是改善一种或多种组分在制剂所需介质中的溶解度 的组分。
“制菌剂”是在制剂使用前的贮存过程中或者用诊断试剂盒合成 放射性药物后，抑制细菌在所述制剂中生长的组分。
文中所用术语“氨基酸”指含一个碱性氨基和一个酸性羧基的有 机化合物。该术语包括天然氨基酸(例如L氨基酸)、修饰的和不常见 氨基酸(例如D氨基酸)以及已知以游离或结合形式生物学存在的但通 常在蛋白质中没有的氨基酸。该术语包括修饰的和不常见氨基酸，例 如在例如Robert and Vellaccio(1983)The Peptides，5：342-429 中公开的那些(该文献的教导引入本文作为参考)。天然蛋白质中的氨 基酸包括但不限于丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、 谷氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、 甲硫氨酸、苯丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸、色氨酸、脯氨酸以 缬氨酸。天然非蛋白质氨基酸包括但不限于瓜氨酸、半胱亚磺酸、3，4- 二羟基苯丙氨酸、高半胱氨酸、高丝氨酸、鸟尿酸、3-碘酪氨酸、3，5- 二碘酪氨酸、3，5，5’-三碘酪氨酸和3，3’，5，5’-四碘酪氨酸。可用 于实施本发明的修饰的或不常见氨基酸包括但不限于D-氨基酸、羟基 赖氨酸、4-羟基脯氨酸、N-Cbz-保护的氨基酸，2，4-二氨基丁酸、高 精氨酸、正亮氨酸、N-甲基氨基酸丁酸、萘基丙氨酸、苯基甘氨酸、 β-苯基脯氨酸、四亮氨酸、4-氨基酸环己基丙氨酸、N-甲基-正亮氨 酸、3，4-二羟基脯氨酸、N，N-二甲基氨基甘氨酸、N-甲基氨基酸甘氨 酸、4-氨基哌啶-4-羧酸、6-氨基己酸、反-4-(氨基甲基)-环己烷羧 酸、2-、3-和4-(氨基甲基)-苯甲酸、1-氨基环戊烷羧酸、1-氨基环 丙烷羧酸和2-苄基-5-氨基酸戊酸。
文中所用术语“肽”指由通过肽键连接的两个或多个氨基酸(如 本文所定义的)组成的线性化合物。在本发明中所要求的“肽”指分 子量小于10，000道尔顿，优选小于5000道尔顿，最佳小于2500道 尔顿的部分。术语“肽”还包括含肽和非肽组分例如假肽或肽模拟物 残基或其他非氨基酸组分的化合物。含肽和非肽组分的所述化合物也 称为“肽类似物”。
“假肽”或“肽模拟物”是例如在肽模拟物和氨基酸残基间通过 使用酰胺键以外的连接基团(假肽键)和/或通过使用非氨基酸取代基 和/或修饰的氨基酸残基来模拟氨基酸残基或肽的结构的化合物。“假 肽残基”指在肽中存在的假肽或肽模拟物部分。
术语“肽键”指通过一个氨基酸的羧基与第二个氨基酸的氨基间 失去一个水分子形成的共价酰胺键。
术语“假肽键”包括用于代替正常酰胺键或者作为正常酰胺键的 代替物的肽键等排物。这些代替物或酰胺“等价”键是从模拟酰胺键 的空间必要条件并应使所述分子对酶促降解稳定的不常见于在肽或 蛋白质中的原子的组合形成的。
本文使用下列缩写： Acm                  乙酰氨基甲基 b-Ala，β-Ala或bAla  3-氨基丙酸 ATA                  2-氨基噻唑-5-乙酸或  2-氨基噻唑-
                 5-乙酰基 Boc                  叔丁氧羰基 CBZ，Cbz或Z          苄氧羰基 Cit                  瓜氨酸 Dap                  2，3-二氨基丙酸 DCC                  二环己基碳二亚胺 DIEA                 二异丙基乙胺 DMAP                 4-二甲基氨基吡啶 EOE                  乙氧基乙基 HBTU                 2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3，-
                 四甲基脲六氟磷酸盐 hynic                boc-肼基烟酰基(nicotinyl)或2-
                 [[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚肼基]甲
                 基]苯磺酸
NMeArg或MeArg      a-N-甲基精氨酸
NMeAsp             a-N-甲基天冬氨酸
NMM                N-甲基吗啉
OcHex              O-环己基
OBzl               O-苄基
oSu                O-琥珀酰亚氨基
TBTU               2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3，-
               四甲基脲四氟硼酸盐
THF                四氢呋喃基
THP                四氢吡喃基
Tosc               甲苯磺酰基
Tr                 三苯甲基
本文使用下列常规三字母氨基酸缩写；本文不使用常规的一个字 母的氨基酸缩写：
Ala=    丙氨酸
Arg=    精氨酸
Asn=    天冬酰胺
Asp=    天冬氨酸
Cys=    半胱氨酸
Gln=    谷氨酰胺
Glu=    谷氨酸
Gly=    甘氨酸
His=    组氨酸
Ile=    异亮氨酸
Leu=    亮氨酸
Lys=    赖氨酸
Met=    甲硫氨酸
Nle=    正亮氨酸
Orn=    鸟氨酸
Phe=    苯丙氨酸
Phg=    苯基甘氨酸
Pro=    脯氨酸
Sar=    肌氨酸
Ser=    丝氨酸
Thr=    苏氨酸
Trp=    色氨酸
Tyr=    酪氨酸
Val=    缬氨酸
本发明的药物含有受体的导向部分，该受体在血管生成的肿瘤维 管系统中表达或者上调。对于靶向VEGF受体、Flk-1/KDR、Flt-1和 neuropilin-1，所述导向部分由以高亲和性与受体结合的肽或肽模拟 物组成。例如已合成了由VEGF C-末端结构域的23个氨基酸组成的 肽，所述肽竞争性抑制VEGF与VEGFR的结合(Soker等，生物化学杂 志(J.Biol.Chem.)，1997，272，31582-8)。Cosic等(分子和细 胞生物化学(Mol.and Cell.Biochem.)，1994，130，1-9)描述了与 碱性FGF受体(bFGFR)结合的11-23个氨基酸残基的线性肽。优选的 bFGFR的线性肽拮抗剂是16个氨基酸肽，Met-Trp-Tyr-Arg-Pro- Asp-Leu-Asp-Glu-Arg-Lys-Gln-Gln-Lys-Arg-Glu。Gho等(癌症研 究(Cancer Research)，1997，57，3733-40)描述了以高亲和性与内 皮细胞表面血管生成素受体结合的小肽的鉴定。优选的肽是Ala- Gln-Leu-Ala-Gly-Glu-Cys-Arg-Glu-Asn-Val-Cys-Met-Gly-Ile- Glu-Gly-Arg，其中两个半胱氨酸残基形成分子内二硫键。Yayon等(美 国国家科学院院报(Proc.Natl.Acad.Sci，USA)，1993，90， 10643-7)描述了从随机噬菌体展示的肽文库鉴定的FGFR的其他线性 肽拮抗剂。对于抑制bFGF与其受体的结合来说，两个线性八肽Ala- Pro-Ser-Gly-His-Tyr-Lys-gly和Lys-Arg-Thr-Gly-Gln-Tyr-Lys- Leu是优选的。
在肿瘤维管系统中表达的整联蛋白的导向部分包括与αvβ3、 αvβ5、α5β0、α4β1、α1β1和α2β2结合的肽和肽模拟物。Pierschbacher 和Rouslahti(生物化学杂志(J.Biol.Chem.)，1987，262，17294-8) 描述了与α5β1和αvβ3选择性结合的肽。US 5536814描述了以高亲和性 与整联蛋白α5β1结合的肽。Burgess和Lim(药物化学杂志(J.Med. Chem.)，1996，39，4520-6)公开了以高亲和性与αvβ3结合的下列三 肽的合成：环[Arg-Gly-Asp-Arg-Gly-Asp]、环[Arg-Gly-Asp-Arg- gly-D-Asp]和线性肽Arg-Gly-Asp-Arg-Gly-Asp。US 5770565和US 5766591公开了以高亲和性与αvβ3结合的肽。US 5767071和US 5780426公开了带有环外Arg氨基酸的对αvβ3有高度亲和性的环肽。 Srivatsa等(Carduivascykar Res.，1997，36，408-28)描述了αvβ3 的环肽拮抗剂，环[Ala-Arg-Gly-Asp-Mamb]。Tran等(生物有机药物 化学通讯(Bioorg.Med.Chem.Lett.)，1997，7，997-1002)公开 了以高亲和性与αvβ3结合的环肽，环[Arg-GlyOAsp-Bal-Gly-Ser- BTD-Ser-Gly-Val-Ala]。Arap等(科学(Science)，1998，279， 377-80)描述了与αvβ3和αvβ5结合的环肽，Cys-Asp-Cys-Arg-Gly- Asp-Cys-Phe-Cys和环[Cys-Asn-Gly-asp-Cys]。Corbert等(生物有 机药物化学通讯(Biorg.Med.Chem.Lett.)，1997，7，1371-6) 描述了一系列αvβ3选择性肽模拟物。Haubner等(Angew.Chem.Int. Ed.Engl.，1997，36，1374-89)公开了从肽文库中得到的肽和肽模 拟物αvβ3拮抗剂。
本发明的导向部分优选与低于1000nM的整联蛋白αvβ3有结合亲 和性。更优选，本发明的导向部分优选与低于100nM的整联蛋白αvβ3 有结合亲和性。甚至更优选，本发明的导向部分优选与低于10nM的 整联蛋白αvβ3有结合亲和性。
本发明的超声造影剂含有与生物相容性气体、液体载体和表面活 性剂微球相连或者掺入生物相容性气体、液体载体和表面活性剂微球 中的多种血管生成肿瘤维管系统导向部分，在导向部分和微泡间还含 有可选择的连接部分，Ln。在本文中，术语液体载体指水溶液，术语 表面活性剂指溶液的界面张力减小的任何两亲物质。在EP 0727225A2 中公开了用于形成表面活性剂微球的适宜表面活性剂的目录，该文献 引入本文作为参考。术语表面活性剂微球包括纳米球、脂质体、泡等。 生物相容性气体可以是空气或者碳氟化合物，例如C3-C5全氟烷烃， 例如全氟丙烷、全氟丁烷或者全氟戊烷，可提供产生回波差并由此在 超声成像中造影。将所述气体包被或包含在所述微球中，所述微球， 任意地通过连接基团与生物导向(biodirecting)基团相连。所述连接 可以是共价的、离子的或通过范德华力。所述造影剂的具体实例包括 带有多种肿瘤新血管系统受体结合肽或肽模拟物的类脂包被的全氟 化碳。
文中所用Sf是类脂或如上定义的式A1-E-A2化合物的表面活性 剂。所述表面活性剂形成能够含产生回波气体的小泡(例如微球)。本 发明的超声造影剂组合物在搅拌(例如振荡，搅拌等……)后能够将产 生回波的气体包被在小泡中，操作方式应能使所得产物用作超声造影 剂。
“小泡”指以存在中央空腔为特征的球形体。优选的小泡从类 脂，包括本文所述的各种类脂配制的。在任何给定的小泡中，类脂可 以是单层或双层形式，可以用单-或双层-类脂形成多种单或双层之 一。在一种以上单或双层的情况下，单或双层通常是同心的。本文所 述的类脂小泡包括通常称为脂质体、微胶粒、泡、微泡、微球等的小 泡。因此，可以用所述类脂形成单层小泡(由单层或双层组成)，寡层 小泡(由约两个或约三个单层或双层组成)或者多层小泡(由约3个以 上单层或双层组成)。所述小泡的中央空腔可以按照需要用液体，例 如包括水、气体、气体前体和/或固体或溶质物质包括例如生物活性 剂填充。
“小泡组合物”指从类脂制备的并含小泡的组合物。
“小泡制剂”指含小泡和生物活性剂的组合物。
文中所用小泡优选是小于或等于10微米的球。文中所用脂质体 可包括一个类脂层(类脂单层)，两个类脂层(类脂双层)或者两个以上 类脂层(类脂多层)。“脂质体”指通常以一个或多个同心层形式，例 如双层的两亲化合物，包括类脂化合物的球形簇或聚集体。本文也将 其称为类脂小泡。
本文所用术语“泡”指通常以存在一个或多个膜或壁包围的中央 空腔为特征的小泡，所述空腔用气体或其前体填充。举证性的泡包括 例如脂质体、微胶粒等。
“类脂”指含有亲水组分和疏水组分的合成的或天然的两亲化合 物。类脂包括例如脂肪酸、中性脂肪、磷脂、糖脂、脂肪族醇和蜡、 萜和甾类。
“类脂组合物”指含有类脂化合物的组合物。举证性的类脂组合 物包括悬浮液、乳剂和小泡组合物。
“类脂制剂”指含类脂化合物和生物活性剂的组合物。
适宜的类脂类和特别适宜的类脂包括：磷脂酰胆碱、例如二油基 磷脂酰胆碱，二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)乙 基二硬脂酰磷脂酰胆碱；磷脂酰乙醇胺，例如二棕榈酰磷脂酰乙醇胺 (DPPE)、二油基磷脂酰乙醇胺和N-琥珀酰-二油基磷脂酰乙醇胺；磷 脂酰丝氨酸；磷脂酰甘油；鞘脂类；糖脂，例如神经节甙脂GM1葡萄 糖脂；硫脂；葡萄糖神经节苷脂；磷脂酸，例如二棕榈酰磷脂酸 (DPPA)；棕榈脂肪酸；硬脂脂肪酸；花生烯酸；月桂酸；肉豆蔻酸； 月桂烯酸；抹香鲸酸；肉豆蔻脑酸；十六碳烯酸；芫荽油酸；油酸； 异月桂酸；异肉豆蔻酸；异棕榈酸；异硬脂酸；胆固醇和胆固醇衍生 物，例如胆固醇半琥珀酸酯，胆固醇硫酸酯，和胆甾醇基-(4’-三甲基 铵)-丁酸酯；聚氧化乙烯脂肪酸醇醚；聚氧乙烯脱水山梨糖醇脂肪酸 酯；甘油聚乙二醇羟基硬脂酸酯；甘油聚乙二醇蓖麻油酸酯；乙氧基 化的大豆甾醇；乙氧基化的蓖麻油；聚氧乙烯-聚氧丙烯脂肪酸聚合 物；聚氧乙烯脂肪酸硬脂酸酯；12-(((7’-二乙基氨基香豆素-3-基)- 羰基)-甲基氨基)-硬脂酸；N-[12-(((7’-二乙基氨基香豆素-3-基)- 羰基)-甲基氨基)]-2-氨基-棕榈酸；1，2-二油基-sn-甘油；1，2-二棕 榈酰基-sn-3-琥珀酰基甘油；1，3-二棕榈酰-2-琥珀酰基-甘油；以及 1-十六烷基-2-棕榈酰基-甘油磷酸乙醇按以及棕榈酰高半胱氨酸；溴 化月桂基三甲基铵；溴化鲸蜡基三甲基铵；溴化肉豆蔻基三甲基铵； 氯化烷基二甲基苄基铵，例如其中烷基是C12 C14或C16烷基；溴化苄 基二甲基月桂基铵；氯化苄基二甲基月桂基铵；溴化苄基二甲基十六 烷基铵；氯化苄基二甲基十六烷基铵；溴化苄基二甲基十四烷基铵； 氯化苄基二甲基十四烷基铵；溴化鲸蜡基二甲基乙基铵；氯化鲸蜡基 二甲基乙基铵；溴化鲸蜡基吡啶鎓；氯化鲸蜡基吡啶鎓；氯化N- [1，2，3-二油基氧基)-丙基]-N，N，N-三甲基铵)DOTMA(；1，2-二油基 氧基-3-(三甲基铵)丙烷(DOTAP)；乙基1，2-二油基-c-(4’-三甲基 铵)-丁酰基-sn-甘油(DOTB)。
产生回波的气体可以是一种气体或者气体的混合物，例如CF4、 C2F6、C3F8、环C4F8、C4F10、C5F12、环C5F10、环C4F7(1-三氟甲基)、丙 烷(2-三氟甲基)-1，1，1，3，3，3六氟和丁烷(2-三氟甲基)- 1，1，1，3，3，3，4，4，4九氟。还优选上述化合物相应的不饱和物，例如 C2F4、C3F6、C4F8的异构体。另外，还可使用这些气体的混合物，特别 是全氟化碳与其他全氟化碳的混合物以及全氟化碳与其他惰性气体 例如空气、N2、O2、He的混合物。在Quay美国专利5595723中可以 发现这些实例，该文献引入本文作为参考。
本发明的X射线造影剂含有与一种或多种X吸收射线或原子序数 为20或更大的“重”原子相连的一种或多种血管生成肿瘤维管系统 导向部分，在导向部分与X射线吸收原子之间还含有任意的连接部分 Ln。在X射线造影剂中常用的重原子是碘。最近，已公开了由金属螯 合物组成的X射线造影剂(Wallace，R.，US5417959)和多种金属离子 组成的聚螯合物(Love，D.，5679810)。更近一些，已公开了多核簇 配合物作为X射线造影剂(US 5804161 PCT WO91/14460)。X射线造 影剂的实例包括上述放射性核素的非放射性或天然类似物(例如Re、 Sm、Ho、Lu、Pm、Y、Bi、Pd、Gd、La、Au、Au、Yb、Dy、Cu、Rh、 Ag和Ir)。
本发明的MRI造影剂含有与一种或多种顺磁金属离子相连的一种 或多种血管生成肿瘤维管系统导向部分，在所述导向部分与顺磁金属 离子间还含有任意的连接部分Ln。顺磁金属离子是金属配合物或金属 氧化物颗粒形式。US 5412148和5760191描述了用于MRI造影剂的 有关顺磁金属离子螯合剂的实例。US 5801228、US 5567411和US 5281704描述了用于MRI造影剂的复合一种以上的顺磁金属离子的聚 螯合剂。US 5520904描述了用作MRI造影剂的由顺磁金属离子组成 的组合物。
本发明的药物具有下式(Q)d-Ln-(Ch-X)、(Q)d-Ln-(Ch-X1)d′(Q)d-Ln-(X2)d″和(Q)d-Ln-(X3)，其中Q代表与血管生成肿瘤维管系统 中表达的受体结合的肽或肽模拟物，d是1-10，Ln代表任意的连接基 团，Ch代表金属螯合剂或键合部分，X代表放射性同位素，X1代表顺 磁金属离子，X2代表顺磁金属离子或含不溶性固体颗粒的重原子，d″ 是1-100，X3代表产生回波的气体的表面活性剂微球。优选的本发明 药物含有导向部分Q，所述导向部分是与玻连蛋白受体αvβ3和αvβ5结 合的肽和肽模拟物。更优选的本发明药物含有导向部分Q，所述导向 部分是与玻连蛋白受体αvβ3结合的肽和肽模拟物。最佳的本发明药物 含有导向αvβ3的部分，Q，所述Q由1-10个环五肽或肽模拟物组成， 所述肽或肽模拟物各自独立地与治疗放射性同位素或可成像部分相 连，本发明药物还可在导向部分和治疗放射性同位素或可成像部分之 间含有任意的连接部分，Ln。所述环肽含有与αvβ3受体结合的三肽序 列和两个氨基酸，其中的任何一个可以与Ln、Ch、X2或X3相连。所述 药物的环肽或肽模拟物部分的三肽识别序列与αvβ3受体相互作用导致 所述药物定位于表达αvβ3受体的血管生成肿瘤维管系统中。
可通过多种方法合成本发明的药物。一种方法是合成导向肽或肽 模拟物部分，Q，然后将一个或多个部分Q与一个或多个金属螯合剂 或键合部分Ch或者顺磁金属离子或含固体颗粒的重原子或者与产生 回波的气体微泡直接相连。另一种方法是将一个或多个部分Q与连接 基团Ln相连，然后所述连接基团与一个或多个金属螯合剂或键合部分 Ch或者顺磁金属离子或含固体颗粒的重原子或者产生回波的气体微泡 相连。用另一种于合成其中d是1的药物的方法是通过将携带Ln的氨 基酸或氨基酸模拟残基掺入到肽或肽模拟物中来一起合成Q-Ln。然后 将所得的部分Q-Ln与一个或多个金属螯合剂或键合部分Ch或者顺磁 金属离子或者含固体颗粒的重原子或者产生回波的气体微泡相连。另 一种方法是合成携带连接基团Ln片段的肽或肽模拟物，Q，然后将其 中之一与其余的连接基团相连，然后与一个或多个金属螯合剂或键合 部分Ch或者顺磁金属离子或者含固体颗粒的重原子或者产生回波的 气体微泡相连。
用本领域技术人员已知的标准合成方法可以合成任意地携带连 接基团Ln或连接基团片段的肽或肽模拟物。优选的方法包括但不限于 下文描述的那些。
通常，通过将C末端残基去保护，然后用所述方法通过肽键与下 一个被适当保护的氨基酸偶连可以延长肽或肽模拟物。重复所述的去 保护和偶连过程直到得到所需的序列。用组成型氨基酸以逐步的方式 或者缩合片段(两个或数个氨基酸)或者两种方法结合，或者按照 Merrifield(美国化学会志(J.Am.Chem.Soc.)，85，2149- 2154(1963)，该文献引入本文作为参考)最初描述的方法，通过固相 肽合成可完成所述偶连。
还可用自动合成装置合成所述肽或肽模拟物。除前述文献外，有 关肽或肽模拟物的合成方法可见于Stewart和Young，“固相肽合成 (Solid Phase Peptide Synthesis)”，第2版，Pierce Chemical Co.， Roekford，IL(1984)；Gross，Meienhofer，Udenfriend编，“肽： 分析、合成、生物学(The Peptides：Analysis，Synthesis，Biology)， Vol.1，2，3，5和9"，Academic Press，New York(1980-1987)； Bodanszky，“肽化学：实用手册(Peptide Chemistry：A Practical Textbook)”，Springer-Verlag，New York(1988)；以及Bodanszky 等“肽合成实践(The Practice of Peptide Synthesis)” Springer-Verlag，New York(1984)，以上文献均引入本文作为参 考。
利用标准偶连方法，例如叠氮化物方法、混合的碳酸酐(异丁基 氯甲酸酯)方法、碳二亚胺(二环己基碳二亚胺，二异丙基碳二亚胺或 者水溶性碳二亚胺)方法、活泼酯(对硝基苯基酯、N-羟基琥珀酰亚胺 基酯)，Woodward试剂K方法、羰基二咪唑法、磷试剂如BOP-Cl或 氧化还原法可以完成两个氨基酸衍生物、一个氨基酸与一个肽或肽模 拟物、两个肽或肽模拟物片段之间的偶连或者肽或肽模拟物的环化。 通过加入1-羟基苯并三唑可以提高其中的一些方法(特别是碳二亚 胺)。可以在溶液(液相)或固相中完成这些偶连反应。
在偶连反应过程中必须保护组成型氨基酸或氨基酸模拟物的功 能基团以避免形成不想要的键。在Greene有机合成中的保护基团(“有 机合成中的保护基(Protective Groups in Organic Synthesis)”) John Wiley＆Sons，New York(1981)和“肽：分析合成生物学(The Peptides：Analysis，Synthsis，Biology)”Vol.3，Academic Press， New York(1981)(所述文献引入本文作为参考)中列出了可以使用的 保护基团。
通常通过可经裂解得到羧酸的酯保护C末端残基的α羧基。这些 保护基团包括：1)烷基酯，例如甲基和叔丁基，2)芳基酯例如苄基或 取代的苄基，或3)通过温和的碱处理或温和的还原方法例如三氯乙基 和苯乙酮酯可裂解的酯。在固相的情况下，将C末端氨基与不溶性载 体(通常的聚苯乙烯)相连。这些不溶性载体含有将与羧基反应以形成 对延长条件稳定但随后溶剂裂解的键的基团。实例是：肟树脂 (DeGrado和Kaiser(1980)，有机化学杂志(J.Org.Chem.)45， 1295-1300)、氯或溴甲基树脂、羟基甲基树脂和氨基甲基树脂。其中 许多树脂可购买到并带有已掺入的C末端氨基酸。
必须保护每个氨基酸的α氨基。可以使用本领域已知的任何保护 基团。实例是1)酰基类例如甲酰基，三氟乙酰基，邻苯二甲酰和对甲 苯磺酰基；2)芳香类氨基甲酸酯例如苄氧基羰基(Cbz)和取代的苄氧 基羰基，1-(对-联苯基)-1-甲基乙氧基羰基，和9-芴基甲基氧基羰基 (Fmoc)3)脂肪族的氨基甲酸酯例如叔丁基氧基羰基(Boc)，乙氧基羰 基，二异丙基甲氧基羰基和丙烯基氧基羰基；4)环烷基氨基甲酸酯 类，例如环戊基氧基羰基和金刚烷基氧基羰基；5)烷基类例如三苯基 甲基和苄基；6)三烷基硅烷例如三甲基硅烷；以及7)含巯基类例如苯 基硫代羰基和二硫杂琥珀酰基。优选的α氨基保护基是Boc或Fmoc。 可购买到许多用于肽合成的经适当保护的氨基酸或氨基酸模拟物衍 生物。
在偶连下一个氨基酸前，裂解α氨基保护基。当使用Boc基团时， 选择的方法是三氟乙酸或三氟乙酸的二氯甲烷溶液，或氯化氢的二氧 六环溶液。然后在偶连前或者就地用碱性溶液例如含水缓冲液或叔胺 的二氯甲烷或二甲基甲酰胺溶液将形成的铵盐中和。当使用Fmoc基 团时，可以选用的试剂是哌啶或取代的哌啶在二甲基甲酰胺中的溶 液，但也可以使用各种仲胺或含水碱性溶液。脱保护在0℃至室温下 进行。
在制备肽的过程中，必需对带有侧链功能基的各种氨基酸或氨基 酸模拟物用以上定义的基团进行保护。本领域技术人员可以理解，用 于这些侧链功能基的适宜保护基的选择和使用取决于氨基酸或氨基 酸模拟物以及肽或肽模拟物中其它保护基的存在。对所述保护基的选 择是非常重要的，它们必需在脱保护和α-氨基酸的偶联过程中不能被 除去。
例如，当选择Boc对α-胺进行进行保护时，以下保护基是可以接 受的：用于精氨酸的对甲苯磺酰基和硝基；用于赖氨酸的苄氧羰基、 取代的苄氧羰基、甲苯磺酰基或三氟乙酰基；用于谷氨酸或天冬氨酸 的苄基或烷基酯，例如环戊基酯；用于丝氨酸和苏氨酸的苄基醚；用 于酪氨酸的苄基醚、取代的苄基醚或2-溴苄氧羰基；用于半胱氨酸的 对甲基苄基、对甲氧基苄基、乙酰氨基甲基、苄基或叔丁基磺酰基； 色氨酸的吲哚可以不保护或用甲酰基保护。
当选择Fmoc对α-胺进行保护时，基于叔丁基的保护基是可以接 受的。例如，赖氨酸可以用Boc；丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸用叔丁基 醚；谷氨酸和天冬氨酸用叔丁基酯。
当肽或肽模拟物的延长或环状肽或肽模拟物的延长和环化结束 后，除去所有的保护基。对于液相合成，可以根据所选择的保护基而 采用任何适宜的方式除去保护基。这些方法是本领域技术人员熟知 的。
当用固相合成法合成环状肽或肽模拟物时，从树脂上除去肽或肽 模拟物时，不能同时从功能基上除去保护基，否则会干扰环化过程。 因此，如果需要将肽或肽模拟物在溶液中环化，则需要选择裂解条件 以产生游离的羧酸根和游离的氨基而又不会同时除去其它保护基。或 者，可以通过肼解从树脂上除去肽或肽模拟物，然后通过叠氮化物法 进行偶联。另一种非常方便的方法是在肟树脂上合成肽或肽模拟物， 然后从树脂上进行分子间亲核置换，由此生成环状的肽或肽模拟物 (Osapay，Profit和Taylor(1990)四面体通讯(Tetrahedron Letters)43，6121-6124)。当采用肟树脂时，通常选择Boc保护方 案。于是，除去侧链保护基的优选方法通常涉及用含有添加剂如二甲 硫醚、茴香醚、茴香硫醚或对甲酚的无水HF在0℃下处理。肽或肽模 拟物的裂解还可以用其它酸性试剂如三氟甲磺酸/三氟乙酸混合物来 完成。
用于本发明的常用氨基酸可以通过本领域技术人员熟知的常规 方法来合成(“肽：分析、合成、生物学(The Peptides：Analysis， Synthesis，Biology)”，Vol.5，342-449，Academic Press，New York(1981))。N-烷基氨基酸可以用以上描述的方法(Cheung等(1977) 加拿大化学杂志(Can.J.Chem.)55，906；Freidinger等(1982)， 有机化学杂志(J.Org.Chem.)48，77(1982))进行保护，以上文 献引入本文作为参考。
本领域技术人员可以用于合成肽和肽模拟物导向部分的其它合 成方法记载于PCT WO 94/22910，其内容引入本文作为参考。
连接基团Ln与肽和肽模拟物Q的连接；螯合剂或结合单元Ch与肽 和肽模拟物Q或与连接基团Ln的连接；以及带有连接基团片段的肽和 肽模拟物与连接基团其余部分的连接(形成(Q)d-Ln部分)，然后再与Ch 部分的连接均可以通过常规方法进行。这些方法包括但不仅限于，酰 胺化、酯化、烷基化以及脲或硫脲的形成。形成这些连接的方法可以 参见Brinkley，M.生物结合化学(Bioconjugate Chemistry)1992， 3(1)，该文献引入本文作为参考。
可以采用多种方法，由固体颗粒表面修饰领域的技术人员将肽和 肽模拟物Q与含有顺磁金属离子或重原子的固体颗粒X2连接。通常， 将导向部分Q或组合(Q)dLn与能够和固体颗粒表面组分反应的偶联基 团连接。偶联基团可以是能够和固体颗粒表面的表面羟基反应的多种 硅烷化合物(参见U.S.A.N.60/092360)中的任意一种，并且还包括 可与固体颗粒表面偶联的多膦酸酯、多羧酸酯、多磷酸酯或其混合 物，参见U.S.5，520，904。
可以用多种反应方案将肽和肽模拟物Q与表面活性剂微球X3连 接。用如下反应方案对其举例说明，其中Sf表示形成表面活性剂微球 的表面活性剂部分。
酰化反应：
Sf-C(=O)-Y+Q-NH2或---------->Sf-C(=O)-NH-Q
Q-OH    或Sf-C(=O)-O-Q
Y是离去基或活泼酯
二硫化物偶联：
Sf-SH+Q-SH--------->Sf-S-S-Q
磺酰胺偶联：
Sf-S(=O)2-Y+Q-NH2------->Sf-S(=O)2-NH-Q
还原酰胺化：
Sf-CHO+Q-NH2-------->Sf-NH-Q
在这些反应方案中，取代基Sf和Q也可以颠倒。
连接基团Ln可以起到多种作用。首先，它提供了金属螯合剂或结 合部分Ch、含有顺磁金属离子或重原子的固体颗粒X2、表面活性剂微 球X3以及一种或多种肽或肽模拟物Q之间的间隔基团，从而使Ch-X、 Ch-X1、X2和X3干扰识别序列Q与血管生成性肿瘤脉管系统受体之间相 互作用的可能性减至最低。是否需要在试剂中掺入连接基团取决于 Q、Ch-X、Ch-X1、X2和X3本身。如果Ch-X、Ch-X1、X2和X3不能够与Q 以基本不减弱其对受体的亲和性的方式连接，就需要使用连接基团。 连接基团还提供了将多个肽和肽模拟物Q彼此独立地与一个连接在 Ch-X、Ch-X1、X2或X3上的基团相连接的方法。
连接基团还提供了在本发明的药物中掺入药物动力学改性剂的 方法。药物动力学改性剂的作用是指导所注射药物的生物学分布，它 不同于导向部分Q与肿瘤新脉管系统中表达的受体的相互作用。有多 种功能基可以作为药物动力学改性剂，包括但不仅限于，碳水化合 物、聚亚烷基二醇、肽或其它多氨基酸以及环糊精。改性剂可以用来 提高或降低亲水性并提高或降低血液清除率。改性剂还可以用来指导 药物的排除途径。优选的药物动力学改性剂是那些可以产生中等至快 速的血液清除并提高肾脏排泄的改性剂。
对金属螯合剂或结合部分Ch的选择是用来与用于具体应用所选 择的金属离子形成稳定的配合物。对用于诊断用放射性药物的螯合剂 或结合部分的选择是用来与具有可成像γ射线或正电子发射的放射性 同位素如99mTc、95Tc、111In、62Cu、60Cu、64Cu、67Ga、68Ga、86Y形成稳 定的配合物。
用于锝、铜和镓同位素的螯合剂选自二胺二硫醇、单胺-单酰胺 二硫醇、三酰胺-单硫醇、单胺-二酰胺-单硫醇、二胺二肟和肼。螯 合剂通常是含有选自氮、氧和硫的供体原子的四配位基。优选的试剂 由含有胺氮和硫醇硫供体原子以及肼结合单元的螯合剂组成。硫醇硫 原子和肼可以带有保护基，所述保护基可以在用试剂合成放射性药物 之前或者优选在合成放射性药物的过程中就地置换。
硫醇保护基的例子包括Greene和Wuts，“有机合成中的保护基” John Wiley＆Sons，New York(1991)中所列的那些，其公开的内容 引入本文作为参考。可以使用本领域已知的任何硫醇保护基。硫醇保 护基的例子包括但不仅限于：乙酰氨基甲基、苯甲酰氨基甲基、1-乙 氧基乙基、苯甲酰基和三苯甲基。
肼结合单元的保护基的例子是腙，可以是醛或酮腙，并带有选自 氢、烷基、芳基和杂环的取代基。特别优选的腙记载于共同未决申请 U.S.S.N.08/476，296中，其公开的内容全文引入本文作为参考。
当肼结合单元与金属放射性核素结合时，将其称为肼基或二氮烯 基，它是放射性核素与放射性药物其余部分的连接点。二氮烯基可以 是末端的(基团上仅有一个原子与放射性核素结合)或是螯合的。为了 含有螯合的二氮烯基，基团上必需另外有至少一个原子也同放射性核 素结合。与金属结合的原子称为供体原子。
111In和86Y的螯合剂选自环状和无环的多氨基羧酸酯，例如 DTPA、DOTA、DO3A、2-苄基-DOTA、α-(2-苯乙基)1，4，7，10-四氮杂 环十二烷-1-乙酸-4，7，10-三(甲基乙酸)、2-苄基-环己基二亚乙基三 胺五乙酸、2-苄基-6-甲基-DTPA和6，6″-二[N，N，N″，N″-四(羧基甲 基)氨基甲基]-4’-(3-氨基-4-甲氧基苯基)-2，2’：6’，2″-三联吡啶 (terprydine)。其中的不能购买到的配体的合成方法可以参见 Breehbiel，M.和Gansow，O.，J.Chem.Soc.Perkin Trans.1992， 1，1175；Brechbiel，M.和Gansow，O.，生物结合化学 (Bioconjugate Chem.)1991，2，187；DeshpandemS.，等，核药学 杂志(J.Nucl.Med.)1990，31，473；Kruper，J.，美国专利 5，064，956和Toner，J.，美国专利4，859，777，其公开的内容引入本 文作为参考。
金属离子的内配位层包括所有与金属结合的配体或基团。为了使 过渡金属放射性核素稳定，配位数(供体原子数)一般为大于或等于4 并且小于或等于8的整数；也就是说，有4-8个原子与金属结合并且 将其称为具有完整的内配位层。稳定的放射性核素配合物所需的配位 数由放射性核素的种类、其氧化态以及供体原子的类型所决定。如果 螯合剂或结合单元不能提供通过完成其内配位层而稳定金属放射性 核素所需的所有原子，则内配位层由来自其它配体(称为辅助配体或 辅配体，其也可以是末端的或螯合的)的供体原子完成。
有多种配体可以作为辅助配体或辅配体，它们的选择取决于多种 因素，例如放射性药物合成的难易性、辅助配体的化学和物理学性 质、形成的速率、收率、所形成的放射性药物的异构体数量、将所述 辅助配体或辅配体施用给患者而不会对所述患者产生不利的生理学 后果的能力、配体在冻干的试剂盒制剂中的相容性。辅助配体的电荷 和亲脂性将会影响放射性药物的电荷和亲脂性。例如，使用4，5-二羟 基-1，3-苯二磺酸盐将会使放射性药物额外带有两个阴离子基团，因 为磺酸盐基团会在生理条件下成为阴离子。使用N-烷基取代的3，4- 羟基吡啶酮会使放射性药物具有不同程度的疏水性，这取决于烷基取 代基的大小。
本发明优选的锝放射性药物由肼基或二氮烯基结合单元和辅助 配体AL1组成，或由一个结合单元和两种类型的辅助配体AL1和AL2组 成，或由由两个氮和两个硫原子组成的四配位螯合剂组成。辅助配体 AL1由两个或多个硬供体原子例如氧和胺氮(sp3杂化的)组成。供体原 子占据放射性核素金属内配位层中的至少两个位点；辅助配体AL1充 当了三配体系统的三个配体之一。辅助配体AL1的例子包括但不仅限 于双氧配体和功能基化的氨基羧酸盐。大量所述的配体可以从商业途 径得到。
辅助双氧配体包括与金属离子通过至少两个氧供体原子配位的 配体。其例子包括但不仅限于：葡庚糖酸盐、葡萄糖酸盐、2-羟基异 丁酸盐、乳酸盐、酒石酸盐、甘露糖醇、葡糖二酸盐、麦芽酚、曲酸、 2，2-二(羟基甲基)丙酸、4，5-二羟基-1，3-苯二磺酸盐或取代或未取 代的1，2-或3，4-羟基吡啶酮(这些例子中的配体名称是指质子化的或 非质子化的配体形式)。
功能基化的氨基羧酸盐包括含有胺氮和氧供体原子的组合的配 体。其例子包括但不仅限于：亚氨基二乙酸、2，3-二氨基丙酸、氮三 乙酸、N，N’-乙二胺二乙酸、N，N，N’-乙二胺三乙酸、羟乙基乙二胺三 乙酸和N，N’-乙二胺二-羟基苯基甘氨酸(这些例子中的配体名称是指 质子化的或非质子化的配体形式)。
在Bridger等，美国专利5，350，837(该文献引入本文作为参考) 中公开了一系列功能基化的氨基羧酸盐，它们可以改善锝标记的肼基 修饰的蛋白质的形成速率。我们发现，其中的某些氨基羧酸盐可以改 善本发明的放射性药物的收率。优选的辅助配体AL1功能基化的氨基 羧酸盐是甘氨酸的衍生物；首选tricine(三(羟甲基)甲基甘氨酸)。
本发明首选的锝放射性药物由一个肼基或二氮烯基(hydrazido 或diazenido)结合单元和两种类型的辅助配体AL1和AL2或二胺二硫醇 螯合剂组成。第二种类型的辅助配体AL2由一个或多个软供体原子组 成，所述软供体原子选自：膦的磷、胂的砷、亚胺的氮(sp2杂化)、 硫(sp2杂化)和碳(sp杂化)；具有p-酸特性的原子。配体AL2可以是单 齿的、二齿的或三齿的，齿数由配体中供体原子的数量确定。二齿配 体的两个供体原子之一以及三齿配体的三个供体原子之一必需是软 供体原子。在共同未决申请U.S.S.N.08/415，908、U.S.S.N. 60/013360和08/646，886(其公开的内容全文引入本文作为参考) 中，我们公开了由一种或多种辅助配体或辅配体AL2组成的放射性药 物比不是由一种或多种辅助配体或辅配体AL2组成的放射性药物更稳 定；也就是说，它们具有最少数量的异构体形式，相对比值不会随着 时间明显改变，并且在稀释时仍基本保持完整。
由膦或胂供体原子组成的配体AL2是三取代的膦、三取代的胂、四 取代的二膦和四取代的联胂。由亚胺的氮组成的配体AL2是不饱和或 芳香性的5或6元含氮杂环。由硫(sp2杂化的)供体原子组成的配体 是硫代羰基，其含有C=S部分。由碳(sp杂化的)供体原子组成的配体 是异腈，其含有CNR部分，其中R是有机基团。所述配体中的大部分 可以通过商业途径获得。异腈可以按照欧洲专利0107734和美国专利 4，988，827中的描述制备，上述文献引入本文作为参考。
优选的辅助配体AL2是三取代的膦和不饱和或芳香性的5或6元 杂环。首选的辅助配体AL2是三取代的膦和不饱和的5元杂环。
辅助配体AL2可以被烷基、芳基、烷氧基、杂环、芳烷基、烷芳基 和芳基烷芳基所取代并且可以带有或不带有由杂原子如氧、氮、磷或 硫组成的功能基。所述功能基的例子包括但不仅限于：羟基、羧基、 甲酰胺、硝基、醚、酮、氨基、铵、磺酸酯、磺酰胺、膦酸酯和膦酰 胺。可以对功能基进行选择以改变配体的亲脂性和水溶性，这可以影 响放射性药物的生物学特性，例如改变在非靶点组织、细胞或体液中 的分布以及从体内排除的机制和速率。
选择治疗用放射性药物的螯合剂或结合部分，用于同具有α粒 子、β粒子、Auger或Coster-Kronig电子发射的放射性同位素形成 稳定的配合物，所述放射性同位素是，例如 186Re，188Re，153Sm，166Ho，177Lu，149Pm，90Y，212Bi，103Pd， 109Pd，159Gd，140La，198Au，199Au，169Yb，175Yb，165Dy，166Dy， 67Cu，105Rh，111Ag，和192Ir。
铼、铜、钯、铂、铱、铑、银和金同位素的螯合剂选自二胺二硫 醇、单胺-单酰胺二硫醇、三酰胺-单硫醇、单胺-二酰胺-单硫醇、二 胺二肟和肼。钇、铋和镧系元素同位素的螯合剂选自环状和无环的多 氨基羧酸酯，例如DTPA、DOTA、DO3A、2-苄基-DOTA、α-(2-苯乙 基)1，4，7，10-四氮杂环十二烷-1-乙酸-4，7，10-三(甲基乙酸)、2-苄 基-环己基二亚乙基三胺五乙酸、2-苄基-6-甲基-DTPA和6，6″-二 [N，N，N″，N″-四(羧基甲基)氨基甲基]-4’-(3-氨基-4-甲氧基苯基)- 2，2’：6’，2″-三联吡啶。
选择磁共振成像造影剂的螯合剂，用于同顺磁金属离子如 Gd(Ⅲ)、Dy(Ⅲ)、Fe(Ⅲ)和Mn(Ⅱ)形成稳定的配合物，所述螯合 剂选自环状和无环的多氨基羧酸酯，例如DTPA、DOTA、DO3A、2-苄 基-DOTA、α-(2-苯乙基)1，4，7，10-四氮杂环十二烷-1-乙酸-4，7，10- 三(甲基乙酸)、2-苄基-环己基二亚乙基三胺五乙酸、2-苄基-6-甲基 -DTPA和6，6″-二[N，N，N″，N″-四(羧基甲基)氨基甲基]-4’-(3-氨基 -4-甲氧基苯基)-2，2’：6’，2″-三联吡啶。
含有肼基或二氮烯基结合单元的本发明的锝和铼放射性药物可 以方便地通过将放射性核素的盐、本发明的试剂、辅助配体AL1、辅助 配体AL2和还原剂在含水溶液中于0至100℃的温度下混合制得。由含 有两个氮和两个硫原子的四齿螯合剂组成的本发明的锝和铼放射性 药物可以方便地通过将放射性核素的盐、本发明的试剂和还原剂在含 水溶液中于0至100℃的温度下混合制得。
当本发明试剂中的结合单元以腙基团存在时，则必需在与金属放 射性核素配合前将其首先转变成肼，转变成的肼可以是质子化的，也 可以是非质子化的。腙基团向肼的转变可以在与放射性核素反应前进 行(在该情况下，放射性核素和辅助配体或辅配体或配体不是与试剂 结合，而是与带有螯合剂或结合单元的试剂的水解形式结合)，或者 是在放射性核素的存在下进行(在该情况下，试剂本身与放射性核素 和辅助配体或辅配体或配体结合)。在后一种情况下，反应混合物的 pH值必需是中性或酸性的。
或者，含有肼基或二氮烯基结合单元的本发明放射性药物可以通 过如下方法制得：首先将放射性核素的盐、辅助配体AL1和还原剂在 含水溶液中于0至100℃的温度下混合形成与辅助配体AL1的中间体放 射性核素配合物，然后加入本发明的试剂和辅助配体AL2并继续在0 至100℃的温度下反应。
或者，含有肼基或二氮烯基结合单元的本发明放射性药物可以通 过如下方法制得：首先将放射性核素的盐、辅助配体AL1、本发明的试 剂和还原剂在含水溶液中于0至100℃的温度下混合形成中间体放射 性核素配合物，然后加入辅助配体AL2并继续在0至100℃的温度下反 应。
锝和铼放射性核素优选是高锝酸盐或高铼酸盐和可药用阳离子 的化学形式。高锝酸盐优选例如从市售的Tc-99m发生器制得的高锝 酸钠。用于制备本发明放射性药物的高锝酸盐的量可以为0.1mCi至 1Ci，更优选1-200mCi。
用于制备本发明的锝和铼放射性药物的本发明试剂的量可以从 0.01μg至10mg，或者更优选为0.5μg-200μg。用量由其它反应物的 量以及所要制备的本发明放射性药物的特性所决定。
辅助配体AL1的用量可以从0.1mg-1g，更优选从1mg-100mg。对 于具体放射性药物的确切用量随着所要制备的本发明放射性药物的 特性、所用的方法以及其它反应物的用量和特性而改变。太大量的AL1 将会导致形成由不含生物学活性分子的锝标记的AL1组成的副产物， 或者由锝标记的含有辅助配体AL1但不含辅助配体AL2的生物学活性分 子组成的副产物。太少量的AL1将会导致其它副产物如锝标记的含有 辅助配体AL2但不含辅助配体AL1的生物学活性分子或还原水解的锝或 锝胶体。
辅助配体AL2的用量可以从0.001mg-1g，更优选从0.01mg-10mg。 对于具体放射性药物的确切用量随着所要制备的本发明放射性药物 的特性、所用的方法以及其它反应物的用量和特性而改变。太大量的 AL2将会导致形成由不含生物学活性分子的锝标记的AL2组成的副产 物，或者由锝标记的含有辅助配体AL2但不含辅助配体AL1的生物学活 性分子组成的副产物。如果试剂带有由一个或多个由以上定义的软供 体原子组成的取代基，则需要比式2试剂的摩尔量过量至少10倍的 辅助配体AL2以防止取代基干扰辅助配体AL2与金属放射性核素的配 位。
用于合成本发明放射性药物的适宜还原剂包括亚锡盐、连二亚硫 酸盐或亚硫酸氢盐、硼氢化物盐和甲脒亚磺酸，其中的盐可以是任何 可药用的形式。优选的还原剂是亚锡盐。还原剂的用量可以从 0.001mg-10mg，更优选0.005mg-1mg。
含有肼基或二氮烯基结合单元的本发明放射性药物的具体结构 取决于所用的本发明试剂的特性、辅助配体AL1的特性、辅助配体AL2 的特性以及放射性核素的特性。用＜100μg/mL的试剂浓度合成的含有 肼基或二氮烯基结合单元的放射性药物将含有一个肼基或二氮烯 基。用＞1mg/mL的浓度合成的放射性药物将含有来自两个试剂分子的 两个肼基或二氮烯基。对于大多数的应用，仅有有限量的生物活性分 子可以被注射，因此并不会引起不利的副作用，例如化学毒性、干扰 生物学过程或改变放射性药物的生物分布。因此，当放射性药物需要 较高浓度的部分由生物活性分子组成的试剂时，其必需在合成后进行 稀释或进行纯化以避免所述的副作用。
辅助配体AL1和AL2的特性将决定变量y和z的值。y和z的值可 以彼此独立地是1-2的整数。在组合中，y和z的值将产生由至少5 个但不超过7个供体原子组成的锝内配位层。对于单齿辅助配体AL2 z可以是1-2的整数；对于二齿或三齿辅助配体AL2，z是1。单齿配 体的优选组合是y等于1或2，z等于1。二齿或三齿配体的优选组合 是，y等于1，z等于1。
本发明的铟、铜、镓、银、钯、铑、金、铂、铋、钇和镧系元素 放射性药物可以方便地通过将放射性核素的盐和本发明的试剂在含 水溶液中于0至100℃的温度下混合制得。这些放射性核素通常以在 无机酸如盐酸、硝酸或硫酸中的稀含水溶液的形式得到。将放射性核 素与1至约1000当量溶于含水溶液中的本发明试剂混合。通常用缓 冲剂将反应混合物的pH保持在3-10。
本发明的钆、镝、铁和锰金属药物可以方便地通过将顺磁金属离 子和本发明的试剂在含水溶液中于0至100℃的温度下混合制得。这 些顺磁金属离子通常以在无机酸如盐酸、硝酸或硫酸中的稀含水溶液 的形式得到。将顺磁金属离子与1至约1000当量溶于含水溶液中的 本发明试剂混合。通常用缓冲剂将反应混合物的pH保持在3-10。
制备的总时间取决于金属离子特性、反应物的特性和用量以及制 备所用的方法。制备可以在1分钟内完成，以＞80％的收率得到放射性 药物，但也可能需要更长的时间。如果需要或希望得到更高纯度的金 属药物，可将产物通过本领域技术人员熟知的多种方法中的任意一种 进行纯化，例如，液相色谱、固相提取、溶剂萃取、透析或超滤。
制备金属药物以及在用于制备所述放射性药物的诊断试剂盒中 所用的缓冲剂包括但不仅限于，磷酸盐、柠檬酸盐、磺基水杨酸盐和 乙酸盐。更完整的目录可以参见美国药典。
在制备用于制备放射性药物的诊断试剂盒中所用的冷冻干燥助 剂包括但不仅限于甘露糖醇、乳糖、山梨醇、葡聚糖、Ficoll和聚乙 烯吡咯烷酮(PVP)。
制备金属药物以及在用于制备所述放射性药物的诊断试剂盒中 所用的稳定助剂包括但不仅限于，抗坏血酸、半胱氨酸、单硫代甘油、 亚硫酸氢钠、偏亚硫酸氢钠、龙胆酸和肌醇。
制备金属药物以及在用于制备所述放射性药物的诊断试剂盒中 所用的助溶剂包括但不仅限于，乙醇、甘油、聚乙二醇、丙二醇、聚 氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯、脱水山梨醇单油酸酯、聚山梨酯、聚(氧 乙烯)聚(氧丙烯)聚(氧乙烯)嵌段共聚物(Pluronics)和卵磷脂。优选 的助溶剂是聚乙二醇和Pluronics。
制备金属药物以及在用于制备所述放射性药物的诊断试剂盒中 所用的制菌剂包括但不仅限于，苄醇、氯苄烷铵、氯丁醇和对羟基苯 甲酸的甲酯、丙酯或丁酯。
诊断试剂盒中的组分还可以起到一种以上的功能。还原剂还可以 作为稳定助剂，缓冲剂还可以作为转移配体，冷冻干燥助剂还可以作 为转移配体、辅助配体或辅配体等。
诊断用放射性药物通过静脉内注射给药，通常以盐水溶液的形 式、以1-100mCi/70kg体重的剂量、或优选以5-50mCi的剂量给药。 成像用已知的方法进行。
治疗用放射性药物通过静脉内注射给药，通常以盐水溶液的形 式、以0.1-100mCi/70kg体重的剂量、或优选以0.5-SmCi/70kg体 重的剂量给药。
本发明的磁共振成像造影剂可以按照与美国专利5，155，215；美 国专利5，087，440；Margerstadt等，磁共振医学(Magn.Reson. Med.)，1986，3，808；Runge等，放射学(Radiology)，1988，166， 835；和Bousquet等，放射学(Radiology)，1988，166，693中所描 述的其它MRI试剂类似的方式使用。通常，将造影剂的无菌水溶液以 0.01-1.0mmol/kg体重的剂量向患者静脉内给药。
当用作X-射线造影剂时，本发明的组合物通常应含有浓度为 lmM-5M、优选0.1M-2M的重原子。通过静脉内注射给药的剂量通常为 0.5mmol/kg至1.5mmol/kg，优选0.8mmol/kg至1.2mmol/kg。成像 用已知的技术进行，优选计算机控制的X-射线断层摄影术。
本发明的超声造影剂通过静脉内注射以10至30μL发生回波的气 体/kg体重的量给药，或通过输注以大约3μL/kg/分钟的速率给药。 成像用已知的超声描计术进行。
在以下实施例的描述过程中，本发明的其它特点将是显而易见 的，给出这些实施例仅仅是为了说明本发明，而并不是想要对其进行 限定。
                     实施例
以下将进一步描述可用于制备本发明化合物的代表性原料和方 法。
在25mL聚丙烯过滤管(购自BioRad Inc.)或60mL沙漏式 (hour-glass)反应容器(购自Peptides International)中进行手工 固相肽合成。肟树脂(取代水平=0.96mmol/g)按照公开的方法制备 (DeGrado和Kaiser，有机化学杂志(J.Org.Chem.)1980，45， 1295)，或从Novabiochem(取代水平=0.62mmol/g)购得。所有的化 学试剂和溶剂(试剂级)均以所述销售商所提供的形式直接使用，不经 进一步的纯化。叔丁氧羰基(Boc)氨基酸和其它原料氨基酸可以从 Bachem Inc.、Bachem BioSciences Inc.(Philadelphia.，PA)、 Advanced ChemTech(Louisville，KY)、Peninsula Laboratories(Belmont，CA)或Sigma(St.Louis，MO)购得。2-(1H- 苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲六氟磷酸盐(HBTU)和TBTU购自 Advanced ChemTech。N-甲基吗啉(NMM)、间-甲酚、D-2-氨基丁酸 (Abu)、三甲基乙酰氯、二异丙基乙基胺(DIEA)、1，2，4-三唑、氯化 亚锡二水合物和三(3-磺酸根苯基)膦三钠盐(TPPTS)购自Aldrich Chemical Company。二(3-磺酸根苯基)苯基膦二钠盐(TPPDS)按照公 开的方法(Kuntz，E.，美国专利4，248，802)制备。(3-磺酸根苯基) 二苯基膦单钠盐(TPPMS)购自TCI America，Inc。Tricine由 Research Organics，Inc提供。锝-99m-高锝酸盐(99mTcO4-)来自 DuPont Pharma 99Mo/99mTc Technelite_发生器。In-111-氯化物 (Indichlor_)来自Amersham Medi-Physics，Inc.Sm-153-氯化物 和镥-177-氯化物来自University of Missouri Research Reactor(MURR)。钇-90氯化物来自Pacific Northwest Research Laboratories。二甲基甲酰胺(DMF)、乙酸乙酯、氯(CHCl3)、甲醇 (MeOH)、吡啶和盐酸(HCl)来自Baker。乙腈、二氯甲烷(DCM)、乙酸 (HOAc)、三氟乙酸(TFA)、乙醚、三乙胺、丙酮和硫酸镁从市场购得。 无水乙醇来自Quantum Chemical Corporation。
用Boc-化学方法在肟树脂上进行固相肽合成以制备环状肽的一 般方法
实施例中所述的适宜保护的环状肽通过手工固相肽合成用Boc- 茶袋(teabag)化学法(Houghton，1985)在对硝基二苯酮肟固相载体 (DeGrado，1982，Scarr和Findeis，1990)上制备。用0.75mm网孔 的聚丙烯滤纸(Spectra Filters)制备5.0cm×5.0cm的茶袋并用 0.5g(或1g)肟树脂填充。在聚丙烯反应器中用台式振荡器振荡完成偶 联和脱保护。保护的五肽树脂中间体的合成通过首先将Boc-Gly-OH 与肟树脂(取代度0.69mmol/g或0.95mmol/g)偶联来完成。用各5 当量的氨基酸、HBTU和二异丙基乙基胺(DIPEA)在DMF中将Boc- Gly-OH连接到肟树脂上。第一氨基酸的偶联通常在2-3天内发生。 充分洗涤后，用苦味酸分析(Stewart和Martin)测定取代水平。然后 用DIPEA和三甲基乙酰氯的DMF溶液封闭树脂上未反应的肟基团。将 Boc-基团用50％或25％TFA的DCM溶液脱保护(30min)。按照类似的 方式通过过夜振荡(1-2天)完成其它保护的Boc-氨基酸的偶联，用苦 味酸分析测定新加入的各氨基酸的偶联收率。
用Fmoc-化学方法在HMPB-BHA树脂上进行固相肽合成以制备环 状肽的一般方法
实施例中所述环状肽的适宜保护的线性肽前体还可以通过自动 固相肽合成用Fmoc化学方法在Advanced ChemTech 90型合成仪上制 备，用HMPB-BHA树脂作为固相载体。保护的五肽-树脂中间体的合成 通过将Fmoc-氨基酸与市售的(Novabiochem)Fmoc-Gly-HMPB-BHA树 脂(通常为2g，取代度0.47至0.60mmol/g)用各3-5当量的氨基酸、 HBTU、HOBt和二异丙基乙基胺(DIPEA)在DMF中偶联(3小时)来完成。 用20％哌啶的DMF溶液(30分钟)将Fmoc-基团脱保护。用1％TFA/DCM 溶液将肽从HMPB-BHA树脂上裂解并将肽溶液收集在吡啶的甲醇溶液 (1∶10)中。真空除去溶剂和反应物并将粗产物在乙醚中研制分离出线 性的保护的肽。
以下将描述多种不能购买到的氨基酸的合成方法。
Tfa-氨基酸的合成
Boc-高Lys(Tfa)-OH和Boc-Cys(2-N-Tfa-氨基乙基)-OH通过将 Boc-高Lys-OH和Boc-Cys(2-氨基乙基)-OH分别与巯基三氟乙酸乙酯 在氢氧化钠水溶液中反应，然后用乙醇重结晶进行纯化制得。
Boc-Orn(d-N-苄基氨基甲酰基)的合成
向Boc-Orn(1mmol)的DMF(30mL)溶液中加入异氰酸苄酯 (2.2mmol)和二异丙基胺(3mmol)。然后将反应混合物室温搅拌过夜。 真空蒸除挥发性物质并将粗产物通过柱色谱纯化得到所需产物。
Boc-Orn(d-N-1-Tos-2-咪唑啉基)的合成
将Boc-Orn-OH(10mmol)、1-甲苯磺酰基-2-甲硫基-2-咪唑啉 (12mmol，(该化合物本身通过将市售的2-甲硫基-2-咪唑啉盐酸盐与 对甲苯磺酸酐在二氯甲烷中(0℃至室温)、在三乙胺的存在下反应制 得))和二异丙基乙基胺(12mmol)的溶液回流搅拌过夜。蒸除挥发性物 质并将所需产物通过色谱分离。
Dap(b-(1-Tos-2-苯并咪唑基乙酰基))的合成
向1-Tos-2-苯并咪唑基乙酸(10mmol，用甲苯磺酰氯和报道的标 准条件制备)和N-甲基吗啉(10mmol)的无水DMF溶液中加入氯甲酸异 丁酯(10mmol)。在冰浴温度搅拌5-10分钟后，一次性加入Boc- Orn-OH(10mmol)和N-甲基吗啉(20mmol)的无水DMF溶液。将反应混 合物室温搅拌过夜，真空除去挥发性物质，然后通过色谱分离产物。 (或者使用Boc-Orn-OMe，然后用LiOH水溶液处理分离的产物得到 酸。)
以下描述所用的分析HPLC方法：
HPLC方法1 装置：   HP1050 柱：     Vydac C18(4.6×250mm) 检测仪： 二极管阵列检测仪220nm/500ref 流速：   1.0mL/分钟 柱温：   50℃ 样品量： 15μL 流动相： A：0.1％TFA水溶液
     B：0.1％TFA ACN/水溶液(9∶1) 梯度A：    时间(分钟) ％A    ％B
         0         80    20
         20        0    100
         30        0    100
         31        80    20 梯度B：    时间(分钟) ％A   ％B
         0        98     2
         16       63.2   36.8
         18        0     100
         28        0     100
         30       98     2
实施例1
环{Arg-Gly-Asp-D-Tyr(N-[2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚肼基] 甲基]-苯磺酸]-3-氨基丙基)-Val}的合成
步骤A：环{Arg(Tos)-Gly-Asp(OBzl)-D-Tyr(N-Cbz-3-氨基丙 基)-Val}的制备
用标准脱保护方法(25％TFA的CH2Cl2溶液)除去肽序列Boc- Asp(OBzl)-D-Tyr(N-Cbz-氨基丙基)-Val-Arg(Tos)-Gly-肟树脂的 N-末端Boc-保护基。用DCM洗涤8次后，用10％DIEA/DCM处理树脂 (2×10分钟)。随后用DCM洗涤(5次)树脂，然后高真空下干燥。然 后将树脂(1.7474g，0.55mmol/g)悬浮在二甲基甲酰胺(15mL)中。加 入冰乙酸(55.0μL，0.96lmmol)，然后将反应混合物在50℃加热72 小时。将树脂过滤，然后用DMF洗涤(2×10mL)。然后将滤液高真空 浓缩得到油。将所得的油用乙酸乙酯研制。将由此得到的固体过滤， 用乙酸乙酯洗涤，并在高真空下干燥得到444.4mg所需产物。ESMS： C51H63N9O12S的计算值，1025.43；实测值，1026.6[M+H]+1。分析HPLC， 方法1A，Rt=14.366分钟，纯度=75％。
步骤B：环{Arg-Gly-Asp-D-Tyr(3-氨基丙基)-Val}三氟乙酸盐 的制备
将环{Arg(Tos)-Gly-Asp(Obzl)-D-Tyr(N-Cbz-3-氨基丙基)- Val}(0.150g，0.146mmol)溶于三氟乙酸(0.6mL)，然后冷却到-10 ℃。滴加三氟甲磺酸(0.5mL)，将温度保持在-10℃。加入茴香醚 (0.1mL)，然后将反应混合物在-10℃搅拌3小时。加入乙醚，将反应 混合物冷却到-35℃，然后搅拌30分钟。将反应混合物进一步冷却到 -50℃并搅拌30分钟。过滤所得的粗产物，用乙醚洗涤，高真空干燥， 然后用制备HPLC方法1纯化得到29.7mg(23％收率)为冻干固体的所 需产物。ESMS：C29H45N9O8计算值，647.34；实测值，648.5[M+H]+1。 分析HPLC，方法1B，Rt=10.432分钟，纯度=91％。
制备HPLC方法1
装置：    Rainin Rabbit；Dynamax软件
柱：      Vydac C-18(21.2×25cm)
检测仪：  Knauer VWM
流速：    15mL/分钟
柱温：    RT
样品量：  15μL
流动相：  A：0.1％TFA水溶液
          B：0.1％TFA ACN/水溶液(9∶1)
梯度A：    时间(分钟)    ％A   ％B
           0         98       2
           16        63.2     36.8
           18        0        100
           28        0        100
           30        98       2
步骤C：环{Arg-Gly-Asp-D-Tyr(N-[2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基] 亚肼基)甲基]-苯磺酸]-3-氨基丙基)-Val}的制备
将环{Arg-Gly-Asp-D-Tyr(3-氨基丙基)-Val}三氟乙酸盐 (0.020g，0.0228mmol)溶于DMF(1mL)。加入三乙胺(9.5μL， 0.0648mmol)，在搅拌5分钟后加入2-[[[5-[[(2，5-二氧代-1-吡咯 烷基)氧基]羰基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸单钠盐(0.0121g， 0.0274mmol)。将反应混合物搅拌7天，然后高真空浓缩得到油。将 该油通过HPLC方法1纯化得到8.9mg(37％)为冻干固体的标题产物 (TFA盐)。HRMS：C42H54N12O12S+H，计算值951.3783；实测值， 951.3767。分析HPLC，方法1B，Rt=14.317分钟，纯度=95％。
实施例2
环{Arg-Gly-Asp-D-Tyr((N-(2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚肼基] 甲基]-苯磺酸]-18-氨基-14-氮杂-4，7，10-氧基-15-氧代-十八烷酰 基)-3-氨基丙基)-Val}的合成
步骤A：3-(N-(2-(2-(3-((叔-丁氧基)-羰基氨基)丙氧基)乙氧 基)乙氧基)丙基)氨基甲酰基)-丙酸的制备
将N-(3-(2-(2-(3-氨基丙氧基)乙氧基)乙氧基)丙基)(叔-丁氧 基)甲酰胺(1.5g，4.68mmol)加到DMF(15毫升)中。向该溶液中加入 吡啶(15毫升)、琥珀酸酐(0.47g，4.68mmol)，然后加入二甲氨基吡 啶(62mL，0.468μmol)。在100℃将反应混合物搅拌过夜。在高真空 下将反应混合物浓缩，向残余物加入水，用pH 2.5的1N HCl酸化， 用乙酸乙酯提取(3次)。将合并的有机提取物用硫酸镁干燥并过滤。 将滤液真空浓缩，得到1.24g油状产物(63％)。无需进一步纯化即可 使用所得的产物。1H NMR(CDCl3)3.67-3.45(m,11H)，3.41-3.28(m, 2H)，3.21-3.09(m,2H)，2.95-2.82(m,2H)，2.80-2.35(m,3H)， 1.81-1.68(m,4H)，1.50-1.35(s,9H)；ESMS：C19H36N2O8的计算值， 420.2471，实测值419.3[M-H]-1。
步骤B：3-(N-(3-(2-(2-(3-((叔-丁氧基)-羰基氨基)丙氧基)乙 氧基)乙氧基)丙基)氨基甲酰基)-丙酸琥珀酰亚胺酯的制备
向3-(N-(2-(2-(3-((叔-丁氧基)-羰基氨基)丙氧基)乙氧基)乙 氧基)丙基)氨基甲酰基)-丙酸(1.12g，2.66mmol)、N-羟基琥珀酰亚 胺(0.40g，3.46mmol)和N，N-二甲基甲酰胺(40毫升)的溶液中加入 1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(0.67g，3.46mmol)。将反应 混合物室温搅拌48小时。在高真空下，将所述混合物浓缩，向残余 物中加入0.1N HCl并用乙酸乙酯提取(3次)。将合并的有机提取物 用水(2次)及饱和氯化钠洗涤，用硫酸镁干燥，然后过滤。将滤液在 真空下浓缩，得到1.0g油状产物(73％)。无需进一步纯化即可使用 所得产物。ESMS：C23H39N3O10的计算值，517.2635实测值518.2 [M+H]+1。
步骤C：环{Arg-Gly-Asp-D-Tyr(3-(3-(N-(3-(2-(2-(3-((叔- 丁氧基)-羰基氨基)丙氧基)乙氧基)乙氧基)丙基)-氨基甲酰基)-丙 酰胺)丙基)-Val}的制备
将环{Arg-Gly-Asp-D-Tyr(3-氨基丙基)-Val}TFA盐(0.040g， 0.0457mmol)溶于DMF(2毫升)。加入三乙胺(19.1μL，0.137mmol)， 搅拌5分钟后加入3-(N-(3-(2-(2-(3-((叔-丁氧基)-羰基氨基)丙氧 基)乙氧基)乙氧基)丙基)氨基甲酰基)-丙酸琥珀酰亚胺酯(0.0284g， 0.0548mmol)。在N2下，将反应混合物搅拌48小时，然后在高真空下 浓缩得到油。将油用乙酸乙酯研制，过滤产物，用乙酸乙酯洗涤，在 高真空下干燥。用制备HPLC方法1纯化所得粗产物，得到7.4mg(14％) 为冻干固体状的所需产物。ESMS：C48H79N11O15的计算值1049.58；实测 值，1050.5[M+H]+1。分析HPLC，方法1B，Rt=20.417分钟，纯度 =100％。
步骤D：环{Arg-Gly-Asp-D-Tyr(3-(3-(N-(3-(2-(2-(3-(氨基) 丙氧基乙氧基)乙氧基)丙基)-氨基甲酰基)-丙酰氨基)丙基)-Val}的 制备
将环{Arg-Gly-Asp-D-Tyr(3-(3-(N-(3-(2-(2-(3-((叔-丁氧 基)-羰基氨基)丙氧基)乙氧基)乙氧基)丙基)-氨基甲酰基)-丙酰氨 基)丙基)-Val}(6.0mg，0.00515mmol)溶于二氯甲烷(1mL)，然后加 入三氟乙酸(1mL)。将溶液搅拌2小时，然后高真空浓缩得到油。将 所述油用乙醚研制，将产物过滤，用乙醚洗涤，真空干燥得到 6.0mg(98％)所需产物。ESMS：C43H71N11O13计算值，949.52；实测值， 950.6[M+H]+l。分析HPLC，方法1B；Rt=14.821分钟，纯度=73％。
步骤E：环{Arg-Gly-Asp-D-Tyr((N-[2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基] 亚肼基]甲基]-苯磺酸]-18-氨基-14-氮杂-4，7，10-氧基-15-氧代-十 八烷酰基)-3-氨基丙基)-Val}的制备
将环{Arg-Gly-Asp-D-Tyr(3-(3-(N-(3-(2-(2-(3-(氨基)丙氧 基)乙氧基)乙氧基)丙基)氨基甲酰基)-丙酰氨基)丙基)-Val}(5.0mg， 0.00424mmol)溶于二甲基甲酰胺(1mL)。加入三乙胺(1.8μL， 0.0127mmol)，搅拌5分钟后加入2-[[[5-[[(2，5-二氧代-1-吡咯烷 基)氧基]-羰基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸单钠盐(2.2mg， 0.00509mmol)。将反应混合物搅拌24小时，然后高真空浓缩得到油。 将该油通过HPLC方法1纯化得到2.2mg(38％)为冻干固体的所需产 物(TFA盐)。ESMS：C56H80N14O17S计算值，1252.6；实测值， 1253.7(M+H+)。分析HPLC，方法1B，Rt=17.328分钟，纯度=100％。
实施例3
[2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸]-Glu(环{D- Tyr(3-氨基丙基)-Val-Arg-Gly-Asp})-环{D-Tyr(3-氨基丙基)- Val-Arg-Gly-Asp}的合成
步骤A：Boc-Glu(环{D-Tyr(3-氨基丙基)-Val-Arg-Gly-Asp})- 环{D-Tyr(3-氨基丙基)-Val-Arg-Gly-Asp}的制备
将环{D-Tyr(3-氨基丙基)-Val-Arg-Gly-Asp}(0.040g， 0.0457mmol)溶于二甲基甲酰胺(2mL)。加入三乙胺(19.1μL， 0.137mmol)，然后将反应混合物搅拌5分钟。加入Boc-Glu(OSu)- OSu(0.0101g，0.0229mmol)，然后将反应混合物在N2下搅拌18小时。 然后将反应混合物在高真空下浓缩得到油。将油用乙酸乙酯研制。将 产物过滤，用乙酸乙酯洗涤，真空干燥得到38.0mg(55％)所需产物。 ESMS：C68H103N19O20计算值，1505.76；实测值，1504.9[M-H]-1。分 析HPLC，方法1B，Rt=19.797分钟，纯度=73％。
步骤B：Glu(环{D-Tyr(3-氨基丙基)-Val-Arg-Gly-Asp})-环 {D-Tyr(3-氨基丙基)-Val-Arg-Gly-Asp}·TFA盐的制备
将Boc-Glu(环{D-Tyr{3-氨基丙基)-Val-Arg-Gly-Asp})-环{D- Tyr(3-氨基丙基)-Val-Arg-Gly-Asp}(0.035g，0.0232mmol)溶于二 氯甲烷(1mL)。加入三氟乙酸(1mL)，然后将反应混合物搅拌2小时。 然后高真空浓缩得到油并用乙醚研制。将所得的产物过滤，用乙醚洗 涤，真空干燥得到30.7mg(76％)所需产物。ESMS：C63H95N19O18计算值， 1405.71；实测值，1404.7[M-H]-1。分析HPLC，方法1B，Rt=15.907 分钟，纯度=77％。
步骤C：[2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸]- Glu(环{D-Tyr(3-氨基丙基)-Val-Arg-Gly-Asp})-环{D-Tyr{3-氨基 丙基)-Val-Arg-Gly-Asp}的制备
向Glu{环{D-Tyr(3-氨基丙基)-Val-Arg-Gly-Asp})-环{D- Tyr(3-氨基丙基)-Val-Arg-Gly-Asp}(0.025g，0.0143mmol)的二甲 基甲酰胺(2mL)溶液中加入三乙胺(6.0μL，0.0429mmol)，将反应混 合物搅拌5分钟，加入2-[[[5-[[(2，5-二氧代-1-吡咯烷基)氧基] 羰基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸单钠盐(0.0076g， 0.0172mmol)，然后将反应混合物搅拌5天，然后高真空浓缩得到油。 将油通过制备HPLC方法1纯化得到12.0mg(43％)为冻干固体的所需 产物。ESMS：C76H104N22O22S计算值，1708.7；实测值，1710.1(M+H+)。 分析HPLC，方法1B，Rt=17.218分钟，纯度=94％。
实施例4
环(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Lys([2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚肼 基]甲基]-苯磺酸])}的合成
步骤A：环(Arg(Tos)-Gly-Asp(OBzl)-D-Tyr(Bzl)-Lys(Cbz)} 的制备
用标准脱保护方法(25％TFA的CH2Cl2溶液)除去肽序列Boc- Asp(OBzl)-D-Tyr(Bzl)-Lys(Z)-Arg(Tos)-Gly-肟树脂的N-末端 Boc保护基。用DCM洗涤8次后，用10％DIEA/DCM处理树脂(2×10 分钟)。随后用DCM洗涤(5次)树脂，然后在高真空下干燥。然后将树 脂(1.8711g，0.44mmol/g)悬浮在DMF(15mL)中。加入冰乙酸 (47.1μL，0.823mmol)，然后将反应于60℃加热72小时。将树脂过 滤并用DMF(2×10mL)洗涤。将滤液在高真空下浓缩得到油。将所得 的油用乙酸乙酯研制。将由此得到的固体过滤，用乙酸乙酯洗涤，在 高真空下干燥，得到653.7mg所需产物。ESMS：C56H65N9O12S计算值， 1087.45；实测值，1088.7[M+H]+1。分析HPLC，方法1A，Rt=17. 559分钟，纯度=82％。
步骤B：环{Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Lys}的制备
将环{Arg(Tos)-Gly-Asp(OBzl)-D-Tyr(Bzl)-Lys(Cbz)} (0.200g，0.184mmol)溶于三氟乙酸(0.6mL)然后冷却到-10℃。滴 加三氟甲磺酸(0.5mL)，将温度保持在-10℃。加入茴香醚(0.1mL)， 然后于-10℃将反应混合物搅拌3小时。加入乙醚，将反应冷却到-50 ℃，然后搅拌1小时。将粗产物过滤，用乙醚洗涤，高真空干燥。用 制备HPLC方法1纯化所述粗产物，得到15.2mg(10％)为冻干固体的 所需产物。HRMS：C27H41N9O8+H计算值，620.3156；实测值， 620.3145。分析HPLC，方法1B，Rt=8.179分钟，纯度=100％。
步骤C：环{Arg-G1y-Asp-D-Tyr-Lys([2-[[[5-[羰基]-2-吡啶 基]亚肼基]甲基]-苯磺酸])}的制备
将环{Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Lys}TFA盐(0.010g，0.0118mmol) 溶于DMF(1mL)。加入三乙胺(5.0μL，0.0354mmol)，搅拌5分钟后， 加入2-[[[5-[[(2，5-二氧代-1-吡咯烷基)氧基]羰基]-2-吡啶基]亚 肼基]-甲基]-苯磺酸单钠盐(0.0062g，0.0142mmol)。将反应混合物 搅拌20小时，然后在高真空下浓缩成油。将油通过制备HPLC方法1 纯化得到6.2mg(46％)为冻干固体的所需产物。HRMS：C40H50N12O12S+H计算值，923.3470；实测值，923.3486。分析HPLC，方法1B，Rt=11.954 分钟，纯度=100％。
实施例5
环{Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys([2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚肼 基]甲基]-苯磺酸])}的合成
步骤A：环{Arg(Tos)-Gly-Asp(OBzl)-D-Phe-Lys(Cbz)}的制备
用标准脱保护方法(25％TFA的CH2Cl2溶液)除去肽序列Boc- Asp(OBZ1)-D-Phe-Lys(Z)-Arg(Tos)-Gly-肟树脂的N-末端Boc-保护 基。用DCM洗涤8次后，用10％DIEA/DCM处理树脂(2×10分钟)。 随后用DCM洗涤(5次)树脂，然后高真空下干燥。将树脂(1.7053g， 0.44mmol/g)悬浮在二甲基甲酰胺(15mL)中。加入冰乙酸(43.0μL， 0.750mmol)，然后将反应于60℃加热72小时。将树脂过滤，用DMF(2 ×10mL)洗涤。然后高真空下浓缩液体得到油。将所得的油用乙酸乙 酯研制。将由此得到的固体过滤，用乙酸乙酯洗涤，真空干燥得到 510.3mg所需产物。ESMS：C49H59N9O11S的计算值，981.40；实测值982.6 [M+H]+1。分析HPLC，方法1A，Rt=15.574分钟，纯度=89％。
步骤B：环{Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys}的制备
将环{Arg(Tos)-Gly-Asp(OBzl)-D-Phe-Lys(Cbz)}(0.200g， 0.204mmol)溶于三氟乙酸(0.6mL)，然后冷却到-10℃。滴加三氟甲磺 酸(0.5mL)并将温度保持在-10℃。加入茴香醚(0.1mL)，然后将反应 在-10℃搅拌3小时。加入乙醚，将反应冷却到-50℃，然后搅拌1小 时。将粗产物过滤，用乙醚洗涤，高真空干下燥，然后通过制备HPLC 方法1纯化，得到121.1mg(71％)为冻干固体的所需产物。HRMS： C27H41N9O7+H计算值，604.3207；实测值，604.3206。分析HPLC，方 法1B，Rt=11.197分钟，纯度=100％。
步骤C：环{Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys([2-[[[5-[羰基]-2-吡啶 基]亚肼基]甲基]-苯磺酸])}的制备
将环{Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys}TFA盐(0.040g，0.0481mmol) 溶于DMF(2mL)。加入三乙胺(20.1μL，0.144mmol)，搅拌5分钟后， 加入2-[[[5-[[(2，5-二氧代-1-吡咯烷基)氧基]羰基]-2-吡啶基]亚 肼基]-甲基]-苯磺酸单钠盐(0.0254g，0.0577mmoll)。将反应混合物 搅拌20小时，然后在高真空下浓缩成油。将油通过制备HPLC方法1 纯化得到38.2mg(78％)为冻干固体的所需产物。HRMS：C40H50N12O11S+H 计算值，907.3521；实测值，907.3534。分析HPLC，方法1B，Rt= 14.122分钟，纯度=91％。
实施例6
[2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸]-Glu(环 {Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe})-环{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe}的合成 步骤A：Boc-Glu(OSu)-OSu的制备
向Boc-Glu-OH(8.0g，32.25mmol)、N-羟基琥珀酰亚胺(8.94g， 77.64mmol)和DMF(120mL)溶液中加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙 基碳二亚胺(14.88g，77.64mmol)。将反应混合物在室温搅拌48 小时。将混合物在高真空下浓缩，然后向残余物中加入0.1N HCl， 并用乙酸乙酯提取(3次)。将合并的有机提取物用水、饱和碳酸氢钠 和饱和氯化钠洗涤，用硫酸镁干燥，过滤。将滤液在真空下浓缩，然 后经反相HPLC(Vydac C18柱，含0.1％TFA的18至90％乙腈梯度， Rt=9.413分钟)纯化，得到8.5g(60％)白色粉末状所需产物。1H NMR(CDCl3)：2.98-2.70(m,11H)，2.65-2.25(m,2H)，1.55-1.40(s, 9H)；ESMS：C18H23N3O10计算值，441.1383实测值459.2[M+NH4]+1。
步骤B：Boc-Glu(环{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe})-环{Lys-Arg- Gly-Asp-D-Phe}的制备
向环(Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe)(0.050g，0.0601mmol)的二甲基 甲酰胺(2mL)溶液中加入三乙胺(25.1μL，0.183mmol)。搅拌5分钟 后，加入Boc-Glu(OSu)-OSu(0.0133g，0.0301mmol)。在N2下将反 应混合物搅拌20小时，然后在高真空下浓缩得到油，然后用乙酸乙 酯研制。将由此得到的产物过滤，用乙酸乙酯洗涤，在高真空下干燥 得到43.7mg(44％)所需产物。ESMS：C64H95N19O18计算值，1417.71；实 测值，1418.8[M+H]+1。分析HPLC，方法1B，Rt=19.524分钟， 纯度=73％.
步骤C：Glu(环{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe})-环{Lys-Arg-Gly- Asp-D-Phe}TFA盐的制备
向Boc-Glu(环{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe})-环{Lys-Arg-Gly- Asp-D-Phe}(0.040g，0.0243mmol)的二氯甲烷(1mL)溶液中加入三 氟乙酸(1mL)。将反应混合物搅拌2小时，在高真空下浓缩成油，然 后用乙醚研制。将产物过滤，用乙醚洗涤，然后在高真空下干燥， 得到39.9mg(100％)所需产物。ESMS：C59H87N19O16计算值，1317.66；实 测值，1318.9[M+H]+1。分析HPLC，方法1B，Rt=15.410分钟， 纯度=73％。
步骤D：[2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基]-亚肼基]甲基]-苯磺酸]- Glu(环{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe})-环{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe}的 制备
向Glu(环{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe})-环{Lys-Arg-Gly-Asp- D-Phe}(0.030g，0.0183mmol)的二甲基甲酰胺(3mL)溶液中加入三 乙胺(7.6μL，0.0549mmol)并将反应混合物搅拌5分钟。加入2- [[[5-[[(2，5-二氧代-1-吡咯烷基)氧基]羰基]-2-吡啶基]-亚肼基] 甲基]-苯磺酸单钠盐(0.0096g，0.0220mmol)，然后将反应混合物搅 拌18小时，然后在高真空下浓缩得到油。通过制备HPLC方法1将油 纯化，得到11.0mg(32％)为冻干固体的所需产物。ESMS：C72H96N22O20S计算值，1620.7；实测值，1620.1(M-H+)。分析HPLC，方法1B，Rt =16.753分钟，纯度=91％。
实施例7
[2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸]-Phe-Glu(环 {Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe})-环{Lys-Arg-Gly-Asp-D-phe}的合成
步骤A：Phe-Glu(环{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe})-环{Lys-Arg- Gly-Asp-D-Phe}的制备
将Glu(环{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe})-环{Lys-Arg-Gly-Asp- D-Phe}(23.4mg，0.014mmol)和三乙胺(7.8μL，0.56mmol)的 DMF(2mL)溶液搅拌5分钟。向其中加入Boc-Phe-OSu(5.1mg， 0.014mmol)，然后在室温及氮气下将反应混合物搅拌过夜。真空除去 DMF，然后将所得残余物溶于TFA(1.5mL)和二氯甲烷(1.5mL)。将所 述溶液搅拌2小时，然后真空浓缩得到31mg所需产物的TFA盐。ESMS： C68H96N20O17计算值，1464.7；实测值，1465.6(M+H)+1。分析HPLC，方 法1B，Rt=15.48分钟，纯度=95％。
步骤B：[2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚肼基)甲基]-苯磺酸]- Phe-Glu(环{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe})-环{Lys-Arg-Gly-Asp-D- Phe}的制备
向Phe-Glu(环{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe})-环{Lys-Arg-Gly- Asp-D-Phe}(0.030g，0.016mmol)的二甲基甲酰胺(2mL)溶液中加入 三乙胺(9μL，0.064mmol)，然后将反应混合物搅拌5分钟。加入 2-[[[5-[[(2，5-二氧代-1-吡咯烷基)氧基]羰基]-2-吡啶基]-亚肼基] 甲基]-苯磺酸单钠盐(O.0099g，0.0220mmol)，将反应混合物搅拌18 小时，然后在高真空下浓缩。通过制备RP-HPLC方法1将残余物纯 化得到7mg(22％)为冻干固体的所需产物(TFA盐)。ESMS：C81H105N23O21S计算值，1767.8；实测值，1768.8(M-H+)。分析HPLC，方法1B，Rt =17.68分钟，纯度=99％。
实施例8
环{Arg-Gly-Asp-D-Nal-Lys([2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚肼 基]甲基]-苯磺酸])}的合成 步骤A：环{Arg(Mtr)-Gly-Asp(OtBu)-D-Nal-Lys(Boc)}的制备
用Fmoc化学方法，通过自动固相肽合成方法得到肽 Asp(OtBu)-D-Nal-Lys(Boc)-Arg(Mtr)-Gly。向100mL圆底烧瓶中加 入HBTU(349mg，0.92mmol)和DMF(10mL)。将溶液在60℃搅拌5分 钟。向该溶液中加Asp(OtBu)-D-Nal-Lys(Boc)Arg(Mtr)-Gly(0.684 g)和Hunig’s碱(0.34mL，1.97mmol.)的DMF(10mL)溶液，然后在氮 气下将溶液在60℃搅拌4小时。真空除去溶剂，然后将残余物用乙酸 乙酯研制。将固体过滤，用乙酸乙酯洗涤(3×5mL)，然后真空干燥 得到所需产物(520mg，86％)。ESMS：C50H71N9O12S计算值，1021.5；实 测值，1022.5[M+H)+1。分析HPLC，方法1A，Rt=15.91分钟，纯 度99％。
步骤B：环{Arg-Gly-Asp-D-Nal-Lys}二TFA盐的制备
在氮气下，将环{Arg(Mtr)-Gly-Asp(OtBu)-D-Nal-Lys(Boc)} (500mg，0.49mmol)，TFA(7mL)，三异丙基硅烷(0.25mL)和水(0.25mL) 在室温搅拌18小时。真空除去溶剂(经3小时)，然后将残余物用乙 醚研制得到为TFA盐的所需产物(426mg，98％)。ESMS：C31H43N9O7计 算值，653.3；实测值，654.3[M+H]+1。分析HPLC方法1B，Rt=13.30 分钟，纯度=97％。
步骤C：环{Arg-Gly-Asp-D-Nal-Lys([2-[[[5-[羰基]-2-吡啶 基]亚肼基]甲基]-苯磺酸)}的制备
将环{Arg-Gly-Asp-D-Nal-Lys}TFA盐(0.056g，0.064mmol) 溶于DMF(2mL)。加入三乙胺(27μL，0.19mmol)，搅拌5分钟后加入 2-[[[5-[[(2，5-二氧代-1-吡咯烷基)氧基]羰基]-2-吡啶基]-亚肼 基]-甲基]-苯磺酸单钠盐(0.039g，0.089mmol)。在氮气下将反应混 合物搅拌过夜，然后高真空浓缩得到油。通过制备HPLC方法1纯化 所述油得到49.3mg(72％)为冻干固体的所需产物(TFA盐)。ESNS： C44H52N121011S计算值，956.4；实测值，957.5[M+H]+1。分析HPLC，方 法1B，Rt=16.19分钟，纯度=99％
实施例9
[2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基]-亚肼基]甲基]-苯磺酸]-Glu(环 {Lys-Arg-Gly-Asp-D-Nal})-环{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Nal}
步骤A：Boc-Glu(环{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Nal})-环{Lys-Arg- Gly-Asp-D-Nal}的制备
向环{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Nal}(0.052g，0.059mmol)的二甲基 甲酰胺(2mL)溶液中加入三乙胺(25μL)。搅拌5分钟后，加入Boc- Glu(OSu)-OSu(0.013g，0.029mmol)。在氮气下，将反应混合物搅拌 20小时，然后在高真空下浓缩得到油，接着用乙酸乙酯研制。将所得 产物过滤，用乙酸乙酯洗涤，高真空干燥得到35.2mg所需产物粗品。 ESMS：C72H99N19O18计算值，1517.7，实测值，760.1[M+2H]+2。分析 HPLC，方法1B，Rt=21.07分钟(65％)。
步骤B：Glu(环{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Nal})-环{Lys-Arg- Gly-Asp-D-Nal}的制备
向Boc-Glu(环{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Nal})-环{Lys-Arg-Gly- Asp-D-Nal}(35.2mg)粗品的二氯甲烷(1.5mL)的溶液中加入三氟乙 酸(1.5mL)。将反应混合物搅拌2小时，然后高真空浓缩得到油，用 乙醚研制。将产物过滤，用乙醚洗涤，高真空干燥得到34.9mg所需 产物粗品(TFA盐)。ESMS：C67H91N19O16计算值，1417.69；实测值， 1418.7[M+H]+1。分析HPLC，方法1B，Rt=19.1分钟，纯度=62％。
步骤C：[2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸]- Glu(环{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Nal})-环{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Nal}的 制备
向Glu(环{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Nal})-环{Lys-Arg-Gly-Asp- D-Nal}(34.9mg)的二甲基甲酰胺(2mL)溶液中加入三乙胺(10μL， 0.074mmol)，将反应混合物搅拌5分钟。加入2-[[[5-[(2，5-二氧代 -1-吡咯烷基)氧基]羰基]-2-吡啶基]-亚肼基]甲基]-苯磺酸单钠盐 (15.2mg，0.0344mmol)，然后将反应混合物搅拌18小时，然后在高 真空下浓缩得到油。通过制备RP-HPLC方法1纯化所述油得到3mg所 需产物(TFA盐)。ESMS：C80H100N22O20S计算值，1720.7；实测值， 1722.6(M+H)+1。分析HPLC，方法1B，Rt=19.78分钟，纯度=92％。
实施例10
环{Arg-Gly-Asp-Lys([2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚肼基]甲 基]-苯磺酸])-D-Val}的制备
步骤A：环{Arg(Tos)-Gly-Asp(OBzl)-Lys(Cbz)-D-Val}的制备
用标准脱保护方法(25％TFA的CH2Cl2溶液)除去肽序列Boc- Asp(OBzl)-Lys(Z)-D-Val-Arg(Tos)-Gly-肟树脂的N末端Boc-保护 基。用DCM洗涤8次后，用10％DIEA/DCM处理(2×10分钟)树脂。 随后用DCM洗涤(5次)树脂并高真空干燥。然后将树脂悬浮在二甲基 甲酰胺(10mL)中。加入冰乙酸(33.3μL，0.582mmol)，然后将反应液 于65℃加热72小时。将树脂过滤，用DMF(2×10mL)洗涤。然后在 高真空下将滤液浓缩得到油。将所得的油用乙酸乙酯研制。将由此得 到的固体过滤，用乙酸乙酯洗涤，高真空干燥，然后通过制备HPLC 方法2纯化得到93.0mg为冻干固体的所需产物。ESMS：C45H59N9O11S计算值，933.41；实测值，934.5[M+H]+1。分析HPLC，方法1A，Rt =14.078分钟，纯度=85％。
制备HPLC方法2
装置：    Rainin Rabbit；Dynamax软件
柱：      Vydac C-18(21.2×25cm)
检测仪：  Knauer VWM
流速：    15mL/分钟
柱温：    RT
样品量：    15μL
流动相：    A：0.1％TFA水溶液
        B：0.1％TFA ACN/水溶液(9∶1) 梯度：    时间(分钟)  ％A    ％B
       0            80   20
       20           0    100
       30           0    100
       31           80   20 步骤B：环{Arg-Gly-Asp-Lys-D-Val}的制备
将环{Arg(Tos)-Gly-Asp(OBzl)-Lys(Cbz)-D-Val}(0.080g， 0.0856mmol)溶于三氟乙酸(0.6mL)，然后冷却到-10℃。滴加三氟甲 磺酸(0.5mL)，将温度保持在-10℃。加入茴香醚(0.1mL)，然后将在 -10℃搅拌3小时。加入乙醚，将反应混合物冷却到-50℃，然后搅拌 30分钟。将所得的粗产物过滤，并用乙醚洗涤，在高真空下干燥，然 后通过制备HPLC方法1纯化，得到44.2mg(66％)为冻干固体的所需 产物。ESMS：C23H41N9O7计算值，555.31；实测值，556.3[M+H]+1。 分析BPLC，方法1B，Rt=8.959分钟，纯度=92％。
步骤C：环{Arg-Gly-Asp-Lys([2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚 肼基]甲基]-苯磺酸])-D-Val}的制备
向环{Arg-Gly-Asp-Lys-D-Val}(0.036g，0.0459mmol)的二甲基 甲酰胺(3mL)溶液中加入三乙胺(19.2μL，0.0138mmol)，然后搅拌 5分钟。加入甲基亚砜(0.7mL)，然后加入2-[[[5-[[(2，5-二氧代-1- 吡咯烷基)氧基]羰基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸单钠盐 (0.0243g，0.0551mmol)并将反应混合物搅拌20小时。将反应混合物 高真空浓缩得到油，然后通过制备HPLC方法1纯化，得到13.9mg(31％) 为冻干固体的所需产物。HRMS：C36H50N12O11S+H计算值，859.3443；实 测值，859.3503。分析HPLC，方法1B，Rt=13.479分钟，纯度=92％。
实施例11
[2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸]-Glu(环 {Lys-D-Val-Arg-Gly-Asp})-环{Lys-D-Val-Arg-Gly-Asp}的合成
步骤A：Boc-Glu(环{Lys-D-Val-Arg-Gly-Asp})-环{Lys-D- Val-Arg-Gly-Asp}的制备
向环{Lys-D-Val-Arg-Gly-Asp}(0.400g，0.51mmol)的二甲基甲 酰胺(7mL)溶液加入三乙胺(0.21mL，1.53mmol)。搅拌5分钟后加入 Boc-Glu(OSu)-OSu(115mg，0.26mmol)。在氮气下将反应混合物20 小时。然后浓缩得到油。将由此得到的产物通过制备RP-HPLC纯化， 得到124mg产物。ESMS：C56H95N19O18的计算值，1321.71；实测值， 1322.6[M+H]+1。
步骤B：Glu(环{Lys-D-Val-Arg-Gly-Asp})-环{Lys-D-Val- Arg-Gly-Asp}的制备
向不纯的Boc-Glu(环{Lys-D-Val-Arg-Gly-Asp})-环{Lys-D- Val-Arg-Gly-Asp}(0.124g)的二氯甲烷(5mL)溶液中加入三氟乙酸 (5mL)。将反应混合物搅拌2小时，然后高真空浓缩得到油，用乙醚 研制。将产物过滤，用乙醚洗涤，高真空干燥，RP-HPLC后得到16.2mg 所需产物(TFA盐)。ESMS：C51H57N19O16计算值，1221.66；实测值， 1222.6[M+H]+1。分析HPLC，方法1B，Rt=11.43分钟，纯度=93％。
步骤C：[2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸]- Glu(环{Lys-D-Val-Arg-Gly-Asp})-环{Lys-D-Val-Arg-Gly-Asp}的 制备
向Glu(环{Lys-D-Val-Arg-Gly-Asp})-环{Lys-D-Val-Arg- Gly-Asp}(0.016g，0.01mmol)的二甲基甲酰胺(2mL)溶液中加入三 乙胺(4.2μL)，然后将反应混合物搅拌5分钟。加入2-[[[5-[[(2，5- 二氧代-1-吡咯烷基)氧基]羰基]-2-吡啶基]-亚肼基]甲基]-苯磺酸 单钠盐(0.0063g，0.014mmol)，然后将反应混合物搅拌18小时，然 后高真空浓缩得到油。将残余物通过制备RP-HPLC方法1得到所需产 物(TFA盐)。ESMS：C64H96N22O20S的计算值1524.7；实测值，1525.7 (M+H)+1。分析HPLC，方法1B，Rt=13.20分钟，纯度=99％。
实施例12
{环(Arg-D-Val-D-Tyr(N-[2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚肼基] 甲基]-苯磺酸]-3-氨基丙基)-D-Asp-Gly}的合成
步骤A：环{Arg(Tos)-D-Val-D-Tyr(N-Cbz-3-氨基丙基)-D- Asp(OBzl)-Gly}的制备
用标准脱保护方法(50％TFA的CH2Cl2溶液)除去肽序列Boc- Arg(Tos)-D-Val-D-Tyr(N-Cbz-氨基丙基)-D-Asp(OBzl)-Gly-肟树 脂的N-末端Boc-保护基。用DCM洗涤(8次)后，将树脂用10％ DIEA/DCM(2×10分钟)中和。将树脂用DCM洗涤(5次)，然后高真空 干燥过夜。然后将树脂(1.08g，0.36mmol/g)悬浮在N，N-二甲基甲酰 胺(12mL)。加入冰乙酸(67mL，1.16mmol)，然后将反应混合物于55 ℃加热72小时。将树脂过滤，用DMF(3×10mL)洗涤。将滤液高真 空浓缩得到油。将所得的油用乙酸乙酯研制。通过反相HPLC(Vydac C18柱，18至90％含有0.1％TFA的乙腈梯度，Rt=15.243分钟)纯化 所得的固体，得到101mg白色粉末状产物(30％)。ESMS：C44H57N9O12S的计算值，935.3847。实测值936.5[M+H]+1。
步骤B：环{Arg-D-Val-D-Tyr(3-氨基丙基)-D-Asp-Gly}的制备 将保护的环肽环{Arg(Tos)-D-Val-D-Tyr(N-Cbz-3-氨基丙基)- D-Asp(OBzl)-Gly}(90mg，0.0961mmoll)溶于三氟乙酸(0.95mL)， 然后在干冰/丙酮浴中冷却到-10℃。向该溶液中加入三氟甲磺酸 (0.1.16mmol)，然后加入茴香醚(190mL)。在-16℃将反应混合物搅拌 3小时。然后将干冰/丙酮浴冷却到-35℃，将冷乙醚(40mL)加到该溶 液中。将所述混合物在-35℃搅拌30分钟，然后冷却到-50℃，然后 再搅拌30分钟。将粗产物过滤，再溶解于水/乙腈(1/1)，冻干，通 过反相HPLC(Vydac C18柱，1.8至90％含有0.1％TFA的乙腈梯度， Rt=13.383分钟)纯化，得到17mg标题产物(27％)。ESMS：C29H45N9O8计 算值，647.3391实测值648.2[M+H]+1。
步骤C：{环(Arg-D-Val-D-Tyr(N-[2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基] 亚肼基]甲基]-苯磺酸]-3-氨基丙基)-D-Asp-Gly}的制备
向环{Arg-D-Val-D-Tyr(3-氨基丙基)-D-Asp-Gly}(14mg， 0.0216mmol)的N，N-二甲基甲酰胺(2mL)溶液中加入三乙胺(15mL， 0.108mmol)，然后在室温搅拌10分钟。加入2-[[[5-[[(2，5-二氧代 -1-吡咯烷基]氧基]羰基-2-吡啶基]-亚肼基]甲基-苯磺酸单钠盐 (11mg，0.0260mmol)，然后将混合物搅拌18小时。将所述混合物在 高真空下浓缩，将残余物通过反相HPLC(Vydac C18柱，1.8至90％含 有0.1％TFA的乙腈梯度，Rt=16.264分钟)纯化，得到10mg白色粉 末状产物(49％)。ESMS：C42H54N12O12S的计算值，950.3705实测值951.3 [M+H]+1。
实施例13
环{D-Lys([2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸])- D-Phe-D-Asp-Gly-Arg}的合成
步骤A：环{D-Lys(Cbz)-D-Phe-D-Asp(OBzl)-Gly-Arg(Tos)}的 制备
用标准脱保护方法(25％TFA的CH2Cl2溶液)除去肽序列Boc- Arg(Tos)-D-Lys(Cbz)-D-Phe-D-Asp(OBzl)-Gly-肟树脂的N末端 Boc-保护基。用DCM洗涤8次后，将树脂用10％DIEA/DCM处理(2×10 分钟)。随后将树脂用DCM洗涤(5次)，然后高真空干燥。将树脂(1.93g， 0.44mmol/g)悬浮在二甲基甲酰胺(15mL)中。加入冰乙酸(77μL)， 然后将反应液于60℃加热72小时。将树脂过滤，用DMF(2×10mL) 洗涤。然后在高真空下浓缩滤液得到油。将所得的油用乙酸乙酯研 制。将由此得到的固体过滤，用乙酸乙酯洗涤，然后高真空下干燥， 得到所需的产物，然后用制备RP-HPLC纯化(产量=252mg)。ESMS： C49H59N9O11S的计算值，981.40；实测值，982.3[M+H]+1。分析HPLC， 方法1A，Rt=14.577分钟。
步骤B：环{D-Lys-D-Phe-D-Asp-Gly-Arg}TFA盐的制备
将环{D-Lys-(Cbz)-D-Phe-D-Asp(OBzl)-Gly-Arg(Tos)} (0.152g，0.155mmol)溶于三氟乙酸(1.55mL)，然后冷却到-16℃。 滴加三氟甲磺酸(1.86mL)，将温度保持在-16℃。加入茴香醚 (0.31mL)，然后将反应在-16℃搅拌3小时。加入乙醚，将反应冷却 到-35℃，然后搅拌20分钟。将粗产物过滤，用乙醚洗涤，高真空干 燥，然后通过制备HPLC方法1纯化，得到69mg(～53％)为冻干固体的 所需产物(TFA盐)。ESMS：C27H41N9O7+H计算值，604.3207；实测值， 604.4。分析HPLC，方法1B，Rt=10.35分钟，纯度=93％。
步骤C：环{D-Lys([2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯 磺酸])-D-Phe-D-Asp-Gly-Arg}TFA盐的制备
将环{D-Lys-D-Phe-D-Asp-Gly-Arg}TFA盐(0.056g， 0.0673mmol)溶于DMF(2mL)。加入三乙胺(28μL，0.202mmol)，搅拌 5分钟后加入2-[[[5-[[(2，5-二氧代-1-吡咯烷基)氧基]羰基]-2-吡 啶基]亚肼基]-甲基]-苯磺酸单钠盐(0.029g，0.0673mmol)。将反应 混合物搅拌70小时，然后高真空浓缩得到油。将该油通过HPLC方法 1纯化得到14mg(78％)为冻干固体的所需产物(TFA盐)。ESMS： C40H50N12O11S+H计算值，907.3521；实测值，907.3。分析HPLC，方 法1B，Rt=14.17分钟，纯度=99％。
实施例14
[2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸]-Glu(环{D- Lys-D-Phe-D-Asp-Gly-Arg})-环{D-Lys-D-Phe-D-Asp-Gly-Arg}的 合成
步骤A：Boc-Glu(环{D-Lys-D-phe-D-Asp-Gly-Arg})-环{D- Lys-D-Phe-D-Asp-Gly-Arg}的制备
向环(D-Lys-D-Phe-D-Asp-Gly-Arg)(0.190g，0.228mmol)的二 甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入三乙胺(95μL，0.684mmol)。搅拌5分 钟后，加入Boc-Glu(OSu)-OSu(0.050g，0.114mmol)。在氮气下将反 应混合物搅拌20小时，然后高真空浓缩得到油，用乙酸乙酯研制。 将由此得到的产物过滤，用乙酸乙酯洗涤，真空干燥得到172mg所需 产物粗品。ESMS：C64H95N19O18的计算值，1417.71；实测值， 1418.7[M+H]+1。分析HPLC，方法1B，Rt=16.8分钟。
步骤B：Glu(环{D-Lys-D-Phe-D-Asp-Gly-Arg})-环{D-Lys- D-Phe-D-Asp-Gly-Arg}的制备
向Boc-Glu(环{D-Lys-D-Phe-D-ASp-Gly-Arg})-环{D-Lys-D- Phe-D-Asp-Gly-Arg}粗品(0.172g)的二氯甲烷(4.5mL)溶液中加入 三氟乙酸(4.5mL)。将反应混合物搅拌2小时，在高真空下浓缩成油， 然后用乙醚研制。将所述产物过滤，用乙醚洗涤，高真空干燥，RP- HPLC后得到38mg为冻干固体的所需产物(TFA盐)。ESMS：C59H87N19O16计算值，1317.66；实测值，1318.9[M+H]+1。分析HPLC，方法1B， Rt=13.06分钟，纯度=93％。
步骤C：[2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸]- Glu(环{D-Lys-D-Phe-D-Asp-Gly-Arg})-环(D-Lys-D-Phe-D-Asp- Gly-Arg)的制备
向Glu(环{D-Lys-D-Phe-D-Asp-Gly-Arg})-环{D-Lys-D-Phe- D-Asp-Gly-Arg)(0.025g，0.015mmol)的二甲基甲酰胺(2mL)溶液加 入三乙胺(6.3μL，0.045mmol)，然后将反应混合物搅拌5分钟。加入 2-[[[5-[[(2，5-二氧代-1-吡咯烷基)氧基]羰基)-2-吡啶基]-亚肼基] 甲基]-苯磺酸单钠盐(0.0092g，0.0210mmol)，将反应混合物搅拌18 小时，然后高真空浓缩得到油，将所述油通过制备HPLC方法1纯化， 得到12.5mg为冻干固体的所需产物(TFA盐)。ESMS：C72H96N22O20S计 算值，1620.7；实测值，1622.5(M+H)+1。分析HPLC，方法1B，Rt= =14.62分钟，纯度=96％。
实施例15
环{D-Phe-D-Lys([2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯 磺酸])-D-Asp-Gly-Arg}的合成
步骤A：环{D-Phe-D-Lys(Cbz)-D-Asp(OBzl)-Gly-Arg(Tos)} 的制备
用标准脱保护方法(25％TFA的CH2Cl2溶液)除去肽序列Boc- Arg(Tos)-D-Phe-D-Lys(Cbz)-D-Asp(OBzl)-Gly-肟树脂的N-末端 Boc-保护基。用DCM洗涤8次后，将树脂用10％DIEA/DCM(2×10分 钟)处理。随后用DCM洗涤(5次)，然后高真空下干燥。然后将树脂 (1.5g，0.44mmol/g)悬浮在二甲基甲酰胺(12mL)中。加入冰乙酸(61 μL)，然后将反应液于60℃加热72小时。将树脂过滤，用DMF(2×10mL) 洗涤。然后将滤液高真空浓缩得到油。将所得的油用乙酸乙酯研制。 将由此得到的固体过滤，用乙酸乙酯洗涤，高真空干燥得到所需的产 物(产率=370mg)。ESMS：C49H59N9O11S计算值，981.40；实测值，982.4 [M+H]+1。分析HPLC，方法1A，Rt=14.32分钟(纯度60％)。
步骤B：环{D-Phe-D-Lys-D-Asp-Gly-Arg}二TFA盐的制备 将环{D-Phe-D-Lys(Cbz)-D-Asp(OBzl)-Gly-Arg(Tos)}粗品 (0.146g)溶于三氟乙酸(1.5mL)，然后冷却到-16℃。滴加三氟甲磺 酸(1.8mL)，将温度保持在-16℃。加入茴香醚(0.3mL)，然后将方应 在-16℃搅拌3小时。加入乙醚，将反应冷却到-35℃，然后搅拌20 分钟。将粗产物过滤，用乙醚洗涤，高真空干燥，通过制备HPLC方 法1纯化，得到100mg为冻干固体的所需产物(TFA盐)。ESMS： C27H41N9O7+H计算值，604.3；实测值，604.3。分析HPLC，方法1B， Rt=10.25分钟，纯度=90％。
步骤C：环{D-Phe-D-Lys([2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚肼基] 甲基]-苯磺酸])-D-Asp-Gly-Arg}的制备
将环{D-Phe-D-Lys-D-Asp-Gly-Arg}TFA盐(0.090g， 0.108mmol)溶于DMF(2mL)。加入三乙胺(45μL，0.324mmol)，搅拌 5分钟后加入2-[[[5-[[(2，5-二氧代-1-吡咯烷基)氧基]羰基]-2-吡 啶基]亚肼基]-甲基]-苯磺酸单钠盐(0.048g，0.108mmol)。将反应混 合物搅拌70小时，然后高真空浓缩得到油。将油通过制备HPLC方法 1纯化得到10mg为冻干固体的所需产物(TFA盐)。ESMS：C40H50N12O11S+H计算值，907.4；实测值，907.3。分析HPLC，方法1B，Rt=13.47 分钟，纯度=89％。
实施例16
环{N-Me-Arg-Gly-Asp-ATA-D-Lys([2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基] 亚肼基]甲基]-苯磺酸])}的合成
步骤A：环{N-Me-Arg(Tos)-Gly-Asp(OBzl)-ATA-D-Lys(Cbz)} 的制备
用标准脱保护方法(50％TFA的CH2Cl2溶液)除去肽序列Boc- Asp(OBzl)-ATA-D-Lys(Z)-N-Me-Arg(Tos)-Gly-肟树脂的N-末端 Boc-保护基。用DCM洗涤(8次)后，将树脂用10％DIEA/DCM处理(2× 10分钟)。将树脂用DCM洗涤(5次)，然后高真空干燥过夜。将树脂 (1.24g，0.39mmol/g)悬浮在DMF(12mL)中。加入冰乙酸(67mL， 1.16mmol)，然后将反应混合物于50℃加热72小时。将树脂过滤， 然后用DMF(3×10mL)洗涤。将滤液在高真空下浓缩，得到油。将所 得的油用乙酸乙酯研制。将所得的固体通过反相HPLC(Vydac C18 柱，18至90％含有0.1％TFA的乙腈梯度，Rt=14.129分钟)纯化，得 到42mg(9％)为冻干固体的所需产物。ESMS：C46H56N10O11S2的计算值 988.3571，实测值989.4[M+H]+1。
步骤B：环{N-Me-Arg-Gly-Asp-ATA-D-Lys}的制备
将环{N-Me-Arg(Tos)-Gly-Asp(OBzl)-ATA-D-Lys(Cbz)}(36mg， 0.0364mmol)溶于三氟乙酸(0.364mL)，然后在干冰/丙酮浴中冷却到 -10℃。向该溶液中加入三氟甲磺酸(0.437mmol)，茴香醚(70mL)。将 反应混合物在-10℃搅拌3小时。然后将干冰/丙酮浴冷却到-35℃， 向该溶液中加入冷乙醚(40mL)。将所述混合物在-35℃搅拌30分钟， 然后进一步冷却到-50℃，然后再搅拌30分钟。将粗产过滤，再溶于 水/乙腈(1/1)，然后冻干得到35mg标题产物(100％)。ESMS：C24H38N10O7S的计算值，610.2646；实测值611.4[M+H]+1。
步骤C：环{N-Me-Arg-Gly-Asp-ATA-D-Lys([2-[[[5-[羰基]-2 吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸])}的制备
向环{N-Me-Arg-Gly-Asp-ATA-D-Lys}(31mg，0.05lmmol)的 DMF(2mL)溶液中加入三乙胺(28mL，0.204mmol)，然后将反应混合物 在室温搅拌10分钟。加入2-[[[5-[[(2，5-二氧代-1-吡咯烷基)-氧 基]羰基-2-吡啶基]亚肼基]甲基-苯磺酸单钠盐(27mg， 0.0612mmol)，然后将混合物搅拌18小时，然后高真空浓缩。将所得 残余物通过反相HPLC(Shandon HS-BDS柱，3至10％乙腈，Rt=13.735 分钟)纯化，得到4mg(8.8％)为冻干固体的所需产物。ESMS： C37H47N13O11S2的计算值，913.2959实测值914.5[M+H]+1。
实施例17
环{Cit-Gly-Asp-D-Phe-Lys([2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚肼 基]甲基]-苯磺酸])}的合成
步骤A：环{Cit-Gly-AsP(OtBu)-D-Phe-Lys(Boc)}的制备
用Fmoc化学方法(参见一般方法)，通过自动固相肽合成得到肽 Asp(OtBu)-D-Phe-Lys(Boc)-Cit-Gly。向100mL圆底烧瓶中加入 HBTU(271mg，0.71mmol)和DMF(10mL)。将该溶液在60℃搅拌5分 钟。向该溶液中加入Asp(OtBu)-D-Phe-Lys(Boc)-Cit-Gly(0.456g) 和Hunig’s碱(0.27mL，1.53mmol)的DMF(10mL)溶液，然后在氮气 下，将该溶液60℃搅拌4小时。然后真空除去溶剂，将残余物用乙酸 乙酯研制。将固体过滤，用乙酸乙酯洗涤(3×6mL)，然后真空下干 燥，得到所需产物(305mg，78％)。ESMS：C36H56N8O10计算值，760.4；实 测值，761.4[M+H)+1。分析HPLC，方法1A，Rt：11.8分钟(纯度 99％)。
步骤B：环{Cit-Gly-Asp(OtBu)-D-Phe-Lys(Boc)}的制备
在氮气下，将环{Cit-Gly-Asp(OtBu)-D-Phe-Lys(Boc)}(287mg， 0.38mmol)、TFA(6mL)、三异丙基硅烷(0.25mL)和水(0.25mL)的溶液 在室温搅拌4小时。真空除去溶剂(经3小时)，然后将残余物用乙醚 研制，过滤，用乙醚洗涤，得到所需产物(315mg)(TFA盐)。ESMS： C27H40N8O8计算值，604.3；实测值，605.4[M+H]+1。分析HPLC，方法 1B，Rt=9.6分钟，纯度=97％。
步骤C：环{Cit-Gly-Asp-D-Phe-Lys([2-[[[5-[羰基]-2-吡啶 基]亚肼基]甲基]-苯磺酸])}的制备
将环{Cit-Gly-Asp-D-Phe-Lys}TFA盐(0.044g)溶于 DMF(2mL)。加入三乙胺(22μL，0.156mmol)，搅拌5分钟后加入2- [[[5-[[(2，5-二氧代-1-吡咯烷基)氧基]羰基]-2-吡啶基]亚肼基]- 甲基]-苯磺酸单钠盐(0.032g，0.073mmol)。在氮气下，将反应混合 物搅拌过夜，然后在高真空下浓缩。将残余物通过制备RP-HPLC方法 1纯化，得到37mg(70％)为冻干固体的所需产物(TFA盐)。ESMS： C40H49N12O12S计算值，907.3；实测值，908.4[M+H]+L分析HPLC，方 法1B，Rt=14.15分钟，纯度=99％。
实施例18A
三(叔-丁基)-1，4，7，10-四氮杂环十二烷-1，4，7，10-四乙酸的合 成
步骤A：制备2-(1，4，7，10-四氮杂-4，7，10-三(((叔丁基)氧基 羰基)甲基)环十二烷基)-乙酸苯基甲基酯
在氮气下，将(1，4，7，10-四氮杂-4，7-二(((叔-丁基)氧基羰基) 甲基)环十二烷基)乙酸叔丁基酯(0.922g，1.79mmol)，TEA(1.8mL) 和苄基溴乙酸酯(0.86mL，5.37mmol)的无水DMF(24mL)溶液在室温搅 拌24小时。真空除去DMF，然后将所得的油溶于EtOAc(300mL)。将 该溶液依次用水(2×50mL)和饱和NaCl(50mL)洗涤，干燥(MgSO4)， 浓缩得到为无定形固体的标题化合物(1.26g)。MS：m/e 663.5[M+H]。
步骤B：2-(1，4，7，10-四氮杂-4，7，10-三(((叔-丁基)氧基羰 基)甲基)环十二烷基)乙酸的制备
将上述步骤A的产物(165mg，0.25mmol）用10％Pd碳(50mg)在 EtOH(15mL)中于60psi氢化24小时。过滤除去催化剂，用EtOH洗 涤。将滤液浓缩，得到无定形固体状标题化合物(134mg，94％)。MS：m/e 573.5[M+H]。
实施例18
2-(1，4，7，10-四氮杂-4，7，10-三(羧基甲基)-1-环十二烷基)乙 酰基-Glu(环{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe})-环{Lys-Arg-Gly-Asp-D- Phe}的合成
步骤A：2-(1，4，7，10-四氮杂-4，7，10-三(叔丁氧羰基甲基)-1- 环十二烷基)乙酰基-Glu(环{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe})-环{Lys- Arg-Gly-Asp-D-Phe}的制备
向三(叔丁基)-1，4，7，10-四-氮杂环十二烷-1，4，7，10-四乙酸 (28mg，0.049mmol)和Hunig’s碱(14μL)的DMF(2mL)溶液中加入 HBTU(17mg，0.0456mmol)，然后将混合物搅拌5分钟。向其中加入 Glu(环{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe})-环{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe} (54.1mg，0.0326mmol)的DMF(1mL)溶液，然后在氮气下，将反应混 合物室温搅拌4小时。真空除去溶剂，将残余物通过制备RP-HPLC纯 化，得到为冻干固体的产物(18.3mg)(TFA盐)。ESMS：C87H137N23O23计 算值，1872.0；实测值，937.2[M+2H]+2。分析HPLC，方法1B，Rt= 19.98分钟，纯度=99％。
步骤B：2-(1，4，7，10-四氮杂-4，7，10-三(羧基甲基)-1-环十 二烷基)乙酰基-Glu(环{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe})-环{Lys-Arg- Gly-Asp-D-Phe}的制备
将2-(1，4，7，10-四氮杂-4，7，10-三(叔丁氧基羰基甲基)-1-环 十二烷基)乙酰基-Glu(环{Lys-Arg-Gly-Asp-D-Phe})-环{Lys-Arg- Gly-Asp-D-Phe}(18.3mg，8.71mmol)的TFA(3mL)溶液在氮气氛下室 温搅拌5小时。将溶液真空浓缩并将残余物通过制备RP-HPLC纯化得 到8mg(45％)为冻干固体的所需产物(TFA盐)。ESMS：计算值 C75H113N23O23，1703.8；实测值，853.0[M+2H]+2。分析HPLC，方法1B， Rt=13.13分钟，纯度=99％。
实施例19
环{Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys(DTPA)}的合成
向环{Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys}(0.050g，0.0601mmol)的DMF (2mL)溶液中加入三乙胺(41.9μL，0.301mmol)。将该溶液在4小时 内滴加到二亚乙基三胺五乙酸二酸酐(0.1074g，0.301mmol)的 DMF(2mL)和甲基亚砜(2mL)溶液中。将反应混合物搅拌16小时，然后 高真空浓缩得到油，将其通过制备HPLC方法1纯化得到29.9mg(46％) 所需产物，为冻干的固体。ESMS：计算值C41H62N12O16，978.4；实测值， 977.5(M-H+)。分析HPLC，方法1B，Rt=11.916分钟。纯度=100％。
实施例20
环{Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys}2(DTPA)的合成
实施例9中制得的油在通过制备HPLC方法1纯化的过程中还得 到21.5mg(21％)标题产物，为冻干的固体。ESMS：计算值C68H101N21O221563.7；实测值，1562.8(M-H+)。分析HPLC，方法1B，Rt=15.135 分钟，纯度=93％。
实施例21
环{Arg-Gly-Asp-D-Tyr(N-DTPA-3-氨基丙基)-Val}的合成
向环{Arg-Gly-Asp-D-Tyr(3-氨基丙基)-Val}(0.050g， 0.0571mmol)的二甲基甲酰胺(2mL)溶液中加入三乙胺(39.8μL， 0.286mmol)。将该溶液在5小时内滴加到二亚乙基三胺五乙酸二酸酐 (0.1020g，0.286mmol)的甲基亚砜(2mL)溶液中。将反应混合物搅拌 18小时，然后高真空浓缩得到油，将其通过制备HPLC方法1纯化得 到41.9mg(65％)为冻干固体的所需产物。ESMS：计算值C43H60N12O17， 1022.5；实测值，1021.4(M-H+)。分析HPLC，方法1B，Rt=15.690 分钟，纯度=96％。
实施例22
环{Orn{d-N-2-咪唑啉基)-Gly-Asp-D-Tyr(N-[2-[[[5-[羰基]- 2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸)-3-氨基丙基)-Val}的合成
步骤A：环{0rn(d-N-1-Tos-2-咪唑啉基)-Gly-Asp(OBzl)-D- Tyr(N-Cbz-3-氨基丙基)-Val}的制备
将肽序列Boc-Asp(OBzl)-D-Tyr(N-Cbz-氨基丙基)-Val-Orn(d- N-1-Tos-2-咪唑啉基)-Gly-肟树脂的N-末端Boc-保护基用常规的脱 保护方法(25％TFA的CH2Cl2溶液)脱除。用DCM洗涤8次后，将树脂 用10％DIEA/DCM处理(2×10分钟)。将树脂用DCM洗涤(5次)然后 高真空干燥。将树脂(1.75g，0.55mmol/g)悬浮在二甲基甲酰胺(15mL) 中。加入冰乙酸(55.0μL，0.961mmol)，将反应混合物于50℃加热72 小时。将树脂过滤，用DMF洗涤(2×10mL)。将滤液高真空浓缩得到 油。将得到的油用乙酸乙酯研制。滤出固体，用乙酸乙酯洗涤然后高 真空干燥得到所需产物。
步骤B：环{Orn(d-N-2-咪唑啉基)-Gly-Asp-D-Tyr(3-氨基丙 基)-Val}三氟乙酸盐的制备。
将环{Orn(d-N-1-Tos-2-咪唑啉基)-Gly-Asp(OBzl)-D-Tyr(N- Cbz-3-氨基丙基)-Val}(0.146mmol)溶于三氟乙酸(0.6mL)并冷却至 -10℃。滴加三氟甲磺酸(0.5mL)，保持温度在-10℃。加入茴香醚 (0.1mL)并将反应混合物于-10℃搅拌3小时。加入乙醚，将反应混合 物冷却至-35℃然后搅拌30分钟。将反应混合物进一步冷却至-50℃ 并搅拌30分钟。滤出粗产物，用乙醚洗涤，高真空干燥，通过制备 HPLC纯化得到所需产物。
步骤C：环{Orn(d-N-2-咪唑啉基)-Gly-Asp-D-Tyr(N-[2-[[[5- [羰基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸]-3-氨基丙基)-Val}的制备
将环{Orn(d-N-2-咪唑啉基)-Gly-Asp-D-Tyr(3-氨基丙基)-Val} 三氟乙酸盐(0.0228mmol)溶于DMF(1mL)。加入三乙胺 (0.0648mmol)，搅拌5分钟后加入2-[[[5-[[(2，5-二氧代-1-吡咯烷 基)氧基]羰基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸单钠盐 (0.0274mmol)。将反应混合物搅拌1-2天，然后高真空浓缩得到油。 将该油通过制备HPLC纯化得到所需产物。
实施例23
环{Lys-Gly-Asp-D-Tyr(N-[2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚肼基] 甲基]-苯磺酸]-3-氨基丙基)-Val}的合成
步骤A：环{Lys(Tfa)-Gly-Asp(OBzl)-D-Tyr(N-Cbz-3-氨基丙 基)-Val}的制备
将肽序列Boc-Asp(OBzl)-D-Tyr(N-Cbz-氨基丙基)-Val- Lys(Tfa)-Gly-肟树脂的N-末端Boc-保护基用常规的脱保护方法 (25％TFA的CH2Cl2溶液)脱除。用DCM洗涤8次后，将树脂用10％ DIEA/DCM处理(2×10分钟)。将树脂用DCM洗涤(5次)然后高真空 干燥。将树脂(1.75g，0.55mmol/g)悬浮在二甲基甲酰胺(15mL)中。 加入冰乙酸(55.0μL，0.961mmol)，将反应混合物于50℃加热72小 时。将树脂过滤，用DMF洗涤(2×10mL)。将滤液高真空浓缩得到油。 将得到的油用乙酸乙酯研制。滤出得到的固体，用乙酸乙酯洗涤然后 高真空干燥得到所需产物。
步骤B：环{Lys(Tfa)-Gly-Asp-D-Tyr(3-氨基丙基)-Val}三氟乙 酸盐的制备。
将环(Lys(Tfa)-Gly-Asp(OBzl)-D-Tyr(N-Cbz-3-氨基丙基)- Val}(0.146mmol)溶于三氟乙酸(0.6mL)并冷却至-10℃。滴加三氟甲 磺酸(0.5mL)，保持温度在-10℃。加入茴香醚(0.1mL)并将反应混合 物于-10℃搅拌3小时。加入乙醚，将反应混合物冷却至-35℃然后搅 拌30分钟。将反应混合物进一步冷却至-50℃并搅拌30分钟。滤出 粗产物，用乙醚洗涤，高真空干燥，通过制备HPLC纯化得到所需产 物。
步骤C：环{Lys-Gly-Asp-D-Tyr(N-[2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基] 亚肼基]甲基]-苯磺酸]-3-氨基丙基]-Val}的制备
将环{Lys(Tfa)-Gly-Asp-D-Tyr(3-氨基丙基)-Val}三氟乙酸盐 (0.0228mmol)溶于DMF(1mL)。加入三乙胺(0.0648mmol)，搅拌5分 钟后加入2-[[[5-[[(2，5-二氧代-1-吡咯烷基)氧基]羰基]-2-吡啶 基]亚肼基]甲基]-苯磺酸单钠盐(0.0274mmol)。将反应混合物搅拌 1-2天，然后高真空浓缩得到油。将该油用20％哌啶的DMF溶液处理， 然后将粗产物通过制备HPLC纯化得到所需产物。
实施例24
环{Cys(2-氨基乙基)-Gly-Asp-D-Tyr(N-[2-[[[5-[羰基]-2-吡 啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸]-3-氨基丙基)-Val}的合成
步骤A：环{Cys(2-N-Tfa-氨基乙基)-Gly-Asp(OBzl)-D-Tyr(N- Cbz-3-氨基丙基)-Val}的制备
将肽序列Boc-Asp(OBzl)-D-Tyr(N-Cbz-氨基丙基)-Val-Cys(2- N-Tfa-氨基乙基)-Gly-肟树脂的N-末端Boc-保护基用常规的脱保护 方法(25％TFA的CH2Cl2溶液)脱除。用DCM洗涤8次后，将树脂用10％ DIEA/DCM处理(2×10分钟)。将树脂用DCM洗涤(5次)然后高真空 干燥。将树脂(1.75g，0.55mmol/g)悬浮在二甲基甲酰胺(15mL)中。 加入冰乙酸(55.0μL，0.961mmol)，将反应混合物于50℃加热72小 时。将树脂过滤，用DMF洗涤(2×10mL)。将滤液高真空浓缩得到油。 将得到的油用乙酸乙酯研制。滤出得到的固体，用乙酸乙酯洗涤然后 高真空干燥得到所需产物。
步骤B：环{Cys(2-N-Tfa-氨基乙基)-Gly-Asp-D-Tyr(3-氨基丙 基)-Val}三氟乙酸盐的制备。
将环{Cys(2-N-Tfa-氨基乙基)-Gly-Asp(OBzl)-D-Tyr(N-Cbz- 3-氨基丙基)-Val}(0.146mmol)溶于三氟乙酸(0.6mL)并冷却至-10 ℃。滴加三氟甲磺酸(0.5mL)，保持温度在-10℃。加入茴香醚(0.1mL) 并将反应混合物于-10℃搅拌3小时。加入乙醚，将反应混合物冷却 至-35℃然后搅拌30分钟。将反应混合物进一步冷却至-50℃并搅拌 30分钟。滤出粗产物，用乙醚洗涤，高真空干燥，通过制备HPLC纯 化得到所需产物。
步骤C：环{Cys(2-氨基乙基)-Gly-Asp-D-Tyr(N-[2-[[[5-[羰 基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸]-3-氨基丙基)-Val}的制备
将环{Cys(2-N-Tfa-氨基乙基)-Gly-Asp-D-Tyr(3-氨基丙基)- Val}三氟乙酸盐(0.0228mmol)溶于DMF(1mL)。加入三乙胺(9.5μL， 0.0648mmol)，搅拌5分钟后加入2-[[[5-[[(2，5-二氧代-1-吡咯烷 基)氧基]羰基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸单钠盐(0.0121g， 0.0274mmol)。将反应混合物搅拌1-2天，然后高真空浓缩得到油。 将该油用20％哌啶的DMF溶液处理，然后将粗产物通过制备HPLC纯化 得到所需产物。
实施例25
环{高Lys-Gly-Asp-D-Tyr(N-[2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚肼 基]甲基]-苯磺酸]-3-氨基丙基)-Val}的合成
步骤A：环{高Lys(Tfa)-Gly-Asp(OBzl)-D-Tyr(N-Cbz-3-氨基 丙基)-Val}的制备
将肽序列Boc-Asp(OBzl)-D-Tyr(N-Cbz-氨基丙基)-Val-高 Lys(Tfa)-Gly-肟树脂的N-末端Boc-保护基用常规的脱保护方法 (25％TFA的CH2Cl2溶液)脱除。用DCM洗涤8次后，将树脂用10％ DIEA/DCM处理(2×10分钟)。将树脂用DCM洗涤(5次)然后高真空 干燥。将树脂(1.75g，0.55mmol/g)悬浮在二甲基甲酰胺(15mL)中。 加入冰乙酸(55.0μL，0.961mmol)，将反应混合物于50℃加热72小 时。将树脂过滤，用DMF洗涤(2×10mL)。将滤液高真空浓缩得到油。 将得到的油用乙酸乙酯研制。滤出得到的固体，用乙酸乙酯洗涤然后 高真空干燥得到所需产物。
步骤B：环{高Lys(Tfa)-Gly-Asp-D-Tyr(3-氨基丙基)-Val}三 氟乙酸盐的制备。
将环{高Lys(Tfa)-Gly-Asp(OBzl)-D-Tyr(N-Cbz-3-氨基丙基)- Val}(0.146mmol)溶于三氟乙酸(0.6mL)并冷却至-10℃。滴加三氟甲 磺酸(0.5mL)，保持温度在-10℃。加入茴香醚(0.1mL)并将反应混合 物于-10℃搅拌3小时。加入乙醚，将反应混合物冷却至-35℃然后搅 拌30分钟。将反应混合物进一步冷却至-50℃并搅拌30分钟。滤出 粗产物，用乙醚洗涤，高真空干燥，通过制备HPLC纯化得到所需产 物。
步骤C：环{高Lys-Gly-Asp-D-Tyr(N-[2-[[[5-[羰基]-2-吡啶 基]亚肼基]甲基]-苯磺酸]-3-氨基丙基)-Val}的制备。
将环{高Lys(Tfa)-Gly-Asp-D-Tyr(3-氨基丙基)-Val}三氟乙酸 盐(0.0228mmol)溶于DMF(1mL)。加入三乙胺(9.5μL，0.0648mmol)， 搅拌5分钟后加入2-[[[5-[[(2，5-二氧代-1-吡咯烷基)氧基]羰 基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸单钠盐(0.0121g， O.0274mmol)。将反应混合物搅拌1-2天，然后高真空浓缩得到油。 将该油用20％哌啶的DMF溶液处理，然后将粗产物通过制备HPLC纯化 得到所需产物。
实施例26
环{Orn(d-N-苄基氨基甲酰基)-Gly-Asp-D-Tyr(N-[2-[[[5-[羰 基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸]-3-氨基丙基)-Val}的合成
步骤A：环{Orn(d-N-苄基氨基甲酰基)-Gly-Asp(OBzl)-D- Tyr(N-Cbz-3-氨基丙基)-Val}的制备
将肽序列Boc-Asp(OBzl)-D-Tyr(N-Cbz-氨基丙基)-Val-Orn(d- N-苄基氨基甲酰基)-Gly-肟树脂的N-末端Boc-保护基用常规的脱保 护方法(25％TFA的CH2Cl2溶液)脱除。用DCM洗涤8次后，将树脂用 10％DIEA/DCM处理(2×10分钟)。将树脂用DCM洗涤(5次)然后高 真空干燥。将树脂(1.75g，0.55mmol/g)悬浮在二甲基甲酰胺(15mL) 中。加入冰乙酸(55.0μL，0.961mmol)，将反应混合物于50℃加热72 小时。将树脂过滤，用DMF洗涤(2×10mL)。将滤液高真空浓缩得到 油。将得到的油用乙酸乙酯研制。滤出得到的固体，用乙酸乙酯洗涤 然后高真空干燥得到所需产物。
步骤B：环{Orn(d-N-苄基氨基甲酰基)-Gly-Asp-D-Tyr(3-氨基 丙基)-Val}三氟乙酸盐的制备。
将环{Orn(d-N-苄基氨基甲酰基)-Gly-Asp(OBzl)-D-Tyr(N- Cbz-3-氨基丙基)-Val}(0.146mmol)溶于三氟乙酸(0.6mL)并冷却至 -10℃。滴加三氟甲磺酸(0.5mL)，保持温度在-10℃。加入茴香醚 (0.1mL)并将反应混合物于-10℃搅拌3小时。加入乙醚，将反应混合 物冷却至-35℃然后搅拌30分钟。将反应混合物进一步冷却至-50℃ 并搅拌30分钟。滤出粗产物，用乙醚洗涤，高真空干燥，通过制备 HPLC纯化得到所需产物。
步骤C：环{Orn(d-N-苄基氨基甲酰基)-Gly-Asp-D-Tyr(N-[2- [[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸]-3-氨基丙基)-Val} 的制备
将环{Orn(d-N-苄基氨基甲酰基)-Gly-Asp-D-Tyr(3-氨基丙基)- Val}三氟乙酸盐(0.0228mmol)溶于DMF(1mL)。加入三乙胺(9.5μL， 0.0648mmol)，搅拌5分钟后加入2-[[[5-[[(2，5-二氧代-1-吡咯烷 基)氧基]羰基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸单钠盐(0.0121g， O.0274mmol)。将反应混合物搅拌1-2天，然后高真空浓缩得到油。 将该油通过制备HPLC纯化得到所需产物。
实施例27
环{Dap(b-(2-苯并咪唑基乙酰基))-Gly-Asp-D-Tyr(N-[2- [[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸]-3-氨基丙基)-Val} 的合成
步骤A：制备环{Dap(b-(1-Tos-2-苯并咪唑基乙酰基))-Gly- Asp(OBzl)-D-Tyr(N-Cbz-3-氨基丙基)-Val}
将肽序列Boc-Asp(OBzl)-D-Tyr(N-Cbz-氨基丙基)-Val-Dap(b- (1-Tos-2-苯并咪唑基乙酰基))-Gly-肟树脂的N-末端Boc-保护基用 常规的脱保护方法(25％TFA的CH2Cl2溶液)脱除。用DCM洗涤8次后， 将树脂用10％DIEA/DCM处理(2×10分钟)。将树脂用DCM洗涤(5 次)然后高真空干燥。将树脂(1.75g，0.55mmol/g)悬浮在二甲基甲酰 胺(15mL)中。加入冰乙酸(55.0μL，0.961mmol)，将反应混合物于50 ℃加热72小时。将树脂过滤，用DMF洗涤(2×10mL)。将滤液高真 空浓缩得到油。将得到的油用乙酸乙酯研制。滤出得到的固体，用乙 酸乙酯洗涤然后高真空干燥得到所需产物。
步骤B：环{Dap(b-(2-苯并咪唑基乙酰基))-Gly-Asp-D-Tyr(3- 氨基丙基)-Val}三氟乙酸盐的制备
将环{Dap(b-(1-Tos-2-苯并咪唑基乙酰基))-Gly-Asp(OBzl)- D-Tyr(N-Cbz-3-氨基丙基)-Val}(0.146mmol)溶于三氟乙酸(0.6mL) 并冷却至-10℃。滴加三氟甲磺酸(0.5mL)，保持温度在-10℃。加入 茴香醚(0.1mL)并将反应混合物于-10℃搅拌3小时。加入乙醚，将反 应混合物冷却至-35℃然后搅拌30分钟。将反应混合物进一步冷却至 -50℃并搅拌30分钟。滤出粗产物，用乙醚洗涤，高真空干燥，通过 制备HPLC纯化得到所需产物。
步骤C：环{Dap(b-(2-苯并咪唑基乙酰基))-Gly-Asp-D-Tyr(N- [2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸]-3-氨基丙基)- Val}的制备
将环{Dap(b-(2-苯并咪唑基乙酰基))-Gly-Asp-D-Tyr(3-氨基丙 基)-Val}三氟乙酸盐(0.0228mmol)溶于DMF(1mL)。加入三乙胺 (9.5μL，0.0648mmol)，搅拌5分钟后加入2-[[[5-[[(2，5-二氧代- 1-吡咯烷基)氧基]羰基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸单钠盐 (0.0121g，0.0274mmol)。将反应混合物搅拌1-2天，然后高真空浓 缩得到油。将该油通过制备HPLC纯化得到所需产物。
实施例28
环{Orn(d-N-2-咪唑啉基)-Gly-Asp-D-Phe-Lys(N-[2-[[[5-[羰 基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸])}的合成
步骤A：环{Orn(d-N-1-Tos-2-咪唑啉基)-Gly-Asp(OBzl)-D- Phe-Lys(Cbz)}的制备
将肽序列Boc-Asp(OBzl)-D-Phe-Lys(Z)-Orn(d-N-1-Tos-2-咪 唑啉基)-Gly-肟树脂的N-末端Boc-保护基用常规的脱保护方法 (25％TFA的CH2Cl2溶液)脱除。用DCM洗涤8次后，将树脂用10％ DIEA/DCM处理(2×10分钟)。将树脂用DCM洗涤(5次)然后高真空 干燥。将树脂(1.75g，0.55mmol/g)悬浮在二甲基甲酰胺(15mL)中。 加入冰乙酸(55.0μL，0.961mmol)，将反应混合物于50℃加热72小 时。将树脂过滤，用DMF洗涤(2×10mL)。将滤液高真空浓缩得到油。 将得到的油用乙酸乙酯研制。滤出得到的固体，用乙酸乙酯洗涤然后 高真空干燥得到所需产物。
步骤B：环{Orn(d-N-2-咪唑啉基)-Gly-Asp-D-Phe-Lys}的制备
将环{Orn(d-N-1-Tos-2-咪唑啉基)-Gly-Asp(OBzl)-D-Phe- Lys(Cbz)}(0.204mmol)溶于三氟乙酸(0.6mL)并冷却至-10℃。滴加 三氟甲磺酸(0.5mL)，保持温度在-10℃。加入茴香醚(0.1mL)并将反 应混合物于-10℃搅拌3小时。加入乙醚，将反应混合物冷却至-50℃ 并搅拌1小时。滤出粗产物，用乙醚洗涤，高真空干燥，通过制备HPLC 纯化得到所需产物。
步骤C：环{Orn(d-N-2-咪唑啉基)-Gly-Asp-D-Phe-Lys(N-[2- [[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸])}的制备
将环{Orn(d-N-2-咪唑啉基)-Gly-Asp-D-Phe-Lys}TFA盐 (0.0481mmol)溶于DMF(2mL)。加入三乙胺(20.1μL，0.144mmol)， 搅拌5分钟后加入2-[[[5-[[(2，5-二氧代-1-吡咯烷基)氧基]羰 基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸单钠盐(0.0254g， 0.0577mmol)。将反应混合物搅拌20小时然后高真空浓缩得到油。将 该油通过制备HPLC纯化得到所需产物。
实施例29
环{Orn(d-N-苄基氨基甲酰基)-Gly-Asp-D-Phe-Lys(N-[2- [[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸])}的合成
步骤A：环{Orn(d-N-苄基氨基甲酰基)-Gly-Asp(OBzl)-D-Phe- Lys(Cbz)}的制备
将肽序列Boc-Asp(OBzl)-D-Phe-Lys(Z)-Orn(d-N-苄基氨基甲 酰基)-Gly-肟树脂的N-末端Boc-保护基用常规的脱保护方法 (25％TFA的CH2Cl2溶液)脱除。用DCM洗涤8次后，将树脂用10％ DIEA/DCM处理(2×10分钟)。将树脂用DCM洗涤(5次)然后高真空 干燥。将树脂(1.75g，0.55mmol/g)悬浮在二甲基甲酰胺(15mL)中。 加入冰乙酸(55.0μL，0.961mmol)，将反应混合物于50℃加热72小 时。将树脂过滤，用DMF洗涤(2×10mL)。将滤液高真空浓缩得到油。 将得到的油用乙酸乙酯研制。滤出得到的固体，用乙酸乙酯洗涤然后 高真空干燥得到所需产物。
步骤B：环{Orn(d-N-苄基氨基甲酰基)-Gly-Asp-D-Phe-Lys}的 制备
将环{Orn(d-N-苄基氨基甲酰基)-Gly-Asp(OBzl)-D-Phe- Lys(Cbz)}(0.204mmol)溶于三氟乙酸(0.6mL)并冷却至-10℃。滴加 三氟甲磺酸(0.5mL)，保持温度在-10℃。加入茴香醚(0.1mL)并将反 应混合物于-10℃搅拌3小时。加入乙醚，将反应混合物冷却至-50℃ 并搅拌1小时。滤出粗产物，用乙醚洗涤，高真空干燥，通过制备HPLC 纯化得到所需产物。
步骤C：环{Orn(d-N-苄基氨基甲酰基)-Gly-Asp-D-Phe-Lys(N- [2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸])}的制备
将环{Orn(d-N-苄基氨基甲酰基)-Gly-Asp-D-Phe-Lys}TFA盐 (0.0481mmol)溶于DMF(2mL)。加入三乙胺(20.1μL，0.144mmol)， 搅拌5分钟后加入2-[[[5-[[(2，5-二氧代-1-吡咯烷基)氧基]羰 基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸单钠盐(0.0254g， 0.0577mmol)。将反应混合物搅拌20小时然后高真空浓缩得到油。将 该油通过制备HPLC纯化得到所需产物。
实施例30
环{Lys-D-Val-D-Tyr(N-[2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚肼基]甲 基]-苯磺酸]-3-氨基丙基)-D-Asp-Gly}的合成
步骤A：环{Lys(Tfa)-D-Val-D-Tyr(N-Cbz-3-氨基丙基)-D- Asp(OBzl)-Gly}的制备
将肽序列Boc-Lys(Tfa)-D-Val-D-Tyr(N-Cbz-氨基丙基)-D- Asp(OBzl)-Gly-肟树脂的N-末端Boc-保护基用常规的脱保护方法 (50％TFA的CH2Cl2溶液)脱除。用DCM洗涤(8次)后，将树脂用10％ DIEA/DCM中和(2×10分钟)。将树脂用DCM洗涤(5次)然后高真空 干燥过夜。将树脂(1.0g，约0.36mmol/g)悬浮在N，N-二甲基甲酰胺 (12mL)中。加入冰乙酸(67mL，1.16mmol)，将反应混合物于55℃加 热72小时。将树脂过滤，用DMF洗涤(3×10mL)。将滤液高真空浓 缩得到油。将得到的油用乙酸乙酯研制。将所需产物通过反相HPLC 纯化。
步骤B：环{Lys-D-Val-D-Tyr(3-氨基丙基)-D-Asp-Gly}三氟乙 酸盐的制备
将保护的环状肽环{Lys(Tfa)-D-Val-D-Tyr(N-Cbz-3-氨基丙 基)-D-Asp(OBzl)-Gly}(0.10mmol)溶于三氟乙酸(0.95mL)并在干冰 /丙酮浴中冷却至-10℃。向该溶液中加入三氟甲磺酸(0.12mmol)，然 后加入茴香醚(190mL)。将反应混合物于-16℃搅拌3小时。然后将干 冰/丙酮浴冷却至-35℃并向该溶液中加入冷的乙醚(40mL)。将混合物 于-35℃搅拌30分钟，然后冷却至-50℃继续搅拌30分钟。滤出粗产 物，溶于水/乙腈(1/1)，冷冻干燥，通过反相HPLC纯化得到所需产 物。
步骤C：环{Lys-D-Val-D-Tyr(N-[2-[[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚 肼基]甲基]-苯磺酸]-3-氨基丙基)-D-Asp-Gly}的制备
向环{Lys(Tfa)-D-Val-D-Tyr(3-氨基丙基)-D-Asp-Gly} (0.0216mmol)的N，N-二甲基甲酰胺(2mL)溶液中加入三乙胺(15mL， 0.108mmol)然后室温搅拌10分钟。加入2-[[[5-[[(2，5-二氧代-1- 吡咯烷基)氧基]羰基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸单钠盐 (0.0260mmol)，然后将混合物搅拌18小时。将混合物高真空浓缩， 将得到油用20％哌啶的DMF溶液处理，然后再次真空浓缩。将残余物 通过反相HPLC纯化得到所需产物。
实施例31
环{Orn(d-N-苄基氨基甲酰基)-D-Val-D-Tyr(N-(2-[[[5-[羰 基]-2-吡啶基)亚肼基]甲基]-苯磺酸]-3-氨基丙基)-D-Asp-Gly}的 合成
步骤A：环{Orn(d-N-苄基氨基甲酰基)-D-Val-D-Tyr(N-Cbz-3- 氨基丙基)-D-Asp(OBzl)-Gly}的制备
将肽序列Boo-Orn(d-N-苄基氨基甲酰基)-D-Val-D-Tyr(N-Cbz- 氨基丙基)-D-Asp(OBzl)-Gly-肟树脂的N-末端Boc-保护基用常规的 脱保护方法(50％TFA的CH2Cl2溶液)脱除。用DCM洗涤(8次)后，将树 脂用10％DIEA/DCM中和(2×10分钟)。将树脂用DCM洗涤(5次)然 后高真空干燥过夜。将树脂(1.0g，约0.36mmol/g)悬浮在N，N-二甲 基甲酰胺(12mL)中。加入冰乙酸(67mL，1.16mmol)并将反应混合物于 55℃加热72小时。将树脂过滤，用DMF洗涤(3×10mL)。将滤液高 真空浓缩得到油。将得到的油用乙酸乙酯研制。将所需产物通过反相 HPLC纯化。
步骤B：环{Orn{d-N-苄基氨基甲酰基)-D-Val-D-Tyr(3-氨基丙 基)-D-Asp-Gly}三氟乙酸盐的制备
将保护的环状肽环{Orn(d-N-苄基氨基甲酰基)-D-Val-D-Tyr(N- Cbz-3-氨基丙基)-D-Asp(OBzl)-Gly}(0.10mmol)溶于三氟乙酸 (0.95mL)并在干冰/丙酮浴中冷却至-10℃。向该溶液中加入三氟甲磺 酸(0.12mmol)，然后加入茴香醚(190mL)。将反应混合物于-16℃搅拌 3小时。然后将干冰/丙酮浴冷却至-35℃并向该溶液中加入冷的乙醚 (40mL)。将混合物于-35℃搅拌30分钟，然后冷却至-50℃继续搅拌 30分钟。滤出粗产物，溶于水/乙腈(1/1)，冷冻干燥，通过反相HPLC 纯化得到所需产物。
步骤C：环{Orn(d-N-苄基氨基甲酰基)-D-Val-D-Tyr(N-[2- [[[5-[羰基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸]-3-氨基丙基)-D- Asp-Gly}的制备
向环{Orn(d-N-苄基氨基甲酰基)-D-Val-D-Tyr(3-氨基丙基)-D- Asp-Gly}(0.0216mmol)的N，N-二甲基甲酰胺(2mL)溶液中加入三乙 胺(15mL，0.108mmol)然后室温搅拌10分钟。加入2-[[[5-[[(2，5- 二氧代-1-吡咯烷基)氧基]羰基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸单 钠盐(0.0260mmol)，然后将混合物搅拌18小时。将混合物高真空浓 缩并将残余物通过反相HPLC纯化得到所需产物。
实施例32
环{Orn(d-N-2-咪唑啉基)-D-Val-D-Tyr(N-[2-[[[5-[羰基]-2- 吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸]-3-氨基丙基)-D-Asp-Gly}的合成
步骤A：环{Orn(d-N-1-Tos-2-咪唑啉基)-D-Val-D-Tyr(N-Cbz- 3-氨基丙基)-D-Asp(OBzl)-Gly}的制备
将肽序列Boc-Orn(d-N-1-Tos-2-咪唑啉基)-D-Val-D-Tyr(N- Cbz-氨基丙基)-D-Asp(OBzl)-Gly-肟树脂的N-末端Boc-保护基用常 规的脱保护方法(50％TFA的CH2Cl2溶液)脱除。用DCM洗涤(8次)后， 将树脂用10％DIEA/DCM中和(2×10分钟)。将树脂用DCM洗涤(5 次)然后高真空干燥过夜。将树脂(1.0g，约0.36mmol/g)悬浮在N，N- 二甲基甲酰胺(12mL)中。加入冰乙酸(67mL，1.16mmol)，将反应混合 物于55℃加热72小时。将树脂过滤，用DMF洗涤(3×10mL)。将滤 液高真空浓缩得到油。将得到的油用乙酸乙酯研制。将所需产物通过 反相HPLC纯化。
步骤B：环{Orn(d-N-2-咪唑啉基)-D-Val-D-Tyr(3-氨基丙基)- D-Asp-Gly}三氟乙酸盐的制备
将保护的环状肽环{Orn(d-N-1-Tos-2-咪唑啉基)-D-Val-D- Tyr(N-Cbz-3-氨基丙基)-D-Asp(OBzl)-Gly}(0.10mmol)溶于三氟乙 酸(0.95mL)并在干冰/丙酮浴中冷却至-10℃。向该溶液中加入三氟甲 磺酸(0.12mmol)，然后加入茴香醚(190mL)。将反应混合物于-16℃搅 拌3小时。然后将干冰/丙酮浴冷却至-35℃并向该溶液中加入冷的乙 醚(40mL)。将混合物于-35℃搅拌30分钟，然后冷却至-50℃继续搅 拌30分钟。滤出粗产物，溶于水/乙腈(1/1)，冷冻干燥，通过反相 HPLC纯化得到所需产物。
步骤C：环{Orn(d-N-2-咪唑啉基)-D-Val-D-Tyr(N-[2-[[[5- [羰基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸]-3-氨基丙基)-D-Asp-Gly} 的制备
向环{Orn(d-N-2-咪唑啉基)-D-Val-D-Tyr(3-氨基丙基)-D— Asp-Gly}(0.0216mmol)的N，N-二甲基甲酰胺(2mL)溶液中加入三乙 胺(15mL，0.108mmol)然后室温搅拌10分钟。加入2-[[[5-[[(2，5- 二氧代-1-吡咯烷基)氧基]羰基]-2-吡啶基]亚肼基]甲基]-苯磺酸单 钠盐(0.0260mmol)，然后将混合物搅拌18小时。将混合物高真空浓 缩并将残余物通过反相HPLC纯化得到所需产物。
放射性药物实施例
下列方法(A，B)描述了本发明式99mTc(VnA)(tricine)(膦)放射 性药物的合成，其中(VnA)代表通过二氮烯基(-N=N-)或肼基(=N-NH-) 与Tc结合的玻连蛋白受体拮抗剂。二氮烯基或肼基部分产生于以游 离肼或以腙形式保护的形式存在的肼基烟酰氨基与Tc-99m的反应。 Tc内配位层中的另两个配体是tricine和膦。
方法A
用亚锡还原剂合成式99mTc(VnA)(tricine)(膦)的Tc-99m玻连蛋 白受体拮抗剂配合物
将10-30μg(0.2-0.4mL)溶于盐水或50％乙醇的本发明试剂、 40mg(0.4mL)tricine水溶液、1-7mg(0.10-0.30mL)溶于水或乙醇 中的膦、25μg(25μL)溶于0.1M HCl的SnCl2·2H2O、0-0.25mL乙 醇和50-150mCi 99mTcO4-的盐水溶液在10毫升小瓶中混合。将试剂 盒在100℃水浴中加热10-20分钟，然后用HPLC方法3分析50μL样 品。如果需要，通过注射在HPLC注射300-400μL注射液，然后将馏 份收集到带罩的烧瓶中，来纯化所述配合物。将收集的馏份蒸发至 干，再溶于含0-5vol％Tween 80的盐水中，然后用HPLC方法3再 进行分析。
方法B
不用亚锡还原剂合成99mTc(VnA)(tricine)(TPPTS)的Tc-99m玻 连蛋白受体拮抗剂配合物
向含4.84mg TPPTS，6.3mg tricine，40mg甘露糖醇和0.25 mmol琥珀酸盐缓冲液，pH 4.8的冻干小瓶中加入0.2-0.4mL(20- 40μg)溶于盐水或50％乙醇的本发明试剂、50-100mCi 99mTcO4-的盐 水和另外的盐水以使总体积达到1.3-1.5mL。将试剂盒在100℃水浴 中加热10-20分钟，然后用HPLC方法3分析50μL样品。如果需要， 通过注射在HPLC注射300-400μL注射液，然后将馏份收集到带罩的 烧瓶中，来纯化所述配合物。将收集的馏份蒸发至干，再溶于含0-5 vol％Tween 80的盐水中，然后用HPLC方法3再进行分析。 表1.99mTc(VnA)(tricine)(膦)配合物的分析和产率数据
下列实施例描述本发明式99mTc(VnA)(tricine)(L)(L=含亚胺-氮 的杂环)的合成，其中(VnA)代表通过二氮烯基(-N=N-)或肼基(=N-NH-) 与Tc结合的玻连蛋白受体拮抗剂。Tc内配位层中的另两个配体是 tricine和含亚胺-氮的杂环。
实施例51
Tc-99m玻连蛋白受体拮抗剂配合物99mTc(VnA)(tricine) (1，2，4-三唑)的合成
在10毫升带罩的小瓶中混合30μg实施例1的试剂(0.30mL 50/50 EtOH/H2O)、40mg tricine(0.25mL/H2O)、8mg 1，2，4-三唑(0.25 mL/H2O)、25μgSnCl2(25μL/0.1N HCl)、0.50mL水和0.20mL 50±5 mCi99mTcO4-，然后在100℃加热10分钟。用下列方法通过HPLC分析 50μL试剂盒内含物。在保留时间为8.33分钟时洗脱产物，放射性 化学物质的为88.1％。
由DOTA(实施例18)，DTPA单酰胺(实施例19和20)或DTPA二 酰胺螯合剂(实施例21)组成的本发明试剂很容易与元素31，39，49 和58-71的金属离子形成配合物。下列实施例说明与放射性药物治疗 中所用的发射β粒子的同位素153Sm、177Lu和90Y，和在放射性药物成像 剂中所用的发射γ射线的同位素111In合成配合物。在所述两种配合物 中，所述金属离子与所述试剂的DOTA，DTPA单酰胺或DTPA二酰胺螯 合剂部分结合。
实施例52和53
含Y-90和Lu-177 DOTA-的玻连蛋白拮抗剂配合物的合成
向清洁的密封的10毫升小瓶中依次加入0.5mL实施例18的试 剂(在0.25M乙酸铵缓冲液中，200μg/mL，pH7.0)，0.05-0.1mL 龙胆酸(钠盐，在0.25M乙酸铵缓冲液中10mg/mL，pH7.0)溶液， 0.3mL 0.25M乙酸铵缓冲液(pH7.0)，和0.05mL 177LuCl3溶液 或者90YCl3溶液(100-200mCi/mL)的0.05N HCl溶液。将所得混合 物在100℃加热35分钟。冷却到室温后，用放射性-HPLC和ITLC分 析所得溶液的样品。通过质谱分析实施例53的配合物(C75H110N23O23Lu实测值[M+H+]=1877.6，计算值1875.8)，证明是一致的。
实施例54
含111In DOTA-的玻连蛋白拮抗剂配合物的合成
向铅罩的300μL自动取样小瓶中依次加入50μL龙胆酸(在0.1M 乙酸铵缓冲液中，10mg/mL，pH6.75)溶液、100μL实施例18的试 剂(200μg/mL在0.2M乙酸铵缓冲液中，pH5.0)和50μLof111InCl3溶液(10mCi/mL)的0.04N HCl溶液。反应混合物的pH为约4.0。 将溶液在100℃加热25分钟。通过放射性-HPLC和ITLC分析所得溶 液的样品。
表1A：DOTA-结合的玻连蛋白受体的Y-90，In-111，和Lu-177 配合物的分析和产率数据
实施例55和56
含有In-111 DTPA-单酰胺或MPA-二酰胺的玻连蛋白拮抗剂配合 物的合成
在10毫升小瓶中，将0.2mL111InCl3(1.7mCi)的0.1N HCl溶液、0.2mL 1.0M乙酸铵缓冲液(pH6.9)和0.1ml溶于水的本发 明试剂混合，然后在室温反应30分钟。用HPLC方法3分析反应混合 物。 表2.111In配合物的分析和产率数据
实施例57-59
Sm-153玻连蛋白拮抗剂配合物的合成
在10毫升玻璃小瓶中，将0.25mL153SmCl3储备液(54mCi/μmol Sm，40mCi/mL)的0.1N HCl溶液与溶于1N乙酸铵缓冲液的本发明 试剂(50-倍摩尔过量)混合。将反应在室温进行约30分钟，然后用 ITLC和HPLC(方法3)分析。如果需要，通过将300-400μL注射到HPLC 上，然后将馏份收集到带罩的烧瓶中来纯化配合物。将收集的馏份蒸 发至干，再溶于盐水中，然后用HPLC方法3再分析。
表3.153Sm配合物的分析和产率数据
通过将溶于2毫升1M乙酸铵缓冲液(pH7)中的3.3mg(2.9μmol) 实施例21的试剂与0.29mL 0.01M0.1N HCl中的SmCl3混合来制 备实施例59的放射性药物的非放射性(天然的)钐类似物。使反应在 室温进行约5小时，然后用HPLC方法3分离产物。通过冻干除去挥 发物质。通过质谱证明配合物的一致性。(API-ESMS：C43H64N12O17Sm实测值[M+2H+=1172.4，计算值1172.9)。用水制备所述配合物的储 备液，通过ICP分析确定其浓度用于确定所述配合物与玻连蛋白受体 αvβ3的结合亲和性。
以下列出本发明代表性In-111(实施例56)、Y-90(实施例52)和 Sm-153(实施例59)放射性药物的结构。
实施例60-62
Lu-177玻连蛋白拮抗剂配合物的合成
向溶于1.0mL0.1N乙酸盐缓冲液，pH6.8的5×10-9mol 本发明试剂中加入溶于0.1N HCl的1×10-9mol Lu-177(40μL，3 mCi)，然后在室温使反应进行30-45分钟。用HPLC方法3分析反应 混合物。 表4.177Lu配合物的分析和产率数据
实施例63
按照下列方法制备实施例21试剂的配合物。将3-3.5mg试剂溶 于2mL1M pH7.0的乙酸铵缓冲液中，向其中加入1当量Gd(NO3)3溶液(0.02M水溶液)。将反应混合物在室温放置3-5小时，然后通 过HPLC方法4分离产物。将含配合物的馏份冻干，然后溶解于1mL 水中，产生通过ICP分析，表明Gd为约2mM的溶液。通过质谱确定 所述配合物的同一性。(API-ESMS：C43H64N12O17Gd实测值 [M+2H+]=1176.9，计算值1176.2)。
下列实施例描述由是αvβ3受体拮抗剂的肿瘤新维管系统的靶向部 分组成的本发明超声造影剂的合成。
实施例64
步骤A：1-(1，2-二棕榈酰基-sn-甘油基-3-磷酸乙醇氨基)-12- (环(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys)-十二烷-1，12-二酮的合成
将二琥珀酰亚氨基十二烷-1，12-二酸酯(0.424 g，1mmol)、1，2- 二棕榈酰基-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺(1.489g，1mmol)和环(Arg- Gly-Asp-D-Phe-Lys)TFA盐(0.831g，1mmol)的25ml二氯甲烷溶液 搅拌5分钟。加入碳酸钠(1mmol)和硫酸钠(1mmol)并将溶液在氮气氛 下室温搅拌18小时。真空蒸除DMF并将粗产物纯化得到标题化合物。
步骤B：造影剂组合物的制备
将1-(1，2-二棕榈酰基-sn-甘油基-3-磷酸乙醇氨基)-12-(环 (Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys)-十二烷-1，12-二酮与其它三种类脂， 1，2-二棕榈酰基-sn-甘油基-3-磷脂酸、1，2-二棕榈酰基-sn-甘油基 -3-磷脂酰胆碱和N-(甲氧基聚乙二醇5000氨基甲酰基)-1，2-二棕榈 酰基-sn-甘油基-3-磷脂酰乙醇胺以1wt％∶6wt％∶54wt％∶41wt％的 相对量混合。然后在2cc玻璃小瓶中制备该类脂混合物(1mg/mL)、氯 化钠(7mg/mL)、甘油(0.1mL/mL)、丙二醇(0.1mL/mL)的含水溶液，pH 6-7。将小瓶中的空气抽空，用全氟丙烷代替并将小瓶密封。将密封 的小瓶在牙科混合机中振荡30-45秒制成超声造影剂组合物，形成乳 白色溶液。
实施例65
步骤A：(ω)-氨基-PEG3400-α-羰基)-环(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys) 的制备
向N-Boc-ω-氨基-PEG3400-α-羧酸琥珀酰亚氨基酯(1mmol)和环 (Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys)(1mmol)的DMF(25mL)溶液中加入三乙胺 (3mmol)。将反应混合物在氮气氛下室温搅拌过夜，然后真空蒸除溶 剂。将粗产物溶于50％三氟乙酸/二氯甲烷并搅拌4小时。蒸除挥发性 物质，然后在乙醚中研制得到标题化合物的TFA盐。
步骤B：1-(1，2-二棕榈酰基-sn-甘油基-3-磷酸乙醇氨基)-12- ((ω-氨基-PEG3400-α-羰基)-环(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys))-十二烷- 1，12-二酮
将二琥珀酰亚氨基十二碳酸酯(1mmol)、1，2-二棕榈酰基-sn-甘 油基-3-磷酸乙醇胺(1mmol)和(ω-氨基-PEG3400-α-羰基)-环(Arg- Gly-Asp-D-Phe-Lys)TFA盐(1mmol)的25mL氯仿溶液搅拌5分钟。 加入碳酸钠(1mmol)和硫酸钠(1mmol)并将溶液在氮气氛下室温搅拌 18小时。真空蒸除DMF并将粗产物纯化得到标题化合物。
步骤C：造影剂组合物的制备
将1-(1，2-二棕榈酰基-sn-甘油基-3-磷酸乙醇氨基)-12-((ω- 氨基-PEG3400-α-羰基)-环(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys))-十二烷-1，12- 二酮与其它三种类脂，1，2-二棕榈酰基-sn-甘油基-3-磷脂酸、1，2- 二棕榈酰基-sn-甘油基-3-磷脂酰胆碱和N-(甲氧基聚乙二醇5000氨 基甲酰基)-1，2-二棕榈酰基-sn-甘油基-3-磷脂酰乙醇胺以1wt％∶6 wt％∶54wt％∶41wt％的相对量混合。然后在2cc玻璃小瓶中制备该类 脂混合物(1mg/mL)、氯化钠(7mg/mL)、甘油(0.1mL/mL)、丙二醇(0.1 mL/mL)的含水溶液，pH6-7。将小瓶中的空气抽空，用全氟丙烷代替 并将小瓶密封。将密封的小瓶在牙科混合机中振荡30-45秒制成超声 造影剂组合物，形成乳白色溶液。
实施例66
步骤A：(ω-氨基-PEG3400-α-羰基)-Glu-(环(Arg-Gly-Asp-D- Phe-Lys))2的制备
向N-Boc-ω-氨基-PEG3400-α-羧酸琥珀酰亚氨基酯(1mmol)和 Glu-(环(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys))2(1mmol)的DMF(25mL)溶液中 加入三乙胺(3mmol)。将反应混合物在氮气氛下室温搅拌过夜，然后 真空蒸除溶剂。将粗产物溶于50％三氟乙酸/二氯甲烷并搅拌4小时。 蒸除挥发性物质，然后在乙醚中研制得到标题化合物的TFA盐。
步骤B：
1-(1，2-二棕榈酰基-sn-甘油基-3-磷酸乙醇氨基)-12-((ω-氨 基-PEG3400-α-羰基)-Glu-(环(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys))2)-十二烷- 1，12-二酮的制备
将二琥珀酰亚氨基十二碳酸酯(1mmol)、1，2-二棕榈酰基-sn-甘 油基-3-磷酸乙醇胺(1mmol)和(ω-氨基-PEG3400-α-羰基)-Glu-(环 (Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys))2TFA盐(1mmol)的25 mL氯仿溶液搅拌5 分钟。加入碳酸钠(1mmol)和硫酸钠(1mmol)并将溶液在氮气氛下室温 搅拌18小时。真空蒸除DMF并将粗产物纯化得到标题化合物。
步骤C：造影剂组合物的制备
将1-(1，2-二棕榈酰基-sn-甘油基-3-磷酸乙醇氨基)-12-((ω- 氨基-PEG3400-α-羰基)-Glu-(环(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys))2)-十二 烷-1，12-二酮与其它三种类脂，1，2-二棕榈酰基-sn-甘油基-3-磷脂 酸、1，2-二棕榈酰基-sn-甘油基-3-磷脂酰胆碱和N-(甲氧基聚乙二 醇5000氨基甲酰基)-1，2-二棕榈酰基-sn-甘油基-3-磷脂酰乙醇胺 以1wt％∶6wt％∶54wt％∶41wt％的相对量混合.然后在2cc玻璃小瓶 中制备该类脂混合物(1mg/mL)、氯化钠(7mg/mL)、甘油(0.1mL/mL)、 丙二醇(0.1mL/mL)的含水溶液，pH6-7。将小瓶中的空气抽空，用 全氟丙烷代替并将小瓶密封。将密封的小瓶在牙科混合机中振荡30- 45秒制成超声造影剂组合物，形成乳白色溶液。
分析方法
HPLC方法3 柱：Zorbax C18，25cm×4.6mm或Vydac C18，25cm×4.6mm 柱温：室温 流速：1.0mL/min 溶剂A：10mM磷酸钠缓冲液pH6 溶剂B：100％乙腈 检测仪：碘化钠(NaI)放射探针或β检测仪 梯度    A(实施例33，51) t(min)   0    20    30    31   40 ％B      0    75   75     0    0 梯度    E(实施例39，40，43，44，45，46，48，50) t(min)    0    20   30  31   35   36    40 ％B       0    25   25  75   75   0      0 梯度    C(实施例34，35，36，37，38，42)： t(min)   0    40    41   46   47   55 ％B      0    35    75   75   0     0 梯度    D(实施例49) t(min)   0    20    30    31  40 ％B      0    25    25    0    0 梯度    E(实施例55，56)： t(min)   0    20    21    30   31   40 ％B      0    20    50    50   0     0 梯度    F(实施例57，58)： t(min)   0    15    16    25   26    35 ％B      0    20    75    75    0    0 梯度    G(实施例59)： t(min)    0    20    21    30    31    40 ％B       0    20    75    75    0     0 梯度    H(实施例60，61，62)： t(min)   0    15     16    21     22    40 ％B      0    20     50    50     0     0 梯度    I(实施例52，53，54) t(min}     0    20    21    30    31    40 ％溶剂B    5    20    60    60    5     5 梯度J(实施例41) t(min)     0    20    30    31    40 ％溶剂B    0    50    50    0     0 梯度K(实施例47) t(min)     0    20    21    30    31    40 ％溶剂B    10   20    60    60    10    10 HPLC方法4 柱：Zorbax C18，25cm×4.6mm 流速：1.0mL/min 溶剂A：10mM乙酸铵 溶剂B：100％甲醇 梯度： t(min)    0    23     26    27 ％B       8    100    100    8 UV检测 ITLC方法 Gelman ITLC-SG带(2cm×7.5cm) 溶剂系统：1∶1丙酮∶盐水 用Bioscan Systen 200检测。
实用性
本发明的药物用于患者血管生成肿瘤维管系统的成像或者治疗 患者的癌症。由发射γ射线的同位素组成的本发明的放射性药物用于 与血管生成新维管系统有关的病理学过程的成像，包括癌症、视网膜 性糖尿病、斑点退化、血管成形术后的血管再狭窄以及伤口愈合。针 对实用性还包括不稳定冠状综合征(例如不稳定冠状斑)的成像。由发 射β、α或者Auger电子的同位素组成的本发明的放射性药物通过将细 胞毒性剂量的辐射传递到血管生成新维管系统的部位而用于治疗与 血管生成新维管系统有关的病理学过程。通过全身性施用放射性药 物，对肿瘤产生细胞毒性辐射进行癌症的治疗。
由选自钆、镝、铁和锰的一种或多种金属顺磁离子组成的本发明 化合物用作与血管生成新维管系统有关的病理学过程的核磁共振成 像(MRI)的造影剂。
由原子序数为20或大于20的一种或多种重原子组成的本发明化 合物用作与血管生成新维管系统有关的病理学过程的X射线成像的X 射线造影剂。
由含产气气体的表面活性剂微球组成的本发明化合物用作与血 管生成新维管系统有关的病理学过程的超声描记术的超声造影剂。
在下列体外和体内试验以及模型中检测本发明的代表性化合物 并发现所述化合物是有活性的。
固定的人胎盘αvβ3受体检测
用[I-125]玻连蛋白发展并验证检测条件。检测验证包括 Scatchard格式分析(n=3)，其中确定受体数(Bmax)和Kd(亲和性)。 检测格式是在IC50确定前，在10和100nM的终浓度初步筛选化合 物。为了确定IC50，评估三个标准(玻连蛋白，抗-avβ3抗体，LM609， 和抗-avβ5，P1F6)以及五个参考肽。简而言之，所述方法包括将预 先分离的受体固定在96孔平板中，然后保温过夜。所述受体是从正 常的新鲜的、非感染性的(无HIV、肝炎病毒B和C、梅毒和HTLC)人 胎盘中分离的。将组织溶解，然后经离心除去组织碎片。将溶解产物 过滤。用固定的avβ3抗体通过亲和色谱分离所述受体。然后用洗涤缓 冲液将平板洗涤3次。加入阻断缓冲液，在室温将平板保温120分钟。 在该过程中，将待测化合物与[I-125]玻连蛋白在储藏平板中预先混 合。除去阻断缓冲液，用移液管移出化合物混合物。在室温经60分 钟完成竞争。然后除去未结合的物质，将孔分开，进行γ闪烁计数。
其他受体结合试验
在Ortega等美国病理学杂志(Amer.J.Pathol.)，1997，151， 1215-1224和Dougher等，生长因子(Growth Factors)，1997，14， 257-268的文献中描述了用于确定本发明药物与VEGF受体、Flk- 1/KDR和Flt-1的结合亲和性的全细胞试验。在Yayon等，美国国家 科学院院报(Proc.Natl.Acad.Sci USA)，1993，90，10643-10647 中描述了用于确定本发明药物与bFGF受体的亲和性的体外试验。Gho 等，癌症研究(Cancer Research)，1997，57，3733-40，描述了血 管生成素受体结合肽的试验。Senger等，美国国家科学院院报(Proc. Natl.Acad.Sci USA)，1997，94，13612-13617描述了有关整联 蛋白a1B1和a2B1的拮抗剂的试验。美国专利5，536，814描述了与 整联蛋白a5B1结合的化合物。
癌症小鼠_的成像
本研究利用c-Neu癌症小鼠_，同时用FVB小鼠作为对照。用戊 巴比妥钠麻醉小鼠并给其注射约0.5mCi的放射性药物。在注射前， 记录在各癌症小鼠_上的肿瘤位置，并用卡尺测量肿瘤大小。将动物 放在相机头部一般给动物的前或后成像。用256×256和2×变焦摄影， 在2小时过程中，得到系列的5分钟动态图象。在完成研究后，通过 画出肿瘤作为所研究的靶区(ROI)以及颈动脉唾液腺下的颈区的背景 部位来评估图象。
该模型还可用于评估由发射β、α或Auger电子的同位素组成的本 发明放射性药物的效力。以适当的量施用所述放射性药物，通过非侵 染性地使带有同步可成像γ发射的那些同位素成像，或者通过切下肿 瘤并用标准计数计数出现的放射性量可以定量分析肿瘤中的摄入。通 过监测对照小鼠中肿瘤的生长速率与在施用本发明放射性药物的小 鼠中的生长率可以评估所述放射性药物的效力。
该模型还可用于评估由顺磁金属为MRI造影剂组成的本发明化合 物。施用适当量的顺磁化合物后，将完整动物放在市售的核磁共振成 像仪中以使肿瘤成像。通过与从未施用造影剂的动物得到的图象进行 比较，很容易看到所述造影剂的效力。
该模型还可用于评估由重金属为X射线造影剂组成的本发明化合 物。施用适当量的X射线吸附化合物后，将完整动物放在市售X射线 成像仪中以使肿瘤成像。通过与从未施用造影剂的动物得到的图象进 行比较，很容易看到所述造影剂的效力。
该模型还可用于评估由含产气表面活性剂微球为超声造影剂组 成的本发明化合物。施用适当量的产气化合物后，利用超声探针接近 肿瘤，可以使动物中的肿瘤成像。通过与从未施用造影剂的动物得到 的图象进行比较，很容易看到所述造影剂的效力。
兔Matrigel模型
该模型是从用于研究小鼠中血管生成作用的matrigel模型改造 过来的。Matrigel(Becton＆Dickinson，USA)是一种富含层粘连蛋 白、胶原IV、巢蛋白、HSPG和其他生长因子的基膜。当与生长因子 例如bFGF[500ng/ml]或VEGF[2μg/ml]混合并静脉内注射到小鼠的 中腹部区时，它固化成凝胶并在4-8天内刺激注射部位的血管生成作 用。在该兔模型中，给新西兰白兔(2.5-3.0kg)注射2.0ml matrigel，加1μg bFGF和4μgVEGF。在7天后注射放射性药物， 然后得到图象。
该模型还可用于评估由发射β、α或Auger电子的同位素组成的本 发明放射性药物的效力。以适当的量施用所述放射性药物，通过非侵 染性地使带有同步可成像γ发射的那些同位素成像，或者通过切下肿 瘤并用标准计数计数出现的放射性量可以定量分析肿瘤中的摄入。通 过监测对照小鼠中肿瘤的生长速率与在施用本发明放射性药物的小 鼠中的生长率可以评估所述放射性药物的效力。
该模型还可用于评估由顺磁金属为MRI造影剂组成的本发明化合 物。施用适当量的顺磁化合物后，将完整动物放在市售的核磁共振成 像仪中以使肿瘤成像。通过与从未施用造影剂的动物得到的图象进行 比较，很容易看到所述造影剂的效力。
该模型还可用于评估由重金属为X射线造影剂组成的本发明化合 物。施用适当量的X射线吸附化合物后，将完整动物放在市售X射线 成像仪中以使肿瘤成像。通过与从未施用造影剂的动物得到的图象进 行比较，很容易看到所述造影剂的效力。
该模型还可用于评估由含产气表面活性剂微球为超声造影剂组 成的本发明化合物。施用适当量的产气化合物后，利用超声探针接近 肿瘤，可以使动物中的肿瘤成像。通过与从未施用造影剂的动物得到 的图象进行比较，很容易看到所述造影剂的效力。
犬自发肿瘤模型
给带有自发性乳腺瘤的成年狗施用赛拉嗪(20mg/kg)/阿托品(1 ml/kg)。施用镇静剂后，给动物插管，用氯胺酮(5mg/kg)/地西泮(0.25 mg/kg)全麻。用氯胺酮(3mg/kg)/赛拉嗪(6mg/kg)进行持续的化学 约束，按需要滴定。如果需要，在研究过程中，经内气管用房间空 气给动物通风(12下/分钟，25ml/kg)。用20G I.V.导管给外周静 脉插入导管，一个作为注入口，一个作为血样的输出口。用心动计数 器(Biotech，Grass Quincy，HA)监测由通过肢体导连产生的导连Ⅱ 心电图引发的心率和EKG。一般在约10分钟(对照)、注入结束时、(1 分钟)、15分钟、30分钟、60分钟、90分钟和120分钟取血样用于 全血细胞计数。放射性药物的剂量是300μCi/kg，通过静脉内快速 浓注，用盐水冲洗。用多种波动描记器(Model 7E Grass)以10mm/min 或10mm/sec的纸速连续监测参数。
用256×256基质，无变焦摄影，进行2小时的侧支成像，得到5 分钟动态图象。将已知源放在成像区(20-90μCi)以评估所研究区域 (ROI)的摄入。还要在注射后24小时得到图象以确定化合物在肿瘤中 的滞留。通过取在划定区的ROI总计数/源并乘以已知μCi来确定摄 入。结果为ROI的μCi。
该模型还可用于评估由发射β、α或Auger电子的同位素组成的本 发明放射性药物的效力。以适当的量施用所述放射性药物，通过非侵 染性地使带有同步可成像γ发射的那些同位素成像，或者通过切下肿 瘤并用标准计数计数出现的放射性量可以定量分析肿瘤中的摄入。通 过监测对照小鼠中肿瘤的生长速率与在施用本发明放射性药物的小 鼠中的生长率可以评估所述放射性药物的效力。
该模型还可用于评估由顺磁金属为MRI造影剂组成的本发明化合 物。施用适当量的顺磁化合物后，将完整动物放在市售的核磁共振成 像仪中以使肿瘤成像。通过与从未施用造影剂的动物得到的图象进行 比较，很容易看到所述造影剂的效力。
该模型还可用于评估由重金属为X射线造影剂组成的本发明化合 物。施用适当量的X射线吸附化合物后，将完整动物放在市售X射线 成像仪中以使肿瘤成像。通过与从未施用造影剂的动物得到的图象进 行比较，很容易看到所述造影剂的效力。
该模型还可用于评估由含产气表面活性剂微球为超声造影剂组 成的本发明化合物。施用适当量的产气化合物后，利用超声探针接近 肿瘤，可以使动物中的肿瘤成像。通过与从未施用造影剂的动物得到 的图象进行比较，很容易看到所述造影剂的效力。
显然，就上述教导而言，本发明的许多修改和变化均是可能的。 因此，应理解，在本发明权利要求的范围内，可以按本文的具体描述 实现本发明。