一种丹桅逍遥丸的制备方法及应用
阅读：146发布：2023-03-11
专利汇可以提供一种丹桅逍遥丸的制备方法及应用专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 提供一种丹桅逍遥丸的制备方法，由牡丹皮100g、栀子100g酒制柴胡150g、酒炒白芍150g、当归150g、茯苓150g、土炒白术150g、薄荷30g、蜜炙甘草120g作为 原料药 制成，采用超临界萃取制备而成，使得含量有很大提高，服用量减少，本发明还提供了丹桅逍遥丸在制备抑制大鼠Walker-256癌W256 细胞增殖 药物中的应用。，下面是一种丹桅逍遥丸的制备方法及应用专利的具体信息内容。
1.一种丹桅逍遥丸在制备抑制大鼠Walker-256癌W256细胞增殖药物中的应用，其特征在于丹桅逍遥丸由牡丹皮100g、栀子100g、酒制柴胡150g、酒炒白芍150g、当归150g、茯苓150g、土炒白术150g、薄荷30g、蜜炙甘草120g作为原料药制成，制备方法由下列步骤组成：取牡丹皮100g、栀子100g、酒制柴胡150g、酒炒白芍150g、当归150g、茯苓150g、土炒白术150g、薄荷30g、蜜炙甘草120g，加入到CO2超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为4-6％，萃取压力15-30MPa，温度30-50℃，CO2流量1-3m1/g生药·min，萃取时间150-180min，得超临界萃取物粉末，粉碎成细粉，过筛，混匀；取生姜20g，加水煎煮，用煎液泛丸，低温干燥，即得。
2.根据权利要求1所述一种丹桅逍遥丸在制备抑制大鼠Walker-256癌W256细胞增殖药物中的应用，其特征在于丹桅逍遥丸中所述CO2超临界萃取夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为5％。
3.根据权利要求1所述一种丹桅逍遥丸在制备抑制大鼠Walker-256癌W256细胞增殖药物中的应用，其特征在于丹桅逍遥丸中所述CO2超临界萃取的萃取压力20MPa，温度
40℃，CO2流量2ml/g生药·min，萃取时间160min。
一种丹桅逍遥丸的制备方法及应用
技术领域
[0001] 本发明涉及中药制剂技术领域，具体涉及一种丹桅逍遥丸的制备方法及应用。
背景技术
[0002] 丹桅逍遥丸记载于卫生部颁药品标准WS3-B-0048-89，处方为牡丹皮100g、栀子100g酒制柴胡150g、酒炒白芍150g、当归150g、茯苓150g、土炒白术150g、薄荷30g、蜜炙甘草120g，以上九味，粉碎成细粉，过筛，混匀；取生姜20g，加水煎煮，用煎液泛丸，低温干燥，即得。能舒肝解郁，清热调经。用于肝郁化火，胸胁胀痛，烦闷急躁，颊赤口干，食欲不振或有潮热，以及妇女月经先期，经行不畅，胸乳与少腹胀痛。
[0003] 现有技术中，尚未有丹桅逍遥丸在提取制备方面采用超临界技术的报道，而采用打粉和水煎煮的方法，工艺粗糙、落后，杂质多，导致患者用量过大，不方便服用，严重影响了本品在临床上应用。
发明内容
[0004] 发明目的：为了解决上述问题，本发明的目的在于提供一种丹桅逍遥丸的制备方法。
[0005] 本发明的另一个目的在于提供一种丹桅逍遥丸在制备抑制大鼠Walker-256癌W256细胞增殖药物中的应用。
[0006] 技术方案：本发明的目的是通过如下的方案实现的：
[0007] 一种丹桅逍遥丸的制备方法，由牡丹皮100g、栀子100g酒制柴胡150g、酒炒白芍150g、当归150g、茯苓150g、土炒白术150g、薄荷30g、蜜炙甘草120g作为原料药制成，所述的方法由下列步骤组成：取牡丹皮100g、栀子100g酒制柴胡150g、酒炒白芍150g、当归150g、茯苓150g、土炒白术150g、薄荷30g、蜜炙甘草120g，加入到CO2超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为4-6%，萃取压力15-30MPa，温度30-50℃，CO2流量1-3m1/g生药·min，萃取时间150-180min，得超临界萃取物粉末，粉碎成细粉，过筛，混匀；取生姜20g，加水煎煮，用煎液泛丸，低温干燥，即得。
[0008] 上述丹桅逍遥丸的制备方法，所述CO2超临界萃取夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为5%。
[0009] 上述丹桅逍遥丸的制备方法，所述CO2超临界萃取的萃取压力20MPa，温度40℃，CO2流量2ml/g生药·min，萃取时间160min。
[0010] 上述丹桅逍遥丸在制备抑制大鼠Walker-256癌W256细胞增殖药物中的应用，丹桅逍遥丸由牡丹皮100g、栀子100g酒制柴胡150g、酒炒白芍150g、当归150g、茯苓150g、土炒白术150g、薄荷30g、蜜炙甘草120g作为原料药制成，制备方法由下列步骤组成：取牡丹皮100g、栀子100g酒制柴胡150g、酒炒白芍150g、当归150g、茯苓150g、土炒白术150g、薄荷30g、蜜炙甘草120g，加入到CO2超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为4-6%，萃取压力15-30MPa，温度30-50℃，CO2流量1-3m1/g生药·min，萃取时间150-180min，得超临界萃取物粉末，粉碎成细粉，过筛，混匀；取生姜20g，加水煎煮，用煎液泛丸，低温干燥，即得。
[0011] 上述丹桅逍遥丸在制备抑制大鼠Walker-256癌W256细胞增殖药物中的应用，丹桅逍遥丸中所述CO2超临界萃取夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为5%。
[0012] 上述丹桅逍遥丸在制备抑制大鼠Walker-256癌W256细胞增殖药物中的应用，丹桅逍遥丸中所述CO2超临界萃取的萃取压力20MPa，温度40℃，CO2流量2ml/g生药·min，萃取时间160min。
[0013] 现有技术中，丹桅逍遥丸口服，一次1丸，一日2次，每丸重9g，采用本发明制备成的丹桅逍遥丸每丸4.5g，但含有的药材量是原来的2倍，因此每次仅需1丸，一日服用1次，在具有更多活性成分的条件下大大减少了服用量。
具体实施方式
[0014] 以下通过实施例形式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明，但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例，凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
[0015] 实施例1
[0016] 取牡丹皮100g、栀子100g酒制柴胡150g、酒炒白芍150g、当归150g、茯苓150g、土炒白术150g、薄荷30g、蜜炙甘草120g，加入到CO2超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为4%，萃取压力15MPa，温度30℃，CO2流量1m1/g生药·min，萃取时间150min，得超临界萃取物粉末，粉碎成细粉，过筛，混匀；取生姜20g，加水煎煮，用煎液泛丸，低温干燥，即得，每丸4.5g。
[0017] 实施例2
[0018] 取牡丹皮100g、栀子100g酒制柴胡150g、酒炒白芍150g、当归150g、茯苓150g、土炒白术150g、薄荷30g、蜜炙甘草120g加入到CO2超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为6%，萃取压力30MPa，温度50℃，CO2流量3m1/g生药·min，萃取时间180min，得超临界萃取物粉末，粉碎成细粉，过筛，混匀；取生姜20g，加水煎煮，用煎液泛丸，低温干燥，即得，每丸4.5g。
[0019] 实施例3
[0020] 取牡丹皮100g、栀子100g酒制柴胡150g、酒炒白芍150g、当归150g、茯苓150g、土炒白术150g、薄荷30g、蜜炙甘草120g加入到CO2超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为5%，萃取压力20MPa，温度40℃，CO2流量2m1/g生药·min，萃取时间160min，得超临界萃取物粉末，粉碎成细粉，过筛，混匀；取生姜20g，加水煎煮，用煎液泛丸，低温干燥，即得，每丸4.5g。
[0021] 实施例4：丹桅逍遥丸抑制W256细胞增殖的实验研究资料
[0022] 1实验材料
[0023] 1.1实验用细胞株
[0024] 大鼠Walker-256癌W256细胞，南京医科大学实验室细胞库，DMEM+10%FBS常规培养。
[0025] 1.2实验药物
[0026] 研究药物：本发明丹桅逍遥丸：按实施例3方法制备。
[0027] 药液储液：称取100mg丹桅逍遥丸，溶于5ml无水乙醇中，0.2μm滤器过滤，500μldoff管分装，-20℃存储，同时0.2μm滤器过滤无水乙醇以备对照组之用。
[0028] 1.3实验试剂
[0029] DMEM（GIBCO公司Cat.No.12100-061Lot.No.758137）；胎牛血清（浙江天杭生物科技有限公司Lot.No.100419）；NaHCO3（上海久亿化学试剂有限公司Cat.No.11810-033Lot.No.1088387）；Trypsin（AMRESCO公司批号：2010/04）；EDTA（AMRESCO公司批号：2009/10）；Penicillin G Sodium Salt（AMRESCO公司批号：2010242）；Streptomycin Sulfate（AMRESCO公司批号：2010382）；无水乙醇（南京化学试剂有限公司批号：080310182）；MTT(Biosharp批号：0793);PBS（实验室自配）；
[0030] 1.4实验器材
[0031] 莱卡倒置显微镜（德国Leica型号：DM1L）；可见-紫外光微孔板检测仪（美国MD公司型号：SPECTRA MAX190）；CO2培养箱（FORMA型号：3111）；超净台（苏净集团安泰公司制造型号：SW-CJ-ZFD）；纯水仪（美国Spring公司型号：S/N020579）；精密移液器（法国吉尔森公司型号：P2）；电子天平（德国赛多利斯有限公司型号：BT323S）；全自动高压灭菌锅（日本SANYO公司型号：MLS-3020）；台式电热鼓风干燥箱（上海精密实验设备公司型号：DHG9123A）；冰箱（西门子公司型号：KG18V21TI）；液氮罐（CBS型号：2001）；低速离心机（上海安亭科学仪器厂型号：KA-1000）；0.2μm滤器（MILLIPORE型号：SLGP033RB）；10cm培养皿(NEST公司)、96孔培养板（NEST公司）；细胞计数板；离心管、移液管、Tips若干。
[0032] 2实验方法
[0033] 1）W256细胞用DMEM+10%FBS于37℃、5%CO2进行常规培养（10cm培养皿），当细胞生长至对数期时，收集细胞，弃去培养液，PBS轻洗3遍，加入3ml0.25%胰蛋白酶-0.04%EDTA，37℃消化2min后，向其中加入5ml完全培养基中和反应，吹打细胞后将其转入离心管中，1000rpm离心5min，调整细胞悬液浓度3×104个/ml。
[0034] 2）将细胞种入96孔培养板中，每孔加入细胞悬液180μl，培养板放入细胞培养箱中（37℃，5%CO2）常规培养。
[0035] 3）根据细胞生长情况，一般长至50%-70%，加入丹桅逍遥丸溶液，继续培养24h。
[0036] 4）24h后加入20μl MTT溶液（5mg/ml，即0.5%MTT），继续培养4h。
[0037] 5）4h后扣板法倒去上清，用吸水纸轻轻拍干，每孔加入200μl二甲基亚砜，置摇床上低速振荡10min，使结晶物充分溶解。在酶联免疫检测仪490nm处测量各孔的吸光值。
[0038] 6）同时设置本底（不加细胞，只加培养液），对照孔（细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT、二甲基亚砜），每组设定6个复孔。
[0039] 7）结果以药物对细胞的抑制率表示：
[0040] 细胞增值抑制率（%）=（对照孔OD值-给药孔OD值）/对照孔OD值×100%。实验重复3次。
[0041] 3统计处理
[0043] 4实验结果
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