疟疾是热带、亚热带最为常见的疾病之一。在许多第三世界国家，疟 疾的发病率和死亡率仍居高不下。目前疟疾依然分布在全球一百多个国家 和地区。1998年WHO估计全球每年有3～5亿人染上疟疾，因该病死亡约 300万人，90％的死亡病人发生在非洲，其中在非洲5岁以下儿童超过90％， 疟疾每天杀害3000名儿童，在非洲一年杀害100万名儿童。1999-2002 年在不同流行率地区受疟疾威胁人口变化情况显示：变化最快、增长最多 的是非洲地区和东南亚地区。非洲地区受威胁人口在20世纪从600万增 长到6亿5千万，80％以上居住在疟疾高流行区和大流行区。
尽管非洲疟疾猖獗，但因经济相对落后，人们长期大量使用价格低廉 的氯喹作为一线药进行治疗。因过量长期使用氯喹，疟疾对氯喹及其衍生 物在全球80多个国家已产生耐药性，在东南亚和非洲大部分地区氯喹对 疟原虫已无效[2]。非洲大量儿童患疟疾死亡与疟原虫对氯喹耐药性增加密 切相关。
考虑非洲经济承受能力的前提下，为了抑制非洲疟疾疫情，降低非洲 疟原虫的耐药性，WHO提出改革传统治疗疟疾的方案，推荐采用以青蒿 素类药物为基础的联合用药，简称ACT疗法。WHO推荐的ACT治疗方 案包括：阿莫地喹/青蒿琥酯、蒿甲醚/苯芴醇(复方蒿甲醚)、SP(磺胺 多辛/乙胺嘧啶)/青蒿琥酯、甲氟喹/青蒿琥酯。目前全球已有40个国家 选择了ACT治疗：36个国家作为一线治疗药物，4个国家作为二线药物， 14个以上国家最近正考虑改换成ACT疗法。
青蒿琥酯主要作用于疟原虫红内期无线体，作用方式主要是干扰表膜 一线粒体的功能。其有如下作用特点：(1)对耐氯喹恶性疟疾有效；(2) 可快速杀灭疟原虫红内期无性体，控制疟疾症状；(3)与其它抗疟药相比， 该产品付作用小。其缺点该产品半衰期短，短疗程(3天)治疗，杀虫不 彻底，原虫复燃率高，需延长疗程(6～7天)才能彻底杀灭疟原虫而提高 治愈率。与其它抗疟药相比，其价格比较贵。
阿莫地喹结构和作用与氯喹相似，能有效杀灭红内期内各种疟原虫无 性体，对间日疟、三日疟和卵形疟的成熟配子体亦有一定作用，但对肝细 胞内的休眠子红外期疟原虫则无效。其有如下作用特点：(1)对耐氯喹恶 性疟疾有效；(2)对血内各种疟原虫的无性体均有较强的杀灭作用，可迅 速控制临床症状，对间日疟、三日疟和卵形疟的成熟配子体和未成熟的恶 性疟原虫配子体亦有杀灭作用；(3)价格低廉。其缺点该产品毒性比其它 抗疟药大。由于阿莫地喹价格低廉，用于治疗疟疾时疗效确切且耐受性良 好，所以在非洲地区仍将其作为一线抗疟治疗用药。
WHO提出的以青蒿琥酯为基础的传统药物联合使用，是对付恶性疟 疾耐药性的有效办法。青蒿琥酯可迅速减少多重耐药性疟原虫，残余部分 疟原虫就能被高浓度的联合药物(例如阿莫地喹)杀死，不同作用机制的 药物联合使用改善了疗效。同时，由于药物疗效高和配子体数量减少，可 减弱疟疾传播，且疟原虫对两种药物均耐药的可能性也较低，联合用药所 致疟原虫耐药性应相当迟缓。因此阿莫地喹与青蒿琥酯联合用药治疗疟疾 十分有效。
目前，世界上联合用药的包装方法，系将两种不同的药物压在同一泡 罩板上，病人服用时需将两种不同药物取出，定量进行服用。该方法显然 十分不方便，容易出现错服药物现象。如何将青蒿琥酯与阿莫地喹制成复 方制剂，以便于人们的服用，是人们所十分期望解决的问题。

本发明所要解决的技术问题是公开一种青蒿琥酯与盐酸阿莫地喹双层 片及其制备方法以克服现有技术存在的缺陷。
本发明的青蒿琥酯与盐酸阿莫地喹双层片由青蒿琥酯片和盐酸阿莫地 喹(碱基)片复合构成，青蒿琥酯片由活性成份青蒿琥酯和辅料组成，盐 酸阿莫地喹(碱基)片由活性成份盐酸阿莫地喹(碱基)、辅料和增溶剂 组成；青蒿琥酯的含量为片剂总重量的8～11％，盐酸阿莫地喹(碱基)含量 为片剂总重量的24～33％，优选的重量比例为：
青蒿琥酯∶盐酸阿莫地喹(碱基)＝1∶3。
所说的辅料包括医药学上可接受的填充剂和/或粘合剂和/或崩解剂和/ 或润滑剂等；
所说的填充剂选自淀粉、糊精、蔗糖或乳糖等中的一种或其混合物， 用量为片剂总重量的10～60％；
所说的粘合剂选自聚乙烯吡咯烷酮，羟丙基甲基纤维素或乙醇等，用 量为片剂总重量的1～20％；
所说的崩解剂选自微晶纤维素、羧甲淀粉钠、羟丙纤维素、交联羧甲 基纤维素钠或交联乙烯吡咯烷酮等中的一种或其混合物，用量为片剂总重 量的1～50％；
所说的润滑剂选自硬脂酸镁或滑石粉等中的一种或其混合物，用量为 片剂总重量的0.5～2.0％。
所说的增溶剂为阴离子表面活性剂或/和非离子表面活性剂，优选聚山 梨酯80或/和十二烷基硫酸钠等，用量为片剂总重量的0.05～3％。
本发明在配方中加入的崩解剂选自羟丙基纤维素、微晶纤维素、羧甲 基淀粉钠，以及加入的增溶剂，可使该产品的溶出度高达85％以上，比单 方片剂溶出度标准高出15％～30％百分点(青蒿琥酯片溶出度标准为：30 分钟≥60％；盐酸阿莫地喹片溶出度标准为：30分钟≥75％)，提高了该 产品的生物利用度，提高了产品质量。未加入上述崩解剂和增溶剂前，产 品的溶出度仅为40～50％左右，不符合标准要求。
羟丙基纤维素、微晶纤维素为纤维素类衍生物，具的较好的吸湿性和 吸水性，这种性质大大增加了它的膨润度，可加速片剂的崩解和崩解后的 分散的细度，从而加快药物的溶出速率，提高生物利用度。
羧甲基淀粉钠为马铃薯淀粉衍生物，具的较强的引湿性，吸水力大， 能吸收其干燥体积的30倍。吸水后粉粒膨胀而不溶解，故不阻碍水分的 继续渗入而影响片子进一步崩解，是一优良崩解剂，能加快药物的溶出速 率，提高生物利用度。
本发明使用的增溶剂有如下特点：
聚山梨酯80为一非离子型表面活性剂，十二烷基硫酸钠为阴离子表面 活性剂，片剂和胃液接触后，该产品能降低其表面张力，增加片子的润湿 性，使水份借片剂的毛细管作用，迅速渗透到片芯引起崩解。但其单独作 用效果欠佳，与本发明的崩解剂合用，可起到辅助崩解使用。
本发明的制备方法包括下列步骤：
(1)青蒿琥酯颗粒的制备：
将青蒿琥酯、填充剂、崩解剂和润滑剂以重量浓度为50～90％的乙醇 水溶液作粘合剂，采用本领域公知的方法制粒，50～60℃干燥，备用；
该步骤中，填充剂的加入量为青蒿琥酯颗粒总重量的10～60％；
润滑剂的加入量为青蒿琥酯颗粒总重量的0.5～2.0％；
粘合剂的加入量为青蒿琥酯颗粒总重量的1～20％；
(2)盐酸阿莫地喹(碱基)颗粒的制备
将盐酸阿莫地喹(碱基)、余量的填充剂和余量的润滑剂以及含有表 面活性剂的余量的粘合剂，如重量含量为8％玉米淀粉浆，采用本领域公 知的方法制粒，50～60℃干燥，备用；
上述的粘合剂中，表面活性剂重量浓度为0.05～3％，粘合剂重量浓度 为5～10％
(3)青蒿琥酯加盐酸阿莫地喹复方制剂(双层片)的制备：
将青蒿琥酯颗粒和盐酸阿莫地喹颗粒采用压片机压片，即获得青蒿琥 酯加盐酸阿莫地喹双层片。
所说的压片机为一种通用设备，如型号为ZP-21W的压片机。
取其成品进行含量和溶出度检查，青蒿琥酯重量含量为98.2％～99.8％， 溶出度30分钟可达85％～97.5％；盐酸阿莫地喹重量含量为97.2％～99.8％， 溶出度30分钟可达85％～92.5％。
成品中含量和溶出度的测定分别按《中国药典2000年版中青蒿琥酯 片标准和《美国药典》27版中盐酸阿莫地喹片标准进行测定。
本发明的青蒿琥酯加盐酸阿莫地喹双层片可用于治疗恶性疟疾，剂量 一般为青蒿琥酯1～4mg/kg，阿莫地喹10mg～12mg/kg体重，具体可根据 患者的年龄、性别和病情由医师决定。可通过口服的方式施加于需要治疗 的患者。
由于本发明在片剂中添加了表面活性剂和与该表面活性剂配合的崩解 剂，因此，溶出度大大提高，可明显降低服用剂量和提高治疗效果，服用 方便，不会导致错误用药，尤其对于儿童和老人，更为方便。

                             实施例1
1.青蒿琥酯颗粒处方：
青蒿琥酯        50mg
玉米淀粉        40％
蔗糖            10％
羟丙基纤维素    10％
微晶纤维素            20％
硬脂酸镁              0.8％
以上均为重量浓度，以颗粒的重量为基准，下同。
2.盐酸阿莫地喹颗粒处方：
盐酸阿莫地喹(碱基)    150mg
玉米淀粉              9％
糊精                  8％
羟丙基纤维素          2％
微晶纤维素            7％
聚山梨酯80            0.05％
硬脂酸镁              1％
3.制备方法：
青蒿琥酯颗粒制备：
将青蒿琥酯按处方用量称量，置磨粉机内磨粉过60目筛，玉米淀粉、 蔗糖、羟丙基纤维素、微晶纤维素和硬脂酸镁分别按处方用量称量，过60 目筛，将活性成份和辅料混合后置制粒机中，用75％乙醇溶液作粘合剂， 制粒，于55℃干燥，16目筛整粒；
盐酸阿莫地喹颗粒制备：
将酸阿莫地喹按处方用量称量，置磨粉机内磨粉过60目筛，将盐酸 阿莫地喹、糊精、羟丙基纤维素、微晶纤维素和硬脂酸镁加入含聚山梨酯 80的玉米淀粉浆作粘合剂，制粒，于60℃干燥，16目筛整粒；
青蒿琥酯加盐酸阿莫地喹复方制剂(双层片)的制备：
将青蒿琥酯颗粒和盐酸阿莫地喹颗粒置于型号为ZP-21W的压片机内 压片，即可制得青蒿琥酯加盐酸阿莫地喹双层片。
采用本企业标准规定的方法进行成品化验，结果：
青蒿琥酯含量：98.8％，溶出度：45.6％；盐酸阿莫地喹含量：97.9％， 溶出度：52.8％
                             实施例2
1.青蒿琥酯颗粒处方
原辅料名称            用量(mg)
青蒿琥酯              50mg
玉米淀粉              38％
蔗糖                  10％
羟丙基纤维素          10％
微晶纤维素            20％
羧甲基淀粉钠          2％
硬脂酸镁              0.8％
2.盐酸阿莫地喹颗粒处方
盐酸阿莫地喹(碱基)    150mg
玉米淀粉              9％
糊精                  6％
羟丙基纤维素          2％
微晶纤维素            6％
羧甲基淀粉钠          2％
十二烷基硫酸钠        1％
硬脂酸镁              1％
制备方法同实施例1。
成品化验结果：青蒿琥酯含量：98.8％，溶出度：78.6％；盐酸阿莫地 喹含量：97.9％，溶出度：72.8％。
                             实施例3
1.青蒿琥酯颗粒处方：
青蒿琥酯              50mg
玉米淀粉              29％
蔗糖                  8％
羟丙基纤维素          15％
微晶纤维素            25％
羧甲基淀粉钠          3％
硬脂酸镁              0.8％
2.盐酸阿莫地喹颗粒处方：
盐酸阿莫地喹(碱基)    150mg
玉米淀粉              9％
糊精                  5％
羟丙基纤维素          3％
微晶纤维素            6％
羧甲基淀粉钠          3％
聚山梨酯80            0.1％
硬脂酸镁              1％
制备方法同实施例1。
成品化验结果：青蒿琥酯含量：98.8％，溶出度：82.4％；盐酸阿莫地 喹含量：97.9％，溶出度：75.9％
                             实施例4
1.青蒿琥酯颗粒处方：
青蒿琥酯              50mg
玉米淀粉              23％
蔗糖                  8％
羟丙基纤维素          20％
微晶纤维素            25％
羧甲基淀粉钠          4％
硬脂酸镁              0.8％
2.盐酸阿莫地喹颗粒处方：
盐酸阿莫地喹(碱基)    150mg
玉米淀粉              9％
糊精                  4％
羟丙基纤维素          4％
微晶纤维素            5％
羧甲基淀粉钠          3.5％
聚山梨酯80            1％
硬脂酸镁              1％
制备方法同实施例1。
成品化验结果：青蒿琥酯含量：98.8％，溶出度：90.2％；盐酸阿莫地 喹含量：97.9％，溶出度：87.6％
                             实施例5
1.青蒿琥酯颗粒处方：
青蒿琥酯              50mg
玉米淀粉              17.8％
蔗糖                  8％
羟丙基纤维素          25％
微晶纤维素            25％
羧甲基淀粉钠          4％
硬脂酸镁              1.0％
盐酸阿莫地喹颗粒处方
盐酸阿莫地喹(碱基)    150mg
玉米淀粉              9％
糊精                  3％
羟丙基纤维素          4％
微晶纤维素            5％
羧甲基淀粉钠          4％
聚山梨酯80            1.5％
硬脂酸镁              1.0％
制备方法同实施例1。
成品化验结果：青蒿琥酯含量：98.8％，溶出度：95.2％；盐酸阿莫地 喹含量：97.9％，溶出度：92.3％
                             实施例6
青蒿琥酯颗粒处方
青蒿琥酯              50mg
玉米淀粉              10.8％
蔗糖                  5％
羟丙基纤维素          30％
微晶纤维素            30％
羧甲基淀粉钠          4％
硬脂酸镁              1.0％
盐酸阿莫地喹颗粒处方
盐酸阿莫地喹(碱基)    150mg
玉米淀粉              9％
糊精                  3％
羟丙基纤维素          4％
微晶纤维素            4％
羧甲基淀粉钠          4％
聚山梨酯80            2.5％
硬脂酸镁              1.0％
制备方法同实施例1。
成品化验结果：青蒿琥酯含量：98.8％，溶出度：93.8％；盐酸阿莫地 喹含量：97.9％，溶出度：92.3％。
                             实施例7
采用实施例1的片剂进行试验，按实施例1方法进行青蒿琥酯颗粒和 盐酸阿莫地喹颗粒制备。取所制得的青蒿琥酯颗粒和盐酸阿莫地喹颗粒在 型号为ZP-21W压片机压片。对其成品进行检测，青蒿琥酯含量为99.3％， 溶出度为47.5％；盐酸阿莫地喹含量为98.9％，溶出度为41.5％。
青蒿琥酯加盐酸阿莫地喹双层片的抗疟药效学试验：
一.青蒿琥酯加盐酸阿莫地喹双层片对鼠疟原虫红内期的作用
1对鼠疟原虫正常株
方法：采用鼠疟原虫(Plasmodium berghei)正常株模型。取健康小 鼠雌雄一拘，体重18～22克，随机分组，每组20只鼠疟种鼠以拔眼法取 血。肝素抗凝，生理盐水稀释。每0.1ml血稀释液含疟原虫5000万个左右。 并腹腔接种，接种后24小时开始观察，从小鼠发烧开始，分别给不同剂 量的青蒿琥酯片、盐酸阿莫地喹片和实施例5的青蒿琥酯加盐酸阿莫地喹 双层片，连续3日。用药期间，测量小鼠体温，停药次日尾部取血涂箔、 厚血膜片，观察疟原虫转阴情况，结果见表1。
                             表1
青蒿琥酯片、盐酸阿莫地喹片和青蒿琥酯加盐酸阿莫地喹双层片对鼠疟原虫正常 株红内期的作用         药物     剂量   (mg/kg次)   给药途径   原虫转阴时间      (小时)  第一天发烧清     除率(％)     青蒿琥酯片      80     灌胃        60        90     青蒿琥酯片      120     灌胃        48        96   盐酸阿莫地喹片   碱基：150     灌胃        48        84 青蒿琥酯加盐酸阿莫     地喹双层片 青蒿琥酯：50 阿莫地喹：150    灌胃    36    97       对照组     停药次日计数原虫感染率为35％
结果：从表1可见较大剂量的青蒿琥酯片和盐酸阿莫地喹片原虫转阴 时间相同，但第一天发烧清除率较高；小剂量的青蒿琥酯片原虫转阴时间 较长，且第一天发烧清除率较大剂量的青蒿琥酯片低。但小剂量的青蒿琥 酯和同剂量盐酸阿莫地喹制成双层片用药后，其转阴速度比单用青蒿琥酯 片及盐酸阿莫地喹片快，第一天发烧清除率与大剂量的青蒿琥酯片相同。 上述结果表明青蒿琥酯与盐酸阿莫地喹联合用药，青蒿琥酯可增加盐酸阿 莫地喹的抗疟疾作用。
2对鼠疟原虫抗氯喹株
方法：基本同前，但采用鼠疟原虫抗氯喹株模型观察，药物则增加氯 喹，结果见表2。
                             表2
青蒿琥酯加盐酸阿莫地喹双层片对鼠疟原虫抗氯喹株红内期的作用         药物       剂量    (mg/kg次)   给药途径   原虫转阴时间      (小时)  第一天发烧清     除率(％)      青蒿琥酯片       80     灌胃        60       90      青蒿琥酯片       120     灌胃        48       96    盐酸阿莫地喹片    碱基：150     灌胃        48       84  青蒿琥酯加盐酸阿莫      地喹双层片  青蒿琥酯：50  阿莫地喹：150     灌胃        36       97         氯喹        80     灌胃        对照组     停药次日计数原虫感染率为36％
结果：从表2可见，青蒿琥酯加盐酸阿莫地喹双层片对抗氯喹株原 虫红内期有杀灭作用。而氯喹无作用，亦表明该产品与氯喹无交叉耐药性。
二.青蒿琥酯加盐酸阿莫地喹双层片毒性
用青蒿琥酯加盐酸阿莫地喹双层片对小鼠灌胃后观察了动物的急毒反 应，并测定LD50值及其95％可信限，结果如下：小鼠灌胃青蒿琥酯加阿 莫地喹双层片，剂量为750、600、450、300、150mg/kg(阿莫地喹)，中 毒症状为抽搐死亡。用Bliss法计算，小鼠(PO)LD50值为560.28mg/kg， 用95％可信限为480.08～640.48mg/kg。文献报道青蒿琥酯毒性口服LD50为 1002.57mg/kg，阿莫地喹毒性毒性口服LD50为550.00mg/kg，说明青蒿琥 酯毒性比阿莫地喹毒性小，制成复方片使用，毒性未见增加，毒性与阿莫 地喹单方相似。可见复方片在一定范围内应用是安全的。
三.青蒿琥酯加盐酸阿莫地喹双层片药代动力学
选用实施例5制成的青蒿琥酯加盐酸阿莫地喹双层片。选用1.5～2.0kg/ 只的家兔15只，均分为3组，每组雄兔4只，雌兔1只，口服(PO)含 青蒿琥酯25mg/kg、阿莫地喹75mg/kg的复方片；另选体重为14～20kg/只 的雄狗5只，口服(PO)含青蒿琥酯15mg/kg、阿莫地喹45mg/kg的复方 片，给药后不同时间由静脉取血，分离血清，置于-30℃保存备测，青蒿 琥酯采用放射免疫法测定，阿莫地喹采用高效液相色谱法测定，结果见表 3。
表3  兔和狗口服复方青蒿琥酯加阿莫地喹片的药代动力学参数        动物                  兔                  狗     剂量(mg/kg)     青蒿琥酯     阿莫地喹     青蒿琥酯    阿莫地喹     Art：25     Amod：75     Art：15    Amod：45    达峰时间(h)     0.75±0.20     1.1±0.38     0.85±0.21    1.05±0.42    峰浓度(ug/ml)     1.8±0.45     0.04±0.02     1.9±0.5    0.04±0.02    AUC(ugih/ml)     1.1±0.52     0.32±0.09     1.2±0.4    0.32±0.08     T1/2(h)   0.7±0.45   13.5±4.9   0.68±0.45   14.9±4.5
从表3中可知，兔和狗口服含青蒿琥酯和阿莫地喹复方片，青蒿琥酯、 阿莫地喹均能很好地吸收，达峰时间迅速，青蒿琥酯血中浓度高，代谢快， 阿莫地喹血中浓度低，代谢慢。