本申请是申请日为2005年8月16日、申请号为200580034401.8、发 明名称为“用作组织蛋白酶S抑制剂的化合物和组合物”的中国发明专利 申请的分案申请。

本发明涉及新的2-氰基嘧啶衍生物、它们的制备、它们作为药物的用 途、含有它们的药物组合物、这类化合物在制备用于治疗疼痛的药物中的 用途以及治疗温血动物、尤其是人的这类疾患的方法。

令人惊讶的是，已发现本文所描述的2-氰基嘧啶衍生物具有有利的药 理学特性并抑制例如组织蛋白酶S的活性。式I的2-氰基嘧啶衍生物因此 适合用于治疗其中组织蛋白酶S活性抑制引起有益效果的疾病。

式I的2-氰基嘧啶衍生物特别适合于治疗和预防神经病变性疼痛 (neuropathic pain)和以下所提及的其他疾病。

因此，本发明涉及式I的2-氰基嘧啶，

其中R1表示式Ia基团

其中A、E和G彼此独立地代表O、S或CH2，条件是A和E的至少一个 代表CH2；

如果G是CH2，则T是O、S或键，如果G是O或S，则T是键；

Ra、Rb和Rc彼此独立地代表氢或C1-C4烷基；

s是0、1或2，t是1、2、3或4，p是0、1或2；

R2表示卤素、C1-C4烷基、未取代或取代的芳基、5或6元杂环基、 -C(O)NR4R5、-NHC(O)R4或-CH2NHC(O)R4，其中

R4代表：

(a)C1-C7烷基，其未被取代或被以下基团取代：卤素；氨基，其被C3-C5 环烷基或C1-C6烷基单取代或二取代，后者在每种情况下未被取代或被卤 素单、二或三取代；包含至少一个氮原子的未取代或取代的C4-C8-脂族杂 环基；未取代或取代的芳基；未取代或取代的杂芳基；未取代或取代的螺 [4.5]癸烷，其包含1或2个选自氧、氮和硫的杂原子；未取代或取代的C3-C6 环烷基；或1-氮杂-(C5-C8)双环烷基；

(b)未取代或取代的N-(C1-C4烷基)哌啶基或N-(C4-C6环烷基)哌啶基；

(c)未取代或取代的芳基；

(d)未取代或取代的C3-C6环烷基；或

(e)含有一个氮原子的未取代或取代的5或6元杂芳基；且

R5代表氢或C1-C4烷基；或

R4和R5与它们所连接的氮一起代表包含至少一个氮原子的未取代或取代 的C4-C8-脂族杂环基；或

R2表示-N(R9)SO2R10，

R9代表氢或C1-C4烷基；且

R10代表C1-C4烷基，其未被取代或被芳基取代；或

R9和R10一起构成基团-(CRR′)m-，其中m是2且包括2至5且包括5的 整数，且R和R′均彼此独立地代表氢或C1-C4烷基；

R3表示氢、卤素、苯基、未被取代或被卤素单、二或三取代的吡啶基、Y-R6 或NR7R8，其中

Y代表O、CH2、S、SO、SO2或NRN，其中RN表示氢或未被取代或被 C1-C4烷氧基取代的C1-C4烷基；

R6代表C1-C6烷基、苯基、五或六元含氮杂芳基-(CH2)q-，其中q是0至 4的整数，或五或六元脂族杂环基-(CH2)n-，其中n是0至4的整数且杂环 基部分包含至少一个环氮原子，该基团在每种情况下可以未被取代或被取 代；

R7和R8与它们所连接的氮一起代表未取代或取代的五或六元脂族杂环基， 其中杂环基部分包含至少一个氮原子；

X表示O、HN、C1-C4烷基-N、S、SO、SO2、其中g是1或2的O(CH2)gNH、 其中h是1或2的(CH2)h或未被取代或被卤素、C1-C4烷基或C1-C4烷氧基 单、二或三取代的芳基；

及这类2-氰基嘧啶的盐和互变异构体。

上下文所使用的通用术语优选在本公开范围内具有以下含义，另有指 示除外。

若对化合物、盐等使用复数，则意味着也指单数化合物、盐等。

卤素或卤代尤其是氟、氯、溴或碘，尤其是氟、氯或溴。

烷基尤其是具有1且包括1至7且包括7、优选1且包括1至4且包 括4个碳原子的烷基，且为直链或支链的；优选地，烷基是甲基、乙基、 丙基如正丙基或异丙基、丁基如正丁基、仲丁基、异丁基或叔丁基。

烷氧基尤其是甲氧基、乙氧基或丙氧基。

环烷基尤其是C3-C6环烷基，即环丙基、环丁基、环戊基或环己基。

包含至少一个氮原子的脂族杂环基尤其是五或六元杂环基，具有一个 环氮原子和任选另外1或2个选自氮、氧和硫的环杂原子，其可以是全饱 和或部分饱和的，优选咪唑烷基、吡咯烷基、哌啶基、吗啉基、硫吗啉基 或哌嗪基，且该基团可以未被取代或被取代。

在未取代或取代的芳基中，芳基优选是具有6至14个环碳原子的单、 二或三环芳族烃基，尤其是苯基、萘基或芴基，更优选苯基。

本文所用的杂芳基尤其是噻吩基、吡咯基、呋喃基、噁唑基、异噁唑 基、异噻唑基、噻唑基、吡唑基、咪唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、吡 啶基、嘧啶基、吡嗪基，更优选噻吩基、呋喃基、吡啶基和吡唑基。

除非另外提及，本文所用术语“未取代或取代的”意指相关基团未被 取代或被一个或多个、优选至多4个、尤其是1或2个选自以下的取代基 取代：氧代、氨基、C1-C4烷基氨基、二(C1-C4烷基)-氨基、羟基-C1-C4烷 基氨基、苯基-C1-C4烷基氨基、C3-C5环烷基氨基、二(C3-C5)环烷基氨基、 N-C1-C4烷基-N-C3-C5环烷基氨基、C1-C4烷酰基氨基、卤素、羟基、C1-C4 烷氧基、未取代或取代的C3-C6环烷基、C3-C5环烷氧基、C1-C4烷氧基C1-C4 烷氧基、二(C1-C4烷基)-氨基C1-C4烷氧基、氨甲酰基、N-C1-C4烷基-氨甲 酰基、N，N-二(C1-C4烷基)-氨甲酰基、硝基、氰基、羧基、C1-C4烷氧基羰 基、C1-C4烷酰基、C1-C4烷酰氧基、苯甲酰基、脒基、胍基、脲基、巯基、 C1-C4烷硫基、吡啶基、C1-C4烷基吡啶基、苯基、未取代或取代的苯基、 苯氧基、C1-C4烷氧基苯基、苯硫基、苯基-C1-C4烷硫基、C1-C4烷基磺酰 基、苯基磺酰基、C1-C4烷基苯基磺酰基、C1-C4链烯基、未取代或取代的 C4-C8杂环基例如C5-C7氧杂环烷基或C5-C7二氧杂环烷基、未取代或取代 的C4-C8杂环氧基例如四氢吡喃氧基、未取代或取代的C4-C8杂环基C1-C4 烷氧基、键合在相邻环C原子的C1-C4亚烷二氧基，及C1-C4烷基，其未 被取代或被以下基团取代：卤素、羟基、C1-C4烷氧基、硝基、亚氨基、 氰基、羧基、C1-C4烷氧基羰基、C1-C4烷酰基、C1-C4烷酰氧基或未取代 或取代的C4-C8杂环基。

鉴于新化合物的游离形式和它们的盐形式、包括可用作例如纯化和鉴 别新化合物的中间体的那些盐形式之间的密切关系，上下文中任何对游离 化合物的称谓应理解为也酌情涉及相应的盐。

盐例如作为酸加成盐优选用有机或无机酸自具有碱性氮原子的式I化 合物形成，尤其是可药用盐。出于分离或纯化目的，也可能使用药学不可 接受的盐，例如苦味酸盐或高氯酸盐。对于治疗应用，仅使用可药用盐或 游离化合物(适用时为药物制剂形式)，因此这些盐是优选的。

式I化合物在哺乳动物中显示有价值的药理学特性，特别可用作组织 蛋白酶S抑制剂。式I化合物的组织蛋白酶S抑制效果可在体外通过测量 例如重组人组织蛋白酶S的抑制作用(体外组织蛋白酶S测定法)得到证实。

该体外测定法在透明、平底96孔微量滴定板(Greiner GmbH，德国) 中、于环境温度、使用重组人组织蛋白酶S进行。人组织蛋白酶S的抑制 作用在恒定的酶和各种底物(底物为Z-Leu-Leu-4-甲基香豆素基-7-酰胺 (Bachem(瑞士))浓度下测试，所述酶和底物处于100份含有2mM EDTA 的0.2M磷酸钠溶液pH 7.0、2份1％Triton X-100、10份20mM二硫苏 糖醇(DTT)和58份蒸馏水中。向含有各种浓度的相应底物和化合物的反应 混合物中加入酶溶液(浓度较重组人组织蛋白酶S的终浓度高13倍)以开始 测定。所使用的底物浓度为3.4至17μM。所使用的组织蛋白酶S终浓度 为0.04nM。所使用的供试化合物浓度为所确定的化合物对酶的IC50的0.4 至2倍。连续测定相对荧光达30分钟，由各个步进曲线获得初始速度。通 过Dixon plot分析确定抑制模式和Ki值。

一般而言，式I化合物抑制人组织蛋白酶S的IC50低于约350nM至 约1nM或更低，优选约50nM或更低。

鉴于式I化合物作为组织蛋白酶S抑制剂的活性，它们特别可用作治 疗和预防哺乳动物中涉及组织蛋白酶S水平升高的疾病和医学病症的活性 剂。这类疾病包括慢性神经病变性疼痛，例如病症如糖尿病性神经病、带 状疱疹后神经痛、三叉神经痛、致疼痛糖尿病性多发性神经病、中风后疼 痛(中枢疼痛)、截肢后疼痛、脊髓病或神经根病疼痛(例如锥管狭窄、蛛网 膜炎、神经根套膜纤维变性)、非典型颜面痛(atypical facial pain)和灼痛样 综合征(causalgia-like syndrome)(复杂性区域疼痛综合征)。

组织蛋白酶S存在于抗原呈递细胞中，在涉及抗原呈递的事件中扮演 重要角色。在这方面，组织蛋白酶S抑制剂可以是有用的活性剂，用于预 防、抑制或治疗免疫和自身免疫疾病，包括但不限于哮喘、类风湿性关节 炎、多发性硬化、系统性红斑狼疮、银屑病和局限性回肠炎，并用于预防、 抑制或治疗组织移植排斥。

此外，组织蛋白酶S可由一些抗原呈递细胞分泌，由此在细胞外基质 相互作用中扮演角色。因此，组织蛋白酶S抑制剂可以是有用的活性剂， 用于预防、抑制或治疗具有可能的炎性成分的神经变性疾病、阿尔茨海默 病、多发性硬化、帕金森病、亨庭顿舞蹈病、运动神经元疾病、肌萎缩侧 索硬化(ALS)、HIV神经病、糖尿病性神经病、吉-巴综合征、CIPD(慢性 炎性脱髓鞘性多发性神经根神经病)、其他脱髓鞘性疾病、脑膜炎、脑/脊 髓创伤、中风、精神分裂症。

组织蛋白酶S抑制剂可以是有用的活性剂，用于预防、抑制或治疗涉 及细胞外蛋白水解的各种其他疾病，如慢性阻塞性肺病中气肿的发生、动 脉粥样硬化、再狭窄和肿瘤细胞侵袭。

组织蛋白酶存在于炎性细胞中，组织蛋白酶S抑制剂可以是有用的活 性剂化合物，用于治疗克-雅病、间质性膀胱炎、炎性肠病和脉管炎性障碍 (vasculitic disorder)。

于如下所述且本领域熟知的体外和体内药理实验中评价有益效果。以 上所述性质可在体外和体内实验中证实，有利地使用哺乳动物例如大鼠、 小鼠、狗、兔、猴或离体器官和组织以及天然或例如通过重组技术制备的 哺乳动物酶制品进行。式I化合物可以以溶液形式、例如优选水溶液或悬 液于体外应用，经肠或胃肠外、有利地口服、例如作为悬液或水溶液或作 为固体胶囊或片剂制剂于体内应用。体外剂量可为约10-5至10-9摩尔浓度。 体内剂量取决于施用途径可约0.1至100mg/kg。

式I化合物用于治疗慢性炎性或神经病变性疼痛的功效可以利用以下 体内动物模型确定。

慢性炎性疼痛模型：

足底注射酵母多糖诱导的机械痛觉过敏可用作慢性炎性疼痛的模型 (Meller等人，Neuropharmacology 33：1471-1478，1994)。在该模型中，通 常使雄性Sprague-Dawley或Wistar大鼠(200-250g)接受一只后爪足底注射 3mg/100μl酵母多糖。在该后爪中出现显著的炎症。一般而言，在炎性攻 击后24小时，即机械痛觉过敏被视为完全建立时，施用药物以评价功效。 慢性神经病变性疼痛模型：

可以使用两种涉及某些形式外周神经损伤的慢性神经病变性疼痛动物 模型。在Seltzer模型中(Seltzer等人，(1990)Pain 43：205-218)，将大鼠麻 醉，在一只大腿(通常为左大腿)中线切一小切口，以暴露坐骨神经。小心 地将神经与周围结缔组织在转子附近、恰在后二头肌半腱肌神经与总坐骨 神经分叉点远端处剥离。用3/8曲形反切小针将7-0丝质缝合线插入神经， 并紧固结扎，使背部1/3至1/2的神经厚度被结扎线夹持。用缝合线和夹 子闭合肌肉和皮肤，伤口撒以抗生素粉。在假手术动物中暴露坐骨神经但 不结扎，如非假手术动物所述闭合伤口。

在慢性压迫损伤(CCI)模型中(Bennett，GJ.和Xie，Y.K.Pain(1988)33： 87-107)，将大鼠麻醉，在一只大腿(通常为左大腿)中线切一小切口，以暴 露坐骨神经。将神经与周围结缔组织剥离，将四条4/0铬制结扎线疏松地 系在神经周围，各自间隔约1mm，以使得结扎线恰好能压迫神经的表面。 如上所述用缝合线和夹子闭合伤口。在假手术动物中，将坐骨神经暴露但 不结扎，如非假手术动物所述闭合伤口。

与Seltzer和CCI模型相对照，Chung模型涉及结扎脊神经(Kim，S.O. 和Chung，J.M.Pain(1992)：50：355-363)。在该模型中，将大鼠麻醉，以卧 姿放置，在脊柱L4-S2节段左侧切口。经脊旁肌切开一深口，分离肌肉和 L4-S2节段的脊突，暴露部分坐骨神经，其分叉形成L4、L5和L6脊神经。 用小骨钳小心除去L6横突，使得这些脊神经能够显现出来。分离L5脊神 经，用7-0丝质缝合线紧密结扎。伤口用一根肌肉缝合线(6-0丝线)和1或 2个皮肤闭合夹闭合，撒以抗生素粉末。在假手术动物中，如前暴露L5 神经但不结扎，并如前闭合伤口。

行为指数

在所有慢性疼痛模型中(炎性和神经病变性)，通过使用Analgesymeter (Ugo-Basile，Milan)测量两只后爪对不断增加的压力刺激的爪回缩阈值来 评估机械痛觉过敏。机械触摸痛(allodynia)是通过测量对非伤害性机械刺 激的回缩阈值来评估，所述刺激用von Frey hair施加于两只后爪的足底表 面。热痛觉过敏是通过测量对施加于每只后爪底面的伤害性热刺激的回缩 潜伏期来评估。对于所有模型，机械痛觉过敏和触摸痛和热痛觉过敏在手 术后1-3天形成，持续至少50天。对于本文所述的测定法，可以在术前和 术后施用药物，以评估它们对痛觉过敏形成的效果，尤其是术后约14天， 测定它们逆转既已建立的痛觉过敏的能力。

痛觉过敏的逆转百分比如下计算：

％逆转＝(给药后阈值-给药前阈值)/(未试验阈值-给药前阈值)×100

在本文所述实验中，Wistar大鼠(雄性)用于上述疼痛模型中。大鼠在 手术时重约120-140克。所有手术在恩氟烷/O2吸入麻醉下进行。在所有情 况下，术后闭合伤口并使动物恢复。在所用所有疼痛模型中，除假手术动 物外的所有动物于若干天后出现显著的机械和热痛觉过敏和触摸痛，其中 出现疼痛阈值降低和后爪对触摸、压力或热刺激的反射回缩响应增强。手 术后，动物还显示出所受累爪的特征性改变。在绝大多数动物中，受累后 爪的脚趾保持成团且脚略微转向一侧；在一些大鼠中，脚趾还卷曲朝下。 结扎大鼠的步态各异，但不常见跛行。可见一些大鼠将受累后爪从笼底抬 起，显示后肢在把持时的不寻常刚性伸展。大鼠倾向于对触摸非常敏感并 且可能出声。另外，大鼠的一般健康状况良好。

本发明化合物治疗骨关节炎的功效可利用模型诸如或类似于家兔部分 外侧半月板切除术模型来确定，如先前所述(Colombo等人，Arth.Rheum. 199326，875-886)。化合物在该模型中的功效可利用组织学评分法定量，如 先前所述(O′Byrne等人，lnflamm Res 1995，44，S117-S118)。

式I化合物可单独或与一种或多种其他治疗剂联合施用，可能的联合 治疗采取固定组合的形式，或交错施用本发明化合物和一种或多种其他治 疗剂，或彼此独立地给予，或联合施用固定组合和一种或多种其他治疗剂。 对于疼痛的治疗而言，包含本文所公开的组织蛋白酶S抑制剂和加巴喷丁、 普瑞巴林(pregabalin)、非甾类抗炎药、COX-2抑制剂、类固醇、三环类 抗抑郁药、其他抗惊厥药(例如卡马西平、拉莫三嗪、奥卡西平)或阿片样 物质的具体组合是特别适合的。

本文所用的术语“阿片样物质”指的是具有吗啡样作用的所有天然和 合成药物。适合于本发明的阿片样物质尤其选自阿芬他尼、烯丙罗定、阿 法罗定、阿利尼定、苄吗啡、苯腈米特、丁丙诺啡、布托啡诺、氯尼他秦、 可待因、cyclorphan、去氧吗啡、右吗拉米、地佐辛、二苯丙二胺、双氢 可待因、双氢吗啡、依他佐辛、乙基吗啡、芬太尼、二氢可待因酮、氢吗 啡酮、羟哌替啶、左旋苯酰甲吗喃、左啡烷、罗芬太尼、甲基吗啡、吗啡、 necomorphine、去甲美沙痛、去甲吗啡、阿片、羟可待酮、羟吗啡酮、福 尔可定、普罗法多和舒芬太尼。

例如，阿芬他尼可以例如以其市售形式、例如商标RapifenTM施用； 烯丙罗定可以例如以其市售形式、例如商标AlperidineTM施用；阿利尼定 可以例如以其市售形式、例如商标LeritineTM施用；苄吗啡可以例如以其 市售形式、例如商标PeronineTM施用；苯腈米特可以例如以其市售形式、 例如商标BurgodinTM施用；丁丙诺啡可以例如以其市售形式、例如商标 BuprenexTM施用；布托啡诺可以例如以其市售形式、例如商标TorateTM施 用；右吗拉米可以例如以其市售形式、例如商标PalfiumTM施用；地佐辛 可以例如以其市售形式、例如商标DalganTM施用；双氢可待因可以例如以 其市售形式、例如商标NovicodinTM施用；双氢吗啡可以例如以其市售形 式、例如商标ParamorphanTM施用；依他佐辛可以例如以其市售形式、例 如商标SedapainTM施用；乙基吗啡可以例如以其市售形式、例如商标 DioninTM施用；芬太尼可以例如以其市售形式、例如商标FentanestTM或 LeptanalTM施用；二氢可待因酮可以例如以其市售形式、例如商标 BekadidTM或CalmodidTM施用；氢吗啡酮可以例如以其市售形式、例如商 标NovolaudonTM施用；羟哌替啶可以例如以其市售形式、例如商标 BemidoneTM施用；左啡烷可以例如以其市售形式、例如商标DromoranTM 施用；去甲美沙痛可以例如以其市售形式、例如商标TicardaTM施用；羟 可待酮可以例如以其市售形式、例如商标DihydroneTM施用，羟吗啡酮可 以例如以其市售形式、例如商标NumorphanTM施用。

在式I中，优选独立、联合或以任意组合或亚组合形式的以下含义。

R1表示式(Ia)基团：

其中A和G均代表O或均代表CH2，E是CH2，T是键；

Ra、Rb和Rc均代表氢；

s是0或1，t是1或2，更优选1，p是1；

R2优选表示-C(O)-NR4R5、-N(R9)-SO2-R10、溴、氯、C1-C4烷基、特别是 异丙基、未取代的苯基或含有至少一个氧原子的6元杂环基；

R3优选表示氢、Y-R6、NR7R8或C1-C4烷基，更优选Y-R6或NR7R8；

R4优选代表：

(a)C1-C7烷基，其未被取代或被以下基团取代：

氨基，其被C3-C5环烷基或C1-C6烷基单取代或二取代，后者未被取代或 被卤素三取代；

1-氮杂-(C4-C8)环烷基，其未被取代或被C1-C4烷基取代；

吡咯烷基，其未被取代或被卤素、C1-C4烷氧基、C1-C4烷氧基C1-C4烷基 或C1-C4烷基氨基取代；

哌啶基，其未被取代或被以下基团单或二取代：卤素、吡咯烷基、哌啶基、 二(卤代)哌啶基、(C4-C6)环烷基或C1-C6烷基，后者未被取代或被羟基或 卤素单取代或二取代；

哌嗪基，其被C1-C4烷基或苯基单取代或二取代；

苯基，其未被取代或被卤素、吗啉基、三氟甲基或C1-C4烷氧基单取代或 二取代；

卤素、C3-C5环烷基、吗啉基、噻吩基、呋喃基、吡啶基、2-氧杂-6-氮杂- 螺[4.5]癸烷或1-氮杂-(C5-C7)双环烷基；

(b)N-(C1-C4烷基)哌啶基，其被苯基取代；

(c)苯基，其被以下基团单、二或三取代：苯基、C3-C5环烷氧基、C1-C4烷 氧基、C1-C4烷氧基C1-C4烷氧基、C1-C4烷氧基苯基、二(C1-C4烷基)-氨基 C1-C4烷氧基、N-(C1-C4烷基)哌嗪基、N-(C1-C4烷基)哌啶氧基或N-(C1-C4 烷基)哌啶基C1-C4烷氧基；

(d)C3-C5环烷基；

(e)吡唑基，其被吡啶基或苯基单取代或二取代；或

(f)N-(C1-C6烷基)哌啶基或N-(C4-C6环烷基)哌啶基，在两种情况下均被苯 基C1-C4烷基取代，其中苯基未被取代或被卤素单取代；

R9优选代表氢或C1-C4烷基；

R10优选代表C1-C4烷基，其未被取代或被苯基取代；

X优选表示HN、C1-C4烷基-N或O；且

Y优选代表O或NH。

在R3中，吡啶基优选未被取代或被卤素、C1-C4烷基或哌嗪基单、二 或三取代。

在R4中，

●C1-C7烷基优选未被取代或被以下基团取代：氨基，其被C3-C5环烷基 或C1-C6烷基单或二取代，取代基在每种情况下未被取代或被卤素单、 二或三取代；包含至少一个氮原子的C4-C8-脂族杂环基，该基团未被取 代或被以下基团单、二或三取代：C1-C4烷基、卤素、C1-C4烷氧基、 C1-C4烷氧基C1-C4烷基、C1-C4烷基氨基、苯基、吡咯烷基、哌啶基、 二(卤代)-哌啶基、吗啉基、C4-C6环烷基或C1-C6烷基，后者被羟基或 卤素单、二或三取代；或苯基，其未被取代或被卤素、C1-C4烷氧基、 C1-C4烷氧基C1-C4烷基、三氟甲基或C4-C8-脂族杂环基单、二或三取 代；杂芳基，该基团未被取代或被以下基团单、二或三取代：C1-C4烷 基、卤素、C1-C4烷氧基、C1-C4烷氧基C1-C4烷基、C1-C4烷基氨基、 苯基、吡咯烷基、哌啶基、二(卤代)-哌啶基、吗啉基、C4-C6环烷基或 C1-C6烷基，后者被羟基或卤素单、二或三取代；螺[4.5]癸烷，其包含 1或2个选自氧、氮和硫的杂原子；卤素、C3-C6环烷基或1-氮杂-(C5-C8) 双环烷基；

●N-(C1-C4烷基)哌啶基优选被苯基取代；

●苯基优选被以下基团单、二或三取代：苯基、C3-C5环烷基氧基、C1-C4 烷氧基、C1-C4烷氧基C1-C4烷氧基、C1-C4烷氧基苯基、二(C1-C4烷基)- 氨基C1-C4烷氧基、N-(C1-C4烷基)哌嗪基、N-(C1-C4烷基)哌啶基氧基 或N-(C1-C4烷基)哌啶基C1-C4烷氧基；

●C3-C6环烷基优选未被取代；

●异噁唑基、咪唑基或吡唑基优选未被取代或被吡啶基或苯基单或二取 代；和

●N-(C1-C6烷基)哌啶基或N-(C4-C6环烷基)哌啶基优选被苯基C1-C4烷基 取代，其中苯基未被取代或被卤素单、二或三取代；

如果R4和R5与它们所连接的氮一起代表吡咯烷基或哌啶基，该基团 优选未被取代或被羟基、C1-C4烷氧基或C1-C4烷基单、二或三取代。

在R6中，C1-C6烷基优选未被取代或被以下基团单、二或三取代：吡 啶基、C1-C4烷基吡啶基、咪唑基、C1-C4烷基咪唑基、苯基、羟基苯基、 羟基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷氧基羰基、羟基C1-C4烷基氨基、C1-C4烷基 -氨基、二-(C1-C4烷基)-氨基、C1-C4烷酰基-氨基、苯基-C1-C4烷基氨基、 C1-C4烷硫基、吗啉基、吗啉基羰基、2-氧代-咪唑烷基、2-氧代-吡咯烷基、 C5-C7环烷基-氨基、C3-C5环烷基、氨基-C4-C7环烷基、羟基-C4-C7环烷基、 四氢吡喃基-氧基、N-(C1-C4烷基)哌嗪基、氧杂-C5-C6环烷基、二氧杂-C5-C7 环烷基，或哌啶基，其未被取代或被卤素、尤其氟、羟基、亚氨基-C1-C4 烷基、C1-C4烷基、C1-C4烷酰基、C1-C4烷基磺酰基或羟基C1-C4烷基取代。

在一个优选的实施方案中，R6代表(a)C1-C6烷基，其未被取代或被二 -(C1-C4烷基)-氨基、N-(C1-C4烷基)哌嗪基或羟基取代，或(b)N-(Q)-哌啶基 -(CH2)n-，其中n是0至4的整数，且Q是氢、C1-C4烷基或N-(C1-C4烷 基)哌啶基。

优选地，R7和R8与它们所连接的氮一起代表哌啶基，其未被取代或 被以下基团取代：C1-C4烷基、羟基、氨基羰基、氨基C1-C4烷基、羟基 C1-C4烷基，或未被取代或取代的C4-C8脂族杂环基；吗啉基或硫吗啉基， 其未被取代或被C1-C4烷基或氧代基取代；哌嗪基，其未被取代或被C1-C4 烷基或C1-C4烷氧基C1-C4烷基取代，或吡咯烷基，其未被取代或被羟基 C1-C4烷基、C1-C4烷氧基C1-C4烷基、甲酰基、二-C1-C4烷基氨基、C1-C4 烷基氨基、氨基、C1-C4烷酰基氨基或氨基羰基取代，

如果R7和R8与它们所连接的氮一起代表哌啶基，该基团优选被 N-(C1-C4烷基)哌嗪基取代。

在R10中，C1-C4烷基优选未被取代或被苯基取代。

在X中，苯基优选未被取代或被卤素、C1-C4烷基或C1-C4烷氧基单、 二或三取代。

本发明特别涉及式I的2-氰基-嘧啶，其中R1表示式(Ia)基团，

其中A、E和G彼此独立地代表O、S或CH2，条件是至少A和E之

一代表CH2；

如果G是CH2，则T是O、S或键，如果G是O或S，则T是键；

Ra、Rb和Rc彼此独立地代表氢或C1-C4烷基；

s是0或1，t是1、2、3或4，且p是0、1或2；

R2表示卤素、C1-C4烷基、未取代或取代的苯基、5或6元杂环基、 -C(O)NR4R5、-NHC(O)R4、-CH2NHC(O)R4或-N(R9)SO2R10，其中：

R4代表：

(a)C1-C7烷基，其未被取代或被以下基团取代：

氨基，其被C3-C5环烷基或C1-C6烷基单或二取代，后者未被取代或被 卤素三取代：

氮杂-(C4-C8)环烷基，其未被取代或被以下基团取代：卤素、C1-C4烷氧 基、C1-C4烷氧基C1-C4烷基、C1-C4烷基氨基、吡咯烷基、哌啶基、二 (卤代)-哌啶基、(C4-C6)环烷基或C1-C6烷基，后者未被取代或被羟基或 卤素单或二取代；

哌嗪基，其被C1-C4烷基或苯基单或二取代；或

苯基，其未被取代或被卤素、吗啉基、三氟甲基或C1-C4烷氧基单或二 取代；

卤素、C3-C5环烷基、吗啉基、噻吩基、呋喃基、吡啶基、2-氧杂-6-氮 杂-螺[4.5]癸烷或1-氮杂-(C5-C7)双环烷基；

(b)N-(C1-C4烷基)哌啶基，其被苯基取代；

(c)苯基，其被以下基团单、二或三取代：苯基、C3-C5环烷氧基、C1-C4 烷氧基、C1-C4烷氧基C1-C4烷氧基、C1-C4烷氧基苯基、二(C1-C4烷基)- 氨基C1-C4烷氧基、N-(C1-C4烷基)哌嗪基、N-(C1-C4烷基)哌啶基氧基 或N-(C1-C4烷基)哌啶基C1-C4烷氧基；

(d)C3-C5环烷基；

(e)异噁唑基、咪唑基或吡唑基，在每种情况下被吡啶基或苯基单或二 取代；或

(f)N-(C1-C6烷基)哌啶基或N-(C4-C6环烷基)哌啶基，其在两种情况下 均被苯基C1-C4烷基取代，其中苯基未被取代或被卤素单取代；且 R5代表氢或C1-C4烷基；或

R4和R5与它们所连接的氮一起代表吡咯烷基或哌啶基，其未被取代或 被羟基取代；

R9代表氢或C1-C4烷基；且

R10代表C1-C4烷基，其未被取代或被苯基取代；或

R9和R10一起形成基团-(CRR’)m-，其中m是2且包括2至4且包括4 的整数，且R和R’均代表氢；

R3表示氢、卤素、苯基、吡啶基-其未被取代或被卤素或哌嗪基单取代、 Y-R6或NR7R8，其中：

Y代表O、CH2、S、SO、SO2或NRN，其中RN表示氢或未被取代或 被C1-C4烷氧基取代的C1-C4烷基；

R6代表C1-C6烷基、苯基、五或六元含氮杂芳基-(CH2)q-，其中q是0 至4的整数，或五或六元脂族杂环基-(CH2)n-，其中n是0至4的整 且杂环基部分包含至少一个环氮原子，这些基团在每种情况下可未 被取代或被取代；

R7和R8与它们所连接的氮一起代表未取代或取代的五或六元脂族杂环 基，其中杂环基部分包含至少一个氮原子；

X表示O、HN、C1-C4烷基-N、S、SO、SO2、OCH2CH2NH、CH2或苯基， 其未被取代或被卤素单取代；

或这类2-氰基-嘧啶的盐。

特别地，优选式I化合物，其中：

R1表示式(Ia)基团：

其中A、E和G彼此独立地代表O、S或CH2，条件是至少A和E之 一代表CH2；

如果G是CH2，则T是O、S或键，如果G是O或S，则T是键；

Ra、Rb和Rc彼此独立地代表氢或C1-C4烷基；

s是0或1，t是1、2、3或4，且p是0、1或2；

R2表示溴代、氯代、C1-C4烷基、未取代的苯基或含有至少一个氧原子的 六元杂环基、-C(O)-NR4R5或-N(R9)-SO2-R10，其中R4代表：

(a)C1-C7烷基，其未被取代或被以下基团取代：

氨基，其被C3-C5环烷基或C1-C6烷基单或二取代，后者未被取代或被 卤素三取代：

氮杂-(C4-C8)环烷基，其未被取代或被以下基团取代：卤素、C1-C4烷氧 基、C1-C4烷氧基C1-C4烷基、C1-C4烷基氨基、吡咯烷基、哌啶基、二 (卤代)-哌啶基、(C4-C6)环烷基或C1-C6烷基，后者未被取代或被羟基或 卤素单或二取代；

哌嗪基，其被C1-C4烷基或苯基单或二取代；或

苯基，其未被取代或被卤素、吗啉基、三氟甲基或C1-C4烷氧基单或二 取代；

卤素、C3-C5环烷基、吗啉基、噻吩基、呋喃基、吡啶基、2-氧杂-6-氮 杂-螺[4-5]癸烷或1-氮杂-(C5-C7)双环烷基；

(b)N-(C1-C4烷基)哌啶基，其被苯基取代；

(c)苯基，其被以下基团单、二或三取代：苯基、C3-C5环烷氧基、C1-C4 烷氧基、C1-C4烷氧基C1-C4烷氧基、C1-C4烷氧基苯基、二(C1-C4烷基)- 氨基C1-C4烷氧基、N-(C1-C4烷基)哌嗪基、N-(C1-C4烷基)哌啶基氧基 或N-(C1-C4烷基)哌啶基C1-C4烷氧基；

(d)C3-C5环烷基；

(e)吡唑基，其被吡啶基或苯基单或二取代；或

(f)N-(C1-C6烷基)哌啶基或N-(C4-C6环烷基)哌啶基，其在两种情况下 均被苯基C1-C4烷基取代，其中苯基未被取代或被卤素单取代；且

R5代表氢或C1-C4烷基；或

R4和R5与它们所连接的氮一起代表吡咯烷基；

R9代表氢或C1-C4烷基；且

R10代表C1-C4烷基，其未被取代或被苯基取代；或

R9和R10一起形成基团-(CRR′)m-，其中m是2且包括2至4且包括4 的整数，且R和R’均代表氢；

R3表示氢、Y-R6或NR7R8，其中

Y代表O或NRN，其中RN表示氢或未被取代或被C1-C4烷氧基取代 的C1-C4烷基；

R6代表C1-C6烷基、苯基、五或六元含氮杂芳基-(CH2)q-，其中q是0 至4的整数，或五或六元脂族杂环基-(CH2)n-，其中n是0至4的整 数且杂环基部分包含至少一个环氮原子，这些基团在每种情况下可 未被取代或被取代；

R7和R8与它们所连接的氮一起代表未取代或取代的五或六元脂族杂环 基，其中杂环基部分包含至少一个氮原子；

X表示HN、C1-C4烷基-N或O；

以及这类2-氰基-嘧啶的相应的盐。

更优选式I的2-氰基-嘧啶，其中：

R1表示式(Ia)基团，

其中A、E和G彼此独立地代表O或CH2，条件是至少A和E之一 代表CH2；

如果G是CH2，则T是O或键，如果G是O，则T是键；

Ra、Rb和Rc均代表氢；

s是0或1，t是1或2，且p是1；

R2表示溴代、氯代、异丙基、未取代的苯基或含有两个氧原子的六元杂环 基、-C(O)-NR4R5或-N(R9)-SO2-R10，其中R4代表：

(a)C1-C7烷基，其未被取代或被以下基团取代：

氨基，其被C3-C5环烷基或C1-C6烷基单或二取代，后者未被取代或被 卤素三取代：

1-氮杂-(C7-C8)环烷基，其未被取代或被C1-C4烷基取代；

1-氮杂-(C4)环烷基，其未被取代或被C1-C4烷基取代；

吡咯烷基，其未被取代或被卤素、C1-C4烷氧基、C1-C4烷氧基C1-C4 烷基或C1-C4烷基氨基取代；

哌啶基，其未被取代或被以下基团单或二取代：卤素、吡咯烷基、哌啶 基、二(卤代)-哌啶基、(C4-C6)环烷基或C1-C6烷基，后者未被取代或被 羟基或卤素单或二取代；

哌嗪基，其被C1-C4烷基或苯基单或二取代；或

苯基，其未被取代或被卤素、吗啉基、三氟甲基或C1-C4烷氧基单或二 取代；

卤素、C3-C5环烷基、吗啉基、噻吩基、呋喃基、吡啶基、2-氧杂-6-氮 杂-螺[4.5]癸烷或1-氮杂-(C5-C7)双环烷基；

(b)N-(C1-C4烷基)哌啶基，其被苯基取代；

(c)苯基，其被以下基团单、二或三取代：苯基、C3-C5环烷氧基、C1-C4 烷氧基、C1-C4烷氧基C1-C4烷氧基、C1-C4烷氧基苯基、二(C1-C4烷基)- 氨基C1-C4烷氧基、N-(C1-C4烷基)哌嗪基、N-(C1-C4烷基)哌啶基氧基 或N-(C1-C4烷基)哌啶基C1-C4烷氧基；

(d)C3-C5环烷基；

(e)吡唑基，其被吡啶基或苯基单或二取代；或

(f)N-(C1-C6烷基)哌啶基或N-(C4-C6环烷基)哌啶基，其在两种情况下 均被苯基C1-C4烷基取代，其中苯基未被取代或被卤素单取代；且

R5代表氢或C1-C4烷基；或

R4和R5与它们所连接的氮一起代表吡咯烷基；

R9代表氢或C1-C4烷基；且

R10代表C1-C4烷基，其未被取代或被苯基取代；或

R9和R10一起形成基团-(CRR′)m-，其中m是2且包括2至4且包括4 的整数，且R和R’均代表氢；

R3表示氢、Y-R6或NR7R8，其中

Y代表O或NRN，其中RN表示氢或未被取代或被C1-C4烷氧基取代 的C1-C4烷基；

R6代表C1-C6烷基、苯基、五或六元含氮杂芳基-(CH2)q-，其中q是0 至4的整数，或五或六元脂族杂环基-(CH2)n-，其中n是0至4的整 数且杂环基部分包含至少一个环氮原子，这些基团在每种情况下可 未被取代或被取代；

R7和R8与它们所连接的氮一起代表未取代或取代的五或六元脂族杂环 基，其中杂环基部分包含至少一个氮原子；

X表示HN、C1-C4烷基-N或O；

或这类2-氰基-嘧啶的盐。

特别优选的本发明化合物是实施例的化合物。

相应地，在其他方面，本发明提供了：

●用于人和动物体的治疗方法中的式I的2-氰基-嘧啶或其互变异构体或 这类化合物的可药用盐；

●式I的2-氰基-嘧啶或其互变异构体或这类化合物的可药用盐在制备用 于治疗神经病变性疼痛或本文所述另一种疾病的药物产品中的用途；

●治疗神经病变性疼痛或本文所述另一种疾病的方法，其包括向需要这类 治疗的温血动物以有效对抗这类疾病的量施用式I的2-氰基-嘧啶或其 互变异构体或其可药用盐；

●药物制剂，包含式I的2-氰基-嘧啶或其互变异构体或这类化合物的可 药用盐或其水合物或溶剂合物以及至少一种可药用载体；

●在哺乳动物中使用式I化合物及其可药用盐或其药物组合物的方法，用 于抑制组织蛋白酶S并用于治疗组织蛋白酶S依赖型病症，如本文所 述的组织蛋白酶S依赖型病症，例如慢性炎性或神经病变性疼痛；和

●选择性抑制哺乳动物组织蛋白酶S活性的方法，其包括向有需要的哺乳 动物施用有效抑制组织蛋白酶S量的式I化合物，更具体而言涉及治疗 哺乳动物慢性炎性或神经病变性疼痛(或本文所述的另一种疾病)的方 法，包括向有需要的哺乳动物施用相应有效量的式I化合物。

式I化合物可以通过尽管迄今未应用于本发明的新化合物但本身已知 的方法制备，尤其是特征如下的方法：

a)对于如下式I化合物的合成而言，其中R2代表-C(O)NR4R5，R3表示氢、 卤素、苯基、未被取代或被卤素单、二或三取代的吡啶基、其中Y代表O、 NH或S的Y-R6或NR7R8，X表示HN、C1-C4烷基-N、O(CH2)gNH、O 或S且其余基团或符号R1、R4、R5、R6、R7、R8和g如对式I化合物所 定义，

使式II的5-嘧啶基甲酸

其中R3表示氢、卤素、苯基、未被取代或被卤素单、二或三取代的吡啶基、 其中Y代表O、NH或S的Y-R6或NR7R8，X表示HN、C1-C4烷基-N、 O(CH2)gNH、O或S，且其余基团或符号R1、R6、R7、R8和g如对式I化 合物所定义，

如方法变体(a)下所定义与式III的胺反应，

其中符号R4和R5如对式I化合物所定义；

b)作为替代选择，对于如下式I化合物的合成而言，其中R2代表 -C(O)NR4R5，R3表示氢、卤素、苯基、未被取代或被卤素单、二或三取代 的吡啶基、其中Y代表O、NH或S的Y-R6或NR7R8，X表示HN、C1-C4 烷基-N、O(CH2)gNH、O或S且其余基团或符号R1、R4、R5、R6、R7、 R8和g如对式I化合物所定义，

使式IV的6-氯嘧啶衍生物

其中R2表示-C(O)NR4R5，R3表示氢、卤素、苯基、未被取代或被卤素单、 二或三取代的吡啶基、其中Y代表O、NH或S的Y-R6或NR7R8，且其 余基团R6、R7和R8如对式I化合物所定义，

如方法变体(b)下所定义与式V化合物反应，

R1-X-H(V)

其中X表示HN、C1-C4烷基-N、O(CH2)gNH、O或S且R1具有如对式I 化合物所定义的含义；

c)对于如下式I化合物的合成而言，其中R2表示-N(R9)SO2R10，R3表示氢、 卤素、苯基、未被取代或被卤素单、二或三取代的吡啶基、其中Y代表O、 NH或S的Y-R6或NR7R8，X表示HN、C1-C4烷基-N、O(CH2)gNH、O 或S，且其余基团和符号R1、R6、R7、R8、R9、R10和g如对式I化合物 所定义，

使式VI的5-氨基嘧啶

其中R3表示氢、卤素、苯基、未被取代或被卤素单、二或三取代的吡啶基、 其中Y代表O、NH或S的Y-R6或NR7R8，X表示HN、C1-C4烷基-N、 O(CH2)gNH、O或S，且其余基团和符号R1、R6、R7、R8和g如对式I 化合物所定义，

如方法变体(c)下所定义与式VII的磺酰卤反应，

其中基团R10如对式I化合物所定义，且Hal表示卤素，

任选地继之以借助烷基化反应将所得式I化合物的磺酰胺官能团中的氢原 子用基团R9替代；

其中在所有情况下，如果必要，式II至VII的原料也可以具有被保护形式 的官能团，和/或为盐的形式，只要存在成盐基团并且盐形式的反应是可能 的；

其中随后除去被保护式I化合物衍生物中的任何保护基；

并且如果需要，将可得到的式I化合物转化为另一种式I化合物，将游离 式I化合物转化为盐，将可得到的式I化合物的盐转化为游离化合物或另 一种盐，和/或将式I的异构体化合物混合物分离为单个的异构体。

方法变体(a)、(b)和(c)的详细描述：

方法变体(a)

式II羧酸的胺化可通过本领域已知的标准工艺完成，例如通过添加适 合的偶联剂如POCl3、硫酰氟氯(sulfuryl chloride fluoride)、P2I4或特别是 N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC-HCI)或N，N′-二环己 基碳二亚胺(DCC)使两者化合物在适合的溶剂中反应。当使用EDC-HCl 或DCC时，反应可在例如二甲基甲酰胺中、在约10℃至约35℃的温度、 例如约20至24℃进行约3至48小时，例如24小时或36小时。

方法变体(b)

反应优选在可用于氨基化合物亲核置换离去基团的标准条件下进行。 式IV的6-氯嘧啶衍生物可以与式V的亲核体在碱存在下、在适合的溶剂 中反应。如果例如X表示NH、C1-C4烷基-N或O(CH2)gNH，则反应可通 过向适合溶剂中的式IV和V的原料添加碱进行，例如氮碱如三乙胺或碱 性盐如碱金属碳酸盐例如碳酸钾，所述溶剂如醚，例如二噁烷或四氢呋喃， 或腈如乙腈，并加热反应混合物至约溶剂的回流温度达约6至12小时，尤 其是8小时至10小时。

方法变体(c)

其中R2表示-N(R9)SO2R10的式I的磺酰胺可如下制备：在约10℃至 约50℃的温度，例如约20至25℃，在等摩尔量的吡啶或类似的碱以及任 选催化量的二甲基氨基吡啶存在下，将式VII的磺酰卤加至式VI的胺在 适合溶剂如二氯甲烷或氯仿中的溶液达约1至12小时，例如2小时至6 小时。

保护基

如果存在一个或多个其他官能团例如羧基、羟基、氨基或巯基，可能 需要在原料中通过保护基保护。所使用的保护基可以已经存在于前体中并 且应该保护有关官能团以免发生不需要的次级反应，如酰化、醚化、酯化、 氧化、溶剂分解和类似的反应。保护基的特征在于它们自身通常通过溶剂 分解、还原、光解或还通过酶活性、例如在类似于生理条件的条件下易于 除去，即无不可取的次级反应，并且它们不会存在于终产物中。专业人员 了解或可容易地确立何种保护基适合于上下文中所述的反应。

这类官能团被这类保护基的保护、保护基自身以及它们的除去反应例 如在标准参考书中述及，如J.F.W.McOmie，“有机化学中的保护基”， Plenum Press，伦敦和纽约1973；T.W.Greene，“有机合成中的保护基”， Wiley，纽约1981；“The Peptides”，第3卷(编辑：E.Gross和J. Meienhofer)，Academic Press，伦敦和纽约1981；“Methoden der organischen Chemie”(有机化学方法)，Houben Weyl，第4版，第15/1卷， Georg Thieme Verlag，Stuttgart 1974；H.-D.Jakubke和H.Jescheit， Peptide，Proteine”(氨基酸、肽和蛋白质)，Verlag Chemie， Weinheim，Deerfield Beach和Basel 1982；以及Jochen Lehmann，“Chemie der Kohlenhydrate：Monosaccharide und Derivate”(碳水化合物化学：单 糖和衍生物)，Georg Thieme Verlag，Stuttgart 1974。

其他方法步骤

具有成盐基团的式I化合物的盐可以以本身已知的方式制备。式I化 合物的酸加成盐因此可通过用酸或用适合的阴离子交换试剂处理而获得。 具有两个酸分子的盐(例如式I化合物的二卤化物)也可以转化为每化合物 具有一个酸分子的盐(例如单卤化物)；这可以通过加热至熔化或例如通过 在高真空、在升高的温度例如130至170℃作为固体加热来完成，每分子 式I化合物被驱除一分子的酸。

盐通常可转化为游离化合物，例如通过用适合的碱性试剂处理，例如 碱金属碳酸盐、碱金属碳酸氢盐或碱金属氢氧化物，通常为碳酸钾和氢氧 化钠。

一般方法步骤

本文所述的所有方法步骤可在已知反应条件下进行，优选在那些特别 提及的条件下，不存在或通常存在溶剂或稀释剂，优选对所使用试剂呈惰 性并能够溶解它们的那些，不存在或存在催化剂、缩合剂或中和剂，例如 离子交换剂，通常为阳离子交换剂，例如H+型阳离子交换剂，取决于反应 和/或反应物的类型，在降低的、正常或升高的温度，例如在-100℃至约 190℃、优选约-80℃至约150℃、例如-80至-60℃、在室温、在-20至40℃ 或在所用溶剂的沸点温度，在大气压下或在密闭容器中、酌情在压力下， 和/或在惰性气氛中，例如在氩或氮气氛下。

盐可以存在于所有起始化合物和中间体中，如果它们含有成盐基团的 话。盐也可以存在于该类化合物的反应过程中，只要反应不因此被中断即 可。

可从中选择的适合于所述反应的溶剂包括例如水；酯，通常为低级烷 基-低级链烷酸酯，例如二乙基乙酸酯；醚，通常为脂族醚，例如二乙基醚， 或环状醚，例如四氢呋喃；液体芳族烃，通常为苯或甲苯；醇，通常为甲 醇、乙醇或1-或2-丙醇；腈，通常为乙腈；卤代烃，通常为二氯甲烷；酰 胺，通常为二甲基甲酰胺；碱，通常为杂环氮碱，例如吡啶；羧酸，通常 为低级链烷羧酸，例如乙酸；羧酸酐，通常为低级链烷酸酐，例如乙酸酐； 环状、直链或支链烃，通常为环己烷、己烷或异戊烷，或这些溶剂的混合 物，例如水溶液，除非在方法描述中另外提及。这类溶剂混合物也可以用 于例如色谱或分配处理中。

在优选的实施方案中，按照或类似于实施例中所定义的方法或方法步 骤制备式I化合物。

活性成分的剂量取决于各种因素，包括患者的类型、种属、年龄、体 重、性别和医学状况；待治疗病症的严重性；施用途径；患者的肾和肝功 能；以及所使用的具体化合物。普通技能的内科医生、临床医生或兽医能 够容易地确定并开具防止、对抗或遏制病症进展所需的药物有效量。使药 物浓度处于产生功效而无毒性范围的过程中的最佳精密度需要基于药物对 目标位点可利用性的动力学的方案。这涉及对药物分布、平衡和消除的考 虑。

本发明还涉及药物组合物，其包含有效量的、尤其是治疗上述疾病之 一有效量的式I化合物或其互变异构体以及可药用载体，所述载体适合于 局部、肠内、例如口服或直肠或胃肠外施用且可以是无机或有机的固体或 液体。用于口服施用的尤其有片剂或明胶胶囊，其包含活性成分以及稀释 剂，例如乳糖、右旋糖、甘露醇和/或甘油，和/或润滑剂和/或聚乙二醇。 片剂也可以包含粘合剂，例如硅酸铝镁、淀粉如玉米、小麦或稻米淀粉、 明胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和/或聚乙烯吡咯烷酮，如果需要还含 有崩解剂，例如淀粉、琼脂、海藻酸或其盐如藻酸钠，和/或泡腾混合物或 吸附剂、染料、调味剂和甜味剂。也可以使用本发明药理学活性化合物的 胃肠外可施用组合物形式或输注溶液形式。药物组合物可以是无菌的和/ 或可包含赋形剂，例如防腐剂、稳定剂、润湿剂和/或乳化剂、增溶剂、调 节渗透压的盐和/或缓冲剂。本发明的药物组合物如果需要可包含其他药理 学活性物质，其以本身已知的方式制备，例如借助常规的混合、制粒、成 型、溶解或冻干方法，且包含约1％至95％、尤其约1％至约20％一种或 多种活性成分。

原料

式II至VII的原料是已知的、商购可得或可类似于或按照本领域已知 的、实施例中所述的或特别是如下所述的方法合成。

式II的5-嘧啶基甲酸

其中R3表示氢、卤素、苯基、吡啶基-未被取代或被卤素单、二或三取代、 其中Y代表O、NH或S的Y-R6或NR7R8，X表示HN、C1-C4烷基-N或 O(CH2)gNH，其余基团或符号R1、R6、R7、R8和g如对式I化合物所定义， 可如下获得：使式VIII的5-嘧啶基甲酸卤

其中R3表示氢、卤素、苯基、吡啶基-未被取代或被卤素单、二或三取代、 其中Y代表O、NH或S的Y-R6或NR7R8，且其余基团R6、R7和R8如对 式I化合物所定义，

在第一步中与醇AlkOH反应，其中Alk表示烷基、优选C1-C4烷基， 在第二步中与式V的胺反应，

R1-X-H(V)

其中X表示HN、C1-C4烷基-N、O(CH2)gNH，且R1如对式I化合物所定 义，

以便制备式IX的2-氯-嘧啶，

其中R3表示氢、卤素、苯基、吡啶基-未被取代或被卤素单、二或三取代、 其中Y代表O、NH或S的Y-R6或NR7R8，Alk表示烷基、优选C1-C4烷 基，X表示HN、C1-C4烷基-N、O(CH2)gNH，且g、R1、R6、R7和R8如 对式I化合物所定义。

式VIII的5-嘧啶基甲酸卤与醇AlkOH的反应可在常规条件下进行， 例如将酰卤溶于适合的溶剂如二氯甲烷中，并在-10至25℃的温度、优选 约0℃交错或同时加入醇和等当量的适合的碱如三(C1-C4烷基)胺。所得甲 酸酯可有利地未经中间体分离进一步反应，在-10至+25℃的温度如约0℃ 添加式V的胺和等当量的适合的碱，如与以上所用三(C1-C4烷基)胺相同或 不同的碱。

然后，使式IX的2-氯-嘧啶与碱金属氰化物如氰化钾在适合的溶剂如 二甲基甲酰胺或二甲亚砜中、在适合的碱如1，4-二氮杂双环[2.2.2]辛烷存在 下、在+15至+35℃的温度、优选在约20至25℃进一步反应15至360分 钟，其中在式IX中R3表示氢、卤素、苯基、吡啶基-未被取代或被卤素 单、二或三取代、其中Y代表O、NH或S的Y-R6或NR7R8，Alk表示烷 基、优选C1-C4烷基，X表示HN、C1-C4烷基-N、O(CH2)gNH且g、R1、 R6、R7和R8如对式I化合物所定义，得到式X的2-氰基-嘧啶-5-甲酸酯

其中R3表示氢、卤素、苯基、吡啶基-未被取代或被卤素单、二或三取代、 其中Y代表O、NH或S的Y-R6或NR7R8，Alk表示烷基、优选C1-C4烷 基，X表示HN、C1-C4烷基-N、O(CH2)gNH，且g、R1、R6、R7和R8如 对式I化合物所定义。然后，通过加入大量过量的水，使所述式X的甲酸 酯在本领域已知由适合的碱催化的条件下最后进行皂化反应，得到如上所 定义的式II的5-嘧啶基甲酸。例如，可将甲酸酯溶于与水混溶的溶剂如四 氢呋喃中，并在-5至20℃的温度、优选约0℃加入适合的碱如氢氧化锂 在水中的溶液。

式II的5-嘧啶基甲酸

其中R3表示氢、卤素、苯基、吡啶基-未被取代或被卤素单、二或三取代、 其中Y代表O、NH或S的Y-R6或NR7R8，X表示O或S，且其余基团 R1、R6、R7和R8如对式I化合物所定义，可如下获得：使其中R3表示氢、 卤素、苯基、吡啶基-未被取代或被卤素单、二或三取代、其中Y代表O、 NH或S的Y-R6或NR7R8且其余基团R6、R7和R8如对式I化合物所定义 的式VIII的5-嘧啶基甲酰卤在第一步中与水反应，在第二步中与式V的 醇或硫醇反应，其中X表示O或S且R1如对式I化合物所定义，以便制 备式XI的2-氯-嘧啶基-5-甲酸，

其中R3表示氢、卤素、苯基、吡啶基-未被取代或被卤素单、二或三取代、 其中Y代表O、NH或S的Y-R6或NR7R8，X表示O或S，且其余基团 R1、R6、R7和R8如对式I化合物所定义。

式VIII的5-嘧啶基甲酰卤与水的反应可在常规条件下进行，例如将酰 卤溶解于适合的与水混溶的溶剂如四氢呋喃中，在15至35℃、优选约20 至25℃加入过量的水。使所得羧酸与强碱如叔丁醇钾和式V的醇或硫醇 在适合的溶剂如四氢呋喃中、在-10至20℃的温度、优选约0℃反应30 至360分钟。

然后，使其中各基团具有如上所提供含义的式XI的2-氯-嘧啶基-5-甲 酸在适合的溶剂如二甲基甲酰胺中、在30至60℃的温度、优选在约45 至55℃与过量的烯丙基卤、例如烯丙基溴在适合的碱如碳酸钾存在下反 应10至120分钟、更优选30至45分钟，得到式(XII)的甲酸烯丙基酯，

其中各基团具有以上对式XI化合物所提供的含义。

然后，使其中各基团具有以上对式XI化合物所提供含义的式(XII)的 甲酸烯丙基酯与碱金属氰化物如氰化钾在适合的溶剂如二甲基甲酰胺或二 甲亚砜中、在适合的碱如1，4-二氮杂双环[2.2.2]辛烷存在下、在+15至+35℃ 的温度、优选在约20至25℃反应15至360分钟，得到式(XIII)的甲酸烯 丙基酯，

其中各基团具有以上对式XI化合物所提供的含义。

最后，通过在+15至+35℃、优选在约20至25℃的温度向烯丙基酯 在适合的溶剂如四氢呋喃中的溶液中加入Pd(0)催化剂、例如四(三苯基- 膦)钯(0)和吗啉，继之以加入碳酸氢钠水溶液，水解所述式XIII的甲酸烯 丙基酯，获得如上所定义的式II化合物。

其中R3表示Y-R6，其中Y代表O、NH或S，X表示HN、C1-C4烷 基-N或O(CH2)gNH且其余基团和符号R1、R6和g如对式I化合物所定义 的式II的5-嘧啶基甲酸也可如下获得：首先使式XIV的2-甲硫基-5-嘧啶 基甲酸

与式XV的胺、醇或硫醇在强碱如氢化钠存在下、在适合的溶剂如四氢呋 喃中、在-10至30℃、优选在约20℃的温度反应，

H-R3(XV)

其中R3表示Y-R6，其中Y代表O、NH或S且R6如对式I化合物所定义， 随后，使反应产物在适合的溶剂如二甲基甲酰胺中、在30至60℃、优选 约45至55℃的温度与过量的烯丙基卤、例如烯丙基溴在适合的碱如碳酸 钾存在下反应10至120分钟、更优选45至75分钟，得到式XVI的甲酸 烯丙基酯，

其中R3表示Y-R6，其中Y代表O、NH或S且R6如对式I化合物所定义。

随后，将式XVI的甲酸烯丙基酯中的甲硫基借助两步反应用氰基替 代。在第一步中，将其中各基团具有如上所提供含义的式XVI的甲酸烯丙 基酯用适合的氧化剂、优选用3倍摩尔过量的间氯过苯甲酸在适合的溶剂 如二氯甲烷中、在-10至+10℃、优选在约0℃氧化。在第二步中，通过所 得中间体在适合的溶剂如二氯甲烷中与适合的氰化物如氰化钠在适合的催 化剂如四(烷基)溴化铵存在下、在15至30℃、优选在约20至25℃的温 度反应，将所得甲基磺酰基用氰基替代，得到式XVII的2-氰基嘧啶基-5- 甲酸烯丙基酯，

其中R3表示Y-R6，其中Y代表O、NH或S且R6如对式I化合物所定义。

最后，将其中R3表示Y-R6、其中Y代表O、NH或S且R6如对式I 化合物所定义的所得式XVII的2-氰基嘧啶基-5-甲酸烯丙基酯如下转化为 式II的甲酸：首先使式XVII的2-氰基嘧啶基-5-甲酸烯丙基酯与式V的胺 和等当量的适合的碱如与以上所用相同或不同的三(C1-C4烷基)胺在-10℃ 至+25℃如约0℃反应，其次在+15至+35℃、优选在约20至25℃的温 度向烯丙基酯在适合的溶剂如四氢呋喃中的溶液中加入Pd(0)催化剂、例 如四(三苯基-膦)钯(0)和吗啉，继之以加入碳酸氢钠水溶液，将所得烯丙基 酯水解。

式IV的6-氯嘧啶衍生物

其中R2表示-C(O)NR4R5，R3表示氢、卤素、苯基、吡啶基-未被取代或 被卤素单、二或三取代、其中Y代表O、NH或S的Y-R6或NR7R8，且 其余基团R6、R7和R8如对式I化合物所定义，可从式XIV的2-甲硫基-5- 嘧啶基甲酸开始获得，

所述羧酸可如实施例中所述与草酰氯反应，得到相应的甲酰氯，其可 通过与其中R4和R5具有如上对式I化合物所定义含义的式III的胺反应而 转化为式XVIII的甲酸酰胺，

其中R2表示-C(O)NR4R5且R4和R5具有以上对式I化合物所定义的含义。 该式XVIII的甲酸酰胺可进一步与其中R3表示Y-R6、其中Y代表O、NH 或S且R6如对式I化合物所定义的式XV的胺、醇或硫醇在强碱如氢化钠 存在下、在适合的溶剂如四氢呋喃中、在-10至30℃、优选约20℃的温 度反应，得到式XIX的2-甲硫基嘧啶衍生物，

其中R2表示-C(O)NR4R5，R3表示Y-R6，其中Y代表O、NH或S，且 R4、R5和R6具有如以上对式I化合物所定义的含义。

最后，借助如对式XVI的甲酸烯丙基酯所述的两步反应，将式XIX 的甲酸烯丙基酯中的甲硫基用氰基替代，得到如上所述的式IV的6-氯嘧 啶衍生物。

式VI的5-氨基嘧啶衍生物

其中R3表示氢、卤素、苯基、吡啶基-未被取代或被卤素单、二或三取代、 其中Y代表O、NH或S的Y-R6或NR7R8，X表示HN、C1-C4烷基-N、 O(CH2)gNH、O或S，且其余基团和符号R1、R6、R7、R8和g如对式I化 合物所定义，可从式XIV的2-甲硫基-5-嘧啶基甲酸开始如下获得：

在第一步中，如以下实施例所述将式XIV的羧酸转化为相应的式XX的氨 基甲酸烯丙基酯

该式XX的氨基甲酸烯丙基酯可进一步与其中R3表示Y-R6、其中Y 代表O、NH或S且R6如对式I化合物所定义的式XV的胺、醇或硫醇在 强碱如氢化钠或叔丁醇钾存在下、在适合的溶剂如四氢呋喃中、在-10至 30℃、优选在约20℃的温度反应，得到式XXI的2-甲硫基-嘧啶衍生物，

其中R3表示Y-R6，其中Y代表O、NH或S，且R6如对式I化合物所定 义。

随后，借助以上对式XIX的甲酸烯丙基酯所述的两步反应，将式XXI 的2-甲硫基-嘧啶中的甲硫基用氰基替代，得到式XXII的2-氰基嘧啶基-5- 氨基甲酸烯丙基酯，

其中R3表示Y-R6，其中Y代表O、NH或S，且R6如对式I化合物所定 义。

最后，将所述2-氰基嘧啶基-5-氨基甲酸烯丙基酯如下转化为式VI的 5-氨基嘧啶衍生物：首先使式XXII的化合物与如上文所述的式V的胺反 应，随后在+15至+35℃、优选在约20至25℃的温度向氨基甲酸烯丙基 酯在适合的溶剂如四氢呋喃中的溶液中加入Pd(0)催化剂、例如四(三苯基- 膦)钯(0)和吗啉，继之以加入碳酸氢钠水溶液，将所得中间体中的氨基甲酸 官能团水解。

从其中各基团如以上对式I化合物所定义的式VI的5-氨基嘧啶衍生 物开始，通过本领域已知的简单的酰化反应，可获得其中R2表示 -NHC(O)R4，其中R4如以上对式I化合物所定义的式I的2-氰基嘧啶。

基团R1中含有的螺环原料可按照实施侧中所述的方法或通过缩醛化 反应制备。用作实施例中所述这类方法以及用于缩醛化反应的原料的二醇 可例如如下制备：在第一步中使式XXIII的二甲酸酯进行还原反应，

其中R11是C1-C4烷基且b是选自1、2或3的整数，

例如用LiAIH4在四氢呋喃中还原，得到式(XXIV)的二醇，

其中b是选自1、2或3的整数。在第二步中，将羟基转化为适合于亲核 取代反应的离去基团，例如与对-甲苯磺酰氯在适合的碱如三乙胺存在下、 在适合的反应条件下反应。随后，用氰化钾在非质子溶剂如二甲亚砜中进 行亲核取代反应，得到式XXV的二(氰基甲基)环烷基化合物，

其中b是选自1、2或3的整数。然后使式XXV的二(氰基甲基)环烷基化 合物进一步进行碱水解，得到游离的二甲酸衍生物，最后，将所述二甲酸 衍生物例如通过用LiAIH4在四氢呋喃中还原，得到式(XXVI)的二醇，

其中b是选自1、2或3的整数。

实施例

以下实施例用于阐述本发明而非限制其范围。

温度以摄氏度测量。除非另外指出，反应在室温进行。终产物、中间 体和原料的结构通过标准分析方法确认，例如微量分析和光谱表征(例如 MS、IR、NMR)。

缩写

所用缩写是本领域常规缩写，具体地具有以下所提供的含义。

Ac            乙酰基

aq.           水性/含水的

Boc           丁氧羰基

cone.         浓

mCPBA         间氯过苯甲酸

DABCO         1，4-二氮杂双环[2.2.2]辛烷

DMAP          二甲基氨基吡啶

DMF           二甲基甲酰胺

DMSO          二甲亚砜

Et            乙基

EtOAc         乙酸乙酯

H             小时

iPr           异丙基

LAH           氢化铝锂

LDA           二异丙基氨基锂

Me            甲基

MS            质谱

NMR           核磁共振

Ph            苯基

RP-HPLC       反相高压液相色谱

sat.        饱和的

soln.       溶液

TBAB        四丁基溴化铵

TFA         三氟乙酸

THF         四氢呋喃

原料

2-氰基-4-[(螺[2.5]辛-6-基甲基)氨基]嘧啶-5-甲酸

在0℃向4-氯-2-氰基-嘧啶-5-羰基氯(8.80mmol)在CH2Cl2(30ml)中的 溶液接连加入MeOH(9.60mmol)和i-Pr2NEt(9.80mmol)。在0℃搅拌15 分钟后，在0℃向反应混合物接连加入C-螺[2.5]辛-6-基-甲基胺盐酸盐 (8.50mmol)和三乙胺(24.0mmol)。将反应混合物在0℃搅拌至室温达50分 钟，然后，在真空中浓缩大部分溶剂。用AcOEt稀释残余物后，将混合物 用KHSO4水溶液、水、饱和NaHCO3水溶液、水和盐水洗涤。有机层经 Na2SO4干燥，过滤，在真空中浓缩。残余物未经进一步纯化直接用于下一 反应。

在室温向上述残余物在DMSO(10ml)中的溶液接连加入 KCN(14.2mmol)在水(2ml)中的溶液和DABCO(2.80mmol)。在同样温度搅 拌后，用AcOEt稀释反应混合物。将所得混合物用水(x2)和盐水洗涤，经 Na2SO4干燥，过滤，在真空中浓缩。所得残余物通过硅胶柱色谱纯化(正 己烷∶AcOEt＝5∶1)，得到氰基嘧啶，其未经进一步纯化直接用于下一反应。

在0℃向THF(20mL)中的以上氰基嘧啶加入LiOH-H2O(19.0mmol) 在水(10mL)中的溶液。在室温搅拌1小时后，加入KHSO4水溶液淬灭反 应。过滤所得沉淀的固体，用水洗涤，用少量CH3CN研磨，得到标题化 合物；1H NMR(400MHz，DMSO)，δ0.22(2H，dd)，0.32(2H，dd)， 0.95-0.98(2H，m)，1.15-1.24(2H，m)，1.68-1.74(5H，m)，3.47(2H，t)，8.88(1H， t)。

4-(3，3-二氟-吡咯烷-1-基)哌啶盐酸盐

在室温将3，3-二氟-吡咯烷盐酸盐(2.02mmol)、4-氧代-哌啶-1-甲酸叔丁 基酯(2.02mmol)和Ti(OiPr)4(2.42mmol)在THF中的混合物搅拌1小时。向 所得混合物加入乙醇(3mL)和NaBH3CN(1.21mmol)。搅拌17小时后，加 入饱和NaHCO3水溶液淬灭反应，滤出所得沉淀。滤液用AcOEt稀释后， 将混合物用盐水洗涤，经MgSO4干燥，在真空中浓缩。残余物通过硅胶柱 色谱纯化，得到4-(3，3-二氟-吡咯烷-1-基)-哌啶-1-甲酸叔丁基酯；1H NMR(CDCI)3δ：1.34-1.52(2H，m)，1.45(9H，s)，1.79(2H，bd)，2.19-2.33(3H， m)，2.78(2H，dd)，2.83(2H，dd)，2.95(2H，dd)，4.00(2H，bs)。

将4-(3，3-二氟-吡咯烷-1-基)-哌啶-1-甲酸叔丁基酯(1.77mmol)用4N的 HCl 1，4-二噁烷(6mL)溶液处理，并在室温搅拌1小时。将反应混合物在真 空中浓缩，所得残余物未经进一步纯化用于下一步骤。

4-苯基-2-吡啶-2-基-2H-吡唑-3-基胺

在室温向3-羟基-2-苯基丙烯腈(3.4mmol)在EtOH(6.8mL)中的溶液加 入AcOH(0.66mL)和2-肼基吡啶(6.8mmol)。在80℃搅拌5小时后，将反 应混合物冷却并在真空中浓缩。残余物用H2O稀释，用AcOEt萃取。有 机萃取液用盐水洗涤，经Na2SO4干燥并在真空中浓缩。将所得残余物用 醚研磨，得到标题化合物；1H NMR(CDCl3)δ6.27(br，2H)，7.11-7.14(m， 1H)，7.21-7.25(m，1H)，7.40-7.48(m，4H)，7.65(s，1H)，7.79-7.84(m，1H)，8.02 (d，1H)，8.35-8.37(m，1H)。

3-环丙基-2，2-二甲基丙基胺盐酸盐

在-78℃向异丁腈(29mmol)在THF(60mL)中的溶液加入LDA(2M THF溶液，35mmol)。在-78℃搅拌2小时后，在-78℃向该溶液加入溴甲 基环丙烷(32mmol)。将混合物在室温搅拌13小时，然后加入NH4Cl水溶 液淬灭反应。用醚萃取混合物，合并有机萃取液，用H2O和盐水洗涤。有 机层经MgSO4干燥，过滤，在真空中浓缩，得到3-环丙基-2，2-二甲基丙腈， 其未经进一步纯化直接用于下一反应。

在0℃向LAH(87mmol)在THF(200mL)中的悬液滴加浓 H2SO4(44mmol)。在0℃搅拌0.5小时后，在0℃向该悬液加入3-环丙基 -2，2-二甲基丙腈。将混合物回流4.5小时。冷却至0℃后，加入 Na2SO4-10H2O淬灭反应。将所得混合物经硅藻土过滤，滤液用HCl的1，4- 二噁烷溶液处理。将所得悬液在真空中浓缩，得到标题化合物；1H NMR (DMSO)δ：0-0.03(2H，m)，0.39-0.44(2H，m)，0.97(6H，s)，1.19(2H，d)，2.66 (q，2H)，8.05(3H，br)。

2-环丙基-2-甲基丙基胺盐酸盐

在-78℃向环丙基乙腈(25mmol)在THF(60mL)中的溶液加入LDA(2M THF溶液，30mmol)。在-78℃搅拌2小时后，在-78℃向溶液加入碘甲烷 (30mmol)。将反应混合物在室温搅拌1小时，然后加入NH4Cl水溶液淬灭 反应。用醚萃取混合物后，将有机萃取液用水和盐水洗涤。有机层经MgSO4 干燥，过滤，在真空中浓缩，得到2-环丙基丙腈，其未经进一步纯化直接 用于下一反应。

在-78℃向2-环丙基丙腈(25mmol)在THF(60mL)中的溶液加入 LDA(2M THF溶液，74mmol)。在-78℃搅拌2.5小时后，在-78℃向溶液 加入碘甲烷(99mmol)。将反应混合物在室温搅拌11小时，然后加入NH4Cl 水溶液淬灭反应。用醚萃取混合物后，将有机萃取液用水和盐水洗涤。有 机层经MgSO4干燥，过滤，在真空中浓缩，得到2-环丙基-2-甲基丙腈， 其未经进一步纯化直接用于下一反应。

在0℃向LAH(87mmol)在THF(200mL)中的悬液滴加浓 H2SO4(44mmol)。在0℃搅拌0.5小时后，在0℃向该悬液加入3-环丙基 -2，2-二甲基丙腈。将反应混合物回流4.5小时。冷却至0℃后，加入 Na2SO4-10H2O淬灭反应。将所得混合物经硅藻土过滤，滤液用HCl的1，4- 二噁烷溶液处理。在真空中浓缩所得悬液，得到标题化合物，其未经进一 步纯化直接用于下一反应。

2-(1-甲基环丁基)乙基胺盐酸盐

在0℃向环丁烷甲酸(50mmol)在THF(100mL)中的溶液加入LDA (2M THF溶液，125mmol)。在0℃搅拌2小时后，在0℃向溶液加入碘 甲烷(125mmol)。将反应混合物在室温搅拌14小时。加入水淬灭反应，然 后将水层与THF层分离。向该水层加入NH4Cl水溶液，用HCl水溶液将 混合物酸化至pH＜2。用AcOEt萃取混合物后，将有机萃取液用水和盐水 洗涤。有机层经MgSO4干燥，过滤，在真空中浓缩，得到1-甲基环丁烷 甲酸，其未经进一步纯化直接用于下一反应。

在0℃向LAH(200mmol)在THF(250mL)中的悬液加入1-甲基环丁烷 甲酸(32mmol)。将反应混合物在60℃搅拌6小时。冷却至0℃后，加入 Na2SO4-10H2O淬灭反应。将所得混合物经硅藻土过滤，滤液在真空中浓 缩，得到(1-甲基环丁基)甲醇，其未经进一步纯化直接用于下一反应。

在0℃向(1-甲基环丁基)甲醇(32mmol)在CH2Cl2(100mL)中的溶液加 入三乙胺(65mmol)、三甲基胺盐酸盐(6mmol)以及对甲苯磺酰氯(49mmol) 在CH2Cl2(50mL)中的溶液，然后将混合物在0℃搅拌0.5小时。加入水淬 灭反应，用CH2Cl2萃混合物取。合并有机萃取液，用水和盐水洗涤。有 机层经Na2SO4干燥，过滤，在真空中浓缩，得到甲苯-4-磺酸1-甲基环丁 基甲基酯，其未经进一步纯化直接用于下一反应。

向甲苯-4-磺酸1-甲基环丁基甲基酯在DMF(60mL)中的溶液加入氰化 钾(60mmol)。将反应混合物在60℃搅拌11小时。冷却至室温后，用水稀 释混合物，然后用醚萃取。合并有机萃取液，用水和盐水洗涤，经Na2SO4 干燥，过滤，在真空中浓缩，得到(1-甲基环丁基)乙腈，其未经进一步纯化 直接用于下一反应。

在0℃向LAH(97mmol)在THF(200mL)中的悬液滴加浓 H2SO4(49mmol)。在0℃搅拌1小时后，在0℃向悬液加入(1-甲基-环丁 基)乙腈。将反应混合物回流4.5小时。冷却至0℃后，加入Na2SO4-10H2O 淬灭反应。将所得混合物经硅藻土过滤，滤液用HCl的1，4-二噁烷溶液处 理，然后在真空中浓缩悬液，得到标题化合物，其未经进一步纯化直接用 于下一反应。

2-苯基-2-吡咯烷-1-基乙基胺二盐酸盐

向苯甲醛(9.4mmol)在H2O(6mL)中的悬液加入硫酸氢钠(9.4mmol)和 吡咯烷(9.4mmol)。在室温搅拌0.5小时后，向悬液加入氰化钠(9.4mmol)， 将所得混合物在室温搅拌15小时。将反应混合物用饱和NaHCO3水溶液 稀释，然后用AcOEt萃取。有机萃取液用水(x 2)和盐水洗涤，经Na2SO4 干燥，过滤，在真空中浓缩，得到苯基吡咯烷-1-基乙腈，其未经进一步纯 化直接用于下一反应。

在0℃向LAH(26mmol)在THF(100mL)中的溶液滴加浓H2SO4 (13mmol)。在0℃搅拌0.5小时后，在0℃向溶液加入苯基吡咯烷-1-基乙 腈，然后将混合物在60℃搅拌3小时。冷却至0℃后，加入Na2SO4-10H2O 淬灭反应。所得混合物经硅藻土过滤，滤液在真空中浓缩。用醚稀释残余 物后，将混合物用HCl的1，4-二噁烷溶液处理。过滤收集沉淀，得到标题 化合物，其未经进一步纯化直接用于下一反应；1H NMR(DMSO)δ： 1.74-1.99(4H，m)，2.87(2H，br)，3.14(2H，br)，3.40-3.78(4H，m)，4.64(1H， br)，7.50-7.53(3H.m)，7.75-7.77(2H，m)，8.26(3H，br)。

2-苯基-3-吡咯烷-1-基丙基胺

向托品酸(0.12mmol)和吡咯烷(0.12mmol)在DMF(20mL)中的溶液加 入HOAt(0.18mmol)和EDCI-HCl(0.18mmol)。将反应混合物在室温搅拌 14小时。用水稀释反应混合物，然后用AcOEt萃取。将有机萃取液接连 用水、包含NaHCO3水溶液、H2O和盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤， 在真空中浓缩。残余物经硅胶柱色谱纯化，得到3-羟基-2-苯基-1-吡咯烷-1- 基丙-1-酮。

在0℃向LAH(10mmol)在THF(50mL)中的溶液加入3-羟基-2-苯基-1- 吡咯烷-1-基丙-1-酮(5mmol)。将反应混合物在0℃搅拌1.5小时。冷却至 0℃后，加入Na2SO4-10H2O淬灭反应，将所得混合物经硅藻土过滤，滤 液在真空中浓缩，得到2-苯基-3-吡咯烷-1-基丙-1-醇，其未经进一步纯化 直接用于下一反应。

在0℃向2-苯基-3-吡咯烷-1-基丙-1-醇(3.4mmol)在THF(10mL)中的溶 液接连加入邻苯二甲酰亚胺(4.1mmol)、三苯基膦(5.1mmol)和偶氮二甲酸 二乙酯(5.1mmol)，然后将混合物在0℃搅拌1.5小时。用水稀释后，将混 合物用KHSO4水溶液酸化至pH＜3，然后用AcOEt洗涤。将水层用饱和 NaHCO3水溶液碱化至pH＞11，然后用AcOEt萃取。有机萃取液用水和 盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，在真空中浓缩。将残余物用醚研磨， 得到2-(2-苯基-3-吡咯烷-1-基丙基)异吲哚-1，3-二酮，其未经进一步纯化直 接用于下一反应。

将2-(2-苯基-3-吡咯烷-1-基丙基)异吲哚-1，3-二酮(3mmol)和肼一水合 物(6mmol)在乙醇(10ml)中的溶液回流3.5小时。将反应混合物冷却并经硅 藻土过滤。将滤液在真空中浓缩，得到标题化合物，其未经进一步纯化直 接用于下一反应。

C-[1-(4-甲氧基苄基)-4-苯基-哌啶-4-基]-甲基胺二盐酸盐

向4-苯基哌啶-4-甲腈(9.0mmol)在MeOH(20mL)中的溶液加入4-甲氧 基苯甲醛(14mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(27mmol)。将反应混合物在室温 搅拌2.5小时，然后在真空中浓缩大部分溶剂。用水稀释后，将混合物用 AcOEt萃取。有机萃取液用水、饱和NaHCO3水溶液、水和盐水洗涤，然 后经MgSO4干燥，过滤，在真空中浓缩。将残余物溶于醚，然后用HCl 的AcOEt溶液处理。过滤收集沉淀，得到1-(4-甲氧基苄基)-4-苯基哌啶-4- 甲腈盐酸盐，其未经进一步纯化直接用于下一反应；1H NMR(CDCl3)δ： 2.19(2H，d)，3.10-3.24(4H，m)，3.59(2H，d)，3.84(3H，s)，4.17(2H，d)，6.99 (2H，d)，7.35-7.45(3H，m)，7.57-7.62(4H，m)，13.08(1H，br)。

在0℃向LAH(27mmol)在THF(100mL)中的溶液滴加浓H2SO4 (14mmol)达0.5小时，然后在0℃加入1-(4-甲氧基苄基)-4-苯基哌啶-4-甲 腈，然后将反应混合物回流2小时。冷却至0℃后，加入Na2SO4-10H2O 淬灭反应。将所得混合物经硅藻土过滤，滤液用HCl的1，4-二噁烷溶液处 理，然后在真空中浓缩，得到标题化合物，其未经进一步纯化直接用于下 一反应。

1-(4-氨基甲基-4-苯基哌啶-1-基)-乙酮盐酸盐

在0℃向C-[1-(4-甲氧基苄基)-4-苯基-哌啶-4-基]-甲基胺二盐酸盐 (3.9mmol)在醚(20mL)和1N NaOH水溶液(20mL)中的溶液加入 BOC2O(4.6mmol)，然后将混合物在室温搅拌18小时。用10％KHSO4水 溶液将反应混合物酸化至pH＜3，然后将水层和有机层分离。用NaOH水 溶液将酸性水层碱化至pH＞12，然后迅速用AcOEt萃取(x 2)混合物。合并 有机萃取液，用水和盐水洗涤。有机层经MgSO4干燥，过滤，浓缩，得到 [1-(4-甲氧基-苄基)-4-苯基哌啶-4-基甲基]氨基甲酸叔丁基酯，其未经进一 步纯化直接用于下一反应。

向[1-(4-甲氧基-苄基)-4-苯基哌啶-4-基甲基]氨基甲酸叔丁基酯 (3.2mmol)在CH2Cl2中的溶液加入氯甲酸1-氯乙基酯(4.7mmol)，然后将混 合物在室温搅拌2.5小时。在真空中浓缩大部分溶剂后，将残余物混悬于 醚中并过滤。在真空中浓缩滤液后，将残余物混悬于己烷中并过滤。在真 空中浓缩滤液，得到4-(叔丁氧基羰基氨基甲基)-4-苯基哌啶-1-甲酸1-氯乙 基酯，其未经进一步纯化直接用于下一反应。

将4-(叔丁氧基羰基氨基甲基)-4-苯基哌啶-1-甲酸1-氯乙基酯在 MeOH中的混合物在60℃搅拌5小时，然后将反应混合物在真空中浓缩， 得到(4-苯基哌啶-4-基甲基)氨基甲酸叔丁基酯，其未经进一步纯化直接用 于下一反应。

在0℃向(4-苯基哌啶-4-基甲基)氨基甲酸叔丁基酯(2.1mmol)在 CH2Cl2中的溶液加入乙酸酐(3.1mmol)和三乙胺(3.1mmol)。将反应混合物 在室温搅拌2.5小时，然后在真空中浓缩大部分溶剂。将残余物混悬于 AcOEt后，用水和盐水洗涤混合物，经MgSO4干燥，过滤，在真空中浓 缩，得到(1-乙酰基-4-苯基哌啶-4-基甲基)氨基甲酸叔丁基酯，其未经进一 步纯化直接用于下一反应。

向(1-乙酰基-4-苯基哌啶-4-基甲基)氨基甲酸叔丁基酯在醚中的溶液加 入4N HCl的1，4-二噁烷溶液。将反应混合物在室温搅拌1小时，在真空 中浓缩。将所得固体用醚洗涤，得到标题化合物，其未经进一步纯化直接 用于下一反应。

4-(2-氟苯基)-1-甲基哌啶-4-甲腈盐酸盐

向(2-氟苯基)乙腈(15mmol)在THF(20mL)中的溶液接连加入二-(2-氯 乙基)甲基胺盐酸盐(16mmol)、硫酸氢四丁基铵(1.5mmol)和40％NaOH水 溶液(20mL)，然后将混合物回流5.5小时。将反应混合物冷却至室温，用 水稀释，然后用THF萃取。有机萃取液用水(x 2)和盐水洗涤，经Na2SO4 干燥，过滤，在真空中浓缩。将残余物溶于醚，然后加入HCl的1，4-二噁 烷溶液。过滤收集沉淀，得到标题化合物，其未经进一步纯化直接用于下 一反应；1H NMR(DMSO)δ：2.43-2.60(4H，m)，2.86(3H，d)，3.20-3.28(2H， m)，4.02-4.04(2H，m)，7.31-7.40(2H，m)，7.48-7.60(2H，m)，11.16(1H，br)。 1，4-二苯基哌啶-4-甲腈

向4-苯基哌啶-4-甲腈盐酸盐(6.7mmol)在甲苯(30mL)中的悬液接连加 入溴苯(8.0mmol)、叔丁醇钠(17mmol)、三邻甲苯基膦(1.3mmol)和三(二亚 苄基丙酮)二钯(0.7mmol)，然后将混合物回流20小时。将反应混合物冷却， 用水稀释，然后用AcOEt萃取。有机萃取液用水和盐水洗涤，经Na2SO4 干燥，过滤，在真空中浓缩。残余物通过硅胶柱色谱纯化，得到标题化合 物；1H NMR(CDCl3)δ：2.12-2.20(2H，m)，2.23-2.28(2H，m)，2.94-3.01(2H， m)，3.86(2H，d)，6.83(1H，t)，7.04(2H，d)，7.22-7.28(2H，m)，7.36-7.41(1H， m)，7.45-7.49(2H，m)，7.56-7.59(2H，m)。

C-(1-甲基-4-苯基哌啶-4-基)甲基胺二盐酸盐

在0℃向LAH(7.5mmol)在THF(10mL)中的溶液滴加浓 H2SO4(3.8mmol)。在0℃搅拌0.5小时后，在0℃加入1-甲基-4-苯基哌啶 -4-甲腈盐酸盐(2.5mmol)。将反应混合物在60℃搅拌6小时。冷却至0℃ 后，加入Na2SO4-10H2O淬灭反应。将所得混合物经硅藻土过滤，在真空 中浓缩滤液。将残余物混悬于醚中并用HCl的1，4-二噁烷溶液处理。过滤 收集所得白色固体，得到标题化合物，其未经进一步纯化直接用于下一反 应。

C-[4-苯基-1-(2，2，2-三氟乙基)哌啶-4-基]甲基胺二盐酸盐

在0℃向4-苯基哌啶-4-甲腈盐酸盐(6.7mmol)在吡啶(13mL)中的溶液 加入三氟乙酸酐(10mmol)，然后将混合物在0℃搅拌1小时。将反应混合 物用水稀释，用AcOEt萃取。有机萃取液接连用水和盐水洗涤。有机层经 Na2SO4干燥，过滤，在真空中浓缩，得到4-苯基-1-(2，2，2-三氟乙酰基)哌 啶-4-甲腈，其未经进一步纯化直接用于下一反应。

在0℃向LAH(40mmol)在THF(40mL)中的溶液滴加浓H2SO4 (20mmol)，并将混合物搅拌0.5小时。在0℃向溶液加入4-苯基-1-(2，2，2- 三氟乙酰基)哌啶-4-甲腈，然后将混合物回流3小时。将反应混合物冷却至 0℃，加入Na2SO4-10H2O淬灭反应。将所得混合物经硅藻土过滤，在真空 中浓缩滤液。将残余物混悬于醚中并用HCl的1，4-二噁烷溶液处理。过滤 收集白色固体，得到标题化合物，其未经进一步纯化直接用于下一反应。

C-螺[3.5]壬-7-基-甲基胺盐酸盐

在0℃向1，1-二-(2-羟基乙基)-环丁烷(37.8g，262mmol)和Me3N·HCl (5.136g，53.7mmol)在CH2Cl2(680mL)中的溶液加入Et3N(146mL， 1052mmol)。5分钟后，在同样温度加入对甲苯磺酰氯(106.4g，558mmol)。 将反应混合物在0℃搅拌2小时，然后升至室温达2小时。将所得混合物 用CH2Cl2(1600mL)稀释，用饱和NaHCO3水溶液(400mL，水层pH为9) 和盐水(400mL)洗涤。有机层经Na2SO4干燥，过滤，在真空中浓缩。残余 物通过硅胶柱色谱纯化(硅胶，正己烷∶EtOAc＝2∶1)，得到所需二甲苯磺酸 酯。

在0℃、30分钟内向NaH(60％，34.3g，858mmol)在THF(890mL)中的 悬液滴加丙二酸二乙酯(160mL)在THF(640mL)中的溶液。剧烈释放氢气。 在0℃搅拌10分钟后，白色悬液溶解得到无色溶液，在0℃滴加前一反 应的二甲苯磺酸酯(110.9g，245mmol)在THF(660mL)中的溶液。在0℃搅 拌至室温达1小时后，将反应混合物(黄色悬液)回流20小时。将混合物冷 却至0℃，然后在0℃加入饱和NH4Cl水溶液(800mL)和水(400mL)。分 离各层。水层用EtOAc萃取(500mL x 4)。合并有机层，用盐水(500mL) 洗涤，经MgSO4干燥，在真空中浓缩。蒸馏除去过量的丙二酸二乙酯，得 到所需的螺[3.5]环壬烷-7，7-二-甲酸二乙酯。

在室温向螺[3.5]环壬烷-7，7-二-甲酸二乙酯(62.4g，233mmol)在DMSO (620mL)中的溶液加入LiCl(19.7g)和H2O(4.2mL)。将反应混合物在185℃ 搅拌13小时。将混合物冷却至0℃，倾入水(1600mL)中。将所得混合物 用EtOAc萃取(300mL x 4)。合并萃取液，用水(150mL x 2)洗涤，经MgSO4 干燥，在真空中浓缩，得到螺[3.5]环壬烷-7-甲酸乙酯，其立即进行下一反 应。

在0℃、1小时内向LiAlH4(15.6g)在THF(450mL)中的悬液滴加螺[3.5] 环壬烷-7-甲酸乙酯在THF(220mL)中的溶液。将反应混合物在0℃搅拌至 室温达14小时，在0℃用Na2SO4-10H2O淬灭过量的LiAlH4。将混合物 在0℃搅拌30分钟，然后经硅藻土垫过滤。浓缩滤液，得到7-(羟基甲基)- 螺[3.5]环壬烷。

在0℃向7-(羟基甲基)-螺[3.5]环壬烷(11g，71.3mmol)在 CH2Cl2(100mL)中的溶液加入Et3N(21.8mL)和Me3N-HCl(682mg)。在0℃ 向反应混合物滴加对甲苯磺酰氯(14.28g)在CH2Cl2(20mL)中的溶液。将反 应混合物在0℃搅拌30分钟，然后除去大部分溶剂。用EtOAc(300mL) 稀释残余物后，将混合物用KHSO4水溶液(80mL x 2)、水(80mL)、饱和 NaHCO3水溶液(80mL)、水(80mL)和盐水(80mL)洗涤。有机层经Na2SO4 干燥，过滤，浓缩，得到相应的甲苯磺酸酯，其未经进一步纯化直接用于 下一反应。

在室温向上述甲苯磺酸酯在DMF(100mL)中的溶液加入NaN3(27.5g)。 将反应混合物在60℃搅拌13小时。用醚(300mL)稀释后，将混合物用水 (80mL x 2)和盐水(80mL)洗涤。有机层经Na2SO4干燥，过滤，浓缩，得到 7-叠氮基甲基-螺[3.5]环壬烷，其未经进一步纯化直接用于下一反应。

在室温向上述叠氮化物在THF(100mL)-H2O(50mL)中的溶液加入 Ph3P(20g)。将反应混合物在相同温度搅拌3小时。用EtOAc(200mL)稀释 后，将混合物用1N HCl(80mL x 3)萃取。合并水性萃取液，用CH2Cl2(50mL) 洗涤，然后用6N NaOH碱化。所得混合物用醚(100mL x 3)萃取。合并有 机萃取液，经K2CO3干燥，过滤。向该滤液加入4N氯化氢的EtOAc溶 液，过滤所得盐酸盐，用醚洗涤，在55℃减压下干燥，得到C-螺[3.5]壬 -7-基-甲基胺盐酸盐。

参考实施例1：2-氰基-4-(环己基甲基氨基)嘧啶-5-甲酸(2-吗啉-4-基-1-苯基 乙基)酰胺

在室温向2-氰基-4-(环己基甲基氨基)-嘧啶-5-甲酸(0.33mmol，步骤1.4) 在DMF(2.0mL)中的溶液加入2-吗啉-4-基-1-苯基乙基胺(69mg，步骤1.3)、 EDCl-H2O(0.50mmol)和HOAt(0.50mmol)。在室温搅拌24小时后，用 AcOEt稀释反应混合物。将混合物用水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，在 真空中浓缩。所得残余物经RP-HPLC纯化，得到标题化合物；1H NMR (DMSO)δ0.6-1.08(m，2H)，1.20-1.35(m，3H)，1.65-1.78(m，6H)， 2.48-2.53(m，2H)，2.60-2.62(m，2H)，2.87-2.93(m，2H)，3.31-3.35(m，1H)， 3.36-3.44(M，1H)，3.60-3.68(m，4H)，5.29-5.35(m，1H)，7.34-7.36(m，1H)， 7.43-7.47(m，2H)，7.50-7.52(m，2H)，8.86(s，1H)，9.00-9.04(m，1H)，9.21(d， 1H)。

步骤1.1：(2-吗啉-4-基-2-氧代-1-苯基乙基)氨基甲酸叔丁基酯

在室温向叔丁氧羰基氨基苯基乙酸(4.0mmol)在CH2Cl2(8.0mL)中的溶 液加入吗啉(4.0mmol)、EDCl-H2O(4.8mmol)和DMAP(0.40mmol)。在室温 搅拌24小时后，加入水淬灭反应。用AcOEt萃取将混合物。合并有机萃 取液，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，在真空中浓缩。所得固体用醚-正己 烷研磨，得到标题化合物；1H NMR(CDCl3)δ1.41(s，9H)，3.08-3.12(m， 1H)，3.20-3.28(m，1H)，3.39-3.45(m，1H)，3.49-3.60(m，3H)，3.66-3.76(m， 2H)，5.54(d，1H)，6.01(d，1H)，7.29-7.36(m，5H)。

步骤1.2：2-氨基-1-吗啉-4-基-2-苯基乙酮

在0℃向(2-吗啉-4-基-2-氧代-1-苯基乙基)氨基甲酸叔丁基酯 (3.0mmol)在CH2Cl2(6.0mL)中的溶液加入TFA(2.0mL)。在室温搅拌24小 时后，用饱和NaHCO3水溶液将反应混合物碱化至pH 8。用CH2Cl2萃取 混合物，然后合并有机萃取液，经Na2SO4干燥，在真空中浓缩，得到标 题化合物；1H NMR(CDCl3)δ2.02(s，2H)，3.09-3.14(m，1H)，3.20-3.25(m， 1H)，3.34-3.40(m，1H)，3.46-3.60(m，3H)，3.65-3.71(m，1H)，3.74-3.80(m， 1H)，7.27-7.34(m，5H)。

步骤1.3：2-吗啉-4-基-1-苯基乙基胺

在0℃向LAH(6.1mmol)在THF(25mL)中的搅拌悬液滴加2-氨基-1- 吗啉-4-基-2-苯基乙酮(670mmol)在THF(5mL)中的溶液。将反应混合物回 流2小时，然后在0℃加入Na2SO4-10H2O淬灭反应。在室温搅拌0.5小 时后，所得混合物经硅藻土过滤，在真空中浓缩滤液，得到标题化合物， 其未经进一步纯化直接用于下一反应。

步骤1.4：2-氰基-4-(环己基甲基氨基)-嘧啶-5-甲酸

在0℃向2，4-二氯-嘧啶-5-羰基氯(8.80mmol)在CH2Cl2(30mL)中的溶 液接连加入MeOH(9.60mmol)和i-Pr2NEt(9.80mmol)。在0℃搅拌15分钟 后，在0℃向反应混合物接连加入环己基甲基胺盐酸盐(8.50mmol)和三乙 胺(24.0mmol)。将反应混合物在0℃搅拌至室温达50分钟，然后真空浓缩 大部分溶剂。用AcOEt稀释残余物后，将混合物用KHSO4水溶液、水、 饱和NaHCO3水溶液、水和盐水洗涤。有机层经Na2SO4干燥，过滤，在 真空中浓缩。残余物未经进一步纯化直接用于下一反应。

在室温向上述残余物在DMSO(10mL)中的溶液接连加入 KCN(14.2mmol)在水(2mL)中的溶液和DABCO(2.80mmol)。在同样温度搅 拌1小时后，用AcOEt稀释反应混合物。将所得混合物用水(x 2)和盐水洗 涤，经Na2SO4干燥，过滤，在真空中浓缩。所得残余物经硅胶柱色谱纯 化(正己烷∶AcOEt＝5∶1)，得到氰基嘧啶，其未经进一步纯化直接用于下一 反应。

在0℃向上述氰基嘧啶在THF(20mL)中的溶液加入LiOH-H2O (19.0mmol)在水(10mL)中的溶液。在室温搅拌1小时后，加入KHSO4水 溶液淬灭反应。过滤所得沉淀的固体，用水洗涤，用少量的CH3CN研磨， 得到标题化合物。

参考实施例2：4-[2-(6-氯-2甲磺酰基嘧啶-4-基氧基)乙基]-哌啶-1-甲酸叔丁 基酯

在0℃向4-[2-(6-氯-2-甲基硫基嘧啶-4-基氧基)乙基]哌啶-1-甲酸叔丁 基酯粗品(4.7g，步骤参考实施例2.1)在CH2Cl2(100mL)中的溶液加入 m-CPBA(40mmol)。在室温搅拌3小时后，在0℃用10％Na2SO3淬灭反 应混合物。分离有机层，用饱和NaHCO3洗涤两次，经MgSO4干燥。有 机层在真空中蒸发。将所得残余物溶于正己烷∶AcOEt(1∶1)，向混合物加入 硅胶。过滤后，在真空中蒸发滤液，得到4-[2-(6-氯-2-甲磺酰基嘧啶-4-基 氧基)乙基]哌啶-1-甲酸叔丁基酯粗品。

参考实施例2步骤2.0：4-[2-(6-氯-2-甲基硫基嘧啶-4-基氧基)-乙基]哌啶-1- 甲酸叔丁基酯

在0℃将NaH(6.4mmol)加至4-(2-羟基-乙基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯 (5.3mmol)在THF(10mL)中的溶液中。在室温搅拌30分钟后，向反应混合 物滴加4，6-二氯-2-甲基硫基-嘧啶(5.3mmol)在THF(10mL)中的溶液。将反 应混合物在室温搅拌12小时，用H2O淬灭。将混合物用AcOEt萃取。有 机层用H2O洗涤，经MgSO4干燥，在真空中蒸发，得到4-[2-(6-氯-2-甲基 硫基嘧啶-4-基氧基)乙基]哌啶-1-甲酸叔丁基酯粗品。

参考实施例2步骤2.1：4-[2-(6-氯-2-氰基嘧啶-4-基氧基)乙基]哌啶-1-甲酸 叔丁基酯

在室温向4-[2-(6-氯-2-甲磺酰基嘧啶-4-基氧基)乙基]-哌啶-1-甲酸叔丁 基酯粗品(4.9g)和NaCN(14mmol)在CH2Cl2∶H2O(50mL，4∶1)中的溶液加入 TBAB(四丁基溴化铵)(0.06mmol)。在同样温度搅拌10小时后，向反应混 合物加入TBAB(0.19mml)。将反应混合物在室温搅拌2小时，加入H2O。 分离有机层，经MgSO4干燥并在真空中蒸发。所得残余物经硅胶柱色谱纯 化，得到4-[2-(6-氯-2-氰基嘧啶-4-基氧基)乙基]哌啶-1-甲酸叔丁基酯； 1H-NMR(CDCl3)，δ：1.14-1.28(2H，m)，1.45(9H，s)，1.56-1.78(7H，m)，2.69 (2H，t)，4.11(2H，m)，4.49(2H，t)，6.93(1H，s)。

参考实施例2步骤2.2：4-(2-{2-氰基-6-[(螺[3.5]壬-7-基甲基)氨基]嘧啶-4- 基氧基}乙基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯

在室温向4-[2-(6-氯-2-氰基嘧啶-4-基氧基)乙基]哌啶-1-甲酸叔丁基酯 (0.82mmol)和C-螺[3.5]壬-7-基甲基胺(0.86mmol)在CH3CN(10mL)中的溶 液加入K2CO3(2.2mmol)。在80℃搅拌12小时后，将反应混合物冷却至 室温，用AcOEt稀释。有机层用H2O洗涤两次，经MgSO4干燥并在真空 中蒸发，得到4-(2-{2-氰基-6-[(螺[3.5]壬-7-基甲基)氨基]嘧啶-4-基氧基}乙 基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯粗品。

实施例2至57

重复上述方法，使用适合的原料和条件，获得以下化合物。

实施例58：2-氰基-4-[(螺[2.5]辛-6-基甲基)氨基]嘧啶-5-甲酸[5-(1-甲基哌啶 -4-基氧基)联苯基-2-基]酰胺

在0℃向5-(1-甲基哌啶-4-基氧基)联苯基-2-基胺(0.27mmol，步骤58.2) 和2-氰基-4-[(螺[2.5]辛-6-基甲基)氨基]嘧啶-5-甲酸(0.33mmol)在DMF (2mL.)中的溶液加入EDCl-HCl(0.54mmol)和HOAt(0.54mmol)。在环境温 度搅拌过夜后，通过RP-HPLC纯化反应混合物，得到标题化合物，为白 色固体；1H NMR(CDCl3)，δ0.18-0.21(2H，m)，0.27-0.30(2H，m)，0.90-0.94 (2H，m)，1.14-1.25(2H，m)，1.58-1.78(5H，m)，1.85-1.92(2H，m)，2.02-2.06 (2H，m)，2.32(3H，s)，2.70(2H，br s)，3.41-3.44(2H，t)，4.35(1H，m)，6.89(1 H，d)，6.97(1H，dd)，7.35-7.37(2H，m)，7.45-7.52(3H，m)，7.65(1H，s)，7.92 (1H，s)，8.06(1H，d)，8.90(1H，s)。

步骤58.1：5-氟-2-硝基联苯

在0℃向5-氟-2-硝基苯酚(10.0mmol)和三乙胺(12.0mmol)在CH2Cl2 (100mL)中的溶液加入三氟甲磺酸酐(11.0mmol)。在同样温度、N2下搅拌 0.5小时后，用H2O稀释反应混合物。将混合物分别用CH2Cl2和AcOEt 萃取(x 2)。合并有机萃取液，经Na2SO4干燥，经硅藻土和硅胶短垫过滤， 用AcOEt洗涤。在真空中浓缩滤液，得到三氟甲磺酸5-氟-2-硝基苯基酯， 为黄色油。

在室温向三氟甲磺酸5-氟-2-硝基苯基酯(4.0mmol)在DME(10mL)中 的溶液加入苯基代硼酸(4.8mmol)、Pd(PPh3)4(0.4mmol)和K3PO4 (3.2mmol)。在80℃搅拌6小时后，将反应混合物经硅藻土过滤，滤饼用 AcOEt洗涤。将滤液用水稀释，用醚萃取(x 2)。合并有机萃取液，经Na2SO4 干燥，过滤，在真空中浓缩。残余物经硅胶柱色谱纯化(正己烷∶AcOEt＝6∶1)， 得到标题化合物；1H NMR(CDCl3)，δ7.12-7.19(2H，m)，7.29-7.32(2H，m)， 7.42-7.45(3H，t)，7.94(1H，dd)。

步骤58.2：5-(1-甲基哌啶-4-基氧基)联苯基-2-基胺

在室温向5-氟-2-硝基联苯(0.86mmol)在甲苯/KOH水溶液(2mL/2mL) 中的溶液加入1-甲基哌啶-4-醇(1.1mmol)和TBAB(0.17mmol)。在70℃搅 拌过夜后，将反应混合物用AcOEt和水稀释，用AcOEt萃取(x 2)。合并 有机萃取液，经Na2SO4干燥，过滤，在真空中浓缩。残余物通过硅胶柱 色谱纯化(CH2Cl2∶MeOH＝10∶1)，得到1-甲基-4-(6-硝基联苯基-3-基氧基) 哌啶，为黄色固体。

在N2气氛下向1-甲基-4-(6-硝基联苯基-3-基氧基)哌啶(0.63mmol)在 EtOH(5mL)中的溶液加入5％披钯活性炭(50mg)。将反应混合物在室温于 H2下剧烈搅拌2.5小时，然后经硅藻土过滤(用AcOEt冲洗)。将滤液在真 空中浓缩为标题化合物，为褐色油；1H NMR(CDCl3)，δ1.79-1.87(2H，m)， 1.96-2.01(2H，m)，2.25-2.31(2H，m)，2.29(3H，s)，2.70(2H，brs)，3.52(2H， m)，4.15-4.18(1H，m)，6.70(1H，d)，6.76-6.80(2H，m)，7.32-7.38(1H，m)， 7.42-7.45(4H，m)。

实施例59至65

重复上述方法，使用适合的原料和条件，获得以下化合物。

实施例66：2-氰基-4-[(螺[2.5]辛-6-基甲基)氨基]嘧啶-5-甲酸(4-苄基-1-异丙 基哌啶-4-基)酰胺

在0℃向4-氨基-4-苄基哌啶-1-甲酸叔丁基酯(0.38mmol，步骤66.1)和 2-氰基-4-[(螺[2.5]辛-6-基甲基)氨基]嘧啶-5-甲酸(0.38mmol)在DMF (1.3mL)中的溶液加入HOAt(0.51mmol)和EDCl-HCl(0.51mmol)。升至室 温并搅拌15小时后，将反应混合物用AcOEt稀释，用1N KHSO4水溶液、 饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤。有机层经MgSO4干燥，过滤，在真空 中浓缩。残余物经硅胶柱色谱纯化，得到4-苄基-4-({2-氰基-4-[(螺[2.5]辛-6- 基甲基)-氨基]-嘧啶-5-羰基}氨基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯。

在0℃向4-苄基-4-({2-氰基-4-[(螺[2.5}辛-6-基甲基)氨基]-嘧啶-5-羰基} 氨基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯(0.14mmol)在CH2Cl2(1.5mL)中的溶液加入 TFA(0.4mL)。在室温搅拌0.5小时后，在真空中浓缩反应混合物。将残余 物溶于DMF(1.5mL)，在0℃用K2CO3(0.35mmol)和异丙基碘(0.28mmol) 处理。在室温搅拌5小时后，将反应混合物用AcOEt稀释，用H2O和盐 水洗涤。有机层经Na2SO4干燥，过滤，在真空中浓缩。残余物经RP-HPLC 纯化，得到标题化合物；1H NMR(CDCl3)，δ：0.18-0.26(2H，m)，0.27-0.34 (2H，m)，0.91-0.99(2H，m)，1.01-1.13(6H，s)，1.17-1.33(2H，m)，1.63-1.97 (7H，m)，2.15-2.40(4H，m)，2.64-2.90(3H，m)，3.15(2H，s)，3.46(2H，dd)， 5.28(1H，s)，7.02-7.10(2H，m)，7.20-7.30(3H，m)，8.05(1H，s)，8.70(1H， bs)。

步骤66.1：4-氨基-4-苄基-哌啶-1-甲酸叔丁基酯

在室温向4-苄基-哌啶-1，4-二甲酸单叔丁基酯(0.65mmol)在1，4-二噁烷 (2mL)中的溶液加入Et3N(0.71mmol)和DPPA(0.71mmol)。升至100℃并 搅拌2小时后，将反应混合物用AcOEt稀释。有机层用饱和NaHCO3水 溶液和盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤，在真空中浓缩。将残余物溶于 THF(4mL)，在室温加入6N NaOH水溶液(0.22mL)。搅拌4小时后，将反 应混合物用CH2Cl2稀释，用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤，在真空中 浓缩。残余物经硅胶柱色谱纯化，得到标题化合物；1H NMR(CDCl3)，δ： 1.18(2H，bs)，1.28-1.37(2H，m)，1.46(9H，s)，1.51-1.64(2H，m)，2.66(2H，s)， 3.20(2H，dd)，3.74(2H，bd)，7.13-7.19(2H，m)，7.21-7.34(3H，m)。

实施例67至72

重复上述方法，使用适合的原料和条件，获得以下化合物。

实施例73：(R)-2-氰基-4-(甲基螺[2.5]辛-6-基甲基氨基)嘧啶-5-甲酸(2-苯基 -1-吡咯烷-1-基甲基乙基)酰胺

在室温向2-氰基-4-(甲基螺[2.5]辛-6-基甲基氨基)嘧啶-5-甲酸粗品 (82mg，步骤73.4)在DMF(1.5mL)中的溶液加入(R)-2-苯基-1-吡咯烷-1-基 甲基乙基胺(0.3mmol)、EDCl-HCl(0.4mmol)和HOAt(0.4mmol)。将反应混 合物搅拌24小时，加入水淬灭反应。用AcOEt萃取混合物，有机萃取液 经Na2SO4干燥，过滤，在真空中浓缩。所得残余物经RP-HPLC纯化， 得到标题化合物；MS(M+1)+488，Rf(溶剂)0.13(CH2Cl2∶MeOH＝10∶1)。

步骤73.1：2，4-二氯嘧啶-5-甲酸烯丙基酯

在0℃向2，4-二氯嘧啶-5-羰基氯(5.1mmol)在THF(10mL)中的溶液加 入烯丙基醇(5.1mmol)和DIEA(N，N-二异丙基乙基胺)(6.1mmol)。在0℃搅 拌3.5小时后，过滤反应混合物，在真空中浓缩滤液。所得残余物经硅胶 柱色谱纯化，得到标题化合物；1H NMR(CDCl3)δ4.87-4.89(m，2H)， 5.35-5.48(m，2H)，5.97-6.08(M，1H)，9.05(s，1H)。

步骤73.2：2-氯-4-(甲基螺[2.5]辛-6-基甲基氨基)嘧啶-5-甲酸烯丙基酯

在室温向2，4-二氯嘧啶-5-甲酸烯丙基酯(1.6mmol)在二噁烷(6mL)中的 溶液加入Et3N(2.4mmol)。向反应混合物滴加甲基-螺[2.5]辛-6-基甲基胺 (1.6mmol)在二噁烷(2.0mL)中的溶液。将反应混合物在室温搅拌12小时， 加入水淬灭反应。用CH2Cl2萃取混合物。有机萃取液经Na2SO4干燥，过 滤，在真空中浓缩。所得残余物经硅胶柱色谱纯化，得到标题化合物(370 mg)；1H NMR(CDCl3)δ0.15-0.19(m，2H)，0.25-0.29(m，2H)，0.87-0.91(m， 2H)，1.08-1.20(m，2H)，1.60-1.85(m，5H)，2.95(s，3H)，3.59(d，2H)， 4.77-4.78(m，2H)，5.29-6.08(m，1H)，8.48(s，1H)。

步骤73.3：2-氰基-4-(甲基螺[2.5]辛-6-基甲基氨基)嘧啶-5-甲酸烯丙基酯

在室温向2-氯-4-(甲基螺[2.5]辛-6-基甲基氨基)嘧啶-5-甲酸烯丙基酯 (1.1mmol)在DMSO(2.0mL)中的溶液加入KCN(1.6mmol)、DABCO (0.3mmol)和H2O(0.2mL)。将反应混合物在室温搅拌3小时，加入水淬灭 反应。用AcOEt萃取混合物。有机萃取液用盐水洗涤，经Na2SO4干燥， 过滤，在真空中浓缩。所得残余物经硅胶柱色谱纯化，得到标题化合物。

步骤73.4：2-氰基-4-(甲基螺[2.5]辛-6-基甲基氨基)嘧啶-5-甲酸

在室温向2-氰基-4-(甲基螺[2.5]辛-6-基甲基氨基)嘧啶-5-甲酸烯丙基酯 (0.87mmol)在THF(8.7mL)中的溶液加入Pd(PPh3)4(0.087mmol)和吗啉 (1.7mmol)。将反应混合物在室温搅拌0.5小时，加入水和饱和NaHCO3 水溶液淬灭反应。用醚洗涤混合物。用饱和KHSO4水溶液将水层酸化至 pH 2。用AcOEt萃取混合物。有机萃取液用盐水洗涤，经Na2SO4干燥， 过滤，在真空中浓缩，得到标题化合物。

实施例74：(R)-2-氰基-4-(螺[2.5]辛-6-基甲基)嘧啶-5-甲酸(2-苯基1-吡咯烷 -1-基甲乙基)酰胺

在室温向2-氰基-4-(螺[2.5]辛-6-基甲基)嘧啶-5-甲酸粗品(22mg，步骤 74.5)在DMF(1.5mL)中的溶液加入(R)-2-苯基-1-吡咯烷-1-基甲基乙基胺 (0.083mmol)、EDCl-H2O(0.11mmol)和HOAt(0.11mmol)。将反应混合物搅 拌24小时，加入H2O淬灭反应。用AcOEt萃取混合物，有机萃取液经 Na2SO4干燥，过滤，在真空中浓缩。所得残余物经RP-HPLC纯化，得到 标题化合物；MS(M+1)+：474，Rf(溶剂)：0.63(CH2Cl2∶MeOH＝10∶1)。

步骤74.1：2，4-二氯嘧啶-5-甲酸

在室温向2，4-二氯嘧啶-5-羰基氯(24mmol)在THF(24mL)中的溶液加 入H2O(0.64mL)。将反应混合物在室温搅拌0.83小时，然后用H2O稀释。 用AcOEt萃取混合物。有机萃取液用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤， 在真空中浓缩，得到标题化合物粗品；1H NMR(CDCl3)δ6.80(brs，1H)， 9.18(s，1H)。

步骤74.2：2-氯-4-(螺[2.5]辛-6-基甲氧基)嘧啶-5-甲酸

在0℃向2，4-二氯嘧啶-5-甲酸(440mg)在THF(4.0mL)中的溶液加入 THF(1.0mL)中的t-BuOK(叔丁醇钾)(5.7mmol)和螺[2.5]辛-6-基甲醇 (2.3mmol)。在0℃搅拌1.5小时后，加入饱和NaHCO3水溶液淬灭反应。 将混合物用醚洗涤。将水层用饱和KHSO4水溶液酸化至pH 2，然后用 AcOEt萃取。有机萃取液用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，在真空中 浓缩，得到标题化合物粗品。

步骤74.3：2-氯-4-(螺[2.5]辛-6-基甲氧基)嘧啶-5-甲酸烯丙基酯

在室温向2-氯-4-(螺[2.5]辛-6-基甲氧基)嘧啶-5-甲酸(490mg)在DMF (2.9mL)中的溶液加入K2CO3(4.4mmol)和烯丙基溴(7.4mmol)。在50℃搅 拌0.5小时后，将反应混合物冷却，用H2O稀释。用AcOEt萃取混合物。 有机萃取液用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，在真空中浓缩。所得残 余物经硅胶柱色谱纯化，得到标题化合物粗品。

步骤74.4：2-氰基-4-(螺[2.5]辛-6-基甲氧基)嘧啶-5-甲酸烯丙基酯

在室温向2-氯-4-(螺[2.5]辛-6-基甲氧基)嘧啶-5-甲酸烯丙基酯 (0.62mmol)在DMSO(1.0mL)中的溶液加入KCN(0.94mmol)、DABCO (0.19mmol)和H2O(0.10mL)。将反应混合物在室温搅拌0.5小时，加入水 淬灭反应。用AcOEt萃取混合物。有机萃取液用盐水洗涤，经Na2SO4干 燥，过滤，在真空中浓缩。所得残余物经硅胶柱色谱纯化，得到标题化合 物；1H NMR(CDCl3)δ0.19-0.20(m，2H)，0.21-0.33(m，2H)，0.91-0.96(m， 2H)，1.23-1.33(m，3H)，1.72-1.85(m，4H)，4.38(d，2H)，4.84(d，2H)， 5.31-5.45(m，1H)，9.01(s，1H)。

步骤74.5：2-氰基-4-(螺[2.5]辛-6-基甲氧基)嘧啶-5-甲酸

在室温向2-氰基-4-(螺[2.5]辛-6-基甲氧基)嘧啶-5-甲酸烯丙基酯 (0.096mmol)在THF(1.0mL)中的溶液加入Pd(PPh3)4(四(三苯基-膦)钯) (0.0096mmol)和吗啉(0.19mmol)。将反应混合物在室温搅拌0.5小时，加入 饱和NaHCO3水溶液淬灭反应。用醚萃取混合物。将水层用饱和KHSO4 水溶液酸化至pH 2。用AcOEt萃取混合物。有机萃取液用盐水洗涤，经 Na2SO4干燥，过滤，在真空中浓缩，得到标题化合物粗品。

实施例75：2-氰基-4-[2-(1-甲基哌啶-4-基)乙氧基]-6-[(螺[3.5]壬-7-基-甲基) 氨基]嘧啶-5-甲酸甲基酰胺

在0℃向4-[2-(1-叔丁氧羰基哌啶-4-基)乙氧基]-2-氰基-6-[(螺[3.5]壬 -7-基甲基)氨基]嘧啶-5-甲酸(0.23mmol，步骤75.4)和2M甲基胺 (0.30mmol)在DMF(1mL)中的溶液加入EDCl-HCl(0.34mmol)和HoAt (0.34mmol)。将反应混合物在室温搅拌1小时。用AcOEt稀释后，将混合 物用H2O和盐水洗涤。有机层经MgSO4干燥，过滤，浓缩。残余物经硅 胶柱色谱纯化，得到4-(2-{2-氰基-5-甲基氨基甲酰基-6-[(螺[3.5]壬-7-基甲 基)氨基]-嘧啶-4-基氧基}乙基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯，为白色固体； 1H-NMR(CDCl3)，δ：0.98-1.07(2H，m)，1.14-1.85(20H，m)，146(9H，s)，2.70 (2H，t)，2.93(3H，d)，3.33(2H，t)，4.05-4.15(2H，m)，4.54(2H，t)，7.80-7.85 (1H，m)，10.10-10.15(1H，m)。

在室温向4-(2-{2-氰基-5-甲基氨基甲酰基-6-[(螺[3.5]壬-7-基-甲基)氨 基]-嘧啶-4-基氧基}乙基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯(0.25mmol)在CH2Cl2(3mL) 中的溶液加入TFA(0.70mL)。在同样温度搅拌0.5小时后，将反应混合物 在真空中蒸发，直接用于下一反应。在室温向粗产物在THF(5mL)中的溶 液加入HCHO水溶液(0.10mL)。在同样温度搅拌0.5小时后，在0℃向反 应混合物加入1M NaBH3CN溶液(0.10mmol)。将反应混合物升至室温，进 一步搅拌0.5小时。用AcOEt稀释后，将有机层用H2O洗涤两次，在真 空中蒸发。残余物经RP-HPLC纯化，得到2-氰基-4-[2-(1-甲基哌啶-4-基) 乙氧基]-6-[(螺[3.5]壬-7-基甲基)氨基]嘧啶-5-甲酸甲基酰胺 (NVP-TAF059)，为白色固体，1H-NMR(CDCl3)，δ：0.97-1.07(2H，m)， 1.19-1.26(2H，m)，1.43-1.88(18H，m)，2.14-2.17(2H，m)，2.42(3H，S)，2.93 (3H，d)，3.05-3.08(2H，m)，3.32(2H，t)，4.54(2H，t)，7.81(1H，br d)，10.14 (1H，brt)。

步骤75.1：4-[2-(1-叔丁氧羰基哌啶-4-基)乙氧基]-6-氯-2-甲硫基-嘧啶-5-甲 酸烯丙基酯

在0℃向NaH(9.0mmol)和N-BOC-4-哌啶乙醇(4.9mmol)在无水THF (15mL)中的混合物滴加4，6-二氯嘧啶-2-甲硫基-5-甲酸(3.8mmol)在无水 THF中的溶液，将混合物在室温搅拌1.5小时。将混合物用AcOEt稀释， 用H2O和盐水洗涤。有机层经MgSO4干燥，过滤，浓缩，得到加合产物 (1.6g)，其未经进一步纯化直接用于下一反应。

在室温向上述产物(1.5mmol)在DMF(7mL)中的溶液加入烯丙基溴 (7.5mmol)和K2CO3(17.4mmol)。在50℃搅拌1小时后，将混合物用AcOEt 稀释。有机层用水和盐水洗涤。经MgSO4干燥后，过滤混合物，在减压下 浓缩。残余物直接用于下一反应。1H-NMR(CDCl3)，δ：1.12-1.73(9H，m)， 1.46(9H，s)，2.54(3H，s)，2.67-2.69(2H，m)，4.08-4.13(2H，m)，4.47(2H，t)， 4.80(2H，dt)，5.30(1H，brd)，5.43(1H，m)，5.98(1H，ddt)。

步骤75.2：4-[2-(1-叔丁氧羰基哌啶-4-基)乙氧基]6-氯-2-甲磺酰基-嘧啶-5- 甲酸烯丙基酯

按照参考实施例2步骤2.1所述的方法，在0℃将4-[2-(1-叔丁氧羰基 哌啶-4-基)乙氧基]-2，6-二氯嘧啶-5-甲酸烯丙基酯(3.0mmol)用 m-CPBA(8.9mmol)在CH2Cl2(10mL)中处理。常规处理后，将粗产物经硅 胶色谱纯化，得到4-[2-(1-叔丁氧羰基哌啶-4-基)乙氧基]6-氯-2-甲磺酰基嘧 啶-5-甲酸烯丙基酯，为无色油。1H-NMR(CDCl3)，δ：1.12-1.73(9H，m)，1.46 (9H，s)，2.67-2.69(2H，m)，3.20(3H，s)，4.08-4.11(2H，m)，4.46(2H，t)，4.87 (2H，dt)，5.33-5.37(1H，m)，5.42-5.47(1H，m)，5.98(1H，ddt)。

步骤75.3：4-[2-(1-叔丁氧羰基哌啶-4-基)乙氧基]-6-氯-2-氰基嘧啶-5-甲酸烯 丙基酯

按照参考实施例2所述合成方法，将4-[2-(1-叔丁氧羰基哌啶-4-基)乙 氧基]-6-氯-2-甲磺酰基嘧啶-5-甲酸烯丙基酯(1.8mmol)在CH2Cl2(5mL)中 的溶液用NaCN(2.2mmol)和四正丁基溴化铵(0.10mmol)在水(2mL)中的溶 液处理0.5小时。常规处理后，将粗产物经硅胶色谱纯化，得到4-[2-(1-叔 丁氧羰基哌啶-4-基)乙氧基]-6-氯-2-氰基嘧啶-5-甲酸烯丙基酯，为无色油； 1H-NMR(CDCl3)，δ：1.12-1.73(9H，m)，1.48(9H，s)，2.68(2H，brt)， 4.05-4.09(2H，m)，4.55(2H，t)，4.87(2H，dt)，5.33-5.37(1H，m)，5.41-5.47 (1H，m)，5.98(1H，ddt)。

步骤75.4：4-[2-(1-叔丁氧羰基哌啶-4-基)乙氧基]2-氰基-6-[(螺[3.5]壬-7-基 甲基)氨基]嘧啶-5-甲酸

在室温向4-[2-(1-叔丁氧羰基哌啶-4-基)乙氧基]-6-氯-2-氰基嘧啶-5-甲 酸烯丙基酯(1.1mmol)和C-螺[3.5]壬-7-基-甲基胺(1.4mmol)在C2H5CN (10mL)中的溶液加入三乙胺(2.8mmol)。在80℃搅拌1小时后，将反应混 合物冷却至室温，用AcOEt稀释。有机层用H2O、KHSO4水溶液和盐水 洗涤。有机层经MgSO4干燥，在真空中蒸发，其未经进一步纯化直接用于 下一反应。

向4-[2-(1-叔丁氧羰基哌啶-4-基)乙氧基]-2-氰基-6-[(螺[3.5]壬-7-基甲 基)氨基]嘧啶-5-甲酸烯丙基酯粗品(1.1mmol)在THF(5mL)中的溶液接连加 入吗啉(3.4mmol)和Pd(PPh3)4(0.06mmol)。在同样温度搅拌0.5小时后，将 反应混合物用AcOEt稀释。有机层用H2O洗涤，在真空中蒸发。残余物 经硅胶柱色谱纯化，得到4-[2-(1-叔丁氧羰基哌啶-4-基)乙氧基]-2-氰基 -6-[(螺[3.5]壬-7-基甲基)氨基]嘧啶-5-甲酸，为黄灰色固体；1H-NMR (CDCl3)，δ：0.97-1.08(2H，m)，1.15-1.29(5H，m)，1.48(9H，s)，1.48-1.86 (15H，m)，2.69(2H，t)，3.39(2H，t)，4.11(2H，m)，4.66(2H，t)，9.42(1H，br t)。

实施例76：2-氰基-4-[2-(1-甲基哌啶-4-基)乙氧基]-6[(螺[2.5]辛-6-基甲基) 氨基]嘧啶-5-甲酸苄基酰胺

在0℃向4-(2-{5-苄基氨基甲酰基-2-氰基-6-[(螺[2.5]辛-6-基甲基)氨 基]-嘧啶-4-基氧基}乙基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯(0.68mmol)在CH2Cl2(10mL) 中的溶液加入TFA(2mL)。在0℃、N2气氛下搅拌2小时后，将混合物浓 缩，在真空中干燥，得到2-氰基-4-(2-哌啶-4-基-乙氧基)-6-[(螺[2.5]辛-6-基 甲基)氨基]嘧啶-5-甲酸苄基酰胺，为黄色固体。1H-NMR(CDCl3)，δ 0.17-0.30(4H，m)，0.89-0.93(2H，m)，1.00-1.11(2H，m)，1.14-1.24(2H，m)， 1.29-1.38(1H，m)，1.51-1.81(9H，m)，2.41-2.48(2H，m)，2.99-3.02(2H，m)， 3.42(2H，t)，4.45(2H，t)，4.56(2H，d)，7.29-7.39(5H，m)，8.17(1H，t)，10.16 (1H，t)。

向2-氰基-4-(2-哌啶-4-基-乙氧基)-6-[(螺[2.5]辛-6-基甲基)氨基]-嘧啶 -5-甲酸苄基酰胺(0.19mmol)在THF(2mL)中的溶液加入甲醛溶液(100μL)， 将所得溶液在室温搅拌0.5小时。冷却至0℃后，滴加1M NaBH3CN在 THF中的溶液，并将反应混合物在室温搅拌2小时。加入H2O淬灭反应， 用AcOEt萃取两次。有机层经Na2SO4干燥，过滤，浓缩。残余物经硅胶 柱纯化，得到2-氰基-4-[2-(1-甲基-哌啶-4-基)乙氧基]-6-[(螺[2.5]辛-6-基甲 基)氨基]嘧啶-5-甲酸苄基酰胺，为无色油；1H-NMR(CDCl3)，δ0.17-0.30 (4H，m)，0.89-0.94(2H，m)，1.14-1.29(3H，m)，1.40-1.50(2H，m)，1.58-1.78 (9H，m)，1.95-2.01(3H，m)，2.38(3H，S)，2.95-2.98(2H，m)，3.42(2H，t)，4.46 (2H，t)，4.56(2H，d)，7.31-7.39(5H，m)，8.13(1H，t)，10.16(1H，t)。

步骤76.1：4，6-二氯-2-甲硫基嘧啶-5-甲酸苄基酰胺

在0℃向4，6-二氯-2-甲硫基嘧啶-5-甲酸(2.1mmol)在CH2Cl2(20mL)中 的悬液加入草酰氯(4.2mmol)和一滴DMF。在室温、N2气氛下搅拌3小时 后，将反应混合物浓缩，在真空中干燥，得到4，6-二氯-2-甲硫基嘧啶-5-羰 基氯，为黄色晶体。

在0℃向4，6-二氯-2-甲硫基嘧啶-5-羰基氯在THF(15mL)中的溶液加 入三乙胺(2.3mmol)和苄基胺(2.5mmol)。在室温搅拌2小时后，将反应混 合物用AcOEt和H2O稀释。将混合物用AcOEt萃取两次。有机层经Na2SO4 干燥，过滤，浓缩。残余物经硅胶柱色谱纯化，得到4，6-二氯-2-甲硫基嘧 啶-5-甲酸苄基酰胺，为白色固体。1H-NMR(CDCl3)，δ2.57(3H，s)，4.66(2 H，d)，6.08(1H，br s)，7.31-7.35(2H，m)，7.36-7.38(3H，m)。

步骤76.2：4-[2-(5-苄基氨基甲酰基-6-氯-2-甲硫基嘧啶-4-基氧基)乙基]哌啶 -1-甲酸叔丁基酯

在0℃、N2下向4，6-二氯-2-甲硫基嘧啶-5-甲酸苄基酰胺(3mmol)在 THF(20mL)中的溶液加入KOtBu(3.6mmol)。在0℃搅拌20分钟后，在 -78℃将以上混合物滴加至4-(2-羟基乙基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯(3.3mmol) 在THF(20mL)中的溶液。将所得混合物在2.5小时内逐渐升温至-30℃。 加入H2O淬灭反应。将混合物用AcOEt萃取两次。有机层经Na2SO4干燥， 过滤，浓缩，得到4-[2-(5-苄基氨基甲酰基-6-氯-2-甲硫基嘧啶-4-基氧基) 乙基]哌啶-1-甲酸叔丁基酯，为白色固体；1H-NMR(CDCl3)，δ1.07-1.17(2 H，m)，1.48(9H，s)，1.62-1.70(2H，m)，2.54(3H，s)，2.64(2H，br t)，4.06(2H， m)，4.45(2H，t)，4.64(2H，d)，6.06(1H，t)，7.30-7.34(2H，m)，7.35-7.36(3H， m)。

步骤76.3：4-[2-(5-苄基氨基甲酰基-6-氯-2-氰基嘧啶-4-基氧基)乙基]-哌啶 -1-甲酸叔丁基酯

在0℃向4-[2-(5-苄基氨基甲酰基-6-氯-2-甲硫基嘧啶-4-基氧基)乙基] 哌啶-1-甲酸叔丁基酯(2.7mmol)在CH2Cl2(50mL)中的溶液加入m-CPBA (4.1mmol)。在N2气氛下搅拌过夜后，在0℃加入Na2S2O3和饱和NaHCO3 水溶液淬灭反应。将混合物用CH2Cl2萃取两次，合并有机萃取液，用饱 和NaHCO3水溶液和水洗涤。有机层经Na2SO4干燥，浓缩，得到4-[2-(5- 苄基氨基甲酰基-6-氯-2-甲磺酰基嘧啶-4-基氧基)乙基]哌啶-1-甲酸叔丁基 酯，为白色固体；1H-NMR(CDCl3)，δ1.08-1.18(2H，m)，1.45(9H，s)， 1.63-1.75(5H，m)，2.64(2H，br t)，3.32(3H，s)，4.05-4.08(2H，m)，4.59(2H， 1)，4.66(2H，d)，6.20(1H，t)，7.31-7.37(5H，m)。

在0℃向上述产物4-[2-(5-苄基氨基甲酰基-6-氯-2-甲磺酰基-嘧啶-4- 基氧基)乙基]哌啶-1-甲酸叔丁基酯在CH2Cl2/H2O(20mL/2mL)中的溶液加 入NaCN(3.3mmol)和四正丁基溴化铵(0.14mmol)。温至室温后，将反应混 合物在室温剧烈搅拌1.5小时。将混合物用CH2C12稀释，用NaHCO3水 溶液洗涤。有机层经Na2SO4干燥，过滤，浓缩。残余物经硅胶柱色谱纯 化，得到4-[2-(5-苄基氨基甲酰基-6-氯-2-氰基-嘧啶-4-基氧基)乙基]哌啶-1- 甲酸叔丁基酯，为白色固体。1H-NMR(CDCl3)，δ1.09-1.19(2H，m)，1.46(9 H，s)，1.63-1.74(5H，m)，2.66(2H，br t)，4.07(2H，m)，4.51(2H，t)，4.66(2H， d)，6.11(1H，t)，7.31-7.37(5H，m)。

步骤76.4：4-(2-{5-苄基氨基甲酰基-2-氰基-6-[(螺[2.5]辛-6-基甲基)氨基]- 嘧啶-4-基氧基}乙基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯

在室温向4-[2-(5-苄基氨基甲酰基-6-氯-2-氰基嘧啶-4-基氧基)乙基]哌 啶-1-甲酸叔丁基酯(0.23mmol)在CH3CN(5mL)中的溶液加入C-螺[2.5]辛 -6-基-甲基胺盐酸盐(0.25mmol)和K2CO3(0.7mmol)。升温至70℃后，将反 应混合物搅拌过夜。将混合物用H2O和AcOEt稀释，用AcOEt萃取两次。 有机层经Na2SO4干燥，过滤，浓缩，得到4-(2-{5-苄基氨基甲酰基-2-氰基 -6-[(螺[2.5]辛-6-基甲基)氨基]嘧啶-4-基氧基}乙基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯， 为白色固体；1H-NMR(CDCl3)，δ0.17-0.30(4H，m)，0.89-1.06(4H，m)， 1.14-1.38(3H，m)，1.46(9H，s)，1.49-1.79(9H，m)，2.51(2H，br t)，3.42(2H， t)，4.00(2H，m)，4.45(2H，t)，4.55(2H，d)，7.30-7.39(5H，m)，8.12(1H，t)， 10.16(1H，t)。

实施例77至164

重复上述方法，使用适合的原料和条件，获得以下化合物。

HPLC条件：Phenomenex Luna反相柱C183μm 30x 4.6mm柱。线性梯 度：在10分钟内，90％含0.08％甲酸的水∶10％乙腈至100％乙腈。检测： 254nm。

(i)实施例114的化合物：熔点＝159℃。

实施例165：N-{2-氰基-4-[2-(1-甲基哌啶-4-基)乙氧基]-6-[(螺[3.5]壬-7-基甲 基)氨基]嘧啶-5-基}-C-苯基甲磺酰胺

按照4-[2-(1-甲基哌啶-4-基)乙氧基]-6-[(螺[3.5]壬-7-基甲基)氨基]嘧啶 -2-甲腈的合成方法，将4-(2-{2-氰基-5-苯基甲磺酰基氨基-6-[(螺[3.5]壬-7- 基甲基)氨基]嘧啶-4-基氧基}乙基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯转化为N-{2-氰基 -4-[2-(1-甲基哌啶-4-基)乙氧基]-6-[(螺[3.5]壬-7-基甲基)氨基]嘧啶-5-基}-C- 苯基甲磺酰胺。

步骤165.1：(4，6-二氯-2-甲硫基嘧啶-5-基)氨基甲酸烯丙基酯

在室温、N2气氛下向4，6-二氯-2-甲硫基嘧啶-5-甲酸(5.5mmol)在二噁 烷(10mL)中的溶液加入叠氮磷酸二苯酯(diphenyl phosphoryl azide)(6.6mmol)、三乙胺(6.6mmol)和烯丙基醇(11mmol)。在100℃搅拌1 小时后，将反应混合物冷却至室温，用AcOEt稀释。有机层用H2O洗涤 两次，在真空中蒸发。所得残余物经硅胶柱色谱纯化，得到(4，6-二氯-2-甲 硫基-嘧啶-5-基)氨基甲酸烯丙基酯。

步骤165.2：4-[2-(5-烯丙基氧基羰基氨基-6-氯-2-甲硫基嘧啶-4-基氧基)乙基] 哌啶-1-甲酸叔丁基酯

按照参考实施例2步骤2.0所述合成方法，将(4，6-二氯-2-甲硫基嘧啶 -5-基)氨基甲酸烯丙基酯转化为4-[2-(5-烯丙基氧基羰基氨基-6-氯-2-甲硫 基嘧啶-4-基氧基)乙基]哌啶-1-甲酸叔丁基酯。

步骤165.3：4-[2-(5-烯丙基氧基羰基氨基-6-氯-2-氰基-嘧啶-4-基氧基)乙基] 哌啶-1-甲酸叔丁基酯

按照参考实施例2对4-[2-(6-氯-2-氰基嘧啶-4-基氧基)乙基]哌啶-1-甲 酸叔丁基酯所述的合成方法，将4-[2-(5-烯丙基氧基羰基氨基-6-氯-2-甲硫 基嘧啶-4-基氧基)乙基]哌啶-1-甲酸叔丁基酯转化为4-[2-(5-烯丙基氧基羰 基氨基-6-氯-2-氰基-嘧啶-4-基氧基)乙基]哌啶-1-甲酸叔丁基酯。

步骤165.4：4-(2-{5-烯丙基氧基羰基氨基-2-氰基-6-[(螺[3.5]壬-7-基甲基)- 氨基]嘧啶-4-基氧基}乙基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯

按照参考实施例2步骤2.2对4-(2-{2-氰基-6-[(螺[3.5]壬-7-基甲基)-氨 基]嘧啶-4-基氧基}乙基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯所述的合成方法，将4-[2-(5- 烯丙基氧基羰基氨基-6-氯-2-氰基-嘧啶-4-基氧基)乙基]哌啶-1-甲酸叔丁基 酯转化为4-(2-{5-烯丙基氧基羰基氨基-2-氰基-6-[(螺[3.5]壬-7-基甲基)氨基] 嘧啶-4-基氧基}乙基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯。

步骤165.5：4-(2-{5-氨基-2-氰基-6-[(螺[3.5]壬-7-基甲基)氨基]嘧啶-4-基氧 基}乙基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯

在室温、N2气氛下向4-(2-{5-烯丙基氧基羰基氨基-2-氰基-6-[(螺[3.5] 壬-7-基甲基)氨基]嘧啶-4-基氧基}乙基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯粗品(230mg) 在THF(10mL)中的溶液加入三乙胺(1.25mmol)和Pd(PPh3)4(催化量)。在同 样温度搅拌1小时后，将反应混合物用AcOEt稀释。有机层用H2O洗涤， 在真空中蒸发。所得残余物经硅胶柱色谱纯化，得到4-(2-{5-氨基-2-氰基 -6-[(螺[3.5]壬-7-基甲基)氨基]嘧啶-4-基氧基}乙基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯； 1H-NMR(CDCl3)，δ：0.97-1.07(2H，m)，1.13-1.28(4H，m)，1.42-1.88(25H， m)，2.69(2H，t)，3.22(2H，s)，3.31(2H，t)，4.04-4.16(2H，m)，4.40(2H，t)， 4.51(1H，1)。

步骤165.6：4-(2-{2-氰基-5-苯基甲磺酰基氨基-6-[(螺[3.5]壬-7-基甲基)氨基] 嘧啶-4-基氧基}乙基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯

在0℃将苄基磺酰氯(0.50mmol)加至4-(2-{5-氨基-2-氰基-6-[(螺[3.5] 壬-7-基甲基)氨基]嘧啶-4-基氧基}乙基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯(167mg)和吡 啶(0.66mmol)在CH2Cl2(3mL)中的溶液，在室温搅拌1小时后，再向反应 混合物加入苄基磺酰氯(0.50mmol)、吡啶(0.66mmol)和DMAP(催化量)。 将反应混合物在室温搅拌1小时，用AcOEt稀释。有机层用H2O洗涤， 在真空中蒸发。所得残余物经硅胶柱色谱纯化，得到4-(2-{2-氰基-5-苯基 甲磺酰基氨基-6-[(螺[3.5]壬-7-基甲基)氨基]嘧啶-4-基氧基}乙基)哌啶-1-甲 酸叔丁基酯。

实施例166和167

重复上述方法，使用适合的原料和条件，获得以下化合物。

实施例168-173：

重复上述方法，使用适合的原料和条件，获得以下化合物。

Me＝甲基

(ii)实施例168的化合物：熔点＝131℃；(M+H)+＝412。

实施例174：软胶囊

如下制备5000粒软胶囊，各包含0.05g前述实施例所述式I化合物之 一作为活性成分：

组成

活性成分     250g

Lauroglycol  2升

制备方法：将粉状活性成分混悬于(丙二醇月桂酸酯， GattefosséS.A.，Saint Priest，法国)并在湿法粉碎机中研磨，制得约1至 3μm的颗粒大小。然后使用胶囊填充机将0.419g每份的混合物装入软明胶 胶囊中。