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巴氏染色试剂盒及其染色方法

阅读:2发布:2020-09-02

专利汇可以提供巴氏染色试剂盒及其染色方法专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种巴氏 染色 试剂 盒 及其染色方法。所述巴氏染色试剂盒包括苏木素染液、伊红染液和橘黄G染液,其中,伊红染液的PH值控制在6.5~6.8之间,从而使得伊红染液在弱酸环境下进行染色,提高了伊红染液的着色 力 。采用本发明提供的方案,可以缩短了细胞涂片从固定到染色以及封片所需的时间,提高检测效率,由于染色后细胞结构分明,进一步提高了检测效率,降低检测难度。,下面是巴氏染色试剂盒及其染色方法专利的具体信息内容。

1.一种巴氏染色试剂盒,其特征在于,包括苏木素染液、伊红染液和橘黄G染液,其中,所述苏木素染液的配制方法包括:将2g苏木素加入250ml 95%乙醇中得到苏木素酒精液;将17g硫酸加入750ml蒸馏中,搅拌使其完全溶解得到硫酸铝钾溶液;将所述苏木素酒精液加入所述硫酸铝溶液中,并向溶液中加入0.2g碘酸钠;再向前述溶液中加入体积浓度为95.5%的醋酸20ml;
所述伊红染液的配制方法包括:
将2.5g淡绿溶于5ml蒸馏水中得到淡绿溶液,再将所述淡绿溶液加入500ml无水乙醇中得到淡绿酒精液;
将0.5g俾士麦棕加入5ml蒸馏水中得到俾士麦棕溶液,再将所述俾士麦棕加入100ml无水乙醇中得到俾士麦棕酒精液;
将2.5g伊红加入500ml、95%乙醇中得到伊红酒精液;
取45ml所述淡绿酒精液、10ml所述俾士麦棕酒精液和45ml所述伊红酒精液进行混合,再向混合液中加入0.2g磷钨酸,得到伊红染液;
所述橘黄G染液的配制方法包括:
将0.5g桔黄G溶于5ml蒸馏水中得到桔黄溶液,再向所述桔黄溶液中加入100ml无水乙醇,得到橘黄G染液。
2.根据权利要求1所述的巴氏染色试剂盒,其特征在于,所述巴氏染色试剂盒中包括
20ml所述苏木素染液、20ml所述伊红染液和20ml所述橘黄G染液。
3.根据权利要求1所述的巴氏染色试剂盒,其特征在于,所述伊红染液的配制方法中还包括:向所述伊红染液中加入数滴酸锂饱和溶液。
4.根据权利要求3所述的巴氏染色试剂盒,其特征在于,加入所述碳酸锂饱和溶液后的所述伊红染液的PH值为6.5~6.8之间。
5.根据权利要求1所述的巴氏染色试剂盒,其特征在于,所述橘黄G染液的配制方法中还包括:向所述橘黄G染液中加入0.015g磷钨酸。
6.一种采用如权利要求1-5中任意一项所述的巴氏染色试剂盒染色的方法,其特征在于,包括以下步骤:
a.将已固定的细胞涂片浸入酒精中3min,然后水洗;
b.将步骤a中获得的细胞涂片浸入苏木素染液中2min,然后采用流水冲洗5min;
c.将步骤b中获得的细胞涂片依次浸入75%、85%、95%酒精中各40s,以进行脱水;
d.将步骤c中获得的细胞涂片浸入橘黄G染液中1~2min;
e.将步骤d中获得的细胞涂片放入95%酒精中浸洗2次;
f.用伊红染液对步骤e中获得的细胞涂片进行染色4~8min;
g.将步骤f中获得的细胞涂片放入95%酒精中浸洗2次,再置于无水乙醇中脱水,接着置于二甲苯中洗涤透明,接着,采用中性树胶对透明后的细胞涂片进行封片。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述步骤a包括:将已固定的细胞涂片依次浸入80%、70%、50%酒精中各1min,然后水洗。

说明书全文

巴氏染色试剂盒及其染色方法

技术领域

[0001] 本发明涉及了体外诊断领域,具体的是一种巴氏染色试剂盒及其染色方法。

背景技术

[0002] 巴氏(Papanicolaou)染色法是病理切片和脱落细胞染色中最常用的染色方法,该染色法不但具有显示细胞核结构清晰,分色明显,透明度好,胞浆受色鲜艳等特点,而且所染标本不易脱色,可长久保存。
[0003] 传统的巴氏染色试剂盒成分复杂,染色手续繁杂,时间较长且难以掌握。因而检验技术人员普遍感到操作难度大。

发明内容

[0004] 为了克服现有技术中的缺陷,本发明实施例提供了一种巴氏染色试剂盒及其染色方法,其用于解决上述问题中的至少一种。
[0005] 本申请实施例公开了:一种巴氏染色试剂盒,包括苏木素染液、伊红染液和橘黄G染液,其中,
[0006] 所述苏木素染液的配制方法包括:将2g苏木素加入250ml 95%乙醇中得到苏木素酒精液;将17g硫酸加入750ml蒸馏中,搅拌使其完全溶解得到硫酸铝钾溶液;将所述苏木素酒精液加入所述硫酸铝溶液中,并向溶液中加入0.2g碘酸钠;再向前述溶液中加入体积浓度为95.5%的醋酸20ml;
[0007] 所述伊红染液的配制方法包括:
[0008] 将2.5g淡绿溶于5ml蒸馏水中得到淡绿溶液,再将所述淡绿溶液加入500ml无水乙醇中得到淡绿酒精液;
[0009] 将0.5g俾士麦棕加入5ml蒸馏水中得到俾士麦棕溶液,再将所述俾士麦棕加入100ml无水乙醇中得到俾士麦棕酒精液;
[0010] 将2.5g伊红加入500ml、95%乙醇中得到伊红酒精液;
[0011] 取45ml所述淡绿酒精液、10ml所述俾士麦棕酒精液和45ml所述伊红酒精液进行混合,再向混合液中加入0.2g磷钨酸,得到伊红染液;
[0012] 所述橘黄G染液的配制方法包括:
[0013] 将0.5g桔黄G溶于5ml蒸馏水中得到桔黄溶液,再向所述桔黄溶液中加入100ml无水乙醇,得到橘黄G染液。
[0014] 具体的,所述巴氏染色试剂盒中包括20ml所述苏木素染液、20ml所述伊红染液和20ml所述橘黄G染液。
[0015] 具体的,所述伊红染液的配制方法中还包括:向所述伊红染液中加入数滴酸锂饱和溶液。
[0016] 具体的,加入所述碳酸锂饱和溶液后的所述伊红染液的PH值为6.5~6.8之间。
[0017] 具体的,所述橘黄G染液的配制方法中还包括:向所述橘黄G染液中加入0.015g磷钨酸。
[0018] 本申请实施例还公开了:一种采用本实施例中的巴氏染色试剂盒染色的方法,包括以下步骤:
[0019] a.将已固定的细胞涂片浸入酒精中3min,然后水洗;
[0020] b.将步骤a中获得的细胞涂片浸入苏木素染液中2min,然后采用流水冲洗5min;
[0021] c.将步骤b中获得的细胞涂片依次浸入75%、85%、95%酒精中各40s,以进行脱水;
[0022] d.将步骤c中获得的细胞涂片浸入橘黄G染液中1~2min;
[0023] e.将步骤d中获得的细胞涂片放入95%酒精中浸洗2次;
[0024] f.用伊红染液对步骤e中获得的细胞涂片进行染色4~8min;
[0025] g.将步骤f中获得的细胞涂片放入95%酒精中浸洗2次,再置于无水乙醇中脱水,接着置于二甲苯中洗涤透明,接着,采用中性树胶对透明后的细胞涂片进行封片。
[0026] 具体的,所述步骤a包括:将已固定的细胞涂片依次浸入80%、70%、50%酒精中各1min,然后水洗。
[0027] 本发明至少具有如下有益效果:
[0028] 1.本发明的巴氏染色试剂盒中各成分制备方法简单、成本低。
[0029] 2.本发明的巴氏染色试剂盒能缩短细胞涂片从固定到染色、再到封片的时间,提高了染色效率。
[0030] 3.本发明的伊红染液的PH值控制在6.5~6.8之间,在该弱酸环境下,可以提高伊红染液的着色
[0031] 4.本发明的巴氏染色试剂盒可以使细胞涂片显示多种颜色,提高染色后细胞结构的分明度,有助于检测人员的检测。
[0032] 为让本发明的上述和其他目的、特征和优点能更明显易懂,下文特举较佳实施例作详细说明如下。
[0033] 具体实施方式
[0034] 下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
[0035] 本实施例中的巴氏染色试剂盒,包括20ml苏木素染液、20ml伊红染液和20ml橘黄G染液,该巴氏染色试剂盒需在常温避光的环境下保持。其中,苏木素染液的配制方法包括:
[0036] 将2g苏木素加入250ml 95%乙醇中得到苏木素酒精液;将17g硫酸铝钾加入750ml蒸馏水中,搅拌使其完全溶解得到硫酸铝钾溶液;将上述苏木素酒精液加入上述硫酸铝溶液中,并向混合后的溶液中加入0.2g碘酸钠;再向前述溶液中加入体积浓度为95.5%的冰醋酸20ml。
[0037] 伊红染液的配制方法包括:
[0038] 将2.5g淡绿溶于5ml蒸馏水中得到淡绿溶液,再将所述淡绿溶液加入500ml无水乙醇中得到淡绿酒精液;
[0039] 将0.5g俾士麦棕加入5ml蒸馏水中得到俾士麦棕溶液,再将所述俾士麦棕加入100ml无水乙醇中得到俾士麦棕酒精液;
[0040] 将2.5g伊红加入500ml、95%乙醇中得到伊红酒精液;
[0041] 取45ml所述淡绿酒精液、10ml所述俾士麦棕酒精液和45ml所述伊红酒精液进行混合,再向混合液中加入0.2g磷钨酸,得到伊红染液。
[0042] 进一步的,为使伊红染液的PH值达到6.5~6.8之间,还可以向上述的伊红染液中加入数滴碳酸锂饱和溶液。该弱酸环境可以使得伊红染液的着色力更高,进而提高染色后细胞结构的分明度。
[0043] 橘黄G染液的配制方法包括:
[0044] 将0.5g桔黄G溶于5ml蒸馏水中得到桔黄溶液,再向所述桔黄溶液中加入100ml无水乙醇,得到橘黄G染液。
[0045] 进一步的,还可以向上述橘黄G染液中加入0.015g磷钨酸,以提高橘黄G染液的着色力。
[0046] 本实施例中的巴氏染色试剂盒对细胞涂片的染色方法包括以下步骤:
[0047] a.将已固定的细胞涂片依次浸入80%、70%、50%酒精中各1min,然后水洗。
[0048] b.将步骤a中获得的细胞涂片浸入苏木素染液中2min,然后采用流水冲洗5min。
[0049] c.将步骤b中获得的细胞涂片依次浸入75%、85%、95%酒精中各40s,以进行脱水。
[0050] d.将步骤c中获得的细胞涂片浸入橘黄G染液中1~2min。
[0051] e.将步骤d中获得的细胞涂片放入95%酒精中浸洗2次。
[0052] f.用伊红染液对步骤e中获得的细胞涂片进行染色4~8min。
[0053] g.将步骤f中获得的细胞涂片放入95%酒精中浸洗2次,再置于无水乙醇中脱水,接着置于二甲苯中洗涤透明,接着,采用中性树胶对透明后的细胞涂片进行封片。
[0054] 通过上述方法获得的最终细胞涂片中,细胞核呈蓝色,核仁呈红色,底层及表层网状核细胞胞浆均染成蓝绿色,表层固缩核细胞胞浆染成淡红色或淡蓝绿色,红细胞呈鲜红色或橘红色。
[0055] 本发明中应用了具体实施例对本发明的原理及实施方式进行了阐述,以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想;同时,对于本领域的一般技术人员,依据本发明的思想,在具体实施方式及应用范围上均会有改变之处,综上所述,本说明书内容不应理解为对本发明的限制。
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