专利汇可以提供一种筛选多氧霉素B组分高产菌株的方法专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 涉及一种筛选多 氧 霉素B组分(Polyoxin B)高产菌株的方法,包括配制出发菌株孢子悬液,将稀释后的孢子悬液经过先紫外诱变,再日光灯照射,然后ARTP复合诱变后,涂布于培养基平板并培养,将挑出的各单菌落的一半摇瓶考核,选出多氧霉素B组分含量高的菌株。本发明的筛选方法可以快速地筛选出含量高的菌株,本发明筛选的多氧霉素B组分含量高的菌株,其 发酵 液对苹果斑点落叶病和 烟草 赤星病具有抑制作用。,下面是一种筛选多氧霉素B组分高产菌株的方法专利的具体信息内容。
1.一种筛选多氧霉素B组分高产菌株的方法,其特征在于,包括配制出发菌株孢子悬液,将稀释后的孢子悬液经过先紫外诱变,再日光灯照射,然后ARTP复合诱变后,涂布于培养基平板并培养,将挑出的各单菌落的一半摇瓶考核,选出多氧霉素B组分含量高的菌株。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,包括如下步骤:
步骤1,将多氧霉素出发菌株金色产色链霉菌接种于斜面培养基恒温培养;
步骤2,挑选步骤1培养好的孢子,加入生理盐水,梯度稀释,涂布于斜面培养基平板上,恒温培养后长出单菌落;
步骤3,挑选步骤2饱满合格的单菌落,均匀切开,其中一半用于制作诱变的孢子悬液,另外一半用于摇瓶考核对照;
步骤4,将步骤3切下的半个单菌落加入含甘油的生理盐水,振荡分散制成待诱变孢子悬液;
步骤5,步骤4制成的待诱变孢子悬液滴入ARTP诱变育种仪的载片上,均匀涂开;
步骤6,将滴加到载片的悬液先紫外诱变,再日光灯照射,然后ARTP诱变,得到诱变液;
步骤7,用无菌生理盐水洗下步骤6所述的诱变液;
步骤8,保持黑暗或在红光下,将步骤7所述的诱变液用生理盐水梯度稀释,分别涂布于斜面培养基平板上,恒温培养;
步骤9,挑选步骤8培养突变的若干单菌落,切下所选这些单菌落的一半接种到摇瓶种子培养基,恒温振荡培养,其余半个仍要保留;将步骤3剩余的半个单菌落也接种到摇瓶种子培养基,恒温振荡培养;
步骤10,将步骤9培养的摇瓶种子以5-15%的接种量接种到摇瓶发酵培养基中继续恒温振荡培养;
步骤11,对步骤10的各发酵瓶发酵液中多氧霉素B组分含量进行检测,筛选与出发菌株单菌落比较代谢B组分含量提高的菌株。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述步骤1、2中,培养参数为温度25-28℃培养5-8天。
4.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,以质量百分含量计,所述步骤1、2、8中所述的斜面培养基包括以下成份:玉米粉0.2-0.7%、麦芽糖0.2-0.8%、酵母膏0.3-0.6%、琼脂
1.5-2.5%,其余是蒸馏水,所述的斜面培养基的消前pH为7.0-7.2。
5.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,步骤4中,所述的生理盐水为含20wt%甘油的生理盐水。
6.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述步骤6中,紫外诱变的参数为:15W紫光灯距离悬液30cm,照射5-60秒;日光照射的参数为:日光灯照射3分钟;ARTP诱变的参数为:
照射功率120W,氦气流量8-12SLM,照射10-180秒。
7.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述步骤8中,所述的培养为于温度25-27℃在暗处培养6-14天。
8.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述步骤9中,所述的培养为在28℃、转速
220rpm恒温摇床培养28-32小时;所述步骤10中,所述的培养为在28℃、转速220rpm恒温摇床培养130-140小时。
9.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述步骤9中,以质量百分含量计,所述的摇瓶种子培养基包括以下成份:玉米粉1.0-2.0%、低温黄豆饼粉1-4%、啤酒酵母粉0.1-
1.0%、果葡糖浆0.5-1.5%、NaCl 0.1-0.3%、CaCO3 0.2-0.4%、KH2PO4 0.05-0.20%,自来水配制,所述的摇瓶种子培养基的消前pH为6.5-6.8。
10.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述步骤10中,以质量百分含量计,所述的摇瓶发酵培养基包括以下成份:玉米粉8-10%、低温黄豆饼粉2.0-3.0%、啤酒酵母粉0.3-
0.5%、鱼粉0.4-0.8%、NaCl 0.1-0.5%、CaCO3 0.1-0.5%、KH2PO4 0.05-0.20%、α-淀粉酶为玉米粉质量的0.005-0.020%,自来水配制,所述摇瓶发酵培养基的pH值为消前6.5-6.8。
标题 | 发布/更新时间 | 阅读量 |
---|---|---|
用于片烟烟包的检测系统、检测方法和制烟设备 | 2020-05-08 | 800 |
非燃烧式抽吸器的电源单元、主体单元及非燃烧式抽吸器 | 2020-05-08 | 476 |
气溶胶生成装置及其主体单元、非燃烧式吸取器 | 2020-05-08 | 335 |
非燃烧式抽吸器的电源单元以及非燃烧式抽吸器 | 2020-05-08 | 825 |
一种使用THT的烟梗烘烤加工方法 | 2020-05-08 | 294 |
非燃烧式抽吸器的电源单元、主体单元及非燃烧式抽吸器 | 2020-05-08 | 204 |
烟弹、雾化单元以及非燃烧式吸取器 | 2020-05-08 | 773 |
非燃烧式吸取器的电源单元、雾化单元以及非燃烧式吸取器 | 2020-05-08 | 68 |
聚乳酸基香味缓释材料、复合薄片及其制备和在加热不燃烧烟草制品中的应用 | 2020-05-08 | 1 |
聚合物基香味缓释复合薄片及其制备和在加热不燃烧烟草制品中的应用 | 2020-05-11 | 854 |
高效检索全球专利专利汇是专利免费检索,专利查询,专利分析-国家发明专利查询检索分析平台,是提供专利分析,专利查询,专利检索等数据服务功能的知识产权数据服务商。
我们的产品包含105个国家的1.26亿组数据,免费查、免费专利分析。
专利汇分析报告产品可以对行业情报数据进行梳理分析,涉及维度包括行业专利基本状况分析、地域分析、技术分析、发明人分析、申请人分析、专利权人分析、失效分析、核心专利分析、法律分析、研发重点分析、企业专利处境分析、技术处境分析、专利寿命分析、企业定位分析、引证分析等超过60个分析角度,系统通过AI智能系统对图表进行解读,只需1分钟,一键生成行业专利分析报告。