技术领域
[0001] 本
发明涉及
植物组织培养技术领域，尤其涉及一种新甜樱桃抗虫果树培育方法。
背景技术
[0002] 樱桃是蔷薇科李属果树，果实较小，成熟早，可称得上百果之先。樱桃树根据
味道的不同一般可以分为两种：甜樱桃和酸樱桃，现有的甜樱桃果树由于长期进行
营养繁殖，使各类病毒病不断扩散蔓延，并日趋严重，造成树体生长不良、产量下降、品质变劣、树体异常，给生产带来巨大的经济损失，同时现有的樱桃树的抗虫能
力较差，进一步导致樱桃产量的大大降低。
[0003] 为解决上述问题现已采用培养，嫁接等方式进行樱桃种植，，经检索，如已公开文件(CN110150143A)一种樱桃苗木的培育方法，其进过传统的育苗方式进行培育，虽然可以得出无毒的樱桃树
幼苗，但是其得出的幼苗抗虫能力依旧较差，樱桃树的樱桃产量依旧无法保证，进而无法满足大批推广使用。
发明内容
[0004] 基于背景技术存在的技术问题，本发明提出了一种新甜樱桃抗虫果树培育方法。
[0005] 本发明提出的一种新甜樱桃抗虫果树培育方法，其特征在于，包括品种选育以及幼苗培育，所述品种选育用于选育具有抗虫性的甜樱桃果树幼苗，所述幼苗培育包括外植体消毒、诱导丛生芽、继代增殖培养、生根壮苗培养和脱毒嫁接培养。
[0006] 进一步地，所述品种选育包括以下步骤：
[0007] S1：在甜樱桃果园里寻找多棵虫害较小的樱桃树；
[0008] S2：由多棵虫害较小的樱桃树上取出多2cm以上的新梢；
[0009] S3：将2cm以上的新梢放入
萘乙酸浓度为0.2-0.5mg/L、吲哚丁酸浓度为1-5mg/L、
硝酸稀土液浓度为0.2-0.8g/L、二氯苯
氧乙酸浓度为3-6g/L、正三十烷醇浓度为1-5mg/L以及玉米素浓度为0.4-0.8g/L的培养液中；
[0010] S4：弱光处理5-7天后，诱导生根。
[0011] 进一步地，所述的外植体消毒步骤具体如下：
[0012] S1：由
权利要求2中的S4中的植株上切去刚萌动变绿尚未展叶的饱满芽；
[0013] S2：采用10-30℃的蒸馏
水对饱满芽进行清洗，之后用
滤纸对饱满芽表面蒸馏水进行吸干；
[0014] S3：饱满芽放入浓度为70％的酒精中浸泡30-60s；
[0015] S4：将饱满芽放入浓度为0.1％的氯化汞中浸泡10分钟，之后采用无菌水冲洗4-7次；
[0016] S5：在无菌环境下剥除芽外部叶原基，切取1.0mm以下茎尖分生组织，得到目标外植体。
[0017] 进一步地，所述诱导丛生芽步骤具体如下：
[0018] S1：以MS培养基为
基础，并向内添加30wt％的
蔗糖以及0.55wt％的琼脂，同时向MS培养基内依次添加1wt％的AgNO3、2.5wt％的NNA、5.0wt％的BA以及3.0wt％的KT；
[0019] S2：向S1的培养基中加入适量浓度为1mol/L的
盐酸以及氢氧化钠，调节PH值为5.8；
[0020] S3：将目标外植体放入S2中的培养基中，在室温下，采用一定的光照强度照射16h，诱导丛生芽。
[0021] 进一步地，S3中室温为24-26℃。
[0022] 进一步地，S3中的光照强度为3500lx。
[0023] 进一步地，将丛生芽或带1～2个芽的茎端转入添加有15wt％的蔗糖，3wt％的琼脂，2.5％vol的KNO3、NH4NO3以及MgSO4·7H2O的
混合液，2.5％vol的MnSO4·4H2O,0.5％vol的盐酸硫胺素以及0.25％vol的盐酸吡哆醇的MS基本培养基中培养3-5周。
[0024] 进一步地，将盆栽苗放入人工
气候室中培养，之后剪取新梢顶部0.5-1.0cm，嫁接到无病毒
砧木上，得到甜樱桃抗虫果树。
[0025] 本发明的有益效果如下：
[0026] 与
现有技术相比，本发明通过从具有抗虫能力的樱桃树上选取新梢，使培育后的树苗具有一定的抗虫能力，进而在该幼苗种植后减少虫害，大大提高樱桃产量，同时，本发明配置改良了MS培养基，通过1wt％的AgNO3+2.5wt％的NNA+5.0wt％的BA的配比，使得丛生芽诱导率到达最高，通过添加3.0wt％，利用KT与BA的协作作用，大大提高外植体的出芽率，有利于丛生芽的诱导以及扩繁培养，AgNO3可促进一些再生困难种的形态发生，增加外植体产生不定芽的数目。提高植株再生
频率，对幼苗培养具有明显促进作用。
具体实施方式
[0027] 下面结合具体
实施例对本发明作进一步解说。
[0028] 本发明提出的一种新甜樱桃抗虫果树培育方法，其特征在于，包括品种选育以及幼苗培育，品种选育用于选育具有抗虫性的甜樱桃果树幼苗，幼苗培育包括外植体消毒、诱导丛生芽、继代增殖培养、生根壮苗培养和脱毒嫁接培养。
[0029] 实施例1
[0030] 品种选育包括以下步骤：
[0031] S1：在甜樱桃果园里随机选择多棵樱桃树；
[0032] S2：由随机选择的多棵的樱桃树上取出多2cm以上的新梢；
[0033] S3：将2cm以上的新梢放入萘乙酸浓度为0.2-0.5mg/L、吲哚丁酸浓度为1-5mg/L、硝酸稀土液浓度为0.2-0.8g/L、二氯苯氧乙酸浓度为3-6g/L、正三十烷醇浓度为1-5mg/L以及玉米素浓度为0.4-0.8g/L的培养液中；
[0034] S4：弱光处理5-7天后，诱导生根。
[0035] 的外植体消毒步骤具体如下：
[0036] S1：由权利要求2中的S4中的植株上切去刚萌动变绿尚未展叶的饱满芽；
[0037] S2：采用10-30℃的蒸馏水对饱满芽进行清洗，之后用滤纸对饱满芽表面蒸馏水进行吸干；
[0038] S3：饱满芽放入浓度为70％的酒精中浸泡30-60s；
[0039] S4：将饱满芽放入浓度为0.1％的氯化汞中浸泡10分钟，之后采用无菌水冲洗4-7次；
[0040] S5：在无菌环境下剥除芽外部叶原基，切取1.0mm以下茎尖分生组织，得到目标外植体。
[0041] 诱导丛生芽步骤具体如下：
[0042] S1：以MS培养基为基础，并向内添加30wt％的蔗糖以及0.55wt％的琼脂，同时向MS培养基内依次添加1wt％的AgNO3、2.5wt％的NNA、5.0wt％的BA以及3.0wt％的KT；
[0043] S2：向S1的培养基中加入适量浓度为1mol/L的盐酸以及氢氧化钠，调节PH值为5.8；
[0044] S3：将目标外植体放入S2中的培养基中，在室温下，采用一定的光照强度照射16h，诱导丛生芽。
[0045] S3中室温为24-26℃。
[0046] S3中的光照强度为3500lx。
[0047] 将丛生芽或带1～2个芽的茎端转入添加有15wt％的蔗糖，3wt％的琼脂，2.5％vol的KNO3、NH4NO3以及MgSO4·7H2O的混合液，2.5％vol的MnSO4·4H2O,0.5％vol的盐酸硫胺素以及0.25％vol的盐酸吡哆醇的MS基本培养基中培养3-5周。
[0048] 将盆栽苗放入人工气候室中培养，之后剪取新梢顶部0.5-1.0cm，嫁接到无病毒砧木上，得到甜樱桃抗虫果树。
[0049] 实施例2
[0050] 品种选育包括以下步骤：
[0051] S1：在甜樱桃果园里寻找多棵虫害较小的樱桃树；
[0052] S2：由多棵虫害较小的樱桃树上取出多2cm以上的新梢；
[0053] S3：将2cm以上的新梢放入萘乙酸浓度为0.2-0.5mg/L、吲哚丁酸浓度为1-5mg/L、硝酸稀土液浓度为0.2-0.8g/L、二氯苯氧乙酸浓度为3-6g/L以及玉米素浓度为0.4-0.8g/L的培养液中；
[0054] S4：弱光处理5-7天后，诱导生根。
[0055] 的外植体消毒步骤具体如下：
[0056] S1：由权利要求2中的S4中的植株上切去刚萌动变绿尚未展叶的饱满芽；
[0057] S2：采用10-30℃的蒸馏水对饱满芽进行清洗，之后用滤纸对饱满芽表面蒸馏水进行吸干；
[0058] S3：饱满芽放入浓度为70％的酒精中浸泡30-60s；
[0059] S4：将饱满芽放入浓度为0.1％的氯化汞中浸泡10分钟，之后采用无菌水冲洗4-7次；
[0060] S5：在无菌环境下剥除芽外部叶原基，切取1.0mm以下茎尖分生组织，得到目标外植体。
[0061] 诱导丛生芽步骤具体如下：
[0062] S1：以MS培养基为基础，并向内添加30wt％的蔗糖以及0.55wt％的琼脂，同时向MS培养基内依次添加1wt％的AgNO3、2.5wt％的NNA、5.0wt％的BA以及3.0wt％的KT；
[0063] S2：向S1的培养基中加入适量浓度为1mol/L的盐酸以及氢氧化钠，调节PH值为5.8；
[0064] S3：将目标外植体放入S2中的培养基中，在室温下，采用一定的光照强度照射16h，诱导丛生芽。
[0065] S3中室温为24-26℃。
[0066] S3中的光照强度为3500lx。
[0067] 将丛生芽或带1～2个芽的茎端转入添加有15wt％的蔗糖，3wt％的琼脂，2.5％vol的KNO3、NH4NO3以及MgSO4·7H2O的混合液，2.5％vol的MnSO4·4H2O,0.5％vol的盐酸硫胺素以及0.25％vol的盐酸吡哆醇的MS基本培养基中培养3-5周。
[0068] 将盆栽苗放入人工气候室中培养，之后剪取新梢顶部0.5-1.0cm，嫁接到无病毒砧木上，得到甜樱桃抗虫果树。
[0069] 实施例3
[0070] 品种选育包括以下步骤：
[0071] S1：在甜樱桃果园里寻找多棵虫害较小的樱桃树；
[0072] S2：由多棵虫害较小的樱桃树上取出多2cm以上的新梢；
[0073] S3：将2cm以上的新梢放入萘乙酸浓度为0.2-0.5mg/L、吲哚丁酸浓度为1-5mg/L、硝酸稀土液浓度为0.2-0.8g/L、二氯苯氧乙酸浓度为3-6g/L、正三十烷醇浓度为1-5mg/L以及玉米素浓度为0.4-0.8g/L的培养液中；
[0074] S4：弱光处理5-7天后，诱导生根。
[0075] 的外植体消毒步骤具体如下：
[0076] S1：由权利要求2中的S4中的植株上切去刚萌动变绿尚未展叶的饱满芽；
[0077] S2：采用10-30℃的蒸馏水对饱满芽进行清洗，之后用滤纸对饱满芽表面蒸馏水进行吸干；
[0078] S3：饱满芽放入浓度为70％的酒精中浸泡30-60s；
[0079] S4：将饱满芽放入浓度为0.1％的氯化汞中浸泡10分钟，之后采用无菌水冲洗4-7次；
[0080] S5：在无菌环境下剥除芽外部叶原基，切取1.0mm以下茎尖分生组织，得到目标外植体。
[0081] 诱导丛生芽步骤具体如下：
[0082] S1：以MS培养基为基础，并向内添加30wt％的蔗糖以及0.55wt％的琼脂，同时向MS培养基内依次添加1wt％的AgNO3、2.5wt％的NNA、7.0wt％的BA以及3.0wt％的KT；
[0083] S2：向S1的培养基中加入适量浓度为1mol/L的盐酸以及氢氧化钠，调节PH值为5.8；
[0084] S3：将目标外植体放入S2中的培养基中，在室温下，采用一定的光照强度照射16h，诱导丛生芽。
[0085] S3中室温为24-26℃。
[0086] S3中的光照强度为3500lx。
[0087] 将丛生芽或带1～2个芽的茎端转入添加有15wt％的蔗糖，3wt％的琼脂，2.5％vol的KNO3、NH4NO3以及MgSO4·7H2O的混合液，2.5％vol的MnSO4·4H2O,0.5％vol的盐酸硫胺素以及0.25％vol的盐酸吡哆醇的MS基本培养基中培养3-5周。
[0088] 将盆栽苗放入人工气候室中培养，之后剪取新梢顶部0.5-1.0cm，嫁接到无病毒砧木上，得到甜樱桃抗虫果树。
[0089] 实施例4
[0090] 品种选育包括以下步骤：
[0091] S1：在甜樱桃果园里寻找多棵虫害较小的樱桃树；
[0092] S2：由多棵虫害较小的樱桃树上取出多2cm以上的新梢；
[0093] S3：将2cm以上的新梢放入萘乙酸浓度为0.2-0.5mg/L、吲哚丁酸浓度为1-5mg/L、硝酸稀土液浓度为0.2-0.8g/L、二氯苯氧乙酸浓度为3-6g/L、正三十烷醇浓度为1-5mg/L以及玉米素浓度为0.4-0.8g/L的培养液中；
[0094] S4：弱光处理5-7天后，诱导生根。
[0095] 的外植体消毒步骤具体如下：
[0096] S1：由权利要求2中的S4中的植株上切去刚萌动变绿尚未展叶的饱满芽；
[0097] S2：采用10-30℃的蒸馏水对饱满芽进行清洗，之后用滤纸对饱满芽表面蒸馏水进行吸干；
[0098] S3：饱满芽放入浓度为70％的酒精中浸泡30-60s；
[0099] S4：将饱满芽放入浓度为0.1％的氯化汞中浸泡10分钟，之后采用无菌水冲洗4-7次；
[0100] S5：在无菌环境下剥除芽外部叶原基，切取1.0mm以下茎尖分生组织，得到目标外植体。
[0101] 诱导丛生芽步骤具体如下：
[0102] S1：以MS培养基为基础，并向内添加30wt％的蔗糖以及0.55wt％的琼脂，同时向MS培养基内依次添加1wt％的AgNO3、2.5wt％的NNA、5.0wt％的BA以及3.0wt％的KT；
[0103] S2：向S1的培养基中加入适量浓度为1mol/L的盐酸以及氢氧化钠，调节PH值为5.8；
[0104] S3：将目标外植体放入S2中的培养基中，在室温下，采用一定的光照强度照射16h，诱导丛生芽。
[0105] S3中室温为24-26℃。
[0106] S3中的光照强度为3500lx。
[0107] 将丛生芽或带1～2个芽的茎端转入添加有15wt％的蔗糖，3wt％的琼脂，2.5％vol的KNO3、NH4NO3以及MgSO4·7H2O的混合液，2.5％vol的MnSO4·4H2O,0.5％vol的盐酸硫胺素以及0.25％vol的盐酸吡哆醇的MS基本培养基中培养3-5周。
[0108] 将盆栽苗放入人工气候室中培养，之后剪取新梢顶部0.5-1.0cm，嫁接到无病毒砧木上，得到甜樱桃抗虫果树。
[0109] 实施例1-4的所得的樱桃苗木发芽率，以及樱桃苗木进行种植后进行抗虫测试，测试效果如下：
[0110]
[0111] 实施例1的幼苗为随机选择多棵樱桃树上的新梢，实例2至实施例4的幼苗为经过挑选的虫害较小的樱桃树上的新梢，实例1的抗虫能力较实差，而实例2至实施例4的抗虫能力较强；
[0112] 实施例2对比实施例1、实施例3以及实施例4，在进行诱导生根过程中的培养基中缺少正三十烷醇，进而导致实施例2的生根率与实施例1、实施例3以及实施例4相比，大大降低；
[0113] 实施例3对比实施例1、实施例2以及实施例4，在进行诱导丛生芽过程中，将5wt％的BA换为7wt％的BA，进而导致实施例3的诱导丛生芽率与实施例1、实施例2以及实施例4相比，大大降低；
[0114] 实施例4相比较实施例1、实施例2以及实施例3来说，其生根率、诱导丛生芽率皆处于平均水平，同时其具有抗虫性，因此实施例4为本发明的最优方案。
[0115] 以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉
本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
