Method of processing carrots |
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| 申请号 | JP2003557302 | 申请日 | 2003-01-02 | 公开(公告)号 | JP4133829B2 | 公开(公告)日 | 2008-08-13 |
| 申请人 | ミョン ファン パク; ロッテ コンフェクショナリー カンパニー リミテッド; | 发明人 | ミョン ファン パク; | ||||
| 摘要 | |||||||
| 权利要求 | 人参を主材として加熱抽出する人参の加工方法において、 1)人参１００重量％と、五味子、山査子 、山茱萸 、木瓜、梅実、柚子 、枳実、りんご、石榴及びオレンジの中から選ばれた１種または２種以上の混合物１０〜１０００重量％とに、４〜１０倍量の水を加えて 沸点で１〜６時間加熱する段階； 2)室温に冷却した後、濾過する段階；及び 3)濾液を濃縮させてエキスや粉末に製造する段階； を含 み、前記で製造されたエキスや粉末中のジンセノサイド (Rg3 + Rg5)/(Rb1 + Rb2 + Rc + Rd) の比率が１０〜４５であることを特徴する、人参の加工方法。 前記1)段階の後、水を蒸発させてエタノールまたはメタノールで１〜３時間加熱抽出する段階を追加に行うことを特徴とする、請求項 １に記載の人参の加工方法。 前記人参は、白参、水参、尾参、紅参、人参葉、花旗参、田七人参または竹節人参であることを特徴とする、請求項 １または ２に記載の人参の加工方法。 |
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| 说明书全文 | 本発明は、人参の加工方法及び加工人参抽出物の用途に関するものであって、さらに詳細には、人参と、五味子、山査子 、山茱萸 、木瓜、梅実、柚子、枳実、りんご、石榴及びオレンジの中から選ばれた１種または２種以上の生薬材とを混合処方することにより、お互い上昇作用を起こし、ジンセノサイド(Rg3 + Rg5)/(Rb1 + Rb2 + Rc + Rd)の比率を１０〜４５に増強させる加工人参抽出物または加工人参のサポニン分画抽出物、及び人参と前記生薬材を混合して７０〜１２０℃で加熱処理する人参の加工方法に関するものである。 人参は、東・西洋に限らず一番よく知られている滋養強壮剤として、それに対しての薬理生理学的研究が続けられてきて、現在はその神秘な薬効が科学的方法により説明されている。 人参の効能は、老化抑制、動脈硬化予防、高脂血症改善、糖尿病改善、高血圧改善、肝機能強化、抗酸化効果、抗ストレス効果、免疫力増強、血栓改善、脳機能改善、脳細胞保護、抗癌効果など多様であり、人体の恒常性を維持し全ての病理状態を正常状態にすることができる。 最近には、紅参だけが極微量含有しているジンセノサイドＲｇ３が血管弛緩作用（非特許文献１参照）、血小板凝集抑制作用（非特許文献２参照）、脳神経細胞保護作用（非特許文献３参照）を有し、ジンセノサイドＲｇ３、Ｒｇ５、Ｒｈ２、Ｒｈ１は抗癌作用を有すると報告された（非特許文献４参照）。 水参は長期間保管できるように、白参、紅参に加工して使用している。 紅参は、水参を加熱処理して製造されるものであって、白参に比べ優れた薬効を奏すると広く知られている。 特に、紅参には、水参、白参に含有されていないジンセノサイドＲｇ３、Ｒｇ５、Ｒｋ１、Ｒｈ２、Ｒｈ１、マルトール(maltol)などの微量成分が含まれており、薬効が増加すると知られている。 家庭で水参または白参から紅参エキスを製造することのできる方法が考案されて、その製造のための機械も既に開示されている（特許文献１参照）。 前述のように、紅参に微量含有されている成分を強化して薬効を増強させる方法に対しての研究が続けられている。 特にその中でも、最近は所謂仙参といって、人参を少量の水の存在下で紅参の製造温度よりかなり高い温度の１２０〜１８０℃で加熱処理すると、紅参に微量含有されていた成分の含量が著しく増加すると共に新しい成分が生成されて、薬効が非常に増強されるということも知られている（非特許文献５，特許文献２参照）。 しかし、この方法は、製造時間が長く、高圧加熱器などの特殊装備も必要となり、特に、通常の加工温度より高温で加熱処理しなければならないため、大量製造する際人参が炭化されてしまう虞があるなど、製造工程の運営上に不具合がある。 従って、本発明者は、人参の薬効を増強させるために鋭意研究した結果、高温で人参を加熱処理して蒸かす加工方法とは違って、７０〜１２０℃で人参に特定生薬材を混合処方して加熱湯薬を抽出することにより、ジンセノサイド(Rg3 + Rg5)/(Rb1 + Rb2 + Rc + Rd)の比率を１０〜４５、大抵は２０〜４５に増強させて、既存人参に比べ血管弛緩作用が６５〜９７倍増強するなど、驚くべき薬効を発揮する加工人参抽出物を開発して本発明を完成した。 従って、本発明は、既存人参に比べ著しく薬効の増加された、ジンセノサイド(Rg3 + Rg5)/(Rb1 + Rb2 + Rc + Rd)の比率が１０〜４５である加工人参抽出物またはこれのサポニン分画抽出物を提供することにその目的がある。 また、本発明は、人参に、五味子、山査子、山茱萸、木瓜、梅実、柚子、枳実、りんご、石榴及びオレンジのような酸味を有する生薬材を混合し７０〜１２０℃で加熱処理することにより、protopanaxadiol系サポニンが変化されジンセノサイドＲｇ３、Ｒｇ５、Ｒｋ１が多量生成されると共に、protopanaxatriol系サポニンはジンセノサイドＲｇ２、Ｆ４、Ｒｈ１などに変化される、人参の新しい加工方法を提供することに他の目的がある。 また本発明は、本発明による加工人参抽出物またはサポニン分画抽出物をそのまま濃縮液、希釈液または飲料組成物に応用するか、またはこれを粉末化して錠剤、カプセル剤、丸剤、顆粒剤、またはお菓子類に添加した形態の健康食品または医薬品を提供することにまた他の目的がある。 本発明は、ジンセノサイド(Rg3 + Rg5)/(Rb1 + Rb2 + Rc + Rd)の比率が１０〜４５である加工人参抽出物またはこれのサポニン分画抽出物をその特徴とする。 また、本発明は、人参に、五味子、 山査子、山茱萸、木瓜、梅実、柚子、枳実 、りんご、石榴及びオレンジの中から選ばれた１種または２種以上の生薬材を混合し、７０〜１２０℃で加熱処理する新しい人参の加工方法を他の特徴とする。 また、本発明は、前記加工人参抽出物またはこれのサポニン分画抽出物が心血管疾患、勃起不全、脳神経細胞関連疾患予防及び改善、そして抗癌効果などの優秀な機能性効能を有するため、これを有効成分として含有する多様な製形の医薬品及び健康食品を含む。 まず、本発明による人参の加工方法を詳細に説明する。 本発明は、人参１００重量％に対し、五味子、 山査子、山茱萸、木瓜、梅実、柚子、枳実 、りんご、石榴、オレンジなどの酸味を有する生薬材１０〜１０００重量％を混合して使用する。 前記混合物を水４〜１０倍量で１〜６時間加熱した後、室温に冷却して濾過し、濾液を濃縮させてエキスや粉末に製造することができる。 この際、使用する水の量は、抽出初期には多い量(例えば、７〜１０倍量)を入れて抽出後期には４〜５倍量になるように加熱することにより、抽出装置内の温度が高くなって反応が促進される。 また、前記混合物の加熱温度は７０〜１２０℃、望ましくは内容物が沸く温度で湯薬抽出しても充分であり、産業現場で通常的に使用されている抽出装置である加圧溶出器を使用すると複雑な追加の設備をしなくとも容易に、商業的に大量に製造することができる。 加熱時間は１〜６時間、望ましくは３〜５時間行うが、この範囲を外れると収得率にあまり変動はないながら、却ってジンセノサイドＲｇ３、Ｒｇ５が分解されてしまう虞がある。 このように得られた加工人参抽出物をそのまま使用しても本発明の目的は達成されるが、前記抽出物を、水を蒸発させてエタノールまたはメタノールで１〜３時間加熱抽出する段階をさらに行ってもよい。 このような過程は、特に、サポニン溶出効率を高める工程に適用すると望ましい結果が得られる。 また、前記のように抽出した加工人参抽出物は、比較的人参と混合処方された生薬材からの非薬効性不純物などが含有されているため、これをさらに精製するためには、例えばジクロロメタンなどで抽出して、水層を水飽和ブタノールなどで数回抽出し合わせて、水で洗滌し、ブタノール抽出液を減圧濃縮してメタノールに溶かす過程をさらに行うことにより、不必要な抽出不純物などを適切に除去し純度の増強されたサポニン抽出物を得ることができるが、このようなサポニン分画抽出物を使用するとさらに高い純度の製品を得ることができる。 一方、本発明に使用する人参は、水参、白参、尾参、紅参、人参葉、花旗参、三七人参または竹節人参が望ましい。 また、本発明で人参加工時共に使用される生薬材は酸味を有するものであって、五味子、 山査子、山茱萸、木瓜、梅実、柚子、枳実 、りんご、石榴、オレンジの中から選ばれた１種または２種以上を人参と共に混合処方して使用する。 本発明で使用される五味子は、各種リグナン(lignans)成分を含有しており、肝の損傷を予防し肝損傷の回復を促進して、肝機能正常化、胆汁分泌亢進効果があり、抗バクテリア、抗酸化剤、消化促進剤として肺、肝、腎臓のために使用されている。 疲労回復、ストレス抵抗力増強、視力疲労、認識能力増加にも有効である。 山査子は、胃液分泌促進、抗菌作用、持続性血圧降下作用があって健胃、消化、整腸薬として使用されており、最近は、冠状動脈拡張作用、コレステロール降下効果が確認され血液循環改善剤として広く使用されている。 山茱萸は、利尿作用、一時的血圧降下作用、抗菌作用、抗ヒスタミン作用があり滋養強壮、収斂、止血の目的で使用されている。 柚子は香辛料として、枳実は芳香性健胃剤として、食品及び漢薬材に使用されると共に、これらの果肉にはクエン酸などの植物有機酸が多量含有されており、酢の代用または魚料理の生臭いにおいを除去する香辛料として使用されている。 梅実は、抗菌、消化液分泌促進、清涼止渇の効果があり清涼性収斂薬、鎮咳去痰、解熱、駆虫作用をする。 木瓜は、新陳代謝を円滑にして、また消化酵素の分泌を促進させる効果を発揮する。 りんごは、ビタミンとミネラルが豊富であり、特に繊維質が多くて整腸効果と鎮静作用に優れている。 石榴は、昔から強壮剤として知られており、特に、高血圧と動脈硬化予防に優れた効果を奏する。 また、下痢、疫痢、腹痛、下り物などに効果があり、駆虫剤の作用もする。 オレンジは、ビタミンＣの含有量が多くて疲労回復、皮膚美容に効果がある。 前述のように本発明では、人参と、五味子、 山査子、山茱萸、木瓜、梅実、柚子、枳実 、りんご、石榴、オレンジなどの生薬材とを混合処方して加熱抽出することにより、既存の人参単一成分を高温処理した場合とは違って、複合薬材がお互い上昇作用を起こしジンセノサイド(Rg3 + Rg5)/(Rb1 + Rb2 + Rc + Rd)の比率が１０〜４５に大いに増強され、高血圧、動脈硬化、血栓、勃起不全、脳卒中、記憶力障害などの予防及び治療、抗癌効果及び抗癌剤副作用を軽減させるなどの優れた薬効を有するということが確認できた。 一方、本発明は、本発明による加工人参抽出物またはこれのサポニン分画抽出物を有効成分とする医薬品または健康食品を含むが、加工人参抽出物の医薬品、健康食品または食品添加剤への適用は、通常の製形化や添加方法により多様に適用することができる。 例えば、医薬品として製造する時には、経口投与製剤に通常的に使用される添加剤の乳化剤、潤滑剤、粘着剤、甘味剤、芳香剤などを利用して錠剤、硬質カプセル剤、軟質カプセル剤、丸剤、顆粒剤、液剤のような経口投与製剤、注射剤などに製造することができる。 本発明の加工人参抽出物またはこれのサポニン分画抽出物は、使用される原料生薬が医薬品または健康食品として使用でき、共に加熱処理しても無毒性で安全に摂取することができる。 本発明による加工人参抽出物またはこれのサポニン分画抽出物は、成人を基準として１００〜１０００ｍｇずつ一日２〜４回服用することが望ましい。 一方、食品添加剤として製造する時には、飲料、錠剤、顆粒剤、カプセル剤、丸剤、ガム、お菓子類などの食品素材に、本発明の加工人参抽出物またはサポニン分画抽出物を含ませて製造することができる。 このような本発明による加工人参抽出物を、前記例示した各種製形に製造し多様な方法で服用する場合、勃起不全改善、血液循環改善、疲労回復、高血圧、動脈硬化、抗血栓、脳卒中及び脳機能改善などに効果を奏して、また抗癌効果だけではなく抗癌剤の副作用を軽減させる効能も発揮する。 以上説明したように、本発明は、人参を、五味子、山査子、山茱萸、木瓜、梅実、柚子、枳実、りんご、石榴及びオレンジの中から選ばれた１種または２種以上の生薬材と共に水で加熱加工することにより、人参単独または五味子などの生薬材を各々抽出し合わせて使用することに比べ、遥かに増強された効果を発揮する。 これは、白参にはなく紅参だけが微量含有しているジンセノサイドＲｇ３、Ｒｇ５、Ｒｋ１などが、本発明の加工人参抽出物またはこれのサポニン分画抽出物には高濃度に含有されていることから起因すると考えられ、そのジンセノサイド(Rg3 + Rg5)/(Rb1 + Rb2 + Rc + Rd)の比率は１０〜４５である。 このような加工人参抽出物は、勃起不全改善、血液循環改善、疲労回復、高血圧、動脈硬化、抗血栓、脳卒中及び脳機能改善、抗癌補助剤などの目的で医薬品及び健康食品として利用することができる。 本発明による加工人参抽出物またはこれのサポニン分画抽出物は、液剤、錠剤、顆粒剤、丸剤、カプセル剤、軟質カプセル剤、注射剤などに製造されて誰でも容易に服用することができる。 以下、実施例を通じて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明がこれら実施例に限定されるものではない。 実施例１ 実施例２ 実施例３ 実施例４ 実施例５ 実施例６ 実施例７ 実施例８ 実施例９ 実施例１０ 実施例１１ 実施例１２ 実施例１３ 実施例１４ 実施例１５ 実施例１６ 実施例１７ 実施例１８ 実施例１９ 実施例２０ 実施例２１ 実施例２２ 実施例２３ 実施例２４ 実施例２５ 実施例２６ 実施例２７ 実施例２８ 実施例２９ 実施例３０ 参考実施例１：錠剤製造 前記実施例１で製造した加工人参抽出物粉末５００ｇと結晶性セルロース１９６ｇ、ステアリン酸マグネシウム４ｇをよく混合し、通常の方法により打錠して７００ｍｇ錠剤を製造した。 参考実施例２：錠剤製造 前記実施例２で製造した加工人参抽出物５００ｇ、結晶性セルロース１９６ｇ、ステアリン酸マグネシウム４ｇをよく混合し、通常の方法により打錠して７００ｍｇ錠剤を製造した。 参考実施例３：硬質カプセル剤製造 前記実施例１で製造した加工人参抽出物粉末１００ｇ、結晶性セルロース９５ｇ、酸化ケイ素５ｇをよく混合し、通常の方法により４００ｍｇ硬質カプセル剤を製造した。 参考実施例４：軟質カプセル剤製造 前記実施例１で製造した加工人参抽出物粉末２００ｇ、大豆油２８０ｇ、レシチン１５ｇ、黄蝋５ｇを均質に混合し、通常の方法により５００ｍｇ軟質カプセル剤を製造した。 参考実施例５：顆粒剤製造 前記実施例２で製造した加工人参抽出物５００ｇ、とうもろこし澱粉１９６ｇ、ステアリン酸マグネシウム４ｇをよく混合し、通常の方法により顆粒剤を製造した。 参考実施例６：丸剤製造 前記実施例２で製造した加工人参抽出物３００ｇ、とうもろこし澱粉１００ｇ、結晶性セルロース５０ｇ、蜂蜜１５０ｇをよく混合し、通常の方法により１００ｍｇ丸剤を製造した。 参考実施例７：液剤製造 前記実施例１で製造した加工人参抽出物１００ｇ、紅参抽出物濃縮液(人参サポニン１４０ｍｇ/ｇ)２０ｇ、冬虫夏草抽出物粉末(２．５：１に濃縮したもの)１００ｇ、ナツメ濃縮液(５５ブリックス)５０ｇ、ビタミンＢ１塩酸塩２ｇ、ビタミンＢ２ １ｇ、ビタミンＢ６塩酸塩２ｇ及び砂糖２００ｇに精製水を加え溶解させて、２ｌの液剤を製造した。 参考実施例８：飲料製品製造 前記実施例１で製造した加工人参抽出物１０ｇ、クエン酸１ｇ、アラビアゴム１ｇ及び砂糖５ｇを水に希釈して通常の方法により飲料を製造するが、９５℃で１５秒間殺菌、冷却して、総１００ｍｌのドリンクタイプの飲料製品を製造した。 比較例１ 比較例２ 比較例３ 比較例４ 比較例５ 比較例６：仙参の製造(大韓民国特許登録第１９２６７８号) 比較例７：仙参の製造(大韓民国特許登録第１９２６７８号) 比較例８ 参考比較例１ 参考比較例２ 参考比較例３ 実験例１ 図１と図２から分かるように、比較例４及び５はジンセノサイドの変化が観察されなかった。 しかし、実施例２１乃至２８では、ジンセノサイドが大部分変化し、極性の少ないジンセノサイドがたくさん生成されたことが確認された。 図３から分かるように、比較例４のジンセノサイドは(ＰＧ−Ｑで表示)大部分変化して(ＧＳ−１表示は実施例２２、ＧＣ−１表示は実施例２１)、ジンセノサイドＲｇ３、Ｒｇ５、Ｒｋ１、Ｒｇ２、Ｒｈ１、Ｆ４に転換されたことが確認された。 ピーク１，２，３，４，５，６，７，８，９，１０，１１，１２，１３は各々ジンセノサイドＲｇ１，Ｒｅ，Ｒｂ１，Ｒｃ，Ｒｂ２，Ｒｄ，Ｒｇ２，Ｒｈ１，Ｆ４，(２０Ｓ)−Ｒｇ３，(２０Ｒ)−Ｒｇ３，Ｒｋ１，Ｒｇ５を表す。 前記実施例１９〜２９及び比較例４〜７から得たサポニン分画抽出物を高速液体クロマトグラフィーで分析して、ジンセノサイド(Rg3 + Rg5)/(Rb1 + Rb2 + Rc + Rd)の比率を各成分の相対ピーク面積を基準として分析し、その結果を次の表１に示した。 前記表１に示したように、本発明による加工人参抽出物のジンセノサイド(Rg3 + Rg5)/(Rb1 + Rb2 + Rc + Rd)の比率は１０〜４５であって、先行技術(大韓民国特許登録番号第192678号)の比較例６と比較例７での１．０３〜２．４３に比べ遥かに優秀である。 また、実施例１９及び２０の場合は、実施例２１及び２２と同一な生薬材で加工された人参であるが、大量加工することによりジンセノサイド(Rg3 + Rg5)/(Rb1 + Rb2 + Rc + Rd)の比率が非常に増加されたことが分かる。 実験例２：勃起不全症改善効能の比較 勃起不全症を有している４５〜６０歳の男性４０名を８名ずつ５群に分けて、前記参考実施例１、参考実施例２、参考比較例１、参考比較例２及び参考比較例３で製造した錠剤を１回２錠ずつ一日３回、３０日間服用させて、勃起不全症改善効果を自覚症状と問診により評価して、その結果を次の表２に示した。 前記表２に示したように、本発明による加工人参抽出物の参考実施例１及び２は８７．５％の勃起不全改善効果を示したが、参考比較例１及び２の勃起不全改善効果は微々たるものであった。 文献上、紅参も勃起不全改善効果があると報告されているが、本発明の加工人参抽出物が紅参(参考比較例３)より遥かに優れた効果を示した。 実験例３：末梢血液循環改善作用 軽微な神経障害を有している４９〜６０歳の男性糖尿病患者４０名を、８名ずつ５群に分けて、前記参考実施例１、参考実施例２、参考比較例１及び参考比較例２で製造した錠剤を６錠ずつ服用させて、服用前、服用後４５分、服用後９０分にLaser Doppler Flowmetry装置を用いて患者らの右足に対し血流を測定した。 偽薬群は同じ量のとうもろこし澱粉で製造した錠剤を服用させた。 その結果を次の表３に示した。 前記表３に示したように、服用後９０分での参考実施例１、参考実施例２は、各々５１．２％、６８．２％の血流増加を示した反面、参考比較例１、参考比較例２のように人参抽出物に五味子抽出物や山査子抽出物を単純混合して投与した群は、１５％、１９％の血流増加を示したことから、本発明による加工人参抽出物が血流障害を有する糖尿病患者の足の血流を著しく増強させるということが分かった。 実験例４：血管弛緩作用の比較 体重２６０〜２８０ｇのSprague-Dawley系ラットの胸部大動脈を摘出して、内皮細胞を損傷させないようにして２〜３ｍｍの長さの大動脈環を用意した。 クレブス炭酸緩衝液(Krebs' bicarbonate buffer；mM: NaCl 118，KCl 4.7，CaCl 2 2.5，NaHCO 3 25，MgSO 4 1.2，KH 2 PO 4 1.2, ブドウ糖11.0，95% O 2 ＋5% CO 2 ，37 ℃)２０ｍｌが入っている臓器チャンバーに懸垂して等尺性張力の記録装置に連結した。 大動脈環を２ｇ休止張力で６０分間平衡させた。 フェニレフリン３０μMを加え安定した収縮が現れたことを確認して、アセチルコリン１μMを加え内皮細胞が存在することを確認した。 大動脈環を４５分間３回洗滌して、再びフェニレフリンで収縮させて、試料を累積的に加えて血管弛緩作用を観測した[図４]。 使用した試料は、前記実施例２１、実施例２２及び比較例４から得たサポニン分画抽出物を使用した。 図４に示したように、本発明による加工人参サポニン分画抽出物の血管弛緩作用は、比較例４のサポニン分画抽出物(−▲−)に比べ、実施例２１のサポニン分画抽出物(−●−)が６５倍、実施例２２のサポニン分画抽出物(−○−)が９７倍強力な効果を示した。 また、本発明による加工人参は、先行技術[大韓民国特許登録第192678号及びJ. Natural Products 63, 1702, 2000]による加工人参(３２倍薬効増加)より遥かに優秀であることが分かった。 実験例５：高血圧に対する効果 ４５〜６０歳の男性高血圧患者２１名を１１名、１０名の２群に分けて、一群には前記参考実施例２で製造した錠剤を、他群には前記参考比較例２で製造した錠剤を、一日３回、１回２錠ずつ３０日間服用させて、血圧の変化を測定して次の表４に示した。 前記表４に示したように、本発明による加工人参抽出物を１ヶ月間服用した場合、高血圧患者の収縮期血圧を降下させる比率は９０．９％であり、変化された血圧は−１４〜−３６ｍｍＨｇであって、既存人参抽出物に山査子抽出物を混合したものを服用した群は、１０名の中で２名(２０％)だけが血圧が下がり、８０％はほとんど変化がなかった。 本発明による加工人参抽出物は、高血圧患者の収縮期血圧を降下させる効果が優秀であった。 実験例６：血小板凝集抑制効果 健康な男性の上膊静脈から採血して(抗凝固剤は15% citric aicd‐citrate‐dextroseを使用)、１２０ｇで１５分間遠心分離し得られた血小板の豊富な血漿を、５００ｇで１０分間遠心分離して血小板を得た。 ２億個血小板/ｍｌに懸濁させてwashed plateletを得た。 文献[高麗人参学会誌 21, 132(1997)]に記載の方法により、コラーゲンにより誘導される血小板凝集反応に対しての加工人参抽出物の効果を測定して、次の表５に示した。 前記表５に示したように、５０％阻害濃度を比較してみると、本発明による加工人参抽出物は、既存人参抽出物より５２倍、４２倍強力な血小板凝集反応抑制効果を奏するため、高血圧、動脈硬化、脳卒中などの血液循環関連疾患に対する予防及び治療効果が期待できる。 実験例７：抗癌剤副作用の軽減効果 抗癌剤であるシスプラチンの投与により発生する副作用の中で、腎臓機能阻害に対しての本発明による加工人参のサポニン分画抽出物の効果を測定した。 体重２００ｇ前後のSprag Dowry系ラットを６匹ずつ五個群に分けて、対照群(食塩水投与)を除いた全ての群にシスプラチン５ｍｇ/ｋｇ/５ｍｌ溶液を腹腔投与した。 前記実施例２２から得たサポニン分画抽出物３００ｍｇ/ｋｇ、比較例４から得たサポニン分画抽出物３００ｍｇ/ｋｇを、各々シスプラチン投与７２、４８、２４、１２時間前に腹腔投与して(事前投与群)、シスプラチン投与１２、２４、４８、７２時間後に腹腔投与した(事後投与群)。 四日目に実験動物から血液を採取して血清を製造した。 ＢＵＮ(Blood urea nitrogen)測定用キットを使用して腎臓毒性指標であるＢＵＮを測定した。 ウレアーゼ酵素原液０．１ｍｌを緩衝液２０ｍｌに混合したもの０．０２ｍｌに、実験動物から採取した血液から製造した血清とウレア基準液０．０２ｍｌを添加して、３７℃で１５分間保温した後、発色試薬２ｍｌずつを各々添加して３７℃で５分間保温した後、５７０ｎｍで吸光度を測定した。 クレアチニン測定キットを使用して腎臓毒性指標であるクレアチニンを測定した。 実験動物の血液から製造した血清０．５ｍｌに４ｍｌタングステン溶液を加え強く振とうして、１０分後、１５００ｇで１０分間遠心分離した。 遠心分離した上清液に、クレアチニン標準薬３ｍｌ(対照群は蒸留水３ｍｌ)、ピクリン酸液１ｍｌ、１．４ Ｍ ＮａＯＨ ０．５ｍｌを加えてよく混合し、１５分後５１５ｎｍで吸光度を測定した。 前記表６に示したように、シスプラチンの投与後、実施例２２のサポニン分画抽出物を投与した事後投与群では、ＢＵＮ、クレアチニン値が正常値に近く回復することが分かった。 実験例８：脳神経細胞保護効果の測定 脳卒中の治療及び予防に対しての効果を調べるために、脳細胞がグルタメート過多露出により死滅することに対する加工人参サポニン分画抽出物の効果を文献[J. Neurosci. Res. 53, 426 (1998)]に基づいて測定し、次の表７に示した。 前記表７に示したように、前記実施例２０から得たサポニン分画抽出物は、比較例４から得たサポニン分画抽出物より優れたグルタメート神経毒に対しての防御効果を奏した。 実験例９：抗癌作用 仔牛血清培養液に人間癌細胞株を接種し４８時間培養した後、９６−ウェル培養容器で一日間継代培養した。 その後、加工人参抽出物を処理して４８時間後ＭＴＴ溶液を加え不溶性ホルマジンを生成させた。 遠心分離後、沈殿層にジメチルスルホキシドを加えホルマジン沈殿を溶解させて、５７０ｎｍで吸光度を自動平板読取り機(automatic flat reader)により測定し５０％細胞が生存する濃度を算出して、その結果を次の表８に示した。 前記表８に示したように、加工人参抽出物のサポニン分画抽出物は、白参抽出物のサポニン分画抽出物に比べ強力な癌細胞成長抑制効果を奏した。 実験例１０：脳機能改善効果の比較 記憶力障害症状を有する６１〜７４歳の老人２０名(男性１０名、女性１０名)を男女各々五人ずつ二つの群に分けて、実施例２、参考実施例２で製造した錠剤を一日２回、１回２錠ずつ３ヶ月間服用させて、問診により記憶力障害症状の改善程度を観察して、その結果を次の表９に示した。 次の表９から分かるように、'改善された'と'顕著に改善された'とを合わせて'有効'と判断する時、本発明の実施例２の加工人参抽出物は有効率８０％であって、既存人参抽出物の有効率３０％に比べ著しく高い有効率を示し、本発明の人参抽出物は、記憶力障害改善による脳機能改善効果が非常に優秀であるということが確認できた。 実験例１１：毒性実験 本発明による加工人参抽出物に対して毒性実験を次のように行った。 具体的に前記実施例１、実施例２の加工人参抽出物を０．２％ツイーン８０水溶液に溶かして、これを体重２０ｇのＩＣＲ系マウス(群当り２０匹)に各々５ｇ/ｋｇずつ経口投与して７日間観察したが、死亡したマウスはいなかった。 |
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