Pharmaceutical compositions and their preparation for the treatment of bronchitis

本発明は、伝統的な漢方医学の分野、特に気管支炎の治療のための医薬組成物およびその調製方法に属する。

気管支炎は、細菌およびウイルスの感染症、または物理的および化学的要因による刺激作用が原因で起こる気管および気管支粘膜の炎症である。 典型的に、気管支炎は、主に咳、喀痰、胸骨下の倦怠感または疼痛、息切れ、および付随する風邪と共通の症状を特徴とする。 持続する期間によって、気管支炎は、２つの種類に分類することができる：急性気管気管支炎および慢性気管支炎である。 慢性気管支炎は、一般的に２カ月より長く持続し、２年連続して発病するか、または１年以内で３カ月連続して持続するもので、その粘膜および末梢組織上に炎症を引き起こす気管支炎である。 殆どの患者は成人であり、春および冬に発病する場合が多い。 気管支炎は、伝統的な漢方医学において、「咳」、「粘液性流体の滞留」、「喘息症候群」の種類に属する。
慢性気管支炎とは、気管および気管支の粘膜ならびにその末梢組織の、慢性の、非特異的炎症を指し、咳、喀痰、または息切れおよび反復した発症を伴う慢性的経過により臨床的に特徴づけられる。 疾患がゆっくりと発症する場合には、閉塞性肺気腫、さらには肺高血圧または肺の心疾患を合併する場合が多い。 １９７３年、中国での部分的一斉調査の統計によると、慢性気管支炎の罹患率は、約３．８２％であり、年齢と共に増加し、５０才を超える人々では約１５％まで増加した。 １９９２年の中国での部分的一斉調査の統計から、慢性気管支炎の罹患率が３．２％であったことが指摘されている。

慢性気管支炎の原因は、かなり複雑である。 例えば環境、気候、遺伝学、喫煙などの要因に加えて、ウイルスおよび細菌感染が非常に重要な要因である。 上記病因学的要因に加えて、慢性気管支炎には、副交感神経の機能亢進をもたらし得る自律神経の機能不全などの身体の内部要因が関与しており、これは、そのような人の気道の反応は、普通の人間より敏感であるためである。 したがって、普通の人には影響のない弱い刺激が、気管支の収縮およびれん縮、分泌の増加を引き起こし、咳、喀痰、息切れなどの症状を発生させる可能性がある。 現在では、西洋医学に基づく治療は、感染を制御し、痰を消散し、咳を止めることに主に焦点を置いており、内部要因の機能不全を調整することは効果的ではない。 数日にわたり急性期を耐えた後、多くの患者は、発熱の緩和、風邪の回避、および粘着性の黄色の痰をしばしば経験する。 しかし、咳、喀痰および息切れなどの症状は軽減せず、痰の量はかなり増加する。 さらに、広範囲の抗生物質をグルココルチコイドと合わせて長期間および大量に使用することはまた、院内の二次感染のさらなる原因ともなる。 伝統的漢方医学を適切な割合で、異なるステージで用いて慢性気管支炎を治療することは、効力および経済性の点で最適であることを示す調査がある。

疾患の治療は、伝統的漢方医学では非常に長い歴史である。 伝統的漢方医学による咳の治療のため、原理、方法、処方および薬物についての継続した審査が、何世代もの医師に引き継がれて行われてきた。 伝統的漢方医学の治療は、付随的なものと、根本的なものを同時に治療する原理を強調している。 症候群の分化および治療が、異なるステージにおいて実施され、これらのステージは、疾患の進行に従い、例えば、外因性病原体が肺を攻撃するステージ、濁った痰が肺をふさぐステージ、気（qi）が低迷し、血液がうっ血するステージ、および病原菌が元気（vital-qi）を上回り優勢となるステージなどに分類することができる。 伝統的漢方医学を用いた慢性気管支炎の治療は、様々な効果、例えば咳を止めること、痰を消滅させること、呼吸困難を緩和すること、および炎症を食い止めることなどを具現化することが薬理学的調査により示された。 臨床上の調査において、伝統的漢方医学を用いた治療は、咳、喀痰、呼吸困難などの症状をかなり緩和することができる一方で、西洋医学と比較して有害反応がより少ないことが実証された。 大部分の患者は、治療中に慢性気管支炎の寛解ステージに入ることが可能なので、抗生物質の使用回数を減らすことができ、これによって、患者の体質を強化し、急性発症の間隔を長くすることができ、したがって、患者の生活の質を改善することができる。

したがって、気管支炎、特に慢性気管支炎を治療するための新規な伝統的漢方医学を開発する必要性が依然として存在する。

上記必要性を満たすため、本発明は、気管支炎を治療するための医薬組成物およびその調製方法を提供する。 本発明の医薬組成物は、薬効物質から、以下の質量部で生成される：

好ましくは、本発明の医薬組成物は、薬効物質から、以下の質量部で生成される：

より好ましくは、本発明の医薬組成物は、薬効物質から、以下の質量部で生成される：

代替として、組成物は、薬効物質から、以下の質量部で生成することができる：

代替として、組成物は、薬効物質から、以下の質量部で生成することができる：

代替として、組成物は、薬効物質から、以下の質量部で生成することができる：

本発明の医薬組成物での半夏および陳皮は、君薬（principal drug）である。 半夏は、味は辛味であり、性質は暖性であり、脾臓、胃および肺の経脈（channel）に入る。 暖性および乾性の性質であり、乾燥によりおよび痰を消滅させることにより湿気を排除することが可能であり、その効力を下向きに発揮することから、半夏は、痰を消滅させ、上向きに逆行する気の流れを下向きにするための主要な薬草であり、半夏はまた咳を止める効果もある。 半夏は、「肺および胃の中の湿った痰を下向きに移動するよう方向づけ、気を吸収し、喘息を緩和することが可能である」（Ｙｉ Ｘｕｅ Ｚｈｏｎｇ Ｚｈｏｎｇ Ｃａｎ Ｘｉ Ｌｕ）と記載されている。 Ｙａｏ Ｘｉｎｇ Ｌｕｎではまた「半夏は、痰を分散させ、肺の気を下向きにし、食欲を増加させ、脾臓を活性化させ、さらに過剰な痰および胸の膨満な感覚を消散させる」と記載されている。 陳皮は、味は辛味および苦味であり、性質は暖性であり、肺および脾臓経脈の気系に対して主要な薬草として作用し、気を調整し、脾臓を活性化し、湿気を排除し、痰を消滅させるのに役立つ。 陳皮は、風味は芳香性であり、気を移動させ、下向きに方向づけることができるので、気を調整し、乾燥により湿気を排除することの両方に優れているので、結果として脾臓の気を活性化させることになり、これによって痰の元を根絶する。 気を調整し、湿気を乾燥させ、痰を消滅させ、上向きに逆行する流れを下向きにする能力があるため、半夏および陳皮を主要薬物として一緒に用いることによって、処方全体が優勢に作用する。

本発明の医薬組成物中の紫苑、款冬花、白朮、茯苓、および苦杏仁は、臣薬（minister drug）である。 紫苑は、性質は暖性および湿性であり、味は苦味であり、浄化作用がある。 紫苑は、痰を消滅させ、咳を緩和するという優れた作用を発揮する。 Ｓｈｅｎ Ｎｏｎｇ'ｓ Ｈｅｒｂａｌにおいて紫苑は、「主に呼吸困難を伴う咳ならびに風邪および熱により胸内に停滞する気を対象とする」ことを記載している。 款冬花は、肺に湿気を与え、気を下向きに方向づけ、咳を緩和し、および痰を消滅させることができる。 Ｂｅｎ Ｊｉｎｇ Ｆｅｎｇ Ｙｕａｎにおいて、款冬花は、「肺に湿気を与え、痰を消滅させ、咳を止め、および喘息を緩和する」という働きがあることが要約されている。 紫苑および款冬花は、これらの相互強化により利用され、慢性咳嗽および遅延性呼吸困難を治療するのに優れた薬物である。 これら両方には、「暖性にして、乾燥せず、湿性にして、脂っこくない」という特性があり、肺の気を温め、湿気を与えること、咳を止めること、および痰を消滅させるという特別な働きがあり、したがって肺の気は潤い、浄化および下降という肺機能は回復し、これによって痰が肺の中に蓄積できなくなる。 一方、２つの薬物の暖性、湿性の特性は、処方において暖性および乾性という特性を有する薬物が過剰なことから、陰を傷つけるという不都合を排除することができる。 白朮は、味は甘味および苦味であり、性質は暖性である。 白朮は、気を補充し、脾臓を活気づけ、ならびに乾燥により湿気を排除するために使用することができ、その一方で利尿を誘発する。 Ｚｈｅｎ Ｚｈｕ Ｎａｎｇにおいて、白朮は、「湿気を除去し、気に有利に働き、痰を分散し、利尿を促進する」ことに優れていることが記載されている。 茯苓は、脾臓を活気づけ、利尿を誘発し、湿気を除去する効果があり、したがって、Ｓｈｉ Ｂｕ Ｚｈａｉ Ｙｉ Ｓｈｕにおいて、「単一の薬物として、茯苓は、痰を治療する主要な薬物である。痰の性質は水なので、茯苓は水の滞留を軽減でき、また痰の移動は湿気なので、湿気の滞留を軽減することもできる」と記載されているように、湿性の痰咳を専門としている。 白朮と茯苓を組み合わせることによって、脾臓を活気づけ、乾燥により湿気を排除し、痰を消散させることになり、したがって、疾患に付随するもの、および疾患の原理を同時に治療することによって、湿気が排除され、脾臓が活性化され、これによって、痰が生成できなくなる。 苦杏仁は、味は苦味であり、性質は微暖性であり、苦味により浄化し、気を下に向け、咳を止め、呼吸困難を緩和するという作用がある。 撹拌加熱後（すなわち炒苦杏仁）、苦杏仁は、その毒性が減少するばかりでなく、腸に湿気を与えることによって便秘を緩和するその働きが強化される。 Ｂｅｎ Ｃａｏ Ｂｉａｎ Ｄｕには、「すべての小堅果は下向きの作用を有する一方、杏仁の種は、気を下向きにすることを専門とし、その結果として、痰を分散させ、咳を止め、さらに大腸に湿気を与えることになる……」と記載されている。 Ｙａｏ Ｘｉｎｇ Ｌｕｎには、苦杏仁は、「主に呼吸困難を伴う咳を対象とする」とも記載されている。 上述の薬物は、一緒に作用することによって、臣薬は、君薬が脾臓を活性化させ、湿気を排除し、逆に作用する気の流れを下向きにすることを促し、これによって痰を消滅させ、咳および喘息を緩和する。

本発明の医薬組成物の紫蘇子、来服子、芥子、桂枝、黄岑、連翹、および十薬は、佐薬（assistant drug）である。 紫蘇子は、味は辛味であり、性質は暖性で、気を下向きにし、痰を分散し、咳および喘息を緩和する働きがある。 Ｒｉ Ｈｕａ Ｚｉ Ｂｅｎ Ｃａｏにおいて、紫蘇子は、「咳を緩和し、心臓および肺に湿気を与え、および痰の気を排除する」ことができると記載されている。 来服子は、味は辛味および甘味であり、性質は平性であり、脾臓、胃、および肺の経脈に入り、気を下向きにする働きがあり、痰を分散し、痰の蓄積および閉塞、ならびに咳による息切れを治す。 Ｃｏｍｐｅｎｄｉｕｍ ｏｆ Ｍａｔｅｒｉａ Ｍｅｄｉｃａにおいて、来服子は、「気を下向きに方向づけることによって、呼吸困難を緩和し、痰を治す」ことができると記載されている。 芥子は、味は辛味であり、性質は暖性であり、肺経脈に入る。 芥子は、辛味で気を調整し、肺を温め、痰を消散し、さらにまた経脈および絡脈（collateral）内の痰を排除することができる働きを有する。 痰の蓄積および気の低迷に対して、芥子を紫蘇子および来服子と一緒に使用して、気を分散させ、絡脈を円滑に動かすことによって痰を分解し、上向きに逆行する気の流れを下向きにし、痰を排除するように半夏を補助する。 桂枝は、味は辛味および甘味であり、性質は暖性である。 一方で、桂枝は、分散に有効な辛味および経脈の通過に有効な暖性の特性を利用することによって、体の表面に作用して、外部の症候群を緩和することができ、これによって発病の要因を退散させ、絡脈を滑らかにすることができる。 他方では、桂枝は、その暖性の特性により、胸内の陽の気が経脈を通過することを可能にし、したがってうっ血の水分および湿気を温め、消滅させることができる。 桂枝は、茯苓および白朮と一緒になって、脾臓の陽を温め、促進させることができ、したがって湿気を除去し、利尿を誘発する。 黄岑は、味は苦味であり、性質は寒性であり、肺の経脈に入り、熱を除去し、乾燥により湿気を排除し、解毒のために炎症を取り除く働きがある。 黄岑は、肺の熱を除去することを専門とし、これに関してＤａｎ Ｘｉは、「黄岑は、痰を下向きにする役目を果たすので、炎症を散らすために使用することができる」と述べていた。 連翹は、味は苦味で、性質は寒性である。 連翹は、外面的に筋肉および表面を緩和し、内面的に停滞気味の熱を除去でき、「持ち上げる、浮かせる、ならびに消散させる……などの能力を持ち、筋肉を介して外部の症候群を緩和し、熱を除去し、風を追い払うことができるので、風の熱の病原菌による疾患を治療するための主要な薬物である」（Ｙｉ Ｘｕｅ Ｚｈｏｎｇ Ｚｈｏｎｇ Ｃａｎ Ｘｉ Ｌｕ）。 連翹の熱除去作用および解毒作用を処方に使用することによって、絡脈内に停滞した熱の毒素を除去する。 十薬は、味は辛味であり、性質は微涼性であり、肺経脈に入り、熱を除去し、解毒し、膿を追い払う働きがある。 十薬は、肺経脈における病原性の熱を除去することを専門とし、肺の熱を治療するための主要薬物である。 黄岑、連翹および十薬を処方で一緒に使用することによって、肺の熱および絡脈内に停滞した熱毒素を除去し、痰の混濁物が熱をおびるのを阻止することができる。

本発明の医薬組成物において甘草は、使薬（guide drug）である。 甘草は、２つの目的のために使用され、２つの理由のため自然のままの形態で使用される。 第１の目的は、甘草が、佐薬として使用されることによって、脾臓を活性化させ、気を補充し、ならびに肺に湿気を与え、咳を緩和することである。 第２の目的は、甘草を使薬として使用することによって、処方の薬物の加減を行い、したがって薬物の性質を穏やかにすることである。

上記を考慮して、本発明の医薬組成物の処方全体は、疾患の表面的なものおよび疾患の原因を同時に治療し、浄化および強化を同時に適用し、ならびに乾燥の性質であることなく暖性であるという特徴を有し、気を調整し、脾臓を活気づけ、湿気を消散し、痰を消滅させ、気を下向きにし、咳を緩和し、喘息を解毒するなどの作用を合わせる。 脾臓の活性化は、痰の生成を不可能にすることになり、痰を消散することは、肺の気を自然に通気させることになるので、咳および呼吸困難が緩和する。 本発明の処方のすべての薬物は、一緒になって、気を調整し、湿気を排除し、痰を消滅させ、咳を緩和する効果を果たす。

本発明を考慮して、および本分野の常識と組み合わせて、本分野の当業者であれば、本発明の医薬組成物中の個々の成分と、同じまたは同様の効力を有する他の漢方の薬効物質を医薬組成物において置き換えられた成分として、置き換えることができる。
本発明の医薬組成物は、当技術分野の従来の調製方法を用いて調製することができる。 例えば、本発明の医薬組成物中の様々な薬用物質は、ｔｈｅ Ｓｔａｎｄａｒｄ ｆｏｒ Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ ｏｒ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙに従い処理することができる。

本発明の医薬組成物は、好ましくは以下の方法で調製することができる：
（１）選択したきれいな黄岑を処方に記載の割合に従って秤量し、後で使用するためにこれを微細な粉末へと微粉砕するステップ、
（２）選択したきれいな陳皮および桂枝を処方に記載の割合に従って秤量し、薬効物質の質量ｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の８〜１２倍の水を添加し、混合物に３〜７時間蒸留を施すことによって、精油を抽出し、後で使用するために精油を収集するステップ、
（３）ステップ（２）の蒸留後に得た水溶液を容器に収集し、ステップ（２）からの薬草残渣を白朮、茯苓、甘草、款冬花および連翹と一緒に、１回目は薬効物質の質量ｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の７〜１１倍の量の水を用いて、２回目は５〜９倍の質量ｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の水を用いて、それぞれ１〜３時間にわたり、水で２回抽出し、次いで、水性抽出物をプールし、濾過し、続いてこれを蒸留後に得た上記の水溶液と合わせ、混合溶液を後で使用するために透明ペースト（６０℃で熱的に測定された相対密度が１．１５〜１．２０）へと濃縮するステップ、
（４）選択したきれいな半夏、紫蘇子、芥子、来服子、紫苑、十薬、および苦杏仁を処方に記載の割合に従って秤量し、これを薬効物質のｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の５〜７倍の４０〜７０％エタノール溶液中で２回、１回目は１〜３時間および２回目は１〜２時間の抽出を行い、抽出物をプールし、これを濾過し、濾液中のエタノールを回収し、残渣を透明ペースト（６０℃で熱的に測定された相対密度が１．１５〜１．２０）へと濃縮し、後で使用するために透明ペーストをステップ（３）で得た透明ペーストと合わせるステップ。
ステップ（１）で得た微細な粉末、ステップ（２）で得た精油、およびステップ（４）で得た合わせた透明ペーストは、本発明の医薬組成物の活性成分を構成する。

本発明による医薬組成物の剤形として、これらに限らないが、硬カプセル剤、錠剤、散剤、経口用液剤、軟カプセル剤、丸剤、チンキ剤、シロップ剤、坐剤、ゲル剤、スプレー剤、または注射剤が挙げられる。
本発明の薬物の剤形は、当技術分野の従来の調製方法、例えばＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、Ｆａｎ Ｂｉｔｉｎｇ（編集者）、１９９７年１２月（第１版）、Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ ＆ Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓにおいて記載の調製方法などを用いて薬学的に許容される従来の剤形に調製することができる。

本発明の様々な医薬品を配合する上で、当業者であれば、本発明の医薬品の異なる剤形に応じておよび当技術分野の常識と組み合わせて、例えば、これだけに限らないが充填剤、崩壊剤、潤滑剤、懸濁剤、結合剤、甘味剤、香味剤、保存剤、マトリックス、またはこれら混合物のいずれかを含めた様々な薬学的に許容される補助物質を添加することができる。 充填剤として、これらに限らないが、デンプン、アルファ化でんぷん、ラクトース、マンニトール、キチン、微結晶性セルロース、ショ糖、またはこれら混合物のいずれかが挙げられる。 崩壊剤として、これらに限らないが、デンプン、アルファ化でんぷん、微結晶性セルロース、カルボキシメチルナトリウムデンプン、架橋結合したポリビニルピロリドン、低置換のヒドロキシプロピルセルロース、架橋したカルボキシメチルセルロースナトリウム、またはこれら混合物のいずれかが挙げられる。 潤滑剤として、これらに限らないが、ステアリン酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、タルク、シリカ、またはこれら混合物のいずれかが挙げられる。 懸濁剤として、これらに限らないが、ポリビニルピロリドン、微結晶性セルロース、ショ糖、寒天、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、またはこれら混合物のいずれかが挙げられる。 結合剤として、これらに限らないが、デンプンスラリー、ポリビニルピロリドン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、またはこれら混合物のいずれかが挙げられる。 甘味剤として、これらに限らないが、サッカリンナトリウム、アスパルテーム、ショ糖、ナトリウムシクラメート、グリチルレチン酸、またはこれら混合物のいずれかが挙げられる。 香味剤として、これらに限らないが、甘味剤および様々なエッセンス、またはこれら混合物のいずれかが挙げられる。 保存剤として、これらに限らないが、パラベン、安息香酸、安息香酸ナトリウム、ソルビン酸およびその塩、ベンザルコニウム臭化物、酢酸クロルヘキシジン、ユーカリ油、またはこれら混合物のいずれかが挙げられる。 マトリックスとして、これらに限らないが、ＰＥＧ６０００、ＰＥＧ４０００、昆虫ろう、またはこれら混合物のいずれかが挙げられる。 伝統的漢方医学の調剤学に従い、上に記載の剤形を調製するために、薬学的に許容される他の補助物質（例えばＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、Ｆａｎ Ｂｉｔｉｎｇ（編集者）、１９９７年１２月（第１版）、Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ ＆ Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓに記載の様々な剤形のための補助物質）をこれら剤形を調製する際にさらに添加することができる。

好ましい実施形態として、以下の方法を用いて本発明の医薬組成物を調製する：
（１）選択したきれいな黄岑を処方に記載の割合に従って秤量し、これを後で使用するために微細な粉末へと微粉砕するステップ、
（２）選択したきれいな陳皮および桂枝を処方に記載の割合に従って秤量し、薬効物質の質量ｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の８〜１２倍の水を添加し、混合物に４〜６時間蒸留を施すことによって、精油を抽出し、後で使用するために精油を収集するステップ、
（３）ステップ（２）の蒸留後に得た水溶液を容器に収集し、ステップ（２）からの薬草残渣を白朮、茯苓、甘草、款冬花および連翹と一緒に、１回目は薬効物質の質量ｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の７〜１１倍の量の水を用いて、２回目は５〜９倍の質量ｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の水を用いて、それぞれ１〜３時間にわたり、水で２回抽出し、次いで、水性抽出物をプールし、混合物を濾過し、濾液を蒸留後に得た上記の水溶液と合わせ、混合溶液を後で使用するために透明ペースト（６０℃で熱的に測定された相対密度が１．１５〜１．２０）へと濃縮するステップ、
（４）選択したきれいな半夏、紫蘇子、芥子、来服子、紫苑、十薬、および苦杏仁を処方に記載の割合に従って秤量し、これを薬効物質の質量ｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の５〜７倍の４０〜７０％エタノール溶液中で２回、１回目は１〜３時間および２回目は１時間、抽出を行い、抽出物をプールし、これを濾過し、濾液のエタノールを回収し、残渣を透明ペースト（６０℃で熱的に測定された相対密度が１．１５〜１．２０である）へと濃縮し、後で使用するために透明ペーストをステップ（３）で得た透明ペーストと合わせるステップ、
（５）基本物質として、ステップ（１）で得た微細な粉末を用いて、ステップ（４）で得た合わせた透明ペーストを顆粒状にし、後で使用するために、得た顆粒剤に仕上げ処理を行うステップ、
（６）以下に従い、錠剤用の物質（質量部）を提供するステップ：
ステップ（５）で得た顆粒剤 ３４０〜６００
コロイド状二酸化ケイ素 １．８〜３．５
ステアリン酸マグネシウム １．８〜３．５、
（７）ステップ（２）で得た精油をコロイド状二酸化ケイ素に添加し、従来の製剤方法で錠剤化することによって、本発明の医薬組成物を得るステップ。

さらに好ましい実施形態として、以下の方法を用いて本発明の医薬組成物を調製する：
（１）選択したきれいな黄岑を処方に記載の割合に従って秤量し、後で使用するために微細な粉末へと微粉砕するステップ、
（２）選択したきれいな陳皮および桂枝を処方に記載の割合に従って秤量し、薬効物質の質量ｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の９倍の水を添加し、混合物に５時間蒸留を施すことによって、精油を抽出し、後で使用するために精油を収集するステップ、
（３）ステップ（２）の蒸留後に得た水溶液を容器に収集し、ステップ（２）からの薬草残渣を白朮、茯苓、甘草、款冬花および連翹と一緒に、１回目は薬効物質の質量ｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の１０倍の量の水を用いて、２回目は７倍の質量ｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の水を用いて、それぞれ４時間にわたり、水で２回抽出し、次いで、水性抽出物をプールし、濾過し、濾液を蒸留後に得た上記の水溶液と合わせ、混合溶液を後で使用するために透明ペースト（６０℃で熱的に測定された相対密度が１．１７）へと濃縮するステップ、
（４）選択したきれいな半夏、紫蘇子、芥子、来服子、紫苑、十薬、および苦杏仁を処方に記載の割合に従って秤量し、ｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の６倍の６０％エタノール溶液中で２回、１回目は２時間および２回目は１時間、抽出を行い、抽出物をプールし、混合物を濾過し、濾液のエタノールを回収し、残渣を透明ペースト（６０℃で熱的に測定された相対密度が１．１７である）へと濃縮し、後で使用するために透明ペーストをステップ（３）で得た透明ペーストと合わせるステップ、
（５）基本物質として、ステップ（１）で得た微細な粉末を用いて、ステップ（４）で得た合わせた透明ペーストを顆粒状にし、後で使用するために、得た顆粒剤に仕上げ処理を行うステップ、
（６）以下に従い、錠剤用の物質（質量部）を提供するステップ：
ステップ（５）で得た顆粒剤 ４７０
コロイド状二酸化ケイ素 ２．４
ステアリン酸マグネシウム ２．４、
（７）ステップ（２）で得た精油をコロイド状二酸化ケイ素に添加し、従来の製剤方法で錠剤化することによって、本発明の医薬組成物を得るステップ。

本発明の医薬組成物は、伝統的漢方医学からの併存疾患理論に基づき、これを気管支炎の原因および病因についての現代の医学的調査、ならびに何年もの臨床診療と組み合わせることで達成された。 この医薬組成物は、気を調整し、乾燥により湿気を排除し、痰を消滅させ、咳を緩和する効果があり、気管支炎を治療することにおいて優れた効力を発揮し、特に慢性気管支炎を治療することにおいて優良な効力を発揮する。

本発明の医薬組成物が、咳を止め、痰を消散し、喘息を緩和し、炎症を食い止めるという効果を持ち、特に慢性気管支炎を治療する優良な効力を示すことが実験的に示された。 さらに、本発明の医薬組成物は、副作用を起こさず、安全であることが実験的に示された。

本発明は、以下の例および試験例によりさらに例示されることになるが、これらは本発明の範囲を限定することを決して意図していない。

（例１）
本発明の薬物の錠剤の調製（仮の名称：Ｌｉａｎ Ｈｕａ Ｍａｎ Ｚｈｉ錠剤）
処方：

調製方法：
（１）選択したきれいな黄岑を処方に記載の質量に従って秤量し、後で使用するために微細な粉末へと微粉砕した。
（２）選択したきれいな陳皮および桂枝を処方に記載の質量に従って秤量し、続いて薬効物質の質量ｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の１０倍の水を添加し、６時間蒸留を施すことによって、精油を抽出し、後で使用するためにこの精油を収集した。
（３）ステップ（２）で蒸留した水溶液を容器に収集し、その薬草残渣を白朮、茯苓、甘草、款冬花、および連翹と一緒に、１回目は薬効物質の質量ｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の１０倍の量の水を用いて、２回目は８倍の質量ｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の水を用いて、それぞれ１．５時間にわたり、水で２回抽出した。 次いで、この水性抽出物をプールし、濾過し、上に記載の蒸留した水溶液をこの濾液に添加し、濾液を濃縮することによって、後で使用するために透明ペースト（６０℃にて熱的に測定された相対密度が１．１７）を得た。
（４）選択したきれいな半夏、紫蘇子、芥子、来服子、紫苑、十薬、および苦杏仁を処方に記載の質量に従って秤量し、薬効物質の質量（ｇ）に対して容量（ｍｌ）で７倍の量の６０％エタノール溶液中で２回、１回目は３時間および２回目は２時間の抽出を行った。 抽出物をプールし、濾過した。 濾液中のエタノールを取り出し、濾液を透明ペースト（６０℃で熱的に測定した相対密度が１．１７）へと濃縮し、これを後で使用するために、ステップ（３）で得た透明ペーストと合わせた。
（５）基本物質として、ステップ（１）で得た微細な粉末を用いて、ステップ（４）で得た合わせた透明ペーストを顆粒状にし、後で使用するために仕上げ処理を行った。
（６）以下の質量部に従い錠剤に使用する原料を秤量した：
ステップ（５）で得た顆粒剤 ４５５
コロイド状二酸化ケイ素 ２．２
ステアリン酸マグネシウム ２．２
（７）ステップ（２）で得た精油をコロイド状二酸化ケイ素に添加し、表題錠剤を従来の製剤方法で調製した。

（例２）
本発明の薬物のカプセル剤の調製処方：

調製方法：
（１）選択したきれいな黄岑を処方に記載の質量に従って秤量し、後で使用するために微細な粉末へと微粉砕した。
（２）選択したきれいな陳皮および桂枝を処方に記載の質量に従って秤量し、続いて薬効物質の質量ｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の９倍の水を添加し、５時間蒸留を施すことによって、精油を抽出し、後で使用するためにこの精油を収集した。
（３）ステップ（２）で蒸留した水溶液を別の容器に収集し、その薬草残渣を白朮、茯苓、甘草、款冬花、および連翹と一緒に、１回目は薬効物質の質量ｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の８倍の量の水を用いて、２回目は６倍の質量ｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の水を用いて、それぞれ１．５時間にわたり、水で２回抽出した。 次いで、この水性抽出物をプールし、濾過し、上に記載の蒸留した水溶液をこの濾液に添加し、混合物を濃縮することによって、後で使用するために透明ペースト（６０℃にて熱的に測定された相対密度が１．１６）を得た。
（４）選択したきれいな半夏、紫蘇子、芥子、来服子、紫苑、十薬、および苦杏仁を処方に記載の質量に従って秤量し、薬効物質の質量（ｇ）に対して容量（ｍｌ）で５倍の量の６０％エタノール溶液中で２回、１回目は２時間および２回目は１．５時間の抽出を行った。 抽出物をプールし、濾過した。 濾液中のエタノールを取り出し、濾液を透明ペースト（６０℃で熱的に測定した相対密度が１．１６）へと濃縮し、これを後で使用するために、ステップ（３）で得た透明ペーストと合わせた。
（５）カプセル剤を従来の製剤方法で調製した。

（例３）
本発明の薬物の散剤の調製処方：

調製方法：
（１）選択したきれいな黄岑を処方に記載の質量に従って秤量し、後で使用するために微細な粉末へと微粉砕した。
（２）選択したきれいな陳皮および桂枝を処方に記載の質量に従って秤量し、続いて薬効物質の質量ｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の９倍の水を添加し、５時間蒸留を施すことによって、精油を抽出し、後で使用するためにこの精油を収集した。
（３）ステップ（２）で蒸留した水溶液を別の容器に収集し、その薬草残渣を白朮、茯苓、甘草、款冬花、および連翹と一緒に、１回目は薬効物質の質量ｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の８倍の量の水を用いて、２回目は６倍の質量ｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の水を用いて、それぞれ１．５時間にわたり、水で２回抽出した。 次いで、この水性抽出物をプールし、濾過し、次いで上に記載の蒸留した水溶液をこの濾液に添加し、混合物を濃縮することによって、後で使用するために透明ペースト（６０℃にて熱的に測定された相対密度が１．１６）を得た。
（４）選択したきれいな半夏、紫蘇子、芥子、来服子、紫苑、十薬、および苦杏仁を処方に記載の質量に従って秤量し、薬効物質の質量（ｇ）に対して容量（ｍｌ）で５倍の量の６０％エタノール溶液中で２回、１回目は２時間および２回目は１．５時間の抽出を行った。 抽出物をプールし、濾過した。 濾液中のエタノールを取り出し、濾液を透明ペースト（６０℃で熱的に測定した相対密度が１．１６）へと濃縮し、これを後で使用するために、ステップ（３）で得た透明ペーストと合わせた。
（５）散剤を従来の製剤方法で調製した。

（例４）
本発明の薬物の経口アルコール飲料の調製処方：

調製方法：
（１）選択したきれいな黄岑を処方に記載の質量に従って秤量し、後で使用するために微細な粉末へと微粉砕した。
（２）選択したきれいな陳皮および桂枝を処方に記載の質量に従って秤量し、続いて薬効物質の質量ｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の８倍の水を添加し、３時間蒸留を施すことによって、精油を抽出し、後で使用するためにこの精油を収集した。
（３）ステップ（２）で蒸留後に得た水溶液を別の容器に収集し、その薬草残渣を白朮、茯苓、甘草、款冬花、および連翹と一緒に、１回目は薬効物質の質量ｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の７倍の量の水を用いて、２回目は５倍の質量ｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の水を用いて、それぞれ１時間にわたり、水で２回抽出した。 次いで、この水性抽出物をプールし、濾過し、次いで上に記載の蒸留した水溶液をこの濾液に添加し、混合物を濃縮することによって、後で使用するために透明ペースト（６０℃にて熱的に測定された相対密度が１．１５〜１．２０）を得た。
（４）選択したきれいな半夏、紫蘇子、芥子、来服子、紫苑、十薬、および苦杏仁を処方に記載の質量に従って秤量し、薬効物質の質量（ｇ）に対して容量（ｍｌ）で５倍の量の４０〜７０％エタノール溶液中で２回、１回目は１時間および２回目は１時間の抽出を行った。 抽出物をプールし、濾過した。 濾液中のエタノールを取り出し、濾液を透明ペースト（６０℃で熱的に測定した相対密度が１．１５〜１．２０）へと濃縮し、これを後で使用するために、ステップ（３）で得た透明ペーストと合わせた。

ステップ（１）で得た微細な粉末、ステップ（２）で得た精油、およびステップ（４）で得た合わせた透明ペーストを従来の製剤方法により経口アルコール飲料へと配合した。

（例５）
本発明の薬物の軟カプセル剤の調製処方：

調製方法：
（１）選択したきれいな黄岑を処方に記載の質量に従って秤量し、後で使用するために微細な粉末へと微粉砕した。
（２）選択したきれいな陳皮および桂枝を処方に記載の質量に従って秤量し、続いて薬効物質の質量ｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の１２倍の水を添加し、７時間蒸留を施すことによって、精油を抽出し、後で使用するためにこの精油を収集した。
（３）ステップ（２）で蒸留後に得た水溶液を別の容器に収集し、その薬草残渣を白朮、茯苓、甘草、款冬花、および連翹と一緒に、１回目は薬効物質の質量ｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の１１倍の量の水を用いて、２回目は９倍の質量ｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の水を用いて、それぞれ３時間にわたり、水で２回抽出した。 次いで、この水性抽出物をプールし、濾過し、上に記載の蒸留した水溶液をこの濾液に添加し、混合物を濃縮することによって、後で使用するために透明ペースト（６０℃にて熱的に測定された相対密度が１．１５〜１．２０）を得た。
（４）選択したきれいな半夏、紫蘇子、芥子、来服子、紫苑、十薬、および苦杏仁を処方に記載の質量に従って秤量し、薬効物質の質量（ｇ）に対して容量（ｍｌ）で７倍の量の４０〜７０％エタノール溶液中で２回、１回目は３時間および２回目は２時間の抽出を行った。 抽出物をプールし、濾過した。 濾液中のエタノールを取り出し、濾液を透明ペースト（６０℃で熱的に測定した相対密度が１．１５〜１．２０）へと濃縮し、これを後で使用するために、ステップ（３）で得た透明ペーストと合わせた。
ステップ（１）で得た微細な粉末、ステップ（２）で得た精油、およびステップ（４）で得た合わせた透明ペーストを従来の製剤方法により軟カプセル剤へと配合した。

（例６）
本発明の薬物の丸剤の調製処方：

調製方法：
（１）選択したきれいな黄岑を処方に記載の質量に従って秤量し、後で使用するために微細な粉末へと微粉砕した。
（２）選択したきれいな陳皮および桂枝を処方に記載の質量に従って秤量し、続いて薬効物質の質量ｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の１０倍の水を添加し、５時間蒸留を施すことによって、精油を抽出し、後で使用するためにこの精油を収集した。
（３）ステップ（２）で蒸留後に得た水溶液を別の容器に収集し、その薬草残渣を白朮、茯苓、甘草、款冬花、および連翹と一緒に、１回目は薬効物質の質量ｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の８倍の量の水を用いて、２回目は７倍の質量ｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の水を用いて、それぞれ２時間にわたり、水で２回抽出した。 次いで、この水性抽出物をプールし、濾過し、次いで上に記載の蒸留した水溶液をこの濾液に添加し、混合物を濃縮することによって、後で使用するために透明ペースト（６０℃にて熱的に測定された相対密度が１．１５〜１．２０）を得た。
（４）選択したきれいな半夏、紫蘇子、芥子、来服子、紫苑、十薬、および苦杏仁を処方に記載の質量に従って秤量し、薬効物質の質量（ｇ）に対して容量（ｍｌ）で６倍の量の６０％エタノール溶液中で２回、１回目は２時間および２回目は１．５時間の抽出を行った。 抽出物をプールし、濾過した。 濾液中のエタノールを取り出し、濾液を透明ペースト（６０℃で熱的に測定した相対密度が１．１５〜１．２０）へと濃縮し、これを後で使用するために、ステップ（３）で得た透明ペーストと合わせた。

ステップ（１）で得た微細な粉末、ステップ（２）で得た精油、およびステップ（４）で得た合わせた透明ペーストを従来の製剤方法により丸剤へと配合した。

（例７）
本発明の薬物のチンキ剤の調製処方：

調製方法：
（１）選択したきれいな黄岑を処方に記載の質量に従って秤量し、後で使用するために微細な粉末へと微粉砕した。
（２）選択したきれいな陳皮および桂枝を処方に記載の質量に従って秤量し、続いて薬効物質の質量ｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の１１倍の水を添加し、４時間蒸留を施すことによって、精油を抽出し、後で使用するためにこの精油を収集した。
（３）ステップ（２）で蒸留後に得た水溶液を別の容器に収集し、その薬草残渣を白朮、茯苓、甘草、款冬花、および連翹と一緒に、１回目は薬効物質の質量ｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の８倍の量の水を用いて、２回目は６倍の質量ｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の水を用いて、それぞれ１．５時間にわたり、水で２回抽出した。 次いで、この水性抽出物をプールし、濾過し、上に記載の蒸留した水溶液をこの濾液に添加し、混合物を濃縮することによって、後で使用するために透明ペースト（６０℃にて熱的に測定された相対密度が１．１５〜１．２０）を得た。
（４）選択したきれいな半夏、紫蘇子、芥子、来服子、紫苑、十薬、および苦杏仁を処方に記載の質量に従って秤量し、薬効物質の質量（ｇ）に対して容量（ｍｌ）で５倍の量の６５％エタノール溶液中で２回、１回目は１時間および２回目は２時間の抽出を行った。 抽出物をプールし、濾過した。 濾液中のエタノールを取り出し、濾液を透明ペースト（６０℃で熱的に測定した相対密度が１．１５〜１．２０）へと濃縮し、これを後で使用するために、ステップ（３）で得た透明ペーストと合わせた。

ステップ（１）で得た微細な粉末、ステップ（２）で得た精油、およびステップ（４）で得た合わせた透明ペーストを従来の製剤方法によりチンキ剤へと配合した。

（例８）
本発明の薬物のシロップ剤の調製処方：

調製方法：
（１）選択したきれいな黄岑を処方に記載の質量に従って秤量し、後で使用するために微細な粉末へと微粉砕した。
（２）選択したきれいな陳皮および桂枝を処方に記載の質量に従って秤量し、続いて薬効物質の質量ｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の９倍の水を添加し、６時間蒸留を施すことによって、精油を抽出し、後で使用するためにこの精油を収集した。
（３）ステップ（２）で蒸留後に得た水溶液を別の容器に収集し、その薬草残渣を白朮、茯苓、甘草、款冬花、および連翹と一緒に、１回目は薬効物質の質量ｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の１０倍の量の水を用いて、２回目は８倍の質量ｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の水を用いて、それぞれ３時間にわたり、水で２回抽出した。 次いで、この水性抽出物をプールし、濾過し、上に記載の蒸留した水溶液をこの濾液に添加し、混合物を濃縮することによって、後で使用するために透明ペースト（６０℃にて熱的に測定された相対密度が１．１５〜１．２０）を得た。
（４）選択したきれいな半夏、紫蘇子、芥子、来服子、紫苑、十薬、および苦杏仁を処方に記載の質量に従って秤量し、薬効物質の質量（ｇ）に対して容量（ｍｌ）で７倍の量の５５％エタノール溶液中で２回、１回目は２．５時間および２回目は２時間の抽出を行った。 抽出物をプールし、濾過した。 濾液中のエタノールを取り出し、濾液を透明ペースト（６０℃で熱的に測定した相対密度が１．１５〜１．２０）へと濃縮し、これを後で使用するために、ステップ（３）で得た透明ペーストと合わせた。

ステップ（１）で得た微細な粉末、ステップ（２）で得た精油、およびステップ（４）で得た合わせた透明ペーストを従来の製剤方法によりシロップ剤へと配合した。

（例９）
本発明の薬物の坐剤の調製処方：

調製方法：
（１）選択したきれいな黄岑を処方に記載の質量に従って秤量し、後で使用するために微細な粉末へと微粉砕した。
（２）選択したきれいな陳皮および桂枝を処方に記載の質量に従って秤量し、続いて薬効物質の質量ｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の１０倍の水を添加し、５時間蒸留を施すことによって、精油を抽出し、後で使用するためにこの精油を収集した。
（３）ステップ（２）で蒸留後に得た水溶液を別の容器に収集し、その薬草残渣を白朮、茯苓、甘草、款冬花、および連翹と一緒に、１回目は薬効物質の質量ｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の８倍の量の水を用いて、２回目は８倍の質量ｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の水を用いて、それぞれ１．５時間にわたり、水で２回抽出した。 次いで、この水性抽出物をプールし、濾過し、次いで上に記載の蒸留した水溶液をこの濾液に添加し、混合物を濃縮することによって、後で使用するために透明ペースト（６０℃にて熱的に測定された相対密度が１．１５〜１．２０）を得た。
（４）選択したきれいな半夏、紫蘇子、芥子、来服子、紫苑、十薬、および苦杏仁を処方に記載の質量に従って秤量し、薬効物質の質量（ｇ）に対して容量（ｍｌ）で６．５倍の量の４５％エタノール溶液中で２回、１回目は３時間および２回目は２時間の抽出を行った。 抽出物をプールし、濾過した。 濾液中のエタノールを取り出し、濾液を透明ペースト（６０℃で熱的に測定した相対密度が１．１５〜１．２０）へと濃縮し、これを後で使用するために、ステップ（３）で得た透明ペーストと合わせた。
ステップ（１）で得た微細な粉末、ステップ（２）で得た精油、およびステップ（４）で得た合わせた透明ペーストを従来の製剤方法により坐剤へと配合した。

（例１０）
本発明の薬物のゲル剤の調製処方：

調製方法：
（１）選択したきれいな黄岑を処方に記載の質量に従って秤量し、後で使用するために微細な粉末へと微粉砕した。
（２）選択したきれいな陳皮および桂枝を処方に記載の質量に従って秤量し、続いて薬効物質の質量ｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の１１倍の水を添加し、５時間蒸留を施すことによって、精油を抽出し、後で使用するためにこの精油を収集した。
（３）ステップ（２）で蒸留後に得た水溶液を別の容器に収集し、その薬草残渣を白朮、茯苓、甘草、款冬花、および連翹と一緒に、１回目は薬効物質の質量ｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の１０倍の量の水を用いて、２回目は８倍の質量ｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の水を用いて、それぞれ２．５時間にわたり、水で２回抽出した。 次いで、この水性抽出物をプールし、濾過し、上に記載の蒸留した水溶液をこの濾液に添加し、混合物を濃縮することによって、後で使用するために透明ペースト（６０℃にて熱的に測定された相対密度が１．１５〜１．２０）を得た。
（４）選択したきれいな半夏、紫蘇子、芥子、来服子、紫苑、十薬、および苦杏仁を処方に記載の質量に従って秤量し、薬効物質の質量（ｇ）に対して容量（ｍｌ）で６．５倍の量の５０％エタノール溶液中で２回、１回目は２時間および２回目は１．５時間の抽出を行った。 抽出物をプールし、濾過した。 濾液中のエタノールを取り出し、濾液を透明ペースト（６０℃で熱的に測定した相対密度が１．１５〜１．２０）へと濃縮し、これを後で使用するために、ステップ（３）で得た透明ペーストと合わせた。

ステップ（１）で得た微細な粉末、ステップ（２）で得た精油、およびステップ（４）で得た合わせた透明ペーストを従来の製剤方法によりゲル剤へと配合した。

（例１１）
本発明の薬物のスプレー剤の調製処方：

調製方法：
（１）選択したきれいな黄岑を処方に記載の質量に従って秤量し、後で使用するために微細な粉末へと微粉砕した。
（２）選択したきれいな陳皮および桂枝を処方に記載の質量に従って秤量し、続いて薬効物質の質量ｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の１０倍の水を添加し、４時間蒸留を施すことによって、精油を抽出し、後で使用するためにこの精油を収集した。
（３）ステップ（２）で蒸留後に得た水溶液を別の容器に収集し、その薬草残渣を白朮、茯苓、甘草、款冬花、および連翹と一緒に、１回目は薬効物質の質量ｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の８倍の量の水を用いて、２回目は８倍の質量ｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の水を用いて、それぞれ２時間にわたり、水で２回抽出した。 次いで、この水性抽出物をプールし、濾過し、上に記載の蒸留した水溶液をこの濾液に添加し、混合物を濃縮することによって、後で使用するために透明ペースト（６０℃にて熱的に測定された相対密度が１．１５〜１．２０）を得た。
（４）選択したきれいな半夏、紫蘇子、芥子、来服子、紫苑、十薬、および苦杏仁を処方に記載の質量に従って秤量し、薬効物質の質量（ｇ）に対して容量（ｍｌ）で６倍の量の５５％エタノール溶液中で２回、１回目は３時間および２回目は１時間の抽出を行った。 抽出物をプールし、濾過した。 濾液中のエタノールを取り出し、濾液を透明ペースト（６０℃で熱的に測定した相対密度が１．１５〜１．２０）へと濃縮し、これを後で使用するために、ステップ（３）で得た透明ペーストと合わせた。
ステップ（１）で得た微細な粉末、ステップ（２）で得た精油、およびステップ（４）で得た合わせた透明ペーストを従来の製剤方法によりスプレー剤へと配合した。

（例１２）
本発明の薬物の注射剤の調製処方：

調製方法：
（１）選択したきれいな黄岑を処方に記載の質量に従って秤量し、後で使用するために微細な粉末へと微粉砕した。
（２）選択したきれいな陳皮および桂枝を処方に記載の質量に従って秤量し、続いて薬効物質の質量ｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の１０倍の水を添加し、４時間蒸留を施すことによって、精油を抽出し、後で使用するためにこの精油を収集した。
（３）ステップ（２）で蒸留後に得た水溶液を別の容器に収集し、その薬草残渣を白朮、茯苓、甘草、款冬花、および連翹と一緒に、１回目は薬効物質の質量ｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の８倍の量の水を用いて、２回目は８倍の質量ｖ／ｗ（ｍｌ／ｇ）の水を用いて、それぞれ２時間にわたり、水で２回抽出した。 次いで、この水性抽出物をプールし、濾過し、上に記載の蒸留した水溶液をこの濾液に添加し、混合物を濃縮することによって、後で使用するために透明ペースト（６０℃にて熱的に測定された相対密度が１．１５〜１．２０）を得た。
（４）選択したきれいな半夏、紫蘇子、芥子、来服子、紫苑、十薬、および苦杏仁を処方に記載の質量に従って秤量し、薬効物質の質量（ｇ）に対して容量（ｍｌ）で６倍の量の５５％エタノール溶液中で２回、１回目は３時間および２回目は１時間の抽出を行った。 抽出物をプールし、濾過した。 濾液中のエタノールを取り出し、濾液を透明ペースト（６０℃で熱的に測定した相対密度が１．１５〜１．２０）へと濃縮し、これを後で使用するために、ステップ（３）で得た透明ペーストと合わせた。

ステップ（１）で得た微細な粉末、ステップ（２）で得た精油、およびステップ（４）で得た合わせた透明ペーストを従来の製剤方法により注射剤へと配合した。
以下の薬理学的および毒物学的実験の試験例において投与されたすべての本発明の医薬組成物（本明細書中でこれより以下「本発明の薬物」と呼ぶ）は、例１に記載の手順により調製した。

試験例１ 本発明の薬物の咳止め効果についての実験１． マウスにおけるアンモニア水誘発性の咳に対する咳止め効果１．１ 実験材料１．１．１ 薬物：
（１）試験する本発明の薬物、生薬６．２５ｇ／ｇ（すなわち１ｇの薬物を６．２５ｇの生薬から生成）、Ｓｈｉｊｉａｚｈｕａｎｇ Ｙｉｌｉｎｇ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏ． Ｌｔｄ． より提供、ロット番号：０６０５０１。 この実験で必要な濃度へと蒸留水を用いて希釈。
（２）クロペラスチン塩酸塩錠剤（ＣＨＴ）：西洋医学の陽性対照として、１０ｍｇ／錠剤、Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｓｈｕｇｕａｎｇ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏ． 、Ｌｔｄ． 製造、ロット番号：０６０６１９、２００８年６月まで有効。
（３）Ｇｕｉ Ｌｏｎｇ Ｋｅ Ｃｈｕａｎ Ｎｉｎｇカプセル剤（ＧＬＫＣＮＣ）、伝統的漢方医学の陽性対照として、生薬１ｇ／丸剤（１丸剤につき散剤０．３ｇ）、Ｓｈａｎｘｉ Ｇｕｉｌｏｎｇ ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏ． 、Ｌｔｄ． 製造、認可番号：ＳＦＤＡ認可Ｎｏ． Ｚ−１１；製品ロット番号：０６０１１２；２００７年１２月まで有効。

１．１．２ 動物：
グレードＩＩのＫｕｎｍｉｎｇマウス６０匹、平均体重１９．９０±０．６６ｇのオスとメスで均等に構成、Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ、Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓより提供、ライセンス番号：ＳＣＸＫ（Ｊｉｎｇ）２０００−０００６。
１．１．３ 動物飼料の配合および栄養成分：
ラット維持飼料、Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｋｅ Ａｏ Ｘｉｅ Ｌｉ Ｆｅｅｄ Ｃｏ． 、Ｌｔｄ． 製造、ライセンス番号：Ｊｉｎｇ Ａｎｉｍａｌ（２０００年）Ｎｏ． ０１５。 主成分［Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ ＆ Ｈｅａｌｔｈ Ｉｎｓｐｅｃｔｉｏｎ Ｆｉｌｅ（１９９７年）Ｎｏ． ０８３］：水分≦９．５％、灰≦７．８％、タンパク質≧７．８％、脂肪≧４．３％、粗繊維≦１１．０％、リジン≧１．３９％、メチオニン＋システイン：０．３〜０．５４％、カルシウム：１．０％、リン：０．５４％、葉酸：２１．１ｍｇ／ｋｇ、ビタミンＡ≧１１．４／ｋｇ、ビタミンＤ≧９８ｕｇ／ｋｇ、Ｂビタミン：２４．１１〜１６４ｍｇ／ｋｇ、カロリー：４．６２テルミ／ｋｇ。

１．１．４ 動物の飼育条件：
Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ Ｃｅｎｔｅｒ、Ｘｉｙｕａｎ Ｈｏｓｐｉｔａｌ、Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅのバリア環境飼育施設、ライセンス番号：ＳＣＸＫ（Ｊｉｎｇ）２００３−０８０８。 周辺温度：２２〜２４℃、相対湿度：４５〜６０％。
１．１．５ 試薬：
水酸化アンモニウム、Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｃｅｎｔｕｒｙ Ｒｅｄ Ｓｔａｒ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ． 、Ｌｔｄ． 製造、ロット番号：２００６０３１０。

１．２ 実験方法 ６０匹の健常なマウスを以下の６つのグループにランダムに振り分けた：（１）蒸留水（２５ｍｌ／ｋｇ）を投与するブランクの対照グループ；（２）ＣＨＴグループ（１２ｍｇ／ｋｇ）；（３）ＧＬＫＣＮＣグループ（生薬２ｇ／ｋｇ）；（４）本発明の薬物の低用量グループ（Ｌ−用量グループ、生薬３ｇ／ｋｇ）；（５）本発明の薬物の中間用量グループ（Ｍ−用量グループ、生薬６ｇ／ｋｇ）；（６）本発明の薬物の高用量グループ（Ｈ−用量グループ、生薬１２ｇ／ｋｇ）。 マウスには、３日連続して２５ｍｌ／ｋｇの量をｑ． ｄ． で胃内に投与した。 最終投与から３０分後、止血栓を含有する５００ｍｌビーカー内に各マウスを配置した。 ０．２ｍｌのアンモニア水を１ｍｌシリンジに吸い込み、止血栓へと射出した。 次いで、ビーカーを急速に反転した。 マウスを観測して、咳の潜伏期および３分間の咳の数を記録した。 グループ間の比較をｔ−試験により実施した。

１．３． 試験結果 結果を表１に示す。

^* Ｐ＜０．０５、

^** Ｐ＜０．０１、

^*** Ｐ＜０．００１。

本発明の薬物の中間用量および高用量ならびに薬物の陽性対照の両方が、マウスにおけるアンモニア水誘発性の咳の潜伏期を有意に長引かせ、咳の数を減少させ、ブランク対照グループと比較して有意な差を示していることが表１からわかる（Ｐ＜０．０５、Ｐ＜０．０１、Ｐ＜０．００１）。

１．４． 総括 上の結果は、本発明の薬物が、マウスにおいて、アンモニア水誘発性の咳の潜伏期を有意に長引かせ、咳の数を減少させる効果があることを示している。

２． マウスにおけるクエン酸誘発性の咳に対する咳止め効果２．１ 実験物質２．１．１ 薬物：
（１）試験する本発明の薬物；生薬６．２５ｇ／ｇ、Ｓｈｉｊｉａｚｈｕａｎｇ Ｙｉｌｉｎｇ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏ． Ｌｔｄ． より提供、ロット番号：０６０５０１。
（２）伝統的漢方医学の対照としてＧＬＫＣＮＣ、生薬１ｇ／丸剤（１丸剤につき散剤０．３ｇ）、Ｓｈａｎｘｉ Ｇｕｉｌｏｎｇ ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏ． 、Ｌｔｄ． 製造、認可番号：ＳＦＤＡ認可Ｎｏ． Ｚ−１１；製品ロット番号：０６０１１２；２００７年１２月まで有効。
（３）西洋医学の対照としてＣＨＴ、１０ｍｇ／錠剤、Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｓｈｕｇｕａｎｇ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏ． 、Ｌｔｄ． 製造、製造日：２００６０６；ロット番号：０６０６１９；２００８年６月まで有効。

２．１．２ 動物：
グレードＩの純血種のモルモット６０匹、平均体重２０６．６５±６．９２ｇのオスとメスで均等に構成、Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｋｅｙｕ Ａｎｉｍａｌ Ｂｒｅｅｄｉｎｇ Ｃｅｎｔｅｒより提供、ライセンス番号：ＳＣＸＫ（Ｊｉｎｇ）２００２−０００５。
２．１．３ 試薬：
クエン酸、Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｐｌａｎｔ製造、ロット番号：９６０９０４。
２．１．４ 装置：
空気ポンプ、４Ｌ円錐形ガラス容器、およびガラススパージャー。
２．２ 実験方法 実験前にモルモットを密閉した４Ｌ円錐形容器に個々に配置し、ガラススパージャーを介して、１７．５％クエン酸溶液を４００ｍｍＨｇの圧力で１分間スプレーした。 ５分間内に記録された咳の数に従いモルモットをスクリーニングした。 咳の数が１０未満のモルモットをはじき、条件を満たしたものを実験用に選択した。 オスおよびメスで均等に構成される、６０匹のスクリーニングされた、条件を満たしたモルモットを以下の６つのグループにランダムに振り分けた：（１）蒸留水（５ｍｌ／ｋｇ）を投与するブランク対照グループ；（２）ＣＨＴグループ（７ｍｇ／ｋｇ）；（３）ＧＬＫＣＮＣグループ（生薬１．２ｇ／ｋｇ）；（４）本発明の薬物の低用量グループ（Ｌ−用量グループ、生薬１．７５／ｋｇ）；（５）本発明の薬物の中間用量グループ（Ｍ−用量グループ、生薬３．５ｇ／ｋｇ）；（６）本発明の薬物の高用量グループ（Ｈ−用量グループ、生薬７ｇ／ｋｇ）。 これらグループの各動物に、３日連続して５ｍｌ／ｋｇの量をｑ． ｄ． で胃内に投与し、その一方で、対照グループの動物には、同量の生理的食塩水を投与した。 最終の投与から３０分後、各モルモットを密閉した４Ｌ円錐形容器内に配置し、ガラススパージャーを介して、１７．５％のクエン酸を６００ｍｍＨｇの圧力で１分間スプレーした。 モルモットを観測して、咳の潜伏期および５分間の咳の数を記録した。 グループ間の比較をｔ−試験により実施した。

２．３． 試験結果 結果を表２に示す。

^* Ｐ＜０．０５、

^** Ｐ＜０．０１、

^*** Ｐ＜０．００１。

実験結果は、本発明の薬物の高用量および中間用量は、咳の潜伏期を有意に長引かせ、咳の数を減少させ、対照グループと比較して有意な差を示していることを実証している（Ｐ＜０．０５、Ｐ＜０．０１、Ｐ＜０．００１）。 本発明の薬物の低用量は、咳の数を減少させる有意な効果を有する（Ｐ＜０．０５）が、その一方で、咳潜伏期を長引かせる明らかな効果を持たない。

２．４． 総括 上に記載の結果は、本発明の薬物が、咳の潜伏期を有意に長引かせ、咳の数を減少させる効果があることを示している。
３結論：
上に記載の実験による研究は、本発明の薬物は、マウスにおいて、アンモニア水またはクエン酸誘発性の咳の潜伏期を有意に長引かせ、咳の数を減少させる効果があることを示し、これは本発明の薬物には咳止め効果があることを示唆している。

試験例２ 本発明の薬物の痰の消散効果についての実験１ フェノールレッドで測定したマウスの痰の量に対する効果１．１ 実験材料１．１．１ 薬物：
（１）試験する本発明の薬物、生薬６．２５ｇ／ｇ、Ｓｈｉｊｉａｚｈｕａｎｇ Ｙｉｌｉｎｇ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏ． Ｌｔｄ． より提供、ロット番号：０６０５０１。
（２）ＧＬＫＣＮＣ、伝統的漢方医学の対照として、生薬１ｇ／丸剤（１丸剤につき散剤０．３ｇ）、Ｓｈａｎｘｉ Ｇｕｉｌｏｎｇ ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏ． 、Ｌｔｄ． 製造、認可番号：ＳＦＤＡ認可Ｎｏ． Ｚ−１１；製品ロット番号：０６０１１２；２００７年１２月まで有効。
（３）Ｍｕｃｏｓｏｌｖａｎ、西洋医学対照として、３０ｍｇ／錠剤、Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ Ｉｎｔ． Ｌｔｄ． Ｇｅｒｍａｎの製品、ロット番号：２０６３６２、流通ロット番号：０３０３０７。

１．１．２ 試薬：
（１）フェノールレッド、２５ｇ／ボトル、Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｐｌａｎｔ製造、ロット番号：２０００６０１７。
（２）ＮａＯＨ、Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｒｅａｇｅｎｔｓ Ｃｏｍｐａｎｙ製、ロット番号：０６０９０１。

１．１．３ 動物：
ＳＰＦ ＩＣＲマウス６０匹、平均体重１９．０２±１．２ｇのオスとメスで均等に構成、Ｖｉｔａｌ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ． 、Ｌｔｄ． 、Ｂｅｉｊｉｎｇより提供、ライセンス番号：ＳＣＸＫ（Ｊｉｎｇ）２００２−０００３。

１．１．４ 装置：
ＵＶ−可視分光光度計、モデル：ＵＶ−１２０−０２，Ｓｈｉｍａｄｚｕ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｊａｐａｎの製品。

１．２ 実験方法 ６０匹の健常なマウスを以下の６つのグループにランダムに振り分けた：（１）蒸留水（２５ｍｌ／ｋｇ）を投与するブランク対照グループ；（２）Ｍｕｃｏｓｏｌｖａｎグループ（１６ｍｇ／ｋｇ）；（３）ＧＬＫＣＮＣグループ（生薬２ｇ／ｋｇ）；（４）本発明の薬物の低用量グループ（Ｌ−用量グループ、生薬３ｇ／ｋｇ）；（５）本発明の薬物の中間用量グループ（Ｍ−用量グループ、生薬６ｇ／ｋｇ）；（６）本発明の薬物の高用量グループ（Ｈ−用量グループ、生薬１２ｇ／ｋｇ）。 各マウスには、３日連続して２５ｍｌ／ｋｇの量をｑ． ｄ． で胃内に投与した。 実験前、マウスは絶食させたが、水は自由に飲ませた。 最終投与の後、各マウスに５％フェノールレッドを含有する生理的食塩水５００ｍｇ／ｋｇを注射した。 ３０分後、マウスを屠殺し、背側の位置で固定した。 頸部の皮膚の中央に切り込みを入れ、気管を分離した。 分離した気管上に極めて小さな開口を切り込み、開口を介して、７ゲージの鈍角シリンジニードルを気管内へ約０．３ｃｍ挿入し、次いで絹縫合糸で堅く結合した。 １ｍｌシリンジに吸い取った生理的食塩水０．５ｍｌで、気道を３回洗浄し、フラッシュ液を試験チューブに吸引した。 このステップを３回反復した。 ０．１ｍｌの１モル／ＬのＮａＯＨをチューブ内のフラッシュ液に添加し、液体を塩基性にした。 フラッシュ液の光学密度（ＯＤ）値をＵＶ−可視分光光度計ＵＶ−１２０−０２で、波長５４６ｎｍにおいて測定し、フラッシュ液中のフェノールレッドのレベル（μｇ／ｍｌ）をフェノールレッド検量線に基づいて計算した。 グループ間の比較をｔ−試験により実施した。

１．３． 試験結果 結果を表３に示す。

^* Ｐ＜０．０５；

^** Ｐ＜０．０１；

^*** Ｐ＜０．００１。

本発明の薬物の高用量および中間用量の両方ならびに陽性対照薬物が、分泌量を有意に増加させ、対照グループと比較して有意な差を示す（Ｐ＜０．０５、Ｐ＜０．０１、Ｐ＜０．００１）ことが表３からわかる。

１．４． 総括 上に記載の結果は、本発明の薬物には、フェノールレッドで測定した、マウスの痰の排泄量を有意に増加させる効果があることを示唆している。

２ キャピラリーで測定したラットにおける痰の量に対する効果２．１ 実験材料２．１．１ 薬物：
（１）試験する本発明の薬物、生薬６．２５ｇ／ｇ、Ｓｈｉｊｉａｚｈｕａｎｇ Ｙｉｌｉｎｇ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏ． Ｌｔｄ． により提供、ロット番号：０６０５０１。
（２）ＧＬＫＣＮＣ、伝統的漢方医学対照として、生薬１ｇ／丸剤（１丸剤につき散剤０．３ｇ）、Ｓｈａｎｘｉ Ｇｕｉｌｏｎｇ ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏ． 、Ｌｔｄ． 製造、認可番号：ＳＦＤＡ認可Ｎｏ． Ｚ−１１；製品ロット番号：０６０１１２；２００７年１２月まで有効。
（３）Ｍｕｃｏｓｏｌｖａｎ、西洋医学対照として、３０ｍｇ／錠剤、Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ Ｉｎｔ． Ｌｔｄ． Ｇｅｒｍａｎの製品、ロット番号：２０６３６２、流通ロット番号：０３０３０７。
２．１．２ 動物：
ＳＰＦ Ｗｉｓｔａｒマウス６０匹、平均体重１７４．３８±７．６４ｇのオスとメスで均等に構成、Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ、Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄａｍｙ ｏｆ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓより提供、ライセンス番号：ＳＣＸＫ（Ｊｉｎｇ）２０００−０００６。

２．２ 実験方法 ６０匹の健常なラットを以下の６つのグループにランダムに振り分けた：（１）蒸留水を投与するブランク対照グループ（１０ｍｌ／ｋｇ）；（２）Ｍｕｃｏｓｏｌｖａｎグループ（１１ｍｇ／ｋｇ）；（３）ＧＬＫＣＮＣグループ（生薬１．５ｇ／ｋｇ）；（４）本発明の薬物の低用量グループ（Ｌ−用量グループ、生薬２ｇ／ｋｇ）；（５）本発明の薬物の中間用量グループ（Ｍ−用量グループ、生薬４ｇ／ｋｇ）；（６）本発明の薬物の高用量グループ（Ｈ−用量グループ、生薬８ｇ／ｋｇ）。 実験では、３．５％抱水クロラール（１０ｍｌ／ｋｇ）を用いて、各ラットに腹腔内から麻酔をかけ、仰向けで水平に寝かせ、固定した。 頸部の皮膚に切り込みを入れ、気管を分離し、２つの軟骨の間の甲状腺軟骨の下縁の中央部位に、シリンジニードルを用いて開口部の穴を開けた。 長さ５ｃｍおよび内径０．８ｍｍの１本のガラスキャピラリーをガラスキャピラリーが管の内壁にちょうど接触するように、開口部を介して挿入した。 ガラスキャピラリーが痰で一杯になった時点で、すぐに別のものと取り換えた。 キャピラリーの痰の量を投与から１時間前に測定した、１時間後、十二指腸に１０ｍｌ／ｋｇの量の薬物を実験グループの動物に投与し、その一方で対照グループの動物には同量の生理的食塩水を投与した。 投与後１または２時間にわたり、すべての動物について、毎時排泄される痰の平均量を観測した。 投与１時間前の平均分泌量を正常値として用いて、グループ間の比較をｔ−試験により実施した。

２．３． 試験結果 結果表４に示す。

^* Ｐ＜０．０５、

^** Ｐ＜０．０１、

^*** Ｐ＜０．００１。

本発明の薬物の高用量、中間用量、および低用量ならびに陽性対照薬物は、ラット呼吸器からの分泌量を有意に増加させ、対照グループと比較して有意な差を示す（Ｐ＜０．０５、Ｐ＜０．０１、Ｐ＜０．００１）ことが表４からわかる。

２．４． 総括 上に記載の結果は、本発明の薬物には、ラットの呼吸器からの分泌量を有意に増加させる効果があることを示唆している。
３ 結論：
上に記載の２つの実験の研究は、本発明の薬物は、痰の消散効果があることを確認した。

試験例３ 本発明の薬物の呼吸困難緩和効果についての実験１ モルモットにおけるヒスタミンプラスアセチルコリン誘発による息切れに対する、本発明の薬物の呼吸困難緩和効果１．１ 実験材料１．１．１． 薬物：
（１）試験する本発明の薬物、生薬６．２５ｇ／ｇ、Ｓｈｉｊｉａｚｈｕａｎｇ Ｙｉｌｉｎｇ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏ． Ｌｔｄ． より提供、ロット番号：０６０５０１。
（２）ＧＬＫＣＮＣ、伝統的漢方医学対照として、生薬１ｇ／丸剤（散剤０．３ｇ）、Ｓｈａｎｘｉ Ｇｕｉｌｏｎｇ ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏ． 、Ｌｔｄ． 製、認可番号：ＳＦＤＡ認可Ｎｏ． Ｚ−１１；製品ロット番号：０６０１１２；２００７年１２月まで有効。
（３）アミノフィリン、西洋医学対照として、０．１ｇ／錠剤、Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｚｉｚｈｕ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏ． 、Ｌｔｄ製品、ロット番号：２００６１２０２。

１．１．２． 動物：
グレードＩの６０匹の白色純血種のモルモット、平均体重１９８．５５±６．３０ｇのオスとメスで均等に構成、Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｋｅｙｕ Ａｎｉｍａｌ Ｂｒｅｅｄｉｎｇ Ｃｅｎｔｅｒより提供、ライセンス番号：ＳＣＸＫ（Ｊｉｎｇ）２００２−０００５。

１．１．３ 試薬：
（１）アセチルコリンクロリド、１ｇ／ボトル、Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｒｅａｇｅｎｔｓ Ｃｏｍｐａｎｙ製、ロット番号：０６０２１１。
（２）リン酸ヒスタミン、５ｇ／ボトル、Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ、Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ製、製造Ｎｏ． １７０２。

１．１．４ 装置：
喘息誘発装置、空気圧縮機、ガラスネブライザー、および４Ｌ円錐形ガラス容器。
１．２ 実験方法 オスとメスで均等に構成される健常なモルモットを正確にスクリーニングした。 モルモットを４Ｌ円錐形のガラス容器内に個々に配置し、２％アセチルコリンクロリドおよび０．１％リン酸ヒスタミンを同量で混合した液体を用いて、４００ｍｍＨｇの圧力で２０秒間スプレーした。 スプレー後６分間の間の喘息痙攣の潜伏期について、モルモットを観測した（スプレー中止後、喘息痙攣が起こるまでの時間）。 １２０秒を上回る喘息痙攣の潜伏期を示すモルモットは、選択されない。 スクリーニングした６０匹のモルモットを動物１０匹を１グループとして、以下の６つのグループにランダムに振り分けた：（１）蒸留水を投与する対照グループ（５ｍｌ／ｋｇ）；（２）アミノフィリングループ（０．０５ｇ／ｋｇ）；（３）ＧＬＫＣＮＣグループ（生薬１．２ｇ／ｋｇ）；（４）本発明の薬物の低用量グループ（Ｌ−用量グループ、生薬１．７５ｇ／ｋｇ）；（５）本発明の薬物の中間用量グループ（Ｍ−用量グループ、生薬３．５ｇ／ｋｇ）；（６）本発明の薬物の高い用量グループ（Ｈ−用量グループ、生薬７ｇ／ｋｇ）。 試験グループの動物には、３日連続して５ｍｌ／ｋｇの量をｑ． ｄ． で胃内に投与し、その一方で対照グループの動物には、同じ量の生理的食塩水を投与した。 喘息誘発実験を最終の投与から３０分後に実施した。 モルモットを４Ｌ円錐形のガラス容器内に個々に配置し、２％アセチルコリンクロリドプラス０．１％リン酸ヒスタミンを同じ量で混合した液体を４００ｍｍＨｇの圧力で２０秒間スプレーした。 次いで、６分の間、喘息痙攣の潜伏期（喘息を誘発する潜伏期としても既知）、すなわち喘息痙攣が起こるまでの時間、およびスプレー中止後、モルモットが倒れるまでの時間についてモルモットを観測した。 ６分より長く持続する潜伏期は３６０秒としてカウントした。 実験の結果は、ｔ−試験によりグループ間で比較した。

１．３． 試験結果 結果を表５に示す。

^* Ｐ＜０．０５；

^** Ｐ＜０．０１；

^*** Ｐ＜０．００１。

本発明の薬物の中間用量および高用量の両方が、対照グループと比較して、潜伏期を有意に長引かせ、アセチルコリンクロリドプラスリン酸ヒスタミンにより誘発された喘息に罹ったモルモットが倒れるまでの時間を引き延ばすことができることが、表５からわかる（Ｐ＜０．０５、Ｐ＜０．０１、Ｐ＜０．００１）。 本発明の薬物の低用量は、対照グループと比較して、倒れる時間を有意に引き延ばすことができる（Ｐ＜０．０５）。

１．４． 総括 本発明の薬物は、アセチルコリンクロリドプラスリン酸ヒスタミンにより誘発されるモルモットの喘息に対して、有意な呼吸困難緩和効果を有することを上記の実験の結果が示している。

２． モルモットにおけるオボアルブミン誘発性アレルギー性気管支れん縮に対する効果２．１ 実験材料２．１．１． 薬物：
（１）試験する本発明の薬物、生薬６．２５ｇ／ｇ、Ｓｈｉｊｉａｚｈｕａｎｇ Ｙｉｌｉｎｇ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏ． Ｌｔｄ． より提供、ロット番号：０６０５０１、粉末にしたその抽出物を使用し、実験に必要な濃度に希釈した。
（２）ＧＬＫＣＮＣ、伝統的漢方医学対照として、生薬１ｇ／丸剤（１丸剤につき、散剤０．３ｇ）、Ｓｈａｎｘｉ Ｇｕｉｌｏｎｇ ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏ． 、Ｌｔｄ． 製造、認可番号：ＳＦＤＡ認可Ｎｏ． Ｚ−１１；製造期日：２００６年１月１日；製品ロット番号：０６０１１２；２００７年１２月まで有効。
（３）アミノフィリン、西洋医学対照として、０．１ｇ／錠剤、Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｚｉｚｈｕ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏ． 、Ｌｔｄ製品、ロット番号：２００６１２０２。

２．１．２． 動物：
グレードＩの白色純血種モルモット６０匹、平均体重２２２．３３±２０．０ｇのオスとメスで均等に構成、Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｋｅｙｕ Ａｎｉｍａｌ Ｂｒｅｅｄｉｎｇ Ｃｅｎｔｅｒより提供、ライセンス番号：ＳＣＸＫ（Ｊｉｎｇ）２００２−０００５。

２．１．３ 試薬：
（１）抗原：オボアルブミン、５０ｇ／ボトル、シグマ製、Ｃａｔ：Ａ５２５３、Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｘｉｎ Ｈｕｉ Ｚｅ Ａｏ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ． 、Ｌｔｄ． でパッキング。
（２）助剤：百日咳ワクチン、３００億単位／ｍｌ、２ｍｌ／アンプル、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ａｎｄ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔ製、ロット番号：０４−１。
２．１．４ 装置：
喘息誘発装置、空気圧縮機、ガラスネブライザー、および４Ｌ円錐形ガラス容器。

２．２ 実験方法 実験は２つのステージで実施した。 第一に、モルモットを感作した。 ６０匹の白色の、健常なおよび純血種のモルモットを選択し、これらそれぞれに対して、オボアルブミン４ｍｇ（４％オボアルブミンを含有する生理的食塩水０．１ｍｌ）を後肢に筋肉内注射し、同時に、感作のため、２×１０ ¹⁰細菌の百日咳ワクチンを腹腔内注射した。 注射から１４日後、感作した動物を実験に使用した。 第二に、感作から１０日目、動物１０匹を１グループとして、動物を以下の６つのグループにランダムに振り分けた：（１）蒸留水を投与するブランク対照グループ（５ｍｌ／ｋｇ）；（２）アミノフィリングループ（０．０５ｇ／ｋｇ）；（３）ＧＬＫＣＮＣグループ（生薬１．２ｇ／ｋｇ）；（４）本発明の薬物の低用量グループ（Ｌ−用量グループ、生薬１．７５ｇ／ｋｇ）；（５）本発明の薬物の中間用量グループ（Ｍ−用量グループ、生薬３．５ｇ／ｋｇ）；（６）本発明の薬物の高用量グループ（Ｈ−用量グループ、生薬７ｇ／ｋｇ）。 試験グループの動物には、５日連続して５ｍｌ／ｋｇの量をｑ． ｄ． で胃内に投与し、その一方でブランクグループ動物には、同じ量の生理的食塩水を投与した。 最終の投与から３０分後、モルモットを密閉した４Ｌ円錐形容器内に個々に配置し、５％オボアルブミン溶液を４００ｍｍＨｇの一定圧力で３０秒間スプレーした。 スプレーしたモルモットを観測することによって、喘息痙攣の潜伏期および６分の間（３６０秒）に呼吸困難、痙攣および卒倒ならびに死亡を示す動物の数を記録した。 ６分の間に、呼吸困難を起こさない、ならびに痙攣および卒倒を起こさない動物については、その潜伏期を３６０秒としてカウントした。 実験の結果をｔ−試験によりグループ間で比較した。 死亡した動物の数をＣｈｉ−ｓｑｕａｒｅ−試験で調べた。

２．３． 試験結果 結果を表６に示す

^* Ｐ＜０．０５；

^** Ｐ＜０．０１；

^*** Ｐ＜０．００１。

本発明の薬物の低用量、中間用量および高用量ならびに陽性対照薬物は、喘息潜伏期を長引かせ、呼吸困難、痙攣および卒倒の発生を引き延ばし、動物の死亡数を減少させることができ、対照グループと比較して有意な差を示す（Ｐ＜０．０５、Ｐ＜０．０１、Ｐ＜０．００１）ことが、表６からわかる。

２．４． 総括 本発明の薬物の低用量、中間用量および高用量は、アレルギー性気管支れん縮の潜伏期を長引かせ、呼吸困難、痙攣および卒倒の発生を引き延ばし、また死亡動物の数も減少させることができるので、したがって、オボアルブミン−誘発性アレルギーの気管支れん縮を有意に改善することを実験の結果が示している。

３ 結論：
本発明の薬物には、呼吸困難を緩和する効果があることを上に記載の２つの実験研究が示唆している。

試験例４ 本発明の薬物の抗炎症実験１． マウスにおけるキシレン誘発性耳腫脹に対する効果１．１． 実験材料１．１．１． 動物：
グレードＩＩのオスのＫｕｎｍｉｎｇマウス６０匹、平均体重１９．７７±０．９１ｇ、Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ、Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓの飼育場より提供、ライセンス数：ＳＣＸＫ（Ｊｉｎｇ）２０００−０００６。
１．１．２． 薬物：
（１）試験する本発明の薬物、生薬６．２５ｇ／ｇ、Ｓｈｉｊｉａｚｈｕａｎｇ Ｙｉｌｉｎｇ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏ． Ｌｔｄ． より提供、ロット数：０６０５０１。
（２）ＧＬＫＣＮＣ、伝統的漢方医学対照として、生薬１ｇ／丸剤（１丸剤につき散剤０．３ｇ）、Ｓｈａｎｘｉ Ｇｕｉｌｏｎｇ ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏ． 、Ｌｔｄ． 製造、認可番号：ＳＦＤＡ認可Ｎｏ． Ｚ−１１；製品ロット番号：０６０１１２；２００７年１２月まで有効。
（３）アスピリン腸溶性錠剤、西洋医学対照として、０．３ｇ／錠剤、Ｙａｎｔａｉ ｔｈｅ Ｓｅｃｏｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｆａｃｔｏｒｙ製造、ロット番号：０１１１０２。 蒸留水を用いて、上で記載の薬物を実験に必要な濃度に配合した。

１．２． 実験方法 ６０匹の健常なマウスを動物１０匹を１グループとして、以下の６つのグループにランダムに振り分けた：（１）生理的食塩水（２５ｍｌ／ｋｇ）を投与した対照グループ；（２）アスピリングループ（０．２ｇ／ｋｇ）；（３）ＧＬＫＣＮＣグループ（生薬２ｇ／ｋｇ）；（４）本発明の薬物の低用量グループ（Ｌ−用量グループ、生薬３ｇ／ｋｇ）；（５）本発明の薬物の中間用量グループ（Ｍ−用量グループ、生薬６ｇ／ｋｇ）；（６）本発明の薬物の高い用量グループ（Ｈ−用量グループ、生薬１２ｇ／ｋｇ）。 試験グループの動物には、３日連続して２５ｍｌ／ｋｇの量をｑ． ｄ． で胃内に投与し、その一方でブランクグループの動物には、同じ量の生理的食塩水を投与した。 ３日目、投与から３０分後、キシレン０．１ｍｌを各マウスの右耳に滴下した。 １５分後、動物を脱臼により屠殺した。 右と左の耳介の同じ部位にパンチャーで６ｍｍの穴を開けた。 右耳および左耳からの小片をそれぞれ電子てんびんで秤量した。 右の小片の質量から左の小片の質量を引き算することによって、各マウスに対して耳腫脹の程度を計算した。 グループ間の耳腫脹の程度の比較をｔ−試験により実施した。

１．３． 試験結果 結果を表７に示す。

^* Ｐ＜０．０５；

^** Ｐ＜０．０１；

^*** Ｐ＜０．００１。

表７に示した通り、対照グループのマウスの右耳は、厚さが増加して有意に膨張し、右耳および左耳からの小片の差は、明らかである。 本発明の薬物の高用量および中間用量ならびに陽性対照薬物では、マウスの右耳の腫脹は有意に減少し、対照グループと比較して有意な差を示しているので（Ｐ＜０．０５、Ｐ＜０．０１）、マウスのキシレン誘発性耳炎症を有意に阻害することができるが、本発明の薬物の低用量では、明らかな腫脹抑制効果を示さず、対照グループと比較して、有意な差を示さない。 実験の結果は、本発明の薬物の中間用量および高用量には、キシレン誘発性耳腫脹マウスモデルに対してより良い抗炎症効果があることを示している。

１．４． 総括 実験の結果は、本発明の薬物の中間用量および高用量が、キシレン誘発性耳腫脹マウスモデルについて有意な抗炎症効果を発揮することを示している。

２． ラット足底のカラゲナン誘発性腫脹に対する効果２．１． 実験材料２．１．１． 薬物：
（１）試験する本発明の薬物、生薬６．２５ｇ／ｇ、Ｓｈｉｊｉａｚｈｕａｎｇ Ｙｉｌｉｎｇ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏ． Ｌｔｄ． より提供、ロット番号：０６０５０１。
（２）ＧＬＫＣＮＣ、伝統的漢方医学対照として、生薬１ｇ／丸剤（散剤０．３ｇ）、Ｓｈａｎｘｉ Ｇｕｉｌｏｎｇ ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏ． 、Ｌｔｄ． 製造、認可番号：ＳＦＤＡ認可Ｎｏ． Ｚ−１１；製品ロット番号：０６０１１２；２００７年１２月まで有効。
（３）アスピリン腸溶性錠剤、西洋医学対照として、０．３ｇ／錠剤、Ｙａｎｔａｉ ｔｈｅ Ｓｅｃｏｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｆａｃｔｏｒｙ製造、ロット番号：０１１１０２。
上に記載の薬物を蒸留水を用いて、実験に必要な濃度に調製した。
（４）カラゲナン、ＳＩＧＭＡ製、ロット番号：１１７Ｈ０１５１、実験に必要な濃度に調製した。

２．１．２． 動物：
グレードＩの、オスの白色Ｗｉｓｔａｒラット６０匹、平均体重１５７．０５±８．４９ｇ、Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ、Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓより提供、ライセンス番号：ＳＣＸＫ（Ｊｉｎｇ）２０００−０００６。

２．２ 実験方法 ６０匹の健常なラットを以下の６つのグループにランダムに振り分けた：（１）蒸留水（１０ｍｌ／ｋｇ）を投与するブランク対照グループ；（２）アスピリングループ（１５０ｍｇ／ｋｇ）；（３）ＧＬＫＣＮＣグループ（生薬１．５ｇ／ｋｇ）；（４）本発明の薬物の低用量グループ（Ｌ−用量グループ、生薬２ｇ／ｋｇ）；（５）本発明の薬物の中間用量グループ（Ｍ−用量グループ、生薬４ｇ／ｋｇ）；（６）本発明の薬物の高用量グループ（Ｈ−用量グループ、生薬８ｇ／ｋｇ）。 キャピラリー増幅方法で測定した各動物の左後足の容積を投与前の値として使用した。 試験グループの動物には、３日連続して１０ｍｌ／ｍｇの量をｑ． ｄ． で胃内に投与し、その一方で、対照グループの動物には、同じ量の生理的食塩水を胃内に投与した。 最終の投与から３０分後、ラット左足底に１％カラゲナン０．０５ｍｌを皮下注射することによって、各ラットに炎症を起こした。 炎症から０．５、１、２、４、および６時間後、ラット左後足の容積（ｍｌ）を測定した。 炎症前後の左足の容積の差について、グループ間の比較をｔ−試験により実施した。

２．３． 試験結果 結果を表８に示す。

注：対照グループと比較して、

^* Ｐ＜０．０５；

^** Ｐ＜０．０１；

^*** Ｐ＜０．００１

表８に示した通り、本発明の薬物の低用量、中間用量および高用量ならびに陽性対照薬物は、炎症後０．５、１、２、４、および６時間の各時間点において、ラット足の腫脹の阻害に有意な効果があり、対照グループと比較して有意な差を示している（Ｐ＜０．０５、Ｐ＜０．０１、Ｐ＜０．００１）。

２．４． 総括 結果は、本発明の薬物の低用量、中間用量および高用量は、ラット足底のカラゲナン誘発性腫脹炎症を有意に阻害する効果を発揮することを示唆している。

３． ラットにおける、小止血栓誘発性肉芽腫に対する効果３．１． 実験材料３．１．１． 動物 グレードＩＩのＷｉｓｔａｒマウス６０匹、平均体重１３２．３７±６．３１ｇのオスとメスで均等に構成、Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ、Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄａｍｙ ｏｆ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓの飼育場より提供、ライセンス番号：ＳＣＸＫ（Ｊｉｎｇ）２０００−０００６。
３．１．２ 薬物（１）試験する本発明の薬物、生薬６．２５ｇ／ｇ、Ｓｈｉｊｉａｚｈｕａｎｇ Ｙｉｌｉｎｇ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏ． Ｌｔｄ． より提供、ロット番号：０６０５０１。
（２）ＧＬＫＣＮＣ、伝統的漢方医学対照として、生薬１ｇ／丸剤（散剤０．３ｇ）、Ｓｈａｎｘｉ Ｇｕｉｌｏｎｇ ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏ． 、Ｌｔｄ． 製造、認可番号：ＳＦＤＡ認可Ｎｏ． Ｚ−１１；ロット番号：０６０１１２。
（３）アスピリン腸溶性錠剤、西洋医学対照として、０．３ｇ／錠剤、Ｙａｎｔａｉ ｔｈｅ Ｓｅｃｏｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｆａｃｔｏｒｙ製造、ロット番号：０５１１０２。 蒸留水を用いて、薬物を実験に必要な濃度に調製した。
（４）アンピシリンナトリウム注射（ＡＳＩ）、０．５ｇ／ボトル、Ｎｏｒｔｈ Ｃｈｉｎａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏ． 、Ｌｔｄ． 製造、ロット番号：Ｆ０１１１２０７。

３．２ 実験方法 ６０匹の健常なラットを動物１０匹を１グループとして、以下の６つのグループにランダムに振り分けた：（１）蒸留水（１０ｍｌ／ｋｇ）を投与するブランク対照グループ；（２）アスピリングループ（１５０ｍｇ／ｋｇ）；（３）ＧＬＫＣＮＣグループ（生薬１．５ｇ／ｋｇ）；（４）本発明の薬物の低用量グループ（Ｌ−用量グループ、生薬２ｇ／ｋｇ）；（５）本発明の薬物の中間用量グループ（Ｍ−用量グループ、生薬４ｇ／ｋｇ）；（６）本発明の薬物の高用量グループ（Ｈ−用量グループ、生薬８ｇ／ｋｇ）。 実験では、３．５％抱水クロラールをラットに腹腔内投与し、腋の下の毛を剪毛し、背側の位置で固定した。 腋の皮膚を定期的に消毒し、次いで切り込みを入れて、切り込みを形成した。 この切り込みを介して、秤量した小さい止血栓（それぞれ約３０ｍｇの綿ボール）（オートクレーブで処理し、アンピシリンナトリウム１ｍｇ／０．１ｍｌを添加し、次いで５０℃でオーブン乾燥したもの）を左および右の腋にそれぞれ皮下移植した。 手術から２時間後投与を実施した。 試験グループの動物には、７日間連続して１０ｍｌ／ｋｇの量をｑ． ｄ． で胃内に投与し、その一方で、対照グループの動物には、同じ量の生理的食塩水を投与した。 投与から７日後、頸部脱臼により動物を屠殺した。 止血栓を取り除き、これらの湿式質量を電子てんびんで秤量し、次いでオーブン内に６０℃で１２時間置き、続いてその乾燥質量を秤量した。 炎症後の肉芽腫の平均の湿質量および乾燥質量をグループのそれぞれについて計算し、これから、綿ボールの元の質量を引き、ｔ−試験により、グループ間の比較を行った。

３．３． 試験結果 結果を表９に示す。

^* Ｐ＜０．０５；

^** Ｐ＜０．０１；

^*** Ｐ＜０．００１。

表９に示した通り、本発明の薬物の低用量、中間用量、および高用量ならびに陽性対照薬物は、ラットの止血栓誘発性肉芽腫の湿質量および乾燥質量を明らかに抑制することができ、対照グループと比較して有意な差を示す（Ｐ＜０．０５、Ｐ＜０．０１、Ｐ＜０．００１）。 結果は、本発明の薬物の低用量、中間用量、および高用量が、止血栓誘発性炎症ラットモデルの肉芽腫の阻害に対し明らかな効果を発揮することを示している。

３．４． 総括 実験結果は、本発明の薬物には、止血栓誘発性肉芽腫のラット炎症モデルに対してより良い抗炎症効果があることを示している。

４ 結論：
上に記載の３つの実験研究は、本発明の薬物が抗炎症効果を有することを確認している。

試験例５ 慢性気管支炎動物モデルに対する本発明の薬物の効果１ 実験材料１．１． 薬物：
（１）本発明の薬物、生薬６．２５ｇ／ｇ、Ｓｈｉｊｉａｚｈｕａｎｇ Ｙｉｌｉｎｇ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏ． Ｌｔｄ． より提供、ロット番号：０６０４０１、実験ではその抽出物の散剤の形態で使用した。
（２）ＧＬＫＣＮＣ、生薬１ｇ／丸剤（１丸剤につき散剤０．３ｇ）、Ｓｈａｎｘｉ Ｇｕｉｌｏｎｇ ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏ． 、Ｌｔｄ． 製造、認可番号：ＳＦＤＡ認可Ｎｏ． Ｚ−１１；製造期日：２００６年１月１日；製品ロット番号：０６０１１２；２００７年１２月まで有効。

１．２． 動物：
１００匹の健常なＳＰＦ ＫＭマウス、体重１８〜２０ｇのオスとメスで均等に構成、ｔｈｅ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ、Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓの飼育場より提供、ライセンス番号：ＳＣＸＫ（Ｊｉｎｇ）２００４−０００１。
１．３． 装置：
プラスチックボックス４０×３０×２２（ｃｍ）。
ＳＮ−６１１０ラジオイムノアッセイγカウンター（プローブ付）、Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｈｅｓｕｏ Ｒｉｈｕａｎ Ｐｈｏｔｏｅｌｅｃｔｒｉｃ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ Ｃｏ． 、Ｌｔｄ． 製造。

１．４． 試薬：
インターロイキン−６ラジオイムノアッセイキット（ＩＬ−６ＲＩＡキット）、製品ロット番号：ＩＦ ₁ ５０１、Ｔｉａｎｊｉｎ Ｎｉｎｅ Ｔｒｉｐｏｄｓ Ｍｅｄｉｃａｌ ＆ Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｃｏ． 、Ｌｔｄ． 製造

２ 実験方法 動物モデルの複製：実験前、マウスをプラスチックボックス（４０×３０×２２ｃｍ）内に均等に配置した。 各ボックスは換気孔を備え、三方管が接続されており、この管は、５０ｍｌシリンジの付いた一方の末端と、火のついた煙草の付いた他方の末端（煙草は、Ｑｉａｎ Ｍｅｎの、先端にフィルターのない煙草、Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｃｉｇａｒｅｔｔｅ Ｆａｃｔｏｒｙ製造）に通じていた。 この三方管を介して、煙草のガスをシリンジによりボックス内へと持続的にポンプで送り込んだ。 動物を１日２回、それぞれ午前と午後に毎回３０分間２本の煙草で燻した。 実験を６週間行った後、数匹のマウスをランダムに選択し、屠殺した。 屠殺したマウスの肺をすぐに取り除き、１０％ホルマリン中に固定し、ＨＥ−染色した。 第８週目に、炎症の気管支への浸潤、上皮細胞の解離などの病変を顕微鏡を用いた病理学的観察を介して発見した後、煙で燻したマウスを動物１５匹を１グループとして、６つのグループにランダムに振り分けた：（１）正常な対照グループ（蒸留水２５ｍｌ／ｋｇ）；（２）モデルグループ（蒸留水２５ｍｌ／ｋｇ＋煙で燻した）；（３）ＧＬＫＣＮＣ（生薬２ｇ／ｋｇ）陽性薬物＋煙で燻したグループ；（４）本発明の薬物（生薬３ｇ／ｋｇ）＋煙で燻したグループ；（５）本発明の薬物（生薬６ｇ／ｋｇ）＋煙で燻したグループ；（６）本発明の薬物（生薬１２ｇ／ｋｇ）＋煙で燻したグループ。 薬物グループの動物には、連続して４週間２５ｍｌ／ｋｇの量をｑ． ｄ． で胃内に投与した。 対照グループおよびモデルグループの動物には、同じ量の生理的食塩水を胃内に投与した。 投与中、薬物グループの動物は、合計１１週の間煙で燻した（上と同じ手順に従う）。 この期間の経過中、外見、栄養および死亡について動物を毎日観測した。 １１週後、グループの動物に眼窩静脈叢からの採血を施した。 各試料の血清を単離し、３０００ｒｐｍで５分間遠心分離した。 上清を収集して、インターロイキン−６を測定した。 インターロイキン−６のレベルを求めることで、マウス体内の炎症反応および抗感染の生体防御の働きを観測した。 次いで、動物を屠殺した。 肺をすぐに取り出し、１０％ホルマリン中に固定し、組織学的にスライスし、ＨＥ−染色し、病理学的変化について観測した。 （１）肺の中の気管支および細気管支の様々な部分の末梢へ、炎症細胞がどの程度浸潤したかについて、各スライスを観測し、３つの段階にランク付けした：スライス全体にわたり、炎症細胞が浸潤した気管支および細気管支の様々な部分の領域の割合および炎症細胞のカウントに従い、＋、＋＋および＋＋＋のランクに分けた。 （２）各スライスをすべての気管支の粘液膜からの上皮細胞の解離の程度について観察することによって評価し、−、＋および＋＋の３段階にランク付けした。 （３）各スライス上の１０の細気管支をランダムに観測し、各細気管支の管腔内の分泌および粘膜性上皮細胞の乳頭状過形成について、それぞれ−、＋、＋＋および＋＋＋に４段階評価した。 （４）粘膜性の壁の領域と、細気管支の総領域との比：マルチメディアカラー病理学イメージ解析システム（ＭＰＩＡＳ−５００）を用いて、固定した画像距離、同じ倍率で、各動物から採取した１０の細気管支を観察し、各細気管支の総領域および内腔の領域を描写し、細気管支の粘膜性の壁の領域を計算した。 したがって、細気管支の粘膜性上皮細胞の過形成の程度は、粘膜性の壁の領域と、細気管支の総領域との比の平均値により反映される。

３ 病理学的変化および統計的治療の採点法（１）慢性気管支炎モデルに対して、炎症の気管支粘膜への浸潤、気管支の分泌、気管支の上皮細胞の解離および粘膜性上皮細胞の過形成の指標について、病理学的観察を実施し、各指標を以下の通り半定量的に採点した：「−」は０点；「＋」は１点；「＋＋」は２点；「＋＋＋」は３点として採点した。
（２）実験結果は、ｔ−試験によりグループの平均値を対比較した。

４． 試験結果：
４．１． 外見および死亡 外見：空気、活動および栄養に関して、モデルグループの煙で燻された動物は、正常な対照グループよりもわずかに劣っており、試験グループおよびＧＬＫＣＮＣグループの動物は、正常な対照グループの動物との比較において有意な差はなかった。 煙での燻し、および煙での燻しプラス投与が経過する間に、個々のグループの動物の中で、死亡した動物はいなかった。

４．２． インターロイキン−６のレベルに対する効果 結果を表１０に示す。

^ΔΔΔ Ｐ＜０．００１；モデルグループと比較して、

^** Ｐ＜０．０１；

^*** Ｐ＜０．００１。

煙で燻したモデルグループのインターロイキン−６測定値は、対照グループの値より有意に高く（Ｐ＜０．００１）、煙で燻しプラス治療したグループのインターロイキン−６測定値は、煙で燻したモデルグループの値より有意に低い（Ｐ＜０．０１、Ｐ＜０．００１）ことが表１０からわかる。 これは、薬物グループのマウスにおけるインターロイキン−６のインビボのレベルが有意に減少したことを示しており、マウスの炎症反応および抗感染の生体防御の阻害を示唆している。

４．３ 病理形態学的変化光学顕微鏡による観察：
（１）正常な対照グループ：胃小窩の構造はきれいで、気管支および細気管支の様々な部分の粘膜性上皮組織は無傷であり、少しの量の分泌が気管内に存在し、気管支の粘膜性上皮組織の過形成は明らかではなく、気管支および小血管の周囲に浸潤する炎症細胞は少ししか存在しなかった。
（２）モデルグループ：胃小窩の構造は、適度にきれいであり、気管支および細気管支の様々な部分の末梢への炎症細胞の浸潤が異なる程度で存在し、気管支の粘膜性上皮組織が、様々な程度の変性、ネクローシスおよび解離を受けていることを観察することができ、さらなる分泌および出血が気管支の管腔内に存在し、気管支の一部の粘膜性上皮組織に、乳頭状過形成が生じていた。
（３）煙で燻した＋ＧＬＫＣＮＣグループ：胃小窩の構造は適度にきれいで、軽度の炎症細胞の浸潤が、気管支および細気管支の様々な部分の末梢において観察でき、気管支の粘膜性上皮組織は、モデルグループのものと比較して、有意に軽減された変性、ネクローシスおよび解離を受け、気管支の管腔内の分泌は、モデルグループのものと比較して有意に減少し、粘膜性上皮組織の乳頭状過形成は、モデルグループのものと比較して、有意に緩和していた。
（４）煙で燻した＋本発明の薬物グループ：胃小窩の構造は、適度にきれいで、気管支および細気管支の様々な部分における異なる程度の炎症は、モデルグループのものより有意に少なく、粘膜性上皮組織の解離は有意に軽減され、管腔内の分泌はモデルグループのものと比較して有意に減少し、上皮過形成もまた有意に減少していた。

^△△△ Ｐ＜０．００１；モデルグループと比較して、

^** Ｐ＜０．０５、

^*** Ｐ＜０．００１；「＋」は、肺において炎症細胞により浸潤された気管支および細気管支の様々な部分の領域が、スライスの総領域の１／３未満であり、炎症細胞はより少ないことを表す；「＋＋」は、肺において炎症細胞により浸潤された気管支および細気管支の様々な部分の領域が、スライスの総領域の１／３〜２／３の範囲であり、炎症細胞がより多いことを表す；「＋＋＋」は、炎症細胞により浸潤された気管支および細気管支の様々な部分の領域が、スライスの総領域の２／３より上であり、極めてより多くの炎症細胞が存在することを表す。

モデルグループにおける気管支粘膜への炎症細胞の浸潤の増加は、正常な対照グループと比較して有意な差を有する（Ｐ＜０．０１）ことが表１１からわかる。 個々の薬物グループへの炎症細胞の浸潤は、正常な対照グループと比較して有意に軽減され、有意な差を有する（Ｐ＜０．０５、Ｐ＜０．０１）。

^△△△ Ｐ＜０．００１；モデルグループと比較して、

^** Ｐ＜０．０５、

^** Ｐ＜０．０１、

^*** Ｐ＜０．００１；「−」は、正常な状態を表す；「＋」は、１／３未満の気管支の粘膜性上皮組織が気管支の管腔内で脱離し、全部で気管支の半分未満が解離していると判明したことを表す；「＋＋」は、１／３よりも多くの気管支の粘膜性上皮組織が気管支の管腔内で解離し、全部で気管支の半分を上回る組織が解離していると判明したことを表す。

モデルグループにおける気管支の上皮細胞の解離は、正常な対照グループのものよりも有意に重症であり（Ｐ＜０．００１）；個々の薬物グループにおける気管支の上皮細胞の解離は、モデルグループと比較して、有意に軽減している（Ｐ＜０．００１、Ｐ＜０．０１、Ｐ＜０．０５）ことが表１２からわかる。

^△△ Ｐ＜０．０１；モデルグループと比較して、

^*** Ｐ＜０．００１；「−」は、正常な状態を表す；「＋」は、気管支の管腔内の分泌量が、気管支の管腔の容積の１／３未満を占めることを表す；「＋＋」は、細気管支管腔内の分泌量が、気管支の管腔の容積の１／３〜２／３を占めることを表す；「＋＋＋」は、細気管支の管腔内の分泌量が、気管支の管腔の容積の２／３よりも上を占めることを表す。

モデルグループにおける気管支の管腔内の分泌量および出血量は、有意な差をもって（Ｐ＜０．００１）、正常な対照グループのものより多く、本発明の薬物の個々の用量グループにおける気管支の管腔内の分泌量は、モデルグループと比較して、有意な差をもって（Ｐ＜０．００１、Ｐ＜０．０１、Ｐ＜０．０５）、有意に減少していることが表１３からわかる。

^{ΔΔ Δ} Ｐ＜０．０１；モデルグループと比較して、

^** Ｐ＜０．０１、

^*** Ｐ＜０．００１；「−」は、正常な状態を表す；「＋」は、気管支内の粘膜性上皮組織の乳頭状過形成の領域が、気管支の総領域の１／３未満であり、低い程度であることを表す；「＋＋」は、気管支内の粘膜性上皮組織の乳頭状過形成の領域が、気管支の管腔の総領域の１／３および２／３に達し、より高い程度であることを表し、細気管支の管腔内の分泌量が、気管支の管腔の総領域の１／３〜２／３の間に達することを表す；「＋＋＋」は、気管支内の粘膜性上皮組織の乳頭状過形成の領域が、気管支の管腔の総領域の２／３を超え、非常に高い程度であることを表す。

モデルグループにおける気管支の粘膜性上皮組織の乳頭状過形成は、有意な差をもって（Ｐ＜０．００１）、正常な対照グループより高く、本発明の個々の薬物グループの気管支の粘膜性上皮組織の乳頭状過形成は、モデルグループと比較して、モデルグループのものより有意に低い（Ｐ＜０．０１、Ｐ＜０．００１）ことが表１４からわかる。

^△△△ Ｐ＜０．００１；モデルグループと比較して、

^*** Ｐ＜０．００１。

モデルグループにおいて細気管支粘膜の壁領域は、有意な差をもって（Ｐ＜０．００１）、対照グループのものより大きい；個々の薬物グループの細気管支粘膜の壁領域は、モデルグループのものより有意に少ない（Ｐ＜０．００１）ことが表１５からわかる。 これは、個々の用量グループにおける本発明の薬物のすべての用量が、細気管支の上皮細胞の過形成を軽減し、細気管支の管腔の領域を広げ、通気量を増加させることができることを示している。

５ 結論：
慢性気管支炎のマウスモデルは、煙草を単一の刺激として用いて確立された。 モデルグループと同じ条件下で、本発明の薬物の試験グループのマウスに、胃内投与を行った。 実験の結果は、本発明の薬物の試験グループのマウスの空気、活動および栄養は、モデルグループのものよりも優れ、対照グループのものと同様であったことを示している。 本発明の薬物は、マウスにおいてインターロイキン−６のインビボのレベルをかなり減少させ、これによって、マウスの身体の炎症反応および抗感染の生体防御を阻害した。 光顕的なレベルから、試験グループのマウスにおける、気管支の粘膜上の炎症の程度、気管支の分泌量、ならびに気管支の上皮細胞の解離および過形成は、有意な差をもって、モデルグループのものよりも、異なる程度に軽減した。

本発明の薬物は、マウスにおいて受動的喫煙により誘発された慢性気管支炎の様々な病理学的変化を改善できることが実験的に示され、これは、慢性気管支炎の治療における本発明の薬物の優れた効果を示唆している。

試験例６ 本発明の薬物の毒性についての調査１． 急性毒性試験（最大用量実験）
マウスの急性毒性の実験を本発明の薬物に関して実施した。 ＬＤ ₅₀の値が測定できなかったので、最大用量の実験を代わりに実施した。 マウスには、最大濃度での最大量を胃内に投与した。 結果は、最大用量である生薬２４３ｇ／ｋｇ（これは臨床用量の３７８倍（臨床用量は、生薬４５ｇ／人／日、人の体重は７０ｋｇとする））をマウスに投与した場合、有害反応または死亡を観測しなかったことを示している。 動物は、実験の終わりに解剖されたが、各器官の異常は裸眼では観測されなかった。

２． 長期間毒性試験 １２０匹のＷｉｓｔａｒラットを実験に使用し、ラットを対照グループと本発明の薬物の試験グループに振り分け、生薬８ｇ、１６ｇ／ｋｇ、および３２ｇ／ｋｇの用量、すなわちそれぞれ、臨床用量（生薬４５ｇ／人／日）の１２．５倍、２５倍および５０倍を連続して２４週間胃内に投与した。 本発明の薬物の影響に関して、動物の様々な徴候を観測した。 本発明の薬物の用量は、体重、飼料消費、末梢血液像、心電図、および器官指標について明らかな影響はないこと、投与から１２週間後の低用量グループのラットのＰＴ、ならびに投与から２４週間後の高用量、中間用量および低用量のグループのＰＴは、対照グループのものより低いが、これは、測定値の低い標準偏差による統計的な差であり、生理学的に無意味であること、回復期間中（４週間の薬物の使用中止）、試験グループのＰＴおよびＡＰＴＴは、対照グループのものと比較して、有意な差はないことを実験結果は示している。 血液生化学の１２の指標に対して測定した値の中で、投与から１２週間後の低用量グループのＧＬＵ値は、対照グループ（Ｐ＜０．０５）のものより高いが、依然として、生理学的指標に対して正常値の範囲内に入る。 投与から１２週間後の、低用量グループのＡＳＴ、ＴＰおよびＣＲＥ値ならびに中間用量グループのＡＬＰおよびＴＰ値は、対照グループのものより低いが（Ｐ＜０．０５）、これらの指標は、依然として、それぞれの正常値の範囲内に入る。 投与から２４週間後、中間用量および高用量グループのＡＳＴ、ＴＰおよびＣＲＥ値は、対照グループのものより低く（Ｐ＜０．０５、Ｐ＜０．０１）、高用量グループのＡＬＢおよびＢＵＮ値は、対照グループのものより低いが（Ｐ＜０．０５、Ｐ＜０．０１）、これら指標は、依然として、それぞれの正常値の範囲内に入る。 回復期間中、低用量グループのＢｉＬｉ値は、対照グループのものより高く（Ｐ＜０．０５）、低用量グループのＣＲＥおよびＢＵＮ値は、対照グループのものより低いが（Ｐ＜０．０５、Ｐ＜０．０１）、これら指標は、依然としてそれぞれの正常値の範囲内に入る。 他の指標については、対照グループと比較して有意な差はない。 病理学的検査において、本発明の薬物に起因する器官の明らかな病理学的変化は発見されていない。

３． 総括 急性毒性試験（最大用量実験）および長期毒性試験において、試験グループの様々な指標は、対照グループと比較して有意な差を示していない。 病理学的検査において、本発明の薬物に起因する器官の明らかな病理学的変化は発見されていない。

上記を考慮して、本発明の薬物は、咳を止め、痰を消散し、呼吸困難を緩和し、および炎症を食い止める効果があり、ならびに気管支炎に対して優れた治療上の効力があり、特に慢性気管支炎に対して優良な効力がある。