一种高保湿促润肤与重建的儿童乳牙牙髓干细胞面膜
阅读：164发布：2020-05-13
专利汇可以提供一种高保湿促润肤与重建的儿童乳牙牙髓干细胞面膜专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种高保湿促润肤与重建的儿童乳牙 牙髓 干细胞面膜，包括：N-壳聚糖1-3份，甘油6-15份，聚乙烯醇4-10份，黄原胶10-25份，透明质酸0.05-0.5份，苯 氧 乙醇 0.4-1份，羟苯甲酯0.3-0.5份，木瓜蛋白酶3-6份，维生素C 30-50份，β- 磷酸 甘油钠10-20份，釉基蛋白10-30份， 杨梅素 10-20份， 碱 性 成 纤维 细胞 生长因子10-30份， 水 分1500-2000份，乳牙牙髓干细胞。根据本发明，通过在面膜中加入儿童牙髓的牙髓干细胞，可以使面部的细胞抗凋亡、抗炎、抗瘢痕以及促面部血管生成，有利于面部组织的修复，而且高保湿。，下面是一种高保湿促润肤与重建的儿童乳牙牙髓干细胞面膜专利的具体信息内容。
1.一种高保湿促润肤与重建的儿童乳牙牙髓干细胞面膜，包括面膜液、面膜营养液及面膜基布,其特征在于，所述面膜液包括如下重量份原料：
N-壳聚糖1-3份，甘油6-15份，聚乙烯醇4-10份，黄原胶10-25份，透明质酸0.05-0.5份，苯氧乙醇0.4-1份，羟苯甲酯0.3-0.5份，木瓜蛋白酶3-6份，维生素C 30-50份，β-磷酸甘油钠10-20份，釉基蛋白10-30份，杨梅素10-20份，碱性成纤维细胞生长因子10-30份，水1500-
2000份，乳牙牙髓干细胞，所述乳牙牙髓干细胞占所述面膜总重量的3％-4.1％。
2.如权利要求1所述的高保湿促润肤与重建的儿童乳牙牙髓干细胞面膜，其特征在于，所述面膜液包括如下重量份原料：
N-壳聚糖2份，甘油10份，聚乙烯醇7份，黄原胶21份，透明质酸0.25份，苯氧乙醇0.6份，羟苯甲酯0.45份，木瓜蛋白酶5份，维生素C 38份，β-磷酸甘油钠18份，釉基蛋白26份，杨梅素18份，碱性成纤维细胞生长因子26份，水分1800份，所述乳牙牙髓干细胞占所述面膜总重量的4.1％。
3.如权利要求1所述的高保湿促润肤与重建的儿童乳牙牙髓干细胞面膜，其特征在于，面膜营养液包括如下重量份原料：葡萄糖0.3-1份，谷氨酰胺0.06-0.2份，胰岛素0.05-0.3份，转铁蛋白5-15份，硒酸钠0.1-0.25份，水500-1500份。
4.如权利要求1所述的高保湿促润肤与重建的儿童乳牙牙髓干细胞面膜，其特征在于，所述面膜基布为纳米纤维素纤维的面膜基布。
一种高保湿促润肤与重建的儿童乳牙牙髓干细胞面膜
技术领域
[0001] 本发明涉及干细胞面膜技术领域，特别涉及一种高保湿促润肤与重建的儿童乳牙牙髓干细胞面膜。
背景技术
[0002] 面膜的原理，就是利用覆盖在脸部的短暂时间，暂时隔离外界的空气与污染，提高肌肤温度，皮肤的毛孔扩张，促进汗腺分泌与新陈代谢，使肌肤的含氧量上升，有利于肌肤排除表皮细胞新陈代谢的产物和累积的油脂类物质，面膜中的水分渗入表皮的角质层，皮肤变得柔软，肌肤自然光亮有弹性。但是现在的面膜的起到功效基本类似，比如保湿、美白及抗氧化等功能，基本只是一些营养物质或者一些成分进入到脸部的表皮细胞对细胞进行一个滋润的作用，不能从脸部的真皮细胞的根本上来对皮肤进行一个改善的作用，这样对脸部皮肤只起到一个短暂的效果，而且不能减缓或者阻止面部皮肤细胞的衰老，一般脸部有炎症或者破损的时候是不适合贴敷一般性面膜。
[0003] 有鉴于此，实有必要开发一种高保湿促润肤与重建的儿童乳牙牙髓干细胞面膜，用以解决上述问题。
发明内容
[0004] 针对现有技术中存在的不足之处，本发明的目的是提供一种高保湿促润肤与重建的儿童乳牙牙髓干细胞面膜，通过在面膜中加入儿童牙髓的牙髓干细胞，可以使面部的细胞抗凋亡、抗炎、抗瘢痕以及促面部血管生成，有利于面部组织的修复，而且高保湿。为了实现根据本发明的上述目的和其他优点，提供了一种高保湿促润肤与重建的儿童乳牙牙髓干细胞面膜，包括面膜液、面膜营养液及面膜基布，所述面膜液包括如下重量份原料：
[0005] N-壳聚糖1-3份，甘油6-15份，聚乙烯醇4-10份，黄原胶10-25份，透明质酸0.05-0.5份，苯氧乙醇0.4-1份，羟苯甲酯0.3-0.5份，木瓜蛋白酶3-6份，维生素C 30-50份，β-磷酸甘油钠10-20份，釉基蛋白10-30份，杨梅素10-20份，碱性成纤维细胞生长因子10-30份，水1500-2000份，乳牙牙髓干细胞，所述乳牙牙髓干细胞占所述面膜总重量的3％-4.1％。
[0006] 优选的，所述面膜基布为纳米纤维素纤维的面膜基布。
[0007] 优选的，所述面膜液包括如下重量份原料：
[0008] N-壳聚糖2份，甘油10份，聚乙烯醇7份，黄原胶21份，透明质酸0.25份，苯氧乙醇0.6份，羟苯甲酯0.45份，木瓜蛋白酶5份，维生素C 38份，β-磷酸甘油钠18份，釉基蛋白26份，杨梅素18份，碱性成纤维细胞生长因子26份，水分1800份，所述乳牙牙髓干细胞占所述面膜总重量的4.1％，牙髓干细胞可促进成纤维细胞增殖迁移以及合成胶原，也就是牙髓干细胞或牙髓干细胞来源的环境递质可促进皮肤恢复活力，可以治理老化的皮肤，同时牙髓干细胞可分泌生长因子和细胞外基质蛋白，增强成纤细胞的功能，促进伤口的愈合，因为牙髓干细胞具有较高的透明质酸，可加快伤口的愈合。
[0009] 优选的，面膜营养液包括如下重量份原料：葡萄糖0.3-1份，谷氨酰胺0.06-0.2份，胰岛素0.05-0.3份，转铁蛋白5-15份，硒酸钠0.1-0.25份，水500-1500份，葡萄糖、谷氨酰胺、胰岛素、转铁蛋白及硒酸钠添加在面膜液体中，给乳牙牙髓干细胞提供生存环境和营养，这样可以保证乳牙牙髓干细胞的活性，当面膜在处于保存环境中时乳牙牙髓干细胞的活性时最低的，所需要营养不多，但当面膜敷在脸部皮肤上时，这是人体皮肤的温度会给面膜加温，此时乳牙牙髓干细胞会处在37℃环境温度下，活性会大大提高，此时所需要的营养成分高。
[0010] 优选的，所述面膜基布为纳米纤维素纤维的面膜基布，纳米纤维素纤维的面膜基布能高度保湿，给乳牙牙髓干细胞提供湿度的环境，这样结合的环境才能保证乳牙牙髓干细胞在贴敷时进行高效增殖和进行分泌，对脸部的衰老的皮肤、炎症以及受损细胞进行细胞的更替或者恢复。
[0011] 本申请牙髓干细胞面膜适合保存于0-2摄氏度温度条件下，而且该面膜在生产出厂以后，要在3-4天内使用，保证在面膜内的干细胞活跃性最强的时间段使用该面膜，所得到的效果更好。当面膜敷在脸上时，在人体正常的皮肤37℃温度下，牙髓干细胞的活性开始激活，所以当在釉基蛋白、杨梅素及碱性成纤维细胞生长因子促进下，牙髓干细胞可以更快的增殖，因为牙髓干细胞具有间充质干细胞的特征，具有旁分泌功能，从而形成利于组织再生或者修复的微环境，当脸部神经或者血管受损时，此时牙髓干细胞在周围壳分泌神经生长因子、脑源性神经营养因子、神经营养因子-3、睫状神经营养因子、神经胶质细胞源性神经营养因子等多种神经营养因子，支持神经干细胞增殖、存活及轴突延长，且表达VEGF促进血管再生，分泌细胞外基质的有效成分，如层黏连蛋白、纤维黏连蛋白及IV型胶原以促进细胞粘附与增殖，从而促进神经受损处轴突的生长，而且牙髓干细胞产生的外泌体可抑制6-羟基多巴胺介导的神经元凋亡，起到保护面部神经的作用。牙髓干细胞通过SHED-CM可使小胶质细胞或巨噬细胞的表型由促炎性M1型转变成抗炎性M2型，抑制CD4+T细胞增殖及其促炎症细胞因子的释放，可以治疗脸部皮肤的炎症，也更有效的加快脸部炎症的愈合。
[0012] 本发明与现有技术相比，其有益效果是：所述面膜基布为纳米纤维素纤维的面膜基布可以使所述面膜基布保持高保湿，给牙髓干细胞一个高的湿度环境，有利于牙髓干细胞的存活，通过在面膜中加入儿童牙髓的牙髓干细胞，可以使面部的细胞抗凋亡、抗炎、抗瘢痕以及促面部血管生成，有利于面部组织的修复。附图说明
[0013] 图1为拔除的健康乳牙；
[0014] 图2为制备牙髓干细胞的原代细胞生长情况；
[0015] 图3为制备牙髓干细胞的第三代细胞生长情况；
[0016] 图4为制备牙髓干细胞的第十代细胞生长情况。
具体实施方式
[0017] 下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
[0018] 实验试剂与实验设备如下：
[0019]
[0020]
[0021] 一、乳牙牙髓的干细胞的收集和培养
[0022] 1、对象：选取6～l0岁健康儿童无牙体牙髓疾病的滞留乳牙。
[0023] 2、制备方法：
[0024] (1)在充分消毒牙体周围组织后拔牙，于预冷含高倍双抗仅一MEM培养基中保存备用，4h内原代取材。
[0025] (2)参照Gronthos等的方法，在超静台中用PBS液反复冲洗乳牙，拔髓针拔取牙髓组织，剪碎，3mg/mlcollagenasetypeI、4mg/mldispase按1：1比列混合，于37℃水浴中消化牙髓组织1h。
[0026] (3)消化液经1000r/min速度离心5min，弃上清，加培养液混匀、吹打，经70μm滤网过滤、细胞悬液接种于25cm2培养瓶，加适量含双抗(100U/mL青霉素、100U/mL链霉素)和20％胎牛血清的α-MEM培养液。
[0028] 3、结果
[0029] 参照图1-4，选取6-10岁健康儿童的滞留乳牙，拔取牙髓组织、消化过滤得到细胞悬液，离心、弃上清液、加含双抗和20％胎牛血清的α-MEM培养液，移入培养瓶。约6-8小时后细胞开始贴壁，5小时后少数细胞增生活跃，呈克隆样声场。倒置显微镜观察见细胞呈现多形性，有短梭形、扁平形状、多角形和椭圆形等形状。约9-15小时贴壁细胞生长可完全覆盖瓶底。单层细胞覆盖瓶底后按照1:3的比例传代，大约4-5小时传代依次。随着细胞的增殖，传代次数的增多，细胞的多形态逐渐减低，并较多地呈现出纤维样的形态，细胞体积变化大，颜色深，细胞大小和形态趋近一致，可得到用消化法可以从乳牙牙髓组织中分离培养得到的克隆形成能力强的牙髓干细胞，这样得到的牙髓干细胞有利于添加进面膜中保持强的增殖性能以及活跃性。
[0030] 所述面膜液包括如下重量份原料：N-壳聚糖1-3份，甘油6-15份，聚乙烯醇4-10份，黄原胶10-25份，透明质酸0.05-0.5份，苯氧乙醇0.4-1份，羟苯甲酯0.3-0.5份，木瓜蛋白酶3-6份，维生素C 30-50份，β-磷酸甘油钠10-20份，釉基蛋白10-30份，杨梅素10-20份，碱性成纤维细胞生长因子10-30份，水分1500-2000份，乳牙牙髓干细胞，营养液，所述营养液如下重量份原料：葡萄糖0.3-1份，谷氨酰胺0.06-0.2份，胰岛素0.05-0.3份，转铁蛋白5-15份，硒酸钠0.1-0.25份，水，500-1500份，其中，釉基蛋白、杨梅素及碱性成纤维细胞生长因子可以促进牙髓干细胞的增值，乳牙牙髓干细胞，所述乳牙牙髓干细胞占所述面膜总重量的3％-4.1％。
[0031] 如下每个实施例将分成三组，每一组均为三个人，每组人包括依次是脸部正常、脸部发炎症状及脸部有伤口的人，每组的脸部正常、脸部发炎症状及脸部有伤口的人数均为6个人，将每一组实验得到的均取其平均数值，然后维持敷本申请述乳牙牙髓干细胞面膜一个月，然后分别统计每个实施例的各组保湿度情况、细胞增殖及活性情况、伤口的愈合情况及炎症的恢复情况，其中在实验过程中，可以通过湿度检测仪来检测每个人脸部在贴敷完面膜后的湿度情况；在敷面膜的前，可以提取一定量的面膜液，放置于光学显微镜下，观察记录牙髓干细胞的数量和活性，待敷完面膜后，再提取一定量的面膜液放于光学显微镜观察记录牙髓干细胞的数量和活性；脸部伤口愈合和脸部炎症恢复的变化，可以通过肉眼观察每天的脸部情况，最后记录脸部完全恢复的具体天数。
[0032] 对比例1方案：包括面膜基布，其中所述牙髓干细胞面膜包括如下重量份原料：N-壳聚糖2克，甘油10克，聚乙烯醇7克，黄原胶21克，透明质酸0.25克，苯氧乙醇0.6克，羟苯甲酯0.45克，木瓜蛋白酶5克，维生素C 38克，β-磷酸甘油钠18克，釉基蛋白26克，杨梅素18克，碱性成纤维细胞生长因子26克，水分1800克，所述乳牙牙髓干细胞占所述面膜总重量的75克，营养液，所述面膜基布为纳米纤维素纤维的面膜基布，得到如下表1的数据。
[0033] 表1对比例1数据
[0034]
[0035]
[0036] 正常面膜在敷完后的保湿效果在4小时后达到最高值，在4小时后开始下降，而本申请面膜在敷完后可以保持在8个小时左右的保湿时间，保湿的效果更佳；一般脸部上伤口愈合时间在一个星期左右，此时在正常情况是不适合敷面膜，但是可以敷本申请的面膜，通过使用后的数据可以看出，敷本申请面膜后脸部伤口的愈合时间缩短为3，5天到4.5天左右，大大的加快脸部伤口的愈合；特别是脸上有炎症时，一般情况下也是不适合贴敷面膜，而且自愈的时间一般是在半个月左右，但是贴敷本申请面膜后，脸上炎症自愈时间缩短在9天到10天的时间左右；一般干细胞面膜中的干细胞的增殖率是在50％左右，而本申请的面膜中牙髓干细胞的增殖率保持95％左右，比一般的干细胞面膜增值率高，体现牙髓干细胞的活性高。
[0037] 一实施例1方案：所述牙髓干细胞面膜包括如下重量份原料：N-壳聚糖1克，甘油6克，聚乙烯醇4克，黄原胶10克，透明质酸0.05克，苯氧乙醇0.4克，羟苯甲酯0.3克，木瓜蛋白酶3克，维生素C 30克，β-磷酸甘油钠10克，釉基蛋白10克，杨梅素10克，碱性成纤维细胞生长因子10克，水分1500克，所述乳牙牙髓干细胞占所述面膜总重量的61克，营养液，所述面膜基布为纳米纤维素纤维的面膜基布，得到如下表2的数据。
[0038] 表2实施例1数据
[0039]
[0040] 正常面膜在敷完后的保湿效果在4小时后达到最高值，在4小时后开始下降，而本申请面膜在敷完后可以保持在7个小时左右的保湿时间，保湿的效果更佳；一般脸部上伤口愈合时间在一个星期左右，此时在正常情况是不适合敷面膜，但是可以敷本申请的面膜，通过使用后的数据可以看出，敷本申请面膜后脸部伤口的愈合时间缩短为5天到5.5天左右，大大的加快脸部伤口的愈合；特别是脸上有炎症时，一般情况下也是不适合贴敷面膜，而且自愈的时间一般是在半个月左右，但是贴敷本申请面膜后，脸上炎症自愈时间缩短在11天到12天的时间左右；一般干细胞面膜中的干细胞的增殖率是在50％左右，而本申请的面膜中牙髓干细胞的增殖率保持82％左右，比一般的干细胞面膜增值率高，体现牙髓干细胞的活性高。
[0041] 一实施例2方案：所述牙髓干细胞面膜包括如下重量份原料：N-壳聚糖3克，甘油15克，聚乙烯醇10克，黄原胶25克，透明质酸0.5克，苯氧乙醇1克，羟苯甲酯0.5克，木瓜蛋白酶6克，维生素C50克，β-磷酸甘油钠20克，釉基蛋白30克，杨梅素20克，碱性成纤维细胞生长因子30克，水分2000克，所述乳牙牙髓干细胞占所述面膜总重量的84克，营养液，所述面膜基布为纳米纤维素纤维的面膜基布，得到如下表3的数据。
[0042] 表3实施例2数据
[0043]
[0044]
[0045] 正常面膜在敷完后的保湿效果在4小时后达到最高值，在4小时后开始下降，而本申请面膜在敷完后可以保持在6.4个小时左右的保湿时间，保湿的效果更佳；一般脸部上伤口愈合时间在一个星期左右，此时在正常情况是不适合敷面膜，但是可以敷本申请的面膜，通过使用后的数据可以看出，敷本申请面膜后脸部伤口的愈合时间缩短为5.5天到6天左右，大大的加快脸部伤口的愈合；特别是脸上有炎症时，一般情况下也是不适合贴敷面膜，而且自愈的时间一般是在半个月左右，但是贴敷本申请面膜后，脸上炎症自愈时间缩短在12天到13天的时间左右；一般干细胞面膜中的干细胞的增殖率是在50％左右，而本申请的面膜中牙髓干细胞的增殖率保持76％左右，比一般的干细胞面膜增值率高，体现牙髓干细胞的活性高。
[0046] 一实施例3方案：其中所述牙髓干细胞面膜包括如下重量份原料：N-壳聚糖2克，甘油10克，聚乙烯醇7克，黄原胶21克，透明质酸0.25克，苯氧乙醇0.6克，羟苯甲酯0.45克，木瓜蛋白酶5克，维生素C 38克，β-磷酸甘油钠18克，釉基蛋白26克，杨梅素18克，碱性成纤维细胞生长因子26克，水分1800克，所述乳牙牙髓干细胞占所述面膜总重量的75克，营养液，得到如下表4的数据。
[0047] 表4实施例3数据
[0048]
[0049] 实施例3相对对比例1其他成分都相同，但是实施例3没有选纳米纤维素纤维的面膜基布，选择正常的面膜基布，通过实验数据可得实施例3的面膜保湿时间在6.2小时左右，而对比例1的保湿时间在7各小时左右，由此可看出选择使用纳米纤维素纤维的面膜基布保湿效果更好。
[0050] 一实施例4方案：其中所述牙髓干细胞面膜包括如下重量份原料：N-壳聚糖2克，甘油10克，聚乙烯醇7克，黄原胶21克，透明质酸0.25克，苯氧乙醇0.6克，羟苯甲酯0.45克，木瓜蛋白酶5克，维生素C 38克，β-磷酸甘油钠18克，釉基蛋白26克，杨梅素18克，碱性成纤维细胞生长因子26克，水分1800克，所述乳牙牙髓干细胞占所述面膜总重量的75克，所述面膜基布为纳米纤维素纤维的面膜基布，得到如下表5的数据。
[0051] 表5实施例4数据
[0052]
[0053]
[0054] 实施例4相对对比例1的其他成分相同，但是实施例4中不包含营养液，根据实验数据可得出，实施例4中不包含营养液时，面膜中的乳牙牙髓干细胞的增殖率相对于对比例1的大大减少，从而影响了伤口愈合时间及炎症愈合时间，使其时间相对比与对比例1要增加，所以可得出添加营养液可大大增高乳牙牙髓干细胞的增殖率，提高面膜的使用效果。
[0055] 一实施例5方案：其中所述牙髓干细胞面膜包括如下重量份原料：N-壳聚糖2克，甘油10克，聚乙烯醇7克，黄原胶21克，透明质酸0.25克，苯氧乙醇0.6克，羟苯甲酯0.45克，木瓜蛋白酶5克，维生素C 38克，β-磷酸甘油钠18克，釉基蛋白26克，杨梅素18克，碱性成纤维细胞生长因子26克，水分1800克，所述乳牙牙髓干细胞重量59克，营养液，所述面膜基布为纳米纤维素纤维的面膜基布，得到如下表6的数据。
[0056] 表6实施例5数据
[0057]
[0058]
[0059] 实施例5相对于对比例1来说其他成分相同，只是实施例5中乳牙牙髓干细胞占所述面膜总比重药小于对比例1，由表6中数据可以看出，伤口愈合时间及炎症愈合时间都要比对比例1中的时间要长一点，所以看出对比例1中的牙牙髓干细胞占所述面膜总比重更为合理。
[0060] 一实施例6方案：其中所述牙髓干细胞面膜包括如下重量份原料：壳N-壳聚糖2克，甘油10克，聚乙烯醇7克，黄原胶21克，透明质酸0.25克，苯氧乙醇0.6克，羟苯甲酯0.45克，木瓜蛋白酶5克，维生素C 38克，β-磷酸甘油钠18克，釉基蛋白26克，杨梅素18克，碱性成纤维细胞生长因子26克，水分1800克，所述乳牙牙髓干细胞重量81克，营养液，所述面膜基布为纳米纤维素纤维的面膜基布，得到如下表7的数据。
[0061] 表7实施例6数据
[0062]
[0063] 实施例6相对于对比例1来说其他成分相同，只是实施例6中乳牙牙髓干细胞占所述面膜总比重要大于对比例1，由表7中数据可以看出，实施例6的伤口愈合时间及炎症愈合时间都要比对比例1中的时间要长一点，因为乳牙牙髓干细胞占比大，后续贴敷的时候回再进行增殖，到后期乳牙牙髓干细胞数量太多，需要要营养更多，而且数量过多会细胞之间会形成彼此抑制的效果，所得到的效果反而更不佳，所以可以看出对比例1中的牙牙髓干细胞占所述面膜总比重更为合理。
[0064] 由表2-7中数据可以看出，实施1至实施例6的面膜的伤口愈合时间、炎症愈合时间及保湿时间都要比一般的伤口愈合时间、炎症愈合时间都要短，而保湿时间都要更长，但从表1-表7中的数据来看，对比例1的伤口愈合时间及炎症愈合时间要比实施例1及实施例6的时间要短，保湿时间更长，所以相比较而言对比例1的方案为更优的方案。
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