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使用伊帕瑞林刺激胃肠系统动力的方法

阅读：589发布：2024-02-23

专利汇可以提供使用伊帕瑞林刺激胃肠系统动力的方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本发明提供了在有此需要之对象中刺激胃肠系统动力的方法，其中所述对象患有胃肠系统疾病 (即，失调症、病症、症状或者药物或手术引起的功能障碍)，该方法通过向对象施用生长激素释放肽(ghrelin)模拟物或其可药用的盐。本发明还提供了通过将生长激素释放肽模拟物与轻泻剂、H2受体拮抗剂、血清素受体激动剂(单一或混合)、抗酸药、阿片类拮抗剂、质子泵抑制剂、促胃动素受体激动剂、多巴胺拮抗剂、胆碱能激动剂、胆碱酯酶抑制剂、生长激素抑制素、奥曲肽(octreotide)或其任意组合共施用来治疗胃肠疾病的方法。，下面是使用伊帕瑞林刺激胃肠系统动力的方法专利的具体信息内容。

权利要求

1.在有此需要之对象中治疗胃肠疾病的方法，其包括向所述对象施用治疗有效量之如下结构式I所示的生长激素释放肽模拟化合物或者其可药用之盐、溶剂化物或水合物：
2.权利要求1的方法，其中所述对象正在使用阿片类物质用于手术后疼痛控制。
3.权利要求1的方法，其中所述对象正在使用阿片类物质用于慢性疼痛控制。
4.权利要求3的方法，其中所述阿片类物质选自吗啡、可待因、羟考酮、氢吗啡酮、氢可酮、美沙酮和芬太尼。
5.权利要求1的方法，其中所述方法还包括向所述对象施用治疗有效量的轻泻剂、外周作用阿片类拮抗剂、质子泵抑制剂、H2拮抗剂、抗酸药、单一或混合的血清素受体激动剂、促胃动素受体激动剂、多巴胺拮抗剂或胆碱酯酶抑制剂、或者其组合。
6.权利要求1的方法，其中所述对象是人。
7.权利要求1的方法，其中所述生长激素释放肽模拟物以实现有效血浆浓度的方式施用。
8.权利要求1的方法，其中所述胃肠疾病是由阿片类物质引起的胃肠功能障碍。
9.权利要求1的方法，其中所述胃肠疾病是由吗啡引起的便秘。
10.权利要求1的方法，其中所述胃肠疾病是由阿片类物质引起的便秘、与糖尿病相关之胃轻瘫或特发性胃轻瘫、胃食管反流病、肠易激综合征、便秘或手术后肠梗阻。
11.在有此需要之对象中刺激胃肠系统动力的方法，其包括向所述对象施用治疗有效量之如下结构式I所示的生长激素释放肽模拟化合物或者其可药用之盐、溶剂化物或水合物：
12.权利要求11的方法，其中所述对象是人。
13.权利要求11的方法，其中所述对象患有由阿片类物质引起的便秘、与糖尿病相关之胃轻瘫、胃食管反流病、肠易激综合征、便秘或手术后肠梗阻。
14.权利要求11的方法，其中所述生长激素释放肽模拟物以实现有效血浆浓度的方式施用。
15.在有此需要之对象中治疗选自由阿片类物质引起之便秘、与糖尿病相关之胃轻瘫或特发性胃轻瘫、胃食管反流病、肠易激综合征、便秘和手术后肠梗阻之病症或症状的方法，所述方法包括向所述对象施用治疗有效量之如下结构式I所示的生长激素释放肽模拟化合物或者其可药用之盐、溶剂化物或水合物：
16.权利要求15的方法，其中所述对象是人。
17.权利要求15的方法，其中所述生长激素释放肽模拟物以实现有效血浆浓度的方式施用。
18.权利要求15的方法，其中所述方法还包括施用治疗有效量之轻泻剂、外周作用阿片类拮抗剂、质子泵抑制剂、H2拮抗剂、抗酸药、血清素受体激动剂、促胃动素受体激动剂、多巴胺拮抗剂或胆碱酯酶抑制剂。

说明书全文

使用伊帕瑞林刺激胃肠系统动力的方法

[0001] 相关申请

[0002] 本申请主张2007年12月21日提交的美国临时申请61/008,828的权益，其全部内容通过引用并入本文中。

[0003] 援引加入

[0004] 无论是否分别进一步通过引用并入本文，本文引用之所有参考文献(包括专利、专利申请和公布之专利申请)其全部内容均通过引用并入本文中。

背景技术

[0005] 胃肠(gastrointestinal，GI)动力是经由消化系统输送营养物之协调的神经肌肉进程。C.Scarpignato，“Pharmacological Stimulation ofGastrointestinal Motility：Where We Are And Where Are We Going？”Dig.Dis.，15：112(1997)。可参与胃食管反流病、胃轻瘫(例如，糖尿病性和手术后的胃轻瘫)、肠易激综合征、肠梗阻和便秘(例如，饮食性或阿片类物质引起的便秘)之胃肠系统动力削弱(即，减缓)是工业化国家最大的医疗保健负担之一。S.D.Feighner等，“Receptor for MotilinIdentified in the Human Gastrointestinal System，”Science，284：2184-2188(1999年6月25日)。

[0006] 据报道，生长激素促分泌剂(growth hormone secretagogue，GHS)例如生长激素释放肽(ghrelin)及其模拟物刺激胃肠动力。然而，已经研究之特定GHS化合物具有不允许其在临床上用于治疗胃肠动力的药代动力学性质。具体而言，生长激素释放肽是于胃中产生的28氨基酸肽。生长激素释放肽的生物活性形式(即，酰化形式)的血清半衰期仅有9～13分钟(Akamizu等(2004)European Journal of Endocrinology150：447-55)。此外，已针对合成的GHS化合物(例如GHRP-6)进行了GI动力治疗能力的评估。与生长激素释放肽类似，GHRP-6具有短的血清半衰期，这阻碍了此化合物用于治疗GI动力失调症。Bowers等证明GHRP-6之血清半衰期只有20分钟((1992)Journal of ClinicalEndocrinology and Metabolism 74：292-8)。

[0007] 鉴于上述情况，有效刺激胃肠系统动力之有效的生理方式是亟需的并且将成为本领域中的进展。发明内容

[0008] 本发明涉及在有此需要之对象中刺激胃肠系统动力的方法，其中所述对象患有胃肠系统疾病(即，失调症、病症、症状或者药物或手术引起的功能障碍)。该方法包括向有此需要之对象施用治疗有效量的生长激素释放肽模拟化合物或其可药用的盐、水合物或溶剂化物。在一个优选实施方案中，生长激素释放肽模拟物是式I(见下文)所示之伊帕瑞林(ipamorelin)、或其可药用之盐、水合物或溶剂化物。

[0009] 如上所述，已证实生长激素释放肽及生长激素释放肽模拟化合物具有受限之血清半衰期，因此不适用于治疗GI动力失调症。与生长激素释放肽和GHRP-6相比，伊帕瑞林在人中的血清半衰期经证明为3～6.5小时。因此，本发明提供了用于刺激胃肠系统动力的方法及治疗有效之组合物。

[0010] 刺激胃肠动力被用于在有此需要之对象中治疗由阿片类物质引起的胃肠功能障碍(例如，吗啡引起之肠道功能障碍或便秘)的方法中，该方法包括施用治疗有效量之生长激素释放肽模拟化合物或其可药用之盐、水合物或溶剂化物。所述对象可正在使用阿片物质或阿片类物质进行手术后疼痛控制或慢性疼痛控制。阿片物质和阿片类物质的实例包括吗啡、可待因、羟考酮、氢吗啡酮、氢可酮(hydrocodone)、美沙酮(methadone)、芬太尼(fentanyl)以及其与抗炎剂(例如对乙酰氨基酚或阿司匹林)的组合。优选的生长激素释放肽模拟物为如式I所示的伊帕瑞林、或其可药用之盐、水合物或溶剂化物。

[0011] 刺激胃肠动力可用于在有此需要之对象中治疗胃轻瘫，其通过施用治疗有效量之生长激素释放肽模拟化合物来实现。优选之生长激素释放肽模拟物为如式I所示的伊帕瑞林、或其可药用之盐、水合物、衍生物、酸、酰胺或溶剂化物。

[0012] 在另一实施方案中，刺激胃肠动力被用于在有此需要之对象中治疗胃食管反流病(gastroesophageal reflux disease，GERD)之方法中，该方法包括施用治疗有效量的生长激素释放肽模拟化合物。在一个具体实施方案中，所述生长激素释放肽模拟物为如式I所示之伊帕瑞林、或其可药用之盐、水合物或溶剂化物。在一个具体实施方案中，所述胃食管反流病为夜间胃食管反流病。

[0013] 本发明还提供了在有此需要之对象中刺激胃肠动力以治疗肠易激综合征(irritable bowel syndrome，IBS)的方法，其通过施用治疗有效量的生长激素释放肽模拟化合物来实现。优选之生长激素释放肽模拟物为如式I所示之伊帕瑞林、或其可药用之盐、水合物或溶剂化物。所述肠易激综合征可为便秘型肠易激综合征或便秘/腹泻交替型肠易激综合征。

[0014] 本发明还提供了在有此需要之对象中刺激胃肠动力以治疗便秘的方法，其通过施用治疗有效量之生长激素释放肽模拟化合物来实现。优选之生长激素释放肽模拟物为如式I所示之伊帕瑞林、或其可药用之盐、水合物或溶剂化物。

[0015] 在一个实施方案中，刺激胃肠动力被用于在有此需要之对象中治疗由手术引起或相关的胃肠功能障碍(例如手术后肠梗阻)的方法中，该方法包括施用治疗有效量之生长激素释放肽模拟化合物。在一个具体实施方案中，所述生长激素释放肽模拟物为如式I所示之伊帕瑞林、或其可药用之盐、水合物或溶剂化物。

[0016] 优选之生长激素释放肽模拟物为如式I所示之伊帕瑞林(α-甲基丙氨酸-L-组氨酸-D-β-(2-萘基)-丙氨酸-D-苯丙氨酸-L-赖氨酰胺或H-Aib-His-β-(2-萘基)-D-Ala-D-Phe-Lys-NH2)：

[0017]

[0018] 或其可药用之盐、水合物或溶剂化物。

[0019] 须注意的是，在本公开内容以及特别地在权利要求和/或各段落中，如“包含”、“含有”等表述可具有美国专利法中规定的涵义，例如，它们可意指“包括”、“涵盖”等；如“基本上由...组成”等表述可具有美国专利法中规定的涵义，例如，它们允许未明确记载的要素，但排除了现有技术中存在的要素或影响本发明基本或新颖性特征的要素。

[0020] 下文之详细说明公开及涵盖了这些及其它实施方案，或者其是显而易见的。附图说明

[0021] 以下详细说明通过实例给出，而非旨在将本发明限制于所述具体实施方案，其可结合附图进行最佳理解。

[0022] 图1显示，在手术后肠梗阻之大鼠模型中，经口施用10和100mg/kg伊帕瑞林的胃动力学效力(gastrokinetic efficacy)。

[0023] 图2显示，在手术后肠梗阻之大鼠模型中，静脉内施用0.1、0.25或1.0mg/kg伊帕瑞林的效力。

[0024] 图3显示，在手术后肠梗阻之大鼠模型中，静脉内施用0.01、0.03及0.1mg/kg伊帕瑞林的效力。

[0025] 图4表明，在施用4mg/kg吗啡之大鼠中，生长激素释放肽并未加速胃排空；施用盐水或生长激素释放肽之大鼠显示相同的酚红吸光度组平均值。

[0026] 图5显示，与用10mg/kg RC-1139处理手术后肠梗阻之大鼠模型相比，静脉内施用0.25、1.0、2.5mg/kg伊帕瑞林(图中示为26-0161)的促胃动力学效力。

[0027] 图6显示，以0.01、0.03及0.06mg/kg剂量进行伊帕瑞林之单一剂量静脉内施用，逆转了人中由吗啡引起的胃肠动力减慢。

[0028] 图7显示比较多种生长激素释放肽模拟物对胃排空之影响的柱状图。

[0029] 图8显示比较多种生长激素释放肽模拟物对通过小肠的胃肠动力之影响的柱状图。

[0030] 图9显示比较多种生长激素释放肽模拟物对胃排空之影响的柱状图。

[0031] 图10显示比较多种生长激素释放肽模拟物对通过小肠的胃肠动力之影响的柱状图(距幽门括约肌的远端)。

[0032] 图11显示比较多种生长激素释放肽模拟物对通过小肠的胃肠动力之影响的柱状图(距幽门括约肌的近端)。

[0033] 图12A-D显示，在手术后肠梗阻之大鼠模型中，腹部手术对结肠运送时间、粪便颗粒量、摄食量及体重增加的影响。

[0034] 图13显示，与载体及对照(GHRP-6)相比，以0.1及1mg/kg伊帕瑞林单一剂量施用后，腹部手术后之大鼠的结肠运送时间。

[0035] 图14显示，与载体及标准对照(GHRP-6)相比，以0.1及1mg/kg伊帕瑞林单一剂量施用后，腹部手术后12、24或48小时之大鼠的累积粪便颗粒量。

[0036] 图15显示，与载体及标准对照(GHRP-6)相比，以0.1及1mg/kg伊帕瑞林单一剂量施用后，腹部手术后3～48小时中不同时间点之大鼠的累积摄食量。

[0037] 图16显示，与载体及标准对照(GHRP-6)相比，以0.1及1mg/kg伊帕瑞林单一剂量施用对腹部手术后24及48小时之大鼠体重的影响。

[0038] 图17显示，与载体相比，多次给药0.01、0.1及1.0mg/kg伊帕瑞林后，腹部手术后之大鼠的结肠运送时间。

[0039] 图18显示，与载体相比，多次给药0.01、0.1及1.0mg/kg伊帕瑞林对腹部手术后48小时期间之大鼠粪便颗粒量的影响。

[0040] 图19显示，与载体相比，多次给药0.01、0.1及1.0mg/kg伊帕瑞林对腹部手术后48小时期间之大鼠累积摄食量的影响。

[0041] 图20显示，与载体相比，多次给药0.01、0.1及1.0mg/kg伊帕瑞林对腹部手术后48小时期间之大鼠体重增加的影响。

具体实施方式

[0042] 本发明涉及在有此需要之对象中刺激胃肠系统动力的方法，其中所述对象患有胃肠系统疾病(即，失调症或病症或由药物或手术引起之功能障碍)。在一些实施方案中，所述疾病包括由阿片类物质引起之胃肠功能障碍(例如由吗啡引起之胃肠功能障碍)、便秘、与糖尿病相关之胃轻瘫、胃食管反流病(GERD)、肠易激综合征(IBS)或由药物或手术引起之胃肠功能障碍(例如手术后肠梗阻)。该方法包括向有此需要之对象施用治疗有效量之生长激素释放肽模拟化合物或其可药用之盐、水合物或溶剂化物。生长激素释放肽模拟物优选为如式I所示之伊帕瑞林、或其可药用之盐、水合物或溶剂化物。

[0043] 生长激素释放肽模拟物

[0044] 本文所用之术语“生长激素释放肽模拟物”或“生长激素释放肽模拟化合物”或“生长激素释放肽激动剂”与“生长激素促分泌剂”或“生长激素促分泌剂化合物”等旧有名词同义。生长激素释放肽模拟物或生长激素释放肽激动剂是指促进(引发或增强)具有与生长激素释放肽受体(GRLN)结合特征之至少一种功能的物质(例如，分子、化合物)。GRLN受体在先前文献中被报道为GHS1a受体，这反映出GRLN受体之第一个已知特质——分泌生长激素。生长激素释放肽受体主要于下丘脑及脑垂体中表达。这些受体于脑垂体中的活化引发生长激素的分泌。除了引发分泌生长激素之外，新近之研究已证实生长激素释放肽模拟物可增加食欲及体重。在一个具体实施方案中，生长激素释放肽模拟物是美国专利No.5,767,085、6,303,620、6,576,648、5,977,178、6,566,337、6,083,908、6,274,584 和
6,919,315中所述的那些，其全部内容均通过引用并入本文中。

[0045] 随后，GRLN受体于脑垂体及下丘脑以外的机体部位(例如胃肠道及血管)中被鉴定出。生长激素释放肽或生长激素释放肽模拟物与这些受体的结合产生除了释放生长激素以外的药理活性。具体而言，该另外的药理活性是增加促胃肠动力活性以及改变心脏功能。因此，原先所命名的“生长激素促分泌剂化合物”现在更普遍性地被称为“生长激素释放肽模拟物(或激动剂)”，以表示由结合其受体(GRLN)产生的更广泛的生理作用谱。

[0046] 大多数被鉴定出之生长激素释放肽模拟物具有不同主链长度之核心肽主链(三肽、四肽、五肽及六肽以及大环化合物)。还预期不同分子结构将对生长激素释放肽受体产生不同亲和力，因此，可产生不同的药理结果。无法由因及果地确定在一般类群中，相比于其它分子，哪个分子可产生不寻常的活性或效力。这通常从具有不寻常结果或发现的科学研究中显现。

[0047] 具有GRLN受体激动剂活性的化合物可以任何适当方法鉴定及评估活性。例如，GRLN受体激动剂与GRLN受体的结合亲和性可使用受体结合测定法测定；生长激素刺激作用可如美国专利No.6,919,315所述予以评估，其通过引用并入本文中。生长激素释放肽模拟物可从任何来源获得，包括任何商业来源。

[0048] 在本发明的情形中，优选的生长激素释放肽模拟物为如结构式I所示之伊帕瑞林(α-甲基丙氨酸-L-组氨酸-D-β-(2-萘基)-丙氨酸-D-苯丙氨酸-L-赖氨酰胺或H-Aib-His-β-(2-萘基)-D-Ala-D-Phe-Lys-NH2)：

[0049]

[0050] 或其可药用之盐、水合物、酸、酰胺、结晶物或溶剂化物。

[0051] 本发明部分基于本发明人的惊人发现，即某些特定的生长激素释放肽模拟物(特别是伊帕瑞林)对于胃肠动力具有出乎意料地有效及强力刺激作用。尽管伊帕瑞林是强效的生长激素促分泌剂，但其与GRLN受体之结合亲和性要比许多其它报导之生长激素释放肽模拟物弱约2～3个对数值。

[0052] 共施用物质

[0053] 本发明的另一方面涉及将一种或多种物质与生长激素释放肽模拟物(例如，伊帕瑞林)共施用以治疗胃肠失调症、病症或症状。共施用可意指作为单一药物组合物一起施用两种或更多种物质，或者在短时间内(例如，彼此在数秒之内至彼此在一天之内)施用两种或更多种物质。外周作用的阿片类拮抗剂

[0054] 有可能施用不跨越血脑屏障的外周作用阿片类物质受体拮抗剂(例如甲基那曲酮(methylnaltrexone)、纳洛酮(naloxone)、那曲酮(naltrexone)、纳美芬(nalmefene)和TM阿维莫潘(alvimopan)(ENTEREG ))来治疗由阿片类物质引起的副作用而不引起阿片类物质戒断症状或抵消镇痛作用(Holzer P.，“Opioids and OpioidReceptors in the Enteric Nervous System：From a Problem in OpioidAnalgesia to a Possible New Prokinetic Therapy in Humans，”NeurosciLett.，361(1-3)：192-5(2004)，其通过引用并入本文中)。
本文所用之“外周作用阿片类拮抗剂”是指作用于外周的阿片类拮抗剂(即，非中枢性，例如不作用于中枢神经系统)。

[0055] 质子泵抑制剂

[0056] 在另一方面中，本发明提供了共施用生长激素释放肽模拟物(例如，伊帕瑞林)与质子泵抑制剂以治疗胃肠症状或疾病。质子泵抑制剂通过特异性抑制胃壁细胞分泌+ +表面的HK-ATP酶系统来抑制胃酸分泌(产生酸的最后步骤)。质子泵抑制剂包括苯并咪唑化合物，例如埃索美拉唑(esomeprazole) 奥美拉唑(omeprazole)
TM TM
(PRILOSEC )、兰索拉唑(lansoprazole)(PREVACID )、雷贝拉唑 (rabeprazole)TM TM
(ACIPHEX )与潘多拉唑(pantoprazole)(Protonix )。这些质子泵抑制剂在经取代之苯并咪唑与吡啶环之间含有亚磺酰基。在中性pH下，埃索美拉唑、奥美拉唑、兰索拉唑和潘多拉唑是不具有抑制活性的化学稳定、脂溶性弱碱。这些不带电荷的弱碱从血液到达腔壁细胞，扩散至分泌小管中，此时所述药物被质子化并因而被捕捉。所述质子化物质重排形+ +
成次磺酸和次磺酰胺，后者能与HK-ATP酶之巯基相互作用。每一分子酶与两个抑制剂分+ +
子发生完全抑制作用。认为质子泵抑制剂作用之特异性源于：a)HK-ATP酶之选择性分布；
b)需要酸性条件来催化反应性抑制剂的产生；以及c)在酸性小管内捕捉质子化药物和阳离子性次磺酰胺使其邻接靶标酶。Goodman & Gilman的The PharmacologicalBasis of Therapeutics，第9版，第901-915页(1996)，其通过引用并入本文中。

[0057] H2受体拮抗剂

[0058] 在又一方面中，本发明提供了共施用生长激素释放肽模拟物(例如，伊帕瑞林)与H2受体拮抗剂以治疗胃肠症状或疾病。H2受体拮抗剂竞争性地抑制组胺与H2受体之相互作用。H2受体拮抗剂具有高度的选择性，对H1受体完全或几乎无作用。尽管H2受体存在于许多组织(包括血管及支气管平滑肌)中，但H2受体拮抗剂明显地很少干预胃酸分TM泌以外的生理功能。H2受体拮抗剂包括但不限于：尼扎替丁(nizatidine)(AXID )、雷尼TM TM TM
替丁(ranitidine)(ZANTAC 和TRITEC )、法莫替丁(famotidine)(PEPCID AC )和西咪TM
替丁(cimetidine)(TAGAMET )。Goodman & Gilman的The Pharmacological Basis of Therapeutics，第9版，第901-915页(1996)，其通过引用并入本文中。H2受体拮抗剂抑制由组胺、其它H2激动剂、胃泌素(gastrin)引起的胃酸分泌以及较低程度地抑制由毒蕈碱激动剂(muscarinic agonist)引起的胃酸分泌。H2受体拮抗剂还抑制基础的及夜间的酸分泌。

[0059] 抗酸药

[0060] 本发明的另一方面提供了共施用生长激素释放肽模拟物(例如，伊帕瑞林)与抗酸药以治疗胃肠症状或疾病的方法。例如，本发明化合物可与抗酸药共施用以中和胃酸。例TM TM如，氢氧化铝和氢氧化镁(MAALOX 和MYLANTA )中和胃之酸性，导致胃与十二指肠球部的pH增加。

[0061] 轻泻剂

[0062] 本发明还提供了共施用生长激素释放肽模拟物(例如，伊帕瑞林)与轻泻剂以治疗胃肠症状或疾病的方法。轻泻剂有多种形式，包括例如，液体、片剂、栓剂、粉末剂、颗粒剂、胶囊剂、口香糖、巧克力口味薄脆饼和焦糖。轻泻剂之基本类型为大便成形轻泻剂(bulk-forminglaxative)、润滑轻泻剂、大便软化剂(亦称为软化轻泻剂)和刺激性轻泻剂。

[0063] 大便成形轻泻剂含有经过消化道而不被消化的物质，例如纤维素和欧车前(psyllium)。在肠道中，这些物质吸收液体而膨胀，使粪便变软、量大且易于通过。量大之粪便继而刺激肠道运动。此类轻泻剂包括例如与等品牌。

[0064] 润滑轻泻剂包括例如矿物油。矿物油是最广泛使用的润滑轻泻剂。经口服后，所述油被覆于粪便上。这使得粪便潮湿、柔软并易于通过。润滑轻泻剂常用于需要避免用力之患者(例如，腹部手术后的患者)。

[0065] 大便软化剂(软化轻泻剂)通过增加粪便的水分含量使其变软且易于通过。此类轻泻剂并非真正地刺激肠运动，但使得无需用力而进行肠运动成为可能。例如，大便软化剂最好用于刚动过手术因而需要避免用力的人中以防止便秘。大便软化剂包括例如多库酯钠(docusatesodium)( 等)、多库酯钙(docusatecalcium)( DC ) 与多库酯钾 (docusatepotassium)
( )。血清素受体(5-HT)激动剂(单一或混合)

[0066] 本发明还提供了共施用生长激素释放肽模拟物(例如，伊帕瑞林)与血清素受体激动剂(例如5-HT4激动剂)以治疗胃肠症状或疾病的方法。所述血清素激动剂可为单一或混合之5-HT受体亚型，或与其它中枢神经系统受体(例如多巴胺)混合。

[0067] 5-HT4激动剂使肠道内含物加速通过结肠并减少对肠神经刺激之敏感性。可与本发明化合物组合使用之适当血清素激动剂包括但不限于：萝芙素(rauwolscine)、育亨宾(yohimbine)、胃复安(metoclopramide)、普芦卡必利(prucalopride)与替加色罗(tegaserod)( )。Spiller R.，“Serotonergic Modulating Drugs forFunctionalGastrointestinal Diseases，”Br J Clin Pharmacol.54：11-20(2002)以及美国专利No.6,413,988，其通过引用并入本文中。

[0068] 促胃动素(motilin)受体激动剂

[0069] 本发明还提供了共施用生长激素释放肽模拟物(例如，伊帕瑞林)与促胃动素受体激动剂以治疗胃肠症状或疾病的方法。促胃动素是在多个物种的胃肠系统中产生的22氨基酸肽。促胃动素在狗、兔和人的胃组织中以及兔的结肠中引起平滑肌收缩。除了局部胃肠组织之外，促胃动素及其受体也在其它组织中发现。

[0070] 除了促胃动素之外，还存在引发胃肠排空并且为促胃动素受体之激动剂的另一些物质。这些制剂之一为红霉素抗生素。研究显示，红霉素引发与促胃动素本身相当的生物响应，并因此可用于治疗例如慢性特发性假性肠梗阻与胃轻瘫等病症。Weber，F.等，The American Journal ofGastroenterology，88：4，485-90(1993)，其通过引用并入本文中。

[0071] 多巴胺拮抗剂

[0072] 本发明另一方面提供了共施用生长激素释放肽模拟物(例如，伊帕瑞林)与多巴胺拮抗剂以治疗胃肠症状或疾病的方法。

[0073] 多巴胺拮抗剂是结合但不活化多巴胺受体从而阻断多巴胺或外源激动剂之作用的药物。这类药物包括但不限于：胃复安、多潘立酮(domperidone)、氨磺必利(amisulpride)、氯波必利(clebopride)、莫沙帕明(mosapramine)、奈莫必利(nemonapride)、瑞莫必利(remoxipride)、利培酮(risperidone)、舒必利(sulpiride)、舒托必利(sultopride)和齐拉西酮(ziprasidone)。

[0074] 胆碱酯酶抑制剂

[0075] 本发明还提供了共施用生长激素释放肽模拟物(例如，伊帕瑞林)与胆碱酯酶抑制剂以治疗胃肠症状或疾病的方法。术语“胆碱酯酶抑制剂”是指通过抑制被胆碱酯酶破坏或被胆碱酯酶水解而延长乙酰胆碱作用的一种或多种制剂。胆碱酯酶抑制剂也称为乙酰胆碱酯酶抑制剂。胆碱酯酶抑制剂的实例包括但不限于：腾喜龙(edrophonium)、新斯的明(neostigmine)、甲基硫酸新斯的明(neostigmine methylsulfate)、吡斯的明(pyridostigmine)、他克林(tacrine)和毒扁豆碱(physostigmine)、安贝氯铵(ambenonium chloride)( )、氯化腾喜龙新斯的明( )、吡斯的明(piridogstimina)(
)、溴地斯的明(distigmine bromide)、依斯的明(eptastigmine)、加兰他敏(galanthamine)、醋克利定(axeclidine)、溴化乙酰胆碱、氯化乙酰胆碱、乙乳胆铵萘二磺酸盐(aclatoniumnapadisilate)、苄吡溴铵(benzpyrinium bromide)、卡巴胆碱(carbachol)、卡普氯铵(carponium chloride)、地美溴铵(cemecarium bromide)、右泛醇(dexpanthenol)、二异丙对氧磷(diisopropyl paraoxon)、氯化乙膦硫胆碱(echothiophate chloride)、依舍立定(eseridine)、呋索碘铵(furtrethonium)、氯醋甲胆碱(methacholine chloride)、毒蕈碱(muscarine)、奥普碘铵(oxapropanium iodide)和呫诺美林(xanomeline)。

[0076] 立体化学性

[0077] 本文所述的许多化合物可具有一个或多个手性中心，因此可以不同对映体形式存在。需要时，手性碳可以星号(＊)标示。在本发明的化学式中，当与手性碳之键合标示为直线时，应理解手性碳之(R)及(S)构型以及由此的两种对映体及其混合物均涵盖于该式中。如本领域所使用地，在需要具体指明有关手性碳之绝对构型时，与该手性碳键合的键之一可标示为楔形(在平面上方与原子键合)，而另一键可标示为一系列或楔形平行短线(在平面下方与原子键合)。可使用Cahn-Inglod-Prelog系统来指定手性碳的(R)或(S)构型。

[0078] 当本发明化合物具有两个或更多个手性碳时，其可具有多于两个光学异构体并且可以非对映异构体形式存在。例如，当存在两个手性碳时，该化合物可具有多达4个光学异构体以及两对对映体((S，S)/(R，R)和(R，S)/(S，R))。对映体对(例如，(S，S)/(R，R))彼此互为镜像立体异构体。彼此不是镜像的立体异构体(例如，(S，S)和(R，S))为非对映异构体。非对映异构体对可利用本领域技术人员已知的方法(例如层析法或结晶法)进行分离；各对对映体中的单个对映体也可如上述进行分离。本发明包含所述化合物的每种非对映体及其混合物。

[0079] 筛选

[0080] 应理解，生长激素释放肽模拟化合物可例如通过使用适当方法筛选分子文库或分子集合来鉴定出。目的化合物的另一来源是可包含许多不同结构分子种类的组合文库。可使用组合文库来鉴定先导化合物(leadcompound)或对先前所鉴定之先导化合物进行优化。可通过公知的组合化学方法来制备所述文库，并利用合适的方法进行筛选。

[0081] 治疗胃肠疾病的方法

[0082] 本发明提供了在有此需要之对象中刺激胃肠系统动力的方法，其中所述对象患有胃肠系统疾病(即，失调症、病症、症状或者由药物或手术引起之功能障碍)。所述方法包括向有此需要之对象施用治疗有效量的生长激素释放肽模拟化合物或其可药用之盐、水合物或溶剂化物。所述生长激素释放肽模拟物是式I所示之伊帕瑞林、或其可药用之盐、水合物或溶剂化物。

[0083] 本文所用的术语“胃肠疾病”是指导致胃肠功能削弱的任何疾病、失调症、症状或功能障碍。例如，所述胃肠疾病可以是由阿片类物质引起的胃肠功能障碍(例如由吗啡引起的便秘)、手术后肠梗阻或胃轻瘫。

[0084] 便秘

[0085] 在另一方面中，本发明提供了通过施用治疗有效量之生长激素释放肽模拟物(例如，伊帕瑞林)来治疗便秘的方法。便秘是人具有不舒适或不频繁肠运动的状况。患有便秘的人产生难以排出的坚硬粪便。患便秘的人也会感觉直肠未完全排空。急性便秘突然且显著地发作。另一方面，慢性便秘隐伏地开始发作并持续数月或数年。

[0086] 本发明治疗便秘的方法还可包括共施用生长激素释放肽模拟物(例如，伊帕瑞林)以及治疗有效量的轻泻剂。合适的轻泻剂包括但不限于大便成形轻泻剂、润滑轻泻剂、大便软化剂或其任意组合。

[0087] 阿片类物质引起的便秘

[0088] 本发明提供了通过施用治疗有效量之生长激素释放肽模拟物(例如，伊帕瑞林)来治疗阿片类物质引起之便秘的方法。使用阿片类镇痛剂缓解慢性疼痛可对中枢神经系统中靶标以外的器官造成影响。例如，阿片类物质作用可使胃排空变慢以及抑制肠运动。粪便内容物在肠中时间增加将造成从粪便内容物中过量吸收水和钠，从而产生更硬、更干的粪便并导致便秘。该影响使约90％使用镇痛剂的个体受到折磨。对于使用阿片类药物的慢性疼痛患者来说，所产生之便秘可以是剂量限制性副作用。此外，用于手术后疼痛控制之镇痛剂可导致由阿片类物质引起的便秘。合适的阿片类物质包括但不限于吗啡、可待因、羟考酮、氢吗啡酮、氢可酮、美沙酮、芬太尼以及与抗炎剂(例如对乙酰氨基酚或阿司匹林)的组合或其任何组合。

[0089] 治疗由阿片类物质引起之便秘的方法还可包括共施用生长激素释放肽模拟化合物(例如，伊帕瑞林)与治疗有效量之外周作用阿片类拮抗剂、轻泻剂或其任何组合。合适的外周作用阿片类拮抗剂包括但不限于：甲基那曲酮、那曲酮、纳美芬、纳洛酮与阿维莫潘或其任何组合。合适的轻泻剂包括但不限于大便成形轻泻剂、润滑轻泻剂、大便软化剂或其任何组合。

[0090] 手术后肠梗阻

[0091] 本发明提供了通过施用治疗有效量之生长激素释放肽模拟物(例如，伊帕瑞林)来治疗手术后肠梗阻的方法。众所周知，胃肠(GI)道动力在手术后暂时性削弱。腹部手术对胃肠动力的影响通常称为“手术后肠梗阻”，该术语表示肠之正常协调运动遭到破坏，导致肠内含物无法推进。肠梗阻亦被定义为肠道的功能性、非机械性梗塞。术语“手术后肠梗阻”是指正常胃排空及结肠排空的延缓。

[0092] 治疗手术后肠梗阻的方法还可包括共施用生长激素释放肽模拟化合物(例如，伊帕瑞林)与治疗有效量之多巴胺拮抗剂。合适的多巴胺拮抗剂包括但不限于：胃复安、多潘立酮、氨磺必利、氯波必利、莫沙帕明、奈莫必利、瑞莫必利、利培酮、舒必利、舒托必利与齐拉西酮或其任何组合。

[0093] 肠易激综合征

[0094] 本发明提供了通过施用治疗有效量之生长激素释放肽模拟物(例如，伊帕瑞林)来治疗肠易激综合征的方法。肠易激综合征(IBS)是影响整个胃肠道动力的功能性失调症，其可导致腹部疼痛、便秘和/或腹泻。IBS中消化道的运动削弱并未伴随身体结构的变化(例如炎症或肿瘤)。IBS症状被认为与肠之任意部分的异常肌肉收缩有关。

[0095] 在该综合征中，胃肠道对胃肠刺激特别敏感。压力、饮食、药物、激素或微量刺激物均可导致胃肠道异常收缩。存在不同类型的IBS：便秘型、腹泻型及便秘/腹泻交替型IBS。

[0096] 治疗IBS的方法可包括共施用生长激素释放肽模拟化合物(例如，伊帕瑞林)与治疗有效量之H2受体拮抗剂、血清素5-HT激动剂、轻泻剂或其任何组合。

[0097] 合适的H2受体拮抗剂包括但不限于：尼扎替丁、雷尼替丁、法莫替丁和西咪替丁或其任何组合。合适的中枢神经系统受体激动剂包括但不限于：萝芙素、育亨宾、胃复安、替加色罗或其任何组合。合适的轻泻剂包括但不限于：大便成形轻泻剂、润滑轻泻剂、大便软化剂或其任何组合。

[0098] 胃食管反流病

[0099] 本发明还提供了通过施用治疗有效量之生长激素释放肽模拟物(例如，伊帕瑞林)来治疗胃食管反流病的方法。胃食管反流病(GERD)是胃内容物(例如胆盐)返回食管(食道)造成胃内容物从胃部慢性逆流至食道下部的症状。GERD常被称为胃灼热，其导致食道刺激和炎症。

[0100] 患有GERD的人，其食道括约肌(位于食道下端，防止胃内容物返回食道的环形肌肉)可能无法行驶其保护职责。所述食道括约肌不再只在进食或吞咽时张开，而是松弛并允许消化液回流至食道中，刺激食道内层。

[0101] 已鉴定出两种类型的GERD，直立型(或日间型)GERD和平卧型(或夜间型)GERD。夜间回流事件发生频率较低，但是酸清除时间较长。夜间回流可能与GERD并发症(例如食管糜烂、溃疡和呼吸道症状)相关。据估计，目前有一千七百万美国人罹患胃灼热及其它GERD症状。

[0102] 治疗GERD的方法包括共施用生长激素释放肽模拟化合物(例如，伊帕瑞林)与治疗有效量的H2受体拮抗剂、抗酸药、质子泵抑制剂或其任何组合。

[0103] 合适的H2受体拮抗剂包括但不限于：尼扎替丁、雷尼替丁、法莫替丁和西咪替丁或其任何组合。合适的抗酸药包括但不限于：氢氧化铝和氢氧化镁及其组合。合适的质子泵抑制剂包括但不限于：埃索美拉唑奥美拉唑、兰索拉唑、潘多拉唑或其组合。

[0104] 胃轻瘫

[0105] 本发明提供了通过施用治疗有效量之生长激素释放肽模拟物(例如，伊帕瑞林)来治疗胃轻瘫(例如糖尿病性或特发性胃轻瘫)的方法。胃轻瘫(亦称为胃排空延迟)是胃排空其内容物时间过长的失调症。胃轻瘫常发生于患1型糖尿病或2型糖尿病的人中。当胃的神经受损或停止工作时会发生胃轻瘫。迷走神经控制食物通过消化道的运动。若迷走神经受损，则胃与肠的肌肉无法正常工作，食物运动即迟缓或停止。若血糖长时间维持高水平，则糖尿病可损伤迷走神经。高血糖导致神经发生化学变化并损伤携带氧与营养物至神经的血管。

[0106] 治疗胃轻瘫的方法可包括共施用生长激素释放肽模拟化合物(例如，伊帕瑞林)与治疗有效量之多巴胺拮抗剂。合适的多巴胺拮抗剂包括但不限于：胃复安、多潘立酮、氨磺必利、氯波必利、莫沙帕明、奈莫必利、瑞莫必利、利培酮、舒必利、舒托必利和齐拉西酮或其任何组合。

[0107] 本发明还涉及可用于刺激(即引发)胃肠系统动力的药物组合物。该药物组合物包含生长激素释放肽模拟物以及任选地可药用载体。该药物组合物可包含第二量之合适治疗剂。合适的治疗剂可根据对象中所治疗之症状来确定。

[0108] 例如，当治疗便秘时，所述药物组合物可包含第一量之生长激素释放肽模拟物(例如，伊帕瑞林)以及第二量之轻泻剂。本发明的药物组合物可任选地含有可药用载体。生长激素释放肽模拟物与轻泻剂可各自以治疗有效量存在于药物组合物中。在另一方面中，所述第一及第二量可一起构成治疗有效量。

[0109] 所述药物组合物可包含第一量之生长激素释放肽模拟物以及第二量之H2受体拮抗剂。本发明之药物组合物可任选地含有可药用载体。生长激素释放肽模拟物与H2受体拮抗剂可各自以治疗有效量存在于药物组合物中。在另一方面中，所述第一及第二量可一起构成治疗有效量。

[0110] 所述药物组合物可包含第一量之生长激素释放肽模拟物及第二量之血清素受体激动剂。所述药物组合物可任选地含有可药用载体。生长激素释放肽模拟物与血清素受体激动剂可各自以治疗有效量存在于药物组合物中。该第一及第二量可一起构成治疗有效量。

[0111] 所述药物组合物可包含第一量之生长激素释放肽模拟物(例如，伊帕瑞林)以及第二量之抗酸药。所述药物组合物可任选地含有可药用载体。生长激素释放肽模拟物与抗酸药可各自以治疗有效量存在于药物组合物中。在另一方面中，所述第一及第二量可一起构成治疗有效量。

[0112] 所述药物组合物可包含第一量之生长激素释放肽模拟物以及第二量之阿片类拮抗剂。所述药物组合物可任选地含有可药用载体。生长激素释放肽模拟物与阿片类物质拮抗剂可各自以治疗有效量存在于药物组合物中。该第一及第二量可一起构成治疗有效量。

[0113] 所述药物组合物可包含第一量之生长激素释放肽模拟物以及第二量之质子泵抑制剂。所述药物组合物可任选地含有可药用载体。生长激素释放肽模拟物与质子泵抑制剂可各自以治疗有效量存在于药物组合物中。该第一及第二量可一起构成治疗有效量。

[0114] 所述药物组合物可包含第一量之生长激素释放肽模拟物以及第二量之促胃动素受体激动剂。所述药物组合物可任选地含有可药用载体。生长激素释放肽模拟物与促胃动素受体激动剂可各自以治疗有效量存在于药物组合物中。该第一及第二量可一起构成治疗有效量。

[0115] 所述药物组合物可包含第一量之生长激素释放肽模拟物以及第二量之多巴胺拮抗剂。所述药物组合物可任选地含有可药用载体。生长激素释放肽模拟物与多巴胺拮抗剂可各自以治疗有效量存在于药物组合物中。该第一及第二量可一起构成治疗有效量。

[0116] 所述药物组合物可包含第一量之生长激素释放肽模拟物以及第二量之胆碱酯酶抑制剂。所述药物组合物可任选地含有可药用载体。生长激素释放肽模拟物与胆碱酯酶抑制剂可各自以治疗有效量存在于药物组合物中。该第一及第二量可一起构成治疗有效量。

[0117] 所述药物组合物可包含第一量之生长激素释放肽模拟物以及第二量之生长激素抑制素(somatostatin)。所述药物组合物可任选地含有可药用载体。生长激素释放肽模拟物与生长激素抑制素可各自以治疗有效量存在于药物组合物中。该第一及第二量可一起构成治疗有效量。

[0118] 本发明还涉及生长激素释放肽模拟化合物用于制备刺激(即引发)胃肠系统动力之药物的用途。

[0119] 本文所用的对象是指动物(例如哺乳动物)，包括但不限于灵长类(例如人)、牛、绵羊、山羊、马、猪、狗、猫、兔、豚鼠、大鼠、小鼠或其它牛科、羊科、马科、犬科、猫科、啮齿类或鼠科动物。在一个优选实施方案中，所述哺乳动物是人。

[0120] 本文所用的治疗是指刺激(例如，引发)胃肠系统动力。

[0121] 本文所用的治疗有效量是指足以引发期望之生物响应的量。所述期望之生物响应是刺激(例如，引发)胃肠系统动力。所述期望之生物响应可以是刺激(例如，引发)胃肠系统动力从而在有此需要之对象中治疗由阿片类物质引起的便秘。所述对象可以正在使用阿片类物质用于手术后疼痛控制或慢性疼痛控制。

[0122] 所述期望之生物响应可以是刺激(例如，引发)胃肠系统动力从而在有此需要之对象中治疗胃轻瘫。

[0123] 所述期望之生物响应可以是刺激(例如，引发)胃肠系统动力从而在有此需要之对象中治疗胃食管反流病。所述胃食管反流病可以为夜间胃食管反流病。

[0124] 所述期望之生物响应可以是刺激(例如，引发)胃肠系统动力从而在有此需要之对象中治疗肠易激综合征。所述肠易激综合征可以为便秘型肠易激综合征。在又一实施方案中，所述肠易激综合征可以为便秘/腹泻肠易激综合征。

[0125] 所述期望之生物响应可以是刺激(例如，引发)胃肠系统动力从而在有此需要之对象中治疗便秘。

[0126] 所述期望之生物响应可以是刺激(例如，引发)胃肠系统动力从而在有此需要之对象中治疗手术后肠梗阻。

[0127] 药物组合物

[0128] 适用于本发明之药物组合物包括其中所含活性成分以治疗有效量实现其预期目的的组合物。应理解，各剂型之单一剂量中所含活性成分的单位含量本身不需要构成有效量，这是因为可通过施用多个剂量单位(例如胶囊或片剂或小瓶或其组合)来达到所需之有效量。此外，应理解，在一些剂量水平下，有效量可直至使用一周、一个月、三个月或六个月后才显示可测量的效果。有效量的确定在本领域技术人员的能力范围之内，特别是在依照本文所提供的详细公开内容下。用于任何特定使用者的特定剂量水平将取决于多种因素，包括年龄、身体活动水平、一般健康状况和胃肠疾病的严重性。

[0129] 治疗有效剂量也指实现所期望效果而无有害或无法忍受之副作用所需的量。本发明之生长激素释放肽模拟物(例如，伊帕瑞林)的毒性和治疗效力可于细胞培养物或实验动物中利用标准医药方法来测定。使用标准方法，可测定在约50％测试群体中显示有效性的剂量(ED50)。类似地，可测定对50％群体产生不良副作用的剂量(SD50)。副作用与治疗效力的剂量比可表示为治疗指数，并且其可表示为SD50/ED50的比值。优选具有高治疗指数的生长激素释放肽模拟物(例如，伊帕瑞林)，即在低剂量具有效力且没有不良副作用(即使有不良副作用，亦发生在极高剂量时)。优选的治疗指数大于约3，更优选的治疗指数大于10，最优选的治疗指数大于25，例如大于50。另外，在任何剂量水平下均不具有副作用的生长激素释放肽模拟物是更优选的。最后，在低剂量下有效并且在任何剂量下均不具有副作用的生长激素释放肽模拟物是最优选的。确切的配方、施用途径及剂量可取决于所期望之效果并可由本领域技术人员来进行选择。

[0130] 在一些实施方案中，生长激素释放肽模拟物配制为可药用盐。本文所用的术语“可药用盐”是指从可药用无毒性酸(包括无机酸、有机酸)制备的待施用之化合物的盐、其溶剂化物、水合物或包合物(clathrate)。这样的无机酸的实例有盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硝酸、硫酸和磷酸。合适的有机酸可选自例如脂肪酸、芳香酸、羧酸和磺酸类的有机酸，其实例有甲酸、乙酸、丙酸、琥珀酸、樟脑磺酸、柠檬酸、反丁烯二酸、葡萄糖酸、羟乙磺酸、乳酸、苹果酸、粘酸、酒石酸、对甲苯磺酸、乙醇酸、葡糖醛酸、顺丁烯二酸、糠酸、麸酸、苯甲酸、邻氨基苯甲酸、水杨酸、苯基乙酸、扁桃酸、亚甲基双羟萘酸(扑酸)、甲基磺酸、乙基磺酸、泛酸、苯磺酸、硬脂酸、氨基苯磺酸、海藻酸、半乳糖醛酸等。

[0131] 本发明之生长激素释放肽模拟物可制备成其水合物(例如半水合物、单水合物、二水合物、三水合物、四水合物等)及溶剂化物的形式。

[0132] 生长激素释放肽模拟物(例如，伊帕瑞林)、其衍生物及任何共施用之药剂可并入可适于施用的任何合适药物组合物中。这样的组合物典型地包含活性药剂(例如，本发明之生长激素释放肽模拟物)和可药用载体。

[0133] 本文所用之“可药用载体”旨在包括与药物施用相容的任何及所有溶剂、分散介质、包衣、抗细菌剂和抗真菌剂、等渗剂和延缓吸收剂等。将这些介质和成分用于药学活性物质是本领域中公知的。除非某些常规介质或成分与所述活性化合物不相容，否则涵盖其在所述组合物中的使用。补充性活性化合物也可并入本发明的药物组合物中。可对任何药物组合物组分进行修饰以影响本发明之因子的溶解性或清除。也可用D-氨基酸来合成肽性分子以增加针对酶促降解的抗性。在一些情形中，所述组合物可与一种或多种增溶剂、防腐剂和渗透增强剂共施用。

[0134] 施用生长激素释放肽模拟物

[0135] 治疗有效量或剂量将取决于患者的年龄、性别和体重以及该患者当前的医疗状况。本领域技术人员能够根据这些及其它因素来确定合适的剂量以实现所期望的生物响应。

[0136] 本发明生长激素释放肽模拟物的合适日剂量可以为约1ng至约10,000mg、约5ng至约9,500mg、约10ng至约9,000mg、约20ng至约8,500mg、约30ng至约7,500mg、约40ng至约7,000mg、约50ng至约6,500mg、约100ng至约6,000mg、约200ng至约5,500mg、约300ng至约5,000mg、约400ng至约4,500mg、约500ng至约4,000mg、约1μg至约3,500mg、约5μg至约3,000mg、约10μg至约2,600mg、约20μg至约2,575mg、约30μg至约2,550mg、约40μg至约2,500mg、约50μg至约2,475mg、约100μg至约2,450mg、约200μg至约
2,425mg、约300μg至约2,000mg、约400μg至约1,175mg、约500μg至约1,150mg、约.5mg至约1,125mg、约1mg至约1,100mg、约1.25mg至约1,075mg、约1.5mg至约1,050mg、约
2.0mg至约1,025mg、约2.5mg至约1,000mg、约3.0mg至约975mg、约3.5mg至约950mg、约
4.0mg至约925mg、约4.5mg至约900mg、约5mg至约875mg、约10mg至约850mg、约20mg至约825mg、约30mg至约800mg、约40mg至约775mg、约50mg至约750mg、约100mg至约725mg、约200mg至约700mg、约300mg至约675mg、约400mg至约650mg、约500mg、或约525mg至约
625mg。

[0137] 本发明生长激素释放肽模拟物之其它合适日剂量包括如下剂量：大约或大于1ng、约5ng、约10ng、约20ng、约30ng、约40ng、约50ng、约100ng、约200ng、约300ng、约
400ng、约500ng、约1μg、约5μg、约10μg、约20μg、约30μg、约40μg、约50μg、约
100μg、约200μg、约300μg、约400μg、约500μg(0.5mg)、约1mg、约1.25mg、约1.5mg、约
2.0mg、约2.5mg、约3.0mg、约3.5mg、约4.0mg、约4.5mg、约5mg、约10mg、约20mg、约30mg、约40mg、约50mg、约100mg、约200mg、约300mg、约400mg、约500mg、约600mg、约625mg、约
650mg、约675mg、约700mg、约725mg、约750mg、约775mg、约800mg、约825mg、约850mg、约
875mg、约900mg、约925mg、约950mg、约975mg、约1000mg、约1025mg、约1050mg、约1075mg、约1100mg、约1125mg、约1150mg、约1175mg、约1200mg、约1225mg、约1250mg、约1275mg、约1300mg、约1325mg、约1350mg、约1375mg、约1400mg、约1425mg、约1450mg、约1475mg、约1500mg、约1525mg、约1550mg、约1575mg、约1600mg、约1625mg、约1650mg、约1675mg、约1700mg、约1725mg、约1750mg、约1775mg、约1800mg、约1825mg、约1850mg、约1875mg、约1900mg、约1925mg、约1950mg、约1975mg、约2000mg、约2025mg、约2050mg、约2075mg、约2100mg、约2125mg、约2150mg、约2175mg、约2200mg、约2225mg、约2250mg、约2275mg、约2300mg、约2325mg、约2350mg、约2375mg、约2400mg、约2425mg、约2450mg、约2475mg、约
2500mg、约2525mg、约2550mg、约2575mg、约2600mg、约3,000mg、约3,500mg、约4,000mg、约4,500mg、约5,000mg、约5,500mg、约6,000mg、约6,500mg、约7,000mg、约7,500mg、约
8,000mg、约8,500mg、约9,000mg或约9,500mg。

[0138] 生长激素释放肽模拟物之合适剂量可以为每天约0.20mg至约4000mg，例如约1mg至约4000mg，例如，每天约5mg至约3000mg，例如约10mg至约2400mg。所述剂量可以单一剂量或多次剂量(例如每天1至4次或更多次)来施用。当使用多次剂量时，每次剂量的量可相同或不同。

[0139] 额外治疗剂(例如，轻泻剂)的合适剂量可以与上述生长激素释放肽模拟物有相同的剂量范围。生长激素释放肽模拟物与额外药剂的剂量可相同或不同。额外药剂的合适剂量可在文献中获得。

[0140] 本发明方法中使用的化合物可配制用成于任何适当的施用途径，例如经口或肠胃外，如透皮、透粘膜(例如，舌下、经舌、经颊(透颊))、经阴道(例如，透阴道和经阴道周围)、经鼻(内)与经直肠(透直肠)、皮下、肌内、真皮内、动脉内、静脉内、吸入和局部施用。

[0141] 在一个优选实施方案中，本发明化合物配制成用于静脉内递送。在另一优选实施方案中，本发明化合物配制成用于经口递送。合适的组合物及剂型包括片剂、胶囊剂、囊片(caplet)、丸剂、凝胶胶囊(gel cap)、锭剂、分散剂、混悬液、溶液、糖浆、颗粒剂、珠子、透皮贴剂、凝胶剂、粉末剂、药丸、乳浆剂、菱形锭剂、霜剂、糊剂、膏药剂、洗剂、圆片剂(disc)、栓剂、液体喷雾剂、干粉剂或气溶胶配方。

[0142] 化合物优选为经口施用。合适的经口剂型包括例如利用如下可药用赋形剂通过常规方法制备的片剂、胶囊剂或囊片，所述可药用赋形剂例如粘合剂(例如，聚乙烯吡咯烷酮或羟丙基甲基纤维素)、填充剂(例如，乳糖、微晶纤维素或磷酸钙)、润滑剂(例如，硬脂酸镁、滑石或硅石)、崩解剂(例如，乙醇酸淀粉钠)或润湿剂(例如，月桂基硫酸钠)。需要时，可使用适当方法对片剂进行包衣，例如用以提供方便的吞咽或提供延迟的活性释放。用于经口施用的液体制备物可采用溶液、糖浆或混悬液的形式。液体制备物(例如，溶液、混悬液及糖浆)也适用于经口施用并且可利用如下可药用添加剂通过常规方法来制备，所述可药用添加剂例如助悬剂(例如，山梨糖醇糖浆、甲基纤维素或氢化食用油脂)、乳化剂(例如，卵磷脂或阿拉伯胶)、非水性载体(例如，杏仁油、油性酯类或乙醇)和防腐剂(例如，对羟苯甲酸甲酯或对羟苯甲酸丙酯或山梨酸)。

[0143] 优选地，包含本发明生长激素释放肽模拟物的药物组合物用于通过刺激胃肠动力或运动来治疗胃肠疾病(例如，削弱胃肠动力的胃肠道失调症、病症、症状或损伤)。确切的配方、施用途径和剂量可根据所期望之效果并可由本领域技术人员来选择。

[0144] 可通过实验测试来确定给药间隔。可使用维持胃肠动力于正常状态上下约10％、正常状态上下约20％、正常状态上下约50％的治疗方案来施用本发明的一种或多种生长激素释放肽模拟物。

[0145] 另一合适的施用方法是借助能够表达生长激素释放肽模拟物之植入物或细胞株来提供本发明的生长激素释放肽模拟物，从而使所述植入物或细胞株可将生长激素释放肽模拟物提供至胃肠系统的细胞。

[0146] 本发明之药物组合物可配制成与其预期施用途径相容。

[0147] 经口施用是指经由口通过消化或者经由胃肠系统之任何其它部分(包括食道)或通过栓剂施用来施用本发明的药物组合物。肠胃外施用是指通过除胃肠道(例如，经口递送)以外的途径递送组合物(例如包含生长激素释放肽模拟物的组合物)。特别地，肠胃外施用可经由静脉内、皮下、肌内或髓内(即，鞘内)注射。肠胃外制剂可封入由玻璃或塑料制成的安瓿、一次性注射器或多剂量小瓶中。局部施用是指将药剂施用至皮肤或粘膜外部表面(包括鼻、肺和口(此情形下亦可为经口施用的形式)之膜表面)，从而使所述药剂穿过皮肤或粘膜外部表面进入下层组织中。局部施用药剂可使药剂有限分布于皮肤及周围组织，或者药剂被血流带离处理区域，可产生药剂的全身性分布。

[0148] 在本发明涵盖之局部施用的一种形式中，生长激素释放肽模拟物通过透皮递送来递送。透皮递送是指药剂穿越皮肤屏障而扩散。可通过在应用于皮肤之前将活性药剂置于油性载体中(该方法称为“涂擦法(inunction)”)及使用微针来增强经由完整皮肤的吸收。被动式局部施用可包括直接将活性药剂联合软化剂或渗透增强剂施加于治疗部位。增强经由皮肤之递送的另一方法是增加药剂剂量。局部施用的剂量可增加至利用其它途径所施用剂量的十倍、百倍或千倍以上。

[0149] 用于透皮递送的渗透剂是本领域中通常知晓的，包括例如用于透粘膜施用的去污剂、胆盐和夫西地酸(fusidic acid)衍生物。透粘膜施用可通过使用鼻喷雾剂或栓剂来实现。利用吸入法施用时，本发明生长激素释放肽模拟物可采用来自含适当抛射剂(例如，气体(如二氧化碳))之加压容器或分配器或者雾化器的气溶胶喷雾剂的形式来递送。对于透皮施用来说，本发明之生长激素释放肽模拟物可配制成本领域中通常知晓的软膏、药膏、凝胶或霜剂。

[0150] 此外，本发明之生长激素释放肽模拟物可利用经鼻或经肺的方法来递送。气溶胶药剂的呼吸递送在多篇文献中有所描述，其中最早的是Gansslen(1925)Klin.Wochenschr.4：71，以及包括Laube等(1993)JAMA 269：2106-21-9；Elliott等(1987)Aust.Paediatr.J.23：293-297；Wigley 等 (1971)Diabetes 20：552-556；Corthorpe 等(1992)Pharm Res9：764-768；Govinda(1959)Indian J.Physiol.Pharmacol.3：161-167；Hastings 等 (1992)J.Appl.Physiol.73：1310-1316；Liu 等 (1993)JAMA269：2106-2109；
Nagano 等 (1985)Jikeikai Med.J.32：503-506；Sakr(1992)Int.J.Phar.86：1-7；和Yoshida等(1987)Clin.Res.35：160-166；其各自通过引用并入本文中。干粉药剂之肺部递送见述于美国专利No.5,254,330中。计量型剂量吸入器见述于Lee和Sciara(1976)J.Pharm.Sci.65：567-572。重组胰岛素之支气管内施用简单描述于Schlutiter等(摘要)(1984)Diabetes 33：75A及Kohler等(1987)Atemw.Lungenkrkh.13：230-232。多种多肽之鼻内和呼吸递送见述于美国专利No.5,011,678和Nagai等(1984)J.Contr.Rel.1：15-22中。

[0151] 适用于注射用途之药物组合物是本领域中已知的，包括例如无菌水溶液(水可溶时)或分散剂以及用于即时制备无菌注射溶液或分散剂的无菌粉末剂。对于静脉内施用本发明生长激素释放肽模拟物来说，生理可接受的合适载体包括例如生理盐液、抑菌水、TMCremophor EL (BASF，Parsippany,N.J.)或磷酸盐缓冲液(PBS)。

[0152] 生理可接受的载体可以是适用于药物(即，局部、经口和肠胃外)应用领域中已知的任何载体。合适的药物载体和配方见述于例如Remington′s Pharmaceutical Sciences(第19版)(Genarro编(1995)MackPublishing Co.，Easton，Pa.)。

[0153] 经口组合物通常包含生理可接受的惰性稀释剂或食用载体。可将它们封入明胶胶囊中或压缩成为片剂。为了经口治疗施用之目的，可将生理赋形剂掺入本发明的生长激素释放肽模拟物并采用片剂、锭剂或胶囊剂的形式使用。

[0154] 可使用改变注射药物递送的多种系统来改变治疗剂的药效学及药代动力学性质(参见，例如，K.Reddy，2000，Annals of Pharmacotherapy34：915-923)。药物递送可通过改变配方(例如，持续释放产品、脂质体)或增添药物分子(例如，聚乙二醇化)来进行修饰。这些药物递送机制的潜在优点包括药理活性期间的增加或延长、不利影响的减少以及患者顺从性与生活品质的提高。注射用持续释放系统采用受控、预先确定之方式递送药物，并且当避免血浆药物浓度大幅波动是重要因素时尤其适用。用脂质体包封药物可产生延长的半衰期以及由于毛细血管通透性增加而导致的向组织分布的提高(例如，肿瘤)。聚乙二醇化提供了修饰治疗性肽或蛋白质的方法，其使得与本发明生长激素释放肽模拟物相关的可能限制(例如，稳定性、半衰期、免疫原性)尽可能小。

[0155] 根据本发明，一种或多种生长激素释放肽模拟物可与脂质或脂质载体(例如，微团(micelle)、脂质体、微球(microsphere)、原细胞(protocell)、原生物(protobiont)、脂质体、团聚体(coacervate)等)一起配制以形成多聚体。类似地，生长激素释放肽模拟物可使用聚乙二醇化、交联、形成二硫键、形成共价交联、形成糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚定或其它成熟的方法来进行多聚化。多聚化的生长激素释放肽模拟物可配制成药物组合物，用以提高或增强其作用。

[0156] 生长激素释放肽模拟物也可制备成用于直肠递送的栓剂(如，使用常规栓剂基质(例如可可脂和其它甘油酯类))或保留灌肠剂(retentionenema)的形式。

[0157] 本领域技术人员应理解，多种已知技术可用于递送本发明的生长激素释放肽模拟物，更具体地递送至局部胃肠组织，例如但不限于胃、食道、小肠或结肠。递送方法取决于如下因素，例如目标组织、待递送化合物的性质以及治疗持续时间。

[0158] 在一方面中，本发明之生长激素释放肽模拟物与保护该生长激素释放肽模拟物免受机体快速清除之载体一起制备，例如控制释放配方，包括植入物和微囊化递送系统。这些可根据本领域技术人员已知的方法(例如，如美国专利No.4,522,811中所述)来制备。

[0159] 经本发明优选实施方案如此详细叙述后，应理解上文定义之本发明不受上述说明书中阐述之特定细节的限制，在不偏离本发明精神或范围下，多种显而易见的变化均是可能的。

[0160] 实施例

[0161] 本发明进一步通过下述非限制性实施例进行描述。

[0162] 在手术后肠梗阻之大鼠模型中评估伊帕瑞林的胃动力学效力。在这些研究中，以0.01mg/kg至1.0mg/kg的剂量，向腹部手术后的雄性大鼠经口施用(10mg/kg和100mg/kg)或经由单次静脉内注射施用伊帕瑞林。通过在伊帕瑞林给药后随即经口强饲施用酚红来测定与对照动物相比的伊帕瑞林对胃排空的作用。

[0163] 实施例1.伊帕瑞林(10或100mg/kg)在手术后肠梗阻之大鼠模型中的促胃运动效力

[0164] 该研究评估了在手术后肠梗阻之大鼠模型中以10或100mg/kg剂量单次经口施用伊帕瑞林后的潜在胃动力学效力。

[0165]

[0166] ＊此组动物接受所有手术程序但未进行盲肠处理。

[0167] 方法和实验设计

[0168] 从 Charles River Canada Inc.St.Constant，Quebec，Canada 获得雄性Sprague-Dawley (Crl： (SD))大鼠(Rattus norvegicus)。从获得动物至开始处理之间有九天时间使动物适应实验室环境。开始处理时，动物大约7周龄，体重为230g～
254g。

[0169] 将动物分别安置于配有自动给水阀的不锈钢网眼底部之笼中。各笼均清楚地标记有标示项目、组别、动物编号和性别的彩色编码笼卡。每只动物均被唯一地识别。动物室环境之指标条件和光照周期为：温度22±3℃；湿度50±20％；光周期为12小时光照及12小时黑暗。

[0170] 所有动物均令其自由取用(除了指定程序期间外)经标准认证之颗粒状市售实验室饲料(PMI Certified Rodent Chow 5002：PMI NutritionInternational Inc.)。该饲料受到管控并由制造商定期分析污染物(例如，重金属、黄曲霉毒素、有机磷酸酯类、氯化烃和PCB)之最大容许浓度。随意地提供经软化、反渗透纯化并暴露于紫外线之市政自来水(除了指定程序期间外)。认为在饲喂物质中不存在可能影响研究结果之已知污染物。

[0171] 所获得及用于该研究中之伊帕瑞林得自Bachem AG(Bubendorf，Switzerland)。所用载体为0.9％注射用氯化钠(Baxter)。用于评估胃排空水平之胃肠标记物为酚红(Sigma Aldrich)。

[0172] 使适量测试物质溶于0.9％USP注射用氯化钠中。依需要，用0.1N/1N盐酸或0.1N氢氧化钠将测试物质制剂调整为pH 7.4～7.5。所有给药配方均保持于室温，并避光。在给药当天，在去离子水中制备5mg/mL之酚红溶液，于室温保存并避光。

[0173] 导管置入手术(catheterization surgery)

[0174] 在手术当天，对每只动物进行苄星(Benzathine)青霉素G与普鲁卡因青霉素G(0.1mL)的肌内抗生素注射，并在手术2天后再注射一次。准备手术之前，用异氟烷(isoflurane)气体麻醉动物，其包括剃除股骨及背侧外部的毛。剃毛之处用4％氯己定葡糖酸盐清洗，随后大量施加10％聚维酮碘(Povidone iodine)。手术之前及手术结束时，在麻醉下，向每只眼睛施用无刺激润滑性眼药(Tears Naturale PM)。在整个手术过程中，使动物维持在异氟烷气体麻醉状态下。

[0175] 在右腹股沟区域做出小切口，并分离股静脉。对该静脉进行小的静脉切开术，插入医用等级之基于硅酮的导管，导管尖端置入腔静脉中大约肾脏水平处。用适当缝合材料使导管固定于合适位置，然后于皮下带至颈背外部点。用温热的(约37℃)0.9％USP注射用氯化钠刺激股骨部位。用间断褥式缝合法(interrupted mattress sulture)缝合股骨部位，用钱包缝合法(purse stitch)缝合外在部位，其在5～10天内或视愈合结果而拆除。直至终止时，每天向导管外在部位施用局部抗生素(多粘菌素B、杆菌肽(Bacitracin)、新霉素)，以及向股骨部位施用直至认为不必需要时为止。

[0176] 为动物安置外罩(jacket)以固定于栓系系统(tether system)。经由所述栓系系统送入预装填0.9％USP注射用氯化钠的导管，并与固定于笼外侧的转环相连。所述转环上部与输注泵连接，所有动物持续以0.4mL/h之速率输注0.9％USP注射用氯化钠，直至开始处理时。

[0177] 引起手术后肠梗阻的手术

[0178] 所有处理程序均在连续两天的时间内重复进行，在所述重复处理中每天处理来自各组的数目大致相同的动物。进行手术前，使动物禁食过夜。在手术当天，用异氟烷气体麻醉动物，向每只眼睛施加无刺激润滑性眼药(Tears Naturale PM)。准备手术时，剃除动物整个腹部区域的毛。在切开之前，清理经剃毛的区域并适当消毒。使用解剖刀打开腹部，对盲肠定位。使盲肠离体，处理约一分钟(即，在盐水浸泡的纱布中，以双手轻拍之)。然后，将盲肠放回原位，使用可吸收之缝合材料(间断缝合法)和缝合钉使手术部位闭合。然后，将动物放回原笼中，使其从麻醉中苏醒。

[0179] 分配于假处理对照组(第1组)之动物接受相同的处理程序，只是其盲肠离体后未经处理即放回原位。

[0180] 给药施用

[0181] 开始给药即针对来自各组之数目大致相同的动物连续每天给药。给药之前，停止向动物供应水。使用注射器和强饲软管通过经口强饲来施用测试/对照物质。经口强饲酚红后，立即向动物给药。剂量体积为5mL/kg(针对伊帕瑞林和酚红施用皆如此)，实际施用剂量基于每只动物的最近体重来确定。

[0182] 胃肠评估

[0183] 注射吗啡约30分钟后，对所有动物经口强饲0.4mL酚红。施用对照或测试物质约30分钟后，使大鼠安乐死。然后，利用剖腹术暴露出胃，迅速于幽门与贲门处结扎后，将胃取出。切开胃，用100mL 0.1NNaOH提取其内容物。利用分光光度计，在558nm处，通过比色测定该提取物中的酚红含量。收集后，在转移供分析期间，将样品保存于湿冰上。

[0184] 结果

[0185] 与对照动物相比，手术后肠梗阻后经口施用10和100mg/kg伊帕瑞林分别使胃排空加速约12.4％和41.6％，然而未达到统计学显著性。参见图1。

[0186] 结论

[0187] 在手术后肠梗阻之大鼠模型中，以10或100mg/kg之剂量经口施用伊帕瑞林剂量依赖性地加速排空。

[0188] 实施例2.在手术后肠梗阻之大鼠模型中静脉内施用伊帕瑞林(0.1、0.25或1.0mg/kg)的胃动力学效力

[0189] 在此研究中，伊帕瑞林经由留置导管以缓慢推注静脉内注射施用(时间约100秒)。

[0190]

[0191] ＊此组动物接受所有手术程序但未进行盲肠处理。

[0192] 方法及实验设计

[0193] 从 Charles River Canada Inc.St.Constant，Quebec，Canada 获得雄性Sprague-Dawley (Crl： (SD))大鼠(Rattus norvegicus)。从获得动物至手术植入导管之间有八天时间使动物适应身体及环境条件。在手术植入导管大约一周后开始对动物用药，从而使动物在处理前适当复原。开始处理时，动物大约10～12周龄，体重为
327g～397g。

[0194] 将动物分别安置于配有自动给水阀的不锈钢网眼底部之笼中。各笼均清楚地标记有标示项目、组别、动物编号和性别的彩色编码笼卡。每只动物均被唯一地识别。动物室环境之指标条件和光照周期为：温度22±3℃；湿度50±20％；光周期为12小时光照及12小时黑暗。

[0195] 所有动物均令其自由取用(除了指定程序期间外)经标准认证之颗粒状市售实验室饲料(PMI Certified Rodent Chow 5002：PMI NutritionInternational Inc.)。该饲料受到管控并由制造商定期分析污染物(例如，重金属、黄曲霉毒素、有机磷酸酯类、氯化烃和PCB)之最大容许浓度。随意地提供经软化、反渗透纯化并暴露于紫外线之市政自来水(除了指定程序期间外)。认为在饲喂物质中不存在可能影响研究结果之已知污染物。

[0196] 所获得及用于该研究中之伊帕瑞林得自Bachem AG。所用载体为0.9％注射用氯化钠(Baxter)。用于评估胃排空水平之胃肠标记物为酚红(Sigma Aldrich)。

[0197] 导管置入手术

[0198] 在手术当天，对每只动物进行苄星(Benzathine)青霉素G与普鲁卡因青霉素G(0.1mL)的肌内抗生素注射，并在手术2天后再注射一次。准备手术之前，用异氟烷气体麻醉动物，其包括剃除股骨及背侧外部的毛。剃毛之处用4％氯己定葡糖酸盐清洗，随后大量施加10％聚维酮碘。手术之前及手术结束时，在麻醉下，向每只眼睛施用无刺激润滑性眼药(Tears Naturale PM)。在整个手术过程中，使动物维持在异氟烷气体麻醉状态下。

[0199] 在右腹股沟区域做出小切口，并分离股静脉。对该静脉进行小的静脉切开术，插入医用等级之基于硅酮的导管，导管尖端置入腔静脉中大约肾脏水平处。用适当缝合材料使导管固定于合适位置，然后于皮下带至颈背外部点。用温热的(约37℃)0.9％USP注射用氯化钠刺激股骨部位。用间断褥式缝合法缝合股骨部位，用钱包缝合法缝合外在部位，其在5～10天内或视愈合结果而拆除。直至终止时，每天向导管外在部位施用局部抗生素(多粘菌素B、杆菌肽(Bacitracin)、新霉素)，以及向股骨部位施用直至认为不必需要时为止。

[0200] 为动物安置外罩(jacket)以固定于栓系系统(tether system)。经由所述栓系系统送入预装填0.9％USP注射用氯化钠的导管，并与固定于笼外侧的转环相连。所述转环上部与输注泵连接，所有动物持续以0.4mL/h之速率输注0.9％USP注射用氯化钠，直至开始处理时。

[0201] 引起手术后肠梗阻的手术

[0202] 所有处理程序均在连续两天的时间内重复进行，在所述重复处理中每天处理来自各组的数目大致相同的动物。进行手术前，使动物禁食过夜。在手术当天，用异氟烷气体麻醉动物，向每只眼睛施加无刺激润滑性眼药(Tears Naturale PM)。准备手术时，剃除动物整个腹部区域的毛。在切开之前，清理经剃毛的区域并适当消毒。使用解剖刀打开腹部，对盲肠定位。使盲肠离体，处理约一分钟(即，在盐水浸泡的纱布中，以双手轻拍之)。然后，将盲肠放回原位，使用可吸收之缝合材料(间断缝合法)和缝合钉使手术部位闭合。然后，将动物放回原笼中，使其从麻醉中苏醒。

[0203] 分配于假处理对照组(第1组)之动物接受相同的处理程序，只是其盲肠离体后未经处理即放回原位。注意到，由于技术疏失，编号2001、2009、3001和4001之动物的盲肠以USP注射用无菌水而非浸泡盐水之纱布进行处理。认为该微小偏差对研究结果或对该结果之解释没有影响。

[0204] 给药施用

[0205] 开始给药即针对来自各组之数目大致相同的动物连续每天给药。经由留置导管以缓慢推注静脉内注射施用施用测试/对照物质(约100秒)。经口强饲酚红后，立即向动物给药。剂量体积为5mL/kg(针对伊帕瑞林和酚红施用皆如此)，实际施用剂量基于每只动物的最近体重来确定。

[0206] 胃肠评估

[0207] 施用酚红之前，停止向动物供应水。手术后(肠梗阻)约30分钟后，经口强饲动物0.4mL酚红。然后对动物用药，大约30分钟后，使其安乐死。安乐死后，使用剖腹术暴露出胃，迅速于幽门与贲门处结扎后，将胃取出。切开胃，用100mL 0.1N NaOH提取其内容物。利用分光光度计，在558nm处，通过比色测定该提取物中的酚红含量。收集后，在转移供分析期间，将样品保存于湿冰上。

[0208] 结果

[0209] 在白化病雄性大鼠中，与载体对照和假处理对照动物相比，手术后静脉内施用0.1、0.25和1.0mg/kg伊帕瑞林加速胃排空，但未观察到剂量关联性。与载体对照组相比，经静脉内伊帕瑞林给药(0.1、0.25或1.0mg/kg)处理之动物显示胃酚红含量减少(分别为
85.7％、95.6％和92.2％)。在0.25和1.0mg/kg剂量下，这些减少量达到统计学显著性(分别为p≤0.001和p≤0.01)。参见图2。

[0210] 关于平均胃酚红含量，载体对照组与假处理对照组相似且无统计学意义上的差异，假处理对照组可表现出(未预期地)肠梗阻或者手术对照组表现出不能引起可检测之肠梗阻。因此，当相比于假处理对照组来表示时，经静脉内给药(0.1、0.25或1.0mg/kg)伊帕瑞林处理之动物在所有剂量水平下显示统计学显著的胃酚红含量减少(分别为87.1％、96.0％和93.1％)。参见图2。

[0211] 结论

[0212] 与假处理及载体对照动物相比，向手术后白化病雄性大鼠静脉内施用0.1、0.25和1.0mg/kg伊帕瑞林显著地加速胃排空。

[0213] 实施例3.在手术后肠梗阻之大鼠模型中静脉内施用伊帕瑞林(0.01、0.03或0.1mg/kg)的胃动力学效力

[0214] 在此研究中，伊帕瑞林以0.01、0.03或0.1mg/kg的剂量经由留置导管以缓慢推注静脉内注射施用下(时间约100秒)。

[0215]

[0216]

[0217] ＊此组动物未进行引起肠梗阻之手术。

[0218] 使用雄性Sprague-Dawley (Crl： (SD))大鼠(Rattusnorvegicus)。从获得动物至手术植入导管之间有七天时间使动物适应身体及环境条件。在手术植入导管大约一周后开始对动物用药，从而使动物在处理前适当复原。开始处理时，动物大约10周龄，体重为334g～385g。

[0219] 将动物分别安置于配有自动给水阀的不锈钢网眼底部之笼中。动物室环境之指标条件和光照周期为：温度22±3℃；湿度50±20％；光周期为12小时光照及12小时黑暗。

[0220] 所有动物每天检查两次死亡数及健康状况不佳迹象或对处理之反应(抵达当天以及当动物检查一次即验尸时除外)。随机及于用药前一天测量个体体重(仅供计算剂量之用)。

[0221] 导管置入手术

[0222] 在右腹股沟区域做出小切口，并分离股静脉。对该静脉进行小的静脉切开术，插入医用等级之基于硅酮的导管，导管尖端置入腔静脉中大约肾脏水平处。用适当缝合材料使导管固定于合适位置，然后于皮下带至颈背外部点。用温热的(约37℃)0.9％USP注射用氯化钠刺激股骨部位。用间断褥式缝合法缝合股骨部位，用钱包缝合法缝合外在部位，其在5～10天内或视愈合结果而拆除。直至终止时，每天向导管外在部位施用局部抗生素(多粘菌素B、杆菌肽(Bacitracin)、新霉素)，以及向股骨部位施用直至认为不必需要时为止。

[0223] 为动物安置外罩(jacket)以固定于栓系系统(tether system)。经由所述栓系系统送入预装填0.9％USP注射用氯化钠的导管，并与固定于笼外侧的转环相连。所述转环上部与输注泵连接，所有动物持续以0.4mL/h之速率输注0.9％USP注射用氯化钠，直至开始处理时。

[0224] 引起手术后肠梗阻的手术

[0225] 所有处理程序均在连续两天的时间内重复进行，在所述重复处理中每天处理来自各组的数目大致相同的动物。进行手术前，使动物禁食过夜。在手术当天，用异氟烷气体麻醉动物，向每只眼睛施加无刺激润滑性眼药(Tears Naturale PM)。准备手术时，剃除动物整个腹部区域的毛。在切开之前，清理经剃毛的区域并适当消毒。使用解剖刀打开腹部，对盲肠定位。使盲肠离体，处理约一分钟(即，在盐水浸泡的纱布中，以双手轻拍之)。然后，将盲肠放回原位，使用可吸收之缝合材料(间断缝合法)和缝合钉使手术部位闭合。然后，将动物放回原笼中，使其从麻醉中苏醒。

[0226] 分配于未手术对照组(第1组)之动物未进行引发手术后肠梗阻的手术。

[0227] 给药施用

[0228] 开始给药即针对来自各组之数目大致相同的动物连续每天给药。经由留置导管以缓慢推注静脉内注射施用施用测试/对照物质。经口强饲酚红后，立即向动物给药。第1、2和5组的剂量体积为5mL/kg；第3组为0.5mL/kg，第4组为1.5mL/kg。实际施用剂量基于每只动物的最近体重来确定。

[0229] 胃肠评估

[0230] 施用酚红之前，停止向动物供应水。手术后(肠梗阻)约30分钟后，经口强饲动物0.4mL酚红。然后对动物用药，大约30分钟后，使其安乐死。安乐死后，使用剖腹术暴露出胃，迅速于幽门与贲门处结扎后，将胃取出。切开胃，用100mL 0.1N NaOH提取其内容物。利用分光光度计，在558nm处，通过比色测定该提取物中的酚红含量。收集后，在转移供分析期间，将样品保存于湿冰上。

[0231] 结果

[0232] 在白化病雄性大鼠中，与载体对照和未手术对照动物相比，手术后静脉内施用0.01、0.03和0.1mg/kg剂量的伊帕瑞林加速胃排空，但未观察到剂量关联性。与载体对照组相比，经静脉内伊帕瑞林给药(0.01、0.03或0.1mg/kg)处理之动物显示胃酚红含量减少。在所有剂量下，这些减少量均达到统计学显著性(0.01和0.1mg/kg时p≤0.05；
0.03mg/kg时p≤0.0)。参见图3。

[0233] 关于平均胃酚红量，载体对照组与未手术对照组相似且无统计学意义上的差异，可表现出不能引起在手术对照组中可检测的肠梗阻。因此，当相比于未手术对照组来表示时，经静脉内给药(0.01、0.03或0.1mg/kg)伊帕瑞林处理之动物在所有剂量水平下均显示统计学显著的胃酚红含量减少。

[0234] 实施例4.吗啡引起大鼠胃肠梗阻的效力

[0235] 此研究之目的是评估吗啡引起大鼠胃肠梗阻的潜在效力。各处理组设置如下。

[0236]

[0237] ＊针对第2～3组吗啡施用剂量体积为0.1mL/kg

[0238] ＊＊针对第4～5组吗啡施用剂量体积为0.4mL/kg

[0239] 方法及实验设计

[0240] 从 Charles River Canada Inc.St.Constant，Quebec，Canada 获得雄性Sprague-Dawley (Crl： (SD))大鼠(Rattus norvegicus)。抵达后，所有动物均由具有资质的兽医工作人员进行一般身体检查以确保健康状况正常。所有动物均被认为可进行使用。从获得动物至开始处理之间有九天时间使动物适应实验室环境。开始处理时，动物大约7周龄，体重为231g～267g。需注意，动物体重略微在实验流程所述范围之外。
此偏差被认为对研究结果或对该结果之解释没有影响。

[0241] 将动物分别安置于配有自动给水阀的不锈钢网眼底部之笼中。动物室环境之指标条件和光照周期为：温度22±3℃；湿度50±20％；光周期为12小时光照及12小时黑暗。

[0242] 所有动物均令其自由取用(除了指定程序期间外)经标准认证之颗粒状市售实验室饲料(PMI Certified Rodent Chow 5002：PMI NutritionInternational Inc.)。该饲料受到管控并由制造商定期分析污染物(例如，重金属、黄曲霉毒素、有机磷酸酯类、氯化烃和PCB)之最大容许浓度。这些分析结果保留于PCS-MTL之科学档案中。随意地提供经软化、反渗透纯化并暴露于紫外线之市政自来水(除了指定程序期间外)。对水的定期分析转包给由PCS-MTL质量保证部门审核的授权管理分析实验室。这些分析结果保留于PCS-MTL之科学档案中。认为在饲喂物质中不存在可能影响研究结果之已知污染物。

[0243] 在给药当天制备剂量配方。将合适的对照溶于载体中以达到所期望浓度。使用所提供的吗啡硫酸盐溶液。在给药当天，制备5mg/mL的酚红溶液，于室温保存，避光待用。

[0244] 给药施用

[0245] 使用附加于注射器的皮下注射针，于上背部(肩胛骨区域)进行皮下注射，施用一次吗啡(4mg/kg或1mg/kg)。于施用对照/阳性对照物质大约30分钟之前施用吗啡。第2及第3组的剂量体积为0.1mL/kg；第4及第5组为0.4mL/kg。实际施用剂量根据每只动物的最近体重来确定。

[0246] 胃肠评估

[0247] 注射吗啡大约30分钟后，经口强饲所有动物0.4mL酚红。施用对照或测试物质约30分钟后，使大鼠安乐死。然后使用剖腹术暴露出胃，迅速于幽门与贲门处结扎后，将胃取出。切开胃，用100mL 0.1NNaOH提取其内容物。利用分光光度计中，在558nm处，通过比色测定该提取物中的酚红含量。收集后，在转移供分析期间，将样品保存于湿冰上。

[0248] 结果

[0249] 与对照动物相比，皮下施用1或4mg/kg剂量之吗啡显著减少胃排空大约42％，然而未达到统计学显著性。暴露于1mg/kg吗啡后，静脉内施用50μg/kg剂量之生长激素释放肽(已知逆转胃肠梗阻的强效促动力(prokinetic)肽)，与以1mg/kg及盐水处理之动物相比，加速胃排空大约37％以及逆转所引起之肠梗阻大约11％。然而，在施用4mg/kg吗啡之大鼠中，生长激素释放肽未加速胃排空，并且此二组(盐水和生长激素释放肽)显示相同的酚红吸光度组别平均值(分别为2.99和3.01)。参见图4。

[0250] 结论

[0251] 以1或4mg/kg剂量向白化病雄性大鼠皮下施用吗啡，以非剂量依赖之方式引起相似程度的胃肠梗阻。暴露于1mg/kg吗啡后，生长激素释放肽加速胃排空并逆转所引起之胃肠梗阻，但对施用4mg/kg剂量吗啡之大鼠的胃排空无影响。

[0252] 实施例5.在大鼠模型中，与RC-1139相比，静脉内注射伊帕瑞林(1.0、2.5、10mg/kg)治疗手术后肠梗阻的胃动力学效力

[0253] 在手术后肠梗阻之大鼠模型中，与RC-1139(已知具有胃动力学效力的生长激素释放肽模拟物)相比来评估伊帕瑞林。在此研究中，各药物如下文表中所示以单次静脉内注射施用。处理组如下。

[0254]

[0255]

[0256] ＊在施用10mg/kg剂量(n＝2)后立即观察到致死，因此第4组中所有其余动物之剂量水平减少至0.25mg/kg。

[0257] 所有动物每天检查两次死亡数及健康状况不佳迹象或对处理之反应(抵达当天以及当动物检查一次即验尸时除外)。随机及于用药前一天测量个体体重(仅供计算剂量之用)。在施用10mg/kg剂量之伊帕瑞林后立即有两只动物死亡，因此第4组所有其余动物以0.25mg/kg给药。

[0258] 方法和实验设计

[0259] 为各处理组随机分配Sprague-Dawley (Crl： (SD))雄性大鼠(Rattus norvegicus)。从获得动物至开始处理之间至少有五天时间使动物适应实验室环境。开始处理时，动物大约7周龄，体重为205g～272g。

[0260] 在制备第一个剂量配方之前，进行2mg/mL(测试物质溶液)和2mg/mL(参考物质溶液)试用制剂以确定所建议配制方法的适用性。

[0261] 给药时，使适量测试物质或参考物质溶于0.9％USP注射用氯化钠中制备各配方。依需要，用0.1N/1N盐酸或0.1N氢氧化钠将给药配方调整至pH 7.4～7.5。使用前，所有给药配方通过0.2μm PVDF滤膜过滤，保持于室温并避光。

[0262] 在给药当天，在去离子水中制备5mg/mL的酚红溶液，于室温保存并避光。

[0263] 引起手术后肠梗阻的手术

[0264] 所有处理程序均在连续两天的时间内重复进行，在所述重复处理中每天处理来自各组的数目大致相同的动物。进行手术前，使动物禁食过夜。在手术当天，用异氟烷气体麻醉动物，向每只眼睛施加无刺激润滑性眼药。准备手术时，剃除动物整个腹部区域的毛。在切开之前，清理经剃毛的区域并适当消毒。使用解剖刀打开腹部，对盲肠定位。使盲肠离体，处理约一分钟(即，在盐水浸泡的纱布中，以双手轻拍之)。然后，将盲肠放回原位，使用可吸收之缝合材料(间断缝合法)和缝合钉使手术部位闭合。然后，将动物放回原笼中，使其从麻醉中苏醒。

[0265] 给药施用

[0266] 经口强饲酚红后，立即对动物给药。使用注射器及适当规格的针，经由静脉内注射施用测试/对照物质与参考物质(以缓慢推注注射给药约100秒)至尾静脉。剂量体积为5mL/kg，实际施用剂量根据每只动物的最近体重来确定。

[0267] 胃肠评估

[0268] 施用酚红之前，停止向动物供应水。手术后约30分钟后，经口强饲动物0.4mL酚红。然后用测试物质给药，大约30分钟后，使其安乐死。安乐死后，使用剖腹术暴露出胃，迅速于幽门与贲门处结扎后，将胃取出。切开胃，用100mL 0.1N NaOH提取其内容物。利用分光光度计，在558nm处，通过比色测定该提取物中的酚红含量。收集后，在转移供分析期间，将样品保存于湿冰上。

[0269] 结果

[0270] 在白化病雄性大鼠中，与对照及经RC-1139处理之动物相比，引起手术后肠梗阻后静脉内施用0.25、1和2.5mg/kg伊帕瑞林加速胃排空，但未观察到单调剂量关联性。参见图5。

[0271] 0.25和2.5mg/kg之静脉内剂量各自显示相似的效力水平，酚红含量分别减少约50和60％；而在1mg/kg剂量后观察到约21％排空。施用10mg/kg RC-1139剂量后，酚红标记物之胃含量与对照组相比少了约16％。

[0272] 结论

[0273] 与对照及参考动物相比，向手术后肠梗阻之白化病雄性大鼠静脉内施用0.25、1和2.5mg/kg剂量之伊帕瑞林加速胃排空。

[0274] 实施例6.在健康志愿者中施用伊帕瑞林逆转由吗啡引起的胃排空减慢

[0275] 引言

[0276] 胃排空延缓对包括手术后肠梗阻、阿片物质引起之肠道功能障碍和胃轻瘫之数种重要指标指征具有致病作用。此外，胃排空延缓可促进或加剧恶心。因此，在动物模型中证明能够促进胃排空的制剂(例如伊帕瑞林(参见上文实施例))可在动力减少的多种GI失调症中用作重要的治疗剂。

[0277] 伊帕瑞林是生长激素释放肽模拟物。生长激素释放肽(一种28氨基酸肽的激素)主要在胃的泌酸腺中合成，较少程度地在机体其它器官(例如肾和下丘脑)中合成。生长激素释放肽所行使的重要生理作用之一是其调节胃动力的能力，已证明其在多种动物以及人中具有强的促动力作用(包括GI上部和下部)。参见Masuda 2000，Asakawa 2001，Tack2006。此外，在大鼠模型中，已证实生长激素释放肽消除了手术后胃肠梗阻。参见Trudel 2002。

[0278] 生长激素释放肽之促动力活性很可能由针对肠的直接影响或经由迷走神经-胆碱能-毒蕈碱途径的间接影响而介导。生长激素释放肽局部作用于胃以刺激迷走神经传入神经元的激活(firing)以及刺激胃动力。参见Peeters 2003。业界已进行多年努力，通过鉴定及开发模拟生长激素释放肽的药剂来发掘生长激素释放肽在多种失调症中的正面作用。生长激素释放肽在人中具有非常短的半衰期(约10分钟)，因此其治疗潜力有限。伊帕瑞林是一种生长激素释放肽模拟物，其在人中的半衰期约为6小时，可用于静脉内治疗，并因此适用于治疗用途。

[0279] 本研究经设计，使用被充分确认之临床药理学模型(对乙酰氨基酚AUC)来评估伊帕瑞林对胃排空的影响。上文实施例中已证明伊帕瑞林在大鼠模型中对胃排空具有强效的刺激作用。此研究旨在将这些发现延伸至人。

[0280] 剂量

[0281] 此研究选用之伊帕瑞林剂量(0.06mg/kg静脉内输注15分钟)已于先前第一阶段研究中被证明为安全且耐受良好的剂量。在生理盐水中，将伊帕瑞林与2当量乙酸配制成0.5mg/mL无菌溶液。使用前，用生理盐水将此无菌溶液进一步稀释至合适的施用量。

[0282] 此研究选用之吗啡剂量(0.05mg/kg静脉内推注)为临床上适用作为止痛剂量及先前已于正常志愿者中证明显著延缓胃排空的剂量[Yuan1998]。

[0283] 此研究选用的对乙酰氨基酚剂量(1000mg，经口混悬液)是对乙酰氨基酚的标准非处方药剂量。此剂量已成功地用于先前的胃排空研究并产生易于测量的血浆浓度(＞0.2μg/mL)。

[0284] 此研究设计为标准的三阶段、随机、单剂量交叉研究。

[0285] 此研究使用单剂量施用进行，其在胃排空的对乙酰氨基酚AUC模型中是适当的并被充分研究。本研究使用的所有三种药物具有六小时或更短的终末半衰期(terminal half-life)，因此5至8天的冲刷间隔(washout interval)即确保药物自体内完全排除。

[0286] 此研究之目的包括评估静脉内伊帕瑞林逆转由阿片物质引起之延缓胃排空的能力以及评估静脉内伊帕瑞林逆转由阿片物质引起之恶心的能力。本发明人预计，如由血浆对乙酰氨基酚吸收所评估地，伊帕瑞林将逆转由阿片物质引起之延缓胃排空：施用伊帕瑞林后的血浆对乙酰氨基酚AUC0-60与施用安慰剂后相比高出50％。

[0287] 研究设计

[0288] 本研究以单中心、双盲、随机、单剂量、三向交叉进行研究。本研究针对下述处理进行比较：

[0289] 1.吗啡+伊帕瑞林；

[0290] 2.吗啡对照；以及

[0291] 3.正常对照

[0292] 施用对乙酰氨基酚后三小时期间取得血浆样品用于测定对乙酰氨基酚AUC以衡量胃排空。预期吗啡将明显延缓胃排空[Yuan 1998]；进一步预期伊帕瑞林将逆转所观察到的排空延缓。所关注的主要参数是施用对乙酰氨基酚后最初一个小时期间(AUC0-60)血浆AUC所反映出的对乙酰氨基酚的早期吸收。另外关注的参数包括AUC0-180、CMAX和TMAX。

[0293] 在15分钟时间内，经由良好校正之输注泵(例如，Harvard泵或类似装置)施用研究药物。根据体重来计算各对象之剂量，体重最高达100kg(6mg)。然后，使用生理盐水用作注射用稀释剂来将给药体积稀释至总体积为15mL。在注射器中抽吸一气泡(帮助搅拌)，轻轻倒转注射器六次进行混合。

[0294] 施用吗啡

[0295] 通过缓慢推注(30～60秒)施用吗啡(1.0mg/mL)/安慰剂。然后，立即用3～5mL生理盐水冲洗输注导管。

[0296] 施用对乙酰氨基酚

[0297] 施用之前，充分振荡对乙酰氨基酚混悬液(32mg/mL)。施用剂量为31mL(992mg)。然后，使对象再饮用150mL水。

[0298] 结果

[0299] 使用伊帕瑞林的治疗耐受性良好，结果显示逆转了人中由吗啡引起的胃肠动力变慢。参见图6。

[0300] 实施例7.较低剂量伊帕瑞林在健康男性志愿者中对吗啡引起之延缓胃排空的检测

[0301] 此研究设计与实施例6a相同，但评估较低剂量静脉内施用之伊帕瑞林对由阿片物质引起之延缓胃排空的逆转。所示数据针对完成所有处理的23个对象。所述研究处理为：(1)未经处理之(盐水)对照；(2)吗啡0.05mg/kg，静脉内；(3)吗啡0.05mg/kg+伊帕瑞林0.01mg/kg，静脉内，以及(4)吗啡0.05mg/kg+伊帕瑞林0.03mg/kg，静脉内。在各处理周期中经口施用对乙酰氨基酚酏剂以允许评估胃排空。各处理以单盲、安慰剂对照、三方交叉研究来施用，在各处理间有5～8天的冲刷期。

[0302] 结果显示，所测定之血浆对乙酰氨基酚水平降低，因此施用吗啡延缓胃排空。此效力被两种剂量之伊帕瑞林所逆转，并与实施例6所示结果相当。数据示于图6中。

[0303] 实施例8.多种生长激素释放肽模拟物(包括伊帕瑞林)对大鼠胃肠动力之影响的比较

[0304] 此研究之目的在于经单次静脉内输注实验药剂后，与常用促动力药剂(胃复安)和对照，由所测量之木炭运送评估一系列生长激素释放肽模拟物对大鼠胃肠动力的药理效应。

[0305] 处理组如下：

[0306]

[0307]

[0308] a剂量修正为测试物质盐/碱比

[0309] 处理程序：

[0310] 在给药当天制备各给药配方。对于生长激素释放肽模拟物，以适量载体稀释4mg/mL母液等分试样以达到最终期望浓度。参考物质配方也在给药当天制备，其通过将适量参考物质与适量载体混合以达到期望最终浓度来实现。使用所提供的盐水和胃复安(1mg/mL)。

[0311] 连续数天，每天针对大约相同数目的动物给药。处理之前，使动物禁食过夜。使用注射器及适当规格的针，经由静脉内注射施用各配方至尾静脉。剂量体积为5mL/kg或10mL/kg(在仅有胃复安的情形下)。

[0312] 测试物质给药约30分钟后，经口强饲所有动物3mL活性碳，然后使动物禁食及禁水20分钟。

[0313] 观察期后，使大鼠安乐死，打开腹腔，取出胃与肠。记录木炭存在与否。称量胃重(有或无内容物时)，得到胃排空指征。切开肠，延伸至其全长。确定木炭位置，测量从幽门括约肌至木炭最近端及最远端踪迹的距离，以及从幽门括约肌至盲肠的总距离。另外，测量木炭行进之距离(表示为小肠全长的百分比)。

[0314] 结果

[0315] 胃复安显著增加小肠动力，进食之木炭行进的远端距离从对照组的67.3％增至胃复安处理组的86.9％，增加了29％。相反地，施用胃复安动物组胃中的木炭量与对照组无明显差异。

[0316] 与对照组相比，伊帕瑞林显著增加胃排空，使残留于胃中的木炭量减少66％。与对照组相比，生长激素释放肽与GHRP-6也使残留于胃中的木炭量分别显著减少57％和64％，但其效应与伊帕瑞林无明显差异。

[0317] 与盐水处理之对照组动物相比，伊帕瑞林明显产生高度显著(P≤0.001)增加之胃排空以及小肠动力增加的倾向，这支持了伊帕瑞林为强效促胃动力药剂的观点。这些实验之结果示于图7和图8中。

[0318] 实施例9.多种生长激素释放肽模拟物(包括伊帕瑞林)对大鼠胃肠动力之影响的比较

[0319] 此研究之目的在于经单次静脉内输注实验药剂后，与对照相比，由所测量之木炭运送评估一系列生长激素释放肽模拟物对大鼠胃肠动力的药理效应。

[0320] 处理组如下：

[0321]

[0322] a伊帕瑞林及RC-1139之剂量针对其各自纯度进行修正

[0323] b此两种化合物经由含有适量各化合物之单一配方以单次注射给药进行共施用[0324] 处理程序：

[0325] 开始用药即针对来自各组之数目大致相同之动物连续每天给药。处理之前，使动物禁食过夜。给药之前，停止向动物供应水。使用注射器及适当规格的针，经由静脉内注射施用测试/参考/阳性对照物质至尾静脉。剂量体积为5mL/kg，实际施用剂量根据各动物之最近体重来确定。

[0326] 测试/参考或阳性对照物质给药约30分钟后，经口强饲所有动物3mL活性碳，然后使动物禁食及禁水20分钟。

[0327] 观察期结束时，使大鼠安乐死，打开腹腔，取出胃与肠。记录胃中存在木炭与否。称量胃重(有或无内容物时)，得到胃排空指征。切开肠，延伸至其全长。确定木炭位置，测量从幽门括约肌至木炭踪迹最近端及最远端的距离，以及从幽门括约肌至盲的之总距离(所有距离均以mm为单位测量)。除了胃重量(有或无内容物时)之外，记录木炭行进之距离(表示为小肠全长之百分比)，得到胃排空指征。记录20分钟观察期间注意到之任何异常或不寻常的临床症状。

[0328] 结果

[0329] 以75μmole/kg单次静脉内给药时，生长激素释放肽以及本研究所测试之三种生长激素释放肽模拟物(伊帕瑞林、GHRP-6和RC-1139乙酸盐)(当独立地施用时)对白化病雄性大鼠之胃排空及肠运送显示出不同的效应。只有伊帕瑞林在胃排空及两种小肠运送测量上(木炭从幽门括约肌行进之近端和远端距离)表现出与生长激素释放肽相同的促动力效应。生长激素释放肽、GHRP-6和伊帕瑞林产生由肠运送两种测量之一(木炭从幽门括约肌行进之近端距离)所示的胃排空。参见图9、10和11。

[0330] 实施例10.伊帕瑞林用于治疗大鼠手术后肠梗阻的效力

[0331] 此研究之目的在于探讨伊帕瑞林是否加速大鼠模型POI的结肠运送。为了进行该评估，同时评价了单次给药及多次给药的效力。

[0332] 材抖与方法

[0333] 动物：从Charles River(Wilmington，MA)获得右颈静脉植入留置导管的成年Sprague-Dawley雄性大鼠。所述动物的初始体重为250～270g。在适应环境期间，导管保持开放，供伊帕瑞林或载体给药用。附加组的对照大鼠(未进行手术及药物或载体处理)购买时带有植入结肠近端(离盲肠1～2cm)用于输注测量结肠运送之染料标记物的留置导管。所有大鼠于受控条件下单独分笼安置(25℃，12h光照/黑暗周期)，以及自由取用食物和水。实验前允许至少一周的环境适应期。

[0334] 引起手术后肠梗阻(POI)：利用如“running of the bowel”(Kalff等，1998)所述之手术方法引发POI。具体而言，用异氟烷(2～3％)吸入法麻醉大鼠，剃除腹部之毛，消毒，沿中线切开以暴露出内脏。使小肠及盲肠离体，使用浸于无菌盐水中的棉花涂抹器检查5分钟。检查完成后，用浸于盐水中的纱布覆盖肠，再使腹部敞开10分钟。为了研究结肠运送，在结肠近端(离盲肠1cm)注射200μl非吸收性染料标记物(盐水中的台盼蓝)。然后用丝缝线使切口闭合。整个过程持续25～30分钟。手术总是于上午6:00至8:00进行，动物在光照/黑暗周期的光照阶段接受伊帕瑞林或载体处理。

[0335] 结肠运送时间之测量：实验之前，使大鼠禁食20～22小时，但其可自由取用水。手术结束时，使大鼠接受染料标记物的结肠内注射。手术后，将大鼠置于供应有预先称重之食物(Purina大鼠饲料)和水的干净原笼中。评估作为结肠运送时间的手术结束至粪便颗粒出现染料之期间。每一实验日，使未进行手术及药物或载体处理之未处理大鼠与患POI之大鼠一起进行研究。未处理大鼠配有在20～22小时禁食后用以输注染料标记物至结肠内的结肠导管。从这些动物收集之数据作为健康对照的参考。在先前研究中，患POI大鼠显示，与未处理动物相比，结肠运送时间明显延缓(Zittel等，1998；Greenwood-Van Meerveld，未公开数据)。

[0336] 累积粪便量、食物摄入量及体重：手术后最初48小时期间，以3小时为间隔以及以12小时为间隔计数粪便颗粒并称重(参见实验设计)。将手术后整个48小时期间的颗粒数相加，以评估累积粪便量。根据实验设计以3小时为间隔以及以12小时为间隔记录食物摄入量并归一化为g/100g体重。在这两个系列实验中均计算手术后48小时的累积食物摄入量。在动物禁食之前每天上午8:00～9:00、实验当天手术之前以及手术后24小时和48小时测量体重。体重变化以相比于禁食动物手术前体重所增加的体重来表示。

[0337] 测试物质和对照物质：使测试化合物伊帕瑞林(游离碱)与2摩尔当量冰乙酸混合，将其转化为二乙酸盐。每天于无菌盐水加上冰乙酸(每毫升0.1μl)中制备0.5mg/ml母液，使伊帕瑞林成为溶液(pH 3～4)。接着用NaOH滴定该溶液至pH 7.0～7.2。3
用盐水制备另外的稀释液。载体对照实验使用无菌盐水。阳性对照[D-Lys]-GHRP-6购自Sigma-Aldrich(St.Louis，MO)，使其溶于无菌盐水中。测试物质和对照物质均以
0.2ml/100g体重的量以推注剂经由颈静脉导管静脉内输注施用。

[0338] 数据及统计分析：各组之数据以平均值±SEM表示。各组间之差异以Student’s T检验评估统计学显著性，以及适当时以单向或双向ANOVA随后利用Dunnett’s或Bonferroni’s检验进行多重比较。p＜0.05的水平被视为显著。此外，使用线性回归分析评估多剂量效应的数据以测定各处理直线斜率间的显著性差异。

[0339] 实验设计：

[0340] 实验系列1：测定单一剂量伊帕瑞林在大鼠POI模型中引起的急性效应。

[0341] ·使大鼠适应设施7天；导管保持敞开

[0342] ·第0天：上午8:00至9:00，测量大鼠体重及禁食

[0343] ·第1天：上午6:00至8:00，在异氟烷麻醉下进行“肠道运行(running of the bowel)”手术

[0344] 手术结束时，在结肠近端输注染料

[0345] 用伊帕瑞林或载体进行单一剂量处理

[0346] 于原笼中观察(第一次粪便颗粒时间；手术后3、6、9和12小时的粪便量及摄食量)

[0347] ·第2天：上午7:00至8:00，手术后24小时的体重、粪便量、摄食量

[0348] ·第3天：上午7:00至8:00，手术后48小时的体重、粪便量、摄食量

[0349] 用过量异氟烷使其安乐死

[0350] 使未处理大鼠禁食但不进行手术。与患POI大鼠相同时间点测量体重、结肠运送、粪便颗粒量和摄食量。

[0351] 组(单一剂量处理)：

[0352] POI+载体(静脉内) n＝12

[0353] POI+伊帕瑞林0.1mg/kg(静脉内) n＝9

[0354] POI+伊帕瑞林1mg/kg(静脉内) n＝10

[0355] POI+GHRP-620μg/kg(静脉内) n＝8

[0356] 未处理(不进行手术、无药物处理) n＝14

[0357] 实验系列2：测定多剂量伊帕瑞林在大鼠POI模型中的效力。

[0358] ·使大鼠适应设施7天；导管保持敞开

[0359] ·第0天：上午8:00至9:00，测量大鼠体重及禁食

[0360] ·第1天：上午6:00至8:00，在异氟烷麻醉下进行“肠道运行”手术

[0361] 手术结束时，在结肠近端输注染料

[0362] 伊帕瑞林或载体多剂量给药(手术结束时第一次给药、每间隔3小时进行第二次、第三次和第四次给药)

[0363] 于原笼中观察(第一次粪便颗粒时间；手术后3、6、9和12小时的粪便量及摄食量)

[0364] ·第2天：上午7:00至8:00，手术后24小时的体重

[0365] 伊帕瑞林或载体多剂量用药(测量体重后第一次给药、每间隔3小时进行第二次、第三次和第四次给药)

[0366] 于原笼中观察(手术后24、27、30、33与36小时的粪便量、摄食量)

[0367] ·第3天：上午7:00至8:00，手术后48小时的体重、粪便量、摄食量

[0368] 用过量异氟烷使其安乐死

[0369] 使未处理大鼠禁食但不进行手术。与患POI大鼠相同时间点测量体重、结肠运送、粪便颗粒量及摄食量。应注意，相比于患POI之大鼠(其在伊帕瑞林或载体给药期间经多次处理)，未处理动物留在其原笼中且未经处理。

[0370] 组(多剂量给药)：

[0371] POI+载体(静脉内) n＝8

[0372] POI+伊帕瑞林0.01mg/kg(静脉内) n＝8

[0373] POI+伊帕瑞林0.1mg/kg(静脉内) n＝8

[0374] POI+伊帕瑞林1mg/kg(静脉内) n＝7

[0375] 未处理(不进行手术、无药物处理) n＝8

[0376] 结果

[0377] 大鼠中的POI：腹部手术对结肠运送时间、粪便颗粒量、摄食量及体重的影响。

[0378] 进行“肠道运行“手术之大鼠与未处理大鼠之间的比较表明，手术造成POI的发展，其特征为结肠运送延缓(图12A)、粪便颗粒量减少(图12B)、摄食量减少(图12C)及体重增加(图12D)。

[0379] 大鼠POI模型。(A)与未处理大鼠相比，结肠运送时间(以第一个经标记粪便颗粒的时间来测量)于手术后明显延缓。(B)与未处理大鼠相比，手术后24小时及48小时累积粪便颗粒量减少。(C)与未处理大鼠相比，手术后24小时及48小时累积摄食量明显降低。(D)与未处理大鼠相比，手术后体重增加减少。数据为来自12只患POI大鼠及14只未处理大鼠的平均值±SEM。使用Student t检验测试进行手术之大鼠与未处理大鼠间差异的显著性：＊p＜0.05、＊＊p＜0.01、＊＊＊p＜0.001。

[0380] 实验系列1：测定用伊帕瑞林单一剂量处理在大鼠POI模型中引起的急性效应。

[0381] 在患POI大鼠中进行实验以研究0.1mg/kg或1mg/kg伊帕瑞林单一剂量处理的效力。手术结束后，经由静脉内输注施用伊帕瑞林或载体。手术后最初48小时期间，测量第一个粪便颗粒时间(图13)以及累积粪便颗粒量(图14)、摄食量(图15)和体重增加(图16)，比较伊帕瑞林效应与载体效应以评估伊帕瑞林的效力。此外，使用20μg GHPR-6(一种GRLN激动剂，即GHS-R1a)作为阳性对照(Davenport等，2005)。图13所示结果表明1mg/kg伊帕瑞林或20μg GHRP-6的手术后单一剂量明显减少结肠运送时间。

[0382] 然而，在手术后最初48小时期间，伊帕瑞林或GHRP-6对粪便颗粒量(图14)、摄食量(图15)或体重增加(图16)均无明显影响。

[0383] 总之，实验系列1所得结果证明，在手术结束时给与1mg/kg伊帕瑞林单一剂量处理缩短了距第一次肠运动的时间，但对于患POI之大鼠48小时复原期间的粪便量及摄食量并未引起影响。然而，这些结果与根据文献报告之伊帕瑞林于大鼠中半衰期为30～60分钟(Johansen等，1998)所预期的结果一致。

[0384] 实验系列2：测定多剂量伊帕瑞林在大鼠POI模型中的效力。

[0385] 在患POI大鼠中研究多剂量伊帕瑞林(0.01、0.1或1mg/kg，静脉内)的剂量响应效应。结果显示，与载体之效应相比，0.1mg/kg或1mg/kg伊帕瑞林之多剂量用药导致结肠运送明显加速(图17)。

[0386] 多剂量伊帕瑞林对粪便颗粒量的影响示于图18中。与载体相比，多剂量伊帕瑞林导致累积粪便颗粒量增加。该影响在0.1mg/kg或1mg/kg剂量时达到显著(图18)。与用载体处理之大鼠相比，接受0.1或1mg/kg静脉内剂量伊帕瑞林之大鼠的粪便量以较高比率增加(低于1/斜率值)。在0.01mg/kg剂量下，伊帕瑞林显示无明显影响。此外，伊帕瑞林引起摄食量增加(图19)。由较高剂量伊帕瑞林引起之摄食量增加与体重增加相关联。如图20所示，与用载体处理之大鼠相比，接受1mg/kg最高剂量伊帕瑞林、根据多剂量模式施用之大鼠在手术后最初48小时期间体重明显增加较多。

[0387] 结论

[0388] 总之，结果证明，在手术后最初48小时期间，在大鼠中多次静脉内给药伊帕瑞林增进结肠运送与摄食量以及体重增加，这提示手术后静脉内输注伊帕瑞林可改善患POI患者的症状。

[0389] 已充分提供本发明之公开内容，本领域技术人员应理解，在不偏离本公开内容精神与范围以及不需过度实验下，可在宽范围的等价参数、浓度与条件下进行。此外，虽然该公开内容通过其具体实施方案来进行描述，但应理解可对其进行进一步修饰。本申请旨在涵盖通常遵循所公开原理以及包括偏离本公开内容而属于本领域已知或常规实践以及可应用于前文描述之主要特征的该公开内容之任何变化、用途、改动。

[0390] 参者文献

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