技术领域
[0001] 本
发明涉及药物制剂领域和
生物学领域，具体涉及一种应用于DNA修复
缺陷类型
肿瘤的PARP酶
抑制剂Talazoparib药物组合物及其用于
治疗癌症的用途，所述药物组合物具有可控的释放行为，能够维持稳定的体内血药浓度和长效的PARP酶抑制活性。
背景技术
[0002] Talazoparib是辉瑞公司于2016年8月收购生物制药公司Medivation,Inc.后，获得的一款新型PARP抑制剂，Talazoparib的分子式为C19H14F2N6O，分子量为380.35，具有下述化学结构：
[0003]
[0004] 人体每个细胞每天会发生成千上万的DNA损伤，DNA损伤有两种，单链断裂和双链断裂。PARP(聚腺苷二
磷酸-核糖聚合酶)主要修复单链断裂，BRCA1和BRCA2基因编码的蛋白通过同源重组(HR)通路参与DNA双链损伤的修复。而在肿瘤细胞中，Talazoparib等PARP抑制剂使得PARP活性受到抑制，致使细胞中单链DNA断裂损伤不被修复并积聚，持续的单链DNA损伤在DNA复制过程中将转化为双链DNA损伤，由于BRCA1/2基因功能缺陷的肿瘤细胞不能通过HR修复双链DNA损伤，这将导致DNA复制叉的停止，产生细胞毒性，导致合成致死，最终靶向杀死肿瘤细胞。
[0005] 作为具有对DNA双链重组修复功能缺陷性肿瘤细胞的特异性靶向杀伤作用的“最强效”PARP酶抑制剂，Talazoparib在抗肿瘤等多个领域也吸引了众多科研工作者的眼球。然而，这种强效作用和非可逆的酶抑制机制，也使之在临床上的毒
副作用明显，到目前为之，仍无具体的临床数据优势显现或报道。
[0006] 据临床药动数据结果可见，Talazoparib单次口服后，吸收较快，1-2小时即可达最大吸收峰；I期临床研究发现，在25-1100ug/天的单剂量下，Talazoparib的系统暴露量随着剂量增加而成比例增加；25-1100μg/d的多剂量
给药情况下，第二周末达稳态血药浓度，28天后的平均Cmax＝0.30-25.4ng/mL，平均AUC0-24h＝3.96-203ng*hr/mL。在900ug/d和1100ug/天剂量下，分别有1/6和2/5的患者出现了不可控的血小板减少症，最终确定II期临床剂量为1000ug/天。最终推荐的II期临床剂量为1mg/次/天，该剂量下，Talazoparib的
血浆半衰期较长(>40h，也有数据报道>100小时)，稳态血药波峰和波谷浓度分别为50nM(19.02ng/mL)和10nM(3.80ng/mL)，波峰值约为波谷值的5倍左右。
[0007] 较大的化合物毒性和较高的血药浓度
波动范围，导致在研的Talazoparib口服速释胶囊在临床运用的过程中，显示出较多的局限性：1)速释胶囊虽可快速达PARP酶抑制所需的血药浓度
水平，但药物吸收较快，血药浓度突高，导致Talazoparib的稳态血药浓度波动范围较大，稳态血药浓度峰值高于PARP酶抑制所需浓度几倍甚至十几倍，产生较多严重的毒副作用；2)较高的稳态血药浓度波峰值，导致较多的毒性产生，限制了剂量的进一步推升和体内药物PARP酶抑制所需血药浓度的提高，进而阻碍了药效的进一步提升；3)药物口服剂量较小，对
固体制剂的制备过程提出较高的要求。
[0008] 为进一步改善Talazoparib的临床抗肿瘤疗效，并降低药物的毒副作用，有必要提供一种可稳定维持PARP酶抑制所需血药浓度并降低血药浓度波峰/波谷比值的优良组合物形式，本发明的目的就是开发一种Talazoparib药物组合物，通过控制其释放行为，精确调控Talazoparib于体内的吸收速率和吸收时间，进而控制体内血药浓度水平及其波动范围，维持体内血药浓度于有效PARP酶抑制水平的长期稳态，提高Talazoparib的抗肿瘤疗效，减少用药后的不良反应。
[0009] 经
专利检索，目前尚无公开的与Talazoparib有关的制剂专利。为进一步提高Talazoparib的临床疗效，本发明公开了一种可精确调控Talazoparib血药浓度水平和波动范围的
控释组合物，该组合物可控地调节酶抑制所需血药浓度水平的长期维持，同时降低血药浓度波动范围，进而在提高肿瘤细胞的PARP酶抑制率和抗肿瘤疗效的同时，减少了肿瘤患者用药后的不良反应，增加患者服药的
顺应性。
发明内容
[0010] 半衰期较长的Talazoparib，多剂量给药后，往往产生较高的稳态血药波峰/波谷比值(>5)，即较大的血药浓度波动，加之该药物对PARP酶的不可逆性抑制作用，导致Talazoparib的速释胶囊制剂存在众多安全性问题，限制了其临床疗效的进一步提升和发挥。
[0011] 本发明的首要目的是针对Talazoparib的生物学性质和临床治疗的药效及安全性需求，提供一种体内吸收行为、血药浓度和PARP酶抑制水平可控的Talazoparib药物组合物，以进一步提高Talazoparib的临床疗效，减少肿瘤患者用药后的不良反应，并增加患者服药的顺应性。本发明涉及具有改进Talazoparib药物载量和/或体内吸收和/或生物利用度和/或血药浓度控制和/或酶抑制水平控制的新型药物的组合和他们作为唯一制剂或其他疗法
联合治疗癌症的用途。
[0012] Talazoparib属于难溶性药物，本发明所提供的Talazoparib药物组合物中的活性成分Talazoparib可以是Talazoparib的游离
碱形式，也可以是其药理学上可接受的盐形式的化合物，例如Talazoparib
甲苯磺酸盐，Talazoparib
盐酸盐，Talazoparib
硫酸盐，Talazoparib
马来酸盐和Talazoparib樟脑酸盐等。因此，在本发明药物组合物中的活性成分Talazoparib包括Talazoparib的游离碱和其药理学上可接受的盐。
[0013] 本发明提供了一种Talazoparib药物组合物，所述组合物包含0.1-200重量份的活性成分Talazoparib，0.1-500重量份的释放速率调节用辅料，0-10重量份的小分子调节剂，0-2000重量份的药用可注射
溶剂。
[0014] 本发明所述的组合物中的药物释放速率调节用辅料选自药用可
生物降解聚合物、药用油脂、药用
表面活性剂以及其他可实现局部注射缓释效果的药用辅料(如
蔗糖醋酸异丁酸酯)的一种或两种以上的组合；具体地，药用
可生物降解聚合物可为选自：聚乳酸(PLA)、聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)、聚原酸酯类、醋酸-异丁酸蔗糖酯、
脂肪酸甘油酯、
聚乙二醇化的PLA/PLGA、三乙二醇聚(原酸酯)聚合物、壳聚糖、
水溶性羧甲基壳聚糖、丝心蛋白、聚-β-羟基丁酸戊酸酯、聚丙交酯/丙交酯-聚乙二醇共聚物或其共混物、聚β-羟基丁酸酯与聚乙二醇共混物和聚乳酸/羟乙酸共混物中的一种或两种以上的组合。所述药用表面活性剂可为选自：注射用磷脂、吐温20、吐温80、Cremphor EL、Solutol HS 15、聚山梨醇酯80、聚山梨醇酯20、聚
氧乙烯
蓖麻油60，泊洛沙姆188、聚氧乙烯脂肪酸酯、磷脂酰胆碱(如DEPC或DOPC或它们的组合物)、磷脂酰甘油(如DPPG)和其他可药用的表面活性剂中的一种或两种以上的组合。所述药用油脂可为选自：甘油、胆固醇、丙二醇酯、乙二醇酯、
角鲨烯、
硬脂酸、
橄榄油、
大豆油、
椰子油，蓖麻油，芝麻油，
花生油，
棉子油、甘油三脂(如油酸甘油三酯或辛酸甘油三酯)和其他的药用油脂(例如油酸甘油酯，如单油酸甘油酯，双油酸甘油酯，三油酸甘油酯以及它们与磷脂等的混合物等)以及相应盐中的一种或两种以上的组合。
[0015] 所述小分子调节剂具体地可为选自渗透压或酸碱度(pH)调节剂，如：乙酸、无水枸橼酸、
抗坏血酸、氯化
钙、苯甲酚、依地酸钙二钠、依地酸钠、甘
氨酸、组氨酸、盐酸、乳酸、单水乳糖、氯化镁、甘露醇、甲磺酸、蛋氨酸、
苯酚、磷酸、无水氢二
钾、醋酸钠、抗坏血酸钠、
碳酸氢钠、亚硫酸氢钠、
氯化钠、
柠檬酸钠、氢氧化钠、磷酸钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸钾、
磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、碳酸钠、
碳酸氢钠、葡甲胺、鱼精蛋白、对羟基苯
甲酸丙酯、胆固醇、
植物甾醇、精氨酸、三
乙醇胺、
葡萄糖、山梨醇、蔗糖、
酒石酸、氨丁三醇、醋酸锌、氯化锌、葡萄糖中的一种或两种以上的组合。
[0016] 所述药用可注射溶剂可为选自：水、苯甲醇、氯丁醇、二甲亚砜、甲基吡咯烷
酮、丙二醇、聚乙二醇(单)甲醚、三乙酸甘油酯
苯甲酸苄酯、甘油糖
醛、甘油缩甲醛、丙二醇、乙醇、乙二醇二乙醚和其他可药用的注射溶剂中的一种或两种以上的组合。
[0017] 本发明提供的药物组合物的贮存形式可以是溶液、混悬液、冻干粉或预装药物粉末或溶液的
注射器形式，可供皮下、皮内、肌肉以及其他部位的注射或埋植。
[0018] 本发明提供的药物组合物可选自可供局部注射的或埋植用的混悬剂，油针制剂，缓释微球，植入凝胶，多囊脂质体及其他可应用的缓控释局部注射递药系统(如SABER delivery system和Camurus FluidCrystal injection系统等)等。
[0019] 本发明提供的药物组合物中注射前的单位制剂中药物活性成分的含量(单次注射制剂中含药量)约为0.1mg～200mg，优选制剂含药量为0.5-100mg，更优选1-50mg，甚至更优选1-20mg，人体上所需的单次局部注射或埋值的体积为0.5-2mL，优选每次注射或埋植的制剂量为1mL。
[0020] 鉴于Talazoparib对PARP酶抑制活性的非可逆性抑制机制，长期的高浓度抑制可能导致
机体难以耐受的毒副作用，因此，不排除每一次或多次用药后，给予机体一定“药物假期”的给药形式，即用药后一段时间，待药物吸收并消除后，再给予机体一定的恢复周期，才能再次用药。
[0021] 本发明提供的Talazoparib药物组合物具有可控的释药行为，注射或埋植给药后，在预定的时间段内，在符合漏槽条件的释放介质中，其释放行为和释放量可控，在水性介质中，37℃条件下，6小时内释放量小于Talazoparib总量的10％，甚至可小于5％；24h释放量小于Talazoparib总量的30％，甚至可小于20％；90％药物释放时间>3天，甚至可大于7天，大于14天或大于30天。
[0022] 与目前在研的临床制剂——速释胶囊相比，本发明所提供的药物组合物注射给药后，可快速达到有效抗肿瘤PARP酶抑制所需的血药浓度水平，并可避免血药浓度波动，维持在有效的血药浓度下几天，甚至数十天。该有效血药浓度可几天至几十天维持在0.2ng/mL-50ng/mL的范围内，甚至血药浓度大于2ng/mL
[0023] 本发明提供了所述Talazoparib药物组合物在制备用于治疗和/或
预防具有DNA修复功能缺陷的肿瘤(如卵巢癌、
乳腺癌、胃癌等)的药物中的用途。
[0024] 本发明提供的Talazoparib药物组合物可用于具有DNA修复功能缺陷的肿瘤(如卵巢癌、乳腺癌、胃癌等)的临床治疗。
[0025] 与口服普通速释制剂相比，具有如下优点：
[0026] 1)可实现药物的可控化释放和吸收，提供精确的体内血药浓度和长时间稳定的高效肿瘤抑制水平，药效持久；
[0027] 2)可控的药物吸收速率，控制血药浓度水平和波动范围，避免患者用药后过多的不良反应；
[0028] 3)单次注射或埋植后，可维持较长时间的有效PARP酶抑制，减少了普通制剂每天用药的繁琐过程，更加方便临床用药；
[0029] 4)由于可控的血药浓度及其波动范围，安全窗口较大，临床治疗过程中，临床剂量和给药方案可灵活调节，有望进一步提高治疗剂量，增强抗肿瘤疗效。
[0030] 为更好的阐述本发明提供的奥拉帕尼药物组合物性质，下文的叙述是对于本发明的详细说明，对本发明的范围不构成任何限制。
附图说明
[0031] 图1显示对比
实施例1的速释talazoparib胶囊的释放曲线。
[0032] 图2显示对比实施例1的速释talazoparib胶囊和实施例1中的talazoparib原位凝胶注射液的犬体内药时曲线图。
[0033] 图3显示实施例2中的缓释微球的释放曲线。
具体实施方式
[0034] 1.多囊脂质体
[0035] 本发明提供的多囊脂质体(Liposomes)主要是由胆固醇和磷脂等组成的类似于
生物膜双分子层结构封闭的微小囊泡，是一种新型的药物载体。脂质体按结构可分为3类：单室脂质体(ULV)、多室脂质体(MLV)和多囊脂质体(MVL)，其中前两者为同心脂质体，而MVL则属于非同心脂质体，MVL是由非同心的类脂双分子囊泡紧密堆积而成的聚集体，是一种传递药物的新型脂质体。这种脂质体装载药物后，注射进入体内形成药物储库，产生良好的缓释作用，这样不仅可减少患者的用药次数，还能提高治疗的依从性，已成为众多学者研究的热点。
[0036] 本发明的talazoparib药物组合物可以为talazoparib多囊脂质体形式，其中所述talazoparib多囊脂质体组合物包含活性成分talazoparib、脂质成分(包括油脂和表面活性剂)以及非必须的其他可药用的pH/渗透压调节剂中的一种或两种以上的组合；其中，所述talazoparib多囊脂质体组合物包含0.1-200重量份，优选0.5-100重量份，更优选1-50重量份的，甚至更优选1-20重量份的活性成分talazoparib，0.1-300重量份、优选0.1-200重量份的脂质成分，和非必须的0-10重量份的其他可药用的pH/渗透压调节剂
[0037] 所述talazoparib是装载至多囊脂质体内部的唯一活性成分；该制剂组合物可以包括未被多囊脂质体包裹的游离talazoparib，未被多囊脂质体装载的游离talazoparib的量一般小于组合物中talazoparib总量的20％，优选小于10％。
[0038] 所述脂质成分选自至少一种两亲性脂质和/或至少一种中性脂质；所述两亲性脂质包括磷脂酰胆碱或磷脂酰甘油或相应盐或以上一种或两种以上成分的组合；在某些实例中，磷脂酰甘油可以是DPPG，在某些实例中，磷脂酰胆碱可以选自DEPC或DOPC或它们的组合物；所述中性脂质包括乙二醇酯，角鲨烯、甘油、甘油三酯和丙二醇酯或以上成分的混合物等，在具体的实例中甘油三脂可以选自油酸甘油三酯或辛酸甘油三酯。
[0039] 在某些实例中，组合物还可以包括脂质膜流动性调节剂、渗透压调节剂或pH调节剂；所述脂质膜流动性调节剂可以选自胆固醇或植物甾醇等；所述pH调节剂为选自非
有机酸，有机酸，非有机碱，有机碱中的一种或两种以上的组合，具体地说pH调节剂选自盐酸、磷酸、酒石酸、组氨酸、丁氨酸、氨丁三醇中的一种或两种以上的组合；本发明的多囊脂质体的外相水溶液pH范围可在4.0-9.0之间。
[0040] 多囊脂质体组合物制剂中的活性成分talazoparib的单次注射给药量范围是0.1-200mg，在某些实例中，未包裹的游离talazoparib量占组合物中talazoparib总量的0％-
20％。
[0041] 本发明提供的多囊脂质体组合物，可静脉、皮下或肌肉注射给药，优选皮下注射给药。
[0042] 本发明的多囊脂质体的制备方法采用本领域中的常规方法，例如采用复乳法，具体地说，需要包括以下5个步骤：(1)先将
处方量的脂质成分溶解于易挥发的
有机溶剂(通常为氯仿或氯仿与乙醚的
混合液)形成油相，将处方量的talazoparib溶于水中形成含药的水溶液(第一水相)，再以合适的油
水体积比(体积比为1:10-12:10，v/v)将含药的水溶液(第一水相)与脂质的有机相(油相)混合，在室温下超声或机械剪切一定时间制备出均匀的油包水(W/O)型初乳；(2)吸取形成的W/O型初乳，按一定比例注入第二水相缓冲液(体积比为1:10-5:10，v/v)，在30℃条件下机械剪切再次乳化形成稳定的水包油包水(W/O/W)型复乳；
(3)将复乳转移至锥形瓶中，以6L/min的速率用惰性气体(如氮气)除去复乳中的有机溶剂(乙醚、氯仿、二氯甲烷等)，可在表面通入氮气或将氮气
导管伸入锥形瓶底部来除去有机溶剂；(4)必要时，可用适用于储存和生理上可接受的盐溶液(如0.9％氯化钠溶液)置换第二水相，浓缩；(5)调整药物含量、根据含量灌装。
[0043] 所用脂质一般包括中性脂质(常用三酰甘油)、磷脂和胆固醇等，中性脂质是MVL制备过程中重要的部分，否则只能得到普通脂质体。制备初乳的方法有：超声、高速分散、乳匀机、
喷嘴雾化等，实验室中也常采用涡旋混合器或高速分散器进行乳化。
[0044] 处方中包封的介质及脂质的种类不同，都会使药物的释放速度不同，其中中性脂质甘油三酯不同的碳链长短可调节药物的释放速度。除此之外，制备MVL时搅拌的时间、
温度、速度、外水相体积、氮气流速、分离游离药物的方法等对其粒径、包封率、包封容积和
稳定性也会产生一定影响，调节以上工艺条件可获取不同释放速率的Talazoparib多囊脂质体。
[0045] 本发明所提供的多囊脂质体，于6小时内释放量小于制剂中Talazoparib总量的10％，甚至小于5％；24h释放量小于Talazoparib总量的30％，甚至小于20％；90％药物释放时间>3天。本发明所提供的药物组合物注射给药后，可快速达到有效抗肿瘤PARP酶抑制所需的血药浓度水平，并可避免血药浓度波动，维持在有效的血药浓度下几天，甚至数十天。
该有效血药浓度可几天至几十天维持在0.2ng/mL-50ng/mL的范围内，甚至血药浓度大于
2ng/mL
[0046] 2.混悬剂
[0047] 本发明提供的talazoparib药物组合物可以通过talazoparib混悬剂的形式实施，以实现所述的释放行为。所述混悬剂可选自水性介质混悬剂或油性介质混悬剂。
[0048] Talazoparib混悬剂包含活性成分talazoparib，油性溶剂和/或注射用水，和/或混悬剂稳定剂，和/或等渗剂、缓冲剂等；
[0049] 其中，所述talazoparib混悬剂包含0.1-200重量份，优选0.5-100重量份，更优选1-50重量份的，甚至更优选1-20重量份的活性成分talazoparib，0-300重量份的油性溶剂和/或注射用水，0.1-500重量份的释放速率调节用辅料，0-5重量份的等渗剂和/或缓冲剂。
[0050] 在某些实施例中，所述油性溶剂可选自椰子油，蓖麻油，芝麻油，大豆油，花生油，棉子油以及其他的药学上可应用的溶剂中的一种或两种以上的组合。
[0051] 所述释放速率调节用辅料可选自表面活性剂或聚合物，表面活性剂可包括聚山梨醇酯80，聚山梨醇酯20，聚氧乙烯蓖麻油50，聚氧乙烯蓖麻油60，泊洛沙姆和聚氧乙烯脂肪酸酯中的一种或两种以上组合，聚合物可包括羧甲基
纤维素钠、醋酸乙烯酯共聚物、泊洛沙姆、聚乙二醇、羟基乳酸聚合物、聚酯、聚多糖、聚维酮K12/K17，羧甲基
纤维素钠和泊洛沙姆中的一种或两种以上的组合。
[0052] 所述缓冲剂可选自磷酸钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸钾、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、碳酸钠、碳酸氢钠、葡甲胺、精氨酸、三乙醇胺和枸橼酸中的一种或两种以上的组合。
[0053] 所述等渗剂可选自氯化钠、葡糖糖和甘露醇中的一种或两种以上的组合。
[0054] 本发明提供的混悬剂可以是纳米混悬剂或微米混悬剂，纳米混悬剂粒径范围是50nm-800nm，微米混悬剂的粒径范围是1um-18um。可通过本领域常见的均质破坏法等制备，如首先将混悬剂稳定剂溶于水中，将活性药物置于以上含有稳定剂的溶液，经过初步的剪切
破碎后，在一定温度下，循环均质破碎，获取粒径均匀的混悬剂。
[0055] 本发明提供的混悬剂中的活性成分talazoparib的单次给药量范围是0.1-200mg，优选0.5-100mg；本发明提供的talazoparib混悬剂可皮下或肌肉注射给药，优选皮下注射给药。
[0056] 3.原位凝胶
[0057] 原位凝胶植入剂是近年来缓控型注射剂领域的研究热点，它是将药物和聚合物溶于适宜的溶剂中，局部皮下注射，在给药部位，聚合物在生理条件下
凝固而形成半固体或固体药物贮库。原位凝胶克服了普通乳剂、脂质体、微球和胶束的缺点，具有可用于病变部位的局部给药、延长释药周期、降低给药剂量和药物不良反应、避免植入剂开刀植入时的痛苦、工艺相对简单等优点。
[0058] 本发明提供的talazoparib药物组合物可以通过talazoparib原位凝胶系统的形式实现所述的释放行为，其特征在于，该原位凝胶系统包含活性成分药物talazoparib、适宜的溶剂、释放速率调节用凝胶形成材料。其中，所述talazoparib原位凝胶系统包含0.1-200重量份，优选0.5-100重量份，甚至更优选1-50重量份，甚至更优选1-20重量份的活性成分talazoparib；50-2000重量份，优选100-1000重量份的可药用的注射用溶剂0.1-500重量份，优选0.5-250重量份，甚至更优选0.5-100重量份的所述释放速率调节用凝胶形成材料。
[0059] 所述talazoparib原位凝胶系统可以本领域公知的方式制备，具体地，例如，可用聚乙二醇甲醚或N-甲基吡咯烷酮等溶剂溶解药用聚合物聚乳酸或聚乳酸-羟基乙酸共聚物等释放速率调节用凝胶形成材料，形成溶液，该溶液可直接溶解活性药物talazoparib，或与活性药物分别预装在无菌注射器后，临用前再溶解药物。溶解药物后的溶液，局部注射至人体，凝胶形成材料溶解用溶剂在局部快速吸收，部分溶解药物也随溶剂的吸收而快速吸收，而凝胶材料体内遇水性环境，形成半固体或固体状凝胶，而溶解或分散至凝胶系统内的大部分活性药物，则随着凝胶的降解和溶蚀缓慢释放，实现体内药物平稳吸收和血药浓度维持。
[0060] 本发明所述的原位凝胶系统中的适宜的溶剂可为选自N-甲基吡咯烷酮、聚乙二醇(单)甲醚、三乙酸甘油酯苯甲酸苄酯、甘油糖醛、甘油缩甲醛、丙二醇、乙醇、乙二醇二乙醚、苯甲醇、二甲亚砜及其他药学可应用的有机溶剂中的一种或两种以上的组合。
[0061] 所述释放速率调节用凝胶形成材料包括：聚乳酸(PLA)、聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)、醋酸-异丁酸蔗糖酯、脂肪酸甘油酯、聚乙二醇化的PLA/PLGA、三乙二醇聚(原酸酯)聚合物以及其他药学可应用局部注射用缓控释材料中的一种或两种以上的组合。
[0062] 原位凝胶系统中的活性成分talazoparib的单次给药量范围是0.1-200mg，优选0.5-100mg，更优选1-50mg，甚至更优选1-20mg。
[0063] 本法明所提供的Talazoparib原位凝胶系统，于6小时内释放量小于制剂中Talazoparib总量的20％，甚至小于15％；24h释放量小于Talazoparib总量的40％，甚至小于30％；90％药物释放时间>3天。本发明所提供的Talazoparib原位凝胶系统注射给药后，可快速达到有效抗肿瘤PARP酶抑制所需的血药浓度水平，并可避免血药浓度波动，维持在有效的血药浓度下几天，甚至数十天。该有效血药浓度可几天至几十天维持在0.2ng/mL-50ng/mL的范围内，甚至血药浓度大于2ng/mL
[0064] 本发明提供的原位凝胶系统可以溶液状态短期贮存，或以预分装药物和溶剂的注射器形式贮存。
[0065] 本发明提供的原位凝胶系统可静脉、皮下或肌肉注射给药，优选皮下和肌肉注射给药。
[0066] 4.微球
[0067] 本发明提供的微球是指药物溶解或分散在缓释高分子材料基质中形成的微小球状实体，粒径较小，属于基质型骨架微粒。微球具有高效无毒、释药速率恒定以及粒径可控的优点，已广泛应用于长效注射剂的研制。微球注射剂的药物释放速率主要由聚合物传递系统决定。当微球注射入皮下或肌内后，药物可从微球基体内缓慢释放，骨架材料可逐渐
水解溶蚀，降解的最后产物为CO2和水，易为机体吸收而不会引起不良反应。
[0068] 本发明所述释放行为的药物组合物可以talazoparib微球的方式提供，所述talazoparib微球包含活性成分talazoparib和释放速率调节用聚合物材料。本发明的缓释微球包含0.1-200重量份，优选0.5-100重量份，甚至更优选1-50重量份，甚至更优选1-20重量份的活性药物talazoparib，和0.1-500重量份，优选0.2-250重量份，甚至更优选1-200重量份的释放速率调节用聚合物。
[0069] 本发明提供的微球制剂为干燥粉末，临用前，需用可注射用水或其他溶剂混悬均匀后注射；所述其他溶剂可选自0.1wt％-1wt％Tween80的水溶液，甘油，聚乙二醇，聚乙二醇甲醚以及其他药物学上可用的并不影响微球稳定性的注射用溶剂中的一种或两种以上组合。
[0070] 所述talazoparib缓释微球可以用本领域公知的方式制备，具体地，可将活性药物talazoparib与释放速率调节用的聚合物材料溶解于适宜的溶剂后，以智能化
喷雾干燥静电收集系统喷雾干燥收集制备；Talazoparib与适宜的释放调节用聚合物材料如聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)，首先溶解于溶剂如二氯甲烷中，以0.2ml/min-1ml/min的速率缓慢注射入喷雾干燥静电系统(如瑞士步琦BUCHI小型喷雾干燥仪B-290)，干燥温度为40℃-80℃左右，在喷雾干燥过程，实时监测微球粒径，调节进样速率、喷雾
频率，加热温度和通
风量大小，待喷雾干燥结束后，收集静电收集系统壁上的微球粉末即可，药物和聚合物溶液的浓度，系统的进样速率，喷雾频率，干燥温度和
通风量等对微球的理化性质和产率有较大影响，控制以上影响因素的条件，可获取粒径均匀的缓释微球制剂，本发明提供的缓释微球粒径一般在0.5～20μm之间。本发明提供的缓释微球局部注射至人体内，药物会随着释放速率调节用聚合物基质的降解和溶蚀缓慢释放，实现体内药物平稳吸收和血药浓度维持。所述释放速率调节用聚合物基质材料包括：聚乳酸(PLA)、聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)、聚乙二醇化的PLA/PLGA、壳聚糖、水溶性羧甲基壳聚糖、丝心蛋白、聚-β-羟基丁酸戊酸酯、聚丙交酯/丙交酯-聚乙二醇共聚物共混物、聚β-羟基丁酸酯与聚乙二醇共混物、聚乳酸/羟乙酸共混物以及其他药学可应用的局部注射用缓控释材料中的一种或两种以上组合。
[0071] 本发明提供的微球系统可以固体粉末形式长期贮存。
[0072] 本发明提供的缓释微球制剂可静脉、皮下或肌肉注射给药，优选皮下和肌肉注射给药。
[0073] 实施例
[0074] 以下实施例一般性地记载了本发明典型组合物的制备方法和/或表征结果，所有的百分比均为重量百分比，除非另有指明。以下实施例是对本发明的具体说明，而不应该认为是对本发明范围的限制。在以下实施例中，未详细描述的各种过程和方法采用本领域中公知的常规方法。
[0075] 实施例1 talazoparib原位凝胶制剂的制备
[0076]
[0077] 以N-甲基吡咯烷酮溶解PLA后，再将药物talazoparib溶解，即得原位凝胶注射液。
[0078] 对比实施例1的速释胶囊(自制明胶速释胶囊，将25wt％talazoparib甲苯磺酸盐、33wt％微晶纤维素、22wt％乳糖、15％甘露醇2wt％微粉
硅胶、1wt％硬脂酸镁和2％十二烷基硫酸钠混合均匀后，直接装入0#硬胶囊制成)；其溶出度测定是采用溶出度测定法(中国药典2010年版二部附录X C)第一法装置，37℃条件下，以900mL pH 1.2的盐酸水溶液为释放介质，转速为每分钟75转，依法操作，按预定时间点取溶液6mL，离心，取上清液作为供试品溶液，测定释放度。
[0079] 按照紫外-可见分光光度法(中国药典2010年版二部附录ⅣA)，在255nm的
波长处分别测定吸光度，测定胶囊的溶出度。
[0080] 释放结果见图1。速释胶囊中活性成分talazoparib于30分钟左右释放80％以上，1小时内基本释放完全。
[0081] 试验实施例1
[0082] 1mg当量的对比实施例1的talazoparib速释胶囊给药与空腹比格犬(n＝3)，用25mL水送服，1mg当量的实施例1的talazoparib原位凝胶注射液，前肢内侧腋窝部位皮下给药，在预定时间点取血，血样在4℃条件下，以4000rpm，离心10min，取上层血浆，用于LC-MS的血药浓度检测，结果见示例图2。相对于胶囊制剂的Cmax(15344.5pg/mL)，原位凝胶制剂提供的血药浓度的Cmax降低至8764.1pg/mL，降低了约43％；由药时曲线图2结果仍可见，相对于速释胶囊，原位凝胶制剂可快速达PARP酶抑制所需血药浓度后，可更长期的维持在有效血药浓度范围内，避免了过多用药毒性的产生，同时，更好的发挥酶抑制作用和
抗肿瘤效果，也为药物剂量爬坡和最佳药效的发挥提供了更大的空间。
[0083] 实施例2：talazoparib微球的制备
[0084]
[0085] 以二氯甲烷溶解Talazoparib和PLGA，以0.2ml/min的进样速率0.5ml/min，注入到干燥温度为65℃、喷雾频率为120kHz、通风量为70L/min的BUCHI B-290喷雾干燥静电收集系统，制备粒径均匀的微球，80％的微球粒径为0.5-10um。
[0086] 试验实施例2实施例2的talazoparib微球的释放度试验
[0087] 实施例2的talazoparib微球置于含0.2％Tween 80的生理等渗PBS溶液(pH 7.4)的释放介质中孵育，37℃，100r/min条件下，在预定的时间点，取溶出介质5ml，10000rpm离心5min后，精密量取上清液20μl滤液注入液相色谱仪，记录色谱图，并作出药物累积释放曲线图。
[0088] 结果见图3，缓释微球于1小时内释放Talazoparib量小于20％，120小时内释放20％左右，192小时时仍持续释药，累积释放量不到30％。
