[0001] 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及分离出的DNA分子及编码的蛋白质分子及其应用，即在水稻中表达的OsARF25基因编码序列及其应用。

[0002] 根系是植物的全部根的总称，它是植物与土壤进行物质交换和信息交流的桥梁，对植物生长和发育具有至关重要的作用(Hochholdinger et al.,2004)，也是植物激素、有机酸和氨基酸等物质合成与转化的重要场所。水稻属于单子叶植物，根系由种子根、不定根和侧根组成(石庆华.,1988)。水稻根系的生长直接影响地上部分的生长发育以及产量的形成，是制约水稻产量潜力进一步发挥的关键因素，因此研究水稻根系的发育，对水稻生长发育分子机理的探讨有重要意义。

[0003] 近年来，随着生物技术的发展，与水稻根系发育相关的基因也有很多报导。如与水稻根系发育相关的基因OsRAA1过量表达，会导致主根变短(Ge et al.,2004)。而水稻中QHB基因过量表达，会引起不定根的减少(Kamiya et al.,2003)。WOX11能直接抑制在冠状根原基表达的A型细胞分裂素响应调节因子RR2的表达，与RR2共同在冠状根发育中调节细胞的增殖(Zhao et al.,2009)。而某些基因的突变也会影响根系水稻根系的发育。如碱性转化酶基因OsCyt-inv1的突变体，根系伸长细胞萎缩(Jia et al.,2008)。水稻的葡聚糖内切酶基因OsGLU3突变后，也会影响根细胞的分裂及伸长(Zhang et al.,2012)。

[0004] 水稻根系的发育实则受很多因素的影响，如植物激素，而生长素和细胞分裂素在根系中的研究较多。在水稻中，生长素的代谢和转运都与根系的发育有密切关系。当OsYUCCA1过表达后，植株体内IAA含量上升，不定根的数目增多(Yuko et al.,2007)。而抑制OsPIN1的表达时，水稻不定根的产生和发育受抑制(Xu et al.,2005)。突变OsCOW1基因会导致不定根减少，根冠比降低。

[0005] 此外，随着全基因组的测序，ARF基因家族在许多植物中有报道，其中拟南芥中发现了23个，在水稻中发现25个，玉米中有35个等(Hagen et al.,2002；Wang et al.,2007)。ARF基因的N-端有DNA结合区(DNA binding domain)，能直接与生长素的响应基因的启动子中的TGTCTC特异性结合，但DBD不能决定ARF基因的调控特性；C-端含结构域III和IV，负责ARF和AUX/IAA形成异源二聚体，或是和ARF形成同源二聚体，可以激活或抑制基因的表达；
其中间区域(middle region)是长短各异且不保守的序列，其氨基酸的组成可决定该蛋白是转录激活子或是转录抑制子。有研究表明，中间区域若富含丝氨酸(S)、亮氨酸(L)和谷氨酰胺(Q),此ARF基因是激活型的，如OsARF5、OsARF12、OsARF19和OsARF25等；若中间区域富含亮氨酸(L)、甘氨酸(G)、丝氨酸(S)和脯氨酸(P)时,则是抑制型的ARF，如OsARF1、OsARF2、OsARF15和OsARF18等(Ulmasoy et al.,1999；Tiwari et al.,2003)。

[0006] 本发明主要分析OsARF25基因在不同器官的表达水平。进一步，通过定向诱导基因组局部突变技术(Targeting Induced Local Lesions IN Genomes(TILLIG))获得了osarf25 TILLIG纯合突变体，分析osarf25突变体和野生型株表型，明确其在水稻根长进程中的功能，为其作用机制提供理论依据。

[0007] 本发明的目的在于提出一种新的水稻基因，还提供该水稻基因的蛋白编码序列，并提供该水稻基因的应用。

[0008] 本发明具体包括了水稻生长素应答因子基因OsARF25的核苷酸编码序列的克隆，对水稻此基因内源的不同器官、组织的空间表达模式，干旱、高盐胁迫以及植物激素处理后的表达模式变化进行分析鉴定，以及在水稻zhonghua11中获得的Tilling突变体，进行分子鉴定和胁迫实验，检测其基因表达量变化及其表型变化。zhonghua11(中花11号)，是京风五号/特特普♀/福锦♂花培获得的粳稻，株高110-115厘米左右，株型较紧凑，较繁茂，叶色浓绿。穗大、码密，穗颈长，有弯腰现象。穗长20厘米，大穗型品种。平均穗粒数115-120粒，空秕罴率为15-20％，较高。谷粒椭圆形，颖及颖尖杆黄色，千短顶芒，粒重26-27克。米质优，垩白少，透明度好，食味佳。全生育期160天左右，属中熟品种。分蘖力强，耐肥，抗倒伏性和抗病性较强，抗寒，抗盐碱。秧令弹性较大。

[0009] 本发明提供的水稻中表达的水稻生长素应答因子OsARF25基因的序列及其应用，具体包括：OsARF25基因的核苷酸编码序列的克隆，序列的同源比对，对水稻此基因内源的不同器官、组织的空间表达模式，干旱、高盐胁迫以及植物激素处理后的表达模式变化进行分析鉴定，以及基于水稻zhonghua11获得Tilling突变体，进行分子鉴定和根长测量实验，检测其基因表达量变化及根长改变等。

[0010] 本发明通过克隆水稻中生长素应答因子基因OsARF25，对其时空表达模式及胁迫响应方式进行确定，结果显示基因在各个器官中组成型表达，在叶中表达量最低，在根中表达量最高。在接受IAA、6-BA、KT、ABA、GA处理后，OsARF25的表达量均升高，其中6-BA及KT处理后的水稻植株中OsARF25的表达量显著升高。盐胁迫(150mmol/L NaCl)处理到8h表达量达到最大值，与对照相比，提高大约4倍；在进行干旱胁迫(20％PEG)处理4h后OsARF25的表达量显著升高，并到达峰值。在以水稻Zhonghua11为遗传背景的OsARF25突变体中，观察到突变体株系较野生型根长变短，主根长显著变短，冠根数显著变少。在成熟期发现突变体株系千粒重，籽粒数，结实率减少，这为水稻在根长发育中提供基因来源与技术支持。

[0011] 本发明首先从水稻中克隆出一种生长素应答因子的基因，命名为OsARF25。为具有特定序列的DNA分子，全长6057bp，其中开放阅读框为2700bp，其核苷酸序列为SEQ ID NO.1所示。

[0012] 本发明还提供这种水稻OsARF25蛋白编码序列，有899个氨基酸残基，其氨基酸序列为SEQ ID NO.2所示。

[0013] 本发明还提供用于调取获得水稻样品中基因OsARF25的一对核苷酸引物。该引物根据基因OsARF25设计，使用此对引物对水稻样品cDNA进行PCR扩增可获得长2700bp的基因片段。具体的引物序列为：

[0014] Forward Primer：5'ATGAAGCTCTCTCCGCCGGCGT 3'(SEQ ID NO.3)

[0015] Reverse Primer：5'TCAGTAGTCCAGAGGCGCTACA 3'(SEQ ID NO.4)

[0016] 本发明提供了一种检测水稻基因OsARF25在不同器官表达模式的方法，即利用所述基因OsARF25的核苷酸序列作为设计探针引物的保守区段，调取其序列的引物序列：

[0017] Forward Primer：5'CTGCGATAATGGAACTGGT 3'(SEQ ID NO.5)

[0018] Reverse Primer：5'ACAATGCTGGGGAAGACA 3'(SEQ ID NO.6)，

[0019] 对水稻cDNA样品进行Real-time PCR,然后检测该基因在茎、叶、根中的表达；样品为水稻的RNA经过逆转录后所得cDNA；其步骤如下：

[0020] (1)提取水稻器官的总RNA(RNAiso plus，市售)。

[0021] (2)利用反转录试剂盒(TaKaRa  RT reagent Kit DRR037A，市售)将总RNA反转录成cDNA，根据SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6设计引物，根据SEQ ID NO.1，进行实时定量PCR检测。

[0022] 本发明提供了一种检测水稻基因OsARF25在高盐、干旱胁迫以及激素处理下的表达模式变化的方法，即将水稻进行高盐、干旱胁迫以及激素处理后，提取水稻叶片中的RNA(RNAiso plus，市售)；利用反转录试剂盒(TaKaRa RT reagent Kit DRR037A，市售)将RNA反转录成cDNA，利用引物SEQ ID NO.5与SEQ ID NO.6，进行Real-time PCR检测。其步骤如下：

[0023] (1)将两周大的水稻苗置于150mM氯化钠溶液中，28℃培养高盐胁迫处理0、2、4、8、以及12h；置于含20％PEG溶液中以进行干旱处理0、2、4、8以及12h；置于10μM IAA、6-BA、KT、ABA、GA中，以进行激素处理8h。

[0024] (2)提取前述个处理的水稻苗的叶和根中的总RNA(RNAiso plus，市售)。

[0025] (3)利用反转录试剂盒(市售)将总RNA反转录成cDNA，根据SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6设计引物，根据SEQ ID NO.1，进行Real-time PCR检测。

[0026] 本发明提供了一种检测osarf25 Tilling突变体的水稻的方法，其步骤如下：

[0027] (1)突变体株系与野生型的种子浸泡在水中24h，让种子充分吸涨。随后将种子玻璃培养皿内，放在水稻恒温培养箱内37℃催芽至露白，每天换水，防止长霉。选取萌发一致的种子，将其转移至种子架上，置于基础营养液中，28℃培养箱培养。

[0028] (2)分别提取突变体以及野生型对照组中的总DNA，利用引物进行PCR检测，确定突变位置以及筛选纯合株系。对应的引物序列为：

[0029] Forward Primer：5'CTCTTTAACCACTTCTTTTTCTGC 3'(SEQ ID NO.7)

[0030] Reverse Primer：5'TGATGGATTTACAGATATGTTA 3'(SEQ ID NO.8)

[0031] 本发明提供了一种osarf25 Tilling突变体水稻与野生型水稻表型分析及产量改变的方法，其步骤如下：

[0032] (1)突变体株系与野生型的种子浸泡在水中24h，让种子充分吸涨。放于培养皿内，恒温培养箱内37℃催芽至露白，每天换水，防止长霉。

[0033] (2)将催芽后的种子均匀地散在苗床上，表面不能积水，种子播撒后，用手抹平，让种子陷入泥中，不应太深。

[0034] (3)育苗3-4周后，三叶苗，根系发达方可移苗。过早会造成根部损伤，后期发育不良。移苗后1-2周可按每颗苗0.5g尿素少量施肥。浇水一般提前将水放在温室内1天温热后再浇。

[0035] (4)生长期测定突变体与野生型的根长和冠根数；成熟期测量突变体与野生型水稻的籽粒饱满度，并统计籽粒数、千粒重与结实率。

[0036] 可见，本发明提供的水稻基因OsARF25可用于植物品种改良，如帮助阐明水稻抵抗干旱以及盐胁迫的机理，用于改善水稻抗干旱以及盐胁迫性能，提高水稻应对非生物胁迫的能力，从而提高水稻的产量。附图说明

[0037] 图1是水稻OsARF25基因器官表达模式分析检测图。

[0038] 图2是水稻基因OsARF25在干旱、高盐胁迫以及植物激素处理下的表达模式分析图，其中图2a是NaCl处理后OsARF25的表达量示意图，图2b经过20％PEG8000处理OsARF25的表达量图，图2c为OsARF25是否受植物激素的调控图。

[0039] 图3是OsARF25 tilling突变体的分子鉴定图。

[0040] 图4是osarf25 tilling突变体和野生型水稻苗进行表型分析，osarf25 Tilling突变体株系较野生型根长变短，如图4a所示。并对osarf25 Tilling突变体和野生型水稻苗进行主根长和冠根数统计，如图4b和图4c所示。

[0041] 图5是突变体株系osarf25与野生型Zhonghua11对照组进行照相，突变体水稻osarf25与野生型Zhonghua11相比，其籽粒不饱满，如图5a所示，籽粒数较少，如图5b所示，千粒重，如图5c所示、结实率，如图5d所示都相对较低。

[0042] 下面结合具体实施实例进一步阐释本发明。应理解，这些实例仅以用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实例中未注明具体的实验方法，均可按照常规方法进行。如Sambrook等分子克隆：实验手册(New York:Cold Spring Harbor Laboratory Press,1989)中所述条件，或按照制造生产厂商的使用说明。

[0043] 实施例1水稻基因OsARF25的克隆

[0044] 1.水稻品种Zhonghua11在培养箱(SPX-250-GB,Shanghai,China)中培养：生长条件为光周期16h/8h(L/D)，28℃。

[0045] 2.DNA提取。取500mg左右新鲜的水稻植物组织材料，加入80μl Lysis Buffer，用研磨棒将植物组织研碎，加入120μl ddH2O。12000rpm离心15min后将上清转移至新的离心管，测OD值，电泳检测。

[0046] 3.基因的克隆。以提取的水稻DNA为模板，利用正向引物和反向引物进行PCR，获得基因全长，具体序列信息参见SEQ ID NO.1。

[0047] 实施例2水稻OsARF25基因器官表达模式分析

[0048] 分别提取水稻根、茎、叶中的总RNA，利用反转录试剂盒将总RNA反转录成cDNA，利用引物SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6，进行Real-time PCR检测，如图1所示。结果显示，该基因为组成型表达，在叶中表达量最低，根中表达量最高。

[0049] 实施例3水稻基因OsARF25在干旱、高盐胁迫以及植物激素处理下的表达模式分析[0050] 对两周大的水稻幼苗分别进行150mM NaCl以及20％PEG干旱处理12h，分别提取处理0、2、4、8、12h后的根中的总RNA；进行4℃低温处理12h，分别提取处理0、0.25、0.5、1、1.5、2、4、8、12h后的叶中的总RNA；进行50μM IAA、6-BA、KT、ABA、GA浸泡处理8h，提取根中的总RNA。利用反转录试剂盒将总RNA反转录成cDNA，利用引物SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6，进行Real-time PCR检测。结果显示，NaCl处理后OsARF25的表达量迅速升高，到8h表达量达到最大值，表达量显著升高，如图2a所示，经过20％PEG8000处理4h后，OsARF25的表达量显著升高，并到达峰值，表达量提高4.5倍左右，如图2b所示，为研究OsARF25是否受植物激素的调控，故进行了植物激素的处理，发现OsARF25受生长素，细胞分裂素(6-BA，KT，IAA，2,4-D，NAA)的调控，如图2c所示。

[0051] 实施例4 OsARF25 tilling突变体的分子鉴定

[0052] 分别提取突变体以及野生型对照组中的总DNA，利用引物SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8，进行PCR检测。结果显示，突变体osarf25-2和osarf25-3位于编码区48位碱基A发生缺失，如图3所示；突变体osarf25-1位于编码区749位碱基G发生缺失，如图3所示；突变体osarf25-3位于编码区的1091位碱基由A突变成T,密码子由CAT变成CTT,氨基酸由组氨酸变成亮氨酸。筛选出纯合突变体，并进行繁殖。

[0053] 实施例5 osarf25 tilling突变体表型分析

[0054] 分别选取osarf25-1，osarf25-2，osarf25-3突变体以及野生型对照组两周龄水稻苗，osarf25 tilling突变体和野生型水稻苗进行表型分析，osarf25 Tilling突变体株系较野生型根长变短，如图4a所示。并对osarf25 Tilling突变体和野生型水稻苗进行主根长和冠根数统计,如图4b和图4c所示，结果显示在osarf25 Tilling突变体中主根长显著变短，冠根数显著变少。

[0055] 实施例6 osarf25突变体水稻株高和产量的改变

[0056] 突变体株系osarf25与野生型Zhonghua11对照组进行照相，并且进行籽粒饱满度、穗、千粒重及结实率统计。结果显示，突变体水稻osarf25与野生型Zhonghua11相比，其籽粒不饱满，如图5a所示，籽粒数较少，如图5b所示，千粒重，如图5c所示、结实率，如图5d所示都相对较低。

[0057] 本发明涉及的序列及记号分别如下：

[0058] SEQ ID NO.1：

[0059] 长度：6057bp

[0060] 类型：核苷酸

[0061] 链型：单链

[0062] 拓扑结构：线性

[0063] ACTACCTCCAAGAAGCTCTCTCTCCGTTTTTCTTCTCTTCCTACTAAACCCCTCAAAACGGAAAGAAAAAAAGAAGAAAAAAAAAACTCGACCACCACCTCCACCACTCACACCTCGATCCGGCCATGGCGGCCTAGCCCTAGCACCTAGGGTTCGCGCCCCCACCACCCTCCCCGCCGTCTCGGAGACCGCGCGCCCCCAGCTCCCGCCTCGCTGTCGCGCCGCCTGATTCCGCCGCCGGCGCCGAATGCTACGCCGTTTGGTGGTGGTGGTGGTCGTCGTCGCCTGATTCCGCGATCTCGTGAGCTCCGGGGGGTGCGCGGTTGCGGCGGCGGCGCCTGAGAGGAAGGCTGGACTCGTCCGCGGCGGCGGCGGCTGCGGGCTAGTGTCGGTGGCGATTTGAGGGCGGCGGTTTGGGTTAGCCGTCGCCGAGAGTGAAGGTGCTGTGTTTTGAGTGCTTGGGATGAGCTGCGTGTTGATCTGATGAACTCGGGGTCGGCGGCGTTCTTCGGTTTCTCCGCTCACTTGCTCCCGCCGTTGGCGAAAATCCGGTTCTTCGGATCGAGTTGCGGTCGCCTGGGTGTTTTTCATCAGTTTTGGGTGAAAATACTCGAGCTCTGAGGGGGGTGATTGGTTTCCAAGTTTGATTGATTTAAAGAGTTTGTGTGGAATTTTTTCGGGGAGATGAAGGGGAGGATTTGCTGCGACGGTCCAGGTTTTGGTTAGTTGTTGAGGGAGAAAAAAATGGAAGATATTTCTGGGCGCAAGAGAGGAAGGCAGGTGTTTGCTGCTGCTGCTGGGAGCATGATGGGAAGCTGACCAGCAGCTTCTCCGGTATCCTGGTGCGGCGGAGTTTCGTGCTCTTTGGCGACGGGTGCACTGGTGATTGGAGATGAAGCTCTCTCCGCCGGCGTCGGCGGATATGCCGCAGGCCTTGCCGGAGAACGACGGTATATATCCTTGCTCACAATTTCGACATTGTTTCAGTTCTGCACTTTCTCAGCTTGTGTTGATGCCTGCATTGTAAAGTGGATTATGGATCATGGAGCTTTGTGATTCTGCACTTTGAGTTGTTTGTGCATGATTACATAATGCATAAATGAGTCTCCATTGCTGCCTTGCACACACTCCGCACATACACACACAAAGAAAAAAGAAAGAAAAAAAAAGAACTACTCCTACATTACTTGGCTCTGTTCATTGCCCTCATGTTATAACATTATTTGATACTGACTGAACCTCCTACTGTCTGTGGGCAAGTACAAATAGTAGCTTCACATGAACTTAACTTTCTGGTGGTTTGCTGTTCAGCTCATGTGTGTTTGGCATGTTGCAGGGGAACAAAGATGTCTGAACTCGGAGCTGTGGCATGCATGCGCTGGGCCCCTTGTGTCTTTGCCAGTGGTCAGGAGCAGGGTCGTCTACTTTCCACAGGGCCATAGCGAGCAGGTCAGTCACTTGGTTTGTAGTCTGTGCACATCTCTTTCATTATGCTAGGCATGGCCGGATTTTGTTGACTCGAATTTACTAGAATTTATAAAAGAAGGTAGAACAGCTCTGCTTTTGCATTTGTGCATCAGTACATAATAGGGCAGAGGATTGTCTTTATTGTTTGCTCAGTGCATCATTAAACTTAATATGGCAGAAGAATGAACTGAAACTGTACTGTCTAAAGTAATTTTAGTTCTGTGCAGGTTGCGGCATCAACTAATAAGGAAGTTGATGCTCAAATCCCAAATTATCCAAACTTACCTCCTCAGTTAATCTGCCAGCTTCATAATGTCACCATGCATGTGAGTTCACTCTTAAAGAAACCATCATGTAGCTTCTTAATAAGCAGCTTATGATAATTCACCTGGTGCTTTTGCAGGCTGATGCAGAGACAGATGAAGTTTATGCTCAGATGACATTGCAACCATTGAGCCCGGTATTTGACCACTGCTTTGCACTTCTAGCCTTATTTCTTTTAAAAGGGCAAAGATGTTACAAGGATTATGTATTTGTCATGTAATCCTGTTGACAGGAAGAGCAAAAGGAGCCTTTCCTTCCAATGGAGTTGGGTGCTGCTAGCAAGCAACCCACTAATTACTTCTGCAAGACATTGACTGCAAGTGACACGAGCACTCATGGTGGTTTCTCTGTTCCCCGCCGGGCAGCTGAGAAAGTCTTCCCTCCACTAGTATGCCTTTAAGCTCAGTCTTTTTTTTGGTAGGAAATGTTCATTTGCTATGTGTTCTTCAAATTGACTCCTTTAGTTCTCTGTAGGATTTTTCACAGCAGCCTCCGGCACAGGAGCTGATTGCAAGAGATTTGCATGATAATGAATGGAAATTTCGCCATATATTTCGTGGTATGTAACTATGGCCGACACACATAGAACTGATTATGAGTTGTTTGTGTACACAAAAAAATTGACATAAAATCATGTACTATGCCTTTTAGATAGCATTTCCATTAGACATGACATCTATCCGTTTTGCTCTTTTTTCTTTGTTGCCAAGATCTGTTTTTGCATTTTTATCTGGCTAAGAAATTACCTGGACATGCTATAATGACAATACTGCAACTAGCCTCCTTCTGTTCCTGCCTTGCAGAATTGTTGAATTATGAAATTATATTGTGAGGGTATCTTCTTCTATTGAACTTTCAATTGGCTATGCATTTGTCGTGCAGGTCAGCCTAAAAGGCATCTCCTGACAACAGGCTGGAGTGTGTTTGTGAGTGCGAAAAGACTAGTAGCAGGAGACTCTGTTATATTTATCTGGTACCACCCACTTTATTCCTTATTTAAATTGTATACTGTTGCTAGAGGTTGTACTCATTGCTGAGACTTAATTACCTTTATCATTTTTACCAGGAATGATAACAATCAACTTCTTTTGGGAATACGTCGTGCAAATCGCCAACAGACTGTTATGCCCTCTTCCGTGTTGTCAAGCGATAGCATGCATATAGGTCTTCTTGCAGCAGCAGCTCATGCTGCAGCCACAAATAGTCGCTTCACTATTTTCTATAACCCCAGGTAAATGTACTGCAATCTTACAGCAGAGCCTTTAACGTTTTATTTTATTTCCATATTTAATTGACATGGGCATCCTTTTTCAGGGCTAGCCCTTCTGAATTTGTGATTCCATTGGCCAAGTATGTGAAAGCTGTTTACCACACACGTGTATCTGTTGGAATGCGTTTTAGAATGCTTTTCGAGACAGAGGAGTCAAGTGTCAGGCGGTAAGCTGATATTAAGCACACAGCATGAACCGTGAAAGCTCCATTAATTCTTATATTTACCTCTTACTTTCAGATACATGGGTACAATCACCAGCATAAGTGATCTAGATTCAGTGCGCTGGCCAAACTCACACTGGCGTTCTGTTAAGGTAATATCTGCTAAATATATTTTGTGGTCTCTACAGAAATGATGTTATCTTGTTCCATTATCTAGTAGTCTGTCAAATCTGTTATCACATCCCTCATGGATCCCTTTCTGTGGATATGTTTTCCTTGTGATTTTTTTTTCATTTTGGATTTATGGCACATTAGGTTGGTTGGGATGAGTCCACCACTGGTGATAAACAGCCAAGGGTTTCTCTTTGGGAGATTGAGCCTTTGACAACCTTTCCGATGTACCCCAGTGCTTTTCCTTTAAGACTTAAGCGTCCGTGGGCTTCAGGACTGCCTATGCATGGCATGTTCAATGGTATGCTGATTGATGGCCGGAACACTAGCACGCATAATTCTAAGAGCATACTCTTTAACCACTTCTTTTTCTGCAGGTGGGGGAAATGACGATTTTGCACGCTATTCTTCTCTCATGTGGCTTCGAGACGGAAATAGAGGAACCCAGTCCCTGAATTTTCAAGGACATGGAGTCTCACCATGGCTTCAGCCAAGAATAGATTCTCCATTGCTGGGCCTTAAGCCAGACACGTACCAGCAAATGGCTGCAGCAGCACTGGAAGAAATTCGATATGGGGACCCTTCAAAGCAGCATCCAGCTACTCTGCAATACCAACAGACTCATAATCTGAACAGTGGATTAAATTCTCTGTTTGCAAGCCATGTTCTAGGGCAGGTGCAGTTTCAACCTCAGCAGTCACCCCTGCAAGTTGTTCAGCAAGGCCATTGTCAGAACACTGGTGACTCTGGGTTCCTTCAAGGTCAGCTTCCACGGCTGCAGTTGCATAACACTCAGCAGCTGCTAAAGGAGCAAGAGTTGCAGCAGCAGCAAAGACAGCATGTTTTACAAGAGCAATCTAGTCAAGAGATGCAACAGCAGCTCCCATCTAGTGATCATCATGTTGCTGATGTAGCTTCTGAGTCTGGATCTGCTCCTCAGGCACAATCATCATTGCTTAGTGGATCATCATTCTACAATCAGAACCTCTTAGAAGGAAATAGTGATCCCCCTTTACATCTACACAACAATTTCCACAACTTCTCTAACCAGGAAGCCTCAAACCTTCTTATTTTGCCTCGAAGTAGCCAATTAATGGCATCAGATGGGTGGCCTTCAAAGCGATTAACTTTAGAATCTGCTGTTCATCCTGAAGCTCCGTCCATGCACCCCAAGATTGAGAAAGTAAATCACCAGGGTATATCTCATTTTCCTGGCGCCTTTCCACCACAATCAGCAAGAGGCTGTTCCATCGTCCAGGATTGCAGGGCAGATGCTGAGAACCGCCTACTTTCATCATCATTTGAACTCCAGGATGGCATGACAAGCATCATAACTGATGCTAACAGAGAAACTGATACTATGGCCATACCTTTGTTGAGATATAGTGGTGCAGATTTGACAACTGAAAACACCTTAGCAACCTCCAATTGTTTAGGTGAATCTGGAACGTTCAATCCTCTTAATAACATATCTGTAAATCCATCACAAGGAGCAACCTTTGTGAAGGTATGCATTTTCAACTTGTGTGTTAGCTTGCGTTAATTCTTCTCTCTGCATTTCTTTTTTCAATTTTCACTGATTGCGAACATTGGTCGCTAAAAGTACTTTACTTAGTAGATAAATAACAAACATTTTAGTAGGTTGATGGTAGCAAAGGAGGCAATTATTTTTTAAAGTTTTGTATGAAGTTTGGAAATGCCTGTTTCTCTTCTTTTTACTACCCTACTTAACATGTCTGTGAGTGTGAGCTGCTCATTTATTCTATATGATCTGGCTAATATCTTCTGCATTTTCTTCAATAGGTTTACAAATCAGGGTCCCTTGGGAGATCACTTGACATCTCCAGATTCAGCAGCTACTGCGAGTTACGTAGTGAGCTTGAGCGTCTCTTTGGTCTTGAAGGCCAACTGGAGGACCCTGTAAGATCAGGCTGGCAGCTTGTATTTGTCGACCGGGAAAATGACATTCTTCTCGTCGGCGACGATCCATGGCAGTAAGCACTTACAAACCTAAAATGTTTCGTATGCAAACACAATATTTGTCAATGTTCAAAGCAAACAAACATGATATTCTATGCCATCTTTTTTTTTCAGGGAGTTTGCAAATAGCGTATGGTGCATCAAAATACTCTCGCCACAGGAGGTGCAGCAGTTGGTTCGTGGTGGAGACGGCCTTCTGTCCTCACCTGGAGCAAGGATGCAGCAGAGCAATGCCTGCGACGACTATTCTGCAAGCCACAACATGCAGAATATCGCCGGAAACATTGCATCTGTAGCGCCTCTGGACTACTGAGATGTAGACCAGAATCCAAACTAAGCACCCTTAAGACTGCAGGGTCACCATTCGTGATCGCCTGCATTCCATGCGATCTTCACTAGTCCTGTCCGAATCAGTAGCAACTCAGTCAATAATATAGCTAGATGATCCGTTGTATTCCATCTGATCATGGACATGCTGTATGATAGCTGCTTTAGCTCTATTAAATCTCTAATGGCAGGCAACTAGGCAAGAACAGTTCTATGATGAATGATGGCAGTCGCTGTAGAATTGACCTTATTCTGTAGCTATAATATGATGTCTAGAACTGATGATTCCAATTTCCAAATGGAGCCCGGAACATATTAAAATCAATCATTTGTCGCCTTCTTCATGTTTTTGCC

[0064] SEQ ID NO.2：

[0065] 长度：899

[0066] 类型：氨基酸

[0067] 链型：单链

[0068] 拓扑结构：线性

[0069] MKLSPPASADMPQALPENDGEQRCLNSELWHACAGPLVSLPVVRSRVVYFPQGHSEQVAASTNKEVDAQIPNYPNLPPQLICQLHNVTMHADAETDEVYAQMTLQPLSPEEQKEPFLPMELGAASKQPTNYFCKTLTASDTSTHGGFSVPRRAAEKVFPPLDFSQQPPAQELIARDLHDNEWKFRHIFRGQPKRHLLTTGWSVFVSAKRLVAGDSVIFIWNDNNQLLLGIRRANRQQTVMPSSVLSSDSMHIGLLAAAAHAAATNSRFTIFYNPRASPSEFVIPLAKYVKAVYHTRVSVGMRFRMLFETEESSVRRYMGTITSISDLDSVRWPNSHWRSVKVGWDESTTGDKQPRVSLWEIEPLTTFPMYPSAFPLRLKRPWASGLPMHGMFNGGGNDDFARYSSLMWLRDGNRGTQSLNFQGHGVSPWLQPRIDSPLLGLKPDTYQQMAAAALEEIRYGDPSKQHPATLQYQQTHNLNSGLNSLFASHVLGQVQFQPQQSPLQVVQQGHCQNTGDSGFLQGQLPRLQLHNTQQLLKEQELQQQQRQHVLQEQSSQEMQQQLPSSDHHVADVASESGSAPQAQSSLLSGSSFYNQNLLEGNSDPPLHLHNNFHNFSNQEASNLLILPRSSQLMASDGWPSKRLTLESAVHPEAPSMHPKIEKVNHQGISHFPGAFPPQSARGCSIVQDCRADAENRLLSSSFELQDGMTSIITDANRETDTMAIPLLRYSGADLTTENTLATSNCLGESGTFNPLNNISVNPSQGATFVKVYKSGSLGRSLDISRFSSYCELRSELERLFGLEGQLEDPVRSGWQLVFVDRENDILLVGDDPWQEFANSVWCIKILSPQEVQQLVRGGDGLLSSPGARMQQSNACDDYSASHNMQNIAGNIASVAPLDY

[0070] SEQ ID NO.3：5'ATGAAGCTCTCTCCGCCGGCGT 3'

[0071] SEQ ID NO.4：5'TCAGTAGTCCAGAGGCGCTACA 3'

[0072] SEQ ID NO.5：5'CTGCGATAATGGAACTGGT 3'

[0073] SEQ ID NO.6：5'ACAATGCTGGGGAAGACA 3'

[0074] SEQ ID NO.7：5'CTCTTTAACCACTTCTTTTTCTGC 3'

[0075] SEQ ID NO.8：5'TGATGGATTTACAGATATGTTA 3'