专利汇可以提供一种比较分析不同牛支原体菌株毒力的方法专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 公开一种不同 牛 支原体菌株毒 力 比较分析方法。本发明的比较分析牛支原体菌株 毒力 的方法是将等活菌菌落浓度的经复苏传代的待比较分析的各待测牛支原体株、牛支原体标准株接种于鸡胚上,再将接种后的鸡胚置于恒温箱培养,定时检测鸡胚状态及死亡情况,统计接种各个菌株的卵黄囊接种鸡胚致死率、尿囊腔接种鸡胚致死率,结合死亡鸡胚尿囊液牛支原体分离鉴定情况,以此进行比较判定。本发明的方法具有操作简单、成本低、实验动物便宜且易得、无需复杂动物饲养管理条件、耗时短、重复性好等优点,极大减少动物试验工作量,避免了使用大动物牛所存在试验操作复杂、试验周期长、工作量大、成本昂贵、实验动物个体差异较大且要求高、重复性不理想等不足。,下面是一种比较分析不同牛支原体菌株毒力的方法专利的具体信息内容。
1.一种比较分析牛支原体菌株毒力的方法,其特征在于将等活菌菌落浓度相近的经复苏传代的待比较分析的牛支原体标准株与各待测牛支原体株接种于鸡胚上,再将接种后的鸡胚置于恒温箱内培养,定时检测鸡胚状态及死亡情况,统计接种各个菌株的鸡胚致死率、尿囊腔接种鸡胚致死率,结合死亡鸡胚尿囊液牛支原体分离鉴定情况,比较待测株与牛支原体标准株PG45株或/和各待测牛支原体,以此进行比较判定。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:
(1)SPF鸡胚准备:准备7~8日龄的血管清晰、活力旺盛健康的SPF鸡胚;
(2)牛支原体标准株与待测株菌液准备:复苏并传代牛支原体标准株PG45株、待测株,
37℃恒温培养箱培养,待牛支原体生长旺盛时,8000~12000rpm离心15min,用生理盐水浓缩菌液至菌液浓度5.0~9.0×109CFU/ml;
(3)鸡胚的接种与观测:用制备好的各待比较分析的牛支原体菌液接种鸡胚,每个菌株按0.2ml/枚卵黄囊接种于SPF鸡胚,试验组接种后,孵化箱孵化,每天观察鸡胚状态,记录死亡情况,剖检死亡鸡胚,收集尿囊液用于病原分离和PCR鉴定;
(4)统计分析与结果判定:统计每个菌株的卵黄囊接种、尿囊腔接种鸡胚死亡情况,鸡胚死亡数,计算每个菌株的卵黄囊接种鸡胚致死率、尿囊腔接种鸡胚致死率,结合鸡胚剖检情况,死亡鸡胚尿囊液牛支原体分离鉴定情况,综合比较分析与结果判定。
3.权利要求1所述方法在牛支原体疫苗筛选或制备中的应用。
4.权利要求1所述方法在牛支原体致病机制或毒力研究中的应用。
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