一种微生物功能菌剂及其制备方法
专利汇可以提供一种微生物功能菌剂及其制备方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且一种 微 生物 功能菌剂及其制备方法，是以 种子 罐(6)、 发酵 罐(5)、储存罐(9)、计量灌装罐(10)为主要设备，以 蒸汽 机(2)、蒸汽 过滤器 （16）为加热消毒设备，以空压机（8）、储气罐（7）、 冷冻干燥 器（12）、油 水 分离器（11）、空气粗滤器(13)、减压 阀 (14)、空气精滤器(15)为无菌空气供气设备，以纯净水箱(1)、 循环水 箱(4)、水 泵 (B)为循环恒温设备，通过密封管道连接构成生产线，经过空消工序、加液实消工序的工艺过程后，向种子罐(6) 内的培养液中加入菌种（A），再经过接种扩繁工序、储存灌装工序的工艺过程，制成微生物功能菌剂成品。本 发明 具有肥效高、能够促进植株防病虫害、改良 土壤 结构、无毒无害、利于环保的特点，可促进农田持续长效发展，促进 农作物 增产增收。，下面是一种微生物功能菌剂及其制备方法专利的具体信息内容。
1.一种微生物功能菌剂及其制备方法，其特征在于以种子罐(6)、发酵罐(5)、储存罐(9)、计量灌装罐(10)为主要设备，以蒸汽机(2)、蒸汽过滤器（16）为加热消毒设备，以空压机（8）、储气罐（7）、冷冻干燥器（12）、油水分离器（11）、空气粗滤器(13)、减压阀(14)、空气精滤器(15)为无菌空气供气设备，以纯净水箱(1)、循环水箱(4)、水泵(B)为循环恒温设备，通过密封管道连接构成生产线，经过空消工序、加液实消工序的工艺过程后，向种子罐(6) 内的培养液中加入菌种（A），再经过接种扩繁工序、储存灌装工序的工艺过程，制成微生物功能菌剂成品。
2.按照权利要求1所述的微生物功能菌剂及其制备方法，其特征在于所述空消工序的工艺过程是：将种子罐(6)和发酵罐(5)的空气阀门关闭、打开空气精滤器(15)的下排污阀，排尽冷水，打开蒸汽阀门，将空气精滤器（15)的压力调至0.11～0.12MPa，保持
30～40min进行蒸汽消毒，再关闭蒸汽阀门，打开空气阀门，通气量调至30L/min，压力为
0.05MPa，通风15～20min，然后关闭空气阀门，保持无菌空气管（Q）连通的管路内气压为正压，将种子罐(6)和发酵罐(5)排气口阀门打开，并打开夹套排污阀，向夹套内通蒸汽
5min-10min，排净夹套内的冷水后，关闭夹套蒸汽阀，然后向种子罐(6)和发酵罐(5)内通蒸汽，罐内温度升至120～121℃，调小排汽阀，使压力上升至0.1～0.12MPa，再调小蒸汽阀，压力稳定在0.11～0.12MPa，保持30～40min，温度下降，继续关闭各路蒸汽阀门，开大排气阀，压力降至0.03MPa，打开空气阀门通入无菌空气，罐内压力上升至0.05～0.1MPa，保持稳定；温度降至40℃时，关闭空气阀门，打开排气阀门放气，罐内压力降为0，向罐内插入pH电极和Do电极。
3.按照权利要求1所述的微生物功能菌剂及其制备方法，其特征在于所述加液实消工序的工艺过程是：将培养槽（3）中配制好的培养液通过培养液管（M）分别加入种子罐(6)和发酵罐(5)内至各自60%的空间，再向种子罐(6)内加入消泡剂30 ml、向发酵罐(5)内加入消泡剂200～300ml，然后向夹套内通蒸汽进行预热，开动搅拌器，搅拌25～40min，温度升至80℃以上，停止搅拌和预热，向罐内通蒸汽至压力0.1～0.11MPa，温度120～121℃，保持30～40min，停止通蒸汽，压力降至0.03MPa；打开空气阀门，通入无菌空气，压力升至
0.1～0.11MPa，打开排气阀保持压力稳定；关闭夹套排污阀，向夹套内通恒温冷却水，温度降为40℃，进入接种扩繁工序。
4.按照权利要求3所述的微生物功能菌剂及其制备方法，其特征在于所述培养槽（3）中配制好的培养液是：按照重量计豆芽（D）1份：水5份的比例向培养槽（3）内加水、加入豆芽（D），通电加热至沸腾，沸腾煮40分钟后关闭电源，滤出豆芽（D），培养槽（3）内留下豆芽水，向豆芽水中加入豆芽（D）重量10%的红糖（T），混合均匀，自然降温至60～70℃，制成培养液。
5.按照权利要求1所述的微生物功能菌剂及其制备方法，其特征在于所述接种扩繁工序的工艺过程是：调节种子罐(6)的进气阀，减少进气量，将种子罐(6)的压力降至
0.01MPa以下，取下进料口盖子，浸泡于浓度为75%的酒精中，无菌操作向种子罐(6)内迅速导入菌种（A），拧上盖子，通入无菌空气，空气流量种子罐（6）中为30L/min,压力升至
0.05MPa，设置罐内温度为39.5～40.5℃、搅拌器转速180～200r/min；16h后每2h抽检一次，至16～24h检验菌体进入对数末期后，种子罐(6)内的菌液通过移液管（L）导入发酵罐(5)中继续进行扩繁培养；种子罐（6）内的菌液导出后，关上空气阀门，泄压；向种子罐（6）内加水至80%，通空气，开搅拌器20min，排出存水，同时清理出料管（C），重复前述空消步骤。
6.按照权利要求5所述的微生物功能菌剂及其制备方法，其特征在于所述菌种（A）为地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis），其制备过程是：取自然腐熟的秸秆和玉米芯，按照秸秆4份、玉米芯1份的比例合成的复合物100g，置入250ml锥形瓶中，瓶口加棉塞封堵，置于40°C培养箱中，培养一周，形成复合物培养样品；然后将富集的复合物培养样品采用系列稀释法进行涂布，系列稀释法过程是：取复合物培养样品10g加入到盛装90ml无菌水-1
的锥形瓶中，振荡混合均匀，融合到无菌水中，稀释为10 ，得到一次稀释液；再从一次稀释-2
液中取1ml，移入到盛装9ml无菌水的试管中，振荡混合均匀，稀释为10 ，形成二次稀释液；
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再从二次稀释液中取1ml，移入到盛装9ml无菌水的试管中，振荡混合均匀，稀释为10 ，形-6
成三次稀释液……如此逐次类推，重复以上稀释过程，直至稀释到10 ，形成六次稀释液；
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制得含有原液10 菌量的菌悬液；然后取原液、含量10 的四次稀释液、10 的五次稀释液、-6
10 的菌悬液，各取0.1ml，分别涂到覆盖培养基的平板上，在高温培养箱中培养48h；然后取出平板，挑取形态各异的单菌落6个，分别进行划线纯化，再置入高温培养箱中培养48h；
然后再取样检验，选择其中生长最快的菌株作为菌种（A），装入锥形瓶中备用。
7.按照权利要求6所述的微生物功能菌剂及其制备方法，其特征在于所述的培养基是将复合物培养样品200g置入加热容器中，加水煮沸，混合均匀，取滤液300 ml，按照质量比加2%琼脂，高温高压灭菌后制备而成。
8.按照权利要求5所述的微生物功能菌剂及其制备方法，其特征在于所述发酵罐（5）的扩繁培养过程为：种子罐(6)内的菌液通过移液管（L）导入发酵罐(5)中，发酵罐(5)设置搅拌器转速180～200r/min，罐内温度为39.5～40.5℃，发酵罐（5）中空气流量为
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15-18m/h，压力保持在0.05Mpa，20h后转速调低至150r/min，Do值保持50以上，24h以后，每2～4h抽样检验一次，至24～48h检验芽孢率达到80～90%时，停止搅拌、停止供气，保压状态下，发酵罐（5）中形成的菌液通过成液管（W）打入储存罐(9)内，进入储存灌装工序。
9.按照权利要求1所述的微生物功能菌剂及其制备方法，其特征在于所述的储存灌装工序的工艺过程是：通过成液管（W）将发酵罐(5)中的菌液打入经过消毒灭菌的储存罐(9)内，常温储存；再将菌液通过菌液管（Y）打入计量灌装罐(10)内，充分搅拌均匀，即制成微生物功能菌剂成品；最后进行计量灌装输入容器（Z）。
10.按照权利要求7所述的微生物功能菌剂及其制备方法，其特征在于所述的微生物功能菌剂成品为液体状态，检验标准指标为：颜色呈黄褐色，无异味；pH值为6.6～7.2，芽孢率达到80～90%，含菌量为14～17亿/ml。
一种微生物功能菌剂及其制备方法
技术领域
背景技术
发明内容
10g加入到盛装90ml无菌水的锥形瓶中，振荡混合均匀，融合到无菌水中，稀释为10 ，得到一次稀释液；再从一次稀释液中取1ml，移入到盛装9ml无菌水的试管中，振荡混合均匀，-2
稀释为10 ，形成二次稀释液；再从二次稀释液中取1ml，移入到盛装9ml无菌水的试管中，-3
振荡混合均匀，稀释为10 ，形成三次稀释液……如此逐次类推，重复以上稀释过程，直至稀-6 -6 -4
释到10 ，形成六次稀释液；制得含有原液10 菌量的菌悬液；然后取原液、含量10 的四-5 -6
次稀释液、10 的五次稀释液、10 的菌悬液，各取0.1ml，分别涂到覆盖培养基的平板上，在高温培养箱中培养48h；然后取出平板，挑取形态各异的单菌落6个，分别进行划线纯化，再置入高温培养箱中培养48h；然后再取样检验，选择其中生长最快的菌株作为菌种，装入锥形瓶。培养基是将复合物培养样品200g置入加热容器中，加水煮沸，混合均匀，取滤液300 ml，按照质量比加2%琼脂，高温高压灭菌后制备而成。发酵罐的扩繁培养过程为：种子罐内的菌液通过移液管导入发酵罐中，发酵罐设置搅拌器转速180～200r/min，罐内温度为
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39.5～40.5℃，发酵罐中空气流量为15-18m/h，压力保持在0.05Mpa，20h后转速调低至
150r/min，Do值保持50以上，24h以后，每2～4h抽样检验一次，至24～48h检验芽孢率达到80～90%时，停止搅拌、停止供气，保压状态下，发酵罐中形成的菌液通过成液管打入储存罐内，进入储存灌装工序。储存灌装工序的工艺过程是：通过成液管将发酵罐中的菌液打入经过消毒灭菌的储存罐内，常温储存；再将菌液通过菌液管打入计量灌装罐(内，充分搅拌均匀，即制成微生物功能菌剂成品；最后进行计量灌装输入容器，用封口机封口，检验合格后，封箱、入库。微生物功能菌剂成品为液体状态，检验标准指标为：液体颜色呈黄褐色，无异味：PH值为pH值为6.6～7.2，芽孢率达到80～90%，含菌量为14～17亿/ml。
本发明制成的菌剂中形成的芽孢，耐酸耐碱、耐高低温，存活能力强，施入土壤后处于休眼状态的菌群会迅速系列扩张，增加土壤有益菌群的数量，可有效调节植物根际土壤微生物生态平衡，促进其它生物产生抗菌活性物质，杀灭植物病原菌，能分泌生长素物质和赤霉素物质等促生长物质，增根壮苗，增强植株抗旱能力，能促进土壤团粒结构形成，防止土壤板结，防止土壤中的水分蒸发。能够增加农作物的产量，有效地防治病虫害。
13—空气粗滤器，14—减压阀，15—空气精滤器，16—蒸汽过滤器；A—菌种，B—水泵，C—出料管，D—豆芽，G—纯净水管，H—回水管，J—流量计，L—移液管，M—培养液管，P—排气管，Q—无菌空气管，R—蒸汽管，S—取样口，T—红糖，W—成液管，X—恒温水管，Y—菌液管，Z—容器。
具体实施方式
5min-10min，排净夹套内的冷水后，关闭夹套蒸汽阀，然后向种子罐6和发酵罐5内通蒸汽，罐内温度升至120～121℃，调小排汽阀，使压力上升至0.1～0.12MPa，再调小蒸汽阀，压力稳定在0.11～0.12MPa，保持30～40min，温度下降，继续关闭各路蒸汽阀门，开大排气阀，压力降至0.03MPa，打开空气阀门通入无菌空气，罐内压力上升至0.05～0.1MPa，保持稳定；温度降至40℃时，关闭空气阀门，打开排气阀门放气，罐内压力降为0，向罐内插入pH电极和Do电极。
120～121℃，保持30～40min，停止通蒸汽，压力降至0.03MPa；打开空气阀门，通入无菌空气，压力升至0.1～0.11MPa，打开排气阀保持压力稳定；关闭夹套排污阀，向夹套内通恒温冷却水，温度降为40℃，进入接种扩繁工序。
0.05MPa，设置罐内温度为39.5～40.5℃、搅拌器转速180～200r/min；16h后每2h抽检一次，至16～24h检验菌体进入对数末期后，种子罐6内的菌液通过移液管L导入发酵罐
5中继续进行扩繁培养；种子罐6内的菌液导出后，关上空气阀门，泄压；向种子罐6内加水至80%，通空气，开搅拌器20min，排出存水，同时清理出料管C，重复前述空消步骤。
装9ml无菌水的试管中，振荡混合均匀，稀释为10 ，形成二次稀释液；再从二次稀释液中取-3
1ml，移入到盛装9ml无菌水的试管中，振荡混合均匀，稀释为10 ，形成三次稀释液……如-6 -6
此逐次类推，重复以上稀释过程，直至稀释到10 ，形成六次稀释液；制得含有原液10 菌-4 -5 -6
量的菌悬液；然后选取：原液、含量10 的四次稀释液、10 的五次稀释液、10 的菌悬液，每样各取0.1ml，分别涂到覆盖培养基的平板上，在高温培养箱中培养48h；然后取出平板，挑取形态各异的单菌落6个，高倍显微镜下观察，菌落特征：形态不规则，边缘不整齐，中间稍隆起，边缘粗糙，中间稍光滑。将选取的形态各异的6个单菌落分别进行划线纯化，再置入高温培养箱中培养48h；然后再取样检验，制片观察菌体形态为长杆状，有芽孢。选择其中生长最快的菌株作为菌种A，装入锥形瓶中备用。
气流量为15-18m/h，压力保持在0.05Mpa，20h后转速调低至150r/min，Do值保持50以上，
24h以后，每2～4h抽样检验一次，至24～48h检验芽孢率达到80～90%时，停止搅拌、停止供气，保压状态下，发酵罐5中形成的菌液通过成液管W打入储存罐9内。接种扩繁工序完成，进入储存灌装工序。
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