一种新型复合微生物菌剂及其应用专利检索-生物生物学专利检索查询-专利查询网

一种新型复合微 生物菌剂及其应用

阅读：245发布：2021-04-13

专利汇可以提供一种新型复合微生物菌剂及其应用专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本发明公开了一种新型复合微生物菌剂，涉及农业微生物技术领域。其以枯草芽孢杆菌10-20份、胶冻样芽孢杆菌20-30份、地衣芽孢杆菌50-70份为原料；其培养基以腐植酸钠5-15份、麸皮30-50份、米糠30-50份、海藻5-15份为原料。本发明新型复合微生物菌剂的制备方法，将芽孢杆菌三种混合、粉碎，水分保持在30％以内，即得新型复合微生物菌剂。本发明新型复合微生物菌剂与氮磷钾适当配比后制成的微生物菌肥，能够有效的改善土壤的团粒结构、对作物的生长有刺激作用，且增产效果显著。，下面是一种新型复合微生物菌剂及其应用专利的具体信息内容。

权利要求

1.一种复合微生物菌剂，其特征在于原料组份重量份如下：
枯草芽孢杆菌 10-20份，
胶冻样芽孢杆菌 20-30份，
地衣芽孢杆菌 50-70份；
所述新型复合微生物菌剂的培养基，原料组分重量份如下：
腐植酸钠 5-15份，
麸皮 30-50份，
米糠 30-50份，
海藻 5-15份。
2.如权利要求1所述新型复合微生物菌剂，其特征在于原料组份重量份如下：
枯草芽孢杆菌菌剂 15-20份，
胶冻样芽孢杆菌菌剂 25-30份，
地衣芽孢杆菌菌剂 50-60份；
所述新型复合微生物菌剂的培养基，原料组分重量份如下：
腐植酸钠 8-13份，
麸皮 35-45份，
米糠 35-45份，
海藻 8-13份。
3.如权利要求1或2所述新型复合微生物菌剂，其特征在于原料组份重量份如下：
枯草芽孢杆菌菌剂 20份，
胶冻样芽孢杆菌菌剂 30份，
地衣芽孢杆菌菌剂 50份；
所述新型复合微生物菌剂的培养基，原料组分重量份如下：
腐植酸钠 10份，
麸皮 35份，
米糠 45份，
海藻 10份。
4.如权利要求1所述新型复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于包括如下工艺步骤：
（1）枯草芽孢杆菌菌剂的制备
1）将试管斜面保藏法保藏的枯草芽孢杆菌菌种取出，扩接至新鲜的试管牛肉膏蛋白胨斜面培养基上，于30℃培养箱中2-4天培养成熟后，备用；
2）将步骤1）得到的成熟菌种接种于培养液，该培养液用牛肉膏5g、蛋白胨5g、氯化钠5g、水1000mL配制，pH为7.2，盛装容器中灭菌，摇床培养至菌液菌数达到20亿/毫升以上，为成熟种子，然后进入发酵阶段，种子液的量以一级发酵罐容积为基准，接种量
0.1％-10％之间；
3) 采用淀粉10kg、豆饼粉10kg、蛋白胨1kg、硫酸铵 1kg 、磷酸二氢钾0.5kg、酵母粉0.1kg、碳酸钙5.0kg配制发酵液，调节pH 7.5，用水定容至1t，通过高压蒸汽灭菌，利用循环冷却水将发酵液冷却至28℃-30℃，期间始终保持罐内为正压状态，表压控制在
0.05Mpa；采用压差法将种子液压入发酵罐，控制压力0.05Mpa，温度28℃，无菌空气通气量为罐容积的0.5-1倍；
4)待一级发酵结束后，通过管道直接将菌液压入二级发酵罐，培养条件同步骤3），当发酵液达到质量指标pH5.5-6.0、发酵液菌数达到20亿/毫升以上、芽孢率为80％时，即为发酵结束，发酵液放入已灭菌的储液罐中，备用；
5)将含水量≤15％、细度80目筛通过率80％的无菌草炭与发酵液以3-5∶1比例吸附，混合均匀，控制含水量≤30％，有效活菌数≥2亿/克，得枯草芽孢杆菌菌剂产品，备用；
（2）胶冻样芽孢杆菌菌剂的制备
1) 将试管斜面保藏法保藏的胶冻样芽孢杆菌菌种取出，扩接至新鲜的试管牛肉膏蛋白胨斜面培养基上，于30℃培养箱中2-4天培养成熟后，备用；
2）将步骤1）得到的成熟菌种接种于培养液，该培养液用牛肉膏5g、蛋白胨5g、氯化钠5g、pH为7.2、水1000mL配制，盛装容器中灭菌，摇床培养至菌液菌数达到20亿/毫升以上，为成熟种子，然后进入发酵阶段，种子液的量以一级发酵罐容积为基准，接种量
0.1％-10％之间；
3) 采用淀粉10kg、豆饼粉10kg、蛋白胨1kg、硫酸铵 1kg 、磷酸二氢钾0.5kg、酵母粉0.1kg、碳酸钙5.0kg配制发酵液，调节pH 7.5，用水定容至1t，通过高压蒸汽灭菌，利用循环冷却水将发酵液冷却至28℃-30℃，期间始终保持罐内为正压状态，表压控制在
0.05Mpa，采用压差法将种子液压入发酵罐，控制压力0.05Mpa，温度28℃，无菌空气通气量为罐容积的0.5-1倍；
4)待一级发酵结束后，通过管道直接将菌液压入二级发酵罐，培养条件同上，当发酵液达到质量指标pH5.5-6.0、发酵液菌数达到20亿/毫升以上、芽孢率为80％时，即为发酵结束，发酵液放入已灭菌的储液罐中，备用；
5)将含水量≤15％、细度80目筛通过率80％的无菌草炭与发酵液以3-5∶1比例吸附，混合均匀，控制含水量≤20％，有效活菌数≥2亿/克，得胶冻样芽孢杆菌菌剂产品，备用；
（3）地衣芽孢杆菌菌剂的制备
1) 将地衣芽孢杆菌从保存的试管斜面转接于新鲜试管牛肉膏蛋白胨斜面培养基上，于37℃培养18h；
2）将步骤1）得到的成熟菌种接种于培养液，该培养液用牛肉膏3g、蛋白胨5g、氯化钠
5g、琼脂15g、蒸馏水1000mL配制，pH为7.2，盛装容器中灭菌，摇床培养至菌液菌数达到20亿/毫升以上，为成熟种子，然后进入发酵阶段，种子液的量以一级发酵罐容积为基准，接种量0.1％-10％之间；
3) 用玉米浆45kg、蛋白胨1.5kg、豆饼粉10kg、葡萄糖1.5kg、磷酸二氢钾0.5kg、酵母粉0.1kg、碳酸钙5.0kg配制发酵液，调节pH 7.5，用水定容至1t，通过高压蒸汽灭菌，利用循环冷却水将发酵液冷却至28℃-30℃，期间始终保持罐内为正压状态，表压控制在
0.05Mpa，采用压差法将种子液压入发酵罐，控制压力0.05Mpa，温度28℃，无菌空气通气量为罐容积的0.5-1倍；
4)待一级发酵结束后，通过管道直接将菌液压入二级发酵罐，培养条件同上，当发酵液达到质量指标pH5.5-6.0、发酵液菌数达到20亿/毫升以上、芽孢率为80％时，即为发酵结束，发酵液放入已灭菌的储液罐中，备用；
5)将含水量≤15％、细度80目筛通过率80％的无菌草炭与发酵液以3-5∶1比例吸附，混合均匀，控制含水量≤20％，有效活菌数≥2亿/克，得胶冻样芽孢杆菌菌剂产品，备用；
（4）复合微生物菌剂制备：将（1）制备的枯草芽孢杆菌菌剂、（2）制备的胶冻样芽孢杆菌菌剂和（3）制备的地衣芽孢杆菌菌剂按照10-20份∶20-30份∶50-70份的比例混合、粉碎，水分保持在30％以内，即得新型复合微生物菌剂。
5.如权利要求1所述新型复合微生物菌剂，在制备花生专用复合微生物菌肥中的应用。

说明书全文

一种新型复合微 生物菌剂及其应用

[0001] 技术领域本发明涉及农业微生物技术领域，具体涉及一种新型复合微生物菌剂。

[0002] 背景技术复合微生物是近年来国内外兴起的一类微生物制剂产品，其特点是通过复合两种或两种以上的微生物菌种，能够起到增强作物养分吸收、抗病、耐贫瘠等多重作用。复合微生物菌剂是由两种或两种以上且互不拮抗的微生物菌种制成的微生物制剂，此类菌剂一般具有种类全、配伍合理、功能性强等优良特点。但是目前应用的复合微生物制剂的稳定性不强，易受环境影响，群体结构或因环境变化使某些微生物死亡或因新的微生物介入导致复合微生物制剂的群体优势被改变。而且复合微生物菌剂由于研发投资大，一般应用于食品、医药、环境处理等方面，应用于农业较少。

[0003] 枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis(Ehrenberg)Cohn)，芽孢杆菌属的一种，其菌体生长过程中产生的枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等活性物质，这些活性物质对致病菌或内源性感染的条件致病菌有明显的抑制作用；能迅速消耗环境中的游离氧，造成低氧环境，促进有益厌氧菌生长，并产生有机酸类，间接抑制其它致病菌生长；刺激免疫器官的生长发育，增强细胞免疫功能，提高群体免疫力；其菌体自身合成α-淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶等酶类，与消化酶类一同发挥作用；能合成维生素B1、B2、B6、烟酸等多种B族维生素，提高干扰素和巨噬细胞的活性。

[0004] 胶冻样芽胞杆菌(Bacillus mucilaginosus)，俗称钾细菌，是农田中常见的一种土壤细菌。五十年代初，苏联学者亚历山大罗夫首先报导从土壤中分离到此种特殊细菌，不仅有活化硅酸盐矿物中钾素的能力，而且还能利用磷灰石中磷素和固定大气氮素，因而称为硅酸盐细菌。胶质芽胞杆菌对磷钾矿物有利用和分解能力，但在短时间内释放出的速效磷钾含量并不高，特别是以对钾长石的分解能力更低，这与此类岩石矿物的特殊结构有关。胶质芽胞杆菌还具有固氮能力和PGPR作用(在植物根际生活的一类具有刺激植物生长和抑制植物病原菌等综合作用的细菌群，简称PGPR)。

[0005] 地衣芽孢杆菌(Bacillus lincheniformis)，芽孢杆菌属的一种，革兰氏阳性菌，细胞形态和排列呈杆状、单生，能产生多种活性酶，如蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、果胶酶、葡聚糖酶、纤维素酶等，同时还能产生多种酶促因子，产生抗活性物质，并具有独特的生物夺氧作用机制，能抑制致病菌的生长繁殖。一般应用于动物饲料添加剂，增强动物消化酶的活性，促进养殖动物的生长，可提高饲料利用率；还可应用于医学，通过调整菌群失调达到治疗目的，可促使机体产生抗菌活性物质、杀灭致病菌。

发明内容

[0006] 本发明目的在于提供一种新型复合微生物菌剂，主要应用于生产微生物菌肥。

[0007] 本发明新型复合微生物菌剂含有的微生物有：（1）枯草芽孢杆菌，拉丁文名称是Bacillus subtilis(Ehrenberg)Cohn，中文菌名Chinese Name枯草芽孢杆菌，中国农业微生物菌种保藏管理中心，保藏号：ACCC.No.11060。

[0008] （2）胶冻样芽孢杆菌，拉丁文名称是Bacillus mucilaginosus，甘肃省微生物菌种保藏中心，保藏号：GSICC 30210。

[0009] （3）地衣芽孢杆菌，拉丁文名称是Bacillus lincheniformis，中国工业微生物菌种保藏管理中心，保藏号是CICC.No.20166。

[0010] 本发明的技术方案如下：本发明复合微生物菌剂，原料组份重量份如下：
枯草芽孢杆菌 10-20份，
胶冻样芽孢杆菌 20-30份，
地衣芽孢杆菌 50-70份；
所述新型复合微生物菌剂的培养基，原料组分重量份如下：
腐植酸钠 5-15份，
麸皮 30-50份，
米糠 30-50份，
海藻 5-15份。

[0011] 本发明复合微生物菌剂，优选原料组份重量份如下：枯草芽孢杆菌菌剂 15-20份，
胶冻样芽孢杆菌菌剂 25-30份，
地衣芽孢杆菌菌剂 50-60份；
所述新型复合微生物菌剂的培养基，优选原料组分重量份如下：
腐植酸钠 8-13份，
麸皮 35-45份，
米糠 35-45份，
海藻 8-13份。

[0012] 本发明复合微生物菌剂，最优选原料组份重量份如下：枯草芽孢杆菌菌剂 20份，
胶冻样芽孢杆菌菌剂 30份，
地衣芽孢杆菌菌剂 50份；
所述新型复合微生物菌剂的培养基，最优选原料组分重量份如下：
腐植酸钠 10份，
麸皮 35份，
米糠 45份，
海藻 10份。

[0013] 本发明新型复合微生物菌剂的制备方法，包括如下工艺步骤：（1）枯草芽孢杆菌菌剂的制备
1）将试管斜面保藏法保藏的枯草芽孢杆菌菌种取出，扩接至新鲜的试管牛肉膏蛋白胨斜面培养基上，于30℃培养箱中2-4天培养成熟后，备用；
2）将步骤1）得到的成熟菌种接种于培养液，该培养液用牛肉膏5g、蛋白胨5g、氯化钠5g、水1000mL配制，pH为7.2，盛装容器中灭菌，摇床培养至菌液菌数达到20亿/毫升以上，为成熟种子，然后进入发酵阶段，种子液的量以一级发酵罐容积为基准，接种量
0.1％-10％之间；
3) 采用淀粉10kg、豆饼粉10kg、蛋白胨1kg、硫酸铵 1kg 、磷酸二氢钾0.5kg、酵母粉0.1kg、碳酸钙5.0kg配制发酵液，调节pH 为7.5，用水定容至1t，通过高压蒸汽灭菌，利用循环冷却水将发酵液冷却至28℃-30℃，期间始终保持罐内为正压状态，表压控制在
0.05Mpa；采用压差法将种子液压入发酵罐，控制压力0.05Mpa，温度28℃，无菌空气通气量为罐容积的0.5-1倍；
4)待一级发酵结束后，通过管道直接将菌液压入二级发酵罐，培养条件同步骤3），当发酵液达到质量指标pH5.5-6.0、发酵液菌数达到20亿/毫升以上、芽孢率为80％时，即为发酵结束，发酵液放入已灭菌的储液罐中，备用；
5)将含水量≤15％、细度80目筛通过率80％的无菌草炭与发酵液以3-5∶1比例吸附，混合均匀，控制含水量≤30％，有效活菌数≥2亿/克，得枯草芽孢杆菌菌剂产品，备用；
（2）胶冻样芽孢杆菌菌剂的制备
1) 将试管斜面保藏法保藏的胶冻样芽孢杆菌菌种取出，扩接至新鲜的试管牛肉膏蛋白胨斜面培养基上，于30℃培养箱中2-4天培养成熟后，备用；
2）将步骤1）得到的成熟菌种接种于培养液，该培养液用牛肉膏5g、蛋白胨5g、氯化钠5g、pH为7.2、水1000mL配制，盛装容器中灭菌，摇床培养至菌液菌数达到20亿/毫升以上，为成熟种子，然后进入发酵阶段，种子液的量以一级发酵罐容积为基准，接种量
0.1％-10％之间；
3) 采用淀粉10kg、豆饼粉10kg、蛋白胨1kg、硫酸铵 1kg 、磷酸二氢钾0.5kg、酵母粉0.1kg、碳酸钙5.0kg配制发酵液，调节pH 7.5，用水定容至1t，通过高压蒸汽灭菌，利用循环冷却水将发酵液冷却至28℃-30℃，期间始终保持罐内为正压状态，表压控制在
0.05Mpa，采用压差法将种子液压入发酵罐，控制压力0.05Mpa，温度28℃，无菌空气通气量为罐容积的0.5-1倍；
4)待一级发酵结束后，通过管道直接将菌液压入二级发酵罐，培养条件同上，当发酵液达到质量指标pH5.5-6.0、发酵液菌数达到20亿/毫升以上、芽孢率为80％时，即为发酵结束，发酵液放入已灭菌的储液罐中，备用；
5)将含水量≤15％、细度80目筛通过率80％的无菌草炭与发酵液以3-5∶1比例吸附，混合均匀，控制含水量≤20％，有效活菌数≥2亿/克，得胶冻样芽孢杆菌菌剂产品，备用；
（3）地衣芽孢杆菌菌剂的制备
1) 将地衣芽孢杆菌从保存的试管斜面转接于新鲜试管牛肉膏蛋白胨斜面培养基上，于37℃培养18h；
2）将步骤1）得到的成熟菌种接种于培养液，该培养液用牛肉膏3g、蛋白胨5g、氯化钠
5g、琼脂15g、蒸馏水1000mL配制，pH7.2，盛装容器中灭菌，摇床培养至菌液菌数达到20亿/毫升以上，为成熟种子，然后进入发酵阶段，种子液的量以一级发酵罐容积为基准，接种量
0.1％-10％之间；
3) 用玉米浆45kg、蛋白胨1.5kg、豆饼粉10kg、葡萄糖1.5kg、磷酸二氢钾0.5kg、酵母粉0.1kg、碳酸钙5.0kg配制发酵液，调节pH 7.5，用水定容至1t，通过高压蒸汽灭菌，利用循环冷却水将发酵液冷却至28℃-30℃，期间始终保持罐内为正压状态，表压控制在
0.05Mpa，采用压差法将种子液压入发酵罐，控制压力0.05Mpa，温度28℃，无菌空气通气量为罐容积的0.5-1倍；
4)待一级发酵结束后，通过管道直接将菌液压入二级发酵罐，培养条件同上，当发酵液达到质量指标pH5.5-6.0、发酵液菌数达到20亿/毫升以上、芽孢率为80％时，即为发酵结束，发酵液放入已灭菌的储液罐中，备用；
5)将含水量≤15％、细度80目筛通过率80％的无菌草炭与发酵液以3-5∶1比例吸附，混合均匀，控制含水量≤20％，有效活菌数≥2亿/克，得胶冻样芽孢杆菌菌剂产品，备用；
（4）复合微生物菌剂制备：将（1）制备的枯草芽孢杆菌菌剂、（2）制备的胶冻样芽孢杆菌菌剂和（3）制备的地衣芽孢杆菌菌剂按照10-20份∶20-30份∶50-70份的比例混合、粉碎，水分保持在30％以内，即得新型复合微生物菌剂。

[0014] 本发明通过用枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis(Ehrenberg)Cohn)、胶冻样芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus)和地衣芽孢杆菌（Bacillus lincheniformis）扩接培养发酵吸附制得的复合微生物菌剂，与氮磷钾适当配比后制成的微生物菌肥能够有效的改善土壤的团粒结构，而且微生物在土壤中的生活、活动，可产生很多代谢产物或分泌物，这些分泌物对作物的生长有刺激作用，增产效果显著。具体实施例

[0015] 下面结合实施例对本发明作详细说明，但本发明的保护范围不仅限如此。

[0016] 实施例1制备新型复合微生物菌剂原料组分重量份如下：
枯草芽孢杆菌菌剂 20份，
胶冻样芽孢杆菌菌剂 30份，
地衣芽孢杆菌菌剂 50份。

[0017] 新型复合微生物菌剂的培养基，组分重量份如下：腐植酸钠 10份，
麸皮 35份，
米糠 45份，
海藻 10份；
制备方法：
1）单一菌剂的培养
将试管斜面保藏法保藏于4℃冰箱的菌种取出，扩接至新鲜的试管牛肉膏蛋白胨斜面培养基上，于30℃培养箱中2-4天培养成熟，接种于培养液 (牛肉膏5g，蛋白胨5g，氯化钠
5g，pH7.2，水1L)进行摇床培养；菌液菌数达到20亿/毫升以上进入一级发酵阶段，种子液的量以一级发酵罐容积为基准，接种量0.1%-10%之间。采用压差法将种子液压入发酵罐，控制压力0.05Mpa，温度28℃，无菌空气通气量为罐容积的0.5-1倍；待一级发酵结束后，通过管道直接将菌液压入二级发酵罐，培养条件同上；当发酵液达到质量指标pH5.5-6.0，发酵液菌数达到20亿/毫升以上时，将发酵液放入已灭菌的储液罐中；将无菌草炭(含水量≤15%，细度80目筛通过率80%)与发酵液以3至5：1比例吸附，混合均匀，控制含水量≤20%，有效活菌数≥2亿/克，得单一菌剂产品。

[0018] 2）复合微生物菌剂制备将按照步骤1）分别制备的枯草芽孢杆菌、胶冻样芽胞杆菌、地衣芽孢杆菌按照2：3：5的比例混合、粉碎，水分保持在30%以内，得复合微生物菌剂，即枯草芽孢杆菌菌剂20份、胶冻样芽孢杆菌菌剂30份、地衣芽孢杆菌菌剂50份。该新型复合微生物菌剂的培养基由10份腐植酸钠、35份麸皮、45份米糠、10份海藻组成。

[0019] 实施例2制备新型复合微生物菌剂原料组分重量份如下：
枯草芽孢杆菌菌剂 15份，
胶冻样芽孢杆菌菌剂 30份，
地衣芽孢杆菌菌剂 55份。

[0020] 新型复合微生物菌剂的培养基，组分重量份如下：腐植酸钠 8份，
麸皮 45份，
米糠 35份，
海藻 12份。

[0021] 制备方法同实施例1。

[0022] 实施例3：制备花生专用复合微生物菌肥，氮、五氧化二磷、氧化钾含量分别为19%、6%、13%，均为质量百分比。

[0023] 原料组分重量份如下：新型复合微生物菌剂 8份，
草炭土 8份，
尿素 40份，
钙镁磷肥 10份，
磷酸一铵 8份，
硫酸钾 25份，
膨润土 1份；
草炭木的标准是含水量2-5%，有机质含量≥30%；
尿素为小颗粒尿素，粒径为0.85mm-2.80mm，含氮量为46.2%，为质量百分比；
钙镁磷肥中五氧化二磷的含量为18%，氧化钙的含量为45%，氧化镁的含量为12%，氧化硅的含量为20%，均为质量百分比；
磷酸一铵中氮的总含量为10%，五氧化二磷含量为50%，均为质量百分比；硫酸钾中氧化钾含量为51%，为质量百分比；
膨润土是以蒙脱石为主的含水粘土矿，由于具有膨润性、粘结性、吸附性、催化性、触变性、悬浮性以及阳离子交换性等特殊的性质，广泛用于各个工业领域，被称之为“万能土”；
以上原料中涉及的含量均为质量百分比。

[0024] 制备方法：将上述原料新型复合微生物菌剂（取自实施例1）、草炭土、尿素、钙镁磷肥、磷酸一铵、

标题	发布/更新时间	阅读量
微生物油脂	2020-05-12	169
生物反应器	2020-05-12	296
转基因生物	2020-05-13	347
微生物菌剂	2020-05-13	338
生物试片	2020-05-11	996
生物传感器	2020-05-12	343
生物反应器	2020-05-12	480
生物保鲜剂	2020-05-12	688
微生物菌肥	2020-05-12	933
生物羊膜	2020-05-11	827

一种新型复合微生物菌剂及其应用

一种新型复合微生物菌剂及其应用

发明内容

该功能需要专业版企业版VIP权限，您可以：