一种用于肺移植的灌洗保存液
阅读：948发布：2021-04-13
专利汇可以提供一种用于肺移植的灌洗保存液专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且一种用于 肺 移植的灌洗保存液，涉及一种器官移植技术。按照本 发明 所提供的方案，在灌洗液中含有 钾 3.0～6毫摩尔/升，钠130～168毫摩尔/升，镁1.0～2.5毫摩尔/升，氯100～110毫摩尔/升， 磷酸 盐 30～40毫摩尔/升， 硫酸 盐 3.5～5.5毫摩尔/升，前列腺素E1 108～150毫克/升， 棉 子糖30～50毫摩尔/升，低分子右旋糖酐40 20～38克/升。这种灌洗液能延长移植器官的保存时间，提高移植器官的存活率，最大可能的保存移植器官的功能。，下面是一种用于肺移植的灌洗保存液专利的具体信息内容。
技术领域
本发明涉及一种器官移植技术，尤其是指一种对器官进行灌洗，以便于 保存，并提高存活率的灌洗液。
背景技术
器官移植被称为“21世纪医学之巅”。在跨入新世纪之际，器官移植又 进入了一个蓬勃发展的新时期。据全球移植中心名录(WTCD)的统计，迄 今已有60余万名身患不治之症者，通过器官移植获得了第二次生命。他们 在移植器官后，全身健康，过着与正常人一样的生活；心理健康，工作精力 充沛；育龄妇女能怀孕生育，少年儿童能健康成长。为了使器官移植有更好 的前景，各国科学工作者们正孜孜不倦地在探索新的领域。为开拓器官来源， 正在开展利用动物器官的异种移植研究；创制各种新的器官保存液。
我国自70年代开展临床器官移植以来，技术队伍不断扩大，水平亦逐 年提高，在肾移植、肝移植、脾移植等多个方面都取得了骄人的成绩，并且 逐渐形成了自己的特色。因此，引起了国际学术界的广泛关注。
自从1983年多伦多肺移植组成功进行人类单肺移植，1986年成功进行 双肺移植以来，全世界应用肺移植技术治疗终末期肺部疾病的病例迅速增 加，据国际心肺移植协会登记2000年全世界单肺移植7420，双肺移植5420 例。平均一年存活率超过87％，三年存活率超过60％，五年存活率超过45％， 七年存活率超过35％。
亚洲地区肺移植相对落后。肺移植在国内开展时间不长，仅北京安贞医 院报告2例长期生存。目前除安贞医院的病例外，国内尚无存活的肺移植病 例。我国肺移植工作落后于国际水平的因素很多，其中选择适当的灌注液以 及肺灌注保存技术一直是实验及临床研究的焦点，它是减少肺再灌注损伤 (Ischemia-reperfusion injury)的关键。
肺移植术后影响早期肺功能的因素很多。在临床实验中应用很多不同的 肺保存技术，有的已经成功，但没有一个是理想的技术。应用改良Euro-Collins 液或UW(威斯康辛大学)液体进行肺动脉灌注，目前也仅能保存4-6h，即 缺血时间最长不得超过6h，因此不甚理想。近年研究并试用的灌洗液还有 LPD(低钾右旋糖酐)，有多家报道其肺保存作用较Euro-Collins液、UW(威 斯康辛大学)液更好，认为它能更好地保护肺泡毛细血管内皮细胞，但即便 如此，仍然不是一种可以在临床上广泛应用的理想的灌洗液，这些因素导致 供肺的运转、手术的安排乃至手术操作都受到严重限制，成为肺移植发展的 重要障碍。
我国自70年代开展临床器官移植以来，技术队伍不断扩大，水平亦逐 年提高，在肾移植、肝移植、脾移植等多个方面都取得了骄人的成绩，并且 逐渐形成了自己的特色。因此，引起了国际学术界的广泛关注。
自从1983年多伦多肺移植组成功进行人类单肺移植，1986年成功进行 双肺移植以来，全世界应用肺移植技术治疗终末期肺部疾病的病例迅速增 加，据国际心肺移植协会登记2000年全世界单肺移植7420，双肺移植5420 例。平均一年存活率超过87％，三年存活率超过60％，五年存活率超过45％， 七年存活率超过35％。
亚洲地区肺移植相对落后。肺移植在国内开展时间不长，仅北京安贞医 院报告2例长期生存。目前除安贞医院的病例外，国内尚无存活的肺移植病 例。我国肺移植工作落后于国际水平的因素很多，其中选择适当的灌注液以 及肺灌注保存技术一直是实验及临床研究的焦点，它是减少肺再灌注损伤 (Ischemia-reperfusion injury)的关键。
肺移植术后影响早期肺功能的因素很多。在临床实验中应用很多不同的 肺保存技术，有的已经成功，但没有一个是理想的技术。应用改良Euro-Collins 液或UW(威斯康辛大学)液体进行肺动脉灌注，目前也仅能保存4-6h，即 缺血时间最长不得超过6h，因此不甚理想。近年研究并试用的灌洗液还有 LPD(低钾右旋糖酐)，有多家报道其肺保存作用较Euro-Collins液、UW(威 斯康辛大学)液更好，认为它能更好地保护肺泡毛细血管内皮细胞，但即便 如此，仍然不是一种可以在临床上广泛应用的理想的灌洗液，这些因素导致 供肺的运转、手术的安排乃至手术操作都受到严重限制，成为肺移植发展的 重要障碍。
发明内容
本发明的目的在于寻求一种用于肺移植的灌洗保存液，这种灌洗液能有 效提高移植器官的存活率。
按照本发明所提供的方案，在灌洗液中含有钾3.0～6毫摩尔/升，钠 130～168毫摩尔/升，镁1.0～2.5毫摩尔/升，氯100～110毫摩尔/升，磷酸盐 30～40毫摩尔/升，硫酸盐3.5～5.5毫摩尔/升，前列腺素E1 108～150毫克/ 升，棉子糖30～50毫摩尔/升，低分子右旋糖酐40 20～38克/升。
为进一步提高灌洗液的效果，还可在灌洗保存液中添加谷光甘肽3.2～5 毫摩尔/升，腺苷5.5～8毫摩尔/升，别嘌呤醇1.2～3毫摩尔/升，地塞米松 6～10毫克/升。
其中钾、钠、镁、氯、磷酸盐及硫酸盐主要用于模拟细胞外液的环境， 调整Ph值，以便更好地保护供体器官；前列腺素E1用于扩张肺动脉；棉子 糖用来取代葡萄糖作为附加的渗透支持；谷光甘肽、腺苷、别嘌呤醇为氧自 由基，对肺缺血灌注损伤的发生起到重要的作用，谷光甘肽与别嘌呤醇均可 明显减少肺缺血灌注损伤；地塞米松用于抗炎症，减少器官排斥；低分子右 旋糖酐40用于改善循环。
我们在大量动物实验上研究并试用WXC液，该技术在动物实验上已显 示出较好的肺保存效果，实验研究显示肺安全保存时间超过24小时，较之 EURO-COLLINS溶液在90分钟的缺血猪模型中有更好的表面物质活性。目 前临床应用于肺移植，显示优于Eurolollins液，体现在WXC增强最初的气 体交换，减少术后机械通气时间，术后死亡率减少，增强了术后肺功能 (PO2/FiO2比)，预防缺血再灌注损伤的发生。
过去十年间，移植肺的匮乏是临床肺移植的主要限制性因素。大多数供 体肺由于水肿、人工吸引和由于脑死亡、供者的维持性通气导致的肺炎而出 现低氧和肺部浸润。近来的研究证明，部分先前认为“不合适移植”的肺也 可被成功移植。然而，大多数此类肺仍不能被成功获取并移植。因而采用挽 救这些移植物的手段或使用在移植后能减轻缺血——再灌注损伤的新方法来 改善目前困扰临床肺移植供体来源缺乏的问题，还有很长的一段路要走。肺 保存技术已成为肺移植的限制因素，因此WXC灌注液对在我国开展肺移植 有非常重要的意义。
国外三种灌洗液成分与WXC灌洗液比较 成分 EC UW LPD WXC 钾(mmol/L) 107 125 4 3.5～6 钠(mmol/L) 9.7 30 168 130～168 镁(mmol/L) 4.7 5 2 0.8～2.5 氯(mmol/L) 14 103 100～110 碳酸氢盐(mmol/L) 9.3 磷酸盐(mmol/L) 55 25 37 30～40 硫酸盐 4.7 5 3.5～5.5 前列腺素E1(mg/L) 100～150 棉子糖(mmol/L) 30 30～50 谷光甘肽(mmol/L) 3 3～5 腺苷(mmol/L) 5 5～8 别嘌呤醇(mmol/L) 1 1～3 葡萄糖(％) 5.6 甘露醇(％) 0.58 羟乙基淀粉(％) 5 胰岛素(U/L) 100 地塞米松(mg/L) 8 5～10 低分子右旋糖酐40(g/L) 20 20～40 PH值 7.74 7.87 7.45 7.35～7.75 克分子渗透压(mOsm/L) 452 327 280 280～320
注：1、EC：Euro-Collins液；2、UW：威斯康星大学液；3、LPD：低钾右 旋糖酐液；4、WXC：中国无锡液，即本发明的灌洗液。
与国外三种保存液比较，WXC能预防细胞水肿，保存液的成功之处与 其它灌注液的区别在于：①不含葡萄糖，而用一种大分子量的Raffinose棉 子糖作为附加的渗透支持；②含有前列腺素E1扩张肺动脉；③氧自由基对 肺缺血灌注损伤的发生起到重要的作用，谷胱甘肽(GSH)和别嘌呤醇均可 明显减少肺缺血灌注损伤。
器官保存液的质量可直接影响供体器官的质量与移植后的效果。WXC为 一种成功的器官保存液，符合下述5条器官保存液的质量要求。
1、适当的pH值。有关保存液的pH值尚无统一标准，通常器官保存液 的Ph值约在7.0～7.4，但要考虑低温的影响，因氢离子浓度随温度而变化。 防止细胞内酸中毒是器官保存良好的先决条件，有研究证明，肝、胰用Ph 值为7.9～8.3的保存液可明显改善保存效果，肺用Ph值为7.50～7.70的保 存液可明显改善保存效果。
2、适宜的渗透浓度，高渗性可防止细胞水肿。
3、无杂质、无热原、无细菌污染，因为器官保存液是用于供体器官初 期原位灌注和随后的冷保存，在质量上应同输液制剂一样无菌、无热原。然 而在制备过程中，要经过许多步骤才能完成，这就要求生产过程中严格控制 细菌的污染，所有容器及封装材料必须清理处理。
4、性能稳定，在已消毒条件下，有效期为1～2年，如出现浑浊、结晶 析出应弃之不用。另外，有部分具有药理活性的成分、生物制剂应在灌注前 临时加入，以便保证保存液质量。
5、实用性，配制方法简便，药源供应足，价格低廉，便于推广应用。
灌洗液的配制方法如下：
按配方称取药品，用适量蒸馏水搅拌溶解，再加水至足量，取少量液体 测其pH值、渗透浓度及电解质浓度，再用垂熔玻璃滤器过滤(以滤孔大小 分号，号码愈大，孔径越小，5号以上可除菌)，滤液经灌装，放薄膜，盖 橡皮塞，压铝盖，最后高压消毒灭菌，成品抽样作细菌培养，对整批保存液 逐瓶进行澄明度检查，凡发现异物，均剔出作废，合格品才能作保存液。
按照本发明所提供的方案，在灌洗液中含有钾3.0～6毫摩尔/升，钠 130～168毫摩尔/升，镁1.0～2.5毫摩尔/升，氯100～110毫摩尔/升，磷酸盐 30～40毫摩尔/升，硫酸盐3.5～5.5毫摩尔/升，前列腺素E1 108～150毫克/ 升，棉子糖30～50毫摩尔/升，低分子右旋糖酐40 20～38克/升。
为进一步提高灌洗液的效果，还可在灌洗保存液中添加谷光甘肽3.2～5 毫摩尔/升，腺苷5.5～8毫摩尔/升，别嘌呤醇1.2～3毫摩尔/升，地塞米松 6～10毫克/升。
其中钾、钠、镁、氯、磷酸盐及硫酸盐主要用于模拟细胞外液的环境， 调整Ph值，以便更好地保护供体器官；前列腺素E1用于扩张肺动脉；棉子 糖用来取代葡萄糖作为附加的渗透支持；谷光甘肽、腺苷、别嘌呤醇为氧自 由基，对肺缺血灌注损伤的发生起到重要的作用，谷光甘肽与别嘌呤醇均可 明显减少肺缺血灌注损伤；地塞米松用于抗炎症，减少器官排斥；低分子右 旋糖酐40用于改善循环。
我们在大量动物实验上研究并试用WXC液，该技术在动物实验上已显 示出较好的肺保存效果，实验研究显示肺安全保存时间超过24小时，较之 EURO-COLLINS溶液在90分钟的缺血猪模型中有更好的表面物质活性。目 前临床应用于肺移植，显示优于Eurolollins液，体现在WXC增强最初的气 体交换，减少术后机械通气时间，术后死亡率减少，增强了术后肺功能 (PO2/FiO2比)，预防缺血再灌注损伤的发生。
过去十年间，移植肺的匮乏是临床肺移植的主要限制性因素。大多数供 体肺由于水肿、人工吸引和由于脑死亡、供者的维持性通气导致的肺炎而出 现低氧和肺部浸润。近来的研究证明，部分先前认为“不合适移植”的肺也 可被成功移植。然而，大多数此类肺仍不能被成功获取并移植。因而采用挽 救这些移植物的手段或使用在移植后能减轻缺血——再灌注损伤的新方法来 改善目前困扰临床肺移植供体来源缺乏的问题，还有很长的一段路要走。肺 保存技术已成为肺移植的限制因素，因此WXC灌注液对在我国开展肺移植 有非常重要的意义。
国外三种灌洗液成分与WXC灌洗液比较 成分 EC UW LPD WXC 钾(mmol/L) 107 125 4 3.5～6 钠(mmol/L) 9.7 30 168 130～168 镁(mmol/L) 4.7 5 2 0.8～2.5 氯(mmol/L) 14 103 100～110 碳酸氢盐(mmol/L) 9.3 磷酸盐(mmol/L) 55 25 37 30～40 硫酸盐 4.7 5 3.5～5.5 前列腺素E1(mg/L) 100～150 棉子糖(mmol/L) 30 30～50 谷光甘肽(mmol/L) 3 3～5 腺苷(mmol/L) 5 5～8 别嘌呤醇(mmol/L) 1 1～3 葡萄糖(％) 5.6 甘露醇(％) 0.58 羟乙基淀粉(％) 5 胰岛素(U/L) 100 地塞米松(mg/L) 8 5～10 低分子右旋糖酐40(g/L) 20 20～40 PH值 7.74 7.87 7.45 7.35～7.75 克分子渗透压(mOsm/L) 452 327 280 280～320
注：1、EC：Euro-Collins液；2、UW：威斯康星大学液；3、LPD：低钾右 旋糖酐液；4、WXC：中国无锡液，即本发明的灌洗液。
与国外三种保存液比较，WXC能预防细胞水肿，保存液的成功之处与 其它灌注液的区别在于：①不含葡萄糖，而用一种大分子量的Raffinose棉 子糖作为附加的渗透支持；②含有前列腺素E1扩张肺动脉；③氧自由基对 肺缺血灌注损伤的发生起到重要的作用，谷胱甘肽(GSH)和别嘌呤醇均可 明显减少肺缺血灌注损伤。
器官保存液的质量可直接影响供体器官的质量与移植后的效果。WXC为 一种成功的器官保存液，符合下述5条器官保存液的质量要求。
1、适当的pH值。有关保存液的pH值尚无统一标准，通常器官保存液 的Ph值约在7.0～7.4，但要考虑低温的影响，因氢离子浓度随温度而变化。 防止细胞内酸中毒是器官保存良好的先决条件，有研究证明，肝、胰用Ph 值为7.9～8.3的保存液可明显改善保存效果，肺用Ph值为7.50～7.70的保 存液可明显改善保存效果。
2、适宜的渗透浓度，高渗性可防止细胞水肿。
3、无杂质、无热原、无细菌污染，因为器官保存液是用于供体器官初 期原位灌注和随后的冷保存，在质量上应同输液制剂一样无菌、无热原。然 而在制备过程中，要经过许多步骤才能完成，这就要求生产过程中严格控制 细菌的污染，所有容器及封装材料必须清理处理。
4、性能稳定，在已消毒条件下，有效期为1～2年，如出现浑浊、结晶 析出应弃之不用。另外，有部分具有药理活性的成分、生物制剂应在灌注前 临时加入，以便保证保存液质量。
5、实用性，配制方法简便，药源供应足，价格低廉，便于推广应用。
灌洗液的配制方法如下：
按配方称取药品，用适量蒸馏水搅拌溶解，再加水至足量，取少量液体 测其pH值、渗透浓度及电解质浓度，再用垂熔玻璃滤器过滤(以滤孔大小 分号，号码愈大，孔径越小，5号以上可除菌)，滤液经灌装，放薄膜，盖 橡皮塞，压铝盖，最后高压消毒灭菌，成品抽样作细菌培养，对整批保存液 逐瓶进行澄明度检查，凡发现异物，均剔出作废，合格品才能作保存液。
具体实施方式
实施例一
在灌洗液中含有钾3.5(毫摩尔/升)，钠140(毫摩尔/升)，镁1.2(毫摩 尔/升)，氯100(毫摩尔/升)，磷酸盐30(毫摩尔/升)，硫酸盐3.5(毫摩尔/ 升)，前列腺素E1 110(毫克/升)，棉子糖30(毫摩尔/升)，低分子右旋糖 酐4030(克/升)，谷光甘肽4(毫摩尔/升)，腺苷6(毫摩尔/升)，别嘌呤 醇2(毫摩尔/升)，地塞米松8(毫克/升)。
实施例二
在灌洗液中含有钾5.0(毫摩尔/升)，钠130(毫摩尔/升)，镁1.2(毫摩 尔/升)，氯110(毫摩尔/升)，磷酸盐40(毫摩尔/升)，硫酸盐4.5(毫摩尔/ 升)，前列腺素E1 150(毫克/升)，棉子糖50(毫摩尔/升)，低分子右旋糖 酐40 20(克/升)，谷光甘肽5(毫摩尔/升)，腺苷8(毫摩尔/升)，别嘌呤 醇3(毫摩尔/升)，地塞米松10(毫克/升)。
实施例三
在灌洗液中含有钾6.0(毫摩尔/升)，钠150(毫摩尔/升)，镁2.5(毫摩 尔/升)，氯108(毫摩尔/升)，磷酸盐38(毫摩尔/升)，硫酸盐5.5(毫摩尔/ 升)，前列腺素E1 130(毫克/升)，棉子糖35(毫摩尔/升)，低分子右旋糖 酐4025(克/升)，谷光甘肽3.5(毫摩尔/升)，腺苷7(毫摩尔/升)，别嘌 呤醇1.5(毫摩尔/升)，地塞米松9(毫克/升)。
实施例四
在灌洗液中含有钾4.0(毫摩尔/升)，钠168(毫摩尔/升)，镁1.0(毫摩 尔/升)，氯103(毫摩尔/升)，磷酸盐33(毫摩尔/升)，硫酸盐4.0(毫摩尔/ 升)，前列腺素E1 140(毫克/升)，棉子糖45(毫摩尔/升)，低分子右旋糖 酐4035(克/升)，谷光甘肽4.5(毫摩尔/升)，腺苷5.5(毫摩尔/升)，别 嘌呤醇2.5(毫摩尔/升)，地塞米松6(毫克/升)。
实施例五
在灌洗液中含有钾5.5(毫摩尔/升)，钠135(毫摩尔/升)，镁1.6(毫摩 尔/升)，氯106(毫摩尔/升)，磷酸盐36(毫摩尔/升)，硫酸盐3.7(毫摩尔/ 升)，前列腺素E1 108(毫克/升)，棉子糖42(毫摩尔/升)，低分子右旋糖 酐40 38(克/升)，谷光甘肽3.2(毫摩尔/升)，腺苷6.5(毫摩尔/升)，别 嘌呤醇1.2(毫摩尔/升)，地塞米松7(毫克/升)。
实施例六
在灌洗液中含有钾3.0(毫摩尔/升)，钠140(毫摩尔/升)，镁1.2(毫 摩尔/升)，氯100(毫摩尔/升)，磷酸盐30(毫摩尔/升)，硫酸盐3.5(毫摩 尔/升)，前列腺素E1 110(毫克/升)，棉子糖30(毫摩尔/升)，低分子右旋 糖酐40 30(克/升)。
在灌洗液中含有钾3.5(毫摩尔/升)，钠140(毫摩尔/升)，镁1.2(毫摩 尔/升)，氯100(毫摩尔/升)，磷酸盐30(毫摩尔/升)，硫酸盐3.5(毫摩尔/ 升)，前列腺素E1 110(毫克/升)，棉子糖30(毫摩尔/升)，低分子右旋糖 酐4030(克/升)，谷光甘肽4(毫摩尔/升)，腺苷6(毫摩尔/升)，别嘌呤 醇2(毫摩尔/升)，地塞米松8(毫克/升)。
实施例二
在灌洗液中含有钾5.0(毫摩尔/升)，钠130(毫摩尔/升)，镁1.2(毫摩 尔/升)，氯110(毫摩尔/升)，磷酸盐40(毫摩尔/升)，硫酸盐4.5(毫摩尔/ 升)，前列腺素E1 150(毫克/升)，棉子糖50(毫摩尔/升)，低分子右旋糖 酐40 20(克/升)，谷光甘肽5(毫摩尔/升)，腺苷8(毫摩尔/升)，别嘌呤 醇3(毫摩尔/升)，地塞米松10(毫克/升)。
实施例三
在灌洗液中含有钾6.0(毫摩尔/升)，钠150(毫摩尔/升)，镁2.5(毫摩 尔/升)，氯108(毫摩尔/升)，磷酸盐38(毫摩尔/升)，硫酸盐5.5(毫摩尔/ 升)，前列腺素E1 130(毫克/升)，棉子糖35(毫摩尔/升)，低分子右旋糖 酐4025(克/升)，谷光甘肽3.5(毫摩尔/升)，腺苷7(毫摩尔/升)，别嘌 呤醇1.5(毫摩尔/升)，地塞米松9(毫克/升)。
实施例四
在灌洗液中含有钾4.0(毫摩尔/升)，钠168(毫摩尔/升)，镁1.0(毫摩 尔/升)，氯103(毫摩尔/升)，磷酸盐33(毫摩尔/升)，硫酸盐4.0(毫摩尔/ 升)，前列腺素E1 140(毫克/升)，棉子糖45(毫摩尔/升)，低分子右旋糖 酐4035(克/升)，谷光甘肽4.5(毫摩尔/升)，腺苷5.5(毫摩尔/升)，别 嘌呤醇2.5(毫摩尔/升)，地塞米松6(毫克/升)。
实施例五
在灌洗液中含有钾5.5(毫摩尔/升)，钠135(毫摩尔/升)，镁1.6(毫摩 尔/升)，氯106(毫摩尔/升)，磷酸盐36(毫摩尔/升)，硫酸盐3.7(毫摩尔/ 升)，前列腺素E1 108(毫克/升)，棉子糖42(毫摩尔/升)，低分子右旋糖 酐40 38(克/升)，谷光甘肽3.2(毫摩尔/升)，腺苷6.5(毫摩尔/升)，别 嘌呤醇1.2(毫摩尔/升)，地塞米松7(毫克/升)。
实施例六
在灌洗液中含有钾3.0(毫摩尔/升)，钠140(毫摩尔/升)，镁1.2(毫 摩尔/升)，氯100(毫摩尔/升)，磷酸盐30(毫摩尔/升)，硫酸盐3.5(毫摩 尔/升)，前列腺素E1 110(毫克/升)，棉子糖30(毫摩尔/升)，低分子右旋 糖酐40 30(克/升)。
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