本申请是1992年7月31日递交的序号为07/922，519的美国专利申请的部分继续申请，该美国专利申请的整个内容完全并入这里以作参考。

本发明涉及用于治疗和抑制胃溃疡和十二指肠溃疡的化合物和组合物，以及治疗和抑制胃溃疡和十二指肠溃疡的方法。

革兰氏阴性、螺旋、微需氧细菌Helicobacter        pylori（以前称作Campylobacter        pylori）感染是引起非自身免疫胃炎的主要原因，是引起消化道溃疡的因素之一，并且在胃癌患者中尤其普遍。

H.pylori最初由Warren（Lancet（1983）1∶1273）和Marshal（Lancet（1983）1∶1273-5）在对世界各地患者进行胃活组织检查时分离出来。

尽管对炎症的确切机制并不十分了解，但已发现H.pylori与胃粘液分泌细胞的顶部表面相结合。

由于这一附着的位点特异性，使人想到在胃和十二指肠粘液分泌细胞上存在着H.pylori的特异附着位点。为了鉴定H.pylori的特异结合位点，已进行过大量这方面的研究。

Evans等人（Infection and Immunity（1988）56∶2896-2906）报道，与NeuAc（2→6）乳糖相比H.pylori与红细胞受体的结合优先被N-乙酰基神经氨酰-α（2→3）-Gal β1→4Glc[NeuAc（2→3）-乳糖]抑制。含有NeuAc-乳糖的NeuAc（2→3）Gal异构体的唾液蛋白，即人红细胞血型糖蛋白A、胎球蛋白和人α2-巨球蛋白也抑制H.pylori结合，但其浓度（mglml）远高于所观察到的NeuAc（2→3）-乳糖浓度，而对于相应的非唾液蛋白则未观察到抑制作用。

上述研究人员进一步观察到，主要含有NeuAc（2→6）Gal异构体的NeuAc-乳糖（也称作唾液酸乳糖）未显示出结合抑制作用，从而使他们得出结论：红细胞上的受体是一含有NeuAc（2→3）Gal的唾液蛋白。尽管被Evans等人确信为H.pylori特异结合位点的NeuAc（2→3）Gal部分是一种广泛存在于自然界的结构，但由于胃肠道的独特环境而使其与H.pylori的选择性结合合理化。按照他们的观点，这是H.pylori未能进一步集群的原因。

Evans等人（Infection        and        Immunity（1989）57∶2272-2278）也观察到H.pylori与Y-1小鼠肾上腺细胞的单细胞层结合。但是，这种附着可通过用神经氨酸苷酶预处理Y-1细胞而被阻止并可被含有唾液酸乳糖的胎球蛋白阻止。

Lingwood等人（Lancet（1989）2∶238-241）已报道对胃甘油脂类物质进行了分离，而这些物质被他们发现是作为H.pylori的受体。他们是从红血细胞及猪胃和人胃的粘膜刮出物中分离出这种物质的。他们假定该物质是一种硫酸化的烷基酰基甘油脂，但并未报道该物质的实际结构。后来的研究（Lingwood        et        al.Infection        and        Immunity（1992）60∶2470-2474）证实该受体是磷脂酰乙醇胺。

Tzovelekis等人（Infection        and        Immunity（1991）59∶4252-4253）报道，胃粘蛋白抑制H.pylori与HEP-2细胞结合。他们发现，纯粘蛋白对H.pylori结合显示出最大抑制作用，而非唾液粘蛋白显示出某种程度减少的抑制作用，高碘酸盐氧化的粘蛋白则显示出最低水平的结合。根据这些观察结果，他们得出结论：唾液酸对于H.pylori和人胃粘蛋白之间的结合至少起部分作用。

因此，所有以上对结合抑制方面的研究均针对于H.pylori特异结合受体，该受体具有按2→3方式与乳糖结合（Evans等人）的N-乙酰神经氨酸（唾液酸）（Tzouvelekis等人和Evans等人）。

除了大量结合抑制方面的研究外，人们也在寻找治疗胃溃疡和十二指肠溃疡患者的方法。胶态碱式柠檬酸铋（CBS）已被成功地用于治疗胃溃疡和十二指肠溃疡这两种疾病（参见Lambert in Review of Infectious Diseases（1991）13（suppl.8）：S691-5）。已证明CBS可有效用作组胺H2拮抗剂。由于CBS能够根除H.pylori，在停止治疗后具有较低的受发率。碱式水杨酸铋（BSS）也已被发现能够抑制H.pylori。

另外还利用质子泵抑制剂omeprazole对根除H.pylori进行了研究。

Coleman等人（美国专利4，935，406）报道了一种通过服用（磷酸/硫酸）铋化糖组合物治疗由H.pylori种群引起的胃肠道疾病的方法。该方法中的糖组合物是醛糖和酮糖的单糖的简单磷酸盐和硫酸盐。

已有将羟氨苄青霉素或四环素、灭滴灵（一种抗原生动物剂）和BSS的“三联疗法”与雷尼替丁结合用于治疗H.pylori的临床试验的报道（Evans等，Ann.Internal        Med.（1991）August        15，115（4）∶266-9）。临床研究发现，与仅接受雷尼替丁相比，接受雷尼替丁和“三联疗法”的患者的溃疡愈合更迅速。

但是，利用这些治疗方法难以长期根除H.pylori。抗生素方法则存在着形成新的抗生素抗性株的危险。因此，目前还没有一种具有良好的长期根除作用的治疗H.pylori的方法。

因此，本发明的目的之一是要提供一种用于抑制和/或治疗胃溃疡和/或十二指肠溃疡的新组合物及其方法。

本发明的目的之二是要提供一种抑制H.pylori与哺乳动物组织附着的方法，包括从患者的胃和/或十二指肠消除H.pylori。

本发明的目的之三是要提供一种用于检测样品中H.pylori存在的药盒。

本发明的所有上述目的和其他目的从下面对本发明的说明中可明显看出，这些目的已通过包含以下低聚糖的组合物而达到：

或其混合物;

其中：X独立地为OH或NHAc;

Y独立地为H、氨基酸或有2-100、优选2-20个氨基酸的肽;

W、W′和W″各自独立地为H或

;

其中Z独立地为H或药物上可接受的阳离子;

P独立地为H或

其中Z的定义同上;

其中W、W′或W″中至少一个为α-N-乙酰神经氨酸部分，且其中W′和W″不同时为α-N-乙酰神经氨酸部分，条件是式Ⅱ化合物不为NAN        α（2→3）Gal        β1-4Glu或NAN        α（2→6）Gal        β1-4Glu。

现已发现，含有单独的或与H2抑制剂、抗生素和/或抗溃疡化合物结合的至少一种式Ⅰ或式Ⅱ低聚糖的组合物能有效抑制H.py-lori与胃或十二指肠粘膜结合并能有效治疗胃溃疡和十二指肠溃疡。

在整个申请文本中均使用以下缩写：“Gal        NAc”：N-乙酰半乳糖胺;“Gal”：半乳糖;“Glc”：葡萄糖;“Glc        NAc”：N-乙酰葡糖胺;“NAN”或“NeuAc”：N-乙酰神经氨酸;“Ser”：丝氨酸。

式Ⅰ低聚糖中，分子右侧糖的4-位上的OH基团代表轴向和水平向差向异构体。当4-位OH基团处于轴向位置时，分子右侧的糖为Gal或Gal        NAc残基。当4-位OH处于水平位置时，分子右侧的糖为Glc或Glc        NAc残基。因此，式Ⅰ的核心结构代表Gal        β1-3Gal、Gal        β1-3Gal        NAc、Gal1-3Glc或Gal        β1-3Glc        NAc。

本发明式Ⅰ低聚糖包含一核心，该核心的构成是X-N-乙酰神经氨酸部分通过其2-位与β-半乳糖部分的3-位或6-位相连，该β-半乳糖部分又通过其1-位与另一半乳糖、N-乙酰半乳糖胺、葡萄糖或N-乙酰葡糖胺部分的3-位相连，而后者再通过其6-位与α-N-乙酰神经氨酸的2-位相连。或者任-α-N-乙酰神经氨酸均可被H替代（但不是同时）。

在一优选实施方案中，该核心结构还包含在半乳糖、N-乙酰半乳糖胺、葡萄糖或N-乙酰葡糖胺部分的1-位与氧结合的氨基酸，从而产生如下所示的式Ⅰ低聚糖：

其中X为OH或NHAc，Y为丝氨酸或苏氨酸，W和W′各自为α-N-乙酰神经氨酸部分，W″为H，Z独立地为H或已知的药物上可接受的阳离子。

具体地说，式Ⅰ低聚糖可为

其中X、Y、W、W′、W″、Z和P如上面式Ⅰ中所定义的那样。

在其他优选的实施方案中，式Ⅰ的低聚糖选自NANα2-3Galβ1-3（NANα2-6）GalNAc，NANα2-3Galβ1-3（NANα2-6）GalNAcα1-ser，NANα2-3Galβ1-3GalNAc，NANα2-6Galβ1-3（NANα2-6）GalNAc，NANα2-6Galβ1-3（NANα2-6）GalNAcα1-ser，NANα2-6Galβ1-3GalNAc，Galβ1-3（NANα2-6）GalNAc，

NANα2-3Galβ1-3（NANα2-6）Gal，NANα2-3Galβ1-3（NANα2-6）Galα1-ser，NANα2-3Galβ1-3Gal，NANα2-6Galβ1-3（NANα2-6）Gal，NANα2-6Galβ1-3（NANα2-6）Galα1-ser，NANα2-6Galβ1-3Gal，Galβ1-3（NANα2-6）Gal，NANα2-3Galβ1-3（NANα2-6）GlcNAc，NANα2-3Galβ1-3（NANα2-6）GlcNAcα1-ser，NANα2-3Galβ1-3GlcNAc，NANα2-6Galβ1-3（NANα2-6）GlcNAc，NANα2-6Galβ1-3（NANα2-6）GlcNAcα1-ser，NANα2-6Galβ1-3GlcNAc，Galβ1-3（NANα2-6）GlcNAc，NANα2-3Galβ1-3（NANα2-6）Glc，NANα2-3Galβ1-3（NANα2-6）Glcα1-ser，NANα2-3Galβ1-3Glc，NANα2-6Galβ1-3（NANα2-6）Glc，NANα2-6Galβ1-3（NANα2-6）Glcα1-ser，NANα2-6Galβ1-3Glc，Galβ1-3（NANα2-6）Glc及其混合物。

本发明的式Ⅱ的低聚糖包括一个由α-N-乙酰神经氨酸部分组成的核心，α-N-乙酰神经氨酸部分通过其2位与β-半乳糖部分的3位或6位结合，β-半乳糖部分又通过其1位与葡萄糖或N-乙酰葡糖胺部分的4位结合，葡萄糖或N-乙酰葡糖胺部分通过其6位与α-N-乙酰神经氨酸的2位结合。另外，任何α-N-乙酰神经氨酸基团（但不是所有的基团同时）都可被H替代。然而，式Ⅱ的化合物不包括NAN        α（2→3）Gal        β1-4Glu或NAN        α（2→3）Gal        β1-4Glu。

在一个优选的实施方案中，这个核心结构进一步包括1个在葡萄糖或N-乙酰葡糖胺部分的1位上与氧结合的氨基酸，得到如下所示式Ⅱ的低聚糖：

其中X是OH或NHAc，Y是丝氨酸或苏氨酸，W和W′各自为α-N-乙酰神经氨酸部分，Z独立地为H或已知的药物上可接受的阳离子。

在其他优选的实施方案中，式Ⅰ的低聚糖选自NANα2-3Galβ1-4（NANα2-6）GlcNAc，NANα2-3Galβ1-4（NANα2-6）GlcNAcα1-ser，NANα2-3Galβ1-4GlcNAc，NANα2-6Galβ1-4（NANα2-6）GlcNAc，NANα2-6Galβ1-4（NANα2-6）GlcNAcα1-ser，NANα2-6Galβ1-4GlcNAc，Galβ1-4（NANα2-6）GlcNAc，NANα2-3Galβ1-4（NANα2-6）Glc，NANα2-3Galβ1-4（NANα2-6）Glcα1-ser，NANα2-6Galβ1-4（NANα2-6）Glc，NANα2-6Galβ1-4（NANα2-6）Glcα1-ser，Galβ1-4（NANα2-6）Glc及其混合物。

此外，对于式Ⅰ或式Ⅱ的低聚糖，基团Y可代表1个氨基酸或由2-100个氨基酸（优选2-20个氨基酸）组成的肽。值得注意的是，糖蛋白-胎球蛋白含有1个由至少500个氨基酸组成的肽。

此外，式Ⅰ或式Ⅱ的低聚糖上的任一个或所有游离羟基都可经用适宜的酰化剂处理被C1-6酰基所酰化，酰化剂例如为乙酰氯、丙酰氯、丁酰氯或乙酸酐。

存在于式Ⅰ或式Ⅱ中的α-N-乙酰神经氨酸部分可在8位上被另一α-N-乙酰神经氨酸进一步取代。因此，对于所有上述式Ⅰ和式Ⅱ的化合物，任何α-N-乙酰神经氨酸部分都可被NANα2-8NAN        α2-替代。可通过用CMP-NAN和对转变为α-N-乙酰神经氨酸特异的α-N-乙酰神经氨酸转移酶处理式Ⅰ或式Ⅱ的单α-N-乙酰神经氨酸化合物来完成这种替代。

本发明的双唾液酸化低聚糖例如为式Ⅱ的双唾液酸化化合物，即NAN        α2-8NAN        α2-3Gal        β1-4Glc和NAN        α2-8NAN        α2-6Gal        β1-4Glc。

任何已知的适宜的药物上可接受的阳离子都可与式Ⅰ或式Ⅱ的低聚糖一起使用，包括常规无毒盐的阳离子，无毒盐包括金属盐如碱金属盐（例如钠盐、钾盐等）或碱土金属盐（例如钙盐、镁盐等）、铵盐、有机碱盐（例如三甲胺盐、三乙胺盐、吡啶盐、甲基吡啶盐、二环己胺盐N，N′-二苄基乙二胺盐等）、有机酸盐（例如甲酸盐、乙酸盐、三氟乙酸盐、马来酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐、苯磺酸盐、甲苯磺酸盐等）、无机酸盐（例如盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、磷酸盐等）、与氨基酸形成的盐（例如精氨酸盐、天冬氨酸盐、谷氨酸盐等），等等。

已证实结构NAN        α2-3Gal        β1-3（NAN        α2-6）Gal        NAc是O-连接的碳水化合物，见于牛因子X（Mizvochi        et        al，J.Biol.Chem.（1977）255：3526）、牛高分子量ininogen（Endo        et        al，J.Biochem.Tokyo（1977）82：545）、人血纤维蛋白溶酶原（Hayes        et        al，J.Biol.Chem.（1979）254：8777）、免疫球蛋白（Chandraskaren        et        al，J.Biol.Chem.（1981）256：1549）、人绒毛膜促性腺激素的β-亚单体（M.Kessler        et        al，J.Biol.Chem.（1979）254：7909）、牛胎球蛋白（R.Spiro        et        al，J.Biol.Chem.（1974）249：5704）和人脱辅基脂蛋白C-Ⅲ（P.Yaith，Biochem.Biophys.Acta（1978）541∶234）。

本发明的低聚糖可用任何已知的方法制得，这样的方法包括（1）在公开的国际申请WO91/16449中所述的本发明人的方法之一，-酶促法，（2）经典的有机化学方法-合成法，或（3）天然存在的低聚糖、糖脂、或糖肽的降解。

化合物NAN α2-3Gal β1-3（NAN α2-6）Gal NAc-糖醇（其中末端Gal NAc的缩醛已被还原为伯醇）可通过碱水解和用NaBH4还原胎球蛋白制得。说明性的水解条件包括在水中，于50℃，使处于0.05M NaOH和1M NaBH4中的胎球蛋白反应16小时。

化合物NAN        α2-3Gal        β1-3（NAN        α2-6）Gal        NAc-肽可通过在水溶液中，于大约50℃，对胎球蛋白进行蛋白酶介导的降解来制取。

然而，作为这种化合物的药物上可接受的来源，胎球蛋白的水解产物因可能引起患狂犬病的牛的疾病，所以可能是不利的。尽管纯化和处理技术能排除这种病毒转移到组合物中的可能性，但酶促合成仍然是优选的。

本发明的低聚糖可与已知的质子泵抑制剂或已知的H2受体拮抗剂一起给药。有代表性的质子泵抑制剂是omeprazole，有代表性的H2受体拮抗剂包括甲腈咪胍、雷尼替丁、nizatidine和famotidine。质子泵抑制剂和H2受体拮抗剂连同本发明的低聚糖的给药量与用于已知治疗的给药量大致相同。因此，质子泵抑制剂和H2受体拮抗剂的有效剂量可通过常规实验来确定。

另外，已知的抗溃疡病化合物可与H2受体拮抗剂一起或作为H2受体拮抗剂的替代物使用。适宜的抗溃汤病药包括醋谷胺、铝配合物、ε-乙酰氨基己酸锌盐、acetoxolone、arbaprostil、benexate hydrochloride、碱式柠檬酸铋溶胶、甘珀酸、西曲酸酯、西咪替丁、enprostil、esaprazole、famotidine、ftaxidide、吉法酯、愈伤兰油烃、irsogladine、misoprostol、nazatidine、ornoprostil、γ-谷维素、pi-farnine、哌仑西平、plaunotol、雷尼替丁、rioprostil、rosaprostol、rotraxate、roxatidine acetate、sofalcone、spizofurone、硫糖铝、teprenone、trimoprostil、trithioxzine、troxipide、和佐利米定。抗溃疡病药连同本发明的低聚糖的给药量与用于已知治疗的给药量大致相同。因此，抗溃疡病药的有效剂量可通过常规实验来确定。

另外，本发明的低聚糖可与具有抗H.pylori活性的抗生素一起给药。适宜的抗生素包括灭滴灵、四环素、铋、红霉素、大环内酯、喹啉和羟氨苄青霉素。抗生素连同本发明的低聚糖的给药量与用于已知治疗的给药量大致相同。因此，抗生素的有效剂量可通过常规实验来确定。

本发明的抗H.pylori组合物含有1种或多种式Ⅰ或式Ⅱ的低聚糖以及任何适宜的液体或固体的药物上可接受的载体或赋形剂，以适合于口服或肠道给药的剂型为优选。此外，本发明的抗H.py-lori组合物最好不含热原。

抗H.pylori组合物通常以与载体混合的形式给药，载体的选择取决于给药途径，采用标准的配方。例如，本发明的化合物可以片剂的形式给药，片剂可采用已知的技术，通过将赋形剂、崩解剂或润滑剂加到本发明的有效成分粉末中而制得，赋形剂例如为淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、结晶纤维素、碳酸钙或高岭土、羟丙基纤维素、葡萄糖溶液、蔗糖溶液、水或乙醇;崩解剂例如为淀粉、琼脂、明胶粉、羧甲基纤维素钙（CMC-Ca）、羧甲基纤维素钠（CM-Na）、结晶纤维素、碳酸钙或碳酸氢钠;润滑剂例如为硬脂酸镁、硬脂酸钙、滑石、macrogoal4，000，macrogoal6，000或硬脂酸。

然后通过常规制片方法对混合物进行压模，必要时，用含有例如阿拉伯树胶、滑石、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇和/或二氧化钛的浓缩糖溶液包糖衣;用由例如聚二乙氨基乙酸乙烯醇缩醛、羟丙基甲基纤维素、羟丙基纤维素、乙基纤维素或聚乙烯吡咯烷酮组成的薄膜形成剂包薄膜衣;或用由例如邻苯二甲酸乙基纤维素、乙酸-邻苯二甲酸纤维素或邻苯二甲酸羟丙基甲基纤维素组成的薄膜形成剂包肠溶衣。

这些药物组合物可呈颗粒或细粒形式，可通过将粘合剂如淀粉、明胶、阿拉伯树胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、重质硅酸酐或轻质硅酸酐加到本发明的有效成分中，然后用常规方法捏和、粒化来制粒;或者为本发明的有效成分粉末本身;或者制成胶囊剂，可通过将赋形剂如乳糖、淀粉或结晶纤维素和/或润滑剂如硬脂酸镁、硬脂酸钙或滑石加到本发明的有效成分中，然后将混合物装入胶囊来制备。

溶液或悬浮液可通过加入本领域中常用的任何稀释剂来制备。例如，适宜的稀释剂包括水、乙醇、丙二醇、聚氧乙烯山梨糖醇、和脱水山梨糖醇酯。可将氯化钠、葡萄糖或甘油掺加到这种液体制剂中，加入量应足以制得等渗溶液。治疗组合物还可进一步含有通常的溶解助剂、缓冲剂、减痛剂、常规防腐剂和选择性的着色剂、香味剂、调味剂、甜味剂和其他药理活性剂，这样的物质是本领域中熟知的。

适宜的组合物可呈溶液、悬浮液、片剂、包衣片剂的形式或适合于释放到胃或十二指肠中的任何药物上可接受的形式。

按照本发明的优选实施方案，低聚物或抗H.pylori组合物是经肠道给需要抑制H.pylori的患者用药的，它们可抑制H.pylori结合或消除患者胃和/或十二指肠中的H.pylori菌落。

通常，适合的患者是人，但本发明的方法也适用于治疗动物，包括（但不限于）哺乳动物如牛、马、绵羊、山羊、狗、猫、啮齿动物和非人类的灵长动物、禽类如鸡、火鸡和鸭以及鱼。

组合物的适宜给药量包括能产生低聚糖的有效胃浓度的量，即1μg～10，000mg/ml/剂，优选100～1000μg/ml。当质子泵抑制剂、H2受体拮抗剂或抗溃疡病药共同给药时，制成的组合物应每天提供10-500mg（优选100-300mg）质子泵抑制剂、H2受体拮抗剂或抗溃疡病药。剂型包括片剂、胶囊剂、溶液或悬浮液等单位剂型。

在本发明的另一个实施方案中，以多价分子形式提供式Ⅰ或式Ⅱ的低聚糖。在这个实施方案中，用已知技术使式Ⅰ或式Ⅱ的低聚物的至少一种类型与一种聚合物结合以便生成一种与式Ⅰ或式Ⅱ的低聚糖的1个以上的各个分子共价连接的聚合物。聚合物的骨架应足够长以提供一种多价分子，该分子能够使得2-1，000，优选10-100，更优选20-30个式Ⅰ或式Ⅱ化合物的分子与聚合物相结合。

式Ⅰ或式Ⅱ的低聚糖最好通过式Ⅰ的半乳糖、N-乙酰半乳糖胺、葡萄糖或N-乙酰葡萄糖胺部分或式Ⅱ的葡萄糖或N-乙酰葡萄糖胺部分（当Y＝H时）的游离端基异构碳或肽（当Y＝肽时）与聚合物结合。适宜的聚合物是可与糖的端基异构碳反应的任何聚合材料，如聚赖氨酸、聚丙烯酰胺或环糊精。

例如，式Ⅰ或式Ⅱ的低聚糖可与载体结合形成珠粒，其中珠粒的表面与式Ⅰ或式Ⅱ的化合物结合。

本发明的另一个实施方案提供了一种用于检测H.pylori的药盒，该实施方案涉及本发明人的序号为07/241，012的申请（申请日为1988年9月2日）。这种药盒与用于进行ELISA的药盒类似，但使用了与固体载体结合的式Ⅰ或式Ⅱ的化合物，而不是使用通常见于ELISA药盒的与固体载体结合的抗原或抗体。式Ⅰ或式Ⅱ的化合物通过式Ⅰ的半乳糖、N-乙酰半乳糖胺、葡萄糖或N-乙酰葡萄糖胺部分或式Ⅱ的葡萄糖或N-乙酰葡萄糖胺部分（此时Y＝H）的端基异构碳和通过氨基酸或肽（当Y＝氨基酸或肽时）与聚合物载体结合，待测试的H.pylori样品与式Ⅰ或式Ⅱ的结合化合物接触。可用标准方法如标记的抗体检测结合的H.pylori。

在下列描述的示范性实施方案过程中，本发明的其他特征将变得显而易见，这些实施方案用于说明本发明，而不对其构成限制。

实施例1        四糖NAN        α2-3Gal        β1-3（NAN        α2-6）Gal        NAc的合成在β1-3半乳糖苷转移酶存在下，于40℃，将等摩尔当量的gal        NAc和UDP-gal的水溶液搅拌足够的时间以进行这两个部分的偶联。从猪的下颌腺中分离β1-3半乳糖苷转移酶。接着，将3摩尔当量的CMP-NAN边同α2-6唾液酸转移酶一起加入以生成单唾液化合物。最后在多于3当量的CMP-NAN存在下加入α2-3唾液酸转移酶以形成四糖。

实施例2        糖肽糖NAN        α2-3Gal        β1-3（NAN        α2-6）Gal        NAc        β1-丝氨酸的合成在β1-3半乳糖苷转移酶存在下，于40℃，将等摩尔当量的O-连接于丝氨酸上的gal        NAc和UDP-gal的水溶液搅拌足够的时间以进行这两个部分的偶联。从猪的下颌腺中分离β1-3半乳糖苷转移酶。接着，将3摩尔当量的CMP-NAN连同α2-6唾液酸转移酶一起加入以生成单唾液化合物。最后在多于3当量的CMP-NAN存在下加入α2-3唾液酸转移酶以形成糖肽糖。

实施例3通过将100mg实施例1的四糖与250mg H2受体拮抗剂雷尼替丁混合来制备抗螺旋杆菌（Helicobacter）组合物。然后将该混合物悬浮于水和丙二醇的混合物中。

实施例4通过将100mg实施例1的四糖与250mg质子泵抑制剂Omeprazole混合来制备抗螺旋杆菌组合物，然后将该混合物悬浮于水和丙二醇的混合物中。

实施例5通过将100mg实施例1的四糖与250mg灭滴灵、四环素和羟氨苄青霉素混合来制备抗螺旋杆菌的组合物。然后将该混合物悬浮于水和丙二醇的混合物中。

实施例6作为一种治疗方法，用实施例3的组合物治疗受H.pylori感染的患者。每日口服4次，每剂提供100μg/ml的有效胃浓度。连续治疗两周，此后的检查表明H.pylori细菌已被消灭。消灭细菌之后，用本发明的组合物进行维持治疗以防止复发。

实施例7        四糖NAN        α2-3Gal        β1-4（NAN        α2-6）Glc        NAc的合成在β1-4半乳糖苷转移酶存在下，于40℃，将等摩尔当量的glc        NAc和UDP-gal的水溶液搅拌足够的时间以进行这两个部分的偶联。从猪的下颌腺中分离β1-4半乳糖苷转移酶。接着，将3摩尔当量的CMP-NAN连同α2-6唾液酸转移酶一起加入以形成单唾液化合物。最后在多于3当量CMP-NAN存在下加入α2-3唾液酸转移酶以形成四糖。

实施例8        四糖NAN        α2-3Gal        β1-3（NAN        α2-6）Glc        NAc的合成在β1-3半乳糖苷转移酶存在下，于40℃，将等摩尔当量的glc        NAc和UDP-gal的水溶液搅拌足够的时间以进行这两个部分的偶联。从猪的下颌腺中分离β1-3半乳糖苷转移酶。接着将3摩尔当量的CMP-NAN连同α2-6唾液酸转移酶一起加入以形成单唾液化合物。最后在多于3当量的CMP-NAN存在下加入α2-3唾液酸转移酶以形成四糖。

显然，根据以上教导可对本发明做出许多改进和变动。因此，应明确的是，在所附权利要求书的范围之内，可按与本文所述不同的方式实施本发明。