本发明涉及一组新的对降解神经肽神经降压素的酶具有抑制活性 的2，3-二芳基-吡唑烷衍生物。

已发现式(1)化合物及其盐具有神经降压素降解酶抑制活性：

其中，

-S1是氢、卤素、羟基或1-3C的烷氧基

-S2是氢或卤素

-S3是氢、卤素、羟基或1-3C的烷氧基

-S4是氢、卤素或任选被羟基、1-3C的烷氧基、氨基、烷基中具 有1-3C的单-或双烷基氨基、巯基或1-3C的S-烷基取代的1-6C的烷 基

-X表示氮或碳

-当X是氮时，Y表示氮或氧，或者当X是碳时，Y是氮

-R3和R4彼此相互独立地是氢或1-3C的烷基

-当X为碳或氮时，R5是氢或可被卤素、CN、CF3、羟基、1-3C 的烷氧基、1-3C的磺酰烷基、氨基、烷基中具有1-3C的单-或双烷基 氨基取代的1-6C的烷基，当X为碳时，R5表示1-6C的烷氧基、巯基 或1-3C的S-烷基

-R’5是氢或1-3C的烷基

-R6是氢或1-3C的烷基

-R7是氢或1-3C的烷基

-R5和R6一起或R’5和R6一起可形成可被低级烷基、卤素、CN或CF3取代的3-7元环基，和R5+R’5一起可形成3-7元的环，和

-Z1，Z2和Z3表示碳原子，或者Z1是氮原子而Z2和Z3是碳原子， 或者Z1和Z3是碳原子而Z2是氮原子，或者Z1和Z2是碳原子而Z3 是氮原子，

-A是由可被卤素、CF3、1-3C的烷基或烷氧基、CN、羟基或巯 基取代的由4-10元环组成的(多)环烷基体系。

更具体地，所述化合物抑制Thimet寡肽酶EC 3.4.24.15和溶神 经素EC 3.4.24.16，这两种酶会破坏神经肽神经降压素。

由于抑制了这些酶的神经降压素降解活性，内源性神经降压素的 水平会上升，在治疗由神经降压素水平紊乱引起的疾病上起到了有益 的效果。

根据文献Biochem.J. 280，421-426和Eur.J.Biochem. 202. 269-276中描述的方法进行测试，本发明的化合物在5.0-8.0(pIC50值) 的范围内能够有效地抑制上述酶。

本发明的化合物可以用来治疗由神经降压素介导的传递紊乱引 起的病变和疾病，例如，末梢紊乱如血压调节和胃排空、神经紊乱如 帕金森病，和中枢神经系统(CNS)紊乱如焦虑、抑郁、精神病和其它 精神异常。

式(1)的化合物可以根据下面A、B、C和D四种方法中的至 少一种来制备。这四种方法的原料化合物是取代的2，3-二芳基-吡唑 烷，具有下图1中所示的结构之一：

                      图1

式(1)化合物的片段R7-Y-A可具有图2中所示基团的结构：

                      图2

图1的起始吡唑烷衍生物可以通过方案1的方法获得，方案1在

实施例5中进行阐述：

                        方案1

方法A：

可以根据化合物A23/A24的合成方法来制备表A中提及的化合 物。完成步骤i后，形成两个非对映异构体，它们在步骤iii完成后， 可以用柱色谱离析成对映体纯的非对映异构体A23和A24，参见方案 A.1。

                       方案A.1

方法B：

可以通过方案B.1中表示的合成方法来制备表B中的化合物：

                       方案B.1

方案B.1中的反应步骤i和ii分别与方案A.1中描述的反应步骤 i和ii相同。

方法C：

表C中的化合物可以根据方案C.1中描述的合成化合物C2和 C8的方法来制备：

                    方案C.1

方法D：

表D中提到的化合物可以根据方案D.1所示的合成化合物D1的 方法制备得到：

                    方案D.1

方案D.1中的反应步骤i和ii分别与方案C.1中描述的反应步骤 iii和iv相同。

现在在下面的实施例中更详细地描述根据A-D的方法来制备式 (1)的化合物以及它的多个中间体。

实施例1

步骤i(方案A.1)：

在室温和氮气气氛下，搅拌下将4克(14.5毫摩尔)的II、2.7克(14.3 毫摩尔)的N-Boc-L-丙氨酸和3.8克(18.4毫摩尔)的DCC(二环己基碳 二亚胺)加入到50毫升干燥的乙腈中，立即形成沉淀，继续搅拌过夜。 反应混合物的薄层色谱显示8字型的两点，该两点中包括两种可能的 非对映异构体。过滤除去沉淀。将约20克的二氧化硅加入到滤液中并 在真空下进行浓缩。将所得的粉末放入二氧化硅干燥柱的顶部，然后 用洗脱液进行洗脱(洗脱液：二氯甲烷/甲醇98/2)，收集含两种非对映 异构体的那部分柱并将其吸收在甲醇中。过滤该浆液，残余物再用甲 醇洗涤一次，合并甲醇部分并在真空下进行浓缩，然后将所得的残余 物溶解在二氯甲烷中，用硫酸镁进行干燥，过滤除去干燥剂，在真空 中蒸发除去溶剂，分离得到约5g(80％)粗产品。

步骤ii(方案A.1)：

搅拌下，将5克(约10毫摩尔)步骤i中获得的产品溶解在100 毫升由三氟乙酸/二氯甲烷/水(70/25/5)组成的溶液中，继续搅拌2 小时。然后将反应混合物在真空下进行浓缩，将所得的残余物溶解在 二氯甲烷中，然后将该溶液用饱和的碳酸钾水溶液进行处理并用水和 盐水进行洗涤，最后用硫酸镁进行干燥。过滤除去干燥剂并在真空中 通过蒸发除去溶剂，分离得到4克粗胺(约100％)。

步骤iii(方案A.1)：

在室温和氮气气氛下，搅拌下将0.50克(1.44毫摩尔)步骤ii 中获得的粗胺悬浮在10毫升的乙腈中，然后向其中加入0.26克(1.44 毫摩尔)的2-金刚烷基异氰酸酯，继续反应2小时。将约2克的二氧 化硅加入到反应混合物中并在真空下进行浓缩，所得的粉末放入干燥 SiO2柱的顶部，然后用洗脱液进行洗脱(洗脱液：乙酸乙酯/石油醚 1/1)，分别收集含非对映异构体的柱部分并将其吸收在甲醇中。得到 的两个悬浮液分别过滤，每种残余物分别用甲醇洗涤一次，合并每种 非对映异构体的相应甲醇部分并在真空中进行浓缩，然后将每种残余 物溶解在二氯甲烷中，用硫酸镁对两个溶液进行干燥。除去干燥剂和 在真空中除去溶剂后，得到各含一种非对映异构体的两种固体：0.16 克的A23(21％)，熔点140-3℃和0.22克的A24(29％)，熔点145-8℃。

注：

化合物A12已经制得对映体纯形式。步骤ii(方案A.1)后的中 间体分离得到对映体，然后进行步骤iii(方案A.2)。A12的(+)-对映体 是eutomer。

一种对映体                            A12

                      方案A.2

步骤ii(方案A.1)后的中间体的对映体拆分采用Chiralcel CD 柱(25×5cm2，20μ，洗脱液：己烷/乙醇4/1)完成。

表A中的化合物通过同样的方法制备：

    表A     R3，R4，R6，R7，S2，S4＝H     X，Y＝N     化合物     吡唑烷   R5   R5′     YR7A 注     熔点     A1     I   H   H     1     见附录1     A2     II   H   H     1     见附录2     A3     II   H   H     2     见附录3     A4     III   H   H     3     153-5     A5     III   H   H     4     ＞220     A6     II   H   H     5     185-8     A7     II   H   H     4     120-5     A8     II   H   H     6     130-3     A9     III   H   H     6     195-8     A10     IV   H   H     7     241-2     A11     III   H   H     7     ＞280     A12     III   H   H     8 [α]+94     164-5     A13     II   H   H     8     135-40     A14     II   H   H     9     105-10     A15     III   H   H     8     168-71     A16     I   H   H     7     208-210     A17     II   H   H     7     115-120     A18     V   H   H     7     见附录4     A19     I   H   H     8     140-5     A20     III   Me   H     8 非对映异构体     125-145     A21     III   Me   H     8     132-150     A22     I   H   H     10     见附录5     A23     II   Me   H     8 非对映异构体     140-3     A24     II   Me   H     8     145-8     A25     II   Et   H     8 非对映异构体     145-8     A26     II   Et   H     8     155-8     A27     II   nBut   H     8     122-5     A28     II   iBut   H     8     122-5     A29     II   H   H     10     见附录6     A30     VI   H   H     8     221-3     A31     X   H   H     8     208-210     A32     VIII   H   H     8     145-165     A33     II   nPr   H     8     110-130

实施例2

步骤iii(方案B.1)：

将0.20克(0.67毫摩尔)三光气溶解在10毫升干燥二氯甲烷中， 在45分钟内，向其中加入由0.70克(2.0毫摩尔)吡唑烷衍生物和0.42 毫升(2.4毫摩尔)二异丙基乙基胺组成的溶液，继续搅拌反应混合物。 接着在5分钟内向反应混合物中加入0.33克(2.0毫摩尔)甲基-2-金 刚烷胺和0.42毫升(2.4毫摩尔)二异丙基乙基胺在5毫升干燥二氯 甲烷中的溶液。使反应混合物反应过夜，然后在真空下蒸发除去溶剂。 将残余物溶解在乙酸乙酯中，所得溶液分别用5％的碳酸氢纳水溶液 和盐水进行处理，分离有机层并用硫酸镁进行干燥。过滤除去干燥剂 并在真空下除去溶剂，得到一种油状物，将该油状物用快速柱色谱 (SiO2，洗脱液：二氯甲烷/甲醇99/1)进行分离，收集含产品部分，然 后在真空下除去洗脱液，得到一种油状物，该油状物在二异丙醚溶剂 中搅拌下结晶。过滤并在空气中干燥该晶体，得到0.69克(64％)的 固体B2(熔点184-6℃)。

注：所用的甲基-2-金刚烷胺可以通过标准的还原氨化反应，用 NaBH(OAc)3作为还原剂，由2-金刚烷酮和盐酸甲胺反应很容易地制 备。

表B中的化合物用同样的方法制备：

注：在B3(R6＝甲基)的情况下，步骤ii(方案B.1)后所需的中间体 可以类似于方案A.1的步骤i或ii制备。

实施例3

步骤i(方案C.1)：

将16克(160毫摩尔)的琥珀酸酐溶解在于燥的乙醚中，然后在 搅拌下向琥珀酸酐溶液中滴加溶解在乙醚中的44克(160毫摩尔)的 II。滴加完毕后，将反应混合物加热到回流温度并继续反应过夜。将 形成的沉淀过滤，并将残余物用乙醚洗涤两次，在空气中进行干燥， 得到45.6克(75％)所需的中间体。

步骤ii(方案C.1)：

在氮气气氛下，将4.5克(12毫摩尔)步骤i中得到的中间体和 7.9克(61毫摩尔，5.1当量)的二异丙基乙基胺溶解在50毫升干燥 的二氯甲烷中，搅拌下将所得的溶液冷却至4℃，然后向其中加入0.90 克(7.0毫摩尔)1-羟基-7-氮杂-苯并三唑和4.20克(15毫摩尔)2-氯 -1，3-二甲基咪唑啉鎓六氟磷酸盐。之后向反应混合物中加入2.19克(15 毫摩尔)2-氨基-金刚烷，并在室温下反应1小时。

将约4克的二氧化硅加入到反应混合物中并在真空下进行浓缩，将 所得的粉末加入到干燥柱(SiO2)的顶部，然后用洗脱液进行洗脱(洗 脱液：乙酸乙酯/石油醚1/1)。收集含产品的那部分柱并将其吸收在 甲醇中，将所得浆液进行过滤，残余物用甲醇洗涤一次。合并甲醇溶 液并将其在真空下进行浓缩，然后将残余物溶解在二氯甲烷中，所得 的溶液用硫酸镁进行干燥。除去干燥剂并在真空下除去溶剂后，得到 2.0克固体C2(32％)，熔点为192-5℃。

步骤iii(方案C.1)：

在搅拌和氮气气氛下，将6.0克(60毫摩尔)琥珀酸酐悬浮在35 毫升甲苯中，然后向其中加入2.07克(18毫摩尔)N-羟基-丁二酰亚 胺、0.73克(6毫摩尔)的4-二甲基氨基吡啶、13.3克(18毫摩尔) 干燥的叔丁醇和1.82克(18毫摩尔)三乙胺。将反应混合物加热到回 流温度并反应过夜。冷却反应混合物并向其内加入乙酸乙酯，所得溶 液分别用10％的柠檬酸水溶液和盐水进行处理，然后将有机部分用硫 酸镁进行干燥，除去干燥剂并在真空下除去溶剂后，得到棕色的油状 物。将该油状物在乙醚/己烷中进行结晶，得到4.4克(42％)所需的 单酯。

步骤iv(方案C.1)：

该步反应按照文献“Synthesis(2000)p1369-71”中描述的步骤进行。 在-78℃下，在四氢呋喃中，通过与二异丙基氨化锂和甲基碘反应，琥 珀酸单叔丁酯在2-位被甲基化。2-甲基-琥珀酸单叔丁酯的分离产率达 到60％。

步骤v(方案C.1)：

在搅拌下，将1.8克(9.8毫摩尔)的2-甲基-琥珀酸单叔丁酯(步 骤iv中得到)溶解在45毫升干燥的二氯甲烷中，然后将该溶液冷却 至4℃。向该溶液中加入0.9克(6.4毫摩尔)1-羟基-7-氮杂-苯并三唑 和4.0克(15毫摩尔)2-氯-1，3-二甲基咪唑啉鎓六氟磷酸盐，然后在 温度不升高的条件下加入4.1克(14毫摩尔)III，在室温下反应过夜。 将约3克硅胶(SiO2)加入到反应混合物中并在真空下进行浓缩，所得 粉末加入到干燥柱(SiO2)的顶部，然后用洗脱液进行洗脱(洗脱液： 乙酸乙酯/石油醚1/4)，收集含产品的那部分柱并将其吸收在甲醇中， 过滤所得浆液，残余物再用甲醇洗涤一次。合并甲醇部分并在真空下 进行浓缩，然后将得到的残余物溶解在二氯甲烷中，所得的溶液用硫 酸镁进行干燥，过滤除去干燥剂并在真空下蒸发除去溶剂，分离得到 3克(66％)所需的中间体。

步骤vi(方案C.1)：

按以下方法进行叔丁酯中间体(步骤v中得到)的水解反应：将3 克(6.4毫摩尔)的叔丁酯溶解在30毫升干燥的二氯甲烷中，然后向 其内滴加10毫升的三氟乙酸，2小时后结束反应。反应混合物在真空 下进行浓缩，将残余物溶解在少量的乙醚中并将其放在短柱(干燥的 SiO2)的顶部，然后用乙醚进行洗脱。将含产品的洗脱液在真空下进 行浓缩，残余物在石油醚中搅拌过夜，过滤收集晶体，晶体在空气中 进行干燥，得到2.1克(80％)所需的中间体。

步骤vii(方案C.1)：

在氮气气氛下，将2.17克(5.3毫摩尔)步骤vi中制备的中间体和 4.7毫升(27毫摩尔，5.1当量)二异丙基乙基胺溶解在25毫升干燥 的二氯甲烷中，在搅拌下将所得的溶液冷却至4℃。然后加入0.42克 (3.1毫摩尔)1-羟基-7-氮杂-苯并三唑和1.85克(6.6毫摩尔)2-氯-1，3- 二甲基咪唑啉鎓六氟磷酸盐，接着向反应混合物中加入1.0克(6.6摩 尔)2-氨基-金刚烷并在室温下反应1小时。

将约4克的二氧化硅加入到反应混合物中并在真空下进行浓缩， 将所得粉末加入到干燥柱(SiO2)的顶部，然后用洗脱液进行洗脱(洗 脱液：乙酸乙酯/石油醚1/2)，分别收集含非对映异构外消旋体的那 部分柱并将其吸收在甲醇中。将所得的两种浆液分别进行过滤，每种 残余物用甲醇洗涤一次。合并每一种非对映异构外消旋体的相应甲醇 部分并在真空下进行浓缩，然后将每种残余物分别溶解在二氯甲烷中 并用硫酸镁进行干燥。除去干燥剂并在真空下除去溶剂后，获得两种 固体，每种固体含有一种可能的非对映异构外消旋体，分别为1.08克 的C8(37％)活性外消旋体，熔点为238-40℃，和1.09克(37％) 另外一种药理学非活性的外消旋体，熔点为125-30℃(没在表C中列 出)。

表C的化合物通过类似的方法得到： 表C R3，R4，R5，R5′，S2，S4＝H X＝C，Y＝N 化合物     吡唑烷   R6   R7     YR7A     熔点 C1     III   H   H     8     210-2 C2     II   H   H     8     90-4 C3     II   H   H     7     230-2 C4     I   H   H     8     160-4 C5     I   H   H     7     198-202 C6     VII   H   H     7     208-210 C7     VII   H   H     8     215-7 C8     III   Me   H     8     238-240 C9     IX   H   H     8     147-150

实施例4

步骤iii(方案D.1)：

在氮气气氛下，将0.92克(4.9毫摩尔)步骤ii中得到的中间体 和4.4毫升(25毫摩尔，5.1当量)二异丙基乙基胺溶解在15毫升干 燥的二氯甲烷中，在搅拌下将所得的溶液冷却至4℃。然后加入0.45 克(3.3毫摩尔)1-羟基-7-氮杂-苯并三唑和2.1克(7.5毫摩尔)2-氯 -1，3-二甲基咪唑啉鎓六氟磷酸盐，接着向反应混合物中加入1.08克 (7.2毫摩尔)2-氨基-金刚烷并在室温下反应1小时。该反应混合物 用于下面步骤iv中。

步骤iv(方案D.1)：

搅拌下向步骤iii的反应混合物中加入45毫升干燥的二氯甲烷和11 毫升(143毫摩尔)三氟乙酸，并继续搅拌24小时。反应混合物在真 空下进行浓缩，残余物溶解在少量的乙醚中，然后将其放入短柱的顶 部(干燥的SiO2)，用乙醚进行洗脱。含产品的洗脱液在真空下进行 浓缩，得到0.87克(67％，2步)所需的酸中间体。

步骤v(方案D.1)：

在搅拌下，将0.87克(3.28毫摩尔)甲基-琥珀酸单酰胺(步骤 iv)溶解在15毫升干燥的二氯甲烷中，并将溶液冷却至4℃。然后向 该溶液中加入0.3克(2.2毫摩尔)1-羟基-7-氮杂-苯并三唑和1.40克 (5.0毫摩尔)2-氯-1，3-二甲基咪唑啉鎓六氟磷酸盐接着在温度不升高 的条件下加入1.33克(4.80毫摩尔)II，在室温下反应过夜。将约3 克硅胶(SiO2)加入到反应混合物中并在真空下进行浓缩，所得粉末加 入到干燥柱(SiO2)的顶部，然后用洗脱液进行洗脱(洗脱液：乙酸乙 酯/石油醚1/1)。

分别收集含非对映异构外消旋体的那部分柱并将其吸收在甲醇 中。将所得的两种浆液分别进行过滤，每种残余物用甲醇洗涤一次。合 并每一种非对映异构外消旋体的相应甲醇部分并在真空下进行浓缩， 接着将每种残余物分别溶解在二氯甲烷中并用硫酸镁干燥两个溶液， 除去干燥剂并在真空下除去溶剂后获得两种固体，每种固体含有一种 可能的非对映异构外消旋体，分别为0.31克(18％)非活性外消旋体 (没在表D中列出)，熔融行为：在90-5℃熔融，在130℃固化，在 160-5℃重新熔融；和0.40克(23％)的活性外消旋体D1，熔融行为： 在80-2℃熔融，在100℃固化，在125-8℃重新熔融。

表D的化合物通过类似的方法得到： 表D R3，R4，R5′，S2，S4＝H X＝CY＝N 化合物     吡唑烷 R5   R6     YR7A 注     熔点 D1     II Me   H     8     80-2/125-8 D2     II nBut   H     8 非对映异构体     80-1/150-5 D3     II nBut   H     8     210-2 D4     II iBut   H     8     155-8 D5     II Et   H     8 非对映异构体     90-2/125-8 D6     II Et   H     8     90-2/155-7

实施例5

在上述实施例1-4中作为起始原料使用的2，3-二芳基-吡唑烷I到 X制备如下：

步骤i(方案1)：

将16.9毫升乙酸和2.3毫升水的混合物进行冷却(冰/水)，然后 向其内小心加入6.8毫升浓硫酸。在氮气气氛和剧烈搅拌的条件下， 向该冷却的溶液中分批加入13.3克(82毫摩尔)2-氟苯基肼。然后保 持温度在25℃以下，向得到的溶液中分批加入由10.0克(82毫摩尔) 2-氟苯乙烯和2.46克(82毫摩尔)低聚甲醛组成的混合物。反应可能 累积(accumulate)一段时间。室温下剧烈搅拌过夜。在冷却条件下，加 入50毫升的水，然后用乙醚萃取二次。用50％的氢氧化钠水溶液使 剩余的水相部分成为碱性，然后用乙醚萃取两次。乙醚部分分别用水 洗3次和盐水洗1次，最后用硫酸镁进行干燥。过滤除去干燥剂并在 真空下除去溶剂，得到16克(75％)粗浆状油，该油没有进行纯化， 应在氮气气氛和-20℃下进行保存以避免吡咯烷核的氧化。