NF-κB(核因子κB)家族由转录因子的Rel家族的均和杂二聚体组 成。这些转录因子的主要作用是诱导和协调广谱致炎基因包括细胞因 子、趋化因子、干扰素、MHC蛋白、生长因子和细胞粘着分子的表达(其 综述参见Verma等，Genes Dev.9：2723-35，1995；Siebenlist 等，Ann.Rev.Cell.Biol.10：405-455，1994；Bauerle和Henkel， Ann.Rev.Immunol.，12：141-179，1994；Barnes和Karin，New Engl.J.Med.，336：1066-1071，1997)。
最常见的Rel家族的二聚体复合物由p50 NFκB和p65 RelA组成 (Baeuerle和Baltimore，Cell 53：211-217，1988；Baeuerle和 Baltimore，Genes Dev.3：1689-1698，1989)。在休眠条件下，NF-κB 被抑制蛋白的IκB家族的成员保留在细胞质内(Beg等，Genes Dev.，7： 2064-2070，1993；Gilmore和Morin，Trends Genet.9：427-433， 1993；Haskil等，Cell 65：1281-1289，1991)。但是，当细胞被各 种细胞因子或其它外界刺激激活后，IκB蛋白就会在两个关键的丝氨酸 残基上磷酸化(Traenckner等，EMBO J.，14：2876，1995)然后靶向 于遍在蛋白化作用和蛋白体介导的降解(Chen，Z.J.等，Genes and Dev.9：1586-1597，1995；Scherer，D.C.等，Proc.Natl.Acad. Sci.USA 92：11259-11263，1996；Alkalay，I.等，Proc.Natl.Acad. Sci.USA 92：10599-10603，1995)。然后，所释放的NF-κB可以转 位到核上并激活基因转录(Beg等，Genes Dev.，6：1899-1913， 1992)。
已证实有多种外界刺激可以激活NF-κB(Baeuerle，P.A.，和 Baichwal，V.R.，Adv.Immunol.，65：111-136，1997)。尽管大部 分NF-κB活化剂均可以引起IκB的磷酸化，但证实有多种途径可以导 致该关键的事件。受体介导的NF-κB激活依赖于特异性的受体和衔接 子/信号分子(例如，TRADD，RIP，TRAF，MyD88)以及相关的激酶(IRAK， NIK)之间的相互作用(Song等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 94： 9792-9796，1997；Natoli等，JBC 272：26079-26082，1997)。环 境的刺激例如紫外光和γ-辐射似乎可以通过另一种不太确定的机制刺 激NF-κB。
最近的出版物部分阐明了NF-κB的激活。该研究确定了三种调节 特异性IκB/NF-κB相互作用的关键酶：NF-κB诱导激酶(NIK)(Boldin 等，Cell 85：803-815，1996)，IκB激酶-1(IKK-1)(Didonato等， Nature 388：548，1997；Regnier等，Cell 90：373 1997)和IκB 激酶-2(IKK-2)(Woronicz等，Science 278：866，997：Zandi等， Cell 91：243，1997)。
NIK似乎代表了由肿瘤坏死因子和白介素-1激发的NF-κB信号级 联反应的最常见的介体，并且是IκB磷酸化的有效的诱导物。但NIK 不能直接磷酸化IκB。
IKK-1和IKK-2被认为是处于紧邻NIK的下游，并且能够直接磷 酸化所有三种IκB亚型。IKK-1和IKK-2在氨基酸水平上有52％的同源 性，但具有类似的底物特异性；但酶的活性似乎是不同的：IKK-2的 效力比IKK-1强几倍。与诱变研究相结合的表达数据表明IKK-1和 IKK-2可以通过其C-末端亮氨酸拉链基元形成均和杂二聚体，更倾向 于形成杂二聚体的形式(Mercurio等，Mol.Cell Biol.，19：1526， 1999；Zandi等，Science；281：13601998；Lee等，Proc.Natl. Acad.Sci.USA 95：9319，1998)。
NIK、IKK-1和IKK-2均是丝氨酸/苏氨酸激酶。最近的数据表明， 酪氨酸激酶在调节NF-κB的激活中也起重要作用。许多研究小组证实， TNF-α诱导的NF-κB激活可以通过蛋白酪氨酸磷酸酶(PTPs)和酪氨酸 激酶进行调节(Amer等，JBC 273：29417-29423，1998；Hu等，JBC 273：33561-33565，1998；Kaekawa等，Biochem.J.337：179-184， 1999；Singh等，JBC 27131049-31054，1996)。这些酶的作用机制 似乎是调节IκB的磷酸化状态。例如，PTP1B和未确定的酪氨酸激酶 似乎可以直接控制IκB-α上的赖氨酸残基(K42)的磷酸化，而这对相邻 的丝氨酸残基作为IKK磷酸化靶点的可能性有关键性的影响。
许多研究小组证实，IKK-1和IKK-2与其它蛋白、包括IKAP(Cohen 等，Nature 395：292-296，1998；Rothwarf等，Nature 395：297-300， 1998)、MEKK-1、推定的MAP激酶磷酸酶(Lee等，Proc.Natl.Acad. Sci.USA 95：9319-9324，1998)以及NIK和IκB一起构成了“信号 传导体(signalsome)”结构的一部分。现在有数据表明，虽然IKK-1 和IKK-2均与NIK有关，但它们会不同地被激活，因此可能代表了激 活NF-κB的一系列信号的一个重要的集合点。重要的是，已发现MEKK-1 (推定的信号传导体的成分之一以及紫外光、LPS诱导的信号分子和小 GTPases的靶点)可以激活IKK-2但不能激活IKK-1。同样，IKK-1的 NIK磷酸化会引起IKK-1活性的剧烈增加但对IKK-2仅有很小的影响 (其综述参见Mercurio，F.，和Manning，A.M.，Current Opinion in Cell Biology，11：226-232，1999)。
抑制NF-κB的激活有可能在治疗炎性疾病中有广泛的应用。
WO 98/02430和EP 853083公开了多种4-吡啶基衍生物，EP 908456 公开了多种3-吡唑基衍生物。
DE 19725450公开了多种3-吡啶基和5-嘧啶基衍生物。
WO 99/46244、WO 98/54116和EP 202538公开了一系列据说具 有生物学活性的取代的噻吩基化合物。
本发明的公开
本发明提供了式(I)化合物

其中：
A表示含有一个或两个彼此独立地选自氧、氮或硫的杂原子的5- 元杂芳族环；
R1表示苯基或含有1至3个彼此独立地选自氧、氮或硫的杂原子 的5-至7-元杂芳族环；所述苯基或杂芳族环选择性地被一个或多个彼 此独立地选自下列的取代基所取代：卤素、氰基、硝基、-NR3R4、 -CONR5R6、-COOR7、-NR8COR9、-SR10、-S(O)mR10、-SO2NR5R6、-NR8SO2R10、 C1-C6烷基、三氟甲基、-(CH2)nR11、-O(CH2)nR11或-OR12；
R2表示氢、卤素、氰基、硝基、-NR13R14、、-CONR15R16、-COOR17、 -NR18COR19、-S(O)mR20、-SO2NR15R16、-NR18SO2R20、C1-C2烷基、三氟甲基、 C2-C3链烯基、C2-C3链炔基、三氟甲氧基、C1-C2烷氧基或C1-C2链烷酰 基；
X表示氧或硫；
R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10和R12彼此独立地表示氢原子或C1-C6 烷基；
R11表示NR21R22，其中R21和R22彼此独立地是氢或选择性地被C1-C4 烷氧基取代的C1-C6烷基；或者R21和R22与它们所连接的氮原子合在一 起形成5-或6-元饱和的环，该环选择性地含有O、S或NR23基团，其 中R23是氢或C1-C6烷基；或者R11表示OR24，其中R24表示C1-C6烷基；
R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19和R20彼此独立地表示氢原子或C1-C2 烷基；
m表示整数0、1或2；
n表示整数2、3或4；
其光学异构体、外消旋体和互变异构体及其可药用盐或溶剂化物：
条件是：当A表示噻吩、呋喃或吡咯时，R1不是4-吡啶基或3-吡 唑基；并且
当A表示噁唑、噻唑或咪唑时，R1不是3-吡啶基或5-嘧啶基。
某些式(I)化合物能够以立体异构体的形式存在。应当理解，本发 明包括式(I)化合物的所有几何和光学异构体及其混合物，包括外消旋 体。互变异构体及其混合物也构成了本发明的一个方面。
优选X表示氧。
式(I)化合物及其可药用盐、对映体和外消旋体的有利之处在于它 们是酶IKK2的抑制剂。
本发明还提供了制备式(I)化合物或其可药用盐、对映体或外消旋 体的方法。
根据本发明，还提供了式(I)化合物或其可药用盐、对映体或外消 旋体作为药物的用途。
本发明的另一方面提供了式(I)化合物或其可药用盐、对映体或外 消旋体在生产用于治疗或预防其中抑制IKK2活性是有益的疾病或病症 的药物中的用途。
本发明的另一方面提供了式(I)化合物或其可药用盐、对映体或外 消旋体在生产用于治疗或预防炎性疾病的药物中的用途。
根据本发明，还提供了治疗或降低其中抑制IKK2活性是有益的疾 病或病症危险的方法，该方法包括，向患有或易患所述疾病或病症的 患者施用治疗有效量的式(I)化合物或其可药用盐、对映体或外消旋 体。
更具体地讲，本发明还提供了对炎性疾病进行治疗或降低其发病 危险的方法，该方法包括，向患有或易患所述疾病的患者施用治疗有 效量的式(I)化合物或其可药用盐、对映体或外消旋体。
在式(I)中，基团A是含有一个或两个彼此独立地选自氧、氮或硫 的杂原子的5-元杂芳族环。优选A如下式(Ia)中所示被取代，其中B 和D选自CR2、S、O和NR25，其中R25是氢或C1-C6烷基：

优选的A基团包括噻吩、呋喃、吡咯、咪唑、噻唑和噁唑。特别优 选环A表示噻吩。
适宜的基团R1是苯基或含有1至3个彼此独立地选自氧、氮或硫 杂原子的5-至7-元杂芳族环；所述苯基或杂芳族环选择性地被一个或 多个彼此独立地选自下列的取代基所取代：卤素、氰基、硝基、-NR3R4、 -CONR5R6、-COOR7、-NR8COR9、-SR10、-S(O)mR10、-SO2NR5R6、-NR8SO2R10、 C1-C6烷基、三氟甲基、-(CH2)nR11、-O(CH2)nR11或-OR12。优选的取代基 是卤素、氰基、-NR3R4、-SO2R10、三氟甲基、-O(CH2)nR11或-OR12。在一 个优选的实施方案中，R1表示选择性取代的苯基。在另一个优选的实 施方案中，R1表示选择性取代的含有一个或两个彼此独立地选自氧、 氮或硫杂原子的5-或6-元杂芳族环。
当R11是NR21R22并且R21和R22与它们所连接的氮原子合在一起形成 5-或6-元饱和环时，所述环的优选的例子包括吗啉、吡咯烷和哌啶环。 当R11是NR21R22并且R21和R22是烷基时，这些烷基优选是甲基。
特别优选的式(I)化合物是其中R1这选择性取代的苯基的化合 物。更优选R1为苯基或被卤素、甲氧基、羟基、OCH2CH2NMe2、 OCH2CH2CH2NMe2、吗啉基乙氧基、吡咯烷基乙氧基和哌啶基乙氧基取代 的苯基。
优选式(I)中的基团R2表示H、卤素或C1-C2烷基。更优选基团R2 表示H或甲基。甚至更优选式(I)中的基团R2表示H。
特别优选的本发明化合物包括以下列举的那些：
3-[(氨基羰基)氨基]-5-苯基-2-噻吩甲酰胺；
3-[(氨基羰基)氨基]-5-(3-氯苯基)-2-噻吩甲酰胺；
3-[(氨基羰基)氨基]-5-(4-氟苯基)-2-噻吩甲酰胺；
3-[(氨基羰基)氨基]-5-(4-氯苯基)-2-噻吩甲酰胺；
3-[(氨基羰基)氨基]-5-(4-异丁基苯基)-2-噻吩甲酰胺；
3-[(氨基羰基)氨基]-5-(2-噻吩基)-2-噻吩甲酰胺；
3-[(氨基羰基)氨基]-5-(4-甲氧基苯基)-2-噻吩甲酰胺；
3-[(氨基羰基)氨基]-5-(3-噻吩基)-2-噻吩甲酰胺；
3-[(氨基羰基)氨基]-5-(3-羟基苯基)-2-噻吩甲酰胺；
3-[(氨基羰基)氨基]-5-(2-氯苯基)-2-噻吩甲酰胺；
3-[(氨基羰基)氨基]-5-(2-甲氧基苯基)-2-噻吩甲酰胺；
3-[(氨基羰基)氨基]-5-{2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苯基}-2- 噻吩甲酰胺；
3-[(氨基羰基)氨基]-5-{4-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苯基}-2- 噻吩甲酰胺；
3-[(氨基羰基)氨基]-5-(3-甲氧基苯基)-2-噻吩甲酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-5-苯基-3-噻吩甲酰胺；
3-[(氨基羰基)氨基]-5-{4-[2-(1-吗啉基)乙氧基]苯基)-2-噻 吩甲酰胺；
3-[(氨基羰基)氨基]-5-{4-[2-(1-吡咯烷基)乙氧基]苯基}-2- 噻吩甲酰胺；
3-[(氨基羰基)氨基]-5-{4-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯基}-2-噻 吩甲酰胺；
3-[(氨基羰基)氨基]-5-{4-[3-(二甲基氨基)丙氧基]苯基}-2- 噻吩甲酰胺；
3-[(氨基羰基)氨基]-5-{3-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苯基}-2- 噻吩甲酰胺；
3-[(氨基羰基)氨基]-5-{3-[2-(1-吗啉基)乙氧基]苯基)-2-噻 吩甲酰胺；
3-[(氨基羰基)氨基]-5-{3-[2-(1-吡咯烷基)乙氧基]苯基}-2- 噻吩甲酰胺；
3-[(氨基羰基)氨基]-5-{3-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯基}-2-噻 吩甲酰胺；
3-[(氨基羰基)氨基]-5-{3-[3-(二甲基氨基)丙氧基]苯基}-2- 噻吩甲酰胺；
3-[(氨基羰基)氨基]-5-{2-[2-(1-吗啉基)乙氧基]苯基}-2-噻 吩甲酰胺；
3-[(氨基羰基)氨基]-5-{2-[2-(1-吡咯烷基)乙氧基]苯基}-2- 噻吩甲酰胺；
3-[(氨基羰基)氨基]-5-{2-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯基}-2-噻 吩甲酰胺；
3-[(氨基羰基)氨基]-5-{2-[3-(二甲基氨基)丙氧基]苯基}-2- 噻吩甲酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(4-氯苯基)-3-噻吩甲酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(4-甲基苯基)-3-噻吩甲酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-4-乙基-5-苯基-3-噻吩甲酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(4-甲氧基苯基)-3-噻吩甲酰 胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(4-氟苯基)-3-噻吩甲酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(3-氟苯基)-3-噻吩甲酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(3-甲氧基苯基)-3-噻吩甲酰 胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(3-氯-4-甲氧基苯基)-3-噻吩 甲酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(2-氯苯基)-3-噻吩甲酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(3-三氟甲基苯基)-3-噻吩甲酰 胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(3-甲基-4-甲氧基苯基)-3-噻 吩甲酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(3，5-二甲氧基苯基)-3-噻吩甲 酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(2，3-二甲氧基苯基)-3-噻吩甲 酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(4-异丙基苯基)-3-噻吩甲酰 胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(3，4，5-三甲氧基苯基)-3-噻吩 甲酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(2-吡啶基)-3-噻吩甲酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-5-[2-(5-甲氧基吡啶基)]-4-甲基-3-噻吩 甲酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(4-嘧啶基)-3-噻吩甲酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(2-吡嗪基)-3-噻吩甲酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(3，4-二氯苯基)-3-噻吩甲酰 胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(4-氰基苯基)-3-噻吩甲酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(4-羟基苯基)-3-噻吩甲酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(4-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯 基)-3-噻吩甲酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(4-[2-(二乙基氨基)乙氧基]苯 基)-3-噻吩甲酰胺；
2-[氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(2-呋喃基)-3-噻吩甲酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-4-三氟甲基-5-苯基-3-噻吩甲酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(2-(4-甲基噻唑基))-3-噻吩甲 酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-苯基-3-噻吩甲酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(3-甲基-异噁唑-5-基)-3-噻吩 甲酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(4-氰基苯基)-3-噻吩甲酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(4-三氟甲基苯基)-3-噻吩甲酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(2，4-二氟苯基)-3-噻吩甲酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(2-吡啶基)-3-噻吩甲酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(3-吡啶基)-3-噻吩甲酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-5-[5-(2-甲氧基吡啶基)]-3-噻吩甲酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-5-[5-(2，4-二甲氧基嘧啶基)]-3-噻吩甲 酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(4-羟基苯基)-3-噻吩甲酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(4-氯苯基)-3-噻吩甲酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(4-甲磺酰基苯基)-3-噻吩甲酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(2-(N-叔丁氧羰基)吡咯基)-3-噻吩甲 酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(2-(5-氰基噻吩基))-3-噻吩甲酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(3，5-二甲基-异噁唑-4-基)-3-噻吩甲酰 胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(3-呋喃基)-3-噻吩甲酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(2-吡咯基)-3-噻吩甲酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(5-嘧啶基)-3-噻吩甲酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(2-(5-氯噻吩基))-3-噻吩甲酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-5-[2-(5-三氟甲基吡啶基)]-3-噻吩甲酰 胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-5-[2-(5-溴吡啶基)]-3-噻吩甲酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(2-(5-氰基呋喃基))-3-噻吩甲酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(4-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯基)-3-噻 吩甲酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(4-[2-(1-(2，2，6，6-四甲基)哌啶基)乙 氧基]苯基)-3-噻吩甲酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(4-(噻唑-4-基-甲氧基)苯基)-3-噻吩 甲酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(4-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苯基)-3- 噻吩甲酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(4-[2-(二乙基氨基)乙氧基]苯基)-3- 噻吩甲酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(4-[2-(1-吗啉基)乙氧基]苯基)-3-噻 吩甲酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(2-呋喃基)-3-噻吩甲酰胺；
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(2-(5-甲基呋喃基))-3-噻吩甲酰胺；
5-[(氨基羰基)氨基]-2-(3，5-二氯苯基)-1，3-噁唑-4-甲酰胺；
5-[(氨基羰基)氨基]-2-(4-三氟甲基苯基)-1，3-噁唑-4-甲酰胺；
2-[(氨基硫代羰基)氨基-5-苯基-3-噻吩甲酰胺； 及其可药用盐和溶剂化物。
若无另外说明，术语“C1-C6烷基”是指含有1至6个碳原子的直 链或支链烷基基团。所述基团的例子包括甲基、乙基、正丙基、异丙 基、正丁基、异丁基和叔丁基。术语“C1-C2烷基”可以进行类似的解 释。
若无另外说明，术语“C2-C3链烯基”是指有至少一个碳碳双键的 含有2或3个碳原子的直链或支链烷基。所述基团的例子包括乙烯基 和丙烯基。
若无另外说明，术语“C2-C3链炔基”是指有一个碳碳叁键的含有 2或3个碳原子的直链或支链烷基。所述基团的例子包括乙炔基和丙炔 基。
若无另外说明，术语“C1-C4烷氧基”是指含有1至4个碳原子的 直链或支链烷氧基。所述基团的例子包括甲氧基、乙氧基和异丙氧基。 术语“C1-C2烷氧基”可以进行类似的解释。
若无另外说明，术语“C1-C2链烷酰基”是指甲酰基或乙酰基。
若无另外说明，术语“卤素”是指氟、氯、溴和碘。
含有1至3个彼此独立地选自氧、氮或硫的杂原子的5-至7-元杂 芳族环的例子包括呋喃、噻吩、吡咯、噁唑、异噁唑、噻唑、异噻唑、 咪唑、吡唑、三唑、吡啶、哒嗪、嘧啶和吡嗪。
本发明还提供了制备式(I)化合物或其可药用盐、对映体或外消旋 体的方法，该方法包括：
(a)将式(II)化合物：

其中A、R1和R2如式(I)中所定义，与异氰酸酯(X＝O)或异硫氰酸酯 (X＝S)反应；或
(b)将式(III)化合物与式(IV)化合物反应
R1-金属
 (III)            (IV)
其中A、X、R1和R2如式(I)中所定义，LG表示离去基；或
(c)将式(V)化合物与式(VI)化合物反应
R1-LG
 (V)              (VI)
其中A、X、R1和R2如式(I)中所定义，LG表示离去基；
以及在需要时将形成的式(I)化合物或其另一种盐转化成其可药用盐； 或将形成的式(I)化合物转化成另一种式(I)化合物；并且在需要时将 形成的式(I)化合物转化成其光学异构体。
在方法(a)中，适宜的异氰酸酯试剂包括三甲基硅烷基异氰酸酯、 三甲基硅烷基异硫氰酸酯、氯磺酰基异氰酸酯、三氯乙酰基异氰酸酯 和异氰酸钠。与三甲基硅烷基异氰酸酯或三甲基硅烷基异硫氰酸酯的 反应可以在溶剂例如二氯甲烷/二甲基甲酰胺中、在适当升高的温度下 例如反应混合物的回流温度下进行。与氯磺酰基异氰酸酯的反应可以 在溶剂例如甲苯中在室温下进行。与异氰酸钠的反应可以在适宜的溶 剂系统例如含水乙酸中在室温下进行。与三氯乙酰基异氰酸酯的反应 可以在适宜的溶剂系统例如乙腈中在室温下进行，然后将混合物用氨 处理得到通式(I)的化合物。
在方法(b)和(c)中，将式(III)和(IV)或式(V)和(VI)的化合物在 过渡金属例如钯或镍的配合物的催化下反应。在式(III)和(VI)化合物 中，在适宜的条件下，“金属”可以是金属或半金属，例如镁、锌、 铜、锡、硅、锆、铝或硼。适宜的离去基包括碘、溴、氯、三氟甲磺 酸根或膦酸根。
本领域技术人员可以理解，在本发明的方法中，在原料试剂或中 间体化合物中的某些功能基例如羟基或氨基可能需要用保护基进行保 护。因此，式(I)化合物的制备可能在适宜的阶段涉及一种或多种保护 基的加入和脱除。
功能基的保护和脱保护详细记载于“Protective Groups in Organic Chemistry”，J.W.F.McOmie编，Plenum Press (1973) 和“Protective Groups in Organic Synthesis”，第2版，T.W.Greene &P.G.M.Wuts，Wiley-Interscience(1991)。
本发明包括盐形式、特别是酸加成盐形式的式(I)化合物。适宜的 盐包括与有机酸和无机酸形成的盐。所述的酸加成盐通常是可药用 的，但不可药用的盐可用于制备和纯化所述的化合物。因此，优选的 盐包括由盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、柠檬酸、酒石酸、乳酸、丙酮 酸、乙酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、甲磺酸和苯磺酸形成的盐。
式(I)化合物的盐可以通过将游离碱或其盐、对映体或外消旋体与 一或多当量适宜的酸反应形成。反应可以在不能溶解盐的溶剂或介质 中进行，或在可以溶解盐的溶剂例如水、二氧六环、乙醇、四氢呋喃 或乙醚或溶剂的混合物中进行，这些溶剂可以通过真空或冷冻干燥除 去。反应还可以是复分解方法或者可以在离子交换树脂上进行。
式(II)化合物可以通过文献[例如，J.Het.Chem.36，333(1999)] 中描述的常规化学方法制备或通过将式(VII)化合物与氨反应进行制 备：

其中A、R1和R2如式(I)中所定义，L表示离去基。适宜的基团L包括 卤素，特别是氯。
其中L是卤素的式(VII)化合物可以从相应的式(VIII)化合物通 过用卤化试剂例如亚硫酰氯处理进行制备：

其中A、R1和R2如式(I)中所定义。
式(III)、(IV)、(V)、(VI)和(VIII)化合物可以购买到或者可以 用本文中描述的常规化学方法制备。
某些新的中间体化合物构成了本发明的另一方面。
式(I)化合物具有药物活性、特别是IKK2酶抑制剂活性，可用于 在人或非人类的动物中治疗(治疗性或预防性的)抑制IKK2是有益的 病症/疾病。所述病症/疾病的例子包括炎性疾病或存在炎症成分的疾 病。具体的疾病包括炎性关节炎，包括类风湿性关节炎、骨关节炎、 脊椎炎、Reiter综合征、牛皮癣性关节炎、狼疮和骨吸收疾病；多发 性硬化、炎性肠疾病，包括节段性回肠炎；哮喘、慢性阻塞性肺疾病、 肺气肿、鼻炎、重症肌无力、Grave病、同种移植物排斥、牛皮癣、皮 炎、过敏性疾病、免疫综合征、恶病质、ARDS、中毒性休克、心血管 疾病、心衰、心肌梗塞、动脉粥样硬化、再灌注损伤、AIDS和癌症。
因此，本发明提供了以上所定义的式(I)化合物或其可药用盐或溶 剂化物用于治疗。
另一方面，本发明提供了以上所定义的式(I)化合物或其可药用盐 或溶剂化物在生产用于治疗的药物中的用途。
另一方面，本发明提供了以上所定义的式(I)化合物或其可药用盐 或溶剂化物在生产用于治疗调节IKK2酶活性有益的疾病或病症的药物 中的用途。
在本说明书中，术语“治疗”还包括“预防”，除非有具体的相 反指示。
预防是指对患有所述疾病或病症的前期事件或被认为是发病的危 险性增加的人进行治疗。有发生某种疾病或病症的危险性的人通常包 括有该疾病或病症的家族史的人或通过基因检测或筛分确定易于发生 该疾病或病症的人。
本发明还提供了治疗IKK2介导的疾病的方法，该方法包括向患者 施用治疗有效量的以上所定义的式(I)化合物或其可药用盐或溶剂化 物。
本发明还提供了在患有或易患炎性疾病、特别是哮喘、类风湿性 关节炎或多发性硬化的患者中治疗所述疾病的方法，该方法包括向患 者施用治疗有效量的以上所定义的式(I)化合物或其可药用盐或溶剂 化物。
对于上述治疗应用，给药剂量会随着所采用的化合物、给药方式、 治疗的需要以及所治疗的病症而改变。
式(I)化合物及其可药用盐和溶剂化物可以单独使用，但通常以含 有式(I)化合物/盐/溶剂化物(活性成分)以及可药用辅剂、稀释剂或载 体的药物组合物的形式给药。根据给药方式，药物组合物优选含有0.05 至99％w(重量％)、更优选0.05至80％w、仍更优选0.10至70％w、甚 至更优选0.10至50％w的活性成分，所有百分比均以整个组合物重量 计。
本发明还提供了含有以上所定义的式(I)化合物或其可药用盐或 溶剂化物以及可药用辅剂、稀释剂或载体的药物组合物。
本发明还提供了制备本发明的药物组合物的方法，该方法包括， 将以上所定义的式(I)化合物或其可药用盐或溶剂化物与可药用辅 剂、稀释剂或载体混合。
可将药物组合物以溶液、混悬液、七氟烷烃气雾剂和干粉制剂的 形式局部给药(例如向肺和/或气管或皮肤给药)；或进行全身性给药， 例如，以片剂、胶囊、糖浆、散剂或颗粒剂的形式口服给药，或以溶 液或混悬液的形式通过胃肠外给药，或通过皮下给药或以栓剂的形式 通过直肠给药或经皮给药。选择和制备适宜药物制剂的常规方法记载 于例如“Pharmaceuticals-The Science of Doseage Form Designs”， M.E.Aulton，Churchill Livingstone，1988。
通过以下实施例举例说明本发明，但本发明并不受这些实施例的 限定：
                        实施例1
3-[(氨基羰基)氨基]-5-苯基-2-噻吩甲酰胺
将3-氨基-5-苯基-2-噻吩甲酰胺(0.5g)、三甲基硅烷基异氰酸酯 (3mL)、二氯甲烷(15mL)和二甲基甲酰胺(3mL)加热回流3天。将反应 混合物冷却并滤出形成的固体，依次用甲醇和乙醚洗涤得到标题的脲 (0.39g)。
m.p.＞300℃。
1H NMR(DMSO-d6)10.06(1H，s)，8.25(1H，s)，7.62(2H，d)， 7.50-7.37(5H，m)，6.63(2H，s)。
                        实施例2
3-[(氨基羰基)氨基]-5-(3-氯装基)-2-噻吩甲酰胺
a)3-氨基-5-(3-氯苯基)-2-噻吩甲酸甲酯
将三氯氧磷(6.7mL)加入到用冰冷却下的二甲基甲酰胺(11mL) 中，保持内温低于25℃。20分钟后，分批加入(3-氯苯基)乙酮(5g)， 保持内温低于30℃。将反应混合物加热至50℃，然后小心地用羟胺盐 酸盐(10g)处理。将反应混合物室温搅拌20分钟，然后加入水(50mL)。 再经过30分钟后，将反应混合物用乙酸乙酯萃取3次。将合并的萃取 液用盐水洗涤，干燥(MgSO4)然后蒸发得到油。将该油溶于甲醇(50mL) 然后用巯基乙酸甲酯(2.7mL)和甲醇钠(7.3mL，25％的甲醇溶液)处 理。回流1小时后，将冷却的反应混合物浓缩至三分之一的体积然后 加入水。将反应混合物用乙酸乙酯萃取3次。将合并的萃取液干燥 (MgSO4)，蒸除溶剂并将残余物进行硅胶色谱，用二氯甲烷/异己烷混 合物洗脱得到得到小标题的酯(2.0g)。
m.p.105-6℃。
MS(EI)267(M)+。
1H NMR(DMSO-d6)7.68(1H，s)；7.60(1H，m)；7.48(2H，m)；7.02 (1H，s)；6.60(2H，s)；3.74(3H，s)。
b)3-氨基-5-(3-氯苯基)-2-噻吩甲酸
将3-氨基-5-(3-氯苯基)-2-噻吩甲酸甲酯(1.0g)、2M氢氧化钠 (2mL)和甲醇(10mL)于70℃加热2天。蒸除甲醇并将残余物用2M盐酸 酸化。萃取到乙酸乙酯中，然后干燥(MgSO4)并蒸除溶剂得到小标题的 酸(0.8g)。
MS(APCI)252(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)7.62(1H，d)；7.60(1H，m)；7.43(2H，m)；7.02 (1H，s)。
c)3-氨基-5-(3-氯苯基)-2-噻吩甲酰胺
将3-氨基-5-(3-氯苯基)-2-噻吩甲酸(0.8g)和亚硫酰氯(20mL) 加热回流1小时。冷却后，蒸除过量的亚硫酰氯并通过与甲苯共沸除 去最后的痕量亚硫酰氯。将残余物溶于乙腈(50mL)并加入氨(d 0.88， 10mL)。搅拌1小时后，蒸除溶剂并将残余物进行硅胶色谱，用乙酸乙 酯/二氯甲烷混合物洗脱。用乙醚研制得到小标题的酰胺(0.48g)。
m.p.164-5℃
MS(APCI)253(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)7.62(1H，d)；7.55(1H，dd)；7.45(2H，m)； 7.02(1H，s)；6.98(2H，s)；6.50(2H，s)。
d)3-[(氨基羰基)氨基]-5-(3-氯苯基)-2-噻吩甲酰胺
通过实施例1的方法从3-氨基-5-(3-氯苯基)-2-噻吩甲酰胺和三 甲基硅烷基异氰酸酯制得。
m.p.＞300℃。
MS(APCI)253(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)10.03(1H，s)；8.30(1H，s)；7.62(1H，d)； 7.60-7.40(4H，m)；7.30-7.00(1H，m)；6.70(2H，s)。
                       实施例3
3-[(氨基羰基)氨基]-5-(4-氟苯基)-2-噻吩甲酰胺
将异氰酸钠(1.08g)分批加入到搅拌的3-氨基-5-(4-氟苯基)-2- 噻吩甲酰胺(3.2g)在乙酸(150mL)和水(90mL)的悬浮液中。20小时 后，滤出固体并用水、甲醇和乙醚洗涤。用甲醇/二甲亚砜重结晶得到 标题的脲(0.5g)，为1∶1二甲亚砜溶剂化物。
m.p.＞320℃。
MS(APCI)278(M-H)+。
1H NMR(DMSO-d6)10.07(1H，s)；8.22(1H，s)；7.67(2H，t)； 7.40(2H，s)；7.29(2H，t)；6.65(2H，s)。
                     实施例3a
3-[(氨基羰基)氨基]-5-(4-氯苯基)-2-噻吩甲酰胺
通过实施例3的方法从3-氨基-5-(4-氯苯基)-2-噻吩甲酰胺制 备。
MS(ES)296(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)11.03(1H，s)，8.2(1H，s)，7.6(2H，d)，7.5 (2H，d)，7.4(2H，s)，6.8(2H，s)。
                     实施例3b
3-[(氨基羰基)氨基]-5-(4-异丁基苯基)-2-噻吩甲酰胺
通过实施例3的方法从3-氨基-5-(4-异丁基苯基)-2-噻吩甲酰胺 制备。
MS(ES)318(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)11.03(1H，s)，8.2(1H，s)，7.5(2H，m)，7.4 (2H，s)，7.2(2H，m)，6.6(2H，s)，2.4(1H，m)，1.8(2H，m)， 0.8(6H，m)。
                        实施例3c
3-[(氨基羰基)氨基]-5-(2-噻吩基)-2-噻吩甲酰胺
通过实施例3的方法从3-氨基-5-(2-噻吩基)-2-噻吩甲酰胺制 备。
MS(ES)266(M-H)-。
1H NMR(DMSO-d6)10.03(1H，s)，8.05(1H，s)，7.6(1H，d)，7.4 (3H，m)，7.1(1H，t)，6.6(2H，s)。
                        实施例4
3-[(氨基羰基)氨基]-5-(4-甲氧基苯基)-2-噻吩甲酰胺
通过实施例1的方法从3-氨基-5-(4-甲氧基苯基)-2-噻吩甲酰胺 和三甲基硅烷基异氰酸酯制备。
m.p.＞300℃。
MS(APCI)292(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)10.06(1H，s)；8.12(1H，s)；7.55(2H，d)； 7.37(2H，s)；7.03(2H，d)；6.61(2H，s)；3.80(3H，s)。
                     实施例5
3-[(氨基羰基)氨基]-5-(3-噻吩基)-2-噻吩甲酰胺
通过实施例1的方法从3-氨基-5-(3-噻吩基)-2-噻吩甲酰胺和三 甲基硅烷基异氰酸酯制备。
1H NMR(DMSO-d6)10.0(1H，s)，8.05(1H，s)，7.8(1H，d)，7.65 (1H，m)，7.4(3H，m)，6.6(2H，s)。
                    实施例6
3-[(氨基羰基)氨基]-5-(3-羟基苯基)-2-噻吩甲酰胺
将3-氨基-5-(3-甲氧基苯基)-2-噻吩甲酰胺(0.5g)、三甲基硅烷 基异氰酸酯(2mL)、二甲基甲酰胺(2mL)和二氯甲烷加热回流3天。冷 却后，滤出固体，悬浮在二氯甲烷(100mL)中并用三溴化硼(5mL，1M 的二氯甲烷溶液)处理。3天后，加入甲醇(50mL)。1小时后，蒸除溶 剂并将残余物用2M盐酸研磨。滤出标题的脲(0.35g)。
m.p.＞300℃。
MS(APCI)278(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)10.05(1H，s)；9.71(1H，s)；8.19(1H，s)； 7.41(2H，m)；7.26(1H，t)；7.03(2H，m)；6.79(1H，dd)；6.62 (2H，s)。
                         实施例7
3-[(氨基羰基)氨基]-5-(2-氯苯基)-2-噻吩甲酰胺
a)3-氨基-5-(2-氯苯基)-2-噻吩甲酸
通过实施例2(b)的方法从3-氨基-5-(2-氯苯基)-2-噻吩甲酸甲 酯制备。
MS(APCI)252(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)7.60(2H，m)；7.40(2H，m)；6.92(1H，s)。
b)3-氨基-5-(2-氯苯基)-2-噻吩甲酰胺
通过实施例2(c)的方法从3-氨基-5-(2-氯苯基)-2-噻吩甲酸制 备。
m.p.87-89℃。
MS(APCI)253(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)7.60(2H，m)；7.40(2H，m)；7.00(2H，s)；6.90 (1H，s)；6.42(2H，s)。
c)3-[(氨基羰基)氨基]-5-(2-氯苯基)-2-噻吩甲酰胺
通过实施例1的方法从3-氨基-5-(2-氯苯基)-2-噻吩甲酰胺和三 甲基硅烷基异氰酸酯制备。
m.p.＞300℃。
MS(APCI)296(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)7.34(2H，s)；6.80(2H，m)；6.70(2H，m)；6.52 (4H，m)。
                        实施例8
3-[(氨基羰基)氨基]-5-(2-甲氧基苯基)-2-噻吩甲酰胺
a)3-氨基-5-(2-甲氧基苯基)-2-噻吩甲酸甲酯
通过实施例2(a)的方法从(2-甲氧基苯基)乙酮制备。
m.p.119-20℃。
MS(APCI)264(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)7.62(1H，dd)；7.40(1H，t)；7.18(1H，d)； 7.05(1H，s)；7.02(1H，t)；6.45(2H，s)；3.95(3H，s)；3.75 (3H，s)。
b)3-氨基-5-(2-甲氧基苯基)-2-噻吩甲酸
通过实施例2(b)的方法从3-氨基-5-(2-甲氧基苯基)-2-噻吩甲 酸甲酯制备并直接用于步骤(c)。
c)3-氨基-5-(2-甲氧基苯基)-2-噻吩甲酰胺
通过实施例2(c)的方法从3-氨基-5-(2-甲氧基苯基)-2-噻吩甲 酸制备并直接用于步骤(d)。
d)3-[(氨基羰基)氨基]-5-(2-甲氧基苯基)-2-噻吩甲酰胺
通过实施例1的方法从3-氨基-5-(2-甲氧基苯基)-2-噻吩甲酰胺 和三甲基硅烷基异氰酸酯制备。
m.p.＞300℃。
1H NMR(DMSO-d6)10.01(1H，s)；8.33(1H，s)；7.62(1H，dd)； 7.40-7.00(5H，m)；6.57(2H，s)；3.90(3H，s)。
                         实施例9
3-[(氨基羰基)氨基]-5-{2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苯基}-2-噻吩 甲酰胺
a)3-[(氨基羰基)氨基]-5-(2-羟基苯基)-2-噻吩甲酰胺
将3-[(氨基羰基)氨基]-5-(2-甲氧基苯基)-2-噻吩甲酰胺 (0.1g)、三溴化硼(2ml，1M的二氯甲烷溶液)和二氯甲烷(10mL)室温 搅拌16小时。加入甲醇(5mL)，1小时后蒸除溶剂。加入2M盐酸 (10mL)，搅拌1小时后，滤出苯酚并直接用于步骤(b)。
b)3-[(氨基羰基)氨基]-5-{2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苯基}-2-噻 吩甲酰胺
将苯酚(0.05g)、碳酸钾(0.05g)和(2-氯乙基)二甲基胺盐酸盐 (0.03g)的二甲基甲酰胺(2mL)溶液于80℃搅拌24小时。将冷却的反 应液倒入乙酸乙酯和盐水中。分出水层并用乙酸乙酯洗涤两次。将合 并的有机萃取液用盐水洗涤，干燥(MgSO4)然后蒸除溶剂。进行硅胶色 谱，用二氯甲烷/甲醇混合物洗脱得到标题化合物(6mg)。
m.p.180℃。
MS(APCI)349(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)10.00(1H，s)；8.40(1H，s)；7.62(1H，dd)； 7.38(3H，m)；7.20(1H，d)；7.05(1H，t)；6.60(2H，s)；4.20 (2H，t)；2.80(2H，t)；2.50(6H，s)。
                         实施例10
3-[(氨基羰基)氨基]-5-{4-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苯基}-2-噻吩 甲酰胺
a)3-[(氨基羰基)氨基]-5-(4-羟基苯基)-2-噻吩甲酰胺
通过实施例6的方法从3-氨基-5-(4-甲氧基苯基)-2-噻吩甲酰胺 制备并直接用于步骤(b)。
b)3-[(氨基羰基)氨基]-5-{4-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苯基}-2-噻 吩甲酰胺
通过实施例9(b)的方法从3-[(氨基羰基)氨基]-5-(4-羟基苯 基)-2-噻吩甲酰胺制备。
m.p.＞300℃。
MS(APCI)349(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)10.06(1H，s)；8.12(1H，s)；7.53(2H，d)； 7.40(2H，s)；7.00(2H，d)；6.60(2H，s)；4.10(2H，t)；2.60 (2H，t)；2.20(6H，s)。
                       实施例11
3-[(氨基羰基)氨基]-5-(3-甲氧基苯基)-2-噻吩甲酰胺
a)3-氨基-5-(3-甲氧基苯基)-2-噻吩甲酸甲酯
通过实施例2(a)的方法从(3-甲氧基苯基)乙酮制备。
m.p.81-2℃。
MS (APCI)264(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)7.40(1H，t)；7.20(1H，d)；7.15(1H，m)；7.00 (2H，m)；6.60(2H，s)；3.80(3H，s)；3.70(3H，s)。
b)3-氨基-5-(3-甲氧基苯基)-2-噻吩甲酸
通过实施例2(b)的方法从3-氨基-5-(3-甲氧基苯基)-2-噻吩甲 酸甲酯制备并直接用于步骤(c)。
c)3-氨基-5-(3-甲氧基苯基)-2-噻吩甲酰胺
通过实施例2(c)的方法从3-氨基-5-(3-甲氧基苯基)-2-噻吩甲 酸制备。
m.p.101-3℃。
MS(APCI)249(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)7.35(1H，t)；7.20(1H，d)；7.10(1H，m)； 7.00-6.90(4H，m)；6.42(2H，s)；3.80(3H，s)。
d)3-[(氨基羰基)氨基]-5-(3-甲氧基苯基)-2-噻吩甲酰胺
通过实施例1的方法从3-氨基-5-(3-甲氧基苯基)-2-噻吩甲酰胺 和三甲基硅烷基异氰酸酯制备。
m.p.105-6℃。
MS (EI)267(M)+。
1H NMR(DMSO-d6)10.05(1H，s)；8.23(1H，s)，7.43(2H，s)； 7.39(1H，t)；7.19(1H，d)；7.10(1H，s)；6.98(1H，d)；6.62 (2H，s)；3.82(3H，s)。
                         实施例12
2-[(氨基羰基)氨基]-5-苯基-3-噻吩甲酰胺
将氯磺酰基异氰酸酯(0.081mL)加入到于0℃下搅拌的2-氨基-5- 苯基-3-噻吩甲酰胺(0.2g)的甲苯(10mL)悬浮液中。室温搅拌16小时 后，蒸除溶剂并将残余物溶于乙腈(20mL)。加入10％碳酸氢钠溶液(2mL) 并将混合物搅拌1小时。用2M盐酸酸化后，将溶液用乙酸乙酯萃取3 次。将合并的萃取液干燥(MgSO4)然后蒸除溶剂。进行硅胶色谱，用甲 醇/二氯甲烷混合物洗脱得到标题的脲(0.027g)。
m.p.395℃。
MS (APCI)262(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)11.01(1H，s)；7.73(1H，s)；7.69(1H，s)； 7.58(1H，s)；7.54(1H，s)；7.40(2H，t)；7.35-7.20(2H，m)； 7.00(2H，s)。
原料2-氨基-5-苯基-3-噻吩甲酰胺按照如下描述制备：
将苯乙醛(7.2g)、硫(1.92g)、氰基乙酰胺(5.1g)和三乙胺 (4.53mL)的二甲基甲酰胺(45mL)溶液室温搅拌1小时。将形成的溶液 加入水(300mL)中，滤出固体沉淀并用水洗涤。将干燥的固体用乙醚研 磨然后收集(5.5g)。
MS (ES)219(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)7.55(1H，s)，7.4(2H，m)，7.35(5H，m)，7.1 (1H，m)。
                         实施例13
3-[(氨基羰基)氨基]-5-{4-[2-(1-吗啉基)乙氧基]苯基]-2-噻吩甲 酰胺
通过实施例9(b)的方法用实施例10(a)的产物和N-(2-氯乙基)吗 啉制备。
MS(EI)390(M)+。
                         实施例14
3-[(氨基羰基)氨基]-5-{4-[2-(1-吡咯烷基)乙氧基]苯基}-2-噻吩 甲酰胺
通过实施例9(b)的方法用实施例10(a)的产物和N-(2-氯乙基)吡 咯烷制备。
MS(EI)374(M)+。
                         实施例15
3-[(氨基羰基)氨基]-5-{4-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯基}-2-噻吩甲 酰胺
通过实施例9(b)的方法用实施例10(a)的产物和N-(2-氯乙基)哌 啶制备。
MS(EI)388(M)+。
                         实施例16
3-[(氨基羰基)氨基]-5-{4-[3-(二甲基氨基)丙氧基]苯基}-2-噻吩 甲酰胺
通过实施例9(b)的方法用实施例10(a)的产物和N-(3-氯丙基)二 甲基胺制备。
MS(EI)362(M)+。
                         实施例17
3-[(氨基羰基)氨基]-5-{3-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苯基}-2-噻吩 甲酰胺
通过实施例9(b)的方法用实施例6的产物和N-(2-氯乙基)二甲基 胺制备。
MS(EI)348(M)+。
                         实施例18
3-[(氨基羰基)氨基]-5-{3-[2-(1-吗啉基)乙氧基]苯基}-2-噻吩甲 酰胺
通过实施例9(b)的方法用实施例6的产物和N-(2-氯乙基)吗啉制 备。
MS(EI)390(M)+。
                            实施例19
3-[(氨基羰基)氨基]-5-{3-[2-(1-吡咯烷基)乙氧基]苯基}-2-噻吩 甲酰胺
通过实施例9(b)的方法用实施例6的产物和N-(2-氯乙基)吡咯烷 制备。
MS(EI)374(M)+。
                            实施例20
3-[(氨基羰基)氨基]-5-{3-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯基}-2-噻吩甲 酰胺
通过实施例9(b)的方法用实施例6的产物和N-(2-氯乙基)哌啶制 备。
MS(EI)388(M)+。
                            实施例21
3-[(氨基羰基)氨基]-5-{3-3-(二甲基氨基)丙氧基]苯基}-2-噻吩 甲酰胺
通过实施例9(b)的方法用实施例6的产物和N-(3-氯丙基)二甲基 胺制备。
MS(EI)362(M)+。
                            实施例22
3-[(氨基羰基)氨基]-5-{2-[2-(1-吗啉基)乙氧基]苯基}-2-噻吩甲 酰胺
通过实施例9(b)的方法但使用N-(2-氯乙基)吗啉进行制备。
MS(APCI)391(M+H)+。
                            实施例23
3-(氨基羰基)氨基]-5-[2-[2-(1-吡咯烷基)乙氧基]苯基}-2-噻吩甲 酰胺
通过实施例9(b)的方法但使用N-(2-氯乙基)吡咯烷进行制备。
MS(APCI)375(M+H)+。
                       实施例24
3-[(氨基羰基)氨基]-5-{2-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯基}-2-噻吩甲 酰胺
通过实施例9(b)的方法但使用N-(2-氯乙基)哌啶进行制备。
MS(APCI)389(M+H)+。
                       实施例25
3-[(氨基羰基)氨基]-5-[2-[3-(二甲基氨基)丙氧基]苯基}-2-噻吩 甲酰胺
通过实施例9(b)的方法但使用N-(3-氯丙基)二甲基胺进行制 备。
MS(APCI)363(M+H)+。
                       实施例26
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(4-氯苯基)-3-噻吩甲酰胺
a)2-氨基-4-甲基-5-(4-氯苯基)-3-噻吩甲酰胺
将(4-氯苯基)丙酮(1.7g)、氰基乙酰胺(0.84g)、硫(0.36g)和吗 啉(1mL)的乙醇(5mL)溶液于55℃下搅拌加热6小时。将反应混合物冷 却并滤除少量的不溶物，然后加入水(150mL)中。滤出析出的固体，用 水洗涤然后干燥。然后产物用乙醚研磨然后收集(1.0g)。
MS(EI)266(M)+。
1H NMR(DMSO-d6)7.4(2H，d)，7.3(2H，d)，6.9(2H，s)，6.8 (2H，s)，2.2(3H，s)。
b)2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(4-氯苯基)-3-噻吩甲酰胺
将2-氨基-4-甲基-5-(4-氯苯基)-3-噻吩甲酰胺(0.44g)悬浮在 乙腈(25mL)中并在10分钟内在搅拌下滴加三氯乙酰基异氰酸酯 (0.2mL)。于室温下继续搅拌3小时，然后加入2M氨的甲醇溶液(10mL) 并继续搅拌2小时。蒸除溶剂并将残余物用水处理。滤出形成的固体 并用水洗涤。将粗产物进行硅胶色谱，用二氯甲烷/甲醇混合物洗脱。 用乙醚研磨得到标题的脲(0.1g)。
MS(ES)310(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)10.05(1H，s)，7.4(2H，d)，7.35(2H，d)，7.25 (2H，m)，6.8(2H，s)，2.25(3H，s)。
                        实施例27
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(4-甲基苯基)-3-噻吩甲酰胺
通过实施例26的方法用(4-甲基苯基)丙酮制备。
MS(ES)290(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)10.04(1H，m)，7.2(6H，m)，6.7(2H，m)，2.3 (3H，s)，2.25(3H，s)。
                        实施例28
2-[(氨基羰基)氨基]-4-乙基-5-苯基-3-噻吩甲酰胺
通过实施例26的方法用1-苯基-2-丁酮制备。
MS(ES)290(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)9.6(1H，m)，7.2(7H，m)，6.6(2H，m)，2.7 (2H，m)，1.0(3H，t)。
                        实施例29
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(4-甲氧基苯基)-3-噻吩甲酰胺
通过实施例26的方法用(4-甲氧基苯基)丙酮制备。
MS(ES)306(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)10.04(1H，s)，7.8(1H，m)，7.25(3H，m)，7.0 (2H，m)，6.75(2H，m)，3.8(3H，s)，2.2(3H，s)。
                        实施例30
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(4-氟苯基)-3-噻吩甲酰胺
通过实施例26的方法用(4-氟苯基)丙酮制备。 MS(ES)294(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)10.05(1H，s)，8.3(1H，m)7.8(1H，m)，7.35 (2H，m)，7.2(2H，m)，6.8(2H，m)，2.2(3H，s)。
                      实施例31
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(3-氟苯基)-3-噻吩甲酰胺
通过实施例26的方法用(3-氟苯基)丙酮制备。
MS(ES)294(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)10.0(1H，s)，7.4(3H，m)，7.2(3H，m)，6.8 (2H，s)，2.25(3H，s)。
                      实施例32
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(3-甲氧基苯基)-3-噻吩甲酰胺
通过实施例26的方法用(3-甲氧基苯基)丙酮制备。
MS(ES)306(M+H)+。
                      实施例33
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(3-氯-4-甲氧基苯基)-3-噻吩甲酰 胺
通过实施例26的方法用(3-氯-4-甲氧基苯基)丙酮制备。
MS(ES)340/342(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)7.25(5H，m)，6.8(2H，s)，3.9(3H，s)，2.2 (3H，s)。
                     实施例34
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(2-氯苯基)-3-噻吩甲酰胺
通过实施例26的方法用(2-氯苯基)丙酮制备。
MS(ES)310/312(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)10.22(1H，s)，7.6(1H，m)，7.4(3H，m)，7.2 (2H，m)，6.8(2H，s)，2.05(3H，s)。
                     实施例35
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(3-三氟甲基苯基)-3-噻吩甲酰胺
通过实施例26的方法用(3-三氟甲基苯基)丙酮制备。
MS(ES)344(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)7.65(3H，m)，7.6(1H，s)，7.4(2H，m)，7.2 (2H，m)，6.8(2H，s)，2.25(3H，s)。
                        实施例36
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(3-基-4-甲氧基苯基)-3-噻吩甲 酰胺
通过实施例26的方法用(3-甲基-4-甲氧基苯基)丙酮制备。
MS(ES)320(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)10.04(1H，m)，7.2(1H，m)，7.1(3H，m)，6.95 (1H，d)，6.7(2H，s)，3.8(3H，s)，2.2(3H，s)，2.15(3H，s)。
                        实施例37
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(3，5-二甲氧基苯基)-3-噻吩甲酰胺
通过实施例26的方法用(3，5-二甲氧基苯基)丙酮制备。
MS(ES)336(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)6.7(2H，m)，6.4(3H，s)，3.8(6H，s)，2.25 (3H，s)。
                        实施例38
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(2，3-二甲氧基苯基)-3-噻吩甲酰胺
通过实施例26的方法用(2，3-二甲氧基苯基)丙酮制备。
MS(ES)336(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)10.16(1H，m)，7.2(1H，m)，7.05(3H，m)，6.8 (1H，m)，6.7(2H，m)，3.8(3H，s)，3.5(3H，s)，2.1(3H，s)。
                        实施例39
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(4-异丙基苯基)-3-噻吩甲酰胺
通过实施例26的方法用(4-异丙基苯基)丙酮制备。
MS(ES)316(M-H)-。
1H NMR(DMSO-d6)7.25(4H，s)，7.25(2H，m)，6.7(2H，m)，2.9 (1H，m)，2.25(3H，s)，1.2(6H，d)。
                        实施例40
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(3，4，5-三甲氧基苯基)-3-噻吩甲酰 胺
通过实施例26的方法用(3，4，5-三甲氧基苯基)丙酮制备。
MS(ES)364(M-H)-。
1H NMR(DMSO-d6)6.7(2H，m)，6.6(2H，s)，3.8(6H，s)，3.7 (3H，s)，2.3(3H，s)。
                        实施例41
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(4-吡啶基)-3-噻吩甲酰胺
通过实施例26的方法用(4-吡啶基)丙酮制备。
MS(ES)275(M-H)-。
1H NMR(DMSO-d6)8.55(2H，m)，7.2(4H，m)，7.1(2H，m)，2.35 (3H，s)。
                        实施例42
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(2-吡啶基)-3-噻吩甲酰胺
通过实施例26的方法用(2-吡啶基)丙酮制备。
MS(ES)275(M-H)-。
1H NMR(DMSO-d6)9.9(1H，s)，8.5(1H，m)，7.8(1H，m)，7.5 (1H，m)，7.4(2H，m)，7.2(2H，m)，6.7(2H，m)。
a)(2-吡啶基)丙酮
将2-甲基吡啶(2g)溶于四氢呋喃(30mL)然后将该溶液冷却至-75 ℃。滴加丁基锂(14.73ml，1.6M的己烷溶液)并将该混合物搅拌2小 时。滴加二甲基乙酰胺(1.87mL)，然后将反应液升温至室温并继续搅 拌2小时。加入水(8.6mL)和36％盐酸(1.3mL)并在继续搅拌30分钟后 加入乙酸乙酯。将分出的溶剂相用盐水洗涤然后干燥(MgSO4)。蒸发后 得到油，其不经进一步的纯化直接使用。
MS(ES)134(M-H)-。
1H NMR(CDCl3)8.6(1H，m)，7.6(1H，m)，7.2(2H，m)，3.9(2H， s)，2.2(3H，s)。
                        实施例43
2-[(氨基羰基)氨基]-5-[2-(5-甲氧基吡啶基)]-4-甲基-3-噻吩甲酰 胺
通过实施例26的方法从[2-(5-甲氧基吡啶基)]丙酮制备。
MS(ES)307(M-H)-。
1H NMR(DMSO-d6)9.93(1H，s)，8.26(1H，d)，7.46-7.37(2H， m)，7.33(2H，bs)，6.72(2H，bs)，3.83(3H，s)，2.40(3H，s)。
a)[2-(5-甲氧基吡啶基)]丙酮
通过与实施例42(a)类似的方式从3-甲氧基-6-甲基吡啶制备。
MS(ES)166(M+H)+。
1H NMR(CDCl3)8.25(1H，d)，7.22-7.10(2H，m)，3.85(5H，s)， 2.22(3H，s)。
b)3-甲氧基-6-甲基吡啶
将3-羟基-6-甲基吡啶(2.5g)、甲醇钠(1.36g)和苯基三甲基氯化 铵(4.33g)的干燥二甲基甲酰胺(25mL)溶液在氩气氛下加热回流2.5 小时。将混合物冷却然后室温搅拌过夜。滤除不溶物并用乙醇洗涤。 将滤液用6M盐酸酸化然后真空蒸除溶剂。然后将残余物用水稀释，用 2M氢氧化钠碱化并用乙醚萃取。将合并的萃取液用盐水洗涤，干燥 (MgSO4)，过滤然后蒸发。将粗产物通过硅胶柱色谱纯化，用3％乙酸乙 酯的己烷溶液洗脱(1.55g，55％)。
MS(ES)124(M+H)+。
1H NMR(CDCl3)8.19(1H，d)，7.10(1H，dd)，7.05(1H，d)，3.83 (3H，s)，2.48(3H，s)。
                        实施例44
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(4-嘧啶基)-3-噻吩甲酰胺
通过实施例26的方法用(4-嘧啶基)丙酮制备。
MS(ES)278(M-H)-。
1H NMR(DMSO-d6)9.95(1H，s)，9.00(1H，s)，8.64(1H，d)，7.55 (1H，d)，7.50(2H，b s)，6.84(2H，b s)，2.54(3H，s)。
a)(4-嘧啶基)丙酮
将4-甲基嘧啶(2g)在氩气氛下在干燥的四氢呋喃(65mL)中搅拌 并将该溶液冷却至-78℃。在20分钟内滴加二异丙基氨基锂(13.8ml， 2M溶液)并于-78℃下继续搅拌1.5小时，然后滴加N-甲氧基-N-甲基 乙酰胺(2.49mL)。将反应混合物于-78℃下继续搅拌40分钟，然后在 1.25小时内升温至室温，在饱和碳酸钠水溶液和乙酸乙酯之间进行分 配。分层并将水相再次用乙酸乙酯萃取。将合并的萃取液用盐水洗涤， 干燥(MgSO4)，过滤然后蒸发。将残余物通过硅胶柱色谱纯化，用40- 50％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱得到油，其在放置中结晶(0.70g，24％)。
MS(ES)135(M-H)-。
1H NMR(CDCl3)14.40(1H，s)，8.75(1H，s)，8.35(1H，d)，6.74 (1H，dd)，5.29(1H，s)，2.06(3H，s)。
                        实施例45
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(2-吡嗪基)-3-噻吩甲酰胺
通过实施例26的方法用(2-吡嗪基)丙酮制备。
MS(ES)278(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)9.95(1H，s)，8.76(1H，d)，8.57(1H，t)，8.42 (1H，d)，7.45(2H，bs)，6.91(2H，bs)。
a)(2-吡嗪基)丙酮
通过实施例44(a)的方法从2-甲基吡嗪制备。
MS(ES)135(M-H)-。
1H NMR(CDCl3)8.56-8.51(2H，m)，8.48(1H，d)，3.95(2H，s)， 2.28(3H，s)。
                        实施例46
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(3，4-二氯苯基)-3-噻吩甲酰胺
通过实施例26的方法用(3，4-二氯苯基)丙酮制备。
MS(ES)342(M-H)-。
1H NMR(DMSO-d6)10.0(1H，s)，8.3(2H，m)，7.6(1H，m)，7.35 (3H，m)，6.8(2H，m)，2.2(3H，s)。
                       实施例47
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(4-氰基苯基)-3-噻吩甲酰胺
通过实施例26的方法用(4-氰基苯基)丙酮制备。 MS(ES)299(M-H)-。
                       实施例48
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(4-羟基苯基)-3-噻吩甲酰胺
通过用三溴化硼按照实施例9(a)的描述将2-[(氨基羰基)氨基]- 4-甲基-5-(4-甲氧基苯基)-3-噻吩甲酰胺脱甲基化制备。
MS(ES)290(M-H)-。
1H NMR(DMSO-d6)10.02(1H，s)，7.8(1H，m)，7.2(3H，m)，7.15 (2H，m)，6.8(2H，m)，2.2(3H，s)。
                       实施例49
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(4-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯基)-3- 噻吩甲酰胺
通过实施例26的方法用(4-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯基)丙酮制 备。
MS(ES)401(M-H)-。
1H NMR(DMSO-d6)10.04(1H，s)，7.25(3H，m)，7.1(2H，m)，6.7 (2H，m)，4.05(2H，m)，2.6(2H，m)，2.4(4H，m)，2.2(3H，s) 1.5(4H，m)，1.4(2H，m)。
(4-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯基)丙酮的制备如下：
将(4-羟基苯基)丙酮(1.5g)、N-氯乙基哌啶盐酸盐(2.2g)和碳酸 钾(3.0g)的二甲基甲酰胺(15mL)溶液于80℃搅拌加热8小时。将反应 混合物冷却并在乙酸乙酯和水之间进行分配。将分出的溶剂相用饱和 盐水洗涤两次然后干燥(MgSO4)。得到的油不经进一步纯化直接使用。
MS(ES)262(M+H)+。
                         实施例50
2-[(氨基羰基)-氨基]-4-甲基-5-(4-[2-(二乙基氨基)乙氧基]苯 基)-3-噻吩甲酰胺
通过实施例26的方法用(4-[2-(二乙基氨基)乙氧基]苯基)丙酮 制备。
1H NMR(DMSO-d6)7.35(3H，m)，7.15(1H，m)，7.0(2H，m)，6.8 (2H，m)，4.05(2H，m)，2.8(2H，m)，2.45(4H，m)，2.4(3H，s)， 1.0(6H，t)。
(4-[2-(二乙基氨基)乙氧基]苯基)丙酮通过与实施例49(a)类似 的方式制备。
MS(ES)249(M+H)+。
                      实施例51
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(2-呋喃基)-3-噻吩甲酰胺
通过实施例26的方法用1-(2-呋喃基)-丙-2-酮制备。
1-(2-呋喃基)-丙-2-酮按照如下描述制备：
a)1-(2-呋喃基)-丙-2-醇
向冷却至5℃的呋喃(7.93g)的四氢呋喃(100mL)溶液中滴加正丁 基锂(80.2ml，1.6M的己烷溶液)。将混合物搅拌2小时。滴加氧化丙 烯溶液(12.2mL)并将形成的混合物于0℃搅拌1小时。将反应混合物 用饱和氯化铵水溶液骤冷并用乙醚萃取。将有机层干燥(MgSO4)然后浓 缩。将粗品油蒸馏得到1-(2-呋喃基)-丙-2-醇(3.85g，6.0mm时， b.p.68-70℃)。
1H NMR(CDCl3)7.35(1H，d)，6.3(1H，m)，6.1(1H，d)，4.1(1H， m)，2.7-2.9(2H，m)，1.8(1H，s)，1.2(3H，d)。
b)1-(2-呋喃基)-丙-2-酮
向1-(2-呋喃基)-丙-2-醇(3.25g)的二氯甲烷(200mL)溶液中一 次性加入氯铬酸吡啶鎓盐(13.0g)。将形成的混合物室温搅拌5小时然 后用小的硅胶床过滤。蒸除有机物得到粗产物，其不经进一步的纯化 直接使用(3.53g)。
1H NMR(CDCl3)7.4(1H，d)，6.35(1H，m)，6.2(1H，d)，3.7(2H， s)，2.2(3H，s)。
                       实施例52
2-[(氨基羰基)氨基]-4-三氟甲基-5-苯基-3-噻吩甲酰胺
a)2-氨基-4-三氟甲基-5-苯基-3-噻吩腈
将3，3，3-三氟-1-苯基丙-2-酮(1g)、丙二腈(0.39g)、硫 (0.25g)、三乙胺(0.22g)的乙醇(5mL)溶液于85℃搅拌加热12小时。 将反应混合物加入水(200mL)中并用乙酸乙酯(100mL)萃取两次。将混 合物分离并将有机层干燥(无水硫酸钠)，过滤然后浓缩。将残余物进 行硅胶色谱，用乙酸乙酯/异己烷混合物洗脱。蒸除溶剂并收集产物 (0.5g)。
MS(ES)267(M-H)-。
1H NMR(DMSO-d6)7.65(2H，s)，7.35-7.45(5H，m)。
b)2-氨基-4-三氟甲基-5-苯基-3-噻吩甲酰胺
将2-氨基-4-三氟甲基-5-苯基-3-噻吩腈(0.12g)和浓硫酸 (1.5mL)的混合物于50℃搅拌加热8小时。将反应混合物加入饱和碳 酸氢钠水溶液中直至pH值达到7。将产物用乙酸乙酯(100mL)萃取并 将有机层用无水硫酸钠(3g)干燥，过滤然后浓缩。将残余物进行硅胶 色谱，用乙酸乙酯/异己烷混合物洗脱。蒸除溶剂并收集产物(0.07g)。
MS(ES)285(M-H)-。
1H NMR(DMSO-d6)7.35-7.45(5H，m)，7.2(2H，s)，6.2(2H，s)。
c)2-[(氨基羰基)氨基]-4-三氟甲基-5-苯基-3-噻吩甲酰胺
将2-氨基-4-三氟甲基-5-苯基-3-噻吩甲酰胺(0.35g)悬浮在四 氢呋喃(10mL)中并在搅拌下于5分钟内滴加三氯乙酰基异氰酸酯 (0.19g)。继续于室温下搅拌1小时，然后加入2M氨的甲醇(10mL)溶 液并继续搅拌12小时。有沉淀形成，滤出沉淀并用乙酸乙酯(5mL)洗 涤得到标题的脲(0.12g)。
MS(ES)328(M-H)-。
1H NMR(DMSO-d6)9.2(1H，s)，7.6(2H，s)，7.35-7.45(5H，m)， 6.6(2H，s)。
                         实施例53
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(2-(4-甲基噻唑基))-3-噻吩甲酰胺
通过实施例26(b)的方法用2-氨基-4-甲基-5-(2-(4-甲基噻唑 基))-3-噻吩甲酰胺制备。
NMR(DMSO-d6)9.9(1H，bs)，7.45(2H，bs)，7.19(1H，s)，6.85 (2H，bs)，2.49(3H，s被DMSO掩盖)，2.35(3H，s)。
MS(M+H)+297.3。
原料的制备可以按照如下描述完成：
a)2-氨基-4-甲基-5-(2-(4-甲基噻唑基))-3-噻吩甲酰胺通过实施例 52(b)的方法从2-氨基-3-氰基-4-甲基-5-(2-(4-甲基噻唑基))噻吩 制备。
NMR(DMSO-d6)7.12(2H，s)，7.08(1H，s)，6.97(2H，bs)，3.27 (3H，s)，2.44(3H，s)
MS(M+H)+254。
b)2-氨基-3-氰基-4-甲基-5-(2-(4-甲基噻唑基))噻吩通过实施例 52(a)的方法用1-(4-甲基噻唑-2-基)-丙-2-酮制备。
NMR(DMSO-d6)7.63(2H，s)，7.15(1H，s)，2.26(3H，s)，2.24 (3H，s)
MS(M+H)+236。
c)1-(4-甲基噻唑-2-基)-丙-2-酮
-70℃及氩气氛下，向2，4-二甲基噻唑(2g)的干燥四氢呋喃(20mL) 溶液中滴加1.6M正丁基锂的己烷溶液(12mL)，保持温度在-70℃以 下。于-60℃搅拌30分钟后，加入N-甲氧基-N-甲基乙酰胺(1.9mL)。 将混合物升温至室温然后在水和乙酸乙酯之间进行分配。将有机相干 燥(MgSO4)，减压蒸除溶剂得到黄色油。将其通过柱色谱纯化，用异己 烷至40％乙酸乙酯/异己烷梯度洗脱得到黄色油状的产物(630mg， 23％)。
NMR(CDCl3)6.84(1H，s)，4.1(2H，s)，2.44(3H，s)，2.27(3H， s)。
MS(M+H)+156。
                         实施例54
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-苯基-3-噻吩甲酰胺
a)2-氰基-3-苄基-丁-2-烯酸酰胺(E/Z混合物)
将(苯基)丙酮(5g)、氰基乙酰胺(3.15g)、乙酸铵(0.29g)和乙酸 (0.45mL)的混合物在甲苯(50mL)中回流并用迪安斯塔克装置除水6小 时。将混合物冷却，滤出结晶状的产物(3g)不经纯化直接使用。 MS(ES)201(M+H)+。
b)2-氨基-4-甲基-5-苯基-3-噻吩甲酰胺
将2-氰基-3-苄基-丁-2-烯酸酰胺(E/Z混合物)(1.0g)、吗啉 (0.5mL)和硫(0.18g)在乙醇(10mL)中的混合物于40℃下搅拌加热3 小时。冷却后，滤除混合物中的少量不溶物并将滤液加入水中。滤出 形成的沉淀并用水洗涤，然后用2-丙醇结晶(0.35g)。
MS(ES)233(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)7.4(2H，m)，7.25(3H，m)，6.9(2H，s)，6.8 (2H，s)，2.2(3H，s)。
c)2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-苯基-3-噻吩甲酰胺
向2-氨基-4-甲基-5-苯基-3-噻吩甲酰胺(0.18g)在冰乙酸(5mL) 和水(0.5mL)的混合物中加入异氰酸钠(101mg)。将形成的溶液室温搅 拌4小时然后倒入水中。滤出沉淀并用水洗涤。将产物进行硅胶色谱， 用二氯甲烷/甲醇混合物洗脱得到固体状标题产物(30mg)。
MS(ES)276(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)10.05(1H，s)，7.4(5H，m)，7.35(1H，m)，6.6 (2H，s)，6.4(2H，m)，2.4(3H，s)。
                    实施例55
2-[(氨基羰基)氨基]-4-甲基-5-(3-甲基-异噁唑-5-基)-3-噻吩甲酰 胺
通过实施例54的方法从1-(3-甲基-异噁唑-5-基)-丙-2-酮制 备。
MS(ES)281(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)9.95(1H，s)，7.5(2H，bs)，6.9(2H，bs)，6.4 (1H，s)，2.4(3H，s)，2.25(3H，s)。
原料1-(3-甲基-异噁唑-5-基)-丙-2-酮的制备如下：
向冷却至-75℃的3，5-二甲基异噁唑(5.28g)的四氢呋喃(80mL) 溶液中滴加正丁基锂(37.4ml，1.6M的己烷溶液)。加料完成后，将混 合物于-75℃搅拌2小时。在15分钟内滴加N-甲氧基-N-甲基乙酰胺 的四氢呋喃(10mL)溶液。将混合物升温至室温然后继续搅拌2小时。 将混合物用饱和乙酸铵骤冷然后用乙醚萃取。将有机相合并，干燥 (MgSO4)然后浓缩。将粗产物进行硅胶色谱，用1∶1乙醚/己烷的混合 物洗脱得到油状标题化合物(1.57g)。
MS(ES)140(M+H)+。
1H NMR(CDCl3)6.1(1H，s)，3.8(2H，s)，2.3(3H，s)，2.2(3H， s)。
                       实施例56
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(4-氰基苯基)-3-噻吩甲酰胺
a)2-氨基-3-氰基噻吩
将2，5-二羟基-1，4-二噻烷(14.3g)悬浮在乙醇(250mL)中然后加 入丙二腈(13.0g)。将混合物冷却至5℃然后加入二乙胺(20.6mL)的乙 醇(15mL)溶液，控制加入的速度使温度保持在5℃。然后将混合物于 30-35℃加热1.5小时。加入水(280mL)并将混合物倒在碎冰(400g) 上。短时间后，有浅褐色的结晶形成，滤出结晶并在滤纸上干燥 (14.6g)。
MS(ES)125(M+H)+。
1H NMR(CDCl3)6.7(1H，d)，6.4(1H，d)，4.8(2H，bs)。
b)2-乙酰基氨基-3-氰基噻吩
将2-氨基-3-氰基噻吩(12g)在乙酸酐(34mL)中加热回流15分 钟，冷却然后冷藏3小时。滤出结晶状产物(13.6g)。
MS(ES)167(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)11.6(1H，bs)，7.1(2H，m)，2.1(3H，s)。
c)2-乙酰基氨基-5-溴-3-氰基噻吩
将2-乙酰基氨基-3-氰基噻吩(13.5g)溶于二甲基甲酰胺(110mL) 并在冰/水浴中冷却。在20分钟内分批加入N-溴代琥珀酰亚胺(15.9g) 然后将混合物升温至室温并搅拌3小时。将混合物浓缩至约-半体积 然后向析出的产物中加入水。滤出产物并于60℃下真空干燥(18.8g)。 1H NMR(DMSO-d6)12.0(1H，bs)，7.4(1H，s)，2.1(3H，s)。
d)2-乙酰基氨基-3-氰基-5-(4-氰基苯基)噻吩
将2-乙酰基氨基-5-溴-3-氰基噻吩(500mg)、4-氰基苯基硼酸 (360mg)和碳酸钾(845mg)加入到二甲氧基乙烷(15mL)和水(2mL)中并 将该系统用氩气净化15分钟。加入四(三苯基膦)钯(O)(236mg)并将 混合物于80℃加热3.25小时。将混合物冷却，减压浓缩以除去大部 分二甲氧基甲烷，加入二氯甲烷并将混合物过滤得到浅褐色固体状的 产物(470mg)。
MS(ES)266(M-H)-。
1H NMR(DMSO-d6)7.8(5H，m)，2.1(3H，s)。
e)2-氨基-5-(4-氰基苯基)-3-噻吩甲酰胺
将2-乙酰基氨基-3-氰基-5-(4-氰基苯基)噻吩(470mg)在乙醇 (15mL)和浓硫酸(1.5mL)中加热回流2.5小时。将反应混合物冷却然后 减压浓缩。将残余物在冷却下用2N氢氧化钠碱化，滤出产物然后干燥 (360mg)。
MS(ES)242(M-H)-。
1H NMR(DMSO-d6)7.8(1H，s)，7.7(4H，m)，7.5(2H，d)，7.3 (1H，bs)，7.0(1H，bs)。
f)2-[(氨基羰基)氨基]-5-(4-氰基苯基)-3-噻吩甲酰胺
通过实施例26(b)的方法制备。
MS(ES)285(M-H)-。
1H NMR(DMSO-d6)11.0(1H，bs)，8.0(1H，s)，7.8(2H，d)，7.7 (3H，m)，7.4(1H，bs)，7.0(2H，bs)。
                         实施例57
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(4-三氟甲基苯基)-3-噻吩甲酰胺
通过实施例56(d-f)的方法用4-三氟甲基苯基硼酸制备。
MS(ES)328(M-H)-。
1H NMR(DMSO-d6)11.0(1H，bs)，7.9(1H，s)，7.7(5H，m)，7.3 (1H，bs)，7.0(2H，bs)。
                         实施例58
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(2，4-二氟苯基)-3-噻吩甲酰胺
通过实施例56(d-f)的方法用2，4-二氟苯基硼酸制备。
MS(ES)296(M-H)-。
1H NMR(DMSO-d6)11.0(1H，bs)，7.7(2H，m)，7.6(1H，m)，7.3 (2H，m)，7.2(1H，m)，7.0(2H，bs)。
                         实施例59
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(2-吡啶基)-3-噻吩甲酰胺
通过实施例26(b)的方法用2-氨基-5-(2-吡啶基)-3-噻吩甲酰胺 制备。
MS(ES)263(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)11.04(1H，s)，8.46-8.41(1H，m)，7.99(1H， s)，7.81-7.73(1H，m)，7.65(1H，bs)，7.61(1H，d)，7.27(1H， bs)，7.19-7.12(1H，m)，6.95(2H，bs)。
原料的制备如下：
a)2-(2-甲氧基乙烯基)吡啶
氩气氛下，将搅拌的甲氧基甲基三苯基氯化鏻(12.48g)的四氢呋 喃(60mL)溶液在冰浴中冷却。然后在30分钟内滴加叔丁醇钾(36.41ml， 1M的四氢呋喃溶液)，颜色变为深橙-红色。于0-5℃下继续搅拌50分 钟然后将混合物冷却至-78℃。滴加2-吡啶甲醛并于-78℃继续搅拌2 小时，然后升温至室温并搅拌2小时。加入己烷(100mL)，将混合物过 滤然后将滤液真空蒸发。将残余物通过硅胶柱色谱纯化，用10％乙酸乙 酯的己烷溶液洗脱得到纯净的顺-2-(2-甲氧基乙烯基)吡啶(0.91g， 24％)：
1H NMR(CDCl3)8.51(1H，d)，7.88(1H，d)，7.63-7.55(1H，m)， 7.02(1H，dd)，6.35(1H，d，J＝7Hz)，5.50(1H，d，J＝7Hz)， 3.84(3H，s)；
和顺：反产物的混合物(1∶1，2.54g，67％)：
1H NMR(CDCl3)8.52-8.49(0.5H，m)，8.46-8.41(0.5H，m)，7.86 (0.5H，d)，7.63-7.48(1.5H，m)，7.07-6.95(1.5H，m)，6.35 (0.5H，d，J＝7Hz)，5.87(0.5H，d，J＝13Hz)，5.50(0.5H， d，J＝7Hz)，3.84(1.5H，s)，3.73(1.5H，s)。
b)2-氨基-5-(2-吡啶基)-3-噻吩甲酰胺
将2-(2-甲氧基乙烯基)吡啶(1.28g)溶于乙醇(13mL)并向该溶液 中加入6M硫酸(3.6mL)。将溶液加热至80℃20分钟，然后冷却至55 ℃。加入吗啉(8mL)，然后加入氰基乙酰胺(0.796g)和硫(0.334g)。 将混合物于55℃加热4小时。冷却至室温后，将溶液倒入水(100mL) 中并用乙酸乙酯萃取。将萃取液干燥(MgSO4)，过滤然后蒸发。将残余 物吸附在硅胶上然后用2-5％甲醇的二氯甲烷溶液洗脱得到橙色固体 (345mg，17％)。
MS(ES)220(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)8.36(1H，dd)，7.83(1H，s)，7.76-7.67(1H， m)，7.62(2H，s)，7.54(1H，d)，7.25(1H，bs)，7.12-7.05(1H， m)，6.83(1H，bs)。
                         实施例60
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(3-吡啶基)-3-噻吩甲酰胺
通过实施例59的方法从3-(2-甲氧基乙烯基)吡啶制备。 MS(ES)263(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)11.02(1H，s)，8.74(1H，d)，8.41(1H，dd)， 7.84(1H，dd)，7.82(1H，s)，7.66(1H，bs)，7.38(1H，dd)，7.33 (1H，bs)，6.98(2H，bs)。
3-(2-甲氧基乙烯基)吡啶
通过实施例59(a)的方法从3-吡啶甲醛制备。
1：2.1顺：反产物。
1H NMR(CDCl3)8.66(0.32H，d)，8.47(0.68H，d)，8.39-8.32(1H， m)，7.99-7.92(0.32H，m)，7.55-7.49(0.68H，m)，7.21-7.12(1H， m)，7.06(0.68H，d，J＝13Hz)，6.25(0.32H，d，J＝7Hz)，5.75 (0.68H，d，J＝13Hz)，5.20(0.32H，d，J＝7Hz)，3.80(0.96H， s)，3.70(2.04H，s)。
                         实施例61
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(4-吡啶基)-3-噻吩甲酰胺
通过实施例59的方法从4-(2-甲氧基乙烯基)吡啶制备。
MS(ES)263(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)11.09(1H，s)，8.50(2H，d)，8.03(1H，s)， 7.72(1H，bs)，7.44(2H，d)，7.35(1H，bs)，7.04(2H，b s)。
4-(2-甲氧基乙烯基)吡啶
通过实施例59(a)的方法从4-吡啶甲醛制备。
1：1.13顺：反产物。
MS(EI)135(M+)。
1H NMR(CDCl3)8.48(0.94H，d)，8.43(1.06H，d)，7.41(0.94H， d)，7.25(0.53H，d，J＝14Hz)，7.08(1.06H，d)，6.32(0.47H， d，J＝8Hz)，5.70(0.53H，d，J＝14Hz)，5.17(0.47H，d，J ＝8Hz)，3.85(1.41H，s)，3.73(1.59H，s)。
                     实施例62
2-[(氨基羰基)氨基]-5-[5-(2-甲氧基吡啶基)]-3-噻吩甲酰胺
通过实施例59的方法从2-甲氧基-5-(2-甲氧基乙烯基)吡啶制 备。
MS(ES)293(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)10.96(1H，bs)，8.27(1H，d)，7.80(1H，dd)， 7.61(1H，s)，7.61(1H，bs)，7.28(1H，bs)，6.95(2H，bs)，6.85 (1H，d)，3.84(3H，s)。
2-甲氧基-5-(2-甲氧基乙烯基)吡啶
通过实施例59(a)的方法从5-(2-甲氧基吡啶)甲醛制备。
1：1.44顺：反产物。
MS(EI)165(M+)。
1H NMR(CDCl3)8.24(0.41H，d)，7.98(0.59H，d)，7.91(0.41H， dd)，7.47(0.59H，dd)，6.92(0.59H，d，J＝13Hz)，6.70-6.63 (1H，m)，6.11(0.41H，d，J＝7Hz)，5.72(0.59H，d，J＝13Hz)， 5.14(0.41H，d，J＝7Hz)，3.92和3.90(3H，s)，3.76(1.23H， s)，3.68(1.77H，s)。
5-(2-甲氧基吡啶)甲醛按照如下描述制备：
a)将溴(0.99mL)滴加到搅拌的乙酸钠(1.59g)和2-甲氧基吡啶 (1.93mL)的乙酸(10mL)悬浮液中。将反应混合物室温搅拌25分钟，然 后于80℃搅拌2.5小时。然后将混合物冷却并倒入冰水中，用2M氢氧 化钠中和并用乙醚萃取。将合并的萃取液干燥(MgSO4)，过滤然后蒸 发。将粗产物通过硅胶柱色谱纯化，用5％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱得 到无色油状的5-溴-2-甲氧基吡啶(1.75g，51％)。
MS(ES)190，188(M+H)+。
1H NMR(CDCl3)8.20(1H，d)，7.63(1H，dd)，6.65(1H，d)，3.90 (3H，s)。
b)将5-溴-2-甲氧基吡啶(1.53g)在干燥的四氢呋喃(35mL)中在 氩气氛及-78℃下搅拌。向溶液中滴加丁基锂(6.6ml，1.6M的溶液)然 后继续于-78℃下搅拌1.5小时。滴加二甲基甲酰胺(1.3mL)并继续于 -78℃下搅拌30分钟，然后升温至室温。将反应混合物倒入饱和碳酸 氢钠水溶液中并将水相用乙醚萃取。将合并的萃取液干燥(MgSO4)，过 滤然后蒸发。将残余物通过硅胶柱色谱纯化得到白色固体状的5-(2- 甲氧基吡啶)甲醛(0.91g，81％)。
1H NMR(CDCl3)9.95(1H，s)，8.63(1H，d)，8.06(1H，dd)，6.85 (1H，d)，4.04(3H，s)。
                         实施例63
2-[(氨基羰基)氨基]-5-[5-(2，4-二甲氧基嘧啶基)]-3-噻吩甲酰胺
通过实施例59的方法从2，4-二甲氧基-5-(2-甲氧基乙烯基)嘧啶 制备。
MS(ES)324(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)11.01(1H，s)，8.50(1H，s)，7.70(1H，s)， 7.69(1H，bs)，7.31(1H，bs)，6.95(2H，bs)，4.05(3H，s)，3.94 (3H，s)。
5-(2，4-二甲氧基嘧啶)甲醛
通过实施例62(b)的方法从5-溴-2，4-二甲氧基嘧啶制备。 MS(EI)168(M+)。
1H NMR(CDCl3)10.17(1H，s)，8.78(1H，s)，4.11(3H，s)，4.09 (3H，s)。
2，4-二甲氧基-5-(2-甲氧基乙烯基)-嘧啶
通过实施例59(a)的方法从5-(2，4-二甲氧基嘧啶)甲醛制备。 分离出29％的反式产物：
MS(EI)196(M+)。
1H NMR(CDCl3)8.06(1H，s)，7.10(1H，d，J＝13Hz)，5.64(1H， d，J＝13Hz)，4.02(3H，s)，3.97(3H，s)，3.67(3H，s)。
分离出49％的顺式产物：
1H NMR(CDCl3)8.95(1H，s)，6.19(1H，d，J＝7Hz)，5.30(1H， d，J＝7Hz)，3.97(6H，s)，3.75(3H，s)。
                     实施例64
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(4-羟基苯基)-3-噻吩甲酰胺
a)2-氨基-3-噻吩甲酰胺
将2，5-二羟基-1，4-二噻烷(25g)和氰基乙酰胺(19.3g)在乙醇 (120mL)中的悬浮液搅拌并加热至50℃。在15分钟内加入三乙胺 (9.2mL)并将混合物于50℃下继续搅拌2小时。用冰冷却后，滤出固 体然后干燥(21.4g)。
MS(ES)143(M+H)+。
b)2-[(氨基羰基)氨基]-3-噻吩甲酰胺
通过实施例26(b)的方法从2-氨基-3-噻吩甲酰胺制备。 MS(ES)186(M+H)+。
c)2-[(氨基羰基)氨基]-5-溴-3-噻吩甲酰胺
将2-[(氨基羰基)氨基]-3-噻吩甲酰胺(1.0g)溶于乙酸(20mL)并 在5分钟内在迅速搅拌下加入溴(0.35mL)的乙酸(5mL)溶液。将混合物 搅拌90分钟然后加入水(50mL)中。滤出产物，用水洗涤然后真空干燥 (0.55g)。
MS(ES)262/264(M-H)-。
1H NMR(DMSO-d6)10.63(1H，s)，7.9(1H，m)，7.8(1H，s)，7.35 (in，m)，7.15(1H，m)。
d)2-[(氨基羰基)氨基]-5-(4-甲氧基苯基)-3-噻吩甲酰胺
将2-[(氨基羰基)氨基]-5-溴-3-噻吩甲酰胺(0.55g)、碳酸钠 (0.44g)和4-甲氧基苯基硼酸(0.51g)在二甲氧基乙烷(60mL)和水 (2mL)中的溶液用氩气净化10分钟。然后加入四(三苯基膦)钯(0.243g) 并将混合物搅拌回流18小时。冷却后，将混合物过滤然后蒸发。将残 余物在乙酸乙酯和2N氢氧化钠之间进行分配，然后滤出固体界面层 (0.2g)。
MS(ES)290(M-H)+。
1H NMR(DMSO-d6)10.54(1H，s)，8.0(1H，m)，7.9(1H，s)，7.45 (2H，d)，7.35(1H，m)，6.95(2H，d)，3.8(3H，s)。
e)2-[(氨基羰基)氨基]-5-(4-羟基苯基)-3-噻吩甲酰胺
通过实施例9(a)的方法制备。
MS(ES)276(M-H)-。
1H NMR(DMSO-d6)10.12(1H，s)，8.0(1H，m)，7.85(1H，s)，7.4 (2H，d)，7.35(1H，m)，6.9(2H，d)。
                      实施例65
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(4-氯苯基)-3-噻吩甲酰胺
通过实施例64(d)的方法用4-氯苯基硼酸制备。
MS(ES)294(M-H)-。
1H NMR(DMSO-d6)10.6(1H，s)，8.1(1H，s)，7.85(1H，s)，7.5 (2H，d)，7.4(3H，m)，7.0(2H，m)。
                      实施例66
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(4-甲磺酰基苯基)-3-噻吩甲酰胺
通过实施例64(d)的方法用4-甲磺酰基苯基硼酸制备。
MS(ES)338.28(M+H)-。
1H NMR(DMSO-d6)11.06(1H，s)，7.95(1H，s)，7.90(2H，d)， 7.70(3H，m)，7.35(1H，s)，7.00(2H，s)，3.20(3H，s)。
                      实施例67
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(2-(N-叔丁氧羰基)吡咯基)-3-噻吩甲酰胺
通过实施例64(d)的方法从1-(叔丁氧羰基)吡咯基-2-硼酸制 备。
MS(ES)351(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)10.97(1H，s)，7.55(1H，s)，7.30(1H，s)， 7.2(1H，s)，7.18(1H，s)，6.85(2H，m)，6.25(2H，m)，1.40 (9H，s)。
                      实施例68
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(2-(5-氰基噻吩基))-3-噻吩甲酰胺
通过实施例64(d)的方法从5-氰基噻吩基-2-硼酸制备。
MS(ES)291(M-H)-。
1H NMR(DMSO-d6)11.1(1H，s)，7.89(1H，s)，7.85(1H，d)，7.75 (1H，s)，7.4(1H，s)，7.2(1H，d)，7.1(2H，s)。
                       实施例69
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(3，5-二甲基-异噁唑-4-基)-3-噻吩甲酰胺
通过实施例64(d)的方法从3，5-二甲基异噁唑基-4-硼酸制备。
MS(ES)279(M-H)-。
1H NMR(DMSO-d6)11.0(1H，s)，7.8(1H，s)，7.4(1H，s)，7.3 (1H，s)，6.9(2H，s)，2.53(3H，s)，2.3(3H，s)。
                       实施例70
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(3-呋喃基)-3-噻吩甲酰胺
通过实施例64(d)的方法从3-呋喃基硼酸制备。
MS(ES)250(M-H)-。
1H NMR(DMSO-d6)10.9(1H，s)，7.9(1H，s)，7.7(1H，m)，7.6 (1H，s)，7.4(1H，s)，7.2(1H，s)，6.9(2H，s)，6.5(1H，m)。
                       实施例71
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(2-吡咯基)-3-噻吩甲酰胺
将2-[(氨基羰基)氨基]-5-(2-(N-叔丁氧羰基)吡咯基)-3-噻吩 甲酰胺(0.1g)、水(0.1mL)和三氟乙酸(2mL)室温搅拌8分钟，然后滴 加到饱和碳酸氢钠水溶液(15mL)中。将产物萃取到乙酸乙酯中并分出 有机层。将粗产物进行硅胶色谱，用甲醇/二氯甲烷混合物洗脱。蒸除 溶剂并收集产物(0.04g)。
MS(ES)249(M-H)-。
1H NMR(DMSO-d6)11.04(1H，s)，10.86(1H，s)，7.5(1H，s)， 7.2-7.15(2H，m)，6.85(2H，s)，6.7(1H，m)，6.15(1H，m)，6.05 (1H，m)。
                      实施例72
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(5-嘧啶基)-3-噻吩甲酰胺
将硼酸三异丙酯(1.48mL)在氩气氛下加入到搅拌的5-溴嘧啶 (200mg)的四氢呋喃(10mL)溶液中。然后将溶液冷却至-78℃并滴加正 丁基锂(3.30ml，1.6M己烷溶液)。于-78℃下继续搅拌5分钟，然后 将反应混合物升温至室温。真空蒸除溶剂，加入二甲氧基乙烷(12mL)， 然后加入2-[(氨基羰基)氨基]-5-溴-3-噻吩甲酰胺(200mg)和饱和碳 酸氢钠水溶液(3.5mL)。将烧瓶用氩气净化然后加入四(三苯基膦)钯(O) (90mg)。将混合物于90℃加热4小时然后冷却。真空蒸除溶剂并将残 余物加入2M氢氧化钠和10％甲醇的二氯甲烷溶液中。分层，将水相过 滤以除去少量的不溶物。然后将滤液用6M盐酸中和并过滤收集形成的 沉淀，用水洗涤然后干燥。将产物用甲醇研磨，过滤收集然后高真空 干燥(47mg，24％)。
MS(ES)264(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)11.02(1H，bs)，9.01(1H，s)，8.91(2H，s)， 7.93(1H，s)，7.66(1H，bs)，7.39(1H，bs)，7.04(2H，bs)。
                      实施例73
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(2-(5-氯噻吩基))-3-噻吩甲酰胺
通过实施例72的方法用5-氯-2-溴噻吩制备。
MS(ES)300.18(M-H)-。
1H NMR(DMSO-d6)11.0(1H，s)，7.75(1H，s)，7.50(1H，s)，7.25 (1H，s)，7.0(1H，d)，6.95(3H，d+bs)。
                      实施例74
2-[(氨基羰基)氨基]-5-[2-(5-三氟甲基吡啶基)]-3-噻吩甲酰胺
通过与实施例72类似的方式从2-溴-5-三氟甲基吡啶制备。 MS(ES)331(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)11.17(1H，s)，8.85(1H，s)，8.26 (1H，s)，8.21(1H，d)，7.83(1H，d)，7.76(1H，bs)，7.39(1H， bs)，7.07(2H，bs)。
                       实施例75
2-[(氨基羰基)氨基]-5-[2-(5-溴吡啶基)]-3-噻吩甲酰胺
通过与实施例72类似的方式从2，5-二溴吡啶制备。
MS(ES)343，341(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6，500MHz)11.07(1H，s)，8.55(1H，d)，8.03 (1H，s)，8.02(1H，dd)，7.63(1H，bs)，7.58(1H，d)，7.26(1H， bs)，6.95(2H，bs)。
                      实施例76
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(2-(5-氰基呋喃基))-3-噻吩甲酰胺
通过实施例72的方法用5-氰基-2-溴呋喃制备。
MS(ES)275(M-H)-。
1H NMR(DMSO-d6)11.1(1H，bs)，7.85(1H，s)，7.8(1H，bs)， 7.6(1H，d)，7.35(1H，bs)，7.1(2H，bs)，6.75(1H，d)。
                      实施例77
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(4-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯基)-3-噻吩甲 酰胺
按照实施例72的描述用4-[2-(1-哌啶基)乙氧基]溴苯制备。 MS(ES)389(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)10.98(1H，s)，7.62(1H，s)，7.6(1H，s)，7.42 (2H，d)，7.25(1H，d)，6.98(2H，d)，6.9(2H，s)，4.15(2H， m)，1.6(4H，M)，1.42(2H，m)。
4-[2-(1-哌啶基)乙氧基]溴苯按照如下描述制备：
a)将4-溴苯酚(1g)、N-(2-氯乙基)哌啶盐酸盐(0.94g)和碳酸钾 (1.76g)在二甲基甲酰胺(15mL)中于60℃搅拌加热15小时。将反应混 合物冷却然后在乙酸乙酯和水之间进行分配。将分出的溶剂相用2N氢 氧化钠洗涤两次，用饱和盐水洗涤一次然后干燥(MgSO4)。得到的油不 经进一步的纯化直接使用。
MS(ES)284(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)7.2(2H，d)，6.9(2H，d)，4.05(2H，m)，2.62 (2H，t)，2.38(4H，m)，1.48(4H，m)，1.36(2H，m)。
                        实施例78
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(4-[2-(1-(2，2，6，6-四甲基)哌啶基)乙氧基] 苯基)-3-噻吩甲酰胺
按照实施例72的描述用4-[2-(2，2，6，6-四甲基-1-哌啶基)乙氧 基]溴苯制备，后者按照与实施例77(a)类似的方式制备。
MS(ES)445(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)7.48(2H，d)，6.96(2H，d)，4.22(2H，m)，3.62 (2H，m)，1.8(4H，m)，1.56(2H，m)，1.42(6H，s)，1.36(6H， s)。
                           实施例79
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(4-(噻唑-4-基-甲氧基)苯基)-3-噻吩甲酰 胺
按照实施例72的描述用4-[噻唑-4-基-甲氧基]溴苯制备，后者 按照与实施例77(a)类似的方式制备。
MS(ES)375(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)10.91(1H，s)，9.1(1H，s)，7.88(1H，s)，7.82 (1H，bs)，7.75(1H，s)，7.42(2H，d)，7.24(1H，bs)，7.08(2H， d)，6.9(1H，bs)，5.11(2H，s)。
                       实施例80
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(4-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苯基)-3-噻吩 甲酰胺
按照实施例72的描述用4-[2-(二甲基氨基)乙氧基]溴苯制备， 后者按照与实施例77(a)类似的方式制备。
MS(ES)349(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)11(1H，s)，7.65(1H，b s)，7.6(1H，s)，7.5 (2H，d)，7.28(1H，b s)，7.05(2H，d)，6.9(2H，b s)，4.45(2H， t)，3.5(2H，t)，2.85(6H，s)。
                       实施例81
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(4-[2-(二乙基氨基)乙氧基]苯基)-3-噻吩 甲酰胺
按照实施例72的描述用4-[2-(二乙基氨基)乙氧基]溴苯制备， 后者按照与实施例77(a)类似的方式制备。
MS(ES)377(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)11(1H，s)，7.65(1H，bs)，7.6(1H，s)，7.5 (2H，d)，7.28(1H，bs)，7.05(2H，d)，6.9(2H，bs)，4.35(2H， t)，3.5(2H，t)，3.25(4H，m)，1.2(6H，t)。
                          实施例82
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(4-[2-(1-吗啉基)乙氧基]苯基)-3-噻吩甲 酰胺
按照实施例72的描述用4-[2-(1-吗啉基)乙氧基]溴苯制备，后 者按照与实施例77(a)类似的方式制备。
MS(ES)391(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)10.9(1H，s)，7.55(1H，s)，7.5(2H，d)，7.15 (1H，bs)，7.05(2H，d)，6.55(2H，bs)，4.4(2H，s)，3.8(4H， s)，3.4-2.8(6H，bm)。
                        实施例83
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(2-呋喃基)-3-噻吩甲酰胺
氩气氛下，向冷却至-75℃的呋喃(598mg)的干燥四氢呋喃(15mL) 溶液中滴加正丁基锂(7.16ml，1.6M的己烷溶液)。将混合物升温至- 10℃并在该温度下搅拌1小时。将混合物冷却至-60℃并加入硼酸三异 丙酯(3.04mL)，加料后，将混合物升温至室温并继续搅拌0.5小时。 将混合物浓缩并加入二甲氧基乙烷(12mL)、2-[(氨基羰基)氨基]-5- 溴-3-硫代甲酰胺和饱和碳酸氢钠(5.5mL)。将混合物用氩气净化并加 入四(三苯基膦)钯(O)(150mg)，然后在氩气氛下回流4小时。将混合 物浓缩然后在乙酸乙酯和2N氢氧化钠之间进行分配。将有机层干燥 (MgSO4)然后蒸发。将残余物通过硅胶柱色谱纯化，用甲醇/二氯甲烷 混合物洗脱得到固体状标题化合物(152mg)。
MS(ES)235(M-NH2)+。
1H NMR(DMSO-d6)7.7(1H，bs)，7.65(1H，s)，7.5(1H，s)，7.3 (1H，bs)，7.25(1H，bs)，7.0(2H，bs)，6.5(2H，dd)。
                     实施例84
2-[(氨基羰基)氨基]-5-(2-(5-甲基呋喃基))-3-噻吩甲酰胺
按照与实施例83类似的方式从2-甲基呋喃制备。
MS(ES)266(M+H)+。
1H NMR(DMSO-d6)11.0(1H，bs)，7.7(1H，bs)，7.4(1H，s)，7.2 (1H，bs)，6.95(2H，bs)，6.35(1H，d)，6.1(1H，d)，2.3(3H， s)。
                     实施例85
5-[(氨基羰基)氨基]-2-(3，5-二氯苯基)-1，3-噁唑-4-甲酰胺
按照实施例26(b)的描述从5-氨基-2-(3，5-二氯苯基)-1，3-噁唑 -4-甲酰胺制备。
NMR(DMSO-d6)7.8(2H，s)，7.75(1H，s)，7.54(1H，bs)，7.43 (1H，bs)，6.81(2H，bs)
MS(M+H)+315.2/317.9。
原料按照如下描述制备：
将浓硫酸(5mL)于0℃下加入到5-氨基-2-(3，5-二氯苯基)-1，3- 噁唑-4-甲腈(490mg)中。室温搅拌90分钟后，将混合物倒在冰上并通 过加入碳酸钾进行中和。将混合物用乙酸乙酯萃取，然后将其干燥 (MgSO4)并减压蒸发得到浅黄色固体(420mg，80％)。
NMR(DMSO-d6)7.67(2H，s)，7.63(1H，s)，7.15(2H，bs)，6.99 (2H，bs)。
MS(M+Na)+294.23/296.22。
                        实施例86
5-[(氨基羰基)氨基]-2-(4-三氟甲基苯基)-1，3-噁唑-4-甲酰胺
按照实施例26(b)的描述从5-氨基-2-(4-(三氟甲基)苯基)- 1，3-噁唑-4-甲酰胺制备，得到乳白色固体(54％)。
NMR(DMSO-d6)9.26(1H，bs)，8.08(2H，d)7.91(2H，d)，7.52 (1H，bs)，7.43(1H，bs)，6.79(2H，bs)。
MS(ES)(M+H)+315.28。
原料按照实施例85的描述用5-氨基-2-(4-(三氟甲基)苯基)- 1，3-噁唑-4-甲腈制备，得到乳白色固体(61％)。
NMR(DMSO-d6)7.93(2H，d)，7.82(2H，d)，7.16(2H，bs)6.99 (1H，bs)。
MS(M-H)-270.3。
                         实施例87
2-[(氨基硫代羰基)氨基]-5-苯基-3-噻吩甲酰胺   
将2-氨基-5-苯基-3-噻吩甲酰胺(1.09g，5mmol)和三甲基硅烷基 异硫氰酸酯(0.85ml，6mmol)的N，N-二甲基乙酰胺溶液于75℃下搅拌 7天。加入N，N-二甲基甲酰胺直至溶解。蒸除溶剂并将形成的浆液进 行硅胶色谱，用异己烷然后是二氯甲烷和乙醚洗脱得到黄色固体状产 物(0.49g，35％)。
1H NMR(DMSO-d6，300MHz)612.59(1H，s)，8.40(2H，s)，7.85 (1H，s)，7.77(1H，s)，7.53(3H，d+s)，7.39(2H，t)，7.25(1H， t)。
MS(ES)278(M+H)+。
                     化合物的药理学评估
IKK2滤膜激酶试验
用滤膜激酶试验测试化合物对IKK2的抑制作用。将试验化合物在 二甲亚砜(DMSO)中溶解达到10mM。然后将化合物以1比40在激酶缓 冲液(50mM Tris，pH 7.4，含有0.1mM EGTA、0.1mM原钒酸钠和0.1％ β-巯基乙醇)中稀释。用2.5％DMSO的激酶缓冲液溶液对该溶液进行1 比3的系列稀释。将20μl化合物稀释液一式两份地加入到96孔板的 孔中。向对照孔中加入20μl 2.5％DMSO的激酶缓冲液溶液(0％抑制)。 向本底孔中加入20μl 0.5M EDTA(100％抑制)。
将10μl乙酸镁、未标记的ATP和33P-标记的ATP的混合物加入各 孔中达到最终浓度为10mM乙酸镁、1μMATP和0.1μCi 33P ATP。将 20μl IKK2(0.15μg/孔)、1-53 GST-IκB(0.5μg/孔)和牛血清白蛋 白(BSA)(8.5μg/孔)的混合物加入各孔中引发反应。最终的反应体积 为50μl。
将激酶反应液于21℃保温80分钟，然后通过加入等体积(50μl) 的20％三氯乙酸(TCA)沉淀出蛋白终止反应。使沉淀形成10分钟然后 过滤到GF/C单滤膜96孔板上。将各滤膜用约1ml 2％的TCA洗涤两次。 将滤板于30-40℃干燥60分钟，向各孔中加入20μl闪烁剂然后将平 板密封并在Packard Topcount小平板闪烁计数器上对放射性进行计 数。
IKK1滤膜激酶试验
通过用滤膜激酶试验测试其对IKK1的抑制作用评估化合物的选 择性。试验条件与IKK2滤膜激酶试验相同，所不同的是向各孔中加 入IKK1(0.25μg/孔)和1-53GST IKB(9μg/孔)的混合物以引发反 应。
对LPS-诱导的PBMC产生TNFα的抑制作用
通过测定对由细菌脂多糖(LPS)刺激的人外周血单核细胞(PBMC) 产生肿瘤坏死因子α(TNFα)的抑制来评估试验化合物对细胞中核因子 κB(NFκB)激活的影响。
从健康的自愿者收集人血(250mL)，用肝素抗凝。将血液的等分 液(25mL)放置在50ml聚丙烯离心管中的20ml Lymphoprep (Nycomed)上。将离心管以2,500rpm离心30分钟(Sorval RT600B)。用细头的巴斯德吸管收集含有PBMC的浑浊层，转移到8 个干净的聚丙烯离心管中(每管约10ml)并用磷酸盐缓冲的盐水(PBS) 稀释至50ml。将这些离心管以2,000rpm离心8分钟。向各细胞沉 积物中加入PBS(10mL)然后温和地将细胞重新悬浮。将细胞收集在 4个离心管中，向各管中加入PBS使体积达到50ml，然后将离心管 以1,400rpm离心8分钟。将细胞沉积物再次重新悬浮在10ml PBS 中，收集在2个离心管中，用PBS使体积达到50ml然后将离心管以 900rpm离心10分钟。
将最终的细胞沉积物温和地重新悬浮在10ml组织培养液(含有1％ 加热灭活的人血清、L-谷氨酰胺和青霉素及链霉素的RPMI)中，合并 在一个试管中并用RPMI培养液使体积达到30ml。进行细胞计数并将 细胞悬浮液稀释至2.6×106细胞/ml。
将试验化合物溶于DMSO达到10mM，然后以1比250用RPMI培养 液稀释(40μM)。然后将化合物用0.4％DMSO的RPMI培养液溶液以1 比3进行系列稀释。将试验化合物稀释液的等分液(50μl)转移到96孔 平板中。对照孔中含有0.4％DMSO的RPMI溶液而不含化合物。
将细胞悬浮液的等分液(100μl)加入各孔中并将平板于37℃保温 30分钟。向各孔中加入50μl 40μg/ml的LPS(Sigma，L-4130)以刺 激细胞产生TNFα并将平板于37℃保温过夜。阴性对照孔加入RPMI培 养液(50μl)而不是LPS。最终的保温体积为200μl。
将平板于1,200rpm离心4分钟，然后取出上清液测定TNFα浓度。 用WST-1试剂(Boehringer Mannheim，1044807)测定剩余的细胞沉积 物的活力。将100μl含有10μl WST-1试剂的RPMI培养液加入各孔中 并将平板保温0.5至3小时。然后用96孔板分光光度计测定在450nm 的吸光度。
用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定上清液(新收集的或于-20℃ 保存的)中的TNFα。通过将96孔板的各孔用绵羊抗人TNFα单克隆抗 体(100μl 1μg/ml在涂覆缓冲液中稀释的抗体；0.5M碳酸盐/碳酸氢 盐缓冲液，pH 9.6，含有0.2g/l叠氮化钠)涂覆制备ELISA平板并于 4℃保温过夜。空白孔未涂覆。将各孔用0.1％BSA在含有0.05％Tween 的PBS(PBS/Tween)中的溶液洗涤一次然后和1％BSA一起在涂覆缓冲 液(200μl)中室温保温1小时。然后将各孔用0.1％BSA的PBS/Tween 溶液洗涤3次。
将PBMC保温的上清液样品用1％BSA的PBS/Tween溶液以1比3 进行稀释。将这些稀释液的100μl等分液加入ELISA平板中。其它的 孔含有100μl TNFα标准物(10、3.3、1.1、0.37、0.12、0.04、0.014 和0ng/ml)。将ELISA平板室温保温2小时然后将各孔用0.1％BSA 的PBS/Tween溶液洗涤3次。向各孔中加入兔抗人TNFα抗体(100μl 2.5μg/ml的溶液)然后将平板室温保温1.5小时。然后将各孔用0.1％ BSA的PBS/Tween溶液洗涤3次。向各孔中加入山羊抗兔IgG辣根过 氧化物酶结合物(ICN，674371；100μl 1比10,000稀释液)并将平板 于室温下保温1.5小时。将各孔用0.1％BSA的PBS/Tween溶液洗涤3 次。
过氧化物酶底物通过将1mg TMB片(Sigma，T-5525)溶于100μl DMSO(100μl)然后将其和36μl UHPO(BDH，30559；1g的片剂溶于 25ml蒸馏水)一起加入10ml 0.1M柠檬酸盐/乙酸盐缓冲液(pH6)中进 行制备。向各孔中加入100μl底物然后将平板在黑暗中室温保温约30 分钟。通过向各孔中加入25μl 2M硫酸终止反应。在96孔平板分光光 度计中测定在450nm的吸光度。