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一种增强免疫的蜂胶营养组合物及其应用

阅读:193发布:2022-10-06

专利汇可以提供一种增强免疫的蜂胶营养组合物及其应用专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种增强免疫 力 的蜂胶营养组合物及其应用,涉及保健品技术领域。该增强免疫力的蜂胶营养组合物的组分按重量份数计包括:蜂胶10-20份、壳聚糖60-70份和鲨鱼软骨粉15-25份。本 申请 中将蜂胶、壳聚糖和鲨鱼软骨粉进行复配使用,这三者组分能够协同增效,同时达到增强免疫力的目的。本申请将蜂胶、壳聚糖和鲨鱼软骨粉作为主要成分,可以添加其他常规载体或辅料以制成不同的剂型,满足不同人群的服用习惯和需求;工艺流程简单,容易推广和成果转化。本申请提供的增强免疫力的蜂胶营养组合物可以广泛应用于制备增强免疫力的保健食品或 功能性食品 中。,下面是一种增强免疫的蜂胶营养组合物及其应用专利的具体信息内容。

1.一种增强免疫的蜂胶营养组合物,其特征在于,其组分按重量份数计包括:蜂胶
10-20份、壳聚糖60-70份和鲨鱼软骨粉15-25份。
2.根据权利要求1所述的增强免疫力的蜂胶营养组合物,其特征在于,所述组分按重量份数计包括:蜂胶12-18份、壳聚糖62-68份和鲨鱼软骨粉17-23份。
3.根据权利要求1所述的增强免疫力的蜂胶营养组合物,其特征在于,所述鲨鱼软骨粉的制备方法为:
将鲨鱼软骨粉碎,加入溶液进行浸泡提取13-15h,分离提取液;
向所述提取液中加酸溶液调节pH值至8-9,随后加入胰蛋白酶进行酶解;
将酶解液进行脱色和除杂;
随后取上清液加入乙醇进行一次结晶,收集沉淀物,继续向沉淀物中加入过化氢进行氧化反应,反应完成后调节pH至6-7,接着再加入乙醇进行二次结晶,结晶过滤干燥;
优选地,将所述鲨鱼软骨粉碎包括先将所述鲨鱼软骨进行粗粉碎,然后进行冷冻粉碎。
4.根据权利要求3所述的增强免疫力的蜂胶营养组合物,其特征在于,酶解的时间为1-
2h,酶解温度为50-60℃;
优选地,氧化反应的时间为5-6h。
5.根据权利要求1所述的增强免疫力的蜂胶营养组合物,其特征在于,所述蜂胶为蜂胶粉。
6.根据权利要求1-5任一项所述的增强免疫力的蜂胶营养组合物,其特征在于,所述组分按重量份数计还包括辅料1-10份;
优选地,所述辅料包括壳寡糖、蜂王浆、蜂花粉、核苷酸、珍珠母粉、灵芝提取物和西洋参提取物中的一种或多种的混合物。
7.根据权利要求1-5任一项所述的增强免疫力的蜂胶营养组合物,其特征在于,所述蜂胶中黄占所述蜂胶的质量百分数为8%-18%。
8.根据权利要求1-5任一项所述的增强免疫力的蜂胶营养组合物,其特征在于,所述增强免疫力的蜂胶营养组合物的剂型为硬胶囊、软胶囊和颗粒剂中的任一种。
9.根据权利要求8所述的增强免疫力的蜂胶营养组合物,其特征在于,所述组分还包括药学上可接受的用于制备硬胶囊、软胶囊和颗粒剂中的任一种的载体。
10.一种如权利要求1-9任一项所述的增强免疫力的蜂胶营养组合物在制备增强免疫力的保健食品或功能性食品中的应用。

说明书全文

一种增强免疫的蜂胶营养组合物及其应用

技术领域

[0001] 本发明涉及保健品技术领域,具体而言,涉及一种增强免疫力的蜂胶营养组合物及其应用。

背景技术

[0002] 免疫力是人体自身的防御机制,是人体识别和消灭外来侵入的任何异物(病毒、细菌等)、处理衰老、损伤、死亡、变性的自身细胞以及识别和处理体内突变细胞和病毒感染细胞的能力。
[0003] 现代免疫学认为,免疫力是人体识别和排除“异己”的生理反应。人体内执行这一功能的是免疫系统。数百万年来,人类生活在一个既适合生存又充满危险的环境,人类得以存续,也获得了非凡的免疫力。所以说免疫力是生物进化过程的产物。
[0004] 现代文明给人类带来物质享受,从根本上改变了人类原先的生活方式和习性,同时也给人类带来了大量的负面影响。营养过剩造成各种代谢紊乱,体内毒素排泄受阻,诱发心脑血管疾病;室内四季温控的环境使螨虫、蚜虫、孢子类及各种细菌、病毒大量繁殖,浮游在空气中,通过呼吸道进入人体内。现代化的家具、室内装饰、装潢材料夹带着甲等有害致癌物质侵蚀着人类的健康。
[0005] 人类要具备抵抗各种病毒、细菌的防疫能力,创造健康的体魄,最重要是增强自身自然免疫力及对各种疾病的自然治愈力,使荷尔蒙生理作用旺盛。
[0006] 目前,临床上提高免疫力的药物分为中药和西药,中药有六味地黄丸、玉屏散、补中益气丸、百令胶囊、金宝等等,通过中医中药的方式与理论,可以增强人的免疫力,提升人体的正气。西医认为,提高免疫力的药物比较常见的是普通的蛋白粉、胸腺五肽、胸腺肽以及注射提高免疫力的药物,比如人血白蛋白、香菇多糖等。现有的提高免疫力的药物对免疫力增强效果不佳。
[0007] 鉴于此,特提出本发明。

发明内容

[0008] 本发明的目的在于提供一种增强免疫力的蜂胶营养组合物,其具有增强免疫力的功效,适用于免疫力低下者。
[0009] 本发明的目的在于提供上述增强免疫力的蜂胶营养组合物在制备增强免疫力的保健食品或功能性食品中的应用。
[0010] 本发明是这样实现的:
[0011] 第一方面,实施例提供一种增强免疫力的蜂胶营养组合物,其组分按重量份数计包括:蜂胶10-20份、壳聚糖60-70份和鲨鱼软骨粉15-25份。
[0012] 在可选的实施方式中,所述组分按重量份数计包括:蜂胶12-18份、壳聚糖62-68份和鲨鱼软骨粉17-23份。
[0013] 在可选的实施方式中,所述鲨鱼软骨粉的制备方法为:
[0014] 将鲨鱼软骨粉碎,加入溶液进行浸泡提取13-15h,分离提取液;
[0015] 向所述提取液中加酸溶液调节pH值至8-9,随后加入胰蛋白酶进行酶解;
[0016] 将酶解液进行脱色和除杂;
[0017] 随后取上清液加入乙醇进行一次结晶,收集沉淀物,继续向沉淀物中加入过化氢进行氧化反应,反应完成后调节pH至6-7,接着再加入乙醇进行二次结晶,结晶过滤干燥;
[0018] 优选地,将所述鲨鱼软骨粉碎包括先将所述鲨鱼软骨进行粗粉碎,然后进行冷冻粉碎。
[0019] 在可选的实施方式中,酶解的时间为1-2h,酶解温度为50-60℃;
[0020] 优选地,氧化反应的时间为5-6h。
[0021] 在可选的实施方式中,所述蜂胶为蜂胶粉。
[0022] 在可选的实施方式中,所述组分按重量份数计还包括辅料1-10份;
[0023] 优选地,所述辅料包括壳寡糖、蜂王浆、蜂花粉、核苷酸、珍珠母粉、灵芝提取物和西洋参提取物中的一种或多种的混合物。
[0024] 在可选的实施方式中,所述蜂胶中黄占所述蜂胶的质量百分数为8%-18%。
[0025] 在可选的实施方式中,所述增强免疫力的蜂胶营养组合物的剂型为硬胶囊、软胶囊和颗粒剂中的任一种。
[0026] 在可选的实施方式中,所述组分还包括药学上可接受的用于制备硬胶囊、软胶囊和颗粒剂中的任一种的载体。
[0027] 第二方面,实施例提供一种如前述实施方式任一项所述的增强免疫力的蜂胶营养组合物在制备增强免疫力的保健食品或功能性食品中的应用。
[0028] 本发明具有以下有益效果:
[0029] 本申请中将蜂胶、壳聚糖和鲨鱼软骨粉进行复配使用,这三者组分能够协同增效,同时达到增强免疫力的目的。本申请将蜂胶、壳聚糖和鲨鱼软骨粉作为主要成分,可以添加其他常规载体或辅料以制成不同的剂型,满足不同人群的服用习惯和需求;工艺流程简单,容易推广和成果转化。本申请提供的增强免疫力的蜂胶营养组合物可以广泛应用于制备增强免疫力的保健食品或功能性食品中。

具体实施方式

[0030] 为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚,下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者,按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者,均为可以通过市售购买获得的常规产品。
[0031] 本申请提供了一种增强免疫力的蜂胶营养组合物,其组分按重量份数计包括:蜂胶10-20份、壳聚糖60-70份和鲨鱼软骨粉15-25份。
[0032] 其中,蜂胶中含有黄酮类、萜烯类、醌类、酯类、醇类、醛类、酚类、有机酸类等化学成分,以及大量的基酸、酶类、维生素类、多糖和多种微量元素等。蜂胶具有多种生物学特性,其中发挥重要作用的生物活性物质是黄酮类化合物,包括黄酮类、黄酮醇类和双氢黄酮类等,约占蜂胶的4.13%。
[0033] 蜂胶黄酮能显著增加试验动物血清总蛋白和抗体的合成量,同时显著增强巨噬细胞的吞噬能力,因而对胸腺、脾脏及整个免疫系统都能产生有益的作用,同时蜂胶黄酮能改善补体的成分和人体抗病的自愈能力,使机体免疫机能处于动态平衡的最佳状态。蜂胶对机体免疫系统具有广泛的调节作用,国内外对此已做了大量的报道,它不但能增强体液免疫,还能促进细胞免疫,蜂胶能有效提高巨噬细胞的活性、吞噬能力和抗氧化能力,降低其氧化应激反应,调节其细胞因子的分泌;增加自然杀伤细胞的活性;调节多形核粒细胞的活性,控制其增殖,因而,提高机体的免疫力,使机体免疫功能处于动态平衡的最佳状态。可以说,蜂胶是一种天然高效的免疫增强剂。能刺激机体的免疫机能,增强巨噬细胞的活力,提高机体免疫力。对预防感冒、癌症、衰老和消除老年斑、色素沉积有良好作用。
[0034] 蜂胶能增强机体的非特异性和特异性免疫功能,对调节机体免疫活性具有一定作用。蜂胶增强免疫功能的作用表现为,具有免疫防御、免疫自稳和免疫监视三方面的生理功能,即具有机体对病菌、病毒的抗感染能力,识别和清除自身衰老的组织细胞的能力,杀伤、清除异常突变细胞和抑制恶性肿瘤生长的能力。蜂胶作为天然免疫刺激剂,能强化免疫系统,增强免疫细胞的活力。对免疫系统的中心器官胸腺,蜂胶可促进产生大量T细胞;蜂胶能促进脾脏产生大量淋巴细胞,有丰富的B细胞,可分泌特殊性抗体;对骨髓、淋巴结等整个系统产生有益的影响。
[0035] 壳聚糖具有调解和提高机体免疫力,促进抗体产生和增加机体抗病能力的功能。壳聚糖具有抵抗原性,能使交感和副交感神经取均衡。此外,壳聚糖还能使体液保持正常,从而达到强化体细胞及免疫细胞的目的,提高提高人体免疫力。
[0036] 经发明人研究发现,蜂胶和壳聚糖两者配合,具有增强免疫力的功能,但是这两者的免疫力的增强效果仍然不佳,因此,本申请在蜂胶和壳聚糖的基础上复配了鲨鱼软骨粉。鲨鱼软骨可以抑制鸡胚胎血管化和基质胶诱导的血管生成,抑制乳腺癌和人恶性胶质瘤的生长,阻止乳腺癌和Lewis癌的转移。软骨的这种作用可能与其抑制金属蛋白酶和丝氨酸蛋白酶的作用有关。鲨鱼软骨中的有效成分具有内皮细胞特异性,可以使微血管内皮细胞表面血管生长因子(VEGF)及其受体表达减弱,抑制VEGF的作用。
[0037] 鲨鱼软骨粉指的是鲨鱼的软骨制成的粉末。鲨鱼软骨粉具备促进人体软骨再生,抑制新生血管的天然功效。鲨鱼软骨中含有可以促进人体关节软骨再生的物质,如氨基葡萄糖硫酸软骨素、胶原蛋白等等。这些物质以均衡的比例组成,可以促进人体软骨再生。鲨鱼软骨成分中含有丰富的粘多糖与高效的抑菌酶,以激T、B细胞和巨噬细胞攻击癌细胞的能力,提高机体免疫能力。
[0038] 本申请中,鲨鱼软骨粉是通过如下制备方法制备而成:
[0039] S1、将鲨鱼软骨粉碎,加1.5%浓度的碱溶液浸泡,提取13-15h,固液分离,取提取液;
[0040] S2、向提取液中加入酸溶液调解pH值至8-9,随后加入胰蛋白酶于50-60℃下进行酶解1-2h;
[0041] S3、将酶解液利用进行脱色和除杂;
[0042] S4、取上清液,加入乙醇进行结晶,收集沉淀物,继续向沉淀物中加入过氧化氢进行氧化反应5-6h,随后调节pH至6-7。随后再加入乙醇进行二次结晶,结晶过滤干燥。
[0043] 其中,碱溶液包括但不限于NaOH、KOH、Na2CO3、K2CO3中的一种或多种;酸溶液包括但不限于HCl、H2SO4、HNO3中的一种或多种。
[0044] 具体到本申请中,将鲨鱼软骨粉碎包括先将鲨鱼软骨进行粗粉碎,然后进行冷冻粉碎。冷冻粉碎是在在低温(例如-20℃~-45℃)下进行粉碎,冷冻条件使得鲨鱼软骨的粘性和弹性降低,从而变脆,更容易粉碎。本申请中将鲨鱼软骨进行两次粉碎,获得的粉状物料更容易进行后续的提取。进一步地,本申请中,通过碱溶液对鲨鱼软骨进行浸泡和提取,能够充分将鲨鱼软骨溶解以进行碱提,随后利用胰蛋白酶可以使鲨鱼软骨的细胞间结合处的蛋白降解,这时细胞由于自身内部细胞骨架的张力作用下成为球形,从而使细胞分开,更利于后续的提取工艺。此外,本申请中加入过氧化氢可以破坏蛋白质与鲨鱼硫酸软骨素的共价结合,使蛋白质中的硫酸软骨素游离出来,能有效的去除蛋白质等杂质,提高鲨鱼硫酸软骨素钠的纯度和含量。本申请中采用两次加入乙醇进行结晶,可以显著提高鲨鱼软骨粉的纯度。利用本申请特定的提取工艺提取获得的鲨鱼软骨粉的纯度更佳,批次之间的稳定性佳,其与蜂胶和壳聚糖的复配效果更佳。
[0045] 此外,本申请中不仅仅限定了鲨鱼软骨粉的制备方法,同时还限定了蜂胶的选择,本申请中优选选择黄酮占蜂胶的质量百分数为8%-18%的蜂胶作为主要成分,其有利于进一步增强免疫力。
[0046] 优选地,上述组分按重量份数计包括:蜂胶12-18份、壳聚糖62-68份和鲨鱼软骨粉17-23份。经发明人研究发现,当蜂胶、壳聚糖和鲨鱼软骨粉的配比在上述范围内时,复配效果更佳,协同作用更明显。
[0047] 进一步地,本申请中的组分按重量份数计还包括辅料1-10份;优选地,辅料包括壳寡糖、蜂王浆、蜂花粉、核苷酸、珍珠母粉、灵芝提取物和西洋参提取物中的一种或多种的混合物。当辅料为混合物时,其组成成分的比例均为1:1。
[0048] 本申请提供的增强免疫力的蜂胶营养组合物的剂型为硬胶囊、软胶囊和颗粒剂中的任一种。应理解,上述组分还包括药学上可接受的用于制备硬胶囊、软胶囊和颗粒剂中的任一种的载体。也即是,在将上述主要成分(蜂胶、壳聚糖和鲨鱼软骨粉)制备成不同的剂型时,可以按照常规的工艺添加硬胶囊、软胶囊或颗粒剂在制备工艺中所需的药用辅料或载体等等。
[0049] 本申请中的增强免疫力的蜂胶营养组合物的制备方法简单,其主要成分(蜂胶、壳聚糖和鲨鱼软骨粉)均为粉状,因此在制备时直接混合即可,随后将其作为主料进行常规工艺分别制备硬胶囊、软胶囊和颗粒剂中的任一种。
[0050] 本申请提供的增强免疫力的蜂胶营养组合物可以广泛应用于制备增强免疫力的保健食品或功能性食品中。
[0051] 以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
[0052] 下述实施例中的鲨鱼软骨粉是按照如下方法制备的:
[0053] 先将鲨鱼软骨进行粗粉碎至60目,然后进行冷冻粉碎至100目,向粉碎后的鲨鱼软骨中加入NaOH进行浸泡提取14h,分离提取液;向提取液中加HCl调节pH值至8-9,随后加入胰蛋白酶于55℃下进行酶解1-2h;酶解结束后,将酶解液进行脱色和除杂;随后取上清液加入质量百分数为95%的乙醇进行一次结晶,收集沉淀物,继续向沉淀物中加入过氧化氢进行氧化反应5-6h,反应完成后调节pH至6-7,接着再加入质量百分数为95%乙醇进行二次结晶,结晶过滤干燥。
[0054] 实施例1
[0055] 本实施例提供了一种增强免疫力的蜂胶营养组合物,其组分包括:蜂胶粉15份、壳聚65份和鲨鱼软骨粉20份。
[0056] 实施例2
[0057] 本实施例提供了一种增强免疫力的蜂胶营养组合物,其组分包括:蜂胶10份、壳聚糖70份和鲨鱼软骨粉20份。
[0058] 实施例3
[0059] 本实施例提供了一种增强免疫力的蜂胶营养组合物,其组分包括:蜂胶粉20份、壳聚糖65份和鲨鱼软骨粉15份。
[0060] 实施例4
[0061] 本实施例提供了一种增强免疫力的蜂胶营养组合物,其组分包括:蜂胶粉18份、壳聚糖65份和鲨鱼软骨粉17份,其中,蜂胶中黄酮占蜂胶的质量百分数为12%。
[0062] 实施例5
[0063] 本实施例提供了一种增强免疫力的蜂胶营养组合物,其组分包括:蜂胶12份、壳聚糖63份、鲨鱼软骨粉17份、蜂王浆4份和西洋参提取物4份。
[0064] 实验例1、壳聚糖+蜂胶:增强免疫力功能试验(壳聚糖82%,蜂胶18%,)[0065] 实验样品:硬胶囊,内容物为土黄色粉状,人体推荐量为内容物净重1600mg/人/日。置于阴凉干燥处保存,供实验用。
[0066] 实验动物:选用上海某实验动物有限公司繁殖的18.3-22.4gF1健康雌性小鼠60只,随机分为4组,每组15只,作为Ⅰ组,进行小鼠抗体生成细胞试验。18.0-22.6gF1健康雌性小鼠60只,随机分为4组,每组15只,作为Ⅱ组,进行小鼠廓清试验。18.8-22.1gF1健康雌性小鼠40只,随机分为4组,每组10只,作为Ⅲ组,进行小鼠ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化、NK细胞活性试验。
[0067] 实验剂量:每人(按60kg体重计)每日推荐量为1600mg,相当于26.7mg/d/kg·bw。分别按人体推荐摄入量5倍、10倍、30倍设计三个剂量组即133mg/kg·bw、267mg/kg·bw、
800mg/kg·bw,另设0mg/kg·bw组以水(已消毒)代替受试物,经口每日一次给予小鼠相应剂量的受试物,连续灌胃30d后测各项增强免疫力功能指标。小鼠灌胃量为10mL/kg·bw。
[0068] 试验方法:抗体生成细胞检测(Jerne改良玻片法)、小鼠碳廓清试验、NK细胞活性测定(乳酸脱氢酶测定法)、ConA诱导小鼠脾淋巴细胞转化试验(MTT法)。
[0069] 饲养条件:小鼠在温度为18-22℃、相对湿度为40-70%的屏障系统中饲养。
[0070] 试验结果:
[0071] 1、样品对小鼠体重的影响
[0072] 经口服给予小鼠不同剂量的样品30d,小鼠的体重增长无影响。
[0073] 2、样品对胸腺、脾脏器官的影响
[0074] 经口服给予小鼠不同剂量的样品30d,三个剂量组相比较,差异均无显著性。
[0075] 3、样品对抗体生成细胞(溶血空斑数)的影响
[0076] 由表1结果可见,267mg/kg·bw、800mg/kg·bw组小鼠溶血空斑数明显高于0mg/kg·bw组。
[0077] 表1.样品对溶血空斑的影响
[0078]
[0079] 4、样品对碳廓清作用的影响
[0080] 由表2结果可见,133mg/kg·bw、800mg/kg·bw组小鼠吞噬指数明显高于0mg/kg·bw组。
[0081] 表2.样品对小鼠碳廓清作用的影响
[0082]
[0083] 5、样品对NK细胞活性的影响
[0084] 由表3结果可见,800mg/kg·bw组小鼠NK细胞活性明显高于0mg/kg·bw组。
[0085] 表3.样品对NK细胞活性的影响
[0086]
[0087] 6、样品对ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化的影响
[0088] 由表4结果可见,800mg/kg·bw组小鼠加ConA孔与不加ConA孔吸光度的差值明显高于0mg/kg·bw组。
[0089] 表4.样品对ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化的影响
[0090]
[0091] 结论:样品以133mg/kg·bw、267mg/kg·bw、800mg/kg·bw连续给样30d,结果显示,样品能促进小鼠脾细胞溶血空斑的形成;增强小鼠碳廓清的能力;提高NK细胞活性;能增强脾淋巴细胞的增殖能力。因此认为样品具有增强免疫力的功能。
[0092] 实验例2:壳聚糖+蜂胶+鲨鱼软骨粉:增强免疫力功能试验(壳聚糖65.6%,蜂胶14.4%、鲨鱼软骨粉20%)
[0093] 实验样品:硬胶囊,人体推荐量为内容物净重2.0g/人/日,相当于0.033g/kg·bw/d(人体重量以60kg计)。样品以普通食用色拉油配制成试验所需的浓度。
[0094] 实验动物及分组:雄性昆明种小鼠,清洁级,体重18-22g;雌性BALB/c小鼠,清洁级,体重18-22g。将小鼠随机分为阴性对照组及低、中、高三个剂量组,分别给予普通食用色拉油及样品165mg/kg·bw/d、330mg/kg·bw/d、660mg/kg·bw/d(三个剂量组分别相当于人体推荐摄入量的5倍、10倍和20倍)。所有实验动物均食用全价营养配合饲料,自由摄食饮水。ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化试验和NK细胞活性试验测定采用BALB/c小鼠作为实验动物,其余各项试验采用昆明种小鼠作为实验动物。
[0095] 实验方法:
[0096] 1、ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化试验(MTT法)
[0097] 2、二硝基氟苯诱导小鼠迟发型变态反应试验(肿胀法)
[0098] 3、抗体生成细胞检测(Jerne改良玻片法)
[0099] 4、血清溶血素测定试验(血凝法)
[0100] 5、小鼠碳廓清试验
[0101] 6、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验(半体内法)
[0102] 7、NK细胞活性测定(乳酸脱氢酶测定法)
[0103] 实验结果:
[0104] 1、体重、胸腺/体重比值及脾脏/体重比值
[0105] 样品对各剂量组小鼠的体重、胸腺/体重比值及脾脏/体重比值与阴性对照组相比,差异无显著性(p>0.05)。
[0106] 2、ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化试验(MTT法)
[0107] 对各组加ConA孔与不加ConA孔吸光度差值的均值进行单因素方差分析,组间差异有显著意义(F=5.59,P<0.01)。经Dunnett’s t检验,样品中、高剂量组与阴性对照组比较差异有显著意义(P<0.05)。结果表明,样品在330mg/kg·bw/d和660mg/kg·bw/d(相当于人体推荐摄入量的10倍和20倍)剂量时,具有增强细胞免疫功能的作用。
[0108] 表5.样品对ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化试验的影响
[0109] 组别(mg/kg) 动物数(只) 加与不加ConA孔吸光度的差值0 10 0.049±0.015
165 10 0.056±0.010
330 10 0.067±0.013*
660 10 0.071±0.015*
[0110] *Dunnett’s t检验,与阴性对照组比较差异有显著意义(P<0.05)[0111] 3、抗体生成细胞检测(Jerne改良玻片法)
[0112] 对各组溶血空斑数均值进行单因素方差分析,组间差异有显著意义(F=3.54,P<0.05)。经Dunnett’s t检验,样品高剂量组与阴性对照组比较差异有显著意义(P<0.05)。
结果表明,样品在660mg/kg·bw/d(相当于人体推荐摄入量的20倍)剂量时,具有增强体液免疫功能的作用。
[0113] 表6.样品对溶血空斑数的影响
[0114] 组别(mg/kg) 动物数(只) 溶血空斑数(个/106脾细胞)0 10 234±32.7
165 10 261±39.2
330 10 269±42.0
660 10 289±38.7*
[0115] *Dunnett’s t检验,与阴性对照组比较差异有显著意义(P<0.05)[0116] 4、血清溶血素测定试验(血凝法)
[0117] 对各组抗体积数的均值进行单因素方差分析,组间差异有显著意义(F=4.38,P<0.01)。经Dunnett’s t检验,样品高剂量组与阴性对照组比较差异有显著意义(P<0.05)。
结果表明,样品在660mg/kg·bw/d(相当于人体推荐摄入量的20倍)剂量时,具有增强体液免疫功能的作用。
[0118] 表7.样品对小鼠血清溶血素抗体积数的影响
[0119] 组别(mg/kg) 动物数(只) 抗体积数0 10 32.0±8.92
165 10 39.2±10.15
330 10 42.8±12.38
660 10 49.3±11.80*
[0120] *Dunnett’s t检验,与阴性对照组比较差异有极显著意义(P<0.01)[0121] 5、小鼠碳廓清试验
[0122] 对各组吞噬指数的均值进行单因素方差分析,组间差异有显著意义(F=4.64,P<0.01)。经Dunnett’s t检验,样品高剂量组与阴性对照组比较差异有显著意义(P<0.05)。
结果表明,样品在660mg/kg·bw/d(相当于人体推荐摄入量的20倍)剂量时,具有增强小鼠巨噬细胞吞噬功能的作用。
[0123] 表8.样品对小鼠吞噬指数的影响
[0124]组别(mg/kg) 动物数(只) 耳片重量差值(mg)
0 10 4.79±0.62
165 10 5.11±0.83
330 10 5.35±0.64
660 10 5.92±0.71*
[0125] *Dunnett’s t检验,与阴性对照组比较差异有极显著意义(P<0.01)[0126] 6、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验(半体内法)
[0127] 对各组吞噬率、吞噬指数的均值进行单因素方差分析,组间差异有显著意义(F=4.05,P<0.05;F=4.20,P<0.05)。经Dunnett’s t检验,样品高剂量组与阴性对照组比较差异有显著意义(P<0.05)。结果表明,样品在660mg/kg·bw/d(相当于人体推荐摄入量的
20倍)剂量时,具有增强小鼠巨噬细胞吞噬功能的作用。
[0128] 表9.样品对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率及吞噬指数的影响[0129]组别(mg/kg) 动物数(只) 吞噬率(%) 吞噬指数
0 10 23.8±5.06 0.271±0.041
165 10 25.7±3.80 0.293±0.050
330 10 28.2±4.38 0.313±0.043
660 10 30.1±4.01* 0.337±0.039*
[0130] *Dunnett’s t检验,与阴性对照组比较差异有显著意义(P<0.05)[0131] 实验例3:
[0132] 实验动物及分组:雄性昆明种小鼠,清洁级,体重18-22g;雌性BALB/c小鼠,清洁级,体重18-22g。将小鼠随机分为阴性对照组及实验组1-4,每组10只。人体推荐剂量为2g/人/日。
[0133] 对照组(0mg/kg·bw组以水代替受试物)
[0134] 实验组1(壳聚糖65%+蜂胶15%+预胶化淀粉20%)333.3mg/kg·bw
[0135] 实验组2(鲨鱼软骨粉20%+预胶化淀粉80%)333.3mg/kg·bw
[0136] 实验组3(壳聚糖65%+蜂胶15%+鲨鱼软骨粉20%,即本申请实施例1)333.g/kg·bw
[0137] 实验组4(壳聚糖65%+蜂胶15%+鲨鱼软骨粉20%,其中,鲨鱼软骨粉为市售购买)333.3mg/kg·bw
[0138] (实验组1、2、3和4相当于人体推荐摄入量的10倍)。所有实验动物均食用全价营养配合饲料,自由摄食饮水。
[0139] 实验方法:
[0140] 1、血清溶血素测定试验
[0141] 2、小鼠碳廓清试验
[0142] 3、抗体生成细胞检测
[0143] 实验结果:
[0144] 1、体重、胸腺/体重比值及脾脏/体重比值
[0145] 样品对各剂量组小鼠的体重、胸腺/体重比值及脾脏/体重比值与阴性对照组相比,差异无显著性(p>0.05)。
[0146] 2、样品对小鼠血清溶血素形成的影响
[0147] 表10.样品对小鼠血清溶血素形成的影响
[0148]组别 动物数(只) 半数溶血值
对照组 10 29.23±4.66
实验组1 10 36.06±6.16*
实验组2 10 35.17±6.95*
实验组3 10 118.0±15.5**
实验组4 10 75.78±9.78**
[0149] *与对照组比较差异有显著意义(P<0.05)
[0150] **与对照组比较差异有极显著意义(P<0.01)
[0151] 结果表明,实验组都具有促进小鼠血清溶血素的形成,其中实验组3与对照组相比差异极显著。
[0152] 3、样品对小鼠碳廓清作用的影响
[0153] 表11.样品对小鼠碳廓清作用的影响
[0154]组别 动物数(只) 吞噬指数
对照组 10 6.60±1.00
实验组1 10 7.69±0.76*
实验组2 10 7.58±0.68*
实验组3 10 7.99±0.87**
实验组4 10 7.70±0.75*
[0155] *与对照组比较差异有显著意义(P<0.05)
[0156] **与对照组比较差异有极显著意义(P<0.01)
[0157] 结果表明,实验组都具有增强小鼠碳廓清的能力,其中实验组3与对照组相比差异极显著。
[0158] 4、样品对小鼠抗体生成细胞影响
[0159] 表12.样品对小鼠抗体生成细胞的影响
[0160] 组别 动物数(只) 溶血空斑数(个/106脾细胞)对照组 10 49±20.3
实验组1 10 68±22.6*
实验组2 10 69±21.4*
实验组3 10 99±33.2*
实验组4 10 71±19.2*
[0161] *与对照组比较差异有显著意义(P<0.05)
[0162] 结果表明,实验组都具有促进小鼠脾细胞溶血空斑的形成,其中实验组3效果最明显。
[0163] 结论:实验例3表明实验组1-4均能促进小鼠的免疫作用。其中实验组3强于实验组1、2、4,更强于对照组。证明本申请提供的蜂胶、壳聚糖和鲨鱼软骨粉三者具有协同增效的作用。
[0164] 综上所述,本申请中将蜂胶、壳聚糖和鲨鱼软骨粉进行复配使用,这三者组分能够协同增效,同时达到增强免疫力的目的。本申请将蜂胶、壳聚糖和鲨鱼软骨粉作为主要成分,可以添加其他常规载体或辅料以制成不同的剂型,满足不同人群的服用习惯和需求;工艺流程简单,容易推广和成果转化。本申请提供的增强免疫力的蜂胶营养组合物可以广泛应用于制备增强免疫力的保健食品或功能性食品中。
[0165] 以上所述仅为本发明的优选实施例而已,并不用于限制本发明,对于本领域的技术人员来说,本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
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