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一种复合发酵型海洋功能性制品

阅读:1037发布:2020-05-29

专利汇可以提供一种复合发酵型海洋功能性制品专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种复合 发酵 型海洋功能性制品,属于 生物 技术领域。本 申请 以鲨鱼软骨粉、海藻、海参为原料,集成现代生物分离技术、生物酶解技术、混菌 微生物 发酵技术、海洋生物资源营养调配技术,研制开发出高免疫增强能 力 的海洋功能性制品,其中原料配伍比例为鲨鱼软骨粉100份、海藻10~20份、海参5~10份;混菌好 氧 发酵菌种主要包括 凝结 芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌;本申请所得海洋功能性制品富含 氨 基糖、糖胺聚糖、黄 酮 、皂甙等多种功能活性物质,具有显著的免疫增强功效,而且具有显著的抗 肿瘤 功效,适合中老年消费者群体,是一种新型的高效海洋功能性制品。,下面是一种复合发酵型海洋功能性制品专利的具体信息内容。

1.一种复合发酵型海洋功能性制品,其特征在于海洋功能性制品制备过程中添加海藻和海参,其配伍比例为:鲨鱼软骨粉100份、海藻10~20份、海参5~10份。
2.根据权利要求1所述的一种复合发酵型海洋功能性制品,其特征在于所述原料配伍比例为;鲨鱼软骨粉100份、海藻15份、海参8份。
3.根据权利要求1或2所述的一种复合发酵型海洋功能性制品,其特征在于所述海藻原料进行如下预提取处理:将海藻去除杂质后粉碎,过80-150目筛,然后加入海藻质量比10倍的纯净,在40~60℃条件下浸泡30min;加入海藻质量比2%的纤维素酶,在声波辅助提取2min,超声波功率为250~400W,然后静置30min以上。
4.根据权利要求3所述的一种复合发酵型海洋功能性制品,其特征在于所述海藻是海带、浒苔、尾藻、鼠尾藻中的一种或两种的混合物。
5.根据权利要求3所述的一种复合发酵型海洋功能性制品,其特征在于所述海藻是浒苔和鼠尾藻的混合物,其质量比为2:3。
6.根据权利要求1所述的一种复合发酵型海洋功能性制品,其特征在于所述海参通过如下步骤制备:将加工的新鲜海参内脏用自来水清洗干净,再用天然矿泉水或纯化水洗净沥干待用;匀浆:将上述海参内脏加入高速匀浆机,加入天然矿泉水或纯化水,进行高速匀浆,直至全部能够通过2mm孔径圆筛;将匀浆后的海参内脏通过高压蒸锅灭菌,冷却后待用。
7.根据权利要求3所述的一种复合发酵型海洋功能性制品,其特征在于所述海洋功能性制品通过好发酵和二步厌氧发酵工艺制备,具体工艺包括:
(1)发酵液制备:将粉碎后的鲨鱼软骨粉与预处理后的海藻酶解液、海参浆液混合,加入10倍的纯净水,然后加入发酵液质量比0.15~0.20% (NH4)2SO4、0.10~0.15% KH2PO4、
0.1%MgSO4;
(2)灭菌:在121℃条件下灭菌15min;
(3)好氧发酵:向发酵液中加入发酵液质量比2~3%的复合生物菌剂,在28~35℃条件下好氧发酵6~12h;
(4)厌氧发酵:好氧发酵结束后加入1~2%的嗜酸乳杆菌菌粉,在28~35℃条件下厌氧发酵8~16h;
(5)过滤:进行粗过滤除去发酵菌体;
(6)离心:以10000r/min速率离心分离,分离上清液;
(7)陈酿:为促进功能性制品的稳定和澄清,在0~10℃条件下陈酿10~20d;
(8)复配:加入1~1.5g/L木糖醇、1~2g/L低聚异麦芽糖、5~10g/L柠檬酸、5~10g/L乳酸、3~5g/L蔗糖
(9)膜过滤:用孔径为0.15μm的微孔膜过滤海洋功能性制品;
(10)无菌灌装:在无菌灌装生产线中灌装封口制得复合发酵型海洋功能性制品。
8.根据权利要求6所述的一种复合发酵型海洋功能性制品,其特征在于所述步骤(3)中的复合微生物菌剂为凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌的混合菌,其接种量量比为1:2:1。
9.根据权利要求8所述的一种复合发酵型海洋功能性制品,其特征在于所述复合微生物菌剂种子液制备方法为:在无菌条件下,采用LB培养基在28~32℃条件下培养24h,分别制得液体凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌种子液,要求种子液的有效活菌数≥109cfu/mL;然后将三种芽孢杆菌的种子液按比例混合。
10.根据权利要求7所述的一种复合发酵型海洋功能性制品,其特征在于所述步骤(6)中离心后的上清液可以浓缩后用于制备任何剂型的保健品。

说明书全文

一种复合发酵型海洋功能性制品

技术领域

[0001] 本发明涉及一种复合发酵型海洋功能性制品,尤其是一种利用生物协同发酵制备高免疫保健功效的海洋功能性制品,属于生物技术领域。

背景技术

[0002] 鲨鱼是世界上最古老、最长寿的深海海洋生物之一,在地球上已生存了四亿年之久,它具有完善免疫系统,生命极强,几乎不被疾病感染,即使受到外伤,伤口也能很快复原,鲨鱼患癌症的几率约为1/百万。我国鲨鱼药用始见于《本草经集注》,其软骨主要由软骨细胞和含有胶原纤维及大量蛋白多糖和细胞外基质构成,从鲨鱼软骨中提取的多糖在临床上主要用于治疗神经痛、偏头痛、腹腔手术后疼痛等。在欧、美、日等发达国家,鲨鱼软骨多糖作为保健食品或保健药品长期应用于防治冠心病、心绞痛、心肌梗死等疾病,无明显的毒副作用。近年来研究表明鲨鱼软骨中除富含、磷、镁等矿物质外,还含有多种粘多糖及硫酸软骨素,具有显著的抗凝血、降血脂、抗病毒和抗肿瘤等功用,是不可多得的天然食品资源。由于鲨鱼软骨粉具备促进人体软骨再生,抑制新生血管的天然功效,因此鲨鱼软骨粉是一种优良的补钙原料。近年来,鲨鱼翅骨粉保健食品开发得到快速发展,但仍存在保健产品原料单一、功能活性成分无法充分利用、产品食用不便等缺陷,制约鲨鱼翅骨粉保健食品产业可持续发展。
[0003] 本发明以鲨鱼软骨粉为组方基础,配伍海藻、海参等原料,利用复合微生物菌剂与具有保健治疗作用的中药进行复合型发酵,制备一种全新的具有鲨鱼软骨粉、海藻、海参等海洋生物资源多重健康作用的海洋功能性制品,拓展了中鲨鱼软骨粉、海藻等海洋生物资源的应用途径,既保重复发挥其营养保健功效,克服目前鲨鱼软骨粉多直接食用造成营养消化率低、海藻资源化利用生产工艺复杂生产成本高的技术弊端。

发明内容

[0004] 为了克服上述现有技术的不足,实现鲨鱼软骨粉等海洋生物资源的功能活性物质高效提取及抗化能力显著提升,本申请提供一种复合发酵型海洋功能性制品,集成现代生物分离技术、生物酶解技术、混菌微生物发酵技术、海洋生物资源营养调配技术,研制开发出高免疫增强能力的海洋功能性制品,满足保健、医疗、食品等领域对海洋生物功能活性成分的应用需求,该工艺技术发酵工艺简单高效、所得产品免疫增强能力强,并具有显著的抗肿瘤功效,生产成本低,易于工业化规模生产。
[0005] 本发明通过下述技术方案实现上述技术效果:一种复合发酵型海洋功能性制品,其特征在于海洋功能性制品制备过程中添加海藻和海参,其配伍比例为:鲨鱼软骨粉100份、海藻10~20份、海参5~10份。
[0006] 优选的,上述原料的配伍比例为;鲨鱼软骨粉100份、海藻15份、海参8份。
[0007] 上述海藻原料进行如下预提取处理:将海藻去除杂质后粉碎,过80-150目筛,然后加入海藻质量比10倍的纯净,在40~60℃条件下浸泡30min;加入海藻质量比2%的纤维素酶,在声波辅助提取2min,超声波功率为250~400W,然后静置30min以上。
[0008] 上述海藻是海带、浒苔、尾藻、鼠尾藻中的一种或两种的混合物。
[0009] 优选的,海藻是浒苔和鼠尾藻的混合物,其质量比为2:3。
[0010] 上述海参通过如下步骤制备:将加工的新鲜海参内脏用自来水清洗干净,再用天然矿泉水或纯化水洗净沥干待用;匀浆:将上述海参内脏加入高速匀浆机,加入天然矿泉水或纯化水,进行高速匀浆,直至全部能够通过2mm孔径圆筛;将匀浆后的海参内脏通过高压蒸锅灭菌,冷却后待用。
[0011] 本申请提供一种复合发酵型海洋功能性制品,其特征在于通过好氧发酵和二步厌氧发酵工艺制备,具体工艺包括:(1)发酵液制备:将粉碎后的鲨鱼软骨粉与预处理后的海藻酶解液、海参浆液混合,加入10倍的纯净水,然后加入发酵液质量比0.15~0.20% (NH4)2SO4、0.10~0.15% KH2PO4、
0.1%MgSO4;
(2)灭菌:在121℃条件下灭菌15min;
(3)好氧发酵:向发酵液中加入发酵液质量比2~3%的复合微生物菌剂,在28~35℃条件下好氧发酵6~12h;
(4)厌氧发酵:好氧发酵结束后加入1~2%的嗜酸乳杆菌菌粉,在28~35℃条件下厌氧发酵8~16h;
(5)过滤:进行粗过滤除去发酵菌体;
(6)离心:以10000r/min速率离心分离,分离上清液;
(7)陈酿:为促进功能性制品的稳定和澄清,在0~10℃条件下陈酿10~20d;
(8)复配:加入1~1.5g/L木糖醇、1~2g/L低聚异麦芽糖、5~10g/L柠檬酸、5~10g/L乳酸钙、3~5g/L蔗糖
(9)膜过滤:用孔径为0.15μm的微孔膜过滤海洋功能性制品;
(10)无菌灌装:在无菌灌装生产线中灌装封口制得复合发酵型海洋功能性制品。
[0012] 上述步骤(3)中的复合微生物菌剂为凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌的混合菌,其接种量量比为1:2:1。
[0013] 上述复合微生物菌剂种子液制备方法为:在无菌条件下,采用LB培养基在28~32℃条件下培养24h,分别制得液体凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌种子液,要求种子液的有效活菌数≥109cfu/mL;然后将三种芽孢杆菌的种子液按比例混合。
[0014] 进一步的,上述步骤(6)中离心后的上清液可以浓缩后用于制备任何剂型的保健品,如保健胶囊、保健口服液等。
[0015] 本发明提供一种复合发酵型海洋功能性制品,所得海洋功能性制品富含基糖、糖胺聚糖、黄、皂甙等多种功能活性物质,具有显著的免疫增强功效,而且具有显著的抗肿瘤功效,适合中老年消费者群体。
[0016] 本发明提供一种复合发酵型海洋功能性制品,与现有技术相比,具有以下显著优势:(1)本申请科学配伍鲨鱼软骨粉、海藻和海参,既可以充分利用海藻、海参等中草药对微生物的促生长作用;又通过鲨鱼软骨粉、海藻、海参间的协同作用显著提升海洋功能性制品的免疫增强功效,实验结果表明上述原料间的协同作用是复合微生物发酵取得预料不到功效的主要原因;
(2)本申请利用好氧菌(凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌)共同发酵海洋生物资源制备功能性制品,充分利用微生物间的协同作用,提升海洋功能性制品的提取率和体外抗氧化能力;多菌种混合发酵不仅提高了功能性制品的营养特性,而且通过微生物间的发酵作用提升了海洋功能性制品的口感;
(3)本申请通过好氧发酵和二步厌氧发酵显著提升了海洋功能性制品的功能性,取得了“1+1>2”的技术效果;
(4)本发明采用海洋生物资源混菌二步发酵,显著提升了活性成分的提取率和产品营养保健功效,实验结果表明在此工艺条件制备的海洋功能性生物制品较海洋生物资源单一发酵免疫增强功效显著提升,具有显著的营养保健功效。

具体实施方式

[0017] 以下实施例中复合微生物菌剂活化方法均采用以下工艺制备:在无菌条件下,采用LB培养基在28~32℃条件下培养24h,分别制得液体凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌种子液,要求种子液的有效活菌数≥109cfu/mL;然后将三种芽孢杆菌的种子液按1:2:1的比例混合。
[0018] 以下实施例中海藻原料均采用以下工艺预处理:将海藻去除杂质后粉碎,过80-150目筛,然后加入海藻质量比10倍的纯净水,在40~60℃条件下浸泡30min;加入海藻质量比2%的纤维素酶,在超声波辅助提取2min,超声波功率为250~400W,然后静置30min以上。
[0019] 以下实施例中海参浆液通过如下工艺制备:将加工的新鲜海参内脏用自来水清洗干净,再用天然矿泉水或纯化水洗净沥干待用;匀浆:将上述海参内脏加入高速匀浆机,加入天然矿泉水或纯化水,进行高速匀浆,直至全部能够通过2mm孔径圆筛;将匀浆后的海参内脏通过高压蒸锅灭菌,冷却后待用。
[0020] 实施例1一种复合发酵型海洋功能性制品,具体工艺步骤包括:
(1)鲨鱼软骨粉100份、海藻16份、海参8份;所述海藻是浒苔和鼠尾藻的混合物,其质量比为2:3;
(2)发酵液制备:将粉碎后的鲨鱼软骨粉与预处理后的海藻酶解液、海参浆液混合,加入10倍的纯净水,然后加入发酵液质量比0.15~0.20% (NH4)2SO4、0.10~0.15% KH2PO4、
0.1%MgSO4;
(3)灭菌:在121℃条件下灭菌15min;
(4)好氧发酵:向发酵液中加入发酵液质量比3%的复合微生物菌剂,在28~35℃条件下好氧发酵12h;
(5)厌氧发酵:好氧发酵结束后加入2%的嗜酸乳杆菌菌粉,在28~35℃条件下厌氧发酵
16h;
(6)过滤:进行粗过滤除去发酵菌体;
(7)离心:以10000r/min速率离心分离,分离上清液;
(8)陈酿:为促进功能性制品的稳定和澄清,在0~10℃条件下陈酿10~20d;
(9)复配:加入1.2g/L木糖醇、1.5g/L低聚异麦芽糖、6g/L柠檬酸、8g/L乳酸钙、4g/L蔗糖;
(10)膜过滤:用孔径为0.15μm的微孔膜过滤海洋功能性制品;
(11)无菌灌装:在无菌灌装生产线中灌装封口制得复合发酵型海洋功能性制品。
[0021] 实施例2一种复合发酵型海洋功能性制品,具体工艺步骤包括:
(1)鲨鱼软骨粉100份、浒苔16份、海参8份;
(2)发酵液制备:将粉碎后的鲨鱼软骨粉与预处理后的海藻酶解液、海参浆液混合,加入10倍的纯净水,然后加入发酵液质量比0.15~0.20% (NH4)2SO4、0.10~0.15% KH2PO4、
0.1%MgSO4;
(3)灭菌:在121℃条件下灭菌15min;
(4)好氧发酵:向发酵液中加入发酵液质量比3%的复合微生物菌剂,在28~35℃条件下好氧发酵12h;
(5)厌氧发酵:好氧发酵结束后加入2%的嗜酸乳杆菌菌粉,在28~35℃条件下厌氧发酵
16h;
(6)过滤:进行粗过滤除去发酵菌体;
(7)离心:以10000r/min速率离心分离,分离上清液;
(8)陈酿:为促进功能性制品的稳定和澄清,在0~10℃条件下陈酿10~20d;
(9)复配:加入1.2g/L木糖醇、1.5g/L低聚异麦芽糖、6g/L柠檬酸、8g/L乳酸钙、4g/L蔗糖;
(10)膜过滤:用孔径为0.15μm的微孔膜过滤海洋功能性制品;
(11)无菌灌装:在无菌灌装生产线中灌装封口制得复合发酵型海洋功能性制品。
[0022] 实施例3一种复合发酵型海洋功能性制品,具体工艺步骤包括:
(1)鲨鱼软骨粉100份、鼠尾藻16份、海参8份;
(2)发酵液制备:将粉碎后的鲨鱼软骨粉与预处理后的海藻酶解液、海参浆液混合,加入10倍的纯净水,然后加入发酵液质量比0.15~0.20% (NH4)2SO4、0.10~0.15% KH2PO4、
0.1%MgSO4;
(3)灭菌:在121℃条件下灭菌15min;
(4)好氧发酵:向发酵液中加入发酵液质量比3%的复合微生物菌剂,在28~35℃条件下好氧发酵12h;
(5)厌氧发酵:好氧发酵结束后加入2%的嗜酸乳杆菌菌粉,在28~35℃条件下厌氧发酵
16h;
(6)过滤:进行粗过滤除去发酵菌体;
(7)离心:以10000r/min速率离心分离,分离上清液;
(8)陈酿:为促进功能性制品的稳定和澄清,在0~10℃条件下陈酿10~20d;
(9)复配:加入1.2g/L木糖醇、1.5g/L低聚异麦芽糖、6g/L柠檬酸、8g/L乳酸钙、4g/L蔗糖;
(10)膜过滤:用孔径为0.15μm的微孔膜过滤海洋功能性制品;
(11)无菌灌装:在无菌灌装生产线中灌装封口制得复合发酵型海洋功能性制品。
[0023] 实施例4:一种复合发酵型海洋功能性制品,具体工艺步骤包括:
(1)鲨鱼软骨粉100份、海藻16份、海参8份;所述海藻是浒苔和鼠尾藻的混合物,其质量比为3:2;
(2)发酵液制备:将粉碎后的鲨鱼软骨粉与预处理后的海藻酶解液、海参浆液混合,加入10倍的纯净水,然后加入发酵液质量比0.15~0.20% (NH4)2SO4、0.10~0.15% KH2PO4、
0.1%MgSO4;
(3)灭菌:在121℃条件下灭菌15min;
(4)好氧发酵:向发酵液中加入发酵液质量比3%的复合微生物菌剂,在28~35℃条件下好氧发酵12h;
(5)厌氧发酵:好氧发酵结束后加入2%的嗜酸乳杆菌菌粉,在28~35℃条件下厌氧发酵
16h;
(6)过滤:进行粗过滤除去发酵菌体;
(7)离心:以10000r/min速率离心分离,分离上清液;
(8)陈酿:为促进功能性制品的稳定和澄清,在0~10℃条件下陈酿10~20d;
(9)复配:加入1.2g/L木糖醇、1.5g/L低聚异麦芽糖、6g/L柠檬酸、8g/L乳酸钙、4g/L蔗糖;
(10)膜过滤:用孔径为0.15μm的微孔膜过滤海洋功能性制品;
(11)无菌灌装:在无菌灌装生产线中灌装封口制得复合发酵型海洋功能性制品。
[0024] 实施例5 不同工艺条件对海洋功能性制品免疫增强能力的影响1、指标测定方法
根据张秀娟等《鲨鱼软骨粉对S180荷瘤小鼠免疫细胞调节功能的影响》文中所述试验方法测定本申请海洋功能性制品对对S180荷瘤小鼠脾淋巴细胞增殖功能和吞噬细胞吞噬活性的影响。
[0025] 2、试验方法及分组小鼠随机分成13组,试验组海洋功能性制品灌胃给予100mg·kg-1,阴性对照组给予同体积生理盐水,每组10只。无菌抽取接种第7天的生长良好的S180荷瘤小鼠腹水(活细胞数>
97%),生理盐水1∶3稀释,按0.2mL/只,小鼠右前腋皮下接种。接种24 h后给药,1次/d,连续给药10d,停药次日眼球采血
分组方法为:实施例1-4组分别灌胃实施例1-3所述海洋功能性制品;对照1组灌胃实施例1中未经厌氧发酵的海洋功能性制品;对照2组灌胃实施例1中未经好氧发酵的海洋功能性制品;对照3组灌胃实施例2中未经厌氧发酵的海洋功能性制品;对照4组灌胃实施例2中未经好氧发酵的海洋功能性制品;对照5组灌胃实施例3中未经厌氧发酵的海洋功能性制品;对照6组灌胃实施例3中未经好氧发酵的海洋功能性制品;对照7组灌胃实施例4中未经厌氧发酵的海洋功能性制品;对照8组灌胃实施例4中未经好氧发酵的海洋功能性制品;试验方法均相同。
[0026] 3、试验结果表1 不同工艺条件对海洋功能性制品营养保健能力的影响
试验组别 A570值 A490值
阴性对照组 0.2321 0.7788
实施例1试验组 0.5988 1.5822
实施例2试验组 0.5213 1.5299
实施例3试验组 0.5032 1.4724
实施例4试验组 0.5419 1.5023
对照1组 0.4521 1.2953
对照2组 0.3349 0.8867
对照3组 0.4602 1.3124
对照4组 0.3327 0.9223
对照5组 0.4712 1.3873
对照6组 0.3523 0.9568
对照7组 0.4815 1.3812
对照8组 0.3613 0.9656
实施例4试验结果表明,海洋生物资源原料间的配伍及发酵菌种间的协同作用对复方海洋功能性制品营养保健性能有着显著的影响。
[0027] 以上实施例仅用于说明本发明的技术方案,而非对其进行限制;尽管参照前述实施例对被发明进行了详细的说明,但对于本领域的普通技术人员来说,依然可以对前述实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分技术特征进行等同替换;而对这些修改或者替换,并不使相应技术方案的本质脱离本发明所要求保护的技术方案的精神和范围。
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