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一种低重金属含量姬松茸的栽培工艺

阅读:390发布:2020-05-08

专利汇可以提供一种低重金属含量姬松茸的栽培工艺专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且一种低重金属含量姬松茸的栽培工艺,包括以下步骤:步骤一:将混合基料和 粪便 发酵 后铺料,将混合菌种播撒在混合基料中后喷洒 抑制剂 ,得到混合培养料;步骤二:将所述混合培养料与所述混合基料与粪便混合均匀进行二次发酵,得到再发酵基料;步骤三:将所述再发酵基料铺料, 播种 后覆膜培养;步骤四:待覆膜培养至菌丝发至料厚的1/2-3/4时覆土培养;步骤五:在控制 温度 为18-28℃、湿度80-85%的条件下培养至出菇;上述混合菌种包括黄孢原毛平革菌、三色革裥菌、拟虫蜡菌中的一种或多种;上述抑制剂为二 氧 化氯溶液。本 发明 通过在播种姬松茸前联用混合菌种、抑制剂的方法,既能保持姬松茸的高产量,也能明显降低姬松茸的铬含量,得到的产品 质量 好、质量高。,下面是一种低重金属含量姬松茸的栽培工艺专利的具体信息内容。

1.一种低重金属含量姬松茸的栽培工艺,其特征在于,包括以下步骤:
步骤一:将混合基料和粪便发酵后平铺至菇床上,将混合菌种均匀播撒在混合基料中待菌丝发至料厚1/4-1/3,喷洒抑制剂2-15h后升温至70-75℃,保持10-25h,得到混合培养料;
步骤二:然后将所述混合培养料与所述混合基料与粪便混合均匀进行二次发酵,得到再发酵基料;
步骤三:将所述再发酵基料平铺于畦床上,播种,而后覆膜培养;
步骤四:待覆膜培养至菌丝发至料厚的1/2-3/4时即可覆土培养;
步骤五:出菇阶段:在控制温度为18-28℃、湿度80-85%的条件下培养至出菇;
所述混合菌种包括黄孢原毛平革菌、三色革裥菌、拟虫蜡菌中的一种或多种;
所述抑制剂为二化氯溶液。
2.根据权利要求1所述的一种低重金属含量姬松茸的栽培工艺,其特征在于,所述混合基料包括稻草、木屑、玉米芯、麸皮、籽壳、麦秸、豆类作物秸秆、甘蔗渣、尿素、消石灰、石膏粉、中的一种或多种;所述粪便选自禽类粪便和/或畜类粪便。
3.根据权利要求1所述的一种低重金属含量姬松茸的栽培工艺,其特征在于,所述步骤一中发酵过程中发酵温度为65-70℃,中间翻堆2-5次。
4.根据权利要求1所述的一种低重金属含量姬松茸的栽培工艺,其特征在于,所述步骤二中二次发酵过程中发酵温度为60-68℃,中途翻堆1-5次;翻堆时,控制量为60-65%,调节pH为6.5-8.0。
5.根据权利要求1所述的一种低重金属含量姬松茸的栽培工艺,其特征在于,所述步骤三中播种的接种量为每平方米接种1-3瓶250ml的姬松茸菌种。
6.根据权利要求1所述的一种低重金属含量姬松茸的栽培工艺,其特征在于,所述混合菌种的活菌浓度为:1-8*108cfu/ml黄孢原毛平革菌、0-8*108cfu/ml三色革裥菌、0-8*
108cfu/ml拟虫蜡菌。
7.根据权利要求6所述的一种低重金属含量姬松茸的栽培工艺,其特征在于,所述混合菌种的处理方法包括:(1)将分别经固体培养、液体培养的菌丝球浸泡在酸性甲溶液中
40-90min后过滤;(2)依次用去离子水、Na2CO3溶液洗去菌丝球表面多余的化学试剂;(3)将菌丝球浸入去离子水中20-40min;(4)用去离子水淋洗菌丝球至滤液成中性。
8.根据权利要求7所述的一种低重金属含量姬松茸的栽培工艺,其特征在于,所述酸性甲醛溶液中盐酸:甲醛 =1:3-5。
9.根据权利要求1所述的一种低重金属含量姬松茸的栽培工艺,其特征在于,所述抑制剂中二氧化氯浓度为50-200mg/L。

说明书全文

一种低重金属含量姬松茸的栽培工艺

技术领域

[0001] 本发明属于菌类栽培技术领域,具体涉及一种低重金属含量姬松茸的栽培工艺。

背景技术

[0002] 姬松茸(Agaricus blazei Murill.)又名巴西蘑菇,属于担子亚,层菌纲,伞菌目,蘑菇科,蘑菇属,是一种珍惜的食(药)用菌。姬松茸是一种中温型食用菌,子实体粗壮,多数单生,少数丛生;菌盖斗笠状或半球形,直径5-10cm,表面浅褐色到棕褐色,覆有纤维状鳞片;菌肉肥厚、鲜嫩;菌柄近圆柱状、中实、白色,基部稍膨大,柄长一般4-15cm,直径1-3cm;孢子暗褐色、光滑、阔椭圆形或球形,没有芽孔,菌丝没有状联合;生长在PDA斜面培养基上菌丝洁白而浓密,气生菌丝多,长满斜面后在管壁与斜面接触处形成许多乳白色扭结。姬松茸是粪草腐生菌栽培的主要源为麦草、稻草、玉米秆等农作物秸秆以及芦苇、九节芒等多年生高大禾草;主要氮源为粪、羊粪、粪、鸡粪等畜禽粪便
[0003] 姬松茸子实体(可食用部分)含有丰富的多糖、核酸、甾醇等多种活性物质以及人体必需的多种基酸、脂肪酸、矿物质和微量元素等成分,具有抗癌、降血脂、降血压、治疗糖尿病、维护肝功能及改善动脉硬化等功效,目前是联合国粮农组织向全世界推荐发展的食用菌主要品种。自1992年起,我国从日本引进姬松茸菌种,现在福建、浙江、江苏、湖北等地人工栽培成功,并自1994年开始出口姬松茸干品及其加工产品,主要出口国是美国、巴西,在日本尤为畅销。姬松茸的产业前景较好,然而其菇体极易吸收培养料及土壤中的重金属,使产品因重金属超标而受阻,尤以镉含量超标为甚。镉是动物和植物的非必需元素,是毒性较大的重金属之一,镉在植物体内的积累超标,是通过食物链污染直接或间接影响到人类的生命和健康。镉在人体和动物中的富集,不仅引起贫血、高血压、肾损害,以及对生殖细胞的选择性毒害作用,还使骨骼的生长代谢受阻,从而造成骨质疏松、萎缩、变形等,直接影响人体健康。
[0004] 申请号为CN107548884A的文件公开了一种降低姬松茸重金属含量的栽培方法,通过基料的制作、接种盖膜、出菇前管理、出菇管理四个步骤完成姬松茸的栽培,通过搭配合理的基料,并将基料与膨润土肥和硫酸锌进行配伍使用,从而抑制姬松茸对重金属的吸收作用,但是该方法通过竞争机制抑制姬松茸对重金属的吸收,其降低姬松茸重金属含量的作用有限,得到的姬松茸产品仍含有高含量的重金属。

发明内容

[0005] 针对上述存在的问题,本发明的目的是提供低一种重金属含量姬松茸的栽培工艺,通过在播种姬松茸前联用混合菌种、抑制剂的方法,既能保持姬松茸的高产量,也能明显降低姬松茸的铬含量,得到的产品质量好、质量高。
[0006] 为了实现上述目的,本发明的技术方案如下:一种重金属含量姬松茸的栽培工艺,包括以下步骤:
步骤一:将混合基料和粪便发酵后平铺至菇床上,将混合菌种均匀播撒在混合基料中待菌丝发至料厚1/4-1/3,喷洒抑制剂2-15h后升温至70-75℃,保持10-25h,得到混合培养料;
步骤二:然后将所述混合培养料与所述混合基料与粪便混合均匀进行二次发酵,得到再发酵基料;
步骤三:将所述再发酵基料平铺于畦床上,播种,而后覆膜培养;
步骤四:待覆膜培养至菌丝发至料厚的1/2-3/4时即可覆土培养;
步骤五:出菇阶段:在控制温度为18-28℃、湿度80-85%的条件下培养至出菇;
上述混合菌种包括黄孢原毛平革菌、三色革裥菌、拟虫蜡菌中的一种或多种;
上述抑制剂为二化氯溶液。
[0007] 在本方案设计中,不采用常用的改良剂如钙镁磷、硅钙肥、硫酸锌等以与镉竞争进行姬松茸体内作为主要降低姬松茸中铬含量的手段,原因在于经本发明人研究证明有的改良剂在降低姬松茸铬含量的同时,也同时降低姬松茸的产量;同时经本发明人研究证明一部分镉离子通过与细胞内的钙离子、镁离子进行离子交换的机理而进入到细胞内,而改良剂中的钙离子、镁离子由于细胞内外离子浓度差异较小,进入细胞内困难,无法与镉离子竞争进入细胞内部,因此抑制镉离子吸附的效果不佳。本方案采用白腐真菌混合菌种先对基料中的镉离子进行吸附,然后再进行姬松茸菌的播种,在白腐真菌中的镉离子因与蛋白质等大分子络合而沉积在真菌内无法再被吸附,可大大减少基料中镉离子的总量,从而降低姬松茸中的镉离子含量。
[0008] 在本方案设计中的机理包括:一,黄孢原毛平革菌、三色革裥菌、拟虫蜡菌都是担子真菌属,它们的吸附机理包括两个吸附过程:主动吸附过程,镉离子等重金属离子与真菌细胞壁表面上的各种官能团结合;主动吸附过程,主动吸附过程缓慢,被吸附的镉离子等重金属离子通过细胞壁扩散进入细胞内,与细胞代谢有关,这表明混合菌种在接种一段时间后即可主动使其细胞失活死亡,减少混合真菌对营养物质的耗损,而混合真菌仍可继续进行被动吸附过程,且死细胞的吸附量不比活细胞的吸附量少,从而减少培养料中镉等重金属离子;二,使用黄孢原毛平革菌、三色革裥菌、拟虫蜡菌都可外分泌漆酶,而漆酶不仅具有降解木质素的作用,还可与环境污染物作用,具有去除毒性的作用,即可起到去除培养料中有毒物质的作用,也可帮助姬松茸将难分解的木质素进行预分解处理,使姬松茸更好利用培养料中的营养物质;三,死去的混合真菌可作为姬松茸的营养物质被进一步分解利用,且由于在混合真菌内的镉等重金属离子已被络合成大分子物质,不易再进入姬松茸体内被姬松茸富集;四,本混合菌种采用多种担子真菌混合,目的是使混合菌种在播种后有互相竞争抑制的作用,防止真菌过度生长消耗培养料中的营养物质,甚至抑制姬松茸的生长;五,本发明采用无害、不产生致癌物质的广谱环保型稳定性二氧化氯溶液作为主要用于杀灭混合菌种的抑制剂, 其杀菌能强、对人体、动物没有危害且对环境不会造成二次污染,并且还能消除培养料中的臭味、异味,因此是本方案中的优选抑制剂。
[0009] 优选地,混合基料包括稻草、木屑、玉米芯、麸皮、籽壳、麦秸、豆类作物秸秆、甘蔗渣、尿素、消石灰、石膏粉、碳酸钙中的一种或多种;所述粪便选自禽类粪便和/或畜类粪便。
[0010] 本方案设计中部分增加担子真菌的主要碳源,用于混合菌种的培养,减少混合菌种与姬松茸竞争碳源。
[0011] 优选地,步骤一中发酵过程中发酵温度为65-70℃,中间翻堆2-5次。
[0012] 优选地,步骤二中二次发酵过程中发酵温度为60-68℃,中途翻堆1-5次;翻堆时,控制量为60-65%,调节pH为6.5-8.0。
[0013] 优选地,步骤三中播种的接种量为每平方米接种1-3瓶250ml的姬松茸菌种。
[0014] 优选地,混合菌种的活菌浓度为:1-8*108cfu/ml黄孢原毛平革菌、0-8*108cfu/ml三色革裥菌、0-8*108cfu/ml拟虫蜡菌。
[0015] 进一步优选地,混合菌种的处理方法包括:(1)将分别经固体培养、液体培养的菌丝球浸泡在酸性甲溶液中40-90min后过滤;(2)依次用去离子水、0.2%的Na2CO3溶液洗去菌丝球表面多余的化学试剂;(3)将菌丝球浸入去离子水中20-40min;(4)用去离子水淋洗菌丝球至滤液成中性。
[0016] 经本发明人研究发现,未经前处理的混合菌种吸附镉离子的效果较低,本发明采用甲醛交联-处理用于提高混合菌种的吸附能力:碱处理能改变真菌细胞壁上某些成分的化学结构,并且可溶解细胞上一些不利于吸附的物质,从而暴露出细胞上更多的活性结合位置,从而使吸附量增大;而甲醛交联可通过与真菌表面蛋白质及酶中的游离氨基发生反应,使菌丝球形成多孔网状结构,从而提高菌种菌丝球的机械性能。
[0017] 进一步优选地,酸性甲醛溶液中37%盐酸:37%甲醛 =1:3-5。
[0018] 进一步地,抑制剂中二氧化氯浓度为50-200mg/L。
[0019] 本发明具有以下有益效果:本发明利用混合菌种的主动吸附及被动吸附过程吸附培养基料中的镉离子等重金属离子并配合抑制剂对培养基料进行前处理,大大降低了土壤中游离镉离子等重金属离子的总量,使姬松茸内富集的镉离子等重金属离子含量大大降低,提高了姬松茸的品质;同时对菌种栽培工艺进行优化,获得的产品产量高、品质好。

具体实施方式

[0020] 实施例1一种低重金属含量姬松茸的栽培工艺,
其培养料配方包括:稻草250kg、玉米芯125kg、干牛粪100kg、麸皮10kg、消石灰10kg、尿素5kg。
[0021] 其混合菌种为液体菌剂,容量250ml,每瓶中的活菌包括:黄孢原毛平革菌(8*108cfu/ml)、三色革裥菌(4*108cfu/ml)、拟虫蜡菌(1*108cfu/ml)。
[0022] 其混合菌种的处理步骤如下:a.固体培养:配制固体培养基,制成斜面后接种,放入恒温培养箱中培养5d,产生大量孢子;b.液体培养:配制液体培养基,用NH4OH和HCl溶液调节pH值为4.5后,在125℃下灭菌20min,将预先制备好的孢子悬液按10%的比例接种到液体培养基中;c.菌丝球培养:将已接种的液体培养基于气浴恒温振荡器上在39℃和150rpm下培养3d;d.甲醛交联-碱处理:过滤菌丝球,将菌丝球浸泡在酸性甲醛溶液(37%的甲醛与37%的盐酸以5:1的体积比混合)中60min,然后过滤,依次用去离子水、0.2%的Na2CO3溶液洗去菌丝球表面多余的化学试剂;然后浸在去离子水中30min,再用去离子水淋洗若干次,直至滤液呈中性。
[0023] 其工艺包括以下步骤:(1)培养料发酵:建堆前将稻草、玉米芯、麸皮等原料预湿浸泡3h,捞起预堆3d,然后打碎混合;牛粪提前打碎,加适量水搅拌预堆2d。
[0024] (2)建堆:将打碎后的稻草、玉米芯、麸皮混合均匀,铺料前在地面上用砖或水泥垫起20cm,然后先铺一层混合基料,再撒上一层石灰粉,将牛粪撒在内层,然后再铺混合基料,如此一层一层对制,料宽60cm,料高30cm,每隔1.2m埋上圆形段木,堆好后拔出让其通气,最外层撒上石灰,注意防、避雨。
[0025] (3)发酵翻堆:建堆时培养料含水量不能太低,手握能滴下水为适;建堆后每天测定料堆中央温度,当温度升至65℃以上时,经4d,进行第一次翻堆,翻堆时将培养料内外置换。若料水分较少,补加水,使料手握能滴下3-4滴水;5d后进行第二次翻堆,如此按4、4、3d的间隔时间进行第三次、第四次、第五次翻堆。发酵好的培养料呈棕褐色,无氨味、臭味和酸味,水分适当,pH4.5左右。
[0026] (4)第一次播种:把混合菌种分成花生仁大碎粒,均匀地撒在料面上,用手或木板轻拍料面稍压实,每平方米料约需菌种1瓶,控制温度20-30℃ ,前3d不通风,以后每天中午通风30min,这是混合菌种培养的过程。
[0027] (5)第二次建堆发酵:待菌丝长到培养料的1/4时,在培养料表面喷洒抑菌剂(100mg/L稳定性二氧化氯溶液),10h后升温至70-75℃范围内,持续10h后(高温使混合菌种细胞失活死亡),在培养料上继续撒上一层熟石灰粉,再将牛粪洒在内层,料宽60cm,料高50cm左右,最外层撒上石灰,控制温度在65℃左右,经3d后进行第一次翻堆,翻堆时内外置换并加入尿素(溶于水中)(补充培养料中姬松茸所需的碳源及氮源);若水分太少,补加适量水,4d后进行第二次翻堆,如此按2、2、1d的间隔时间进行第三次、第四次、第五次翻堆。发酵好的培养料呈棕褐色,无氨味、臭味和酸味,水分适当,pH7.5左右(若太低则用石灰调节),这是失去活性的混合菌种被动吸附培养料中重金属离子的过程。
[0028] (6)第二次播种:将经上述发酵后的培养料趁热过畦,畦宽1.3m,铺料厚度为30cm,当料温降至25℃时播种;将姬松茸分成鸡蛋大小,培养料上每隔20-25cm见方挖一深约10cm见方的接种穴,净菌种播入,每平方米需250ml的姬松茸菌种两瓶,最后在床面上铺一层厚约1cm的培养料覆盖菌种,然后覆膜畦床,播种后5d内不揭膜,不喷水,5d后每2d通风一次,料面干燥则喷水保湿。
[0029] (7)覆土:待菌丝布料料面或长到整个培养料的2/3时开始覆土,覆土选用直径2-3cm粗土粒和直径为0.5-1cm的细土粒混合,混合土料先消毒、搅拌去异味,用生石灰调整pH,然后揭膜覆土,采用二次覆土技术,第一次土厚2cm,待菌丝布满覆土表层时,再覆一层
1cm的土层,然后加大通风,待土层逐渐变白时,用薄膜覆盖2-3d。
[0030] (8)出菇管理:如果菌丝爬土不整齐,要及时补足土;当全部菌丝布满土面时,喷重水一次;喷重水后停水2d,再喷一次出菇水,土的含水量要求土捏成团为宜,同时注意不要使水渗露到料面,此时结合通风,增强光线,出菇阶段控制温度为20-25℃,湿度80-85%内,一潮菇采收后,及时整理畦面,并喷水补水,使下潮菇顺利发生。
[0031] 实施例2本实施例与实施例1的不同之处在于,其培养料配方包括:麦秸300kg、棉籽壳175kg、干牛粪100kg、石膏粉10kg、尿素5kg。
[0032] 其混合菌种为液体菌剂,容量250ml,每瓶中的活菌包括:黄孢原毛平革菌(5*108cfu/ml)、三色革裥菌(5*108cfu/ml)、拟虫蜡菌(3*108cfu/ml)。
[0033] 本实施例的工艺步骤与实施例1一致。
[0034] 实施例3本实施例与实施例1的不同之处在于,其培养料配方包括:麦秸150kg、黄豆秸秆100kg、甘蔗渣50kg、木屑25kg、干牛粪100kg、碳酸钙10kg、尿素5kg。
[0035] 其混合菌种为液体菌剂,容量250ml,每瓶中的活菌包括:黄孢原毛平革菌(6*108cfu/ml)、三色革裥菌(6*108cfu/ml)。
[0036] 本实施例的工艺步骤与实施例1一致。
[0037] 实施例4本实施例与实施例1的不同之处在于,其培养料配方包括:稻草150kg、黄豆秸秆100kg、甘蔗渣50kg、棉籽壳25kg、干鸡粪100kg、消石灰10kg、尿素5kg。
[0038] 其混合菌种为液体菌剂,容量250ml,每瓶中的活菌包括:黄孢原毛平革菌(12*108cfu/ml)。
[0039] 本实施例的工艺步骤与实施例1一致。
[0040] 对比例1本对比例与实施例1的不同之处在于,混合菌种不进行甲醛交联-碱处理。
[0041] 对比例2本对比例与实施例1的培养料配方一致,不添加混合菌种,其工艺包括以下步骤:
(1)培养料发酵:建堆前将稻草、玉米芯、麸皮等原料预湿浸泡3h,捞起预堆3d,然后打碎混合;牛粪提前打碎,加适量水搅拌预堆2d。
[0042] (2)建堆:将打碎后的稻草、玉米芯、麸皮混合均匀,铺料前在地面上用砖或水泥垫起20cm,然后先铺一层混合基料,再撒上一层石灰粉,将牛粪撒在内层,然后再铺混合基料,如此一层一层对制,料宽60cm,料高50cm,每隔1.2m埋上圆形段木,堆好后拔出让其通气,最外层撒上石灰,注意防风、避雨。
[0043] (3)发酵翻堆:建堆时培养料含水量不能太低,手握能滴下水为适;建堆后每天测定料堆中央温度,当温度升至65℃以上时,经4d,进行第一次翻堆,翻堆时将培养料内外置换。若料水分较少,补加水,使料手握能滴下3-4滴水;5d后进行第二次翻堆,如此按4、4、3d的间隔时间进行第三次、第四次、第五次翻堆。发酵好的培养料呈棕褐色,无氨味、臭味和酸味,水分适当,pH7.5左右(若太低则用石灰调节)。
[0044] (4)播种:将经上述发酵后的培养料趁热过畦,畦宽1.3m,铺料厚度为30cm,当料温降至25℃时播种;将姬松茸分成鸡蛋大小,培养料上每隔20-25cm见方挖一深约10cm见方的接种穴,净菌种播入,每平方米需250ml的姬松茸菌种两瓶,最后在床面上铺一层厚约1cm的培养料覆盖菌种,然后覆膜畦床,播种后5d内不揭膜,不喷水,5d后每2d通风一次,料面干燥则喷水保湿。
[0045] (5)覆土:待菌丝布料料面或长到整个培养料的2/3时开始覆土,覆土选用直径2-3cm粗土粒和直径为0.5-1cm的细土粒混合,混合土料先消毒、搅拌去异味,用生石灰调整pH,然后揭膜覆土,采用二次覆土技术,第一次土厚2cm,待菌丝布满覆土表层时,再覆一层
1cm的土层,然后加大通风,待土层逐渐变白时,用薄膜覆盖2-3d。
[0046] (6)出菇管理:如果菌丝爬土不整齐,要及时补足土;当全部菌丝布满土面时,喷重水一次;喷重水后停水2d,再喷一次出菇水,土的含水量要求土捏成团为宜,同时注意不要使水渗露到料面,此时结合通风,增强光线,出菇阶段控制温度为20-25℃,湿度80-85%内,一潮菇采收后,及时整理畦面,并喷水补水,使下潮菇顺利发生。
[0047] 对实施例1 4及对比例1、2各组姬松茸第一潮菇种的重金属含量进行测定,结果如~下表:
由上表可知,本实施例1 4的各重金属含量与对比例1、2相比含量明显降低,证明本发~
明采用的发明可显著减少姬松茸富集重金属离子的作用;由对比例1与实施例1、对比例2相比,对比例1中混合菌种仍具有一定的吸附能力,但其重金属吸附能力下降较明显,因此证明混合菌种预处理可显著提高混合菌种的吸附能力。
[0048] 分别检测施例1 4及对比例1、2各组的产量,结果如下表:~
如上表所示,实施例1 4及对比例1、2的产量差异不大且产量较高,实施例4的产量略低~
可能是由于混合菌种使用了单一菌种,其在生长过程中没有竞争抑制,繁殖较快,消耗营养物质较多,因此造成姬松茸的营养减少,但是其生长时间有限(通过抑制剂杀灭),因此不会造成姬松茸产量大大减少,因此,本发明采用的方案不仅不影响姬松茸的产量,得到的姬松茸甚至产量较高、品质较好。
[0049] 本文中所描述的具体实施例仅仅是对本发明精神作举例说明。本发明所属技术领域的技术人员可以对所描述的具体实施例做各种各样的修改或补充或采用类似的方式替代,但并不会偏离本发明的精神或者超越所附权利要求书所定义的范围。
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