技术领域
[0001] 本
发明涉及
饲料发酵技术领域，具体为一种水产用乳酸菌发酵豆浆的制备方法。
背景技术
[0002] 水产中常常用使用生豆浆投喂，培育水花、虾苗，但殊不知生豆浆并非水花、虾苗直接
摄食饵料，而是通过肥
水培养天然饵料供给水花、虾苗摄食。并且生豆浆易沉于底后臭底，影响水质，同时，生豆浆易引起
水体pH偏高而形成偏
碱性水体，不利于水花、虾苗生长。另外，生豆浆含有
抗营养因子(胰蛋白酶
抑制剂、大豆球蛋白、β-伴球蛋白等)，这些都会对水花、虾苗生长发育产生制约作用。并且生豆浆保质期短，常温下保存不超过一天，且在贮运销售过程中极易受微
生物污染引起变质。
发明内容
[0003] (一)解决的技术问题
[0004] 针对
现有技术的不足，本发明提供了一种水产用乳酸菌发酵豆浆的制备方法，解决了上述背景技术中所提出的问题。
[0005] (二)技术方案
[0006] 为实现上述的目的，本发明提供如下技术方案：一种水产用乳酸菌发酵豆浆的制备方法，包括如下步骤，
[0007] S1、菌种选择：选取乳杆菌和
植物乳杆菌；
[0008] S2、菌种活化：将S1中所选取的乳杆菌和植物乳杆菌接到MRS培养基中进行活化；
[0009] S3、鲜豆浆制作：选购黄豆，将黄豆除杂清洗，将黄豆放入水中浸泡12-24小时，将浸泡发胀后的黄豆沥干，黄豆与水按照1：8的比例倒入磨浆机中磨浆，再将磨好的豆浆放入高压灭菌锅中，将高压灭菌锅内部的
温度控制在120℃，豆浆放在高压灭菌锅内部灭菌的时间为20分钟；
[0010] S4、菌种驯化：对活化后的乳杆菌和植物乳杆菌进行驯化，使其适应豆浆中的生长；
[0011] S5、菌株液体发酵：对S4中驯化后的菌株进行扩大培养，制作液体发酵
种子液：
[0012] S6、厌
氧发酵：将S5中扩大培养后的乳杆菌和植物乳杆菌分别计数后调整浓度，然后进行混合制备发酵接种菌剂，将混合发酵接种菌剂按
质量比添加至灭菌冷却后的豆浆中，加入稳定剂，用均质器混合后装入
发酵罐中密封，然后将其放入
培养箱中，培养箱内部的
温度控制在30－37℃，培养时间为24-48小时，即获得的乳酸菌发酵豆浆。
[0013] 有选的，所述乳杆菌、植物乳杆菌采用MRS培养基为蛋白胨10g，
牛肉膏10g，
酵母粉4g，
葡萄糖20g，
硫酸镁0.2g，乙酸钠5g，
柠檬酸三铵2g，
磷酸氢二
钾2g，硫酸锰0.05g，吐温
801g，蒸馏水1000mL，pH6.2±0.2，温度控制在121℃，时间为15min，摇瓶发酵培养条件为：
发酵温度30-37℃，发酵时间18-36h，转速150-225r/min。
[0014] 有选的，所述稳定剂的成分为CMC、海藻酸钠和黄原胶，CMC、海藻酸钠和黄原胶的质量比为1:1:1。
[0015] (三)有益效果
[0016] 与现有技术相比，本发明提供了一种水产用乳酸菌发酵豆浆的制备方法。具备以下有益效果：
[0017] 该水产用乳酸菌发酵豆浆的制备方法，发酵前不需要滤掉豆渣，增加了产量，发酵豆浆时不需要添加奶粉、果糖、白砂糖、麦芽糖等，节约了成本，生产过程中，没有
废水、废渣和废气产生，达到了环保安全的效果，不会对水质有影响，且菌株发酵液的添加，不会影响发酵豆浆的口感和色泽，该水产用乳酸菌发酵豆浆的制备方法，解决了生豆浆沉在水底后发臭的问题，保证了水质，避免了生豆浆引起水体PH偏高形成偏碱性水体的问题，有利于虾苗和水花的生长，解决了生豆浆保质期短，不方便运输的问题，发酵后的豆浆在水中油膜少，水质稳定，悬浮性好，利用率高，能显著促进水花、虾苗等水产动物生长，改善水产动物肠道微
生物群落结构，降低水产动物死亡率，提高水产动物产量和产品品质。
具体实施方式
[0018] 下面将结合本发明的
实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
[0019] 一种水产用乳酸菌发酵豆浆的制备方法，包括如下步骤，
[0020] S1、菌种选择：选取乳杆菌和植物乳杆菌；
[0021] S2、菌种活化：将S1中所选取的乳杆菌和植物乳杆菌接到MRS培养基中进行活化；
[0022] S3、鲜豆浆制作：选购黄豆，黄豆的质量标准：新鲜干燥，颗粒饱满，品质良好无杂质，无虫蛀及霉变的优质大豆，将黄豆除杂清洗，将黄豆放入水中浸泡12-24小时，用冷的
饮用水漫过优质大豆，当水面有少量
泡沫，豆皮平滑有光亮，将豆搓成两半后，子叶表面平滑，中心部位与边缘色泽一致，沿横向剖面易于断开，表明浸泡时间已够，将浸泡发胀后的黄豆沥干，黄豆与水按照1：8的比例倒入磨浆机中磨浆，再将磨好的豆浆放入高压灭菌锅中，将高压灭菌锅内部的温度控制在120℃，豆浆放在高压灭菌锅内部灭菌的时间为20分钟；
[0023] S4、菌种驯化：对活化后的乳杆菌和植物乳杆菌进行驯化，使其适应豆浆中的生长；分别将经过活化后的乳杆菌、植物乳杆菌的菌种接入杀菌后不同比例的豆浆与牛奶培养基中，进行梯度驯化，梯度驯化步骤为：活化菌种→纯牛奶→牛奶豆浆(牛奶与豆浆的质量比为9：1)
混合液→牛奶豆浆(牛奶与豆浆的质量比为7：3)混合液→牛奶豆浆(牛奶与豆浆的质量比为6：4)混合液→牛奶豆浆(牛奶与豆浆的质量比为5：5)混合液→牛奶豆浆(牛奶与豆浆的质量比为4：6)混合液→牛奶豆浆(牛奶与豆浆的质量比为3：7)混合液→牛奶豆浆(牛奶与豆浆的质量比为1：9)混合液；
[0024] S5、菌株液体发酵：对S4中驯化后的菌株进行扩大培养，制作液体发酵种子液：
[0025] 菌株活化：按以下步骤操作：
[0026] (1)安管的开封：
[0027] a、用浸过70％酒精的
脱脂棉擦净安管；
[0028] b、用火焰将安管顶端加热；
[0029] c、滴无菌水至加热的安管顶端使玻璃开裂；
[0030] d、用锉刀或
镊子敲下已开裂的安管顶端；
[0031] (2)菌株恢复培养：
[0032] ①用无菌吸管吸取0.3-0.4ml的液体灭菌后的MRS培养基滴入安管内轻轻振荡，使冻干菌体溶解成悬浮状；
[0033] ②将①菌液注入液体灭菌后的MRS培养基内(3-4ml)，厌氧在30－37℃温度下培养24－48h。
[0034] 发酵液的制备：
[0035] 分别取驯化好了的乳杆菌、植物乳杆菌2ml(分别检测活菌浓度≥109CFU/ml)，接种于100ml培养基中进行摇瓶发酵培养，发酵温度为28～37℃，PH值为6.0～7.0，转速为200～300r/min，发酵时间为24～48h，摇瓶发酵培养基为MRS培养基，成分为：蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母粉4g，葡萄糖20g，
硫酸镁0.2g，乙酸钠5g，柠檬酸三铵2g，
磷酸氢二钾2g，硫酸锰0.05g，吐温801g，蒸馏水1000mL，pH6.2±0.2，121℃，15min；
[0036] 摇瓶发酵结束后进行发酵罐扩大培养，取100ml摇瓶发酵种子液接种到10L发酵罐中，装液量5L，发酵温度为30～37℃，PH值为6.0～7.0，搅拌速度为200～300r/min，发酵24～48h，发酵罐中试培养基与摇瓶发酵培养基成分一致，发酵结束后将培养基置于4℃备用；
[0037] S6、厌氧发酵：将S5中扩大培养后的乳杆菌和植物乳杆菌分别计数后调整浓度，然后进行混合制备发酵接种菌剂，将混合发酵接种菌剂按质量比添加至灭菌冷却后的豆浆中，加入稳定剂，用均质器混合后装入发酵罐中密封，然后将其放入培养箱中，培养箱内部的温度控制在30－37℃，培养时间为24-48小时，即获得的乳酸菌发酵豆浆，乳酸菌发酵豆浆口感爽滑、无豆腥味、稠厚感强、无分层、无絮状沉淀；
[0038] 具体而言，所述乳杆菌、植物乳杆菌采用MRS培养基为蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母粉4g，葡萄糖20g，硫酸镁0.2g，乙酸钠5g，柠檬酸三铵2g，磷酸氢二钾2g，硫酸锰0.05g，吐温801g，蒸馏水1000mL，pH6.2±0.2，温度控制在121℃，时间为15min，摇瓶发酵培养条件为：
发酵温度30-37℃，发酵时间18-36h，转速150-225r/min。
[0039] 具体而言，所述稳定剂的成分为CMC、海藻酸钠和黄原胶，CMC、海藻酸钠和黄原胶的质量比为1:1:1。
[0040] 实施例
[0041] 水产用乳酸菌发酵豆浆在龙虾养殖过程的应用，其步骤是：
[0042] 乳酸菌发酵豆浆龙虾饲养试验
[0043] 在城市周边找二个池塘，每一个池塘的面积在400平方米，一个作为对照组，一个作为试验组。
[0044] (1)放养前准备，两个池塘各带水深50cm用生石灰化水泼洒，用量为90kg/个，10天后排掉池水；
[0045] (2)水花生栽培
[0046] 在池塘底部，以行距2m、株距1m条带栽植，发芽前不加水，发芽后保持湿润，当芽长到2－3cm后加水深5cm，每3—5d增加10cm，水位达到30cm停止加水，准备放养小龙虾苗；
[0047] (3)苗种放养
[0048]
[0049] (4)饵料投喂
[0050]
[0051] (5)养殖结果
[0052]
[0053] 结果表明，试验组添加乳酸菌发酵豆浆后，能提高龙虾的消化吸收率、增强免疫
力、减少发病率、提高成活率、改善水质、提高产量。
[0054] 本发明的有益效果是：该水产用乳酸菌发酵豆浆的制备方法，发酵前不需要滤掉豆渣，增加了产量，发酵豆浆时不需要添加奶粉、果糖、白砂糖、麦芽糖等，节约了成本，生产过程中，没有废水、废渣和废气产生，达到了环保安全的效果，不会对水质有影响，且菌株发酵液的添加，不会影响发酵豆浆的口感和色泽，该水产用乳酸菌发酵豆浆的制备方法，解决了生豆浆沉在水底后发臭的问题，保证了水质，避免了生豆浆引起水体PH偏高形成偏碱性水体的问题，有利于虾苗和水花的生长，解决了生豆浆保质期短，不方便运输的问题，发酵后的豆浆在水中油膜少，水质稳定，悬浮性好，利用率高，能显著促进水花、虾苗等水产动物生长，改善水产动物肠道
微生物群落结构，降低水产动物死亡率，提高水产动物产量和产品品质。
[0055] 尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、
修改、替换和变型，本发明的范围由所附
权利要求及其等同物限定。
