技术领域
[0001] 本
发明涉及农业领域,特别是涉及一种黄粉虫代替鱼粉饲养锦鲤可行性的研究方法。
背景技术
[0002] 锦鲤
别名为日本锦鲤、绯鲤。它是一种由鲤鱼演变而来的鱼类,在
生物学上属于鲤科鱼类。它自身的体色会随着养殖环境的变化而改变。其体态丰腴、体色鲜艳、性情温和、品种丰富,得到了广大观赏鱼爱好者的欢迎。
[0003] 黄粉虫隶属于动物界种类最多、数量最大、分布最广
节肢动物门中的昆虫纲,人们大多称作面包虫。原本是一种大型的仓储
害虫,如今分布广泛的多为高
蛋白质的动物性蛋白源的昆虫存在。黄粉虫不仅在生理和遗传上有重要的作用,而且更是蛋白含量很高的优质昆虫类产品[1]。黄粉虫的食性广且杂食,不受
气候和地域的限制,对环境条件要求不高,易饲养,故在
水产养殖行业应用广泛。黄粉虫烘干后
粗蛋白含量达60%左右,其干重成本是鱼粉价格的3/5左右。有研究表明,直接投喂新鲜的黄粉虫或者投喂适量加入含量50%鱼粉的配合
饲料的黄粉虫到中华倒刺鲃都可以对它的正常生长、摄入的脂肪含量及肌肉中的脂肪含量有明显的影响,对肌肉的鲜美程度和品质也有不同程度的改善。
[0004] 限制着
水产养殖可持续发展的主要问题是鱼粉的供应,国产的鱼粉和进口鱼粉是中国市场的鱼粉主要两种来源,但是因为气候环境的变化对鱼粉在质和量上都无法正常保证。因此,减轻在水产养殖中对鱼粉的过度依赖,寻求合适的高蛋白质昆虫来代替鱼粉成为我们迫在眉睫需要解决的问题。现已有许多学者深入研究,李垚垚等把高蛋白黄粉虫替代鱼粉观察对大菱鲆幼鱼的影响,得出最佳的添加量在25%左右。
[0005] 本发明中用黄粉虫替代鱼粉饲养锦鲤,通过研究其对锦鲤非特异性指标、抗
氧化指标及抗炎因子的影响,以期为黄粉虫在水产养殖营养与饲料方面的应用提供理论
基础。
发明内容
[0006] 一种黄粉虫代替鱼粉饲养锦鲤可行性的研究方法,所述方法步骤包括:
[0007] (1)实验材料准备
[0008] 试验用鱼体
质量为(55.49±2.28)g,体长为(114.127±4.06)cm,购置黄粉虫备用;
[0009] 饲料准备
[0010] 本试验共设计6组饲料,G1,G2,G3,G4,G5,G6,其中G1为对照组,其替代鱼粉比例分别为(0%、20%、40%、60%、80%、100%),与配方中的原料混合后,用制粒机
挤压成颗粒料,非阳光直射处自然烘干7天,并于室温下封闭保存;
[0011] 实验预备
[0012] 随机挑出360条鱼进行分组,分为1个对照组和5个试验组共为6组,每组2个平行组,每个循环箱30条鱼置于养殖环境中;
[0013] 实验管理
[0014] 试验期间,每天8:30、16:30各投喂一次,投喂量为鱼体质量的3.0-5.0%,换水量为体积的1/3-1/2,水温控制在28℃,养殖周期为56d;
[0016] 采样前停食24h,从每个水箱中选取鱼11尾,抽血时用肝素润湿离心管及
注射器,采取尾部静脉
采血,于4℃静置24h,在4000r/min下离心10min后吸取上清液,-80℃备用,测
血浆的非特异性指标、抗氧化指标及抗炎因子指标,然后把抽过血的试验鱼解剖,取其肝脏,-80℃备用,测定前,按质量体积比为1mg:9mL加入预冷的生理盐水,用匀浆机
研磨制成10%匀
浆液,于4℃下以4500r/min离心20min,取上清液进行肝脏非特异性指标和抗氧化指标的测定,本试验共测定14个指标,GSH-PX、SOD、MDA和CAT为抗氧化指标,ACP、AKP、LZM、GPT及GOT为生化指标及PGF2a、C5aR、c3a、PGE2、IL-6为抗炎因子指标;
[0018] 数据用Excel 2010
软件进行
整理,采用SPSS 17.0软件进行单因素方差分析,差异显著(P<0.05)用Duncan’s法进行多重比较,结果用平均值±标准差表示,分析黄粉虫对锦鲤血液及肝脏生化指标的影响。
[0019] 优选的,所述步骤(2)配方中的原料成分包括褐鱼粉、黄粉虫、虾粉、小麦、
豆粕、面粉、谷朊粉、
淀粉、豆油、多种维生素、多种矿物质、菜籽、玉米、粗蛋白、粗脂肪、灰分及水分。
[0020] 优选的,所述G1原料配方为:15.0%褐鱼粉、7.0%虾粉、7.3%小麦、25.5%豆粕、10.0%面粉、12.0%谷朊粉、2.0%淀粉、3.2%豆油、1.0%多种维生素、4.0%多种矿物质、
9.0%菜籽、4.0%玉米、50.8%粗蛋白、17.1%粗脂肪、7.9%灰分及23.9%水分。
[0021] 优选的,所述G2原料配方为:12.0%褐鱼粉、3.0%黄粉虫、7.0%虾粉、6.4%小麦、27.0%豆粕、10.0%面粉、12.0%谷朊粉、2.0%淀粉、2.6%豆油、1.0%多种维生素、4.0%多种矿物质、9.0%菜籽、4.0%玉米、50.2%粗蛋白、18.2%粗脂肪、8.0%灰分及23.1%水分。
[0022] 优选的,所述G3原料配方为:9.0%褐鱼粉、6.0%黄粉虫、7.0%虾粉、5.5%小麦、28.5%豆粕、10.0%面粉、12.0%谷朊粉、2.0%淀粉、1.9%豆油、1.0%多种维生素、4.0%多种矿物质、9.0%菜籽、4.0%玉米、50.4%粗蛋白、18.0%粗脂肪、8.1%灰分及23.9%水分。
[0023] 优选的,所述G4原料配方为:6.0%褐鱼粉、9.0%黄粉虫、7.0%虾粉、4.7%小麦、30.0%豆粕、10.0%面粉、12.0%谷朊粉、2.0%淀粉、1.3%豆油、1.0%多种维生素、4.0%多种矿物质、9.0%菜籽、4.0%玉米、50.6%粗蛋白、18.2%粗脂肪、8.0%灰分及23.0%水分。
[0024] 优选的,所述G5原料配方为:3.0%褐鱼粉、12.0%黄粉虫、7.0%虾粉、3.9%小麦、31.5%豆粕、10.0%面粉、12.0%谷朊粉、2.0%淀粉、0.6%豆油、1.0%多种维生素、4.0%多种矿物质、9.0%菜籽、4.0%玉米、50.3%粗蛋白、17.4%粗脂肪、7.9%灰分及24.0%水分。
[0025] 优选的,所述G6原料配方为:15.0%黄粉虫、7.0%虾粉、3.5%小麦、32.5%豆粕、10.0%面粉、12.0%谷朊粉、2.0%淀粉、1.0%多种维生素、4.0%多种矿物质、9.0%菜籽、
4.0%玉米、50.7%粗蛋白、17.1%粗脂肪、8.0%灰分及24.0%水分。
[0026] 优选的,所述步骤(3)养殖环境制造方法为养殖水箱提前24h用高锰酸
钾水溶液进行浸泡消毒处理,养殖用水提前72h曝气,使用气石持续充氧。
[0027] 优选的,所述步骤(3)实验用鱼体能正常生理活动的条件下驯化10d后开始试验。
[0028] 有益效果:本发明提供了一种黄粉虫代替鱼粉饲养锦鲤可行性的研究方法,其方法包括实验材料准备-饲料准备-实验预备-实验管理-采样检测-数据处理与统计分析,本试验中用黄粉虫替代鱼粉饲养锦鲤,通过研究其对锦鲤非特异性指标、抗氧化指标及抗炎因子的影响,以期为黄粉虫在水产养殖营养与饲料方面的应用提供理论基础,所述步骤(2)配方中的原料成分包括褐鱼粉、黄粉虫、虾粉、小麦、豆粕、面粉、谷朊粉、淀粉、豆油、多种维生素、多种矿物质、菜籽、玉米、粗蛋白、粗脂肪、灰分及水分;所述G1原料配方为:15.0%褐鱼粉、7.0%虾粉、7.3%小麦、25.5%豆粕、10.0%面粉、12.0%谷朊粉、2.0%淀粉、3.2%豆油、1.0%多种维生素、4.0%多种矿物质、9.0%菜籽、4.0%玉米、50.8%粗蛋白、17.1%粗脂肪、7.9%灰分及23.9%水分;所述G2原料配方为:12.0%褐鱼粉、3.0%黄粉虫、7.0%虾粉、6.4%小麦、27.0%豆粕、10.0%面粉、12.0%谷朊粉、2.0%淀粉、2.6%豆油、1.0%多种维生素、4.0%多种矿物质、9.0%菜籽、4.0%玉米、50.2%粗蛋白、18.2%粗脂肪、8.0%灰分及23.1%水分;所述G3原料配方为:9.0%褐鱼粉、6.0%黄粉虫、7.0%虾粉、5.5%小麦、28.5%豆粕、10.0%面粉、12.0%谷朊粉、2.0%淀粉、1.9%豆油、1.0%多种维生素、4.0%多种矿物质、9.0%菜籽、4.0%玉米、50.4%粗蛋白、18.0%粗脂肪、8.1%灰分及23.9%水分;所述G4原料配方为:6.0%褐鱼粉、9.0%黄粉虫、7.0%虾粉、4.7%小麦、30.0%豆粕、
10.0%面粉、12.0%谷朊粉、2.0%淀粉、1.3%豆油、1.0%多种维生素、4.0%多种矿物质、
9.0%菜籽、4.0%玉米、50.6%粗蛋白、18.2%粗脂肪、8.0%灰分及23.0%水分;所述G5原料配方为:3.0%褐鱼粉、12.0%黄粉虫、7.0%虾粉、3.9%小麦、31.5%豆粕、10.0%面粉、
12.0%谷朊粉、2.0%淀粉、0.6%豆油、1.0%多种维生素、4.0%多种矿物质、9.0%菜籽、
4.0%玉米、50.3%粗蛋白、17.4%粗脂肪、7.9%灰分及24.0%水分;所述G6原料配方为:
15.0%黄粉虫、7.0%虾粉、3.5%小麦、32.5%豆粕、10.0%面粉、12.0%谷朊粉、2.0%淀粉、1.0%多种维生素、4.0%多种矿物质、9.0%菜籽、4.0%玉米、50.7%粗蛋白、17.1%粗脂肪、8.0%灰分及24.0%水分,通过以上各实验组的饲料成分一方面能够确保锦鲤生长所需的营养成分,另一方面通过单因子设置黄粉虫含量的不同,达到研究黄粉虫替代鱼粉的效果,所述步骤(3)养殖环境制造方法为养殖水箱提前24h用高锰酸钾水溶液进行浸泡消毒处理,养殖用水提前72h曝气,使用气石持续充氧,该生长环境能够除去环境中不利于锦鲤生长的因素,最大程度保证单因子变量,即黄粉虫含量的改变,使得研究结果更具科学性,所述步骤(3)实验用鱼体能正常生理活动的条件下驯化10d后开始试验,该方法能够使得锦鲤适应实验生长环境,防止突然环境改变对锦鲤生长造成影响。
具体实施方式
[0029] 为使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解,下面结合具体实施方式,进一步阐述本发明。
[0031] 一种黄粉虫代替鱼粉饲养锦鲤可行性的研究方法,所述方法步骤包括:
[0032] (1)实验材料准备
[0033] 试验用鱼体质量为(55.49±2.28)g,体长为(114.127±4.06)cm,购置黄粉虫备用;
[0034] 饲料准备
[0035] 本试验按照G1配置饲料,其替代鱼粉比例分别为0%,与配方中的原料混合后,用制粒机挤压成颗粒料,非阳光直射处自然烘干7天,并于室温下封闭保存;
[0036] 所述G1原料配方为:15.0%褐鱼粉、7.0%虾粉、7.3%小麦、25.5%豆粕、10.0%面粉、12.0%谷朊粉、2.0%淀粉、3.2%豆油、1.0%多种维生素、4.0%多种矿物质、9.0%菜籽、4.0%玉米、50.8%粗蛋白、17.1%粗脂肪、7.9%灰分及23.9%水分;
[0037] 实验预备
[0038] 随机挑出360条鱼进行分组,分为1个对照组和5个试验组共为6组,每组2个平行组,每个循环箱30条鱼置于养殖环境中,养殖环境制造方法为养殖水箱提前24h用高锰酸钾水溶液进行浸泡消毒处理,养殖用水提前72h曝气,使用气石持续充氧,实验用鱼体能正常生理活动的条件下驯化10d后开始试验;
[0039] 实验管理
[0040] 试验期间,每天8:30、16:30各投喂一次,投喂量为鱼体质量的3.0-5.0%,换水量为体积的1/3-1/2,水温控制在28℃,养殖周期为56d;
[0041] 采样检测
[0042] 采样前停食24h,从每个水箱中选取鱼11尾,抽血时用肝素润湿离心管及注射器,采取尾部静脉采血,于4℃静置24h,在4000r/min下离心10min后吸取上清液,-80℃备用,测血浆的非特异性指标、抗氧化指标及抗炎因子指标,然后把抽过血的试验鱼解剖,取其肝脏,-80℃备用,测定前,按质量体积比为1mg:9mL加入预冷的生理盐水,用匀浆机研磨制成10%匀浆液,于4℃下以4500r/min离心20min,取上清液进行肝脏非特异性指标和抗氧化指标的测定,本试验共测定14个指标,GSH-PX、SOD、MDA和CAT为抗氧化指标,ACP、AKP、LZM、GPT及GOT为生化指标及PGF2a、C5aR、c3a、PGE2、IL-6为抗炎因子指标;
[0043] 数据处理与统计分析
[0044] 数据用Excel 2010软件进行整理,采用SPSS 17.0软件进行单因素方差分析,差异显著(P<0.05)用Duncan’s法进行多重比较,结果用平均值±标准差表示,分析黄粉虫对锦鲤血液及肝脏生化指标的影响。
[0045] 实施例2:
[0046] 一种黄粉虫代替鱼粉饲养锦鲤可行性的研究方法,所述方法步骤包括:
[0047] (1)实验材料准备
[0048] 试验用鱼体质量为(55.49±2.28)g,体长为(114.127±4.06)cm,购置黄粉虫备用;
[0049] (2)饲料准备
[0050] 本试验按照G2配置饲料,其替代鱼粉比例分别为20%,与配方中的原料混合后,用制粒机挤压成颗粒料,非阳光直射处自然烘干7天,并于室温下封闭保存;
[0051] 所述G2原料配方为:12.0%褐鱼粉、3.0%黄粉虫、7.0%虾粉、6.4%小麦、27.0%豆粕、10.0%面粉、12.0%谷朊粉、2.0%淀粉、2.6%豆油、1.0%多种维生素、4.0%多种矿物质、9.0%菜籽、4.0%玉米、50.2%粗蛋白、18.2%粗脂肪、8.0%灰分及23.1%水分;
[0052] 实验预备
[0053] 随机挑出360条鱼进行分组,分为1个对照组和5个试验组共为6组,每组2个平行组,每个循环箱30条鱼置于养殖环境中,养殖环境制造方法为养殖水箱提前24h用高锰酸钾水溶液进行浸泡消毒处理,养殖用水提前72h曝气,使用气石持续充氧,实验用鱼体能正常生理活动的条件下驯化10d后开始试验;
[0054] (4)实验管理
[0055] 试验期间,每天8:30、16:30各投喂一次,投喂量为鱼体质量的3.0-5.0%,换水量为体积的1/3-1/2,水温控制在28℃,养殖周期为56d;
[0056] (5)采样检测
[0057] 采样前停食24h,从每个水箱中选取鱼11尾,抽血时用肝素润湿离心管及注射器,采取尾部静脉采血,于4℃静置24h,在4000r/min下离心10min后吸取上清液,-80℃备用,测血浆的非特异性指标、抗氧化指标及抗炎因子指标,然后把抽过血的试验鱼解剖,取其肝脏,-80℃备用,测定前,按质量体积比为1mg:9mL加入预冷的生理盐水,用匀浆机研磨制成10%匀浆液,于4℃下以4500r/min离心20min,取上清液进行肝脏非特异性指标和抗氧化指标的测定,本试验共测定14个指标,GSH-PX、SOD、MDA和CAT为抗氧化指标,ACP、AKP、LZM、GPT及GOT为生化指标及PGF2a、C5aR、c3a、PGE2、IL-6为抗炎因子指标;
[0058] (6)数据处理与统计分析
[0059] 数据用Excel 2010软件进行整理,采用SPSS 17.0软件进行单因素方差分析,差异显著(P<0.05)用Duncan’s法进行多重比较,结果用平均值±标准差表示,分析黄粉虫对锦鲤血液及肝脏生化指标的影响。
[0060] 实施例3:
[0061] 一种黄粉虫代替鱼粉饲养锦鲤可行性的研究方法,所述方法步骤包括:
[0062] (1)实验材料准备
[0063] 试验用鱼体质量为(55.49±2.28)g,体长为(114.127±4.06)cm,购置黄粉虫备用;
[0064] (2)饲料准备
[0065] 本试验按照G3配置饲料,其替代鱼粉比例分别为40%,与配方中的原料混合后,用制粒机挤压成颗粒料,非阳光直射处自然烘干7天,并于室温下封闭保存;
[0066] 所述G3原料配方为:9.0%褐鱼粉、6.0%黄粉虫、7.0%虾粉、5.5%小麦、28.5%豆粕、10.0%面粉、12.0%谷朊粉、2.0%淀粉、1.9%豆油、1.0%多种维生素、4.0%多种矿物质、9.0%菜籽、4.0%玉米、50.4%粗蛋白、18.0%粗脂肪、8.1%灰分及23.9%水分;
[0067] (3)实验预备
[0068] 随机挑出360条鱼进行分组,分为1个对照组和5个试验组共为6组,每组2个平行组,每个循环箱30条鱼置于养殖环境中,养殖环境制造方法为养殖水箱提前24h用高锰酸钾水溶液进行浸泡消毒处理,养殖用水提前72h曝气,使用气石持续充氧,实验用鱼体能正常生理活动的条件下驯化10d后开始试验;
[0069] (4)实验管理
[0070] 试验期间,每天8:30、16:30各投喂一次,投喂量为鱼体质量的3.0-5.0%,换水量为体积的1/3-1/2,水温控制在28℃,养殖周期为56d;
[0071] (5)采样检测
[0072] 采样前停食24h,从每个水箱中选取鱼11尾,抽血时用肝素润湿离心管及注射器,采取尾部静脉采血,于4℃静置24h,在4000r/min下离心10min后吸取上清液,-80℃备用,测血浆的非特异性指标、抗氧化指标及抗炎因子指标,然后把抽过血的试验鱼解剖,取其肝脏,-80℃备用,测定前,按质量体积比为1mg:9mL加入预冷的生理盐水,用匀浆机研磨制成10%匀浆液,于4℃下以4500r/min离心20min,取上清液进行肝脏非特异性指标和抗氧化指标的测定,本试验共测定14个指标,GSH-PX、SOD、MDA和CAT为抗氧化指标,ACP、AKP、LZM、GPT及GOT为生化指标及PGF2a、C5aR、c3a、PGE2、IL-6为抗炎因子指标;
[0073] (6)数据处理与统计分析
[0074] 数据用Excel 2010软件进行整理,采用SPSS 17.0软件进行单因素方差分析,差异显著(P<0.05)用Duncan’s法进行多重比较,结果用平均值±标准差表示,分析黄粉虫对锦鲤血液及肝脏生化指标的影响。
[0075] 实施例4:
[0076] 一种黄粉虫代替鱼粉饲养锦鲤可行性的研究方法,所述方法步骤包括:
[0077] (1)实验材料准备
[0078] 试验用鱼体质量为(55.49±2.28)g,体长为(114.127±4.06)cm,购置黄粉虫备用;
[0079] (2)饲料准备
[0080] 本试验按照G4配置饲料,其替代鱼粉比例分别为60%,与配方中的原料混合后,用制粒机挤压成颗粒料,非阳光直射处自然烘干7天,并于室温下封闭保存;
[0081] 所述G4原料配方为:6.0%褐鱼粉、9.0%黄粉虫、7.0%虾粉、4.7%小麦、30.0%豆粕、10.0%面粉、12.0%谷朊粉、2.0%淀粉、1.3%豆油、1.0%多种维生素、4.0%多种矿物质、9.0%菜籽、4.0%玉米、50.6%粗蛋白、18.2%粗脂肪、8.0%灰分及23.0%水分;
[0082] (3)实验预备
[0083] 随机挑出360条鱼进行分组,分为1个对照组和5个试验组共为6组,每组2个平行组,每个循环箱30条鱼置于养殖环境中,养殖环境制造方法为养殖水箱提前24h用高锰酸钾水溶液进行浸泡消毒处理,养殖用水提前72h曝气,使用气石持续充氧,实验用鱼体能正常生理活动的条件下驯化10d后开始试验;
[0084] (4)实验管理
[0085] 试验期间,每天8:30、16:30各投喂一次,投喂量为鱼体质量的3.0-5.0%,换水量为体积的1/3-1/2,水温控制在28℃,养殖周期为56d;
[0086] (5)采样检测
[0087] 采样前停食24h,从每个水箱中选取鱼11尾,抽血时用肝素润湿离心管及注射器,采取尾部静脉采血,于4℃静置24h,在4000r/min下离心10min后吸取上清液,-80℃备用,测血浆的非特异性指标、抗氧化指标及抗炎因子指标,然后把抽过血的试验鱼解剖,取其肝脏,-80℃备用,测定前,按质量体积比为1mg:9mL加入预冷的生理盐水,用匀浆机研磨制成10%匀浆液,于4℃下以4500r/min离心20min,取上清液进行肝脏非特异性指标和抗氧化指标的测定,本试验共测定14个指标,GSH-PX、SOD、MDA和CAT为抗氧化指标,ACP、AKP、LZM、GPT及GOT为生化指标及PGF2a、C5aR、c3a、PGE2、IL-6为抗炎因子指标;
[0088] (6)数据处理与统计分析
[0089] 数据用Excel 2010软件进行整理,采用SPSS 17.0软件进行单因素方差分析,差异显著(P<0.05)用Duncan’s法进行多重比较,结果用平均值±标准差表示,分析黄粉虫对锦鲤血液及肝脏生化指标的影响.
[0090] 实施例5:
[0091] 一种黄粉虫代替鱼粉饲养锦鲤可行性的研究方法,所述方法步骤包括:
[0092] (1)实验材料准备
[0093] 试验用鱼体质量为(55.49±2.28)g,体长为(114.127±4.06)cm,购置黄粉虫备用;
[0094] (2)饲料准备
[0095] 本试验按照G5配置饲料,其替代鱼粉比例分别为80%,与配方中的原料混合后,用制粒机挤压成颗粒料,非阳光直射处自然烘干7天,并于室温下封闭保存;
[0096] 所述G5原料配方为:3.0%褐鱼粉、12.0%黄粉虫、7.0%虾粉、3.9%小麦、31.5%豆粕、10.0%面粉、12.0%谷朊粉、2.0%淀粉、0.6%豆油、1.0%多种维生素、4.0%多种矿物质、9.0%菜籽、4.0%玉米、50.3%粗蛋白、17.4%粗脂肪、7.9%灰分及24.0%水分;
[0097] (3)实验预备
[0098] 随机挑出360条鱼进行分组,分为1个对照组和5个试验组共为6组,每组2个平行组,每个循环箱30条鱼置于养殖环境中,养殖环境制造方法为养殖水箱提前24h用高锰酸钾水溶液进行浸泡消毒处理,养殖用水提前72h曝气,使用气石持续充氧,实验用鱼体能正常生理活动的条件下驯化10d后开始试验;
[0099] (4)实验管理
[0100] 试验期间,每天8:30、16:30各投喂一次,投喂量为鱼体质量的3.0-5.0%,换水量为体积的1/3-1/2,水温控制在28℃,养殖周期为56d;
[0101] (5)采样检测
[0102] 采样前停食24h,从每个水箱中选取鱼11尾,抽血时用肝素润湿离心管及注射器,采取尾部静脉采血,于4℃静置24h,在4000r/min下离心10min后吸取上清液,-80℃备用,测血浆的非特异性指标、抗氧化指标及抗炎因子指标,然后把抽过血的试验鱼解剖,取其肝脏,-80℃备用,测定前,按质量体积比为1mg:9mL加入预冷的生理盐水,用匀浆机研磨制成10%匀浆液,于4℃下以4500r/min离心20min,取上清液进行肝脏非特异性指标和抗氧化指标的测定,本试验共测定14个指标,GSH-PX、SOD、MDA和CAT为抗氧化指标,ACP、AKP、LZM、GPT及GOT为生化指标及PGF2a、C5aR、c3a、PGE2、IL-6为抗炎因子指标;
[0103] (6)数据处理与统计分析
[0104] 数据用Excel 2010软件进行整理,采用SPSS 17.0软件进行单因素方差分析,差异显著(P<0.05)用Duncan’s法进行多重比较,结果用平均值±标准差表示,分析黄粉虫对锦鲤血液及肝脏生化指标的影响。
[0105] 实施例6:
[0106] 一种黄粉虫代替鱼粉饲养锦鲤可行性的研究方法,所述方法步骤包括:
[0107] (1)实验材料准备
[0108] 试验用鱼体质量为(55.49±2.28)g,体长为(114.127±4.06)cm,购置黄粉虫备用;
[0109] (2)饲料准备
[0110] 本试验按照G6配置饲料,其替代鱼粉比例分别为100%,与配方中的原料混合后,用制粒机挤压成颗粒料,非阳光直射处自然烘干7天,并于室温下封闭保存;
[0111] 所述G6原料配方为:15.0%黄粉虫、7.0%虾粉、3.5%小麦、32.5%豆粕、10.0%面粉、12.0%谷朊粉、2.0%淀粉、1.0%多种维生素、4.0%多种矿物质、9.0%菜籽、4.0%玉米、50.7%粗蛋白、17.1%粗脂肪、8.0%灰分及24.0%水分;
[0112] (3)实验预备
[0113] 随机挑出360条鱼进行分组,分为1个对照组和5个试验组共为6组,每组2个平行组,每个循环箱30条鱼置于养殖环境中,养殖环境制造方法为养殖水箱提前24h用高锰酸钾水溶液进行浸泡消毒处理,养殖用水提前72h曝气,使用气石持续充氧,实验用鱼体能正常生理活动的条件下驯化10d后开始试验;
[0114] (4)实验管理
[0115] 试验期间,每天8:30、16:30各投喂一次,投喂量为鱼体质量的3.0-5.0%,换水量为体积的1/3-1/2,水温控制在28℃,养殖周期为56d;
[0116] (5)采样检测
[0117] 采样前停食24h,从每个水箱中选取鱼11尾,抽血时用肝素润湿离心管及注射器,采取尾部静脉采血,于4℃静置24h,在4000r/min下离心10min后吸取上清液,-80℃备用,测血浆的非特异性指标、抗氧化指标及抗炎因子指标,然后把抽过血的试验鱼解剖,取其肝脏,-80℃备用,测定前,按质量体积比为1mg:9mL加入预冷的生理盐水,用匀浆机研磨制成10%匀浆液,于4℃下以4500r/min离心20min,取上清液进行肝脏非特异性指标和抗氧化指标的测定,本试验共测定14个指标,GSH-PX、SOD、MDA和CAT为抗氧化指标,ACP、AKP、LZM、GPT及GOT为生化指标及PGF2a、C5aR、c3a、PGE2、IL-6为抗炎因子指标;
[0118] (6)数据处理与统计分析
[0119] 数据用Excel 2010软件进行整理,采用SPSS 17.0软件进行单因素方差分析,差异显著(P<0.05)用Duncan’s法进行多重比较,结果用平均值±标准差表示,分析黄粉虫对锦鲤血液及肝脏生化指标的影响。
[0120]
抽取各实施例的样品进行检测分析,并与
现有技术进行对照,得出如下数据:
[0121]
[0122] 根据上述表格数据可以得出,当实施实施例2时,通过本发明一种黄粉虫代替鱼粉饲养锦鲤可行性的研究方法研究获得参数为肝脏ACP值为28U/gprot,肝脏AKP值为42U/gprot,血浆ACP值为28U/ml,血浆AKP值为27U/ml,而现有技术标准为肝脏ACP值为13U/gprot,肝脏AKP值为24U/gprot,血浆ACP值为19U/ml,血浆AKP值为24U/ml,因此本发明一种黄粉虫代替鱼粉饲养锦鲤可行性的研究方法研究获得的黄粉虫替代鱼粉对锦鲤进行饲养时肝脏及血浆理化数据具有所提高,因此本发明具备显著的优越性。
[0123] 本发明提供了一种黄粉虫代替鱼粉饲养锦鲤可行性的研究方法,其方法包括实验材料准备-饲料准备-实验预备-实验管理-采样检测-数据处理与统计分析,本试验中用黄粉虫替代鱼粉饲养锦鲤,通过研究其对锦鲤非特异性指标、抗氧化指标及抗炎因子的影响,以期为黄粉虫在水产养殖营养与饲料方面的应用提供理论基础,所述步骤(2)配方中的原料成分包括褐鱼粉、黄粉虫、虾粉、小麦、豆粕、面粉、谷朊粉、淀粉、豆油、多种维生素、多种矿物质、菜籽、玉米、粗蛋白、粗脂肪、灰分及水分;所述G1原料配方为:15.0%褐鱼粉、7.0%虾粉、7.3%小麦、25.5%豆粕、10.0%面粉、12.0%谷朊粉、2.0%淀粉、3.2%豆油、1.0%多种维生素、4.0%多种矿物质、9.0%菜籽、4.0%玉米、50.8%粗蛋白、17.1%粗脂肪、7.9%灰分及23.9%水分;所述G2原料配方为:12.0%褐鱼粉、3.0%黄粉虫、7.0%虾粉、6.4%小麦、27.0%豆粕、10.0%面粉、12.0%谷朊粉、2.0%淀粉、2.6%豆油、1.0%多种维生素、4.0%多种矿物质、9.0%菜籽、4.0%玉米、50.2%粗蛋白、18.2%粗脂肪、8.0%灰分及
23.1%水分;所述G3原料配方为:9.0%褐鱼粉、6.0%黄粉虫、7.0%虾粉、5.5%小麦、
28.5%豆粕、10.0%面粉、12.0%谷朊粉、2.0%淀粉、1.9%豆油、1.0%多种维生素、4.0%多种矿物质、9.0%菜籽、4.0%玉米、50.4%粗蛋白、18.0%粗脂肪、8.1%灰分及23.9%水分;所述G4原料配方为:6.0%褐鱼粉、9.0%黄粉虫、7.0%虾粉、4.7%小麦、30.0%豆粕、
10.0%面粉、12.0%谷朊粉、2.0%淀粉、1.3%豆油、1.0%多种维生素、4.0%多种矿物质、
9.0%菜籽、4.0%玉米、50.6%粗蛋白、18.2%粗脂肪、8.0%灰分及23.0%水分;所述G5原料配方为:3.0%褐鱼粉、12.0%黄粉虫、7.0%虾粉、3.9%小麦、31.5%豆粕、10.0%面粉、
12.0%谷朊粉、2.0%淀粉、0.6%豆油、1.0%多种维生素、4.0%多种矿物质、9.0%菜籽、
4.0%玉米、50.3%粗蛋白、17.4%粗脂肪、7.9%灰分及24.0%水分;所述G6原料配方为:
15.0%黄粉虫、7.0%虾粉、3.5%小麦、32.5%豆粕、10.0%面粉、12.0%谷朊粉、2.0%淀粉、1.0%多种维生素、4.0%多种矿物质、9.0%菜籽、4.0%玉米、50.7%粗蛋白、17.1%粗脂肪、8.0%灰分及24.0%水分,通过以上各实验组的饲料成分一方面能够确保锦鲤生长所需的营养成分,另一方面通过单因子设置黄粉虫含量的不同,达到研究黄粉虫替代鱼粉的效果,所述步骤(3)养殖环境制造方法为养殖水箱提前24h用高锰酸钾水溶液进行浸泡消毒处理,养殖用水提前72h曝气,使用气石持续充氧,该生长环境能够除去环境中不利于锦鲤生长的因素,最大程度保证单因子变量,即黄粉虫含量的改变,使得研究结果更具科学性,所述步骤(3)实验用鱼体能正常生理活动的条件下驯化10d后开始试验,该方法能够使得锦鲤适应实验生长环境,防止突然环境改变对锦鲤生长造成影响。
[0124] 以上所述的仅是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明创造构思的前提下,还可以做出若干
变形和改进,这些都属于本发明的保护范围。