一种源于桔青霉的青霉烯醇A2的抗肿瘤用途
专利汇可以提供一种源于桔青霉的青霉烯醇A2的抗肿瘤用途专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 涉及一种源于桔青霉的 生物 碱 类化合物青霉烯醇A2的抗 肿瘤 用途。该桔青霉（Penicillium citrinum）IBPT-5已于2013年12月25日保藏在中国典型培养物保藏中心，地址:武汉大学，保藏编号是：CCTCC NO：M 2013713。经实验证实，该化合物对多种肿瘤细胞具有较好的抗肿瘤活性。可作为制备 细胞增殖 抑制药物或抗肿瘤药物用于抗肿瘤的研究。肿瘤细胞包括：人结肠癌细胞SW620、人肝癌细胞Huh7、人结肠癌细胞SW480、人食管鳞癌细胞KYSE450、人食管癌细胞EC9706、人肝癌细胞PLC。，下面是一种源于桔青霉的青霉烯醇A2的抗肿瘤用途专利的具体信息内容。
1.一株桔青霉（Penicillium citrinum）IBPT-5，该菌株已于2013年12月25日保藏在中国典型培养物保藏中心，地址: 武汉 武汉大学，保藏编号是：CCTCC NO：M 2013713。
2.一种源于权利要求1所述桔青霉的生物碱类化合物青霉烯醇A2，其特征在于：所述化合物结构式为
。
3.权利要求2所述的化合物的制备方法，其特征在于：所述制备方法的具体步骤如下：
（1）发酵生产
培养微生物的常规方法，取桔青霉（Penicillium citrinum）IBPT-5接种到PDA固体斜面培养基上在28℃培养箱中培养4天，然后接种到培养液中，28℃静止培养30天后，获得菌丝体和发酵液；所述培养液组成：每升水含甘露醇20.0g、酵母膏3.0 g、麦芽糖20.0 g、味精10.0 g、葡萄糖10.0 g、KH2PO4 0.5 g、MgSO4 0.3 g、NaCl 30.0 g；
（2）浸膏的获得
用纱布将菌丝体和发酵液分离，将发酵液用2倍体积的乙酸乙酯萃取两次，萃取液减压蒸馏至干，得到发酵液的乙酸乙酯浸膏；
（3）化合物的分离精制
乙酸乙酯浸膏通过100-200目硅胶拌样后，以石油醚、二氯甲烷、甲醇为洗脱液用减压硅胶色谱柱梯度洗脱，取二氯甲烷：甲醇v/v=100:1的洗脱物，进一步以二氯甲烷、甲醇为洗脱液，通过加压硅胶柱层析梯度洗脱，得到二氯甲烷：甲醇v/v=50:1的洗脱物，继续以甲醇：水v/v=3:2为溶剂进行反相硅胶柱层析除去杂质，最后通过半制备液相色谱1010型ODS-A、10×250 mm、5μm：分离流速为5 mL/min，流动相为80%甲醇含0.1% TFA，得到tR 8.7 min的所述化合物。
4.权利要求2所述的化合物在制备肿瘤细胞增殖抑制药物中的应用。
5.权利要求2所述的化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。
6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述的肿瘤细胞包括人结肠癌细胞SW620、人肝癌细胞Huh7、人结肠癌细胞SW480、人食管鳞癌细胞KYSE450、人食管癌细胞EC9706、人肝癌细胞PLC。
一种源于桔青霉的青霉烯醇A2的抗肿瘤用途
技术领域
背景技术
发明内容
培养微生物的常规方法，取桔青霉（Penicillium citrinum）IBPT-5接种到PDA固体斜面培养基上在28℃培养箱中培养4天，然后接种到培养液中，28℃静止培养30天后，获得菌丝体和发酵液；所述培养液组成：每升水含甘露醇20.0g、酵母膏3.0 g、麦芽糖20.0 g、味精10.0 g、葡萄糖10.0 g、KH2PO4 0.5 g、MgSO4 0.3 g、NaCl 30.0 g；
（2）浸膏的获得
用纱布将菌丝体和发酵液分离，将发酵液用2倍体积的乙酸乙酯萃取两次，萃取液减压蒸馏至干，得到发酵液的乙酸乙酯浸膏；
（3）化合物的分离精制
乙酸乙酯浸膏通过100-200目硅胶拌样后，以石油醚、二氯甲烷、甲醇为洗脱液用减压硅胶色谱柱梯度洗脱，取二氯甲烷：甲醇v/v=100:1的洗脱物，进一步以二氯甲烷、甲醇为洗脱液，通过加压硅胶柱层析梯度洗脱，得到二氯甲烷：甲醇v/v=50:1的洗脱物，继续以甲醇：水v/v=3:2为溶剂进行反相硅胶柱层析除去杂质，最后通过半制备液相色谱1010型ODS-A、10×250 mm、5μm：分离流速为5 mL/min，流动相为80%甲醇含0.1% TFA，得到tR 8.7 min的所述化合物。
具体实施方式
生产菌的发酵培养：按培养微生物的常规方法，取桔青霉（Penicillium citrinum）IBPT-5 (已于2013年12月25日保藏在中国典型培养物保藏中心，地址: 武汉 武汉大学，保藏编号是：CCTCC NO：M 2013713) 适量，接种到PDA固体斜面培养基上在28℃培养箱中培养4天。
1 13
子式为C16H27NO4。 H和 C-NMR等NMR数据见表1。
被测样品溶液的配制 测试样品为上述实施1中分离精制的化合物纯品。精密称取适量样品，用甲醇配制成所需浓度的溶液，供测活性。
四氮唑盐（MTT）法 取对数生长期的肿瘤细胞，将细胞密度调至每毫升2×10个细胞，按每孔200微升接种于96孔细胞培养板中，于37℃通入5% CO2的培养箱中培养4小时。
每孔加入2微升样品液或空白溶液，培养24小时后，每孔加MTT液（MTT的每毫升5毫克生
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