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具有改善记忆功能的压片糖果及其制备方法

阅读:1061发布:2020-06-09

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1.具有改善记忆功能的压片糖果的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)首先按照比例称取植物蛋白酶解产物、玉米淀粉或者玉米淀粉改性物、甘露醇、微晶纤维素、硬脂酸镁、柠檬酸、香精、糖胺聚糖;
(2)然后将所有物料加入三维混合机中,充分混合,获得混合物;
(3)最后将混合物使用压片机直接压片,得到具有改善记忆功能的压片糖果。
2.根据权利要求1所述的具有改善记忆功能的压片糖果的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)首先按照比例称取植物蛋白酶解产物、玉米淀粉或者玉米淀粉改性物、甘露醇、微晶纤维素、硬脂酸镁、二氧化硅、柠檬酸、香精、糖胺聚糖;
所述植物蛋白酶解产物:玉米淀粉或者玉米淀粉改性物、甘露醇:微晶纤维素:硬脂酸镁:二氧化硅:柠檬酸:香精:糖胺聚糖的重量比是(20~40):(20~30):(40~60):(1~3):
(0.3~0.9):(0.2~0.4):(0.3~0.6):(0.5~2):(0.5~2);
(2)然后将所有物料加入三维混合机中,以4~12rmp/min混合5~10分钟,获得混合物;
(3)最后将混合物使用压片机直接压片,压片压为15~25kN,压片速度为20~40rmp/min,得到具有改善记忆功能的压片糖果。
3.根据权利要求2所述的具有改善记忆功能的压片糖果的制备方法,其特征在于,所述植物蛋白酶解产物为大豆蛋白酶解产物、花生蛋白酶解产物和核桃蛋白酶解产物中的一种,优选为核桃蛋白酶解产物。
4.根据权利要求3所述的具有改善记忆功能的压片糖果的制备方法,其特征在于,所述核桃蛋白酶解产物使用以下方法制备得到:
(1)取核桃粕将其与按重量比1:(10~20)混合,用摩尔浓度0.5~1.5mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH值至8~10,室温搅拌提取1~2小时,以6000~9000转/分钟离心30~40分钟,取上清液;将上清液用摩尔浓度0.5~1.5mol/L的盐酸调节pH值至4.0~4.5,以6000~
9000转/分钟离心10~20分钟,取沉淀物;将沉淀物加入其重量50~100倍的去离子水,用
0.5~1.5mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH值至7.0~8.0使其充分溶解,用去离子水通过截流分子量2~5kDa的透析膜透析24~48小时,收集透析液;将透析液真空冷冻干燥,得到核桃分离蛋白;
(2)取30~60g核桃分离蛋白加入200~400mL水,以2000~3000转/分钟均质1~5分钟;
用0.5~1.5mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH至7.0~8.0,在50~60℃保温10~20分钟后,加入核桃分离蛋白质量0.7~1.5%的酶,在50~60℃保温水解8~12小时;酶解结束后,将酶解体系升温至95~100℃保温10~20分钟灭酶;自然冷却至室温后,以6000~9000转/分钟离心20~40分钟,收集上清液;将上清液真空冷冻干燥,得到核桃蛋白酶解产物。
5.根据权利要求4所述的具有改善记忆功能的压片糖果的制备方法,其特征在于,所述酶为Alcalase 2.4L酶、木瓜蛋白酶、味蛋白酶、胰酶和中性蛋白酶中的一种或几种的混合物。
6.根据权利要求2所述的具有改善记忆功能的压片糖果的制备方法,其特征在于,所述玉米淀粉改性物由普通玉米淀粉和半乳甘露聚糖复合制备得到,具体过程为:称取半乳甘露聚糖于150~1000mL水中,于80~90℃搅拌混匀,自然冷却至室温,得到半乳甘露聚糖溶液;称取40~60g普通玉米淀粉,加入半乳甘露聚糖溶液中,于室温搅拌10~30分钟,置于40~50℃干燥至恒重;粉碎,过筛,加入水,调节水分含量15~20wt%,充分混匀,收集共混物;
将共混物于110~120℃反应3~4小时,再次于40~50℃干燥至恒重,粉碎,过筛,得到玉米淀粉改性物。
7.根据权利要求6所述的具有改善记忆功能的压片糖果的制备方法,其特征在于,所述半乳甘露聚糖添加量占普通玉米淀粉重量的0.5~1.5%。
8.根据权利要求6所述的具有改善记忆功能的压片糖果的制备方法,其特征在于,所述半乳甘露聚糖为瓜尔胶、塔拉胶和槐豆胶中的一种,优选为瓜尔胶。
9.根据权利要求2所述的具有改善记忆功能的压片糖果的制备方法,其特征在于,所述糖胺聚糖为刺参糖胺聚糖和/或鱼鳔糖胺聚糖。
10.具有改善记忆功能的压片糖果,其特征在于,采用权利要求1~9中任一项所述的具有改善记忆功能的压片糖果的制备方法加工而成。

说明书全文

具有改善记忆功能的压片糖果及其制备方法

技术领域

[0001] 本发明涉及功能性制品技术领域,特别是涉及具有改善记忆功能的压片糖果及其制备方法。

背景技术

[0002] 随着消费平以及消费习惯的逐年变化,压片糖果作为具有清口功能的产品渐取代口香糖成为消费者口袋里更为常见的清口必备物,口香糖的市场逐渐被压缩,其原因在于压片糖果可被人体分解消化,可以直接咀嚼吞咽,其食用方式更为方便且环保,不必像口香糖一样吐出,减少了环境污染的问题。
[0003] 片剂系指活性原料与适宜辅料均匀混合后压制而成的圆片状或异形片状固体制剂,片剂形式的产品可实现机械化生产,产量大,成本低,卫生标准易达到,具有质量稳定,便于服用和携带,为固体口服产品中最常用的剂型。粉末直接压片法是将干燥粉直接与辅料混合进行压片的方法。直接粉末压片法因省时节能、工艺简便、工序少、适用于湿热不稳定的物料等突出优点而深受青睐。但该法也存在对粉末流动性要求高、片重差异大、粉末压片容易造成裂片等弱点,对原辅料、设备、工艺、过程控制提出更高的要求。
[0004] 蛋白酶解产物活性肽类产品由于水解后疏水性基酸暴露,导致苦味突出,且容易吸潮不便于直接服用和储存。片剂可以通过添加甜味剂、香精、包衣等方法改善口感,从而提升消费者服用的接受度,此外片剂由于水分含量低,稳定性好,因此,活性肽产品适合制成片剂形式。本发明中使用蛋白酶解产物、花生碎、淀粉或者淀粉的改性物作为主要原料,改进压片糖果品质,使消费者能够在享受糖果原有美味的同时,得到健康和营养。

发明内容

[0005] 本发明所要解决的技术问题之一是提供一种具有改善记忆功能的压片糖果的制备方法。
[0006] 本发明所述具有改善记忆功能的压片糖果的制备方法,包括以下步骤:
[0007] (1)首先按照比例称取植物蛋白酶解产物、玉米淀粉或者玉米淀粉改性物、甘露醇、微晶纤维素、硬脂酸镁、柠檬酸、香精、糖胺聚糖;
[0008] (2)然后将所有物料加入三维混合机中,充分混合,获得混合物;
[0009] (3)最后将混合物使用压片机直接压片,得到具有改善记忆功能的压片糖果。
[0010] 具体地,所述具有改善记忆功能的压片糖果的制备方法,包括以下步骤:
[0011] (1)首先按照比例称取植物蛋白酶解产物、玉米淀粉或者玉米淀粉改性物、甘露醇、微晶纤维素、硬脂酸镁、二氧化硅、柠檬酸、香精、糖胺聚糖;
[0012] 所述植物蛋白酶解产物:玉米淀粉或者玉米淀粉改性物、甘露醇:微晶纤维素:硬脂酸镁:二氧化硅:柠檬酸:香精:糖胺聚糖的重量比是(20~40):(20~30):(40~60):(1~3):(0.3~0.9):(0.2~0.4):(0.3~0.6):(0.5~2):(0.5~2);
[0013] (2)然后将所有物料加入三维混合机中,以4~12rmp/min混合5~10分钟,获得混合物;
[0014] (3)最后将混合物使用压片机直接压片,压片压为15~25kN,压片速度为20~40rmp/min,得到具有改善记忆功能的压片糖果。
[0015] 进一步地,所述植物蛋白酶解产物为大豆蛋白酶解产物、花生蛋白酶解产物和核桃蛋白酶解产物中的一种,优选为核桃蛋白酶解产物。
[0016] 经过动物试验发现,大豆蛋白酶解产物、花生蛋白酶解产物和核桃蛋白酶解产物均能够显著改善记忆损伤小鼠的记忆能力(错误次数减少,潜伏期延长及错误反应降低),其中使用核桃蛋白酶解产物的效果最优。
[0017] 进一步地,所述核桃蛋白酶解产物使用以下方法制备得到:
[0018] (1)取核桃粕将其与水按重量比1:(10~20)混合,用摩尔浓度0.5~1.5mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH值至8~10,室温搅拌提取1~2小时,以6000~9000转/分钟离心30~40分钟,取上清液;将上清液用摩尔浓度0.5~1.5mol/L的盐酸调节pH值至4.0~4.5,以
6000~9000转/分钟离心10~20分钟,取沉淀物;将沉淀物加入其重量50~100倍的去离子水,用0.5~1.5mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH值至7.0~8.0使其充分溶解,用去离子水通过截流分子量2~5kDa的透析膜透析24~48小时,收集透析液;将透析液真空冷冻干燥,得到核桃分离蛋白;
[0019] (2)取30~60g核桃分离蛋白加入200~400mL水,以2000~3000转/分钟均质1~5分钟;用0.5~1.5mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH至7.0~8.0,在50~60℃保温10~20分钟后,加入核桃分离蛋白质量0.7~1.5%的酶,在50~60℃保温水解8~12小时;酶解结束后,将酶解体系升温至95~100℃保温10~20分钟灭酶;自然冷却至室温后,以6000~9000转/分钟离心20~40分钟,收集上清液;将上清液真空冷冻干燥,得到核桃蛋白酶解产物。
[0020] 在具体实施例方式中,核桃粕水溶液用氢氧化钠水溶液调节pH值至9.0,是因为核桃蛋白同时含有羧基和氨基,是一种两性分子,随着pH的升高,分子的电负性逐渐增强,彼此之间排斥作用增强,从而减少蛋白分子之间聚集,增大其溶解度;然而当pH超过9.0以后,过高pH会引起蛋白质发生变性,使得蛋白分子的等电点发生不可逆变化。所以为了最大程度保持核桃蛋白原有的结构和功能特性,优选pH 9.0作为提的最佳pH。
[0021] 另外,因为核桃蛋白同时含有羧基端和氨基端,是一种两性分子,在低于其等电点的酸性环境中,蛋白分子主要以正离子存在,溶解性较好;高于其等电点的弱酸性或碱性环境中,蛋白分子主要以负离子的形式存在,相互之间存在排斥,不容易引起彼此之间的聚集,因此溶解性也较好,然而当其pH位于其等电点4.0附近时,核桃蛋白分子净电荷几乎为0,彼此之间排斥作用大大减弱,而此时核桃蛋白分子绝对带电量达到最大值,极易引起各分子之间带不同种电荷的端基发生相互吸引而引起蛋白聚集,从而产生沉淀。
[0022] 进一步地,所述酶为Alcalase 2.4L酶、木瓜蛋白酶、味蛋白酶、胰酶和中性蛋白酶中的一种或几种的混合物。
[0023] 进一步地,所述玉米淀粉改性物由普通玉米淀粉和半乳甘露聚糖复合制备得到,具体过程为:称取半乳甘露聚糖于150~1000mL水中,于80~90℃搅拌混匀,自然冷却至室温,得到半乳甘露聚糖溶液;称取40~60g普通玉米淀粉,加入半乳甘露聚糖溶液中,于室温搅拌10~30分钟,置于40~50℃干燥至恒重;粉碎,过筛,加入水,调节水分含量15~20wt%,充分混匀,收集共混物;将共混物于110~120℃反应3~4小时,再次于40~50℃干燥至恒重,粉碎,过筛,得到玉米淀粉改性物。
[0024] 进一步地,所述半乳甘露聚糖添加量占普通玉米淀粉重量的0.5~1.5%。
[0025] 进一步地,所述半乳甘露聚糖为瓜尔胶、塔拉胶和槐豆胶中的一种,优选为瓜尔胶。
[0026] 进一步地,所述糖胺聚糖为刺参糖胺聚糖和/或鱼鳔糖胺聚糖。优选地,所述糖胺聚糖为刺参糖胺聚糖和鱼鳔糖胺聚糖以质量比1:1组成的混合物。
[0027] 本发明所要解决的技术问题之二是提供一种具有改善记忆功能的压片糖果,采用上述任一项所述的具有改善记忆功能的压片糖果的制备方法加工而成。
[0028] 本发明所述具有改善记忆功能的压片糖果表面光滑美观、酸甜爽口、硬度和咀嚼性适当,是一款营养丰富的健康食品。

具体实施方式

[0029] 实施例中原料介绍如下:
[0030] 普通玉米淀粉,厂家济南春禄福商贸有限公司,食品级。
[0031] 甘露醇,食品级,厂家郑州超群化工食品有限公司。
[0032] 微晶纤维素,食品级,厂家河北鹏宇生物科技有限公司。
[0033] 硬脂酸镁,食品级,厂家郑州康源化工产品有限公司。
[0034] 二氧化硅,食品级,厂家河南燕康食品添加剂有限公司。
[0035] 柠檬酸,食品级,厂家苏州康硕化工有限公司。
[0036] 香精,厂家河南一品香精香料有限公司。
[0037] 瓜尔胶、塔拉胶和槐豆胶,食品级,厂家河北五百科技有限公司。
[0038] 刺参糖胺聚糖参照专利申请号201010112839.6的实施例1制备得到。
[0039] 大豆粕,花生粕,核桃粕,厂家济南君达化工科技有限公司。
[0040] Alcalase 2.4L酶,木瓜蛋白酶,风味蛋白酶,胰酶,中性蛋白酶(由枯草芽孢杆菌经培养发酵后得到,属于一种内切酶),酶活力80万U/g,厂家东恒华道生物科技有限责任公司。
[0041] 鱼鳔糖胺聚糖参照专利申请号201710330111.2的实施例1制备得到。
[0042] 在本发明未作具体说明的情况下,室温为20~25℃。
[0043] 在本发明未作具体说明的情况下,搅拌转速为100转/分钟。
[0044] 在本发明未作具体说明的情况下,真空冷冻干燥的具体条件为:预冻温度-80℃,预冻时间2小时,冷冻温度-70℃,冷冻时间24小时,绝对压强100Pa。
[0045] 实施例1
[0046] 具有改善记忆功能的压片糖果的制备方法,包括以下步骤:
[0047] (1)首先按照比例称取植物蛋白酶解产物、普通玉米淀粉、甘露醇、微晶纤维素、硬脂酸镁、二氧化硅、柠檬酸、香精、刺参糖胺聚糖;
[0048] 所述植物蛋白酶解产物:普通玉米淀粉、甘露醇:微晶纤维素:硬脂酸镁:二氧化硅:柠檬酸:香精:刺参糖胺聚糖的重量比是30:20:45:2:0.6:0.3:0.4:1:1;
[0049] (2)然后将所有物料加入三维混合机中,以6rmp/min混合10分钟,获得混合物;
[0050] (3)最后将混合物使用压片机直接压片,压片压力为20kN,压片速度为30rmp/min,得到具有改善记忆功能的压片糖果。
[0051] 所述植物蛋白酶解产物为大豆蛋白酶解产物,使用以下方法制备得到:
[0052] (1)取大豆粕将其与水按重量比1:10混合,用摩尔浓度1mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH值至9,室温搅拌提取1小时,以8000转/分钟离心30分钟,取上清液;将上清液用摩尔浓度1mol/L的盐酸调节pH值至4.0,以8000转/分钟离心10分钟,取沉淀物;将沉淀物加入其重量80倍的去离子水,用1mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH值至7.0使其充分溶解,用去离子水通过截流分子量5kDa的透析膜透析24小时,收集透析液;将透析液真空冷冻干燥,得到大豆分离蛋白
[0053] (2)取50g大豆分离蛋白加入300mL去离子水,以3000转/分钟均质1分钟;用1mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH至7,在50℃保温20分钟后,加入大豆分离蛋白质量1.2%的木瓜蛋白酶,在50℃保温水解8小时;酶解结束后,将酶解体系以2℃/分钟升温至95℃保温15分钟灭酶;自然冷却至室温后,以8000转/分钟离心20分钟,收集上清液;将上清液真空冷冻干燥,得到大豆蛋白酶解产物。
[0054] 实施例2
[0055] 具有改善记忆功能的压片糖果的制备方法,包括以下步骤:
[0056] (1)首先按照比例称取植物蛋白酶解产物、普通玉米淀粉、甘露醇、微晶纤维素、硬脂酸镁、二氧化硅、柠檬酸、香精、刺参糖胺聚糖;
[0057] 所述植物蛋白酶解产物:普通玉米淀粉、甘露醇:微晶纤维素:硬脂酸镁:二氧化硅:柠檬酸:香精:刺参糖胺聚糖的重量比是30:20:45:2:0.6:0.3:0.4:1:1;
[0058] (2)然后将所有物料加入三维混合机中,以6rmp/min混合10分钟,获得混合物;
[0059] (3)最后将混合物使用压片机直接压片,压片压力为20kN,压片速度为30rmp/min,得到具有改善记忆功能的压片糖果。
[0060] 所述植物蛋白酶解产物为花生蛋白酶解产物,使用以下方法制备得到:
[0061] (1)取花生粕将其与水按重量比1:10混合,用摩尔浓度1mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH值至9,室温搅拌提取1小时,以8000转/分钟离心30分钟,取上清液;将上清液用摩尔浓度1mol/L的盐酸调节pH值至4.0,以8000转/分钟离心10分钟,取沉淀物;将沉淀物加入其重量80倍的去离子水,用1mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH值至7.0使其充分溶解,用去离子水通过截流分子量5kDa的透析膜透析24小时,收集透析液;将透析液真空冷冻干燥,得到花生分离蛋白;
[0062] (2)取50g花生分离蛋白加入300mL去离子水,以3000转/分钟均质1分钟;用1mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH至7,在50℃保温20分钟后,加入花生分离蛋白质量1.2%的木瓜蛋白酶,在50℃保温水解8小时;酶解结束后,将酶解体系以2℃/分钟升温至95℃保温15分钟灭酶;自然冷却至室温后,以8000转/分钟离心20分钟,收集上清液;将上清液真空冷冻干燥,得到花生蛋白酶解产物。
[0063] 实施例3
[0064] 具有改善记忆功能的压片糖果的制备方法,包括以下步骤:
[0065] (1)首先按照比例称取植物蛋白酶解产物、普通玉米淀粉、甘露醇、微晶纤维素、硬脂酸镁、二氧化硅、柠檬酸、香精、刺参糖胺聚糖;
[0066] 所述植物蛋白酶解产物:普通玉米淀粉、甘露醇:微晶纤维素:硬脂酸镁:二氧化硅:柠檬酸:香精:刺参糖胺聚糖的重量比是30:20:45:2:0.6:0.3:0.4:1:1;
[0067] (2)然后将所有物料加入三维混合机中,以6rmp/min混合10分钟,获得混合物;
[0068] (3)最后将混合物使用压片机直接压片,压片压力为20kN,压片速度为30rmp/min,得到具有改善记忆功能的压片糖果。
[0069] 所述植物蛋白酶解产物为核桃蛋白酶解产物,使用以下方法制备得到:
[0070] (1)取核桃粕将其与水按重量比1:10混合,用摩尔浓度1mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH值至9,室温搅拌提取1小时,以8000转/分钟离心30分钟,取上清液;将上清液用摩尔浓度1mol/L的盐酸调节pH值至4.0,以8000转/分钟离心10分钟,取沉淀物;将沉淀物加入其重量80倍的去离子水,用1mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH值至7.0使其充分溶解,用去离子水通过截流分子量5kDa的透析膜透析24小时,收集透析液;将透析液真空冷冻干燥,得到核桃分离蛋白;
[0071] (2)取50g核桃分离蛋白加入300mL去离子水,以3000转/分钟均质1分钟;用1mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH至7,在50℃保温20分钟后,加入核桃分离蛋白质量1.2%的木瓜蛋白酶,在50℃保温水解8小时;酶解结束后,将酶解体系以2℃/分钟升温至95℃保温15分钟灭酶;自然冷却至室温后,以8000转/分钟离心20分钟,收集上清液;将上清液真空冷冻干燥,得到核桃蛋白酶解产物。
[0072] 测试例1
[0073] 动物试验:采用小鼠对大豆蛋白酶解产物、花生蛋白酶解产物和核桃蛋白酶解产物进行动物试验测试。
[0074] 选取健康NIH小鼠,体重18~22g,全为雌性,购于广东省医学实验动物中心。将所需小鼠分为对照组和实验组,实验组分别灌胃333.3mg/kg大豆蛋白酶解产物、333.3mg/kg花生蛋白酶解产物、333.3mg/kg核桃蛋白酶解产物,对照组灌胃等量的去离子水。所有组别小鼠均接受训练且由跳台记录仪进行测试。在实验过程中,样品会连续不断地给药
[0075] 于给药四周的末次给药后次日开始训练小鼠,将动物放入YLS-2T型小鼠跳台记录仪内,先适应环境3分钟,然后通以36V交流电进行刺激。小鼠先训练一次后,将动物放在反应箱内,记录5分钟内小鼠跳下平台的错误次数和第一次跳下平台的潜伏期,以此作为学习成绩(记忆获得)。24小时后进行重测验,将小鼠放在平台上,记录各鼠第一次跳下平台的潜伏期、小鼠3分钟内电击次数和受电击的动物数,计算出现错误反应的动物百分率(记忆巩固)。停止训练5天后,进行一次记忆消退实验(记忆再现),方法同重测验。
[0076] 错误反应的动物百分率%=受电击的动物数/该组动物总数×100%。
[0077] 具体测试结果见表1。
[0078] 表1植物蛋白酶解产物对正常小鼠在跳台实验中的记忆作用
[0079]
[0080]
[0081] 从表1可以看出,大豆蛋白酶解产物、花生蛋白酶解产物和核桃蛋白酶解产物均能够显著改善记忆损伤小鼠的记忆能力(错误次数减少,潜伏期延长及错误反应降低),其中实施例3使用核桃蛋白酶解产物的效果最优。
[0082] 实施例4~7
[0083] 具有改善记忆功能的压片糖果的制备方法,包括以下步骤:
[0084] (1)首先按照比例称取植物蛋白酶解产物、普通玉米淀粉、甘露醇、微晶纤维素、硬脂酸镁、二氧化硅、柠檬酸、香精、刺参糖胺聚糖;
[0085] 所述植物蛋白酶解产物:普通玉米淀粉、甘露醇:微晶纤维素:硬脂酸镁:二氧化硅:柠檬酸:香精:刺参糖胺聚糖的重量比是30:20:45:2:0.6:0.3:0.4:1:1;
[0086] (2)然后将所有物料加入三维混合机中,以6rmp/min混合10分钟,获得混合物;
[0087] (3)最后将混合物使用压片机直接压片,压片压力为20kN,压片速度为30rmp/min,得到具有改善记忆功能的压片糖果。
[0088] 所述植物蛋白酶解产物为核桃蛋白酶解产物,使用以下方法制备得到:
[0089] (1)取核桃粕将其与水按重量比1:10混合,用摩尔浓度1mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH值至9,室温搅拌提取1小时,以8000转/分钟离心30分钟,取上清液;将上清液用摩尔浓度1mol/L的盐酸调节pH值至4.0,以8000转/分钟离心10分钟,取沉淀物;将沉淀物加入其重量80倍的去离子水,用1mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH值至7.0使其充分溶解,用去离子水通过截流分子量5kDa的透析膜透析24小时,收集透析液;将透析液真空冷冻干燥,得到核桃分离蛋白;
[0090] (2)取50g核桃分离蛋白加入300mL去离子水,以3000转/分钟均质1分钟;用1mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH至7,在50℃保温20分钟后,加入核桃分离蛋白质量1.2%的酶,在50℃保温水解8小时;酶解结束后,将酶解体系以2℃/分钟升温至95℃保温15分钟灭酶;自然冷却至室温后,以8000转/分钟离心20分钟,收集上清液;将上清液真空冷冻干燥,得到核桃蛋白酶解产物。
[0091] 实施例4使用的酶为胰酶,实施例5使用的酶为风味蛋白酶,实施例6使用的酶为Alcalase 2.4L酶,实施例7使用的酶为中性蛋白酶。
[0092] 测试例2
[0093] 1)蛋白回收率的测定:使用凯氏定氮法测定酶解产物上清液的氮含量以及核桃蛋白粉中的氮含量。按下式计算蛋白回收率:
[0094] 蛋白回收率=(W1×M1)/(W2×M2)×100%
[0095] 式中,W1指酶解液的氮含量,%;M1指酶解液的总质量,g;W2指核桃蛋白粉的氮含量,%;M2指所加入的核桃蛋白粉的质量,g。
[0096] 2)肽得率的测定:参考文献《不同酶水解泥鳅蛋白的特性研究》(游丽君,四川大学学报,2008,40(1):74-80)进行。
[0097] 3)核桃蛋白酶解产物乙酰胆碱酯酶抑制活性的测定:实验中样品浓度为20mg/mL,在96孔酶标板中分别加入30μL ATCI(碘代硫代乙酰胆碱,7.5mmol/L)、125μL DNTB(5,5’-二硫双硝基苯甲酸,3mmol/L)、40μL缓冲液液B(50mmol/L Tris-HCl,pH8,含0.1%血清蛋白(BSA)和50μL样品,37℃保温20分钟后,加入30μL乙酰胆碱酯酶,412nm下扫描30次,间隔为1分钟。按照下式计算乙酰胆碱酯酶抑制率。
[0098] 乙酰胆碱酯酶抑制率=[1-(Aj-Ai)/(A1-A0)]×100%
[0099] 公式中,Aj指加入样品并反应后其在412nm处吸光值;Ai指同浓度样品在此吸光值下的吸收;A1指加入用PBS代替样品并反应后的吸光值;A0指不加酶与样品时的吸光值。
[0100] 具体测试结果见表2。
[0101] 表2核桃蛋白酶解性能测试表
[0102]
[0103] 从2可以看出,实施例6使用Alcalase 2.4L酶,核桃蛋白酶解的综合性能最佳,这是由于核桃蛋白中含有较多的疏水性氨基酸,而Alcalase 2.4L酶碱性蛋白酶对由疏水性氨基酸的羧基构成的肽段具有特异性,因而其剪切位点较多,其蛋白回收率、肽得率均较高,而且Alcalase 2.4L酶酶解产物具有最高的乙酰胆碱酯酶抑制活性。
[0104] 实施例8
[0105] 实施例8和实施例6基本相同,区别仅在于:将Alcalase 2.4L酶替换为风味蛋白酶和Alcalase 2.4L酶以质量比1:5组成的混合物。
[0106] 测试例3
[0107] 1)水解度的测定:参照《青养蛋白抗氧化肽的制备及其胃肠道消化性的研究》(顾敏,2013,34(23):1966-200,食品工业科技)进行。
[0108] 2)转化率的测定:参照《不同分子质量段小麦面筋蛋白酶解液对美拉德反应物风味的影响》(钟泓波,2012,38(7):63-67,食品与发酵工业)进行。
[0109] 具体测试结果见表3。
[0110] 表3核桃蛋白酶解性能测试表
[0111]  实施例6 实施例8
蛋白回收率(%) 86.0 87.1
肽得率(%) 70.8 69.5
水解度(%) 9.4 11.7
转化率(%) 11.1 12.6
乙酰胆碱酯酶抑制(%) 38.9 37.3
[0112] 从表3可以看出,实施例6条件下制备的核桃蛋白酶解产物乙酰胆碱酯酶抑制活性最佳,且具有较好的蛋白回收率和水解度。然而此条件下制备的酶解苦味突出,由于考虑到核桃蛋白酶解液用于压片糖果中,因此需要对其进行脱苦。添加风味蛋白酶可以对蛋白酶解液脱苦,这是因为风味蛋白酶属于外切酶,能够水解肽链末端的疏水性氨基酸等苦味氨基酸以达到降低产物苦味的效果。实施例8和实施例6相比,核桃蛋白酶解液的苦味明显减少,而核桃蛋白的回收率、肽得率、乙酰胆碱酯酶抑制活性均没有显著变化(p>0.05)。此外,加入风味蛋白酶后,核桃酶解液的水解度和转化率明显提升,这是由于风味蛋白酶含有外切酶,能够释放肽链末端的氨基酸,导致游离氨基酸的增加,进而引起水解度和转化率的迅速改变。
[0113] 实施例9
[0114] 具有改善记忆功能的压片糖果的制备方法,包括以下步骤:
[0115] (1)首先按照比例称取植物蛋白酶解产物、玉米淀粉改性物、甘露醇、微晶纤维素、硬脂酸镁、二氧化硅、柠檬酸、香精、刺参糖胺聚糖;
[0116] 所述植物蛋白酶解产物:玉米淀粉改性物、甘露醇:微晶纤维素:硬脂酸镁:二氧化硅:柠檬酸:香精:刺参糖胺聚糖的重量比是30:20:45:2:0.6:0.3:0.4:1:1;
[0117] (2)然后将所有物料加入三维混合机中,以6rmp/min混合10分钟,获得混合物;
[0118] (3)最后将混合物使用压片机直接压片,压片压力为20kN,压片速度为30rmp/min,得到具有改善记忆功能的压片糖果。
[0119] 所述植物蛋白酶解产物为核桃蛋白酶解产物,使用以下方法制备得到:
[0120] (1)取核桃粕将其与水按重量比1:10混合,用摩尔浓度1mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH值至9,室温搅拌提取1小时,以8000转/分钟离心30分钟,取上清液;将上清液用摩尔浓度1mol/L的盐酸调节pH值至4.0,以8000转/分钟离心10分钟,取沉淀物;将沉淀物加入其重量80倍的去离子水,用1mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH值至7.0使其充分溶解,用去离子水通过截流分子量5kDa的透析膜透析24小时,收集透析液;将透析液真空冷冻干燥,得到核桃分离蛋白;
[0121] (2)取50g核桃分离蛋白加入300mL去离子水,以3000转/分钟均质1分钟;用1mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH至7,在50℃保温20分钟后,加入核桃分离蛋白质量1.2%的酶,所述酶为风味蛋白酶和Alcalase 2.4L酶以质量比1:5组成的混合物,在50℃保温水解8小时;酶解结束后,将酶解体系以2℃/分钟升温至95℃保温15分钟灭酶;自然冷却至室温后,以
8000转/分钟离心20分钟,收集上清液;将上清液真空冷冻干燥,得到核桃蛋白酶解产物。
[0122] 所述玉米淀粉改性物由普通玉米淀粉和半乳甘露聚糖复合制备得到,具体过程为:称取半乳甘露聚糖于190mL蒸馏水中,于90℃搅拌混匀,自然冷却至室温,得到半乳甘露聚糖溶液;称取50g普通玉米淀粉,加入半乳甘露聚糖溶液中,于室温搅拌30分钟,置于45℃干燥至恒重;粉碎,过100目筛,加入水,调节水分含量20wt%,充分混匀,收集共混物;将共混物于120℃反应4小时,再次于45℃干燥至恒重,粉碎,过100目筛,得到玉米淀粉改性物。
[0123] 实施例9中:半乳甘露聚糖添加量占普通玉米淀粉重量的0;
[0124] 实施例10:半乳甘露聚糖为槐豆胶,半乳甘露聚糖添加量占普通玉米淀粉重量的0.5%;
[0125] 实施例11:半乳甘露聚糖为槐豆胶,半乳甘露聚糖添加量占普通玉米淀粉重量的1%;
[0126] 实施例12:半乳甘露聚糖为槐豆胶,半乳甘露聚糖添加量占普通玉米淀粉重量的2%;
[0127] 实施例13:半乳甘露聚糖为塔拉胶,半乳甘露聚糖添加量占普通玉米淀粉重量的0.5%;
[0128] 实施例14:半乳甘露聚糖为塔拉胶,半乳甘露聚糖添加量占普通玉米淀粉重量的1%;
[0129] 实施例15:半乳甘露聚糖为塔拉胶,半乳甘露聚糖添加量占普通玉米淀粉重量的2%;
[0130] 实施例16:半乳甘露聚糖为瓜尔胶,半乳甘露聚糖添加量占普通玉米淀粉重量的0.5%;
[0131] 实施例17:半乳甘露聚糖为瓜尔胶,半乳甘露聚糖添加量占普通玉米淀粉重量的1%;
[0132] 实施例18:半乳甘露聚糖为瓜尔胶,半乳甘露聚糖添加量占普通玉米淀粉重量的2%。
[0133] 测试例4
[0134] 对普通玉米淀粉以及玉米淀粉改性物中快消化淀粉、慢消化淀粉和抗性淀粉的含量进行测定,参照《粉状富淀粉传统保健食材水化合物体外消化特性》(中国农业大学学报,梁晓丽,2011年第05期)进行。
[0135] 具体测试结果见表4。
[0136] 表4样品中快消化淀粉、慢消化淀粉和抗性淀粉的含量
[0137]
[0138] 从表4可以看出,相比于普通玉米淀粉,经湿热处理的普通玉米淀粉中快消化淀粉含量明显增大,慢消化淀粉含量也稍有增加,抗性淀粉含量则显著降低。半乳甘露聚糖为一类由半乳糖和甘露糖残基组成的多糖,其中较为常见的有瓜尔胶、塔拉胶和槐豆胶。此三种多糖均为非离子型多糖,且其中半乳糖与甘露糖的比例依次为1:2,1:3,1:4。由普通玉米淀粉和半乳甘露聚糖复合制备的玉米淀粉改性物中,抗性淀粉含量的大小顺序为:槐豆胶<塔拉胶<瓜尔胶。而半乳甘露聚糖的分子大小顺序为:槐豆胶<塔拉胶<瓜尔胶,即复合物的消化性与半乳甘露聚糖的分子大小有关,且含更多半乳糖基单元的半乳甘露聚糖更能有效增加抗性淀粉含量。
[0139] 实施例19
[0140] 实施例19与实施例18基本相同,区别仅在于:将所述糖胺聚糖由刺参糖胺聚糖替换为鱼鳔糖胺聚糖。
[0141] 实施例20
[0142] 实施例20与实施例18基本相同,区别仅在于:将所述糖胺聚糖由刺参糖胺聚糖替换为刺参糖胺聚糖和鱼鳔糖胺聚糖以质量比1:1组成的混合物。
[0143] 对实施例18~20具有改善记忆功能的压片糖果进行性能测试。
[0144] 1)脆碎度的测定:取压片样品10片,用吹风机吹去片剂脱落的粉末,精密称重,计为W1,置脆碎度仪圆筒中,在转速为每分钟25转的条件下,转动100次。取出,同法除去粉末,精密称重,计为W2,计算脆碎度。要求减失重量不得过1%,且不得检出断裂、龟裂及粉碎的片。如减失重童超过1%时,应复测2次,3次的平均减失重量不得过1%,并不得检出断裂、龟裂及粉碎的片。
[0145] 脆碎度=(W1-W2)/W1×100%。
[0146] 2)加速试验:温度40±2℃、相对湿度75±5%条件下放置6个月,然后取样进行菌落总数的测试。
[0147] 具体测试结果见表5。
[0148] 表5脆碎度和加速试验测试表
[0149]
[0150]
[0151] 应当理解,虽然本说明书按照实施方式加以描述,但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案,说明书的这种叙述方式仅仅是为了清楚起见,本领域技术人员应当将说明书作为一个整体,各实施例中的技术方案也可以经适当组合,形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。
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