用于预防、治疗和管理肾脏疾病的草药-矿物制剂及其制备方法专利检索-植物植物学专利检索查询-专利查询网

用于预防、治疗和管理肾脏疾病的草药-矿物制剂及其制备方法

阅读：42发布：2021-04-13

专利汇可以提供用于预防、治疗和管理肾脏疾病的草药-矿物制剂及其制备方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本文公开了用于预防和治疗肾脏疾病的草药-矿物制剂。该制剂包括用于治疗肾脏疾病的草药和矿物成分的组合。肾脏疾病包括与肾脏功能有关的任何病症，诸如慢性肾衰竭。，下面是用于预防、治疗和管理肾脏疾病的草药-矿物制剂及其制备方法专利的具体信息内容。

权利要求

1.一种用于治疗和管理肾脏疾病及相关并发症的制剂，所述制剂包括：
草药成分，所述草药成分包括香樟、菖蒲、云木香、穿心莲、心叶青牛胆、雪松、姜黄、异叶乌头、具芒小檗、荜拔、白花丹玫红、芫荽、余甘子、诃子、毗黎勒、夏巴胡椒、信筒子、荜拔、胡椒、印度没药、甘蔗和生姜，或它们的提取物；以及
矿物成分，所述矿物成分包括喜来芝和bhasma。
2.根据权利要求1所述的制剂，其中，所述草药成分还包括选自由以下组成的组的至少一种草药：盒果藤、斑籽、柴桂、锡兰肉桂、小豆蔻、竹甘露、黄细心、香附、羊蹄甲和止泻木，或它们的提取物。
3.根据权利要求1所述的制剂，其中，所述矿物成分包括选自由Mandurabhasma和Lohabhasma组成的组的至少一种bhasma。
4.根据权利要求3所述的制剂，其中，Mandura Bhasma以2至6wt％范围的量存在。
5.根据权利要求3所述的制剂，其中，Loha Bhasma以1至4wt％范围的量存在。
6.根据权利要求1所述的制剂，其中，香樟以1至4wt％范围的量存在，菖蒲以1至4wt％范围的量存在，云木香以1至4wt％范围的量存在，穿心莲以1至4wt％范围的量存在，心叶青牛胆以1至4wt％范围的量存在，雪松以1至4wt％范围的量存在，姜黄以1至4wt％范围的量存在，异叶乌头以1至4wt％范围的量存在，具芒小檗以1至4wt％范围的量存在，荜拔以1至
4wt％范围的量存在，白花丹玫红以1至4wt％范围的量存在，芫荽以1至4wt％范围的量存在，余甘子以1至4wt％范围的量存在，诃子以1至4wt％范围的量存在，毗黎勒以1至4wt％范围的量存在，夏巴胡椒以1至4wt％范围的量存在，信筒子以1至4wt％范围的量存在，夏巴胡椒以1至4wt％范围的量存在，荜拔以1至4wt％范围的量存在，胡椒以1至4wt％范围的量存在，生姜以1至4wt％范围的量存在，印度没药以6至10wt％范围的量存在，以及甘蔗以2至
6wt％范围的量存在。
7.根据权利要求1所述的制剂，其中，喜来芝以6至10wt％范围的量存在。
8.根据权利要求1所述的制剂，还包括选自由Yavakshara和Sarjakshara组成的组的至少一种碱。
9.根据权利要求8所述的制剂，其中，所述碱以≤2wt％的量存在。
10.根据权利要求1所述的制剂，还包括选自由岩盐、Sonchal盐和黑盐组成的组的至少一种盐。
11.根据权利要求10所述的制剂，其中，所述盐以1至4wt％范围的量存在。
12.根据权利要求1所述的制剂，还包括合适的赋形剂，优选阿拉伯胶。
13.根据权利要求1所述的制剂，还包括选自由以下组成的组的至少一种添加剂：香料、着色剂、防腐剂和pH调节剂。
14.根据权利要求1所述的制剂，其中，所述制剂以选自由以下组成的组的形式给药：粉剂、乳剂、片剂、胶囊剂、锭剂和丸剂。
15.根据权利要求1所述的制剂，其中，所述制剂为片剂形式。
16.根据权利要求15所述的制剂，其中，所述片剂为500mg片剂的形式。
17.根据权利要求1所述的制剂在制备用于治疗选自由以下组成的组的病症的药物中的用途：肾脏疾病、肾炎、肾病、慢性肾衰竭、贫血、电解质失衡、高血压、蛋白尿、高钾血症和相关并发症。
18.一种用于制备根据权利要求1所述的制剂的方法，所述方法包括：
将bhasmas、Guggulu和喜来芝磨细；
加入草药、碱和盐；以及
加入研磨汤剂、新鲜汁和gomutra，同时继续研磨以获得磨碎的物质。
19.根据权利要求18所述的用于制备制剂的方法，其中，所述bhasmas选自由Madura Bhasma和Loha Bhasma组成的组。
20.根据权利要求18所述的用于制备制剂的方法，其中，所述草药包括选自由以下组成的组的至少一种草药的细粉形式：菖蒲、云木香、异叶乌头、具芒小檗、荜拔、夏巴胡椒、白花丹玫红、盒果藤、斑籽、小豆蔻、黄细心和香附的干燥根；芫荽、余甘子、诃子、毗黎勒、荜拔、信筒子和胡椒的细粉状干燥果实；香樟的晶体；雪松的细粉状干燥芯材；柴桂的细粉状干燥叶；穿心莲的细粉状干燥全植物；生姜和姜黄的细粉状干燥根茎；心叶青牛胆、甘蔗和夏巴胡椒的细粉状干燥茎；以及锡兰肉桂、羊蹄甲和止泻木的细粉状干燥茎皮；竹甘露的分泌物和印度没药的油胶树脂。
21.根据权利要求18所述的用于制备制剂的方法，其中，所述碱包括选自由Yavakshara和Sarjakshara组成的组的至少一种碱。
22.根据权利要求18所述的用于制备制剂的方法，其中，所述盐包括选自由岩盐、Sonchal盐和黑盐组成的组的至少一种盐。
23.根据权利要求18所述的用于制备制剂的方法，其中，所述研磨汤剂是选自由以下组成的组的至少一种草药的汤剂：香附的干燥根、荜拔的干燥果实、总序天冬的干燥根、羊蹄甲的干燥茎皮、Oldanlandiaumbelata的干燥全植物、印度菝葜的干燥根、香根草的干燥根、余甘子的干燥果实、诃子的干燥果实、毗黎勒的干燥果实和黄细心的干燥根。
24.根据权利要求18所述的用于制备制剂的方法，其中，所述新鲜汁是选自由库拉索芦荟、石榴、狗牙根和菠萝组成的组的至少一种草药的汁。
25.一种治疗肾脏疾病和相关并发症的方法，所述方法包括给药治疗有效量的权利要求1中所述的制剂。
26.根据权利要求25所述的治疗肾脏疾病和相关并发症的方法，其中，所述治疗有效量为给药500至1000mg每天一至三次。
27.根据权利要求25所述的治疗肾脏疾病和相关并发症的方法，其中，给药所述制剂，同时给药作为处方用于治疗肾脏疾病和相关并发症的至少一种其他药物。

说明书全文

用于预防、治疗和管理肾脏疾病的草药-矿物制剂及其制备

方法

[0001] 相关申请的交叉引用

[0002] 本申请基于并源于2017年4月24日提交的印度临时申请201741014513的权益，其内容通过引用并入本文。

技术领域

[0003] 本说明书中公开的实施方式涉及在肾脏疾病的治疗、管理和预防中有效的草药-矿物制剂，并且更特别地作为充当肾保护剂的制剂。它还涉及这样的制剂的制备方法。

背景技术

[0004] 肾脏疾病是与肾脏功能有关的疾病。肾脏具有净化血液、保持水和盐平衡以及调节体液的体积和组成的能力，使其成为人体最重要的器官之一。肾脏的这种能力的任何损害都可能造成严重后果。因此，保持功能完善的肾脏对良好的健康至关重要。

[0005] 肾脏疾病可能是由多种原因引起的，如在急性肾损伤(AKI)的情况下，其中由于失血、脱水或药物使用等导致肾功能障碍。AKI通常是较突然且可逆的病症。在另一方面，慢性肾衰竭(CRF)是具有肾功能进行性丧失的不可逆病症。CRF的主要原因之一包括引起糖尿病性肾病的糖尿病。肾功能不全的其他主要适应症包括高血压、肾小球肾炎、感染等。

[0006] 已知各种治疗肾脏疾病的方法。可以根据肾脏疾病的原因选择适当的治疗路线。在一些情况下，药物可以直接用于治疗影响肾脏功能的主要并发症。这样的药物可以包括用于治疗糖尿病、高血压、高胆固醇、贫血等的药物。此外，在末期肾脏疾病的情况下，治疗将包括透析和肾脏移植。尽管在对抗医学的实践中通常实施的对症治疗方案可能有助于暂时缓解症状，但是它们通常并不关注改善肾脏的整体健康。

[0007] 另一方面，阿育吠陀(Ayurvedic)医学的核心理念是达到/维持系统中的和谐，并因此其方法致力于改善人体健康，而不是治疗症状。阿育吠陀干预在治疗肾脏疾病方面也是已知的。基于对各种草药的治愈特性的了解，已经开发了许多草药制剂。已经开发了具有诸如心叶青牛胆(Tinospora cordifolia)、诃子(Terminalia chebula)、黄细心(Boerhavia diffua)等的草药的制剂。然而，这样的制剂的有效性是有争议的。需要有效的方法来治疗/管理肾脏疾病。

[0008] 本公开的实施方式的目的

[0009] 本文公开的实施方式的主要目的是提供治疗肾脏疾病的组合物和方法。

[0010] 本文公开的实施方式的第二目的是提供管理肾脏疾病的组合物和方法。

[0011] 本文公开的实施方式的另一目的是提供预防肾脏疾病的组合物和方法。

[0012] 本文公开的实施方式的另一目的是提供草药-矿物制剂及其制备方法。

[0013] 当结合以下描述和所附附图考虑时，将更好地领会和理解本文的实施方式的这些和其他目的。然而，应当理解的是，以下描述虽然指示了优选实施方式及其众多具体细节，但是仅以说明性而非限制性的方式给出。可以在本文的实施方式的范围内进行许多变化和修改而不脱离其精神，并且本文的实施方式包括所有这些修改。

附图说明

[0014] 在所附附图中示出了本文公开的实施方式，在所有附图中，相似的附图标记在不同图中指示相应的部分。根据以下描述并参考附图，将更好地理解本文的实施方式，其中：

[0015] 图1(a)描绘了制备Swarna Makshika Bhasma的流程图；

[0016] 图1(b)描绘了制备Mandura Bhasma的流程图；

[0017] 图1(c)描绘了制备Loha Bhasma的流程图；

[0018] 图2描绘了制备强化片剂的流程图；

[0019] 图3表示了组I(正常对照)和组II(阳性对照)的肾脏的组织病理学观察；

[0020] 图4表示了用本文公开的实施方式治疗的组III和组IV的肾脏的组织病理学观察；以及

[0021] 图5表示了根据本文的实施方式的组I、组II、组III和组IV的肝脏的组织病理学观察。

具体实施方式

[0022] 参考在所附附图中示出且在以下描述中详述的非限制性实施方式，将更全面地解释本文的实施方式和其各种特征及有利细节。省略了对公知组分和加工技术的描述，以免不必要地模糊本文的实施方式。本文使用的实例仅旨在便于理解可以实践本文实施方式的方式以及进一步使本领域技术人员能够实践本文的实施方式。因此，实例不应被解释为限制本文实施方式的范围。

[0023] 本文的实施方式实现了具有治疗价值的草药-矿物制剂，以及用于制备该制剂的方法。本文公开的草药-矿物制剂可用于治疗、预防和管理肾脏疾病。在本文的各种实施方式中，肾脏疾病可以包括与肾脏有关的任何病症，诸如肾炎、肾病、慢性肾衰竭等。还观察到，本公开的制剂的实施方式可以有助于预防肾脏疾病的并发症，诸如贫血、电解质失衡、高血压、蛋白尿、高钾血症等。

[0024] 此外，本公开的制剂还可以用于增强肾实质对各种类型的肾毒性的抵抗力。制剂的各种实施方式还包括用作肾保护剂的补充剂。制剂可以用作单一疗法或用作用于治疗肾脏疾病的其他药物的辅助物。因此，本文公开的实施方式实现了用于治疗/管理/预防肾脏疾病的方法。

[0025] 制剂

[0026] 本文公开的实施方式提供了具有所选草药和矿物的组合的草药-矿物制剂。在实施方式中，草药-矿物制剂包括草药成分和矿物成分。在另一实施方式中，草药-矿物制剂包括草药成分、矿物成分和至少一种碱。在又一实施方式中，草药制剂包括草药成分、矿物成分、至少一种碱和至少一种盐。在实施方式中，草药-矿物制剂还可以包括一种或多种合适的赋形剂。

[0027] 草药成分

[0028] 在实施方式中，草药成分包括选自由以下组成的组的草药：香樟(Cinnamomum camphora)、菖蒲(Acorus calamus)、云木香(Saussurea lappa)、穿心莲(Anrographis paniculate)、心叶青牛胆、雪松(Cedrus deodara)、姜黄(Curcuma longa)、异叶乌头(Aconitum heterophylum)、具芒小檗(Berberis aristata)、荜拔(Piper longum)、白花丹玫红(Plumbago rosea)、芫荽(Coriandrum sativum)、余甘子(Emblica officinalis)、诃子、毗黎勒(Terminalia bellerica)、信筒子(Embelia ribes)、夏巴胡椒(Piper chaba)、荜拔(Piper longum)、甘蔗(Saccharum officinarum)、印度没药(Commophora mukul)、胡椒(Piper nigrum)和生姜(Zingiber officinalis)，或它们的提取物，或提取自这些草药的活性成分。在另一实施方式中，草药成分还包括选自以下的至少一种草药：盒果藤(Operculina terpethum)、斑籽(Baliospermum montanum)、柴桂(Cinnamomum tamala)、锡兰肉桂(Cinnamomum zeylanica)、小豆蔻(Elettaria cardamomum)、竹甘露(Bamboo manna)、黄细心、香附(Cyperus rotundas)、羊蹄甲(Bauhinia variegate)和止泻木(Holarrhena antidysenterica)，或它们的提取物，或提取自这些草药的活性成分。

[0029] 草药成分可以包括草药的特定部分(也称为草药组分)，诸如根、花、果实、茎、树皮、树脂、根茎、全植物、提取物等。在实施方式中，草药成分可以包括选自由以下组成的组的草药的根：菖蒲、云木香、异叶乌头、具芒小檗、荜拔、夏巴胡椒、白花丹玫红、盒果藤、斑籽、小豆蔻、黄细心和香附；选自由以下组成的组的草药的果实：芫荽、余甘子、诃子、毗黎勒、荜拔、信筒子和胡椒；香樟的晶体；雪松的芯材；柴桂的叶；穿心莲的全植物；生姜和姜黄的根茎；心叶青牛胆、甘蔗和夏巴胡椒的茎；以及锡兰肉桂、羊蹄甲和止泻木的茎皮；或它们的提取物。

[0030] 草药成分还可以包括可由草药或草药的任何部位流出的任何形式的分泌物、树脂或排出物。在实施方式中，草药成分可以包括竹甘露的分泌物和印度没药的油胶树脂。然而，草药-矿物制剂包括其他草药组分诸如叶、花等，也在本文提供的权利要求的范围内，只要不妨碍草药-矿物制剂的预期功能。

[0031] 草药组分可以以本领域通常已知的任何形式包括在制剂中。例如，草药组分可以是干燥的、粉末状、加工成浓缩物、提取物等。在一种优选的实施方式中，将草药组分干燥并粉末化，其进一步并入制剂中。在另一实施方式中，草药组分包括茎(例如：甘蔗的茎)，其可以被粉碎以产生提取物，进一步用于制剂中。

[0032] 在实施方式中，草药成分包括量在1至4wt％的范围内的草药香樟、菖蒲、云木香、穿心莲、心叶青牛胆、雪松、姜黄、异叶乌头、具芒小檗、荜拔、白花丹玫红、芫荽、余甘子、诃子、毗黎勒、夏巴胡椒、信筒子、荜拔、胡椒和生姜；量在6至10wt％的范围内的印度没药；以及量在2至6wt％的范围内的甘蔗。此外，在另一实施方式中，草药成分包括量在≤2wt％的范围内的至少一种盒果藤、斑籽、柴桂、锡兰肉桂、小豆蔻、竹甘露、黄细心、香附、羊蹄甲和止泻木。

[0033] 矿物成分

[0034] 在实施方式中，矿物成分包括Bhasmas或煅烧制品，诸如Swarna Makshika bhasma、Mandura bhasma和Loha bhasma。替代地，矿物成分也可以选自由铁锈、铁和黄铜矿中的至少一种组成的组。在公开的实施方式中，bhasmas与草药成分一起形成可生物利用的草药-矿物复合物，该复合物可用于治疗、预防和管理肾脏相关的并发症。在实施方式中，矿物成分还包括喜来芝(Shilajit)。然而，作为替代物或另外地，草药-矿物-制剂包括其他类似的煅烧制品或矿物，也在本文提供的权利要求书的范围内，只要不妨碍草药-矿物制剂的预期功能。

[0035] 在实施方式中，矿物成分包括在6至10wt％的范围内的喜来芝。在另一实施方式中，矿物成分包括量为1至4wt％的Swarna Makshika Bhasma；量为2至6wt％的Mandura Bhasma；量为1至4wt％的Loha Bhasma。

[0036] 碱

[0037] 此外，在实施方式中，碱包括选自由Yavakshara和Sarjakshara组成的组的至少一种碱。在本文的实施方式中公开的Yavakshara包括大麦(Hordeum vulgare)的碱，并且Sarjakshara包括Barilla。在实施方式中，本文公开的草药-矿物制剂包括量在≤2wt％的范围内的碱。

[0038] 盐

[0039] 在实施方式中，盐包括选自由岩盐、Sonchal盐和黑盐组成的组的至少一种盐。在实施方式中，本文公开的草药-矿物制剂包括量在1至4wt％的范围内的盐。

[0040] 在本文的各种实施方式中，公开的制剂还可以包括合适的赋形剂。合适的赋形剂包括本领域通常已知的溶剂、粘结剂、润滑剂、草药载体、油和盐。在优选的实施方式中，赋形剂包括阿拉伯胶。

[0041] 此外，可以包括在公开的制剂的各种实施方式中的草药成分和矿物成分的量可以在0至10wt％的范围内。在实施方式中，制剂包括香樟(1至4wt％)、菖蒲(1至4wt％)、云木香(1至4wt％)、穿心莲(1至4wt％)、心叶青牛胆(1至4wt％)、雪松(1至4wt％)、姜黄(1至4wt％)、异叶乌头(1至4wt％)、具芒小檗(1至4wt％)、荜拔(1至4wt％)、白花丹玫红(1至
4wt％)、芫荽(1至4wt％)、余甘子(1至4wt％)、诃子(1至4wt％)、毗黎勒(1至4wt％)、夏巴胡椒(1至4wt％)、信筒子(1至4wt％)、夏巴胡椒(1至4wt％)、荜拔(1至4wt％)、胡椒(1至
4wt％)、生姜(1至4wt％)、印度没药(6至10wt％)、喜来芝(6至10wt％)、甘蔗(2至6wt％)、Swarna Makshika bhasma(1至4wt％)、Mandura bhasma(2至6wt％)以及Lohabhasma(1至
4wt％)。

[0042] 在实施方式中，制剂包括香樟(1至4wt％)、菖蒲(1至4wt％)、云木香(1至4wt％)、穿心莲(1至4wt％)、心叶青牛胆(1至4wt％)、雪松(1至4wt％)、姜黄(1至4wt％)、异叶乌头(1至4wt％)、具芒小檗(1至4wt％)、荜拔(1至4wt％)、白花丹玫红(1至4wt％)、芫荽(1至4wt％)、余甘子(1至4wt％)、诃子(1至4wt％)、毗黎勒(1至4wt％)、夏巴胡椒(1至4wt％)、信筒子(1至4wt％)、夏巴胡椒(1至4wt％)、荜拔(1至4wt％)、胡椒(1至4wt％)、生姜(1至
4wt％)、印度没药(6至10wt％)、喜来芝(6至10wt％)、甘蔗(2至6wt％)、Yavakshara(1至
4wt％)、Sarjakshara(1至4wt％)、Swarna Makshika bhasma(1至4wt％)、Mandura bhasma(2至6wt％)以及Lohabhasma(1至4wt％)。

[0043] 此外，在又一实施方式中，制剂包括香樟(1至4wt％)、菖蒲(1至4wt％)、云木香(1至4wt％)、穿心莲(1至4wt％)、心叶青牛胆(1至4wt％)、雪松(1至4wt％)、姜黄(1至4wt％)、异叶乌头(1至4wt％)、具芒小檗(1至4wt％)、荜拔(1至4wt％)、白花丹玫红(1至4wt％)、芫荽(1至4wt％)、余甘子(1至4wt％)、诃子(1至4wt％)、毗黎勒(1至4wt％)、夏巴胡椒(1至4wt％)、信筒子(1至4wt％)、夏巴胡椒(1至4wt％)、荜拔(1至4wt％)、胡椒(1至4wt％)、生姜(1至4wt％)、印度没药(6至10wt％)、喜来芝(6至10wt％)、甘蔗(2至6wt％)、Yavakshara(1至4wt％)、Sarjakshara(1至4wt％)、岩盐(1至4wt％)、Sonchal盐(1至4wt％)、黑盐(1至
4wt％)、Swarna Makshika bhasma(1至4wt％)、Mandura bhasma(2至6wt％)以及Lohabhasma(1至4wt％)。

[0044] 在另一实施方式中，制剂还包括量在≤2wt％的范围内的盒果藤、斑籽、柴桂、锡兰肉桂、小豆蔻、竹甘露、黄细心、香附、羊蹄甲和止泻木中的至少一种。

[0045] 此外，阿拉伯胶的量可以是适合执行赋形剂活性的任何量。在实施方式中，制剂可以包括每500mg制剂0至50mg的范围内的阿拉伯胶，优选10wt％的阿拉伯胶。

[0046] 然而，显然配料的量可以进行略微变化，只要不妨碍草药-矿物制剂的预期功能。

[0047] 本文公开的草药-矿物制剂可以配制成各种剂型使其适合口服给药。草药-矿物制剂可以是片剂、丸剂、锭剂、颗粒剂、胶囊剂、溶液剂、乳剂、混悬剂的形式或任何其他适合使用的形式。在实施方式中，草药-矿物制剂配制成片剂形式，优选500mg片剂。例如：表1A描述了500mg片剂中各配料的量。

[0048] 本文还公开了用于治疗/预防/管理肾脏疾病的片剂。在实施方式中，片剂是具有表1A中所描述的草药成分、矿物成分和赋形剂的500mg片剂。

[0049] 表1A-每500mg片剂包括：

[0050]

[0051]

[0052]

[0053] 分析了片剂形式的公开的制剂的实施方式的参数，包括物理化学性质，诸如片剂硬度、干燥失重、测定、崩解时间、灰分值等，并记录了结果。表2描述了为确定公开的制剂的实施方式的物理化学性质而进行的分析的结果。在实施方式中，公开的制剂片剂具有如表2所描述的特点。对于本领域技术人员显而易见的是，可以在不脱离本发明范围的情况下对材料和方法两者进行许多修改。

[0054] 表2：

[0055]试验参数规格
描述深棕色双凸面盘
鉴定对于铁、钙呈阳性
平均重量 500mg±12.5mg
重量均一性实际平均重量±2.5％
片剂硬度 3.6kg/cm2
干燥失重 6.2％w/w
甲醇可溶性抽提物 41.2％w/v
氯仿可溶性抽提物 12.0％w/v
灰分值 15.2％w/w
平均崩解时间 26分钟
测定每个片剂含有铁-4.5mg、钙-15mg

[0056] 方法

[0057] 本文公开了制备草药-矿物制剂的方法的实施方式。在实施方式中，该方法包括：

[0058] 将bhasmas、Guggulu和喜来芝在研磨机中磨细；

[0059] 将草药、碱和盐加入研磨机中；以及

[0060] 加入研磨汤剂、新鲜草药汁和gomutra(牛尿)，同时继续研磨以获得磨碎的物质。

[0061] bhasmas包括Loha Bhasma、Mandura Bhasma和Swarna makshika bhasma中的至少一种。Bhasmas、Guggulu和喜来芝的混合物可以是半固体形式。在实施方式中，磨细可以进行约3小时的持续时间。

[0062] 此外，草药包括菖蒲、云木香、异叶乌头、具芒小檗、荜拔、夏巴胡椒、白花丹玫红、盒果藤、斑籽、小豆蔻、黄细心和香附的细粉状干燥根；芫荽、余甘子、诃子、毗黎勒、荜拔、信筒子和胡椒的细粉状干燥果实；香樟的晶体；雪松的细粉状干燥芯材；柴桂的细粉状干燥叶；穿心莲的细粉状干燥全植物；生姜和姜黄的细粉状干燥根茎；心叶青牛胆、甘蔗和夏巴胡椒的细粉状干燥茎；以及锡兰肉桂、羊蹄甲和止泻木的细粉状干燥茎皮；竹甘露的分泌物和印度没药的油胶树脂。在实施方式中，可以通过将草药组分粉末化并通过80目筛网进行筛分来获得细粉状的草药/草药组分。

[0063] 研磨汤剂是可以促进研磨的草药的汤剂。在实施方式中，研磨汤剂包括选自由以下组成的列表中的至少一种草药的汤剂：香附、荜拔、总序天冬(Asparagus racemosus)、羊蹄甲、Oldanlandia umbelata、印度菝葜(Hemidesmus indicus)、香根草(Vetiveria zizanioides)、余甘子、诃子、毗黎勒和黄细心。汤剂可以通过本领域中通常已知的任何煎煮方法获得。在实施方式中，制备研磨汤剂的方法还包括：浸泡研磨的草药，即粉末状的香附的干燥根、荜拔的干燥果实、总序天冬的干燥根、羊蹄甲的干燥茎皮、Oldanlandia umbelata的干燥全植物、印度菝葜的干燥根、香根草的干燥根、余甘子的干燥果实、诃子的干燥果实、毗黎勒的干燥果实以及黄细心的干燥根；并通过煮沸进行浓缩。

[0064] 在另一实施方式中，浸泡可以通过将研磨的草药浸泡在16份水中过夜来进行。在另一实施方式中，浓缩可以通过在高温下，优选约80至85摄氏度下煮沸来进行，直到残留1/8的液体。浓度可以借助布里糖度计来确认。

[0065] 此外，一旦加入了研磨汤剂，就在继续研磨的同时加入新鲜草药汁。新鲜草药汁包括选自由以下组成的列表中的至少一种草药的新鲜汁：芦荟(Aloe vera)、石榴(Punica granatum)、狗牙根(Cynodon dactylon)和菠萝(Ananas comosus)。可以加入通过本领域中通常已知的任何方法获得的新鲜草药汁。在实施方式中，新鲜汁可以通过将草药一起或分开进行研磨来获得。此外，一旦加入了新鲜草药汁，就在继续研磨的同时加入gomutra(牛尿)。在实施方式中，继续研磨约72小时，优选在120rpm下，以获得磨碎的物质。在实施方式中，制备方法还可以包括向磨碎的物质中加入赋形剂，其中，可以将阿拉伯胶加入至磨碎的物质中，通过将其溶解在研磨汤剂中同时继续研磨3小时以获得半固体物质。制备方法还可以包括在50摄氏度下干燥，优选在热风炉中，湿法制粒，冲压以获得500mg片剂。图2描绘了制备强化片剂的流程图。表1B描述了优选实施方式之一中研磨(研磨草药)所需的草药配料。

[0066] 表1B-研磨的草药的列表

[0067]

[0068] 在公开的草药-矿物制剂的各种实施方式中使用的bhasmas可以通过本领域通常已知的方法来制备。可以通过以下步骤制备bhasmas：选择真正标准矿物作为起始材料，诸如铁锈、铁、黄铜矿等；在热风炉中干燥；通过磨碎、淬冷(quenching)、煮沸等来提纯矿物；用草药汤剂磨碎；制成盘；干燥盘；制备sharavasam puta，使Sharavasam puta进行Gaja puta，并一旦冷却就将盘粉末化。在实施方式中，重复该方法30次直至获得bhasmas。

[0069] 用于制备bhasmas的起始材料可以包括本领域通常使用的标准矿物。在实施方式中，Swarna makshika Bhasma的制备包括Swarna makshika作为起始材料。图1(a)描绘了使用Swarna makshika作为起始材料制备Swarna Makshika Bhasma的流程图。在另一实施方式中，Mandura Bhasma的制备包括铁锈作为起始材料。图1(b)描绘了使用铁锈作为起始材料制备Mandura Bhasma的流程图。在实施方式中，Loha Bhasma的制备包括钢铁作为起始材料。图1(c)描绘了使用钢铁作为起始材料制备Loha Bhasma的流程图。

[0070] 矿物的纯化或提纯(shodhana)可以通过本领域中通常已知的方法进行。在实施方式中，纯化可以通过将起始材料与岩盐和柠檬汁混合来进行，其中，其进一步用于制备Swarna makshika Bhasma。在实施方式中，纯化可以通过将矿物加热至红热并浸入5种不同的液体介质中，诸如芝麻油、黄油奶水、牛尿、Kanji(酸药制米粥)和马嘴豆(Horse gram)汤剂，其中，其进一步用于制备Mandura Bhasma。在另一实施方式中，纯化可以通过将矿物在Triphala汤剂中淬冷来进行，其进一步用于制备Loha Bhasma。

[0071] 用于磨碎的草药汤剂/汁可以是在制备bhasmas中通常用于磨碎的任何草药汤剂/汁。例如，草药汤剂/汁可以包括triphala、柠檬汁、Gomutra(牛尿)等。在实施方式中，草药汤剂包括牛尿和triphala汤剂，其中其可用于制备Mandura bhasma。在另一实施方式中，草药汤剂具体包括Triphala Kashaya(诃子、毗黎勒和余甘子的果实汤剂)，其中其可用于制备Loha Bhasma。在又一实施方式中，可以用柠檬汁进行磨碎，其中其可用于制备Swarna makshika bhasma。

[0072] 治疗

[0073] 本文公开了治疗/预防/管理肾脏疾病和相关并发症的方法的实施方式。本文公开的实施方式也有助于预防与肾脏疾病有关的并发症，诸如贫血、电解质失衡、高血压、蛋白尿、高钾血症等。

[0074] 在实施方式中，该方法包括向患者给药如本文公开的任一实施方式中描述的组合物。在实施方式中，患者可以包括需要这种治疗的任何个体，包括患有/疑似患有肾脏疾病或其症状的个体。此外，患者还可以包括患有/疑似患有与肾脏疾病有关的并发症(诸如贫血、电解质失衡、高血压、蛋白尿等)的任何个体。

[0075] 在优选的实施方式中，该方法包括向患者给药具有草药成分、矿物成分、至少一种碱、至少一种盐和合适的赋形剂的组合物，其中，草药成分包括香樟(1至4wt％)、菖蒲(1至4wt％)、云木香(1至4wt％)、穿心莲(1至4wt％)、心叶青牛胆(1至4wt％)、雪松(1至4wt％)、姜黄(1至4wt％)、异叶乌头(1至4wt％)、具芒小檗(1至4wt％)、荜拔(1至4wt％)、白花丹玫红(1至4wt％)、芫荽(1至4wt％)、余甘子(1至4wt％)、诃子(1至4wt％)、毗黎勒(1至4wt％)、夏巴胡椒(1至4wt％)、信筒子(1至4wt％)、夏巴胡椒(1至4wt％)、荜拔(1至4wt％)、胡椒(1至4wt％)、生姜(1至4wt％)、印度没药(6至10wt％)、甘蔗(2至6wt)和/或选自盒果藤、斑籽、柴桂、锡兰肉桂、小豆蔻、竹甘露、黄细心、香附、羊蹄甲和止泻木中的至少一种草药(≤
2wt％)；矿物成分包括喜来芝(6至10wt％)和选自Mandura bhasma(2至6wt％)和Lohabhasma(1至4wt％)中的至少一种bhasma；至少一种碱，选自由Yavakshara(≤2wt％)和Sarjakshara(≤2wt％)组成的组；以及至少一种盐，选自由岩盐(1至4wt％)、Sonchal盐(1至4wt％)和黑盐(1至4wt％)组成的组。

[0076] 在实施方式中，可以使用公开的制剂使得其充当抗脂质剂、自由基清除剂、降血脂剂和肾保护剂中的至少一种。

[0077] 公开的治疗方法可以用作治疗的主线或用作肾脏疾病的其他治疗方法的辅助。

[0078] 可以向患者给药治疗有效量的公开的制剂的实施方式。治疗有效量可以根据患者而变化。在实施方式中，治疗有效量是每天一至三次给药500至1000mg。

[0079] 对公开的制剂的实施方式进行急性口服毒性研究，并进行研究以检查其对行为和神经系统的影响。研究表明，制剂的实施方式是没有毒性的，即使在6000mg/kg体重(这是最大可能的剂量)的剂量下。还发现它对行为和神经系统没有有害影响。

[0080] 如下文通过举例描述的，通过临床前和临床研究进一步评价公开的制剂(也称为测试产品或测试药物)的实施方式的肾保护活性的有效性。仅以说明的方式并且不应解释为限制本文提供的权利要求的范围，通过参考以下实施例进一步描述实施方式。对于本领域技术人员显而易见的是，可以在不脱离权利要求的范围的情况下对材料和方法两者进行许多修改。

[0081] 实施例1：临床前研究

[0082] 此研究的目的是分析测试药物对雄性Sprague dawley大鼠中庆大霉素诱导的肾中毒的影响。

[0083] 实验细节：

[0084] 选择范围为200-300g之间的24只Sprague dawley大鼠，并使其适应实验室条件5天时间。适应后，将动物随机分为四组(组I-IV)，每组由六只动物组成。组I和II动物接受载体(0.5％CMC)；组III和IV分别以100和200mg/kg体重口服接受测试药物为期14天。给药1hr后，除正常对照组中的那些动物外，所有实验动物腹腔内接受庆大霉素(100mg/kg；腹腔注射)，每天一次，持续14天。每周药物剂量根据动物各周的体重进行调整。

[0085] 每天观察毒性、发病率和死亡率的临床体征直到尸检日。在给药前以及在第7天和第14天记录一次体重。通过在代谢笼中单独安置动物，在第7天和第14天分析尿排出量和尿液生物化学。在治疗结束和尸检时还分析了血清中的生物化学和电解质。观察了肾脏重量变化以及肝脏和肾脏组织的大体病理。

[0086] 在实验动物之间未发现与治疗有关的死亡和毒性的临床体征。第14天在组II中观察到显著的体重降低。与组II相比，组III和组IV动物被防止了体重损失。

[0087] 在组I、组II、III和IV动物之间，未观察到尿中颜色、pH和比重、血、亚硝酸盐、胆红素和酮的排泄的变化。在第14天，在组II、III和IV的尿液中观察到了痕量葡萄糖、微量白蛋白、蛋白质、白蛋白、尿胆素原和白细胞。

[0088] 与组I相比，在第14天还观察到了组II动物的尿液和血液中的尿素、肌酐、尿酸、碱性磷酸酶、γ-谷氨酰转移酶显著升高。组III和组IV(测试药物，100和200mg/kg)以剂量依赖的方式显著减弱了这些水平。

[0089] 与组I相比，在治疗组之间没有观察到血清电解质诸如钾、pH、钠的显著变化。在组II中观察到钙的显著升高，其被IV组显著减弱至正常范围。

[0090] 在组II中，由于庆大霉素给药使脂质过氧化显著(p<0.05)增强，伴随抗氧化物、超氧化物歧化酶、还原型谷胱甘肽和谷胱甘肽过氧化物酶减少。组III和组IV动物以剂量依赖性方式逆转了这些改变。

[0091] 庆大霉素在各组之间未显示任何大体病理变化。然而，在组II动物中，肾组织的组织病理学显示轻度至中度的病变，诸如肾小管变性、肾小管细胞坏死等，这证实了大鼠中肾毒性的诱导。与庆大霉素处理组和同期对照组的动物相比，在组IV动物(测试药物以200 mg/kg体重处理)中观察到肾脏组织中病变的严重程度和发生率显著降低。

[0092] 用测试药物以100和200 mg/kg体重处理来治疗的动物的肝脏的组织学显示，在组II动物中炎症的严重程度降低。

[0093] 总之，本研究通过尿液中排泄的葡萄糖、蛋白质、微量白蛋白、白细胞和尿胆素原报告了大鼠中由庆大霉素产生潜在肾毒性。测试药物治疗已经刺激了用抗氧化物防御以两种剂量水平抵消这些反应。该研究的结果表明，测试药物对庆大霉素诱导的大鼠肾脏损伤具有强效的肾保护作用，并具有抗脂质过氧化和自由基清除活性。

[0094] 实验细节：

[0095] 材料：

[0096]

[0097] 使用的化学品：

[0098]

[0099]

[0100] 消耗品

[0101]

[0102] 使用的仪器/设备：

[0103] 下面提到的设备视情况定期校准：

[0104]

[0105] 实验条件：

[0106]

[0107]

[0108] 程序：

[0109] 分组和剂量：按照以下方式将动物分组为每个笼子六只。表3描述了动物的分组和剂量。

[0110] 表3：

[0111]

[0112] 诱导：药物治疗14天后1hr，除正常对照组外，所有实验动物均接受庆大霉素(100mg/kg；腹腔注射)。

[0113] 剂量制剂：在给药前，用适当体积的0.5％CMC新鲜制备测试药物和参比药物。

[0114] 剂量：

[0115] ·体积剂量为10ml/kg

[0116] ·根据每周的体重来调整测试物质的给药剂量。

[0117] ·经由胃内管向各个动物口服给药测试药物、参比药物、载体制剂14天。

[0118] 尿液收集：

[0119] ·在第7天和第14天，将动物安置在代谢笼中24hr以收集尿液。

[0120] ·测量尿排出量并用于使用尿液试纸进行分析。

[0121] 血液收集：

[0122] ·在第15天，使用异氟醚对动物进行麻醉以收集血液。将血液收集在eppendorf小瓶中，并在室温下在倾斜位置保持15-30分钟以进行血清分离。

[0123] ·将小瓶以3500rpm离心10分钟以进行分离，并用于生化分析。

[0124] 组织病理学：

[0125] ·收集器官肾脏和肝脏用于进行组织病理学过程

[0126] 数据分析：所有值均单独表示为平均值±S.E.M.。使用单向ANOVA(F值)对不同条件进行统计分析，然后进行事后分析(Tukey多重比较检验)，p<0.05和p<0.01被认为具有统计学意义。

[0127] 观察：

[0128] 死亡率&发病率：每天检查动物的死亡率和发病率。

[0129] 临床体征：在整个研究过程中，观察实验动物中的临床体征。

[0130] 体重：在第0、7和14天记录体重。

[0131] 尿液参数：使用尿液分析仪通过尿浸试纸对尿液中的pH、比重、胆红素、血、亚硝酸盐、葡萄糖、微量白蛋白尿(MALB)、白蛋白、蛋白质、酮和白细胞进行定量。使用Bio-Systems Diagnostics Pvt.Ltd用半自动生化分析仪对尿液中的尿素、肌酐、尿酸和白蛋白的含量以及酶(诸如碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰转移酶(GGT)和酸性磷酸酶(ACP))的活性进行分析。

[0132] 血液参数：使用Cornley Acculyte 5P电解质分析仪对血清电解质(钙、钾、pH、钠)进行分析。按照试剂盒手册使用Bio-Systems Diagnostics Pvt.Ltd对血尿素氮(BUN)、肌酐、尿酸、总蛋白、白蛋白、球蛋白、碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰转移酶(GGT)和酸性磷酸酶(ACP)活性进行分析。

[0133] 氧化应激标记物：在5mL KCl[10mM]磷酸盐缓冲液(1.15％)中将约500mg肾组织与乙二胺四乙酸(EDTA，pH 7.4)匀浆，并以5,000rpm离心60min。上清液用于使用多板读数器测量氧化应激标记物，诸如超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、还原型谷胱甘肽(GSH)、脂质过氧化物(TBARS)和总蛋白(TP)。

[0134] 组织脂质过氧化物(LPO，TBARS)水平：根据Ohkawa et al(1979)的方法将组织脂质过氧化物(LPO)水平确定为TBA反应性物质。向1.0ml匀浆物中加入3.0ml的0.8％TBAHCl试剂和0.5ml的甲醇中0.05％丁基化羟基甲苯(BHT)，并充分混合。将混合物在沸水浴中保持15分钟。冷却后，将试管在1000g下离心10分钟，并取上清液用于测量。以类似的方式处理不同浓度的丙二醛标准溶液。在535nm处，相对于试剂空白读取粉红色发色团的吸光度。数值表示为微克/克组织。

[0135] 总蛋白：通过Lowry et al.,1951对组织中的蛋白含量进行测量。向0.025ml匀浆物中加入0.5ml Lowry试剂并充分混合。将混合物在室温下保持15分钟。以类似的方式处理不同浓度的BSA标准溶液。在540nm处，相对于试剂空白读取蓝色发色团的吸光度。数值用于表示酶活性。

[0136] 酶和非酶抗氧化物

[0137] 超氧化物歧化酶：通过Kakkar et al.,1984的方法对超氧化物歧化酶活性进行测定。通过取0.05ml匀浆物，然后加入0.3ml焦磷酸钠缓冲液、0.025ml吩嗪硫酸甲酯(PMS；186μΜ)和0.075ml氯化四唑硝基蓝(NBT，300μM)来测定超氧化物歧化酶。通过加入0.075ml的NADH(780μM)来开始反应。在300℃下温育90秒后，通过加入0.25ml冰醋酸来终止反应。然后将反应混合物与2.0ml正丁醇一起剧烈搅拌并摇动。使混合物静置10分钟并离心。仅1.5ml正丁醇作为空白。发色团的颜色强度在560nm处读取。

[0138] 计算：酶活性(1单位)＝50％抑制/分钟。

[0139] 谷胱甘肽过氧化物酶：通过Rotruck et al.,(1973)的方法对谷胱甘肽过氧化物酶活性进行估计。通过取200μl的0.4mM Tris Hcl缓冲液(pH 7.2)、200μl K.EDTA(0.4mM)以及100μl叠氮化钠(10mM)和200μl酶制剂并充分混合来测定谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)的活性。之后，加入200μl还原型谷胱甘肽溶液(2mM)，然后加入0.1ml H2O2。通过加入0.5ml的10％TCA来停止整个反应。通过用缓冲液代替酶样品，对非酶反应速率进行相应地评估。通过在4000rpm下离心10分钟来除去沉淀。通过加入1.0ml的0.2M磷酸盐缓冲液(pH 8.0)中的
0.6mM二硫代二硝基苯甲酸(DTNB)来确定上清液中残留的还原型谷胱甘肽。使用UV/可见光分光光度计在412nm处读取吸光度。使用GSH的标准图计算GSH的含量。结果以每mg蛋白质每分钟消耗的GSH的微克表示。

[0140] 过氧化氢酶：通过Sinha AK 1972的方法对过氧化氢酶活性进行估计。布置了两组试管，并标记为测试和对照。向“测试”中加入0.1ml匀浆物和0.5ml磷酸盐缓冲液，并通过加入0.4ml H2O2来引发反应。向对照中加入0.6ml磷酸盐缓冲液和0.4ml H2O2。将反应混合物在室温下温育5分钟。温育后，加入2ml的双色乙酸并煮沸10分钟。将0.1ml匀浆物加入对照试管中。在570nm处对由此产生的乙酸铬进行比色测量。CAT的活性表示为单位/mg蛋白质。一个单位的CAT活性代表破坏1μmol H2O2/min的酶的量。

[0141] 还原型谷胱甘肽(GSH)：通过Moren et al.,1979的方法对还原型谷胱甘肽含量进行测量。将0.25ml匀浆物加入等体积的冰冷的5％TCA中以沉淀组织中存在的蛋白质。通过在4000rpm下离心10分钟以除去沉淀。向上清液的1ml等分试样中加入0.25ml磷酸盐缓冲液(pH 8.0)和0.5ml的0.2M磷酸盐缓冲液(pH 8.0)中的0.6mM二硫代二硝基苯甲酸(DTNB)，并充分混合。使用UV/可见光分光光度计在412nm处读取吸光度。使用GSH的标准图计算GSH的含量。结果以每克组织中GSH的微摩尔表示。

[0142] 尸检：在研究结束时，通过CO2窒息将所有存活的动物安乐死，并对所有动物进行详细的大体尸检(肉眼尸检)，包括尸体的外部表面以及对外口、颅、胸腔和腹腔及其内容物的大体检查。

[0143] 组织病理学：从收集的器官中，将适量的肾脏和肝脏组织置于充满福尔马林的容器中(比例为1:10)用于固定，修剪大约3-5mm厚的组织，在酒精、二甲苯中处理，并浸入石蜡中。将处理过的组织包埋在石蜡块中，切成3-5微米，并用H&E染色用于组织病理学检查。

[0144] 以下分级系统用于该研究中的组织病理学评价：

[0145] 1–最小

[0146] 2-轻度

[0147] 3-中度

[0148] 4–明显

[0149] 5-重度

[0150] 结果和讨论：

[0151] 死亡率&发病率：在整个研究中，在实验动物中未观察到发病率或死亡率。

[0152] 临床体征：在整个研究中，在实验动物中未观察到异常的临床体征。所有动物均被发现正常。

[0153] 体重：在第7天，在对照组和治疗组之间没有观察到明显的体重变化。然而，与组I相比，在第14天在组II中观察到体重显著(p<0.05)下降。尽管在测试药物治疗的大鼠(组III和IV)中观察到体重略有增加，但并不显著且与正常对照组(组I)没有可比性。表4描述了测试药物对肾毒性诱导的大鼠的体重变化的影响。

[0154] 尿液参数：尿液分析(UA)用作筛查工具，以检测与肾功能不全或尿路感染(UTI)相关的尿液中的物质或细胞物质。与组I相比，注意到组II动物在第7天和第14天的尿排出量显著增加。但是与组II相比，组IV在第7天和第14天没有观察到尿排出量的显著变化。表5描述了测试药物治疗对肾毒性诱导的大鼠中尿排出量的影响。

[0155] 在对照动物和治疗动物之间没有颜色、pH和比重变化。在对照动物和治疗动物中未观察到血、亚硝酸盐、胆红素、酮的排泄。

[0156] 在第14天，在组II、III和IV的尿液中观察到痕量葡萄糖(5.6mmol/L)、微量白蛋白、蛋白质、显著(p<0.01)水平的白蛋白、尿胆素原和白细胞，并且在组I中没有观察到这样的排泄。结果表明，庆大霉素诱导造成了肾脏组织中的轻微损伤，这转而反应出葡萄糖、蛋白质、微量白蛋白、白细胞和尿胆素原的排泄。这可能是由于肾小管分泌增加、肾小球滤过增加、尿路阻塞和肾小管疾病中葡萄糖重吸收减少。测试药物治疗已抵消了这些不显著的反应。表6描述了测试药物治疗对肾毒性诱导的大鼠中尿参数的影响。

[0157] 另一方面，与组I相比，在第14天在组II动物中观察到尿素、肌酐、尿酸、碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰转移酶(GGT)显著升高。与组II相比，两种剂量水平的测试药物显著减弱了这些水平。表7描述了测试药物治疗对肾毒性诱导的大鼠中尿液生物化学的影响。表8描述了测试药物治疗对肾毒性诱导的大鼠中器官重量的影响。

[0158] 血液参数：与组I相比，在组II动物中观察到血尿素氮(BUN)、肌酐、尿酸、碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰转移酶(GGT)显著升高。与组II相比，组III和IV(两种剂量水平的测试药物)显著减弱了GGT和尿酸水平，并且还降低了尿素和肌酐，该水平不显著。表9描述了测试药物治疗对肾毒性诱导的大鼠中血液生物化学的影响。

[0159] 在治疗组之间未观察到血清电解质诸如钾、pH、钠的显著变化。在组II中观察到钙的显著升高，其被测试药物高剂量治疗显著减弱至正常。如之前所报道的，钙与庆大霉素有关系。庆大霉素会妨碍钙在肾小管中的运输(Arphitha et al 2008)并增加血清中的钙水平。表10描述了测试药物治疗对肾毒性诱导的大鼠中血清电解质的影响。

[0160] 氧化应激标记物：通过MDA的积累评估肾组织中的脂质过氧化，其由于庆大霉素给药而显著(p<0.05)增强，伴随抗氧化物、超氧化物歧化酶、还原型谷胱甘肽和谷胱甘肽过氧化物酶减少。测试药物治疗显著地维持庆大霉素诱导的大鼠中脂质过氧化(p<0.05)和谷胱甘肽(p<0.01)接近正常。类似地，测试药物治疗以剂量依赖性方式非显著地增强了超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶水平。表11描述了测试药物治疗对肾毒性诱导的大鼠中肾应激标志物的影响。

[0161] 大体病理学：在尸检期间，在组II动物的肾脏中观察到了大体病变(肉眼病变)如变色、苍白、有凹痕的表面、双侧。在任何研究动物的其他器官中未发现任何大体病变。

[0162] 组织病理学：仅用载体处理的对照动物的肾脏显示肾小管变性和或再生、肾小管扩张和炎性细胞浸润，但仅在正常限度至最小严重程度内。庆大霉素(100mg/kg体重)诱导的动物的肾脏显示经典的肾毒性诱导的组织病理学病变，即肾小管变性和/或再生、肾小管扩张、肾小管细胞空泡、肾小管细胞坏死和炎性细胞浸润，具有从轻度至中度的较高严重程度。表12描述了单个动物组织病理学发现。

[0163] 来自用测试药物治疗的两组的动物确实显示出对庆大霉素诱导的毒性的保护作用。然而，与用测试药物(100mg/kg体重)治疗的动物相比，在以200mg/kg体重治疗的测试药物中观察到了明显的效果，即在动物肾脏中病变的严重程度和发生率降低。表13描述了用于肾脏组织病理学评价的分级系统的总结。

[0164] 肝脏的组织病理学虽然不明显，但是在来自庆大霉素处理组的3/6只动物中显示出有最小严重程度的炎性细胞浸润，这也表现为减少至用以200mg/kg体重的测试药物治疗的1/6只动物。表14描述了用于肝脏组织病理学评价的分级系统的总结。

[0165] 图3表示组I和组II的肾脏的组织病理学观察。图4表示组III和组IV的肾脏的组织病理学观察。图5表示组I、组II、组III和组IV的肝脏的组织病理学观察。

[0166] 所有其他组织病理学发现均为自发性和或背景性变化，与在该年龄的大鼠中通常观察到的濒死改变(agonal change)相关。

[0167] 结果的列表如下：

[0168] 表4：测试药物对肾毒性诱发的大鼠中体重变化的影响

[0169]

[0170]

[0171] 结果以个体值和平均值±SEM(n＝6)表示；使用graph pad prism 5.0版本进行统计分析，并进行事后T检验(Tukey post hoc test)。与正常对照相比，#p<0.05，##p<0.01：与庆大霉素(100mg/kg)腹腔注射相比p<0.05(*)&0.01(**)。

[0172] 表5：测试药物治疗对肾毒性诱导的大鼠中尿排出量的影响。

[0173]

[0174]

[0175] 结果以个体值和平均值±SEM(n＝6)表示；使用graph pad prism 5.0版本进行统计分析，并进行事后T检验。

[0176] 表6：测试药物治疗对肾毒性诱导的大鼠中尿参数的影响

[0177]

[0178]

[0179]

[0180] 结果以个体值和平均值±SEM(n＝6)表示；使用graph pad prism 5.0版本进行统计分析，并进行事后T检验。与正常对照相比，#p<0.05，##p<0.01：与庆大霉素(100mg/kg)腹腔注射相比p<0.05(*)&0.01(**)。

[0181] 表7：测试药物治疗对肾毒性中尿液生物化学的影响

[0182]

[0183]

[0184]

[0185]

[0186] 结果以个体值和平均值±SEM(n＝6)表示；使用graph pad prism 5.0版本进行统计分析，并进行事后T检验。与正常对照组相比，#p<0.05，##p<0.01：与庆大霉素(100mg/kg)腹腔注射相比p<0.05(*)&0.01(**)。

[0187] 表8：测试药物治疗对肾毒性诱导的大鼠中器官重量的影响

[0188]

[0189]

[0190] 表9：测试药物治疗对肾毒性诱导的大鼠中血液生物化学的影响

[0191]

[0192]

[0193] 结果以个体值和平均值±SEM(n＝6)表示；使用graph pad prism 5.0版本进行统计分析，并进行事后T检验。与正常对照组相比，#p<0.05，##p<0.01：与庆大霉素(100mg/kg)腹腔注射相比p<0.05(*)&0.01(**)。

[0194]

[0195]

[0196] 结果以个体值和平均值±SEM(n＝6)表示；使用graph pad prism 5.0版本进行统计分析，并进行事后T检验。与正常对照组相比，#p<0.05，##p<0.01：与庆大霉素(100mg/kg)腹腔注射相比p<0.05(*)&0.01(**)。

[0197] 表10：测试药物治疗对肾毒性诱导的大鼠中血清电解质的影响

[0198]

[0199]

[0200] 结果以个体值和平均值±SEM(n＝6)表示；使用graph pad prism 5.0版本进行统计分析，并进行事后T检验。与正常对照组相比，#p<0.05，##p<0.01：与庆大霉素(100mg/kg)腹腔注射相比p<0.05(*)&0.01(**)。

[0201] 表11：测试药物治疗对肾毒性诱导的大鼠中肾应激标志物的影响

[0202]

[0203]

[0204] 结果以个体值和平均值±SEM(n＝6)表示；使用graph pad prism 5.0版本进行统计分析，并进行事后T检验。与正常对照相比，#p<0.05，##p<0.01：与庆大霉素(100mg/kg)腹腔注射相比，p<0.05(*)&0.01(**)。

[0205] 表12：单个动物组织病理学发现

[0206]

[0207]

[0208]

[0209]

[0210]

[0211] 表13：用于肾脏组织病理学评价的分级系统的总结

[0212]

[0213]

[0214] 表14：用于肝组织病理学评价的分级系统的总结

[0215]

[0216]

[0217] 结论:

[0218] 由此，结果表明测试药物对庆大霉素诱导的大鼠中的肾损伤具有强效的肾保护作用，并具有抗脂质过氧化和自由基清除活性。此外，它表明在大鼠中以200mg/kg用测试药物治疗可以预防由庆大霉素诱导的功能性以及组织学肾脏改变。

[0219] 实施例2：临床研究

[0220] 目标和目的：证明测试药物在管理慢性肾功能衰竭(CRF)中的有效性。为观察结果提供科学依据，这些观察结果表明测试药物显著纠正白蛋白尿和血清肌酐值(这是CRF的基本特征)，并改善肾功能，这通过降低血清肌酐和血液尿素水平来体现。

[0221] 材料和方法：所有患者均选自Muniyal Ayurveda医院和Manipal研究中心的OPD和IPD。

[0222] 纳入标准：纳入具有CRF临床阳性病史，具有CRF临床特征(如白蛋白尿、血清肌酐升高和血液尿素升高)的患者。

[0223] 排除标准：患有糖尿病性肾病的患者被排除在该研究之外。接受透析治疗的患者。有其他增加的并发症的患者。

[0224] 研究和管理计划：总共登记了100名CRF患者用于研究。向患者给药测试药物片剂，2片(2×500mg)每天两次。患者保持正常健康的饮食。患者的连续抗高血压药物的剂量不受干扰。治疗持续时间为1个月。

[0225] 结果的评估：在治疗前后对所有患者进行临床评估。对症状、白蛋白尿、血清肌酐、血液尿素和血红蛋白的变化进行观察。对观察结果进行统计学评估。

[0226] 结果和观察：该研究中CRF的主要病因因素是高血压；在该组中发现86％的患者。7％患者患有慢性肾炎，以及5％患有多囊肾病。仅发现2％患者患有梗阻性肾病。血清肌酐降低了20.71％，并且这在统计学上非常显著。

[0227] 血液尿素减少了32.15％，并且这在统计学上也非常显著。白蛋白尿减少了36.70％，并且这在统计学上非常显著。血红蛋白增加了4.65％，并且这在统计学上非常显著。没有患者显示出任何新的和异常的特征。尿排出量增加了56.54％，并且这在统计学上非常显著。在100名患者中，有58例患者报告水肿，并且减少了71.56％。有46例患者报告恶心，并且缓解了68.75％。发现24例患者有呕吐，并且缓解了82.35％。发现85例患者虚弱，并且减少了55.61％。发现53例患者食欲不振，并且食欲增加了59.29％。在17例患者中发现腿抽筋，并且减少了72％。在27例患者中发现呼吸急促，并且缓解了64.29％。仅发现一名患者打嗝，并且完全缓解。19例患者报告瘙痒，并且减少了66.66％。所有这些症状的减少在统计学上都非常显著。

[0228] 讨论与解释：如前所述，CRF是肾脏疾病的特殊形式。根据阿育吠陀，CRF是Mutravaha Srotas(泌尿系统)的疾病。尽管所有三种Dosha以及所有Dushya都参与了该疾病，但Kapha负责阻断微血管和发展微血管病。Vata负责肾脏结构的变性。根据阿育吠陀管理疾病的原则，可以通过Rasayana药物对组织损伤进行预防和修复，因为它们具有改善组织质量的能力，并因此提高组织的抵抗力。另一方面，可以通过对堵塞的通道具有擦除作用的Lekhana药物来去除堵塞。

[0229] 在该研究中，发现治疗后血清肌酐降低了20.71％。该有益效果在统计学上非常显着，这是令人鼓舞的，并且显示了肾脏功能的改善。治疗后血液尿素减少了36.15％，并且这在统计学上也非常显著。治疗使得白蛋白尿减少了36.70％，血红蛋白增加了4.65％，这在统计学上非常显著。水肿、虚弱、腿抽筋的减少、食欲增加以及恶心、呼吸急促和瘙痒的缓解均在统计学上非常显著。

[0230] 结论：在进行的临床观察和讨论的帮助下，可以得出结论：86％的CRF患者患有作为基本潜在病因的高血压。获得的结果可以归因于借助其Rasayana和抗Vata–Kapha特性的试验疗法的疾病修正作用。试验疗法作为CRF情况下的安全且有效的替代方案是理想的药物。

[0231] 血清肌酐、血液尿素和白蛋白尿分别减少了20.71％、32.15％和36.70％。血红蛋白水平和尿排出量分别增加了4.38％和56.54％。它们在统计学上非常显著。所有患者的所有体征和症状均显示出大于50％的缓解。

[0232] 具体实施方式的上述描述将充分地揭示本文实施方式的一般性质，使得其他人可以在不脱离通用概念的情况下，通过应用当前知识，容易地修改和/或调整这样的具体实施方式的各种应用，并因此这些调整和修改应该且旨在涵盖在所公开的实施方式的等同物的含义和范围内。应该理解，本文采用的措辞或术语是出于描述的目的而非限制。因此，尽管已经就优选实施方式对本文的实施方式进行了描述，但是本领域技术人员将认识到，可以在本文描述的实施方式的精神和范围内通过修改来实践本文的实施方式。

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