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一种美国红枫的商业组织培养种苗繁育方法

阅读：626发布：2021-09-19

专利汇可以提供一种美国红枫的商业组织培养种苗繁育方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本发明公开了一种美国红枫的商业组织培养种苗繁育方法，属于木本植物的组织培养技术领域，旨在提供一种实现种苗繁育工作的周年化、批次化、洁净化、优质化的美国红枫“KW126”组织培养种苗繁育方法，其技术方案要点是美国红枫“KW126”组织培养种苗繁育方法，具体步骤如下：S1：外植体的选择；S2：外植体消毒；S3：启动培养；S4：增殖培育：S5：壮苗培育：S6：生根培育，其中，在所述S2中采用“白猫”牌家用漂白水与无菌水按1：4的体积比制成的漂白水对外植体消毒。本方法通过组织培养以芽繁芽的技术途径进行种苗快速繁殖，在培养过程中避免产生愈伤组织，避免了性状分离和变异，保持了母本的优良特性，种苗性状稳定。，下面是一种美国红枫的商业组织培养种苗繁育方法专利的具体信息内容。

权利要求

1.一种美国红枫的商业组织培养种苗繁育方法，其特征在于：具体步骤如下：
S1：外植体的选择；
S2：外植体消毒；
S3：启动培养；
S4：增殖培育：
S5：壮苗培育：
S6：生根培育，
其中，在所述S2中采用“白猫”牌家用漂白水与无菌水按1：4的体积比制成的漂白水对外植体消毒。
2.根据权利要求1所述的一种美国红枫的商业组织培养种苗繁育方法，其特征在于：在S1中，选取美国红枫新抽出的幼态嫩梢，从顶芽起向下截取约3～10个带腋芽茎段的枝条，去除叶片，切取单节带腋芽茎段作为外植体，每根茎段带2个腋芽，每根茎段长2～5cm。
3.根据权利要求1所述的一种美国红枫的商业组织培养种苗繁育方法，其特征在于：将外植体用医用酒精棉擦拭干净，立即倒入漂白水中20～30min，期间均需轻微摇晃震荡2～3次，最后用无菌水分别洗涤3次，每次漂洗2～5分钟。
4.根据权利要求1所述的一种美国红枫的商业组织培养种苗繁育方法，其特征在于：在S3中，将S2中消毒后的外植体上下两端分别切除0.3～0.5cm，接入启动培养基中，接种后放入培养室暗培养一周，然后转入每天光照时间16h，黑暗8h，光强2000～3000lux，室温23～
26℃，培养3～4周。
5.根据权利要求4所述的一种美国红枫的商业组织培养种苗繁育方法，其特征在于：在S3中的启动培养基为MS+TDZ 0.005～0.01mg/L+GA31.0～2.0 mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.8g/L，pH为5.80。
6.根据权利要求1所述的一种美国红枫的商业组织培养种苗繁育方法，其特征在于：在S4中，将在S3中萌发的将萌发后的无菌苗腋芽茎段切下，接种于增殖培养基中，接种后在培养室暗培养一周，然后每天光照16h，黑暗8h，培养温度均为23～26℃，光强2000～3000lux，培养4～6周。
7.根据权利要求6所述的一种美国红枫的商业组织培养种苗繁育方法，其特征在于：在S4中的增殖培养基为MS+TDZ0.005～0.01mg/L+BA0.05～0.1 mg/L+GA31.5～2.0 mg/L +添加蔗糖30g/L+琼脂6.8g/L，pH为5.80。
8.根据权利要求1所述的一种美国红枫的商业组织培养种苗繁育方法，其特征在于：在S5中，将S4中培养的丛生芽分成单芽切下，接种于壮苗培养基中，接种后在培养室暗培养
48h，然后每天光照16h，黑暗8h，培养温度均为23～26℃，光强2000～3000lux，培养4～6周，单芽长高变壮，株高约3～5cm。
9.根据权利要求8所述的一种美国红枫的商业组织培养种苗繁育方法，其特征在于：在S5中的壮苗培养基为MS+BA0.05～0.1mg/L+添加蔗糖30g/L+琼脂6.8g/L，pH为5.80。
10.根据权利要求1所述的一种美国红枫的商业组织培养种苗繁育方法，其特征在于：
在S6中，将S5中壮苗后健壮的顶芽切下，接种于生根培养基中进行生根诱导，生根培养基为
1/2MS+IBA0.8～1.0mg/L +NAA0.3～0.5mg/L+活性炭0.2～0.5g/L+添加蔗糖15g/L+琼脂
6.8g/L，pH为5.80，接种后在培养室先暗培养一周，然后每天光照16h，黑暗8h，光强2000～
3000lux,培养温度均为23～26℃，培养3～4周可生根，植株长高约至2～3cm，健壮，主根为2～5条，长度约2～6cm。

说明书全文

一种美国红枫的商业组织培养种苗繁育方法

技术领域

[0001] 本发明涉及木本植物的组织培养技术领域，特别涉及一种美国红枫的商业组织培养种苗繁育方法。

背景技术

[0002] 传统的美国红枫繁殖方法一般采用籽播、扦插等方式进行种苗繁育。种播育苗会受到种子来源和性状分离的限制，种子萌芽率也会受各种因素的制约而不够稳定，而且此方式存在较严重的性状分离，难以获得性状一致的优良种苗。而扦插育苗受季节限制，一年中只有短暂的5～9月可以进行相关作业，且根系生长不好，枝条感菌、感染病毒的比例较高，存在严重的生物风险；此外，扦插育苗需要从苗木上截取大量枝条，将会影响苗木的绿化造型，严重的将直接导致截枝后的苗木无法销售，失去商业价值。而本发明旨在用木本植物组织培养技术来克服美国红枫有性繁殖系和常规扦插育苗的诸多弊端。

[0003] 1.种子繁殖：种子成熟后带翅且较轻易飞散，最好随采随种，种子的成熟度较低，播前需挑选饱满的种子进行温水浸泡催芽，播种时的种子密度、合理行距及覆土厚度都受不同区域的土壤和气候限制，播种后的出苗期、间苗期、成长期，均要加强水肥及病虫害、杂草等田间管理。

[0004] 2.扦插育苗：每年5～9月份，剪取半木质化的嫩枝插穗，截成15cm长的插条，保留上半部枝叶，其余枝叶全部去除，下端切口处蘸取配置好的生根粉或生根液，插入已备好的插床上，管理好插床的温湿度，等插条生根后进行移植。

[0005] 3. 组织培养：现有的文献报道，美国红枫的组织培养育苗方式多数采用器官直接再生和外植体脱分化和再分化的方式进行。器官直接再生就是采取外植体进行消毒，无菌后接种到芽启动培养基上进行萌芽培养，萌出的芽再进行增殖培养、诱导生根等一系列过程，最终获得健全的苗木。外植体脱分化是将采取的外植体进行消毒，无菌后接种于愈伤组织诱导培养基进行脱分化诱导愈伤组织，愈伤组织再分化出不定芽，继而进行增殖和生根等一系列培养，获得无菌植株。

[0006] 美国红枫新品种KW126是美国J Frank Schmidt&Son公司最新培育的红枫新品种。对于美国红枫KW126的组培文献国内还没有相关报道。

[0007] 但是上述美国红枫KW126的繁殖方法都会有以下的问题存在：1.常规的种子繁殖速度过慢，需采种选种，贮藏、催芽播种，育苗管理等一系列较长周期的实施步骤，同时受季节的限制，播种时限较短；且种子成活率低，导致繁殖系数低；种子繁殖中，发生性状分离的概率高，难以获得性状一致的批量种苗。

[0008] 2.扦插育苗过程中插穗生根比较难，且根系不够健壮，扦插时间短暂、扦插基质配比种类以及扦插微环境控制对生根率的影响比较大；且扦插育苗需要截取大量枝条，严重影响树势及；此外，植物病毒会随着扦插育苗而逐渐积累，随着扦插繁殖代数的增加，性状退化较为明显。

[0009] 3.KW126的组培育苗技术还未研发报道。

发明内容

[0010] 本发明的目的是提供一种美国红枫的商业组织培养种苗繁育方法，具有实现种苗繁育工作的周年化、批次化、洁净化、优质化的优点。

[0011] 本发明的上述技术目的是通过以下技术方案得以实现的：一种美国红枫的商业组织培养种苗繁育方法，具体步骤如下：
S1：外植体的选择；
S2：外植体消毒；
S3：启动培养；
S4：增殖培育：
S5：壮苗培育：
S6：生根培育，
其中，在所述S2中采用“白猫”牌家用漂白水与无菌水按1：4的体积比制成的漂白水对外植体消毒。

[0012] 通过采用上述技术方案，能够大大降低外植体的死亡率，消毒成活率较高。采用该消毒剂安全高效。

[0013] 进一步的，在S1中选取美国红枫新抽出的幼态嫩梢，从顶芽起向下截取约3～10个带腋芽茎段的枝条，去除叶片，切取单节带腋芽茎段作为外植体，每根茎段带2个腋芽，每根茎段长2～5cm。

[0014] 进一步的，将外植体用医用酒精棉擦拭干净，立即倒入漂白水中20～30min，期间均需轻微摇晃震荡2～3次，最后用无菌水分别洗涤3次，每次漂洗2～5分钟。

[0015] 通过采用上述技术方案，这种方式对外植体消毒方法简单，能够大大降低外植体的死亡率，消毒成活率较高。

[0016] 进一步的，在S3中，将S2中消毒后的外植体上下两端分别切除0.3～0.5cm，接入启动培养基中，接种后放入培养室暗培养一周，然后转入每天光照时间16h，黑暗8h，光强2000～3000lux，室温23～26℃，培养3～4周。

[0017] 通过采用上述技术方案，能够有效避免各阶段植物材料出现应激反应，植物材料能够快速适应新的营养液，促使植物材料快速生长、芽体健壮。

[0018] 进一步的，在S3中的启动培养基为MS+TDZ 0.005～0.01mg/L+GA31.0～2.0 mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.8g/L，pH为5.80。

[0019] 通过采用上述技术方案，能够快速打破腋芽休眠，促进腋芽萌发，同时能够有效避免愈伤组织的产生。

[0020] 进一步的，在S4中，将在S3中萌发的将萌发后的无菌苗腋芽茎段切下，接种于增殖培养基中，接种后在培养室暗培养一周，然后每天光照16h，黑暗8h，培养温度均为23～26℃，光强2000～3000lux，培养4～6周。

[0021] 通过采用上述技术方案，能够有效避免各阶段植物材料出现应激反应，植物材料能够快速适应新的营养液，促使植物材料快速生长、芽体健壮。

[0022] 进一步的，在S4中的增殖培养基为MS+TDZ0.005～0.01mg/L+BA0.05～0.1 mg/L+GA31.5～2.0 mg/L +添加蔗糖30g/L+琼脂6.8g/L，pH为5.80。

[0023] 通过采用上述技术方案，能够保障腋芽增殖人为可控，增殖倍率为3～4倍，且芽体健壮，重复性好。

[0024] 进一步的，在S5中，将S4中培养的丛生芽分成单芽切下，接种于壮苗培养基中，接种后在培养室暗培养48h，然后每天光照16h，黑暗8h，培养温度均为23～26℃，光强2000～3000lux，培养4～6周，单芽长高变壮，株高约3～5cm。

[0025] 通过采用上述技术方案，能够有效避免各阶段植物材料出现应激反应，植物材料能够快速适应新的营养液，促使植物材料快速生长、芽体健壮。

[0026] 进一步的，在S5中的壮苗培养基为MS+BA0.05～0.1mg/L+添加蔗糖30g/L+琼脂6.8g/L，pH为5.80。

[0027] 通过采用上述技术方案，能够保障丛芽生长健壮，利于增殖和生根。

[0028] 进一步的，将S5中壮苗后健壮的顶芽切下，接种于生根培养基中进行生根诱导，生根培养基为1/2MS+IBA0.8～1.0mg/L +NAA0.3～0.5mg/L+活性炭0.2～0.5g/L+添加蔗糖15g/L+琼脂6.8g/L，pH为5.80，接种后在培养室先暗培养一周，然后每天光照16h，黑暗8h，光强2000～3000lux,培养温度均为23～26℃，培养3～4周可生根，植株长高约至2～3cm，健壮，主根为2～5条，长度约2～6cm。

[0029] 通过采用上述技术方案，够促进植物产生的根与植物体结构相连，且培养的根短而粗壮，能够在移栽时降低损伤、提高移栽存活率。

[0030] 综上所述，本发明具有以下有益效果：1、本方法通过组织培养以芽繁芽的技术途径进行种苗快速繁殖，在培养过程中避免产生愈伤组织，避免了性状分离和变异，保持了母本的优良特性，种苗性状稳定。

[0031] 2、本方法只需要少量外植体材料，不再需要采集大量枝条，避免了对成品苗木的取枝伤害；也不依赖于植物种子，能够根据订单需要按批周年生产。

[0032] 3、本方法中涉及的培养基配方，能够保持3～4倍的增殖倍率，重复性好，性状稳定，且丛生芽健壮、大小一致，符合商业生产对种苗健壮度、整齐度、重复性的要求。附图说明

[0033] 图1是实施例中美国红枫的商业组织培养种苗繁育方法的流程图。

具体实施方式

[0034] 以下结合附图对本发明作进一步详细说明。

[0035] 一种美国红枫的商业组织培养种苗繁育方法，本实施例主要针对美国红枫KW126的组织培养种苗繁育方法，具体步骤如下：S1.外植体的选择：
春季4月份，选择晴朗的天气，选取美国红枫KW126植株健壮、性状纯正、无病虫害的新抽出的幼态嫩梢，从顶芽起向下截取约3～10个带腋芽茎段的枝条，去除叶片，切取单节带腋芽茎段作为外植体，每根茎段带2个腋芽，每根茎段长2～5cm。

[0036] S2.外植体消毒：在无菌操作台上，将外植体用医用酒精棉擦拭干净，立即倒入比例为1:4的白猫牌家用漂白水（漂白水：无菌水体积比）中20～30min，期间均需轻微摇晃震荡2～3次，最后用无菌水分别洗涤3次，每次漂洗2～5分钟。

[0037] S3.启动培养：在操作工作台上，将消毒后的外植体上下两端分别切除0.3～0.5cm，接入启动培养基中，启动培养基为MS+TDZ 0.005～0.01mg/L+GA31.0～2.0 mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.8g/L，pH为5.80。接种后放入培养室暗培养一周，然后转入每天光照时间16h，黑暗8h，光强2000～
3000lux，室温23～26℃，培养3～4周，腋芽开始萌发，无菌苗株长高约2～3cm。

[0038] S4.增殖培养：将萌发后的无菌苗腋芽茎段切下，接种于增殖培养基中，增殖培养基为MS+TDZ0.005～
0.01mg/L+BA0.05～0.1 mg/L+GA31.5～2.0 mg/L +添加蔗糖30g/L+琼脂6.8g/L，pH为
5.80。接种后在培养室暗培养一周，然后每天光照16h，黑暗8h，培养温度均为23～26℃，光强2000～3000lux，培养4～6周可诱导产生从生芽约2～4个，芽丛高度约1～2cm，增殖率达到3～4倍。

[0039] S5.壮苗培养：将丛生芽分成单芽切下，接种于壮苗培养基中，壮苗培养基为MS+BA0.05～0.1mg/L+添加蔗糖30g/L+琼脂6.8g/L，pH为5.80。接种后在培养室暗培养48h，然后每天光照16h，黑暗
8h，培养温度均为23～26℃，光强2000～3000lux，培养4～6周，单芽长高变壮，株高约3～
5cm。

[0040] S6.生根培养：将壮苗后健壮的顶芽切下，接种于生根培养基中进行生根诱导，生根培养基为1/2MS+IBA0.8～1.0mg/L +NAA0.3～0.5mg/L+活性炭0.2～0.5g/L+添加蔗糖15g/L+琼脂6.8g/L，pH为5.80。接种后在培养室先暗培养一周，然后每天光照16h，黑暗8h，光强2000～3000lux，培养温度均为23～26℃，培养3～4周可生根，植株长高约至2～3cm，健壮，主根为2～5条，长度约2～6cm。

[0041] 本具体实施例仅仅是对本发明的解释，其并不是对本发明的限制，本领域技术人员在阅读完本说明书后可以根据需要对本实施例做出没有创造性贡献的修改，但只要在本发明的权利要求范围内都受到专利法的保护。

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