技术领域
[0001] 本
发明属于农业领域，具体涉及一种
生物农药组合物，尤其是涉及一种包含壳寡糖和松脂酸铜的农药组合物及其用途。
背景技术
[0003] 其中，柑橘溃疡病菌多侵染幼嫩组织，展叶、坐果期组织比较幼嫩容易被病原菌侵染，此时用化学药多了易产生
药害，用药少了又达不到杀菌的效果，到显症时往往已致害成病。柑橘种植区大多位于
温度较高、湿度较大的低纬度地区，易于病原菌繁殖。细菌的存活能
力较强，可以潜藏在植株多个部位，阴雨天随雨
水喷溅到各个部位，等到条件适宜时开始侵染植株，爆发溃疡病。常用的
杀菌剂都是化学制剂成份单一，连续使用会产生较强的抗药性；二是台
风留下的伤口给病菌带来可乘之机，伤口不修复好依靠单一的杀菌解决不了根本问题。
[0004] 壳寡糖又称作
氨基寡糖，具有抗
微生物活性，壳寡糖中的阳离子与微生物细胞表面上的阴离子残基相互作用，改变了细胞膜渗透性，进而阻止营养物质的进入或引起胞内物质的
泄漏，抑制微生物生长。
[0005] 松脂酸铜是一种广谱、高效、低毒性的有机铜类杀菌剂，其作用机理主要依靠抑制
真菌、细菌
蛋白质的合成，可用于防治多种真菌和细菌所引起的常见植物病害，如溃疡病、霜霉病、叶斑病、
炭疽病、枯萎病、根腐病、疫病、锈病等。
[0006] 在本
专利权人
申请的专利CN102524300A中公开了一种含有寡糖和铜的杀菌剂组合物，其中公开了壳寡糖和松脂酸铜的配比为5:13，5:6情况下的制剂
实施例。并且公开了该组合物用于防治绿橙柑橘溃疡病，将其稀释到200ppm的情况下，绿橙柑橘溃疡病的防效为56.4％，500ppm的情况下为70.2％，1000ppm的情况下为94.2％。
[0007] 但是应用壳寡糖和松脂酸铜防治柑橘溃疡病并没有研究出有效的配比和合适的方法。
发明内容
[0008] 为解决上述技术问题，本发明提供了一种包含壳寡糖和松脂酸铜的农药组合物，所述农药组合物包含壳寡糖和松脂酸铜两种农药活性成分，壳寡糖和松脂酸铜的重量比为1:(7.5-30)。
[0009] 优选的，所述农药组合物中的农药活性成分由壳寡糖和松脂酸铜组成，壳寡糖和松脂酸铜的重量之和占农药组合物的重量百分比为10-50％，优选的，壳寡糖和松脂酸铜的重量之和占农药组合物的重量百分比为15.5-32.0％，优选的，壳寡糖占农药组合物的重量百分比为0.5-2.0％，松脂酸铜占农药组合物的重量百分比为15.0-30.0％。
[0010] 优选的，所述组合物中还包含农药助剂，所述农药助剂占农药组合物重量的百分比为50-90％，优选的，农药助剂占农药组合物重量的百分比为68-84.5％。
[0011] 优选的，所述农药组合物为农药制剂，所述农药制剂的剂型为水乳剂、微乳剂、水分散粒剂或颗粒剂，优选的，所述农药制剂中不含有阴离子乳化剂。
[0012] 本发明还提供了上述农药组合物用于防治植物细菌性病害的用途，所述农药组合物稀释到农药活性成分的浓度为100-500ppm防治植物细菌性病害病，优选的，农药组合物稀释到农药活性成分的浓度为100-300ppm防治植物细菌性病害，所述植物细菌性病害为柑橘溃疡病、火龙果溃疡病、香蕉巴拿
马病、番茄青枯病、辣椒
角斑病或芒果角斑病。
[0013] 本发明还提供了防治植物细菌性病害的方法，所述方法包括步骤：
[0014] 将上述农药组合物稀释到活性成分的浓度为100-500ppm，优选的，将上述农药组合物稀释到活性成分的浓度为100-300ppm，在植物细菌性病害的发病初期开始施药，每隔5-15天施药1次，合计施药2-5次，所述植物细菌性病害为柑橘溃疡病、火龙果溃疡病、香蕉巴拿马病、番茄青枯病、辣椒角斑病或芒果角斑病。
[0015] 本发明还提供了一种包含壳寡糖和松脂酸铜的农药制剂的制备方法，所述农药制剂的剂型为微乳剂或水乳剂，所述制备方法为：在制备制剂过程中不加入阴离子乳化剂。
[0016] 优选的，上述包含壳寡糖和松脂酸铜的农药制剂的制备方法中，所述方法包括如下步骤：
[0017] 将壳寡糖用水溶解，然后加入阳离子乳化剂，获得壳寡糖溶液；
[0018] 将松脂酸铜和非离子乳化剂混合，然后加入非极性
溶剂，获得松脂酸铜溶液；
[0019] 将松脂酸铜溶液进行充分搅拌剪切，在剪切的同时加入壳寡糖溶液，充分混合后得到包含壳寡糖和松脂酸铜的农药制剂；
[0020] 或者将壳寡糖溶液进行充分搅拌剪切，在剪切的同时加入松脂酸铜溶液，充分混合后得到包含壳寡糖和松脂酸铜的农药制剂。
[0021] 优选的，上述制备方法中，所述阳离子乳化剂为十六烷基三甲基溴化铵、十八烷基三甲基溴化铵、十六烷基三甲基
氯化铵或溴代十六烷基吡啶中的一种或多种。
[0022] 优选的，上述制备方法中，所述阳离子乳化剂、非离子乳化剂和非极性溶剂的重量比为1:0.5-2:1-5，其阳离子乳化剂、非离子乳化剂和非极性溶剂的重量之和占农药制剂重量的百分比为20-80％，优选的，占25-75％，尤其优选的，占35-60％。
[0023] 优选的，上述制备方法中，所述非离子乳化剂为烷
氧基化甘油三酯，乙氧基化甘油三酯，乙氧基化
蓖麻油、烷基酚聚氧乙烯醚、脂肪醇聚氧乙烯醚、三苯乙基
苯酚聚氧乙烯醚、甲
醛树酯聚氧乙烯醚、蓖麻油聚氧乙烯醚和苯乙基酚聚氧乙烯醚中的一种或多种。
[0024] 优选的，上述制备方法中，所述非极性溶剂为偏苯三
甲酸三异癸基酯、
己二酸二异丁酯、豆油
脂肪酸酯、油酸甲酯、油酸异丁酯、2-乙基己酸鲸蜡酯、2-乙基己酸三甘油酯、苯基二
甲苯基乙烷、二甲苯、二甲基
萘、椰油、棕榈仁油、
棕榈油、
大豆油、
菜籽油、玉米油中的一种或多种。
[0025] 本发明的有益效果
[0026] 1、在防治柑橘溃疡病中，经过大量试验，尤其是柑橘的田间试验，以沙糖桔的柑橘溃疡病的防治为研究对象，发现壳寡糖和松脂酸铜复配具有增效作用，尤其是壳寡糖和松脂酸铜的配比在1:7.5-30的情况下，两种农药成分具有明显的增效作用。
[0027] 2、本发明的包含壳寡糖和松脂酸铜的组合物能够有效防治植物细菌性病害，尤其是柑橘溃疡病、火龙果溃疡病、香蕉巴拿马病、番茄青枯病、辣椒角斑病或芒果角斑病。
[0028] 3、本发明的农药制剂在制备过程中不加入非离子乳化剂，采用特殊的制备方法制备得到制剂具有优异的效果，制备得到的农药制剂本身在应用过程中进行稀释不会产生絮凝，而且该制剂和其他农药制剂桶混使用的情况下也不会产生絮凝。
[0029] 4、针对柑橘溃疡病，使用本发明的农药组合物防治下，采用低浓度和多次施药能够取得比较好的防治效果，而且还能够提高柑橘果实的品质。
具体实施方式
[0030] (一)制剂制备制剂实施例1：15.5％壳寡糖·松脂酸铜(0.5％+15％)水乳剂的制备
[0031] 将6.25g壳寡糖原药(纯度为80％)用143.75g水溶解，然后加入100g的十六烷基三甲基溴化铵，充分混合获得壳寡糖溶液；
[0032] 将250g的松脂酸铜(纯度60％)和100g的乙氧基化蓖麻油混合，然后加入400g的二甲苯，充分混合获得松脂酸铜溶液；
[0033] 将松脂酸铜溶液进行剪切，在剪切的同时加入壳寡糖溶液，加完壳寡糖溶液后继续剪切20分钟获得包含壳寡糖和松脂酸铜的水乳剂。
[0034] 制剂实施例2：30.5％壳寡糖·松脂酸铜(0.5％+30％)水乳剂的制备[0035] 将6.25g壳寡糖原药(纯度为80％)用143.75g水溶解，然后加入100g的十六烷基三甲基溴化铵，充分混合获得壳寡糖溶液；
[0036] 将500g的松脂酸铜(纯度60％)和100g的乙氧基化蓖麻油混合，然后加入150g的二甲苯，充分混合获得松脂酸铜溶液；
[0037] 将壳寡糖溶液进行剪切，在剪切的同时加入松脂酸铜溶液，加完松脂酸铜溶液后继续剪切20分钟获得包含壳寡糖和松脂酸铜的水乳剂。
[0038] 制剂实施例3：16％壳寡糖·松脂酸铜(1％+15％)水乳剂的制备
[0039] 将12.5g壳寡糖原药(纯度为80％)用137.5g水溶解，然后加入100g的十六烷基三甲基溴化铵，充分混合获得壳寡糖溶液；
[0040] 将250g的松脂酸铜(纯度60％)和100g的乙氧基化蓖麻油混合，然后加入400g的二甲苯，充分混合获得松脂酸铜溶液；
[0041] 将松脂酸铜溶液进行剪切，在剪切的同时加入壳寡糖溶液，加完壳寡糖溶液后继续剪切20分钟获得包含壳寡糖和松脂酸铜的水乳剂。
[0042] 制剂实施例4：31％壳寡糖·松脂酸铜(1％+30％)水乳剂的制备
[0043] 将12.5g壳寡糖原药(纯度为80％)用137.5g水溶解，然后加入100g的十六烷基三甲基溴化铵，充分混合获得壳寡糖溶液；
[0044] 将500g的松脂酸铜(纯度60％)和100g的乙氧基化蓖麻油混合，然后加入150g的二甲苯，充分混合获得松脂酸铜溶液；
[0045] 将松脂酸铜溶液进行剪切，在剪切的同时加入壳寡糖溶液，加完壳寡糖溶液后继续剪切20分钟获得包含壳寡糖和松脂酸铜的水乳剂。
[0046] 制剂实施例5：17％壳寡糖·松脂酸铜(2％+15％)水乳剂的制备
[0047] 将25g壳寡糖原药(纯度为80％)用125g水溶解，然后加入100g的十六烷基三甲基溴化铵，充分混合获得壳寡糖溶液；
[0048] 将250g的松脂酸铜(纯度60％)和100g的乙氧基化蓖麻油混合，然后加入400g的二甲苯，充分混合获得松脂酸铜溶液；
[0049] 将松脂酸铜溶液进行剪切，在剪切的同时加入壳寡糖溶液，加完壳寡糖溶液后继续剪切20分钟获得包含壳寡糖和松脂酸铜的水乳剂。
[0050] 制剂实施例6：32％壳寡糖·松脂酸铜(2％+30％)水乳剂的制备
[0051] 将25g壳寡糖原药(纯度为80％)用125g水溶解，然后加入100g的十六烷基三甲基溴化铵，充分混合获得壳寡糖溶液；
[0052] 将500g的松脂酸铜(纯度60％)和100g的乙氧基化蓖麻油混合，然后加入150g的二甲苯，充分混合获得松脂酸铜溶液；
[0053] 将松脂酸铜溶液进行剪切，在剪切的同时加入壳寡糖溶液，加完壳寡糖溶液后继续剪切20分钟获得包含壳寡糖和松脂酸铜的水乳剂。
[0054] 制剂实施例7：18％壳寡糖·松脂酸铜(3％+15％)水乳剂的制备
[0055] 将37.5g壳寡糖原药(纯度为80％)用112.5g水溶解，然后加入100g的十六烷基三甲基溴化铵，充分混合获得壳寡糖溶液；
[0056] 将250g的松脂酸铜(纯度60％)和100g的乙氧基化蓖麻油混合，然后加入400g的二甲苯，充分混合获得松脂酸铜溶液；
[0057] 将松脂酸铜溶液进行剪切，在剪切的同时加入壳寡糖溶液，加完壳寡糖溶液后继续剪切20分钟获得包含壳寡糖和松脂酸铜的水乳剂。
[0058] 制剂实施例8：33％壳寡糖·松脂酸铜(3％+30％)水乳剂的制备
[0059] 将37.5g壳寡糖原药(纯度为80％)用112.5g水溶解，然后加入100g的十六烷基三甲基溴化铵，充分混合获得壳寡糖溶液；
[0060] 将500g的松脂酸铜(纯度60％)和100g的乙氧基化蓖麻油混合，然后加入100g的二甲苯，充分混合获得松脂酸铜溶液；
[0061] 将松脂酸铜溶液进行剪切，在剪切的同时加入壳寡糖溶液，加完壳寡糖溶液后继续剪切20分钟获得包含壳寡糖和松脂酸铜的水乳剂。
[0062] (二)应用试验
[0063] 应用实施例1：农药制剂对柑橘溃疡病的田间防治试验
[0064] 1、田间试验方法
[0065] 在田间试验中，应用制剂实施例1-8的制剂，15％松脂酸铜
乳油、0.5％、1％、2％、3％的壳寡糖水溶液分别稀释到相应的倍数并分别进行施药。
[0066] 在广西柑桔果园的沙糖桔品种进行试验，每小区定2株树，4次重复，小区按随机区组排列，每小区的树种、树龄、长势及水肥管理等条件一致。
[0067] 柑橘溃疡病发病初期(病前病情指数在2-8之间)施药一次，第一次施药10d后再喷施一次，共施药3次。分别于施药前、第一次药后10天、第二次施药后10天、第三次施药后10天调查防治效果，每个小区的2株树全部调查，每株按东、西、南、北、中五点取样，每点调查10个果及两个叶梢上的全部
叶片。记录调查总叶数或总果树，按照调查标准调查各级病叶(果)数、叶(果)危害等级并计算病情指数和防治效果，并将病叶和病果总体计算病情指数。
[0068] 2、病害的调查方法
[0069] (1)病害分级
[0070] 针对由病菌引起的病害，用分级法记载发病程度，分级标准如下：
[0071] 0级：无病；
[0072] 1级：病斑堆面积占整叶面积的5％以下；
[0073] 3级：病斑堆面积占整叶面积的6％-10％以下；
[0074] 5级：病斑堆面积占整叶面积的11％-20％以下；
[0075] 7级：病斑堆面积占整叶面积的21％-50％以下；
[0076] 9级：病斑堆面积占整叶面积的50％以上。
[0077] (2)药效计算方法
[0078] 病叶(果)率(％)＝病叶(果)数/调查总叶(果)数×100
[0079] 病情指数＝∑(各级病叶(果)数×相对级数值)/(调查总叶(果)数×9)×100[0080] 防治效果(％)＝〔1-(空白对照区药前病情指数×处理区药后病情指数)/(空白对照区药后病情指数×处理区药前病情指数)〕×100。
[0081] (3)增效验证方法
[0082] 两种成分的特定组合的预期作用可使用Colby公式计算：
[0083]
[0084] X为使用A1成分剂量为B1的作物病害的防效；
[0085] Y为使用A2成分剂量为B2的作物病害的防效；
[0086] B1和B2可以相同或不同。
[0087] E0为剂量B1的A1成分和剂量B2的A2成分一起施用到作物上理论防效。
[0088] E1为剂量B1的A1成分和剂量B2的A2成分一起混合施用到作物的实际防效。
[0089] 如果E1＞E0，则说明A1成分和A2成分在混合施用的情况下是增效的。
[0090] 3、试验结果
[0091] 经过试验调查数据，壳寡糖·松脂酸铜制剂、壳寡糖水剂及松脂酸铜乳油在防治柑橘溃疡病的病害中，壳寡糖水剂对柑橘溃疡病的防效比较低，松脂酸铜在150ppm的情况下，三次用药后的防效能够达到75％，当松脂酸铜中加入壳寡糖后，能够有效提高松脂酸铜对柑橘溃疡病的防效，尤其是壳寡糖和松脂酸铜的配比在1:7.5至1:30范围内是增效的，当壳寡糖和松脂酸铜的配比在1:5和1:60的情况下增效效果不明显，接近于协同效应。具体参见如下表1中的制剂实施例1-8的防效，制剂实施例1、3、5-6、8都显示出了明显的增效效果，制剂实施例2和7的增效效果不明显。但是无论是否明显增效，其沙糖桔的
果皮都光滑，沙糖桔的直径相比于单用松脂酸铜更大。
[0092] 表1包含壳寡糖和松脂酸铜的制剂防治柑橘溃疡病的效果
[0093]
[0094]
[0095] 应用实施例2：壳寡糖和松脂酸铜的常规配比对柑橘溃疡病的防治试验[0096] 按照制剂实施例1的方法，制备12％壳寡糖·松脂酸铜(5％+7％)的水乳剂，和18％壳寡糖·松脂酸铜(5％+13％)的水乳剂，同时和5％壳寡糖水剂、7％松脂酸铜乳油、
13％松脂酸铜乳油进行比对，确认其对柑橘溃疡病的增效效果。按照应用实施例2的方法进行试验，试验地点与应用实施例1的试验地点相同，具体试验结果如下表2。从表2能够看出，壳寡糖和松脂酸铜在5:7和5:13的情况下，增效效果不明显，基本上是协同相加的防效。即使是协同相加的效果，包含壳寡糖和松脂酸铜的组合物防治柑橘溃疡病后，其沙糖桔的果实表面光滑，果实直径相对于单用松脂酸铜更大，在检测沙糖桔果实含糖量后，其含糖量相较于单用松脂酸铜会更高。
[0097] 表2壳寡糖和松脂酸铜常规配比对柑桔溃疡病的防效
[0098] 药剂 稀释倍数 首次施药后10天 二次施药后10天 三次施药后10天5％壳寡糖+7％松脂酸铜 1000 56.4 68.5 76.2
5％壳寡糖+13％松脂酸铜 1000 63.4 72.7 78.5
5％wt壳寡糖水剂 1000 15.2 20.3 26.6
7％松脂酸铜 1000 46.5 57.9 64.4
13％松脂酸铜 1000 55.1 63.4 70.1
[0099] 应用实施例3：柑橘、番茄、辣椒和芒果溃疡病的防治方法试验
[0100] 应用制剂实施例3的制剂防治火龙果溃疡病、香蕉巴拿马病、番茄青枯病、辣椒角斑病或芒果角斑病，药剂稀释1000倍，应用次数为3次，每次施药间隔时间为10天，统计病叶和病果的综合防效，施药时机为疡病的发病初期施药，也就是病情指数(或称作病害指数)在8以下的时候施药。针对火龙果溃疡病、番茄青枯病、辣椒角斑病或芒果角斑病的防治方式为叶面喷施，针对香蕉巴拿马病的方式方式为灌根，施药浓度、次数和间隔期相同。具体防治效果如下表3。
[0101] 表3柑橘、番茄、辣椒和芒果溃疡病防治效果
[0102]
[0103] 应用实施例5：制剂桶混应用试验
[0104] 按照壳寡糖和松脂酸铜在制剂实施例1-8中的配比和含量，应用常规水乳剂或微乳剂的制备方法，制剂制备过程中加入阴离子乳化剂时，制备得到的制剂使用过程中用水稀释后会发生絮凝现象，而且与其他农药制剂进行桶混时容易发生絮凝现象，尤其是与含有重
金属离子的制剂进行桶混时会发生絮凝，而且所述制剂采用阴离子乳化剂的情况下，则会导致农药制剂在稀释时及与其他农药进行桶混的情况下会产生絮凝，而且絮凝后难以再次溶解。将制剂实施例1-8的制剂稀释不会发生絮凝现象，而且与含有重金属离子的制剂进行桶混时则不会发生絮凝现象。
